التخليق الإشعاعي ومراقبة الجودة والتصوير المقطعي بالإصدار البوزيتروني للحيوانات الصغيرة ^{ل 68}جزيئا نانو مسمى Ga

يركز بحثنا على الصيدلة المشعة ، وبالتالي إنتاج مستحضرات صيدلانية مشعة جديدة لكل من والبشر. في النهاية ، نريد أن نتصور جوانب مرض معين ، في حالتنا ، السرطان ، وبهذه الطريقة تساعد في العلاج في العيادة. نحن الآن نذهب إلى أكثر من مجرد التصوير.

بدلا من ذلك ، نقوم بتطوير العلاجات العلاجية ، وهي مركبات يمكن استخدامها للتصوير والعلاج ببساطة عن طريق تبديل النظير المشع المدمج في جهاز التتبع. التكنولوجيا الأساسية المستخدمة في مجال الطب النووي هي التصوير المقطعي بالإصدار البوزيتروني ، باختصار ، PET ، وهو متاح لكل من المختبر الصغيرة وللممارسة السريرية. باستخدام التصوير المقطعي بالإصدار البوزيتروني ، يمكننا تحديد وتحديد تراكم المتتبع الإشعاعي داخل الجسم ، وهذا بدوره يمكننا من تقييم جدوى أدوات التتبع الجديدة في نماذج الأمراض الحيوانية المختبرية الصغيرة لجدواها في الاستخدام السريري.

التحدي التجريبي الرئيسي هو الحصول على دواء مشع مناسب للحقن في الوريد. بالإضافة إلى ذلك ، هناك تحد في النموذج الحيواني. من ناحية ، نريد نموذجا حيوانيا يحاكي الوضع البشري.

ومن ناحية أخرى ، نريد نموذجا حيوانيا قابلا للتكرار ويمكن التنبؤ به ، وهذا مزيج صعب. في المستقبل ، سيواصل مختبرنا التركيز على التصوير والعلاج غير الجراحي لسرطان الثدي. على الرغم من العديد من التطورات في مجال الأورام في السنوات الماضية ، لا يزال هناك معدل وفيات مرتفع ومعدل الإصابة بسرطان الثدي.

يصبح الأمر صعبا بشكل خاص عندما ينتشر هذا النوع من السرطان ، وباستخدام التصوير الجزيئي غير الجراحي ، نود تحسين التشخيص لهؤلاء المرضى. وأيضا باستخدام العلاج الإشعاعي ، نود زيادة معدلات بقائهم على قيد الحياة. للبدء ، قم بقياس نشاط العينة المترافقة لمخلب الجسم النانوي في أنبوب الطرد المركزي الدقيق باستخدام مقياس النشاط في الإعداد الصحيح.

ضع عينة من 10 إلى 15 ميكرولتر على شريط اختبار الأس الهيدروجيني لقياس الرقم الهيدروجيني. ضع ميكرولتر واحد من خليط تفاعل الملصقات الإشعاعية على شريط TLC مشرب بالسيليكا واتركه حتى يجف لمدة دقيقة واحدة. املأ حجرة TLC بحمض الستريك كمرحلة متحركة وقم بتشغيل الشريط حتى يصل السائل إلى الجزء العلوي من الشريط.

ضع شريط TLC على ماسح ضوئي راديوي TLC وقم بقياسه وفقا لبروتوكول الشركة المصنعة. احسب إنتاجية الوسم الراديوي للتفاعل باستخدام كروماتوجرام الراديو ، واقسم المساحة المتكاملة أسفل المنحنى من التردد اللاسلكي على المساحة الإجمالية تحت المنحنى واضرب في 100. بعد إغراق خطوط HPLC لمدة 10 دقائق بالمذيب الصحيح ، اضبط إعداد القياس باستخدام التدفق المتساوي لخليط 50-50 من الأسيتونيتريل كمذيب A وخليط من محلول كلوريد الصوديوم 0.9٪ جنبا إلى جنب مع حمض ثلاثي فلورو أسيتيك ومحلول السترات كمذيب B. قياس امتصاص الأشعة فوق البنفسجية عند 280 نانومتر.

خفف خمسة ميكرولترات من المنتج ب 15 ميكرولتر من 0.9٪ كلوريد الصوديوم. حقن 15 ميكرولتر من الخليط في الراديو التحليلي HPLC. باستخدام الإعدادات الموضحة سابقا ، قم بقياس الإشارة المشعة وامتصاص الأشعة فوق البنفسجية للمنتج عند 280 نانومتر.

يرجع التحول الطفيف في أوقات الاستبقاء بين قنوات الأشعة فوق البنفسجية وجاما إلى تصميم HPLC. بعد ذلك ، حدد النقاء الكيميائي الإشعاعي من خلال دمج القمم في قناة جاما. دمج جميع القمم الأخرى في قناة جاما وتقييمها على أنها شوائب.

قم بإعداد تخفيف من واحد إلى 20 للمنتج بحجم نهائي يبلغ 150 ميكرولتر باستخدام ماء معتمد خال من السموم الداخلية. أدخل خرطوشة السموم الداخلية التي تستخدم لمرة واحدة مملوءة تجاريا بجميع الكواشف اللازمة في قارئ اختبار السموم الداخلية. قم بتحميل 25 ميكرولتر من المنتج المخفف في كل حجرة خرطوشة.

بعد إجراء الاختبار لمدة 15 دقيقة ، يتضمن PTS عناصر تحكم داخلية إيجابية وسلبية. يعتبر المنتج خاليا من السموم الداخلية إذا كان محتوى السموم الداخلية أقل من 8.7 وحدة سموم داخلية لكل مليلتر بحجم أقصى يبلغ 20 ملليلترا. أكد تحليل HPLC النقاء الكيميائي والكيميائي الإشعاعي للمستحضرات الصيدلانية المشعة بنسبة 98.2٪ وأظهر اختلافا طفيفا في وقت الاحتفاظ بين المنتج المشع والمركب المرجعي غير المشع.

أشار الكروماتوجرام TLC إلى نقاء كيميائي إشعاعي واضح بنسبة 99.9٪ للجسم النانوي NM02 المسمى 68 جاليوم. ابدأ بملء المحقنة بالمقتفي المشع اعتمادا على طريقة الإعطاء. قم بقياس النشاط الإشعاعي للمتتبع باستخدام مقياس النشاط.

لتحضير قسطرة قياس 30 ، قم بإزالة عمود الإبرة المعدنية من الإبرة قياس 30 إما عن طريق قصها بمقص معدني أو ثنيها بعيدا عن البلاستيك. أدخل يدويا أنبوب PE-10 بقطر 0.3 مم في جزء العمود الذي تمت إزالته من المحور. املأ القسطرة قياس 30 بمحلول كلوريد الصوديوم 0.9٪.

ضع مرهما للعيون على عيون الفأر المخدر لمنع الجفاف أثناء التخدير. بعد اختيار الوريد من الذيل ، قم بتدوير الذيل قليلا لملامسة الوريد المحدد مع حصيرة التسخين واتركه يتمدد لمدة دقيقة واحدة. ثم أدر الماوس إلى موضعه الجانبي حتى يرتفع الوريد المحدد لأعلى.

ثبت طرف وقاعدة الذيل بشريط لاصق. خذ القسطرة قياس 30 باليد المهيمنة وضع إصبع السبابة لليد غير المهيمنة برفق على الوريد المحددة لإنشاء نسخة احتياطية من الدم بالداخل ، لتشكيل سنام صغير. باستخدام اليد المهيمنة ، ضع القسطرة قياس 30 موازية للذيل المواجه للسنام على الوريد.

حرك اليد المهيمنة للأمام لضمان بزل الوريد المباشر. بمجرد دخول الوريد ، يصبح ارتجاع الدم مرئيا في الأنبوب البلاستيكي. قم بتثبيت الأنبوب البلاستيكي للتأكد من أن الإبرة لا تتحرك داخل الوريد أثناء الحقن.

في الطرف الحر من الأنبوب ، أدخل حقنة التتبع المتصلة بإبرة قياس 30. قم بحقن محتوى حقنة التتبع ببطء لمدة 10 ثوان. مع الحفاظ على الإبرة قياس 30 متصلة بنظام القسطرة ، قم بإزالة حقنة التتبع فقط وقم بتوصيل حقنة بمحلول كلوريد الصوديوم 0.9٪ لشطف القسطرة.

قم بإزالة القسطرة قياس 30 من وريد الذيل واستخدم كمادات قطنية معقمة لوقف النزيف. احسب النشاط المتبقي عن طريق قياس نشاط القسطرة قياس 30 ، والحقنة العازلة ، وحقنة التتبع الفارغة ، وضغط القطن باستخدام مقياس النشاط. ضع الفأر المخدر في وضع بطني على فراش وقم بتوصيله بالماسح الضوئي PET.

تأكد من أن معدل تنفس الماوس أثناء الفحص يتراوح بين 75 و 50 تنفس في الدقيقة. ثبت الماوس خلف رقبته على فراش بشريط طبي. اضبط وقت الاستحواذ على 45 دقيقة وحدد منطقة الاهتمام للمسح الضوئي.

أدخل مقدار النشاط المحقون ووقت الحقن. ثم حدد 68 جاليوم كنظير الدراسة وابدأ الفحص. حددت صورة التصوير المقطعي المحوسب بوضوح كلى الفئران وسمحت بتقييم العظام.

أظهرت صورة التصوير المقطعي بالإصدار البوزيتروني ، باستخدام مقياس قيمة امتصاص موحد من صفر إلى 5.0 ، امتصاصا ملحوظا للورم في الجانب الأيسر من الفأر وإزالة الكلى للمتبع. سمحت صورة اندماج PET-CT بإجراء تقييم شامل للتوزيع الحيوي للتتبع. كشف إسقاط PET الأقصى للكثافة عن نشاط المثانة البولية ، مما يعزز التصفية الكلوية للمتبع.