إنشاء نموذج فأر لبطانة الرحم الرقيقة

تم التعرف على بطانة الرحم الرقيقة على نطاق واسع على أنها السبب الحاسم للعقم. تعتمد الدراسات حول التسبب في بطانة الرحم الرقيقة على النماذج الحيوانية ، مما يجعل اختيار النموذج المناسب أمرا بالغ الأهمية. هنا ، نصف بروتوكولا مفصلا ينتج نموذجا موثوقا به وقابلا للتكرار في بطانة الرحم الرقيقة في الفئران.

العملية مؤلمة ، حيث نحتاج إلى تشريح الفأر وفضح قرن رحم الفأر للتلاعب. قد تسبب العملية غير السليمة عدوى أو حتى تؤدي إلى موت الفئران. في الواقع ، هناك حاجة إلى تدريب وخبرة دقيقين قبل العملية التجريبية.

نجحنا في تطوير نموذج بطانة الرحم مع وقت التسريب الذي يتراوح من دقيقة إلى ثلاث دقائق لتكرار الدرجات المتفاوتة من أعراض بطانة الرحم الرقيقة التي لوحظت في الحالات السريرية. يتيح لنا ذلك إنشاء نماذج بمستويات مختلفة من الضرر ، اعتمادا على الاحتياجات المحددة لبحثنا. توفر الطريقة المستخدمة في بروتوكولنا ميزة التكلفة المنخفضة والملاءمة بالإضافة إلى الفترة التجريبية.

يدرس الآلية المرضية والعلاج في ثلاث تقنيات أولية مقارنة بالتقنيات الأخرى. للبدء ، ضع الفأر المخدر على طاولة العمليات المسخنة مسبقا ، وباستخدام شريط طبي ، قم بتأمين أطراف الفأر. باستخدام مقص وملقط معقم ، قم بعمل شق بطول سنتيمتر واحد في البطن ، يقع على بعد حوالي سنتيمتر واحد من فتحة مجرى البول ، ويمتد إلى التجويف البريتوني.

حركي الأحشاء برفق جانبا باستخدام ملقط معقم لتحديد موقع الرحم. كشف قرن الرحم الأيمن وتطبيق مشابك مرقئ في الطرف القريب بالقرب من عنق الرحم والنهاية البعيدة بالقرب من المبيض. باستخدام حقنة قياس 25 ، قم بغرس ما يقرب من 50 ميكرولترا من الإيثانول بنسبة 95٪ في تجويف الرحم ، مع تثبيت الإبرة بالتوازي مع قرن الرحم.

احتفظي بالمحقنة لمدة دقيقة إلى خمس دقائق حسب الاقتضاء. بعد ذلك ، اسحب الإيثانول من تجويف الرحم واغسل تجويف الرحم بمحلول ملحي معقم خمس مرات لإزالة أي إيثانول متبقي. الآن ، قم بإزالة المشابك المرقئة وأعد الرحم والأحشاء إلى وضعها الأصلي.

باستخدام خيوط جراحية قابلة للامتصاص 5/0 ، قم بخياطة الصفاق ، متبوعا بالبشرة. للبدء ، ضع نموذج فأر بطانة الرحم الرفيع القتل رحيم على طاولة التشريح وقم بقص الغرز باستخدام مقص جراحي لكشف الرحم. ثم ، باستخدام الملقط الجراحي ، قم باستخراج الرحم بالكامل بعناية وافصل الرحم عن الأحشاء المحيطة.

قم بإزالة قرني الرحم على الفور وقسم كل قرن إلى ثلاثة إلى أربعة أجزاء صغيرة. ضع أنسجة الرحم في مليلتر واحد من 4٪ بارافورمالدهيد تؤخذ في أنبوب طرد مركزي دقيق سعة 1.5 ملليلتر. ضع العينات المثبتة بالفورمالين في أشرطة الأنسجة وانقل أشرطة الأنسجة من خلال سلسلة من تركيزات الإيثانول ، متبوعة بالزيلين والبارافين.

املأ قالب الشمع بشمع البارافين المنصهر المسخن إلى 55 درجة مئوية. استخدم ملقطا ساخنا لنقل أجزاء الأنسجة المخللة بسرعة من كاسيت التضمين إلى قالب الشمع. بمجرد وضع أجزاء الأنسجة بشكل صحيح ، ضع الجزء السفلي من كاسيت التضمين أعلى قالب الأنسجة.

بعد ذلك ، ضع القالب مباشرة على لوح تبريد مضبوطة على أربع درجات مئوية لمدة 20 دقيقة على الأقل للسماح للبارافين بالتصلب. بعد ذلك ، قم بإزالة العينة من القالب واستخدم أداة تشذيب البارافين لتقليم أي شمع زائد حولها. انخفض سمك بطانة الرحم وعدد الغدد البطاقية بشكل ملحوظ في المجموعات التي تبلغ مدتها دقيقة واحدة ودقيقتين وثلاث دقائق مقارنة بالمجموعة الضابطة.

لوحظ التصاق شديد في الرحم وتجويف الرحم غير المرئي تقريبا في المجموعات التي تبلغ مدتها أربع دقائق وخمس دقائق ، ولم يتم العثور على غدد بطانة الرحم. زاد تليف بطانة الرحم مع مدة ضخ الإيثانول ، كما يتضح من التلوين المفرط في مجموعات من دقيقة إلى خمس دقائق مقارنة بالسيطرة.