إجراءات التشغيل والاحتواء الحيوي لمنشأة لفئران المختبر ذات الميكروبيوم الطبيعي: إجراء التنميط المناعي

نحن نحقق في آثار التغذية على جهاز المناعة. ونحن مهتمون بشكل خاص بالتأثيرات المضادة للشيخوخة والمضادة للالتهابات لتقييد السعرات الحرارية وأنظمة الصيام ودور الكائنات الحية الدقيقة في هذه العمليات. تجمع الفئران البرية بين الخلفية الجينية المميزة جيدا لسلالات الفئران المختبرية والميكروبيوم الطبيعي للفئران المتجولة بحرية.

ومع ذلك ، فإن الميكروبيوم الطبيعي لهذه الفئران البرية يحتوي على فيروسات وبكتيريا وطفيليات أيضا ، وبالتالي يشكل تحديا لمرافق تربية. كانت مساهمة مركز QUEST للأبحاث المسؤولة هي تطوير إطار عمل Six R ، والذي يعزز Rs الثلاثة التي نعرفها من Russell and Burch ، والاستبدال ، والتحسين ، والتخفيض ، من خلال دمج ثلاثة متانة إضافية من Rs ، والتسجيل ، وإعداد التقارير. يهدف هذا الإطار إلى تعزيز قابلية التكاثر والشفافية في البحوث قبل السريرية.

والفكرة هي أن النتائج التجريبية أكثر موثوقية وجديرة بالثقة ويمكن ترجمتها في النهاية إلى السياقات السريرية. على مدى السنوات الأربع الماضية ، قمنا بتطوير مفهوم منشأة للفئران البرية مع إجراءات احتواء حيوي متميزة. نود مشاركة خبرتنا مع الباحثين لتمكينهم من تضمين الفئران التي تحتوي على ميكروبيوم طبيعي في عملهم.

السكتة الدماغية هي الأكثر شيوعا عند كبار السن. يحتوي الجهاز المناعي على خلايا ذاكرة من محاربة الجسيمات المعدية والعيش مع الجراثيم غير المتجانسة. وبالتالي ، فإن نمذجة السكتة الدماغية في الفئران البرية هي نموذج مكرر في القوارض يعكس بشكل أفضل ظروف المرضى.

بعد التغيير إلى السراويل والقوزاق وأغطية الأحذية التي تستخدم لمرة واحدة ، قم بإزالة الأحذية والجوارب في غرفة انتظار الدش الهوائي. ارتد جوارب المنطقة ومعدات الحماية الشخصية لكامل الجسم ، بما في ذلك وزرة Tyvek وشبكة الشعر والقفازات القطنية وقفازات النتريل وأقنعة الوجه. ادخل الدش الهوائي مرتديا جوارب المنطقة عبر غطاء الأرضية اللاصق.

أثناء الاستحمام بالهواء ، ارفع ذراعيك وقم بتدوير 360 درجة. اخرج من الدش الهوائي وارتد أحذية المنطقة على الجانب الآخر. انقل الماوس من غرفته في قفص مغلق وجيد التهوية بشكل فردي إلى غرفة الإجراءات.

ضع الفأر المخدر على الطاولة المطهرة وامسك بقشرة رقبته لضغط أوردة الرقبة. باستخدام يد واحدة ، قم بتأمين رأس الماوس بالإبهام والسبابة. أدخل شعرية جديدة في القناة الإنسية للعين تحت الغشاء اللاصق بزاوية 45 درجة.

قم بتدوير الشعيرات الدموية محوريا عبر غشاء الجيوب الأنفية في الجزء الخلفي من المدار حتى يبدأ الدم في التدفق. اجمع ما لا يقل عن 15 ميكرولترا من الدم في أنبوب جمع الدم الذي يحتوي على قطرة من EDTA. قم بفك قبضة الرقبة قبل إزالة الشعيرات الدموية لتقليل النزيف في الأنسجة.

استخدم وسادة شاش نظيفة أو مسحة لوقف النزيف وضمان الإرقاء. قم بتدوير الأنبوب قليلا لخلط الدم و EDTA دون رجه وتخزين عينة الدم على الثلج. بعد الانتهاء من أخذ عينات الدم ، قم بتغيير القفازات وتطهير جميع المواد والأسطح.

ارتد ملابس واقية جديدة في تدفق الهواء الرقائقي للوصول ، أو LAF ، الموجود أمام مقصورة LAF. قم بتطهير حاويات العينات وإزالتها عبر الباب المنزلق في الجدار الزجاجي لكابينة LAF. بعد نقل حاويات العينة إلى الشخص الثاني ، قم بتطهير جميع الأسطح.

استلام حاويات عينات مطهرة من المنطقة البرية دون اتصال مباشر من خلال الباب المنزلق في الجدار الزجاجي لمقصورة LAF. بعد ذلك ، اترك وزرة يمكن التخلص منها وأحذية المنطقة داخل المنطقة المخصصة. تخلص من شبكة الشعر والقفازات المطاطية وقناع الوجه.

أدخل الدش الهوائي على الفور في جوارب المنطقة. ارفع ذراعيك وقم بتدوير 360 درجة أثناء الاستحمام بالهواء. اترك الدش الهوائي وضع جوارب المنطقة في مجمع الغسيل.

ارتد الجوارب الشخصية والأحذية وأغطية الأحذية التي تستخدم لمرة واحدة. قم بإيداع ملابس المنطقة في جامع غسيل غرفة تغيير الملابس وقم بتغييرها إلى الملابس العادية.