نموذج فأر للتندب الضخامي الشبيه بالإنسان الذي يحركه النقل الميكانيكي

التندب الضخامي هو عملية غير طبيعية لالتئام الجروح تؤدي إلى تكوين الأنسجة الندبية المفرطة. يمكن أن يساعد إنشاء نماذج ليفية شبيهة بالإنسان في تطوير علاجات لمنع التندب وتعزيز التجديد. على مدى العقد الماضي ، أثبتنا أن التنبيغ الميكانيكي ، حيث يتم تحويل المحفزات الميكانيكية إلى استجابات خلوية ، يؤدي إلى تكوين ندبة مفرطة.

لقد قمنا بتثبيط المحفزات الميكانيكية ووجدنا أنها تعزز الشفاء والتجديد في النماذج الحيوانية الكبيرة ، وحددنا أيضا أهميتها في استجابة الجسم الغريب للغرسات الطبية الحيوية. بعد الإصابة ، تشكل الفئران ندوبا أقل من البشر بسبب جلدها الخفيف والأرق ، بالإضافة إلى الطبقة العضلية الأساسية ، العضلة العضلية العصبية ، التي تنقبض الجرح. لقد طورنا نموذجا للفأر يطبق مستويات الإنسان من الإجهاد الميكانيكي على الجرح الملتئم لإنشاء نموذج تندب ضخامي يشبه الإنسان.

يتميز بروتوكولنا ببساطته وقابليته للتكرار وتقليده الحيوي. من خلال تطبيق التوتر الميكانيكي على الجروح ، فإننا نحث بشكل موثوق على المزيد من التندب الضخامي الشبيه بالإنسان ، وتسخير مسارات النقل الميكانيكية الفسيولوجية بدلا من الاعتماد على نماذج الحروق أو الإصابة الكيميائية. يعكس هذا بشكل موثوق كيف تتشكل الندبات الضخامية في الجسم ، مما يجعلها قابلة للترجمة بدرجة كبيرة.

بشكل عام ، يبحث مختبرنا في كيفية استهداف الإشارات الميكانيكية دوائيا لتقليل التليف عبر أنظمة الأعضاء. على وجه التحديد ، باستخدام هذا النموذج ، سوف نستكشف العلاجات الأخرى المضادة للتندب ، مثل السقالات المتجددة للأنسجة وضمادات الجروح والمنشطات. للبدء ، ضع الماوس المخدر على سطح التشغيل.

أدخل أنف الفأر في فتحة مخروط الأنف للحفاظ على التخدير. تأكد من عمق التخدير من خلال عدم الاستجابة لقرص إصبع القدم. باستخدام إبرة قياس 21 ، قم بحقن 0.05 ملليغرام لكل كيلوغرام من البوبرينورفين تحت الجلد في الكتف لعلاج الألم بعد الجراحة.

قم بتطهير ظهر الفأر بثلاث جولات متناوبة من المقشر الموجود باليود أو الكلورهيكسيدين ومسحة الكحول. الآن ، باستخدام مشرط ، قم بعمل شق خط الوسط الظهري كامل السماكة على طول المنطقة المحددة. أغلق الشق ب 5-0 خيوط في نمط بسيط متقطع عن طريق تقسيم الجرح.

قطع شاش Telfa إلى قطعة ثلاثة سنتيمترات في سنتيمتر واحد. ضع قطعة الشاش في وسط ضمادة لاصقة للفيلم وضعها على الظهر ، مع التأكد من أن الشاش يغطي الشق. ثم ضعي ضمادة مقطعة إلى أنصاف على البطن ولفيها بشكل محيطي حتى تلتقي بالضمادة الظهرية.

بعد تضميد الجرح ، ضع الفأر في قفص معقم منفصل وراقبه حتى يتعافى تماما من التخدير. بعد أربعة أيام من إنشاء شق خط الوسط الظهري ، قم بتخدير الماوس وضعه على منصة عمل. استخدم الملقط لفصل الضمادة عن بطن الفأر عن طريق تحريك الأداة جنبا إلى جنب مقابل الجانب البطني.

اترك الأداة بين الغلاف والجلد لرفع الضمادة عن الجلد. ثم استخدم المقص لقطع الضمادة. نظف الظهر بمسحة كحولية.

افحص الشق بحثا عن تشوه الجرح أو علامات العدوى. بعد ذلك ، قم بتغطية ذراعي التندب الضخامي برفق ، أو جهاز HTS ، بالغراء الطبي. بيد واحدة ، اجعل الجلد الموجود على ظهر الفأر مشدودا قليلا في الاتجاه العرضي.

ثم ، بمساعدة اليد الأخرى ، ضع جهاز HTS على الظهر ، مع التأكد من أن الشق على مسافة متساوية من كل ذراع وأن الجلد مشدود بشكل موحد بين الذراعين. بعد التجفيف ، قم بتأمين أربع خيوط حول كل ذراع من الجهاز ومن خلال الجلد ، مع التأكد من خروج الإبرة نحو الشق. الآن ، ضع ثلاثة دبابيس جلدية حول ذراعي الجهاز ، وثبتها على الجلد.

بعد ذلك ، ضع قطعة شاش Telfa في وسط ضمادة لاصقة للفيلم وقم بتطبيقها على ظهر الفأر ، مع التأكد من أن الشاش يغطي الشق. ضعي ضمادة مقطعة إلى أنصاف على البطن ولفيها بشكل محيطي حتى تلتقي بالضمادة الظهرية. في اليوم التالي ، قم بإزالة الغرز من الجرح باستخدام مقص التشريح.

بالنسبة للتمدد الأولي لجهاز HTS، أدخل مفتاح جهاز HTS في الجهاز وقم بتدويره لتوسيع الجهاز حتى يصبح الجلد مشدودا، ولكن ليس معرضا لخطر التمزق. أخيرا ، قم بضمادة الماوس كما هو موضح سابقا. أظهرت فئران مجموعة التمدد ندوبا أوسع بكثير مقارنة بالمجموعة الضابطة ، مع ذروة عرض ندبة يبلغ 0.99 ملم في اليوم التاسع بعد الجراحة ، والتي ظلت أوسع بكثير في 15 و 19 يوما بعد الجراحة.