إنشاء نماذج للفئران تحاكي العلاجات الهرمونية المؤكدة للجنس

طور بحثنا نماذج حيوانية لتكرار العلاجات الهرمونية المؤكدة للجنس للأفراد المتحولين جنسيا باستخدام هرمون التستوستيرون للرجال المتحولين جنسيا والإستروجين مع مضادات الأندروجين للنساء المتحولات جنسيا. نحن ندرس ما إذا كان أولئك الذين يخضعون لهذه العلاجات معرضين للمواد الكيميائية البيئية مثل عامة السكان وما إذا كان هناك أي آثار جانبية طويلة للعلاج الهرموني. هذا النموذج فريد من نوعه في مجاله حيث تتوفر حاليا البيانات والأدوات لتقييم القابلية المختلفة المحتملة للمواد الكيميائية للأشخاص المتحولين جنسيا الذين يخضعون للعلاج الهرموني وآثارها الجانبية.

من النتائج المهمة من عملنا استخدام CPS الكبدي الخاص بالجنس كعلامة لتقييم نجاح العلاجات الهرمونية. يوفر هذا النهج ، الذي تم تطويره لأول مرة في دراستنا ، أداة قيمة لتأكيد دقة وفعالية النموذج.

يعالج بروتوكولنا الفجوة في فهم الآثار طويلة المدى للعلاجات الهرمونية. كما يبحث في ما إذا كان التعرض اليومي للأغذية والمواد الكيميائية البيئية يمكن أن يتفاعل مع أو يغير تأثيرات العلاجات الهرمونية بمرور الوقت.

في المستقبل ، سوف نستكشف ما إذا كان النموذج مناسبا للاختبار طويل المدى ، وسنحقق في المؤشرات الحيوية الإضافية مثل الاختبارات السلوكية الضيقة لتقييم تأثيرات العلاج بشكل أفضل.

[مدرب] ابدأ بقرص الجلد ورفعه في موقع الحقن لإدارة هرمون التستوستيرون والاستراديول بالإضافة إلى أسيتات سيبروتيرون المذاب في زيت السمسم. أدخل إبرة حقنة سعة مليلتر واحد موازية لظهر. بمجرد دخول الإبرة إلى الداخل ، قم بحقن 100 ميكرولتر من هرمون التستوستيرون ببطء أو 200 ميكرولتر من الاستراديول بالإضافة إلى أسيتات سيبروتيرون ، اعتمادا على الطراز. بعد أسبوعين من العلاج ، ضع كل فأر مخدر في وضع ضعيف على وسادة تدفئة. بعد ذلك ، قم بإعداد حقنة سعة خمسة مليلتر بإبرة قياس 21 ، مع ضمان إزالة الفراغ. استخدم الأصابع لتحديد موقع القلب. قم بتنظيف جدار الصدر برفق وأدخل الإبرة بعناية في الجدار الصدري الجانبي ، عموديا على الجسم ، عند النقطة المحاذاة للأكواع المرنة ، بين الأضلاع الخامسة والسادسة. بمجرد وصول الإبرة إلى بطين القلب ، يدخل الدم إلى المحقنة عن طريق الشعيرات الدموية. اسحب مكبس المحقنة ببطء وبشكل مستمر حتى يتم سحب الدم. بعد التضحية ، ضع كل على طاولة التشريح مستلقيا ، بحيث تكون الأرجل الأمامية متجهة لأعلى والساقين الخلفيتين لأسفل. ثبت الأطراف بالدبابيس ، ثم رش السطح البطني للحيوان بمحلول مطهر للتحضير للتشريح. باستخدام المقص ، قم بقص خط الوسط من العانة إلى الجزء العلوي من البطن. قم بعمل قطعتين جانبيتين على طول الأسطح الإنسية لكل طرف خلفي من شق البطن البطني في خط الوسط وكشف أحشاء البطن. في ذكور الفئران ، استئصال الخصيتين الموجودة في كيس الصفن داخل البطن. اضغط على كيس الصفن للتأكد من بروز الخصيتين وإمساكهما برفق. استخدم كماشة لتثبيت الدهون الحشوية ، ثم اقطع الخصيتين بعناية بعيدا عن الأحشاء قم بوزن الخصيتين قبل تخزينها في محلول Bois لتحليل الأنسجة المرضية. في إناث الفئران ، أمسك الرحم بدقة. تحديد المبايض في نهايات قرني الرحم وقطعها بعيدا عن الأنسجة الدهنية الحشوية المحيطة. وزن المبايض بعد الاستئصال. بعد ذلك ، أمسك الكبد بالملقط ، وتأكد من عدم كسره. استخدم كماشة لفهم عملية الخنجري وقطع الحجاب الحاجز تماما بالمقص. استخدم المقص لفصل الكبد عن الحجاب الحاجز. ارفع عملية الخنجري بالملقط واستخرج الكبد من تجويف البطن. بعد الاستئصال ، قم بوزن الكبد وتخزينه بشكل مناسب. باستخدام المقص ، قم بقص عمودي على طول عنق. قم بإزالة الجلد والعضلات لكشف القصبة الهوائية ، حيث توجد الغدة الدرقية. قم بقص أطراف القصبة الهوائية برفق لإزالة الغدة الدرقية. بعد إزالة الخصية ، أمسك البربخ ، الذي يتم إرفاقه بالهامش الخلفي للخصية وموجود داخل كيس الصفن. لجمع السائل المنوي ، قم بتنظيف ذيل البربخ الأيمن عن طريق إزالة الدهون والأنسجة الضامة باستخدام المقص. افصل الذيل عن الجزء المتبقي وضعه في طبق بتري يحتوي على ملليلتر واحد من DMEM. اقطع الذيل بالمقص واستخدم ماصة سابقة لتدفق المحتويات برفق وتسهيل إطلاقها. الآن ، انقل السائل الذي تم جمعه إلى أنبوب سعة 15 مليلتر واضبط الحجم على 10 ملليلتر باستخدام DMEM لتحقيق عامل تخفيف من واحد إلى 10. ماصة المحتويات للتجانس وإنشاء تعليق. بعد الاهتزاز برفق ، خذ 10 ميكرولتر من التعليق لتحميل غرفة Neubauer.