March 7th, 2025
توضح هذه المقالة طرق الحقن تحت الشبكية في الفئران ، باستخدام التصور أثناء الجراحة للتحكم في كل من موقع الحقن ومنطقة انفصال الشبكية.
أنا أستكشف آليات موت الخلايا في انفصال الشبكية ، وهدفي هو ضمان إمكانية تتبع البيانات في المختبر إلى التجارب في الجسم الحي. في فريقنا ، أظهرنا تورط آليات موت الخلايا المختلفة أثناء تنكس المستقبلات الضوئية. هناك العديد من الطرق التي تم وصفها للحث على انفصال الشبكية في القوارض.
تم تصميم هذا البروتوكول للإجابة على تحديين ، قابلية التكرار والسلامة. سيضمن توفير بروتوكول آمن وقابل للتكرار في انفصال الشبكية الكفاءة في هذا النوع من البحث. للبدء ، قم بتركيب طرف معدني غير مشطوف مقاس 10 ملم عيار 30 مثبتا على حقنة سعة 25 ميكرولترا على حاقن صغير.
للحث على انفصال الشبكية على المدى الطويل ، استخدم 2٪ هيدروكسي بروبيل ميثيل سلولوز أو 1٪ إلى 5٪ هيالورونات الصوديوم. قم بتحميل المحلول المحضر في المحقنة. بعد ذلك ، ضع قطرة واحدة من 0.5٪ تروبيكاميد على عين واحدة من فأر مخدر للحصول على داء الميدريات.
ضع قطرة واحدة من أوكسي بوبروكائين في العين المراد تشغيلها. استخدم مجهر العيون المتصل بمفتاح القدم لإجراء الجراحة. لفضح الصلبة، قم بتثبيت خيوط سحب الجفن في الربع الخارجي من هامش الجفن في الجفون العلوية والسفلية.
اسحب الغرز لتحقيق انتفاخ لطيف للعين. باستخدام إبرة قياس 30 ، قم بإنشاء قناة صلبية من خلال الملتحمة البصلية الصدغية من حوالي ملليمتر إلى ملليمتر من طرف القرنية. ضع الجل المسيل للدموع كواجهة للعين طوال العملية.
لتصور لوحة الشبكية ، ضع عدسات لاصقة مسطحة بقطر ثمانية ملليمترات على سطح العين. استخدم مفتاح القدم في المجهر للتركيز على مستوى الشبكية. الآن ، أدخل القنية عموديا من خلال القناة الصلبة مسبقة التشكيل.
اقترب ببطء من شبكية العين واضغط عليها برفق حتى يلاحظ تبييض الشبكية. حافظ على ثبات الطرف أثناء الحقن من خلال بضع الشبكية المتكون من تدفق الحقن بعد الحقن ، قم بإزالة الطرف من بضع الشبكية. بعد ذلك ، اسحب القنية بأكملها برفق من التجويف الزجاجي ، مع التأكد من عدم لمس العدسة.
تأكد من تغيير المنعكس الأحمر الحدقة بواسطة انفصال الشبكية دون مراقبة تدفق الدم داخل التجويف الزجاجي. قم بإزالة خيوط الجفن ، ثم امسح أي نزيف بعناية. تقييم ضغط العين يدويا بإيجاز.
لرعاية ما بعد الجراحة ، ضع مرهم العين الكلورامفينيكول الريتينول على العين التي خضعت للجراحة. بعد ذلك ، قم بإعطاء مليلتر واحد من 5٪ جلوكوز أحادي الهيدرات داخل الصفاق. حقن 0.9 ملليغرام لكل كيلوغرام من الأتيباميزول تحت الجلد.
أخيرا ، انقل إلى غرفة يتم التحكم في درجة حرارتها وراقبها حتى يستيقظ. تم التحقق من نجاح الحقن تحت الشبكية عن طريق السائل تحت الشبكية الشفاف في التصوير المقطعي للتماسك البصري ، وغياب نزيف تحت الشبكية في تصوير قاع العين. ولوحظ انفصال واضح في الشبكية في كلتا الطريقتين.
لوحظ أحيانا نزيف طفيف داخل الجسم الزجاجي ، بالقرب من موقع الحقن بشكل أساسي ، لكنه لم يمتد إلى الفضاء تحت الشبكية.
تصف هذه المقالة طرقًا للحقن تحت الشبكية في الفئران، باستخدام التصور أثناء العملية الجراحية للتحكم في كل من موقع الحقن ومنطقة انفصال الشبكية. يهدف البروتوكول إلى تحسين التكرارية والسلامة في أبحاث انفصال الشبكية.
Intraoperative visualization of subretinal injection and retinal detachment in rats addresses a critical need for reproducible, controlled delivery of therapeutics and disease modeling in ophthalmic drug discovery. This protocol enables precise manipulation and monitoring of retinal detachment, supporting translational continuity from preclinical models to human-relevant workflows. Enhanced reproducibility and safety directly impact the predictive confidence of early-stage retinal therapeutic programs.
This method integrates into the discovery-to-preclinical continuum for retinal disease research, bridging in vitro findings with in vivo validation and supporting lead identification and optimization.