Name: تصوير حي طويل الأمد لتطور الساق ذبابة الفاكهة بعد إزالة الحفرة (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-01-17T14:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 20 s
Description: تعلم تصوير حي طويل الأمد لتطور ساق ذبابة الفاكهة بعد إزالة الحفرة باستخدام المجهر الضوئي التخيلي. تُظهر الخلايا الطلائية تغيرات ديناميكية في الشكل وتشكل بنية شبيهة بالبارثينون مؤقتًا.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>تصوير حي ممتد لذبابة الفاكهة مورفوتكوين الساق العذراء بدون الحفرة

<ol><li>Koto, A., Kuranaga, E., Miura, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temporal+regulation+of+Drosophila+IAP1+determines+caspase+functions+in+sensory+organ+development%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Temporal regulation of Drosophila IAP1 determines caspase functions in sensory organ development.</a> J Cell Biol. 187 (2), 219-231 (2009).</li>
<li>Ninov, N., Martín-Blanco, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Live+imaging+of+epidermal+morphogenesis+during+the+development+of+the+adult+abdominal+epidermis+of+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Live imaging of epidermal morphogenesis during the development of the adult abdominal epidermis of Drosophila.</a> Nat Protoc. 2 (12), 3074-3080 (2007).</li>
<li>Chiba, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activatable+photosensitizer+for+targeted+ablation+of+lacZ-positive+cells+with+single-cell+resolution%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Cent+Sci%22%5BJournal%5D)">Activatable photosensitizer for targeted ablation of lacZ-positive cells with single-cell resolution.</a> ACS Cent Sci. 5 (11), 1676-1681 (2019).</li>
<li>Umetsu, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Local+increases+in+mechanical+tension+shape+compartment+boundaries+by+biasing+cell+intercalations%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Biol%22%5BJournal%5D)">Local increases in mechanical tension shape compartment boundaries by biasing cell intercalations.</a> Curr Biol. 24 (16), 1798-1805 (2014).</li>
<li>Tran, N. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Programmed+disassembly+of+a+microtubule-based+membrane+protrusion+network+coordinates+3D+epithelial+morphogenesis+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22EMBO+J%22%5BJournal%5D)">Programmed disassembly of a microtubule-based membrane protrusion network coordinates 3D epithelial morphogenesis in Drosophila.</a> EMBO J. 43 (6), 568-594 (2024).</li>
<li>Hellerman, M. B., Choe, R. H., Johnson, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Live-imaging+of+the+Drosophila+pupal+eye%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Live-imaging of the Drosophila pupal eye.</a> J Vis Exp. (95), e52120(2015).</li>
<li>O'Connor, J. T., Shannon, E. K., Hutson, M. S., Page-McCaw, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mounting+Drosophila+pupae+for+laser+ablation+and+live+imaging+of+the+dorsal+thorax%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Mounting Drosophila pupae for laser ablation and live imaging of the dorsal thorax.</a> STAR Protoc. 3 (2), 101396(2022).</li>
<li>Ziserman, D., Roegiers, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Live-cell+imaging+of+sensory+organ+precursor+cells+in+intact+Drosophila+pupae%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Live-cell imaging of sensory organ precursor cells in intact Drosophila pupae.</a> J Vis Exp. (51), e2706(2011).</li>
<li>Tögel, M., Pass, G., Paululat, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+imaging+of+Drosophila+wing+heart+development+during+pupal+stages%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">In vivo imaging of Drosophila wing heart development during pupal stages.</a> Int J Dev Biol. 57 (1-2), 13-24 (2013).</li>
<li>Weavers, H., Franz, A., Wood, W., Martin, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+in+vivo+tracking+of+inflammatory+cell+dynamics+within+Drosophila+pupae%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Long-term in vivo tracking of inflammatory cell dynamics within Drosophila pupae.</a> J Vis Exp. (136), e57871(2018).</li>
<li>Kojima, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+mechanism+of+the+tarsus+in+insect+legs%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Insect+Sci%22%5BJournal%5D)">Developmental mechanism of the tarsus in insect legs.</a> Curr Opin Insect Sci. 19, 36-42 (2017).</li>
<li>Mirth, C., Akam, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Joint+development+in+the+Drosophila+leg%3A+Cell+movements+and+cell+populations%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Joint development in the Drosophila leg: Cell movements and cell populations.</a> Dev Biol. 246 (2), 391-406 (2002).</li>
<li>Mirth, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ecdysteroid+control+of+metamorphosis+in+the+differentiating+adult+leg+structures+of+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Ecdysteroid control of metamorphosis in the differentiating adult leg structures of Drosophila melanogaster.</a> Dev Biol. 278 (1), 163-174 (2005).</li>
<li>Tajiri, R., Misaki, K., Yonemura, S., Hayashi, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamic+shape+changes+of+ECM-producing+cells+drive+morphogenesis+of+ball-and-socket+joints+in+the+fly+leg%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Dynamic shape changes of ECM-producing cells drive morphogenesis of ball-and-socket joints in the fly leg.</a> Development. 137 (12), 2055-2063 (2010).</li>
<li>Hiraiwa, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unveiling+the+cell+dynamics+during+the+final+shape+formation+of+the+tarsus+in+Drosophila+adult+leg+by+live+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Genes+Evol%22%5BJournal%5D)">Unveiling the cell dynamics during the final shape formation of the tarsus in Drosophila adult leg by live imaging.</a> Dev Genes Evol. , (2024).</li>
<li>ImageJ plugin page. , Signaling RIKEN. Available at: 
 <a target="_blank" href="https://signaling.riken.jp/en/en-tools/imagej/629/">https://signaling.riken.jp/en/en-tools/imagej/629/</a> (2024).</li>
<li>Pandey, R., Heidmann, S., Lehner, C. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epithelial+re-organization+and+dynamics+of+progression+through+mitosis+in+Drosophila+separase+complex+mutants%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Sci%22%5BJournal%5D)">Epithelial re-organization and dynamics of progression through mitosis in Drosophila separase complex mutants.</a> J Cell Sci. 118 (4), 733-742 (2005).</li>
<li>Kiehart, D. P., Galbraith, C. G., Edwards, K. A., Rickoll, W. L., Montague, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiple+forces+contribute+to+cell+sheet+morphogenesis+for+dorsal+closure+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Multiple forces contribute to cell sheet morphogenesis for dorsal closure in Drosophila.</a> J Cell Biol. 149 (2), 471-490 (2000).</li>
<li>Ashburner, M. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aAshburner%2C+M+%22Drosophila%3A+A+Laboratory+Handbook%22">Drosophila: A Laboratory Handbook</a>. , Cold Spring Harbor Laboratory Press. (1989).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>35 مم / طبق قاعدة زجاجي</td><td>IWAKI</td><td>3911-035</td><td></td></tr><tr><td>مناديل تنظيف</td><td>NIPPON Paper CRICIA</td><td>S-200</td><td></td></tr><tr><td>Dumont #3c ملقط</td><td>أدوات العلوم الدقيقة</td><td>11231-20</td><td></td></tr><tr><td>Dumont #5SF</td><td>أدوات العلوم الدقيقة</td><td>11252-00</td><td></td></tr><tr><td>Eppendorf Research plus 2-20 & micro ؛ L</td><td>Eppendorf</td><td>3123000098</td><td></td></tr><tr><td>سلالة الذبابة: His2Av-mRFP ، sGMCA</td><td>Bloomington ذبابة الفاكهة Stock Center</td><td>59023</td><td></td></tr><tr><td>FV3000</td><td>CLEAR</td><td></td><td>المجهر متحد البؤر</td></tr><tr><td>المقلوب FV31S-SW</td> برنامج <td>واضح</td><td></td><td>ل FV3000</td></tr><tr><td>G40L</td><td>Shin-Etsu سيليكون</td><td></td><td>سيليكون شحم</td></tr><tr><td>غطاء صغير زجاجي 18 × 18 مم 0.13-0.17 مم</td><td>ماتسونامي</td><td>C018181</td><td></td></tr><tr><td>زجاج منزلق صغير 76 × 26 مم 0.9-1.2 مم</td><td>ماتسونامي</td><td>S7213</td><td></td></tr><tr><td>NEO-SABLE مقاس 0 دائري ، ناعم</td><td>Pentel</td><td>XZBNR-0</td><td></td></tr><tr><td>فرشاة SIL300CS-30CC</td><td>زيت سيليكون</td><td>واضح</td><td></td></tr><tr><td>نظام المجهر المجسم SZX7</td><td>CLEAR</td><td></td><td></td></tr><tr><td>حقنة Terumo 50 مل</td><td>Terumo</td><td>SS-50ESZ</td><td></td></tr><tr><td>شريط شفاف على الوجهين</td><td>سكوتش&nbsp;</td><td>665-1-12</td><td>نظرا لأن الطبقة الداخلية لها التصاق أقوى من الطبقة الخارجية ، فيجب استخدام الطبقة الداخلية لإصلاح الشرانق.</td></tr><tr><td>UPLSAPO10x</td><td>EVIDENT</td><td></td><td></td></tr><tr><td>UPLSAPO40XS</td><td>CLEAR</td><td></td><td>سيليكون الغمر</td></tr><tr><td>عدسة Vannas Spring مقص - 2.5mm</td> أدوات <td>العلوم الدقيقة</td> المتطورة <td>15000-08</td><td>اختياري</td></tr></tbody></table>

تصوير حي طويل الأمد لتطور الساق ذبابة الفاكهة بعد إزالة الحفرة

Long-Term Live Imaging of Drosophila Pupal Leg Development After Puparium Removal

هنا ، يتم وصف مثال على التصوير الحي لمدة 44 ساعة لذبابة الفاكهة النامية الساق البالغة في مرحلة العذراء. تم جمع الذباب الذي يعبر عن His2Av-mRFP17 (نوى وضع العلامات) و sGMCA18 (بروتين الأكتين المرتبط بعلامة GFP Moesin ، أكتين الملصق) في مرحلة العذراء البيضاء واحتضانها لمدة 15 ساعة عند 25 درجة مئوية. تمت إزالة الشرانق وتركيبه وفقا للبروتوكول (الشكل 2). تم الحصول على صور مكدس Z للرسغ والرسغ ، بالقرب من طرف الساق ، بنجاح كل 15 دقيقة من 16 ساعة إلى 60 ساعة APF في درجة حرارة الغرفة (ليست صارمة ، ولكن بالقرب من 25 درجة مئوية). يظهر النصف الأول من سلسلة الصور في الشكل 3 ، والنصف الأخير في الشكل 4 ، والفيلم بأكمله في الفيلم 1. مع تضييق أنسجة الساق بسرعة ، شكلت الخلايا الظهارية بشكل عابر بنية مثيرة للاهتمام ، هيكل يشبه البارثينون ، يتميز بإسقاطات الظلية والوصلات القاعدية (الشكل 3). لوحظ انخفاض السماكة الظهارية حتى بعد اكتمال المخطط التفصيلي تقريبا (الشكل 4). يتم استعراض العملية برمتها في الشكل 1.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67597/67597fig1.jpg"> 
الشكل 1: نظرة عامة على الشكل النهائي لذبابة الفاكهة الكرسغ البالغ خلال مرحلة العذراء. تم تقسيم العملية برمتها إلى خمس مراحل بناء على التغيرات المورفولوجية على كل من مستويات الأنسجة والخلايا التي لوحظت في تجارب التصوير الحي طويلة المدى. يتم عرض الصور التمثيلية أو الصور المعروضة على السطح (إشارة sGMCA) المقابلة لعدة نقاط زمنية على الجانب الأيسر. يتم كتابة وصف موجز للأحداث في كل مرحلة على الجانب الأيمن. تم تعديل هذا الرقم من Hiraiwa et al.15. انظر أيضا الفيلم 1. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67597/67597fig1large.jpg" target="_blank">الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67597/67597fig2.jpg"> 
الشكل 2: إزالة Puparium وتجميع التركيب للتصوير الحي. (أ) خادرة بيضاء مجمعة في طبق. (ب) ظهرت الخادرة في (أ) بعد الحضانة لمدة 15 ساعة عند 25 درجة مئوية. تشير المنطقة السماوية الملونة إلى الطبقة العظمية. (ج) صورة فوتوغرافية تظهر خادرة ملتصقة بقطعة من الشريط اللاصق على الوجهين. (D-J) سلسلة من الصور توضح إجراء إزالة الشرانق. (د) يتم رفع الطبقة بالملقط. (ه) تتم إزالة الصوت. (و) يتم إدخال طرف ملقط بين بشرة العذراء والشرانقية. (ز) يتم فتح المعرنرة جزئيا. (ح) يتم إدخال طرف ملقط مرة أخرى. (ط) تم فتح المعرنقة ، ولم يتبق سوى جزء صغير من الطرف الخلفي. (ي) الخادرة التي يتم رفعها بواسطة فرشاة الرسم. (ك) مثال على تسرب سوائل الجسم للخادرة. يشار إلى السائل الخارج من الجرح الذي يتم دسه طرف الملقط برأس سهم. (L-N) صور ورسوم توضيحية توضح تجميع الجبل. (L) عرض صورة من الجانب العلوي تظهر الشرانق الموضوعة والماء المقطر في قاع طبق زجاجي القاع. (م) الطبق بعد الانتهاء من تجميع التركيب. تم وضع شحم السيليكون على طول الحافة حول الجزء الزجاجي ، وتم وضع غطاء على الشحوم لإغلاقه. (ن) رسم تخطيطي لمجموعة تركيب ذبابة الفاكهة خادرة للتصوير الحي على المدى الطويل. (س) تطورت خادرة مثبتة تقريبا بالاغة. (ع) خادرة مثبتة على الإغلاق. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67597/67597fig2large.jpg" target="_blank">الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67597/67597fig3.jpg"> 
الشكل 3: تغيرات الشكل الديناميكي في الخلايا الظهارية الرصغية في 16-27.5 ساعة APF. (أ) رسم توضيحي للخادرة يرى من الجانب البطني. يتوافق المستطيل المتقطع مع المنطقة التي لوحظت في (B-E). L1: الساق الأولى ، L2: الساق الثانية ، L3: الساق الثالثة. (B ، C ، D ، E) صور ثابتة من التصوير المباشر للجزء البعيد من الرص الرغي في sGMCA (أخضر) و His2Av-mRFP (أرجواني) تعبر عن الذبابة. تضيق الأنسجة بسرعة ، وتتقدم المسافة البادئة لمناطق المفاصل. (ب '، ج' ، د '، ه') تكبير المناطق المحاطة بالخطوط المتقطعة في (B,C,D,E) على التوالي. يظهر السهم ورأس السهم في (C') مثالا على الإسقاطات القبلية وموضع الوصلات القاعدية ، على التوالي. يبدأ الهيكل الشبيه بالبارثينون في التكون في (B') ، ويتشكل بالكامل في (C') ، ويبدأ في الاختفاء في (D') ، ويصبح من الصعب رؤيته في (E'). البعيد إلى اليمين والظهري إلى الأعلى في جميع الأشكال. تظهر المراحل في الزوايا اليمنى السفلية في (B ، C ، D ، E). قضبان المقياس: B ، C ، D ، E: 50 ميكرومتر ؛ B',C',D',E': 10 ميكرومتر. تم تعديل هذا الرقم من Hiraiwa et al.15. انظر أيضا الفيلم 1. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67597/67597fig3large.jpg" target="_blank">الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67597/67597fig4.jpg"> 
الشكل 4: تغيرات الشكل في طبقة الخلية الظهارية الرصغية في 41-60 ساعة APF. (أ ، ب ، ج ، د) صور ثابتة من نفس مجموعة البيانات المتسلسلة للتصوير الحي مثل الشكل 3. يتم تكبير المستطيلات المتقطعة في (A ، B ، C ، D) في (A '، B' ، C' ، D ') ، على التوالي. بحلول حوالي 48 ساعة APF (A-B') ، يكون تكوين الشكل الخارجي ، مثل استطالة الشعيرات والمخالب والبولفيلي ، قد اكتمل تقريبا. تحرك الجزء السفلي من المفصل الذي تم غزوه بشكل قريب ، وبعد ذلك ، تقدم تكوين هيكل الكرة والمقبس بعد حوالي 54 ساعة APF. أصبح الاختلاف المورفولوجي بين الظهارة الظهرية والبطنية واضحا (أسهم مزدوجة وأسهم مزدوجة مفتوحة في B '، C '، D'). بعد 54 ساعة APF (C-D') ، انخفضت الطبقة الظهارية سمكها دون تغيير الخطوط العريضة للشرائح. الظهرية إلى الأعلى وبعيدة إلى اليمين في جميع الأشكال. أشرطة المقياس: A ، B ، C ، D: 50 ميكرومتر ؛ أ '، ب '، ج '، د': 20 ميكرومتر ، وقد تم الاستشهاد بهذا الرقم من Hiraiwa et al.15. انظر أيضا الفيلم 1. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67597/67597fig4large.jpg" target="_blank">الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67597/67597fig5.jpg"> 
الشكل 5: مثال على مراقبة الساق باستخدام وظيفة Bright Z. (أ ، ب) صور للمنطقة المقابلة والعمق والمرحلة من المحطة الثالثة من sGMCA (أخضر) و His2Av-mRFP (أرجواني) تعبر عن الذبابة ، مع (B) أو بدون (A) باستخدام وظيفة Bright Z. (أ) مستخرج مستوى XY بعمق 59.1 ميكرومتر من مراقبة المنطقة الرصغية في الساق الثالثة عند 16 ساعة APF تم الحصول عليها دون استخدام وظيفة Bright Z. (أ) يتوافق عرض المقطع العرضي مع الخط الرأسي الأصفر في (A). يشير الخط العمودي في (A') إلى المستوى البؤري ل (A). (ب) مستوى XY بعمق 61.6 ميكرومتر مستخرج من مراقبة المنطقة الرصغية في الساق الثالثة عند 16 ساعة APF تم الحصول عليها باستخدام وظيفة Bright Z. تم ضبط كل من جهد PMT وطاقة الليزر. تم تحسين رؤية الصورة مقارنة ب (A). (ب') يتوافق العرض المقطعي مع الخط الرأسي الأصفر في (B). يشير الخط العمودي الأصفر في (B') إلى المستوى البؤري ل (B). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67597/67597fig5large.jpg" target="_blank">الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>
الملف التكميلي 1: مثال على إعداد المجهر متحد البؤر للتصوير الحي لمنطقة الساق من 15-30 ساعة APF. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67597/67597_Supplementary%20File%201.docx" target="_blank">الرجاء النقر هنا لتنزيل هذا الملف.</a>
فيلم 1: تصوير حي طويل الأمد للجزء البعيد من الرصغ لمدة 44 ساعة. تم استخدام ذبابة sGMCA (أخضر) و His2Av-mRFP (أرجواني). تم استخراج مستوى XY الأكثر تمثيلا من نفس مجموعة البيانات مثل الشكل 3 والشكل 4. تشير رؤوس الأسهم إلى أمثلة على المناطق المشتركة المستقبلية. الخلايا سريعة الحركة في الأنسجة هي خلايا شبيهة بالبلاعم. الإشارة الشبيهة بالسلسلة الممتدة على طول الأجزاء الرصغية هي جزء من الحاجز. يظهر الطابع الزمني hh: mm. البعيد إلى اليمين ، والظهري إلى الأعلى. تم اقتباس هذا الفيلم من Hiraiwa et al.15<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67597/Movie%201.mp4" target="_blank">الرجاء النقر هنا لتنزيل هذا الملف.</a>

Over the past decades, significant progress has been made in understanding the mechanisms of cell fate determination. However, the process by which ...

long-term-live-imaging-drosophila-pupal-leg-development-after

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

علم الأحياء النمائي

جرحشاعثزرحشرتاد مضان التصوير المقطعي يعمل خارج حدود اختراق الأنسجة sectioning المجهري مضان. وتستند هذه التقنية على التعددية إسقاط الإضاءة والنقل وصفا الفوتون. علينا أن نظهر في الجسم الحي ، كامل الجسم التصور 3D من التشكل من GFP - معربا عن أقراص تخيلي في...

جرحشاعثزرحشرتاد الإسفار عن التصوير المقطعي في الجسم الحي. تصوير النامية ذبابة الفاكهة</em

في هذا الفيديو ، ونحن تصف طريقة لتصوير الخلايا الحية لتقسيم الخلايا الاصلية غير متماثلة الحسية والجهاز سليمة في خلايا...

تعيش خلية التصوير الحسي للخلايا السليمة في الجهاز السلائف ذبابة الفاكهة شرانق

Source: Hellerman، M.B.، et al. Live-imaging of the ذبابة الفاكهة العين العذراء.  J. Vis. Exp. (2015)يوضح الفيديو تقنية تصوير مباشر لدراسة زخرفة العين في ذبابة الفاكهة خادرة ميلانوغاستر. تتيح العلامات الموسومة بالبروتين الفلوري الأخضر (GFP) تصور التنظيم الخلوي والتمايز أثناء تكوين بنية العين النامية.

التصوير الحي لعين ذبابة الفاكهة العذراء باستخدام الفحص المجهري الفلوري

يوضح هذه الورقة استخدام المجهر متحد البؤر المسح السريع إلى سلوك الخلية صورة مباشرة من خلال puparium. من خلال ترك حالة العذراء سليمة، وهذا الأسلوب يسمح للمراقبة وقياس العمليات الحيوية في الخلية مرحلة من مراحل التنمية ذبابة الفاكهة التي يصعب دراسة مباشرة.

التصوير من خلال حالة العذراء من<em&gt; ذبابة الفاكهة السوداء البطن</em

يقدم هذا البروتوكول طريقة فعالة لتصوير ذبابة الفاكهة الظهارية العصبية الحية للعين العذراء. تعوض هذه الطريقة عن حركة الأنسجة والطوبولوجيا غير المتكافئة ، وتعزز تصور حدود الخلية من خلال استخدام العديد من بروتينات التوصيل الموسومة ب GFP ، وتستخدم جهاز تصوير سهل التجميع.

يعيش التصوير لل ذبابة الفاكهة العذراء العين

يصف هذا البروتوكول طريقة مفصلة لعلى المدى الطويل فيفو السابقين الثقافة والتصوير المباشر لقرص تخيلي ذبابة الفاكهة. وهو يدل التمايز مبصرة والتناوب ommatidial في غضون فترة 10 ساعة من التصوير المباشر لقرص العين. بروتوكول بسيط ولا يتطلب الإعداد مكلفة.

طويلة الأجل تصوير لايف<em&gt; ذبابة الفاكهة</em&gt; القرص العين

هنا، نحن نقدم وسيلة سهلة الاستخدام، وتنوعاً لإجراء التصوير مباشر للعمليات الإنمائية في morphogenesis العامة ووتر العضلات خاصة في المعيشة الخوادر المورفولوجية .

في فيفو تصوير Morphogenesis وتر العضلات في المورفولوجية الخوادر

نقدم هنا بروتوكولا لإصلاح الجرح العيش-التصوير والاستجابة الالتهابية المرتبطة بها في عالية الدقة الزمانية في فيفو. هذا الأسلوب يستخدم الخوادر مرحلة التنمية المورفولوجية لتمكين الطويلة الأجل التصوير وتعقب السكان خلية معينة على مر الزمن ومتوافق مع الجينات بوساطة [رني] كفاءة المنظمة.

طويلة الأمد في فيفو تتبع ديناميات الخلايا التحريضية داخل الخوادر المورفولوجية

تم تصميم هذا البروتوكول لتصوير وتحليل ديناميات اتجاه الخلية ونمو الأنسجة في ظهارة البطن Drosophila كما ذبابة الفاكهة يخضع التحول. يمكن تطبيق المنهجية الموصوفة هنا على دراسة مختلف مراحل النمو والأنسجة والهياكل تحت الخلوية في دروسوفيلا أو غيرها من الكائنات النموذجية.

التصوير والتحليل لاتجاهات الأنسجة وديناميات النمو في الظهارة الهوائية النامية Drosophila خلال مراحل البوبال

يصف هذا البروتوكول طريقة لتركيب يرقات Drosophila لتحقيق أطول من 10 ساعة من التصوير دون انقطاع الفاصل الزمني في الحيوانات الحية السليمة. يمكن استخدام هذه الطريقة لتصوير العديد من العمليات البيولوجية بالقرب من جدار الجسم اليرقات.

LarvaSPA، طريقة لتركيب Drosophila Larva للتصوير على المدى الطويل الفاصل الزمني

هنا ، نقدم بروتوكولا مفصلا لإجراء تصوير مباشر للانقسام غير المتماثل للخلايا الجذعية الجرثومية (GSCs) في ذبابة الفاكهة في مكانة المبيض. نستخدم خطا معدلا وراثيا يعبر في كل مكان عن اندماج البروتين الفلوري الأخضر (GFP) لبروتين الطيف Par-1.

التصوير الحي الممتد لمنافذ الخلايا الجذعية الجرثومية ذبابة الفاكهة السوداء

تعلم تصوير حي طويل الأمد لتطور ساق ذبابة الفاكهة بعد إزالة الحفرة باستخدام المجهر الضوئي التخيلي. تُظهر الخلايا الطلائية تغيرات ديناميكية في الشكل وتشكل بنية شبيهة بالبارثينون مؤقتًا.

تصوير حي طويل الأمد لتطور الساق ذبابة الفاكهة بعد إزالة الحفرة

استكشف المزيد من الفيديوهات