فبراير 28, 2025
آليات الموت المفاجئ غير المتوقع في الصرع (SUDEP) غير مفهومة جيدا ويصعب ترجمتها من النماذج الحالية. قد تقدم الأرانب المعدلة وراثيا نظرة ثاقبة لهذه الآليات. نصف طريقة لتسجيلات تخطيط كهربية الدماغ وتخطيط كهربية القلب طويلة المدى ومستمرة في مجموعات الأرانب المعدلة وراثيا لتقييم الأحداث الخطيرة التي قد تؤدي إلى الوفاة.
[مدرب] للبدء ، ضع مجموعة التخدير على وسادة تسخين بالأشعة تحت الحمراء يتم التحكم فيها عبر مقياس حرارة المستقيم. ضع الأنف والفم في قناع وجه مخصص مطبوع ثلاثي الأبعاد متصل عبر موصل دوار بدائرة جاكسون ريس غير قابلة لإعادة التنفس مع كيس سعة 0.5 لتر. راقب عمق التخدير باستخدام مقياس التأكسج النبضي على الأذن أو المخلب. ضع مناشف جراحية لاصقة على جانبي المجموعة ، وقم بتغطيتها بستارة جراحية كبيرة. اقطع ثقبا بحجم مناسب في الستارة لكشف البطن والصدر. افتح الغرسة على المجال الجراحي وضع خيوط مرساة غير قابلة للامتصاص في كل فتحة من فتحات تثبيت الزرع ، مع ترك ذيل من خمسة إلى ستة سنتيمترات على كل خياطة. ضع الغرسة في وعاء من المحلول الملحي المعقم الدافئ حتى تصبح جاهزة للوضع. باستخدام مشرط ، قم بعمل شق بطول ثلاثة سنتيمترات عبر الجلد على طول الخط ألبا. وشق بعناية من خلال العضلات لفتح التجويف البريتوني. ثم ضع الغرسة في الجزء الجمجمي من تجويف البطن ، وضعها على يسار الشق. استخدم مبازلا لإخراج مخطط كهربية القلب الإيجابي ، أو ECG ، وسلك مخطط كهربية الدماغ من التجويف البريتوني والجلد حوالي ثلاثة إلى أربعة سنتيمترات إلى يسار الشق. قم بحفر سلك تخطيط القلب السالب على بعد سنتيمترين على يمين الشق ، مما يسمح للغرسة بالجلوس بشكل مريح داخل التجويف. الآن ، قم بتأمين الغرسة بخيوط مرساة على الجدار البطني للتجويف البريتوني ، مما يضمن عدم احتجاز الأمعاء. وأغلق جدار البطن بخياطة قابلة للامتصاص بنمط متقطع. ثم أغلق شق الجلد بخياطة غير قابلة للامتصاص بنمط متقطع. نفق يؤدي مخطط كهربية القلب السلبي تحت الجلد إلى الجزء العلوي الأيمن من الصدر على مستوى الضلع الأول. قم بتشريح جيب تحت الجلد بصراحة للف ما يقرب من 10 سم من الأسلاك. قم بقطع أي سلك زائد وإنشاء حلقة بعد ربط الطرف المكشوف بالسلك المعزول بخياطة غير قابلة للامتصاص. قم بتثبيت الحلقة على العضلات باستخدام خيوط غير قابلة للامتصاص. ثم قم بحفر مخطط كهربية القلب الإيجابي إلى الضلع السفلي الأيسر ، وكرر الخطوات الموضحة لتثبيته على العضلات وإغلاق الشق. لف أسلاك EEG المكشوفة بورق الألمنيوم المعقم. دع مساعدا غير معقم يزيل الستارة المعقمة وربطة عنق الساق. قم بتحويل المجموعة إلى وضع الانبطاح ، مع التأكد من بقاء قناع الوجه في مكانه بإحكام عن طريق تدوير الموصل الدوار بين قناع الوجه والدائرة. اضبط مقياس التأكسج النبضي وجهاز مراقبة دوبلر حسب الحاجة للحفاظ على مراقبة التخدير المستمرة. ثم ضع مسبار دوبلر فوق القلب. ضع منشفة لاصقة معقمة أسفل الجانب الأيسر ، بينما يحمل المساعد علبة رقائق الألومنيوم التي تحتوي على الأسلاك. قم بإزالة الأسلاك برفق من كيس الألمنيوم وضعها على الحقل المعقم ، وأكمل عملية اللف بمنشفة معقمة. قم بعمل شق بطول ثلاثة سنتيمترات على طول خط الوسط لفروة الرأس لكشف الجمجمة. استخدم المبزل لحفر خيوط مخطط كهربية الدماغ تحت الجلد من الجانب الأيسر إلى الجمجمة. ثم قم بتنظيف واكشط السمحاق من العظام الجدارية المكشوفة باستخدام مشرط. أدخل مثقابا محمولا باليد في غطاء معقم بالموجات فوق الصوتية ، وقم بتوجيه لدغ حفر بمقدار ملليمتر واحد في المثقاب. بعد ذلك ، قم بحفر ثقوب لدغ ثنائية في العظام الجدارية ، حوالي 0.5 سم أمام لامدا و 0.5 سم جانبيا للخياطة السهمية. استخدم ملقطا دقيقا لوضع المسمار في فتحة الأزيز. ثم استخدم مفك البراغي لإدخال المسمار في منتصف الطريق تقريبا في الجمجمة. الآن ، قم بتشريح جيب تحت الجلد بصراحة على طول الجزء الخلفي من الرقبة للف ما يقرب من 10 سم من الأسلاك. اقطع أي سلك زائد وقم بتجريد العزل من الحافة ، وتمديد السلك. لإنشاء حلقة في نهاية السلك المكشوف ، اربط عقدة تاركة حلقة صغيرة. ضع الحلقة فوق المسمار وشد المسمار بالجمجمة ، مما يضمن ملامسة السلك للمسمار. ضع السلك الأرضي على اليسار وسلك التسجيل على اليمين. الآن ، قم بتثبيت البراغي والأسلاك في الجمجمة باستخدام أكريليك الأسنان. أخيرا ، قم بحقن بوبيفاكائين تحت الجلد في كل موقع شق لتخفيف الآلام. وقم بتغطية كل شق بكمية صغيرة من غراء الجلد. بمجرد وضع جميع الأسلاك في مكانها ، قم بتقييم إشارات القياس عن بعد باستخدام برنامج التحليل للتحقق من دقة الإشارة. توقع ظهور إشارات مخطط كهربية الدماغ بسعة منخفضة أثناء تخدير المجموعة. تم إجراء جراحة الزرع بنجاح على 15 مجموعة من مجموعات الأرانب ، مع بقاء 12 على قيد الحياة حتى نقطة النهاية التجريبية. أظهرت تسجيلات القياس عن بعد مباشرة بعد إعادة المجموعات إلى أقفاص المنزل إشارات مخطط كهربية الدماغ ذات السعة المنخفضة ، والتي تحسنت مع تعافي المجموعات من التخدير. تغير مورفولوجيا إشارة تخطيط القلب بشكل طفيف في الأيام القليلة الأولى بعد الجراحة بسبب التندب وتثبيت الأسلاك. لكن بشكل عام ، ظلت جودة الإشارة قوية بمرور الوقت. سمح نظام القياس عن بعد المزروع بتسجيل إمكانات حيوية متعددة ، بما في ذلك تخطيط كهربية الدماغ ودرجة الحرارة والتسارع وتخطيط كهربية القلب وجودة الإشارة.
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية
تستكشف هذه الدراسة آليات الموت المفاجئ غير المتوقع في الصرع (SUDEP) باستخدام صغار أرانب معدلة وراثياً. وتصف الدراسة طريقة للتسجيل المستمر وطويل الأمد لتخطيط كهربية الدماغ (EEG) وتخطيط كهربية القلب (ECG) لتقييم الأحداث الخطيرة التي قد تؤدي إلى الوفاة.
يتيح القياس عن بُعد المتزامن لتخطيط كهربائية الدماغ (EEG) وتخطيط كهربائية القلب (ECG) في مجموعات الأرانب حديثة الولادة المعدلة وراثياً مراقبة طولية عالية الدقة للفيزيولوجيا الكهربائية العصبية والقلبية ذات الصلة بآليات الموت المفاجئ المفاجئ المرتبط بالصرع (SUDEP). تعالج هذه الطريقة فجوة حرجة في النمذجة قبل السريرية من خلال رصد اضطرابات نظم القلب ونوبات الصرع ذات الصلة بالمرض في نظام يتمتع بتوافق فيزيولوجي أقرب إلى البشر مقارنة بنماذج القوارض. وتدعم هذه الطريقة الثقة التنبؤية في التحقق من الأهداف وتقليل المخاطر الميكانيكية لاعتلالات القنوات الأيونية المرتبطة بالصرع والخلل الوظيفي القلبي.
يربط نموذج الأرانب المزود بتقنية القياس عن بُعد هذا بين مرحلة الاكتشاف المبكر والتحقق قبل السريري لأبحاث الصرع واضطراب نظم القلب، مما يدعم عملية تحديد المركبات الواعدة والدراسات الميكانيكية.