تقييم الخصائص المضادة للأكسدة والطاردة للديدان لمستخلصات Tithonia diversifolia ضد بيض الديدان الخيطية المعدية المعوية باستخدام فحوصات في المختبر

يركز بحثي على علم الطفيليات، حيث أدرس حاليا المكونات الطبيعية من النباتات للسيطرة على الطفيليات الداخلية في المجترات الصغيرة. نريد دمج المعرفة التقليدية والطرق البديلة للسيطرة على أعداد المجترات الصغيرة في العالم. في الوقت الحاضر، نستخدم بشكل متزايد تقنيات مثل النمذجة التنبؤية، والعدادات التلقائية، والأدوات الجزيئية لاكتشاف التنبيهات المحددة.

علاوة على ذلك، تقوم عدة معاهد حول العالم بتطوير نماذج أولية للقاحات ضد التواءات هيمونخوس. هذه خطوة كبيرة إلى الأمام. وآخرون يستخدمون المحركات العضوية لتقليل الاعتماد على المختبرية، وهو أمر ذو قيمة أخلاقية وعلمية.

بشكل عام، هناك جهد عالمي قوي ومنسق لتعزيز أدوات التشخيص والأبحاث، يهدف إلى تطوير استراتيجيات مبتكرة ومستدامة لمكافحة الطفيليات على مستوى العالم، ومنع مقاومة الأدوية. للبدء، اخلط 30 جراما من كل عينة براز مع 50 ملليلتر من محلول الملح المشبع بكثافة 1.2 جرام لكل ملليلتر استعدادا لاختبارات الكوبرولوجيا. قم بتجانس ثلاثة جرامات من عينة البراز في محلول 50 ملليلتر من محلول كلوريد الصوديوم المشبع، وترشيح الخليط عبر قطعة قماش جبن.

افحص الشريحة تحت المجهر بتكبير 10 أضعاف، وعد البيض من نوع سترونجيل. احسب عدد البيض لكل غرام باستخدام الصيغة المعطاة. قم بتصفية البراز مرتين باستخدام شاش معقم.

ثم قم بتصفية التعليق الناتج وانقله إلى مصفاة. اغسل المادة المحبوسة على المنخل بالماء المقطر، واجمع التعليق المغسول في أنابيب بسعة 15 ملليتر. ضع العينات في جهاز طرد مركزي على الطاولة مع دوار دلو متأرجح، وادار على حرارة تقارب 4,800 جرام لمدة خمس دقائق في درجة حرارة الغرفة.

أعد تعليق البيض وPBS، واضبط تركيز البيض إلى 100 بيضة لكل ملليلتر لإعداد الاختبار. جهز السيطرة الإيجابية عن طريق إذابة فينبيندازول في PBS للحصول على محلول مخزن بحجم 1,000 ميكروغرام لكل ملليلتر. بعد إضافة خليط واحد إلى واحد من المستخلص وتعليق البيض، أضف حوالي 100 بيضة لكل ملليلتر إلى كل بئر في طبق يحتوي على 48 بئر.

التحدي الرئيسي لهذه التقنية يكمن في تباين استجابة فقس البيض. حتى عند اتباع جميع خطوات البروتوكول، قد يحدث فقس البيض بين 48 إلى 72 ساعة، أو في بعض الحالات لا يحدث على الإطلاق. أظهر التأثير المثبط لمستخلص تيثونيا ديفيرسيفوليا على فقس البيض نمطا يعتمد على الجرعة ينعكس في قيمة EC50 البالغة 521.6 ميكروغرام لكل ملليلتر.

تشير هذه النتيجة إلى أن تركيزات معتدلة من المستخلص الخام مطلوبة لتحقيق تثبيط بنسبة 50٪، مما يشير إلى وجود مركبات نشطة بيولوجيا ذات جهد مضاد للديدان. عند الجرعات المنخفضة من 150 إلى 300 ميكروغرام لكل ملليلتر، كان التثبيط ضئيلا، وظل التباين منخفضا، متسقا مع عدم التعرض الكافي للتدخل في تكوين الأجنة أو ظهور اليرقات. بلغ التباين ذروته عند الجرعة الوسيطة 1,200 ميكروغرام لكل ملليلتر، وهو ما يتوافق مع منطقة الانتقال غير الخطية لمنحنى استجابة الجرعة، حيث يمكن أن تسبب الفروق البيولوجية أو التجريبية الصغيرة تحولات كبيرة في النتائج.

وهذا متوقع مع مستخلصات النباتات الخام التي تحتوي على عدة مركبات نشطة. بشكل عام، تؤكد النتائج النشاط المضاد للفقس لتيثونيا ديفيرسيفوليا مع زيادة فعالية عند الجرعات الأعلى. قد يعزز تكرير أو تجزئة المستخلص من الفعالية، ويوصى بالمزيد من الدراسات الكيميائية النباتية والعلاج في الجسم لتقييم فائدته في برامج مكافحة الطفيليات.

تظهر نتائجنا نشاطا في المختبر، مما يؤكد الإمكانات المضادة للطفيليات. تلك التي تمثل اكتشافا ذا معنى والتطبيق السريري المحتمل لتعزيز صحة. بالإضافة إلى ذلك، فإن التكلفة المنخفضة والنهج الأخلاقي لهذا الاختبار يؤكدان استخدام المعرفة التقليدية فيما يتعلق بالدراسات المستقبلية.

تقدم نتائج دراستنا رؤى مبنية على الأدلة حول استراتيجيات مضادات الديدان، ومكونات صديقة للبيئة تم التحقق منها لدعم استراتيجيات السيطرة على تقليل الاعتماد على المخدرات.