نموذج الفئران لالتهاب دواعم السن المتقدم الناجم عن رباط النايلون في الضرس العلوي الثاني

يتمثل نطاق بحثنا في دراسة العوامل الخلوية والجزيئية التي تفضل التهاب دواعم السن التي نستخدم من أجلها نموذج الفئران لالتهاب دواعم السن الناجم عن الرباط.

أثبتت الأبحاث الحديثة أهمية الالتهاب. خلل التنسج والأمراض الجهازية هي عوامل محددة في تطور التهاب دواعم السن.

تتضمن التكنولوجيا المستخدمة مؤخرا في أمراض اللثة نماذج حيوانية ، وبعضها يبحث عن جزيئات مختلفة ، وتسلسل البروتينات ، وقياس التدفق الخلوي ، وعلم الأنسجة ، من بين أمور أخرى.

ترتبط التحديات التجريبية الحالية بفهم التفاعل بين الأمراض الجهازية والتهاب دواعم السن.

نستخدم نموذج الفئران لالتهاب دواعم السن الرباطي لإثبات أن السيتوكين المؤيد للالتهابات A و S يشارك في تطور التهاب دواعم السن أثناء الحمل.

[الراوي] للبدء ، ضع فأرة مخدرة على طاولة عمل متجهة لأعلى مع توجيه رأسه نحو المشغل. اسحب كل ساق برفق دون توتر وقم بتثبيتها بشريط صغير لمنع الحركات اللاإرادية المفاجئة. قم بتغطية الماوس ببطانية أو شاش للحفاظ على حرارة جسمه. ضع أحد طرفي مرونة تقويم الأسنان حول القواطع العلوية وقم بتأمين الطرف الآخر بالحامل العلوي دون الضغط على الشد. ثم ضع مرونة تقويم الأسنان الثانية حول القواطع السفلية وثبتها على حامل سفلي باستخدام شريط مطاطي. الآن أدخل فواصل الخد وحرك اللسان بعناية إلى جانب واحد لتحسين الرؤية. ضع المجهر لتصور الأضراس العلوية باستخدام هدف التكبير الأدنى. بمجرد تحديد موقعه ، قم بزيادة التكبير لتحسين الراحة والتركيز للمشغل. عندما تكون الصورة واضحة ، حدد الضرس الأكبر والقريب M1 ، والضرس التالي M2 ، والمولي الأصغر والبعيد M3. استخدم خياطة نايلون 6-0 لوضع الرباط لأنها تسبب ضررا ميكانيكيا أقل مقارنة بالخيوط العريضة. باستخدام ملقط الأنسجة ، أمسك الطرف البعيد لخياطة النايلون 6-0 وضعها في قاعدة الحليمة من جانب الحنك في الجزء البعيد من M2. قم بتطبيق ضغط خفيف من خلال قاعدة الفضاء الحنكي بين الأطراف لدفعه نحو سطح الخد. عندما تتقاطع الخيطة ، اسحبها عبر الفراغ القريب باتجاه الجانب الشدقي. الآن ، ضع طرف الخيط في قاعدة المنطقة القريبة على السطح المتوسط ل M2 من الجانب الشدقي. ادفعه برفق لعبور الفضاء بين الأطراف وقم بتمريره مرة أخرى عبر الفضاء الشدقي إلى الحنك. اسحب برفق خياطة النايلون 6-0. أمسك الطرف بملقط الأنسجة المثبت حول M2 ، وقم بتأمين الخيط باستخدام ثلاث عقد بسيطة. ثم قطع الخيط بمقص ناعم. لتحرير الماوس ، قم أولا بإزالة الشريط المطاطي حول القواطع السفلية ثم فواصل الخد. ثم قم بإزالة الشريط المطاطي حول القواطع العلوية والشريط المسام الدقيقة من الساقين. الآن قم بإزالة الماوس من طاولة العمل واحتفظ باللسان على جانب واحد للحفاظ على مجرى الهواء مفتوحا ومنع الانسداد. لف الماوس بشاش أو قطعة قماش وضعه ووجهه لأعلى. حافظ على دفء ، مغطى بقطعة قماش أو شاش ، وتحت الملاحظة حتى يستيقظ تماما. ضع قطرة واحدة من الهيبروميلوز في كل عين حتى يتمكن الفأر من الوميض بشكل طبيعي. ثم أعده إلى قفصه العادي. للتحقق من ديمومة الرباط ، خذ الماوس. امسك رأسه وجسمه بإحكام ، واستخدم ملقط الأنسجة لفتح الفم. تحت ضوء المصباح ، راقب خياطة النايلون 6-0 حول M2. لتأكيد تكوين الأغشية الحيوية باستخدام علم الأنسجة ، قم بحصاد الفك العلوي من التي تم القتل الرحيم بعد 30 يوما. اغسل الأنسجة في محلول كلوريد الصوديوم بنسبة 0.9٪ وضعها في أنابيب الطرد المركزي الدقيقة المصنفة. قم بإصلاح العينات في محلول بارافورمالدهيد 4٪ لمدة ساعتين تحت التحريض. ثم اغسل العينات الثابتة بماء الصنبور لمدة ساعتين. بعد ذلك ، قم بإزالة الكلس من العينات في 20 حجما من 4٪ EDTA عند درجة الحموضة 7.3 لمدة 20 يوما ، مع تغيير EDTA كل أربعة أيام. ثم قم بتضمين العينات في البارافين. قم بقص خمسة أقسام ميكرومتر من منطقة M2 وصخها بالهيماتوكسيلين واليوزين. راقب الأقسام الملطخة تحت المجهر البصري لوصف التغيرات في ظهارة التلم وألياف اللثة واللثة والارتفاع وسلامة القمة السنخية. قم بقياس فقدان التعلق عن طريق تحديد المسافة بين تقاطع المينا وأعلى نقطة في قمة العظم باستخدام برنامج التحرير الرقمي. بعد التحليل النسيجي ، قم بتحليل البيانات من مجموعات التحكم وعلاج اللثة باستخدام اختبار Mann-Whitney U. يؤدي التهاب دواعم السن إلى فقدان الأنسجة في الفئران ، والالتهاب ، والنزيف ، وتكوين جيب اللثة على هامش اللثة بحلول اليوم 30 ، على عكس المجموعة الضابطة. أكد التحليل النسيجي تلفا هيكليا كبيرا في مجموعة PT ، مع وجود جيوب اللثة ، وانفصال الألياف ، والهجرة القمية للظهارة. كما لوحظ فقدان نوى الخلايا في اللثة وعظام الجانبين الشدقي والحنكي. في المقابل ، أظهرت مجموعة CTL أنسجة صحية. كشف التحليل الكمي عن زيادة كبيرة في فقدان التعلق في مجموعة PT مع فقدان الجانب الشدقي عند حوالي 209 ميكرومتر والجانب الحنكي عند حوالي 254 ميكرومتر.