يوليو 8, 2025
يقدم البروتوكول طريقة مبتكرة لتحليل وتصور السلوكيات المرتبطة بنتيلين إيترازول بالنوبات التي يسببها البنتيلينيترازول في الفئران. يمتد هذا النهج إلى ما هو أبعد من درجات راسين التقليدية ، مما يوفر تقييما أكثر شمولا للتنوع والديناميكيات الزمنية لسلوكيات ictal.
يركز بحثنا على توصيف وقياس نوعين من السلوكيات الجليدية ، التشنج والرمع العضلي ، بعد إعطاء بنتيلينيترازول. نحاول الكشف عن كيفية مساهمة هذه السلوكيات في ظهور النوبات الحوفية وكيف تتطور الأنماط بمرور الوقت. في الآونة الأخيرة ، كان هناك الكثير من التقدم في فهم كيفية انتشار النوبات البؤرية عبر الشبكات العصبية وتعميمها في النهاية.
بمساعدة تحليل الفيديو بمساعدة الكمبيوتر ، أصبحنا الآن قادرين على التقاط تفاصيل أدق حول كيفية حدوث النوبات. تعتمد معظم دراسات النوبات على مقياس راسين ، لكن هذا النهج غالبا ما يفتقد السلوكيات المهمة التي يسببها PTZ. يساعد بروتوكولنا في سد هذه الفجوة من خلال تحديد وتحديد الأحداث التي عادة ما يتم تجاهلها ، قبل وبعد ظهور النوبة الحوفية بالفعل.
يسمح بروتوكولنا بتحليل أكثر تفصيلا للسلوك. بدلا من الاعتماد على درجة واحدة ، مثل مقياس راسين ، يمكننا قياس معلمات متعددة لكل حدث من الأحداث ، مما يمنحنا فهما أعمق لما يحدث بالفعل أثناء النوبات. في الوقت الحالي ، يركز مختبرنا على استكشاف ما إذا كانت الأدوية البديلة المضادة للنوبات يمكن أن تمنع أو تؤخر أو تقلل من التشنجات والرمع العضلي ، وكيف يمكن أن يؤثر ذلك على تطور النوبات الحوفية.
للبدء ، استخدم مقياسا لقياس وزن جسم. احسب حجم محلول البنتيلينيترازول المطلوب لكل بناء على وزن جسمه. سجل سلوك داخل الساحة لمدة ساعة واحدة على الأقل قبل حقن البنتيلينيترازول.
تقلل فترة التعود هذه من الإسعافات والقلق الناجم عن الحداثة وتسمح باستخراج نشاط خط الأساس. تحضير حقن pentylenetetrazole. للإعطاء تحت الجلد ، استخدم يدا واحدة لتأمين وقرص الجلد برفق بين لوحي الكتف.
باستخدام حقنة سعة 1 مليلتر متصلة بإبرة قياس 26-1 / 2 ، أدخل الإبرة في الفضاء تحت الجلد بالتوازي مع اتجاه الجسم وحقن المحلول ببطء. بمجرد اكتمال الحقن ، قم بإزالة الإبرة برفق أثناء تثبيت الجلد عند نقطة الخروج لمنع التسرب بسبب ضغط التجويف الداخلي. راقب وتدوين أي تسرب للمحلول من موقع الحقن.
في حالة وجود تسرب ، ضع في اعتبارك إعطاء 50 ميكرولتر إضافي من نفس محلول البنتيلينيترازول. الآن ، ضع مرة أخرى في الساحة وسجل باستمرار لمدة ساعة واحدة. بعد ساعة واحدة أو أكثر من حقن pentylenetetrazole ، أوقف التسجيل وانسخ ملف الفيديو للمعالجة اللاحقة.
استخدم هذا لتتبع الفيديو والترميز السلوكي. افتح برنامج Solomon Coder. إذا كان ملف التكوين متاحا، فحدد ملف وانقر فوق تحميل التكوين لتحميل الإعدادات المحددة مسبقا.
لفتح مقطع فيديو، حدد ملف وانقر فوق فتح فيديو. اضغط على تشغيل لبدء تشغيل الفيديو. انقر فوق زر الماوس الأيسر أو اضغط على مفتاح لوحة المفاتيح المخصص لتمييز السلوكيات المرصودة أثناء التشغيل.
لحفظ البيانات، انتقل إلى تحليل وحدد حفظ الإخراج باسم لإنشاء ملف قيم مفصولة بفواصل. بالنسبة لورقة الترميز ، انتقل إلى ملف واختر حفظ ورقة الترميز. ضع علامة على وقت إدارة pentylenetetrazole في اللحظة التي يظهر فيها الماوس مرة أخرى في إطار الفيديو بعد إعادته إلى ساحة المراقبة.
استخدم هذه اللحظة كوقت صفر لتكون بمثابة نقطة مرجعية زمنية لجميع السلوكيات اللاحقة وحسابات زمن الانتقال. راقب التشنجات والرمع العضلي بعد دقائق قليلة من حقن بنتيلينيترازول. حدد التشنجات على أنها تقلصات سريعة وعابرة للعضلات المحورية ، بما في ذلك ثني الأذن الثنائي ، وتقلص عضلات الظهر ، ورفع الذيل ، ونادرا ما تكون قفزة مفاجئة.
قم بترميز هذه التشنجات كأحداث سرية وفورية ، وربطها بإطار فيديو واحد. لترميز الرمع العضلي ، حدد الأحداث التي تزيد مدتها عن 200 مللي ثانية والتي تتميز برعشة عضلية قوية ومفاجئة في الرأس والرقبة والكفوف. صنف الأنواع الفرعية بناء على الهزات المرتبطة أو فقدان الموقف الاتجاهي ، بما في ذلك الأمام أو اليسار أو اليمين.
قم بترميز الحدث عبر إطارات متعددة، حيث تتراوح المدة عادة من ثانية إلى ثانيتين. بالنسبة للنوبات الحوفية ، حدد السلوكيات المتوافقة مع مقياس راسين ، بدءا من التوقف السلوكي أو التحديق. اتبع ذلك بالأتمتة ، وحركات الفم والوجه ، والرمع العضلي الأمامي أو الرأسي ، والتصعيد إلى التربية أو القفز أو نوبات المنشط.
استخدم مقياس راسين المعدل لتعيين فئات فرعية للأحداث التي تستمر لمدة تزيد عن 10 إلى 15 ثانية. أخيرا ، ضع علامة على نهاية جلسة التسجيل على إطار فيديو واحد بعد ساعة واحدة بالضبط من حقن البنتيلينيترازول. يوضح الشكل بالتفصيل المعلمات التي يمكن استخراجها من نظام الترميز هذا ، بما في ذلك زمن الوصول لكل سلوك ictal ، وعدد الأحداث ، ومدة الحدث ، والفاصل الزمني بين الأحداث ، وشدة النوبات الحوفية.
عادة ما تتضمن التشنجات تصلب الجذع في معظم الأحداث ، في حين أن 6٪ فقط من التشنجات تنشط الذيل حصريا. ظهر الرمع العضلي في الغالب على شكل هزات في 64٪ من الحالات. كما لوحظت حركات للأمام واليمين واليسار.
كان زمن الوصول إلى البداية مختلفا بشكل كبير بين التشنجات والرمع العضلي والنوبات الحوفية ، مع حدوث التشنجات في وقت مبكر. كان العدد الإجمالي للتشنجات أعلى بكثير من العدد الإجمالي للتشنجات العضلية أو النوبات الحوفية. لم يختلف متوسط الفاصل الزمني بين الأحداث بشكل كبير بين التشنجات والرمع العضلي ، لكن النوبات الحوفية استمرت لفترة أطول بكثير من الرمع العضلي.
في بروتوكول حقن PTZ اليومي ، انخفض زمن انتقال التشنج والفاصل الزمني بين الأحداث بشكل ملحوظ بحلول اليوم الثامن ، بينما زادت أحداث التشنج الإجمالية.
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية
تقدم هذه الدراسة بروتوكولاً جديداً لتحليل وتصور السلوكيات النوبية المرتبطة بالتشنجات التي يحثها البنتيلين تيترازول في الفئران. تعزز هذه الطريقة النهج التقليدية من خلال توفير فحص تفصيلي لسلوكيات مثل التشنجات والرمع العضلي، مما يسلط الضوء على دورها في بداية وتطور نوبات الصرع الحوفية.
يعتبر التكميم السلوكي للأنماط الظاهرية للنوبات في النماذج قبل السريرية أمراً بالغ الأهمية للتحقق من الأهداف وضمان الاستمرارية الانتقالية في اكتشاف أدوية الصرع. وبالانتقال إلى ما هو أبعد من مقياس Racine، يتيح هذا البروتوكول قياساً تفصيلياً للسلوكيات النوبية مثل التشنجات والرمع العضلي، مما يدعم تقليل المخاطر الميكانيكية وتعزيز الثقة التنبؤية في مراحل الفحص المبكرة. كما أن تحسين دقة التحليل السلوكي يساهم في توجيه عملية فرز المحافظ الدوائية واتخاذ قرارات التقدم المعدلة حسب المخاطر للعلاجات الخاصة بالجهاز العصبي المركزي.
يتكامل هذا البروتوكول ضمن السلسلة الممتدة من مرحلة الاكتشاف إلى المرحلة قبل السريرية من خلال تمكين التحليل السلوكي التفصيلي بعد إعطاء PTZ، مما يدعم مرحلتي التحقق من الهدف وتحديد المركبات الرائدة.