نموذج الفئران لتسلخ الأبهر الصدري الناجم عن التسريب الأنجيوتنسين الثاني β-aminopropionitrile عن طريق الفم وتحت الجلد

تؤسس هذه الدراسة نموذجا للفأر لتسلخ الأبهر الصدري ، TAD ، من خلال تحريض BAPN و Angiotensin II ، مما يوفر إجراء مفصلا يوفر أداة قيمة لاستكشاف التسبب في مرض TAD أو الأساليب العلاجية. توفر تركيبة BAPN-angiotensin II طريقة لإنشاء نماذج TAD للفئران ، والتي تحقق معدل حدوث TAD مرتفعا ، وتكرر خصائص الفيزيولوجيا المرضية التي تشبه تلك التي لوحظت في TAD البشري. في المستقبل ، سيقوم فريق البحث لدينا بدمج الأبحاث السريرية والتأسيسية لتوضيح التسبب في أمراض القلب والأوعية الدموية ، مع إعطاء الأولوية لاكتشاف استراتيجيات علاجية جديدة من خلال الرؤى الميكانيكية والابتكار الانتقالي.

[مقدم] قم بوزن كل فأر وسجل الحد الأقصى لوزن الجسم لحساب كتلة الأنجيوتنسين II المطلوبة للتجربة. استخدم قالب الحساب لتحديد كتلة الأنجيوتنسين II لكل ماوس بناء على الحد الأقصى لوزن الجسم. ثم احسب الكتلة الإجمالية للأنجيوتنسين II المطلوبة لتحضير 130 ميكرولتر من محلول الأنجيوتنسين II لكل فأر. استخدم النموذج المقدم لتحديد حجم تعبئة محلول الأنجيوتنسين II والمحلول الملحي اللازم للتجربة. قم بوزن الكمية المحسوبة من الأنجيوتنسين II في أنبوب دقيق معقم باستخدام ميزان تحليلي. أضف الحجم المحسوب للمحلول الملحي العادي إلى الأنبوب الدقيق. باستخدام خلاط دوامة ، قم بإذابة المسحوق جيدا حتى تختفي جزيئات مرئية. قم بوزن كل مضخة تناضحي، بما في ذلك جسم المضخة ووسيط التدفق، باستخدام ميزان تحليلي. قم بتوصيل أنبوب تعبئة بحقنة معقمة 1 مليلتر مفتوحة حديثا ، واستنشط محلول الأنجيوتنسين II المحضر بعناية. أمسك أنبوب التعبئة في وضع تصاعدي وقم بإزالة أي فقاعات هواء من المحقنة. أدخل طرف أنبوب التعبئة برفق في الفتحة العلوية للمضخة التناضحية حتى لا يمكن إدخال الأنبوب أكثر من ذلك. أمسك المضخة في وضع مستقيم واضغط ببطء على مكبس المحقنة حتى يظهر محلول الأنجيوتنسين II عند المخرج. ثم توقف وقم بإزالة أنبوب التعبئة بعناية. بعد ذلك ، أدخل وسيط التدفق في فتحة المضخة بعناية وببطء حتى لا تبقى فجوة بين الوسيط والجزء العلوي من المضخة. قم بوزن المضخة المحملة باستخدام الميزان التحليلي ، وسجل القيمة. ضع المضخات المملوءة في محلول ملحي معقم عند 37 درجة مئوية ، بحيث يكون رأس الوسيط متجها لأعلى ، لمدة ست ساعات على الأقل قبل الزرع. ضع الماوس في وضع الانبطاح على سطح الجراحة. استخدم مشرطا لعمل شق عرضي بطول 1 سم في الجلد بعناية. استخدم زوجا واحدا من الملقط المنحني لفهم الهامش القاطع وزوجا آخر من الملقط لتشريح الأنسجة تحت الجلد بصراحة ، مما يخلق جيبا للمضخة التناضحية. أدخل المضخة المملوءة في الجيب بحيث يشير رأس وسيط التدفق إلى الطرف الذيلي للماوس. قم بمحاذاة الهوامش القاطعة بدقة وأغلق الجلد باستخدام 6-0 خيوط غير قابلة للامتصاص. يوضح هذا الشكل حدوث تسلخ الأبهر وتمزقه في جميع المجموعات التجريبية. حدث تسلخ الأبهر في 100٪ من الفئران في مجموعة BAPN بالإضافة إلى الأنجيوتنسين II ، مع 35٪ من تمزق ، متجاوزا 55٪ أو 60٪ الإصابة التي لوحظت في مجموعة BAPN أو BAPN بالإضافة إلى المحلول الملحي ، بينما لم يحدث تشريح أو تمزق في الضوابط. أظهر مورفولوجيا الأبهر الإجمالي تشوها تدريجيا في مجموعات BAPN و BAPN بالإضافة إلى المحلول الملحي و BAPN بالإضافة إلى الأنجيوتنسين II مقارنة بالشريان الأورطي في الضوابط كان الحد الأقصى لأقطار الأبهر الصدري أكبر بشكل ملحوظ في جميع المجموعات المعالجة ب BAPN مقارنة بالضوابط ، مع عدم وجود فروق ذات دلالة إحصائية بين المجموعات المعالجة. كشف تلطيخ الهيماتوكسيلين والإيوسين عن جدران أبهرية رقيقة وموحدة في الضوابط ، بينما أظهرت جميع المجموعات المعالجة ب BAPN سماكة وتسلل التهابي. أظهر تلطيخ إيلاستين فان جيسون أليافا مرنة سليمة في عناصر التحكم وتجزئة الألياف التدريجية مع تكوين تجويف زائف في جميع المجموعات المعالجة ب BAPN.