Name: لا خيار للاختيار و- فحوصات لاختبار مقاومة للحشرات thaliana ألف مضغ (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2008-05-14T16:15:00.000+00:00
Duration: 8 min 24 s
Description: تعلم إعداد تجارب الاختيار وعدم الاختيار لتقييم مقاومة نبات Arabidopsis thaliana ضد آفة Pieris rapae. يوضح هذا البروتوكول دور حمض الجاسمونيك والغلوكوزينولات في آليات الدفاع النباتي.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

لا خيار التجربة : <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> أرفق بعناية النباتات Arabidopsis الفائدة في كوب من البلاستيك. في هذه الحالة : العقيد - 0 (WT) ، ومتحولة ضعف في إنتاج JA. تأكد من الحد من الأضرار التي لحقت الأوراق. لذلك يمكنني استخدام الجزء الخلفي من هذا الرسام. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام الفرشاة الجميلة لاتخاذ اليرقات الطازجة من مستعمرة على الملفوف. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعناية وضع اليرقة على النباتات Arabidopsis. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> اليرقة الوزن في يوم 4 و 7 و 10. TIP : تنمو النباتات الخاصة بك تحت ظروف النهار القصير (8 ساعة ضوء) لزيادة النمو الخضري (1 يرقة يمكن الوفاء دورة الحياة الكاملة في 1 النبات). </li></ol> اختيار التجربة : <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ويتم اختيار اثنين من النباتات ، واحدة من كل الوراثي. الأفضل هو أن تنمو النباتات في وعاء نفسه ، للحد من عوامل أخرى ، مثل آثار صينية ، الخ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع النباتات في قفص فراشة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حدد الأنثى الخصبة. أمسكت عادة الأنثى التي يتم وضع البيض بنشاط في مستعمرة تربية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الافراج عن الإناث في قفص مع اختيار اثنين من النباتات لمدة 24 ساعة. </li></ol> نصيحة 1 : القضاء له تأثير التعلم ، لا إعادة استخدام الإناث للاختبارات اختيار لاحقة. نصيحة 2 : يمكن للمرء أن يقارن فقط النباتات التي تحتوي على النمط الظاهري نمو مماثلة. بدلا من ذلك ، هل يمكن تحميل كل ورقة من النمط الجيني على رأس دورق مخروطي وقارن بين قدرتها على جذب الإناث. يرجى زيارة <a href="http://arjournals.annualreviews.org/doi/abs/10.1146/annurev.arplant.59.032607.092825">المراجعات السنوية للبيولوجيا النبات</a> للحصول على مزيد من المعلومات حول هذه الحصانة ومصنع لبروتوكول الحشرات بالأعشاب.

لا خيار للاختيار و- فحوصات لاختبار مقاومة للحشرات thaliana ألف مضغ

Choice and No-Choice Assays for Testing the Resistance of A. thaliana to Chewing Insects

يرقات فراشة الكرنب البيضاء الصغيرة هي آفة في البيئات الزراعية. هذا النوع من كاتربيلر يغذي النباتات في عائلة الملفوف ، والتي تشمل العديد من المحاصيل مثل الكرنب والقرنبيط ، وبراعم بروكسل تربية الخ من الحشرات يحدث على النباتات الملفوف في الاحتباس الحراري. وهناك حاجة إلى اثنين على الأقل من أقفاص لتربية rapae Pieris. واحد لليرقات وأخرى لاحتواء الكبار ، والفراشات. من أجل التحقيق في دور الهرمونات النباتية والمواد الكيميائية السامة في مصنع لمقاومة هذه الآفة الحشرية ونظهر تجربتين. الأول ، تحديد دور حمض jasmonic (JA -- وهو هرمون نباتي وأشار في كثير من الأحيان مقاومة للحشرات) في مقاومة الحشرات rapae Pieris المضغ. ويمكن مقارنة نمو اليرقة على النباتات البرية من نوع ومتحولة ضعف في إنتاج JA. وتعتبر هذه التجربة &quot;لا خيار&quot; ، وذلك لأن يرقات يضطرون إلى العيش على مصنع واحد والذي يجمع أو نقص في JA. ثانيا ، علينا أن نظهر أن تحقق تجربة دور glucosinolates ، والتي تستخدم على النحو oviposition (وضع البيض) الاشارات. هنا ، فإننا نستخدم Arabidopsis WT ومتحولة ضعف في الإنتاج glucosinolate في تجربة &quot;الاختيار&quot; الذي يسمح للإناث الفراشات في اختيار لتضع بيضها على النباتات إما التركيب الوراثي. هذا الفيديو يوضح الإعداد تجريبية لكلا المقايسات فضلا عن نتائج تمثيلية.

ويمكن اختبار مقاومة النباتات للمضغ الحشرات العاشبة في عدة طرق. هنا ، ونحن لشرح كيفية انشاء اختيار وتجربة لا للخيار مع نموذج Arabidopsis thaliana مصنع لتحديد المقاومة ضد الأنواع rapae Pieris الآفات.

تُعد يرقات فراشة الكرنب الصغيرة آفة في البيئات الزراعية. وتتغذى هذه الأنواع من اليرقات على النباتات التي تنتمي إلى الفصيلة الكرنبية، والتي...

تعتبر يرقات فراشة الكرنب البيضاء الصغيرة من الآفات في البيئات الزراعية. تتغذى هذه النوعية من اليرقات على النباتات التي تنتمي إلى الفصيلة الكرنبية، والتي تشمل العديد من المحاصيل مثل الكرنب والبروكلي وكرنب بروكسل وغيرها الكثير. ومن المثير للاهتمام أن النباتات يمكن أن تطور مقاومة ضد القوى العشبية، مثل bedo tappe، وسنقوم في هذا الفيديو باختبار مقاومة النوع النباتي النموذجي rabbit opposite Ana تجاه هذه الحشرة المنسجة باستخدام طريقتين.أهلاً بكم، أنا مارتن نافوس، زميل ما بعد الدكتوراه في مختبر جورج جاندر بمعهد بو تومسون للأبحاث المخططة. أود اليوم أن أعرض لكم كيفية إعداد تجربة الاختيار وتجربة عدم الاختيار باستخدام نبات *Arabidopsis thaliana* كنبات نموذجي، وذلك لبحث المقاومة ضد الآفات المغذية.تتم تربية اليرقات على نباتات الكرنب في الدفيئة الزراعية. يلزم توفير قفصين على الأقل لتربية نوع Peter؛ يُخصص أحدهما لليرقات، بينما يحتوي الآخر على الحشرات البالغة من الفراشات، وذلك لتوضيح دور الهرمونات النباتية والمواد الكيميائية النباتية السامة.فيما يتعلق باختبار مقاومة هذه الحشرة، أود استعراض تجربتين؛ تتناول الأولى تحديد دور حمض jasmonic، وهو هرمون نباتي غالباً ما يرتبط بالمقاومة ضد الحشرات.في تجربة عدم الاختيار، يمكن مقارنة نمو اليرقات على النباتات من النوع البري والنباتات الطافرة التي تعاني من خلل في إنتاج حمض mon فقط. وتتمثل الفرضية في أن اليرقات تكتسب وزناً أكبر على النبات الطافر. لذا، دعونا نبدأ بالتجربة الأولى.سنقوم بإجراء تجربة "عدم الاختيار" (no choice experiment) باستخدام نباتات *Revit opsis elliana* لقياس زيادة وزن يرقات *purest rapha*. لذا، فإن أول ما يتعين علينا فعله هو إحاطة هذه النباتات بعناية؛ وفي ذلك، نستخدم أحد هذه الأكواب بعد قص قاعدته البلاستيكية.لذا، ومن أجل الإغلاق، سأستخدم الطرف الخلفي لفرشاة الرسم الدقيقة هذه. وبدون إتلاف الأوراق، سنقوم بإغلاق هذه النباتات. وبذلك، لدينا تجربة "بدون خيار" هنا بين نباتات rabbit opss، والنوع البري، والنبات الطافر.الطفرة هي طفرة تعاني من خلل في حمض الجاسمونيك، ومن المرجح أن تكون أكثر عرضة للتغذية. هذه تجربة بدون خيار لأن اليرقة الواحدة لا يمكنها الاختيار إلا من نمط جيني واحد من النباتات. لذا، سنقوم بإضافة يرقة واحدة إلى كل كوب.من المهم البدء بيرقات فقست للتو. وتُسمى هذه اليرقات يرقات L1. وإليكم هنا يرقة واحدة فقست للتو.حسناً، سأقوم الآن بوضع هذه اليرقة بعناية على الشريط الاختباري. الخطوة التالية هي حبس هذه النباتات مع يرقة واحدة، وأستخدم شبكة دقيقة وشريطاً زيتياً لإغلاقها بإحكام حتى لا تخرج زحفاً. بعد ذلك ننتظر بضعة أيام، عادة سبعة أيام، قبل قياس مقدار زيادة وزن اليرقة.لذا، بعد سبعة أيام من التغذية، نخرج اليرقات ونزنها باستخدام هذا الميزان، ونستخدم الملاقط المرنة لالتقاط اليرقات بعناية وتسجيل وزنها. يزن هذا الفرد تقريباً 250 milligrams. سأقوم بمقارنة وزن هذه اليرقة التي كانت على النبات الطافر مع وزن اليرقة التي كانت على النبات البري.كما تلاحظون على الفور، هناك كمية أكبر بكثير من الأنسجة النباتية المتبقية في النبات من النوع البري. لذا نفترض أن اليرقة قد اكتسبت وزناً أقل؛ إذ تزن اليرقة الموجودة على النبات من النوع البري حوالي 100 milligrams فقط.لذا، هناك فرق شاسع في كل من كمية الأنسجة التي تم استهلاكها وفي زيادة وزن اليرقات. وبذلك نكون قد انتهينا من تجربة "عدم الاختيار". لننتقل الآن إلى تجربة "الاختيار"، هل نبدأ؟تتعرف الآفات المتخصصة وتنجذب إلى إشارات المضيف التي تكون سامة للقوى العامة. وفي حالة pi، تُستخدم الجلوكوزينولات السريعة كإشارة موضعية فائقة. سأستخدم هنا النوع البري وطفرات rabbit opsis المعطلة في إنتاج الجلوكوزينولات.لإجراء تجربة الاختيار، يجب أن يكون الباحث قادراً على التمييز بين الفراشات الذكور والإناث قبل البدء في هذه التجربة. إليكم مثالاً، تمتلك إناث فراشات bureaus rapid نقطتين على كل جناح، بينما يحمل الذكور نقطة واحدة فقط، وأحياناً يمكن الخلط بين الذكور والإناث إذا كان الذكر يمتلك علامة ثانية تكون غالباً باهتة. لذا، دعونا نبدأ في إعداد تجربة الاختيار.في هذه الحالة، لدينا نبات من النوع البري ونبات طافر. يعاني النبات الطافر من خلل في إنتاج الجلوكوزينولات. ومرة أخرى، تعتبر الجلوكوزينولات سامة للآفات العامة، ولكن المتخصصات مثل هذه الحشرة التي نعمل معها تنجذب إلى الجلوكوزينولات.هذه هي المراحل اليرقية الخمس لـ penis ape، بدءاً من المرحلة اليرقية الأولى L1 وهي الأصغر حجماً، حيث تزداد اليرقة وزناً حتى تصل إلى المرحلة اليرقية الخامسة. بعد ذلك، تتحول إلى خادرة وتتم عملية التحول الكامل، وتؤدي هذه اليرقات في النهاية إلى فراشات بالغة. بالنسبة لتجربة الاختيار هذه، سنستخدم هذا القفص الذي وضعت فيه كل من النبات البري والنبات الطافر، وسأضيف الآن فراشة أنثى واحدة إليه.لتقييم الـ acai، أقوم عادةً بصيد الإناث الخصبة. وللتأكد من خصوبتها، أصطاد الإناث التي تضع البيض بنشاط، حيث أضع يدي بحذر حول الفراشة وأنقلها إلى قفص الاختبار. نترك الفراشة لمدة 24 ساعة، ثم نقوم بحساب عدد البيض الموضوع على كل نمط جيني من هذه الأنماط.لذا، هناك بعض النصائح المفيدة عند إجراء هذا النوع من التجارب؛ أولاً، عند اختيار فراشة أنثى، لا تستخدمها في تجارب لاحقة لأن ذلك قد يؤدي إلى حدوث تأثير ناتج عن التعلم. ثانياً، يمكن فقط مقارنة النباتات التي تمتلك أنماطاً ظاهرية نموية متشابهة. لذا، إذا كانت لديك نباتات لا تمتلك نمطاً ظاهرياً نموياً متشابهاً، يمكنك أخذ أوراق ذات أحجام متماثلة وتثبيتها فوق دورق LMI.لذا، بعد مرور 24 ساعة، يمكننا إخراج النباتات أولاً. النبات من النوع البري، كما ترون، يحتوي على الكثير من البيض، أما النبات الطافر، وهو الطافر الذي يفتقر إلى الجلوكوزينولات، فإنه يفتقر إلى المحفز الكيميائي أو التجاذب الجاذب.كما تلاحظون، لا يوجد تقريباً أي بيض أو يوجد عدد قليل جداً، على الأقل في النبات الطافر. بينما يوجد الكثير من البيض على نبات النوع البري. لقد أوضحت لكم للتو كيفية إعداد التجارب لتحديد مدى المقاومة ضد الحشرات.كانت التجربة الأولى تجربة خيار واحد، حيث قارنا زيادة وزن اليرقات على النباتات الطافرة مقابل النباتات البرية. أما التجربة الثانية، فكانت تجربة خيار.لقد قارنا acla بواسطة فراشة أنثى على نبات طافر مقابل نبات من النوع البري. شكراً جزيلاً. هذا كل شيء.آمل أن يكون مفيداً في تجاربكم.

choice-no-choice-assays-for-testing-resistance-thaliana-to-chewing

Research

JoVE Journal

Biology

علم الأحياء

ويتجلى هذا في الفيديو ومقايسة ان الاختبارات على التسامح من النيكوتين إلى نوعين من المن الذي infests نباتات التبغ في مجال واحد والتي لا.

اختبار تسامح النيكوتين في المن باستخدام تجربة حمية الاصطناعي

هذا الفيديو يشرح آليات مقاومة النبات المضيف على الحيوانات العاشبة ويوضح اختبار لا للخيار أن تقديرات الإسهامات النسبية للتضاد والتسامح إلى المقاومة في...

توصيف آليات المقاومة آكل النبات : Spittlebugs على Brachiaria النيابة. كمثال

يصف هذا الفيديو مقايسة تفضيل التذوق ، وهي طريقة سلوكية تستخدم لقياس الانجذاب أو التجنب تجاه المحاليل الملونة التي يكون مذاقها مختلفا من خلال تقييم لون بطن الذبابة بعد تناول المادة المفضلة. يوضح البروتوكول المميز الإجراء المستخدم لقياس تفضيل الذباب تجاه المحاليل ذات تركيزات السكروز المتفاوتة.

فحص تفضيل الذوق: طريقة لقياس سلوك التغذية في ذبابة الفاكهة

ووصف العمودي، T-متاهة olfactometer لمعايرة الاستجابة السلوكية للالمفصليات. وolfactometer يسمح للمجرب لقياس الخيارات التي يؤديها اختبار المواضيع عندما تتعرض لحقلين رائحة المحتملة. ويمكن قياس كل من الجذب والتنافر لمن odorants مع هذا الجهاز.

الفحص العمودي اختيار T-متاهة للاستجابة لالمفصلي Odorants

الذوق هو عملية حسية مهمة تسهل الانجذاب إلى المواد المفيدة وتجنب المواد السامة.  يصف هذا البروتوكول مقايسة ابتلاع بسيطة لتحديد ذبابة الفاكهة التفضيل الذوقي لمركب كيميائي معين.

طعم الفحص تفضيل الكبار<em&gt; ذبابة الفاكهة</em

هنا، نقدم كاينورهابديتيس ايليجانس مقايسة محددة تهدف إلى تقييم التغيرات في السلوك النفور النحاس والقدرة على تحديد مصدر الغذاء المشترك، كما تقدم الكائن الحي من تغذية جيدة إلى حالة غذائية جوعا.

ا<em&gt; كاينورهابديتيس ايليجانس</em&gt; الوضع الغذائي القائم على النحاس النفور الفحص

نقدم إعداد تسجيل السلوك والبروتوكول الذي يتيح التحليل الآلي من الديدان الخيطية، تفضيل كاينورهابديتيس ايليجانس "للمركبات القابلة للذوبان في مقايسة سكانية. توضح هذه المقالة بناء غرفة السلوك، بروتوكول الفحص السلوكي، واستخدام برامج تحليل الفيديو.

التحليل الآلي من النيماتودا القائم على السكان الحسية الكيميائية تفضيل التفضيل

نقدم هنا، بروتوكولا للتحقيق في تفضيل بوبيشن اليرقات الناضجة من جريسيسسينس اكتروبيس استجابة لعوامل التربة (مثلاً، الركيزة والرطوبة ونوع المحتوى) باستخدام خيار المقايسة. نقدم أيضا على بروتوكول للمقايسة لا خيار لتحديد العوامل التي تؤثر في سلوك بوباتيون وحالة البقاء على الحياة من...

الاختيار والمقايسة لا خيار لدراسة الأفضلية بوبيشن وظهور نجاح جريسيسسينس اكتروبيس

الطريقة المعروضة يخلق الأنسجة النباتية التالفة الأعشاب الطبيعية من خلال تطبيق يرقات Manduca sexta على أوراق منفصلة من البطاطا. يتم فحص الأنسجة النباتية للتعبير عن ستة متجانسات عامل النسخ المشاركة في الاستجابات المبكرة لعشب الحشرات.

اختبار أوراق منفصلة لتبسيط دراسات التعبير الجيني في البطاطا أثناء الإصابة عن طريق مضغ الحشرات مندوكا sexta

نقدم بروتوكولاً لـ فحص تغذية خيارين للذباب هذا الخضوع للتغذية سريع وسهل التشغيل، وهو مناسب ليس فقط للبحوث المختبرية الصغيرة النطاق، ولكن أيضا للشاشات السلوكية عالية الإنتاجية في الذباب.

A سريع الغذاء تفضيل المقايسة في دروسوفيليا

يصف هذا البروتوكول مقايسة التغذية الملزمة لتقييم التأثير السام المحتمل للمادة الكيميائية النباتية على يرقات الحشرات حرشفية الأجنحة. هذا اختبار حيوي للحشرات قابل للتطوير بدرجة كبيرة ، وسهل لتحسين الجرعة شبه المميتة والمميتة ، والنشاط الرادع ، والتأثير الفسيولوجي. يمكن استخدام هذا لفحص المبيدات الحشرية الصديقة للبيئة.

تطوير نظام فحص التغذية لتقييم تأثير المبيدات الحشرية للمواد الكيميائية النباتية على Helicoverpa armigera

تعلم إعداد تجارب الاختيار وعدم الاختيار لتقييم مقاومة نبات Arabidopsis thaliana ضد آفة Pieris rapae. يوضح هذا البروتوكول دور حمض الجاسمونيك والغلوكوزينولات في آليات الدفاع النباتي.

لا خيار للاختيار و- فحوصات لاختبار مقاومة للحشرات thaliana ألف مضغ

استكشف المزيد من الفيديوهات