تصور الأشعة السينية للتسريب الاستئصالي القائم على الإيثانول داخل القناة للوقاية من سرطان الثدي في نماذج الأرانب

سرطان الثدي هو السبب الرئيسي الثاني للوفاة المرتبط بالسرطان. في حين أن هناك عددا قليلا من التدخلات الاستباقية للنساء المعرضات لخطر متوسط ، فإن استئصال الثدي الوقائي والعلاج الهرموني هما خيارات متاحة للنساء المعرضات لمخاطر عالية. ومع ذلك, بسبب الآثار الجانبية السلبية الشديدة لهذه الخيارات الوقائية, العديد من النساء المعرضات لمخاطر عالية تختار عدم اتخاذ لها.

لذلك ، هناك حاجة إلى استراتيجية جديدة للوقاية من الأفراد المعرضين لمخاطر عالية. لقد طورنا تقنية التوصيل داخل القناة لاستئصال الخلايا الظهارية للذاكرة التي ينشأ منها سرطان الثدي كبديل موضعي أقل توغلا لاستئصال الثدي. أظهرت دراستنا السابقة فعالية التسريب الفردي في القناة بنسبة 70٪ من الإيثانول لمنع تكوين سرطان الثدي في نموذج فأر عدواني.

تمكنا من توسيع نطاق هذا الإجراء إلى نموذج الفئران والتأكد من نجاح التسريب. على الرغم من أننا أظهرنا الحشو والتصوير بالأشعة السينية في الجسم الحي لشجرة القنوات في كل من نماذج الفئران والفئران ، إلا أن هذه النماذج تحتوي فقط على شجرة قنوية واحدة لكل غدة ثديية. لذلك ، في هذا الإجراء ، سنتناول قابلية توسع هذه التقنية في نموذج أرنب مع نظام شجرة متعدد القنوات.

توفر الأرانب نموذجا عمليا وذو صلة للحيوانات الكبيرة الوسيطة للتطبيق الانتقالي لهذا الإجراء الاستئصالي للمعرف على البشر. باختصار ، بدأنا بإعداد للإجراء عن طريق إزالة الفراء المحيط بالحلمات المراد حقنها ، ثم يتم إجراء الحقن داخل القناة ، وبعد كل تسريب ، يتم التقاط صورة التنظير الفلوري بالأشعة السينية لضمان ملء شجرة القنوية. أخيرا ، يتم إجراء تحليل الأنسجة لتحديد معدل نجاح المحلول الاستئصالي.

قم بتخدير الأرنب قبل 20 دقيقة من إعطاء الأيزوفلوران عن طريق حقن التخدير العضلي. استخدمنا الكيتامين والزيلازين. حقن تسكين الألم بعد ظهور العلامات السريرية للتخدير.

استخدمنا الكيتوبروفين. ضع الأرنب على طاولة التصوير المبطنة ببطانية ماء دافئ معاد تدويرها وقم بتنبيب الأرنب باستخدام أنبوب التنبيب بالحجم المناسب الذي يتم توصيله بعد ذلك بجهاز الأيزوفلوران. يعتمد حجم الأنبوب على وزن الأرنب ، لكنه ليس دقيقا دائما ، لذلك من الممارسات الجيدة أن يكون لديك أحجام متعددة في متناول اليد.

يمكن استخدام قناع بدلا من أنبوب التنبيب إذا لم يتمكن من الحصول على ختم مناسب. أدخل قسطرة وريدية قياس 25 في أذن الأرنب للسماح بإعطاء الدواء في حالات الطوارئ. بمجرد تخدير الأرنب بالكامل ، احلق البطن الذيلية حول الزوجين الثاني والثالث من الحلمات.

يمكن أن تساعد المكنسة الكهربائية اللاسلكية في الحفاظ على موقع التسريب النظيف. بمجرد إزالة معظم الشعر ، ضعي كريم إزالة الشعر حول منطقة الحلمة وأزيليه بشاش مبلل بعد 15 ثانية من التطبيق. تأكد من الرؤية الجيدة والوصول إلى منطقة الحلمة وكرر ذلك إذا لزم الأمر.

امسح المنطقة بضمادات شاش الكلورهيكسيدين لتنظيف موقع الحقن قبل القنية. يمكن أن يكون للأرانب سدادة بارزة من فتحة القناة يمكن أن تمنع القنية الناجحة للحلمة إذا لم تتم إزالتها. قم بإزالة طبقة الجلد برفق فوق فتحات القنوات باستخدام ملقط مدبب بدقة.

أدخل إبرة قياس 28 ، بحيث يكون الجانب المشطوف لأعلى ، في جانب الحلمة وقم بنقع 0.2 مل من محلول ملحي معقم بنسبة 0.9٪. قد يخرج بعض المحلول الملحي من فتحات القنوات. سيسمح ذلك بتصور أفضل لفتحات القنوات أثناء القنية.

قم بإعداد خط التمديد مقاس 12 بوصة للقنية باستخدام تقنية التعقيم. نظف سطح المقعد بالإيثانول وارتدي قفازات معقمة بعناية. قم بإزالة الأغطية الواقية على طرفي خط التمديد.

استنشق مليلترا واحدا من محلول الاستئصال المحضر باستخدام حقنة Luer-Lok سعة ملليلتر واحد. قم بتوصيل المحقنة بعناية بالطرف الأنثوي المجنح ، ثم قم بتوصيل إبرة حادة قياس 27 بعناية بالطرف الآخر. ادفع المحلول ببطء عبر الخط حتى يخرج تيار ثابت من المحلول من الإبرة.

احرص على عدم قلب المحقنة ، لأن ذلك سيؤدي إلى تكوين فقاعات هواء. أمسك الحلمة برفق بإصبع الإبهام والسبابة وارفعها قليلا للتسريب داخل القنوة. قم بتدوير القناة ذات الأهمية بعناية باستخدام إبرة ذات طرف حاد قياس 27.

يمكن أن يساعد المصباح المكبر 10X في تصور فتحات القنوات. قم بنقع المحلول ببطء لتقليل الضرر المحتمل الناجم عن السوائل سريعة الحركة داخل القناة. عادة ، هناك باحث واحد يقوم بتقنية الإبرة وإمساكها بينما يمسك باحث ثان بالمحقنة ويدفع المكبس بالمعدل المطلوب.

Omnipaque هو عامل تباين قائم على اليود معتمد من إدارة الغذاء والدواء الأمريكية (FDA) يسمح لنا برؤية شجرة الأقنية تحت تصوير التنظير الفلوري بالأشعة السينية. يتيح لنا ذلك رؤية شجرة قنية مملوءة بمحلول استئصال في الوقت الفعلي وإيقاف التوصيل عندما يصل المحلول إلى نهايات شجرة القناة. يوفر التصوير بالتنظير الفلوري أيضا تأكيدا سريعا وسهلا للملء الناجح لشجرة الأقنية بأكملها بعد التسريب مباشرة.

في هذه الجلسة الحية للتسريب في القناة الثالثة ، يمكنك أن ترى أن القنوات 1 و 2 قد تم غرسها بالفعل. دليل هذا التصوير الحي لزيادة ملء شجرة الأقنية إلى أقصى حد. بمجرد اكتمال الإجراء ، ابدأ في استعادة الأرنب عن طريق إعطاء عامل انعكاس في العضل.

في حالتنا ، استخدمنا أتيباميزول. تشمل علامات الشفاء المضغ وارتعاش الأنف. تأكد من أن الأرنب يمكنه تثبيت نفسه في وضع مستقيم قبل السماح له بالتعافي من تلقاء نفسه.

قم بإعطاء الكيتوبروفين تحت الجلد لمدة ثلاثة أيام على الأقل بعد العملية للمساعدة في تقليل الالتهاب وتقليل التندب. صبغة الهيماتوكسيلين والإيوزين ، أو المعروفة أكثر باسم صبغة H & E ، هي البقعة الأكثر استخداما في علم الأنسجة. بهذا ، يمكننا رؤية فتحات الأقنية الأربعة ومسارات الأقنية داخل الغدة الثديية.

في تجاربنا ، اختبرنا مجموعة من المحاليل بتركيز 10 إلى 70٪ من الإيثانول. بناء على هذا النطاق من التركيزات ، يمكننا أن نلاحظ أن محلول الاستئصال الذي يحتوي على أقل من 10٪ من الإيثانول لا يزال بإمكانه استئصال شجرة القنية بكفاءة مقارنة بنسبة أعلى من الإيثانول. تشير هذه النتائج إلى أنه يجب إعطاء الأولوية لهذا المحلول الاستئصالي منخفض 10٪ من الإيثانول لمزيد من الدراسة.

نصف إجراء التسريب الموجه بالصور في نظام شجرة الأقنية للغدة الثديية للأرانب. نوضح التسريب المتحكم فيه لعامل تباين الأشعة السينية الذي يحتوي على محلول استئصال قائم على الإيثانول في جميع فتحات الحلمة عن طريق التصوير في الوقت الفعلي للتنظير الفلوري ونؤكد معدل استئصال الخلايا الظهارية وتلف الأنسجة عن طريق التحليل النسيجي. يوفر هذا الإجراء خطوة نحو قابلية التوسع لطريقة أقل توغلا للوقاية الأولية من سرطان الثدي كبديل لاستئصال الثدي الوقائي.

يستخدم هذا البروتوكول أدوات وكواشف ومواد للتسريب الموجه بالتنظير الفلوري لمحلول استئصال قائم على الإيثانول المحتوي على Omnipaque ومتوافق مع الممارسة السريرية الحالية لتصور أشجار الأقنوية. وبالتالي ، يمكن تنفيذ الإجراء الموصوف وتقييمه بسهولة في التجارب السريرية الأولى على الإنسان.