اختبار تفضيل حاسة الشم لقياس التحيزات الشمية المتعة في نماذج الفئران للاكتئاب

التحيز السلبي في المعالجة العاطفية هو سمة رئيسية لاضطرابات الاكتئاب. هذا التحيز مثير للاهتمام بشكل خاص لفهم علم الأمراض الفسيولوجية للمرض بشكل أفضل. نقترح هنا بروتوكولا للتقييم الموثوق به لتقييم الرائحة الفطرية باستخدام الروائح المرتبطة بالتكافؤ المختلف في كل من نماذج الفئران من الذكور والإناث للاكتئاب.

يعد تقييم التحيز المتعة في نماذج الفئران أمرا ضروريا ، سواء لتقييم النمط الظاهري الشبيه بالاكتئاب المستحث بشكل أفضل ، وأيضا كأداة للتحقيق في الآليات العصبية وراء هذه التغييرات في تعيين التكافؤ. بشكل عام ، يوفر هذا البروتوكول طرقا جديدة للبحث الانتقالي لفهم الآلية الكامنة وراء الاكتئاب وفعالية العلاج. في المستقبل ، سنحاول فك تشفير دوائر الدماغ وراء هذه المعالجة العاطفية المعطلة والآليات المحتملة الخاصة بالجنس ، جنبا إلى جنب مع عمل مضادات الاكتئاب على هذه المسارات.

للبدء ، قم بإعداد الإعداد التجريبي باستخدام ساحة من جزأين بقياس 45 سم × 50 سم × 25 سم مع جدران زجاجية رمادية وأرضية بيضاء. قسم الساحة إلى مقصورتين متساويتين بطول 25 سم × 45 سم ، باستخدام جدار زجاجي رمادي بقياس 37 سم × 25 سم. قم بتأمين طبق بتري المثقوب بمادة لاصقة وضعه في الجزء السفلي من الجدار في كل حجرة.

ثم استخدم مادة لاصقة على الوجهين أو Blu Tack لتثبيت كل طبق بتري عموديا على جدار الساحة. بعد ذلك ، ضع كاميرا على ارتفاع مترين فوق الساحة لتسجيل سلوك وتمكين التتبع التلقائي لتحركاتها طوال التجربة. الآن قسم الفئران إلى مجموعتين تجريبيتين على الأقل ، الفئران الضابطة وفئران مجموعة الاختبار.

انقل كل فأر إلى غرفة الاختبار السلوكي قبل 30 دقيقة من بدء التجربة. باستخدام مقياس لوكس ، اضبط الإضاءة في الساحة على حوالي 40 لوكس وتحقق من توزيع الإضاءة بالتساوي. بعد ذلك ، أضف ورق ترشيح نظيف بقياس 42.5 ملم في كل من طبقي بتري في الساحة.

في اليوم الأول ، ضع جميع الفئران برفق من نفس القفص السكني معا في الساحة لمدة 10 دقائق لتقليل رهاب الحديث. في يوم الاختبار ، قم بإعداد الرائحة في قارورة زجاجية تحت غطاء كيميائي ، باستخدام التخفيف الصحيح. خفف الرائحة في الزيت المعدني أو الماء المقطر حسب خصائصه الكيميائية.

قبل اختبار كل فأرة مباشرة، استخدم ماصة صغيرة الحجم بطرف مرشح لتجميع 200 ميكرولتر من محلول الرائحة أسفل الغطاء. قم بتوزيع المحلول على ورق الترشيح في أحد أطباق بتري. اترك ورق الترشيح الثاني في طبق بتري الآخر دون معالجة.

انقل أطباق بتري إلى غرفة الاختبار. ثم قم بتثبيتها عموديا على جدار الساحة. ضع كل ماوس على حدة في الساحة في المركز بين المقصورتين.

سجل السلوك لمدة 10 دقائق باستخدام الكاميرا العلوية. قم بإزالة الماوس من الساحة بعد انتهاء فترة المراقبة. قم بإزالة طبق بتري الرائحة من الساحة.

ثم نظف الساحة باستخدام محلول مطهر من الإيثانول بنسبة 70٪ وجففها جيدا. تخلص من ورق الترشيح المستخدم وقم بإعداد عينة الرائحة التالية للماوس التالي. استخدم برنامج تتبع تلقائي لتسجيل موضع الماوس طوال الاختبار.

حدد مناطق متميزة داخل الساحة للتحليل. أثناء التعود ، أمضت جميع الفئران 50 ثانية على الأقل في كل من منطقتي الرائحة والتحكم ، مما يشير إلى مشاركة كافية في المهمة. الأهم من ذلك ، أن الفئران التي تعرضت ل UCMS أمضت نفس الوقت في منطقة الرائحة أكثر من الضوابط.

على الرغم من أنه يمكن ملاحظة بعض الاختلاف في مناطق أخرى. تحركت إناث الفئران الضابطة أكثر بكثير من إناث UCMS عند تعرضها لبول الذكور ، ولكن ليس أثناء التعود أو التعرض ل TMT. تظهر جميع قراءات استجابة المتعة اختلافات كبيرة أو ميلا إحصائيا بين الإناث الضابطات و UCMS.

يظهر هذا التأثير أيضا من خلال مؤشر استكشاف الروائح العالمي ، وهو مقياس مشترك للاستجابة المتعة والحركية. يرتبط مؤشر استكشاف الرائحة ارتباطا إيجابيا بدرجة العاطفة لكل من بول الذكور و TMT في إناث الفئران. في ذكور الفئران ، لم يلاحظ أي اختلافات أثناء التعود أو في المسافة الإجمالية التي تم نقلها خلال الاختبار.

يظهر الوقت الذي يقضيه في منطقة الرائحة انخفاضا كبيرا في استكشاف بول الإناث وTMT في UCMS مقارنة بالضوابط. تدخل فئران UCMS بشكل أقل بكثير في منطقة الرائحة ، أو تميل إلى ذلك ، وتقدم مؤشر تفضيل منخفضا بشكل كبير لكل من بول الإناث و TMT. يظهر مؤشر استكشاف الرائحة استجابة سلوكية متغيرة سلبا لبول الإناث و TMT لفئران UCMS مقارنة بالضوابط ، والتي تميل إلى أن ترتبط بشكل إيجابي بدرجة عاطفة.