Name: تقنية الحقن تحت الشبكية عبر الصلبة طفيفة التوغل في الفأر (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-07-25T13:10:00.000+00:00
Duration: 6 min 46 s
Description: تعلم تقنية الحقن تحت الشبكية عبر الصلبة في الفأر لدراسة أمراض الشبكية الوراثية. تُحسّن هذه الطريقة معدلات النجاح الجراحي وتقلل الضرر النسيجي.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Trapani, I., Banfi, S., Simonelli, F., Surace, E. M., Auricchio, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gene+therapy+of+inherited+retinal+degenerations%3A+prospects+and+challenges%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">Gene therapy of inherited retinal degenerations: prospects and challenges.</a> Hum Gene Ther. 26, 193-200 (2015).</li>
<li>Peng, Y., Tang, L., Zhou, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subretinal+Injection%3A+A+Review+on+the+Novel+Route+of+Therapeutic+Delivery+for+Vitreoretinal+Diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmic+Res%22%5BJournal%5D)">Subretinal Injection: A Review on the Novel Route of Therapeutic Delivery for Vitreoretinal Diseases.</a> Ophthalmic Res. 58, 217-226 (2017).</li>
<li>Simunovic, M. P., Xue, K., Jolly, J. K., MacLaren, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structural+and+Functional+Recovery+Following+Limited+Iatrogenic+Macular+Detachment+for+Retinal+Gene+Therapy%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Structural and Functional Recovery Following Limited Iatrogenic Macular Detachment for Retinal Gene Therapy.</a> JAMA Ophthalmol. 135, 234-241 (2017).</li>
<li>Parikh, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+Alternative+and+Validated+Injection+Method+for+Accessing+the+Subretinal+Space+via+a+Transcleral+Posterior+Approach%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">An Alternative and Validated Injection Method for Accessing the Subretinal Space via a Transcleral Posterior Approach.</a> J Vis Exp. (118), e54808(2016).</li>
<li>Testa, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-year+follow-up+after+unilateral+subretinal+delivery+of+adeno-associated+virus+in+patients+with+Leber+congenital+Amaurosis+type+2%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Three-year follow-up after unilateral subretinal delivery of adeno-associated virus in patients with Leber congenital Amaurosis type 2.</a> Ophthalmology. 120, 1283-1291 (2013).</li>
<li>Ghazi, N. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Treatment+of+retinitis+pigmentosa+due+to+MERTK+mutations+by+ocular+subretinal+injection+of+adeno-associated+virus+gene+vector%3A+results+of+a+phase+I+trial%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Genet%22%5BJournal%5D)">Treatment of retinitis pigmentosa due to MERTK mutations by ocular subretinal injection of adeno-associated virus gene vector: results of a phase I trial.</a> Hum Genet. 135, 327-343 (2016).</li>
<li>Bennett, J., Anand, V., Acland, G. M., Maguire, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cross-species+comparison+of+in+vivo+reporter+gene+expression+after+recombinant+adeno-associated+virus-mediated+retinal+transduction%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Enzymol%22%5BJournal%5D)">Cross-species comparison of in vivo reporter gene expression after recombinant adeno-associated virus-mediated retinal transduction.</a> Methods Enzymol. 316, 777-789 (2000).</li>
<li>Muhlfriedel, R., Michalakis, S., Garcia Garrido, M., Biel, M., Seeliger, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimized+technique+for+subretinal+injections+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Optimized technique for subretinal injections in mice.</a> Methods Mol Biol. 935, 343-349 (2013).</li>
<li>Hejri, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+non-surgical+method+for+subretinal+delivery+by+trans-scleral+microneedle+injection%5BTitle%5D)+AND+%22Bioeng+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">A non-surgical method for subretinal delivery by trans-scleral microneedle injection.</a> Bioeng Transl Med. 10 (3), e10755(2025).</li>
<li>Sastry, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microscope-Integrated+OCT-Guided+Volumetric+Measurements+of+Subretinal+Blebs+Created+by+a+Suprachoroidal+Approach%5BTitle%5D)+AND+%22Transl+Vis+Sci+Technol%22%5BJournal%5D)">Microscope-Integrated OCT-Guided Volumetric Measurements of Subretinal Blebs Created by a Suprachoroidal Approach.</a> Transl Vis Sci Technol. 10, 24(2021).</li>
<li>Blanc, V. F., Jacob, J. L., Milot, J., Cyrenne, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+oculorespiratory+reflex+revisited%5BTitle%5D)+AND+%22Can+J+Anaesth%22%5BJournal%5D)">The oculorespiratory reflex revisited.</a> Can J Anaesth. 35, 468-472 (1988).</li>
<li>Dewar, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+oculocardiac+reflex%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+R+Soc+Med%22%5BJournal%5D)">The oculocardiac reflex.</a> Proc R Soc Med. 69, 373-374 (1976).</li>
<li>Katzung, B. G. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKatzung%2C+BG+%22Basic+%26amp%3B+clinical+pharmacology%22">Basic &amp; clinical pharmacology</a>. , 9th ed, Lange Medical Books/McGraw Hill. New York, USA. (2004).</li>
<li>Mai, X., Huang, S., Chen, W., Ng, T. K., Chen, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Application+of+Optical+Coherence+Tomography+to+a+Mouse+Model+of+Retinopathy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Application of Optical Coherence Tomography to a Mouse Model of Retinopathy.</a> J Vis Exp. (179), e63421(2022).</li>
<li>L'Abbate, D., Prescott, K., Geraghty, B., Kearns, V. R., Steel, D. H. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biomechanical+considerations+for+optimising+subretinal+injections%5BTitle%5D)+AND+%22Surv+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Biomechanical considerations for optimising subretinal injections.</a> Surv Ophthalmol. 69, 722-732 (2024).</li>
<li>Huang, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subretinal+injection+in+mice+to+study+retinal+physiology+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Subretinal injection in mice to study retinal physiology and disease.</a> Nat Protoc. 17, 1468-1485 (2022).</li>
<li>Stockslager, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optical+method+for+automated+measurement+of+glass+micropipette+tip+geometry%5BTitle%5D)+AND+%22Precis+Eng%22%5BJournal%5D)">Optical method for automated measurement of glass micropipette tip geometry.</a> Precis Eng. 46, 88-95 (2016).</li>
<li>Li, Q., Rycaj, K., Chen, X., Tang, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cancer+stem+cells+and+cell+size%3A+A+causal+link%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Cancer+Biol%22%5BJournal%5D)">Cancer stem cells and cell size: A causal link.</a> Semin Cancer Biol. 35, 191-199 (2015).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>0.9٪ حقن كلوريد الصوديوم ، USP</td><td>هوسبيرا</td><td>PAA130066</td><td></td></tr><tr><td>1٪ محلول كبريتات الأتروبين للعيون ، USP</td><td>أكورن</td><td>مؤتمر الحوار الوطني 17478-215-05</td><td></td></tr><tr><td>30&deg; سكين الماس</td><td>كاتينا</td><td>ك 2-6560</td><td></td></tr><tr><td>AmScope 6W LED إضاءة مزدوجة معقوفة</td><td>أمسكوب</td><td>ليد-11 سي آر</td><td></td></tr><tr><td>مقص بزاوية فاناس</td><td>روبوز</td><td>آر إس-5618</td><td></td></tr><tr><td>محلول الري المعقم BSS</td><td>الكون</td><td>289010-0902</td><td></td></tr><tr><td>قطرات العين الموسعة سيكلوميدريل</td><td>الكون</td><td>0065-0359-02</td><td>0.2٪ سيكلوبنتولات ، 1٪ فينيل إيفرين</td></tr><tr><td>أطراف ماصة epT.I.P.S. اللودر الصغيرTM</td><td>إيبندورف</td><td>5242 956.003</td><td></td></tr><tr><td>حاقن دقيق فيمتو جيت 4i</td><td>إيبندورف</td><td>E5252000021</td><td>المنتج المتوقفة</td></tr><tr><td>مرهم العين المزلق GenTeal Tears</td><td>الكون</td><td>16027802</td><td></td></tr><tr><td>إبر الحقن المجهري الزجاجي</td><td>كلونبري العلمية</td><td>ب 100-58-50</td><td>30&deg; شطبه. قطر الدائرة: 50 & م خارجي ، 29 & م داخلي</td></tr><tr><td>محلول الأيزوفلوران</td><td>كوفيتروس</td><td>29405</td><td></td></tr><tr><td>مجهر تصوير الشبكية MICRON IV مع OCT الموجه بالصور</td><td>فينكس</td><td>غير متاح</td><td></td></tr><tr><td>المجهر المجسم SteREO Discovery.V8</td><td>زييس</td><td>495015-0001-000</td><td></td></tr><tr><td>ستيرن-كاستروفيجو قفل الملقط المسنن</td><td>كاتينا</td><td>ك 5-2552</td><td></td></tr><tr><td>ملقط مسنن</td><td>روبوز</td><td>آر إس-5172</td><td></td></tr><tr><td>أسلاك تنظيف التنغستن لإبر قياس 23 ثانية</td><td>هاملتون</td><td>18306</td><td></td></tr><tr><td>Ultracell PVA العين الرماح</td><td>جزر فيرجن البريطانية الطبية</td><td>40400-8</td><td></td></tr><tr><td>محاقن الأنسولين Ultra-Fine2015 &nbsp;</td><td>دينار بحريني</td><td>328438</td><td>3/10 مل ، 8 مم (5/16 بوصة) ، 31 جيجا</td></tr></tbody></table>

تقنية الحقن تحت الشبكية عبر الصلبة طفيفة التوغل في الفأر

Optimized Minimally Invasive Transscleral Subretinal Injection Technique in Mouse

يولد الحقن الناجح باستخدام هذه التقنية عبر الصلبة فقاعة تحت الشبكية يمكن ملاحظتها في OCT مباشرة بعد إجراء الحقن (الشكل 2 أ). نظرا للتحدي التقني لهذه التقنية ، فإن خطوة التصوير لا غنى عنها لتحديد المحقونة بنجاح. بالنسبة للباحثين الذين يخططون لاستخدام هذه التقنية في تجارب العلاج الجيني ، نوصي بإجراء حقن تدريبية بجزيئات الفيروس المرتبط بالغدة (AAV) التي تحمل جين مراسل الفلورسنت. تحقق جزيئات AAV التي يتم تسليمها باستخدام هذه التقنية مساحة نقل كبيرة جدا من RPE (الشكل 2 ب)</st...

The conventional method of material delivery to the subretinal space in the mouse involves dual perforation of the neural retina, which causes extensive ...

optimized-minimally-invasive-transscleral-subretinal-injection

Research

JoVE Journal

Medicine

الطب

هذه التقنية الجراحية يوضح حقن ناقلات العلاج الجيني والخلايا الجذعية في الفضاء تحت الشبكية للعين الماوس.

تحت الشبكية حقن المتجهات العلاج الجيني والخلايا الجذعية في العين ماوس

المصدر: Park, S. W., et al. النهج الحزوي - الحقن تحت الشبكية للنواقل الفيروسية للعلاج الجيني في الفئران صبغة الشبكية الظهارية. J. Vis. Exp. (2015)يصف الفيديو طريقة الحقن تحت الشبكية للنواقل الفيروسية في ظهارة صبغة الشبكية (RPE) في نموذج الفأر. يفصل الإجراء من التخدير وإعداد العين إلى التوصيل الدقيق لنواقل الفيروسات ، مما يضمن تكامل الجينات والتعبير عنها في RPE.

الحقن تحت الشبكية للنواقل الفيروسية في ظهارة صبغة الشبكية في نموذج الفأر

المصدر: Parikh, S., et al. طريقة حقن بديلة ومعتمدة للوصول إلى الفضاء تحت الشبكية عبر نهج خلفي عبر الكليبة. J. Vis. Exp. (2016)يوضح هذا الفيديو إجراء توصيل صبغة الفلورسنت إلى الفضاء تحت الشبكية للفأر. تتضمن العملية تخدير الفأر ، وإعداد العين ، وعمل شقوق دقيقة للوصول إلى الفضاء تحت الشبكية ، وحقن الصبغة لإنشاء انفصال شبكية متحكم فيه. تسمح هذه التقنية بالتوصيل المستهدف للصبغة ، مما يتيح التصوير التفصيلي وتحليلا لهياكل الشبكية.

توصيل صبغة الفلورسنت إلى الفضاء تحت الشبكية للفأر

نقدم هنا بروتوكولا مقبولا من قبل المجتمع بتنسيق وسائط متعددة لحقن بلعة من خلايا RPE تحت الشبكية في الفئران والفئران. يمكن استخدام هذا النهج لتحديد إمكانات الإنقاذ وملامح السلامة وقدرات البقاء على قيد الحياة لخلايا RPE المطعمة عند زرعها في نماذج حيوانية لتنكس الشبكية.

أداء تحت الشبكية الحقن في القوارض لتسليم خلايا الظهارة الصبغية الشبكية في تعليق

الحقن المباشر في العصب البصري للفئران مفيد للأبحاث التجديدية. نظهر تقنية طفيفة التوغل للحقن المباشر في العصب البصري للفئران لا تتضمن فتح الجمجمة. باستخدام هذه الطريقة ، يتم تقليل المضاعفات الجراحية ويكون الشفاء أسرع.

تقنيات الحد الأدنى الغازية لحقن الفئران في العصب البصري

الحقن تحت الشبكية هو تقنية جراحية لتوصيل الجينات الفعال إلى ظهارة صبغة الشبكية في عين الفأر.  نصف هنا طريقة سهلة وقابلة للتكرار للحقن تحت الشبكية للنواقل الفيروسية إلى ظهارة صبغة الشبكية في الفئران التجريبية.

الحوفي-النهج تحت الشبكية حقن الفيروسية المتجهات للعلاج الجيني في الفئران الشبكية الظهارة الصبغية

الحقن تحت الشبكية هي التقنية الأكثر شيوعا لتوصيل العوامل العلاجية الكبيرة مثل البروتينات والنواقل الفيروسية إلى المستقبلات الضوئية وظهارة صبغة الشبكية. يتم وصف طريقة بديلة في الفئران تستهدف بنجاح الفضاء تحت الشبكية بأقل قدر من الضرر الجانبي وأوقات التعافي السريعة.

بديل والمصادق عليها طريقة حقن للوصول إلى الفضاء تحت الشبكية<i&gt; عبر</i&gt; نهج Transcleral الخلفي

حقن سوبريتينال قد طبقت على نطاق واسع في الدراسات الإكلينيكية للعلاج باستبدال الخلايا الجذعية لكبر السن البقعي. في هذه المقالة تصور، يصف لنا تقنية حقن سوبريتينال أقل مخاطرة واستنساخه وتعديل التحديد عن طريق نهج ترانس-سكليرال لتوصيل الخلايا إلى عيون الفئران.

وضع البروتوكول المكرر لزرع الخلايا الظهارية الصبغية الشبكية البشرية ترانس-سكليرال سوبريتينال في عيون الفئران

هنا نظهر نهجاً جديداً لاستخدام التصوير المقطعي التماسك الضوئية المجال الطيفي عالية الدقة (الموارد البشرية-التنمية المستدامة-أكتوبر) لمساعدة إيصال وكلاء العلاج الجيني في الفضاء سوبريتينال وتقييم تغطية مساحية وتميز حيوية مستقبله.

القرار أولتراهيغ الماوس الضوئية التماسك التصوير المقطعي لمساعدة الحقن داخل مقلة العين في أبحاث العلاج الجيني الشبكية

يقدم هذا البروتوكول نهجا عبر الصلبة موجها بالرؤية عبر الحدقة لتقديم الطعوم الخلوية تحت الشبكية بأمان ودقة ، مع معدل منخفض من المضاعفات الجراحية ، في متلقي الفئران مع أو بدون تنكس الشبكية.

زرع الطعوم تحت الشبكية الموجهة عبر الحدقة في نموذج فأر تنكس الشبكية

توضح هذه المقالة طرق الحقن تحت الشبكية في الفئران ، باستخدام التصور أثناء الجراحة للتحكم في كل من موقع الحقن ومنطقة انفصال الشبكية.

التصور أثناء الجراحة للحقن تحت الشبكية وانفصال الشبكية في الفئران

تعلم تقنية الحقن تحت الشبكية عبر الصلبة في الفأر لدراسة أمراض الشبكية الوراثية. تُحسّن هذه الطريقة معدلات النجاح الجراحي وتقلل الضرر النسيجي.

تقنية الحقن تحت الشبكية عبر الصلبة طفيفة التوغل في الفأر

استكشف المزيد من الفيديوهات