استئصال اللمفاوية الميساريتيكية للفأر لاضطراب انتقائي في التواصل اللمفاوي مع الأمعاء الخاصة بالمنطقة المحددة

يركز بحثنا على استجابات خلايا T للمستضدات الجديدة والأنسجة الطرفية، وهذه الاستجابات تتأثر بشكل كبير بالتمهيد، ولذلك نركز بشكل أساسي على أماكن حدوث هذه الأحداث التحضيرية. حاليا، الخيارات الوحيدة المستخدمة على نطاق واسع لمنع انتقال العقد اللمفاوية والأنسجة هي الوسائل الجهازية مثل محفزات مستقبلات S1P وحجب الإنتجين. لكن هذا التثبيط الواسع يمنعنا من دراسة مساهمة العقد اللمفاوية المحلية المحددة.

يوفر بروتوكولنا وصفا معمقا لعمليات استئصال اللمفاوية الانتقائية للغاية في كل من محطات العقد اللمفاوية المضرقية الأربع الرئيسية، وبما أن هذه العقد اللمفاوية متخصصة جدا في قطاع الأمعاء الذي تصريفه، فإن هذا الإجراء الجيد للبقاء يسمح لنا بتعطيل أجزاء محددة من محور اللمفاوی المعوي مع إبقاء الباقي سليما. بعد التأكد من عمق التخدير المناسب عن طريق قرص القدم الخلفية، استخدم مقصا جراحيا معقما لعمل شق في منتصف الجلد بقطر 0.5 إلى 1 سنتيمتر في الفأر المخدر. باستخدام ملقط معقم، قم بتشريح الجلد بعيدا عن جدار البطن وتحديد الخط الألبي.

ثم قم بعمل شق آخر بطول 0.5 إلى 1 سنتيمتر عبر الخط الألبا للوصول إلى التجويف الصفاقي. باستخدام إبرة جافاج ذات طرف غير حاد، قم بغرس ملليلتر واحد من محلول ملحي معقم بدرجة حرارة الجسم في تجويف الصفاق. بلل الستائر المعقمة استعدادا لوضع الأمعاء.

لاستئصال محطة العقدة اللمفاوية الأولى، وجه الأمعاء الخارجية على ستائر مبللة بحيث يكون الأيور في الأسفل والقولون القريب فوقيا، واللفائفي الطرفي باتجاه الجراح. حدد سلسلة العقد اللمفاوية المسارقيوية التي تمتد طوليا على طول القولون. باستخدام ملقط مائل ذو أطراف دقيقة، قم بتشريح محطة العقد اللمفاوية الأولى بعيدا عن الأوعية اللفائفية عن طريق وضع الملقط المغلق بين هذه الهياكل وفتحها بلطف.

لتقليل الخطر النظري للتدفق الجانبي إلى العقد القريبة، قم بربط خياطة اختياري باستخدام غرز مفردة متقطعة على طول سلسلة العقد اللمفاوية، وعلى بعد مليمتر واحد وبعيد مليمتر قريب من محطة العقد اللمفاوية الأولى باستخدام غرز نايلون أحادي الخيط وملقط رفيع الرأس. اسحب محطة العقدة اللمفاوية بلطف إلى الخلف، ثم استخدم مقص دقيق، قم بإزالة محطة العقد اللمفاوية المستهدفة من اتجاه الرأس إلى اتجاه الذيل. راقب الفروع البعيدة للأوعية اللفائفية، والأوعية اللفائفية، والأوعية الجينية للتأكد من أن إمداد الدم لا يزال سليما.

لاستئصال محطة العقد اللمفاوية الثانية، قم بإزالة أحشاء الأمعاء الدقيقة بلطف وتوجيه الأمعاء الخارجية على ستائر مبللة بحيث يكون السيکوم في الأسفل والقولون القريب من الأعلى، والأمعاء الدقيقة باتجاه يمين الجراح. بعد ذلك، حدد محطة العقد اللمفاوية الثانية التي تمتد طوليا على طول القولون وتبدأ عند التقاء الأوعية اللفائية والجوهرية. باستخدام ملقط مائل ذو رؤوس دقيقة، قم بتقشير محطة العقد اللمفاوية الثانية بعيدا عن الأوعية الكولونية.

لتقليل الخطر النظري للتدفق الجانبي إلى العقد القريبة، قم بإجراء ربط خياطة اختياري باستخدام غرز منفصلة على طول سلسلة العقد اللمفاوية، وعلى بعد مليمتر واحد وبعيد مليمتر قريب من محطة العقد اللمفاوية الثانية باستخدام خيط نايلون أحادي الخيط وملقط رفيع الرأس. قم بسحب محطة العقدة اللمفاوية بلطف من الزاوية الذيلية، ثم باستخدام مقص دقيق، قم بإزالة محطة العقدة اللمفاوية الثانية من اتجاه الرأس إلى اتجاه الذيل. افحص مجال العملية للتأكد من وجود دم.

لاستئصال محطة العقدة اللمفاوية الرابعة، قم بإزالة أحشاء الأمعاء الدقيقة بالكامل بلطف حتى نقطة الربط الخلفية. وجه الأمعاء على ستائر مبللة بحيث يكون الساق في الأسفل والقولون القريب من الأعلى، والأمعاء الدقيقة باتجاه يمين الجراح. حدد محطة العقدة اللمفاوية الرابعة التي تقع مباشرة من القولون البعيد وعلى الجانب للمحطة الثالثة.

باستخدام ملقط ذو طرف رفيع مائل أو مقص رفيع جدا، قم بتشريح محطة العقد اللمفاوية الرابعة بعيدا عن الأوعية القولونية والأنسجة الدهنية المحيطة. لتقليل الخطر النظري للتدفق الجانبي إلى العقد القريبة، يتم إجراء ربط خياطة اختياري باستخدام غرز منفصلة عند كل عقدة لمفاوية معروفة، عادة على بعد مليمتر واحد من العقدة باستخدام غرز نايلون أحادي الخيط وملقط رفيع الرأس. ثم اسحب بلطف محطة العقدة اللمفاوية الرابعة في الرأس.

باستخدام مقص دقيق أو دقيق جدا، قم بإزالة محطات العقد اللمفاوية من الذيلة إلى الرأسية. كرر الإجراء للعقدة الثانية في محطة العقد اللمفاوية الرابعة. قم بتشريح العقدة بعناية، وقم بربط الغرز إذا لزم الأمر، ثم استئصالها.

افحص مجال العملية للتأكد من وجود دم. بعد إعادة محتويات البطن إلى تجويف الصفاق، قم بحقن ملليلتر واحد من محلول ملحي معقم بدرجة حرارة الجسم في تجويف البطن لتعويض فقدان السوائل التبخيرية. أغلق البطن على طبقتين: أولا جدار البطن، ثم الجلد باستخدام خيط بولي بروبيلين أحادي 6-0 بنمط متقطع.

أما النسيج المستخرج باستخدام إجراء استئصال النسيج الليمفاوي المسرقي فقد أدى باستمرار إلى عينات ذات محتوى دهني منخفض، كما يتضح من الانخفاض الفوري في PBS. أكد تحليل تدفق الخلايا خلع العقد اللمفاوية نجاحا، حيث تم تحديد أكثر من 95٪ من الخلايا في عينات مشتقة من استئصال الغدة اللمفاوية المجروية على أنها إيجابية ل CD45، مقارنة ب 7٪ فقط في أنسجة الدهون الحشوية.