Name: نمذجة خلل التنسج وإصلاح السنخية الرئوية الوظيفية بعد الإصابة بالإنفلونزا (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-09-19T14:10:00.000+00:00
Duration: 7 min 45 s
Description: تعلم نمذجة خلل التنسج وإصلاح السنخية الرئوية الوظيفية بعد الإصابة بالإنفلونزا في الفئران باستخدام التسلسل أحادي الخلية. يوفر هذا البروتوكول رؤى حاسمة حول آليات إصلاح الرئة والاستجابات الخلوية.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Mammoto, A., Mammoto, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascular+niche+in+lung+alveolar+development%2C+homeostasis%2C+and+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Bioeng+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Vascular niche in lung alveolar development, homeostasis, and regeneration.</a> Front Bioeng Biotechnol. 7, 318(2019).</li>
<li>Tsikis, S. T., Hirsch, T. I., Fligor, S. C., Quigley, M., Puder, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+the+lung+endothelial+niche+to+promote+angiogenesis+and+regeneration%3A+a+review+of+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Mol+Biosci%22%5BJournal%5D)">Targeting the lung endothelial niche to promote angiogenesis and regeneration: a review of applications.</a> Front Mol Biosci. 9, 1093369(2022).</li>
<li>Torrego, A., Pajares, V., Mola, A., Lerma, E., Franquet, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influenza+A+%28H1N1%29+organising+pneumonia%3A+figure+1%5BTitle%5D)+AND+%22BMJ+Case+Rep%22%5BJournal%5D)">Influenza A (H1N1) organising pneumonia: figure 1.</a> BMJ Case Rep. 2010, bcr1220092531(2010).</li>
<li>Murota, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influenza+H1N1+virus-associated+pneumonia+often+resembles+rapidly+progressive+interstitial+lung+disease+seen+in+collagen+vascular+diseases+and+COVID-19+pneumonia%3B+CT-pathologic+correlation+in+24+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Radiol+Open%22%5BJournal%5D)">Influenza H1N1 virus-associated pneumonia often resembles rapidly progressive interstitial lung disease seen in collagen vascular diseases and COVID-19 pneumonia; CT-pathologic correlation in 24 patients.</a> Eur J Radiol Open. 7, 100297(2020).</li>
<li>Niethamer, T. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Defining+the+role+of+pulmonary+endothelial+cell+heterogeneity+in+the+response+to+acute+lung+injury%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">Defining the role of pulmonary endothelial cell heterogeneity in the response to acute lung injury.</a> eLife. 9, e53072(2020).</li>
<li>Klomp, M., Ghosh, S., Mohammed, S., Khan, M. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+virus+to+inflammation%2C+how+influenza+promotes+lung+damage%5BTitle%5D)+AND+%22J+Leukoc+Biol%22%5BJournal%5D)">From virus to inflammation, how influenza promotes lung damage.</a> J Leukoc Biol. 110 (1), 115-122 (2021).</li>
<li>Newton, A. H., Cardani, A., Braciale, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+host+immune+response+in+respiratory+virus+infection%3A+balancing+virus+clearance+and+immunopathology%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Immunopathol%22%5BJournal%5D)">The host immune response in respiratory virus infection: balancing virus clearance and immunopathology.</a> Semin Immunopathol. 38 (4), 471-482 (2016).</li>
<li>Jones, D. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+injury-induced+mesenchymal-epithelial+cell+niche+coordinates+regenerative+responses+in+the+lung%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">An injury-induced mesenchymal-epithelial cell niche coordinates regenerative responses in the lung.</a> Science. 386 (6727), eado5561(2024).</li>
<li>Niethamer, T. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Longitudinal+single-cell+profiles+of+lung+regeneration+after+viral+infection+reveal+persistent+injury-associated+cell+states%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Stem+Cell%22%5BJournal%5D)">Longitudinal single-cell profiles of lung regeneration after viral infection reveal persistent injury-associated cell states.</a> Cell Stem Cell. 32 (2), 302-321.e6 (2025).</li>
<li>Belser, J. A., Gustin, K. M., Katz, J. M., Maines, T. R., Tumpey, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+traditional+intranasal+and+aerosol+inhalation+inoculation+of+mice+with+influenza+A+viruses%5BTitle%5D)+AND+%22Virology%22%5BJournal%5D)">Comparison of traditional intranasal and aerosol inhalation inoculation of mice with influenza A viruses.</a> Virology. 481, 107-112 (2015).</li>
<li>Oltean, T., Maelfait, J., Saelens, X., Vandenabeele, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Need+for+standardization+of+influenza+A+virus-induced+cell+death+in+vivo+to+improve+consistency+of+inter-laboratory+research+findings%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Death+Discov%22%5BJournal%5D)">Need for standardization of influenza A virus-induced cell death in vivo to improve consistency of inter-laboratory research findings.</a> Cell Death Discov. 10 (1), 247(2024).</li>
<li>Nguyen, T. -Q., Rollon, R., Choi, Y. -K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+for+influenza+research%3A+strengths+and+weaknesses%5BTitle%5D)+AND+%22Viruses%22%5BJournal%5D)">Animal models for influenza research: strengths and weaknesses.</a> Viruses. 13 (6), 1011(2021).</li>
<li>Jin, X. -Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+pathogenicity+of+influenza+virus-induced+pneumonia+mouse+model+following+intranasal+and+aerosolized+intratracheal+inoculation%5BTitle%5D)+AND+%22Virol+J%22%5BJournal%5D)">Comparative pathogenicity of influenza virus-induced pneumonia mouse model following intranasal and aerosolized intratracheal inoculation.</a> Virol J. 21 (1), 240(2024).</li>
<li>Revelli, D. A., Boylan, J. A., Gherardini, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+non-invasive+intratracheal+inoculation+method+for+the+study+of+pulmonary+melioidosis%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Infect+Microbiol%22%5BJournal%5D)">A non-invasive intratracheal inoculation method for the study of pulmonary melioidosis.</a> Front Cell Infect Microbiol. 2, 164(2012).</li>
<li>Cantu, A., Gutierrez, M. C., Dong, X., Leek, C., Anguera, M., Lingappan, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modulation+of+recovery+from+neonatal+hyperoxic+lung+injury+by+sex+as+a+biological+variable%5BTitle%5D)+AND+%22Redox+Biol%22%5BJournal%5D)">Modulation of recovery from neonatal hyperoxic lung injury by sex as a biological variable.</a> Redox Biol. 68, 102933(2023).</li>
<li>Sunagar, R., Kumar, S., Namjoshi, P., Rosa, S. J., Hazlett, K. R. O., Gosselin, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+an+outbred+mouse+model+for+Francisella+tularensis+vaccine+development+and+testing%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Evaluation of an outbred mouse model for Francisella tularensis vaccine development and testing.</a> PLoS One. 13 (12), e0207587(2018).</li>
<li>Cowley, P. M., Roberts, C. R., Baker, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monitoring+the+health+status+of+mice+with+bleomycin-induced+lung+injury+by+using+body+condition+scoring%5BTitle%5D)+AND+%22Comp+Med%22%5BJournal%5D)">Monitoring the health status of mice with bleomycin-induced lung injury by using body condition scoring.</a> Comp Med. 69 (2), 95-102 (2019).</li>
<li>Gonzalez, A. J., Ijezie, E. C., Balemba, O. B., Miura, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Attenuation+of+influenza+A+virus+disease+severity+by+viral+coinfection+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Virol%22%5BJournal%5D)">Attenuation of influenza A virus disease severity by viral coinfection in a mouse model.</a> J Virol. 92 (23), e00881-e00918 (2018).</li>
<li>Lv, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kinetics+of+pulmonary+immune+cells%2C+antibody+responses+and+their+correlations+with+the+viral+clearance+of+influenza+A+fatal+infection+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Virol+J%22%5BJournal%5D)">Kinetics of pulmonary immune cells, antibody responses and their correlations with the viral clearance of influenza A fatal infection in mice.</a> Virol J. 11, 57(2014).</li>
<li>Liberti, D. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alveolar+epithelial+cell+fate+is+maintained+in+a+spatially+restricted+manner+to+promote+lung+regeneration+after+acute+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep%22%5BJournal%5D)">Alveolar epithelial cell fate is maintained in a spatially restricted manner to promote lung regeneration after acute injury.</a> Cell Rep. 35 (6), 109092(2021).</li>
<li>Cipolla, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhalable+and+nasal+biologics%3A+analytical%2C+formulation%2C+development%2C+and+regulatory+considerations%5BTitle%5D)+AND+%22J+Aerosol+Med+Pulm+Drug+Deliv%22%5BJournal%5D)">Inhalable and nasal biologics: analytical, formulation, development, and regulatory considerations.</a> J Aerosol Med Pulm Drug Deliv. 2024, (2025).</li>
<li>Cardiff, R. D., Miller, C. H., Munn, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Manual+hematoxylin+and+eosin+staining+of+mouse+tissue+sections%5BTitle%5D)+AND+%22Cold+Spring+Harb+Protoc%22%5BJournal%5D)">Manual hematoxylin and eosin staining of mouse tissue sections.</a> Cold Spring Harb Protoc. 2014 (6), (2014).</li>
<li>Bouvier, N. M., Lowen, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+for+influenza+virus+pathogenesis+and+transmission%5BTitle%5D)+AND+%22Viruses%22%5BJournal%5D)">Animal models for influenza virus pathogenesis and transmission.</a> Viruses. 2 (8), 1530-1563 (2010).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>أنبوب 1.5 مل & nbsp;</td><td>فيشر ساينتيفك</td><td>02-682-557</td><td></td></tr><tr><td>100 وميكرو؛ مصفاة خلية M</td><td>فالكون</td><td>352360</td><td></td></tr><tr><td>أنبوب مخروطي بحجم 15 مل</td><td>فالكون</td><td>352196</td><td></td></tr><tr><td>1x PBS</td><td>Gibc0</td><td>10010-023</td><td></td></tr><tr><td>40 وميكرو؛ مصفاة خلية M</td><td>فالكون</td><td>352340</td><td></td></tr><tr><td>أنبوب 5 مل</td><td>الكرة الأرضية</td><td>6101C</td><td></td></tr><tr><td>أنبوب مخروطي بحجم 50 مل</td><td>فالكون</td><td>352098</td><td></td></tr><tr><td>مخزون فيروس الإنفلونزا A/PR/8/34</td><td>ATCC&nbsp;</td><td>VR-95PQ</td><td>القطع المختلفة لها مؤشرات فيروسات مختلفة</td></tr><tr><td>مخزن تحليل ACK</td><td>جودة بيولوجية</td><td>118-156-101</td><td></td></tr><tr><td>الأجسام المضادة المضادة لTRKB</td><td>R& دي سيستمز</td><td>AF1494</td><td></td></tr><tr><td>المبيض</td><td>كلوروكس</td><td></td><td>10٪ مبيض</td></tr><tr><td>مصل البقر ألبومين</td><td>سيغما ألدريتش</td><td>A8022</td><td></td></tr><tr><td>غرفة تحفيز التخدير بثاني أكسيد الكربون</td><td>أي</td><td>لا يوجد</td><td></td></tr><tr><td>كولاجناز النوع الأول</td><td>جيبكو</td><td>17100017</td><td></td></tr><tr><td>DAPI</td><td>ميليبور سيغما</td><td>28718-90-3</td><td></td></tr><tr><td>Dispase</td><td>كورنينغ</td><td>CB-40235</td><td></td></tr><tr><td>أدوات التشريح: مقص، ملقط منحني، ملقط مستقيم</td><td>أي</td><td>لا يوجد</td><td></td></tr><tr><td>دنيس</td><td>سيغما ألدريتش</td><td>4716728001</td><td></td></tr><tr><td>D-PBS</td><td>كورنينغ</td><td>21-031-CM</td><td></td></tr><tr><td>الإيثانول</td><td>فارمكو</td><td>111000200</td><td></td></tr><tr><td>القوارير الزجاجية</td><td>علوم الحياة DWK</td><td>986562</td><td></td></tr><tr><td>دلو الثلج</td><td>أي</td><td>لا يوجد</td><td></td></tr><tr><td>إيزوفلوران</td><td>كوفيتروس</td><td>29404</td><td></td></tr><tr><td>نيدلز، 21&200; 23 ج</td><td>أي</td><td>لا يوجد</td><td></td></tr><tr><td>P20/P200 pipette&nbsp;</td><td>بيبيتمان</td><td>F144056M/F144058M،</td><td></td></tr><tr><td>أطراف الماصة P20/P200</td><td>توماس ساينتفيك</td><td>1159M43/1159M40</td><td></td></tr><tr><td>بارافورمالديهايد (PFA)&nbsp;</td><td>ثيرمو ساينتفيك</td><td>J19943-k2</td><td>2٪ PFA</td></tr><tr><td>بيبيتمان</td><td>أي</td><td>لا يوجد</td><td></td></tr><tr><td>صناديق الفريزر البلاستيكية أو الكرتونية</td><td>أي</td><td>لا يوجد</td><td></td></tr><tr><td>شفرة الحلاقة</td><td>أي</td><td>لا يوجد</td><td></td></tr><tr><td>منصة الحلبة</td><td>أي</td><td>لا يوجد</td><td></td></tr><tr><td>بيبتس مصلية، 5 مل</td><td>فالكون</td><td>357543</td><td></td></tr><tr><td>غرفة إيزوفلوران الفأر ذات العلوية المنزلقة</td><td>سومني ساينتيفك</td><td></td><td></td></tr><tr><td>الخياطة</td><td>فيشر ساينتيفك</td><td>NC9422522</td><td></td></tr><tr><td>أنابيب الحقنة وأقفال اللوير</td><td>أي</td><td>لا يوجد</td><td></td></tr><tr><td>حقنة، 10 مل</td><td>أي</td><td>لا يوجد</td><td></td></tr><tr><td>آلة تخدير الطاولة الإيزوفلوران</td><td>أوهميدا</td><td>أوهميدا إيزوتيك- 4</td><td>معدل التدفق يجب أن يكون 2.5&ndash; 3%</td></tr><tr><td>أجاروز ذوبان منخفض جدا</td><td>سيغما ألدريتش</td><td>A5030-1G</td><td></td></tr><tr><td>ميزان الوزن</td><td>أوهاوس</td><td>CS200</td><td></td></tr></tbody></table>

نمذجة خلل التنسج وإصلاح السنخية الرئوية الوظيفية بعد الإصابة بالإنفلونزا

Modeling Dysplastic and Functional Lung Alveolar Repair after Influenza Infection

Viral infection causes both acute and long-term damage to the lung alveolus, the specialized tissue structure responsible for gas exchange between the ...

modeling-dysplastic-functional-lung-alveolar-repair-after-influenza

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

علم المناعة والعدوى

وصفنا عزل الخلايا الأولية السريع للنوع الثاني الفئران السنخية الظهارية (وادي) عن طريق الانتقاء السلبي تدفق cytometric. هذه تظهر قابلية عالية وادي والنقاء ومناسبة لمجموعة واسعة من الدراسات الفنية والجزيئية بشأن دورها في أمراض الجهاز التنفسي مثل أمراض المناعة الذاتية أو المعدية.

عزل تدفق Cytometric من نوع خلايا الفئران الابتدائية السنخية II طلائي للدراسات الوظيفية والجزيئية

لقد طورنا نموذجا لإصابة رئة الفأر عن طريق الحقن داخل القصبة الهوائية للبكتيريا Pseudomonas aeruginosa. يحاكي هذا النموذج إصابة الرئة أثناء الالتهاب الرئوي وهو ذو صلة سريريا.

الزائفة الزنجارية المستحثة الرئة الإصابات نموذج

نصف وسيلة لقياس قدرة انتشار الرئة بسرعة وبساطة في الفئران ونظهر أنها حساسة بما فيه الكفاية لتغيرات النمط الظاهري في أمراض الرئة الشائعة المتعددة.  وبالتالي ، فإن هذا المقياس يجلب أهمية انتقالية مباشرة لنماذج الفأر ، حيث يمكن أيضا قياس قدرة الانتشار بسهولة في البشر.

Phenotyping ماوس الرئوي وظيفة في فيفو مع قدرة الرئة نشرها

استئصال الرئة الفأر هو نموذج شائع الاستخدام لنمو الرئة التعويضي. يمكن استخدام هذا الإجراء جنبا إلى جنب مع تتبع النسب أو نماذج الفئران المعدلة وراثيا لتوضيح الآليات الأساسية.

الماوس استئصال الرئة نموذج النمو الرئة التعويضي

منطقة سطح الرئة الداخلية (عيسى) هو معيار حاسم لتقييم مورفولوجيا الرئة وعلم وظائف الأعضاء في أمراض الرئة والتجدد السنخي الناجم عن الاصابة. نحن تصف هنا طريقة موحدة التي يمكن أن تقلل من التحيز قياس عيسى في كل من استئصال رئوي الرئوي ونماذج الفئران زرع الاصطناعية.

طريقة موحدة لقياس المساحة الداخلية الرئة السطحية عن طريق استئصال رئوي الماوس وزرع الاصطناعية

هنا، نقدم طرق لتحسين دراسات الالتهاب الرئوي البكتيري الثانوي من خلال توفير طريق غير الغازية للغرس في الجهاز التنفسي السفلي تليها استعادة مسببات الأمراض وتحليل النص. هذه الإجراءات قابلة للاستنساخ ويمكن تنفيذها دون معدات متخصصة مثل قنية، أسلاك دليل، أو كابلات الألياف البصرية.

نظام دقيق لإيصال مسببات الأمراض واستعادتها لنماذج المورين من الالتهاب الرئوي البكتيري الثانوي

تصف هذه المخطوطة إنشاء نموذج معدي للالتهاب الرئوي في الفئران وتوصيف حل الإصابة جنبا إلى جنب مع طرق نمو البكتيريا والتقطير داخل القصبة الهوائية. كما تم وصف نهج جديد باستخدام قياس التدفق الخلوي عالي الأبعاد لتقييم المشهد المناعي.

نموذج تجريبي لتقييم حل الالتهاب الرئوي

نماذج الرئة على رقاقة تتجاوز الثقافات التقليدية 2D من خلال محاكاة واجهة الهواء السائل ونضح الخلايا البطانية، ومحاكاة تدفق الدم وتبادل المغذيات حاسمة لدراسات فسيولوجيا الرئة. هذا يعزز أهمية أبحاث الرئة ، ويوفر بيئة ديناميكية ودقيقة من الناحية الفسيولوجية لتعزيز فهم وعلاج التهابات الجهاز التنفسي.

نموذج الحويصلات الهوائية على الرقاقة المناعي لدراسة الاستجابات المناعية المخاطية السنخية

يوضح هذا البروتوكول تقنية الشفط الفموي البلعومي لاستخدامها في نموذج الفئران البيوميسين للتليف الرئوي.

إعطاء البلعوم الفموي للبليوميسين في نموذج الفئران للتليف الرئوي

يحدد هذا البروتوكول طريقة لإحداث التليف الرئوي في الفئران من خلال الإعطاء الفموي البلعومي المتكرر للبليومايسين ، مما ينتج عنه سمات مرضية تشبه إلى حد بعيد تلك الخاصة بالتليف الرئوي مجهول السبب.

نموذج الفئران المكرر للتليف الرئوي مجهول السبب

تعلم نمذجة خلل التنسج وإصلاح السنخية الرئوية الوظيفية بعد الإصابة بالإنفلونزا في الفئران باستخدام التسلسل أحادي الخلية. يوفر هذا البروتوكول رؤى حاسمة حول آليات إصلاح الرئة والاستجابات الخلوية.

نمذجة خلل التنسج وإصلاح السنخية الرئوية الوظيفية بعد الإصابة بالإنفلونزا

استكشف المزيد من الفيديوهات