Name: التقييم الكيميائي الإشعاعي لنشاط إنزيم سينسيز الجليكوجين في الأنسجة الحيوانية (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-10-24T14:50:00.000+00:00
Duration: 2 min 30 s
Description: اكتشف تقييم النشاط الإنزيمي لسينسيز الجليكوجين في عضلات الفئران باستخدام الكشف الإشعاعي. تساعد هذه الطريقة الباحثين على فهم اضطرابات التمثيل الغذائي وتطوير علاجات لأمراض تخزين الجليكوجين.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Preiss, J., Walsh, D. A. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPreiss%2C+J+%22Biology+of+Carbohydrates%22">Biology of Carbohydrates</a>. Ginsburg, V., Robbins, P. 1, John Wiley. 199-314 (1981).</li>
<li>Pederson, B. A. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPederson%2C+BA+%22Enzymology+of+Complex+Alpha-Glucans%22">Enzymology of Complex Alpha-Glucans</a>. , CRC Press. 84-137 (2021).</li>
<li>Wayllace, N. Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+enzyme-coupled+continuous+spectrophotometric+assay+for+glycogen+synthases%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Biol+Rep%22%5BJournal%5D)">An enzyme-coupled continuous spectrophotometric assay for glycogen synthases.</a> Mol Biol Rep. 39 (1), 585-591 (2012).</li>
<li>Wilson, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spectrophotometric+Methods+for+the+Study+of+Eukaryotic+Glycogen+Metabolism%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Spectrophotometric Methods for the Study of Eukaryotic Glycogen Metabolism.</a> J Vis Exp. (174), e63046(2021).</li>
<li>Danforth, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glycogen+synthetase+activity+in+skeletal+muscle.+Interconversion+of+two+forms+and+control+of+glycogen+synthesis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Glycogen synthetase activity in skeletal muscle. Interconversion of two forms and control of glycogen synthesis.</a> J Biol Chem. 240, 588-593 (1965).</li>
<li>Leloir, L. F., Olavarria, J. M., Goldemberg, S. H., Carminatti, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biosynthesis+of+glycogen+from+uridine+diphosphate+glucose%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Biochem+Biophys%22%5BJournal%5D)">Biosynthesis of glycogen from uridine diphosphate glucose.</a> Arch Biochem Biophys. 81 (2), 508-520 (1959).</li>
<li>Schalin-Jantti, C., Harkonen, M., Groop, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+activation+of+glycogen+synthase+in+people+at+increased+risk+for+developing+NIDDM%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Impaired activation of glycogen synthase in people at increased risk for developing NIDDM.</a> Diabetes. 41 (5), 598-604 (1992).</li>
<li>Huang, X., Hansson, M., Laurila, E., Ahren, B., Groop, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fat+feeding+impairs+glycogen+synthase+activity+in+mice+without+effects+on+its+gene+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Metabolism%22%5BJournal%5D)">Fat feeding impairs glycogen synthase activity in mice without effects on its gene expression.</a> Metabolism. 52 (5), 535-539 (2003).</li>
<li>Holt, B. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+CD71+Centyrin%3A+Gys1+siRNA+conjugate+reduces+glycogen+synthesis+and+glycogen+levels+in+a+mouse+model+of+Pompe+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ther%22%5BJournal%5D)">A novel CD71 Centyrin: Gys1 siRNA conjugate reduces glycogen synthesis and glycogen levels in a mouse model of Pompe disease.</a> Mol Ther. 33 (1), 235-248 (2025).</li>
<li>Prats, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phosphorylation-dependent+translocation+of+glycogen+synthase+to+a+novel+structure+during+glycogen+resynthesis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Phosphorylation-dependent translocation of glycogen synthase to a novel structure during glycogen resynthesis.</a> J Biol Chem. 280 (24), 23165-23172 (2005).</li>
<li>Perezleon, J. A., Osorio-Paz, I., Francois, L., Salceda, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunohistochemical+localization+of+glycogen+synthase+and+GSK3beta%3A+Control+of+glycogen+content+in+retina%5BTitle%5D)+AND+%22Neurochem+Res%22%5BJournal%5D)">Immunohistochemical localization of glycogen synthase and GSK3beta: Control of glycogen content in retina.</a> Neurochem Res. 38 (5), 1063-1069 (2013).</li>
<li>Thomas, J. A., Schlender, K. K., Larner, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+rapid+filter+paper+assay+for+UDP-glucose-glycogen+glucosyltransferase%2C+including+an+improved+biosynthesis+of+UDP-14C-glucose%5BTitle%5D)+AND+%22Analytical+Biochemistry%22%5BJournal%5D)">A rapid filter paper assay for UDP-glucose-glycogen glucosyltransferase, including an improved biosynthesis of UDP-14C-glucose.</a> Analytical Biochemistry. 25 (1), 486-499 (1968).</li>
<li>Parker, G. J., Lund, K. C., Taylor, R. P., McClain, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insulin+resistance+of+glycogen+synthase+mediated+by+O-linked+N-acetylglucosamine%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Insulin resistance of glycogen synthase mediated by O-linked N-acetylglucosamine.</a> J Biol Chem. 278 (12), 10022-10027 (2003).</li>
<li>Niederwanger, A., Kranebitter, M., Ritsch, A., Patsch, J. R., Pedrini, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+gel+filtration+assay+to+determine+glycogen+synthase+activity%5BTitle%5D)+AND+%22J+Chromatogr+B+Analyt+Technol+Biomed+Life+Sci%22%5BJournal%5D)">A gel filtration assay to determine glycogen synthase activity.</a> J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci. 820 (1), 143-145 (2005).</li>
<li>Suzuki, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insulin+control+of+glycogen+metabolism+in+knockout+mice+lacking+the+muscle-specific+protein+phosphatase+PP1G%2FRGL%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Insulin control of glycogen metabolism in knockout mice lacking the muscle-specific protein phosphatase PP1G/RGL.</a> Mol Cell Biol. 21 (8), 2683-2694 (2001).</li>
<li>Nagy, A., Gertsenstein, M., Vintersten, K., Behringer, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quick+and+humane+sacrifice+of+a+mouse+by+cervical+dislocation%5BTitle%5D)+AND+%22CSH+Protoc%22%5BJournal%5D)">Quick and humane sacrifice of a mouse by cervical dislocation.</a> CSH Protoc. 2006 (1), prot4357(2006).</li>
<li>Gomes, F. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glycogen+storage+and+muscle+glucose+transporters+%28GLUT-4%29+of+mice+selectively+bred+for+high+voluntary+wheel+running%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Biol%22%5BJournal%5D)">Glycogen storage and muscle glucose transporters (GLUT-4) of mice selectively bred for high voluntary wheel running.</a> J Exp Biol. 212 (Pt 2), 238-248 (2009).</li>
<li>Greenberg, C. C., Jurczak, M. J., Danos, A. M., Brady, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glycogen+branches+out%3A+new+perspectives+on+the+role+of+glycogen+metabolism+in+the+integration+of+metabolic+pathways%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Endocrinol+Metab%22%5BJournal%5D)">Glycogen branches out: new perspectives on the role of glycogen metabolism in the integration of metabolic pathways.</a> Am J Physiol Endocrinol Metab. 291 (1), E1-E8 (2006).</li>
<li>Bradford, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+rapid+and+sensitive+method+for+the+quantitation+of+microgram+quantities+of+protein+utilizing+the+principle+of+protein-dye+binding%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Biochem%22%5BJournal%5D)">A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding.</a> Anal Biochem. 72, 248-254 (1976).</li>
<li>Gilboe, D. P., Larson, K. L., Nuttall, F. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radioactive+method+for+the+assay+of+glycogen+phosphorylases%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Biochem%22%5BJournal%5D)">Radioactive method for the assay of glycogen phosphorylases.</a> Anal Biochem. 47 (1), 20-27 (1972).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>[<الأخبار>14</الأخبار>C] يوريدين 5-ديفوسفو-جلوكوز</td><td>الكيميكيات الأمريكية ذات العلامات الإشعاعية</td><td>ARC 0154</td><td></td></tr><tr><td>ورق كروماتوغرافيا ETCHR 31</td><td>واتمان</td><td>3031 915</td><td></td></tr><tr><td>هيدرات هيدروكلوريد البنزاميدين</td><td>سيغما</td><td>B6506</td><td></td></tr><tr><td>بيتا ميركابتوإيثانول</td><td>سيغما</td><td>M3148</td><td></td></tr><tr><td>حمام جاف</td><td>توري باينز العلمي</td><td>SC25</td><td></td></tr><tr><td>الإيثانول (200 بروف)</td><td>فارمكوآبر</td><td>111000200</td><td></td></tr><tr><td>حمض الإيثيلين غليكول رباعي الأسيتيك (EGTA)</td><td>سيغما</td><td>E4378</td><td></td></tr><tr><td>حمض الإيثيلين ديامين رباعي الأسيتيك (EDTA)</td><td>سيغما</td><td>E5134</td><td></td></tr><tr><td>ملح الصوديوم جلوكوز-6-فوسفات</td><td>سيغما</td><td>G7879</td><td></td></tr><tr><td>الجليكوجين من كبد الأرنب (النوع الثالث)</td><td>سيغما</td><td>G8876</td><td></td></tr><tr><td>ميكروبلايت، مسطح القاع، 96 بئر</td><td>غرينر</td><td>655101</td><td></td></tr><tr><td>ميكروبلايت، pcr، 96 بئر</td><td>DOT Scientific</td><td>951-PCR</td><td></td></tr><tr><td>عداد الوميض متعدد الأغراض</td><td>بيكمان كولتر</td><td>LS 6500</td><td></td></tr><tr><td>ديهيدرات فلوريد البوتاسيوم</td><td>سيغما</td><td>221872</td><td></td></tr><tr><td>كوكتيل مثبط البروتين</td><td>جولد بيو</td><td>GB-108-2</td><td></td></tr><tr><td>كوكتيل الوميض</td><td>منتجات البحث الدولية</td><td>111195</td><td></td></tr><tr><td>قوارير الوميض</td><td>منتجات البحث الدولية</td><td>125509</td><td></td></tr><tr><td>فلوريد الصوديوم</td><td>سيغما</td><td>S7920</td><td></td></tr><tr><td>تمزق الأنسجة</td><td>منتجات بايوسبك</td><td>الطراز 398</td><td></td></tr><tr><td>توسيليزين كلوروميثيل كيتون (TLCK)</td><td>سيغما</td><td>T7254</td><td></td></tr><tr><td>قاعدة تريزما (99.9٪)</td><td>سيغما</td><td>T1503</td><td></td></tr><tr><td>هيدروكلوريد تريزما</td><td>سيغما</td><td>T3253</td><td></td></tr><tr><td>يوريدين 5-ديفوسبو-جلوكوز</td><td>سيغما</td><td>U-4625</td><td></td></tr></tbody></table>

التقييم الكيميائي الإشعاعي لنشاط إنزيم سينسيز الجليكوجين في الأنسجة الحيوانية

Radiochemical Assessment of Glycogen Synthase Enzyme Activity in Animal Tissue

Glycogen is an important metabolite to many eukaryotic cells, integral to energy storage and quick energy release. The building of the molecule is ...

radiochemical-assessment-glycogen-synthase-enzyme-activity-animal

Research

JoVE Journal

Biochemistry

الكيمياء الحيوية

يصف هذا الفيديو مقايسة الطيف الضوئي لتقدير نشاط سينسيز الجليكوجين. تعتمد الطريقة على تقليل امتصاص NADH بمرور الوقت وتشير إلى نشاط سينسيز الجليكوجين.

الفحص الطيفي لتحديد نشاط سينسيز الجليكوجين

في هذا الفيديو ، نصف مقايسة القياس الطيفي النوعي لتحديد مدى التفرع في عينة الجليكوجين ذات البنية غير المميزة. تشير مقارنة الحد الأقصى للامتصاص للعينة غير المميزة بالسكريات ذات الهياكل المتفرعة المعروفة إلى وجود تفرع في العينة غير المميزة.

مقايسة تفرع الجليكوجين لقياس درجة تفرع الجليكوجين

نحن هنا وصف طريقة البيوكيميائية دقيقة وقابلة للتكرار ومريحة للمعايرة من الجليكوجين في المختبر. يستخدم هذا الأسلوب عدة مقايسة Abcam الجليكوجين ويقوم على التحلل المتعاقبة من الجليكوجين إلى جلوكوز والجلوكوز المعايرة من قبل مضان.

المعايرة الكيميائية الحيوية من الجليكوجين<em&gt; في المختبر</em

تلطيخ شيف الحمضي الدوري هو تقنية تصور محتوى السكريات في الأنسجة. توضح هذه المقالة بروتوكول تلطيخ شيف الحمضي الدوري الذي تم تكييفه للاستخدام في خلايا الدم المحيطية أحادية النواة المنقاة من الدم الوريدي البشري. يتم إثراء هذه العينات للخلايا الليمفاوية وخلايا الدم البيضاء الأخرى في الجهاز المناعي.

كشف الجليكوجين في خلايا الدم المحيطي وحيدات النوى مع الدوري حمض شيف تلطيخ

هنا، نقدم مقايسة موثوقة وسهلة لقياس محتوى الجليكوجين في الخلايا السيانوباكتريال. الإجراء ينطوي على هطول الأمطار، اختيار البلمرة، والكشف عن بقايا الجلوكوز. هذا الأسلوب هو مناسبة لكل من ويلديب والسلالات المعدلة وراثيا ويمكن أن تسهل الهندسة الأيضية من البكتيريا الزرقاء.

تحديد محتوى الجليكوجين في البكتيريا الزرقاء

يتم تقديم تقنيات لقياس نشاط الإنزيمات الرئيسية لعملية التمثيل الغذائي للجليكوجين ، باستخدام مقياس طيف ضوئي بسيط يعمل في النطاق المرئي.

الطرق الطيفية لدراسة استقلاب الجليكوجين حقيقي النواة

تم تحديد تركيز السكروز الأمثل لاستخراج الجليكوجين في الكبد باستخدام الطرد المركزي المتدرج لكثافة السكروز. أثبتت إضافة خطوة الغليان لمدة 10 دقائق لتثبيط إنزيمات تحلل الجليكوجين أنها مفيدة.

استخراج جزيئات الجليكوجين في الكبد لتحديد بنية الجليكوجين

كما الميتوكوندريا فقط نسبة مئوية صغيرة من الخلايا النباتية، أنها تحتاج إلى أن تنقية لمجموعة من الدراسات. يمكن أن تكون الميتوكوندريا المعزولة من مجموعة متنوعة من أجهزة المصنع بالتجانس، متبوعاً بالطرد المركزي التدرج التفاضلية والكثافة للحصول على كسر المتقدرية تنقية عالية.

والعزلة وقياسات الجهاز التنفسي من الميتوكوندريا من التمويل نبات

يمكننا وصف بروتوكول لرسم خرائط التوزيع المكاني للنشاط الأنزيمي للإنزيمات التي تولد نيكوتيناتميدي الأدنين وأميد النيكوتنك (NAD(P)H) + H + في عينات الأنسجة مباشرة.

رسم الخرائط الأيض: رصد النشاط نازعة لاكتات مباشرة في الأنسجة

ويصف هذا البروتوكول وضع منهجية فعالة لاستخراج وتحديد كمية الكافيين في تعليق خلية للأم آرابيكا جيم- وهي عملية تجريبية لتقييم النشاط الأنزيمي من الكافيين synthase مع مستوى التعبير الجين الذي يشفر هذا الإنزيم.

استخراج الكافيين والنشاط الأنزيمي والتعبير الجيني ل Synthase الكافيين من تعليق خلية النبات

اكتشف تقييم النشاط الإنزيمي لسينسيز الجليكوجين في عضلات الفئران باستخدام الكشف الإشعاعي. تساعد هذه الطريقة الباحثين على فهم اضطرابات التمثيل الغذائي وتطوير علاجات لأمراض تخزين الجليكوجين.

التقييم الكيميائي الإشعاعي لنشاط إنزيم سينسيز الجليكوجين في الأنسجة الحيوانية

استكشف المزيد من الفيديوهات