تصوير دوبلر بالموجات فوق الصوتية للتصوير الحي والقياس الكمي لوظيفة الأوعية الدموية للمبيض في الفئران

يهدف هذا البحث إلى توصيف تدفق الدم المبيض قبل الإباضة باستخدام طريقة غير جراحية في الجسم الحي. يفتقر المجال إلى طرق غير جراحية لدراسة إعادة تشكيل الأوعية الدموية في المبيض في الوقت الفعلي دون التأثير على الفسيولوجيا الطبيعية للفئران. للبدء، شغل الطاقة الرئيسية الموجودة في الجزء الخلفي من نظام التصوير.

بعد إقلاع النظام، قم بتبديل مفتاح الاستعداد على الجانب الأيسر من الكارت لإيقاظ الشاشة والكمبيوتر. وصل محول MS700 إلى منفذ المحول النشط في وحدة التصوير الموجودة في المنفذ الأيمن. قم بمحاذاة دبوس القفل في موصل المحول مع الشق في المنفذ.

ادفع الموصل بالكامل وادر ذراع القفل إلى الوضع العمودي لتثبيته. شغل برنامج التحليل بالنقر على أيقونة البرنامج. انقر على جديد لإنشاء دراسة جديدة واختر الاسم المناسب من القائمة المنسدلة.

في نافذة معلومات الدراسة، أدخل اسم الدراسة، اسم السلسلة. حزمة الطلب هي المبيض وحزمة القياس هي الأوعية الدموية. بمجرد فتح البرنامج واكتشاف المحول تلقائيا، اختر حزمة تطبيق المبيض.

بعد ذلك، ضع كمية صغيرة من كريم الأقطاب الكهربائية على كل قطب لضمان التلامس الصحيح لمراقبة معدل ضربات القلب. بمجرد أن يتم تخدير الحيوان بالكامل، قم بإعادة توجيه تدفق الغاز عن طريق فتح الصندوق المتوقف إلى مخروط الأنف على منصة التصوير، وإغلاق القفل على غرفة الحث. انقل الفأرة بلطف إلى منصة التصوير المسخنة.

ضع الفأر في وضعية الاستلقاء بحيث يكون الجانب الظهري متجها للأعلى وثبت مخروط الأنف فوق أنفه للحفاظ على التخدير. قم بلصق كل قدم في كريم الأقطاب على وسادة القطب المقابلة للمراقبة الفسيولوجية. ضع مرهم العيون على العينين لمنع جفاف القرنية أثناء التخدير.

تأكد من عمق التخدير الكافي باستخدام طريقة انعكاس القرص على إصبع القدم. راقب العلامات الحيوية للحيوان، مثل معدل التنفس ونبضات القلب، والحركات التي تشير إلى الانزعاج، ودرجة حرارة المنصة كل خمس دقائق. بعد ذلك، احلق الجزء السفلي الأيمن من الظهر باستخدام ماكينة حلاقة كهربائية من الطرف الخلفي الأيمن إلى خط المنتصف، مع البقاء جانبيا للعمود الفقري.

ضعي طبقة رقيقة من كريم مزيل شعر الجسم. بعد دقيقة، امسح الكريم جيدا باستخدام الشاش الرطب. ثم ضع طبقة سخية ومتساوية من جل الموجات فوق الصوتية على المنطقة المحلوقة.

ضع مسبار المحول في وضع عرضي بالنسبة للفأرة على الحامل الميكانيكي مع توجيه الزاوية إلى يسار المشغل. ثبت المجس في مكانه باستخدام المشبك. اضغط على مفتاح B-Mode في لوحة التحكم لتفعيل نافذة التصوير الرمادي القياسية.

تأكد من أن الفأرة والمنصة مستويين وأن المحول عمودي على السطح. ثم اسحب الجلد إلى اليسار ووضع المحول بالقرب من المنطقة العلوية المحلوقة، أقرب إلى خط منتصف الظهر. أنزل المحول بلطف على المنطقة المحلوقة المغطاة بجل الموجات فوق الصوتية.

محاذاة الحافة اليسرى للمجس مع العمود الفقري والحافة اليمنى فوق الجانب الأيمن. لتحديد المبيض، حدد أولا الكلية، وهي بنية بيضاوية رمادية فاتحة كبيرة تحتوي على قشرة ونخاع. ادفع منصة التصوير قليلا نحو رأس الفأر لكشف المبيض والنسيج الدهني الشاحن.

اضغط على زر Cine Store لالتقاط فيديو B-Mode. الآن، اضغط على زر وضع دوبلر القوة في لوحة التحكم لرؤية الأوعية الدموية ذات الحساسية العالية لتدفق السرعات المنخفضة. اضبط كسب دوبلر إلى 32 إلى 55 ديسيبل، والحساسية إلى 5، والنطاق الديناميكي إلى 15 DR، والسرعة إلى كيلوهرتز واحد.

حرك المنصة بلطف ذهابا وإيابا للحصول على أفضل رؤية للأوعية الدموية المبيضية وتحديد الشريان المبيض الذي يدخل الحجاب المبيضي، والأوعية النخاعية في النخاع المركزي، والأوعية القشرية حول الجريبات النامية. اضغط على Cine Store لحفظ الفيديو المعروض للمبيض والأوعية الدموية في وضع Power Doppler. لتمييز التدفق الشرياني عن الوريد، اضغط وضع دوبلر اللون.

العروض الحمراء تتدفق نحو المحول وتبتعد العروض الزرقاء عنه. الوعاء ذو السرعة المتوسطة الأعلى هو الشريان المبيض. اضغط على زر دوبلر الموجة النبضية PW لإظهار خطوط التاريخ العينة.

اضغط عليه مرة أخرى لتفعيل الموجة الطيفية لدوبلر. بعد وضع بوابة العينة في مركز لومن الوعاء، اضبط زاوية الرنين لتكون أقل من أو تساوي 60 درجة ومتوازية للتدفق باستخدام مقبض الزاوية. بالنسبة للشريان المبيض، ضع البوابة قبل دخوله إلى المبيض مباشرة.

بالنسبة للوعاء النخاعي، ضعه عند التفرع المركزي. بالنسبة للأوعية القشرية، ضعها عند قاعدة جريبة تنمو. اضغط على Cine Store لحفظ صورة الموجات فوق الصوتية وشكل الموجة الطيفية.

عند اكتمال التصوير، امسح جل الموجات فوق الصوتية من الخلف وأخرج الفأرة برفق من منصة التصوير. وضع الفأرة على وسادة تسخين حتى تستيقظ تماما. كشف تصوير دوبلر الخارجي عن زيادة واضحة في الأوعية النخاعية بعد ساعة واحدة من حقن الغونادوتروبين المشيمية البشرية، تلتها عودة إلى الوضع الطبيعي بعد ثماني ساعات ثم انخفاض إضافي بعد 12 ساعة من الحقن.

مكن تصوير دوبلر الملون من التمييز الواضح بين الشريان المبيض والوريد المبيضي وتحسين رؤية اتجاه تدفق الدم داخل الأوعية المبيضية. أظهرت موجات دوبلر التمثيلية لنمط PW دورات مميزة مع سرعات قليلة قابلة للقياس في الانقباض والنهاية الانبساطية في الشريان المبيض لفأر مستجيب للهرمونات، بينما أظهر الفأر غير المستجيب آثار إشارة منخفضة دون وجود موجة قابلة للكشف. بعد ساعة واحدة من حقن الغدد التناسلية المشيمية للإنسان، زادت سرعة تدفق الدم في الشريان المبيضي، والأوعية النخاعية، والأوعية القشرية في الفئران التي استجابت للتحفيز، لكن لم يلاحظ مثل هذا الارتفاع في الفأر غير المستجيب.

في الفئران غير المستجيبة، انخفضت السرعة في الأوعية القشرية إلى ما دون عتبة الكشف عند نقاط زمنية محددة تشير إليها بقيم مؤقتة معينة. باستخدام تصوير الموجات فوق الصوتية دوبلر، حددنا أن سرعة تدفق الدم في المبيض تزداد بسرعة بعد ارتفاع DLH في الفئران. يسمح تصوير دوبلر بالموجات فوق الصوتية بإجراء تقييم متكرر وغير جراحي لديناميكا الدم المبيضية خلال فترة ما قبل الإباضة، وهو ما لا تستطيع الطرق الأخرى تحقيقه.

بعد توصيف الديناميكا الدموية الطبيعية قبل الإباضة، يمكن للدراسات المستقبلية الآن استخدام هذا البروتوكول لفحص اضطرابات تدفق الدم في نماذج اضطرابات المبيض مثل متلازمة تكيس المبايض.