ديسمبر 30, 2025
تقدم هذه الدراسة بروتوكولا لإنشاء نموذج جرذان قابل للتكرار وقليل التوغل لجلطة الجيب السهمي العلوي الناتج عن كلوريد الحديد، باستخدام طريقة خياطة الحرير مع تصوير التباين بالليزر والموجات فوق الصوتية عالية الدقة للتقييم.
في مجالنا، تستخدم عدة طرق نمذجة لجلطة الجيوب السهمية العليا. ومع ذلك، تستخدم طريقة تحفيز كلوريد الحديد على نطاق واسع بسبب بساطتها وتكلفتها المنخفضة. نهدف إلى تحسين نموذج جلطة الجيب السهمي العلوي الناتج عن كلوريد الحديد من خلال تقليل الإصابة القشرية ورؤية جلطة الجيوب الأنفية.
للبدء، ضع مرهم العيون على كلتا عيني فأر مخدر واحلق شعر فروة الرأس بعناية. ثم، ثبت الفأر في وضعية الاستلقاء على منصة تشغيل القوارض باستخدام شريط طبي. حافظ على درجة حرارة الجسم عند حوالي 37 درجة مئوية باستخدام وسادة تدفئة.
عقم فروة الرأس المحلوقة جيدا باستخدام 5٪ بوفيدون-يود، ثم 75٪ كحول، وكرر العملية ثلاث مرات لكل مرة. بعد التأكد من عمق التخدير من خلال رد فعل ضغط إصبع القدم، قم بعمل شق جلدي محيطي بمقدار 15 ملم في فروة الرأس. باستخدام تشريح حاد، يتم فصل اللفافة الأساسية عن الشاحونة لكشف الجمجمة بالكامل.
قم بتخفيف الجمجمة باستخدام مثقاب القحف حتى يصبح الجيب السهمي العلوي مكشوفا بوضوح، بدءا من اللامبدا وتمتد 10 مليمترات أمامية على طول الدرز السهمي. استخدم تقنية الحفر المتقطع لتجنب تلف المادة الجافية الأساسية والجيوب السهمية العليا، وقم بري رأس الحفر بمحلول ملحي عادي بشكل متكرر لمنع الإصابة الحرارية للقشرة. بعد تصوير الظروف الأساسية، أطبق قطعة 10 ملم من خياطة حرير 2-0 منقوعة بمحلول كلوريد الحديدي 40٪ على سطح الجيب السهمي العلوي المكشوف لمدة خمس دقائق.
استبدل الغرز بقطعة مبللة حديثا وطبقها لمدة خمس دقائق أخرى. ثم اشطف الحقل الجراحي ب 0.5 ملليلتر من المحلول الملحي الطبيعي ثلاث مرات لإزالة بقايا كلوريد الحديد. أغلق الجلد باستخدام غرز متقطعة بخياطة حرير 4-0، وقم بتعقيم المنطقة بالبوفيدون-يودين.
راقب الفأر حتى يستيقظ تماما، ثم أعده إلى قفصه. قم بتشغيل نظام تصوير التباين بالليزر النقطي والبرمجيات المقابلة له، الإصدار الخامس من RF LSI. اضغط على زر الوضع المتقطع لتفعيل التصوير المباشر.
قم بضبط ارتفاع وموقع الجهاز حتى يصبح ليزر المؤشر في منتصف مجال الرؤية. ضع الفأر على منصة من الفوم، وعدل موقعه حتى يتوافق الجيب السهمي العلوي مع ليزر المؤشر. قم بضبط التكبير والتركيز حتى تظهر الصورة بوضوح.
اضبط الحدود السفلية والعليا لعتبة اللون الزائف لتحسين المظهر البصري لصورة اللون الزائف. حدد عائد دائري على الجيوب السهمية العليا، سجل تدفق الأوردة، وحفظ الصور الأصلية والصور شبه الملونة (شبه اللون). جهز الإيزوفلوران، جل الموجات فوق الصوتية، شفرات الحلاقة ذات الاستخدام الواحد، الأشرطة الطبية، وفحص جميع الأدوات المطلوبة.
تركيب محرك الاستحواذ ثلاثي الأبعاد على نظام التصوير. ثم قم بتركيب محول UHF 57X، وقم بتهيئة المحرك. بعد تخدير الجرذ، ضعه في وضع الاستلقاء على لوحة التصوير الحرارية المضبوطة على 37 درجة مئوية، وثبت الرأس والأطراف بلطف باستخدام أشرطة طبية.
ضع جل الموجات فوق الصوتية بشكل متساو على فروة الرأس المكشوفة. قم بضبط موضع واتجاه الفأر بالنسبة للمحول حتى يتم رؤية الجيب السهمي العلوي والجلطة داخل اللمعان بوضوح. التقاط صور مقطعية متتالية للجيب السهمي العلوي في المستوى السهمي باستخدام تصوير ثلاثي الأبعاد في وضع B بحجم خطوة 0.04 مليمتر، تليها صور مقطعية في المستوى الإكليلي باستخدام نفس الإعدادات.
استخدم وضع دوبلر الملون لمراقبة تدفق الدم في الجيب السهمي العلوي، وطبق وضع دوبلر الموجة النبضية لقياس سرعة تدفق الدم. توقف عن التخدير وراقب الفأر حتى يستيقظ تماما. ثم أعد الجرذ إلى قفصه.
وأخيرا، تصدير الصور التي تم الحصول عليها، وتحليلها باستخدام برنامج Vevo LAB. سجل أقصى مناطق المقطع العرضي السهمي والإكليل وحجم الجلطة في الجيب السهمي العلوي، بالإضافة إلى أقصى سرعة تدفق دم للجيب. بعد التطبيق الموضعي لكلوريد الحديد، كشف تصوير التباين بالليزر عن انخفاض كبير في تدفق الدم الموضعي في الجيب السهمي العلوي مقارنة بالنقطة الأساسية.
في اليوم السابع بعد العملية، أكد الموجات فوق الصوتية للحيوانات الصغيرة تكوين جلطة في الجيب السهمي العلوي مع إعادة تنشيط جزئي للضوء المضيء. أظهر الموجات فوق الصوتية النبضية دوبلر سرعة تدفق الدم القابلة للقياس داخل التجويف المتبقي للجيب السهمي العلوي. مكن التصوير بالموجات فوق الصوتية ثلاثي الأبعاد من القياس الحجمي لجلطة الجيب السهمي العلوي باستخدام شرائح صور متسلسلة بسماكة 0.04 مليمتر.
نموذجنا المحسن أقل تدخلا وأكثر توافقا مع التصوير بالموجات فوق الصوتية، مما يتيح تطويرا وتقييما علاجيا أكثر موثوقية ومباشرة. تأكد من أن تصوير التباين بالليزر بين العمليات يؤكد نجاح النموذج، وأن الموجات فوق الصوتية عالية الدقة بعد العملية تراقب ديناميكيا تكوين الجلطات، وتحللها، وإعادة تشكيل التلوين.
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية
تقدم هذه المقالة نموذجاً مطوراً للجرذان لدراسة تخثر الجيب السهمي العلوي (SSS) باستخدام تقنية الخياطة المغموسة في FeCl3. يقلل هذا البروتوكول من إصابة القشرة الدماغية ويعزز التوافق مع أنماط التصوير، مما يوفر منصة قابلة للتكرار وبأقل قدر من التدخل الجراحي لدراسة تخثر الأوردة الدماغية (CVT) وتقييم العلاجات المحتملة.
تُعد النماذج قبل السريرية الموثوقة لتخثر الأوردة الدماغية (CVT) ضرورية للأبحاث الانتقالية والتقييم العلاجي في مجال اكتشاف الأدوية الوعائية العصبية. يتيح نموذج تخثر الجيب السهمي العلوي المستحث بـ FeCl3 المعدل إجراء دراسات قابلة للتكرار، وبأقل قدر من التدخل الجراحي، ومتوافقة مع التصوير الطبي، مما يدعم الثقة التنبؤية في التحقق من الأهداف في المراحل المبكرة والحد من المخاطر الميكانيكية. وتعزز هذه المنصة عملية اتخاذ القرار بشأن محفظة الأدوية من خلال توفير بيانات كمية وطولية حول تكوين الخثرة وإعادة التصريف.
يتكامل هذا النموذج ضمن التسلسل الممتد من مرحلة الاكتشاف إلى المرحلة قبل السريرية، حيث يربط بين الدراسات الميكانيكية المبكرة وتقييم الفعالية الانتقالية للاستطبابات الوعائية العصبية.