Name: اختبار تسامح النيكوتين في المن باستخدام تجربة حمية الاصطناعي (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2008-05-14T16:17:00.000+00:00
Duration: 6 min 19 s
Description: اكتشف آليات تكيف المن مع النيكوتين في دراسة تفاعلات النبات والحشرات. يوضح هذا البحث كيف تطورت أفراس النحل المتأقلمة مع التبغ مقاومة أعلى للدفاعات الكيميائية النباتية.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

في هذه التجربة ، والمغلقة 4 المن الكبار في كوب صغير من البلاستيك. تتغذى من الحمية السائلة pipetted بين 2 طبقات من parafilm امتدت فوق الجزء العلوي من الكوب. بعد 3 أيام التغذية ، تتم مقارنة سمية الوجبات الغذائية التي تحتوي على تركيزات مختلفة من النيكوتين للسيطرة على الوجبات الغذائية عن طريق العد الكبار والمن اليرقات في كل كوب. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جعل الحلول التي تحتوي على السكروز و 20 الأحماض الأمينية. المن يمكن العيش على هذا النظام الغذائي ، والتكاثر عند مستوياتها الطبيعية ، ما لا يقل عن 1 في الاسبوع. يرجى الاطلاع على الملف المرفق للحمية الاصطناعي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قسامة 1 مل من هذا النظام الغذائي إلى 6 أنابيب إيبندورف مختلفة تحتوي على النيكوتين. التسمية لهم الاحترام لتركيزات مختلفة من النيكوتين المستخدمة ، والتي تتراوح بين 500μM - 0. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حدد 4 المن ، إما أحمر أو أخضر ، ووضعها في هذه الكؤوس التجريبية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عند اختيار المن ، فمن المهم أن تكون متسقة من العمر. عادة ، والبحث عن المن مشابهة من حيث الحجم واللون (الأحمر والمن الحصول على أكثر قتامة عندما هم من كبار السن). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تغطية كأس بقطعة من parafilm. أرفق النظام الغذائي بين 2 قطعة من parafilm. وتمتد بشكل جزئي على مستوى parafilm الثاني حول حواف الكأس. قسامة الحمية السائلة بين الطبقات ، وختم طبقة أعلى إلى أسفل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إبقاء هذه الكؤوس في غرفة الحشرات تحت الأضواء في الإضاءة طويلة يوميا لمدة 3 أيام ، وبعد ذلك الوقت يمكن جمع البيانات للتجربة. </li></ol> يرجى زيارة <a href="http://arjournals.annualreviews.org/doi/abs/10.1146/annurev.arplant.59.032607.092825" target="_blank">المراجعات السنوية للبيولوجيا النبات</a> للحصول على مزيد من المعلومات حول هذه الحصانة ومصنع لبروتوكول الحشرات بالأعشاب.

ليس لدى المؤلفين أي تعارض في المصالح للإفصاح عنه.

اختبار تسامح النيكوتين في المن باستخدام تجربة حمية الاصطناعي

Testing Nicotine Tolerance in Aphids Using an Artificial Diet Experiment

قد محطات upregulate إنتاج العديد من الأيضات seconday مختلفة استجابة لتغذية الحشرات. واحدة من هذه الأيضات ، النيكوتين ، ونعرف جيدا أن خصائص المبيدات. ردا واحدا من نباتات التبغ إلى الحيوانات العاشبة ، أو يجري gnawed عليها الحشرات ، هو زيادة إنتاج هذا قلويد أعصاب. هنا ، سوف نقوم شرح كيفية إعداد تجربة لمعالجة هذه مسألة ما إذا كان التبغ مكيفة سلالة من حشرة الخوخ الأخضر ، Myzus persicae ، يمكن أن يتسامح مع مستويات أعلى من النيكوتين من سلالة من هذه الحشرة التي لا تصيب في التبغ الميدان.

ويتجلى هذا في الفيديو ومقايسة ان الاختبارات على التسامح من النيكوتين إلى نوعين من المن الذي infests نباتات التبغ في مجال واحد والتي لا.

قد تزيد النباتات من تنظيم إنتاج العديد من المستقلبات الثانوية المختلفة استجابةً لتغذية الحشرات. ويُعد النيكوتين أحد هذه المستقلبات، وهو...

قد تنظم النباتات إنتاج العديد من المستقلبات الثانوية المختلفة استجابة لتغذية الحشرات. تتمثل إحدى استجابات نباتات التبغ للحيوانات العاشبة التي لا تتناولها الحشرات في زيادة إنتاج قلويد النيكوتين السام للأعصاب باستخدام النيكوتين. على سبيل المثال ، سأوضح كيفية إعداد تجربة لتقييم سمية المستقلبات الثانوية النباتية ضد حشرات المن.تكيفت سلالات معينة من MiSiS persky ، من الخوخ الأخضر للتخصص في التبغ المزروع. نفترض هنا أن هذه السلالات المتكيفة مع التبغ زادت من مقاومة النيكوتين على السلالات غير التكيفية. مرحبا ، اسمي جون رامزي.أنا طالب دراسات عليا في مختبر جورج جاندر في معهد بو طومسون لأبحاث النبات. سأريكم اليوم إجراء لقياس سمية مستقلبات النبات ضد حشرات المن. يتضمن هذا الإجراء إعداد نظام غذائي اصطناعي يهمه مستقلب النبات.في هذه الحالة ، يضاف النيكوتين بتركيزات متفاوتة ، حشرات المن في أقفاص ، بحيث تتغذى على هذا النظام الغذائي وتحسب حشرات المن بعد عدة أيام لقياس البقاء على قيد الحياة والخصوبة على تركيزات مختلفة من النيكوتين. لذلك دعونا نبدأ. مع التجربة.يمكننا تربية حشرات المن على أنظمة غذائية اصطناعية ، مع الاستفادة من أسلوب التغذية الذي يقومون فيه بإدخال نمط S متخصص في الأوعية الدموية النباتية ويستهلكون نظاما غذائيا من النسغ المتدفق. نقوم بإعداد نظام غذائي سائل مشابه لتلك التي تتغذى عليها A على نبات يتكون من السكروز والأحماض الأمينية لهذا المحلول. ثم نضيف تركيزات متفاوتة من مستقلب النبات.نحن مهتمون بفحص سمية النيكوتين في هذه الحالة. في هذه التجربة ، يتم وضع أربعة حشرات من المن البالغة في كوب بلاستيكي صغير. تتغذى من نظام غذائي سائل منزوع بين طبقتين من الأغشية الحيوية الممتدة فوق الجزء العلوي من الكوب بعد ثلاثة أيام.تتم مقارنة سمية التغذية للأنظمة الغذائية التي تحتوي على تركيزات مختلفة من النيكوتين بالوجبات الغذائية الضابطة عن طريق حساب حشرات المن البالغة واليرقات في كل كوب. حان الوقت الآن لإعداد النظام الغذائي التجريبي. لدي هنا محلول من السكروز و 20 من الأحماض الأمينية.يمكن أن تعيش حشرات المن وتتكاثر بشكل طبيعي في هذا النظام الغذائي لمدة أسبوع على الأقل. الآن قمت بنقل هذا النظام الغذائي في مليلتر واحد ، Alec Watts يحتوي على تركيزات مختلفة من النيكوتين من صفر إلى 500 ميكرومولار في هذه الأنابيب المصفاة ، ثم يتم اختيار أربعة حشرات من المن إما حمراء أو خضراء ووضعها في هذه الأكواب التجريبية. تستخدم فرشاة الرسم لرفع حشرات المن بدقة من الورقة ووضعها في الكوب التجريبي.عند اختيار حشرات المن ، من المهم اختيار حشرات من نفس الحجم العام واللون الأغمق ، مثل هذه الحشرات التي قد تكون أقدم وغير مناسبة لهذه التجربة. ثم سأقوم بتمديد الطبقة الأولى من الفيمس فوق الجزء العلوي من الكوب لاحتواء حشرات المن. بعد ذلك ، سأقوم بتقطيع 100 ميكرولتر من النظام الغذائي السائل بين طبقتي الطفيلي ثم قم بتمديد طبقة الطفيلي الثانية لتثبيتها حول حواف الكوب.لقد قمت بعمل فتحات الهواء هذه للتأكد من وجود تدفق هواء جيد خلال التجربة ، وسأضع هذا الكوب في حامل الأنبوب هذا وأضعه على رف في غرفة الحشرات تحت فترة تصوير ليوم طويل تحت الأضواء. لذا يمكننا هنا أن ننظر إلى نتائج التجربة، التي قمت بإعدادها قبل ثلاثة أيام بنفس طريقة التجربة التي أوضحتها للتو. لدي كوب واحد ، كل من حشرات المن الخضراء والحمراء على صفر ميكرومولار ، و 10 ميكرومولار ، و 100 ميكرومولار ، و 1000 ميكرومولار أو حمية نيكوتين مللي مولار.ويمكنك أن ترى للنظام الغذائي للتحكم صفر من النيكوتين الميكرومولار ، كل من حشرات المن الحمراء والخضراء على قيد الحياة والتكاثر. وبالمثل ، في النظام الغذائي 10 ميكرومولار ، لدينا عدد كبير من ذرية المن الأحمر. لا يزال لدينا بالغون أخضر ، لكن ليس لديهم الكثير من النسل.لذلك قد يشعرون بآثار النيكوتين ، حتى عند تركيز منخفض يصل إلى 10 ميكرومولار. هنا لا توجد حشرات من المن الخضراء البالغة على قيد الحياة في نظام غذائي مائة ميكرومولار من النيكوتين ، لكن حشرات المن الحمراء تعيش وتتكاثر على نفس مستوى التحكم. يمكنك أن ترى في النظام الغذائي الذي يحتوي على 1000 ميكرومولار النيكوتين.لا حشرات المن الخضراء ولا الحمراء قادرة على البقاء على قيد الحياة. بناء على ذلك ، يمكننا النظر في احتمال أن أحد التعديلات التي سمحت لسلالة MiSiS الحمراء بغزو التبغ في الحقل هو القدرة المعززة على إزالة السموم من النيكوتين. لقد أوضحنا لك للتو كيفية إعداد تجربة لاستخدام الأنظمة الغذائية الاصطناعية لقياس سمية المستقلبات الثانوية النباتية ضد الآفيس.عند إعداد هذه التجارب ، من المهم أن تتذكر اختيار الحشرات التي ليست فقط من نفس الحجم واللون ، ولكنها تأتي أيضا من نباتات في مراحل نمو مماثلة. هذا كل شيء. شكرا على المشاهدة ونتمنى لك السعادة في تجاربك.

testing-nicotine-tolerance-aphids-using-an-artificial-diet

Research

JoVE Journal

Biology

علم الأحياء

ويمكن اختبار مقاومة النباتات للمضغ الحشرات العاشبة في عدة طرق. هنا ، ونحن لشرح كيفية انشاء اختيار وتجربة لا للخيار مع نموذج Arabidopsis thaliana مصنع لتحديد المقاومة ضد الأنواع rapae Pieris الآفات.

لا خيار للاختيار و- فحوصات لاختبار مقاومة للحشرات thaliana ألف مضغ

المن ومرسلات فعالة للفيروسات النباتية. microinjection أولا بأول من الفيروس ، وهذا الإجراء سوف نظهر لكم اليوم ، هي تقنية تسمح للباحثين حقن الفيروس مباشرة في hemocoel من المن ، تجاوز الأمعاء ، واحدة من العقبات الرئيسية ل2 انتقال الفيروس بطريقة circulative. كما يستخدم نفس الأسلوب لحقن الرنا المزدوج الجديلة عن رني.

اختبار الحواجز الفسيولوجية لانتقال الفيروس عن طريق Microinjection في المن

يصف هذا الفيديو مقايسة تفضيل التذوق ، وهي طريقة سلوكية تستخدم لقياس الانجذاب أو التجنب تجاه المحاليل الملونة التي يكون مذاقها مختلفا من خلال تقييم لون بطن الذبابة بعد تناول المادة المفضلة. يوضح البروتوكول المميز الإجراء المستخدم لقياس تفضيل الذباب تجاه المحاليل ذات تركيزات السكروز المتفاوتة.

فحص تفضيل الذوق: طريقة لقياس سلوك التغذية في ذبابة الفاكهة

تم وصف اختبار سلوكي جديد للتحقيق في الاستجابات الذوقية قصيرة المدى لأجزاء فم النحل الطنان الذي يتحرك بحرية (Bombus terrestris) تجاه العناصر الغذائية والسموم في المحلول.

رواية السلوكية الفحص المعنية بالتحقيق في الردود ذوقي الفردي، بحرية يتحرك النحل تلعثم (<em&gt; Bombus تيريستريس</em&gt;)

الذوق هو عملية حسية مهمة تسهل الانجذاب إلى المواد المفيدة وتجنب المواد السامة.  يصف هذا البروتوكول مقايسة ابتلاع بسيطة لتحديد ذبابة الفاكهة التفضيل الذوقي لمركب كيميائي معين.

طعم الفحص تفضيل الكبار<em&gt; ذبابة الفاكهة</em

المن نيري عافص كولونيزيس على النباتات التي دافعت عن درجة عالية في الأسرة دوجباني (أبوسياناسي)، ويوفر العديد من الفرص لدراسة التفاعلات بين النبات-الحشرات. هنا، نحن نقدم سلسلة من البروتوكولات للحفاظ على النباتات والمن الثقافات، وتوليد وتحليل الجزيئي، والبيانات--أوميك نيري (أ).

الحفاظ على الثقافات البيولوجية وقياس التعبير الجيني في نيري عافص: نظام عدم-نموذج للتفاعلات بين النبات-الحشرات

هنا، نحن تصف بناء واستخدام نفق الرياح لرائحة وساطة فحوصات السلوكية بالحشرات. ويسهل تصميم نفق الرياح الإفراج عن مصادر رائحة بطرق عدة، مع أو بدون المحفزات البصرية. تجارب نفق الرياح طرق هامة لتحديد المواد الكيميائية المتفجرة النشطة سلوكيا.

نفق الرياح لرائحة بوساطة الحشرات فحوصات السلوكية

يوفر البروتوكول الحالي معلومات تعليمية لاستخدام دودة قرن التبغ Manduca sexta في أبحاث القنب.  تتضمن الطريقة الموضحة هنا جميع الإمدادات والبروتوكولات اللازمة لرصد التغيرات الفسيولوجية والسلوكية لنموذج الحشرات استجابة لعلاج الكانابيديول (CBD).

دودة قرن التبغ كنظام نموذجي للحشرات للدراسات ما قبل السريرية للقنب

يصف هذا البروتوكول مقايسة التغذية الملزمة لتقييم التأثير السام المحتمل للمادة الكيميائية النباتية على يرقات الحشرات حرشفية الأجنحة. هذا اختبار حيوي للحشرات قابل للتطوير بدرجة كبيرة ، وسهل لتحسين الجرعة شبه المميتة والمميتة ، والنشاط الرادع ، والتأثير الفسيولوجي. يمكن استخدام هذا لفحص المبيدات الحشرية الصديقة للبيئة.

تطوير نظام فحص التغذية لتقييم تأثير المبيدات الحشرية للمواد الكيميائية النباتية على Helicoverpa armigera

يقدم هذا البروتوكول نظام فحص حيوي محسن للأوراق المنفصلة لتقييم فعالية الفطريات المسببة للأمراض الحشرية (EPF) ضد من الخردل (Lipaphis erysimi (Kalt.)) ، وهي حشرة بارثينوجينية. تحدد الطريقة عملية جمع البيانات أثناء تجارب طبق بتري ، مما يمكن الباحثين من قياس ضراوة EPF باستمرار ضد حشرات المن الخردل والحشرات البارثينوجينية الأخرى.

تقييم تأثير مبيد الحشرات للفطريات المسببة للأمراض الحشرية ضد الحشرات العذرية ، من الخردل ، Lipaphis erysimi (Kalt.)

تقدم هذه الورقة بروتوكولا مفصلا لتربية فراشة الملفوف البيضاء في ظروف معملية خاضعة للرقابة مع نظام غذائي اصطناعي ، مما يسمح بالتلاعب الدقيق بالتغذية المبكرة والتعرض للسموم. تظهر النتائج التمثيلية كيف يمكن فحص سمية المعادن الثقيلة باستخدام هذا البروتوكول.

تربية فراشة الملفوف البيضاء (Pieris rapae) في ظروف خاضعة للرقابة: دراسة حالة مع تحمل المعادن الثقيلة

اكتشف آليات تكيف المن مع النيكوتين في دراسة تفاعلات النبات والحشرات. يوضح هذا البحث كيف تطورت أفراس النحل المتأقلمة مع التبغ مقاومة أعلى للدفاعات الكيميائية النباتية.

اختبار تسامح النيكوتين في المن باستخدام تجربة حمية الاصطناعي

استكشف المزيد من الفيديوهات