الإغلاق الانتقائي والدائم للشريان الدماغي الأوسط عند الفئران: نهج تجريبي لدراسة عجز الذاكرة الحركية والمكانية

تم تطوير نموذج جرذ للإغلاق الانتقائي الدائم للشريان الدماغي الأوسط (MCA) لدراسة قصور الذاكرة الحركية والمكانية. تتسم العديد من نماذج السكتة الدماغية بكونها أقل انتقائية، لذا يتيح هذا البروتوكول الرؤية المباشرة للوعاء الدموي والإغلاق الدقيق للجزء القاصي من الشريان الدماغي الأوسط. للبدء، قم بتجهيز الأدوات الجراحية المعقمة والنظيفة حول منصة المجهر المغطاة بقطعة قماش معقمة.

قم بكشف الجانب الوحشي الأيسر لجرذ Worcester المخدر والموضوع في وضعية الاستلقاء الجانبي بزاوية 180 درجة على منصة المجهر المبطنة، مع دعم الرأس بلفافة ناعمة. ثبت الرأس باستخدام شريط لاصق، ثم ضع قطرات مرطبة للعين.

قم بتثبيت الجفون مغلقة باستخدام شريط لاصق. أعد فحص درجة الحرارة الشرجية للتأكد من بقائها ضمن النطاق المثالي الذي يبلغ حوالي 37 degrees Celsius. قم بتعديل مصدر الحرارة إذا لزم الأمر.

قم بإزالة الشعر من منطقة تبلغ مساحتها 1.6 في 0.5 سنتيمتر بين المآق الجانبي والزنمة باستخدام جهاز إزالة شعر صغير أو شفرة حلاقة. قم بتطهير المنطقة المحلوقة باستخدام محلول غسيل كلورهيكسيدين بتركيز 2%، يليه محلول كلورهيكسيدين مائي بتركيز 0.2%. استخدم شفرة مشرط معقمة لإجراء شق جلدي وتحت جلدي بطول سنتيمتر واحد، مع الحفاظ على هامش قدره 0.3 سنتيمتر خلف المآق الجانبي وأمام الزنمة.

استخدم ملقطاً مرقئاً لإبعاد الجلد والطبقة تحت الجلد. بعد تحديد الفرع الصدغي الأوسط للأوعية الصدغية السطحية، قم بتخثير الوعاء الدموي باستخدام الكي الكهربائي. وباستخدام رافعة فريير، قم بجس القوس الوجنية.

قم بإجراء شق طولي في لفافة العضلة الصدغية. قم بتشريح العضلة الصدغية من الناحيتين الرأسية والذيلية للكشف عن العظمين الصدغي والجبهي وجزء من العضلة الماضغة. قم بعزل القوس الوجنية طولياً.

قم بإزالة قطعة بطول 0.5 سنتيمتر تقريبًا من القوس الوجني. اتخذ الاحتياطات المناسبة أثناء تنفيذ هذا الإجراء. استخدم مثقابًا دائريًا مطليًا بالألماس لحفر العظم الصدغي الجانبي خلف موقع إزالة القوس الوجني مباشرة، مع الري المتقطع بمحلول 0.9%saline.

أثناء الحفر، اترك طبقة عظمية متبقية رقيقة متصلة بالأم الجافية. استخدم ملقط Halsted لإزالة الشظايا المتصلة المتبقية بلطف. استخدم إبرة فائقة الدقة لفتح الأم الجافية.

حدد الوريد الدماغي السفلي، والشريان الدماغي الأوسط، أو MCA، والفرع القاعدي والأكثر سمكاً لـ MCA في المركز. استخدم حامل إبر دقيق لتمرير خيط جراحي من البولي بروبيلين 8.0 غير قابل للامتصاص حول MCA، ثم أغلق الوعاء عن طريق ربط ثلاث عقد حوله. بعد التأكد من عدم وجود تدفق دموي في المصب، استخدم إبرة فائقة الدقة للتحقق من وجود فروع إضافية لـ MCA لربطها في حال كانت موجودة.

قم بري التجويف بمحلول ملحي. أجْرِ إرقاءً للدم باستخدام الكي الكهربائي أو الضغط اللطيف. بعد سد الشريان الدماغي الأوسط (MCA) وإغلاق الأم الجافية، أعد تقريب طبقة العضلات العميقة وخيِّط لفافة العضلة الصدغية باستخدام خيط جراحي قابل للامتصاص 4-O.

استخدم خيوط جراحية من مادة polyglactin 910 مقاس 4-0 قابلة للامتصاص لخياطة الطبقة تحت الجلد وطبقة الجلد بنمط مستمر. أجرِ التقييم بعد الجراحة في أيام محددة. كانت درجات الوظيفة الحركية في اختبار القوام في اليوم السابع بعد الجراحة أعلى بكثير في الحيوانات التي خضعت لسد الشريان المخي الأوسط (MCA occlusion) مقارنة بالحيوانات التي خضعت للجراحة الوهمية (sham animals).

أظهرت الحيوانات التي خضعت لسد الشريان المخي المتوسط (MCA) انخفاضاً في استكشاف الجسم المنقول في اليوم الثامن بعد العملية مقارنة بحيوانات المجموعة الضابطة (sham). يساعد هذا البروتوكول الباحثين على دراسة نقص التروية القشري الانتقائي وتأثيراته على الوظيفة الحركية والذاكرة المكانية. ويكمن التحدي الرئيسي في إجراء عملية استئصال جزء من الجمجمة بأمان وتحديد الشريان المخي المتوسط بشكل صحيح.

يمكن للدراسات المستقبلية استخدام هذا النموذج لاختبار العلاجات ودراسة النتائج الوظيفية والنسيجية على المدى الطويل.