Name: الماوس البشرة الجذعية العصبية خلية كريست (EPI - NCSC) الثقافات (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2008-05-09T01:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 29 s
Description: تعلم عزل الخلايا الجذعية العصبية الظهارية من جريبات شعر الفئران باستخدام التفريز الدقيق. تُهاجر الخلايا خلال 3-4 أيام لتساعد في دراسة تطور العصب الظهاري.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

بدعم من : USPHS منح NS38500 ، المعهد الوطني للاضطرابات العصبية والسكتة الدماغية ، المعاهد القومية للصحة بالولايات المتحدة الأمريكية ، التكنولوجيا الطبية الحيوية التحالف جنوب شرق ويسكونسن ، Milwauke ، ويسكونسن ، الولايات المتحدة الأمريكية ؛ بريون Riesch مؤسسة الشلل ، وميلووكي ، ويسكونسن ، الولايات المتحدة الأمريكية ؛ ترتيب الشقيق النسور ، والغرب الأوسط الفصل ، الولايات المتحدة الأمريكية ؛ الوطنية لاصابة النخاع الشوكي الرابطة ، الفصل ميلووكي ، الولايات المتحدة الأمريكية ، شمال شرق انكلترا معهد الجذعية الخليوي ، جامعة نيوكاسل في المملكة المتحدة.

تشريح من الانتفاخ من الكبار المسام الشارب ماوس <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نحن نستخدم 10 أسابيع إلى 6 أشهر من العمر الفئران. الفئران الأصغر الغلة غالبا ما تكون أكثر الخلايا. الموت ببطء والفأر حيوان تغرق بالكامل في خليط من betadine 01:01 (محلول اليود) وبيروكسيد الهيدروجين (المتوفر من الصيدلية) لحوالي 3 دقائق. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بخ كامل الماوس ، لا سيما في منطقة الوجه ، مع الايثانول 75 ٪ ، وحمل الماوس لمجهر تشريح هود في التدفق الصفحي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تشريح منصات الطولي ، وتجنب القطع بعناية في بصيلات الشعر ، وحمام سباحة في HBSS. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تشريح بصيلات الطولي وحمام سباحة في HBSS في درجة حرارة الغرفة. القيام بذلك عن طريق عقد الجلد بجانب بصيلات الشعر مع ملقط ، ومن ثم قطع جميع أنحاء جراب مع المقص مباشرة. قطع عميق لتجنب اصابة بصيلات الشعر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> رفع جريب شعرة شعرة من لوحة ووضعها في لوحة جديدة مع HBSS الطازجة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تدفق adipous فضفاضة والنسيج الجلدي مع النافورات من العازلة ، وحتى المسام نظيفة ضئيلة للغاية. إذا لزم الأمر ، وقطع العصب للجريب شعرة وإزالة الأنسجة الملتصقة عن طريق كشط والهبات المتكررة HBSS. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> دبوس شعر على تنظيف follilce Sylgard المغلفة الزجاج طبق بتري باستخدام الإبر التنغستن شحذ ، وذلك باستخدام microforceps عن التمسك الجزء الجلد المجاور للجريب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قطع شعرة جراب longitudically مع microblade. تجنب قطع عميق جدا ، حيث سيؤدي ذلك إلى إصابة انتفاخ. إزالة الدم مع النافورات المتكررة HBSS حتى ذهب. ظهور الدم يعتبر مؤشرا جيدا على أن خفض كانت عميقة بما فيه الكفاية. إذا لم يتم خفض longitudial طويلة بما فيه الكفاية ، يجوز إطالتها مع microscissors عازمة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> اجراء خفض عرضية فوق مستوى الجيوب الكهفية ، وبعد ذلك بخفض ثان على مستوى عرضية داخل تجويف حلقة ، على مقربة من الجلد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> سترى الآن انتفاخ داخل الكبسولة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الاستيلاء على وضع حد لكبسولة من الكولاجين مع ملقط وطرح انتفاخ بإبرة التنغستن عازمة. سترى الآن الكبسولة الفارغة وانتفاخ معزولة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عزل تجمع الانتفاخات في صفيحة ثقافة منفصلة في HBSS في درجة حرارة الغرفة. تأكد من عدم الأنسجة الأخرى هي تلوث الانتفاخات المجمعة. </li></ol> ثقافة Explants انتفاخ <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> معطف 35 ملم مع لوحات ثقافة الكولاجين الكولاجين من خلال وضع 50 و 10 ميكرولتر ميكرولتر العقيمة كلوريد الصوديوم 6 ٪ بجانب بعضها البعض. تخلط جيدا مع الماصة Pasteyr المزدوج عازمة والدفع باتجاه حافة صفيحة الثقافة. يحضن بين عشية وضحاها في dessicator نظيفة ، ولكن لا تدع الجافة. قبل الاستخدام ، لوحات شطف مع المياه المالحة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قبل احتضان الثقافة لوحات الكولاجين المغلفة وتشطف لحوالي 3 دقائق مع متوسط ​​الثقافة. مستنبت يتكون من 85 ٪ الفا تعديل MEM ، و 10 ٪ مصل بقري جنيني و 5 ٪ اليوم استخراج الجنين الفرخ 11. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد إعادة حضانة ، وإزالة لوحات مستنبت من الانتفاخات وإضافة عدة مع متوسط ​​أقل قدر ممكن. إزالة الزائدة متوسطة الثقافة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> احتضان لمدة 1 ساعة ، ولكن لم يعد ، في الخلية الحاضنة في جو مرطب مع الأكسجين 10 ٪ و 5 ٪ CO 2. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد 1 ساعة ، إضافة بلطف 1.5 مل من المتوسط ​​الثقافة. ينبغي explants انتفاخ التمسك التحتية الكولاجين. استبدال 50 ٪ من متوسط ​​الثقافة اليومية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في غضون 3 -- 4 أيام ، وسوف الخلايا الكثيرة الارتحال الهجرة من explants انتفاخ. علما التشكل على نجمي ، حركية ، وعدم وجود الغالبة من خلية خلية الاتصالات. خلال الأيام القليلة المقبلة ، سيكون أكثر الخلايا الهجرة ، وهاجر وسوف تتكاثر الخلايا بسرعة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة انتفاخ 2 -- 3 أيام بعد ظهور EPI - NCSC الهجرة بإبرة التنغستن شحذ. إذا ترك الانتفاخات أطول ، فإنها تميل إلى تسطيح ويجعل من المستحيل الحصول على برنامج التحصين الموسع ، نقية NCSC الثقافات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> المهم : خلايا نادرة مع التشكل بالارض ، والتي أصبحت واضحة في بعض الأحيان عدة أيام في وقت لاحق من البرنامج الموسع للتمنيع ، NCSC ، والتي هي أقل متحركة وغير EPI - NCSC ، ولكن المفترض الخلايا الجذعية البشرة / الأسلاف. الثقافات التي تتكون من هذه الخلايا ، أو الثقافات المختلطة التي تحتوي على برنامج التحصين الموسع ، والمفترض NCSC الخلايا الجذعية البشرة / الأسلاف يجب أن يتم التخلص منها. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تلميح : لا تبقي الخلايا لفترة طويلة جدا في المتوسط ​​يزدرع الابتدائية ، كما أنها تميل إلى التفريق في كثافة الخلايا بسرعة عالية ، وبسبب مزعومة autocrine / نظير الصماوي النمو يشير عامل. </li></ol>

<ol><li>Sieber-Blum, M., Grim, M., YF, H. u, Szeder, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pluripotent+neural+crest+stem+cells+in+the+adult+hair+follicle%5BTitle%5D)+AND+%22Dev.+Dyn%22%5BJournal%5D)">Pluripotent neural crest stem cells in the adult hair follicle.</a> Dev. Dyn. 231, 258-269 (2004).</li>
<li>Sieber-Blum, M., Grim, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+adult+hair+follicle+-+cradle+for+pluripotent+neural+crest+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Birth+Defects+Research+%28Part+C%29%22%5BJournal%5D)">The adult hair follicle - cradle for pluripotent neural crest stem cells.</a> Birth Defects Research (Part C). Tuan, R., Grim, M. 72, 162-172 (2004).</li>
<li>Sieber-Blum, M., Schnell, L., Grim, M., Schneider, R., Schwab, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+epidermal+neural+crest+stem+cell+%28EPI-NCSC%29+grafts+in+the+lesioned+spinal+cord%5BTitle%5D)+AND+%22Pub%22%5BJournal%5D)">Characterization of epidermal neural crest stem cell (EPI-NCSC) grafts in the lesioned spinal cord.</a> Pub. 32, 67-81 (2006).</li>
<li>Hu, Y. F., Zhang, Z. -J., Sieber-Blum, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+epidermal+neural+crest+stem+cell+%28EPI-NCSC%29+molecular+signature%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">An epidermal neural crest stem cell (EPI-NCSC) molecular signature.</a> Stem Cells. 24, Epub ahead of print 2692-2702 (2006).</li>
</ol>

بحكم قدرتها على الهجرة ، ويمكن أن تكون معزولة EPI - NCSC كما يبلغ عدد سكانها نقية للغاية من الخلايا الجذعية ، التي يمكن توسيعها في المختبر. كبقايا الجنينية في موقع الكبار ، EPI - NCSC المرشحين يحتمل أن تكون جذابة بالنسبة لمستقبل العلاجات البديلة للخلية ، الهندسة الطبية و / أو الطب التجديدي. لقد اختبرنا EPI - NCSC في نموذج الفأر من اصابات الحبل الشوكي ، حيث أنها تظهر الصفات المرغوب فيه. من خلال التعبير الجيني التنميط التي LongSAGE (www.ncbi.nlm.nih.gov / الجغرافية ، سلسلة عدد GSE4680) أظهرنا ذلك ، كما ...

الماوس البشرة الجذعية العصبية خلية كريست (epi - ncsc) الثقافات

Mouse Epidermal Neural Crest Stem Cell (EPI-NCSC) Cultures

EPI - NCSC هي من مخلفات العصبية الجنينية للقمة في مكان غير أخلاقي ، وانتفاخ في بصيلات الشعر. هم الخلايا الجذعية multipotent التي لديها خاصية فسيولوجية لتوليد مجموعة واسعة من أنواع الخلايا المختلفة ، بما في ذلك الخلايا العصبية ، الخلايا العصبية الداعمة ، وخلايا العضلات الملساء والعظام / خلايا الغضاريف والخلايا الصباغية. EPI - NCSC يمكن الحصول عليها بسهولة في الجلد وشعر كما يمكن عزل السكان نقية للغاية من الخلايا الجذعية. هذا الفيديو يوفر بروتوكول مفصلة لإعداد الماوس EPI - NCSC الثقافات من بصيلات ضئيلة للغاية. إزالة لوحة من الخط الطولي ماوس الكبار ، وتشريح بصيلات الطولي. المسام تقطع طوليا ثم في وقت لاحق وبشكل مستعرض فوق وتحت منطقة انتفاخ. إزالة انتفاخ من كبسولة الكولاجين وضعت في لوحة الثقافة. EPI - NCSC بدء الهجرة من انتفاخ explants 3 إلى 4 أيام في وقت لاحق.

نعرض هنا لدينا وسيلة لعزل الماوس البشرة الجذعية العصبية قمة الخلايا (EPI - NCSC). الأسلوب الذي ينطوي على تشريح المسام الدقيقة ضئيلة للغاية ، وعزل انتفاخ placeing عليه في زراعة الأنسجة. EPI - NCSC بدء الهجرة من explants انتفاخ على الطبقة التحتية في غضون 3 -- 4 أيام.

الماوس البشرة الجذعية العصبية خلية كريست (EPI - NCSC) الثقافات

تُعد خلايا EPI-NCSC بقايا من العرف العصبي الجنيني في موقع بالغ، وهو انتفاخ البصيلات الشعرية. وهي خلايا جذعية متعددة القدرات تمتلك...

مرحباً، أنا مايا سيبو بلوم من معهد الوراثة البشرية ومعهد شمال شرق إنجلترا للخلايا الجذعية بجامعة نيوكاسل. وهذا الزميل من كلية الطب في ويسكونسن. سنعرض لكم اليوم إجراءنا الخاص بتحضير المستنبتات النسيجية (Explan) من الجريبات المبيضية للفئران.تعتبر أجنة الدجاج (B Explan) هي الأنسجة الأولية لتحضير مستنبتات الخلايا الجذعية العصبية القمية للبشرة. يتضمن هذا الإجراء تشريح وسادة الشوارب والتشريح المجهري لبصيلات الشعر، ثم عزل البصيلات (BULs) ووضعها في طبق استنبات. لذا، فلنبدأ.تبدأ هذه العملية بتشريح منطقة الانتفاخ (bulge) من بصيلات شارب الفأر البالغ. عادةً ما نستخدم فئرانًا تتراوح أعمارها بين شهرين وستة أشهر، ومع ذلك، تميل الفئران الأصغر سنًا إلى تقديم عدد أكبر من الخلايا الجذعية. يتم تخدير الحيوانات وغمرها بالكامل في خليط بنسبة واحد إلى واحد من Betadine وبيروكسيد الهيدروجين لمدة ثلاث دقائق تقريبًا للتطهير، ثم يتم رش الفأر بالكامل، وخاصة منطقة الوجه، بـ 75% ethanol ونقل الفأر إلى مجهر التشريح.في غطاء التدفق الصفائحي، قم بتشريح وسادات WHI بعناية، مع تجنب القطع في بصيلات الشعر، ثم ضعها في محلول ملحي متوازن من نوع Hanks في درجة حرارة الغرفة. ولتشريح جريبات whi، أمسك الجلد المجاور للجريب باستخدام الملقط، ثم قص حول الجريب باستخدام مقص مستقيم. قم بالقص بعمق.لتجنب إصابة بصيلات الشعر، ارفع جريب الشعرة من وسادة الشوارب وضعه في طبق جديد. باستخدام محلول HBSS طازج، اسحب الجريبات في الطبق نفسه. قم بتثبيت جريب شعرة باستخدام ملاقط وإبر مدببة على طبق بتري زجاجي مطلي بواقٍ حريري يحتوي على محلول HBSS.قم بغسل الأنسجة الدهنية السائبة والأنسجة الجلدية بدفقات من المحلول المنظم حتى تصبح بصيلة الشارب نظيفة. إذا لزم الأمر، اقطع العصب الواصل إلى بصيلة الشارب وقم بإزالة الأنسجة الملتصقة عن طريق الكشط والغسل المتكرر بمحلول HBSS. اقطع بصيلة الشارب طولياً باستخدام شفرة دقيقة.تجنب القطع بعمق زائد لأن ذلك سيؤدي إلى إصابة الانتفاخ. قم بإزالة أي دم عن طريق رش محلول HBSS بشكل متكرر حتى يختفي. ويعد ظهور الدم مؤشراً جيداً على أن القطع كان بالعمق الكافي.بعد ذلك، قم بإجراء قطع مستعرض فوق مستوى الجيب المخروطي، ثم قم بإجراء قطع مستعرض ثانٍ عند المستوى الموجود داخل الجيب الحلقي بالقرب جداً من الجلد ضمن قطعة الجريب المعزولة. ستظهر لك الآن البروزات داخل المحفظة. انظر، ها هي هناك.أمسك طرف الكبسولة باستخدام الملقط وقم بإزالة الانتفاخ. ستظهر لك الآن الكبسولة الفارغة ومجموعة الانتفاخات المعزولة. تُحفظ الانتفاخات المعزولة في طبق زراعة منفصل يحتوي على HBSS في درجة حرارة الغرفة.تأكد من عدم وجود أي أنسجة أخرى تلوث النتوءات المجمعة. في هذه المرحلة، يمكن استزراع نباتات النتوءات قبل الاستزراع في نباتات bul. يتم طلاء أطباق استزراع بقطر 35 millimeter بالكولاجين عن طريق وضع قطرات بحجم 50 microliter من الكولاجين و10 microliter من المحلول المعقم.محلول ملحي بتركيز 6% بجانب بعضهما البعض. اخلط جيداً باستخدام ماصة باستير مثنية مرتين وادفع الخليط نحو حافة طبق الزرع، ثم حضن العينات طوال الليل في بيئة نظيفة مع الحرص على عدم جفافها. ونستخدم لهذا الغرض مجففاً يحتوي على طبق من الماء في القاع.في اليوم التالي، وهو يوم الزرع. اشطف الأطباق بمحلول ملحي، ثم قم بحضنها مسبقاً في وسط الزرع داخل الحاضنة لمدة ثلاث ساعات تقريباً، باستخدام أطباق زرع مغلفة بالكولاجين ومغسولة. يتكون وسط الزرع من 85% alpha modified MEM، و 10% fetal bovine serum، و 5% day 11 chick embryo extract.بعد فترة التحضين المسبق، قم بإزالة وسط الزرع من الأطباق وأضف عدة BULs مع أقل كمية ممكنة من الوسط. قم بإزالة وسط الزرع الزائد. حضن العينات لمدة ساعة واحدة في حاضنة خلايا في جو رطب يحتوي على 10%oxygen و 5%CO2.بعد مرور ساعة واحدة، أضف 1.5 milliliter من الوسط الزراعي ببطء. يجب أن تلتصق نباتات Medium CHE بالطبقة التحتية من كولاجين col؛ استبدل 50% من الوسط الزراعي يومياً. حسناً، لنبدأ الآن.والآن نلقي نظرة على المزارع الخلوية. فخلال ثلاثة إلى أربعة أيام، ستهاجر خلايا ذات قدرة عالية على الهجرة من كرات الفحص. يرجى ملاحظة شكلها النجمي والغياب السائد للاتصالات بين الخلايا.خلال الأيام القليلة القادمة، ستهاجر المزيد من الخلايا، وستتكاثر الخلايا المهاجرة بسرعة، بما في ذلك خلايا نادرة ومهمة ذات شكل مسطح، والتي تظهر أحيانًا بعد عدة أيام من ظهور خلايا العرف العصبي البشروي. كما تُلاحظ أحيانًا خلايا جذعية في هذه المزارع؛ وهذه الخلايا ليست خلايا جذعية للعرف العصبي البشروي، بل هي بدلاً من ذلك خلايا جذعية بشروية مفترضة أو خلايا سلفية أقل حركة، لذا يجب التخلص من المزارع التي تتكون من هذه الخلايا.لقد عرضنا لكم للتو كيفية تحضير مستنبتات قطعة المنتفخ (bulge explan) التي تحتوي على خلايا جذعية عصبية بشرية من البشرة. ونظراً لأن الخلايا العصبية تتميز بقدرة عالية على الهجرة، فإنها ستغادر قطعة المنتفخ في غضون ثلاثة إلى أربعة أيام. وبعد عملية الزرع، يتم إزالة المنتفخ، لتبقى المجموعة النقية من الخلايا العصبية في طبق المستنبت.عند إجراء هذه العملية، من المهم تذكر تعقيم الفأر بعناية لتجنب التلوث. كما يجب القطع بعمق في وسادة القدم لتفادي إصابة الجريبات. وفيما يتعلق بالمزارع الخلوية، من المهم التمييز بين المقطر المهاجر، وخلايا العرف العصبي، والخلايا الكيراتينية غير المهاجرة ذات الشكل المرصوف.هذا كل شيء. شكراً للمشاهدة وبالتوفيق في تجاربكم.

mouse-epidermal-neural-crest-stem-cell-epi-ncsc-cultures

Research

JoVE Journal

Biology

علم الأحياء

هذا الفيديو يصف الطريقة المستخدمة لعزل neuroprecursors من القشرة النامية من الفئران الجنينية. ويرد الإجراء لإزالة الأجنة من الرحم ، وتشريح الانسجة القشرية ، وهضم القشرة الدماغية المعزولة.

ثقافة العصبية الماوس السلائف الخلايا الجذعية

لزراعة الخلايا الجذعية العصبية قمة (NCSC) في المختبر ، مطلوب المتوسطة الخاصة (NCSCM). جزء أساسي من NCSCM الفرخ هو استخراج الجنين (CEE). نحن هنا وصف دقيق تقنيات لإنتاج كمية من أوروبا الوسطى والشرقية إلى أقصى حد نوعية نقية وعالية ، بما في ذلك تفاصيل مثل العزلة ، والنقع ، الطرد المركزي ، وعمليات الترشيح.

إنتاج استخراج الجنين الفرخ لزراعة الخلايا الجذعية العصبية الفئران كريست

ووصف سريع ، طريقة سليمة قابلة للاستمرار في عزل الخلايا الجذعية البالغة الظهارية من الجلد البشري. الأسلوب يستخدم الهضم الأنزيمي مصفوفة الكولاجين الجلد ، تليها نتف من بصيلات الشعر وعزلة تعليق خلية واحدة أو شظايا الأنسجة للثقافة الخلية.

العزلة وثقافة الكبار الخلايا الجذعية الظهارية من الجلد البشري

تقدم هذه المقالة قوية لبروتوكول العزلة وثقافة العصبية من الخلايا الجذعية قمة بصيلات الشعر البشري.

العزلة وثقافة العصبية الخلايا الجذعية من بصيلات الشعر كريست الإنسان

العزلة من قمة العصبية الجنينية من الأنبوب العصبي يسهل...

العزلة والثقافة من الخلايا العصبية كريست من الأنبوبة العصبية الجنينية الفئران

قمة العصبية (NC) الخلايا المشتقة من الخلايا الجذعية المحفزة الإنسان (hPSC) لديها امكانات كبيرة لنمذجة التنمية البشرية والمرض والعلاجات البديلة للخلية. هنا، والتكيف خالية من التغذية للاستخدام على نطاق واسع...

خالية من التغذية اشتقاق الخلايا العصبية كريست السلف من افرة القوة البشرية الخلايا الجذعية

الظهارية إلى الانتقال اللحمة المتوسطة (EMT) تسمح للسرطانات بأن تصبح غازية. للتحقيق في EMT ، يتم وصف نموذج مختبري قائم على الخلايا الجذعية العصبية (NSC) خال من المصل والإنزيمات. يسمح هذا النظام الموحد بالتقييم الكمي والنوعي لهجرة الخلايا والتعبير الجيني والبروتيني. النموذج مناسب لاكتشاف الأدوية.

نموذج الانزيمات والمصل خالية من العصبية الثقافة الخلايا الجذعية لEMT التحقيق مناسبة للاكتشاف المخدرات

الهدف من هذا البروتوكول هو عزل الخلايا القرنية البشرة من الجلد الظهري للفئران البالغة لمجموعة متنوعة من التطبيقات النهائية مثل البيولوجيا الجزيئية، والكيمياء الحيوية، وفرز الخلايا المنشطة الفلورية، والاستخدامات الأولية في المختبر (على سبيل المثال، clonogenic الخلايا الكيراتينية).

عزل الخلايا الكيراتينية البشرة الماوس وثقافتهم في المختبر Clonogenic

هنا، نحن نقدم تقنية microsurgical رواية لعزل الخلايا الجذعية العصبية من الماوس الجنين ه13 ganglionic نيافة.

العزلة والثقافة من الخلايا الجذعية الجنينية الماوس العصبية

يصف هذا البروتوكول تشريح وثقافة خلايا الجمجمة العصبية القحفيه من نماذج الفئران ، وذلك في المقام الأول لدراسة هجره الخلايا. نحن وصف تقنيات التصوير الحية المستخدمة وتحليل التغيرات السرعة وشكل الخلية.

تشريح والثقافة وتحليل خلايا الجمجمة العصبية الابتدائية من الماوس لدراسة الخلية كريست العصبية الترقيم والهجرة

نقدم بروتوكول تمايز ثلاثي الأبعاد (3D) في المختبر يولد مجالات عصبية ذات حجم قابل للتكرار لإنتاج خلايا قمة عصبية قحمية من الخلايا الجذعية الجنينية للفأر. نوضح أن هذه المنهجية تقلل من التباين مقارنة بالبروتوكولات السابقة وكيف يمكن استخدامها في الفحص متعدد الإرسال لدراسة تطور خلايا القمة العصبية القحفية.

خلايا القمة العصبية القحفية ثلاثية الأبعاد في بروتوكول التمايز في المختبر للفحص متعدد الإرسال

تعلم عزل الخلايا الجذعية العصبية الظهارية من جريبات شعر الفئران باستخدام التفريز الدقيق. تُهاجر الخلايا خلال 3-4 أيام لتساعد في دراسة تطور العصب الظهاري.

الماوس البشرة الجذعية العصبية خلية كريست (EPI - NCSC) الثقافات

استكشف المزيد من الفيديوهات