جعل التصحيح ، وماصات أقطاب شارب مع بولير برمجة

أصبحت الماصات الشعرية الزجاجية منتشرة في كل مكان في المختبرات لمجموعة متنوعة من التقنيات ، مثل التثقيب الكهربائي أحادي الخلية ، والحقن الدقيق للحمض النووي ، والفيزيولوجيا الكهربية لمشبك التصحيح لإعداد أقطاب مشبك التصحيح الشعرية الزجاجية للتسجيلات أو يتم سحب زجاج السيليكات على قطبي قابل للبرمجة. أطراف القطب الكهربائي مطلية بالشمع ، ثم يتم تلميع الأطراف بالنار وتخزينها للاستخدام في المستقبل. مرحبا ، أنا ميريام جودمان من قسم علم وظائف الأعضاء الجزيئي والخلوي في جامعة ستانفورد.

في هذا الفيديو، سأوضح كيفية صنع ماصات مشبك التصحيح وأقطاب كهربائية حادة للفيزيولوجيا الكهربية. كانت الأقطاب الكهربائية الزجاجية الدقيقة ، والتي تسمى أيضا الماصات ، العمود الفقري للفيزيولوجيا الكهربية لعقود. اليوم ، هذه الماصات مصنوعة من الشعيرات الدموية الزجاجية باستخدام سحب قابل للبرمجة.

لذلك دعونا نبدأ. لصنع ماصات مشبك التصحيح ، نستخدم حرير الخنزير Sutter في الشعيرات الدموية النظيفة والخالية من الغبار ، ونستخدم مجتذب القطب الكهربائي الصغير Sutter P تسعة سبعة ملتهبين. يعد كتاب الطبخ ماصة سوتر مرجعا ممتازا لتطوير برامج سحب مناسبة.

للبدء ، ارفع غطاء الغبار على المجتذب. ثم خذ أنبوبا شعريا زجاجيا واحدا من الصندوق. تأكد من استبدال الغطاء لتقليل تراكم الغبار.

بعد ذلك ، بيد واحدة ، حرك الشعيرات الدموية في الأخدود على جانب واحد من الفتيل ، وشد المشبك قليلا. في هذه المرحلة ، يجب أن يكون المشبك ضيقا بدرجة كافية لمنع الأنبوب من السقوط ، ولكنه فضفاض بدرجة كافية بحيث يمكنك تحريكه في الأخدود. الآن ، حرر التوقف المعدني الزنبركي على نفس الجانب.

ثم بإبهامك والسبابة ، أمسك الألسنة المعدنية المرفقة بالجزء السفلي من كلا الناقلتين. حرر التوقف المعدني الزنبركي الآخر. اسحب الناقلات معا بقدر ما ستذهب وثبتها في مكانها بيد واحدة.

بعد ذلك ، حرك الأنبوب من خلال مبيت الفتيل في أخدود الناقل على الجانب الآخر. تجنب دفع الزجاج إلى خيوط التسخين. شد المشابك على كلا الجانبين.

يجب أن تكون ضيقة بما يكفي لتثبيت الناقلات في مكانها ، ولكن ليست ضيقة جدا بحيث يتم سحق الزجاج. الآن ، أغلق غطاء الغبار واضغط على الزر الأخضر. يتم تشكيل ماصات عمودية ملحوظة لتسجيلات مشبك التصحيح باستخدام برنامج اقتراع من خمس خطوات مع حرارة وسرعة تنازلية في كل خطوة وعمود صغير في الخطوة النهائية.

يستخدم هذا البرنامج الحرارة والجاذبية. إجراء صنع أقطاب كهربائية حادة متشابه جدا ، ولكن في هذه الحالة ، نستخدم الشعيرات الدموية الزجاجية الرقيقة من شركة Warner Instruments التي يبلغ قطرها الخارجي ملليمترا واحدا وقطرها الداخلي 0.78 ملم. نطبق أيضا برنامج سحب يستخدم محركا بالإضافة إلى الحرارة والجاذبية عند الانتهاء من برامج السحب.

ارفع غطاء الغبار وفك كلا المشابك وقم بإزالة الماصة النهائية. ثم ضع الماصات في صندوق عمل. يمكن صنع الصندوق عن طريق لصق شريط من الرغوة على رف صندوق طرف الماصة البلاستيكية ، ثم قطع ستة إلى ثمانية شقوق في الرغوة.

أدخل الماصات في الشقوق. بمجرد أن يمتلئ الصندوق بالماصات المسحوبة، انتقل إلى خطوة تلميع الحريق لتلميع الماصات بإشعال النار. قم بإعداد جهاز تشكيل صغير مع خيوط تسخين بلاتينية يتم التحكم فيها بواسطة دواسة قدم قبل بدء تلميع النار.

قم أولا بتغطية الماصة بشمع الأسنان لتقليل السعة وتحسين خصائص الضوضاء. للقيام بذلك ، احتفظ بكمية صغيرة من الشمع المنصهر في مكان قريب. استخدم ضغط الهواء على الجزء الخلفي من الماصة لمنع الشمع من دخول الحافة.

ثم اغمس الحافة لفترة وجيزة في الشمع السائل. وقم بإزالته الآن. ضع الماصة في جهاز التلميع واجلب الطرف حوالي 50 ميكرون من الفتيل.

ضع في اعتبارك أن الفتيل سوف يتمدد عند تسخينه. ضع نبضة حرارية قصيرة لمدة ثانية أو ثانيتين لإزالة الشمع من طرف الماصة وتنعيم الزجاج. افحص أطراف الماصة تحت المجهر لتحديد قطر الفتحة ونعومتها.

بالنسبة لتسجيلات مشبك التصحيح القياسية ، يجب أن يكون قطر فتحات الأطراف من ميكرون إلى ثلاثة ميكرون ، أو مهملا ، أو خشنا ، أو غير متساو ، أو غير منتظم. ضع الماصة النهائية في صندوق عمل، مع التأكد من إغلاق الغطاء لحماية الماصات من الغبار المتكررة لمدة 10 ماصات ناجحة. لقد أوضحت لك للتو كيفية صنع ماصات مشبك التصحيح والإلكتروكات الحادة باستخدام مجتذب قابل للبرمجة.

يمكن استخدام نفس الإجراء لصنع مجموعة متنوعة من الأدوات الزجاجية ، بما في ذلك إبر الحقن للحصول على نتائج مثالية لمشبك التصحيح. من المهم أن تتذكر سحب ماصات جديدة خالية من الغبار في نفس يوم التجربة وتلميعها في غضون ساعة من التجربة. تحقق أيضا من خلال الفحص من أن الماصات ناعمة ومصقولة.

تأكد من مشاهدة الفيديو الآخر الخاص بنا ، والذي يوضح كيفية إجراء تسجيل مشبك التصحيح للقنوات الأيونية المعبر عنها في بويضات التأليف. حسنا ، هذا كل شيء. أنت الآن خبير في الماصة ونتمنى لك التوفيق في تجاربك.