October 22nd, 2008
هذا هو دليل على تعديل شكل micropipettes الزجاج. على وجه التحديد ، وذلك باستخدام الحرارة والضغط الجوي وتوسيع تفتق دون زيادة افتتاح الطرف ، مما يؤدي إلى انخفاض المقاومة ماصة. هذا أمر بالغ الأهمية للحصول على تسجيلات ضوضاء منخفضة من خلايا صغيرة لكنها مفيدة في العديد من التطبيقات.
يبدأ هذا الإجراء بوضع طرف الماصة بالقرب من خيوط التلميع بتكبير 100 مرة. بعد ذلك قم بتشغيل ضغط الهواء والحرارة. الفتيل.
سوف يتمدد طرف الماصة لتشكيل طرف غير حاد الشكل. أطفئي النار للحصول على فتحة طرف أصغر. أطفئ الضغط والحرارة مرة أخرى.
مرحبا ، أنا براندون جونسون من مختبر الدكتورة ميريام جودمان في قسم علم وظائف الأعضاء الجزيئي والخلوي بجامعة ستانفورد. سنعرض لك اليوم إجراء لماصات التصحيح لتلميع الضغط. نستخدم هذا الإجراء في مختبرنا لدراسة القنوات الأيونية وبقع الغشاء والخلايا العصبية NC elgan.
لذلك دعونا نبدأ. اسحب مجموعة من ستة إلى 10 ماصات رقعة. استشر خبيرا محليا أو تجربتنا المرئية لصنع ماصات رقعة وأقطاب كهربائية حادة باستخدام قطبي قابل للبرمجة للحصول على المساعدة.
لبدء الإجراء ، اضبط ضغط الطائرة المضغوط على حوالي 40 حصانا. ثم أقوم بتوصيل شركة الطيران المضغوطة بصمام تحكم رباعي الاتجاهات. قم بتوصيل طول الأنبوب البلاستيكي بالصمام رباعي الاتجاهات وقم بتوصيل حامل ماصة الضغط العالي بالطرف السائب للأنبوب البلاستيكي. استخدم جهاز تشكيل صغير لإجراء التلميع.
نحن نستخدم مجموعة Ccpm two من LA Scientific. يحتوي هذا الحفار على حامل ماصة عالي الضغط ، وخيوط تسخين بلاتينية يتم التحكم فيها بواسطة دواسة قدم ومجهر مجهز بتكبير منخفض وعالي 10 مرات في 100 مرة. تعد أهداف الهواء عن مسافة العمل مثالية لأنه من الأهمية بمكان أن تكون قادرا على مراقبة فتحة الماصة أثناء البروتوكول.
بعد ذلك ، تحقق من أن صمام الضغط في وضع إيقاف التشغيل. ثم ضع ماصة في حامل الماصة وشد التركيب بإحكام إصبعه من أجل سلامة المختبر. تأكد من تثبيت الماصة بإحكام في حامل الماصة.
خلاف ذلك ، سيؤدي ضغط الهواء إلى إخراج الماصة من الحامل. كخطوة اختيارية ، يمكنك طلاء الماصة بعازل كاره للماء مثل الشمع لتقليل السعة وتحسين خصائص الضوضاء. الآن ضع الماصة في الحامل في الحدادة الدقيقة ، ضع حامل الماصة على مرحلة المجهر بحيث يكون كل من الطرف وخيوط التلميع مرئيين عند طاقة منخفضة 10 أضعاف على الحدادة الدقيقة.
أحضر الطرف حوالي 50 ميكرون من الفتيل ، ثم قم بالتبديل إلى الهدف 100 عالي الطاقة ، يجب أن يكون كل من طرف الماصة وخيوط التلميع في بؤرة التركيز وفي مجال الرؤية. إذا لم يكن كذلك ، اضبط ارتفاع الفتيل. نظرا لأنه لا يمكن ضبط موضع الماصة، يجب أن يكون طرف الماصة والفتيل على الجانبين المتقابلين من مجال الرؤية.
تجنب وضع طرف الماصة بالقرب من الفتيل لأنه سيتمدد مع تسخينه ويمكن أن يصطدم بالماصة. بمجرد وضع الطرف والفتيل بشكل صحيح، قم بتدوير الصمام لتوجيه الهواء المضغوط إلى الماصة وتسخين طرف الماصة حتى يبدأ المستدق خلف الطرف في التضخم للخارج. أوقف التسخين قبل أن تنفجر بالونات الطرف على نطاق واسع.
التجريب مطلوب لتحديد المسافة والحرارة والوقت المناسب للشكل المطلوب. كخطوة اختيارية ، يمكنك أيضا تلميع الطرف في حالة عدم وجود ضغط لتقليل قطر فتحة الطرف. ضع في اعتبارك أيضا أنه يمكن تكرار خطوات التلميع هذه بشكل جيد.
اضبط شكل وأبعاد طرف الماصة. عند اكتمال التلميع. قم بإيقاف تشغيل نقطة الضغط في طرف الماصة في اتجاه آمن.
قم بإزالة الماصة وضعها في صندوق تخزين نظيف حيث سيتم حمايتها من الغبار. من أجل سلامة المختبر ، تأكد من إيقاف الضغط قبل إزالة الماصة. خلاف ذلك ، يمكن إخراجها من حامل الماصة.
عند الإزالة، أوضحنا لك للتو كيفية الضغط على ماصات التلميع لتحسين تسجيلات مشبك التصحيح. عند القيام بهذا الإجراء، من المهم أن تتذكر طلاء ملف التلميع بزجاج بدرجة حرارة انصهار عالية لتقليل ترسب المعدن المتبخر على الماصات. وتوخي الحذر أثناء تعرض الماصات للهواء المضغوط.
تأكد من تثبيت الماصة بإحكام في الحامل وإيقاف تشغيل الهواء قبل إزالة الماصة من الحامل. هذا كل شيء. شكرا للمشاهدة.
تلميع ضغط سعيد ونتمنى لك التوفيق في تجاربك.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
يوضح هذا الدليل تعديل أشكال الماصات الزجاجية الصغيرة باستخدام الحرارة وضغط الهواء. يسمح هذا العملية بتوسيع التدرج دون زيادة فتحة الحافة، وهو أمر ضروري لتحقيق تسجيلات منخفضة الضوضاء في تطبيقات الخلايا الصغيرة.