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Mosaic Zebrafish Transgenesis for Evaluating Enhancer Sequences

The completion of the human genome sequence, along with that of many other species, has highlighted the challenge of ascribing specific function to non ...

University of Pennsylvania 

&#x901A;&#x8FC7;&#x5C06;&#x6309;&#x987A;&#x5E8F;&#x6DFB;&#x52A0;&#x8FDC;&#x7AEF;&#x7684;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x9CCD;&#x9AA8;&#x65B0;&#x9636;&#x5C42;&#x6210;&#x957F;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x9CCD;&#x3002;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#xFF0C;&#x90E8;&#x5206;&#x589E;&#x52A0;&#x5219;&#x89C4;&#x7BA1;&#xFF0C;&#x7B49;&#x8DDD;&#x5173;&#x7CFB;&#x7EF4;&#x6301;&#x9CCD;&#x957F;&#x5EA6;&#x548C;&#x4F53;&#x957F;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x65E5;&#x76CA;&#x589E;&#x957F;&#x7684;&#x9C7C;&#x7684;&#x5BFF;&#x547D;&#x3002;&#x9CCD;&#x751F;&#x957F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x7ED3;&#x5408;&#x4F7F;&#x7528;&#x4EE5;&#x65B0;&#x9896;&#x3001; fak&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6BB5;&#x52A0;&#x6CD5;&#x662F;&#x4E0D;&#x8FDE;&#x7EED;&#x7684;&#x4F46;&#x76F8;&#x5F53;&#x6536;&#x76CA;&#x7684;&#x8DF3;&#x8DC3;&#x3002;&#x98CE;&#x6C99;&#x662F;&#x7531;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x5171;&#x4EAB;&#x7684;&#x57FA;&#x672C;&#x589E;&#x957F;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x8BC1;&#x660E;&#x90E8;&#x5206;&#x589E;&#x52A0;&#x6536;&#x76CA;&#x4E00;&#x8D77;&#x7528;&#x5FAA;&#x73AF;&#x7206;&#x88C2;&#x7684;&#x8FDC;&#x7AEF;&#x7FC5; ray &#x95F4;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x5728;&#x8FDC;&#x7AEF;&#x7FC5;&#x8868;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6269;&#x6563;&#x4EE5;&#x6052;&#x5B9A;&#x901F;&#x7387;&#x5728;&#x6574;&#x4E2A;&#x9CCD; ray &#x751F;&#x957F;&#x5468;&#x671F;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5355;&#x72EC;&#x7684;&#x7FC5;&#x8FC7;&#x5EA6;&#x751F;&#x957F;&#x7A81;&#x53D8;&#x3001; &#x957F;&#x9CCD;&#x548C;&#x957F;&#x53D1;&#x516C;&#x4E3B;&#xFF0C;&#x7ED5;&#x8FC7;&#x7FC5; ray &#x751F;&#x957F;&#x5468;&#x671F;&#x5206;&#x522B;&#x5236;&#x5B9A;&#x975E;&#x5BF9;&#x79F0;&#x548C;&#x5BF9;&#x79F0;&#x7FC5;&#x8FC7;&#x5EA6;&#x751F;&#x957F;&#xFF0C;&#x5728;&#x7600;&#x9636;&#x6BB5;&#x3002;

&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x7684;&#x5C3E;&#x9CCD;&#x7B49;&#x8F74;&#x589E;&#x957F;&#x8DE8;&#x8D8A;&#x5F0F;&#x63A7;&#x5236;&#x88AB;&#x6253;&#x65AD;&#x957F;&#x9CCD;&#x548C;&#x957F;&#x53D1;&#x516C;&#x4E3B;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x3002;

Zebrafish fins grow by sequentially adding new segments of bone to the distal end of each fin ray. In wild type zebrafish, segment addition is regulated such that an isometric relationship is maintained between fin length and body length over the lifespan of the growing fish. Using a novel, surrogate marker for fin growth in conjunction with cell proliferation assays, we demonstrate here that segment addition is not continuous, but rather proceeds by saltation. Saltation is a fundamental growth mechanism shared by disparate vertebrates, including humans. We further demonstrate that segment addition proceeds in conjunction with cyclic bursts of cell proliferation in the distal fin ray mesenchyme. In contrast, cells in the distal fin epidermis proliferate at a constant rate throughout the fin ray growth cycle. Finally, we show that two separate fin overgrowth mutants, long fin and rapunzel, bypass the stasis phase of the fin ray growth cycle to develop asymmetrical and symmetrical fin overgrowth, respectively.

Saltatory control of isometric growth in the zebrafish caudal fin is disrupted in long fin and rapunzel mutants.

Ailettes de poisson-z&#xE8;bre cro&#xEE;tre en ajoutant s&#xE9;quentiellement de nouveaux segments d&#x26;#39;os &#xE0; l&#x26;#39;extr&#xE9;mit&#xE9; distale de chaque rayon de la nageoire. Chez le poisson z&#xE8;bre de type sauvage, plus segment est r&#xE9;gul&#xE9;e de telle sorte qu&#x26;#39;il existe une relation isom&#xE9;trique est maintenu entre la longueur des nageoires et la longueur du corps au cours de la dur&#xE9;e de vie de l&#x26;#39;&#xE9;levage de poissons. Utilisation d&#x26;#39;un roman, un marqueur de substitution pour la croissance fin en conjonction avec des tests de prolif&#xE9;ration cellulaire, nous d&#xE9;montrons ici que l&#x26;#39;ajout du segment n&#x26;#39;est pas continue, mais plut&#xF4;t le produit par saltation. Saltation est un m&#xE9;canisme de croissance fondamentale partag&#xE9;e par les vert&#xE9;br&#xE9;s, y compris les humains disparates. Nous avons en outre d&#xE9;montrer que le produit d&#x26;#39;addition du segment, en collaboration avec rafales cycliques de la prolif&#xE9;ration cellulaire dans le m&#xE9;senchyme rayon de la nageoire distale. Par contre, les cellules de l&#x26;#39;&#xE9;piderme ailette distale prolif&#xE9;rer &#xE0; une vitesse constante pendant tout le cycle de croissance rayon de la nageoire. Enfin, nous montrons que deux s&#xE9;par&#xE9;s mutants surcroissance des nageoires, des nageoires de long et Raiponce, contourner la phase de stase du cycle de croissance rayon de la nageoire de d&#xE9;velopper prolif&#xE9;ration fin asym&#xE9;trique et sym&#xE9;trique, respectivement.

Contr&#xF4;le de la croissance saltatoire isom&#xE9;trique dans le poisson-z&#xE8;bre Fin caudale est perturb&#xE9; en longue nageoire et Mutants Rapunzel

Saltatorische Kontrolle der isometrischen Wachstum im Zebrafisch Schwanzflosse befindet sich in Long Fin und Rapunzel Mutanten gest&#xF6;rt.

Danio rerio pinne crescono in sequenza aggiungendo nuovi segmenti di osso all&#39;estremit&agrave; distale di ogni raggio di pinna. In zebrafish wild type, aggiunta di segmento &egrave; regolato tali che un rapporto isometrico &egrave; mantenuto tra lunghezza pinna e lunghezza del corpo sopra la durata della vita del pesce crescente. Utilizzando un romanzo, marker surrogato per la crescita di pinna in collaborazione con dosaggi di proliferazione cellulare, mostriamo qui che aggiunta di segmento non &egrave; continua, ma piuttosto procede dal Saltazionismo. Saltazionismo &egrave; un meccanismo di crescita fondamentali condiviso da disparati vertebrati, compreso gli esseri umani. Noi dimostrare ulteriormente che aggiunta segmento procede in collaborazione con ciclici scoppi di proliferazione cellulare nel mesenchima ray pinna distale. Al contrario, le cellule dell&#39;epidermide pinna distale proliferano ad un tasso costante durante tutto il ciclo di crescita di ray fin. Infine, ci mostra che due distinti pinna iperaccrescimento mutanti, lunga pinna e Raperonzolo, bypassare la fase di stasi del ciclo di crescita fin ray per sviluppare una sovracrescita di pinna asimmetrica e simmetrica, rispettivamente.

Saltatoria controllo della crescita isometrica nella pinna caudale zebrafish &egrave; perturbato nella lunga pinna e Raperonzolo mutanti.

&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x9806;&#x6B21;&#x5404;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x7DDA;&#x306E;&#x9060;&#x4F4D;&#x7AEF;&#x306B;&#x9AA8;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x8FFD;&#x52A0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6210;&#x9577;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x306E;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x8FFD;&#x52A0;&#x306F;&#x3001;&#x7B49;&#x5C3A;&#x6027;&#x306E;&#x95A2;&#x4FC2;&#x304C;&#x6210;&#x9577;&#x3057;&#x3066;&#x9B5A;&#x306E;&#x5BFF;&#x547D;&#x4E0A;&#x306E;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x306E;&#x9577;&#x3055;&#x3068;&#x30DC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30FC;&#x306E;&#x9577;&#x3055;&#x306E;&#x9593;&#x3067;&#x7DAD;&#x6301;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x898F;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3068;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3066;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5C0F;&#x8AAC;&#x3001;&#x30B5;&#x30ED;&#x30B2;&#x30FC;&#x30C8;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x8FFD;&#x52A0;&#x306F;&#x8DF3;&#x8E8D;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x7D99;&#x7D9A;&#x7684;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x53CE;&#x76CA;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8DF3;&#x8E8D;&#x306F;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x591A;&#x7A2E;&#x591A;&#x69D8;&#x306A;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x3067;&#x5171;&#x6709;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x57FA;&#x672C;&#x7684;&#x306A;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x9060;&#x4F4D;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x7DDA;&#x9593;&#x5145;&#x7E54;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x306E;&#x5468;&#x671F;&#x7684;&#x306A;&#x30D0;&#x30FC;&#x30B9;&#x30C8;&#x3068;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3066;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x8FFD;&#x52A0;&#x53CE;&#x5165;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x9060;&#x4F4D;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x8868;&#x76AE;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x7DDA;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x305F;&#x4E00;&#x5B9A;&#x306E;&#x901F;&#x5EA6;&#x3067;&#x5897;&#x6B96;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;2&#x3064;&#x200B;&#x200B;&#x306E;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x305F;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3001;&#x9577;&#x3044;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x3068;&#x30E9;&#x30D7;&#x30F3;&#x30C4;&#x30A7;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3001;&#x975E;&#x5BFE;&#x79F0;&#x3068;&#x5BFE;&#x79F0;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x7DDA;&#x6210;&#x9577;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x306E;&#x505C;&#x6EDE;&#x30D5;&#x30A7;&#x30FC;&#x30BA;&#x3092;&#x30D0;&#x30A4;&#x30D1;&#x30B9;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

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Zebrafish &#xC9C0; &#xB290; &#xB7EC; &#xBBF8;&#xB294; &#xC21C;&#xCC28;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC01; &#xC9C0; &#xB290; &#xB7EC; &#xBBF8; &#xB808;&#xC774;&#xC758; &#xC120;&#xB2E8;&#xBD80;&#xC5D0; &#xBF08;&#xC758; &#xC0C8; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xB97C; &#xCD94;&#xAC00; &#xD558; &#xC5EC; &#xC131;&#xC7A5;. &#xC57C;&#xC0DD; &#xD0C0;&#xC785; zebrafish &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8; &#xCD94;&#xAC00; &#xC544;&#xC774;&#xC18C;&#xBA54;&#xD2B8;&#xB9AD; &#xAD00;&#xACC4; &#xC9C0; &#xB290; &#xB7EC; &#xBBF8; &#xAE38;&#xC774; &#xBAB8; &#xAE38;&#xC774; &#xC0AC;&#xC774; &#xC131;&#xC7A5; &#xD558; &#xACE0; &#xC788;&#xB294; &#xBB3C;&#xACE0;&#xAE30;&#xC758; &#xC218;&#xBA85; &#xB3D9;&#xC548; &#xC720;&#xC9C0; &#xAD00;&#xB9AC; &#xB418;&#xB3C4;&#xB85D; &#xADDC;&#xC81C; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC18C;&#xC124;, &#xB300;&#xB9AC; &#xB9C8;&#xCEE4;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC140; &#xD655;&#xC0B0; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xACFC; &#xD568;&#xAED8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C0; &#xB290; &#xB7EC; &#xBBF8; &#xC131;&#xC7A5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC5EC;&#xAE30; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8; &#xCD94;&#xAC00; &#xC5F0;&#xC18D;, &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC624;&#xD788;&#xB824; saltation&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC9C4;&#xD589; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. Saltation &#xC778;&#xAC04;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD55C; &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xCC99;&#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xACF5;&#xC720; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xBCF8;&#xC801;&#xC778; &#xC131;&#xC7A5; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD94;&#xAC00; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8; &#xCD94;&#xAC00; &#xC6D0;&#xC2EC; &#xC9C0; &#xB290; &#xB7EC; &#xBBF8; &#xB808;&#xC774; mesenchyme&#xC5D0; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD;&#xC758; &#xC21C;&#xD658; &#xBC84;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC640; &#xD568;&#xAED8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C4;&#xD589; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC18;&#xBA74;, &#xC140; &#xC6D0;&#xC2EC; &#xC9C0; &#xB290; &#xB7EC; &#xBBF8; &#xD45C; &#xD53C;&#xC5D0; &#xC9C0; &#xB290; &#xB7EC; &#xBBF8; &#xB808;&#xC774; &#xC131;&#xC7A5; &#xC0AC;&#xC774;&#xD074;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; &#xC77C;&#xC815; &#xD55C; &#xC18D;&#xB3C4;&#xB85C; &#xC99D;&#xC2DD;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB450; &#xBA85;&#xC758; &#xBCC4;&#xB3C4; &#xD540; &#xC790;&#xB77C; &#xB09C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;, &#xAE34; &#xC9C0; &#xB290; &#xB7EC; &#xBBF8;&#xC640; &#xB77C; &#xD47C; &#xC824;, &#xC6B0;&#xD68C; &#xBE44;&#xB300;&#xCE6D;&#xACFC; &#xB300;&#xCE6D; &#xC9C0; &#xB290; &#xB7EC; &#xBBF8; &#xC790;&#xB77C; &#xB09C;&#xC744; &#xAC01;&#xAC01; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xC9C0; &#xB290; &#xB7EC; &#xBBF8; &#xB808;&#xC774; &#xC131;&#xC7A5; &#xC8FC;&#xAE30;&#xC758; &#xC2A4;&#xD14C;&#xC774; &#xC2DC;&#xC2A4; &#xB2E8;&#xACC4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Zebrafish &#xAF2C;&#xB9AC; &#xC9C0; &#xB290; &#xB7EC; &#xBBF8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC544;&#xC774;&#xC18C;&#xBA54;&#xD2B8;&#xB9AD; &#xC131;&#xC7A5;&#xC758; saltatory &#xC81C;&#xC5B4;&#xB294; &#xAE34; &#xC9C0; &#xB290; &#xB7EC; &#xBBF8;&#xC640; &#xB77C; &#xD47C; &#xC824; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC5D0; &#xC911;&#xB2E8; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Aletas Zebrafish crecer a&#xF1;adiendo secuencialmente nuevos segmentos de hueso en el extremo distal de cada aleta de rayos. En el pez cebra silvestre, adem&#xE1;s del segmento est&#xE1; regulado de tal manera que una relaci&#xF3;n isom&#xE9;trica se mantiene entre la longitud de la aleta y la longitud del cuerpo durante la vida de los peces en crecimiento. Uso de una novela, marcador sustituto para el crecimiento de la aleta, en relaci&#xF3;n con los ensayos de proliferaci&#xF3;n celular, demostramos aqu&#xED; que adem&#xE1;s de segmento no es continua, sino m&#xE1;s bien el producto por saltaci&#xF3;n. Saltaci&#xF3;n es un mecanismo fundamental de crecimiento compartido por diferentes vertebrados, incluidos los humanos. Adem&#xE1;s, demuestran que el producto de adici&#xF3;n de segmentos, en relaci&#xF3;n con los estallidos c&#xED;clicos de la proliferaci&#xF3;n celular en el mes&#xE9;nquima de la aleta distal. En contraste, las c&#xE9;lulas en la epidermis de la aleta distal proliferar a un ritmo constante durante todo el ciclo de crecimiento de la aleta de rayos. Finalmente, mostramos que dos mutantes diferentes crecimiento excesivo de las aletas, aleta larga y Rapunzel, eludir la fase de estancamiento del ciclo de crecimiento de la aleta de rayos para desarrollar el crecimiento excesivo de aletas asim&#xE9;tricas y sim&#xE9;tricas, respectivamente.

De control relativa a la danza del crecimiento isom&#xE9;trico en la aleta caudal de pez cebra se interrumpe en la aleta larga y mutantes Rapunzel

&#x6A21;&#x578B;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x9AA8;&#x9ABC; dysplasias &#x7CFB;&#x7EDF;&#x9274;&#x5B9A;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x9AA8;&#x9ABC;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x53D1;&#x75C5;&#x673A;&#x5236;&#x548C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5E2E;&#x52A9; orthologous &#x4EBA;&#x7C7B;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x9274;&#x5B9A;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x6B63;&#x5728;&#x8FDB;&#x884C;&#x8BF1;&#x53D8;&#x5C4F;&#x5E55;&#x4E0A;&#x7684;&#x9AA8;&#x9ABC; dysplasias &#x6210;&#x4EBA;&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#xFF0C;&#x5229;&#x7528;&#x5C04;&#x7EBF;&#x7167;&#x76F8;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5F02;&#x5E38;&#x9AA8;&#x9ABC;&#x89E3;&#x5256;&#x5B66;&#x548C;&#x9AA8;&#x5F62;&#x6001;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x5206;&#x79BB;&#x5947;&#x74E6;&#x74E6;&#x5DDE;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4E00;&#x822C;&#x7F3A;&#x635F;&#x9AA8;&#x751F;&#x957F;&#x5728;&#x663E;&#x6027;&#x7A81;&#x53D8;&#x3002;&#x6742;&#x5408;&#x6027;&#x5947;&#x74E6;&#x74E6;&#x5DDE;&#x9C7C;&#x6709;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x6210;&#x9AA8;&#x4E0D;&#x5168;&#x75C7;&#x7684;&#x8868;&#x578B;&#x76F8;&#x4F3C;&#x3001; &#x9AA8;&#x9ABC;&#x53D1;&#x80B2;&#x4E0D;&#x826F;&#x9020;&#x6210;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x7C7B;&#x578B;&#x4E2D;&#x6211;&#x80F6;&#x539F;&#x57FA;&#x56E0;&#x3002;&#x5947;&#x74E6;&#x74E6;&#x5DDE;&#x7A81;&#x53D8;&#x6620;&#x5C04;&#x548C;&#x5206;&#x5B50;&#x7279;&#x5F81;&#x6307;&#x793A;&#x7F3A;&#x9677;&#x9A7B;&#x7559;&#x80F6;&#x539F; I(alpha1) &#x94FE;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x5947;&#x74E6;&#x74E6;&#x5DDE;&#x51C6;&#x786E;&#x6A21;&#x578B;&#x6210;&#x9AA8;&#x4E0D;&#x5168;&#x75C7;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x548C;&#x5206;&#x5B50;&#x4E00;&#x7EA7;&#xFF0C;&#x5C06;&#x8BC1;&#x660E;&#x75BE;&#x75C5;&#x75C5;&#x7406;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x8D44;&#x6E90;&#x3002;&#x6444;&#x5F71;&#x662F;&#x5B9E;&#x9645;&#x7B5B;&#x67E5;&#x5DE5;&#x5177;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x7EC6;&#x5FAE;&#x7684;&#x9AA8;&#x9ABC;&#x7578;&#x5F62;&#x6210;&#x4EBA;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x3002;&#x5947;&#x74E6;&#x74E6;&#x5DDE;&#x7684;&#x8BC6;&#x522B;&#x6F14;&#x793A;&#x4F1A;&#x53D1;&#x73B0;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7684;&#x9AA8;&#x9ABC; dysplasias &#x7A81;&#x53D8;&#x8868;&#x578B;&#x3002;

&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x9AA8;&#x9ABC;&#x7F3A;&#x9677;&#x5C04;&#x7EBF;&#x5206;&#x6790;&#x3002;

Systematic identification of skeletal dysplasias in model vertebrates provides insight into the pathogenesis of human skeletal disorders and can aid in the identification of orthologous human genes. We are undertaking a mutagenesis screen for skeletal dysplasias in adult zebrafish, using radiography to detect abnormalities in skeletal anatomy and bone morphology. We have isolated chihuahua, a dominant mutation causing a general defect in bone growth. Heterozygous chihuahua fish have phenotypic similarities to human osteogenesis imperfecta, a skeletal dysplasia caused by mutations in the type I collagen genes. Mapping and molecular characterization of the chihuahua mutation indicates that the defect resides in the gene encoding the collagen I(alpha1) chain. Thus, chihuahua accurately models osteogenesis imperfecta at the biologic and molecular levels, and will prove an important resource for studies on the disease pathophysiology. Radiography is a practical screening tool to detect subtle skeletal abnormalities in the adult zebrafish. The identification of chihuahua demonstrates that mutant phenotypes analogous to human skeletal dysplasias will be discovered.

Radiographic analysis of zebrafish skeletal defects.

L&#x26;#39;identification syst&#xE9;matique des dysplasies squelettiques chez les vert&#xE9;br&#xE9;s mod&#xE8;le permet de mieux comprendre la pathogen&#xE8;se de l&#x26;#39;homme des troubles du squelette et peut aider &#xE0; l&#x26;#39;identification des orthologues des g&#xE8;nes humains. Nous entreprenons un &#xE9;cran de mutagen&#xE8;se pour dysplasies squelettiques chez le poisson z&#xE8;bre adulte, en utilisant la radiographie pour d&#xE9;tecter des anomalies de l&#x26;#39;anatomie du squelette et de la morphologie osseuse. Nous avons isol&#xE9; chihuahua, une mutation dominante causant un d&#xE9;faut g&#xE9;n&#xE9;ralis&#xE9; de la croissance osseuse. H&#xE9;t&#xE9;rozygote chihuahua poissons pr&#xE9;sentent des similitudes ph&#xE9;notypiques &#xE0; l&#x26;#39;homme l&#x26;#39;ost&#xE9;ogen&#xE8;se imparfaite, une dysplasie squelettique caus&#xE9;e par des mutations dans les g&#xE8;nes de collag&#xE8;ne de type I. Cartographie et caract&#xE9;risation mol&#xE9;culaire de la mutation chihuahua indique que le d&#xE9;faut r&#xE9;side dans le g&#xE8;ne codant pour le collag&#xE8;ne I (alpha1) de la cha&#xEE;ne. Ainsi, chihuahua mod&#xE9;lise avec pr&#xE9;cision l&#x26;#39;ost&#xE9;ogen&#xE8;se imparfaite aux niveaux biologiques et mol&#xE9;culaires, et se r&#xE9;v&#xE9;lera une ressource importante pour les &#xE9;tudes sur la physiopathologie de la maladie. La radiographie est un outil de d&#xE9;pistage pratique pour d&#xE9;tecter les subtiles anomalies du squelette chez le poisson z&#xE8;bre adulte. L&#x26;#39;identification de chihuahua d&#xE9;montre que les ph&#xE9;notypes mutants analogues &#xE0; l&#x26;#39;homme dysplasies squelettiques seront d&#xE9;couverts.

Analyse radiographique du poisson z&#xE8;bre des malformations squelettiques

Radiologische Analyse der Zebrafisch Skelettdefekten.

Identificazione sistematica delle displasie scheletriche nei vertebrati modello fornisce la comprensione nella patogenesi di disturbi scheletrici umani e pu&ograve; aiutare nell&#39;identificazione di geni umani orthologous. Stiamo intraprendendo una schermata di mutagenesi per displasie scheletriche in zebrafish adulto, tramite radiografia per rilevare anomalie scheletrica anatomia e morfologia ossea. Abbiamo isolato chihuahua, una mutazione dominante, provocando un generale difetto di crescita ossea. Pesci eterozigoti chihuahua hanno somiglianze fenotipiche con umana osteogenesi imperfetta, una displasia scheletrica causata da mutazioni nel tipo I geni del collagene. Caratterizzazione di mappatura e molecolare della mutazione chihuahua indica che il difetto risiede nel gene che codifica per il collagene I(alpha1) catena. Cos&igrave;, chihuahua accuratamente modelli osteogenesi imperfetta a livello biologico e molecolare e si riveler&agrave; un&#39;importante risorsa per gli studi sulla fisiopatologia della malattia. Radiografia &egrave; uno strumento di screening pratico per rilevare anomalie scheletriche sottile in the zebrafish adulto. L&#39;identificazione di chihuahua dimostra che saranno scoperto fenotipi mutanti analoghi umano delle displasie scheletriche.

Analisi radiografica di zebrafish difetti scheletrici.

&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x9AA8;&#x683C;&#x7570;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x7CFB;&#x7D71;&#x7684;&#x306A;&#x540C;&#x5B9A;&#x306F;&#x3001;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x9AA8;&#x683C;&#x75BE;&#x60A3;&#x306E;&#x75C5;&#x56E0;&#x3078;&#x306E;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3001;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30BD;&#x30ED;&#x30B0;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x540C;&#x5B9A;&#x306B;&#x5F79;&#x7ACB;&#x3064;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x9AA8;&#x683C;&#x306E;&#x89E3;&#x5256;&#x5B66;&#x3001;&#x9AA8;&#x5F62;&#x614B;&#x306E;&#x7570;&#x5E38;&#x3092;&#x691C;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;X&#x7DDA;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x5927;&#x4EBA;&#x306E;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x9AA8;&#x683C;&#x7570;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x8A98;&#x767A;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30F3;&#x306B;&#x53D6;&#x308A;&#x7D44;&#x3093;&#x3067;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30C1;&#x30EF;&#x30EF;&#x3001;&#x9AA8;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x6B20;&#x9665;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x512A;&#x6027;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x5358;&#x96E2;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30D8;&#x30C6;&#x30ED;&#x30C1;&#x30EF;&#x30EF;&#x306E;&#x9B5A;&#x306F;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x9AA8;&#x5F62;&#x6210;&#x4E0D;&#x5168;&#x75C7;&#x3001;I&#x578B;&#x30B3;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x9AA8;&#x683C;&#x5F62;&#x6210;&#x7570;&#x5E38;&#x306B;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x985E;&#x4F3C;&#x70B9;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30C1;&#x30EF;&#x30EF;&#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x306E;&#x30DE;&#x30C3;&#x30D4;&#x30F3;&#x30B0;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5206;&#x5B50;&#x7279;&#x6027;&#x306F;&#x6B20;&#x9665;&#x304C;I&#x578B;&#x30B3;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3;&#xFF08;&#x3B1;1&#xFF09;&#x9396;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5185;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x30C1;&#x30EF;&#x30EF;&#x306F;&#x6B63;&#x78BA;&#x306B;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5206;&#x5B50;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x9AA8;&#x5F62;&#x6210;&#x4E0D;&#x5168;&#x75C7;&#x3092;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x5316;&#x3057;&#x3001;&#x75BE;&#x60A3;&#x306E;&#x75C5;&#x614B;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30EA;&#x30BD;&#x30FC;&#x30B9;&#x3092;&#x8A3C;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; X&#x7DDA;&#x64AE;&#x5F71;&#x306F;&#x3001;&#x5927;&#x4EBA;&#x306E;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x3067;&#x306F;&#x5FAE;&#x5999;&#x306A;&#x9AA8;&#x683C;&#x7570;&#x5E38;&#x3092;&#x691C;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5B9F;&#x7528;&#x7684;&#x306A;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30C1;&#x30EF;&#x30EF;&#x306E;&#x8B58;&#x5225;&#x306F;&#x3001;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x9AA8;&#x683C;&#x7570;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x985E;&#x4F3C;&#x3057;&#x3066;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x304C;&#x767A;&#x898B;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x9AA8;&#x683C;&#x6B20;&#x9665;&#x306E;X&#x7DDA;&#x5206;&#x6790;

&#xBAA8;&#xB378; &#xCC99;&#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACE8;&#xACA9; dysplasias&#xC758; &#xCCB4;&#xACC4;&#xC801;&#xC778; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xACE8;&#xACA9; &#xC9C8;&#xD658;&#xC758; &#xBCD1; &#xC778;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD1B5;&#xCC30;&#xB825;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558; &#xACE0; orthologous &#xC778;&#xAC04; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC2DD;&#xBCC4;&#xC5D0; &#xB3C4;&#xC6C0;&#xC774; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBC29;&#xC0AC;&#xC120;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xACE8;&#xACA9; &#xD574;&#xBD80;&#xD559;&#xACFC; &#xBF08; &#xD615;&#xD0DC;&#xC5D0; &#xC774;&#xC0C1;&#xC774; &#xAC10;&#xC9C0; &#xC131;&#xC778; zebrafish &#xACE8;&#xACA9; dysplasias mutagenesis &#xD654;&#xBA74;&#xC744; &#xC0AC;&#xC5C5; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xCE58;&#xC640;&#xC640;, &#xBF08; &#xC131;&#xC7A5;&#xC5D0; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xACB0;&#xD568;&#xC744; &#xC77C;&#xC73C;&#xD0A4;&#xB294; &#xC9C0;&#xBC30;&#xC801;&#xC778; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xACA9;&#xB9AC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Heterozygous &#xCE58;&#xC640;&#xC640; &#xBB3C;&#xACE0;&#xAE30; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xACE8; imperfecta phenotypic &#xC720;&#xC0AC;&#xC131;, &#xACE8;&#xACA9; &#xBC1C;&#xC721; &#xC774;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778; &#xD55C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC720;&#xD615;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB098; &#xCF5C;&#xB77C;&#xAC90; &#xC720;&#xC804;&#xC790;. &#xCE58;&#xC640;&#xC640; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC758; &#xB9E4;&#xD551; &#xBC0F; &#xBD84;&#xC790; &#xD2B9;&#xC131;&#xD654; &#xC778;&#xCF54;&#xB529; I(alpha1) &#xCCB4;&#xC778; &#xCF5C;&#xB77C;&#xAC90; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xACB0;&#xD568;&#xC774; &#xC788;&#xB294; &#xAC83;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xCE58;&#xC640;&#xC640; &#xC815;&#xD655; &#xD558; &#xAC8C; &#xACE8; imperfecta &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xBC0F; &#xBD84;&#xC790; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBAA8;&#xB378;&#xB9C1; &#xD558; &#xACE0; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xC774;&#xC0C1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC790;&#xC6D0;&#xC744; &#xC99D;&#xBA85;&#xD560; &#xAC83; &#xC774;&#xB2E4;. &#xBC29;&#xC0AC;&#xC120; &#xC131;&#xC778; zebrafish &#xBBF8;&#xBB18;&#xD55C; &#xACE8;&#xACA9; &#xC774;&#xC0C1;&#xC774; &#xAC10;&#xC9C0; &#xC2E4;&#xC81C; &#xC2EC;&#xC0AC; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCE58;&#xC640;&#xC640;&#xC758; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xACE0;&#xAE30; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xACE8;&#xACA9; dysplasias &#xC720;&#xC0AC; &#xAC80;&#xC0C9; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Zebrafish &#xACE8;&#xACA9; &#xACB0;&#xD568;&#xC758; &#xBC29;&#xC0AC;&#xC120; &#xBD84;&#xC11D;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La identificaci&#xF3;n sistem&#xE1;tica de las displasias esquel&#xE9;ticas en los vertebrados modelo proporciona la penetraci&#xF3;n en la patog&#xE9;nesis de los trastornos &#xF3;seos humanos y pueden ayudar en la identificaci&#xF3;n de ort&#xF3;logos los genes humanos. Estamos llevando a cabo una pantalla de mutag&#xE9;nesis de displasias esquel&#xE9;ticas en el pez cebra adulto, mediante una radiograf&#xED;a para detectar anomal&#xED;as en la anatom&#xED;a del esqueleto y la morfolog&#xED;a de los huesos. Hemos aislado chihuahua, una mutaci&#xF3;n dominante causando un defecto general en el crecimiento &#xF3;seo. Heterocigota peces chihuahua tiene similitudes fenot&#xED;picas para la salud humana la osteog&#xE9;nesis imperfecta, una displasia esquel&#xE9;tica causada por mutaciones en el tipo I, los genes del col&#xE1;geno. Mapeo y caracterizaci&#xF3;n molecular de la mutaci&#xF3;n de Chihuahua indica que el defecto reside en el gen que codifica el col&#xE1;geno I (alfa 1) de la cadena. Por lo tanto, Chihuahua modela con precisi&#xF3;n la osteog&#xE9;nesis imperfecta en los niveles biol&#xF3;gicos y moleculares, y ser&#xE1; un recurso importante para los estudios sobre la fisiopatolog&#xED;a de la enfermedad. La radiograf&#xED;a es una herramienta de evaluaci&#xF3;n pr&#xE1;ctica para detectar sutiles anormalidades esquel&#xE9;ticas en el pez cebra adulto. La identificaci&#xF3;n de Chihuahua demuestra que los fenotipos mutantes an&#xE1;logos a los humanos displasias esquel&#xE9;ticas ser&#xE1; descubierto.

El an&#xE1;lisis radiogr&#xE1;fico de pez cebra defectos esquel&#xE9;ticos

&#x5728;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x9AA8;&#x9ABC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x662F;&#x7531;&#x7CBE;&#x786E;&#x9057;&#x4F20;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x63A7;&#x5236;&#x3002;&#x9014;&#x5F84;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5173;&#x952E;&#x8C03;&#x63A7;&#x57FA;&#x56E0;&#x7F16;&#x7801;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50; Runx2&#xFF0C;&#x8FD9;&#x5728;&#x9F20;&#x6807;&#x662F;&#x8981;&#x6C42;&#x6240;&#x6709;&#x7684;&#x6210;&#x9AA8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x548C;&#x5B50;&#x96C6;&#x7684;&#x80A5;&#x5927;&#x8F6F;&#x9AA8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6B63;&#x5E38;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;&#x63A2;&#x7D22;&#x6A21;&#x5F0F;&#x751F;&#x7269;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C; (&#x8868;&#x8FBE;&#x5E8F;&#x5217;&#x6807;&#x7B7E;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#xFF09; skeletogenic &#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x6211;&#x4EEC;&#x6CA1;&#x6709;&#x53D1;&#x73B0;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x57FA;&#x56E0;&#x3001; runx2a &#x548C; runx2b &#x4E24;&#x4E2A; orthologues&#x3002;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x57FA;&#x56E0;&#x4E0E;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x5171;&#x4EAB;&#x5E8F;&#x5217;&#x540C;&#x6E90;&#x6027;&#x548C;&#x57FA;&#x56E0;&#x7ED3;&#x6784;&#xFF0C;&#x5E76;&#x6620;&#x5C04;&#x5230;&#x663E;&#x793A;&#x4E0E;&#x8BE5;&#x533A;&#x57DF;&#x5728;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x5B88;&#x6052;&#x540C;&#x7EBF;&#x6027;&#x5206;&#x6790;&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x533A;&#x57DF;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x57FA;&#x56E0;&#x5728;&#x9AA8;&#x9ABC;&#x808C;&#x73AF;&#x8282;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#xFF0C;&#x5B83;&#x4EEC;&#x5C06;&#x663E;&#x793A;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x6A21;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x89E3;&#x91CA;&#x4E3A;&#x4EC0;&#x4E48;&#x901A;&#x8FC7;&#x786C;&#x9AA8;&#x6F14;&#x5316;&#x4FDD;&#x7559;&#x4E86;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A; orthologues &#x4E2D;&#x8BC1;&#x636E;&#x7684;&#x90E8;&#x5206;&#x5206;&#x6B67;&#x3002;

&#x91CD;&#x590D;&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C; runx2 orthologues &#x5728;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x56FD;&#x5BB6;&#x9AA8;&#x9ABC;&#x808C;&#x7684;&#x5143;&#x7D20;&#x6765;&#x8868;&#x793A;&#x3002;

The differentiation of cells in the vertebrate skeleton is controlled by a precise genetic program. One crucial regulatory gene in the pathway encodes the transcription factor Runx2, which in mouse is required for differentiation of all osteoblasts and the proper development of a subset of hypertrophic chondrocytes. To explore the differentiation of skeletogenic cells in the model organism zebrafish (Danio rerio), we have identified two orthologues of the mammalian gene, runx2a and runx2b. Both genes share sequence homology and gene structure with the mammalian genes, and map to regions of the zebrafish genome displaying conserved synteny with the region where the human gene is localized. While both genes are expressed in developing skeletal elements, they show evidence of partial divergence in expression pattern, possibly explaining why both orthologues have been retained through teleost evolution.

Duplicate zebrafish runx2 orthologues are expressed in developing skeletal elements.

La diff&#xE9;renciation des cellules dans le squelette vert&#xE9;br&#xE9; est command&#xE9; par un programme g&#xE9;n&#xE9;tique pr&#xE9;cise. Un g&#xE8;ne essentiel dans la voie r&#xE9;glementaire code du facteur de transcription Runx2, qui chez la souris est n&#xE9;cessaire pour la diff&#xE9;renciation des ost&#xE9;oblastes et tous le bon d&#xE9;veloppement d&#x26;#39;un sous-ensemble de chondrocytes hypertrophiques. Pour explorer la diff&#xE9;renciation des cellules skeletogenic chez le poisson z&#xE8;bre organisme mod&#xE8;le (Danio rerio), nous avons identifi&#xE9; deux orthologues du g&#xE8;ne chez les mammif&#xE8;res, et runx2a runx2b. La fois homologie de s&#xE9;quence des g&#xE8;nes part et la structure g&#xE9;nique avec des g&#xE8;nes de mammif&#xE8;res, et la carte des r&#xE9;gions du g&#xE9;nome de poisson-z&#xE8;bre affichage synt&#xE9;nie avec la r&#xE9;gion o&#xF9; le g&#xE8;ne humain est localis&#xE9;. Bien que les deux g&#xE8;nes sont exprim&#xE9;s dans l&#x26;#39;&#xE9;laboration des &#xE9;l&#xE9;ments du squelette, ils montrent des signes de divergence partielle dans le mod&#xE8;le d&#x26;#39;expression, ce qui pourrait expliquer pourquoi les deux orthologues ont &#xE9;t&#xE9; retenus par l&#x26;#39;&#xE9;volution des t&#xE9;l&#xE9;ost&#xE9;ens.

Dupliquer poisson-z&#xE8;bre Runx2 orthologues sont exprim&#xE9;s en D&#xE9;veloppement d&#x26;#39;&#xE9;l&#xE9;ments squelettiques

Duplizieren Zebrafisch RUNX2 Orthologe sind bei der Entwicklung von Skelett-Elemente zum Ausdruck gebracht.

La differenziazione delle cellule nello scheletro vertebrato &egrave; controllata da un preciso programma genetico. Un gene regolatore fondamentale nel percorso codifica per il fattore di trascrizione Runx2, che nel topo &egrave; necessaria per la differenziazione degli osteoblasti tutti e il corretto sviluppo di un sottoinsieme di condrociti ipertrofica. Per esplorare la differenziazione delle cellule skeletogenic nell&#39;organismo di modello zebrafish (Danio rerio), abbiamo identificato due orthologues del gene dei mammiferi, runx2a e runx2b. Entrambi i geni condividono struttura genica e omologia di sequenza con i geni dei mammiferi e mappa delle regioni del genoma zebrafish visualizzazione sintenia conservata con la regione dove &egrave; localizzato il gene umano. Mentre entrambi i geni sono espressi nello sviluppo di elementi scheletrici, essi mostrano evidenza di parziale divergenza nel pattern di espressione, possibilmente spiegando perch&eacute; entrambi orthologues sono stati mantenuti attraverso l&#39;evoluzione teleostei.

Duplicare zebrafish runx2 orthologues sono espressi nello sviluppo di elementi scheletrici.

&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x9AA8;&#x683C;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x6B63;&#x78BA;&#x306A;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5236;&#x5FA1;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;1&#x3064;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x9AA8;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x3068;&#x80A5;&#x5927;&#x8EDF;&#x9AA8;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;Runx2&#x306E;&#x3092;&#x3001;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x751F;&#x7269;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#xFF08;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#xFF09;&#x306E;skeletogenic&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x3092;&#x63A2;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3001;runx2a&#x3068;runx2b&#x306E;2&#x30AA;&#x30EB;&#x30BD;&#x30ED;&#x30B0;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x5171;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x914D;&#x5217;&#x306E;&#x76F8;&#x540C;&#x6027;&#x3068;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x69CB;&#x9020;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3068;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x304C;&#x5C40;&#x5728;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30B7;&#x30F3;&#x30C6;&#x30CB;&#x30FC;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3059;&#x308B;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x30DE;&#x30C3;&#x30D7;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3002;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x304C;&#x9AA8;&#x683C;&#x8981;&#x7D20;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B;&#x8868;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306F;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30BD;&#x30ED;&#x30B0;&#x306F;&#x786C;&#x9AA8;&#x9B5A;&#x306E;&#x9032;&#x5316;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x7DAD;&#x6301;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x7406;&#x7531;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x3001;&#x767A;&#x73FE;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306A;&#x767A;&#x6563;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x91CD;&#x8907;&#x3057;&#x305F;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;Runx2&#x306E;&#x30AA;&#x30EB;&#x30BD;&#x30ED;&#x30B0;&#x306F;&#x3001;&#x9AA8;&#x683C;&#x8981;&#x7D20;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3067;&#x8868;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;

&#xCC99;&#xCD94; &#xACE8;&#xACA9;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC140;&#xC758; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;&#xB294; &#xC815;&#xD655;&#xD55C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC81C;&#xC5B4; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD1B5;&#xB85C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD558;&#xB098;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xADDC;&#xC81C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xB294; &#xBAA8;&#xB4E0; osteoblasts&#xC758; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xBC0F; hypertrophic chondrocytes &#xD558;&#xC704; &#xC9D1;&#xD569;&#xC758; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790;&#xB97C; Runx2, &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBAA8;&#xB378; &#xC0DD;&#xBB3C; zebrafish (Danio rerio)&#xC5D0;&#xC11C; skeletogenic &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xBD84;&#xD654;&#xB97C; &#xD0D0;&#xD5D8;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC720;&#xC804;&#xC790;, runx2a &#xBC0F; runx2b&#xC758; &#xB450; orthologues&#xB97C; &#xD655;&#xC778; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB450; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xAC00; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; homology &#xBC0F; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xAD6C;&#xC870;&#xB97C; &#xACF5;&#xC720; &#xD558; &#xACE0; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB294; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xC601;&#xC5ED; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; synteny &#xD45C;&#xC2DC; zebrafish &#xAC8C;&#xB188;&#xC758; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xB9E4;&#xD551;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB450; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB294; &#xACE8;&#xACA9; &#xC694;&#xC18C; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xD45C;&#xD604;, &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xC544;&#xB9C8;&#xB3C4; teleost &#xC9C4;&#xD654;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xB450; orthologues &#xC720;&#xC9C0; &#xB418;&#xC5C8;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC65C; &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xB294; &#xC2DD;&#xC774; &#xD328;&#xD134;&#xC5D0; &#xBD80;&#xBD84; &#xBC1C;&#xC0B0;&#xC758; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC911;&#xBCF5; &#xB41C; zebrafish runx2 orthologues &#xACE8;&#xACA9; &#xC694;&#xC18C; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xD45C;&#xD604; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La diferenciaci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas en el esqueleto de los vertebrados est&#xE1; controlada por un programa gen&#xE9;tico preciso. Un gen regulador fundamental en la v&#xED;a codifica el factor de transcripci&#xF3;n Runx2, que en el rat&#xF3;n se requiere para la diferenciaci&#xF3;n de todos los osteoblastos y el adecuado desarrollo de un subconjunto de los condrocitos hipertr&#xF3;ficos. Para explorar la diferenciaci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas skeletogenic en el pez cebra organismo modelo (Danio rerio), hemos identificado dos ort&#xF3;logos del gen de mam&#xED;fero, y runx2a runx2b. Ambos genes comparten homolog&#xED;a de secuencia y estructura de los genes con los genes de mam&#xED;feros, y el mapa de las regiones del genoma pez cebra mostrando synteny conservadas con la regi&#xF3;n donde se localiza el gen humano. Mientras que ambos genes se expresan en el desarrollo de los elementos esquel&#xE9;ticos, muestran evidencia de divergencia parcial en el patr&#xF3;n de expresi&#xF3;n, lo que puede explicar por qu&#xE9; ambos orthologues se han conservado a trav&#xE9;s de evoluci&#xF3;n de los tele&#xF3;steos.

Duplicar pez cebra Runx2 Orthologues est&#xE1;n expresados &#x200B;&#x200B;en el Desarrollo de los elementos esquel&#xE9;ticos

BMP &#x4FE1;&#x53F7;&#x8C03;&#x5236;&#x800C;&#x6210;&#x80DE;&#x5916;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC; Chordin&#xFF0C;&#x4E0E; Tolloid &#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x7684;&#x4E00;&#x4E9B;&#x9176; (Tld) &#x548C;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x86CB;&#x767D; Twisted Gastrulation (Tsg)&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x4F53;&#x5916;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E; Chordin &#x5288;&#x88C2;&#x7684; Tld &#x9176;&#xFF0C;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x8C03;&#x8282;&#x673A;&#x5236;&#x53CA;&#x5176;&#x610F;&#x4E49;&#x4E0D;&#x8BBE;&#x7ACB;&#x5728;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x4E2D;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;Tsg &#x636E;&#x62A5;&#x5728;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x4E0A;&#x4E0B;&#x6587;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x589E;&#x5F3A;&#x6216;&#x6291;&#x5236; BMP &#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8FC7;&#x5176;&#x4E0E; Chordin &#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x7528;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x539F;&#x80A0;&#x6765;&#x8FDB;&#x884C;&#x7ED3;&#x6784;/&#x529F;&#x80FD;&#x7814;&#x7A76; Chordin&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x4F7F; Chordin &#x90E8;&#x5206;&#x6216;&#x5168;&#x90E8;&#x8010; Tld &#x5288;&#x88C2;&#x548C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x5F15;&#x5165; chordin &#x7F3A;&#x80DA;&#x80CE;&#x7684;&#x7248;&#x672C;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4E86;&#x7684;&#x88C2;&#x89E3;&#x4EA7;&#x54C1;&#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x548C;&#x6539;&#x53D8; Chordins &#x4ECE;&#x4F53;&#x5185;&#x548C;&#x80DA;&#x80CE;&#x9AA8;&#x5F62;&#x6001;&#x53D1;&#x751F;&#x86CB;&#x767D;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x5176;&#x6709;&#x6548;&#x6027;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC1;&#x660E; Tld &#x5288;&#x88C2;&#x548C;&#x5236;&#x7EA6; Chordin &#x51FD;&#x6570;&#x4F53;&#x5185;&#xFF0C;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#xFF0C;&#x7531;&#x5197;&#x4F59;&#x9176;&#x5728;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x539F;&#x80A0;&#x4E2D;&#x8FDB;&#x884C;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x63D0;&#x51FA;&#x8BC1;&#x636E;&#x90E8;&#x5206;&#x5288;&#x7684; Chordin &#x662F;&#x5168;&#x957F;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x6BD4;&#x5F3A;&#x9AA8;&#x5F62;&#x6001;&#x53D1;&#x751F;&#x86CB;&#x767D;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x8C03;&#x8282; Chordin tld &#x63D0;&#x51FA;&#x4E86;&#x79EF;&#x6781;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x80DA;&#x80CE;&#x7684; Tsg &#x67AF;&#x7AED;&#x5BFC;&#x81F4;&#x51CF;&#x5C11; BMP &#x4FE1;&#x53F7;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5411;&#x66F4;&#x9AD8;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684; Chordin&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; Tsg &#x8FD8;&#x589E;&#x5F3A;&#x4E86; BMP &#x4FE1;&#x53F7;&#x5728; Chordin&#xFF0C;&#x6CA1;&#x6709;&#x5176;&#x6D88;&#x8017;&#x90E8;&#x5206;&#x53EF;&#x4EE5;&#x62EF;&#x6551; chordin &#x7A81;&#x53D8;&#x8868;&#x578B;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E; BMP &#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8DEF;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x7EC4;&#x6210;&#x90E8;&#x5206;&#x4ECD;&#x7136;&#x4E0D;&#x660E;&#x3002;

&#x626D;&#x7684; gastrulation &#x589E;&#x5F3A;&#x4E86; BMP &#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8FC7; chordin &#x4ECE;&#x5C5E;&#x548C;&#x72EC;&#x7ACB;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

BMP signaling is modulated by a number of extracellular proteins, including the inhibitor Chordin, Tolloid-related enzymes (Tld), and the interacting protein Twisted Gastrulation (Tsg). Although in vitro studies have demonstrated Chordin cleavage by Tld enzymes, its significance as a regulatory mechanism in vivo has not been established in vertebrates. In addition, Tsg has been reported in different contexts to either enhance or inhibit BMP signaling through its interactions with Chordin. We have used the zebrafish gastrula to carry out structure/function studies on Chordin, by making versions of Chordin partially or wholly resistant to Tld cleavage and introducing them into chordin-deficient embryos. We examined the cleavage products generated in vivo from wild-type and altered Chordins, and tested their efficacy as BMP inhibitors in the embryo. We demonstrate that Tld cleavage is crucial in restricting Chordin function in vivo, and is carried out by redundant enzymes in the zebrafish gastrula. We also present evidence that partially cleaved Chordin is a stronger BMP inhibitor than the full-length protein, suggesting a positive role for Tld in regulating Chordin. We find that depletion of the embryo for Tsg leads to decreased BMP signaling, and to increased levels of Chordin. Finally, we show that Tsg also enhances BMP signaling in the absence of Chordin, and its depletion can partially rescue the chordin mutant phenotype, demonstrating that important components of the BMP signaling pathway remain unidentified.

Twisted gastrulation enhances BMP signaling through chordin dependent and independent mechanisms.

BMP signalisation est modul&#xE9;e par un certain nombre de prot&#xE9;ines extracellulaires, comprenant l&#x26;#39;inhibiteur, Chordin Tolloid enzymes li&#xE9;es (DTL), et le gastrulation prot&#xE9;ine d&#x26;#39;interaction du torse (Tsg). Bien que des &#xE9;tudes in vitro ont d&#xE9;montr&#xE9; le clivage par des enzymes Chordin TLD, sa signification en tant que m&#xE9;canisme de r&#xE9;gulation in vivo n&#x26;#39;a pas &#xE9;t&#xE9; &#xE9;tablie chez les vert&#xE9;br&#xE9;s. En outre, Tsg ont &#xE9;t&#xE9; signal&#xE9;s dans diff&#xE9;rents contextes pour en accro&#xEE;tre ou inhiber la signalisation BMP &#xE0; travers ses interactions avec Chordin. Nous avons utilis&#xE9; la gastrula poisson-z&#xE8;bre pour mener &#xE0; bien la structure / fonction des &#xE9;tudes sur Chordin, en faisant des versions de Chordin partiellement ou totalement r&#xE9;sistante au clivage TLD et les introduire dans chordine d&#xE9;ficientes embryons. Nous avons examin&#xE9; les produits de clivage g&#xE9;n&#xE9;r&#xE9;s in vivo &#xE0; partir Chordins de type sauvage et alt&#xE9;r&#xE9;, et test&#xE9; leur efficacit&#xE9; comme inhibiteurs de BMP dans l&#x26;#39;embryon. Nous d&#xE9;montrons que le clivage TLD est cruciale dans la restriction de la fonction Chordin in vivo, et est r&#xE9;alis&#xE9;e par des enzymes redondantes dans la gastrula poisson-z&#xE8;bre. Nous avons &#xE9;galement la preuve que partiellement coup&#xE9; pr&#xE9;sente une plus forte Chordin inhibiteur de BMP que la prot&#xE9;ine pleine longueur, ce qui sugg&#xE8;re un r&#xF4;le positif pour Tld dans la r&#xE9;gulation de Chordin. Nous trouvons que l&#x26;#39;appauvrissement de l&#x26;#39;embryon &#xE0; Tsg entra&#xEE;ne une diminution de signalisation BMP, et &#xE0; des niveaux accrus de Chordin. Enfin, nous montrons que Tsg am&#xE9;liore &#xE9;galement la signalisation BMP en l&#x26;#39;absence de Chordin, et son appauvrissement peut partiellement sauver le ph&#xE9;notype mutant chordine, d&#xE9;montrant que des &#xE9;l&#xE9;ments importants de la voie de signalisation BMP restent non identifi&#xE9;s.

Gastrulation Twisted Am&#xE9;liore BMP Signaling au moyen des m&#xE9;canismes chordine d&#xE9;pendantes et ind&#xE9;pendantes

Twisted Gastrulation verst&#xE4;rkt BMP-Signalgebung durch Chordin abh&#xE4;ngige und unabh&#xE4;ngige Mechanismen.

Segnalazione BMP &egrave; modulata da un certo numero di proteine extracellulari, inclusi l&#39;inibitore Chordin, correlati a Tolloid enzimi (Tld) e la proteina d&#39;interazione Twisted gastrulazione (STG). Sebbene gli studi in vitro hanno dimostrato Chordin scissione da enzimi Tld, la sua importanza come un meccanismo di regolazione in vivo non &egrave; stata stabilita nei vertebrati. Inoltre, STG &egrave; stata segnalata in diversi contesti per potenziare o inibire la segnalazione attraverso le sue interazioni con Chordin BMP. Abbiamo usato la gastrula zebrafish di effettuare studi di struttura/funzione su Chordin, facendo versioni di Chordin parzialmente o totalmente resistenti alla scissione Tld e introdurli negli embrioni chordin-carenti. Abbiamo esaminato la scissione prodotti generati in vivo da Chordins wild-type ed alterato e testato la loro efficacia come inibitori BMP nell&#39;embrione. Dimostriamo Tld scissione &egrave; fondamentale per limitare la funzione Chordin in vivo che &egrave; effettuata dagli enzimi ridondanti nella gastrula di zebrafish. Siamo presenti anche prove che parzialmente fenduto Chordin &egrave; un forte inibitore BMP rispetto la proteina full-length, suggerendo un ruolo positivo per Tld nella regolazione Chordin. Troviamo che svuotamento dell&#39;embrione per STG conduce per segnalazione BMP &egrave; diminuito e all&#39;aumento dei livelli di Chordin. Infine, mostriamo che Tsg inoltre migliora la segnalazione BMP in assenza di Chordin, e suo esaurimento pu&ograve; salvare parzialmente il fenotipo mutante chordin, dimostrando che importanti componenti delle BMP signaling pathway rimangono non identificati.

Gastrulazione contorto migliora la segnalazione BMP attraverso chordin meccanismi dipendenti e indipendenti.

BMP&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x304C;&#x963B;&#x5BB3;Chordin&#x3001;Tolloid&#x95A2;&#x9023;&#x9175;&#x7D20;&#xFF08;TLD&#xFF09;&#x3068;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30C4;&#x30A4;&#x30B9;&#x30C8;&#x539F;&#x8178;&#xFF08;TSG&#xFF09;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x6570;&#x3001;&#x5909;&#x8ABF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; in vitro&#x8A66;&#x9A13;&#x3067;&#x306E;TLD&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;Chordin&#x306E;&#x5207;&#x65AD;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x3066;&#x304D;&#x305F;&#x304C;&#x3001;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x306F;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;TSG&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;Chordin&#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;BMP&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x3092;&#x5897;&#x5F37;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x7570;&#x306A;&#x3063;&#x305F;&#x6587;&#x8108;&#x3067;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306B;&#x307E;&#x305F;&#x306F;TLD&#x306E;&#x5207;&#x65AD;&#x306B;&#x5B8C;&#x5168;&#x8010;&#x6027;&#x3092;Chordin&#x306E;&#x30D0;&#x30FC;&#x30B8;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x4F5C;&#x308B;&#x3068;chordin-&#x6B20;&#x640D;&#x80DA;&#x306B;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x3092;&#x5C0E;&#x5165;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;Chordin&#x306E;&#x69CB;&#x9020;/&#x6A5F;&#x80FD;&#x7814;&#x7A76;&#x3092;&#x9042;&#x884C;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x539F;&#x8178;&#x80DA;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6539;&#x5909;&#x3055;&#x308C;&#x305F;Chordins&#x304B;&#x3089;&#x3001;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x3067;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x958B;&#x88C2;&#x751F;&#x6210;&#x7269;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x3001;&#x80DA;&#x306E;BMP&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x305D;&#x306E;&#x6709;&#x52B9;&#x6027;&#x3092;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;TLD&#x306E;&#x5207;&#x65AD;&#x304C;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x3067;&#x306E;Chordin&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x5236;&#x9650;&#x3059;&#x308B;&#x4E0A;&#x3067;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x539F;&#x8178;&#x80DA;&#x306E;&#x5197;&#x9577;&#x9175;&#x7D20;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x884C;&#x308F;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306B;Chordin&#x3092;&#x5207;&#x65AD;&#x3057;&#x6211;&#x3005;&#x3082;&#x5B58;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x8A3C;&#x62E0;&#x306F;Chordin&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;TLD&#x306E;&#x7A4D;&#x6975;&#x7684;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3001;&#x5B8C;&#x5168;&#x9577;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;BMP&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;TSG&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x80DA;&#x306E;&#x305D;&#x306E;&#x67AF;&#x6E07;&#x304C;BMP&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x3001;&#x3068;Chordin&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3092;&#x898B;&#x3064;&#x3051;&#x308B;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;BMP&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x6B63;&#x4F53;&#x4E0D;&#x660E;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3001;TSG&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;BMP&#x306F;Chordin&#x306E;&#x4E0D;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x304C;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x67AF;&#x6E07;&#x304C;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306B;chordin&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3092;&#x6551;&#x51FA;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x306D;&#x3058;&#x308C;&#x305F;&#x539F;&#x8178;&#x306F;Chordin&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x975E;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;BMP&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x3092;&#x5897;&#x5F37;&#x3059;&#x308B;

BMP &#xC2E0;&#xD638;&#xB294; Chordin, Tolloid &#xAD00;&#xB828; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC22B;&#xC790;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBCC0;&#xC870; &#xD6A8;&#xC18C; (Tld)&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB4A4;&#xD2C0; &#xB9AC;&#xACE0; Gastrulation (Tsg). &#xBE44;&#xB85D; &#xCCB4; &#xC678; &#xC5F0;&#xAD6C; Tld &#xD6A8;&#xC18C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; Chordin &#xBD84;&#xC5F4; &#xC785;&#xC99D;, &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xADDC;&#xC81C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC73C;&#xB85C; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xC911;&#xC694;&#xC131; &#xCC99;&#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xC124;&#xB9BD; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, Tsg &#xAC15;&#xD654; &#xB610;&#xB294; &#xC5B5;&#xC81C; BMP Chordin&#xC640;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xCEE8;&#xD14D;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF4;&#xACE0; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBC84;&#xC804;&#xC758; &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB610;&#xB294; &#xC804;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; Tld &#xCABC;&#xAC1C; &#xC9D0; &#xB0B4;&#xC131; Chordin &#xBC0F; chordin &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xBC30;&#xC544;&#xC5D0; &#xB3C4;&#xC785; &#xD558; &#xC5EC; Chordin&#xC5D0; &#xAD6C;&#xC870;/&#xAE30;&#xB2A5; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC218;&#xD589; &#xD558; zebrafish gastrula&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC870;&#xC0AC; &#xBD84;&#xC5F4;&#xC744; &#xC81C;&#xD488;&#xACFC; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xC57C;&#xC0DD; &#xD615; &#xBC0F; &#xBCC0;&#xACBD; &#xB41C; Chordins&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0DD;&#xC131; &#xB41C; &#xBC30;&#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; BMP &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xB85C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xD6A8;&#xB2A5;&#xC744; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xD588;&#xB2E4;. Tld &#xBD84;&#xC5F4; vivo&#xC5D0;&#xC11C; Chordin &#xD568;&#xC218;&#xB97C; &#xC81C;&#xD55C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC911;&#xC694; &#xD558; &#xACE0; &#xC911;&#xBCF5; &#xD6A8;&#xC18C; zebrafish gastrula&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC218;&#xD589; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; cleaved Chordin&#xB294; &#xC804;&#xCCB4; &#xAE38;&#xC774; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB354; &#xAC15;&#xD55C; BMP &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; Chordin &#xC870;&#xC808;&#xC5D0; Tld&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xC2DC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; Tsg&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBC30;&#xC544;&#xC758; &#xACE0;&#xAC08; &#xAC10;&#xC18C; BMP &#xC2E0;&#xD638;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; Chordin&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0; &#xB2E8;&#xC11C;&#xB97C; &#xCC3E;&#xC744;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCF4;&#xC5EC; Tsg &#xB610;&#xD55C; BMP Chordin, &#xBD80;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xC2E0;&#xD638; &#xAC15;&#xD654; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8; &#xC18C;&#xBAA8; &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; chordin &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xD45C;&#xD604; &#xD615;&#xC744; &#xAD6C;&#xCD9C; &#xC218; &#xC2E0;&#xD638; &#xD1B5;&#xB85C; BMP&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; &#xC720;&#xC9C0; &#xBBF8;&#xD655;&#xC778; &#xC2DC;&#xC5F0;.

&#xD2B8;&#xC704;&#xC2A4;&#xD2B8; gastrulation chordin &#xC885;&#xC18D; &#xBC0F; &#xB3C5;&#xB9BD; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; BMP &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xC2DC;&#xD0B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Se&#xF1;alizaci&#xF3;n de BMP es modulada por una serie de prote&#xED;nas extracelulares, incluyendo el inhibidor Chordin, Tolloid relacionados con enzimas (TLD), y la interacci&#xF3;n de prote&#xED;nas Gastrulaci&#xF3;n trenzado (TSG). Aunque los estudios in vitro han demostrado la escisi&#xF3;n por las enzimas Chordin TLD, su importancia como mecanismo de regulaci&#xF3;n in vivo no se ha establecido en los vertebrados. Adem&#xE1;s, Tsg se ha informado en contextos diferentes para mejorar o inhibir la se&#xF1;alizaci&#xF3;n de BMP a trav&#xE9;s de sus interacciones con Chordin. Hemos utilizado la g&#xE1;strula pez cebra para llevar a cabo la estructura / funci&#xF3;n de los estudios sobre Chordin, haciendo versiones de Chordin parcial o totalmente resistentes a la rotura de primer nivel y su introducci&#xF3;n en Chordin con deficiencia de embriones. Se analizaron los productos de degradaci&#xF3;n generados en vivo a partir de Chordins de tipo salvaje y alterado, y probado su eficacia como inhibidores de BMP en el embri&#xF3;n. Se demuestra que la divisi&#xF3;n TLD es fundamental en la restricci&#xF3;n de la funci&#xF3;n Chordin in vivo, y se lleva a cabo por las enzimas redundantes en la g&#xE1;strula pez cebra. Tambi&#xE9;n se presentan evidencias de que parte escindida Chordin es un fuerte inhibidor de la prote&#xED;na BMP de larga duraci&#xF3;n, lo que sugiere un papel positivo para la TLD en la regulaci&#xF3;n de Chordin. Nos parece que el agotamiento del embri&#xF3;n de Tsg conduce a una disminuci&#xF3;n de se&#xF1;alizaci&#xF3;n de BMP, y mayores niveles de Chordin. Finalmente, mostramos que Tsg tambi&#xE9;n mejora la se&#xF1;alizaci&#xF3;n de BMP en la ausencia de Chordin, y su agotamiento parcial puede rescatar el fenotipo mutante Chordin, lo que demuestra que los componentes importantes de la v&#xED;a de se&#xF1;alizaci&#xF3;n BMP no ser identificado.

Gastrulaci&#xF3;n Twisted Mejora BMP se&#xF1;alizaci&#xF3;n a trav&#xE9;s de mecanismos dependientes e independientes Chordin

&#x8FDB;&#x5316;&#x4FDD;&#x6301;&#x5E73;&#x9762;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6781;&#x6027; (PCP) &#x901A;&#x8DEF; &#xFF08;&#x6216;&#x975E;&#x89C4;&#x8303;&#x5316;&#x7684; Wnt &#x901A;&#x8DEF;&#xFF09; &#x9A71;&#x52A8;&#x5668;&#x7684;&#x51E0;&#x4E2A;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC7;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x3001; &#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC1;&#x79FB;&#x548C;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x7684;&#x4E3B;&#x8F74;&#x65B9;&#x5411;&#x3002;&#x5728;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#xFF0C;PCP &#x57FA;&#x56E0; gastrulation &#x548C; neurulation &#x671F;&#x95F4;&#x6709;&#x6781;&#x5316;&#x6536;&#x655B;&#x6269;&#x5C55;&#x8FD0;&#x52A8;&#x4E2D;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A;&#x5305;&#x62EC;&#x6253;&#x5F00;&#x773C;&#x76AE;&#xFF0C;&#x795E;&#x7ECF;&#x7BA1;&#x7F3A;&#x9677;&#x7684; PCP &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x4E0E;&#x5171;&#x4EAB;&#x8868;&#x578B;&#x548C;&#x6253;&#x4E71;&#x4E86;&#x4EBA;&#x5DE5;&#x8033;&#x8717;&#x7EA4;&#x6BDB;&#x675F;&#x53C2;&#x4E0E;&#x5173;&#x8054;&#x776B;&#x529F;&#x80FD;&#x969C;&#x788D;&#xFF0C;&#x969C;&#x788D;&#x7EFC;&#x5408;&#x5F81; Bardet Biedl (BBS)&#x3001; &#x57FA;&#x56E0;&#x7A81;&#x53D8;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A;&#x9057;&#x4F20; BBS &#x57FA;&#x56E0;&#x548C;&#x9F20;&#x6807; &#xFF08;Ltap&#xFF0C;&#x4E5F;&#x79F0;&#x4E3A; Vangl2&#xFF09; &#x548C;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C; (vangl2) &#x7684; PCP &#x57FA;&#x56E0;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#xFF0C;&#x589E;&#x5F3A;&#x7684;&#x578B;&#x7ED3;&#x679C;&#x4ECE;&#x589E;&#x5F3A;&#x6709;&#x7F3A;&#x9677;&#x7684;&#x6536;&#x655B;&#x63A8;&#x5E7F;&#x8FD0;&#x52A8;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x663E;&#x793A; Vangl2 &#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x7684;&#x57FA;&#x5E95;&#x8EAB;&#x4F53;&#x548C; axoneme &#x7EA4;&#x6BDB;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x8BA9;&#x4EBA;&#x60F3;&#x8D77;&#x7684; BBS &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x6A21;&#x5F0F;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x7EA4;&#x6BDB;&#x672C;&#x8D28;&#x4E0A;&#x53C2;&#x4E0E; PCP &#x8FDB;&#x7A0B;&#x3002;

Bardet Biedl &#x7EFC;&#x5408;&#x5F81;&#x776B;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x4E2D;&#x65AD;&#x5F71;&#x54CD;&#x4E86;&#x5730;&#x7403;&#x5E73;&#x9762;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6781;&#x6027;&#x7684;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x3002;

The evolutionarily conserved planar cell polarity (PCP) pathway (or noncanonical Wnt pathway) drives several important cellular processes, including epithelial cell polarization, cell migration and mitotic spindle orientation. In vertebrates, PCP genes have a vital role in polarized convergent extension movements during gastrulation and neurulation. Here we show that mice with mutations in genes involved in Bardet-Biedl syndrome (BBS), a disorder associated with ciliary dysfunction, share phenotypes with PCP mutants including open eyelids, neural tube defects and disrupted cochlear stereociliary bundles. Furthermore, we identify genetic interactions between BBS genes and a PCP gene in both mouse (Ltap, also called Vangl2) and zebrafish (vangl2). In zebrafish, the augmented phenotype results from enhanced defective convergent extension movements. We also show that Vangl2 localizes to the basal body and axoneme of ciliated cells, a pattern reminiscent of that of the BBS proteins. These data suggest that cilia are intrinsically involved in PCP processes.

Disruption of Bardet-Biedl syndrome ciliary proteins perturbs planar cell polarity in vertebrates.

La polarit&#xE9; cellulaire &#xE9;volutif conserv&#xE9; plane (PCP) voie (ou non canonique de la voie Wnt) entra&#xEE;ne plusieurs processus cellulaires importants, y compris la polarisation des cellules &#xE9;pith&#xE9;liales, la migration cellulaire et l&#x26;#39;orientation du fuseau mitotique. Chez les vert&#xE9;br&#xE9;s, les g&#xE8;nes PCP ont un r&#xF4;le vital dans la polarisation des mouvements d&#x26;#39;extension convergentes pendant la gastrulation et la neurulation. Ici, nous montrons que les souris porteuses de mutations des g&#xE8;nes impliqu&#xE9;s dans le syndrome de Bardet-Biedl (BBS), un trouble associ&#xE9; &#xE0; une dysfonction ciliaire, les ph&#xE9;notypes mutants partager avec PCP, y compris les paupi&#xE8;res ouvertes, les anomalies du tube neural et perturb&#xE9; cochl&#xE9;aires faisceaux st&#xE9;r&#xE9;ocils. En outre, nous identifions les interactions g&#xE9;n&#xE9;tiques entre les g&#xE8;nes du BBS et un g&#xE8;ne PCP &#xE0; la fois dans la souris (LTAP, &#xE9;galement appel&#xE9; Vangl2) et poisson-z&#xE8;bre (Vangl2). Chez le poisson z&#xE8;bre, les r&#xE9;sultats ph&#xE9;notypiques augment&#xE9;e &#xE0; partir de l&#x26;#39;am&#xE9;lioration des mouvements d&#x26;#39;extension d&#xE9;fectueux convergentes. Nous montrons aussi que Vangl2 se localise dans le corps basal et axon&#xE8;me des cellules cili&#xE9;es, un mod&#xE8;le qui rappelle celle des prot&#xE9;ines BBS. Ces donn&#xE9;es sugg&#xE8;rent que les cils sont intrins&#xE8;quement impliqu&#xE9;s dans les processus de PCP.

Perturbation des prot&#xE9;ines du syndrome de Bardet-Biedl ciliaire perturbe Polarit&#xE9; cellulaire planaire chez les vert&#xE9;br&#xE9;s

Evolution&auml;r konservierte planar Zelle Polarit&auml;t (PCP) Weg (oder Mitgliedattribut Wnt-Signalweg) treibt mehrere wichtige zellul&auml;re Prozesse, einschlie&szlig;lich Epithelzellen Polarisation, Zellmigration und mitotische Spindel Orientierung. Bei Wirbeltieren haben PCP Gene eine entscheidende Rolle im polarisierten konvergente Erweiterung Bewegungen w&auml;hrend der Gastrulation und Neurulation. Hier zeigen wir, dass M&auml;use mit Mutationen in Genen, die in Bardet-Biedl-Syndrom (BBS), eine Funktionsst&ouml;rung mit Ziliendysfunktion, Ph&auml;notypen mit PCP-Mutanten teilen, darunter offene Augenlider, Neuralrohrdefekte und cochlear Stereociliary B&uuml;ndel gest&ouml;rt. Dar&uuml;ber hinaus identifizieren wir genetische Interaktionen zwischen BBS Gene und ein PCP-gen sowohl der Maus (Ltap, auch Vangl2 genannt) als auch der Zebrafisch (vangl2). In Zebrafisch ergibt sich der erweiterte Ph&auml;notyp aus verst&auml;rkten defekte konvergente Erweiterung Bewegungen. Wir zeigen auch, dass Vangl2 der basalen K&ouml;rper und Axonem ciliated Zellen, ein Muster erinnert an die der BBS-Proteine lokalisiert. Diese Daten legen nahe, dass Zilien intrinsisch in PCP-Prozessen beteiligt sind.

St&ouml;rung des Bardet-Biedl-Syndrom Zilien Proteine w&uuml;hlt planar Zellpolarit&auml;t bei Wirbeltieren.

La cella planare evolutionarily conserved polarit&agrave; (PCP) percorso (o canonica Wnt pathway) unit&agrave; diversi importanti processi cellulari, compresa la polarizzazione delle cellule epiteliali, migrazione cellulare e l&#39;orientamento del fuso mitotico. Nei vertebrati, PCP geni hanno un ruolo fondamentale nei movimenti di estensione convergente polarizzata durante la gastrulazione e neurulazione. Qui vi mostriamo che topi con mutazioni in geni coinvolti nella sindrome di Bardet-Biedl (BBS), un disturbo associato a disfunzione ciliare, condividono fenotipi con mutanti PCP comprese le palpebre aperte, difetti del tubo neurale e perturbato cocleare stereociliary bundle. Inoltre, identifichiamo le interazioni genetiche tra geni BBS e un gene PCP in zebrafish (vangl2) e mouse (Ltap, chiamato anche Vangl2). In zebrafish, il fenotipo aumentato risultati da movimenti di maggiore estensione convergente difettosi. Mostriamo anche che Vangl2 si localizza al basale e assonema delle cellule cigliate, un modello che ricordano che le proteine BBS. Questi dati suggeriscono che ciglia &egrave; intrinsecamente coinvolti nei processi di PCP.

Interruzione delle proteine ciliare Bardet-Biedl sindrome sconvolge polarit&agrave; planare delle cellule nei vertebrati.

&#x9032;&#x5316;&#x7684;&#x306B;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5E73;&#x9762;&#x5185;&#x7D30;&#x80DE;&#x6975;&#x6027;&#xFF08;PCP&#xFF09;&#x7D4C;&#x8DEF;&#xFF08;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x975E;&#x30AB;&#x30CE;&#x30CB;&#x30AB;&#x30EB;Wnt&#x7D4C;&#x8DEF;&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x6975;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x904A;&#x8D70;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x7D21;&#x9318;&#x4F53;&#x306E;&#x5411;&#x304D;&#x306A;&#x3069;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x99C6;&#x52D5;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x3067;&#x306F;&#x3001;PCP&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x539F;&#x8178;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x795E;&#x7D4C;&#x80DA;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x504F;&#x5149;&#x53CE;&#x6582;&#x4F38;&#x9577;&#x904B;&#x52D5;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30D0;&#x30FC;&#x30C7;&#x30C3;&#x30C8; - &#x30D3;&#x30FC;&#x30C9;&#x30EB;&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#xFF08;BBS&#xFF09;&#x3001;&#x6BDB;&#x69D8;&#x4F53;&#x6A5F;&#x80FD;&#x4E0D;&#x5168;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x75BE;&#x60A3;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306B;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x958B;&#x3044;&#x305F;&#x307E;&#x3076;&#x305F;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x7BA1;&#x6B20;&#x640D;&#x3092;&#x542B;&#x3080;PCP&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x682A;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306F;&#x3001;&#x8778;&#x725B;stereociliary&#x30D0;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x3092;&#x4E2D;&#x65AD;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;BBS&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3068;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#xFF08;Ltap&#x3001;&#x307E;&#x305F;Vangl2&#x3068;&#x3082;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#xFF09;&#x3068;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#xFF08;vangl2&#xFF09;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;PCP&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x9593;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6B20;&#x9665;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x53CE;&#x6582;&#x4F38;&#x9577;&#x904B;&#x52D5;&#x304B;&#x3089;&#x62E1;&#x5F35;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3001;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;Vangl2&#x306F;&#x57FA;&#x790E;&#x4F53;&#x6E29;&#x3068;&#x7E4A;&#x6BDB;&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;BBS&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x305D;&#x306E;&#x3092;&#x5F77;&#x5F7F;&#x3068;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x8EF8;&#x7CF8;&#x306B;&#x5C40;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x7E4A;&#x6BDB;&#x304C;&#x672C;&#x8CEA;&#x7684;&#x306B;PCP&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x30D0;&#x30FC;&#x30C7;&#x30C3;&#x30C8; - &#x30D3;&#x30FC;&#x30C9;&#x30EB;&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#x7E4A;&#x6BDB;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x6DF7;&#x4E71;&#x306F;&#x3001;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x5E73;&#x9762;&#x5185;&#x7D30;&#x80DE;&#x6975;&#x6027;&#x3092;&#x4E71;&#x3059;

&#xC9C4;&#xD654; &#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xD3C9;&#xBA74; &#xC140; &#xADF9;&#xC131; (PCP) &#xD1B5;&#xB85C; (&#xB610;&#xB294; &#xBE44;&#xC815;&#xADDC; Wnt &#xACBD;&#xB85C;) &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC591;&#xADF9; &#xD654;, &#xC140; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; mitotic &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; &#xBC29;&#xD5A5; &#xB4F1;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; &#xB4DC;&#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;. &#xCC99;&#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C;, &#xC8FC;&#xCE58;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790; gastrulation &#xBC0F; neurulation &#xC911; &#xD3B8;&#xAD11;&#xB41C; &#xC9D1;&#xC911; &#xD655;&#xC7A5; &#xC6B4;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; Bardet Biedl &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70; (BBS), &#xC18D;&#xB208;&#xC379; &#xBD80;&#xC804; &#xAD00;&#xB828; &#xC9C8;&#xD658;&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC640; &#xC950; &#xC624;&#xD508; &#xB208; &#xAEBC; &#xD480;, &#xC2E0;&#xACBD; &#xAD00; &#xACB0;&#xD568;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xC8FC;&#xCE58;&#xC758; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xD568;&#xAED8; &#xACE0;&#xAE30;&#xB97C; &#xACF5;&#xC720; &#xD558; &#xACE0; &#xC778;&#xACF5; &#xC640;&#xC6B0; stereociliary &#xBC88;&#xB4E4; &#xC911;&#xB2E8;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xAC8C;&#xC2DC;&#xD310; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC640; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; (Ltap, vangl2&#xC774; &#xB77C;&#xACE0;&#xB3C4;) &#xBC0F; zebrafish (vangl2)&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC8FC;&#xCE58;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xAC04;&#xC758; &#xC720;&#xC804; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Zebrafish, &#xC99D;&#xAC15;&#xB41C; &#xD615; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xACB0;&#xD568;&#xC774; &#xC9D1;&#xC911; &#xD655;&#xC7A5; &#xC6C0;&#xC9C1;&#xC784;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; Vangl2 &#xAE30;&#xC800; &#xC721;&#xCCB4;&#xC640; axoneme ciliated &#xC140;&#xC758; &#xD328;&#xD134; &#xAC8C;&#xC2DC;&#xD310; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC5F0;&#xC0C1; localizes &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xC18D;&#xB208;&#xC379; &#xBCF8;&#xC9C8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC8FC;&#xCE58;&#xC758; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Bardet Biedl &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70; &#xC18D;&#xB208;&#xC379; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC911;&#xB2E8; &#xCC99;&#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD3C9;&#xBA74; &#xC140; &#xADF9;&#xC131; perturbs.

La polaridad celular conservado evolutivamente plana (PCP) y la v&#xED;a (o v&#xED;a Wnt no can&#xF3;nica) lleva varios importantes procesos celulares, incluyendo la polarizaci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas epiteliales, la migraci&#xF3;n celular y la orientaci&#xF3;n del huso mit&#xF3;tico. En los vertebrados, los genes de PCP tienen un papel vital en el movimiento de extensi&#xF3;n polarizado convergentes durante la gastrulaci&#xF3;n y neurulaci&#xF3;n. Aqu&#xED; nos muestran que los ratones con mutaciones en los genes implicados en el s&#xED;ndrome de Bardet-Biedl (BBS), un trastorno asociado con la disfunci&#xF3;n ciliar, fenotipos mutantes compartir con PCP, incluyendo los p&#xE1;rpados abiertos, defectos del tubo neural y perturbado cocleares paquetes stereociliary. Por otra parte, se identifican las interacciones gen&#xE9;ticas entre los genes del BBS y un gen PCP, tanto en el rat&#xF3;n (LTAP, tambi&#xE9;n llamado Vangl2) y el pez cebra (vangl2). En el pez cebra, el fenotipo aumentados de mejora de los movimientos de extensi&#xF3;n defectuosos convergentes. Tambi&#xE9;n mostramos que Vangl2 se localiza en el cuerpo basal y el axonema de las c&#xE9;lulas ciliadas, un patr&#xF3;n que recuerda a la de las prote&#xED;nas BBS. Estos datos sugieren que los cilios son intr&#xED;nsecamente implicados en los procesos de PCP.

La alteraci&#xF3;n de las prote&#xED;nas del s&#xED;ndrome de Bardet-Biedl Ciliar perturba polaridad celular plana de los vertebrados

&#x8FDE;&#x9501;&#x4E2D;&#x8868;&#x578B;&#x53D8;&#x5F02;&#xFF0C;&#x6709;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x4F46;&#x8FD9;&#x79CD;&#x73B0;&#x8C61;&#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x5256;&#x6790;&#x4ECD;&#x7136;&#x5F88;&#x5177;&#x6311;&#x6218;&#x6027;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x65B0;&#x578B;&#x7684;&#x8F68;&#x8FF9;&#xFF0C;MGC1203&#xFF0C;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E; Bardet Biedl &#x7EFC;&#x5408;&#x75C7; (BBS)&#x3001; &#x591A;&#x6548;&#x6027;&#xFF0C;&#x5BE1;&#x969C;&#x788D;&#x4E0A;&#x4F4D;&#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x9274;&#x5B9A;&#x3002;MGC1203 &#x5C06;&#x7F16;&#x7801; pericentriolar &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x4EA4;&#x4E92;&#x548C; colocalizes &#x4E0E; BBS &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;&#x5E8F;&#x5217;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x72EC;&#x7ACB;&#x7684; BBS &#x7EC4;&#x7FA4;&#x900F;&#x9732;&#x91CD;&#x5927;&#x6D53;&#x7F29;&#x7684;&#x6742;&#x5408;&#x6027;&#x7684; C430T &#x7A81;&#x53D8;&#x7684;&#x75C5;&#x4EBA;&#xFF0C;&#x548C;&#x4F20;&#x9012;&#x4E0D;&#x5E73;&#x8861;&#x68C0;&#x9A8C; (TDT) &#x8868;&#x660E;&#x5F3A; over-transmission &#x7684;&#x8FD9;&#x79CD;&#x53D8;&#x4F53;&#x3002;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E; 430T &#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#x589E;&#x5F3A;&#x4F7F;&#x7528;&#x795E;&#x79D8;&#x63A5;&#x5934;&#x627F;&#x5151;&#x4EBA;&#x7F51;&#x7AD9;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x8FC7;&#x65E9;&#x7EC8;&#x6B62;&#x5BC6;&#x7801;&#x5B50; (PTC) &#x7684;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x548C;&#x7A33;&#x6001; MGC1203 &#x4FE1;&#x4F7F; RNA &#x6C34;&#x5E73;&#x51CF;&#x5C11;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x5728;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x4E2D;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x57FA;&#x56E0;&#x578B;&#x7684;&#x91CD;&#x8FF0;&#x6F14;&#x793A; mgc1203 &#x6E29;&#x548C;&#x5236;&#x6B62;&#x65BD;&#x52A0;&#x5BF9;&#x53D1;&#x5C55;&#x8868;&#x578B;&#x7684; BBS morphants &#x4E0A;&#x4F4D;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x8BF4;&#x660E;&#x5982;&#x4F55;&#x751F;&#x5316;&#x3001; &#x9057;&#x4F20;&#x548C;&#x4F53;&#x5185;&#x5DE5;&#x5177;&#x7ED3;&#x5408;&#x7684;&#x4F7F;&#x7528;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4FBF;&#x5229;&#x5939;&#x5C42;&#x7684;&#x4E0A;&#x4F4D;&#x7684;&#x73B0;&#x8C61;&#xFF0C;&#x5E76;&#x52A0;&#x5F3A;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x8868;&#x578B;&#x53D8;&#x5F02;&#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x57FA;&#x7840;&#x7684;&#x8D5E;&#x8D4F;&#x3002;

&#x5939;&#x5C42;&#x52A8;&#x8109;&#x7624;&#x7684;&#x4E0A;&#x4F4D;&#x6027;&#x5BE1; Bardet Biedl &#x7EFC;&#x5408;&#x5F81;&#x3002;

Epistatic interactions have an important role in phenotypic variability, yet the genetic dissection of such phenomena remains challenging. Here we report the identification of a novel locus, MGC1203, that contributes epistatic alleles to Bardet-Biedl syndrome (BBS), a pleiotropic, oligogenic disorder. MGC1203 encodes a pericentriolar protein that interacts and colocalizes with the BBS proteins. Sequencing of two independent BBS cohorts revealed a significant enrichment of a heterozygous C430T mutation in patients, and a transmission disequilibrium test (TDT) showed strong over-transmission of this variant. Further analyses showed that the 430T allele enhances the use of a cryptic splice acceptor site, causing the introduction of a premature termination codon (PTC) and the reduction of steady-state MGC1203 messenger RNA levels. Finally, recapitulation of the human genotypes in zebrafish shows that modest suppression of mgc1203 exerts an epistatic effect on the developmental phenotype of BBS morphants. Our data demonstrate how the combined use of biochemical, genetic and in vivo tools can facilitate the dissection of epistatic phenomena, and enhance our appreciation of the genetic basis of phenotypic variability.

Dissection of epistasis in oligogenic Bardet-Biedl syndrome.

Interactions &#xE9;pistatiques ont un r&#xF4;le important dans la variabilit&#xE9; ph&#xE9;notypique, mais la dissection g&#xE9;n&#xE9;tique de ces ph&#xE9;nom&#xE8;nes reste difficile. Nous rapportons ici l&#x26;#39;identification d&#x26;#39;un nouveau locus, MGC1203, qui contribue &#xE0; all&#xE8;les &#xE9;pistatiques de Bardet-Biedl (BBS), une pl&#xE9;iotropique, le trouble oligog&#xE9;nique. MGC1203 code pour une prot&#xE9;ine qui interagit p&#xE9;ricentriolaire et co-localise avec les prot&#xE9;ines BBS. Le s&#xE9;quen&#xE7;age de deux cohortes BBS ind&#xE9;pendantes ont r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; un enrichissement significatif d&#x26;#39;une mutation h&#xE9;t&#xE9;rozygote C430T chez les patients, et un test de d&#xE9;s&#xE9;quilibre de transmission (TDT) ont montr&#xE9; une forte plus-transmission de cette variante. D&#x26;#39;autres analyses ont montr&#xE9; que l&#x26;#39;all&#xE8;le 430T am&#xE9;liore l&#x26;#39;utilisation d&#x26;#39;un site accepteur d&#x26;#39;&#xE9;pissage cryptique, entra&#xEE;nant l&#x26;#39;introduction d&#x26;#39;un codon de terminaison pr&#xE9;matur&#xE9; (PTC) et la r&#xE9;duction de l&#x26;#39;&#xE9;tat d&#x26;#39;&#xE9;quilibre des niveaux d&#x26;#39;ARN messager MGC1203. Enfin, la r&#xE9;capitulation des g&#xE9;notypes de l&#x26;#39;homme dans le poisson-z&#xE8;bre montre que la suppression modeste de mgc1203 exerce un effet &#xE9;pistatique sur le ph&#xE9;notype de d&#xE9;veloppement de morphants BBS. Nos donn&#xE9;es d&#xE9;montrent comment l&#x26;#39;utilisation conjointe de biochimiques, g&#xE9;n&#xE9;tiques et in vivo dans des outils peuvent faciliter la dissection des ph&#xE9;nom&#xE8;nes &#xE9;pistatiques, et d&#x26;#39;am&#xE9;liorer notre appr&#xE9;ciation de la base g&#xE9;n&#xE9;tique de la variabilit&#xE9; ph&#xE9;notypique.

Dissection de l&#x26;#39;&#xE9;pistasie dans oligog&#xE9;nique de Bardet-Biedl syndrome

Epistatic Interaktionen haben eine wichtige Rolle in ph&auml;notypische Variabilit&auml;t, aber die Genetik dieser Ph&auml;nomene bleibt weiterhin schwierig. Hier berichten wir &uuml;ber die Identifizierung einer neuartigen Locus, MGC1203, die epistatic Allele, Bardet-Biedl-Syndrom (BBS), einen pleiotropen, Oligogenic St&ouml;rung beitr&auml;gt. MGC1203 kodiert ein Pericentriolar Protein, das interagiert und colocalizes mit der BBS-Proteine. Sequenzierung von zwei unabh&auml;ngigen BBS Kohorten offenbart eine wesentliche Bereicherung der heterozygote Mutation C430T bei Patienten, und ein Ungleichgewicht &Uuml;bertragungstest (TDT) zeigte starke Over-transmission dieser Variante. Weitere Analysen zeigten, dass die 430T-Allel die Verwendung einer kryptischen Splei&szlig;-Akzeptor-Website erh&ouml;ht verursacht die Einf&uuml;hrung einer vorzeitigen K&uuml;ndigung-Codon (PTC) und die Verringerung der station&auml;ren MGC1203 Boten-RNA-Level. Schlie&szlig;lich zeigt Reprise der menschlichen Genotypen in Zebrafisch, bescheidene Unterdr&uuml;ckung der mgc1203 einen epistatic Effekt auf die Entwicklungsbiologie Ph&auml;notyp der BBS Morphants &uuml;bt. Unsere Daten zeigen, wie der kombinierte Einsatz von biochemischen, genetische und in-vivo-Tools erleichtern die Pr&auml;paration der epistatic Ph&auml;nomene kann, und verbessern unsere Dankbarkeit f&uuml;r die genetische Grundlage f&uuml;r ph&auml;notypische Variabilit&auml;t.

Pr&auml;paration der Epistase in Oligogenic Bardet-Biedl-Syndrom.

Interazioni epistatici hanno un ruolo importante nella variabilit&agrave; fenotipica, eppure la dissezione genetica di tali fenomeni rimane impegnativa. Qui riportiamo l&#39;identificazione di un locus romanzo, MGC1203, che contribuisce epistatici alleli di Bardet-Biedl sindrome (BBS), un pleiotropica, disturbo oligogenica. MGC1203 codifica per una proteina di pericentriolar che interagisce e colocalizza con le proteine BBS. Sequenziamento di BBS indipendente due coorti ha rivelato un significativo arricchimento di una mutazione in eterozigosi C430T nei pazienti, e un test di disequilibrio della trasmissione (TDT) ha mostrato forte over-transmission di questa variante. Ulteriori analisi hanno dimostrato che l&#39;allele 430T migliora l&#39;utilizzo di un sito accettore di splice criptico, causando l&#39;introduzione di un codone di terminazione prematura (PTC) e la riduzione dei livelli di RNA messaggero MGC1203 steady-state. Infine, Ricapitolazione dei genotipi umani nello zebrafish Mostra che modesto soppressione del mgc1203 esercita un effetto sul fenotipo evolutiva di BBS morphants epistatici. I nostri dati dimostrano, come l&#39;uso combinato di strumenti di biochimici, genetici e in vivo pu&ograve; facilitare la dissezione dei fenomeni epistatici e migliorare il nostro apprezzamento per la base genetica della variabilit&agrave; fenotipica.

Dissezione di epistasi nella sindrome di Bardet-Biedl oligogenica.

&#x30A8;&#x30D4;&#x30B9;&#x30BF;&#x30B7;&#x30B9;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x304C;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x5909;&#x52D5;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3001;&#x307E;&#x3060;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x73FE;&#x8C61;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x89E3;&#x5256;&#x306F;&#x56F0;&#x96E3;&#x306A;&#x307E;&#x307E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30D0;&#x30FC;&#x30C7;&#x30C3;&#x30C8; - &#x30D3;&#x30FC;&#x30C9;&#x30EB;&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#xFF08;BBS&#xFF09;&#x3001;&#x591A;&#x9762;&#x7684;&#x3001;oligogenic&#x969C;&#x5BB3;&#x306B;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B9;&#x30BF;&#x30B7;&#x30B9;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306B;&#x5BC4;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x65B0;&#x898F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5EA7;&#x3001;MGC1203&#x306E;&#x540C;&#x5B9A;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; MGC1203&#x306F;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3057;&#x3001;BBS&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3068;&#x5171;&#x5C40;&#x5728;&#x3059;&#x308B;pericentriolar&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x4E8C;&#x3064;&#x306E;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x305F;BBS&#x306E;&#x30B3;&#x30DB;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E;&#x914D;&#x5217;&#x60A3;&#x8005;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30D8;&#x30C6;&#x30ED;C430T&#x5909;&#x7570;&#x306E;&#x6709;&#x610F;&#x306A;&#x6FC3;&#x7E2E;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x3001;&#x4F1D;&#x9054;&#x4E0D;&#x5E73;&#x8861;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#xFF08;TDT&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x4F1D;&#x9001;&#x306B;&#x308F;&#x305F;&#x3063;&#x3066;&#x5F37;&#x3044;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306A;&#x308B;&#x5206;&#x6790;&#x306F;&#x3001;430T&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x672A;&#x719F;&#x7D42;&#x6B62;&#x30B3;&#x30C9;&#x30F3;&#xFF08;PTC&#xFF09;&#x3068;&#x5B9A;&#x5E38;&#x72B6;&#x614B;MGC1203&#x30E1;&#x30C3;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B8;&#x30E3;&#x30FC;RNA&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306E;&#x5C0E;&#x5165;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x4E0D;&#x53EF;&#x89E3;&#x306A;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B9;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BB;&#x30D7;&#x30BF;&#x30FC;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x3067;&#x30D2;&#x30C8;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x8981;&#x7D04;&#x306F;&#x3001;mgc1203&#x767A;&#x63EE;&#x63B2;&#x793A;&#x677F;morphants&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306B;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B9;&#x30BF;&#x30B7;&#x30B9;&#x52B9;&#x679C;&#x306E;&#x305D;&#x306E;&#x63A7;&#x3048;&#x3081;&#x306A;&#x6291;&#x5236;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3069;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x751F;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;in vivo&#x306E;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3067;&#x306E;&#x4F75;&#x7528;&#x304C;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B9;&#x30BF;&#x30B7;&#x30B9;&#x73FE;&#x8C61;&#x306E;&#x89E3;&#x96E2;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3057;&#x3001;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x5909;&#x52D5;&#x6027;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x57FA;&#x790E;&#x306E;&#x611F;&#x8B1D;&#x306E;&#x6C17;&#x6301;&#x3061;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Oligogenic&#x30D0;&#x30FC;&#x30C7;&#x30C3;&#x30C8; - &#x30D3;&#x30FC;&#x30C9;&#x30EB;&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#x306E;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B9;&#x30BF;&#x30B7;&#x30B9;&#x306E;&#x89E3;&#x5256;

Epistatic &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; phenotypic &#xB2E4;&#xC591;&#xC131;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xC544;&#xC9C1; &#xADF8;&#xB7F0; &#xD604;&#xC0C1;&#xC758; &#xC720;&#xC804; &#xD574; &#xBD80; &#xB3C4;&#xC804; &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCF4;&#xACE0; &#xC18C;&#xC124; &#xB85C;&#xCEE4; &#xC2A4;, MGC1203, Bardet Biedl &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70; (&#xAC8C;&#xC2DC;&#xD310;)&#xB294; &#xB2E4; &#xBA74; &#xBC1C;&#xD604; &#xC131;, oligogenic &#xC7A5;&#xC560; epistatic &#xB300;&#xB9BD;&#xC744; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD558; &#xACE0; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. MGC1203 &#xAC8C;&#xC2DC;&#xD310; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC73C;&#xB85C; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558; &#xACE0; colocalizes pericentriolar &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; &#xAC8C;&#xC2DC;&#xD310;&#xC758; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2F1; &#xB3D9;&#xB8CC; &#xD658;&#xC790;, heterozygous C430T &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC758; &#xC911;&#xB300; &#xD55C; &#xD48D;&#xBD80; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC804;&#xC1A1; &#xBD88;&#xADE0;&#xD615; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; (TDT)&#xC774;&#xC774; variant&#xC758; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; over-transmission&#xB97C; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;. &#xCD94;&#xAC00; &#xBD84;&#xC11D; 430T &#xB300;&#xB9BD; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xC870;&#xAE30; &#xC885;&#xB8CC; codon (PTC)&#xC758; &#xB3C4;&#xC785; &#xBC0F; &#xC815;&#xC0C1; &#xC0C1;&#xD0DC; MGC1203 &#xBA54;&#xC2E0;&#xC800; RNA &#xB808;&#xBCA8;&#xC758; &#xAC10;&#xC18C;&#xB97C; &#xC77C;&#xC73C;&#xD0A4;&#xB294; &#xC774;&#xC0C1;&#xD55C; &#xC2A4;&#xD50C;&#xB77C;&#xC774;&#xC2A4; &#xC218;&#xB77D;&#xC790; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD5A5;&#xC0C1;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC778;&#xAC04;&#xC758; genotypes zebrafish&#xC758;&#xC758; &#xC7AC;&#xD604; &#xBD80; mgc1203&#xC758; &#xACB8;&#xC190; &#xD55C; &#xC5B5;&#xC81C; &#xAC8C;&#xC2DC;&#xD310; morphants&#xC758; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xD615;&#xC5D0; epistatic &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; &#xC0DD;&#xD654;&#xD559;, &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xB97C; &#xACB0;&#xD569; &#xD558; &#xC5EC; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xC218; epistatic &#xD604;&#xC0C1;&#xC758; &#xD574; &#xBD80;&#xB97C; &#xC6A9;&#xC774; &#xD558; &#xAC8C; &#xD558; &#xACE0; phenotypic &#xB2E4;&#xC591;&#xC131;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC801; &#xAE30;&#xCD08;&#xC758; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xAC10;&#xC0AC;&#xB97C; &#xAC15;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Oligogenic Bardet-Biedl &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70;&#xC5D0; epistasis&#xC758; &#xD574; &#xBD80;.

Interacciones epist&#xE1;ticas tienen un papel importante en la variabilidad fenot&#xED;pica, sin embargo, la disecci&#xF3;n gen&#xE9;tica de estos fen&#xF3;menos sigue siendo un reto. Aqu&#xED; se presenta la identificaci&#xF3;n de un nuevo locus, MGC1203, que contribuye a epist&#xE1;ticos alelos de Bardet-Biedl (BBS), un trastorno pleiotr&#xF3;pico, oligog&#xE9;nico. MGC1203 codifica una prote&#xED;na que interact&#xFA;a pericentriolar y colocalizes con las prote&#xED;nas BBS. La secuenciaci&#xF3;n de dos cohortes independientes BBS revel&#xF3; un significativo enriquecimiento de una mutaci&#xF3;n heterocigota C430T en pacientes, y una prueba de desequilibrio de transmisi&#xF3;n (TDT) mostr&#xF3; fuerte sobre la transmisi&#xF3;n de esta variante. An&#xE1;lisis posteriores demostraron que el alelo 430T mejora el uso de un sitio aceptor de empalme cr&#xED;ptico, causando la introducci&#xF3;n de un cod&#xF3;n de terminaci&#xF3;n prematura (PTC) y la reducci&#xF3;n de los niveles de estado estacionario MGC1203 ARN mensajero. Por &#xFA;ltimo, la recapitulaci&#xF3;n de los genotipos humanos en el pez cebra muestra que la supresi&#xF3;n modesta de mgc1203 ejerce un efecto sobre el fenotipo epist&#xE1;tico desarrollo de morphants BBS. Nuestros datos demuestran c&#xF3;mo el uso combinado de bioqu&#xED;mica, gen&#xE9;tica y en las herramientas in vivo puede facilitar la disecci&#xF3;n de los fen&#xF3;menos de epistasis, y mejorar nuestra apreciaci&#xF3;n de la base gen&#xE9;tica de la variabilidad fenot&#xED;pica.

La disecci&#xF3;n de epistasis en Oligog&#xE9;nica de Bardet-Biedl

&#x8FDB;&#x5316;&#x5E8F;&#x5217;&#x517B;&#x62A4;&#x662F;&#x516C;&#x8BA4;&#x7684;&#x6807;&#x51C6;&#xFF0C;&#x786E;&#x5B9A;&#x7F16;&#x7801;&#x7684;&#x8C03;&#x63A7;&#x5E8F;&#x5217;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x57FA;&#x4E8E;&#x8F6C;&#x5EA7;&#x5B50;&#x7684;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x68C0;&#x6D4B;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x6765;&#x8BC4;&#x4F30;&#x975E;&#x7F16;&#x7801;&#x5E8F;&#x5217;&#x5728;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C; ret &#x4FDD;&#x5B88;&#x4E4B;&#x95F4;&#x786C;&#x9AA8;&#x9C7C;&#x7C7B;&#xFF0C;&#x548C;&#x5728;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x95F4;&#x4FDD;&#x5B88;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B; RET &#x8F68;&#x8FF9;&#x7684;&#x8F68;&#x8FF9;&#x3002;&#x786C;&#x9AA8;&#x5E8F;&#x5217;&#x6700;&#x9488;&#x5BF9;&#x8BB0;&#x8005; ret &#x7279;&#x5B9A;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x5F88;&#x591A;&#x663E;&#x793A;&#x91CD;&#x53E0;&#x7684;&#x89C4;&#x7BA1;&#x3002;&#x4EBA;&#x7C7B; RET &#x975E;&#x7F16;&#x7801;&#x5E8F;&#x5217;&#x7684;&#x591A;&#x6570;&#x8FD8;&#x5728;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x4E2D;&#x6307;&#x793A; ret &#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x5B58;&#x5728;&#x5927;&#x91CF;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x6027;&#x5E8F;&#x5217;&#x4FE1;&#x606F;&#xFF0C;&#x5C06;&#x4E0D;&#x80FD;&#x68C0;&#x6D4B;&#x7684;&#x5E8F;&#x5217;&#x76F8;&#x4F3C;&#x6027;&#x7684;&#x529E;&#x6CD5;&#x3002;

RET &#x76D1;&#x7BA1;&#x804C;&#x80FD;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x4EBA;&#x6743;&#x5230;&#x65E0;&#x5E8F;&#x5217;&#x76F8;&#x4F3C;&#x6027;&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x7684;&#x517B;&#x62A4;&#x3002;

Evolutionary sequence conservation is an accepted criterion to identify noncoding regulatory sequences. We have used a transposon-based transgenic assay in zebrafish to evaluate noncoding sequences at the zebrafish ret locus, conserved among teleosts, and at the human RET locus, conserved among mammals. Most teleost sequences directed ret-specific reporter gene expression, with many displaying overlapping regulatory control. The majority of human RET noncoding sequences also directed ret-specific expression in zebrafish. Thus, vast amounts of functional sequence information may exist that would not be detected by sequence similarity approaches.

Conservation of RET regulatory function from human to zebrafish without sequence similarity.

Conservation de la s&#xE9;quence de l&#x26;#39;&#xE9;volution est un crit&#xE8;re accept&#xE9; pour identifier des s&#xE9;quences non codantes de r&#xE9;glementation. Nous avons utilis&#xE9; un dosage bas&#xE9; sur le transposon chez le poisson z&#xE8;bre transg&#xE9;nique pour &#xE9;valuer les s&#xE9;quences non codantes au niveau du locus poisson z&#xE8;bre ret, conserv&#xE9; parmi les t&#xE9;l&#xE9;ost&#xE9;ens, et au niveau du locus humain RET, conserv&#xE9;es chez les mammif&#xE8;res. La plupart des s&#xE9;quences t&#xE9;l&#xE9;ost&#xE9;ens dirig&#xE9; ret-expression sp&#xE9;cifique du g&#xE8;ne rapporteur, avec de nombreux chevauchements afficher un contr&#xF4;le r&#xE9;glementaire. La majorit&#xE9; des s&#xE9;quences non codantes de l&#x26;#39;homme a &#xE9;galement dirig&#xE9; RET RET-expression sp&#xE9;cifique chez le poisson z&#xE8;bre. Ainsi, de vastes quantit&#xE9;s d&#x26;#39;information s&#xE9;quence fonctionnelle peut exister qui ne seraient pas d&#xE9;tect&#xE9;s par les approches de similarit&#xE9; de s&#xE9;quence.

Conservation de la fonction de r&#xE9;glementation RET de l&#x26;#39;homme &#xE0; poisson-z&#xE8;bre Sans similarit&#xE9; de s&#xE9;quence

Evolution&auml;re Sequenz Erhaltung ist eine akzeptierte Kriterium f&uuml;r nichtkodierende regulatorische Sequenzen zu identifizieren. Wir haben eine Transposon-gegr&uuml;ndeten transgene Probe verwendet im Zebrafisch auswerten nichtkodierende Sequenzen an der Zebrafisch ret Locus, konserviert unter den Teleosts und an der menschlichen RET-Locus, bei S&auml;ugetieren konserviert. Die meisten teleost Sequenzen gerichtet ret-spezifische Reporter Genexpression, mit vielen Anzeigen von &uuml;berlappenden Regulierungsaufsicht. Die Mehrheit der menschlichen RET nichtkodierende Sequenzen drehte auch ret-spezifischen Ausdruck im Zebrafisch. So riesige Informationsmengen Funktionsablauf existieren k&ouml;nnen, die nicht von Sequenz &Auml;hnlichkeit Ans&auml;tze erkannt werden w&uuml;rde.

Erhaltung der hoheitlichen Funktion RET aus menschlichen, Zebrafish ohne Reihenfolge &Auml;hnlichkeit.

Conservazione di sequenza evolutiva &egrave; un criterio accettato per identificare sequenze regolatrici non codificante. Abbiamo usato un dosaggio transgenico basati su trasposone in zebrafish per valutare sequenze non codificante presso il Danio rerio ret locus, conservata tra i teleostei e presso il locus RET umano, conservato tra i mammiferi. Pi&ugrave; sequenze di teleostei diretto espressione del gene reporter ret-specifiche, con molti visualizzazione controllo normativo di sovrapposizione. La maggior parte degli umani RET non codificante sequenze diretto anche espressione ret-specifica nello zebrafish. Cos&igrave;, possono esistere grandi quantit&agrave; di informazioni di sequenza funzionale che non sarebbe rilevato da approcci di similarit&agrave; di sequenza.

Conservazione della funzione regolamentare RET da umani di zebrafish senza similarit&agrave; di sequenza.

&#x9032;&#x5316;&#x7684;&#x306A;&#x914D;&#x5217;&#x4FDD;&#x5B58;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x975E;&#x7FFB;&#x8A33;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x914D;&#x5217;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x8A8D;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x57FA;&#x6E96;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x786C;&#x9AA8;&#x9B5A;&#x985E;&#x306E;&#x9593;&#x3067;&#x4FDD;&#x5B58;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;RET&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5EA7;&#x3067;&#x306E;&#x975E;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x914D;&#x5217;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30BE;&#x30F3;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3001;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;RET&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5EA7;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x9593;&#x3067;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306E;&#x786C;&#x9AA8;&#x9B5A;&#x306E;&#x914D;&#x5217;&#x306F;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x898F;&#x5236;&#x7BA1;&#x7406;&#x304C;&#x91CD;&#x8907;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3068;&#x3001;ret&#x306E;&#x56FA;&#x6709;&#x306E;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x6307;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30D2;&#x30C8;RET&#x975E;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x914D;&#x5217;&#x306E;&#x5927;&#x90E8;&#x5206;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;RET-&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x6307;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306A;&#x914D;&#x5217;&#x60C5;&#x5831;&#x306E;&#x81A8;&#x5927;&#x306A;&#x91CF;&#x306F;&#x3001;&#x914D;&#x5217;&#x985E;&#x4F3C;&#x6027;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5B58;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x5834;&#x5408;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x914D;&#x5217;&#x985E;&#x4F3C;&#x6027;&#x304C;&#x306A;&#x3051;&#x308C;&#x3070;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;&#x304B;&#x3089;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306B;RET&#x8ABF;&#x7BC0;&#x6A5F;&#x200B;&#x200B;&#x80FD;&#x306E;&#x4FDD;&#x5168;

&#xC9C4;&#xD654; &#xC21C;&#xC11C; &#xBCF4;&#xC874; noncoding &#xADDC;&#xC81C; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xB294; &#xD5C8;&#xC6A9;&#xB41C; &#xAE30;&#xC900; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; transposon &#xAE30;&#xBC18; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD3C9;&#xAC00; zebrafish noncoding &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xB294; zebrafish&#xC5D0;&#xC11C; ret &#xB85C;&#xCEE4; &#xC2A4;, teleosts, &#xC911; &#xACE0; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; RET &#xB85C;&#xCEE4; &#xC2A4;, &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xAC00;&#xC6B4;&#xB370; &#xBCF4;&#xC874;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xC874;. Teleost &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xAC00;&#xC7A5; &#xB9CE;&#xC740; &#xC911;&#xBCF5; &#xADDC;&#xC81C; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864; &#xD45C;&#xC2DC; ret &#xAD00;&#xB828; &#xB9AC;&#xD3EC;&#xD130; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC744; &#xAC10;&#xB3C5;. &#xB610;&#xD55C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; RET noncoding &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC758; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84; zebrafish ret &#xD2B9;&#xC815; &#xC2DD; &#xAC10;&#xB3C5;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xBC29;&#xB300;&#xD55C; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xC815;&#xBCF4;&#xC5D0; &#xC874;&#xC7AC;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xC720;&#xC0AC;&#xC131; &#xC811;&#xADFC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAC10;&#xC9C0; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC744; &#xAC83; &#xC774;&#xB77C;&#xACE0;.

Zebrafish &#xC5C6;&#xC774; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xC720;&#xC0AC;&#xC131;&#xC744; &#xC778;&#xAC04;&#xC5D0;&#xC11C; RET &#xADDC;&#xC81C; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBCF4;&#xC874;.

Conservaci&#xF3;n de la secuencia evolutiva es un criterio aceptado para identificar las secuencias no codificantes de regulaci&#xF3;n. Hemos utilizado un ensayo transg&#xE9;nico transpos&#xF3;n basado en el pez cebra para evaluar las secuencias no codificantes en el locus pez cebra ret, conservan entre los tele&#xF3;steos, y en el locus RET humana, conservadas entre los mam&#xED;feros. La mayor&#xED;a de las secuencias de tele&#xF3;steos dirigido ret espec&#xED;ficos de la expresi&#xF3;n del gen indicador, que muestra la superposici&#xF3;n con muchos controles reglamentarios. La mayor&#xED;a de los humanos secuencias no codificantes RET RET tambi&#xE9;n dirigi&#xF3; la expresi&#xF3;n espec&#xED;fica en el pez cebra. Por lo tanto, grandes cantidades de informaci&#xF3;n de la secuencia funcional puede existir que no ser&#xED;a detectado por los enfoques de similitud de secuencias.

Conservaci&#xF3;n de la funci&#xF3;n RET Reguladora de Humano a pez cebra Sin similitud de secuencia

&#x8BC4;&#x4EF7;&#x751F;&#x7269;&#x7684;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x4E2D;&#x65E0;&#x6570;&#x5047;&#x5B9A;&#x76D1;&#x7BA1;&#x975E;&#x7F16;&#x7801;&#x5E8F;&#x5217;&#x76F8;&#x5173;&#x6027;&#x8868;&#x793A;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5DE8;&#x5927;&#x7684;&#x6311;&#x6218;&#x3002;&#x529F;&#x80FD;&#x5206;&#x6790;&#x4F53;&#x5185;&#x901A;&#x5E38;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6602;&#x8D35;&#x548C;&#x52B3;&#x52A8;&#x5BC6;&#x96C6;&#x578B;&#x7684;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x6218;&#x7565;&#x5C0F;&#x9F20;&#x3002;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x6280;&#x672F;&#x4E5F;&#x9002;&#x7528;&#x4E8E; nonrodent &#x7684;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#xFF0C;&#x5982;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#xFF0C;&#x4F46;&#x76F4;&#x5230;&#x6700;&#x8FD1;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x52AA;&#x529B;&#x4E00;&#x76F4;&#x53D7;&#x5230;&#x91CD;&#x5927;&#x9576;&#x5D4C;&#x548C;&#x751F;&#x6B96;&#x4F20;&#x64AD;&#x5DEE;&#x7387;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5236;&#x5B9A;&#x4E86;&#x57FA;&#x4E8E; Tol2 &#x7684;&#x8F6C;&#x5EA7;&#x5B50;&#xFF0C;&#x79FB;&#x52A8;&#x7684;&#x5143;&#x7D20;&#x5728;&#x53E6;&#x4E00;&#x4E2A;&#x786C;&#x9AA8;&#xFF0C;&#x6B21;&#x6700;&#x8FD1;&#x624D;&#x53D1;&#x73B0;&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x6218;&#x7565;&#x3002;&#x6B64;&#x65B9;&#x6CD5;&#x91C7;&#x7528;&#x7684;&#x6B64;&#x5B8C;&#x6574; DNA &#x8F6C;&#x5EA7;&#x5B50;&#xFF0C;&#x7531;&#x76F8;&#x5E94;&#x7684;&#x8F6C;&#x86CB;&#x767D;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x6240;&#x63D0;&#x4F9B;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x6574;&#x5408;&#x7684;&#x63D0;&#x9AD8;&#x6548;&#x7387;&#x7684;&#x4F18;&#x52BF;&#x3002;&#x672C;&#x534F;&#x8BAE;&#x4E2D;&#x6240;&#x8FF0;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x4F7F;&#x7528;&#x901A;&#x7528;&#x77E2;&#x91CF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x5141;&#x8BB8;&#x7528;&#x7279;&#x5B9A;&#x4E8E;&#x7AD9;&#x70B9;&#x7684;&#x91CD;&#x7EC4;&#x5E8F;&#x5217;&#x76EE;&#x6807;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684; DNA &#x5FEB;&#x901F;&#x7EB3;&#x5165;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x8BC4;&#x4F30;&#x5019;&#x9009;&#x5E8F;&#x5217;&#x7684;&#x7BA1;&#x7406;&#x6F5C;&#x529B;&#xFF0C;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x95F4;&#x9694;&#x662F; PCR &#x6269;&#x589E;&#x4F7F;&#x7528;&#x5E8F;&#x5217;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x5F15;&#x7269;&#xFF0C;&#x4E24;&#x4FA7;&#x662F;&#x5FC5;&#x8981;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x7AD9;&#x70B9;&#x7684;&#x514B;&#x9686;&#xFF0C;&#x5E76;&#x91CD;&#x7EC4;&#x5230;&#x666E;&#x904D;&#x8868;&#x8FBE;&#x8D28;&#x7C92; &#xFF08;pGW_cfosEGFP&#xFF09;&#x3002;&#x7EAF;&#x5316;&#x7684;&#x91CD;&#x7EC4; Dna &#x7136;&#x540E;&#x6CE8;&#x5165; 1-2-&#x7EC6;&#x80DE;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x80DA;&#x80CE;&#x548C;&#x5728;&#x5F00;&#x53D1;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x6240;&#x9700;&#x7684; timepoints &#x5728;&#x5206;&#x6790;&#xFF0C;&#x7531;&#x6B64;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x8BB0;&#x8005;&#x8868;&#x8FBE;&#x6A21;&#x5F0F;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E00;&#x5236;&#x5EA6;&#x662F;&#x9002;&#x5408;&#x8FDB;&#x884C;&#x5927;&#x89C4;&#x6A21;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#xFF0C;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x5FEB;&#x901F;&#x529F;&#x80FD;&#x5206;&#x6790;&#x7684;&#x975E;&#x7F16;&#x7801;&#x5E8F;&#x5217;&#x4ECE;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x548C;&#x786C;&#x9AA8;&#x9C7C;&#x79CD;&#x3002;

&#x8BC4;&#x4F30;&#x5047;&#x5B9A;&#x5242;&#x5728;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x4E2D;&#x4F7F;&#x7528; Tol2 &#x8F6C;&#x5EA7;&#x5B50;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x6280;&#x672F;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x76F8;&#x5173;&#x6027;&#x3002;

Evaluating the biological relevance of the myriad putative regulatory noncoding sequences in vertebrate genomes represents a huge challenge. Functional analyses in vivo have typically relied on costly and labor-intensive transgenic strategies in mice. Transgenesis has also been applied in nonrodent vertebrates, such as zebrafish, but until recently these efforts have been hampered by significant mosaicism and poor rates of germline transmission. We have developed a transgenic strategy in zebrafish based on the Tol2 transposon, a mobile element that was recently identified in another teleost, Medaka. This method takes advantage of the increased efficiency of genome integration that is afforded by this intact DNA transposon, activity that is mediated by the corresponding transposase protein. The approach described in this protocol uses a universal vector system that permits rapid incorporation of DNA that is tagged with sequence targets for site-specific recombination. To evaluate the regulatory potential of a candidate sequence, the desired interval is PCR-amplified using sequence-specific primers that are flanked by the requisite target sites for cloning, and recombined into a universal expression plasmid (pGW_cfosEGFP). Purified recombinant DNAs are then injected into 1-2-cell zebrafish embryos and the resulting reporter expression patterns are analyzed at desired timepoints during development. This system is amenable to large-scale application, facilitating rapid functional analysis of noncoding sequences from both mammalian and teleost species.

Evaluating the biological relevance of putative enhancers using Tol2 transposon-mediated transgenesis in zebrafish.

&#xC9;valuer la pertinence biologique de la myriade de s&#xE9;quences non codantes putatives de r&#xE9;gulation dans les g&#xE9;nomes de vert&#xE9;br&#xE9;s repr&#xE9;sente un &#xE9;norme d&#xE9;fi. Les analyses fonctionnelles in vivo sont g&#xE9;n&#xE9;ralement appuy&#xE9;s sur co&#xFB;teuses et de main-d&#x26;#39;&#x153;uvre strat&#xE9;gies transg&#xE9;niques chez la souris. La transgen&#xE8;se a &#xE9;galement &#xE9;t&#xE9; appliqu&#xE9;e chez les vert&#xE9;br&#xE9;s nonrodent, tels que le poisson-z&#xE8;bre, mais jusqu&#x26;#39;&#xE0; r&#xE9;cemment, ces efforts ont &#xE9;t&#xE9; entrav&#xE9;s par une mosa&#xEF;que importante et les faibles taux de transmission germinale. Nous avons d&#xE9;velopp&#xE9; une strat&#xE9;gie chez le poisson z&#xE8;bre transg&#xE9;nique sur la base du transposon Tol2, un &#xE9;l&#xE9;ment mobile qui a &#xE9;t&#xE9; r&#xE9;cemment identifi&#xE9; dans un autre t&#xE9;l&#xE9;ost&#xE9;ens, m&#xE9;daka. Cette m&#xE9;thode tire parti de l&#x26;#39;efficacit&#xE9; accrue de l&#x26;#39;int&#xE9;gration du g&#xE9;nome qui est accord&#xE9;e par le pr&#xE9;sent transposon ADN intact, activit&#xE9; qui est m&#xE9;di&#xE9;e par la prot&#xE9;ine transposase correspondante. L&#x26;#39;approche d&#xE9;crite dans ce protocole utilise un syst&#xE8;me de vecteur universel qui permet l&#x26;#39;int&#xE9;gration rapide de l&#x26;#39;ADN qui est &#xE9;tiquet&#xE9; avec des objectifs de s&#xE9;quence pour la recombinaison site sp&#xE9;cifique. Pour &#xE9;valuer le potentiel de r&#xE9;gulation d&#x26;#39;une s&#xE9;quence candidate, l&#x26;#39;intervalle d&#xE9;sir&#xE9; est amplifi&#xE9; par PCR en utilisant la s&#xE9;quence des amorces sp&#xE9;cifiques qui sont flanqu&#xE9;s par les sites cibles n&#xE9;cessaires pour le clonage, et recombin&#xE9;s dans une expression universelle plasmide (pGW_cfosEGFP). Purifi&#xE9;s ADN recombinants sont ensuite inject&#xE9;es dans des embryons de poisson z&#xE8;bre 1-2-cellulaires et des mod&#xE8;les d&#x26;#39;expression r&#xE9;sultant rapporteurs sont analys&#xE9;s &#xE0; timepoints souhait&#xE9;s au cours du d&#xE9;veloppement. Ce syst&#xE8;me se pr&#xEA;te &#xE0; application &#xE0; grande &#xE9;chelle, ce qui facilite rapide analyse fonctionnelle des s&#xE9;quences non codantes de deux esp&#xE8;ces de mammif&#xE8;res et de poissons t&#xE9;l&#xE9;ost&#xE9;ens.

&#xC9;valuer la pertinence biologique de Enhancers putatifs &#xE0; l&#x26;#39;aide Tol2 transposon m&#xE9;di&#xE9;e par transgen&#xE8;se chez le poisson z&#xE8;bre

Bewertung die biologische Relevanz der unz&auml;hligen vermeintlichen regul&auml;rer nichtkodierende Sequenzen in vertebrate Genom stellt eine gro&szlig;e Herausforderung dar. Funktionsanalysen in-vivo haben in der Regel auf Kosten- und arbeitsintensive transgene Strategien bei M&auml;usen verlassen. Transgenese auch in nonrodent Wirbeltiere, wie z. B. Zebrafisch, angewendet wurde, aber bis vor kurzem wurde diese Bem&uuml;hungen durch erhebliche Mosaik und niedrige Raten bei Germline &Uuml;bertragung behindert. Wir entwickelten eine transgene Strategie im Zebrafisch auf der Grundlage der Tol2 Transposon, mobile-Element, das vor kurzem in einem anderen teleost, Medaka identifiziert wurde. Diese Methode nutzt die Steigerung der Effizienz der Genom-Integration, die durch diese intakte DNA-Transposon, T&auml;tigkeit gew&auml;hrt wird, die von den entsprechenden Transposase-Protein vermittelt wird. Die in diesem Protokoll beschriebene Methode verwendet ein universal Vektor, die rasche Aufnahme von DNA erlaubt, das mit Sequenz-Ziele f&uuml;r ortsspezifische Rekombination markiert ist. Um das regulatorische Potenzial einer Kandidaten-Sequenz zu bewerten, ist das gew&uuml;nschte Intervall, PCR-amp mit Sequenz-spezifischen Z&uuml;ndkapseln, die flankiert von der notwendigen Ziel-Sites f&uuml;r das Klonen und rekombiniert in einer universellen Ausdruck Plasmid (pGW_cfosEGFP). Gereinigte rekombinante DNA werden dann in 1-2-Zellen Zebrafisch-Embryonen injiziert und die daraus resultierende Reporter Ausdrucksmuster am gew&uuml;nschten Zeitpunkte w&auml;hrend der Entwicklung ausgewertet. Dieses System ist f&uuml;r die Parallelisierung auf gro&szlig;fl&auml;chige Anwendung, schnelle Funktionalanalysis nichtkodierende Sequenzen aus sowohl S&auml;ugetier- und teleost Arten zu erleichtern.

Die biologische Relevanz der vermeintlichen Vergr&ouml;&szlig;erer mit Tol2 Transposon-vermittelte Transgenese im Zebrafisch auswerten.

Valutare la rilevanza biologica della miriade putative sequenze regolatrici non codificante in genomi di vertebrati rappresenta una sfida enorme. Analisi funzionale in vivo in genere hanno contato su strategie transgenici costosi e dispendioso nei topi. Transgenesi sono stato applicato anche nei vertebrati nonrodent, come zebrafish, ma fino a poco tempo questi sforzi sono stati ostacolati da un significativo mosaicismo e tassi di trasmissione germinale. Abbiamo sviluppato una strategia transgenica di zebrafish basato sul trasposone Tol2, un elemento mobile che &egrave; stato recentemente identificato in un altro teleostei, Medaka. Questo metodo sfrutta la maggiore efficienza di integrazione del genoma che &egrave; garantita da questo trasposone DNA intatto, attivit&agrave; che &egrave; mediato dalla proteina ha corrispondente. L&#39;approccio descritto in questo protocollo utilizza un sistema vettoriale universale che consente la rapida incorporazione di DNA che &egrave; etichettato con obiettivi di sequenza per ricombinazione sito-specifica. Per valutare il potenziale normativo di una sequenza del candidato, l&#39;intervallo desiderato &egrave; amplificato in PCR utilizzando primer sequenza-specifici che sono affiancata dai siti di destinazione richiesti per la clonazione e ricombinati in un plasmide di espressione universale (pGW_cfosEGFP). DNAs ricombinante purificato sono poi iniettato in embrioni di zebrafish di 1-2-cella e i pattern di espressione risultante reporter sono analizzati a DPD desiderata durante lo sviluppo. Questo sistema &egrave; suscettibile di applicazione su larga scala, per facilitare la rapida analisi funzionale delle sequenze non codificante da specie di mammiferi e teleostei.

Valutare la rilevanza biologica di rinforzatori putativi utilizzando Tol2 transposon mediated transgenesi nello zebrafish.

&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x7121;&#x6570;&#x306E;&#x63A8;&#x5B9A;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x975E;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x914D;&#x5217;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x95A2;&#x9023;&#x6027;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x6311;&#x6226;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; in vivo&#x3067;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x89E3;&#x6790;&#x306F;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x8CBB;&#x7528;&#x304C;&#x304B;&#x304B;&#x308A;&#x3001;&#x52B4;&#x50CD;&#x96C6;&#x7D04;&#x578B;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x6226;&#x7565;&#x306B;&#x983C;&#x3063;&#x3066;&#x304D;&#x305F;&#x3002;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306A;&#x3069;nonrodent&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306B;&#x9069;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x6700;&#x8FD1;&#x307E;&#x3067;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x53D6;&#x308A;&#x7D44;&#x307F;&#x306F;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30E2;&#x30B6;&#x30A4;&#x30AF;&#x3068;&#x751F;&#x6B96;&#x7CFB;&#x5217;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x8CA7;&#x3057;&#x3044;&#x4EBA;&#x3005;&#x306E;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x59A8;&#x3052;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x3001;Tol2&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30BE;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x6700;&#x8FD1;&#x5225;&#x306E;&#x786C;&#x9AA8;&#x9B5A;&#x3001;&#x30E1;&#x30C0;&#x30AB;&#x3067;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x643A;&#x5E2F;&#x96FB;&#x8A71;&#x306E;&#x8981;&#x7D20;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x6226;&#x7565;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306F;&#x3001;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30B6;&#x30FC;&#x30BC;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30AF;&#x30C8;&#x306A;DNA&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30BE;&#x30F3;&#x3001;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x7D71;&#x5408;&#x306E;&#x52B9;&#x7387;&#x6027;&#x306E;&#x5411;&#x4E0A;&#x3092;&#x5229;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30B3;&#x30EB;&#x3067;&#x8A18;&#x8FF0;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306F;&#x3001;&#x90E8;&#x4F4D;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3067;&#x30BF;&#x30B0;&#x4ED8;&#x3051;&#x3055;&#x308C;&#x305F;DNA&#x306E;&#x8FC5;&#x901F;&#x306A;&#x53D6;&#x308A;&#x8FBC;&#x307F;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x666E;&#x904D;&#x7684;&#x306A;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x7CFB;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5019;&#x88DC;&#x914D;&#x5217;&#x306E;&#x898F;&#x5236;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x76EE;&#x7684;&#x306E;&#x9593;&#x9694;&#x306F;&#x3001;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306B;&#x96A3;&#x63A5;&#x3057;&#x3001;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C9;&#x30E6;&#x30CB;&#x30D0;&#x30FC;&#x30B5;&#x30EB;&#x5F0F;&#xFF08;pGW_cfosEGFP&#xFF09;&#x306B;&#x518D;&#x7D50;&#x5408;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x914D;&#x5217;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x306A;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;PCR&#x5897;&#x5E45;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3057;&#x305F;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;DNA&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;1&#x304B;&#x3089;2&#x30BB;&#x30EB;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x80DA;&#x306B;&#x6CE8;&#x5165;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3001;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x958B;&#x767A;&#x6642;&#x306B;&#x5E0C;&#x671B;&#x306E;&#x6642;&#x70B9;&#x3067;&#x5206;&#x6790;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x3068;&#x786C;&#x9AA8;&#x9B5A;&#x7A2E;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x304B;&#x3089;&#x975E;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x914D;&#x5217;&#x306E;&#x8FC5;&#x901F;&#x306A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x89E3;&#x6790;&#x3092;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x3057;&#x3001;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x9069;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;Tol2&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30BE;&#x30F3;&#x5A92;&#x4ECB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x63A8;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30A8;&#x30F3;&#x30CF;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x95A2;&#x9023;&#x6027;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;

&#xCC99;&#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC758; &#xAC8C;&#xB188;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBB34;&#xC218; &#xD55C; &#xC0C1; &#xADDC;&#xC81C; noncoding &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC758; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xAD00;&#xB828;&#xC131; &#xD3C9;&#xAC00; &#xAC70; &#xB300; &#xD55C; &#xB3C4;&#xC804;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAE30;&#xB2A5; &#xBD84;&#xC11D; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBE44;&#xC6A9;&#xACFC; &#xB178;&#xB3D9; &#xC9D1;&#xC57D;&#xC801;&#xC778; &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xC804;&#xB7B5;&#xC5D0; &#xC758;&#xC874; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Transgenesis zebrafish, &#xAC19;&#xC740; nonrodent &#xCC99;&#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xC801;&#xC6A9; &#xB41C; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xCD5C;&#xADFC;&#xAE4C;&#xC9C0; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB178;&#xB825; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; mosaicism&#xC640; &#xAC00;&#xB09C;&#xD55C; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC804;&#xC1A1; &#xC18D;&#xB3C4; &#xC758;&#xD574; &#xBC29;&#xD574; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. Zebrafish Tol2 transposon &#xB2E4;&#xB978; teleost, &#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD5C;&#xADFC; &#xD655;&#xC778; &#xB41C; &#xBAA8;&#xBC14;&#xC77C; &#xC694;&#xC18C; &#xAE30;&#xBC18;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xC804;&#xB7B5;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB294;&#xC774; &#xADF8;&#xB300;&#xB85C; DNA transposon &#xD574;&#xB2F9; transposase &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC911;&#xC7AC; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC73C;&#xB85C; &#xC5EC;&#xC720; &#xAC8C;&#xB188; &#xD1B5;&#xD569;&#xC758; &#xD6A8;&#xC728;&#xC131; &#xD5A5;&#xC0C1;&#xB41C; &#xC774;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0;&#xCF5C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC740; &#xD0DC;&#xADF8; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xBCC4; &#xC7AC;&#xACB0;&#xD569;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC21C;&#xC11C; &#xBAA9;&#xD45C;&#xC640; DNA&#xC758; &#xAE09;&#xC18D; &#xD55C; &#xD1B5;&#xD569;&#xC744; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xBCF4;&#xD3B8;&#xC801;&#xC778; &#xBCA1;&#xD130; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD6C4;&#xBCF4; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC758; &#xADDC;&#xC81C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC744; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD558;&#xAE30; &#xC6D0;&#xD558;&#xB294; &#xAC04;&#xACA9; PCR &#xC99D;&#xD3ED; &#xD558;&#xB294; &#xBCF5;&#xC81C;&#xB97C; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xB300;&#xC0C1; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD615;&#xBC8C;&#xACFC; &#xBCF4;&#xD3B8;&#xC801;&#xC778; &#xC2DD; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC; (pGW_cfosEGFP)&#xB85C; &#xC62E;&#xAE30;&#xB294; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xD2B9;&#xC815; &#xB1CC;&#xAD00;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xC21C;&#xD654; &#xB41C; Dnas&#xB294; &#xB2E4;&#xC74C; 1-2-&#xC140; zebrafish &#xD0DC;&#xC544;&#xC5D0; &#xC8FC;&#xC785; &#xD558; &#xACE0; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC6D0;&#xD558;&#xB294; timepoints&#xC5D0;&#xC11C; &#xACB0;&#xACFC; &#xAE30;&#xC790; &#xC2DD; &#xD328;&#xD134; &#xBD84;&#xC11D;. &#xC774; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC740; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958;&#xC640; teleost &#xC885;&#xC5D0;&#xC11C; noncoding &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC758; &#xC2E0;&#xC18D;&#xD55C; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBD84;&#xC11D; &#xCD09;&#xC9C4; &#xB300;&#xADDC;&#xBAA8; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC5D0; &#xC758;&#xBB34;&#xAC00; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Zebrafish transposon &#xC911;&#xC7AC; transgenesis tol2&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC0C1; &#xC99D;&#xAC15;&#xC758; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xAD00;&#xB828;&#xC131;&#xC744; &#xD3C9;&#xAC00;.

La evaluaci&#xF3;n de la importancia biol&#xF3;gica de los miles de secuencias no codificantes supuestos normativos en los genomas de vertebrados representa un enorme desaf&#xED;o. An&#xE1;lisis funcional in vivo han generalmente se basan en estrategias de transg&#xE9;nicos costosos y requieren mucho trabajo en los ratones. La transg&#xE9;nesis se ha aplicado tambi&#xE9;n en los vertebrados nonrodent, como el pez cebra, pero hasta hace poco estos esfuerzos han sido obstaculizados por mosaicismo importante y bajas tasas de transmisi&#xF3;n de l&#xED;nea germinal. Hemos desarrollado una estrategia en el pez cebra transg&#xE9;nico basado en el transpos&#xF3;n Tol2, un elemento m&#xF3;vil que fue identificado recientemente en otro tele&#xF3;steo, medaka. Este m&#xE9;todo aprovecha el aumento de la eficiencia de la integraci&#xF3;n del genoma que se confiere esta transpos&#xF3;n intacto ADN, actividad que est&#xE1; mediada por la prote&#xED;na transposasa correspondiente. El m&#xE9;todo descrito en este protocolo utiliza un sistema de vector universal que permite una r&#xE1;pida incorporaci&#xF3;n de ADN que se etiqueta con los objetivos de la secuencia de recombinaci&#xF3;n espec&#xED;fica de sitio. Para evaluar el potencial de una secuencia reguladora candidato, el intervalo deseado es amplificado por PCR utilizando cebadores espec&#xED;ficos de secuencia que est&#xE1;n flanqueados por los sitios diana necesarias para la clonaci&#xF3;n, y se recombinan en una expresi&#xF3;n universal pl&#xE1;smido (pGW_cfosEGFP). DNAs recombinantes purificadas se inyecta entonces en embriones de pez cebra 1-2-celulares y los patrones de expresi&#xF3;n reportero resultantes se analizan en puntos de tiempo deseados durante el desarrollo. Este sistema es susceptible de aplicaci&#xF3;n a gran escala, lo que facilita un r&#xE1;pido an&#xE1;lisis funcional de las secuencias no codificantes de las dos especies de mam&#xED;feros y tele&#xF3;steos.

La evaluaci&#xF3;n de la importancia biol&#xF3;gica de reforzadores putativos Uso Tol2 transpos&#xF3;n mediada por transg&#xE9;nesis en pez cebra

RecQ DNA helicases &#x89E3;&#x51B3; Rad 51 &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x91CD;&#x7EC4;&#x548C;&#x5236;&#x6B62;&#x5F02;&#x5E38;&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#x3002;&#x4E0E;&#x764C;&#x75C7;&#x6613;&#x611F;&#x6027;&#x53CA;&#x589E;&#x52A0;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x91CD;&#x7EC4;&#x76F8;&#x5173;&#x7684; RecQ &#x57FA;&#x56E0;&#x4E22;&#x5931;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F00;&#x53D1;&#x4E86;&#x57FA;&#x4E8E; RecQ &#x6D3B;&#x52A8;&#xFF0C;&#x5236;&#x6B62;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x8272;&#x7D20;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x5185;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x548C;&#x8BC1;&#x660E;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C; RecQ &#x57FA;&#x56E0;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x5F00;&#x59CB;&#x50A8;&#x85CF;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x91CD;&#x7EC4;&#x3002;

&#x64CD;&#x4F5C;&#x901A;&#x8FC7; RecQ helicases &#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x80DA;&#x80CE;&#x4E2D;&#x7684;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x91CD;&#x7EC4;&#x3002;

RecQ DNA helicases resolve Rad-51-mediated recombination and suppress aberrant homologous recombination. RecQ gene loss is associated with cancer susceptibility and increased mitotic recombination. We have developed an in vivo assay based on a zebrafish pigment mutant for suppression of RecQ activity, and demonstrate that zebrafish RecQ genes have conserved function in suppressing mitotic recombination.

Manipulating mitotic recombination in the zebrafish embryo through RecQ helicases.

&#x8C03;&#x89E3;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x73AF;&#x5883;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x901A;&#x4FE1;&#x7684;&#x8FDB;&#x5316;&#x4FDD;&#x6301;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5668;&#x539F;&#x53D1;&#x6027;&#x7EA4;&#x6BDB;&#x548C;&#x57FA;&#x5E95;&#x673A;&#x6784;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; bbs1&#x3001; bbs4 &#x548C; mkks &#xFF08;&#x4E5F;&#x79F0;&#x4E3A; bbs6&#xFF09;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x5BF9;&#x57FA;&#x5E95;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D;&#x8FDB;&#x884C;&#x7F16;&#x7801;&#xFF0C;&#x6536;&#x655B;&#x548C;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x7684;&#x6269;&#x5C55;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x5E76;&#x4E0E; wnt11 &#x548C; wnt5b &#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#x3002;Bbs1&#x3001; bbs4 &#x548C; mkks &#x7684;&#x8A8A;&#x672C;&#x5236;&#x6B62;&#x5BFC;&#x81F4;&#x8FDE;&#x73AF;&#x4E0E;&#x76F8;&#x5E94;&#x4E0A;&#x8C03; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50; (TCF) &#x7A33;&#x5B9A;-&#x4F9D;&#x8D56;&#x8F6C;&#x5F55;&#x5728;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x80DA;&#x80CE;&#x548C;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x7EA4;&#x6BDB;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;phenocopied axonemal &#x9A71;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x4E9A;&#x5355;&#x4F4D; KIF3A &#x6C89;&#x9ED8;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x80DE;&#x8D28;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x7F51;&#x7EDC;&#x4E2D;&#x65AD;&#x7684;&#x7F3A;&#x9677;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x610F;&#x89C1;&#x7684;&#x90E8;&#x5206;&#x539F;&#x56E0;&#x662F;&#x6709;&#x7F3A;&#x9677;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53; &#xFF1B; &#x9000;&#x5316;BBS4 &#x6291;&#x5236;&#x5BFC;&#x81F4;&#x6444;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x9776;&#x5411;&#x548C;&#x4F34;&#x968F;&#x79EF;&#x7D2F;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x8FDE;&#x73AF;&#x3002;&#x65E5;&#x79EF;&#x6708;&#x7D2F;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x57FA;&#x4F53;&#x662F;&#x901A;&#x8FC7;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x964D;&#x89E3; Wnt &#x4FE1;&#x53F7;&#x89E3;&#x91CA;&#x91CD;&#x8981;&#x8C03;&#x8282;&#x5668;&#x548C;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x5728;&#x6B64;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#x7684;&#x7F3A;&#x9677;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x4EBA;&#x7C7B; ciliopathies &#x7684; pathognomonic &#x7684;&#x8868;&#x578B;&#x3002;

&#x59A5;&#x534F;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x529F;&#x80FD;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185; Wnt &#x53CD;&#x5E94;&#x5F71;&#x54CD;&#x4E86;&#x5730;&#x7403;&#x7684;&#x57FA;&#x4F53;&#x4E2D;&#x65AD;&#x3002;

Primary cilia and basal bodies are evolutionarily conserved organelles that mediate communication between the intracellular and extracellular environments. Here we show that bbs1, bbs4 and mkks (also known as bbs6), which encode basal body proteins, are required for convergence and extension in zebrafish and interact with wnt11 and wnt5b. Suppression of bbs1, bbs4 and mkks transcripts results in stabilization of beta-catenin with concomitant upregulation of T-cell factor (TCF)-dependent transcription in both zebrafish embryos and mammalian ciliated cells, a defect phenocopied by the silencing of the axonemal kinesin subunit KIF3A but not by chemical disruption of the cytoplasmic microtubule network. These observations are attributable partly to defective degradation by the proteasome; suppression of BBS4 leads to perturbed proteasomal targeting and concomitant accumulation of cytoplasmic beta-catenin. Cumulatively, our data indicate that the basal body is an important regulator of Wnt signal interpretation through selective proteolysis and suggest that defects in this system may contribute to phenotypes pathognomonic of human ciliopathies.

Disruption of the basal body compromises proteasomal function and perturbs intracellular Wnt response.

Les cils primaires et les corps basaux sont &#xE9;volutivement conserv&#xE9;es organites qui interviennent dans la communication entre les milieux intracellulaires et extracellulaires. Ici, nous montrons que BBS1, BBS4 et MKKS (&#xE9;galement connu sous le nom BBS6), qui codent pour des prot&#xE9;ines du corps basal, sont n&#xE9;cessaires pour la convergence et l&#x26;#39;extension chez le poisson z&#xE8;bre et d&#x26;#39;interagir avec wnt11 et wnt5b. R&#xE9;pression de la BBS1, BBS4 et transcriptions MKKS r&#xE9;sultats dans la stabilisation de la b&#xEA;ta-cat&#xE9;nine avec r&#xE9;gulation &#xE0; la hausse concomitante de cellules T facteur (TCF) d&#xE9;pendant de la transcription dans les deux embryons de poisson z&#xE8;bre et de mammif&#xE8;res cellules cili&#xE9;es, un d&#xE9;faut ph&#xE9;nocopies par le silence de la sous-unit&#xE9; axon&#xE9;male kin&#xE9;sine KIF3A mais pas par une perturbation chimique du r&#xE9;seau de microtubules cytoplasmique. Ces observations sont en partie attribuables &#xE0; un d&#xE9;faut de d&#xE9;gradation par le prot&#xE9;asome; suppression de BBS4 conduit &#xE0; l&#x26;#39;accumulation perturb&#xE9; par le prot&#xE9;asome ciblage et concomitante de b&#xEA;ta-cat&#xE9;nine cytoplasmique. Cumulativement, nos donn&#xE9;es indiquent que la basale du corps est un r&#xE9;gulateur important de l&#x26;#39;interpr&#xE9;tation du signal Wnt par une prot&#xE9;olyse s&#xE9;lective et sugg&#xE8;rent que les d&#xE9;fauts de ce syst&#xE8;me peut contribuer &#xE0; des ph&#xE9;notypes pathognomoniques de ciliopathies de l&#x26;#39;homme.

La perturbation de la fonction basale du corps compromet la prot&#xE9;asome et perturbe intracellulaire R&#xE9;ponse Wnt

Prim&auml;re Zilien und Basalk&ouml;rpern sind evolution&auml;r konservierte Organellen, die Kommunikation zwischen der intrazellul&auml;ren und extrazellul&auml;ren Umgebung vermitteln. Hier zeigen wir, dass bbs1, bbs4 und Mkks (auch bekannt als bbs6), die basalen K&ouml;rper Proteine kodieren, erforderlich f&uuml;r Konvergenz und Erweiterung im Zebrafisch und Interaktion mit wnt11 und wnt5b. Unterdr&uuml;ckung der bbs1, bbs4 und Mkks Abschriften f&uuml;hrt zu einer Stabilisierung des Beta-Catenin mit begleitenden Hochregulation des T-Zell-Faktors (TCF)-abh&auml;ngige Transkription im Zebrafisch-Embryonen und S&auml;ugetier-ciliated Zellen, einen phenocopied an, indem die von der axonemal Kinesin-Untereinheit KIF3A aber nicht durch chemische Unterbrechung des Netzwerks zytoplasmatischen Microtubule defekt. Diese Beobachtungen sind teilweise defekt Abbau durch das Proteasom zuzuschreiben; Unterdr&uuml;ckung BBS4 f&uuml;hrt zu gest&ouml;rt Proteasomal-targeting und damit einhergehende H&auml;ufung von zytoplasmatischen Beta-Catenin. Kumulativ, zeigen unsere Daten, dass der basalen K&ouml;rper ist ein wichtiger Regulator des Wnt-Signal-Interpretation durch selektive Proteolyse und schlagen vor, da&szlig; die M&auml;ngel in diesem System zu Ph&auml;notypen der menschlichen Ziliopathien pathognomonische beitragen k&ouml;nnen.

St&ouml;rung der basalen K&ouml;rper gef&auml;hrdet Proteasomal Funktion und w&uuml;hlt intrazellul&auml;re Wnt-Antwort.

Ciliari e corpi basali sono evolutivamente conservati organelli che mediano la comunicazione tra gli ambienti intracellulare ed extracellulare. Qui vi mostriamo che bbs1, bbs4 e mkks (noto anche come bbs6), che codificano le proteine basale, sono necessarie per la convergenza e l&#39;estensione in zebrafish e interagire con wnt11 e wnt5b. Soppressione delle trascrizioni bbs1, bbs4 e mkks risultati nella stabilizzazione della beta-catenina con concomitante sovraregolazione di fattore della T-cellula (TCF)-trascrizione dipendente in zebrafish embrioni e cellule cigliate dei mammiferi, un difetto di phenocopied dal silenziamento della subunit&agrave; axonemal chinesina KIF3A ma non da interruzione chimica della rete dei microtubuli citoplasmatici. Queste osservazioni sono attribuibili in parte alla degradazione difettosi dal proteasoma; soppressione del BBS4 conduce al targeting proteosomale perturbato e concomitante accumulo di beta-catenina citoplasmatica. Cumulativamente, i nostri dati indicano che il corpo basale &egrave; un regolatore importante dell&#39;interpretazione segnale Wnt tramite proteolisi selettiva e suggeriscono che difetti di questo sistema possono contribuire a fenotipi patognomonici di ciliopatie umana.

Rottura del corpo basale compromette la funzione proteosomale e sconvolge risposta intracellulare di Wnt.

&#x4E00;&#x6B21;&#x7E4A;&#x6BDB;&#x3068;&#x57FA;&#x5E95;&#x306E;&#x4F53;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x74B0;&#x5883;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x901A;&#x4FE1;&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x9032;&#x5316;&#x7684;&#x306B;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x5C0F;&#x5668;&#x5B98;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x57FA;&#x790E;&#x4F53;&#x6E29;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x53CE;&#x675F;&#x3068;&#x62E1;&#x5F35;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3055;&#x308C;wnt11&#x3068;wnt5b&#x3068;&#x5BFE;&#x8A71;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;bbs1&#x3001;bbs4&#x3068;mkks&#xFF08;&#x307E;&#x305F;bbs6&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#xFF09;&#x3001;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002; bbs1&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x3001;bbs4&#x3068;T&#x7D30;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF08;TCF&#xFF09;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3059;&#x308B;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x80DA;&#x3084;&#x54FA;&#x4E73;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x7E4A;&#x6BDB;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3067;&#x8EE2;&#x5199;&#x3001;&#x8EF8;&#x7CF8;&#x30AD;&#x30CD;&#x30B7;&#x30F3;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;KIF3A&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;phenocopied&#x6B20;&#x9665;&#x306E;&#x540C;&#x6642;&#x767A;&#x73FE;&#x4E0A;&#x6607;&#x3068;&#x3B2;-&#x30AB;&#x30C6;&#x30CB;&#x30F3;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x5316;mkks&#x8EE2;&#x5199;&#x7523;&#x7269;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x306E;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x7834;&#x58CA;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x89B3;&#x200B;&#x200B;&#x5BDF;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x4E0D;&#x826F;&#x54C1;&#x306E;&#x52A3;&#x5316;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;&#x3002;BBS4&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x3B2;-&#x30AB;&#x30C6;&#x30CB;&#x30F3;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x4F75;&#x7528;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3092;&#x6442;&#x52D5;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x3002;&#x7D2F;&#x7A4D;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x57FA;&#x790E;&#x4F53;&#x6E29;&#x306F;&#x3001;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5206;&#x89E3;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x3001;Wnt&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x306E;&#x89E3;&#x91C8;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x306F;&#x4EBA;&#x9593;ciliopathies&#x306E;&#x7279;&#x5FB4;&#x7684;&#x306A;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306B;&#x5BC4;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x57FA;&#x790E;&#x4F53;&#x6E29;&#x306E;&#x4E71;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x640D;&#x306A;&#x3046;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;Wnt&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x4E71;&#x3059;

&#xAE30;&#xBCF8; &#xC18D;&#xB208;&#xC379;&#xACFC; &#xAE30;&#xC800; &#xC2DC;&#xCCB4;&#xB294; &#xC9C4;&#xD654; &#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; organelles &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xD658;&#xACBD; &#xAC04;&#xC758; &#xD1B5;&#xC2E0;&#xC744; &#xC911;&#xC7AC; &#xD558;&#xB294;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; bbs1, bbs4 &#xBC0F; mkks (bbs6 &#xB77C;&#xACE0;&#xB3C4; &#xD568;) &#xAE30;&#xCD08; &#xC2E0;&#xCCB4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xBD80;&#xD638;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xC735;&#xD569;&#xACFC; zebrafish&#xC758; &#xD655;&#xC7A5;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xBC0F; wnt11 &#xBC0F; wnt5b&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. Bbs1, bbs4 &#xBC0F; mkks &#xC131;&#xC801;&#xD45C;&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C; T &#xC138;&#xD3EC; &#xBE44;&#xC728; (TCF)&#xC758; &#xBD80;&#xC218;&#xC801;&#xC778; upregulation&#xC640; &#xBCA0;&#xD0C0;-catenin&#xC758; &#xC548;&#xC815;&#xD654;&#xC5D0; &#xACB0;&#xACFC;-&#xC885;&#xC18D; &#xC804;&#xC0AC; zebrafish &#xD0DC;&#xC544;&#xC640; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; ciliated &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; microtubule &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C;&#xC758; &#xD654;&#xD559; &#xC911;&#xB2E8; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; axonemal kinesin &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; kif3a&#xC758; &#xCE68;&#xBB35;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; phenocopied &#xACB0;&#xD568;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAD00;&#xCE21;&#xC740; &#xC77C;&#xBD80; &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880;;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xACB0;&#xD568;&#xC774; &#xC800;&#xD558;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC778; bbs4&#xC758; &#xAD50;&#xB780;&#xB41C; proteasomal &#xD0C0;&#xAC9F;&#xD305; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xBCA0;&#xD0C0;-catenin&#xC758; &#xBD80;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xCD95;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;. Cumulatively, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xAE30;&#xCD08; &#xC2E0;&#xCCB4; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; &#xBCA0;&#xC774;&#xC2A4;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; Wnt &#xC2E0;&#xD638; &#xD574;&#xC11D;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130; &#xC774;&#xBA70;,&#xC774; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xACB0;&#xD568;&#xC774; &#xACE0;&#xAE30; &#xC778;&#xAC04; ciliopathies&#xC758; pathognomonic&#xB97C; &#xAE30;&#xC5EC;&#xD560; &#xC218; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xAE30;&#xCD08; &#xC2E0;&#xCCB4; &#xC7A5;&#xC560; proteasomal &#xD568;&#xC218;&#xB97C; &#xD0C0;&#xD611; &#xD558; &#xACE0; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; Wnt &#xC751;&#xB2F5; perturbs.

Los cilios primarios y cuerpos basales est&#xE1;n conservadas evolutivamente org&#xE1;nulos que intervienen en la comunicaci&#xF3;n entre los ambientes intra y extracelulares. Aqu&#xED; nos muestran que BBS1, bbs4 y MKKS (tambi&#xE9;n conocido como bbs6), que codifican las prote&#xED;nas del cuerpo basal, son necesarios para la convergencia y la extensi&#xF3;n en el pez cebra e interactuar con wnt11 y Wnt5b. Represi&#xF3;n de BBS1, bbs4 y transcripciones MKKS resultados en la estabilizaci&#xF3;n de la beta-catenina con regulaci&#xF3;n al alza concomitante del factor de c&#xE9;lulas T (TCF), dependiente de la transcripci&#xF3;n en embriones de pez cebra como de los mam&#xED;feros las c&#xE9;lulas ciliadas, un defecto phenocopied por el silenciamiento de la subunidad kinesin axonemal KIF3A pero no por la interrupci&#xF3;n qu&#xED;mica de la red de microt&#xFA;bulos citopl&#xE1;smica. Estas observaciones son atribuible en parte a un defecto en la degradaci&#xF3;n por el proteasoma, la supresi&#xF3;n de la BBS4 conduce a la acumulaci&#xF3;n perturbado proteasomal focalizaci&#xF3;n y concomitante de beta-catenina citoplasm&#xE1;tica. En conjunto, nuestros datos indican que el cuerpo basal es un importante regulador de la interpretaci&#xF3;n de la se&#xF1;al Wnt a trav&#xE9;s de la proteolisis selectiva y sugieren que los defectos en este sistema puede contribuir a fenotipos patognom&#xF3;nicos de ciliopat&#xED;as humanos.

La interrupci&#xF3;n de la corporal basal comprometa la funci&#xF3;n proteasomal y perturba la respuesta intracelular Wnt

&#x968F;&#x7740;&#x8D8A;&#x6765;&#x8D8A;&#x591A;&#x7684;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7684;&#x6D4B;&#x5E8F;&#x3001; &#x6BD4;&#x8F83;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x5B66;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x5DE8;&#x5927;&#x7684;&#x627F;&#x8BFA;&#x63A8;&#x51FA;&#x5927;&#x89C4;&#x6A21;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x57FA;&#x56E0;&#x8C03;&#x63A7;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5206;&#x6790;&#x5927;&#x91CF;&#x7684;&#x5E8F;&#x5217;&#x6570;&#x636E;&#x548C;&#x4E0E;&#x4E3B;&#x5E8F;&#x5217;&#x6709;&#x5173;&#x7684;&#x804C;&#x80FD;&#x7684;&#x6311;&#x6218;&#x4EE4;&#x4EBA;&#x751F;&#x754F;&#x3002;&#x51E0;&#x4E2A;&#x786C;&#x9AA8;&#x7269;&#x79CD;&#x5360;&#x636E;&#x5173;&#x952E;&#x58C1;&#x9F9B;&#x4E2D;&#x7684;&#x6BD4;&#x8F83;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x5B66;&#xFF0C;&#x4E16;&#x754C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x6A21;&#x578B;&#x751F;&#x7269;&#x4F53;&#x7684;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x5B9E;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x548C;&#x5206;&#x5B50;&#x8FDB;&#x5316;&#x7684;&#x751F;&#x6D3B;&#x8DEF;&#x7EBF;&#x56FE;&#x3002;&#x73B0;&#x5B58;&#x7269;&#x79CD;&#x8FDB;&#x5316;&#x540E;&#x786C;&#x9AA8;&#x9C7C;&#x7C7B;&#x7279;&#x5B9A;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x91CD;&#x53E0;&#xFF0C;&#x548C;&#x673A;&#x4F1A;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x68C0;&#x67E5;&#x91CD;&#x590D;&#x57FA;&#x56E0;&#x5BF9;&#x6210;&#x5343;&#x4E0A;&#x4E07;&#x7684;&#x6F14;&#x53D8;&#x3002;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x662F;&#x6B63;&#x5728;&#x8D8A;&#x6765;&#x8D8A;&#x591A;&#x5730;&#x91C7;&#x7528;&#x529F;&#x80FD;&#x68C0;&#x67E5;&#x975E;&#x7F16;&#x7801;&#x5E8F;&#x5217;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x9C7C;&#x7C7B;&#x548C;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x5F53;&#x524D;&#x7684;&#x505A;&#x6CD5;&#x7684;&#x786C;&#x9AA8;&#x9C7C;&#x7C7B;&#xFF0C;&#x57FA;&#x56E0;&#x8C03;&#x63A7;&#x7814;&#x7A76;&#x548C;&#x672A;&#x6765;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x627F;&#x8BFA;&#x3002;

&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x72EC;&#x8054;&#x4F53;&#x89C4;&#x7BA1;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x8BC4;&#x4EF7;&#x3002;

As increasing numbers of vertebrate genomes are sequenced, comparative genomics offers tremendous promise to unveil mechanisms of transcriptional gene regulation on a large scale. However, the challenge of analysing immense amounts of sequence data and relating primary sequence to function is daunting. Several teleost species occupy crucial niches in the world of comparative genomics, as experimental model organisms of wide utility and living roadmaps of molecular evolution. Extant species have evolved after a teleost-specific genome duplication, and offer the opportunity to examine the evolution of thousands of duplicate gene pairs. Transgenesis in zebrafish is being increasingly employed to functionally examine non-coding sequences, from fish and mammals. Here, we discuss current approaches to the study of gene regulation in teleosts, and the promise of future research.

Evaluation of cis-regulatory function in zebrafish.

Comme un nombre croissant de g&#xE9;nomes de vert&#xE9;br&#xE9;s sont s&#xE9;quenc&#xE9;s, la g&#xE9;nomique comparative offre une &#xE9;norme promesse de d&#xE9;voiler les m&#xE9;canismes de r&#xE9;gulation transcriptionnelle des g&#xE8;nes &#xE0; grande &#xE9;chelle. Cependant, le d&#xE9;fi de l&#x26;#39;analyse d&#x26;#39;&#xE9;normes quantit&#xE9;s de donn&#xE9;es de s&#xE9;quences et relative &#xE0; la fonction s&#xE9;quence primaire est de taille. Plusieurs esp&#xE8;ces de t&#xE9;l&#xE9;ost&#xE9;ens occupent des niches cruciales dans le monde de la g&#xE9;nomique comparative, que les organismes de mod&#xE8;les exp&#xE9;rimentaux d&#x26;#39;utilit&#xE9; de large et feuilles de route de vie de l&#x26;#39;&#xE9;volution mol&#xE9;culaire. Esp&#xE8;ces actuelles ont &#xE9;volu&#xE9; apr&#xE8;s une duplication t&#xE9;l&#xE9;ost&#xE9;ens sp&#xE9;cifique du g&#xE9;nome, et offrent l&#x26;#39;occasion d&#x26;#39;examiner l&#x26;#39;&#xE9;volution de milliers de paires de g&#xE8;nes dupliqu&#xE9;s. La transgen&#xE8;se chez le poisson z&#xE8;bre est de plus en plus employ&#xE9;e pour examiner fonctionnellement s&#xE9;quences non codantes, &#xE0; partir de poissons et de mammif&#xE8;res. Ici, nous discutons les approches actuelles &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;tude de la r&#xE9;gulation des g&#xE8;nes chez les t&#xE9;l&#xE9;ost&#xE9;ens, et la promesse de futures recherches.

&#xC9;valuation de la cis-r&#xE9;gulatrices Fonction chez le poisson z&#xE8;bre

Da immer mehr vertebrate Genom sequenziert werden, bietet vergleichende Genomik enorme Versprechen, Mechanismen der transkriptionelle Genregulation in gro&szlig;em Ma&szlig;stab zu enth&uuml;llen. Riesige Mengen von Sequenzdaten Analyse und Funktion prim&auml;re Sequenz zur Herausforderung ist jedoch erschreckend. Mehrere teleost Arten besetzen entscheidende Nischen in der Welt der vergleichende Genomik, als experimentelle Modellorganismen der breit Hilfswerkzeug und lebenden Roadmaps der molekularen Evolution. Arten nach eine Teleost-spezifische Genom-Vervielf&auml;ltigung entwickelt haben, und bieten die M&ouml;glichkeit, die Entwicklung von Tausenden von doppelten gen-Paaren zu untersuchen. Transgenese im Zebrafisch wird zunehmend eingesetzt, nicht-kodierenden Sequenzen von Fischen und S&auml;ugetieren funktionell zu untersuchen. Hier diskutieren wir aktuelle Ans&auml;tze f&uuml;r die Studie der Genregulation in Teleosts und das Versprechen der Zukunftsforschung.

Bewertung der Cis-regulatorische Funktion im Zebrafisch.

Un numero crescente di genomi di vertebrati &egrave; sequenziato, genomica comparativa offerte di tremenda promessa di svelare i meccanismi di regolazione trascrizionale genica su larga scala. Tuttavia, la sfida dell&#39;analisi immense quantit&agrave; di dati di sequenza e la relativa sequenza primaria funzione &egrave; scoraggiante. Diverse specie di teleostei occupano nicchie cruciale nel mondo di genomica comparativa, come organismi modello sperimentale di ampia utilit&agrave; e roadmap vivente dell&#39;evoluzione molecolare. Specie viventi si sono evoluti dopo una duplicazione di teleosteo-specifiche del genoma e offrono l&#39;opportunit&agrave; di esaminare l&#39;evoluzione di migliaia di coppie duplicate gene. Transgenesi in zebrafish sono sempre pi&ugrave; impiegato per esaminare funzionalmente sequenze non codificanti, da pesci e mammiferi. Qui, discuteremo attuali approcci allo studio della regolazione genica in teleostei e la promessa di future ricerche.

Valutazione della funzione cis-regolatori in zebrafish.

&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x6570;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x304C;&#x914D;&#x5217;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x6BD4;&#x8F03;&#x30B2;&#x30CE;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x8EE2;&#x5199;&#x5F8C;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x9014;&#x65B9;&#x3082;&#x306A;&#x3044;&#x7D04;&#x675F;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x914D;&#x5217;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306E;&#x81A8;&#x5927;&#x306A;&#x91CF;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3057;&#x3001;&#x95A2;&#x6570;&#x3078;&#x306E;&#x4E00;&#x6B21;&#x914D;&#x5217;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x306E;&#x8AB2;&#x984C;&#x306F;&#x56F0;&#x96E3;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x786C;&#x9AA8;&#x9B5A;&#x985E;&#x7A2E;&#x306F;&#x5206;&#x5B50;&#x9032;&#x5316;&#x306E;&#x5E83;&#x3044;&#x30E6;&#x30FC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30EA;&#x30C6;&#x30A3;&#x3068;&#x751F;&#x6D3B;&#x306E;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C9;&#x30DE;&#x30C3;&#x30D7;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x751F;&#x7269;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6BD4;&#x8F03;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x4E16;&#x754C;&#x3067;&#x306F;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C1;&#x3092;&#x5360;&#x3081;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x73FE;&#x5B58;&#x7A2E;&#x306F;&#x3001;&#x786C;&#x9AA8;&#x9B5A;&#x985E;&#x7279;&#x6709;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x91CD;&#x8907;&#x5F8C;&#x306E;&#x9032;&#x5316;&#x3001;&#x91CD;&#x8907;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30DA;&#x30A2;&#x306E;&#x6570;&#x5343;&#x4EBA;&#x306E;&#x9032;&#x5316;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3059;&#x308B;&#x6A5F;&#x4F1A;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x306F;&#x3001;&#x307E;&#x3059;&#x307E;&#x3059;&#x9B5A;&#x3084;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x304B;&#x3089;&#x3001;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x975E;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x914D;&#x5217;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x63A1;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x786C;&#x9AA8;&#x9B5A;&#x985E;&#x306E;&#x898F;&#x5236;&#x3001;&#x4ECA;&#x5F8C;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x7D04;&#x675F;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306B;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30B7;&#x30B9;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x8A55;&#x4FA1;

&#xCC99;&#xCD94; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; &#xC22B;&#xC790;&#xB294; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2F1;&#xC73C;&#xB85C; &#xBE44;&#xAD50; &#xC720;&#xC804;&#xCCB4;&#xD559; &#xB300;&#xADDC;&#xBAA8; transcriptional &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC870;&#xC808; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xACF5;&#xAC1C;&#xD560; &#xC5C4;&#xCCAD;&#xB09C; &#xC57D;&#xC18D;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC5C4;&#xCCAD;&#xB09C; &#xC591;&#xC758; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB97C; &#xBD84;&#xC11D; &#xD558; &#xACE0; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xD568;&#xC218;&#xC5D0; &#xAD00;&#xD55C; &#xB3C4;&#xC804; &#xBC1C;&#xAD74;&#xC774; &#xB2E4;. &#xC5EC;&#xB7EC; teleost &#xC885; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xBAA8;&#xB378; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC720;&#xD2F8;&#xB9AC;&#xD2F0;&#xC640; &#xBD84;&#xC790; &#xC9C4;&#xD654;&#xC758; &#xC0DD;&#xD65C; &#xB85C;&#xB4DC;&#xB9F5; &#xBE44;&#xAD50; &#xC720;&#xC804;&#xCCB4;&#xD559;&#xC758; &#xC138;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xD2C8;&#xC0C8;&#xB97C; &#xCC28;&#xC9C0;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD604;&#xC874; &#xC885; teleost &#xD2B9;&#xC815; &#xAC8C;&#xB188; &#xC911;&#xBCF5; &#xD6C4; &#xBC1C;&#xC804;&#xC744; &#xAC70;&#xB4ED;&#xD558;&#xACE0; &#xC788;&#xC73C;&#xBA70; &#xC911;&#xBCF5; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC30D;&#xC758; &#xC218;&#xCC9C;&#xC758; &#xC9C4;&#xD654;&#xB97C; &#xAC80;&#xD1A0; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xD68C;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Zebrafish&#xC758; Transgenesis &#xC810;&#xCC28; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBB3C;&#xACE0;&#xAE30;&#xC640; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBE44; &#xCF54;&#xB529; &#xC21C;&#xC11C;&#xB97C; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD558; &#xACE0;&#xC6A9; &#xB418;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; teleosts&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC870;&#xC808; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xBC0F; &#xBBF8;&#xB798; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xD604;&#xC7AC; &#xC811;&#xADFC;&#xC744; &#xB17C;&#xC758; &#xD55C;&#xB2E4;.

Zebrafish cis &#xADDC;&#xC81C; &#xAE30;&#xB2A5; &#xD3C9;&#xAC00;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Como un n&#xFA;mero creciente de genomas de vertebrados secuenciados son, la gen&#xF3;mica comparativa ofrece una gran promesa para dar a conocer los mecanismos de regulaci&#xF3;n transcripcional de genes a gran escala. Sin embargo, el reto de analizar inmensas cantidades de datos de la secuencia y la secuencia primaria en relaci&#xF3;n a la funci&#xF3;n es de enormes proporciones. Varias especies de tele&#xF3;steos ocupan nichos importantes en el mundo de la gen&#xF3;mica comparativa, como organismos modelo experimental de amplia utilidad y planes de vida de la evoluci&#xF3;n molecular. Las especies existentes se han desarrollado despu&#xE9;s de una duplicaci&#xF3;n de los tele&#xF3;steos espec&#xED;fica del genoma, y &#x200B;&#x200B;ofrecen la oportunidad de examinar la evoluci&#xF3;n de miles de pares de genes duplicados. La transg&#xE9;nesis en el pez cebra se est&#xE1; empleando cada vez m&#xE1;s funcional para examinar las secuencias no codificantes, de peces y mam&#xED;feros. En este caso, hablamos de los enfoques actuales para el estudio de la regulaci&#xF3;n de genes en los tele&#xF3;steos, y la promesa de futuras investigaciones.

Evaluaci&#xF3;n de cis-regulador de funciones en el pez cebra

&#x671F;&#x95F4;&#x7FC5;&#x518D;&#x751F;&#x3001; &#x6210;&#x9AA8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5FC5;&#x987B;&#x4E0D;&#x65AD;&#x52A0;&#x4EE5;&#x533A;&#x5206;&#x9AA8;&#x9CCD;&#x7684;&#x4EA7;&#x7269;&#x3002;&#x7EE7;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x65F6;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x540C;&#x6837;&#x68C0;&#x6D4B;&#x9AA8;&#x6210;&#x719F;&#x5EA6;&#x589E;&#x52A0;&#x8FDC;&#x7AEF;&#x8FD1;&#x7AEF;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x548C;&#x6210;&#x9AA8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6210;&#x719F;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x4E3A;&#x6210;&#x9AA8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x65E9;&#x671F;&#x6807;&#x5FD7;&#x8868;&#x793A;&#x5728;&#x8FDC;&#x7AEF;&#x7684;&#x9C7C;&#x7FC5;&#xFF0C;&#x53EA;&#x662F;&#x8FD1;&#x7AEF;&#x5212;&#x5206;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x76F8;&#x90BB;&#x7684;&#x80DA;&#x8F66;&#x53A2;&#x5728;&#x79BB;&#x6563;&#x57DF;&#x4E2D;&#x3002;&#x77E9;&#x9635;&#xFF0C;&#x9700;&#x8981;&#x5728;&#x7A0D;&#x540E;&#x9636;&#x6BB5;&#x53D1;&#x80B2;&#xFF0C;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5FC3;&#x5305;&#x5BF9;&#x65E9;&#x671F;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x4EBA;&#x7FA4;&#x4E2D;&#x3002;&#x6210;&#x719F;&#x7684;&#x6210;&#x9AA8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6807;&#x8BB0;&#x8868;&#x793A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x8FD1;&#x7AEF;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x57DF;&#x90E8;&#x5206;&#x76F8;&#x4E92;&#x91CD;&#x53E0;&#xFF0C;&#x4E5F;&#x8BB8;&#x63ED;&#x793A;&#x989D;&#x5916;&#x7EA7;&#x522B;&#x7684;&#x6210;&#x9AA8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6210;&#x719F;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x6A21;&#x578B;&#x589E;&#x957F;&#x51E1;&#x65B0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0D;&#x65AD;&#x6DFB;&#x52A0;&#x5230;&#x6700;&#x8FDC;&#x7AEF;&#x7684;&#x6210;&#x9AA8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8F66;&#x53A2;&#xFF0C;&#x800C;&#x6210;&#x9AA8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x66F4;&#x8FD1;&#x7AEF;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x533A;&#x5206;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x53D1;&#x5C55;&#x65F6;&#x95F4;&#x7684;&#x8FD1;&#x7AEF;&#x8FDC;&#x7AEF;&#x8F74;&#x4E0A;&#x7684;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x3002;

&#x6210;&#x9AA8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6210;&#x719F;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x9CCD;&#x518D;&#x751F;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x53D1;&#x751F;&#x91CD;&#x53E0;&#x7684;&#x8FD1;&#x7AEF;&#x8FDC;&#x7AEF;&#x8F66;&#x53A2;&#x5185;&#x3002;

During fin regeneration, osteoblasts must continually differentiate for outgrowth of the bony fin rays. Bone maturity increases in a distal-proximal manner, and osteoblast maturation can be detected similarly when following gene expression. We find that early markers for osteoblast differentiation are expressed in a discrete domain at the distal end of the fin, just proximal to the adjacent germinal compartment of dividing cells. Matrix genes, required at later stages developmentally, are expressed in a population of cells proximally to the early genes. A marker for mature osteoblasts is expressed in cells further proximal. These domains of gene expression are partially overlapping, perhaps revealing additional levels of osteoblast maturity. We suggest a model for growth where new cells are continually added to the distal-most osteoblast compartment, while osteoblasts in more proximal locations differentiate, thus translating developmental time to location on the proximal-distal axis.

Osteoblast maturation occurs in overlapping proximal-distal compartments during fin regeneration in zebrafish.

Lors de la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration fin, les ost&#xE9;oblastes doit continuellement se diff&#xE9;rencier pour cons&#xE9;quence des rayons de la nageoire osseuses. Augmentations de la maturit&#xE9; osseuse, d&#x26;#39;une mani&#xE8;re distale-proximale et la maturation des ost&#xE9;oblastes peut &#xEA;tre d&#xE9;tect&#xE9;e m&#xEA;me lorsque l&#x26;#39;on suit l&#x26;#39;expression des g&#xE8;nes. Nous constatons que les marqueurs pr&#xE9;coces de la diff&#xE9;renciation des ost&#xE9;oblastes sont exprim&#xE9;s dans un domaine discret &#xE0; l&#x26;#39;extr&#xE9;mit&#xE9; distale de la nageoire, juste en amont de le compartiment adjacent germinale de cellules qui se divisent. G&#xE8;nes Matrix, n&#xE9;cessaires &#xE0; des stades ult&#xE9;rieurs du d&#xE9;veloppement, les sont exprim&#xE9;es dans une population de cellules en amont du g&#xE8;nes pr&#xE9;coces. Un marqueur pour les ost&#xE9;oblastes matures est exprim&#xE9; dans les cellules plus proximales. Ces domaines de l&#x26;#39;expression des g&#xE8;nes se chevauchent partiellement, r&#xE9;v&#xE9;lant peut-&#xEA;tre d&#x26;#39;autres niveaux de maturit&#xE9; des ost&#xE9;oblastes. Nous proposons un mod&#xE8;le de croissance o&#xF9; les nouvelles cellules sont continuellement ajout&#xE9;s au compartiment des ost&#xE9;oblastes plus distale, tandis que les ost&#xE9;oblastes dans des endroits plus proximales diff&#xE9;rencier, traduisant ainsi le temps de d&#xE9;veloppement &#xE0; l&#x26;#39;emplacement sur l&#x26;#39;axe proximo-distal.

La maturation des ost&#xE9;oblastes se produit dans Chevauchement proximal-distal Compartiments Lors de la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration chez le poisson z&#xE8;bre Fin

Beim Fin regenerieren m&uuml;ssen die Osteoblasten kontinuierlich f&uuml;r Auswuchs der kn&ouml;chernen Fin Strahlen unterscheiden. Knochen Reife steigt auf eine distale und proximale Art und Osteoblasten Reifung k&ouml;nnen &auml;hnlich wie beim Genexpression nach entdeckt werden. Wir finden, dass fr&uuml;he Marker f&uuml;r Osteoblasten Differenzierung in einer separaten Dom&auml;ne am distalen Ende der Flosse, nur proximal zum angrenzenden germinal Fach der teilenden Zellen ausgedr&uuml;ckt werden. Matrix-Gene, entwicklungspolitisch, in sp&auml;teren Lebensphasen ben&ouml;tigt werden in einer Bev&ouml;lkerung der Zellen spiralig um die fr&uuml;hen Gene ausgedr&uuml;ckt. Marker f&uuml;r Reife Osteoblasten dr&uuml;ckt sich in den Zellen weiter proximal. Diese Dom&auml;nen der Genexpression sind teilweise &uuml;berlappende, vielleicht offenbart weitere Ebenen der Osteoblasten Reife. Wir empfehlen ein Modell f&uuml;r Wachstum, wo neue Zellen st&auml;ndig zum distalen-die meisten Osteoblasten Fach, hinzugef&uuml;gt werden, w&auml;hrend die Osteoblasten im mehr proximalen Standorte zu unterscheiden, so &uuml;bersetzen Entwicklungsst&ouml;rungen Zeit, Lage auf der proximalen und distalen Achse.

Osteoblasten Reifung tritt in den &uuml;berlappenden proximalen und distalen abteilen w&auml;hrend Fin Regeneration im Zebrafisch.

Durante la rigenerazione di pinna, osteoblasti devono differenziare continuamente per escrescenza dei raggi ossei pinna. Osso maturit&agrave; aumenta in modo distale-prossimale e maturazione degli osteoblasti pu&ograve; essere rilevate allo stesso modo quando in seguito l&#39;espressione genica. Troviamo che il marker precoce per la differenziazione degli osteoblasti sono espressi in un dominio discreto all&#39;estremit&agrave; distale della pinna, appena prossimale al vano adiacente germinale delle cellule in divisione. Matrice geni, necessarie inerente allo sviluppo, nelle fasi successive sono espressi in una popolazione di cellule prossimalmente ai primi geni. Un marcatore per osteoblasti maturi &egrave; espresso nelle cellule pi&ugrave; prossimale. Questi domini di espressione genica sono parzialmente sovrapposte, forse rivelando ulteriori livelli di maturit&agrave; degli osteoblasti. Consigliamo un modello di crescita dove nuove cellule sono continuamente aggiunti al vano degli osteoblasti pi&ugrave; distale, mentre differenziano osteoblasti in posizioni pi&ugrave; prossimale, traducendo cos&igrave; tempo dello sviluppo di posizione sull&#39;asse prossimale-distale.

Maturazione degli osteoblasti avviene in compartimenti prossimali-distali sovrapposti durante la rigenerazione di pinna in zebrafish.

&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x4E2D;&#x306B;&#x3001;&#x9AA8;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x7D76;&#x3048;&#x305A;&#x9AA8;&#x306E;&#x9C2D;&#x306E;&#x4F38;&#x9577;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x533A;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x305F;&#x3069;&#x308B;&#x969B;&#x306B;&#x9AA8;&#x9060;&#x4F4D;&#x8FD1;&#x7684;&#x306B;&#x6210;&#x719F;&#x5EA6;&#x304C;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x3001;&#x9AA8;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6210;&#x719F;&#x306F;&#x3001;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x691C;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x9AA8;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x306E;&#x65E9;&#x671F;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x306F;&#x5206;&#x88C2;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x96A3;&#x63A5;&#x3057;&#x305F;&#x80DA;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306B;&#x3061;&#x3087;&#x3046;&#x3069;&#x8FD1;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x306E;&#x5148;&#x7AEF;&#x306B;&#x96E2;&#x6563;&#x9818;&#x57DF;&#x3067;&#x8868;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x767A;&#x9054;&#x5F8C;&#x306E;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306B;&#x8FD1;&#x4F4D;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x96C6;&#x56E3;&#x3067;&#x8868;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6210;&#x719F;&#x9AA8;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x8FD1;&#x4F4D;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x304A;&#x305D;&#x3089;&#x304F;&#x9AA8;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6210;&#x719F;&#x5EA6;&#x306E;&#x8FFD;&#x52A0;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x3001;&#x91CD;&#x8907;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3088;&#x308A;&#x8FD1;&#x4F4D;&#x306E;&#x5834;&#x6240;&#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x9AA8;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x8FD1;&#x4F4D; - &#x9060;&#x4F4D;&#x8EF8;&#x4E0A;&#x306E;&#x4EFB;&#x610F;&#x306E;&#x5834;&#x6240;&#x306B;&#x767A;&#x9054;&#x306E;&#x6642;&#x9593;&#x3092;&#x7FFB;&#x8A33;&#x3057;&#x3001;&#x5DEE;&#x5225;&#x5316;&#x3057;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x7D99;&#x7D9A;&#x7684;&#x306B;&#x9060;&#x4F4D;&#x3067;&#x6700;&#x3082;&#x9AA8;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x533A;&#x753B;&#x306B;&#x8FFD;&#x52A0;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x9AA8;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6210;&#x719F;&#x306F;&#x3001;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x3067;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x6642;&#x306B;&#x306F;&#x8FD1;&#xB7;&#x9060;&#x4F4D;&#x533A;&#x5206;&#x306E;&#x91CD;&#x8907;&#x306B;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC9C0; &#xB290; &#xB7EC; &#xBBF8; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; osteoblasts &#xACC4;&#xC18D; &#xD574; &#xC11C; &#xBF08; &#xB2E4; &#xADC0; &#xD0C4; &#xBBF8; &#xC775; &#xAD11;&#xC120;&#xC758; &#xD30C;&#xC0DD;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xD574;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBF08; &#xC131;&#xC219; &#xC99D;&#xAC00; &#xADFC; &#xC704; &#xC6D0;&#xC2EC; &#xBC29;&#xC2DD;&#xACFC; osteoblast &#xC131;&#xC219;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604; &#xB9C8;&#xCC2C;&#xAC00;&#xC9C0;&#xB85C; &#xAC80;&#xC0C9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xCC3E;&#xC744; osteoblast &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC870;&#xAE30; &#xD45C;&#xC2DD; &#xC140; &#xBD84;&#xD560;&#xC758; &#xC778;&#xC811; &#xD55C; &#xC0C8;&#xC2F9; &#xAD6C;&#xD68D;&#xC5D0; &#xADF8;&#xB0E5; &#xADFC; &#xC704; &#xD540; &#xC120;&#xB2E8;&#xBD80;&#xC5D0; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC5D0; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; &#xC720;&#xC804;&#xC790;, &#xBC1C;&#xB2EC;, &#xB098;&#xC911; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xCD08;&#xAE30; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; proximally &#xC140;&#xC758; &#xC778;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD45C;&#xD604; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC131;&#xC219; osteoblasts&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD45C;&#xC2DD; &#xC140; &#xCD94;&#xAC00; &#xADFC; &#xC704;&#xB85C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC758; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC740; &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xACB9;&#xCE58;&#xB294; &#xC544;&#xB9C8;&#xB3C4; osteoblast &#xC131;&#xC219; &#xC218;&#xC900;&#xC744; &#xACF5;&#xAC1C;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xB9D0; &#xCD08; &#xADFC; &#xC704; &#xCD95;&#xC758; &#xC704;&#xCE58;&#xB85C; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC2DC;&#xAC04; &#xBC88;&#xC5ED; &#xC5B4;&#xB514; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; &#xACC4;&#xC18D; &#xCD94;&#xAC00; &#xC6D0;&#xC2EC; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84; osteoblast &#xAD6C;&#xD68D;&#xC5D0; &#xB354; &#xC778;&#xC811; &#xC704;&#xCE58;&#xC5D0; osteoblasts &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xD558;&#xBA74;&#xC11C; &#xC131;&#xC7A5; &#xBAA8;&#xB378; &#xD558;&#xC138;&#xC694;.

Osteoblast &#xC131;&#xC219; &#xACB9;&#xCE58;&#xB294; &#xC6D0;&#xC2EC; &#xC778;&#xC811; &#xAD6C;&#xD68D; zebrafish&#xC758; &#xC9C0; &#xB290; &#xB7EC; &#xBBF8; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Durante la regeneraci&#xF3;n de la aleta, los osteoblastos continuamente hay que diferenciar a consecuencia de las radios de la aleta de hueso. Aumentos de hueso de madurez de manera distal-proximal, y la maduraci&#xF3;n de osteoblastos se puede detectar de manera similar cuando se sigue la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica. Se encuentra que los marcadores iniciales para la diferenciaci&#xF3;n de los osteoblastos se expresan en un dominio discreto en el extremo distal de la aleta, justo proximal al compartimiento adyacente germinal de c&#xE9;lulas que se dividen. Genes de la matriz, requeridos en las etapas posteriores de desarrollo, se expresan en una poblaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas proximalmente para los genes tempranos. Un marcador de osteoblastos maduros se expresa en c&#xE9;lulas m&#xE1;s proximales. Estos dominios de expresi&#xF3;n de los genes se superponen parcialmente, tal vez revelando niveles adicionales de maduraci&#xF3;n de osteoblastos. Sugerimos un modelo de crecimiento donde las nuevas c&#xE9;lulas se a&#xF1;aden continuamente al compartimiento de los osteoblastos m&#xE1;s distal, mientras que los osteoblastos en los lugares m&#xE1;s proximales diferenciar, por lo tanto la traducci&#xF3;n de tiempo de desarrollo a la ubicaci&#xF3;n en el eje proximal-distal.

La maduraci&#xF3;n de osteoblastos se produce la superposici&#xF3;n proximal-distal compartimentos durante la regeneraci&#xF3;n de aleta de pez cebra

&#x7C7B;&#x578B; XVIII &#x80F6;&#x539F;&#x662F;&#x5730;&#x4E0B;&#x5BA4;&#x819C;&#x7EC4;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x5E76;&#x8868;&#x793A;&#x7A81;&#x51FA;&#x7684;&#x773C;&#x775B;&#x3001; &#x8840;&#x7BA1;&#x3001; &#x809D;&#x810F;&#x548C;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x3002;&#x5728; COL18A1 &#x4E2D;&#x7684;&#x7EAF;&#x5408;&#x7A81;&#x53D8;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7F57;&#x514B;&#x7EFC;&#x5408;&#x5F81;&#xFF0C;&#x5176;&#x7279;&#x70B9;&#x662F;&#x773C;&#x90E8;&#x7F3A;&#x9677;&#x548C;&#x6795;&#x53F6;&#x8111;&#x81A8;&#x51FA;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x76F8;&#x5BF9;&#x8F83;&#x5C11;&#x88AB;&#x63CF;&#x8FF0;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#xFF0C;XVIII &#x578B;&#x80F6;&#x539F;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x6CA1;&#x6709;&#x4EBA;&#x77E5;&#x9053;&#x5173;&#x4E8E;&#x5B83;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x8868;&#x8FBE;&#x6A21;&#x5F0F;&#x7684;&#x76D1;&#x7BA1;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7528;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x6280;&#x672F;&#x6765;&#x786E;&#x5B9A;&#x548C;&#x8FA8;&#x522B;&#x63A7;&#x5236;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x8C03;&#x63A7;&#x5E8F;&#x5217;&#x3002;&#x4ECE;&#x5173;&#x8054; COL18A1 &#x57FA;&#x4E8E;&#x5E8F;&#x5217;&#x517B;&#x62A4;&#x5728;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x4E4B;&#x4E2D;&#x7684;&#x975E;&#x7F16;&#x7801;&#x5E8F;&#x5217;&#x6311;&#x9009;&#x5019;&#x9009;&#x4EBA;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x5242;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x6CA1;&#x6709;&#x516C;&#x5F00;&#x517B;&#x62A4;&#x4E0E; orthologous &#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x5E8F;&#x5217;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x5C06;&#x663E;&#x793A;&#xFF0C;&#x56DB;&#x4E2A;&#x533A;&#x57DF;&#x4E0D;&#x8FC7;&#x62C5;&#x4EFB;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x8F6C;&#x5F55;&#x5242;&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x80DA;&#x80CE;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x548C;&#x5728;&#x4E00;&#x8D77;&#x6982;&#x62EC; col18a1 &#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x65B9;&#x9762;&#x3002;&#x79EF;&#x6781;&#x589E;&#x5F3A;&#x5B50;&#x5E8F;&#x5217;&#x4E0A;&#x7684;&#x989D;&#x5916;&#x5458;&#x989D;&#x7279;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x7B97;&#x5206;&#x6790;&#x63ED;&#x793A;&#x4E86;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x548C;&#x786C;&#x9AA8;&#x7684;&#x5E8F;&#x5217;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63A8;&#x6D4B;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x5BF9;&#x9F50;&#x65B9;&#x5F0F;&#x9884;&#x6D4B;&#x76F8;&#x5E94;&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x5242; &#xFF1B;&#x4E3A;&#x5176;&#x4E2D;&#x4E4B;&#x4E00;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x4E0E; orthologous &#x4EBA;&#x7C7B;&#x589E;&#x5F3A;&#x5B50;&#x5E8F;&#x5217;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x91CD;&#x53E0;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x529F;&#x80FD;&#x548C; COL18A1&#xFF0C;&#x89C4;&#x7BA1;&#x7684;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x548C;&#x6307;&#x5411;&#x5176;&#x4ED6;&#x5E8F;&#x5217;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x590D;&#x6742;&#x75BE;&#x75C5;&#x6D89;&#x53CA; COL18A1&#x3002;&#x66F4;&#x4E00;&#x822C;&#x5730;&#x8BF4;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x529F;&#x80FD;&#x6570;&#x636E;&#x7ED3;&#x5408;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x53D1;&#x80B2;&#x517B;&#x62A4;&#x6709;&#x9488;&#x5BF9;&#x6027;&#x5730;&#x5206;&#x6790;&#x53EF;&#x4EE5;&#x63ED;&#x793A;&#x4E2D;&#x5927;&#x91CF;&#x7684;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#x5355;&#x72EC;&#x8BA1;&#x7B97;&#x5BF9;&#x9F50;&#x798F;&#x5C14;&#x65AF;&#x77ED;&#x7684;&#x5B88;&#x6052;&#x7684;&#x72EC;&#x8054;&#x4F53;&#x8C03;&#x63A7;&#x5143;&#x4EF6;&#x3002;

&#x529F;&#x80FD;&#x4E0A;&#x4FDD;&#x5B88;&#x72EC;&#x8054;&#x4F53;&#x8C03;&#x63A7;&#x5143;&#x4EF6;&#xFF0C;COL18A1 &#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x6280;&#x672F;&#x901A;&#x8FC7;&#x786E;&#x5B9A;&#x3002;

Type XVIII collagen is a component of basement membranes, and expressed prominently in the eye, blood vessels, liver, and the central nervous system. Homozygous mutations in COL18A1 lead to Knobloch Syndrome, characterized by ocular defects and occipital encephalocele. However, relatively little has been described on the role of type XVIII collagen in development, and nothing is known about the regulation of its tissue-specific expression pattern. We have used zebrafish transgenesis to identify and characterize cis-regulatory sequences controlling expression of the human gene. Candidate enhancers were selected from non-coding sequence associated with COL18A1 based on sequence conservation among mammals. Although these displayed no overt conservation with orthologous zebrafish sequences, four regions nonetheless acted as tissue-specific transcriptional enhancers in the zebrafish embryo, and together recapitulated the major aspects of col18a1 expression. Additional post-hoc computational analysis on positive enhancer sequences revealed alignments between mammalian and teleost sequences, which we hypothesize predict the corresponding zebrafish enhancers; for one of these, we demonstrate functional overlap with the orthologous human enhancer sequence. Our results provide important insight into the biological function and regulation of COL18A1, and point to additional sequences that may contribute to complex diseases involving COL18A1. More generally, we show that combining functional data with targeted analyses for phylogenetic conservation can reveal conserved cis-regulatory elements in the large number of cases where computational alignment alone falls short.

Functionally conserved cis-regulatory elements of COL18A1 identified through zebrafish transgenesis.

Type de collag&#xE8;ne XVIII est un composant des membranes basales, et a exprim&#xE9; en bonne place dans l&#x26;#39;&#x153;il, les vaisseaux sanguins, le foie et le syst&#xE8;me nerveux central. Mutations homozygotes dans COL18A1 plomb &#xE0; Knobloch syndrome, caract&#xE9;ris&#xE9; par des d&#xE9;fauts oculaires et enc&#xE9;phaloc&#xE8;le occipitale. Cependant, relativement peu a &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;crit sur le r&#xF4;le de type XVIII collag&#xE8;ne dans le d&#xE9;veloppement, et on ne sait rien au sujet de la r&#xE9;gulation de son profil d&#x26;#39;expression tissu-sp&#xE9;cifique. Nous avons utilis&#xE9; la transgen&#xE8;se poisson-z&#xE8;bre pour identifier et caract&#xE9;riser s&#xE9;quences cis-r&#xE9;gulatrices contr&#xF4;lant l&#x26;#39;expression du g&#xE8;ne humain. Exhausteurs de candidates ont &#xE9;t&#xE9; s&#xE9;lectionn&#xE9;es &#xE0; partir de s&#xE9;quence non codante associ&#xE9;e &#xE0; COL18A1 bas&#xE9; sur la conservation de s&#xE9;quence chez les mammif&#xE8;res. Bien que ces affich&#xE9;e sans conservation manifeste avec des s&#xE9;quences orthologues de poisson z&#xE8;bre, quatre r&#xE9;gions n&#xE9;anmoins agi comme exhausteurs de tissu-sp&#xE9;cifiques de la transcription dans l&#x26;#39;embryon du poisson z&#xE8;bre, et, ensemble, a r&#xE9;capitul&#xE9; les principaux aspects de la col18a1 expression. Suppl&#xE9;mentaires analyse post-hoc de calcul sur des s&#xE9;quences amplificatrices positifs r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; alignements entre les s&#xE9;quences de mammif&#xE8;res et poissons t&#xE9;l&#xE9;ost&#xE9;ens, qui nous &#xE9;mettons l&#x26;#39;hypoth&#xE8;se de pr&#xE9;dire les exhausteurs de poisson-z&#xE8;bre correspondants; pour l&#x26;#39;un de ceux-ci, nous d&#xE9;montrons chevauchement fonctionnel avec la s&#xE9;quence enhancer orthologue humain. Nos r&#xE9;sultats fournissent des indications importantes sur la fonction biologique et la r&#xE9;glementation des COL18A1, et le point &#xE0; des s&#xE9;quences suppl&#xE9;mentaires qui peuvent contribuer &#xE0; des maladies complexes impliquant COL18A1. Plus g&#xE9;n&#xE9;ralement, nous montrons que la combinaison des donn&#xE9;es fonctionnelles avec des analyses cibl&#xE9;es pour la conservation phylog&#xE9;n&#xE9;tique peut r&#xE9;v&#xE9;ler conserv&#xE9;es &#xE9;l&#xE9;ments cis-r&#xE9;gulateurs dans le grand nombre de cas o&#xF9; l&#x26;#39;alignement de calcul seul est insuffisant.

Fonctionnellement Conserves &#xE9;l&#xE9;ments cis-r&#xE9;gulateurs de COL18A1 identifi&#xE9;s par transgen&#xE8;se poisson-z&#xE8;bre

Typ XVIII Kollagen ist eine Komponente von Keller-Membranen und prominent in das Auge, Blutgef&auml;&szlig;e, Leber und des zentralen Nervensystems ausgedr&uuml;ckt. Homozygote Mutationen im COL18A1 f&uuml;hren zu Knobloch-Syndrom, gekennzeichnet durch Augendefekte und okzipitale Enzephalozele. Jedoch relativ wenig ist &uuml;ber die Rolle der Typ XVIII Kollagen in Entwicklung beschrieben worden, und &uuml;ber die Regulierung der sein Gewebe-spezifischen Ausdrucksmuster ist nichts bekannt. Wir haben Zebrafish Transgenese Ermittlung und Charakterisierung von Cis-regulatorische Sequenzen Steuernder Ausdruck des menschlichen Gens verwendet. Kandidat Vergr&ouml;&szlig;erer wurden aus nicht-kodierenden Sequenz zugeordnet COL18A1 basierend auf Sequenz Erhaltung bei S&auml;ugetieren ausgew&auml;hlt. Obwohl dies keine offenkundige Erhaltung mit Orthologous Zebrafisch Sequenzen angezeigt, vier Regionen dennoch als Gewebe-spezifischen transkriptionelle Geschmacksverst&auml;rker im Zebrafish Embryo, und gemeinsam rekapituliert die Hauptaspekte der col18a1 Ausdruck. Computational zus&auml;tzliche Post-hoc-Analyse auf positive Vergr&ouml;&szlig;erer Sequenzen offenbart, dass Ausrichtungen zwischen S&auml;ugetieren und teleost Sequenzen, die wir vermuten die entsprechenden Zebrafisch-Vergr&ouml;&szlig;erer vorherzusagen; zum einen der folgenden demonstrieren wir funktionale &Uuml;berschneidungen mit der Orthologous menschlichen Vergr&ouml;&szlig;erer-Sequenz. Unsere Ergebnisse einen wichtigen Einblick in die biologische Funktion und Regulierung des COL18A1, und zeigen Sie auf zus&auml;tzliche Sequenzen, die zu komplexen Erkrankungen, die mit COL18A1 beitragen k&ouml;nnen. Generell zeigen wir, dass die Kombination von Funktionsdaten mit gezielten Analysen f&uuml;r phylogenetische Erhaltung konservierte Cis-regulatorische Elementen in der gro&szlig;en Zahl der F&auml;lle aufdecken kann, wo computational Ausrichtung allein nicht ausreicht.

Funktional konservierten Cis-regulatorische Elemente des COL18A1 durch Zebrafish Transgenese identifiziert.

Collagene di tipo XVIII sono un componente delle membrane basali ed espresso visibile nell&#39;occhio, i vasi sanguigni, fegato e sistema nervoso centrale. Mutazioni omozigoti nel COL18A1 portano alla sindrome di Knobloch, caratterizzata da anomalie oculari ed encefalocele occipitale. Tuttavia, relativamente poco &egrave; stato descritto il ruolo del collagene di tipo XVIII in sviluppo, e non si sa nulla circa il regolamento del suo pattern di espressione tessuto-specifica. Abbiamo usato zebrafish transgenesi per identificare e caratterizzare le sequenze cis-regolatori di espressione del gene umano di controllo. Esaltatori di candidati sono stati selezionati dalla sequenza non codificante associato COL18A1 basato sulla conservazione di sequenza tra i mammiferi. Sebbene queste visualizzato nessun palese conservazione con sequenze di zebrafish orthologous, quattro regioni comunque agito come esaltatori di transcriptional di tessuto-specifici nell&#39;embrione dello zebrafish e ricapitolate insieme i principali aspetti del col18a1 espressione. Analisi computazionale ulteriori post-hoc su sequenze enhancer positivo ha rivelato gli allineamenti tra sequenze dei mammiferi e teleostei, che ipotizziamo prevedono i rinforzatori di zebrafish corrispondente; per uno di questi, dimostriamo sovrapposizione funzionale con la sequenza enhancer umano orthologous. I nostri risultati forniscono informazioni importanti nella funzione biologica e regolamento di COL18A1 e punti a sequenze aggiuntive che possono contribuire a malattie complesse che coinvolgono COL18A1. Pi&ugrave; in generale, vi mostriamo che combinando dati funzionali con analisi mirata per conservazione filogenetica pu&ograve; rivelare elementi cis-regolatori conservati in gran numero di casi dove cade breve allineamento computazionale da solo.

Funzionalmente conservati elementi cis-regolatori di COL18A1 identificato tramite transgenesi zebrafish.

XVIII&#x578B;&#x30B3;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3;&#x306F;&#x57FA;&#x5E95;&#x819C;&#x306E;&#x6210;&#x5206;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x773C;&#x3001;&#x8840;&#x7BA1;&#x3001;&#x809D;&#x81D3;&#x3001;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x3067;&#x9855;&#x8457;&#x306B;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x773C;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x3084;&#x5F8C;&#x982D;&#x90E8;&#x8133;&#x30D8;&#x30EB;&#x30CB;&#x30A2;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x30CE;&#x30D6;&#x30ED;&#x30D5;&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#x3078;&#x306E;COL18A1&#x925B;&#x306E;&#x30DB;&#x30E2;&#x63A5;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x6BD4;&#x8F03;&#x7684;&#x5C0F;&#x3055;&#x306A;&#x958B;&#x767A;XVIII&#x578B;&#x30B3;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x3066;&#x304D;&#x305F;&#x3001;&#x4F55;&#x304C;&#x305D;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x767A;&#x73FE;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x306F;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x30B7;&#x30B9;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x914D;&#x5217;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x3001;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5019;&#x88DC;&#x30A8;&#x30F3;&#x30CF;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x54FA;&#x4E73;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x9593;&#x3067;&#x914D;&#x5217;&#x306E;&#x4FDD;&#x5B58;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;COL18A1&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x975E;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x914D;&#x5217;&#x304B;&#x3089;&#x9078;&#x629E;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306F;&#x30AA;&#x30EB;&#x30BD;&#x30ED;&#x30AC;&#x30B9;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x914D;&#x5217;&#x3068;&#x306E;&#x660E;&#x767D;&#x306A;&#x4FDD;&#x5168;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x304C;&#x3001;4&#x3064;&#x306E;&#x5730;&#x57DF;&#x306F;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x80DA;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x306A;&#x8EE2;&#x5199;&#x30A8;&#x30F3;&#x30CF;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x4F5C;&#x7528;&#x3057;&#x3001;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;col18a1&#x8868;&#x73FE;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x5074;&#x9762;&#x3092;recapitulated&#x3002;&#x6B63;&#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30CF;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x914D;&#x5217;&#x306B;&#x8FFD;&#x52A0;&#x306E;&#x4E8B;&#x5F8C;&#x8A08;&#x7B97;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x304C;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x30A8;&#x30F3;&#x30CF;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x3092;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3059;&#x308B;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x3068;&#x786C;&#x9AA8;&#x9B5A;&#x306E;&#x914D;&#x5217;&#x9593;&#x306E;&#x30A2;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x306E;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30AA;&#x30EB;&#x30BD;&#x30ED;&#x30AC;&#x30B9;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30CF;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x914D;&#x5217;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306A;&#x30AA;&#x30FC;&#x30D0;&#x30FC;&#x30E9;&#x30C3;&#x30D7;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;COL18A1&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3068;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3001;COL18A1&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x75C5;&#x6C17;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x4ED8;&#x52A0;&#x7684;&#x306A;&#x914D;&#x5217;&#x3092;&#x6307;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3088;&#x308A;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x7CFB;&#x7D71;&#x4FDD;&#x5168;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6A19;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306A;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x3092;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x5358;&#x72EC;&#x3067;&#x8A08;&#x7B97;&#x30A2;&#x30E9;&#x30A4;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306F;&#x53CA;&#x3070;&#x306A;&#x3044;&#x4F8B;&#x304C;&#x591A;&#x6570;&#x3067;&#x4FDD;&#x5B58;&#x30B7;&#x30B9;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x30A8;&#x30EC;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x8B58;&#x5225;COL18A1&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306B;&#x4FDD;&#x5B58;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x30A8;&#x30EC;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;

&#xC720;&#xD615; 18 &#xC138; &#xCF5C;&#xB77C;&#xAC90; &#xC9C0;&#xD558;&#xC2E4; &#xB9C9;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; &#xC774;&#xBA70;, &#xB208;, &#xD608;&#xAD00;, &#xAC04;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC911;&#xC559; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB208;&#xC5D0; &#xB744;&#xAC8C; &#xD45C;&#xD604;. COL18A1 homozygous &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; Knobloch &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70;, &#xB208; &#xACB0;&#xD568; &#xBC0F; &#xC774;&#xC6C3;&#xC9D1; encephalocele &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9C8;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC0C1;&#xB300;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC791;&#xC740; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xD615; 18 &#xC138; &#xCF5C;&#xB77C;&#xAC90;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560; &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC544;&#xBB34;&#xAC83;&#xB3C4; &#xADF8; &#xC870;&#xC9C1;&#xC744; &#xD2B9;&#xC815; &#xD328;&#xD134;&#xC758; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xC158;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xBC0F; cis &#xADDC;&#xC81C; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xC81C;&#xC5B4; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD45C;&#xD604; &#xD2B9;&#xC131; zebrafish transgenesis&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD6C4;&#xBCF4; &#xC99D;&#xAC15; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC911;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC21C;&#xC11C; &#xBCF4;&#xC874;&#xC744; &#xAE30;&#xBC18;&#xC73C;&#xB85C; &#xD558;&#xB294; col18a1&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xBE44; &#xCF54;&#xB529; &#xC21C;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC120;&#xC815; &#xB410;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xC5C6;&#xC74C; &#xBA85;&#xBC31;&#xD55C; &#xBCF4;&#xC874; orthologous zebrafish &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC640; &#xD568;&#xAED8;, &#xBE44;&#xB85D; 4 &#xAC1C; &#xC9C0;&#xC5ED; zebrafish &#xD0DC;&#xC544;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC870;&#xC9C1; &#xAD00;&#xB828; transcriptional &#xC99D;&#xAC15;&#xC73C;&#xB85C; &#xADF8;&#xB7FC;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xD589;&#xB3D9; &#xD558; &#xACE0; &#xD568;&#xAED8; col18a1 &#xC2DD;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xCE21;&#xBA74;&#xC744; recapitulated. &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC99D;&#xAC15; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xCD94;&#xAC00; &#xD3EC;&#xC2A4;&#xD2B8; hoc &#xC804;&#xC0B0; &#xBD84;&#xC11D; &#xBC1D;&#xD600; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xAC00;&#xC124; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958;&#xC640; teleost &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xAC04;&#xC758; &#xC120;&#xD615; &#xC608;&#xCE21; &#xD574;&#xB2F9; zebrafish &#xAC15;&#xD654;; &#xB2E4;&#xC74C; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC911;&#xBCF5; orthologous &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC99D;&#xAC15; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBC0F; COL18A1, &#xADDC;&#xC81C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xD1B5;&#xCC30;&#xB825;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558; &#xACE0; col18a1&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC758; &#xC6D0;&#xC778;&#xC774; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xCD94;&#xAC00; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xB97C; &#xAC00;&#xB9AC;&#xD0B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; phylogenetic &#xBCF4;&#xC874;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD0C0;&#xAC9F;&#xB41C; &#xBD84;&#xC11D; &#xAE30;&#xB2A5; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xACB0;&#xD569; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; cis &#xADDC;&#xC815; &#xC694;&#xC18C; &#xACC4;&#xC0B0; &#xB9DE;&#xCDA4; &#xD63C;&#xC790; &#xC9E7;&#xC740; &#xD3ED;&#xD3EC; &#xACBD;&#xC6B0; &#xB9CE;&#xC740; &#xBC1D;&#xD790; &#xC218; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Zebrafish transgenesis&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xB294; col18a1&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; cis &#xADDC;&#xC815; &#xC694;&#xC18C;.

Tipo de col&#xE1;geno XVIII es un componente de las membranas basales, y expres&#xF3; un lugar destacado en el ojo, los vasos sangu&#xED;neos, el h&#xED;gado y el sistema nervioso central. Mutaciones homocig&#xF3;ticas en COL18A1 plomo a Knobloch s&#xED;ndrome, caracterizado por defectos oculares y encefalocele occipital. Sin embargo, relativamente poco se ha descrito en el papel del tipo de col&#xE1;geno XVIII en el desarrollo, y nada se sabe sobre la regulaci&#xF3;n de su patr&#xF3;n de expresi&#xF3;n tejido-espec&#xED;fica. Hemos utilizado transg&#xE9;nesis pez cebra para identificar y caracterizar cis-secuencias reguladoras que controlan la expresi&#xF3;n del gen humano. Potenciadores de candidatos fueron seleccionados de secuencia que no codifica asociado con COL18A1 basado en la secuencia de conservaci&#xF3;n entre los mam&#xED;feros. Aunque estos no mostraron la conservaci&#xF3;n de manifiesto con las secuencias de pez cebra orthologous, cuatro regiones, sin embargo actuaron como los tejidos espec&#xED;ficos de los potenciadores de la transcripci&#xF3;n en el embri&#xF3;n de pez cebra, y juntos recapitul&#xF3; los principales aspectos de COL18A1 expresi&#xF3;n. Adicional post-hoc de an&#xE1;lisis computacional de secuencias potenciadoras positivos revel&#xF3; alineamientos entre secuencias de mam&#xED;feros y tele&#xF3;steos, que nuestra hip&#xF3;tesis es predecir los potenciadores de pez cebra correspondientes, ya que uno de ellos, demostramos superposici&#xF3;n de funciones con la secuencia de ort&#xF3;logos humanos potenciador. Nuestros resultados proporcionan informaci&#xF3;n importante sobre la funci&#xF3;n biol&#xF3;gica y la regulaci&#xF3;n de COL18A1, y el punto de secuencias adicionales que pueden contribuir a enfermedades complejas que involucran COL18A1. En t&#xE9;rminos m&#xE1;s generales, nos muestran que la combinaci&#xF3;n de datos con los an&#xE1;lisis funcionales espec&#xED;ficas para la conservaci&#xF3;n filogen&#xE9;tica puede revelar conservadas cis-elementos reguladores en el gran n&#xFA;mero de casos en los que la alineaci&#xF3;n de c&#xE1;lculo solo se queda corta.

Funcionalmente Conservas cis-elementos reguladores de COL18A1 identificados a trav&#xE9;s de transg&#xE9;nesis pez cebra

&#x800C;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x90FD;&#x6709;&#x4FEE;&#x590D;&#x9AA8;&#x7F3A;&#x635F;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x6709;&#x9650;&#xFF0C;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5B8C;&#x5168;&#x518D;&#x751F;&#x79BB;&#x65AD;&#x9AA8;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x5B83;&#x4EEC;&#x7684;&#x9CCD;&#x3002;&#x9C7C;&#x7FC5;&#x518D;&#x751F;&#x662F;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E; blastema&#xFF0C;&#x5806;&#x79EF;&#x4E8E;&#x622A;&#x80A2;&#x5E73;&#x9762;&#x7684;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6C60;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;Blastema &#x4ECE;&#x6D3E;&#x751F;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x662F;&#x5426;&#x5B83;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x8131;&#x5206;&#x5316;&#x6210;&#x719F;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x548C; blastema &#x7EC6;&#x80DE;&#x662F;&#x5426;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&#x8FD8;&#x4E0D;&#x6E05;&#x695A;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x660E;&#x6210;&#x719F;&#x7684;&#x6210;&#x9AA8;&#x7EC6;&#x80DE; dedifferentiate &#x548C; blastema &#x7684;&#x4E00;&#x90E8;&#x5206;&#x3002;&#x6210;&#x9AA8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0B;&#x8C03;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x4E2D;&#x95F4;&#x4F53;&#x548C;&#x665A;&#x9AA8;&#x5206;&#x5316;&#x6807;&#x8BB0;&#x548C;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x9AA8;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x8FBE;&#x57FA;&#x56E0;&#x3002;&#x53BB;&#x5206;&#x5316;&#x6210;&#x9AA8;&#x7EC6;&#x80DE; FGF &#x4F9D;&#x8D56;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x6269;&#x6563;&#x548C;&#x8FC1;&#x79FB;&#x5230; blastema &#x7684;&#x4E00;&#x90E8;&#x5206;&#x3002;&#x9057;&#x4F20;&#x547D;&#x8FD0;&#x6620;&#x5C04;&#x663E;&#x793A;&#x6210;&#x9AA8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53EA;&#x4F1A;&#x5F15;&#x8D77;&#x5BF9;&#x6210;&#x9AA8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x518D;&#x751F;&#xFF0C;&#x6307;&#x793A;&#x8BE5;&#x53BB;&#x5206;&#x5316;&#x4E0D;&#x8111;&#x795E;&#x7ECF;&#x7684;&#x5B9E;&#x73B0;&#x4E0E;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x9AA8;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4ECE;&#x6210;&#x719F;&#x6210;&#x9AA8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#xFF0C;&#x53D1;&#x73B0;&#x6709;&#x6F5C;&#x5728;&#x5F71;&#x54CD;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x9AA8;&#x4FEE;&#x590D;&#x901A;&#x8FC7;&#x91CD;&#x65B0;&#x751F;&#x6210;&#x3002;

&#x901A;&#x8FC7;&#x5728;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x9CCD;&#x7684;&#x6210;&#x9AA8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x518D;&#x751F;&#x9AA8;&#x3002;

While mammals have a limited capacity to repair bone defects, zebrafish can completely regenerate amputated bony structures of their fins. Fin regeneration is dependent on formation of a blastema, a progenitor cell pool accumulating at the amputation plane. It is unclear which cells the blastema is derived from, whether it forms by dedifferentiation of mature cells, and whether blastema cells are multipotent. We show that mature osteoblasts dedifferentiate and form part of the blastema. Osteoblasts downregulate expression of intermediate and late bone differentiation markers and induce genes expressed by bone progenitors. Dedifferentiated osteoblasts proliferate in a FGF-dependent manner and migrate to form part of the blastema. Genetic fate mapping shows that osteoblasts only give rise to osteoblasts in the regenerate, indicating that dedifferentiation is not associated with the attainment of multipotency. Thus, bone can regenerate from mature osteoblasts via dedifferentiation, a finding with potential implications for human bone repair.

Bone regenerates via dedifferentiation of osteoblasts in the zebrafish fin.

Alors que les mammif&#xE8;res ont une capacit&#xE9; limit&#xE9;e pour r&#xE9;parer les d&#xE9;fauts osseux, le poisson z&#xE8;bre peut r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;rer compl&#xE8;tement amput&#xE9;s structures osseuses de leurs nageoires. Fin de r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration d&#xE9;pend de la formation d&#x26;#39;un blast&#xE8;me, une piscine de cellules prog&#xE9;nitrices, s&#x26;#39;accumulent sur le plan de l&#x26;#39;amputation. On ne sait pas lequel des cellules du blast&#xE8;me est d&#xE9;riv&#xE9; de, si elle se forme par d&#xE9;diff&#xE9;renciation des cellules matures, et si les cellules blast&#xE8;me sont multipotentes. Nous montrons que les ost&#xE9;oblastes matures d&#xE9;diff&#xE9;rencier et font partie du blast&#xE8;me. Les ost&#xE9;oblastes r&#xE9;gulent &#xE0; la baisse l&#x26;#39;expression de interm&#xE9;diaires et la fin de marqueurs de diff&#xE9;renciation osseuse et induisent des g&#xE8;nes exprim&#xE9;s par les prog&#xE9;niteurs osseux. Ost&#xE9;oblastes d&#xE9;diff&#xE9;renci&#xE9;es prolif&#xE8;rent de mani&#xE8;re FGF-d&#xE9;pendante et migrent pour former une partie de l&#x26;#39;blast&#xE8;me. Cartographie g&#xE9;n&#xE9;tique montre que le sort des ost&#xE9;oblastes ne donner lieu &#xE0; des ost&#xE9;oblastes dans la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;rer, ce qui indique que la d&#xE9;diff&#xE9;renciation n&#x26;#39;est pas associ&#xE9; &#xE0; la r&#xE9;alisation de multipotence. Ainsi, les os peuvent se r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;rer &#xE0; partir d&#x26;#39;ost&#xE9;oblastes matures via d&#xE9;diff&#xE9;renciation, une conclusion avec des implications potentielles pour la r&#xE9;paration des os humains.

Article	Year
Saltatory control of isometric growth in the zebrafish caudal fin is disrupted in long fin and rapunzel mutants. Developmental biology\| PubMed ID: 12871703	2003
Radiographic analysis of zebrafish skeletal defects. Developmental biology\| PubMed ID: 14623232	2003
Duplicate zebrafish runx2 orthologues are expressed in developing skeletal elements. Gene expression patterns : GEP\| PubMed ID: 15261836	2004
Twisted gastrulation enhances BMP signaling through chordin dependent and independent mechanisms. Development (Cambridge, England)\| PubMed ID: 15604098	2005
Disruption of Bardet-Biedl syndrome ciliary proteins perturbs planar cell polarity in vertebrates. Nature genetics\| PubMed ID: 16170314	2005
Dissection of epistasis in oligogenic Bardet-Biedl syndrome. Nature\| PubMed ID: 16327777	2006
Conservation of RET regulatory function from human to zebrafish without sequence similarity. Science (New York, N.Y.)\| PubMed ID: 16556802	2006
Evaluating the biological relevance of putative enhancers using Tol2 transposon-mediated transgenesis in zebrafish. Nature protocols\| PubMed ID: 17406414	2006
Manipulating mitotic recombination in the zebrafish embryo through RecQ helicases. Genetics\| PubMed ID: 17483412	2007
Disruption of the basal body compromises proteasomal function and perturbs intracellular Wnt response. Nature genetics\| PubMed ID: 17906624	2007
Evaluation of cis-regulatory function in zebrafish. Briefings in functional genomics & proteomics\| PubMed ID: 18820318	2008
Osteoblast maturation occurs in overlapping proximal-distal compartments during fin regeneration in zebrafish. Developmental dynamics : an official publication of the American Association of Anatomists\| PubMed ID: 19842180	2009
Functionally conserved cis-regulatory elements of COL18A1 identified through zebrafish transgenesis. Developmental biology\| PubMed ID: 19895802	2010
Bone regenerates via dedifferentiation of osteoblasts in the zebrafish fin. Developmental cell\| PubMed ID: 21571227	2011
Î¦C31 integrase mediates efficient cassette exchange in the zebrafish germline. Developmental dynamics : an official publication of the American Association of Anatomists\| PubMed ID: 21805532	2011
Identification of RNA binding motif proteins essential for cardiovascular development. BMC developmental biology\| PubMed ID: 22011202	2011

Shannon Fisher

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