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Dissection and Culture of Commissural Neurons from Embryonic Spinal Cord

Commissural neurons have been widely used to investigate the mechanisms underlying axon guidance during embryonic spinal cord development. The cell bodies ...

Institut de recherches cliniques de Montréal

McGill University

Montreal Neurological Institute

&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;-1 &#x4E3B;&#x53D7;&#x4F53; CD4&#xFF0C;&#x53D7;&#x4F53;&#x514D;&#x75AB;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x8D85;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x5728;&#x514D;&#x75AB;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5BB6;&#x65CF;&#x7684;&#x6210;&#x5458;&#x3002;CD4 &#x7684;&#x80DE;&#x5916;&#x90E8;&#x5206;&#x662F; D1 &#x81F3; D4 &#x7684;&#x57DF;&#xFF0C;&#x514D;&#x75AB;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x6837;&#x56DB;&#x4E2A;&#x4E32;&#x8054;&#x3002;D1&#x3001; D2 &#x548C; D4 &#x57DF;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x5305;&#x542B;&#x4E8C;&#x786B;&#x952E;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x5C55;&#x793A; D2 &#x4E8C;&#x786B;&#x952E;&#x662F;&#x6C27;&#x5316;&#x8FD8;&#x539F;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;(&#x4E8C;&#x5DEF;&#x4E0E;&#x786B;&#x5316;) &#x786B;&#x9187;&#x7684;&#x6C27;&#x5316;&#x8FD8;&#x539F;&#x72B6;&#x6001;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x8FD9;&#x7531; CD4(+) T &#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x6CCC;&#x51FA;&#x6765;&#x7684;&#x786B;&#x6C27;&#x8FD8;&#x86CB;&#x767D;&#x53D7;&#x5230;&#x89C4;&#x7BA1;&#x3002;&#x9501;&#x5B9A; CD4 &#x548C;&#x786B;&#x6C27;&#x8FD8;&#x86CB;&#x767D;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7F51;&#x7AD9; dithiols &#x5230;&#x6613;&#x611F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2; 1 &#x51CF;&#x5C11;&#x72B6;&#x6001;&#x4E0B;&#x8FDB;&#x884C;&#x4EB2;&#x6C34;&#x7684;&#x4E09;&#x4EF7;&#x7837;&#x88AB;&#x963B;&#x6B62;&#x5165;&#x5883;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E; CD4 D2 &#x4E2D;&#x7684;&#x6C27;&#x5316;&#x8FD8;&#x539F;&#x66F4;&#x6539;&#x4E3A;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2; 1 &#x9879;&#x91CD;&#x8981;&#xFF0C;&#x4EE3;&#x8868;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2; 1 &#x8FDB;&#x5165;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x7684;&#x65B0;&#x9776;&#x70B9;&#x3002;

&#x4E8C;&#x786B;&#x5316;&#x4EA4;&#x6362;&#x7684; CD4 2 &#x57DF;&#x4E2D;&#x662F;&#x5FC5;&#x9700;&#x7684;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;-1 &#x7684;&#x6761;&#x76EE;&#x3002;

CD4, a member of the immunoglobulin superfamily of receptors that mediates cell-cell interactions in the immune system, is the primary receptor for HIV-1. The extracellular portion of CD4 is a concatenation of four immunoglobulin-like domains, D1 to D4. The D1, D2 and D4 domains each contain a disulfide bond. We show here that the D2 disulfide bond is redox-active. The redox state of the thiols (disulfide versus dithiol) appeared to be regulated by thioredoxin, which is secreted by CD4(+) T cells. Locking the CD4 and the thioredoxin active-site dithiols in the reduced state with a hydrophilic trivalent arsenical blocked entry of HIV-1 into susceptible cells. These findings indicate that redox changes in CD4 D2 are important for HIV-1 entry and represent a new target for HIV-1 entry inhibitors.

Disulfide exchange in domain 2 of CD4 is required for entry of HIV-1.

CD4, membre de la superfamille des immunoglobulines de r&eacute;cepteurs qui intervient dans les interactions cellule-cellule du syst&egrave;me immunitaire, est le principal r&eacute;cepteur pour le VIH-1. La partie extracellulaire de CD4 est une concat&eacute;nation des quatre domaines de type immunoglobuline, D1 &agrave; D4. Les domaines D1, D2 et D4 contiennent une liaison disulfure. Nous montrons ici que la liaison disulfure D2 est activ&eacute; par oxydo-r&eacute;duction. L&#39;&eacute;tat redox des thiols (disulfure versus dithiol) semble &ecirc;tre r&eacute;glement&eacute;e par la thior&eacute;doxine, qui est s&eacute;cr&eacute;t&eacute;e par les cellules T CD4 +. Verrouillage les CD4 et les thior&eacute;doxine site actif dithiols dans l&#39;&eacute;tat r&eacute;duit avec une entr&eacute;e de bloqu&eacute;s arsenical trivalente hydrophile du VIH-1 dans les cellules sensibles. Ces r&eacute;sultats indiquent que les changements redox en D2 CD4 sont importantes pour l&#39;entr&eacute;e du VIH-1 et repr&eacute;sentent une nouvelle cible pour les inhibiteurs de l&#39;entr&eacute;e du VIH-1.

&Eacute;change disulfure dans domaine 2 de CD4 est exig&eacute; &agrave; l&#39;entr&eacute;e du VIH-1.

Disulfidaustausch in der Dom&#xE4;ne 2 CD4 Eintritt von HIV-1 erforderlich.

CD4, un membro della superfamiglia dei recettori dell&#39;immunoglobulina che media le interazioni cellula-cellula del sistema immunitario, &egrave; il principale recettore per l&#39;HIV-1. La porzione extracellulare di CD4 &egrave; una concatenazione di quattro immunoglobulina-come domini, D1 a D4. I domini D1, D2 e D4 contengono un legame disolfuro. Mostriamo qui che il ponte disolfuro D2 &egrave; redox-attiva. Lo stato redox dei tioli (disolfuro versus ditiolo) sembrava essere regolata da tioredossina, che viene secreto dalle cellule T CD4(+). Bloccaggio del CD4 e la tioredossina attiva-sito dithiols nello stato ridotto con un idrofilo ingresso bloccato arsenicale trivalente di HIV-1 in cellule sensibili. Questi risultati indicano che modifiche redox in CD4 D2 sono importanti per l&#39;ingresso dell&#39;HIV-1 e rappresentano una nuova destinazione per gli inibitori di entrata HIV-1.

Disolfuro exchange nel dominio 2 di CD4 &egrave; necessaria per l&#39;ingresso dell&#39;HIV-1.

CD4 &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3001;&#x514D;&#x75AB;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x30B0;&#x30ED;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3; &#x30B9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;HIV-1 &#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3067;&#x3059;&#x3002;Cd4 &#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x306E;&#x90E8;&#x5206;&#x306F; D1 D4 &#x306B; 4 &#x3064;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x30B0;&#x30ED;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3;&#x69D8;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x9023;&#x7D50;&#x3067;&#x3059;&#x3002;D1&#x3001;D2&#x3001;D4 &#x306E;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x5404;&#x30B8;&#x30B9;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C9;&#x7D50;&#x5408;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x3053;&#x3053; D2 &#x30B8;&#x30B9;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C9;&#x7D50;&#x5408;&#x30EC;&#x30C9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x6D3B;&#x6027;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30C1;&#x30AA;&#x30FC;&#x30EB;&#x5316;&#x5408;&#x7269; (&#x4E8C;&#x786B;&#x5316;&#x30B8;&#x30C1;&#x30AA;&#x30FC;&#x30EB;&#x5BFE;) &#x306E;&#x9178;&#x5316;&#x9084;&#x5143;&#x72B6;&#x614B; CD4(+) T &#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5206;&#x6CCC;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30C1;&#x30AA;&#x30EC;&#x30C9;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x898F;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x306B;&#x898B;&#x3048;&#x305F;&#x3002;CD4 &#x3068;&#x30C1;&#x30AA;&#x30EC;&#x30C9;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3; &#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x633F;&#x5165;&#x3067;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B; HIV-1 &#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x72B6;&#x614B;&#x306F;&#x89AA;&#x6C34;&#x6027;&#x306E;&#x4E09;&#x4FA1;&#x30D2;&#x7D20;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA;&#x306E;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6240;&#x898B;&#x306F; CD4 D2 &#x306E;&#x30EC;&#x30C9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x5909;&#x5316; HIV-1 &#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA;&#x3092;&#x91CD;&#x8981;&#x306A; HIV 1 &#x30A8;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x8868;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3; 2 CD4 &#x306E;&#x30B8;&#x30B9;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C9;&#x4EA4;&#x63DB;&#x306E; HIV-1 &#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

C d 4 &#xBA74;&#xC5ED; &#xCCB4;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xC911;&#xC7AC; &#xD558;&#xB294; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xBA74;&#xC5ED; &#xAE00;&#xB85C;&#xBD88;&#xB9B0; superfamily &#xD68C;&#xC6D0; h i V-1&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC774;&#xB2E4;. CD4 &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xBD80;&#xBD84;&#xC740; 4 &#xAC1C;&#xC758; &#xBA74;&#xC5ED; &#xAE00;&#xB85C;&#xBD88;&#xB9B0; &#xAC19;&#xC740; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; d 1 d 4 &#xC5F0;&#xACB0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. D1, D2 &#xBC0F; d 4 &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xC774;&#xD669;&#xD654; &#xBCF8;&#xB4DC; &#xD3EC;&#xD568;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0; D2 &#xC774;&#xD669;&#xD654; &#xBCF8;&#xB4DC;&#xB294; redox active &#xD45C;&#xC2DC;. Thiols (&#xC774;&#xD669;&#xD654; dithiol &#xB300;)&#xC758; &#xC0B0;&#xD654; &#xC0C1;&#xD0DC; thioredoxin, CD4(+) T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBD84; &#xBE44;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD1B5;&#xC81C; &#xB420; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC778;&#xB2E4;. &#xC7A0;&#xAE08; &#xB41C; c d 4&#xC640; &#xCDE8;&#xC57D; &#xC140;&#xC73C;&#xB85C; V-1&#xC758; &#xCE5C;&#xC218;&#xC131; trivalent arsenical &#xCC28;&#xB2E8;&#xB41C; &#xD56D;&#xBAA9;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC10;&#xC18C; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0;&#xC11C; thioredoxin &#xC561;&#xD2F0;&#xBE0C; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; dithiols. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; c d 4 d 2&#xC758; redox &#xBCC0;&#xD654; &#xC5D0;&#xC774;&#xC988;-1 &#xD56D;&#xBAA9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; HIV-1 &#xD56D;&#xBAA9; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xBAA9;&#xD45C;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC774;&#xD669;&#xD654; exchange &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; 2 c d 4&#xC5D0;&#xB294; h i V-1&#xC758; &#xD56D;&#xBAA9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

CD4, un miembro de la superfamilia de inmunoglobulinas de receptores que media las interacciones c&eacute;lula-c&eacute;lula en el sistema inmune, es el principal receptor para el VIH-1. La porci&oacute;n extracelular de CD4 es una concatenaci&oacute;n de cuatro dominios de la inmunoglobulina-como, D1 a D4. Los dominios D1, D2 y D4 contienen un enlace disulfuro. Aqu&iacute; mostramos que el disulfuro de D2 es redox activos. El estado redox de los tioles (disulfuro versus ciclarla) parec&iacute;a ser regulada por tiorredoxina, que es secretada por las c&eacute;lulas T CD4. Cierre el CD4 y la tiorredoxina activa-sitio tioles en el estado reducido con una entrada bloqueada arsenical trivalente hidrof&iacute;lico del VIH-1 en c&eacute;lulas susceptibles. Estos resultados indican que los cambios redox en D2 de CD4 son importantes para la entrada del VIH-1 y representan una nueva Diana de los inhibidores de la entrada del VIH-1.

Intercambio de disulfuro en el dominio 2 de CD4 es necesaria para la entrada del VIH-1.

&#x5728; CD4 &#x7684;&#x4E8C;&#x786B;&#x952E;&#x4EA4;&#x6362;&#x3002;

Disulfide exchange in CD4.

&Eacute;change disulfure CD4.

Disulfidaustausch in CD4.

Scambio disolfuro in CD4.

CD4 &#x306E;&#x30B8;&#x30B9;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C9;&#x4EA4;&#x63DB;&#x3002;

CD4 &#xC774;&#xD669;&#xD654; &#xAD50;&#xB958;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Intercambio de disulfuro en CD4.

&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x5728;&#x80DE;&#x5185;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x6885;&#x4E01;&#x8FBE;&#x6BD4;&#x5728;&#x674E;&#x65AF;&#x7279;&#x83CC;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x65E9;&#x671F;&#x8868;&#x8FBE;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x5171;&#x8F6D;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x72AC;&#x80BE;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE; F-&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x8FC5;&#x901F;&#x7EC4;&#x88C5; (&#x5927;&#x7EA6; 25 s) &#x548C;&#x53CD;&#x6C47;&#x7F16; &#xFF08;&#x5927;&#x7EA6; 30 s) &#x5468;&#x56F4;&#x7EC6;&#x83CC;&#x3001; &#x4E00;&#x79CD;&#x73B0;&#x8C61;&#x6211;&#x4EEC;&#x79F0;&#x4E4B;&#x4E3A;&#x95EA;&#x70C1;&#x3002;&#x65E0;&#x6CD5;&#x6267;&#x884C;&#x57FA;&#x4E8E;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x52A8;&#x529B;&#x6216;&#x65E0;&#x6CD5;&#x9003;&#x8131; phagosome L.&#x674E;&#x65AF;&#x7279;&#x83CC;&#x83CC;&#x682A;&#x662F;&#x80FD;&#x591F;&#x95EA;&#x70C1;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x5927;&#x4F1A;&#x53D1;&#x751F; phagosome &#x819C;&#x4E0A;&#x3002;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7EC4;&#x88C5;&#x548C;&#x62C6;&#x5378;&#x7684;&#x5468;&#x671F;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5BF9;&#x540C;&#x4E00; phagosome &#x91CD;&#x590D;&#x53D1;&#x751F;&#x3002;&#x95F4;&#x63A5;&#x514D;&#x75AB;&#x8367;&#x5149;&#x663E;&#x793A;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x7EC6;&#x83CC;&#x5F20;&#x77F3;&#x95EA;&#x70C1;&#x53D1;&#x751F;&#x65F6;&#xFF0C;&#x6697;&#x793A;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x95EA;&#x70C1;&#x5E76;&#x4E0D;&#x4EE3;&#x8868;&#x541E;&#x566C;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x5927;&#x80A0;&#x57C3;&#x5E0C;&#x6C0F;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x8868;&#x8FBE;&#x628A;&#x63E1;&#xFF0C;&#x5047;&#x7ED3;&#x6838;&#x83CC;&#x8036;&#x5C14;&#x68EE;&#x6C0F;&#x83CC;&#xFF0C;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5165;&#x4FB5;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x57FA;&#x56E0;&#x4EA7;&#x54C1;&#x4E5F;&#x5F15;&#x8D77;&#x95EA;&#x70C1;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6D82;&#x4EE5; E-&#x9499;&#x7C98;&#x86CB;&#x767D;&#x6216;&#x8F6C;&#x94C1;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x805A;&#x82EF;&#x4E59;&#x70EF;&#x73E0;&#x4E5F;&#x5F15;&#x8D77;&#x95EA;&#x70C1;&#x540E;&#x5185;&#x90E8;&#x5316;&#x3002;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E;&#x95EA;&#x70C1;&#x4E0B;&#x6E38;&#x53D1;&#x751F;&#x7684;&#x51E0;&#x79CD;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x8FDB;&#x5165;&#x673A;&#x5236;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x5185;&#x5728;&#x5316;&#x7684;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5927;&#x578B;&#x5BF9;&#x8C61;&#x7684;&#x4E00;&#x822C;&#x540E;&#x679C;&#x3002;

&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE; phagosomes &#x7684;&#x5FEB;&#x901F;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7EC4;&#x88C5;&#x548C;&#x62C6;&#x5378;&#x7684;&#x5468;&#x671F;&#x53CD;&#x590D;&#x51FA;&#x73B0;&#x3002;

We have found that early in infection of the intracellular pathogen Listeria monocytogenes in Madin-Darby canine kidney epithelial cells expressing actin conjugated to green fluorescent protein, F-actin rapidly assembles (approximately 25 s) and disassembles (approximately 30 s) around the bacteria, a phenomenon we call flashing. L. monocytogenes strains unable to perform actin-based motility or unable to escape the phagosome were capable of flashing, suggesting that the actin assembly occurs on the phagosome membrane. Cycles of actin assembly and disassembly could occur repeatedly on the same phagosome. Indirect immunofluorescence showed that most bacteria were fully internalized when flashing occurred, suggesting that actin flashing does not represent phagocytosis. Escherichia coli expressing invA, a gene product from Yersinia pseudotuberculosis that mediates cellular invasion, also induced flashing. Furthermore, polystyrene beads coated with E-cadherin or transferrin also induced flashing after internalization. This suggests that flashing occurs downstream of several distinct molecular entry mechanisms and may be a general consequence of internalization of large objects by epithelial cells.

Repeated cycles of rapid actin assembly and disassembly on epithelial cell phagosomes.

Nous avons constat&eacute; qu&#39;au d&eacute;but de l&#39;infection de l&#39;agent pathog&egrave;ne intracellulaire Listeria monocytogenes dans Madin-Darby les cellules &eacute;pith&eacute;liales de rein canin exprimer l&#39;actine, conjugu&eacute; &agrave; la prot&eacute;ine fluorescente verte, F-actine rapidement assemble (environ 25 s) ainsi que l&#39;ensemble (environ 30 s) autour de la bact&eacute;rie, un ph&eacute;nom&egrave;ne nous appelons clignotant. Les souches de L. monocytogenes incapables d&#39;ex&eacute;cuter la motilit&eacute; ax&eacute;e sur l&#39;actine ou incapables de s&#39;&eacute;chapper du phagosome &eacute;taient capables de clignoter, ce qui sugg&egrave;re que l&#39;assemblage de l&#39;actine se produit sur la membrane du phagosome. Cycles d&#39;assemblage de l&#39;actine et d&eacute;montage vous risquez &agrave; plusieurs reprises sur le m&ecirc;me phagosome. L&#39;immunofluorescence indirecte a montr&eacute; que la plupart des bact&eacute;ries ont &eacute;t&eacute; pleinement int&eacute;gr&eacute;s lorsque clignotant s&#39;est produite, sugg&eacute;rant que clignoter actine ne repr&eacute;sente pas la phagocytose. Escherichia coli exprimant invA, produit d&#39;un g&egrave;ne de Yersinia pseudotuberculosis qui m&eacute;die invasion cellulaire, induit aussi clignoter. De plus, les billes de polystyr&egrave;ne recouverts de E-cadh&eacute;rine ou transferrine induit &eacute;galement clignoter apr&egrave;s internalisation. Ceci sugg&egrave;re que le clignotant se produit en aval de plusieurs m&eacute;canismes d&#39;entr&eacute;e mol&eacute;culaire distincte et peut &ecirc;tre une cons&eacute;quence g&eacute;n&eacute;rale d&#39;internalisation des objets volumineux par les cellules &eacute;pith&eacute;liales.

Cycles r&eacute;p&eacute;t&eacute;s d&#39;actine rapide montage et d&eacute;montage sur phagosomes des cellules &eacute;pith&eacute;liales.

Wiederholte Zyklen von Aktin schnelle Montage und Demontage an Epithelzellen Phagosomen.

Abbiamo trovato che all&#39;inizio della infezione del patogeno intracellulare Listeria monocytogenes in Madin-Darby cellule epiteliali del rene canino che esprimono actina coniugato alla proteina fluorescente verde, F-actina rapidamente Assembla (circa 25 s) e disassemblaggio (circa 30 s) intorno i batteri, un fenomeno che chiamiamo lampeggiante. Ceppi di L. monocytogenes Impossibile eseguire la motilit&agrave; actina-based o incapaci di sfuggire il Fagosoma erano in grado di lampeggiare, suggerendo che l&#39;assemblaggio dell&#39;actina avviene sulla membrana del Fagosoma. Cicli di actina montaggio e smontaggio potrebbero verificarsi ripetutamente il Fagosoma stesso. L&#39;immunofluorescenza indiretta ha mostrato che la maggior parte dei batteri sono stati completamente interiorizzati quando lampeggiante si &egrave; verificato, suggerendo che lampeggiante actina non rappresentano la fagocitosi. Escherichia coli che esprimono invA, un prodotto del gene da pseudotuberculosis Yersinia che media invasione cellulare, indotto anche lampeggiante. Inoltre, perle di polistirolo rivestiti con E-caderina o Transferrina indussero anche lampeggiante dopo interiorizzazione. Questo suggerisce che il lampeggiante si verifica a valle di diversi meccanismi di voce distinta molecolare e pu&ograve; essere una conseguenza generale di interiorizzazione di oggetti di grandi dimensioni da cellule epiteliali.

Cicli ripetuti di actina rapido montaggio e smontaggio su phagosomes delle cellule epiteliali.

&#x30DE;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;-&#x30C0;&#x30FC;&#x30D3;&#x30FC;&#x3067;&#x30EA;&#x30B9;&#x30C6;&#x30EA;&#x30A2;&#x83CC;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x306E;&#x611F;&#x67D3;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x306B;&#x7DD1;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306B;&#x5171;&#x5F79;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x767A;&#x73FE;&#x72AC;&#x814E;&#x81D3;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE; F-&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x6025;&#x901F;&#x306B;&#x7D44;&#x307F;&#x7ACB;&#x3066;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x305F; &#xFF08;&#x7D04; 25 s) &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x9006;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EB; (&#x7D04; 30 s&#xFF09; &#x6211;&#x3005; &#x70B9;&#x6EC5;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x73FE;&#x8C61;&#x306E;&#x5468;&#x308A;&#x306E;&#x7D30;&#x83CC;&#x3092;&#x547C;&#x3073;&#x51FA;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;L. &#x30EA;&#x30B9;&#x30C6;&#x30EA;&#x30A2;&#x83CC;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x3092;&#x5B9F;&#x884C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30D5;&#x30A1;&#x30B4;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x30A8;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30D7;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3; &#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA; &#x30D5;&#x30A1;&#x30B4;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x819C;&#x306B;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x70B9;&#x6EC5;&#x306E;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x7D44;&#x7ACB;&#x3068;&#x5206;&#x89E3;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x3067;&#x540C;&#x3058;&#x30D5;&#x30A1;&#x30B4;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x7E70;&#x308A;&#x8FD4;&#x3057;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9593;&#x63A5;&#x86CD;&#x5149;&#x6297;&#x4F53;&#x6CD5;&#x306F;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x70B9;&#x6EC5;&#x8CAA;&#x98DF;&#x80FD;&#x3092;&#x8868;&#x3055;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x70B9;&#x6EC5;&#x304C;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x3001;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306E;&#x7D30;&#x83CC;&#x304C;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x5185;&#x5728;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;InvA &#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7523;&#x7269;&#x7D30;&#x80DE;&#x6D78;&#x6F64;&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x4EEE;&#x6027;&#x304B;&#x3089;&#x307E;&#x305F;&#x70B9;&#x6EC5;&#x306B;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;E-&#x30AB;&#x30C9;&#x30D8;&#x30EA;&#x30F3;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B9;&#x30C1;&#x30EC;&#x30F3; &#x30D3;&#x30FC;&#x30BA;&#x3082;&#x5185;&#x9762;&#x5316;&#x5F8C;&#x306B;&#x70B9;&#x6EC5;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x70B9;&#x6EC5;&#x4E0B;&#x6D41;&#x306B;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA; &#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306E;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306E;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B8; &#x30AA;&#x30D6;&#x30B8;&#x30A7;&#x30AF;&#x30C8;&#x306E;&#x5185;&#x90E8;&#x5316;&#x306E;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x7D50;&#x679C;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3002;

&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE; phagosome &#x306E;&#x7E70;&#x308A;&#x8FD4;&#x3057;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x306E;&#x8FC5;&#x901F;&#x306A;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x3068;&#x9006;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x3002;

&#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; Madin-&#xB2E4; &#xBE44;&#xC5D0;&#xC11C; Listeria monocytogenes &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4;&#xC758; &#xAC10;&#xC5FC; &#xCD08;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC1A1;&#xACF3; &#xB2C8; &#xC2E0;&#xC7A5; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xB179;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xD65C;&#xC6A9; &#xB9D0;&#xB77C; F &#xB9D0;&#xB77C; &#xBE60;&#xB974;&#xAC8C; &#xC870;&#xB9BD; &#xBC1C;&#xACAC; (&#xC57D; 25 s) &#xBC0F; &#xB514;&#xC2A4;&#xC5B4;&#xC148;&#xBE14; (&#xC57D; 30 s) &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;, &#xC8FC;&#xC704;&#xB294; &#xD604;&#xC0C1;&#xC774; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC804;&#xD654; &#xAE5C;&#xBC15;&#xC774;. L. monocytogenes &#xAE34;&#xC7A5; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; &#xB9D0;&#xB77C; &#xAE30;&#xBC18;&#xC744; &#xC218;&#xD589;&#xD560; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB610;&#xB294; &#xC774;&#xC2A4;&#xCF00;&#xC774;&#xD504;&#xB294; phagosome &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xAE5C;&#xBC15;&#xC784;, &#xC81C;&#xC548; &#xB9D0;&#xB77C; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC; phagosome &#xB9C9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xC774; &#xAC00;&#xB2A5; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB9D0;&#xB77C; &#xC870;&#xB9BD;&#xACFC; &#xD574;&#xCCB4;&#xC758; &#xC8FC;&#xAE30;&#xB294; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; phagosome&#xC5D0; &#xBC18;&#xBCF5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAC04;&#xC811; &#xBA74;&#xC5ED; &#xD615;&#xAD11; &#xAC80;&#xC0AC;&#xB294; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544; &#xD588;&#xB2E4;&#xC5D0; &#xB9D0;&#xB77C; &#xC810;&#xBA78; &#xC2DD; &#xADE0; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294; &#xC81C;&#xC548; &#xAE5C;&#xBC15;&#xC784; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD588;&#xC744; &#xB54C; &#xB0B4; &#xBA74; &#xC644;&#xBCBD; &#xD558; &#xAC8C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0; invA &#xD45C;&#xD604;, &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xCE68;&#xB7B5;&#xC744; &#xC911;&#xC7AC; &#xD558;&#xB294; &#xD398;&#xC2A4;&#xD2B8; pseudotuberculosis&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC81C;&#xD488; &#xB610;&#xD55C; &#xC810;&#xBA78; &#xC720;&#xB3C4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC804;&#xC790; cadherin &#xB610;&#xB294; transferrin &#xCF54;&#xD305; &#xB41C; &#xD3F4;&#xB9AC;&#xC2A4; &#xD2F0; &#xB80C; &#xAD6C;&#xC2AC; &#xB610;&#xD55C; &#xAD6D;&#xC81C;&#xD654; &#xD6C4; &#xAE5C;&#xBC15;&#xC774; &#xC720;&#xB3C4;. &#xC774;&#xAC83; &#xAE5C;&#xBC15;&#xC774; &#xD558;&#xB958; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xC740; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC00;&#xC9C0; &#xBD84;&#xC790; &#xD56D;&#xBAA9; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC758; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD070; &#xAC1C;&#xCCB4;&#xC758; &#xAD6D;&#xC81C;&#xD654;&#xC758; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xACB0;&#xACFC; &#xC788;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; phagosomes&#xC5D0; &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xAC8C; &#xB9D0;&#xB77C; &#xC870;&#xB9BD;&#xACFC; &#xD574;&#xCCB4;&#xC758; &#xBC18;&#xBCF5;&#xB41C; &#xC8FC;&#xAE30;.

Hemos encontrado que a principios de la infecci&oacute;n del pat&oacute;geno intracelular Listeria monocytogenes en Madin-Darby c&eacute;lulas epiteliales del ri&ntilde;&oacute;n canino expresando actina conjugada con la prote&iacute;na verde fluorescente, F-actina r&aacute;pidamente monta (aproximadamente 25 s) y desmonta (aproximadamente 30 s) alrededor de las bacterias, un fen&oacute;meno que llamamos intermitente. L. monocytogenes cepas incapaces de realizar movilidad basadas en actina o incapaces de escapar el fagosoma fueron capaces de parpadear, lo que sugiere que la Asamblea de actina se produce en la membrana del fagosoma. Ciclos de desmontaje y montaje de actina podr&iacute;an ocurrir repetidamente en el mismo fagosoma. Inmunofluorescencia indirecta demostr&oacute; que la mayor&iacute;a de las bacterias fueron totalmente asimiladas cuando ocurri&oacute; el intermitente, sugiriendo que destella de actina no representar la fagocitosis. Escherichia coli expresando invA, un producto del gen de la Yersinia pseudotuberculosis que media la invasi&oacute;n celular, tambi&eacute;n indujo intermitente. Adem&aacute;s, bolas de poliestireno recubiertas con E-cadherin o transferrina tambi&eacute;n indujeron intermitente despu&eacute;s de internalizaci&oacute;n. Esto sugiere que la intermitente ocurre aguas abajo de varios mecanismos de entrada molecular distinto y puede ser una consecuencia general de internalizaci&oacute;n de objetos grandes por las c&eacute;lulas epiteliales.

Ciclos repetidos de actina r&aacute;pido montaje y desmontaje en fagosomas c&eacute;lula epitelial.

&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x5206;&#x6790;&#x4E86;&#x5BF9;&#x79F0;&#x6027;&#x81EA;&#x53D1;&#x7834;&#x7F3A;&#x548C;&#x542F;&#x52A8;&#x57FA;&#x4E8E;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x52A8;&#x529B;&#x7684;&#x89D2;&#x819C;&#x57FA;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE; (&#x9C7C;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;)&#x3002;&#x5728;&#x56FA;&#x5B9A;&#x7684;&#x89D2;&#x819C;&#x57FA;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3001; &#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7F51;&#x7EDC;&#x6D41;&#x91CF;&#x662F;&#x5411;&#x5185;&#x548C;&#x5F84;&#x5411;&#x5BF9;&#x79F0;&#x3002;&#x7ACB;&#x5373;&#x4E4B;&#x524D;&#x52A8;&#x529B;&#x542F;&#x52A8;&#x3001; &#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7F51;&#x7EDC;&#x6D41;&#x91CF;&#x51C6;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x540E;&#x9762;&#x589E;&#x52A0;&#x548C;&#x8C03;&#x6574;&#x7684;&#x65B9;&#x5411;&#xFF0C;&#x5728;&#x6838;&#x5468;&#x533A;&#x57DF;&#xFF0C;&#x5177;&#x6709;&#x524D;&#x77BB;&#x6027;&#x7684;&#x8FD0;&#x52A8;&#x8F74;&#x5BF9;&#x9F50;&#x3002;&#x5728;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x524D;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7F51;&#x7EDC;&#x6D41;&#x91CF;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6781;&#x5316;&#x540E;&#x624D;&#x88AB;&#x63A2;&#x6D4B;&#x3002;&#x6291;&#x5236;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x4E8C;&#x6216; Rho &#x6FC0;&#x9176;&#x6253;&#x4E71;&#x4E86;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7F51;&#x7EDC;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x548C;&#x6838;&#x5468;&#x5730;&#x533A;&#x6D41;&#x548C;&#x51CF;&#x5C11;&#x52A8;&#x529B;&#x7684;&#x8D77;&#x59CB;&#x9891;&#x7387;&#xFF0C;&#x800C;&#x589E;&#x52A0;&#x4E0E;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x4E8C;&#x6D3B;&#x52A8;&#x589E;&#x52A0;&#x52A8;&#x529B;&#x542F;&#x52A8;&#x9891;&#x7387;&#x3002;&#x672C;&#x5730;&#x56FA;&#x5B9A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x672C;&#x5730;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x7531;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x523A;&#x6FC0;&#x9488;&#x5BF9;&#x52A8;&#x529B;&#x542F;&#x52A8;&#x523A;&#x6FC0;&#x7684;&#x662F;&#x5E9F;&#x589F;&#x3002;&#x5728;&#x4E00;&#x8D77;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x5927;&#x578B;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;-&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x7F51;&#x7EDC;&#x91CD;&#x7EC4;&#x53CA;&#x6536;&#x7F29;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x540E;&#x4E0A;&#x4E3B;&#x52A8;&#x81EA;&#x53D1;&#x5BF9;&#x79F0;&#x7834;&#x7F3A;&#x548C;&#x6781;&#x5316;&#x7684;&#x52A8;&#x529B;&#x7684;&#x89D2;&#x819C;&#x57FA;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;

&#x5728;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x540E;&#x9762;&#x81EA;&#x53D1;&#x53D1;&#x8D77;&#x7684;&#x5BF9;&#x79F0;&#x6027;&#x6781;&#x5316;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;-&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x7F51;&#x7EDC;&#x91CD;&#x7EC4;&#x7B26;&#x7EC6;&#x80DE;&#x52A8;&#x529B;&#x3002;

We have analyzed the spontaneous symmetry breaking and initiation of actin-based motility in keratocytes (fish epithelial cells). In stationary keratocytes, the actin network flow was inwards and radially symmetric. Immediately before motility initiation, the actin network flow increased at the prospective cell rear and reoriented in the perinuclear region, aligning with the prospective axis of movement. Changes in actin network flow at the cell front were detectable only after cell polarization. Inhibition of myosin II or Rho kinase disrupted actin network organization and flow in the perinuclear region and decreased the motility initiation frequency, whereas increasing myosin II activity with calyculin A increased the motility initiation frequency. Local stimulation of myosin activity in stationary cells by the local application of calyculin A induced directed motility initiation away from the site of stimulation. Together, these results indicate that large-scale actin-myosin network reorganization and contractility at the cell rear initiate spontaneous symmetry breaking and polarized motility of keratocytes.

Actin-myosin network reorganization breaks symmetry at the cell rear to spontaneously initiate polarized cell motility.

Nous avons analys&#xE9; la brisure spontan&#xE9;e de sym&#xE9;trie et de l&#x26;#39;initiation de l&#x26;#39;actine bas&#xE9;e sur la motilit&#xE9; dans k&#xE9;ratocytes (cellules &#xE9;pith&#xE9;liales de poissons). En k&#xE9;ratocytes fixes, le d&#xE9;bit r&#xE9;seau d&#x26;#39;actine est vers l&#x26;#39;int&#xE9;rieur et radialement sym&#xE9;trique. Imm&#xE9;diatement avant le d&#xE9;but motilit&#xE9;, le d&#xE9;bit r&#xE9;seau d&#x26;#39;actine a augment&#xE9; &#xE0; l&#x26;#39;arri&#xE8;re de cellule prospective et r&#xE9;orient&#xE9; dans la r&#xE9;gion p&#xE9;rinucl&#xE9;aire, l&#x26;#39;alignement sur l&#x26;#39;axe prospectif de mouvement. Les changements dans le d&#xE9;bit du r&#xE9;seau d&#x26;#39;actine &#xE0; l&#x26;#39;avant des cellules ont &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;tectables qu&#x26;#39;apr&#xE8;s polarisation de la cellule. L&#x26;#39;inhibition de la myosine II ou Rho kinase perturb&#xE9; actine r&#xE9;seau de l&#x26;#39;organisation et le d&#xE9;bit dans la r&#xE9;gion p&#xE9;rinucl&#xE9;aire et une diminution de la fr&#xE9;quence d&#x26;#39;initiation motilit&#xE9;, tandis que l&#x26;#39;augmentation de myosine II avec l&#x26;#39;activit&#xE9; calyculine Une augmentation de la fr&#xE9;quence d&#x26;#39;initiation motilit&#xE9;. La stimulation de l&#x26;#39;activit&#xE9; locale dans les cellules fixes myosine par l&#x26;#39;application locale d&#x26;#39;une ouverture calyculine motilit&#xE9; induite dirig&#xE9;e &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;cart du site de stimulation. Ensemble, ces r&#xE9;sultats indiquent que la grande r&#xE9;organisation du r&#xE9;seau d&#x26;#39;actine-myosine et de la contractilit&#xE9; des cellules &#xE0; l&#x26;#39;arri&#xE8;re initier brisure spontan&#xE9;e de sym&#xE9;trie et de la motilit&#xE9; des k&#xE9;ratocytes polaris&#xE9;e.

R&#xE9;organisation du r&#xE9;seau d&#x26;#39;actine-myosine Breaks sym&#xE9;trie &#xE0; l&#x26;#39;arri&#xE8;re de cellules &#xE0; Spontan&#xE9;ment Initier la motilit&#xE9; cellulaire polaris&#xE9;

Wir haben die spontane Symmetrie zu brechen und Einleitung des Aktin-basierte Motilit&auml;t in Keratocytes (Fisch-Epithelzellen) analysiert. Station&auml;re Keratocytes war die Aktin-Netzwerk-Str&ouml;mung nach innen und radial symmetrische. Unmittelbar vor Motilit&auml;t Einleitung der Datenfluss im Netzwerk Aktin prospektive Zelle hinten erh&ouml;ht und der Region perinukle&auml;re Angleichung an die potenziellen Achse Bewegung umorientiert. Aktin Datenfluss im Netzwerk Zelle vorne ver&auml;nderten sich nachweisbar erst nach Zelle Polarisation. Hemmung der Myosin II oder Rho-Kinase Aktin Netzwerkorganisation und Fluss in der Region perinukle&auml;re gest&ouml;rt und verringert die Motilit&auml;t-Einleitung-Frequenz, w&auml;hrend gesteigerte Myosin-II-Aktivit&auml;t mit Calyculin A die Motilit&auml;t-Einleitung-Frequenz erh&ouml;ht. Lokale Stimulation des Myosin-Aktivit&auml;t in den station&auml;ren Zellen durch die lokale Anwendung des Calyculin eine induzierte gerichtet Motilit&auml;t Einleitung von den St&auml;tten der Stimulation. Zusammen, zeigen diese Ergebnisse, dass gro&szlig; angelegte Aktin-Myosin-Netzwerk-Reorganisation und Kontraktilit&auml;t Zelle hinten spontane Symmetriebrechung und polarisierten Motilit&auml;t des Keratocytes initiieren.

Aktin-Myosin Netzwerk Reorganisation Pausen, die Symmetrie auf der R&uuml;ckseite der Zelle spontan initiieren polarisiert Zelle Motilit&auml;t.

Abbiamo analizzato la rottura spontanea di simmetria e l&#39;iniziazione della motilit&agrave; actina-based in cheratinociti (cellule epiteliali di pesce). In cheratociti stazionario, il flusso di rete actina era verso l&#39;interno e radialmente simmetrico. Immediatamente prima dell&#39;iniziazione di motilit&agrave;, il flusso di rete actina aumentato nella parte posteriore della cella prospettico e riorientato nella regione perinucleare, allineamento con l&#39;asse prospettico del movimento. Cambiamenti nel flusso di rete dell&#39;actina nella parte anteriore della cella erano rilevabili solo dopo la polarizzazione delle cellule. Inibizione di miosina II o chinasi Rho perturbato organizzazione rete actina e flusso nella regione perinucleare e diminuito la frequenza di iniziazione di motilit&agrave;, mentre aumentando l&#39;attivit&agrave; di miosina II con calyculin A aumentato la frequenza di iniziazione di motilit&agrave;. La stimolazione locale dell&#39;attivit&agrave; di miosina nelle cellule fisse con l&#39;applicazione locale di calyculin un indotto diretto iniziazione motilit&agrave; lontano dal sito di stimolazione. Insieme, questi risultati indicano che la riorganizzazione rete su larga scala dell&#39;actina-miosina e contrattilit&agrave; nella parte posteriore della cella avvii rottura spontanea di simmetria e polarizzata motilit&agrave; dei cheratociti.

Interruzioni di riorganizzazione rete actina-miosina simmetria nella parte posteriore della cella di avviare spontaneamente polarizzato cellule motilit&agrave;.

&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x81EA;&#x767A;&#x7684;&#x5BFE;&#x79F0;&#x6027;&#x306E;&#x7834;&#x308C;&#x3068;keratocytes&#xFF08;&#x9B5A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF09;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x904B;&#x52D5;&#x306E;&#x958B;&#x59CB;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x9759;&#x6B62;keratocytes&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x306E;&#x6D41;&#x308C;&#x304C;&#x5185;&#x5074;&#x3068;&#x534A;&#x5F84;&#x65B9;&#x5411;&#x306B;&#x5BFE;&#x79F0;&#x7684;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3059;&#x3050;&#x306B;&#x904B;&#x52D5;&#x958B;&#x59CB;&#x524D;&#x306B;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x306E;&#x6D41;&#x308C;&#x306F;&#x904B;&#x52D5;&#x306E;&#x5C06;&#x6765;&#x306E;&#x8EF8;&#x306B;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3066;&#x3001;&#x5C06;&#x6765;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x80CC;&#x9762;&#x3068;&#x6838;&#x5468;&#x8FBA;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x65B9;&#x5411;&#x3067;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x524D;&#x9762;&#x306B;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x306E;&#x6D41;&#x308C;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x304C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6975;&#x6027;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x5F8C;&#x306B;&#x306E;&#x307F;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;II&#x307E;&#x305F;&#x306F;Rho&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x306F;&#x6838;&#x5468;&#x8FBA;&#x9818;&#x57DF;&#x3067;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x7D44;&#x7E54;&#x3068;&#x306E;&#x6D41;&#x308C;&#x3092;&#x7834;&#x58CA;&#x3057;&#x3001;&#x904B;&#x52D5;&#x958B;&#x59CB;&#x306E;&#x983B;&#x5EA6;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x305B;&#x3001;calyculin&#x3068;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;II&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x4E00;&#x65B9;&#x3001;&#x904B;&#x52D5;&#x958B;&#x59CB;&#x306E;&#x983B;&#x5EA6;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3002; calyculin&#x96E2;&#x308C;&#x3066;&#x523A;&#x6FC0;&#x90E8;&#x4F4D;&#x304B;&#x3089;&#x8A98;&#x5C0E;&#x6307;&#x793A;&#x904B;&#x52D5;&#x958B;&#x59CB;&#x306E;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EB;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x9759;&#x6B62;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x5C40;&#x6240;&#x523A;&#x6FC0;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x80CC;&#x9762;&#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3; - &#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x306E;&#x518D;&#x7DE8;&#x3068;&#x53CE;&#x7E2E;&#x304C;keratocytes&#x306E;&#x81EA;&#x767A;&#x7684;&#x5BFE;&#x79F0;&#x6027;&#x306E;&#x7834;&#x308C;&#x3068;&#x504F;&#x6975;&#x904B;&#x52D5;&#x3092;&#x958B;&#x59CB;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3; - &#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x306E;&#x518D;&#x7DE8;&#x6210;&#x306F;&#x3001;&#x81EA;&#x767A;&#x7684;&#x306B;&#x5206;&#x6975;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x904B;&#x52D5;&#x3092;&#x958B;&#x59CB;&#x3059;&#x308B;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x80CC;&#x9762;&#x306B;&#x5BFE;&#x79F0;&#x6027;&#x3092;&#x7834;&#x308B;

&#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC790;&#xBC1C;&#xC801; &#xB300;&#xCE6D; &#xD30C;&#xAD34; &#xBC0F; &#xAC1C;&#xC2DC; keratocytes (&#xBB3C;&#xACE0;&#xAE30; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;)&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; &#xB9D0;&#xB77C; &#xAE30;&#xBC18; &#xBD84;&#xC11D;. &#xACE0;&#xC815; keratocytes&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9D0;&#xB77C; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C; &#xD750;&#xB984; &#xB3CC;&#xC774;&#xCF1C; &#xACE0; &#xBC29;&#xC0AC;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xB300;&#xCE6D; &#xC774;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; &#xAC1C;&#xC2DC; &#xC9C1;&#xC804; &#xB9D0;&#xB77C; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C; &#xD750;&#xB984; &#xC608;&#xBE44; &#xC140; &#xD6C4;&#xBC29;&#xC5D0; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558; &#xACE0; &#xC6B4;&#xB3D9;&#xC758; &#xBBF8;&#xB798;&#xC758; &#xCD95; &#xC815;&#xB82C; perinuclear &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xB530;&#xB974;&#xC9C0;. &#xC140; &#xC55E;&#xC5D0; &#xB9D0;&#xB77C; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C; &#xD750;&#xB984;&#xC758; &#xBCC0;&#xD654;&#xB9CC; &#xC140; &#xC591;&#xADF9; &#xD654; &#xD6C4; &#xAC10;&#xC9C0; &#xD588;&#xB2E4;. Myosin II&#xC758; &#xC800;&#xD574; &#xB610;&#xB294; &#xB178; &#xB2C8; &#xB9D0;&#xB77C; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C; &#xC870;&#xC9C1;&#xACFC; perinuclear &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xD750;&#xB984;&#xC744; &#xBC29;&#xD574; &#xD558; &#xACE0; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131;&#xC744; &#xAC1C;&#xC2DC; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218; &#xC99D;&#xAC00; calyculin A&#xC640; myosin II &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558;&#xB294; &#xBC18;&#xBA74; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; &#xC2DC;&#xC791; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218;&#xB97C; &#xAC10;&#xC18C;. Calyculin&#xB294; &#xC720;&#xB3C4;&#xC758; &#xB85C;&#xCEEC; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACE0;&#xC815; &#xB41C; &#xC140;&#xC758; myosin &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xB85C;&#xCEEC; &#xC790;&#xADF9; &#xC790;&#xADF9;&#xC758; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; &#xAC1C;&#xC2DC;&#xB97C; &#xAC10;&#xB3C5;. &#xD568;&#xAED8;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xB300;&#xADDC;&#xBAA8; &#xB9D0;&#xB77C; myosin &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C; &#xAC1C;&#xD3B8; &#xBC0F; &#xC140; &#xB4A4;&#xC5D0; &#xC218;&#xCD95; &#xC2DC;&#xC791; &#xC790;&#xBC1C;&#xC801; &#xB300;&#xCE6D; &#xD30C;&#xAD34;&#xC640; keratocytes&#xC758; &#xD3B8;&#xAD11;&#xB41C; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC790;&#xBC1C;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC2DC;&#xC791; &#xC140; &#xB4A4;&#xCABD;&#xC5D0; &#xB300;&#xCE6D; &#xD3B8;&#xAD11; &#xB9D0;&#xB77C; myosin &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C; &#xAC1C;&#xD3B8; &#xB098;&#xB204;&#xAE30; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; &#xC138;&#xD3EC;.

Hemos analizado la ruptura espont&#xE1;nea de la simetr&#xED;a y el inicio de la actina basada en la motilidad de los queratocitos (c&#xE9;lulas epiteliales de peces). En queratocitos estacionarias, el flujo de la red de actina fue hacia el interior y radialmente sim&#xE9;trico. Inmediatamente antes de iniciar la motilidad, el flujo de la red de actina aument&#xF3; en la parte posterior de c&#xE9;lulas prospectivo y reorientado en la regi&#xF3;n perinuclear, la alineaci&#xF3;n con el eje potencial de movimiento. Los cambios en el flujo de la red de actina en la parte delantera de c&#xE9;lulas se detectan &#xFA;nicamente despu&#xE9;s de la polarizaci&#xF3;n celular. La inhibici&#xF3;n de la miosina II o quinasa Rho interrumpido actina organizaci&#xF3;n de la red y el flujo en la regi&#xF3;n perinuclear y la disminuci&#xF3;n de la frecuencia de iniciaci&#xF3;n motilidad, mientras que el aumento de actividad miosina II con caliculina Un aumento de la frecuencia de iniciaci&#xF3;n motilidad. Estimulaci&#xF3;n de la actividad local miosina en c&#xE9;lulas estacionarias por la aplicaci&#xF3;n local de caliculina Un inducida iniciaci&#xF3;n dirigida motilidad lejos del sitio de estimulaci&#xF3;n. En conjunto, estos resultados indican que la gran escala de actina-miosina de reorganizaci&#xF3;n de la red y de la contractilidad en la parte posterior de c&#xE9;lulas iniciar la ruptura espont&#xE1;nea de la simetr&#xED;a y la motilidad de los queratocitos polarizado.

Actina-miosina Reorganizaci&#xF3;n Red rompe la simetr&#xED;a en la parte trasera de la c&#xE9;lula para iniciar espont&#xE1;neamente la motilidad de la c&#xE9;lula polarizada

&#x97F3;&#x901F;&#x523A;&#x732C; (Shh) &#x4E2D;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x4E8B;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x5982;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x547D;&#x8FD0;&#x89C4;&#x683C;&#x548C;&#x8F74;&#x7A81;&#x6307;&#x5BFC;&#x65B9;&#x9762;&#x62C5;&#x5F53;&#x91CD;&#x8981;&#x89D2;&#x8272;&#x3002;Shh &#x8BF1;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x547D;&#x8FD0;&#x89C4;&#x8303;&#x901A;&#x8FC7;&#x89C4;&#x8303; Shh &#x4FE1;&#x53F7;&#x3001; &#x4ECB;&#x5BFC;&#x8F6C;&#x5F55;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D; Shh &#x6307;&#x5BFC;&#x795E;&#x7ECF;&#x8F74;&#x7A81;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x662F;&#x672A;&#x77E5;&#x7684;&#x3002;&#x4E3A;&#x7814;&#x7A76;&#x8FD9;&#x95EE;&#x9898;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F00;&#x53D1;&#x8F74;&#x7A81;&#x7684;&#x6307;&#x5BFC;&#xFF0C;&#x540C;&#x65F6;&#x5E94;&#x5BF9;&#x5316;&#x5B66;&#x63D0;&#x793A;&#x5B9A;&#x4E49;&#x6E10;&#x53D8;&#x9644;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4F53;&#x5916;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x3002;&#x8F74;&#x7A81;&#x7684;&#x6E38;&#x79BB;&#x9AD3;&#x540E;&#x8FDE;&#x5408;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x653E;&#x5728; Shh &#x6E10;&#x53D8;&#x8FC5;&#x901F;&#x8F6C;&#x5411; Shh.&#x7B26;&#x5408;&#x8FD9;&#x4E00;&#x5FEB;&#x901F;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x542B;&#x91CF;&#x4E0D;&#x65AD;&#x589E;&#x591A;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x660E;&#x7531; Shh &#x7684;&#x5438;&#x5F15;&#x529B;&#x5E76;&#x4E0D;&#x8981;&#x6C42;&#x8F6C;&#x5F55;&#x3002;&#x76F8;&#x53CD;&#xFF0C;Shh &#x523A;&#x6FC0; Smoothened &#x4F9D;&#x8D56;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F; Src &#x5BB6;&#x65CF;&#x6FC0;&#x9176; (&#x4E2D;&#x836F;&#x9AD3;&#x590D;&#x5EB7;&#xFF09; &#x6210;&#x5458;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x60C5;&#x51B5;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x9700;&#x8981;&#x4E3A;&#x4ECB;&#x5BFC; Shh &#x6307;&#x5BFC;&#x7684;&#x9AD3;&#x540E;&#x8FDE;&#x5408;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x8F74;&#x7A81;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E0D;&#x662F;&#x8BF1;&#x5BFC; Gli &#x8F6C;&#x5F55;&#x8BB0;&#x8005;&#x6D3B;&#x52A8;&#x4E2D;&#x836F;&#x9AD3;&#x590D;&#x5EB7;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x5728;&#x4E00;&#x8D77;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E; Shh &#x884C;&#x4E3A;&#x901A;&#x8FC7;&#x8FC5;&#x901F;&#x4EE3;&#x7406;&#x3001; &#x975E;&#x89C4;&#x8303;&#x5316;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x901A;&#x8DEF;&#x6765;&#x6307;&#x5BFC;&#x8F74;&#x7A81;&#x3002;

&#x97F3;&#x901F;&#x523A;&#x732C;&#x6307;&#x5BFC;&#x901A;&#x8FC7;&#x975E;&#x89C4;&#x8303;&#x5316;&#x3001; Src &#x5BB6;&#x65CF;&#x6FC0;&#x9176;&#x4F9D;&#x8D56;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x901A;&#x8DEF;&#x7684;&#x8F74;&#x7A81;&#x3002;

Sonic hedgehog (Shh) plays essential roles in developmental events such as cell fate specification and axon guidance. Shh induces cell fate specification through canonical Shh signaling, mediated by transcription. However, the mechanism by which Shh guides axons is unknown. To study this, we developed an in vitro assay for axon guidance, in which neurons can be imaged while responding to a defined gradient of a chemical cue. Axons of dissociated commissural neurons placed in a Shh gradient turned rapidly toward increasing concentrations of Shh. Consistent with this rapid response, we showed that attraction by Shh does not require transcription. Instead, Shh stimulates the activity of Src family kinase (SFK) members in a Smoothened-dependent manner. Moreover, SFK activity is required for Shh-mediated guidance of commissural axons, but not for induction of Gli transcriptional reporter activity. Together, these results indicate that Shh acts via a rapidly acting, noncanonical signaling pathway to guide axons.

Sonic hedgehog guides axons through a noncanonical, Src-family-kinase-dependent signaling pathway.

Sonic hedgehog (Shh) joue un r&ocirc;le essentiel dans des &eacute;v&eacute;nements d&eacute;veloppementaux comme cellule sort specification et axon guidance. SHH induit la sp&eacute;cification sort des cellules par l&#39;interm&eacute;diaire de Shh canonique de signalisation, m&eacute;di&eacute;e par la transcription. Toutefois, le m&eacute;canisme par lequel Shh guides axones est inconnu. Pour ce faire, nous avons d&eacute;velopp&eacute; un test in vitro pour guidage axonal, dans lequel les neurones peuvent &ecirc;tre photographi&eacute;es tout en r&eacute;pondant &agrave; un d&eacute;grad&eacute; d&eacute;fini d&#39;un signal chimique. Axones de dissocie commissurale neurones plac&eacute;s dans un gradient de Shh que se tourna rapidement vers l&#39;augmentation des concentrations de Shh. en accord avec cette r&eacute;ponse rapide, nous avons montr&eacute; que l&#39;attraction par Shh ne n&eacute;cessite pas de transcription. Au lieu de cela, Shh stimule l&#39;activit&eacute; des membres de famille kinase (SFK) Src de mani&egrave;re Smoothened-d&eacute;pendante. En outre, activit&eacute; SFK est requise pour orientation Shh-n&eacute;goci&eacute;e des axones commissures, mais pas pour l&#39;induction de l&#39;activit&eacute; transcriptionnelle de journaliste Gli. Ensemble, ces r&eacute;sultats indiquent que Shh agit via une voie de signalisation rapidement par int&eacute;rim, non canonique pour guider les axones.

Sonic hedgehog guides axones gr&acirc;ce &agrave; une voie de signalisation non canonique, Src-famille-kinase d&eacute;pendante.

Sonic Hedgehog (Shh) spielt wesentliche Rollen in entwicklungspolitischen Veranstaltungen wie Zelle Schicksal Anleitung zur Spezifikation und Axon. SHH induziert Zelle Schicksal Spezifikation durch kanonische Shh Signalisierung, vermittelt durch Transkription. Der Mechanismus, mit dem Shh Axone f&uuml;hrt, ist jedoch unbekannt. Um dies zu untersuchen, haben wir ein in vitro Tests Axon-Anleitungen, in denen Neuronen abgebildet werden k&ouml;nnen, w&auml;hrend die Reaktion auf einen definierten Farbverlauf von einer chemischen Cue entwickelt. Axone der dissoziiert kommissurale Neurons in einem Shh Farbverlauf drehte die rasch zunehmende Konzentrationen von Shh. im Einklang mit dieser Sofortreaktion platziert, wir zeigten, dass die Anziehung von Shh Transkription nicht erforderlich ist. Stattdessen regt Shh die Aktivit&auml;t der Src Familie Kinase (SFK) Mitglieder in gewissem Sinne gegl&auml;ttet-abh&auml;ngigen. Dar&uuml;ber hinaus ist die SFK Aktivit&auml;t erforderlich, f&uuml;r die Ausrichtung der Shh-vermittelte der kommissurale Axone, aber nicht f&uuml;r Induktion Gli Reporter transkriptionelle Aktivit&auml;t. Zusammen, zeigen diese Ergebnisse, dass Shh &uuml;ber eine rasch handeln, Mitgliedattribut Signalweg um Axone leiten fungiert.

Sonic Hedgehog f&uuml;hrt Axone durch eine Mitgliedattribut, Src-Familie-Kinase-abh&auml;ngigen Signalweg.

Sonic hedgehog (Shh) svolge ruoli essenziali dello sviluppo eventi come cella destino specifica e axon guidance. SHH induce specifica di destino delle cellule tramite Shh canonica di segnalazione, mediata dalla trascrizione. Tuttavia, il meccanismo da cui Shh guide assoni &egrave; sconosciuto. Per studiare questo, abbiamo sviluppato un test in vitro per la guida di assone, in cui i neuroni possono essere imaged mentre risponde a un gradiente di una pila chimica definito. Assoni di dissociano commissural neuroni collocati in una sfumatura di Shh trasformata rapidamente verso una maggiore concentrazione di Shh. coerentemente con questa risposta rapida, abbiamo mostrato che attrazione da Shh non richiede la trascrizione. Invece, Shh stimola l&#39;attivit&agrave; dei membri della famiglia chinasi (SFK) Src in modo lisciato-dipendente. Inoltre, SFK attivit&agrave; &egrave; richiesta per l&#39;orientamento di Shh-mediata degli assoni commissural, ma non per l&#39;induzione dell&#39;attivit&agrave; trascrizionale reporter Gli. Insieme, questi risultati indicano che Shh agisce tramite una via di segnalazione rapidamente recitazione, canonica a guida assoni.

Sonic hedgehog guide assoni attraverso una via di segnalazione canonica, Src-famiglia-chinasi-dipendente.

&#x97F3;&#x6CE2; hedgehog (Shh) &#x7D30;&#x80DE;&#x904B;&#x547D;&#x4ED5;&#x69D8;&#x3068;&#x8EF8;&#x7D22;&#x30AC;&#x30A4;&#x30C0;&#x30F3;&#x30B9;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x306E;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3067;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6CE3;&#x304B;&#x306A;&#x3044;&#x3067;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x3001;&#x8EE2;&#x5199;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5A92;&#x4ECB;&#x6B63;&#x898F;&#x6CE3;&#x304B;&#x306A;&#x3044;&#x3067;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x904B;&#x547D;&#x4ED5;&#x69D8;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;Shh &#x304C;&#x8EF8;&#x7D22;&#x3092;&#x30AC;&#x30A4;&#x30C9;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3092;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;in vitro &#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306E;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x624B;&#x304C;&#x304B;&#x308A;&#x306E;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x6E08;&#x307F;&#x306E;&#x30B0;&#x30E9;&#x30C7;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3057;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3; &#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3001;&#x8EF8;&#x7D22;&#x30AC;&#x30A4;&#x30C0;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6CE3;&#x304B;&#x306A;&#x3044;&#x3067;&#x3002; &#x3053;&#x306E;&#x8FC5;&#x901F;&#x306A;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3068;&#x30B3;&#x30F3;&#x30B7;&#x30B9; &#x30C6;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x9AD8;&#x307E;&#x308A;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x6025;&#x901F;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x6CE3;&#x304B;&#x306A;&#x3044;&#x3067;&#x30B0;&#x30E9;&#x30C7;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x914D;&#x7F6E;&#x4EA4;&#x9023;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x8EF8;&#x7D22;&#x3092;&#x89E3;&#x96E2;, &#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x9B45;&#x529B; Shh &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8EE2;&#x5199;&#x4E0D;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4EE3;&#x308F;&#x308A;&#x306B;&#x3001;Shh &#x6ED1;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x4F9D;&#x5B58;&#x7684;&#x3067; Src &#x5BB6;&#x65CF;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; (SFK) &#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;SFK &#x6D3B;&#x6027;&#x306F; Shh &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x6307;&#x5C0E;&#x4EA4;&#x9023;&#x795E;&#x7D4C;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;Gli &#x8EE2;&#x5199;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;Shh &#x8EF8;&#x7D22;&#x3092;&#x5C0E;&#x304F;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x6025;&#x901F;&#x306B;&#x6F14;&#x6280;&#x3001;&#x30AB;&#x30CE;&#x30CB;&#x30AB;&#x30EB; &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30BD;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF; &#x30FB; &#x30D8;&#x30C3;&#x30B8;&#x30DB;&#x30C3;&#x30B0; &#x30AB;&#x30CE;&#x30CB;&#x30AB;&#x30EB;&#x3001;Src &#x5BB6;&#x65CF;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x8EF8;&#x7D22;&#x3092;&#x30AC;&#x30A4;&#x30C9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC18C;&#xB2C9; &#xB354; &#xD5E4;&#xC9C0;&#xD638;&#xADF8; (Shh) &#xC140; &#xC6B4;&#xBA85; &#xC0AC;&#xC591; &#xBC0F; &#xCD95; &#xC0AD; &#xC9C0;&#xCE68; &#xB4F1; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC26C;&#xC774; &#xC787; &#xC815;&#xC2DD; &#xC26C; &#xC2E0;&#xD638;, &#xD544; &#xC0AC; &#xD558; &#xC5EC; &#xC911;&#xC7AC;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC138;&#xD3EC; &#xC6B4;&#xBA85; &#xC0AC;&#xC591;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;,&#xB294; &#xC26C;&#xC774; &#xC787; &#xAC00;&#xC774;&#xB4DC; axons &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC54C; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD654;&#xD559; &#xD050;&#xC758; &#xC815;&#xC758; &#xADF8;&#xB77C;&#xB370;&#xC774;&#xC158;&#xC5D0; &#xC751;&#xB2F5; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xBA87; &#xAD70;&#xB370; &#xC218; &#xCD95; &#xC0AD; &#xC9C0;&#xB3C4; &#xB300; &#xD55C; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xAC1C;&#xBC1C;. &#xCD95; &#xC0AD;&#xC758; &#xD574;&#xB9AC; &#xC26C;.&#xC774; &#xC2E0;&#xC18D;&#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xACFC; &#xC77C;&#xCE58;&#xC758; &#xB18D;&#xB3C4; &#xC99D;&#xAC00; &#xD5A5;&#xD574; &#xBE60;&#xB974;&#xAC8C; &#xC124;&#xC815; &#xB418;&#xC5B4; &#xC26C; &#xADF8;&#xB77C;&#xB370;&#xC774;&#xC158;&#xC5D0; &#xBC30;&#xCE58; commissural &#xB274;&#xB7F0;, &#xC0B4;&#xD3B4;&#xBCF8; &#xB9E4;&#xB825; &#xC26C;&#xC774; &#xC787; &#xD558; &#xC5EC; &#xC804;&#xC0AC;&#xB97C; &#xD544;&#xC694; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB300;&#xC2E0;, &#xC26C; Smoothened &#xC885;&#xC18D; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; Src &#xAC00;&#xC871; &#xD0A4; (SFK) &#xD68C;&#xC6D0;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC790;&#xADF9;. &#xB610;&#xD55C;, SFK &#xD65C;&#xB3D9;&#xC740; commissural axons&#xC758; &#xC9C0;&#xB3C4; &#xD558;&#xC5D0; &#xC26C;&#xC774; &#xC787;-&#xC911;&#xC7AC; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; Gli transcriptional &#xAE30;&#xC790; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xC720;&#xB3C4; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD568;&#xAED8;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC26C; axons &#xAC00;&#xC774;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xAC8C; &#xD589;&#xB3D9;, &#xBE44;&#xC815;&#xADDC; &#xC2E0;&#xD638; &#xD1B5;&#xB85C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC18C;&#xB2C9; &#xD5E4; &#xC9C0; &#xD638; &#xADF8; &#xCD95; &#xC0AD; &#xBE44;&#xC815;&#xADDC;, Src &#xAC00;&#xC871; &#xD0A4; &#xC885;&#xC18D; &#xC2E0;&#xD638; &#xD1B5;&#xB85C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC548;&#xB0B4;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Sonic hedgehog (Shh) juega un papel esencial en desarrollo eventos como gu&iacute;a de especificaci&oacute;n y ax&oacute;n de destino celular. SHH induce especificaci&oacute;n de destino de la c&eacute;lula a trav&eacute;s de Shh can&oacute;nica de se&ntilde;alizaci&oacute;n, mediada por transcripci&oacute;n. Sin embargo, se desconoce el mecanismo por el cual Shh Gu&iacute;a de axones. Para estudiar esto, hemos desarrollado un ensayo in vitro para la orientaci&oacute;n del ax&oacute;n, en el cual las neuronas pueden ser reflejadas al responder a un gradiente definido de una se&ntilde;al qu&iacute;mica. Disociaron de axones de las neuronas commissural en un gradiente de Shh que se volvi&oacute; r&aacute;pidamente hacia el aumento de las concentraciones de Shh. en concordancia con esta respuesta r&aacute;pida, demostramos que atracci&oacute;n por Shh no requiere transcripci&oacute;n. En cambio, Shh estimula la actividad de los miembros de familia quinasa (SFK) de fuente en una forma dependiente de alisado. Por otra parte, SFK actividad es mediada por Shh Gu&iacute;a de axones commissural, pero no para la inducci&oacute;n de la actividad transcripcional de reportero de Gli. Juntos, estos resultados indican que Shh act&uacute;a a trav&eacute;s de una v&iacute;a de se&ntilde;alizaci&oacute;n noncanonical, actuando r&aacute;pidamente para gu&iacute;a de axones.

Sonic hedgehog gu&iacute;as axones a trav&eacute;s de una v&iacute;a de se&ntilde;alizaci&oacute;n noncanonical, Src-familia-cinasa dependiente.

&#x6E38;&#x79BB;&#x7684;&#x6D41;&#x4F53;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x5377;&#x5165;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7531;&#x4E8E;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x8BF1;&#x4F7F;&#x6C34;&#x52A8;&#x529B;&#x548C;&#x5176;&#x5BF9;&#x8FD0;&#x8F93;&#x5230;&#x524D;&#x6CBF;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x673A;&#x68B0;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x8C03;&#x67E5;&#x5B58;&#x5728;&#x548C;&#x8FC5;&#x901F;&#x79FB;&#x52A8;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x5185;&#x6D41;&#x4F53;&#x6D41;&#x52A8;&#x7684;&#x65B9;&#x5411;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x60F0;&#x6027;&#x91CF;&#x5B50;&#x70B9;&#x5F15;&#x5165;&#x9C7C;&#x89D2;&#x819C;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5E72;&#x9884;&#x5E76;&#x5206;&#x6790;&#x5176;&#x5206;&#x5E03;&#x548C;&#x8FD0;&#x52A8;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x6D41;&#x4F53;&#x6D41;&#x52A8;&#x9488;&#x5BF9;&#x4ECE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F53;&#x5B9E;&#x73B0;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x6846;&#x67B6;&#x7684;&#x5F15;&#x7528;&#xFF0C;&#x5728;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x901F;&#x5EA6;&#x7684; 40%&#x5DE6;&#x53F3;&#x7684;&#x9886;&#x5148;&#x4F18;&#x52BF;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x8FD9;&#x8F6C;&#x53D1;-&#x5B9A;&#x5411;&#x6D41;&#x7531;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x9759;&#x6C34;&#x538B;&#x529B;&#x7531;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x6536;&#x7F29;&#x548C;&#x663E;&#x793A;&#x7531; blebbistatin &#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x4E8C;&#x6D3B;&#x6027;&#x6291;&#x5236;&#x53CD;&#x8F6C;&#x7684;&#x6D41;&#x4F53;&#x6D41;&#x52A8;&#x65B9;&#x5411;&#x548C;&#x57FA;&#x8D28;&#x901F;&#x5EA6;&#x4E0B;&#x964D;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x751F;&#x6210;&#x540E;&#x9762;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x76EE;&#x524D;&#x6D41;&#x4F53;&#x538B;&#x529B;&#x4E0E;&#x4E2D;&#x79FB;&#x52A8;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x6570;&#x91CF;&#x4E0A;&#x5360;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x6570;&#x636E;&#x7684;&#x6D41;&#x7684;&#x7269;&#x7406;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;

&#x80DE;&#x5185;&#x6D41;&#x4F53;&#x6D41;&#x52A8;&#x4E2D;&#x5FEB;&#x901F;&#x79FB;&#x52A8;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;

Cytosolic fluid dynamics have been implicated in cell motility because of the hydrodynamic forces they induce and because of their influence on transport of components of the actin machinery to the leading edge. To investigate the existence and the direction of fluid flow in rapidly moving cells, we introduced inert quantum dots into the lamellipodia of fish epithelial keratocytes and analysed their distribution and motion. Our results indicate that fluid flow is directed from the cell body towards the leading edge in the cell frame of reference, at about 40% of cell speed. We propose that this forward-directed flow is driven by increased hydrostatic pressure generated at the rear of the cell by myosin contraction, and show that inhibition of myosin II activity by blebbistatin reverses the direction of fluid flow and leads to a decrease in keratocyte speed. We present a physical model for fluid pressure and flow in moving cells that quantitatively accounts for our experimental data.

Intracellular fluid flow in rapidly moving cells.

Dynamique des fluides cytosolique ont &eacute;t&eacute; impliqu&eacute;s dans la motilit&eacute; cellulaire, en raison des forces hydrodynamiques, ils induisent et leur influence sur le transport des composants de la machinerie de l&#39;actine &agrave; la fine pointe. Afin d&#39;&eacute;tudier l&#39;existence et la direction de l&#39;&eacute;coulement du fluide dans le d&eacute;placement rapide des cellules, nous a pr&eacute;sent&eacute; les points quantiques inerte dans la lamellipodia des poissons keratocytes &eacute;pith&eacute;liales et analys&eacute; leur distribution et leur mouvement. Nos r&eacute;sultats indiquent que l&#39;&eacute;coulement du fluide est dirig&eacute; du corps cellulaire vers le bord d&#39;attaque dans le cadre de r&eacute;f&eacute;rence de cellule, &agrave; environ 40 % de la vitesse de la cellule. Nous proposons que cette avant-dirig&eacute;e flux est entra&icirc;n&eacute;e par l&#39;augmentation de la pression hydrostatique g&eacute;n&eacute;r&eacute;e &agrave; l&#39;arri&egrave;re de la cellule par la contraction de la myosine et montrent que l&#39;inhibition de l&#39;activit&eacute; de la myosine II par blebbistatin inverse le sens d&#39;&eacute;coulement du fluide et conduit &agrave; une diminution de la vitesse de keratocyte. Nous pr&eacute;sentons un mod&egrave;le physique pour la pression du fluide et de flux dans le d&eacute;placement des cellules qui repr&eacute;sente quantitativement nos donn&eacute;es exp&eacute;rimentales.

&Eacute;coulement de fluide intracellulaire dans le d&eacute;placement rapide des cellules.

Zytosolische Fluiddynamik haben wurde verwickelt in Zelle Motilit&auml;t aufgrund der hydrodynamischen Kr&auml;fte, die sie ausl&ouml;sen und wegen ihres Einflusses auf den Transport von Komponenten der Aktin-Maschine an der Vorderkante. Um die Existenz und die Richtung der Fl&uuml;ssigkeitsstr&ouml;mung in rasch bewegten Zellen zu untersuchen, wir inert Quantenpunkte in der Lamellipodium Fisch epitheliale Keratocytes eingef&uuml;hrt und analysiert ihre Verteilung und Bewegung. Unsere Ergebnisse zeigen, dass Fl&uuml;ssigkeitsstr&ouml;mung vom Zellk&ouml;rper in Richtung Wettbewerbsvorteil in der Zelle Bezugsrahmen, um etwa 40 % der Zelle Geschwindigkeit geleitet wird. Wir schlagen vor, das vorw&auml;rts-Str&ouml;mung angetrieben wird, durch erh&ouml;hte hydrostatische Druck auf der R&uuml;ckseite der Zelle durch Myosin Kontraktion und zeigen inszenierte, dass die Hemmung der Myosin-II-Aktivit&auml;t von Blebbistatin kehrt die Richtung der Fl&uuml;ssigkeitsstr&ouml;mung und f&uuml;hrt zu einem R&uuml;ckgang auch Geschwindigkeit generiert. Wir pr&auml;sentieren ein physikalisches Modell f&uuml;r fl&uuml;ssigen Druck und Flow Zellen zu bewegen, das unsere experimentellen Daten quantitativ ausmacht.

Intrazellul&auml;re Fl&uuml;ssigkeitsstr&ouml;mung Zellen schnell zu bewegen.

Fluidodinamica citosolico sono stati implicati nella motilit&agrave; cellulare a causa delle forze idrodinamiche inducono e a causa della loro influenza sui mezzi di trasporto dei componenti dei macchinari all&#39;avanguardia dell&#39;actina. Per indagare l&#39;esistenza e la direzione di flusso del fluido in movimento rapidamente le cellule, siamo introdotti punti quantici inerte lamellipodia di pesce epiteliali cheratociti e analizzare la loro distribuzione e movimento. I nostri risultati indicano che il flusso del fluido &egrave; diretto dal corpo cellulare verso l&#39;avanguardia nel quadro di riferimento di cella, a circa il 40% della velocit&agrave; di cella. Proponiamo che questo avanti-diretto flusso &egrave; guidato da aumento della pressione idrostatica generata nella parte posteriore della cella da contrazione di miosina e mostrano che l&#39;inibizione dell&#39;attivit&agrave; di miosina II da blebbistatin inverte la direzione del flusso del fluido e conduce ad una diminuzione della velocit&agrave; di cheratinociti. Vi presentiamo un modello fisico per la pressione del fluido e flusso in movimento le cellule che quantitativamente i conti per i nostri dati sperimentali.

Flusso del fluido intracellulare nel muoversi rapidamente le cellule.

&#x30BE;&#x30EB;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x306E;&#x6D41;&#x4F53;&#x529B;&#x5B66;&#x304C;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x904B;&#x52D5;&#x6027;&#x3067;&#x5F7C;&#x3089;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x6D41;&#x4F53;&#x529B;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x8F38;&#x9001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x6A5F;&#x68B0;&#x306E;&#x6700;&#x5148;&#x7AEF;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3002;&#x5B58;&#x5728;&#x3068;&#x6025;&#x901F;&#x306B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x79FB;&#x52D5;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6D41;&#x4F53;&#x306E;&#x6D41;&#x308C;&#x306E;&#x65B9;&#x5411;&#x3092;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x6027;&#x91CF;&#x5B50;&#x30C9;&#x30C3;&#x30C8;&#x9B5A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x5B9F;&#x8CEA;&#x7D30;&#x80DE;&#x30B1;&#x30E9;&#x30C8;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x4EEE;&#x8DB3;&#x306B;&#x5C0E;&#x5165;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5206;&#x5E03;&#x3068;&#x52D5;&#x304D;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6D41;&#x4F53;&#x306E;&#x6D41;&#x308C;&#x304C;&#x7D30;&#x80DE;&#x4F53;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x30BB;&#x30EB; &#x30D5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x53C2;&#x7167;&#x30BB;&#x30EB;&#x901F;&#x5EA6;&#x306E;&#x7D04; 40 &#xFF05; &#x3067;&#x306E;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0; &#x30A8;&#x30C3;&#x30B8;&#x304B;&#x3089;&#x6307;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30D5;&#x30A9;&#x30EF;&#x30FC;&#x30C9; - &#x6D41;&#x308C;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x80CC;&#x9762;&#x306B;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;&#x53CE;&#x7E2E;&#x3068; blebbistatin &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3; II &#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x306F;&#x6D41;&#x4F53;&#x306E;&#x6D41;&#x308C;&#x306E;&#x65B9;&#x5411;&#x3092;&#x53CD;&#x8EE2;&#x3057;&#x3001;&#x89D2;&#x5316;&#x901F;&#x5EA6;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x30B7;&#x30E7;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5897;&#x52A0;&#x306E;&#x9759;&#x6C34;&#x5727;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x99C6;&#x52D5;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x6307;&#x793A;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6D41;&#x4F53;&#x5727;&#x529B;&#x3068;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x30A2;&#x30AB;&#x30A6;&#x30F3;&#x30C8;&#x5F53;&#x793E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x79FB;&#x52D5;&#x306E;&#x6D41;&#x308C;&#x306E;&#x7269;&#x7406;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x63D0;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x6D41;&#x4F53;&#x306E;&#x6D41;&#x308C;&#x3092;&#x6025;&#x901F;&#x306B;&#x30BB;&#x30EB;&#x3092;&#x79FB;&#x52D5;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Cytosolic &#xC720;&#xCCB4; &#xC5ED;&#xD559; &#xC720;&#xCCB4;&#xC5ED;&#xD559; &#xC138;&#xB825; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xC720;&#xB3C4; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xCCA8;&#xB2E8;&#xC744; &#xB9D0;&#xB77C; &#xAE30;&#xACC4;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; &#xC804;&#xC1A1;&#xC5D0; &#xADF8;&#xB4E4; &#xC601;&#xD5A5; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC140; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC874;&#xC7AC; &#xD558; &#xACE0; &#xBE60;&#xB974;&#xAC8C; &#xC140; &#xC774;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xC720;&#xCCB4; &#xD750;&#xB984; &#xBC29;&#xD5A5;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBB3C;&#xACE0;&#xAE30; &#xC0C1;&#xD53C; keratocytes lamellipodia&#xC5D0; &#xBD88;&#xD65C;&#xC131; &#xC591;&#xC790; &#xC810; &#xB4E4;&#xC744; &#xC18C;&#xAC1C; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC720;&#xD1B5; &#xBC0F; &#xBAA8;&#xC158; &#xBD84;&#xC11D;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xC720;&#xCCB4; &#xD750;&#xB984; &#xC140; &#xD504;&#xB808;&#xC784;&#xC758; &#xCC38;&#xC870; &#xC140; &#xC18D;&#xB3C4;&#xC758; &#xC57D; 40%&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD5C;&#xCCA8;&#xB2E8;&#xC744; &#xD5A5;&#xD574; &#xC140; &#xBAB8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC10;&#xB3C5;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294;&#xC774; &#xC55E;&#xC73C;&#xB85C;-&#xAC10;&#xB3C5; &#xD750;&#xB984; myosin &#xC218;&#xCD95;&#xACFC; &#xC1FC; blebbistatin&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; myosin II &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xC800;&#xD574; &#xC720;&#xCCB4; &#xD750;&#xB984;&#xC758; &#xBC29;&#xD5A5;&#xC744; &#xBC18;&#xB300;&#xB85C; &#xD558; &#xACE0; keratocyte &#xC18D;&#xB3C4;&#xC758; &#xAC10;&#xC18C;&#xC5D0; &#xC774;&#xB974;&#xAC8C; &#xD558; &#xC5EC; &#xC140; &#xD6C4;&#xBA74;&#xC5D0; &#xC0DD;&#xC131; &#xC99D;&#xAC00; &#xC815;&#xC218; &#xC555;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAD6C;&#xB3D9; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC720;&#xCCB4; &#xC555;&#xB825;&#xACFC; &#xC591;&#xC801; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xACC4;&#xC815; &#xC140; &#xC774;&#xB3D9; &#xD750;&#xB984;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBB3C;&#xB9AC;&#xC801; &#xBAA8;&#xB378; &#xC81C;&#xC2DC;.

&#xBE60;&#xB974;&#xAC8C; &#xC140; &#xC774;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xC720;&#xCCB4; &#xD750;&#xB984;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Din&aacute;mica de fluidos citos&oacute;lica han sido implicados en la motilidad celular debido a las fuerzas hidrodin&aacute;micas que inducen y debido a su influencia en el transporte de los componentes de la maquinaria de la actina a la vanguardia. Para investigar la existencia y la direcci&oacute;n de flujo de fluidos en movimiento r&aacute;pidamente las c&eacute;lulas, introdujimos puntos cu&aacute;nticos inerte en el lamellipodia de pescado queratocitos epiteliales y analizar su distribuci&oacute;n y movimiento. Nuestros resultados indican que el fluido se dirige desde el cuerpo celular hacia la vanguardia en el marco de referencia de celda, en alrededor del 40% de la velocidad de la c&eacute;lula. Proponemos que este avance dirigido flujo es impulsado por el aumento de la presi&oacute;n hidrost&aacute;tico generado en la parte trasera de la c&eacute;lula por contracci&oacute;n de miosina y mostrar que la inhibici&oacute;n de la actividad de miosina II por blebbistatin invierte la direcci&oacute;n de flujo de fluidos y conduce a una disminuci&oacute;n en la velocidad del keratocyte. Presentamos un modelo f&iacute;sico para la presi&oacute;n y flujo en el movimiento de las c&eacute;lulas que representa cuantitativamente los datos experimentales.

Flujo de fluidos intracelular en mover r&aacute;pidamente las c&eacute;lulas.

&#x771F;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x722C;&#x884C;&#x8FD0;&#x52A8;&#x53D6;&#x5F97;&#x7684;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#xFF1A; &#x690E;&#x95F4;&#x76D8;&#x7A81;&#x51FA;&#x7684;&#x9886;&#x5148;&#x4F18;&#x52BF;&#x9700;&#x8981;&#x7F51;&#x7EDC;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x4E1D;&#xFF0C;&#x5FC5;&#x987B;&#x62C6;&#x5378;&#x7684;&#x6301;&#x7EED;&#x52A8;&#x529B;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x540E;&#x9762;&#x7684;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x96C6;&#x3002;&#x5C3D;&#x7BA1; ADF/cofilin &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5DF2;&#x88AB;&#x8BC1;&#x660E;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x53CD;&#x6C47;&#x7F16;&#xFF0C;&#x5C1A;&#x4E0D;&#x6E05;&#x695A;&#x5982;&#x4F55;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x672C;&#x5730;&#x4EE3;&#x7406;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x53EF;&#x4EE5;&#x534F;&#x8C03;&#x6574;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x8DDD;&#x79BB;&#x89C4;&#x6A21;&#x8FBE;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x8BE5;&#x975E;&#x808C;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D; II &#x5728;&#x722C;&#x884C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7F51;&#x7EDC;&#x53CD;&#x6C47;&#x7F16;&#x5177;&#x6709;&#x76F4;&#x63A5;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x5728;&#x9C7C;&#x89D2;&#x819C;&#x57FA;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7ECF;&#x5386;&#x52A8;&#x529B;&#xFF0C;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x4E8C;&#x88AB;&#x96C6;&#x4E2D;&#x4E8E;&#x7387;&#x8F83;&#x9AD8;&#x7684;&#x7F51;&#x7EDC;&#x53CD;&#x6C47;&#x7F16;&#x540E;&#x90E8;&#x533A;&#x57DF;&#x3002;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D; atp &#x4E8C;&#x3001; &#x6D17;&#x6DA4;&#x5242;&#x63D0;&#x53D6;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x5BFC;&#x81F4;&#x540E;&#x65B9;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x53CD;&#x6C47;&#x7F16;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7F51;&#x7EDC;&#x3002;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x4E8C;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x548C;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x4E1D;&#x534F;&#x540C;&#x963B;&#x788D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FD0;&#x52A8;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x53CD;&#x6C47;&#x7F16;&#x7684;&#x9014;&#x5F84;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x4E4B;&#x4E00;&#x9700;&#x8981;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x4E8C;&#x3001; &#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x9176;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7F51;&#x7EDC;&#x53CD;&#x6C47;&#x7F16; &#xFF1B; &#x4E8C;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x9010;&#x6B65;&#x5F62;&#x6210;&#x548C;&#x8089;&#x7F51;&#x7EDC;&#x91CD;&#x7EC4;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x5185;&#x5728;&#x9500;&#x6BC1;&#x8BA1;&#x65F6;&#x5668;&#xFF0C;&#x542F;&#x7528;&#x8FDC;&#x7A0B;&#x534F;&#x8C03;&#x7684;&#x80FD;&#x52A8;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7F51;&#x7EDC; treadmilling&#x3002;

&#x4E8C;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x901A;&#x8FC7;&#x7F51;&#x7EDC;&#x62C6;&#x5378;&#x5355;&#x5143;&#x89C4;&#x6A21;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7F51;&#x7EDC; treadmilling&#x3002;

Crawling locomotion of eukaryotic cells is achieved by a process dependent on the actin cytoskeleton: protrusion of the leading edge requires assembly of a network of actin filaments, which must be disassembled at the cell rear for sustained motility. Although ADF/cofilin proteins have been shown to contribute to actin disassembly, it is not clear how activity of these locally acting proteins could be coordinated over the distance scale of the whole cell. Here we show that non-muscle myosin II has a direct role in actin network disassembly in crawling cells. In fish keratocytes undergoing motility, myosin II is concentrated in regions at the rear with high rates of network disassembly. Activation of myosin II by ATP in detergent-extracted cytoskeletons results in rear-localized disassembly of the actin network. Inhibition of myosin II activity and stabilization of actin filaments synergistically impede cell motility, suggesting the existence of two disassembly pathways, one of which requires myosin II activity. Our results establish the importance of myosin II as an enzyme for actin network disassembly; we propose that gradual formation and reorganization of an actomyosin network provides an intrinsic destruction timer, enabling long-range coordination of actin network treadmilling in motile cells.

Myosin II contributes to cell-scale actin network treadmilling through network disassembly.

Locomotion Crawling des cellules eucaryotes est obtenue par un processus d&#xE9;pendant de l&#x26;#39;cytosquelette d&#x26;#39;actine: saillie du bord d&#x26;#39;attaque n&#xE9;cessite l&#x26;#39;assemblage d&#x26;#39;un r&#xE9;seau de filaments d&#x26;#39;actine, qui doivent &#xEA;tre d&#xE9;mont&#xE9;es &#xE0; l&#x26;#39;arri&#xE8;re de la motilit&#xE9; cellulaire soutenue. Bien que l&#x26;#39;ADF / cofiline prot&#xE9;ines ont &#xE9;t&#xE9; montr&#xE9;s pour contribuer &#xE0; l&#x26;#39;actine d&#xE9;montage, il n&#x26;#39;est pas clair comment l&#x26;#39;activit&#xE9; de ces prot&#xE9;ines agissent localement pourrait &#xEA;tre coordonn&#xE9; sur l&#x26;#39;&#xE9;chelle de distance de la cellule enti&#xE8;re. Ici, nous montrons que la non-musculaire myosine II a un r&#xF4;le direct dans l&#x26;#39;actine r&#xE9;seau d&#xE9;montage ramper cellules. En k&#xE9;ratocytes poissons subissant la motilit&#xE9;, la myosine II est concentr&#xE9;e dans les r&#xE9;gions &#xE0; l&#x26;#39;arri&#xE8;re avec des taux &#xE9;lev&#xE9;s de r&#xE9;seau de d&#xE9;montage. L&#x26;#39;activation de la myosine II par l&#x26;#39;ATP dans les r&#xE9;sultats cytosquelette d&#xE9;tergent extraites &#xE0; l&#x26;#39;arri&#xE8;re-localis&#xE9;e d&#xE9;montage du r&#xE9;seau d&#x26;#39;actine. L&#x26;#39;inhibition de la myosine II l&#x26;#39;activit&#xE9; et la stabilisation des filaments d&#x26;#39;actine en synergie entraver la motilit&#xE9; cellulaire, ce qui sugg&#xE8;re l&#x26;#39;existence de deux voies de d&#xE9;montage, dont l&#x26;#39;un exige la myosine II d&#x26;#39;activit&#xE9;. Nos r&#xE9;sultats &#xE9;tablissent l&#x26;#39;importance de la myosine II comme &#xE9;tant une enzyme pour l&#x26;#39;actine r&#xE9;seau d&#xE9;montage; nous proposons que la formation progressive et la r&#xE9;organisation d&#x26;#39;un r&#xE9;seau actomyosine fournit une minuterie destruction intrins&#xE8;que, ce qui permet &#xE0; long terme la coordination des treadmilling r&#xE9;seau d&#x26;#39;actine dans les cellules mobiles.

La myosine II Contribue &#xE0; Cellulaire &#xE9;chelle Treadmilling r&#xE9;seau d&#x26;#39;actine &#xE0; travers le R&#xE9;seau D&#xE9;montage

Kriechenden Fortbewegung der eukaryotischen Zellen wird erreicht, indem ein Prozess des Aktin-Zytoskeletts abh&auml;ngig: Vorw&ouml;lbung der Eintrittskante erfordert Assembly eines Netzes von Aktin-Filamenten, die an der R&uuml;ckseite der Zelle f&uuml;r nachhaltige Motilit&auml;t demontiert werden m&uuml;ssen. Obwohl ADF/Cofilin Proteine Aktin Demontage beitragen nachgewiesen wurde, ist nicht klar, wie Aktivit&auml;t dieser lokal handeln Proteine &uuml;ber die Entfernungsskala der ganzen Zelle koordiniert werden k&ouml;nnten. Hier zeigen wir, dass diese nicht-Muskel-Myosin II eine direkte Rolle in Aktin-Netzwerk-Demontage in kriechenden Zellen verf&uuml;gt. In Fisch Keratocytes in der Motilit&auml;t konzentriert sich Myosin II in den Regionen an der R&uuml;ckseite mit hohen Raten von Netzwerk-Demontage. Aktivierung des Myosin II von ATP in Waschmittel-extrahiert Cytoskeletons f&uuml;hrt hinten lokalisierte Demontage des Aktin-Netzwerks. Hemmung der Myosin-II-Aktivit&auml;t und Stabilisierung von Aktin-Filamenten behindern synergistisch Zelle Motilit&auml;t, was auf die Existenz von zwei Demontage Wege, von denen Myosin-II-Aktivit&auml;t erfordert. Unsere Ergebnisse legt die Bedeutung der Myosin II als ein Enzym Aktin Netzwerk Demontage; Wir schlagen vor, die allm&auml;hliche Entstehung und Reorganisation eines Actomyosin-Netzwerks stellt einen systeminternen Zerst&ouml;rung-Timer, weitr&auml;umige Koordinierung der Aktin-Netzwerk-Treadmilling in gekr&uuml;mmter Zellen aktivieren.

Myosin II tr&auml;gt zur Zelle-Skala Aktin Netzwerk Treadmilling durch Netzwerk-Demontage.

Locomozione strisciante delle cellule eucariotiche &egrave; ottenuta mediante un processo dipendente del citoscheletro di actina: sporgenza del bordo principale richiede il montaggio di una rete di filamenti di actina, che deve essere smontato nella parte posteriore della cella per motilit&agrave; sostenuta. Anche se le proteine ADF/cofilin hanno dimostrate di contribuire allo smontaggio dell&#39;actina, non &egrave; chiaro come attivit&agrave; di questi agisce localmente le proteine potrebbero essere coordinate sopra la scala delle distanze dell&#39;intera cellula. Qui vi mostriamo che non-muscolare miosina II ha un ruolo diretto nel disassemblaggio rete actina nelle cellule striscianti. Nel pesce cheratociti in fase di motilit&agrave;, miosina II &egrave; concentrata nelle regioni nella parte posteriore con alti tassi di smontaggio della rete. Attivazione della miosina II da ATP in estratti di detergente cytoskeletons risultati in localizzato posteriore Smontaggio della rete dell&#39;actina. Inibizione dell&#39;attivit&agrave; di miosina II e stabilizzazione dei filamenti di actina in sinergia ostacolare la motilit&agrave; cellulare, suggerendo l&#39;esistenza di due vie di smontaggio, uno dei quali richiede attivit&agrave; di miosina II. I nostri risultati stabilire l&#39;importanza della miosina II come un enzima per lo smontaggio di rete actina; proponiamo che la formazione graduale e la riorganizzazione di una rete di actomiosina fornisce un timer di distruzione intrinseca, consentendo a lungo raggio coordinamento del treadmilling rete actina nelle cellule motili.

Miosina II contribuisce a treadmilling di rete actina delle cellule-scala attraverso lo smontaggio della rete.

&#x771F;&#x6838;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x904B;&#x52D5;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3059;&#x308B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x9054;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#xFF1A;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x30A8;&#x30C3;&#x30B8;&#x306E;&#x7A81;&#x8D77;&#x304C;&#x6301;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x904B;&#x52D5;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5F8C;&#x90E8;&#x3067;&#x5206;&#x89E3;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A3;&#x30E9;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x306E;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x304C;&#x200B;&#x200B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002; ADF /&#x30B3;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x304C;&#x5206;&#x89E3;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5C40;&#x6240;&#x7684;&#x306B;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x8DDD;&#x96E2;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30EB;&#x3067;&#x8ABF;&#x6574;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x304B;&#x306F;&#x660E;&#x78BA;&#x3067;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x975E;&#x7B4B;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;II&#x306F;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x5206;&#x89E3;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x7684;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x904B;&#x52D5;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x9B5A;k&#x200B;&#x200B;eratocytes&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;II&#x306F;&#x5206;&#x89E3;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x306E;&#x9AD8;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E;&#x80CC;&#x9762;&#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x5730;&#x57DF;&#x306B;&#x96C6;&#x4E2D;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x306E;&#x80CC;&#x9762;&#x306B;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x9006;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30FC;&#x5185;&#x306E;&#x754C;&#x9762;&#x6D3B;&#x6027;&#x5264;&#x62BD;&#x51FA;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x7D50;&#x679C;&#x306E;ATP&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;II&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3002;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A3;&#x30E9;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;II&#x6D3B;&#x6027;&#x3068;&#x5B89;&#x5B9A;&#x5316;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x306F;&#x76F8;&#x4E57;&#x7684;&#x306B;2&#x5206;&#x89E3;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306F;&#x3001;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;II&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x904B;&#x52D5;&#x6027;&#x3092;&#x59A8;&#x3052;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x5206;&#x89E3;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;II&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3057;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C8;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x306E;&#x305D;&#x306E;&#x6F38;&#x9032;&#x7684;&#x306A;&#x5F62;&#x6210;&#x3084;&#x518D;&#x7DE8;&#x6210;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;&#x904B;&#x52D5;&#x6027;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x306E;&#x30C8;&#x30EC;&#x30C3;&#x30C9;&#x306E;&#x9577;&#x671F;&#x8ABF;&#x6574;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3057;&#x3001;&#x672C;&#x8CEA;&#x7684;&#x306A;&#x7834;&#x58CA;&#x30BF;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;II&#x306F;&#x3001;&#x9006;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EB;&#x3001;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x306E;&#x30C8;&#x30EC;&#x30C3;&#x30C9;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;

&#xC9C4; &#xD575; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD06C;&#xB864;&#xB9C1; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xB9D0;&#xB77C; cytoskeleton&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB2EC;&#xC131;: &#xC55E; &#xAC00;&#xC7A5;&#xC790;&#xB9AC;&#xC758; &#xB3CC;&#xCD9C; &#xB9D0;&#xB77C; &#xD544; &#xB77C; &#xBA58; &#xD2B8;, &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778;&#xB41C; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC140; &#xB4A4;&#xC5D0; &#xBD84;&#xD574; &#xD574;&#xC57C; &#xD558;&#xB294; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C;&#xC758; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC;&#xAC00; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. ADF/cofilin &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB9D0;&#xB77C; &#xD574;&#xCCB4;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC;&#xD560; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; &#xB85C;&#xCEEC; &#xD589;&#xB3D9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC774; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC804;&#xCCB4; &#xC140;&#xC758; &#xAC70;&#xB9AC; &#xB208;&#xAE08;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC870;&#xC815; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xBA85;&#xD655; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xADF8; &#xBE44; &#xADFC;&#xC721; myosin II &#xD06C;&#xB864;&#xB9C1; &#xC140;&#xC5D0; &#xB9D0;&#xB77C; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C; &#xB514;&#xC2A4;&#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C1;&#xC811; &#xC5ED;&#xD560;&#xC774; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBB3C;&#xACE0;&#xAE30; keratocytes &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131;&#xC744; &#xBC1B;&#xACE0;, myosin II &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C; &#xD574;&#xCCB4;&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xC18D;&#xB3C4; &#xD568;&#xAED8; &#xD6C4;&#xBA74;&#xC5D0;&#xB294; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xC9D1;&#xC911; &#xB418;&#xC5B4;. Myosin ATP&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; II cytoskeletons &#xC138;&#xC81C; &#xCD94;&#xCD9C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB9D0;&#xB77C; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C;&#xC758; &#xD574;&#xCCB4; &#xD6C4;&#xBA74; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xB41C; &#xACB0;&#xACFC;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. Myosin II &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xC800;&#xD574;&#xC640; &#xB9D0;&#xB77C; &#xD544; &#xB77C; &#xBA58; &#xD2B8;&#xC758; &#xC548;&#xC815;&#xD654; synergistically myosin II &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xD544;&#xC694;&#xB85C; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xB294; &#xB450; &#xBD84;&#xD574; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xB97C; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xC140; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; &#xBC29;&#xD574;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xC124;&#xC815; &#xB9D0;&#xB77C; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C; &#xD574;&#xCCB4;; &#xD6A8;&#xC18C;&#xB85C; myosin II&#xC758; &#xC911;&#xC694;&#xC131; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC810;&#xC9C4;&#xC801; &#xD615;&#xC131;&#xACFC; actomyosin &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C; &#xAC1C;&#xD3B8; &#xBA54;&#xAD6C;&#xBBF8; &#xC140;&#xC5D0; &#xB9D0;&#xB77C; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C; treadmilling&#xC758; &#xAE34;-&#xBC94;&#xC704; &#xC870;&#xC815; &#xAC00;&#xB2A5; &#xD558; &#xAC8C; &#xD558;&#xB294; &#xB0B4;&#xC7A5; &#xD30C;&#xAD34; &#xD0C0;&#xC774;&#xBA38; &#xC81C;&#xACF5; &#xC81C;&#xC548;.

Myosin II &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C; &#xD574;&#xCCB4;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC140; &#xADDC;&#xBAA8; &#xB9D0;&#xB77C; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C; treadmilling&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD55C;&#xB2E4;.

Rastreo locomoci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas eucariotas se consigue mediante un proceso dependiente de la citoesqueleto de actina: protrusi&#xF3;n del borde de ataque requiere el montaje de una red de filamentos de actina, que deben ser desmontados en la parte trasera de la c&#xE9;lula para la motilidad sostenida. Aunque ADF / cofilina prote&#xED;nas se han demostrado que contribuyen a la actina desmontaje, no est&#xE1; claro c&#xF3;mo la actividad de estas prote&#xED;nas que act&#xFA;an localmente podr&#xED;a ser coordinado sobre la escala de distancia de toda la celda. Aqu&#xED; nos muestran que no m&#xFA;sculo miosina II tiene un papel directo en la red de actina en el rastreo de las c&#xE9;lulas de desmontaje. En queratocitos de peces sometidos a la motilidad, la miosina II se concentra en las regiones en la parte trasera con altas tasas de la red de desmontaje. La activaci&#xF3;n de la miosina II por la ATP en extra&#xED;dos detergente resultados citoesqueletos en la parte trasera localizada el desmontaje de la red de actina. La inhibici&#xF3;n de la actividad miosina II y estabilizaci&#xF3;n de los filamentos de actina sin&#xE9;rgicamente impedir la motilidad celular, lo que sugiere la existencia de dos v&#xED;as de desmontaje, uno de los cuales requiere miosina actividad II. Nuestros resultados establecen la importancia de la miosina II, una enzima para la actina red de desmontaje, proponemos que la formaci&#xF3;n gradual y la reorganizaci&#xF3;n de una red de actomiosina proporciona un temporizador destrucci&#xF3;n intr&#xED;nseca, lo que permite a largo plazo la coordinaci&#xF3;n de la red de actina en treadmilling c&#xE9;lulas m&#xF3;viles.

La miosina II contribuye a la c&#xE9;lula treadmilling escala actina red a trav&#xE9;s de la red Desmontaje

&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#x89C4;&#x7BA1;&#x7684;&#x901F;&#x5EA6;&#x548C;&#x65B9;&#x5411;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x4EA7;&#x7269;&#x5728;&#x5F00;&#x53D1;&#x548C;&#x518D;&#x751F;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x5982;&#x4F55;&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#x65F6;&#x7A7A;&#x76D1;&#x7BA1;&#x6307;&#x5BFC;&#x63D0;&#x793A;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x662F;&#x751A;&#x5C11;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x7EAF;&#x51C0;&#x7684;&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x5B66;&#x5206;&#x6790;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A;&#x9002;&#x914D;&#x5668;&#x86CB;&#x767D; 14-3-3 &#x7CFB;&#x5217;&#x7684;&#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#x4E3A;&#x4E3B;&#x8981;&#x6210;&#x5206;&#x7684;&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#x3002;14-3-3 &#x901A;&#x8FC7; R18 &#x62EE;&#x6297;&#x5242;&#x6216;&#x4E2A;&#x522B; 14-3-3 &#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#x7684;&#x7EC4;&#x5408;&#x5F0F;&#x4E2D;&#x65AD;&#x5207;&#x6362;&#x5230;&#x5438;&#x5F15;&#x529B;&#x5728;&#x80DA;&#x80CE;&#x7684;&#x7B2C;&#x5341;&#x4E09;&#x5929;&#x5C0F;&#x9E21;&#x548C;&#x4EA7;&#x540E;&#x7B2C; 5 &#x5929;&#x5927;&#x9F20;&#x80CC;&#x6839;&#x8282;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x795E;&#x7ECF;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x548C;&#x9AD3;&#x9798;&#x76F8;&#x5173;&#x7CD6;&#x86CB;&#x767D;&#x4F9D;&#x8D56;&#x7684;&#x65A5;&#x529B;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6548;&#x679C;&#x8BA9;&#x4EBA;&#x8054;&#x60F3;&#x8D77;&#x5207;&#x6362;&#x54CD;&#x5E94;&#x63D0;&#x5347;&#x8425;&#x4E2D;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x8010;&#x4EBA;&#x5BFB;&#x5473;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x4F9D;&#x8D56; R18 &#x7684;&#x5207;&#x6362;&#xFF0C;&#x88AB;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; A &#xFF08;PKA&#xFF09;&#xFF0C;&#x5EFA;&#x8BAE; 14-3-3 &#x86CB;&#x767D;&#x8C03;&#x8282; PKA &#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x3002;&#x59CB;&#x7EC8;&#x5982;&#x4E00;&#xFF0C;14-3-3 &#x86CB;&#x767D;&#x4E0E; PKA &#x7684;&#x4EA4;&#x4E92;&#x548C; R18 &#x6FC0;&#x6D3B; PKA&#xFF0C;&#x907F;&#x514D;&#x8BEF;&#x5165;&#x6B67;&#x9014;&#x53CA;&#x5176;&#x76D1;&#x7BA1;&#x548C;&#x50AC;&#x5316;&#x4E9A;&#x5355;&#x4F4D;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;14-3-3 heterodimers &#x89C4;&#x7BA1; PKA &#x5168;&#x9176;&#x8FD8;&#x80FD;&#x4E0E;&#x8FD9;&#x9879;&#x6D3B;&#x52A8;&#x53D1;&#x6325;&#x7740;&#x5173;&#x952E;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5728;&#x8C03;&#x8282;&#x5230;&#x62D2;&#x63D0;&#x793A;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;

14-3-3 &#x86CB;&#x767D;&#x8C03;&#x8282;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x8C03;&#x8282;&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#x8F6C;&#x5411;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;

Growth cones regulate the speed and direction of neuronal outgrowth during development and regeneration. How the growth cone spatially and temporally regulates signals from guidance cues is poorly understood. Through a proteomic analysis of purified growth cones we identified isoforms of the 14-3-3 family of adaptor proteins as major constituents of the growth cone. Disruption of 14-3-3 via the R18 antagonist or knockdown of individual 14-3-3 isoforms switches nerve growth factor- and myelin-associated glycoprotein-dependent repulsion to attraction in embryonic day 13 chick and postnatal day 5 rat DRG neurons. These effects are reminiscent of switching responses observed in response to elevated cAMP. Intriguingly, R18-dependent switching is blocked by inhibitors of protein kinase A (PKA), suggesting that 14-3-3 proteins regulate PKA. Consistently, 14-3-3 proteins interact with PKA and R18 activates PKA by dissociating its regulatory and catalytic subunits. Thus, 14-3-3 heterodimers regulate the PKA holoenzyme and this activity plays a critical role in modulating neuronal responses to repellent cues.

14-3-3 proteins regulate protein kinase a activity to modulate growth cone turning responses.

Les c&ocirc;nes de croissance r&eacute;glementent la vitesse et la direction de l&#39;excroissance neuronale lors du d&eacute;veloppement et de r&eacute;g&eacute;n&eacute;ration. Comment le c&ocirc;ne de croissance spatialement et temporellement r&eacute;glemente les signaux provenant des signaux de guidage est mal comprise. Gr&acirc;ce &agrave; une analyse prot&eacute;omique des c&ocirc;nes de croissance purifi&eacute;e, nous avons identifi&eacute; isoformes de la famille 14-3-3 des prot&eacute;ines de l&#39;adaptateur comme constituants majeurs du c&ocirc;ne de croissance. Perturbation du 14-3-3 via la R18 antagoniste ou pr&eacute;cipitation d&#39;isoformes individuels de 14-3-3 passe nerve growth factor - et la my&eacute;line-associ&eacute;s de r&eacute;pulsion glycoprot&eacute;ine d&eacute;pendant attraction en poussin embryonnaire jour 13 et neurones de jour post-natal 5 rats DRG. Ces effets font penser &agrave; des r&eacute;ponses observ&eacute;es en r&eacute;ponse au cAMP &eacute;lev&eacute;e de commutation. Curieusement, R18 d&eacute;pendant de commutation est bloqu&eacute; par les inhibiteurs de la prot&eacute;ine kinase A (PKA), ce qui sugg&egrave;re que les prot&eacute;ines 14-3-3 r&eacute;glementent PKA. Constamment, 14-3-3 prot&eacute;ines interagissent avec un PKA et R18 active PKA en dissociant ses sous-unit&eacute;s catalytiques et de r&eacute;glementation. Ainsi, 14-3-3 h&eacute;t&eacute;rodim&egrave;res r&eacute;glementent l&#39;holoenzyme PKA et cette activit&eacute; joue un r&ocirc;le essentiel dans la modulation des r&eacute;ponses neuronales aux signaux r&eacute;pulsifs.

prot&eacute;ines 14-3-3 r&eacute;glementent une activit&eacute; pour moduler le c&ocirc;ne de croissance transformant les r&eacute;ponses de prot&eacute;ine kinase.

Wachstum Zapfen Regeln die Geschwindigkeit und Richtung der neuronalen Auswuchs w&auml;hrend Entwicklung und Regeneration. Wie der Wachstumskegel r&auml;umlich und zeitlich Signale von Leitlinien-Signale reguliert wird schlecht verstanden. Durch eine Proteomic-Analyse der gereinigten Wachstum Zapfen haben wir als wichtige Bestandteile der Wachstumskegel Isoformen der 14-3-3-Familie der Adapter-Proteine identifiziert. Unterbrechung der 14-3-3 &uuml;ber das R18-Antagonist oder Niederschlag der einzelnen 14-3-3-Isoformen wechselt Nerven-Wachstumsfaktor und Myelin-assoziierte Glykoprotein-abh&auml;ngige Absto&szlig;ung Attraktion in embryonalen 13.Tag Chick und postnatale 5.Tag Ratte DRG-Neuronen. Diese Effekte sind der Wechsel Antworten bemerkte als Reaktion auf erh&ouml;hten Lager erinnert. Interessanterweise ist die R18-abh&auml;ngige Umschaltung von Inhibitoren der Proteinkinase A (PKA), was darauf hindeutet, dass 14-3-3-Proteine PKA regulieren blockiert. Konsequent, 14-3-3-Proteine interagieren mit PKA und R18 PKA aktiviert, indem man seine regulatorischen und katalytischen Untereinheiten distanziert. So 14-3-3-Heterodimere regulieren die PKA-Erfahrung und diese Aktivit&auml;t spielt eine entscheidende Rolle bei der Modulation der neuronaler Antworten zu abweisend Hinweise.

14-3-3-Proteine regulieren Proteinkinase eine Aktivit&auml;t zu Wachstumskegel drehen Antworten zu modulieren.

Coni di crescita regolano la velocit&agrave; e la direzione di escrescenza neuronale durante lo sviluppo e la rigenerazione. Come il cono di crescita spazialmente e temporalmente regola segnali da stecche di orientamento &egrave; poco conosciuta. Attraverso un&#39;analisi proteomic dei coni di crescita purificato abbiamo identificato isoforme della famiglia di proteine adattatore 14-3-3 come principali costituenti del cono di crescita. Interruzione del 14-3-3 via R18 antagonista o atterramento delle singole isoforme di 14-3-3 interruttori repulsione glicoproteina dipendente dal fattore di crescita nervosa e mielina associati all&#39;attrazione in pulcino 13 giorno embrionale e postnatale giorno 5 ratto neuroni dei DRG. Questi effetti sono rievocativi delle risposte osservate in risposta all&#39;elevato campo di commutazione. Curiosamente, R18-dipendente di commutazione &egrave; bloccato da inibitori della chinasi di proteina A (PKA), suggerendo che le proteine 14-3-3 regolano PKA. Coerentemente, le proteine 14-3-3 interagiscono con PKA e R18 attiva la PKA di dissociazione della sua subunit&agrave; catalitica e normativa. Cos&igrave;, 14-3-3 eterodimeri regolano l&#39;esonucleasica PKA e questa attivit&agrave; gioca un ruolo fondamentale nel modulare le risposte neuronali a stecche repellente.

le proteine 14-3-3 regolano la chinasi di proteina un&#39;attivit&agrave; per modulare il cono di crescita trasformando le risposte.

&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x901F;&#x5EA6;&#x3068;&#x958B;&#x767A;&#x3068;&#x518D;&#x751F;&#x4E2D;&#x795E;&#x7D4C;&#x4F38;&#x9577;&#x65B9;&#x5411;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x304C;&#x6642;&#x7A7A;&#x9593;&#x7684;&#x6307;&#x5C0E;&#x306E;&#x624B;&#x304C;&#x304B;&#x308A;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306F;&#x3088;&#x304F;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x89E3;&#x6790;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x6210;&#x5206;&#x3068;&#x3057;&#x3066; 14-3-3 &#x306E;&#x5BB6;&#x65CF;&#x30A2;&#x30C0;&#x30D7;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;14-3-3 &#x500B;&#x3005; &#x306E; 14-3-3 &#x30A2;&#x30A4;&#x30BD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E; R18 &#x62EE;&#x6297;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C0;&#x30E0;&#x30A2;&#x30C3;&#x30AF;&#x30BB;&#x30B9;&#x7D4C;&#x7531;&#x306E;&#x4E2D;&#x65AD;&#x795E;&#x7D4C;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;&#x3068;&#x30DF;&#x30A8;&#x30EA;&#x30F3;&#x95A2;&#x9023;&#x7CD6;&#x4F9D;&#x5B58;&#x53CD;&#x767A; 13 &#x65E5;&#x76EE;&#x80DA;&#x3072;&#x3088;&#x3053;&#x3068;&#x7523;&#x5F8C; 5 &#x65E5;&#x76EE;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8; DRG &#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x9B45;&#x529B;&#x306B;&#x5207;&#x308A;&#x66FF;&#x308F;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x9AD8;&#x67B6;&#x306E;&#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D7;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306B;&#x307F;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x30B9;&#x30A4;&#x30C3;&#x30C1;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x9023;&#x60F3;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3067;&#x3059;&#x3002;Lrad R18 &#x4F9D;&#x5B58;&#x30B9;&#x30A4;&#x30C3;&#x30C1;&#x30F3;&#x30B0; &#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; A (PKA) 14-3-3 &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; PKA &#x3092;&#x898F;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3001;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E00;&#x8CAB;&#x3057;&#x3066;&#x3001;14-3-3 &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; PKA &#x304C;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3057;&#x3001;R18 PKA &#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x898F;&#x5236;&#x3084;&#x89E6;&#x5A92;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x89E3;&#x96E2;&#x3092;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;14-3-3 &#x30D8;&#x30C6;&#x30ED; PKA &#x30DB;&#x30ED;&#x9175;&#x7D20;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D3;&#x30C6;&#x30A3;&#x306F;&#x64A5;&#x30AD;&#x30E5;&#x30FC;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

14-3-3 &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3092;&#x56DE;&#x3057;&#x3066;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x3092;&#x5909;&#x8ABF;&#x3059;&#x308B;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3092;&#x898F;&#x5236;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC131;&#xC7A5; &#xCF58; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xBC0F; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD30C;&#xC0DD;&#xBB3C;&#xC758; &#xBC29;&#xD5A5; &#xBC0F; &#xC18D;&#xB3C4; &#xC870;&#xC808;. &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; &#xC131;&#xC7A5; &#xC6D0;&#xBFD4; &#xACF5;&#xAC04;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC77C;&#xC2DC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xADDC;&#xC81C; &#xC9C0;&#xCE68; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E0;&#xD638; &#xC11C; &#xD22C;&#xB974; &#xAC8C; &#xC774;&#xD574;. &#xC21C;&#xD654; &#xB41C; &#xC131;&#xC7A5; &#xC6D0;&#xBFD4;&#xC758; proteomic &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC131;&#xC7A5; &#xC6D0;&#xBFD4;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xC131;&#xBD84;&#xC73C;&#xB85C; isoforms &#xC5B4;&#xB311;&#xD130; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; 14-3-3 &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xD30C;&#xC545;. 14-3-3 R18 &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C; &#xB610;&#xB294; &#xAC1C;&#xBCC4; 14-3-3 isoforms &#xCD5C;&#xC800;&#xC758; &#xD1B5;&#xD574; &#xC911;&#xB2E8; &#xBC30;&#xC544; &#xD558;&#xB8E8; 13 &#xC5EC;&#xC790;&#xC640; &#xC0B0; &#xD6C4; &#xC8FC; 5 &#xC950; DRG &#xB274;&#xB7F0;&#xC5D0; &#xB9E4;&#xB825; &#xB2F9;&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC885;&#xC18D; &#xBC18;&#xBC1C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; &#xBC0F; myelin &#xC5F0;&#xACB0; &#xC804;&#xD658; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD6A8;&#xACFC; &#xB192;&#xC740; &#xCEA0;&#xD504;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xC2A4;&#xC704;&#xCE6D;&#xC758; &#xC5F0;&#xC0C1;. &#xAE00;, R18 &#xC885;&#xC18D; &#xC804;&#xD658; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; A (PKA), 14-3-3 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; PKA &#xADDC;&#xC81C; &#xC81C;&#xC548;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCC28;&#xB2E8; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC77C;&#xAD00; &#xB418; &#xAC8C;, PKA&#xC640; 14-3-3 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xBC0F; R18 &#xADDC;&#xC81C; &#xBC0F; &#xCD09;&#xB9E4; subunits dissociating &#xC5EC; PKA&#xB97C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, 14-3-3 heterodimers PKA holoenzyme &#xADDC;&#xC81C; &#xD558; &#xACE0;&#xC774; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xAD6C; &#xCDA9; &#xC81C; &#xC2E0;&#xD638; &#xBCC0;&#xC870;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4;.

14-3-3 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; &#xD65C;&#xB3D9; &#xBCC0;&#xC870; &#xC751;&#xB2F5; &#xC120;&#xD68C; &#xC131;&#xC7A5; &#xC6D0;&#xBFD4;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Conos de crecimiento regulan la velocidad y la direcci&oacute;n de extensi&oacute;n neuronal durante el desarrollo y regeneraci&oacute;n. C&oacute;mo el cono de crecimiento espacial y temporal regula las se&ntilde;ales de las se&ntilde;ales de orientaci&oacute;n es mal entendida. A trav&eacute;s de un an&aacute;lisis prote&oacute;mico de conos de crecimiento purificada identificamos isoformas de la familia de prote&iacute;nas adaptadoras de 14-3-3 como componentes importantes del cono de crecimiento. Interrupci&oacute;n de 14-3-3 por el antagonista R18 o ca&iacute;da de isoformas individuales de 14-3-3 interruptores repulsi&oacute;n de dependiente de la glicoprote&iacute;na asociada a la mielina y al factor de crecimiento nervioso a atracci&oacute;n en chick embrionario d&iacute;a 13 y d&iacute;a postnatal 5 rata DRG neuronas. Estos efectos son una reminiscencias de respuestas observadas en respuesta al elevado campo de conmutaci&oacute;n. Es fascinante, R18-dependiente de la conmutaci&oacute;n est&aacute; bloqueada por los inhibidores de la prote&iacute;na quinasa A (PKA), lo que sugiere que las prote&iacute;nas 14-3-3 regulan PKA. Constantemente, 14-3-3 prote&iacute;nas interact&uacute;an con PKA y R18 activa PKA por disociar sus subunidades reguladoras y catal&iacute;ticas. As&iacute;, 14-3-3 heterod&iacute;meros regulan la holoenzyme PKA y esta actividad juega un papel fundamental en la modulaci&oacute;n de las respuestas neuronales a se&ntilde;ales repelentes.

Article	Year
Disulfide exchange in domain 2 of CD4 is required for entry of HIV-1. Nature immunology\| PubMed ID: 12089508	2002
Disulfide exchange in CD4. BioFactors (Oxford, England)\| PubMed ID: 12897445	2003
Repeated cycles of rapid actin assembly and disassembly on epithelial cell phagosomes. Molecular biology of the cell\| PubMed ID: 15456901	2004
Actin-myosin network reorganization breaks symmetry at the cell rear to spontaneously initiate polarized cell motility. The Journal of cell biology\| PubMed ID: 17893245	2007
Sonic hedgehog guides axons through a noncanonical, Src-family-kinase-dependent signaling pathway. Neuron\| PubMed ID: 19447091	2009
Intracellular fluid flow in rapidly moving cells. Nature cell biology\| PubMed ID: 19767741	2009
Myosin II contributes to cell-scale actin network treadmilling through network disassembly. Nature\| PubMed ID: 20485438	2010
14-3-3 proteins regulate protein kinase a activity to modulate growth cone turning responses. The Journal of neuroscience : the official journal of the Society for Neuroscience\| PubMed ID: 20962227	2010

Patricia T. Yam

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