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Isolation of Labile Multi-protein Complexes by <em>in vivo</em> Controlled Cellular Cross-Linking and Immuno-magnetic Affinity Chromatography

The dynamic nature of cellular machineries is frequently built on transient and/or weak protein associations. These low affinity interactions preclude ...

Emory University

&#x9175;&#x6BCD;&#x548C;&#x52A8;&#x7269;&#x540C;&#x578B;&#x878D;&#x5408;&#x548C;&#x7A7A;&#x6CE1;&#x86CB;&#x767D;&#x6392;&#x5E8F; &#xFF08;&#x8DC3;&#x70B9;&#xFF09; &#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x5305;&#x542B;&#x5B88;&#x6052;&#x4E9A;&#x57FA;&#xFF0C;&#x4F46;&#x52A8;&#x7269;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x8DC3;&#x4EA4;&#x901A;&#x53EF;&#x80FD;&#x9700;&#x8981;&#x66F4;&#x591A;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC1;&#x660E; SPE 39 &#x540C;&#x7CFB;&#x7269;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x53EA;&#x5728;&#x52A8;&#x7269;&#x4E2D;&#x53D1;&#x73B0;&#xFF0C;&#x76EE;&#x524D;&#x5728; RAB5&#x3001; RAB7 &#x548C; RAB11 &#x9633;&#x6027; endosomes &#x4ED6;&#x4EEC;&#x53D1;&#x6325;&#x5B88;&#x6052;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x6EB6;&#x9176;&#x4F53;&#x4F20;&#x9012;&#xFF0C;&#x5E76;&#x53EF;&#x80FD;&#x901A;&#x8FC7;&#x5176;&#x4E3A;&#x6838;&#x5FC3;&#x7684;&#x4EA4;&#x4E92;&#x529F;&#x80FD;&#x5564;&#x9152;&#x82B1;&#x590D;&#x6742;&#x3002;&#x79C0;&#x4E3D;&#x9690;&#x6746;&#x7EBF;&#x866B; spe 39 &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x88AB;&#x6700;&#x521D;&#x8BA4;&#x5B9A;&#x5F02;&#x5E38;&#x6C34;&#x75B1;&#x751F;&#x7269;&#x53D1;&#x751F;&#x5728;&#x7CBE;&#x5B50;&#x53D1;&#x751F;&#x8FC7;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7A81;&#x53D8;&#x8FD8;&#x6270;&#x4E71;&#x4E86; endocytosed &#x86CB;&#x767D;&#x5728;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x4F53;&#x8154;&#x4E2D;&#x7684;&#x5904;&#x7406;&#x3002;C.&#x7EBF;&#x866B; SPE 39 &#x4EA4;&#x4E92;&#x4F53;&#x5916;&#x4E0E; VPS33A &#x548C; VPS33B&#xFF0C;&#x800C; VPS33B &#x7684; RNA &#x5E72;&#x6270;&#x5BFC;&#x81F4; spe-39 &#x6837;&#x751F;&#x7CBE;&#x529F;&#x80FD;&#x7F3A;&#x9677;&#x3002;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7684; SPE 39 orthologue C14orf133 &#x8FD8;&#x4E0E; VPS33 &#x540C;&#x7CFB;&#x7269;&#x548C; coimmunoprecipitates &#x548C; cosediments &#x4E0E;&#x5176;&#x4ED6;&#x8DC3;&#x4E9A;&#x57FA;&#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#x3002;SPE 39 &#x7EC4;&#x5408;&#x5F0F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6539;&#x53D8;&#x5F62;&#x6001;&#x7684; syntaxin 7-&#x3001; syntaxin 8-&#x548C; syntaxin 13 &#x9633;&#x6027; endosomes&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5F71;&#x54CD;&#x4E0E;&#x5EF6;&#x8FDF;&#x7518;&#x9732;&#x7CD6; 6-&#x78F7;&#x9178;&#x53D7;&#x4F53;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; D &#x4EA4;&#x4ED8;&#x548C;&#x5185;&#x5728;&#x5316;&#x8868;&#x76AE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x53D7;&#x4F53;&#x9000;&#x5316;&#x540C;&#x65F6;&#x53D1;&#x751F;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x5EFA;&#x7ACB; SPE 39 &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x662F;&#x6EB6;&#x9176;&#x4F53;&#x4EA4;&#x4ED8;&#x4EE5;&#x524D;&#x65E0;&#x6CD5;&#x8BC6;&#x522B;&#x7684;&#x8C03;&#x8282;&#x5668;&#x548C;&#x8BE5;&#x7EBF;&#x866B;&#x7CBE;&#x5B50;&#x53D1;&#x751F;&#x662F;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x786E;&#x5B9A;&#x5B88;&#x6052;&#x76D1;&#x7BA1;&#x673A;&#x6784;&#x7684;&#x540E;&#x751F;&#x6EB6;&#x9176;&#x4F53;&#x751F;&#x7269;&#x53D1;&#x751F;&#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x3002;

SPE 39 &#x5BB6;&#x65CF;&#x86CB;&#x767D;&#x4E0E;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x8DC3;&#x70B9;&#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#x548C;&#x5728;&#x6EB6;&#x9176;&#x4F53;&#x7684;&#x4F20;&#x9012;&#x51FD;&#x6570;&#x3002;

Yeast and animal homotypic fusion and vacuole protein sorting (HOPS) complexes contain conserved subunits, but HOPS-mediated traffic in animals might require additional proteins. Here, we demonstrate that SPE-39 homologues, which are found only in animals, are present in RAB5-, RAB7-, and RAB11-positive endosomes where they play a conserved role in lysosomal delivery and probably function via their interaction with the core HOPS complex. Although Caenorhabditis elegans spe-39 mutants were initially identified as having abnormal vesicular biogenesis during spermatogenesis, we show that these mutants also have disrupted processing of endocytosed proteins in oocytes and coelomocytes. C. elegans SPE-39 interacts in vitro with both VPS33A and VPS33B, whereas RNA interference of VPS33B causes spe-39-like spermatogenesis defects. The human SPE-39 orthologue C14orf133 also interacts with VPS33 homologues and both coimmunoprecipitates and cosediments with other HOPS subunits. SPE-39 knockdown in cultured human cells altered the morphology of syntaxin 7-, syntaxin 8-, and syntaxin 13-positive endosomes. These effects occurred concomitantly with delayed mannose 6-phosphate receptor-mediated cathepsin D delivery and degradation of internalized epidermal growth factor receptors. Our findings establish that SPE-39 proteins are a previously unrecognized regulator of lysosomal delivery and that C. elegans spermatogenesis is an experimental system useful for identifying conserved regulators of metazoan lysosomal biogenesis.

SPE-39 family proteins interact with the HOPS complex and function in lysosomal delivery.

Fusion de levure et des animaux homotypique et tri des prot&#xE9;ines vacuole (HOUBLON) complexes contiennent des sous-unit&#xE9;s conserv&#xE9;es, mais HOUBLON m&#xE9;di&#xE9;e par la circulation chez les animaux pourraient avoir besoin de prot&#xE9;ines suppl&#xE9;mentaires. Ici, nous d&#xE9;montrons que SPE-39 homologues, qui ne se trouvent que chez les animaux, sont pr&#xE9;sents dans Rab5-, Rab7-, et Rab11 positif endosomes o&#xF9; ils jouent un r&#xF4;le conserv&#xE9;e dans la prestation des lysosomes et probablement la fonction via leur interaction avec le noyau HOUBLON complexe. Bien que Caenorhabditis elegans mutants spe-39 ont &#xE9;t&#xE9; initialement identifi&#xE9;s comme ayant biogen&#xE8;se v&#xE9;siculaire anormale au cours de la spermatogen&#xE8;se, nous montrons que ces mutants ont &#xE9;galement perturb&#xE9; le traitement des prot&#xE9;ines endocytose dans les ovocytes et coelomocytes. C. elegans SPE-39 interagit in vitro avec deux VPS33A et VPS33B, tandis que l&#x26;#39;ARN interf&#xE9;rence des VPS33B cause des d&#xE9;fauts de la spermatogen&#xE8;se SPE-39-comme. L&#x26;#39;&#xEA;tre humain SPE-39 orthologue C14orf133 interagit &#xE9;galement avec VPS33 homologues et les deux coimmunoprecipitates et cosediments avec sous-unit&#xE9;s HOUBLON autres. SPE-39 effet de choc dans des cultures de cellules humaines a modifi&#xE9; la morphologie de la syntaxine 7 -, la syntaxine 8 -, et la syntaxine 13-positif endosomes. Ces effets sont survenus de fa&#xE7;on concomitante avec la livraison retard&#xE9;e m&#xE9;di&#xE9;e par le r&#xE9;cepteur du mannose-6-phosphate cathepsine D et la d&#xE9;gradation des r&#xE9;cepteurs internalis&#xE9;s &#xE9;pidermiques de facteur de croissance. Nos r&#xE9;sultats &#xE9;tablissent que SPE-39 prot&#xE9;ines sont un r&#xE9;gulateur pr&#xE9;c&#xE9;demment non reconnu de la livraison des lysosomes et que la spermatogen&#xE8;se C. elegans est un syst&#xE8;me exp&#xE9;rimental utile pour identifier des r&#xE9;gulateurs conserv&#xE9;s de m&#xE9;tazoaires biogen&#xE8;se lysosomale.

SPE-39 prot&#xE9;ines de la famille interagir avec le complexe HOUBLON et fonction dans la prestation de lysosomale

Hefe und tierischen homotypischen Fusion und Vakuole Protein sortieren (HOPS)-komplexe enthalten konservierte Untereinheiten Hopfen-vermittelten Verkehr bei Tieren erfordern m&ouml;glicherweise zus&auml;tzliche Proteine Hier zeigen wir, dass SPE-39 Homologen, die nur bei Tieren gefunden werden, in RAB5 - RAB7- und RAB11-positiven Endosomen sind, wo sie eine Rolle konservierten lysosomale Lieferung und wahrscheinlich Hopfen Funktion durch ihre Interaktion mit der zentralen Komplex. Obwohl Caenorhabditis Elegans Spe-39 Mutanten zun&auml;chst als Benutzer abnorme vesikul&auml;ren Biogenese w&auml;hrend der Spermatogenese identifiziert wurden, zeigen wir, dass diese Mutanten auch Verarbeitung Endocytosed Proteine in Oozyten und Coelomocytes gest&ouml;rt haben. C. Elegans SPE-39 interagiert mit VPS33A und VPS33B, in-vitro, w&auml;hrend die RNA-Interferenz der VPS33B Spe-39-wie Spermatogenese M&auml;ngel verursacht. Die menschliche SPE-39 Orthologue C14orf133 interagiert auch mit VPS33 Homologen, Coimmunoprecipitates und Cosediments mit anderen Hopfen-Untereinheiten. SPE-39 Niederschlag in kultivierten menschlichen Zellen ver&auml;ndert die Morphologie von Syntaxin 7 - Syntaxin 8- und Syntaxin 13-positivem Endosomen. Diese Effekte aufgetreten begleitend mit verz&ouml;gerten Mannose-6-Phosphat-Rezeptor-vermittelten Kathepsin D Lieferung und Verschlechterung der verinnerlichten epidermalen Wachstumsfaktor-Rezeptoren. Unsere Ergebnisse belegen, dass die SPE-39-Proteine sind ein zuvor unbekannter Regulator der lysosomalen Lieferung und die Spermatogenese C. Elegans ist ein experimentelles System n&uuml;tzlich zum Identifizieren von konservierten Regulators der indem lysosomale Biogenese.

SPE-39 Familie Proteine interagieren mit der komplexen Hopfen und in lysosomale Lieferung.

Animale homotypic proteina di fusione e vacuolo ordinamento complessi (luppolo) e lievito contengono subunit&agrave; conservate, ma traffico luppolo-mediata negli animali potrebbe richiedere ulteriori proteine. Qui, ci dimostrano che SPE-39 omologhi, che si trovano solo negli animali, sono presenti in RAB5, RAB7 ed endosomes RAB11-positivi, dove svolgono un ruolo conservato in consegna lisosomiale e probabilmente luppolo complessa funzione attraverso la loro interazione con il nucleo. Sebbene Caenorhabditis elegans spe-39 mutanti furono inizialmente identificati come avendo biogenesi vescicolare anomala durante la spermatogenesi, ci mostrano che anche questi mutanti hanno interrotto elaborazione delle proteine endocytosed di ovociti e coelomocytes. C. elegans SPE-39 interagisce in vitro con VPS33A e VPS33B, considerando che l&#39;interferenza del RNA di VPS33B provoca spermatogenesi spe-39-come difetti. L&#39;umana SPE-39 orthologue C14orf133 interagisce anche con omologhi VPS33 e coimmunoprecipitates e cosediments con altre subunit&agrave; di luppolo. SPE-39 atterramento in cellule umane coltivate alterato la morfologia di Sintaxina 7-, Sintaxina 8- e Sintaxina 13-positivo endosomes. Questi effetti si sono verificati simultaneamente con ritardo mannosio 6-fosfato-mediata dal recettore catepsina D consegna e degradazione dei recettori del fattore di crescita epidermico interiorizzata. I nostri risultati stabiliscono che le proteine SPE-39 sono un regolatore precedentemente non riconosciuto di consegna lisosomiale e quello spermatogenesi di c. elegans sono un sistema sperimentale di utile per identificare conservati regolatori di metazoi biogenesi lisosomiale.

SPE-39 famiglie proteine interagiscono con il luppolo complesse e funzionano in consegna lisosomiale.

&#x9175;&#x6BCD;&#x3084;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x540C;&#x578B;&#x878D;&#x5408;&#x3068;&#x6DB2;&#x80DE;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30BD;&#x30FC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#xFF08;HOPS&#xFF09;&#x932F;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x542B;&#x3093;&#x3067;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;HOPS&#x5A92;&#x4ECB;&#x30C8;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x306F;&#x8FFD;&#x52A0;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x304C;&#x30B3;&#x30A2;&#x306F;&#x30DB;&#x30C3;&#x30D7;&#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30EA;&#x30BD;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x914D;&#x4FE1;&#x3001;&#x304A;&#x305D;&#x3089;&#x304F;&#x95A2;&#x6570;&#x5185;&#x3067;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x5834;&#x6240;&#x3060;&#x3051;&#x306E;&#x52D5;&#x7269;&#x3067;&#x767A;&#x898B;&#x3055;&#x308C;&#x305F;SPE-39&#x30DB;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B0;&#x304C;&#x3001;Rab5&#x306E; - &#x3001;RAB7-&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;Rab11&#x306F;&#x967D;&#x6027;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x5185;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3059;&#x308B;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x3002;&#x7DDA;&#x866B;&#xFF08;Caenorhabditis elegans&#xFF09;SPE-39&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x6700;&#x521D;&#x306B;&#x7CBE;&#x5B50;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x7570;&#x5E38;&#x306A;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306E;&#x751F;&#x5408;&#x6210;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x3082;&#x306E;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x304A;&#x3088;&#x3073;coelomocytes&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x51E6;&#x7406;&#x3092;&#x4E2D;&#x65AD;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; VPS33B&#x306E;RNA&#x5E72;&#x6E09;&#x306F;&#x3001;SPE-39&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x4E00;&#x65B9;&#x3001;C. elegans&#x306E;SPE-39&#x306F;&#x3001;VPS33A&#x3068;VPS33B&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3092;in vitro&#x3067;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;SPE-39&#x30AA;&#x30EB;&#x30BD;&#x30ED;&#x30B0;C14orf133&#x3082;VPS33&#x540C;&#x65CF;&#x4F53;&#x3068;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3057;coimmunoprecipitates&#x3068;&#x4ED6;&#x306E;&#x30DB;&#x30C3;&#x30D7;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;cosediments&#x4E21;&#x65B9;&#x3002; &#x3001;&#x30B7;&#x30F3;&#x30BF;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3; -  8  - &#x30D2;&#x30C8;&#x57F9;&#x990A;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;SPE-39&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30F3;&#x30BF;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3;7&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3057;&#x3001;&#x30B7;&#x30F3;&#x30BF;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3;13&#x6B63;&#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x306F;&#x5185;&#x9762;&#x4E0A;&#x76AE;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x9045;&#x5EF6;&#x30DE;&#x30F3;&#x30CE;&#x30FC;&#x30B9;-6  - &#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x30AB;&#x30C6;&#x30D7;&#x30B7;&#x30F3;D&#x306E;&#x914D;&#x4FE1;&#x3084;&#x52A3;&#x5316;&#x306B;&#x4ED8;&#x968F;&#x3057;&#x3066;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x3067;&#x306F;&#x3001;SPE-39&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x30EA;&#x30BD;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x914D;&#x4FE1;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x7DDA;&#x866B;C. elegans&#x306E;&#x7CBE;&#x5B50;&#x5F62;&#x6210;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x8A8D;&#x8B58;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x3067;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x5F8C;&#x751F;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x30EA;&#x30BD;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x751F;&#x5408;&#x6210;&#x306E;&#x4FDD;&#x5B58;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6709;&#x7528;&#x306A;&#x5B9F;&#x9A13;&#x7CFB;&#x3067;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

SPE-39&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x30EA;&#x30BD;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x8F38;&#x9001;&#x306E;HOPS&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;

&#xD6A8; &#xBAA8;&#xC640; &#xB3D9;&#xBB3C; homotypic &#xD4E8;&#xC804;&#xACFC; &#xACF5;&#xD3EC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (&#xD649;) &#xB2E8;&#xC9C0; &#xC815;&#xB82C; &#xD3EC;&#xD568; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; subunits &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xD649;-&#xC911;&#xC7AC; &#xD2B8;&#xB798;&#xD53D;&#xC744; &#xCD94;&#xAC00; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xD544;&#xC694;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xB9CC; &#xC788;&#xB294; SPE-39 homologues, RAB5, RAB7 &#xBC0F; RAB11 &#xC591;&#xC131; endosomes lysosomal &#xBC30;&#xB2EC;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xC874; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD558; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC544;&#xB9C8; &#xD568;&#xC218;&#xB294; &#xCF54;&#xC5B4;&#xC640;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xD649;&#xC5D0; &#xC874;&#xC7AC; &#xD558;&#xB294; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. Caenorhabditis elegans spe-39 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; spermatogenesis &#xB3D9;&#xC548; &#xBE44;&#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xAE30;&#xACF5;&#xC744; &#xC18D;&#xC73C;&#xB85C; &#xCC98;&#xC74C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xB610;&#xD55C; oocytes &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; coelomocytes&#xC758; endocytosed &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xCC98;&#xB9AC; &#xC911;&#xB2E8;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC18;&#xBA74; vps33b&#xC758; RNA &#xAC04;&#xC12D; &#xD558;&#xBA74; spe 39 &#xAC19;&#xC740; spermatogenesis &#xACB0;&#xD568; C. elegans SPE-39 vps33a&#xC640; VPS33B, &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC791;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC778;&#xAC04;&#xC758; SPE-39 orthologue C14orf133 VPS33 homologues coimmunoprecipitates&#xC640; cosediments &#xB2E4;&#xB978; &#xD649; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704;&#xC640;&#xB3C4; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. SPE-39 &#xCD5C;&#xC800;&#xC758; &#xACBD;&#xC791;&#xB41C; &#xD55C; &#xC778;&#xAC04; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; syntaxin 7-, syntaxin 8-syntaxin 13-&#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC778; endosomes&#xC758; &#xD615;&#xD0DC;&#xB97C; &#xBCC0;&#xACBD;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD6A8;&#xACFC; concomitantly &#xC9C0;&#xC5F0;&#xB41C; &#xC2A4; 6 &#xC778;&#xC0B0; &#xC5FC; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;-&#xC911;&#xC7AC; cathepsin D &#xC804;&#xB2EC;&#xACFC; &#xB0B4; &#xBA74;&#xB41C; &#xD45C; &#xD53C; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xC131;&#xB2A5; &#xC800;&#xD558; &#xBC1C;&#xC0DD;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC218;&#xB9BD; SPE 39 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; lysosomal &#xBC30;&#xB2EC; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC778;&#xC2DD; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;&#xB294; &#xADF8; C. elegans spermatogenesis&#xC740; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC801;&#xC778; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; metazoan lysosomal &#xC18D;&#xC758; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC720;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

SPE-39 &#xAC00;&#xC871; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD649; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xBC0F; lysosomal &#xBC30;&#xB2EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC791;&#xB3D9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La levadura de fusi&#xF3;n y de los animales y la clasificaci&#xF3;n de prote&#xED;nas homotipica vacuola (saltos) complejos contienen subunidades conservadas, pero los saltos mediada por el tr&#xE1;fico de animales podr&#xED;a requerir prote&#xED;nas adicionales. Aqu&#xED;, nos demuestran que la SPE-39 hom&#xF3;logos, que se encuentran s&#xF3;lo en los animales, est&#xE1;n presentes en Rab5, Rab7, y Rab11 positiva endosomas donde juegan un papel conservado en la prestaci&#xF3;n de la funci&#xF3;n lisosomal y probablemente a trav&#xE9;s de su interacci&#xF3;n con el n&#xFA;cleo L&#xDA;PULO compleja. A pesar de Caenorhabditis elegans espe-39 mutantes fueron identificados inicialmente como teniendo la biog&#xE9;nesis vesicular anormal durante la espermatog&#xE9;nesis, se demuestra que estos mutantes tambi&#xE9;n han interrumpido el procesamiento de las prote&#xED;nas endocytosed en ovocitos y coelomocytes. C. elegans SPE-39 interact&#xFA;a in vitro con tanto VPS33A y VPS33B, mientras que la interferencia de ARN de VPS33B causa espe-39-como los defectos de la espermatog&#xE9;nesis. El ser humano SPE-39 orthologue C14orf133 tambi&#xE9;n interact&#xFA;a con VPS33 hom&#xF3;logos y ambos coimmunoprecipitates y cosediments con subunidades L&#xDA;PULO otros. SPE-39 ca&#xED;da en cultivos de c&#xE9;lulas humanas alter&#xF3; la morfolog&#xED;a de syntaxin 7 -, syntaxin 8 -, y endosomas syntaxin 13-positivo. Estos efectos se produjeron de forma concomitante con retraso manosa-6-fosfato entrega mediada por el receptor catepsina D y la degradaci&#xF3;n de internalizadas receptores del factor de crecimiento epid&#xE9;rmico. Nuestros resultados se&#xF1;alan que los SPE-39 prote&#xED;nas son un regulador de la prestaci&#xF3;n no reconocida previamente lisosomal y que la espermatog&#xE9;nesis C. elegans es un sistema experimental &#xFA;til para la identificaci&#xF3;n de los reguladores de la biog&#xE9;nesis de los metazoos conservadas lisosomal.

SPE-39, la familia de prote&#xED;nas interact&#xFA;an con el complejo L&#xDA;PULO y funci&#xF3;n en el suministro de Lisosomal

&#x5927;&#x8863;&#x5B9A;&#x4E49;&#x82BD;&#x4ECE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5668;&#x7684;&#x8F7D;&#x4F53;&#x7684;&#x7EC4;&#x6210;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x5916;&#x5957;&#x819C;&#x7CFB;&#x7EF3;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x6C34;&#x75B1;&#x878D;&#x5408;&#x4E0E;&#x4EA4;&#x4E92;&#x3002;&#x9175;&#x6BCD; AP-3 &#xFF08;&#x9002;&#x914D;&#x5668;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x590D;&#x6742; 3) &#x5916;&#x5957;&#x548C;&#x7C7B; C Vps/&#x8DC3;&#x70B9;&#x6570; &#xFF08;&#x540C;&#x578B;&#x878D;&#x5408;&#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x6392;&#x5E8F;&#xFF09; &#x7CFB;&#x7EF3;&#x6309;&#x7167;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6A21;&#x5F0F;&#x53CA;&#x5176;&#x4EA4;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x53D1;&#x751F;&#x5728;&#x627F;&#x8FD0;&#x4EBA;&#x7684;&#x878D;&#x5408;&#x6B65;&#x9AA4;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269; Vps &#x7C7B; C/&#x8DC3;&#x4E9A;&#x57FA;&#x548C;&#x7F51;&#x683C;&#x86CB;&#x767D;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x548C;&#x6025;&#x6027;&#x6444;&#x52A8;&#x7F51;&#x683C;&#x86CB;&#x767D;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x6270;&#x4E71;&#x7684; Vps &#x7C7B; C/&#x8DC3;&#x70B9;&#x6570;&#x951A;&#x7D22;&#x5728;&#x4E24;&#x6781;&#x5206;&#x5316;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C; HEK293T endosomal &#x5206;&#x5E03;&#x3002;Vps &#x7C7B; C/&#x8DC3;&#x4E9A;&#x57FA;&#x4E0E;&#x7F51;&#x683C;&#x86CB;&#x767D;&#x5B58;&#x5728;&#x4E8E; AP 3 &#x6216;&#x809D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x53D7;&#x4F53;&#x5E95;&#x7269; (Hrs) &#x4E0E;&#x590D;&#x6742;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;Vps &#x7C7B; C/&#x8DC3;&#x70B9;&#x6570;&#x86CB;&#x767D; cofractionate &#x4E0E;&#x7F51;&#x683C;&#x86CB;&#x767D;&#x6D82;&#x5C42;&#x7684;&#x6C34;&#x6CE1;&#xFF0C;&#x6CA1;&#x6709;&#x5C0F;&#x65F6;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684; FK506 &#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D; (FKBP)-&#x5D4C;&#x5408;&#x4F53;&#x8F7B;&#x94FE;&#x7F51;&#x683C;&#x86CB;&#x767D;&#x6291;&#x5236;&#x7F51;&#x683C;&#x86CB;&#x767D;&#x819C;&#x534F;&#x4F1A;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#xFF0C;&#x589E;&#x52A0; Vps &#x7C7B; C/&#x8DC3;&#x4E9A;&#x57FA; rab5 endosomal &#x8F66;&#x53A2;&#x5185;&#x7684;&#x5185;&#x5BB9;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;Vps &#x7C7B; C/&#x8DC3;&#x4E9A;&#x57FA;&#x90FD;&#x96C6;&#x4E2D;&#x5728;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7A81;&#x8D77;&#x7684;&#x63D0;&#x793A;&#x548C;&#x8FD0;&#x8F7D;&#x4E86;&#x53D7;&#x635F; FKBP &#x7F51;&#x683C;&#x86CB;&#x767D;&#x5D4C;&#x5408;&#x4F53;&#x548C; AP20187 &#x5B75;&#x5316;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x652F;&#x6301;&#x7684;&#x6A21;&#x578B;&#x4E2D;&#x7684; Vps &#x7C7B; C/&#x8DC3;&#x4E9A;&#x57FA;&#x7EB3;&#x5165;&#x7F51;&#x683C;&#x86CB;&#x767D;&#x6D82;&#x5C42; endosomal &#x57DF;&#x548C;&#x5728;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x627F;&#x8FD0;&#x4EBA;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x6C34;&#x6CE1; (AP-3) &#x548C; nonvesicular (Hrs) &#x7F51;&#x683C;&#x86CB;&#x767D;&#x673A;&#x5236;&#x9694;&#x79BB;&#x7C7B; C Vps/&#x8DC3;&#x7CFB;&#x7EF3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5668;&#x548C;&#x8F74;&#x627F;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x4F53;&#x7CFB;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x57DF;&#x3002;

&#x7F51;&#x683C;&#x86CB;&#x767D;&#x4F9D;&#x8D56;&#x673A;&#x5236;&#x8C03;&#x8282;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6781;&#x6027;&#x548C;&#x65E0;&#x6781;&#x6027;&#x7C7B; C Vps/&#x8DC3;&#x7CFB;&#x7EF3;&#x4E9A;&#x57FA;&#x7684;&#x4E9A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5E03;&#x3002;

Coats define the composition of carriers budding from organelles. In addition, coats interact with membrane tethers required for vesicular fusion. The yeast AP-3 (Adaptor Protein Complex 3) coat and the class C Vps/HOPS (HOmotypic fusion and Protein Sorting) tether follow this model as their interaction occurs at the carrier fusion step. Here we show that mammalian Vps class C/HOPS subunits and clathrin interact and that acute perturbation of clathrin function disrupts the endosomal distribution of Vps class C/HOPS tethers in HEK293T and polarized neuronal cells. Vps class C/HOPS subunits and clathrin exist in complex with either AP-3 or hepatocyte growth factor receptor substrate (Hrs). Moreover, Vps class C/HOPS proteins cofractionate with clathrin-coated vesicles, which are devoid of Hrs. Expression of FK506 binding protein (FKBP)-clathrin light chain chimeras, to inhibit clathrin membrane association dynamics, increased Vps class C/HOPS subunit content in rab5 endosomal compartments. Additionally, Vps class C/HOPS subunits were concentrated at tips of neuronal processes, and their delivery was impaired by expression of FKBP-clathrin chimeras and AP20187 incubation. These data support a model in which Vps class C/HOPS subunits incorporate into clathrin-coated endosomal domains and carriers in mammalian cells. We propose that vesicular (AP-3) and nonvesicular (Hrs) clathrin mechanisms segregate class C Vps/HOPS tethers to organelles and domains of mammalian cells bearing complex architectures.

Clathrin-dependent mechanisms modulate the subcellular distribution of class C Vps/HOPS tether subunits in polarized and nonpolarized cells.

Manteaux de d&#xE9;finir la composition des supports en herbe des organites. En outre, manteaux interagir avec attaches membranaires n&#xE9;cessaires &#xE0; la fusion v&#xE9;siculaire. La levure AP-3 (complexe prot&#xE9;ine adaptateur 3) manteau et les Vps classe C / HOUBLON (fusion homotypique et tri des prot&#xE9;ines) d&#x26;#39;attache de suivre ce mod&#xE8;le que leur interaction se produit &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;tape de fusion transporteur. Ici, nous montrons que les mammif&#xE8;res les vice-pr&#xE9;sidents de classe C / HOUBLON sous-unit&#xE9;s et d&#x26;#39;interagir clathrine et que la perturbation aigu&#xEB; de la fonction clathrine perturbe la distribution endosomal de VPS de classe C / HOUBLON attaches dans HEK293T et polaris&#xE9;e des cellules neuronales. Vps classe C / sous-unit&#xE9;s et HOUBLON clathrine existent dans un complexe avec soit AP-3 ou h&#xE9;patocytes substrat r&#xE9;cepteur du facteur de croissance (heures). En outre, les vice-pr&#xE9;sidents de classe C / HOUBLON prot&#xE9;ines cofractionate avec recouvertes de clathrine des v&#xE9;sicules, qui sont d&#xE9;pourvues de Hrs. Expression de la prot&#xE9;ine de fixation FK506 (FKBP)-clathrine chim&#xE8;res de cha&#xEE;nes l&#xE9;g&#xE8;res, pour inhiber la clathrine dynamique membranaire association, a augment&#xE9; Vps classe de contenu sous-unit&#xE9; C / houblon dans Rab5 endosomes. En outre, les vice-pr&#xE9;sidents de classe C / HOUBLON sous-unit&#xE9;s ont &#xE9;t&#xE9; concentr&#xE9;es &#xE0; l&#x26;#39;extr&#xE9;mit&#xE9; des processus neuronaux, et leur prestation &#xE9;tait affaiblie par l&#x26;#39;expression de FKBP-clathrine chim&#xE8;res et AP20187 d&#x26;#39;incubation. Ces donn&#xE9;es appuient un mod&#xE8;le dans lequel les vice-pr&#xE9;sidents de classe C / HOUBLON sous-unit&#xE9;s incorporer dans recouvertes de clathrine domaines des endosomes et les transporteurs dans les cellules de mammif&#xE8;res. Nous proposons que v&#xE9;siculaires (AP-3) et (nonvesicular heures) les m&#xE9;canismes de la s&#xE9;gr&#xE9;gation de classe clathrine Vps C / HOUBLON attaches aux organites et des domaines de cellules de mammif&#xE8;res portant des architectures complexes.

D&#xE9;pendante de la clathrine M&#xE9;canismes moduler la distribution subcellulaire de la classe C VPS / sous-unit&#xE9;s d&#x26;#39;attache HOUBLON dans des cellules polaris&#xE9;es et non polaris&#xE9;es

M&auml;ntel definieren die Zusammensetzung der Fluggesellschaften, die Knospen von Organellen. Dar&uuml;ber hinaus interagieren Jacken mit Membran Anbindehaltung f&uuml;r vesikul&auml;re Fusion ben&ouml;tigt. Die Hefe AP-3 (Adaptor Protein Complex 3) Fell und die Klasse C Vps/Hopfen (homotypischen Fusion und Protein Sorting) Leine Folgen dieses Modell, wie ihre Interaktion beim Frachtf&uuml;hrer Fusion Schritt erfolgt. Hier zeigen wir, dass S&auml;ugetier-Vps-Klasse C/Hopfen-Untereinheiten und Clathrin interagieren und akute St&ouml;rung der Clathrin-Funktion die Endosomen Verteilung Vps-Klasse C/Hopfen Anbindehaltung in HEK293T und polarisierte Nervenzellen st&ouml;rt. VPS-Klasse C/Hopfen-Untereinheiten und Clathrin existieren im Komplex mit AP-3 oder Hepatozyten-Wachstumsfaktor-Rezeptor Substrat (Hrs). Dar&uuml;ber hinaus Vps-Klasse C/Hopfen Proteine mit Clathrin-coated Vesikel, die frei von Std. Ausdruck FK506 verbindliches Protein (FKBP) sind cofractionate-Clathrin Leichtketten Chim&auml;ren, Clathrin Membrandynamik Verband, hemmen erh&ouml;ht Vps-Klasse C/Hopfen Untereinheit Inhalt in rab5 Endosomen F&auml;cher. Dar&uuml;ber hinaus Vps-Klasse C/Hopfen Untereinheiten wurden konzentriert an Spitzen der neuronalen Prozessen und ihrer Ablieferung durch Ausdruck FKBP-Clathrin Chim&auml;ren und AP20187 Inkubation beeintr&auml;chtigt wurde. Diese Daten unterst&uuml;tzen ein Modell in der Vps Klasse C/Hopfen-Untereinheiten in Endosomen Clathrin-coated Dom&auml;nen und Tr&auml;ger in den S&auml;ugetier-Zellen integrieren. Wir schlagen vor, vesikul&auml;re (AP-3) und nonvesicular (Hrs) Clathrin Mechanismen Klasse C Vps/Hopfen Anbindehaltung Organellen und Dom&auml;nen der S&auml;ugetier-Zellen mit komplexe Architekturen trennen.

Clathrin-abh&auml;ngige Mechanismen modulieren die subzellul&auml;re Verteilung der Klasse C Vps/Hopfen Leine Untereinheiten in polarisierten und Nichtpolarisierter Zellen.

Cappotti definiscono la composizione dei vettori in erba da organelli. Inoltre, cappotti interagiscano con membrana pastoie necessarie per la fusione vescicolare. Il cappotto di AP-3 (adattatore proteina complessa 3) di lievito e il classe C Vps/luppolo (HOmotypic fusion e proteina ordinamento) tether seguire questo modello come la loro interazione si verifica in fase di fusione il vettore. Qui vi mostriamo che mammiferi Vps classe C/luppolo subunit&agrave; e clatrina interagiscono e che acuta perturbazione della funzione clatrina sconvolge la distribuzione endosomal di Vps classe C/luppolo attacchi HEK293T e polarizzate cellule neuronali. Clatrina e Vps subunit&agrave; di classe C/luppolo esiste nel complesso con AP-3 o del hepatocyte growth factor receptor substrato (Hrs). Inoltre, le proteine di Vps classe C/luppolo cofractionate con vescicole rivestite di clatrina, che sono privi di proteina Hrs. espressione di FK506 (FKBP)-chimere catena leggera clatrina, per inibire la clatrina dinamiche di associazione di membrana, aumentato Vps classe contenuto subunit&agrave; C/luppolo rab5 endosomal compartimenti. Inoltre, Vps subunit&agrave; di classe C/luppolo erano concentrate a suggerimenti dei processi neuronali, e loro consegna &egrave; stato alterato dall&#39;espressione di FKBP-Clatrina chimere e AP20187 di incubazione. Questi dati supportano un modello nel quale Vps subunit&agrave; C/luppolo classe incorporare nei domini endosomal rivestite da Clatrina e vettori in cellule di mammifero. Proponiamo che vescicolare (AP-3) e nonvesicular (Hrs) Clatrina meccanismi segregano pastoie C Vps/luppolo classe organelli e domini delle cellule di mammiferi cuscinetto architetture complesse.

Meccanismi di Clatrina dipendente modulano la distribuzione sottocellulare di classe C Vps/luppolo tether subunit&agrave; in cellule polarizzate e non polarizzate.

&#x30B3;&#x30FC;&#x200B;&#x200B;&#x30C8;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x5C0F;&#x5668;&#x5B98;&#x304B;&#x3089;&#x51FA;&#x82BD;&#x30AD;&#x30E3;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x69CB;&#x6210;&#x3092;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C8;&#x306F;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x819C;&#x30C6;&#x30B6;&#x30FC;&#x3068;&#x5BFE;&#x8A71;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x304C;&#x30AD;&#x30E3;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x9175;&#x6BCD;&#x306E;AP-3&#xFF08;&#x30A2;&#x30C0;&#x30D7;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;3&#xFF09;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C8;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;C VPS / HOPS&#xFF08;&#x30DB;&#x30E2;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x878D;&#x5408;&#x3068;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x9078;&#x5225;&#xFF09;&#x30C6;&#x30B6;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306B;&#x5F93;&#x3063;&#x3066;&#x304F;&#x3060;&#x3055;&#x3044;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;VPS&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;C / HOPS&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3057;&#x3001;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x95A2;&#x6570;&#x3068;&#x6025;&#x6027;&#x6442;&#x52D5;&#x306F;HEK293T&#x3068;&#x504F;&#x5149;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;VP&#x306F;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;C / HOPS&#x30C6;&#x30B6;&#x30FC;&#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x5206;&#x5E03;&#x3092;&#x4E71;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; VPS&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;C / HOPS&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;AP-3&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x809D;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x56E0;&#x5B50;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x57FA;&#x8CEA;&#xFF08;HRS&#xFF09;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x3068;&#x306E;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6642;&#x9593;&#x3092;&#x6B20;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x88AB;&#x8986;&#x5C0F;&#x80DE;&#x3068;&#x306E;cofractionate&#x307E;&#x305F;&#x3001;VPS&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;C / HOPS&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3002;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x819C;&#x95A2;&#x9023;&#x306E;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;FK506&#x7D50;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;FKBP&#xFF09; - &#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x8EFD;&#x9396;&#x30AD;&#x30E1;&#x30E9;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;Rab5&#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x533A;&#x753B;&#x3067;&#x306E;VP&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;C / HOPS&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x542B;&#x6709;&#x91CF;&#x304C;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;VPS&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;C / HOPS&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x7A81;&#x8D77;&#x306E;&#x5148;&#x7AEF;&#x306B;&#x96C6;&#x4E2D;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x914D;&#x4FE1;&#x306F;FKBP-&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AD;&#x30E1;&#x30E9;&#x3068;AP20187&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30E5;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x640D;&#x306A;&#x308F;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;VPS&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;C / HOPS&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x304C;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x88AB;&#x8986;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3084;&#x30AD;&#x30E3;&#x30EA;&#x30A2;&#x306B;&#x7D44;&#x307F;&#x8FBC;&#x3080;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x5C0F;&#x80DE;&#xFF08;AP-3&#xFF09;&#x3068;&#x975E;&#x5C0F;&#x80DE;&#x6027;&#x306E;&#xFF08;&#x6642;&#x9593;&#xFF09;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;C VPS&#x3092;&#x5206;&#x96E2;/&#x7D30;&#x80DE;&#x5C0F;&#x5668;&#x5B98;&#x3068;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x30A2;&#x30FC;&#x30AD;&#x30C6;&#x30AF;&#x30C1;&#x30E3;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x54FA;&#x4E73;&#x52D5;&#x7269;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x30C6;&#x30B6;&#x30FC;&#x3092;&#x30DB;&#x30C3;&#x30D7;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3002;

&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x504F;&#x5149;&#x7121;&#x6975;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;C VPS / HOPS&#x30C6;&#x30B6;&#x30FC;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x5206;&#x5E03;&#x3092;&#x5909;&#x8ABF;

&#xCF54;&#xD2B8; organelles&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E0;&#xC9C4; &#xC0AC;&#xC5C5;&#xC790;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131;&#xC744; &#xC815;&#xC758; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC678; &#xD22C; &#xB9C9; &#xBC27;&#xC904; &#xAE30;&#xACF5;&#xC744; &#xC735;&#xD569;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;. &#xD6A8; &#xBAA8; (&#xC5B4;&#xB311;&#xD130; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; 3) AP-3 &#xCF54;&#xD2B8;&#xC640; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; C Vps/&#xD649; (HOmotypic &#xC735;&#xD569; &#xBC0F; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC815;&#xB82C;) &#xBC27;&#xC904; &#xCE90;&#xB9AC;&#xC5B4; &#xD4E8;&#xC804; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC774; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xC774; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xB530;&#xB985;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; Vps &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; C/&#xD649; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704;&#xC640; clathrin &#xC791;&#xC6A9; clathrin &#xD568;&#xC218;&#xC758; &#xAE09;&#xC131; &#xC12D; &#xB3D9; &#xBC29;&#xD574; Vps &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; C/&#xD649; &#xC124;&#xC815; hek293t&#xC640; &#xB300;&#xB9BD; &#xB41C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; endosomal &#xBD84;&#xD3EC; &#xD45C;&#xC2DC;. Vps &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; C/&#xD649; subunits clathrin AP 3 &#xB610;&#xB294; hepatocyte &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xAE30;&#xD310; (&#xC2DC;&#xAC04;)&#xC640; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC874;&#xC7AC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, Vps &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; C/&#xD649; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC2DC;&#xAC04;. &#xC2DD;&#xC758; FK506 &#xC758;&#xBB34;&#xC801;&#xC778; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (FKBP)&#xC774; &#xC5C6;&#xB2E4; &#xD558;&#xB294; clathrin-&#xC785;&#xD788;&#xB294; &#xC18C;&#xD3EC;&#xC640; cofractionate-clathrin &#xB9C9; &#xD611;&#xD68C; &#xC5ED;&#xD559;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; clathrin &#xBE5B; &#xCCB4;&#xC778; &#xD0A4;&#xBA54;&#xB77C; Vps &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; rab5 endosomal &#xAD6C;&#xD68D;&#xC5D0;&#xC11C; C/&#xD649; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; &#xCF58;&#xD150;&#xCE20; &#xC99D;&#xAC00;. &#xB610;&#xD55C;, Vps &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; C/&#xD649; subunits &#xC2E0;&#xACBD; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC758; &#xB05D;&#xC5D0; &#xC9D1;&#xC911; &#xB418;&#xC5C8;&#xACE0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xBC30;&#xB2EC; FKBP clathrin &#xD0A4;&#xBA54;&#xB77C;&#xC640; AP20187 &#xBD80; &#xD654;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC190;&#xC0C1; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; Vps &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; C/&#xD649; subunits clathrin &#xCF54;&#xD305; endosomal &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xBC0F; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC6B4;&#xBC18;&#xB300;&#xC5D0; &#xD1B5;&#xD569;&#xD560; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB098;&#xB178;&#xBBF8;&#xD130; (ap &#xD1B5;&#xC2E0;-3) &#xBC0F; nonvesicular (&#xC2DC;&#xAC04;) clathrin &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; organelles&#xC640; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xAD6C;&#xC870;&#xB97C; &#xBCA0;&#xC5B4;&#xB9C1; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; C Vps/&#xD649; &#xBC27;&#xC904; &#xBD84;&#xB9AC; &#xC81C;&#xC548; &#xD55C;&#xB2E4;.

Clathrin &#xC885;&#xC18D; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xD3B8;&#xAD11; &#xBC0F; nonpolarized &#xC140;&#xC5D0; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; C Vps/&#xD649; &#xBC27;&#xC904; subunits&#xC758; subcellular &#xBD84;&#xD3EC; &#xBCC0;&#xC870;.

Abrigos definir la composici&#xF3;n de las compa&#xF1;&#xED;as incipientes de org&#xE1;nulos. Adem&#xE1;s, las capas interact&#xFA;an con los amarres necesarios para la fusi&#xF3;n de la membrana vesicular. La levadura de AP-3 (Complejo adaptador de prote&#xED;nas 3) el abrigo y amarre los vicepresidentes de la clase C / saltos (fusi&#xF3;n homot&#xED;picos y clasificaci&#xF3;n de prote&#xED;nas) siguen este modelo como su interacci&#xF3;n se produce en la etapa de fusi&#xF3;n portador. Aqu&#xED; nos muestran que los mam&#xED;feros vicepresidentes de la clase C / HOPS subunidades e interactuar clatrina y que la perturbaci&#xF3;n aguda de la funci&#xF3;n clatrina altera la distribuci&#xF3;n endosomal de VPS de clase C / HOPS ataduras en las c&#xE9;lulas neuronales HEK293T y polarizada. Vicepresidentes de la clase C / HOPS subunidades y clathrin existen en el complejo, ya sea con AP-3 o el sustrato del receptor de factor de crecimiento de hepatocitos (Horas). Por otra parte, VPS de clase C / HOPS prote&#xED;nas cofractionate con clatrina recubiertos con ves&#xED;culas, que carezcan de Hrs. La expresi&#xF3;n de la prote&#xED;na de uni&#xF3;n FK506 (FKBP)-clathrin quimeras de la cadena ligera, para inhibir la din&#xE1;mica de la membrana clatrina la asociaci&#xF3;n, el aumento de la clase VFA C / HOPS contenido subunidad en Rab5 endosomal compartimentos. Adem&#xE1;s, los vicepresidentes de la clase C / HOPS subunidades se concentraron en las puntas de los procesos neuronales, y su entrega se vio afectada por la expresi&#xF3;n de FKBP-clathrin quimeras e incubaci&#xF3;n AP20187. Estos datos apoyan un modelo en el cual vicepresidentes de la clase C / HOPS subunidades incorporar en clathrin revestidos dominios endosomal y transportistas en c&#xE9;lulas de mam&#xED;feros. Proponemos que vesiculares (AP-3) y nonvesicular (horas) los mecanismos de clatrina separar clase VFA C / L&#xDA;PULO amarres a los org&#xE1;nulos y los dominios de las c&#xE9;lulas de mam&#xED;feros que llevan arquitecturas complejas.

Clathrin dependientes de los mecanismos modulan la distribuci&#xF3;n subcelular de la Clase C Vps / Subunidades L&#xDA;PULO Tether en las c&#xE9;lulas polarizadas y no polarizadas

&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x4E0E;&#x6DB2;&#x6CE1;&#x3001; &#x6EB6;&#x9176;&#x4F53;&#x76F8;&#x5F53;&#x4E8E;&#x9175;&#x6BCD;&#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD;&#xFF0C;&#x662F;&#x6700;&#x597D;&#x7406;&#x89E3;&#x7684;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x4E4B;&#x4E00;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5207;&#x5730;&#x4E86;&#x89E3;&#x8FD9;&#x79CD;&#x878D;&#x5408;&#x673A;&#x5236;&#x6E90;&#x4E8E;&#x5F3A;&#x5927;&#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x5B66;&#x548C;&#x4F18;&#x96C5;&#x7684;&#x4F53;&#x5916;&#x91CD;&#x7EC4;&#x68C0;&#x5B9A;&#x6CD5;&#x3002;&#x6DB2;&#x6CE1;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x7684;&#x6838;&#x5FC3;&#x662F; multi-subunit &#x7CFB;&#x7EF3;&#x4F55; motypic &#x878D;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x6392;&#x5E8F; &#xFF08;&#x8DC3;&#x70B9;&#xFF09; &#x590D;&#x6742;&#xFF0C;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x878D;&#x5408;&#x673A;&#x68B0;&#x5176;&#x4ED6;&#x5FC5;&#x8981;&#x7684;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x540C;&#x6837;&#x8BE6;&#x7EC6;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x4E86;&#x89E3;&#x4E0E;&#x6EB6;&#x9176;&#x4F53;&#x6216; metazoans &#x5728;&#x6EB6;&#x9176;&#x4F53;&#x76F8;&#x5173;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5668;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x5B83;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x8FD9;&#x57FA;&#x672C;&#x539F;&#x5219;&#x5982;&#x4F55; rabs&#xFF0C;&#x5708;&#x5957;&#x548C;&#x5564;&#x9152;&#x82B1; tethers &#x4FDD;&#x9669;&#x4E1D;&#x6EB6;&#x9176;&#x4F53;&#x4E0E;&#x819C;&#x7684;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x548C;&#x6709;&#x5173;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5668;&#x5B88;&#x6052;&#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD;&#x548C; metazoans &#x4E4B;&#x95F4;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x65B0;&#x5174;&#x7684;&#x5916;&#x5957;&#x4F9D;&#x8D56;&#x673A;&#x5236;&#x6307;&#x5BFC;&#x8DC3;&#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD;&#x548C; metazoans &#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x590D;&#x6742;&#x4E9A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5E03;&#x7684;&#x5DEE;&#x5F02;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5DEE;&#x5F02;&#x4E0A;&#x6E38;&#x9A7B;&#x7559;&#x7684;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x5916;&#x5957;&#x5982;&#x4F55;&#x9694;&#x79BB;&#x7C7B; C Vps/&#x8DC3;&#x7CFB;&#x7EF3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5668;&#x548C;&#x57DF;&#x7684;&#x540E;&#x751F;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E0A;&#x7684;&#x5DEE;&#x5F02;&#x662F;&#x9002;&#x5E94;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x4F53;&#x7CFB;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x540E;&#x751F;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x4F8B;&#x5982;&#x90A3;&#x4E9B;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x548C;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x3002;

&#x540E;&#x751F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x4E2D;&#x7EE7;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x8DC3;&#x70B9;&#x6570;&#x3002;

Membrane fusion with vacuoles, the lysosome equivalent of the yeast Saccharomyces cerevisiae, is among the best understood membrane fusion events. Our precise understanding of this fusion machinery stems from powerful genetics and elegant in vitro reconstitution assays. Central to vacuolar membrane fusion is the multi-subunit tether the HO motypic fusion and Protein Sorting (HOPS) complex, a complex of proteins that organizes other necessary components of the fusion machinery. We lack a similarly detailed molecular understanding of membrane fusion with lysosomes or lysosome-related organelles in metazoans. However, it is likely that fundamental principles of how rabs, SNAREs and HOPS tethers work to fuse membranes with lysosomes and related organelles are conserved between Saccharomyces cerevisiae and metazoans. Here, we discuss emerging differences in the coat-dependent mechanisms that govern HOPS complex subcellular distribution between Saccharomyces cerevisiae and metazoans. These differences reside upstream of the membrane fusion event. We propose that the differences in how coats segregate class C Vps/HOPS tethers to organelles and domains of metazoan cells are adaptations to complex architectures that characterize metazoan cells such as those of neuronal and epithelial tissues.

Metazoan cell biology of the HOPS tethering complex.

La fusion membranaire avec des vacuoles, l&#x26;#39;&#xE9;quivalent des lysosomes de la levure Saccharomyces cerevisiae, est parmi les meilleurs &#xE9;v&#xE9;nements compris la fusion membranaire. Notre compr&#xE9;hension pr&#xE9;cise de ce m&#xE9;canisme de fusion d&#xE9;coule de la g&#xE9;n&#xE9;tique puissants et &#xE9;l&#xE9;gants dans des essais de reconstitution in vitro. Au centre de la fusion des membranes vacuolaires est l&#x26;#39;attache de plusieurs sous-unit&#xE9; de la fusion HO motypic et tri des prot&#xE9;ines (HOUBLON) complexe, un complexe de prot&#xE9;ines qui organise d&#x26;#39;autres composants n&#xE9;cessaires de la machinerie de fusion. Nous manquons d&#x26;#39;une compr&#xE9;hension similaire mol&#xE9;culaire d&#xE9;taill&#xE9;e de la fusion membranaire avec les lysosomes ou lysosome li&#xE9;s organites chez les m&#xE9;tazoaires. Cependant, il est probable que les principes fondamentaux de la fa&#xE7;on dont rabs, pi&#xE8;ges et attaches HOUBLON travailler de fusionner les membranes avec les lysosomes et autres organites semblables sont conserv&#xE9;es entre Saccharomyces cerevisiae et les m&#xE9;tazoaires. Ici, nous discutons des diff&#xE9;rences dans les m&#xE9;canismes &#xE9;mergents manteau-d&#xE9;pendants qui r&#xE9;gissent HOUBLON complexe distribution subcellulaire entre Saccharomyces cerevisiae et les m&#xE9;tazoaires. Ces diff&#xE9;rences r&#xE9;sident en amont de l&#x26;#39;&#xE9;v&#xE9;nement de fusion membranaire. Nous proposons que les diff&#xE9;rences dans la fa&#xE7;on dont manteaux s&#xE9;gr&#xE9;gation de classe C Vps / HOUBLON attaches aux organites et des domaines de cellules de m&#xE9;tazoaires sont des adaptations &#xE0; des architectures complexes qui caract&#xE9;risent les cellules de m&#xE9;tazoaires tels que ceux des tissus neuronaux et &#xE9;pith&#xE9;liales.

Biologie cellulaire chez les m&#xE9;tazoaires des HOUBLON Tethering complexe

Membrane Fusion mit Vakuolen, das Lysosom-&Auml;quivalent von der Hefe Saccharomyces Cerevisiae, ist unter den besten verstandenen Membrane Fusion-Ereignisse. Unser genaue Verst&auml;ndnis dieser Fusion-Maschinen stammt von m&auml;chtigen Genetik und elegant in-vitro-Rekonstitution Assays. Zentrale Vacuolar Membrane Fusion ist die multi-subunit Leine der HO Motypic Fusion und Protein Sorting (HOPS) Komplex, ein Komplex von Proteinen, die anderen notwendigen Komponenten der Fusion-Maschine organisiert. Uns fehlt ein ebenso detailliertes molekularen Verst&auml;ndnis der Membrane Fusion mit Lysosomen oder Lysosom-bezogene Organellen in Metazoen. Allerdings ist es wahrscheinlich, dass Grundprinzipien der wie Rabs, SNAREs und Hopfen festbindet Arbeit um Membranen mit Lysosomen verschmelzen und verwandte Organellen sind zwischen Saccharomyces Cerevisiae und Metazoen konserviert. Hier diskutieren wir aufstrebenden Unterschiede in den Mantel-abh&auml;ngige Mechanismen, die Hopfen komplexe subzellul&auml;re Verteilung zwischen Saccharomyces Cerevisiae und Metazoen Regeln. Diese Unterschiede befinden sich oberhalb der Membrane Fusion Veranstaltung. Wir schlagen vor, da&szlig; die Unterschiede in wie M&auml;ntel Klasse C Vps/Hopfen Anbindehaltung Organellen und Dom&auml;nen, indem Zellen absondern Anpassungen komplexe Architekturen sind, indem Zellen wie die der neuronalen und epitheliale Gewebe die Charakterisierung.

Indem Zellbiologie des HOPFENS Anbindehaltung Komplex.

Fusione di membrana con vacuoli, l&#39;equivalente di lysosome del lievito Saccharomyces cerevisiae, &egrave; tra gli eventi di fusione meglio capito membrana. Nostra comprensione precisa di questo macchinario fusion deriva dalla genetica potente ed elegante ricostituzione in vitro dosaggi. Centrale a fusione membrane vacuolar &egrave; il tether multi-subunit l&#39;HO motypic fusion e proteina ordinamento (luppolo) complex, un complesso di proteine che organizza altri componenti necessari della macchina di fusione. Ci manca una comprensione molecolare allo stesso modo dettagliata della fusione della membrana con lisosomi o organuli lisosoma-correlate nei metazoi. Tuttavia, &egrave; probabile che i principi fondamentali di come rabs, intrappola e luppolo attacchi lavoro per fondere le membrane con lisosomi e organelli correlati sono conservati fra Saccharomyces cerevisiae e metazoi. Qui, discuteremo le differenze emergenti nei meccanismi cappotto-dipendente che governano la complessa distribuzione sottocellulare luppolo fra Saccharomyces cerevisiae e metazoi. Queste differenze risiedono a monte dell&#39;evento di fusione della membrana. Proponiamo che le differenze in come cappotti segregano pastoie C Vps/luppolo classe organelli e domini delle cellule di metazoi sono adattamenti di architetture complesse che caratterizzano le cellule di metazoi come quelle dei tessuti epiteliali e neuronali.

Biologia cellulare metazoi del luppolo tethering complesse.

&#x80DE;&#x306E;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x3001;&#x9175;&#x6BCD;Saccharomyces cerevisiae&#x306E;&#x30EA;&#x30BD;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306B;&#x76F8;&#x5F53;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x6700;&#x9AD8;&#x306E;&#x7406;&#x89E3;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x4E00;&#x3064;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x6A5F;&#x68B0;&#x306E;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x6B63;&#x78BA;&#x306A;&#x7406;&#x89E3;&#x306F;&#x3001;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B66;&#x3068;in vitro&#x3067;&#x518D;&#x69CB;&#x6210;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3067;&#x30A8;&#x30EC;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C8;&#x306B;&#x7531;&#x6765;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6DB2;&#x80DE;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x306E;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x306B;&#x3001;&#x30DE;&#x30EB;&#x30C1;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x30C6;&#x30B6;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;HO motypic&#x878D;&#x5408;&#x3068;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x9078;&#x5225;&#xFF08;HOPS&#xFF09;&#x8907;&#x5408;&#x3001;&#x878D;&#x5408;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306E;&#x4ED6;&#x306E;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x6574;&#x7406;&#x3057;&#x305F;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x5F8C;&#x751F;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x30EA;&#x30BD;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30EA;&#x30BD;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x95A2;&#x9023;&#x30AA;&#x30EB;&#x30AC;&#x30CD;&#x30E9;&#x306E;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x306E;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x8A73;&#x7D30;&#x306A;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x7406;&#x89E3;&#x3092;&#x6B20;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;rabs&#x3001;&#x30B9;&#x30CD;&#x30A2;&#x3068;&#x30DB;&#x30C3;&#x30D7;&#x30C6;&#x30B6;&#x30FC;&#x304C;&#x30EA;&#x30BD;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x5C0F;&#x5668;&#x5B98;&#x306E;&#x819C;&#x3092;&#x878D;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x4ED5;&#x7D44;&#x307F;&#x306E;&#x57FA;&#x672C;&#x7684;&#x306A;&#x539F;&#x5247;&#x306F;&#x3001;&#x30B5;&#x30C3;&#x30AB;&#x30ED;&#x30DF;&#x30BB;&#x30B9;&#xB7;&#x30BB;&#x30EC;&#x30D3;&#x30B7;&#x30A8;&#x3068;&#x5F8C;&#x751F;&#x52D5;&#x7269;&#x9593;&#x3067;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30B5;&#x30C3;&#x30AB;&#x30ED;&#x30DE;&#x30A4;&#x30BB;&#x30B9;&#xB7;&#x30BB;&#x30EC;&#x30D3;&#x30B7;&#x30A8;&#x3068;&#x5F8C;&#x751F;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x5206;&#x5E03;&#x3092;HOPS&#x3092;&#x652F;&#x914D;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C8;&#x4F9D;&#x5B58;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306E;&#x65B0;&#x8208;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x306F;&#x3001;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x4E0A;&#x6D41;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x3001;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C8;&#x306F;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;C VPS&#x3092;&#x5206;&#x96E2;/&#x5F8C;&#x751F;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5C0F;&#x5668;&#x5B98;&#x3068;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x30C6;&#x30B6;&#x30FC;&#x3092;HOPS&#x65B9;&#x6CD5;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x304C;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x3082;&#x306E;&#x3068;&#x5F8C;&#x751F;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x308B;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x30A2;&#x30FC;&#x30AD;&#x30C6;&#x30AF;&#x30C1;&#x30E3;&#x3078;&#x306E;&#x9069;&#x5FDC;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;&#x3002;

HOPS&#x30C6;&#x30B6;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x5F8C;&#x751F;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;

Vacuoles, &#xB9AC;&#xC18C;&#xC880; &#xC0C1;&#xC751; &#xD558;&#xB294; &#xD6A8; &#xBAA8; Saccharomyces cerevisiae&#xC640; &#xB9C9; &#xD4E8;&#xC804; &#xC774;&#xD574; &#xB9C9; &#xCD5C;&#xACE0;&#xC758; &#xD4E8;&#xC804; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xD4E8;&#xC804; &#xAE30;&#xACC4;&#xC758; &#xC815;&#xD655;&#xD55C; &#xC774;&#xD574; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC720;&#xC804;&#xD559;&#xACFC; &#xC6B0;&#xC544;&#xD55C; &#xCCB4; &#xC678; &#xC7AC;&#xAD6C;&#xC131; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xB798;&#xD55C; &#xB2E4;. Vacuolar &#xB9C9; &#xC735;&#xD569;&#xC758; &#xC911;&#xC2EC;&#xC740; &#xD638; motypic &#xC735;&#xD569; &#xBC0F; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC815;&#xB82C; (&#xD649;), &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC735;&#xD569; &#xAE30;&#xACC4;&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xAD6C;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; multi-subunit &#xBC27;&#xC904;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB9C9; &#xD4E8;&#xC804; &#xB9AC;&#xC18C;&#xC880; &#xB610;&#xB294; metazoans&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9AC;&#xC18C;&#xC880; &#xAD00;&#xB828; organelles&#xC758; &#xC720;&#xC0AC; &#xD558; &#xAC8C; &#xC0C1;&#xC138;&#xD55C; &#xBD84;&#xC790; &#xC774;&#xD574; &#xBD80;&#xC871;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xADF8; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC6D0;&#xB9AC; rabs, SNAREs &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xACFC; &#xD649; tethers &#xB9C9; &#xB9AC;&#xC18C;&#xC880;&#xACFC; &#xC735;&#xD569; &#xD558;&#xB294; &#xC791;&#xC5C5; &#xBC0F; &#xAD00;&#xB828;&#xB41C; organelles Saccharomyces cerevisiae&#xC640; metazoans &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xBCF4;&#xC874; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC2E0;&#xD765; &#xCC28;&#xC774; Saccharomyces cerevisiae&#xC640; metazoans &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xD649; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; subcellular &#xBC30;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; &#xCF54;&#xD2B8;-&#xC885;&#xC18D; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xB300;&#xD574;&#xC11C; &#xC0B4;&#xD3B4;&#xBD05;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xCC28;&#xC774; &#xC0C1;&#xB958; &#xC0C1;&#xC8FC; &#xB9C9; &#xD4E8;&#xC804; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xC758;. &#xCF54;&#xD2B8; organelles &#xBC0F; metazoan &#xC140;&#xC758; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; C Vps/&#xD649; &#xBC27;&#xC904;&#xC744; &#xBD84;&#xB9AC; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC5D0; &#xCC28;&#xC774; &#xAC01; &#xC0C9; &#xD55C; &#xADF8; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC870;&#xC9C1; &#xB4F1; metazoan &#xC140;&#xC744; &#xD2B9;&#xC131;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xAD6C;&#xC870;&#xB97C; &#xC81C;&#xC548; &#xD55C;&#xB2E4;.

&#xBC27;&#xC904;&#xB85C; &#xB9E4;&#xB294; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xD649;&#xC758; metazoan &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La fusi&#xF3;n de membranas con vacuolas, el equivalente lisosoma de la levadura Saccharomyces cerevisiae, es uno de los mejor conocidos eventos de membrana de fusi&#xF3;n. Nuestro conocimiento preciso de esta maquinaria de fusi&#xF3;n se debe a la gen&#xE9;tica potente y elegante en los ensayos de reconstituci&#xF3;n in vitro. Central a la fusi&#xF3;n de membranas vacuolar es la correa multi-subunidad de la fusi&#xF3;n HO motypic y clasificaci&#xF3;n de prote&#xED;nas (saltos) complejo, un complejo de prote&#xED;nas que organiza otros componentes necesarios de la maquinaria de fusi&#xF3;n. Nos falta un conocimiento molecular detallado de manera similar la fusi&#xF3;n de membranas con los lisosomas u org&#xE1;nulos relacionados con el lisosoma en metazoos. Sin embargo, es probable que los principios fundamentales de c&#xF3;mo rabs, lazos y correas de sujeci&#xF3;n L&#xDA;PULO trabajan para fusionar las membranas con los lisosomas y org&#xE1;nulos relacionados se conservan entre Saccharomyces cerevisiae y metazoos. En este caso, hablamos de las diferencias que surgen en los mecanismos dependientes de escudo que rigen L&#xDA;PULO compleja distribuci&#xF3;n subcelular entre Saccharomyces cerevisiae y metazoos. Estas diferencias residen aguas arriba de la actividad de fusi&#xF3;n de la membrana. Proponemos que las diferencias en c&#xF3;mo separar las capas de la clase VFA C / L&#xDA;PULO amarres a los org&#xE1;nulos de las c&#xE9;lulas y los dominios metazoos son adaptaciones a arquitecturas complejas que caracterizan a las c&#xE9;lulas de metazoos, como las de los tejidos neuronales y c&#xE9;lulas epiteliales.

Biolog&#xED;a Celular metazoos del l&#xFA;pulo Tethering Complejo

Dysbindin &#x5C06;&#x6C47;&#x7F16;&#x6210;&#x7684;&#x6EB6;&#x9176;&#x4F53;&#x76F8;&#x5173;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5668;&#x590D;&#x6742; 1 &#xFF08;&#x96C6;&#x56E2;-1&#xFF09;&#xFF0C;&#x751F;&#x7269;&#x53D1;&#x751F;&#x4E0E;&#x8C03;&#x89E3;&#x5E38;&#x89C1; endosome &#x8D29;&#x8FD0;&#x8DEF;&#x7EBF;&#x7684;&#x9002;&#x914D;&#x5668;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x590D;&#x6742; 3 (AP-3&#xFF09;&#xFF0C;&#x4EA4;&#x4E92;&#x3002;AP 3 &#x548C;&#x96C6;&#x56E2; 1 &#x7F3A;&#x9677;&#x5F71;&#x54CD;&#x7A81;&#x89E6;&#x56CA;&#x6CE1;&#x7EC4;&#x6210;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x662F;&#x5426; AP 3 &#x96C6;&#x56E2; 1 &#x4F9D;&#x8D56;&#x6392;&#x5E8F;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x63A7;&#x5236;&#x7A81;&#x89E6;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#x542B;&#x91CF;&#x8FDB;&#x884C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x673A;&#x6784;&#x4E2D;&#x4E0A;&#x6E38;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x672B;&#x68A2;&#x4ECD;&#x672A;&#x77E5;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x901A;&#x8FC7;&#x5206;&#x6790;&#x9488;&#x5BF9;&#x76EE;&#x524D;&#x7A81;&#x89E6;&#x524D;&#x548C;&#x7A81;&#x89E6;&#x540E;&#x8F66;&#x53A2;&#x5185;&#x7684;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#x7C7B;&#x578B;&#x78F7;&#x8102;&#x9170;&#x808C;&#x9187; 4 &#x6FC0;&#x9176;&#x4E8C; &alpha; (PI4KII&alpha;)&#xFF0C;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x8FD9;&#x4E00;&#x5047;&#x8BBE;&#x3002;PI4KII&alpha; copurified &#x4E0E;&#x96C6;&#x56E2; 1 &#x548C; AP 3 &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4EA4;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x8F6C;&#x5316;&#x4E3A; dysbindin null &#x96C6;&#x56E2; 1 &#x7F3A;&#x548C; AP 3 &#x7A7A;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6D77;&#x9A6C;&#x9F7F;&#x72B6;&#x56DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x51CF;&#x5C11; PI4KII&alpha; &#x5185;&#x5BB9;&#x3002;PI4KII&alpha; &#x5728;&#x9F7F;&#x72B6;&#x7684;&#x51CF;&#x5C11;&#x53CD;&#x6620;&#x4E86;&#x4ECE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F53;&#x901A;&#x4FE1;&#x5931;&#x8D25;&#x3002;PI4KII&alpha; &#x9488;&#x5BF9;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x539F;&#x4EE3;&#x57F9;&#x517B;&#x76AE;&#x5C42;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x548C; PC12 &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x8FC7;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x4F46;&#x672A;&#x80FD;&#x8FBE;&#x6210;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7F3A;&#x4E4F; AP 3 &#x6216;&#x96C6;&#x56E2; 1 neurites&#x3002;&#x540C;&#x6837;&#xFF0C;PI4KII&alpha; AP 3 &#x6392;&#x5E8F;&#x6BCD;&#x4E2D;&#x65AD;&#x53D7;&#x635F;&#x53CA;&#x5176;&#x5206;&#x7C7B;&#x5230; PC12 &#x548C;&#x539F;&#x4EE3;&#x57F9;&#x517B;&#x76AE;&#x5C42;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x5230; neurites &#x548C;&#x795E;&#x7ECF;&#x7EC8;&#x7AEF;&#x6392;&#x5E8F;&#x4ECE;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F53;&#x7684;&#x8D27;&#x7269;&#x9700;&#x8981;&#x96C6;&#x56E2; 1 &#x548C; AP 3 &#x914D;&#x5408;&#x65B0;&#x578B;&#x56CA;&#x6CE1;&#x8FD0;&#x8F93;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

&#x7CBE;&#x795E;&#x5206;&#x88C2;&#x75C7;&#x6613;&#x611F;&#x6027;&#x56E0;&#x7D20; dysbindin &#x548C;&#x5176;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x590D;&#x6742;&#x6392;&#x5E8F;&#x8D27;&#x7269;&#x4ECE;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x673A;&#x6784;&#x5230;&#x7A81;&#x89E6;&#x3002;

Dysbindin assembles into the biogenesis of lysosome-related organelles complex 1 (BLOC-1), which interacts with the adaptor protein complex 3 (AP-3), mediating a common endosome-trafficking route. Deficiencies in AP-3 and BLOC-1 affect synaptic vesicle composition. However, whether AP-3-BLOC-1-dependent sorting events that control synapse membrane protein content take place in cell bodies upstream of nerve terminals remains unknown. We tested this hypothesis by analyzing the targeting of phosphatidylinositol-4-kinase type II Î± (PI4KIIÎ±), a membrane protein present in presynaptic and postsynaptic compartments. PI4KIIÎ± copurified with BLOC-1 and AP-3 in neuronal cells. These interactions translated into a decreased PI4KIIÎ± content in the dentate gyrus of dysbindin-null BLOC-1 deficiency and AP-3-null mice. Reduction of PI4KIIÎ± in the dentate reflects a failure to traffic from the cell body. PI4KIIÎ± was targeted to processes in wild-type primary cultured cortical neurons and PC12 cells but failed to reach neurites in cells lacking either AP-3 or BLOC-1. Similarly, disruption of an AP-3-sorting motif in PI4KIIÎ± impaired its sorting into processes of PC12 and primary cultured cortical neuronal cells. Our findings indicate a novel vesicle transport mechanism requiring BLOC-1 and AP-3 complexes for cargo sorting from neuronal cell bodies to neurites and nerve terminals.

The schizophrenia susceptibility factor dysbindin and its associated complex sort cargoes from cell bodies to the synapse.

Dysbindine assemble dans la biogen&#xE8;se des lysosomes li&#xE9;es organites complexes 1 (BLOC-1), qui interagit avec le complexe prot&#xE9;ique adaptateur 3 (AP-3), la m&#xE9;diation d&#x26;#39;un commun endosome-traite la route. Les carences en AP-3 et BLOC-1 sur la composition des v&#xE9;sicules synaptiques. Toutefois, si l&#x26;#39;AP-3-BLOC-1-d&#xE9;pendants des &#xE9;v&#xE9;nements de tri que le contr&#xF4;le synapse teneur en prot&#xE9;ines de membrane ont lieu dans les corps cellulaires en amont de terminaisons nerveuses demeure inconnue. Nous avons test&#xE9; cette hypoth&#xE8;se en analysant le ciblage de phosphatidylinositol-4-kinase de type II &#x3B1; (PI4KII&#x3B1;), une prot&#xE9;ine pr&#xE9;sente dans les compartiments de la membrane pr&#xE9;synaptiques et postsynaptiques. PI4KII&#x3B1; copurified avec BLOC-1 et AP-3 dans des cellules neuronales. Ces interactions traduit par une teneur r&#xE9;duite en PI4KII&#x3B1; dans le gyrus dent&#xE9; de dysbindine-nulle BLOC-1 et AP carence en-3-souris nulles. R&#xE9;duction de la PI4KII&#x3B1; dans le dent&#xE9; refl&#xE8;te un &#xE9;chec &#xE0; la circulation &#xE0; partir du corps cellulaire. PI4KII&#x3B1; a &#xE9;t&#xE9; cibl&#xE9;e &#xE0; des processus de type sauvage en culture primaire des neurones corticaux et les cellules PC12, mais n&#x26;#39;est pas parvenu &#xE0; neurites dans les cellules d&#xE9;pourvues soit AP-3 ou BLOC-1. De m&#xEA;me, la perturbation d&#x26;#39;un motif AP-3-tri dans PI4KII&#x3B1; nui &#xE0; sa tri dans les processus de PC12 et cultures primaires de cellules neuronales corticales. Nos r&#xE9;sultats indiquent un m&#xE9;canisme de transport des v&#xE9;sicules roman exigeant complexes BLOC-1 et AP-3 pour le fret de tri de corps cellulaires neuronaux &#xE0; neurites et terminaisons nerveuses.

Le facteur de schizophr&#xE9;nie dysbindine sensibilit&#xE9; et de ses associ&#xE9;s cargaisons Trier complexes de corps cellulaires de la Synapse

Dysbindin assembliert in der Biogenese Lysosom-bezogene Organellen Komplex 1 (Block-1), die mit der Vermittlung einer gemeinsamen Endosom Menschenhandel Route Adapterprotein Komplex 3 (AP-3), interagiert. M&auml;ngel in der AP-3 und BLOC-1 betreffen synaptische Vesikel Zusammensetzung. Bleibt jedoch, ob AP-3-Block-1-abh&auml;ngige Sortierung Ereignissen, dass Kontrolle Synapse-Membran-Protein-Inhalt in Zelle K&ouml;rper stattfinden oberhalb der Nervenenden unbekannt. Wir testeten diese Hypothese durch die Analyse, die gezielte Phosphatidylinositol-4-Kinase Typ II &alpha; (PI4KII&alpha;), ein Membranprotein in pr&auml;synaptischen und postsynaptisches F&auml;cher vorhanden. PI4KII&alpha; copurified mit Block-1 und AP-3 in neuronalen Zellen. Diese Interaktionen &uuml;bersetzt eine verminderte PI4KII&alpha; Inhalt in den Gyrus dentatus von Dysbindin-Null BLOC-1-Mangel und AP-3-Null-M&auml;usen. Reduzierung der PI4KII&alpha; in den Gyrus spiegelt ein Versagen f&uuml;r den Verkehr vom Zellk&ouml;rper. PI4KII&alpha; zielte auf Prozesse in Wildtyp prim&auml;re kultivierten kortikalen Neuronen und PC12 Zellen aber keine Neurites in den Zellen fehlt entweder AP-3 oder Block-1 zu erzielen. In &auml;hnlicher Weise beeintr&auml;chtigt St&ouml;rung ein AP-3-Sortierung Motiv in PI4KII&alpha; seine Sortierung in Prozesse der PC12 und prim&auml;re kultivierten kortikalen Nervenzellen. Unsere Befunde zeigen neuartige Vesikel Transportmechanismus erfordern BLOC-1 und AP-3 komplexe f&uuml;r Fracht, die Sortierung von neuronalen Zelle K&ouml;rper mit Neurites und Nerven-Klemmen.

Die Schizophrenie Anf&auml;lligkeit Faktor Dysbindin und seine zugeordneten komplexen Art Ladungen aus Zelle K&ouml;rper an der Synapse.

Dbndd1 assembla in biogenesi degli organelli relativi lisosoma complesso 1 (blocco-1), che interagisce con la proteina dell&#39;adattatore 3 complessi (AP-3), mediando un comune percorso endosoma-traffico. Carenze in AP-3 e 1 blocco influisce sulla composizione della vescicola sinaptica. Tuttavia, se AP-3-blocco-1-dipendente ordinamento eventi controllo sinapsi membrana proteica avvenga nei corpi cellulari a Monte dei terminali nervosi rimane sconosciuto. Abbiamo testato questa ipotesi analizzando il targeting di fosfatidilinositolo-4-chinasi tipo II &alpha; (PI4KII&alpha;), una proteina di membrana presente in compartimenti presinaptico e postsinaptici. PI4KII&alpha; copurified con blocco-1 e AP-3 nelle cellule neuronali. Queste interazioni tradotto in un diminuzione PI4KII&alpha; contenuto nel giro dentato del deficit di BLOC-1 DBNDD1-null e topi AP-3-null. Riduzione di PI4KII&alpha; nel dentato riflette un fallimento per il traffico dal corpo cellulare. PI4KII&alpha; &egrave; stato mirato ai processi nel selvaggio-tipo primari colti di neuroni corticali e le cellule PC12 ma non &egrave; riuscito a raggiungere neuriti in cellule manca AP-3 o BLOC-1. Analogamente, interruzione di un motivo AP-3-ordinamento in PI4KII&alpha; alterato suo ordinamento nei processi di PC12 e cellule neuronali corticali coltivate primarie. I nostri risultati indicano un meccanismo di trasporto della vescicola romanzo che richiedono complessi BLOC-1 e AP-3 per l&#39;ordinamento da corpi cellulari neuronali di neuriti e nervo terminali cargo.

La schizofrenia suscettibilit&agrave; fattore DBNDD1 e relativo carico di ordinamento complesso associato da corpi cellulari di sinapsi.

Dysbindin&#x306F;&#x3001;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x4EBA;&#x8EAB;&#x58F2;&#x8CB7;&#x30EB;&#x30FC;&#x30C8;&#x3092;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x30A2;&#x30C0;&#x30D7;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;3&#xFF08;AP-3&#xFF09;&#x3068;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;1&#xFF08;BLOC-1&#xFF09;&#x3001;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x30EA;&#x30BD;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x95A2;&#x9023;&#x30AA;&#x30EB;&#x30AC;&#x30CD;&#x30E9;&#x306E;&#x751F;&#x5408;&#x6210;&#x306B;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; AP-3&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x3084;BLOC-1&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306E;&#x7D44;&#x6210;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x5236;&#x5FA1;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x819C;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x542B;&#x6709;&#x91CF;&#x304C;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D42;&#x672B;&#x306E;&#x4E0A;&#x6D41;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x4F53;&#x3067;&#x884C;&#x308F;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;AP-3-BLOC-1&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x306E;&#x4E26;&#x3079;&#x66FF;&#x3048;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30C1;&#x30B8;&#x30EB;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;4  - &#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;II&#x578B;&#x3B1;&#xFF08;PI4KII&#x3B1;&#xFF09;&#x3001;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x524D;&#x3068;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5F8C;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x819C;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x6A19;&#x7684;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3053;&#x306E;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x3092;&#x691C;&#x8A3C;&#x3057;&#x305F;&#x3002; PI4KII&#x3B1;&#x306F;BLOC-1&#x3068;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;AP-3&#x3068;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;dysbindin null&#x3067;BLOC-1&#x6B20;&#x640D;&#x75C7;&#x3068;AP-3&#x6B20;&#x640D;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x6D77;&#x99AC;&#x6B6F;&#x72B6;&#x56DE;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;PI4KII&#x3B1;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30F3;&#x30C4;&#x306B;&#x5909;&#x63DB;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6B6F;&#x306E;PI4KII&#x3B1;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x4F53;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x306B;&#x969C;&#x5BB3;&#x3092;&#x53CD;&#x6620;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; PI4KII&#x3B1;&#x306F;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x306E;&#x521D;&#x4EE3;&#x57F9;&#x990A;&#x76AE;&#x8CEA;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x304A;&#x3088;&#x3073;PC12&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x5BFE;&#x8C61;&#x3068;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3001;AP-3&#x307E;&#x305F;&#x306F;BLOC-1&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x3092;&#x6B20;&#x304F;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306F;&#x795E;&#x7D4C;&#x7A81;&#x8D77;&#x306B;&#x5230;&#x9054;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5931;&#x6557;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; PC12&#x3068;&#x521D;&#x4EE3;&#x57F9;&#x990A;&#x5927;&#x8133;&#x76AE;&#x8CEA;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306B;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30BD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3092;&#x640D;&#x306A;&#x308F;PI4KII&#x3B1;&#x306E;AP-3-&#x30BD;&#x30FC;&#x30C8;&#x30E2;&#x30C1;&#x30FC;&#x30D5;&#x306E;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x3001;&#x6DF7;&#x4E71;&#x3002;&#x4ECA;&#x56DE;&#x306E;&#x77E5;&#x898B;&#x306F;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x4F53;&#x304B;&#x3089;&#x795E;&#x7D4C;&#x7A81;&#x8D77;&#x3068;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D42;&#x672B;&#x306B;&#x30BD;&#x30FC;&#x30C8;&#x8CA8;&#x7269;BLOC-1&#x3001;AP-3&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x5C0F;&#x80DE;&#x8F38;&#x9001;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x7D30;&#x80DE;&#x4F53;&#x304B;&#x3089;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x3078;&#x306E;&#x7D71;&#x5408;&#x5931;&#x8ABF;&#x75C7;&#x306E;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x56E0;&#x5B50;Dysbindin&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x4E26;&#x3079;&#x66FF;&#x3048;&#x306E;&#x8CA8;&#x7269;

Dysbindin &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; endosome &#xBC00;&#xB9E4; &#xACBD;&#xB85C; &#xC911;&#xC7AC; &#xC5B4;&#xB311;&#xD130; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; 3 (ap &#xD1B5;&#xC2E0;-3)&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xB9AC;&#xC18C;&#xC880; &#xAD00;&#xB828; organelles &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; 1 (1 &#xBE14;&#xB85D;), &#xC18D;&#xC5D0; &#xC870;&#xB9BD;. AP-3 &#xBE14;&#xB85D; 1&#xC5D0; &#xBD80;&#xC871; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xC18C;&#xD3EC; &#xAD6C;&#xC131;&#xC744; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xB4E0; AP 3 &#xBE14;&#xB85D; 1 &#xC885;&#xC18D; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864; &#xB0C5; &#xB9C9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xCF58;&#xD150;&#xCE20; &#xC140; &#xC2DC;&#xCCB4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC1C;&#xCD5C; &#xD558;&#xB294; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xB97C; &#xC815;&#xB82C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD130;&#xBBF8;&#xB110;&#xC758; &#xC5C5;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xB0A8;&#xC544; &#xC54C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; phosphatidylinositol-4-&#xB2C8; &#xC720;&#xD615; II &alpha; (PI4KII&alpha;), presynaptic&#xACFC; postsynaptic &#xAD6C;&#xD68D;&#xC5D0; &#xB9C9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xBD84;&#xC11D; &#xD558; &#xC5EC;&#xC774; &#xAC00;&#xC124;&#xC744; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;. &#xBE14;&#xB85D; 1&#xACFC; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; AP-3 copurified PI4KII&alpha;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; dysbindin null &#xBE14;&#xB85D; 1 &#xACB0;&#xD54D; &#xBC0F; AP 3 null &#xC950;&#xAC00; &#xB1CC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC10;&#xC18C; PI4KII&alpha; &#xCF58;&#xD150;&#xCE20; &#xBCC0;&#xD658; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. Pi4kii&alpha;&#xC758; &#xAC10;&#xC18C;&#xB294;&#xAC00; &#xC140; &#xC2DC;&#xCCB4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD2B8;&#xB798;&#xD53D; &#xC2E4;&#xD328;&#xB97C; &#xBC18;&#xC601;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Pi4kii&alpha;&#xB294; &#xC57C;&#xC0DD; &#xD615; &#xAE30;&#xBCF8; &#xAD50;&#xC591;&#xB41C; &#xB300;&#xB1CC; &#xD53C; &#xC9C8;&#xC758; &#xB274;&#xB7F0; PC12 &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xB97C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xBD80;&#xC871; &#xD55C; AP 3 &#xB610;&#xB294; &#xBE14;&#xB85D;-1 &#xC140;&#xC5D0; neurites&#xC5D0; &#xB3C4;&#xB2EC; &#xD558;&#xC9C0; &#xBABB;&#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xCC2C;&#xAC00;&#xC9C0;&#xB85C;, pi4kii&alpha;&#xC5D0;&#xC11C; AP 3 &#xC815;&#xB82C; &#xBAA8;&#xD2F0;&#xBE0C;&#xC758; &#xC7A5;&#xC560; &#xC7A5;&#xC560;&#xC778; PC12 &#xBC0F; &#xAE30;&#xBCF8; &#xAD50;&#xC591;&#xB41C; &#xB300;&#xB1CC; &#xD53C; &#xC9C8;&#xC758; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xB85C; &#xC815;&#xB82C;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; neurites &#xBC0F; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC2DC;&#xCCB4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC815;&#xB82C; &#xD558;&#xB294; &#xD654;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBE14;&#xB85D; 1&#xACFC; AP 3 &#xB2E8;&#xC9C0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC18C;&#xC124; &#xAE30; &#xC804;&#xC1A1; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC815;&#xC2E0; &#xBD84;&#xC5F4; &#xC99D; &#xBBFC;&#xAC10;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; dysbindin &#xBC0F;&#xB294; &#xB0C5;&#xC5D0; &#xC140; &#xC2DC;&#xCCB4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADF8; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC815;&#xB82C; &#xD654;&#xBB3C;.

Dysbindin se constituye en la biog&#xE9;nesis de los lisosomas-org&#xE1;nulos complejos relacionados con el 1 (BLOC-1), que interact&#xFA;a con el complejo de prote&#xED;nas adaptador de 3 (AP-3), la mediaci&#xF3;n de un endosoma com&#xFA;n el tr&#xE1;fico de la ruta. Las deficiencias en la AP-3 y el Bloque 1-afectan a la composici&#xF3;n de ves&#xED;culas sin&#xE1;pticas. Sin embargo, si AP-3-BLOC-1-dependientes eventos de clasificaci&#xF3;n que el control de la membrana sinapsis contenido en prote&#xED;nas tienen lugar en los cuerpos celulares aguas arriba de los terminales nerviosos sigue siendo desconocido. Pusimos a prueba esta hip&#xF3;tesis mediante el an&#xE1;lisis de la focalizaci&#xF3;n de fosfatidilinositol-4-quinasa tipo II &#x3B1; (PI4KII&#x3B1;), una prote&#xED;na presente en los compartimentos de membrana presin&#xE1;ptica y la postsin&#xE1;ptica. PI4KII&#x3B1; copurified con BLOC-1 y AP-3 en las c&#xE9;lulas neuronales. Estas interacciones se tradujo en una disminuci&#xF3;n del contenido PI4KII&#x3B1; en el giro dentado del dysbindin nulo BLOC-1 deficiencia y los ratones AP-3-nulos. Reducci&#xF3;n de PI4KII&#x3B1; en el dentado refleja una falla en el tr&#xE1;fico desde el cuerpo celular. PI4KII&#x3B1; fue dirigida a los procesos de tipo salvaje principales cultivos de neuronas corticales y c&#xE9;lulas PC12, pero no lograron llegar a neuritas en las c&#xE9;lulas que carecen de cualquiera de AP-3 o 1-BLOC. Del mismo modo, la interrupci&#xF3;n de un motivo AP-3-clasificaci&#xF3;n en PI4KII&#x3B1; mermado su clasificaci&#xF3;n en los procesos de PC12 y principales cultivos de c&#xE9;lulas neuronales corticales. Nuestros resultados indican una ves&#xED;cula novedoso mecanismo de transporte que requiere complejos BLOC-1 y AP-3 para la carga de clasificaci&#xF3;n de cuerpos de c&#xE9;lulas neuronales de neuritas y terminales nerviosas.

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Stephanie A. Zlatic

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