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Direct Restart of a Replication Fork Stalled by a Head-On RNA Polymerase

In vivo studies suggest that replication forks are arrested due to encounters with head-on transcription complexes. Yet, the fate of the replisome and RNA ...

Rockefeller University

&#x5728;&#x8BB8;&#x591A;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x4E2D;&#x7684;&#x7EB3;&#x7C73;&#x6280;&#x672F;&#xFF0C;&#x6750;&#x6599;&#x6216;&#x5206;&#x5B50;&#x5728;&#x7EB3;&#x7C73;&#x8303;&#x56F4;&#x5185;&#x7684;&#x63A7;&#x5236;&#x7684;&#x8FD0;&#x52A8;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x6355;&#x83B7;&#x3001; &#x79FB;&#x52A8;&#x548C;&#x91CA;&#x653E;&#x7684;&#x8D27;&#x7269;&#x6CBF; DNA &#x5206;&#x5B50;&#x7684; T7 RNA &#x805A;&#x5408;&#x9176; (RNAP) &#x7531; DNA &#x5E8F;&#x5217;&#x7684;&#x63A7;&#x5236;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x4FEE;&#x6539;&#x540E;&#x7684;&#x5F62;&#x5F0F;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x5355;&#x5206;&#x5B50;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x76F4;&#x89C2;&#x663E;&#x793A;&#x7684;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x96C6;&#x548C;&#x64CD;&#x7EB5;&#x5668;&#x4EF6;&#x548C;&#x9A7E;&#x9A6D; RNAP &#x7535;&#x673A;&#x7684;&#x56DE;&#x8F6C;&#x548C;&#x7EBF;&#x6027;&#x529B;&#x91CF;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;

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Controlled movement of materials or molecules within the nanometer range is essential in many applications of nanotechnology. Here we report the capture, movement, and release of cargo molecules along DNA by a modified form of T7 RNA polymerase (RNAP) in a manner that is controlled by the sequence of the DNA. Using single-molecule methods, we visualize the assembly and manipulation of nanodevices and the ability to harness rotary and linear forces of the RNAP motor.

A tightly regulated molecular motor based upon T7 RNA polymerase.

Un mouvement contr&ocirc;l&eacute; des mat&eacute;riaux ou des mol&eacute;cules au sein de la gamme nanom&egrave;tre est essentiel dans de nombreuses applications de la nanotechnologie. Nous rapportons ici la capture, le mouvement et la lib&eacute;ration de mol&eacute;cules de fret le long de l&#39;ADN par une forme modifi&eacute;e de l&#39;ARN polym&eacute;rase T7 (RNAP) d&#39;une mani&egrave;re qui est contr&ocirc;l&eacute;e par la s&eacute;quence de l&#39;ADN. &Agrave; l&#39;aide de m&eacute;thodes de simple-mol&eacute;cule, nous visualisons le montage et la manipulation des nanodispositifs et la capacit&eacute; d&#39;exploiter les forces lin&eacute;aires et de rotation du moteur RNAP.

Un moteur mol&eacute;culaire &eacute;troitement r&eacute;glement&eacute; bas&eacute; sur l&#39;ARN polym&eacute;rase T7.

Kontrollierte Bewegung von Materialien oder Molek&uuml;le im Nanometer-Bereich unbedingt in vielen Anwendungen der Nanotechnologie. Hier berichten wir &uuml;ber die Erfassung, Bewegung und Freigabe der Ladung Molek&uuml;le entlang DNA durch eine modifizierte Form von T7-RNA-Polymerase (Name) in einer Weise, die durch die Sequenz der DNA gesteuert wird. Mit Einzelmolek&uuml;l-Methoden, visualisieren wir die Montage und Bearbeitung von Nanosysteme und die F&auml;higkeit, rotierende und lineare Kr&auml;fte der Name Motor zu nutzen.

Ein streng geregelte Molekulare Motor basierend auf T7-RNA-Polymerase.

Movimento controllato di materiali o molecole all&#39;interno della gamma di nanometro &egrave; indispensabile in molte applicazioni della nanotecnologia. Qui riportiamo la cattura, il movimento e il rilascio di molecole di carico lungo il DNA da una forma modificata di T7 RNA polimerasi (RNAP) in un modo che &egrave; controllata dalla sequenza del DNA. Utilizzando metodi di singola molecola, noi visualizzare l&#39;assemblaggio e la manipolazione di nanodispositivi e la capacit&agrave; di sfruttare le forze lineari e rotative del motore RNAP.

Un motore strettamente regolamentato molecolare basato su T7 RNA polimerasi.

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T7 RNA &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xAE34;&#xBC00; &#xD558; &#xAC8C; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774;&#xD2B8; &#xB41C; &#xBD84;&#xC790; &#xBAA8;&#xD130;.

Movimiento controlado de materiales o mol&eacute;culas dentro de la gama del nan&oacute;metro es esencial para muchas aplicaciones de la nanotecnolog&iacute;a. Aqu&iacute; divulgamos la captura, el movimiento y la liberaci&oacute;n de mol&eacute;culas de carga a lo largo del ADN por una forma modificada de T7 ARN polimerasa (RNAP) de manera que es controlada por la secuencia de la DNA. Utilizando m&eacute;todos de una sola mol&eacute;cula, visualizamos la Asamblea y la manipulaci&oacute;n de nanodispositivos y la capacidad de aprovechar las fuerzas rotativas y lineales del motor RNAP.

Un motor molecular fuertemente regulado basado en T7 ARN polimerasa.

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Transcription errors by T7 RNA polymerase (RNAP) may occur as the result of a mechanism in which the template base two positions downstream of the 3' end of the RNA (the TSn+1 base) is utilized during two consecutive nucleotide-addition cycles. In the first cycle, misalignment of the template strand leads to incorporation of a nucleotide that is complementary to the TSn+1 base. In the second cycle, the template is realigned and the mismatched primer is efficiently extended, resulting in a substitution error. Proper organization of the transcription bubble is required for maintaining the correct register of the DNA template, as the presence of a complementary nontemplate strand opposite the TSn+1 base suppresses template misalignment. Our findings for T7 RNAP are in contrast to related DNA polymerases of the Pol I type, which fail to extend mismatches efficiently and generate predominantly deletion errors as a result of template-strand misalignment.

A mechanism of nucleotide misincorporation during transcription due to template-strand misalignment.

Les erreurs de transcription par l&#39;ARN polym&eacute;rase T7 (RNAP) peuvent se produire comme le r&eacute;sultat d&#39;un m&eacute;canisme dans lequel le mod&egrave;le de base deux positions en aval de l&#39;extr&eacute;mit&eacute; 3&#39; de l&#39;ARN (le TSn + 1 base) est utilis&eacute; au cours de deux cycles cons&eacute;cutifs de nucl&eacute;otides-ajout. Dans le premier cycle, un mauvais alignement du brin mod&egrave;le conduit &agrave; l&#39;incorporation d&#39;un nucl&eacute;otide qui est compl&eacute;mentaire de la TSn + 1 base. Dans le second cycle, le mod&egrave;le est r&eacute;align&eacute; et l&#39;appr&ecirc;t d&eacute;pareill&eacute; est efficacement &eacute;tendu, r&eacute;sultant en une erreur de substitution. Bonne organisation de la bulle de transcription est requise pour la tenue du Registre correct de la matrice d&#39;ADN, comme la pr&eacute;sence d&#39;un brin compl&eacute;mentaire de collection en face de la TSn + 1 base supprime un mauvais alignement du mod&egrave;le. Nos r&eacute;sultats pour T7 RNAP contrastent connexes ADN polym&eacute;rases de la Pol de type I, qui ne sont pas &eacute;tendre efficacement les inad&eacute;quations et g&eacute;n&eacute;rer des erreurs de suppression &agrave; la suite de d&eacute;salignement brin mod&egrave;le principalement.

Un m&eacute;canisme de misincorporation de nucl&eacute;otide pendant la transcription en raison de d&eacute;salignement du mod&egrave;le-brin.

&Uuml;bertragungsfehler durch T7-RNA-Polymerase (Name) k&ouml;nnen auftreten, da das Ergebnis eines Mechanismus, in dem die Vorlage basieren zwei Positionen flussabw&auml;rts vom 3&#39;-Ende der RNA (die TSn + 1 Base) w&auml;hrend zwei aufeinander folgenden Nukleotid-Zusatz-Zyklen genutzt wird. Im ersten Zyklus f&uuml;hrt Fehlbewertung des Teilprogramms Vorlage zur Aufnahme der Nukleotide, die komplement&auml;r zu der TSn + 1 base ist. In der zweiten Schleife die Vorlage neu ausgerichtet ist und die nicht &uuml;bereinstimmende Grundierung wird effizient erweitert, was zu einem Ersatz-Fehler. Ordnungsgem&auml;&szlig;e Organisation der Transkription-Blase ist erforderlich f&uuml;r die Aufrechterhaltung des richtigen Registers der DNA-Vorlage, wie das Vorhandensein von einem Strang komplement&auml;r nicht auf Vorlagen basierende gegen&uuml;ber der TSn + 1 base Vorlage Schiefstellungen unterdr&uuml;ckt. Unsere Ergebnisse f&uuml;r T7 Name sind im Gegensatz zu verwandten DNA-Polymerasen die Pol, die ich schreibe, die Konflikte effizient zu erweitern und erzeugen &uuml;berwiegend L&ouml;schung St&ouml;rungen infolge Vorlage-Strang Schiefstellungen nicht.

Ein Mechanismus der Nukleotid-Misincorporation w&auml;hrend der Transkription durch Vorlage-Strang Schiefstellungen.

Come il risultato di un meccanismo in cui il modello di base di due posizioni a valle dell&#39;estremit&agrave; 3&#39; del RNA (il TSn + 1 base) utilizzato durante due cicli consecutivi nucleotide-aggiunta, potrebbero verificarsi errori di trascrizione da T7 RNA polimerasi (RNAP). Nel primo ciclo, disallineamento del filamento modello conduce all&#39;incorporazione di un nucleotide complementare per il TSn + 1 base. Nel secondo ciclo, il modello viene riallineato e il primer non corrispondente in modo efficiente &egrave; esteso, risultante in un errore di sostituzione. Corretta organizzazione della bolla di trascrizione &egrave; necessaria per mantenere il registro corretto del modello del DNA, come la presenza di un filamento complementare non template di fronte il TSn + 1 base sopprime il disallineamento modello. I nostri risultati per T7 RNAP sono in contrasto con relative polimerasi del DNA Pol I tipo, che non riescono a estendere in modo efficiente disadattamento e prevalentemente generano errori di cancellazione a seguito di disallineamento modello-strand.

Un meccanismo di misincorporation nucleotide durante la trascrizione, a causa di disallineamento modello-strand.

T7 RNA &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; (RNAP) &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; &#x30A8;&#x30E9;&#x30FC;&#x306F;&#x7D50;&#x679C;&#x30C6;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8; &#x30D9;&#x30FC;&#x30B9; 2 &#x3064;&#x306E;&#x30DD;&#x30B8;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x4E0B;&#x6D41; &#xFF08;&#x3001;TSn + 1 &#x62E0;&#x70B9;) RNA &#x306E; 3&#39; &#x7D42;&#x308F;&#x308A;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306E; 2 &#x3064;&#x306E;&#x9023;&#x7D9A;&#x3057;&#x305F;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x3092;&#x4ED8;&#x52A0;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x4E2D;&#x306B;&#x5229;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30C6;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E;&#x7E4A;&#x7DAD;&#x306E;&#x30DF;&#x30B9;&#x30A2;&#x30E9;&#x30A4;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x304C; TSn + 1 &#x57FA;&#x672C;&#x306B;&#x76F8;&#x88DC;&#x7684;&#x306A;&#x5869;&#x57FA;&#x306E;&#x8A2D;&#x7ACB;&#x306B; &#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;2 &#x756A;&#x76EE;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30C6;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E;&#x518D;&#x7DE8;&#x3057;&#x3001;&#x4E0D;&#x4E00;&#x81F4;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x3092;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306B;&#x62E1;&#x5F35;&#x3057;&#x305F;&#x7F6E;&#x63DB;&#x30A8;&#x30E9;&#x30FC;&#x304C;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x88DC;&#x5B8C;&#x975E;&#x30C6;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8; &#x30B9;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C9;&#x3001;TSn + 1 &#x57FA;&#x672C;&#x306E;&#x53CD;&#x5BFE;&#x5074;&#x306E;&#x30D7;&#x30EC;&#x30BC;&#x30F3;&#x30B9; &#x30C6;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E;&#x305A;&#x308C;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x8EE2;&#x5199;&#x30D0;&#x30D6;&#x30EB;&#x306E;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E; DNA &#x306E;&#x30C6;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E;&#x6B63;&#x3057;&#x3044;&#x767B;&#x9332;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;T7 RNAP &#x306E;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x4E0D;&#x4E00;&#x81F4;&#x3092;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306B;&#x62E1;&#x5F35;&#x3057;&#x3001;&#x4E3B;&#x306B;&#x30C6;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8; &#x30B9;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C9; &#x30DF;&#x30B9;&#x30A2;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x524A;&#x9664;&#x8AA4;&#x308A;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x306B;&#x5931;&#x6557;&#x3057;&#x305F;&#x95A2;&#x9023;&#x306E; DNA &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; I &#x578B; Pol &#x306E;&#x3068;&#x306F;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9; misincorporation &#x30C6;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E;&#x7E4A;&#x7DAD;&#x306E;&#x5909;&#x4F4D;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x8EE2;&#x5199;&#x4E2D;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3002;

T7 RNA &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C; (RNAP)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD544; &#xC0AC; &#xC624;&#xB958;&#xB294; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xC5F0;&#xC18D; &#xB41C; &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC; &#xCD94;&#xAC00; &#xC8FC;&#xAE30; &#xB3D9;&#xC548; &#xC11C;&#xC2DD; &#xD30C;&#xC77C; (Tsn&#xB294; + 1 &#xC790;&#xB8CC;) RNA&#xC758; 3&#39; &#xB05D;&#xC758; &#xD558;&#xB958; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xC704;&#xCE58;&#xB97C; &#xAE30;&#xBCF8; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xD65C;&#xC6A9;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC0AC;&#xC774;&#xD074;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD15C;&#xD50C;&#xB9BF; &#xAC00;&#xB2E5;&#xC758; &#xC624;&#xCC28;&#xB294; TSn + 1 &#xAE30;&#xBCF8; &#xBCF4;&#xC644;&#xC740; &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC;&#xC758; &#xB9AC;&#xB4DC;. &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC8FC;&#xAE30;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; &#xD15C;&#xD50C;&#xB9BF;&#xC744; &#xC7AC;&#xC815;&#xBE44; &#xD558; &#xACE0; &#xC77C;&#xCE58; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294; &#xB1CC;&#xAD00; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD655;&#xC7A5; &#xB300;&#xCCB4; &#xC624;&#xB958;. &#xBC18;&#xB300;&#xB294; TSn + 1 &#xAE30;&#xBCF8; &#xBCF4;&#xC644; &#xBE44;&#xD15C;&#xD50C;&#xB9BF; &#xAC00;&#xB2E5;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xB97C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD15C;&#xD50C;&#xB9BF; &#xBD80;&#xC815;&#xD569;&#xC73C;&#xB85C; &#xC804;&#xC0AC; &#xAC70;&#xD488;&#xC758; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xC870;&#xC9C1; DNA &#xD15C;&#xD50C;&#xB81B;&#xC758; &#xC62C;&#xBC14;&#xB978; &#xB808;&#xC9C0;&#xC2A4;&#xD130;&#xB97C; &#xC720;&#xC9C0; &#xAD00;&#xB9AC; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xD544;&#xC694;&#xD55C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. T7 RNAP&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xB098; &#xC785;&#xB825; Pol&#xC758; &#xBD88;&#xC77C;&#xCE58;&#xB97C; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD655;&#xC7A5; &#xD558; &#xACE0; &#xC8FC;&#xB85C; &#xD15C;&#xD50C;&#xB9BF; &#xAC00;&#xB2E5; &#xBD80;&#xC815;&#xD569; &#xACB0;&#xACFC;&#xB85C; &#xC0AD;&#xC81C; &#xC624;&#xB958;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131;&#xC5D0; &#xC2E4;&#xD328; &#xD558;&#xB294; &#xAD00;&#xB828;&#xB41C; DNA &#xD3F4; &#xB2EC;&#xB9AC;&#xB294;.

&#xD15C;&#xD50C;&#xB9BF; &#xAC00;&#xB2E5; &#xC624;&#xCC28; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xB179;&#xC74C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; misincorporation &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC;&#xC758; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;.

Errores de transcripci&oacute;n por T7 ARN polimerasa (RNAP) pueden ocurrir como resultado de un mecanismo en el que la plantilla base dos posiciones m&aacute;s abajo el extremo 3&#39; del RNA (la TSn + 1 base) se utiliza durante dos ciclos consecutivos nucle&oacute;tido-adici&oacute;n. En el primer ciclo, desalineamiento de la cadena lleva a la incorporaci&oacute;n de un nucle&oacute;tido que es complementario a la TSn + 1 base. En el segundo ciclo, es realinear la plantilla y la cartilla no coinciden se extiende eficientemente, resultando en un error de sustituci&oacute;n. Organizaci&oacute;n adecuada de la burbuja de transcripci&oacute;n se requiere para mantener el registro correcto de la plantilla de ADN, como la presencia de un filamento complementario nontemplate enfrente de la TSn + 1 base suprime el desalineamiento de la plantilla. Nuestros resultados para T7 RNAP est&aacute;n en contraste con relacionados con DNA polimerasas de la Pol tipo I, que no extienda desajustes eficientemente y predominante generar errores de eliminaci&oacute;n como consecuencia de la mala alineaci&oacute;n del filamento de la plantilla.

Un mecanismo de misincorporation nucle&oacute;tido durante la transcripci&oacute;n debido a mala alineaci&oacute;n del filamento de la plantilla.

&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x8868;&#x660E;&#x5355;&#x4E9A;&#x57FA; T7 RNA &#x805A;&#x5408;&#x9176; (RNAP) &#x7684;&#x4E00;&#x79CD;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x4E0D;&#x5BF9;&#x7684; dna &#x6A21;&#x677F;&#x4E2D;&#x53EF;&#x4EE5;&#x751F;&#x6210; misincorporation &#x9519;&#x8BEF;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5728;&#x7531;&#x591A;&#x80BD;&#x94FE;&#x9175;&#x6BCD; RNAP II &#x548C;&#x7EC6;&#x83CC; RNAPs &#x8F6C;&#x5F55;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x4EA7;&#x751F;&#x9519;&#x8BEF;&#x3002;&#x8367;&#x5149;&#x5149;&#x8C31;&#x6CD5;&#x7814;&#x7A76;&#x63ED;&#x793A;&#x4E86;&#x5728;&#x8FD9;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6A21;&#x677F;&#x94A2;&#x7EDE;&#x7EBF;&#x7684;&#x91CD;&#x7EC4;&#x548C;&#x5206;&#x5B50;&#x6A21;&#x62DF;&#x8868;&#x660E;&#x5F00;&#x653E;&#x7A7A;&#x95F4;&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7F51;&#x7AD9;&#xFF0C;&#x5B83;&#x80FD;&#x5BB9;&#x7EB3;&#x4E00;&#x4E2A;&#x672A;&#x5BF9;&#x9F50;&#x7684;&#x57FA;&#x7840;&#x4E4B;&#x4E0A;&#x3002;&#x57FA;&#x677F;&#x7ADE;&#x4E89;&#x5316;&#x9A8C;&#x8868;&#x660E;&#x6A21;&#x677F;&#x9519;&#x4F4D;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x662F; misincorporation&#xFF0C;&#x662F;&#x7531;&#x7EC6;&#x80DE; RNAPs &#x66FF;&#x6362;&#x9519;&#x8BEF;&#x7684;&#x9996;&#x9009;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x4E0D;&#x5BF9;&#x4E2D;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5360;&#x6570;&#x636E;&#x4EE5;&#x524D;&#x91C7;&#x53D6;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x989D;&#x5916; NTP &#x7ED3;&#x5408;&#x4F4D;&#x70B9;&#x4E0B;&#x6E38;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7AD9;&#x70B9;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x3002;&#x5BF9; misincorporation &#x7684;&#x4E0D;&#x540C;&#x6A21;&#x677F;&#x62D3;&#x6251;&#x7ED3;&#x6784;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x53CC;&#x9762; DNA &#x7ACB;&#x5373;&#x4E0B;&#x6E38;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7AD9;&#x70B9;&#x5177;&#x6709;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x4FDD;&#x771F;&#x3002;

&#x5728;&#x591A;&#x80BD;&#x94FE;&#x7684; RNA &#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x548C;&#x8F6C;&#x5F55;&#x4FDD;&#x771F;&#x5EA6;&#x7684;&#x6A21;&#x677F;&#x9519;&#x4F4D;&#x3002;

Recent work showed that the single-subunit T7 RNA polymerase (RNAP) can generate misincorporation errors by a mechanism that involves misalignment of the DNA template strand. Here, we show that the same mechanism can produce errors during transcription by the multisubunit yeast RNAP II and bacterial RNAPs. Fluorescence spectroscopy reveals a reorganization of the template strand during this process, and molecular modeling suggests an open space above the polymerase active site that could accommodate a misaligned base. Substrate competition assays indicate that template misalignment, not misincorporation, is the preferred mechanism for substitution errors by cellular RNAPs. Misalignment could account for data previously taken as evidence for additional NTP binding sites downstream of the active site. Analysis of the effects of different template topologies on misincorporation indicates that the duplex DNA immediately downstream of the active site plays an important role in transcription fidelity.

Template misalignment in multisubunit RNA polymerases and transcription fidelity.

Des travaux r&eacute;cents ont montr&eacute; que la seule sous-unit&eacute; ARN polym&eacute;rase T7 (RNAP) peut g&eacute;n&eacute;rer des erreurs de misincorporation par un m&eacute;canisme impliquant un d&eacute;salignement du brin ADN mod&egrave;le. Ici, nous montrons que le m&ecirc;me m&eacute;canisme peut g&eacute;n&eacute;rer des erreurs au cours de la transcription par les sous-unit&eacute;s levure RNAP II et la RNAPs bact&eacute;riennes. La spectroscopie de fluorescence r&eacute;v&egrave;le une r&eacute;organisation du brin mod&egrave;le au cours de ce processus et mod&eacute;lisation mol&eacute;culaire sugg&egrave;re un espace libre au-dessus du site actif de polym&eacute;rase qui pourrait accueillir une base mal align&eacute;e. Analyses de comp&eacute;tition de substrat indiquent que mod&egrave;le d&eacute;salignement, pas misincorporation, est le m&eacute;canisme par d&eacute;faut pour les erreurs de la substitution de RNAPs cellulaires. D&eacute;salignement pourrait expliquer les donn&eacute;es pr&eacute;c&eacute;demment consid&eacute;r&eacute;es comme une preuve pour suppl&eacute;mentaires NTP accepteurs en aval du site actif. Analyse des effets des topologies diff&eacute;rentes mod&egrave;le sur misincorporation indique que l&#39;ADN recto verso imm&eacute;diatement en aval du site actif joue un r&ocirc;le important dans la fid&eacute;lit&eacute; de la transcription.

D&eacute;salignement de mod&egrave;le en sous-unit&eacute;s ARN polym&eacute;rases et la fid&eacute;lit&eacute; de la transcription.

Die j&uuml;ngsten Arbeiten zeigten, dass die Einzel-Untereinheit T7-RNA-Polymerase (Name) Misincorporation Fehler durch einen Mechanismus generieren kann, die Fehlstellung der Strang der DNA-Vorlage beinhaltet. Hier zeigen wir, dass der gleiche Mechanismus St&ouml;rungen w&auml;hrend der Transkription von der exprimierten Hefe Name II und bakterielle RNAPs produzieren kann. Fluoreszenzspektroskopie offenbart eine Reorganisation des Teilprogramms Vorlage w&auml;hrend dieses Prozesses und Molekulare Modellierung schl&auml;gt einen offenen Raum oberhalb der Polymerase-aktiven-Site, die eine falsch ausgerichtete Base aufnehmen konnte. Substrat Wettbewerb Proben zeigen, dass die Vorlage Versatz, nicht Misincorporation, der bevorzugte Mechanismus f&uuml;r die Ersetzung von zellul&auml;ren RNAPs fehlerhaft ist. Schiefstellungen kann Daten, die zuvor als Beweis f&uuml;r zus&auml;tzliche NTP Bindungsstellen stromabw&auml;rts von der aktiven Site genommen ber&uuml;cksichtigen. Analyse der Auswirkungen der verschiedenen Vorlage Topologien auf Misincorporation angibt, die die duplex DNA unmittelbar hinter der Website aktiv spielt eine wichtige Rolle in der Transkription Treue.

Vorlage Schiefstellung in exprimierten RNA-Polymerasen und Transkription Treue.

Recenti lavori hanno dimostrato che la singola subunit&agrave; T7 RNA polimerasi (RNAP) pu&ograve; generare errori di misincorporation da un meccanismo che coinvolge il disallineamento del filamento del DNA template. Qui, ci mostra che lo stesso meccanismo pu&ograve; produrre errori durante la trascrizione dal lievito questa malattia RNAP II e RNAPs batterica. Spettroscopia di fluorescenza rivela una riorganizzazione del modello filo durante questo processo, e modellistica molecolare suggerisce uno spazio aperto sopra il sito attivo della polimerasi che poteva ospitare una base disallineata. Substrato concorso dosaggi indicano che il disallineamento di modello, non misincorporation, &egrave; il meccanismo preferito per errori di sostituzione di RNAPs cellulare. Disallineamento potrebbe spiegare dati precedentemente presi come prova per NTP associazione siti aggiuntivi a valle del sito attivo. Analisi degli effetti delle topologie di modello diverso su misincorporation indicano che il DNA duplex immediatamente a valle del sito attivo gioca un ruolo importante nella fedelt&agrave; di trascrizione.

Disallineamento di modello in questa malattia RNA polimerasi e fedelt&agrave; di trascrizione.

&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x4ED5;&#x4E8B;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x30EB; &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E; T7 RNA &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; (RNAP) &#x304C; DNA &#x306E;&#x30C6;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E;&#x7E4A;&#x7DAD;&#x306E;&#x30DF;&#x30B9;&#x30A2;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066; misincorporation &#x30A8;&#x30E9;&#x30FC;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x540C;&#x3058;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x304C; multisubunit &#x9175;&#x6BCD; RNAP II &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7D30;&#x83CC; RNAPs &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x8EE2;&#x5199;&#x306E;&#x4E2D;&#x306B;&#x30A8;&#x30E9;&#x30FC;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x86CD;&#x5149;&#x5206;&#x5149;&#x6CD5;&#x306E;&#x30C6;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E;&#x7E4A;&#x7DAD;&#x518D;&#x7DE8;&#x3053;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x4E2D;&#x306B;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x3001;&#x5206;&#x5B50;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x30AA;&#x30FC;&#x30D7;&#x30F3; &#x30B9;&#x30DA;&#x30FC;&#x30B9;&#x304C;&#x305A;&#x308C;&#x3066;&#x57FA;&#x5730;&#x53CE;&#x5BB9;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x90E8;&#x4F4D;&#x4E0A;&#x8A18;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x57FA;&#x677F;&#x306E;&#x7AF6;&#x4E89;&#x306E;&#x8A66;&#x91D1;&#x30C6;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8; &#x30DF;&#x30B9;&#x30A2;&#x30E9;&#x30A4;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3001;&#x306A;&#x3044; misincorporation &#x30BB;&#x30EB;&#x30E9;&#x30FC; RNAPs &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7F6E;&#x63DB;&#x30A8;&#x30E9;&#x30FC;&#x306E;&#x63A8;&#x5968;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30DF;&#x30B9;&#x30A2;&#x30E9;&#x30A4;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306F;&#x4EE5;&#x524D;&#x8FFD;&#x52A0; NTP &#x7D50;&#x5408;&#x90E8;&#x4F4D;&#x3092;&#x4E0B;&#x6D41;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x64AE;&#x5F71;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3067;&#x304D;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x5225;&#x306E;&#x30C6;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E;&#x30C8;&#x30DD;&#x30ED;&#x30B8;&#x304C; misincorporation &#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x5F71;&#x97FF;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x304C;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x4E8C;&#x91CD;&#x306E; DNA &#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x90E8;&#x4F4D;&#x304C;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3059;&#x3050;&#x4E0B;&#x6D41;&#x8EE2;&#x5199;&#x306E;&#x5FE0;&#x5B9F;&#x5EA6;&#x3067;&#x518D;&#x751F;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30C6;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x305A;&#x308C; multisubunit RNA &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;&#x8EE2;&#x5199;&#x306E;&#x5FE0;&#x5B9F;&#x5EA6;&#x3067;&#x306F;&#x3002;

&#xCD5C;&#xADFC; &#xC791;&#xD488; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900; &#xB2E8;&#xC77C; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; T7 RNA &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C; (RNAP)&#xAC00; DNA &#xD15C;&#xD50C;&#xB9BF; &#xAC00;&#xB2E5;&#xC758; &#xC624;&#xCC28;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; misincorporation &#xC624;&#xB958;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; multisubunit &#xD6A8; RNAP II &#xC138;&#xADE0; Rnaps&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC804;&#xC1A1; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC624;&#xB958;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD615;&#xAD11; &#xBD84;&#xAD11;&#xD559; &#xBC1D;&#xD600;&#xC774; &#xACFC;&#xC815; &#xC11C;&#xC2DD; &#xD30C;&#xC77C; &#xAC00;&#xB2E5;&#xC758; &#xAC1C;&#xD3B8; &#xBC0F; &#xBD84;&#xC790; &#xBAA8;&#xB378;&#xB9C1; &#xC81C;&#xC548; &#xACE0;&#xB974;&#xC9C0; &#xC790;&#xB8CC;&#xB97C; &#xC218;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xD6A8;&#xC18C; &#xD65C;&#xC131; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xC704;&#xC5D0; &#xC5F4;&#xB9B0; &#xACF5;&#xAC04;. &#xAE30;&#xD310; &#xACBD;&#xC7C1; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xD15C;&#xD50C;&#xB9BF; misalignment, &#xD558;&#xC9C0; misincorporation &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; Rnaps&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB300;&#xCCB4; &#xC624;&#xB958;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC124;&#xC815;&#xB41C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC798;&#xBABB; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xCD94;&#xAC00;&#xC801;&#xC778; NTP &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB2E4;&#xC6B4;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xD65C;&#xC131; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC758; &#xC99D;&#xAC70;&#xB85C; &#xAC00;&#xC838;&#xC628; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xACC4;&#xC815; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Misincorporation&#xC5D0; &#xB2E4;&#xB978; &#xC11C;&#xC2DD; &#xD30C;&#xC77C; &#xD1A0;&#xD3F4;&#xB85C;&#xC9C0; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC774;&#xC911; DNA &#xC989;&#xC2DC; &#xB2E4;&#xC6B4;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xD604;&#xC7AC; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4; &#xC804;&#xC0AC; &#xCDA9;&#xC2E4;&#xB3C4;.

&#xC11C;&#xC2DD; &#xD30C;&#xC77C; multisubunit RNA &#xD3F4;&#xACFC; &#xC804;&#xC0AC; &#xC815; &#xC808;&#xC5D0; &#xBD80;&#xC815;&#xD569;.

Trabajo reciente demostr&oacute; que la sola-subunidad T7 ARN polimerasa (RNAP) puede generar errores misincorporation por un mecanismo que implica desalineamiento del filamento de la plantilla del DNA. Aqu&iacute;, demostramos que el mismo mecanismo puede producir errores durante la transcripci&oacute;n por la levadura m&uacute;ltiples subunidades RNAP II y RNAPs bacterianas. Espectroscopia de fluorescencia revela una reorganizaci&oacute;n del filamento de la plantilla durante este proceso, y modelado molecular sugiere un espacio abierto sobre el sitio activo de polimerasa que podr&iacute;a acoger una base desalineada. Sustrato competencia ensayos indican que el desalineamiento de la plantilla, no misincorporation, es el mecanismo preferido para errores de sustituci&oacute;n por celulares RNAPs. Desalineamiento podr&iacute;a explicar datos previamente tomados como evidencia adicionales NTP sitios de Uni&oacute;n aguas abajo del sitio activo. An&aacute;lisis de los efectos de las topolog&iacute;as de plantilla diferente en misincorporation indica que el ADN d&uacute;plex inmediatamente aguas abajo del sitio activo juega un papel importante en la fidelidad de la transcripci&oacute;n.

Desalineamiento de la plantilla en m&uacute;ltiples subunidades Polimerasas del RNA y la fidelidad de la transcripci&oacute;n.

&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7684; replicases &#x662F;&#x5C06; DNA &#x590D;&#x5236;&#x4E0E;&#x60CA;&#x4EBA;&#x7684;&#x901F;&#x5EA6;&#x548C; processivity &#x7684;&#x591A;&#x7EC4;&#x5206;&#x673A;&#x5668;&#x3002;Replisome &#x7EC4;&#x7EC7;&#x63ED;&#x793A;&#x4E86;&#x6700;&#x9002;&#x5408;&#x7684;&#x9886;&#x5148;&#x548C;&#x843D;&#x540E;&#x80A1;&#x5E76;&#x53D1;&#x5408;&#x6210;&#x53CC; DNA &#x805A;&#x5408;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x5927;&#x80A0;&#x57C3;&#x5E0C;&#x6C0F;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x548C;&#x771F;&#x6838;&#x590D;&#x5236;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x548C;&#x751F;&#x5316;&#x7814;&#x7A76;&#x63D0;&#x4F9B;&#x590D;&#x6742;&#x8BE6;&#x7EC6;&#x7684;&#x8702;&#x7A9D; replicases &#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x548C;&#x5185;&#x90E8;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x539F;&#x7406;&#x3002;&#x5C24;&#x5176;&#x662F;&#xFF0C;&#x6ED1;&#x52A8;&#x5939;&#x548C;&#x5939;&#x88C5;&#x8F7D;&#x673A;&#x4E9A;&#x57FA;&#x7814;&#x7A76;&#x6F84;&#x6E05; replisome processivity &#x548C;&#x843D;&#x540E;&#x7684;&#x94A2;&#x7EDE;&#x7EBF;&#x5408;&#x6210;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x8BC1;&#x660E;&#x7EC6;&#x83CC;&#x548C;&#x771F;&#x6838;&#x590D;&#x5236;&#x673A;&#x6784;&#x4E4B;&#x95F4;&#x5BC6;&#x5207;&#x7684;&#x76F8;&#x4F3C;&#x4E4B;&#x5904;&#x3002;

Replisome &#x529B;&#x5B66;&#xFF1A; &#x53CC; DNA &#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x673A;&#x7684;&#x89C1;&#x89E3;&#x3002;

Chromosomal replicases are multicomponent machines that copy DNA with remarkable speed and processivity. The organization of the replisome reveals a twin DNA polymerase design ideally suited for concurrent synthesis of leading and lagging strands. Recent structural and biochemical studies of Escherichia coli and eukaryotic replication components provide intricate details of the organization and inner workings of cellular replicases. In particular, studies of sliding clamps and clamp-loader subunits elucidate the mechanisms of replisome processivity and lagging strand synthesis. These studies demonstrate close similarities between the bacterial and eukaryotic replication machineries.

Replisome mechanics: insights into a twin DNA polymerase machine.

Replicases chromosomiques sont des machines &agrave; plusieurs composantes qui copier l&#39;ADN avec une vitesse remarquable et processivit&eacute;. L&#39;organisation de la replisome r&eacute;v&egrave;le une conception de l&#39;ADN polym&eacute;rase jumeau id&eacute;ale pour synth&egrave;se simultan&eacute;e de capacitive et inductive des brins. R&eacute;centes &eacute;tudes structurales et biochimiques d&#39;Escherichia coli et les composants de r&eacute;plication eucaryotes fournissent des d&eacute;tails complexes du fonctionnement interne et de l&#39;organisation du replicases cellulaires. En particulier, les &eacute;tudes du glissement des pinces et des sous-unit&eacute;s de la pince-chargeur &eacute;lucider les m&eacute;canismes de replisome processivit&eacute; et la synth&egrave;se du brin &agrave; la tra&icirc;ne. Ces &eacute;tudes d&eacute;montrent &eacute;troites similitudes entre les machineries de r&eacute;plication bact&eacute;rienne et eucaryotes.

Replisome m&eacute;canique : &eacute;clairage sur une machine de l&#39;ADN polym&eacute;rase de jumeaux.

Chromosomale Replicases sind Mehrkomponenten Maschinen, die DNA mit bemerkenswerter Geschwindigkeit und Processivity kopieren. Die Organisation der Replisom offenbart eine Zweibettzimmer-DNA-Polymerase-Design, ideal geeignet f&uuml;r gleichzeitige Synthese von f&uuml;hrenden und r&uuml;ckst&auml;ndigen Str&auml;nge. Strukturelle und biochemische Studien von Escherichia coli und eukaryotischen Replikationskomponenten bieten die komplizierten Details der Organisation und innere Funktionsweise der zellul&auml;ren Replicases. Insbesondere erhellen Studien des Gleitens, Klammern und Klemmen-Loader-Untereinheiten die Mechanismen der Replisom Processivity und r&uuml;ckst&auml;ndigen Strang Synthese. Diese Studien zeigen enge &Auml;hnlichkeiten zwischen der bakteriellen und eukaryotic Replikation-Maschinen.

Replisom Mechanik: Einblicke in ein Zweibettzimmer-DNA-Polymerase-Maschine.

Replicases cromosomiche sono macchine multicomponenti che copiare il DNA con notevole velocit&agrave; e processivity. L&#39;organizzazione della replisome rivela un design DNA polimerasi gemello ideale per sintesi simultanee di leading e lagging filoni. Recenti studi biochimici e strutturali di Escherichia coli e replicazione eucariotiche componenti forniscono intricati dettagli sul funzionamento di organizzazione ed interna del replicases cellulari. In particolare, gli studi dei morsetti e subunit&agrave; morsetto-caricatore scorrevoli delucidare i meccanismi della replisome processivity e lagging strand sintesi. Questi studi dimostrano la strette somiglianze tra i macchinari di replicazione batterica ed eucarioti.

Replisome meccanica: intuizioni in una macchina di DNA polimerasi twin.

&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x306E; replicases &#x306F;&#x3001;&#x9A5A;&#x304F;&#x3079;&#x304D;&#x30B9;&#x30D4;&#x30FC;&#x30C9;&#x3068;&#x30B9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x30AF; DNA &#x3092;&#x30B3;&#x30D4;&#x30FC;&#x591A;&#x6210;&#x5206;&#x306E;&#x30DE;&#x30B7;&#x30F3;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x7D44;&#x7E54;&#x3001;replisome &#x306E;&#x7406;&#x60F3;&#x7684;&#x306A;&#x5C0E;&#x304F;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30E9;&#x30AE;&#x30F3;&#x30B0;&#x7E4A;&#x7DAD;&#x306E;&#x540C;&#x6642;&#x5408;&#x6210;&#x7528;&#x30C4;&#x30A4;&#x30F3; DNA &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; &#x30C7;&#x30B6;&#x30A4;&#x30F3;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x3068;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; &#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x7684;&#x30FB;&#x751F;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7D30;&#x80DE; replicases &#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5185;&#x90E8;&#x306E;&#x4ED5;&#x7D44;&#x307F;&#x306E;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x8A73;&#x7D30;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7279;&#x306B;&#x3001;&#x30AF;&#x30E9;&#x30F3;&#x30D7;&#x3068;&#x30AF;&#x30E9;&#x30F3;&#x30D7; &#x30ED;&#x30FC;&#x30C0;&#x30FC; &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x647A;&#x52D5;&#x7814;&#x7A76; replisome &#x30B9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x30AF;&#x3068;&#x30E9;&#x30AE;&#x30F3;&#x30B0;&#x9396;&#x5408;&#x6210;&#x306E;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3092;&#x89E3;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x7D30;&#x83CC;&#x3084;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x6A5F;&#x68B0;&#x9593;&#x8FD1;&#x304F;&#x306E;&#x985E;&#x4F3C;&#x70B9;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Replisome &#x529B;&#x5B66;: &#x53CC;&#x5B50; DNA &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x30DE;&#x30B7;&#x30F3;&#x3078;&#x306E;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x529B;&#x3002;

&#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; replicases&#xB294; &#xB180;&#xB77C;&#xC6B4; &#xC18D;&#xB3C4;&#xC640; processivity DNA &#xBCF5;&#xC0AC; &#xAE61;&#xD1B5;&#xC774; &#xAE30;&#xACC4;. Replisome&#xC758; &#xC870;&#xC9C1; &#xC120;&#xD589; &#xBC0F; &#xD6C4;&#xD589; &#xAC00;&#xB2E5;&#xC758; &#xB3D9;&#xC2DC; &#xD569;&#xC131; &#xC801;&#xD569; &#xD2B8;&#xC708; DNA &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C; &#xB514;&#xC790;&#xC778;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900;&#xB2E4;. &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0;&#xACFC; &#xC9C4; &#xD575; &#xBCF5;&#xC81C; &#xAD6C;&#xC131;&#xC758; &#xCD5C;&#xADFC; &#xAD6C;&#xC870; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xD654;&#xD559; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC138;&#xD3EC; replicases&#xC758; &#xC870;&#xC9C1; &#xBC0F; &#xB0B4;&#xBD80; &#xB3D9;&#xC791;&#xC758; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC138;&#xBD80; &#xC0AC;&#xD56D;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD2B9;&#xD788;, &#xD074;&#xB7A8;&#xD504; &#xBC0F; &#xD074;&#xB7A8;&#xD504; &#xB85C;&#xB354; subunits &#xC2AC;&#xB77C;&#xC774;&#xB529;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; replisome processivity &#xBC0F; &#xD6C4;&#xD589; &#xAC00;&#xB2E5; &#xD569;&#xC131;&#xC758; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xBA85;&#xB8CC;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC138;&#xADE0;&#xC131;&#xACFC; &#xC9C4; &#xD575; &#xBCF5;&#xC81C; &#xAE30;&#xACC4; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xAC00;&#xAE4C;&#xC6B4; &#xC720;&#xC0AC;&#xC131;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Replisome &#xC5ED;&#xD559;: &#xD2B8;&#xC708; DNA &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD1B5;&#xCC30;&#xB825;.

Replicases cromos&oacute;micas son m&aacute;quinas multicomponentes que copiar ADN con notable rapidez y procesividad. La organizaci&oacute;n del replisoma revela un dise&ntilde;o de polimerasa de la DNA de doble ideal para s&iacute;ntesis concurrente de conducir y filamentos del revestimiento. Recientes estudios estructurales y bioqu&iacute;micos de Escherichia coli y componentes de replicaci&oacute;n eucariotas proporcionan detalles sobre el funcionamiento de la organizaci&oacute;n y el interior de replicases celulares. En particular, estudios del deslizamiento de las abrazaderas y las subunidades de la abrazadera-cargador dilucidar los mecanismos de procesividad replisoma y s&iacute;ntesis del filamento del revestimiento. Estos estudios muestran una estrecha similitud entre los mecanismos de replicaci&oacute;n de bacterias y eucariotas.

Mec&aacute;nica replisoma: penetraciones en una m&aacute;quina de polimerasa de la DNA de doble.

&#x590D;&#x5236;&#x53C9;&#x59A8;&#x788D;&#x4E86; DNA &#x635F;&#x4F24;&#x548C;&#x8F6C;&#x5F55; RNA &#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x7B49;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6838;&#x9178;&#x9178;&#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x3002;&#x4F8B;&#x5982;&#xFF0C;&#x4E0E; RNA &#x805A;&#x5408;&#x9176; replisome &#x8FCE;&#x5934;&#x76F8;&#x649E;&#x5BFC;&#x81F4;&#x590D;&#x5236;&#x53C9;&#x902E;&#x6355;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x4E0E; RNA &#x805A;&#x5408;&#x9176; replisome co-directional &#x78B0;&#x649E;&#x5DF2;&#x5BF9;&#x53C9;&#x8FDB;&#x5C55;&#x5F88;&#x5C11;&#x6216;&#x6CA1;&#x6709;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x68C0;&#x67E5; co-directional replisome &#x548C;&#x4F53;&#x5916; RNA &#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x78B0;&#x649E;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x5927;&#x80A0;&#x57C3;&#x5E0C;&#x6C0F;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC; replisome &#x4F5C;&#x4E3A;&#x5E95;&#x6F06;&#x901A;&#x8FC7;&#x4F7F;&#x7528; RNA &#x8A8A;&#x672C;&#x6D41;&#x79BB;&#x5931;&#x6240;&#x8005;&#x4ECE; DNA &#x7684; RNA &#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x4E0E;&#x78B0;&#x649E;&#x540E;&#x7EE7;&#x7EED;&#x9886;&#x5148;&#x7EDE;&#x5408;&#x6210;&#x3002;&#x6B64;&#x64CD;&#x4F5C;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4E2D;&#x65AD;&#x9886;&#x5148;&#x94A2;&#x7EDE;&#x7EBF;&#xFF0C;&#x4F46; replisome &#x4ECD;&#x7136;&#x4FDD;&#x6301;&#x4E0D;&#x53D8;&#xFF0C;&#x5E76;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; DNA &#x7684;&#x6574;&#x4E2A;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x5F3A;&#x8C03;&#x5176;&#x4E2D; replisome &#x8FD0;&#x4F5C;&#x6765;&#x89C4;&#x907F;&#x5176;&#x8DEF;&#x5F84;&#x4E2D;&#x7684;&#x969C;&#x788D;&#xFF0C;&#x5E76;&#x53EF;&#x80FD;&#x89E3;&#x91CA;&#x4E3A;&#x4EC0;&#x4E48;&#x9886;&#x5148;&#x7684;&#x94A2;&#x7EDE;&#x7EBF;&#x5408;&#x6210;&#x7684;&#x975E;&#x8FDE;&#x7EED;&#x4F53;&#x5185;&#x663E;&#x8457;&#x53EF;&#x5851;&#x6027;&#x3002;

Replisome &#x4E0E; RNA &#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x53D1;&#x751F;&#x78B0;&#x649E;&#x540E;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5E95;&#x6F06;&#x4F7F;&#x7528; mRNA&#x3002;

Replication forks are impeded by DNA damage and protein-nucleic acid complexes such as transcribing RNA polymerase. For example, head-on collision of the replisome with RNA polymerase results in replication fork arrest. However, co-directional collision of the replisome with RNA polymerase has little or no effect on fork progression. Here we examine co-directional collisions between a replisome and RNA polymerase in vitro. We show that the Escherichia coli replisome uses the RNA transcript as a primer to continue leading-strand synthesis after the collision with RNA polymerase that is displaced from the DNA. This action results in a discontinuity in the leading strand, yet the replisome remains intact and bound to DNA during the entire process. These findings underscore the notable plasticity by which the replisome operates to circumvent obstacles in its path and may explain why the leading strand is synthesized discontinuously in vivo.

The replisome uses mRNA as a primer after colliding with RNA polymerase.

Fourches de r&eacute;plication sont entrav&eacute;s par des dommages &agrave; l&#39;ADN et prot&eacute;ines nucl&eacute;iques complexes acides tels que la transcription de l&#39;ARN polym&eacute;rase. Par exemple, une collision frontale de le replisome avec l&#39;ARN polym&eacute;rase entra&icirc;ne arrestation de fourche de r&eacute;plication. Cependant, une collision co-directif de la replisome avec l&#39;ARN polym&eacute;rase a peu ou pas d&#39;effet sur la progression de la fourche. Nous examinons ici les collisions co-directif entre un replisome et in vitro de l&#39;ARN polym&eacute;rase. Nous montrons que l&#39;Escherichia coli replisome utilise le transcrit comme appr&ecirc;t pour continuer la synth&egrave;se du brin-leader apr&egrave;s la collision avec l&#39;ARN polym&eacute;rase qui est d&eacute;plac&eacute; de l&#39;ADN. Cette action entra&icirc;ne une discontinuit&eacute; dans le brin de premier plan, mais le replisome reste intact et qui est li&eacute; &agrave; l&#39;ADN durant tout le processus. Ces r&eacute;sultats mettent en &eacute;vidence la plasticit&eacute; remarquable par lequel le replisome a pour effet de contourner les obstacles sur son chemin et peut expliquer pourquoi le premier brin est synth&eacute;tis&eacute; discontinue in vivo.

La replisome utilise des ARNm comme appr&ecirc;t apr&egrave;s une collision avec l&#39;ARN polym&eacute;rase.

Replikation Gabeln werden durch DNA-Sch&auml;den und Protein-Nukleins&auml;ure S&auml;ure-komplexe wie Transkription von RNA-Polymerase behindert. Frontalen Zusammensto&szlig; der Replisom mit RNS-Polymerase f&uuml;hrt beispielsweise Replikation Gabel Verhaftung. Co-directional Kollision von Replisom mit RNS-Polymerase hat jedoch wenig oder gar keine Auswirkungen auf Gabel Fortschreiten. Hier untersuchen wir co-directional Kollisionen zwischen einem Replisom und in-vitro-RNA-Polymerase. Wir zeigen, dass die Escherichia-coli-Replisom verwendet das RNA-Transkript als Grundierung weiterhin f&uuml;hrende-Strang Synthese nach der Kollision mit der RNS-Polymerase, die aus der DNA verdr&auml;ngt wird. Diese Aktion f&uuml;hrt zu einer Diskontinuit&auml;t in der f&uuml;hrenden Strang, dennoch die Replisom bleibt intakt und gebundenen DNA w&auml;hrend des gesamten Prozesses. Diese Ergebnisse unterstreichen die bemerkenswerte Plastizit&auml;t, bei der die Replisom betreibt, Hindernisse in den Weg zu umgehen und mag erkl&auml;ren, warum der f&uuml;hrende Strang diskontinuierlich in-vivo synthetisiert wird.

Die Replisom wird mRNA als Grundierung verwendet, nachdem er mit der RNS-Polymerase.

Forcelle replica sono ostacolate da danni al DNA e complessi acidi nucleici proteina come trascrizione RNA polimerasi. Per esempio, urto frontale di replisome con RNA polimerasi provoca arresto forcella replica. Tuttavia, co-directional collisione di replisome con RNA polimerasi ha poco o nessun effetto sulla progressione della forcella. Qui esaminiamo co-directional collisioni tra un replisome e polimerasi del RNA in vitro. Dimostriamo che l&#39;Escherichia coli replisome utilizza la trascrizione di RNA come primer per continuare a filamento leading sintesi dopo la collisione con la RNA polimerasi che &egrave; spostata dal DNA. Questa azione si traduce in una discontinuit&agrave; nel filone principale, ancora il replisome rimane intatto e rilegato a DNA durante l&#39;intero processo. Questi risultati sottolineano la plasticit&agrave; notevole che il replisome opera per aggirare gli ostacoli nel suo percorso e pu&ograve; spiegare perch&eacute; il filone principale &egrave; sintetizzato in maniera discontinua vivo.

Il replisome utilizza mRNA come primer dopo la collisione con la RNA polimerasi.

&#x8907;&#x88FD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30AF;&#x306F; RNA &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x304C;&#x8EE2;&#x5199;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x6838;&#x9178;&#x306E;&#x9178;&#x932F;&#x4F53;&#x3068; DNA &#x640D;&#x50B7;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x59A8;&#x3052;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x305F;&#x3068;&#x3048;&#x3070;&#x3001;RNA &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068; replisome &#x306E;&#x6B63;&#x9762;&#x885D;&#x7A81;&#x306F;&#x8907;&#x88FD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30AF;&#x505C;&#x6B62;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x30B3;&#x30C0;&#x30A4;&#x30EC;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30CA;&#x30EB;&#x885D;&#x7A81; RNA &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068; replisome &#x306E;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30AF;&#x306E;&#x9032;&#x884C;&#x306B;&#x52B9;&#x679C;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053; replisome &#x3068; in vitro RNA &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x30B3;&#x30C0;&#x30A4;&#x30EC;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30CA;&#x30EB;&#x885D;&#x7A81;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x5927;&#x8178;&#x83CC; replisome RNA &#x8EE2;&#x5199;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x9396;&#x5408;&#x6210;&#x5F8C;&#x306E;&#x885D;&#x7A81;&#x304B;&#x3089;&#x306E; DNA &#x3092;&#x907F;&#x96E3; RNA &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3092;&#x7D99;&#x7D9A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x64CD;&#x4F5C;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3001;&#x4E00;&#x6D41;&#x7E4A;&#x7DAD;&#x306E;&#x4E0D;&#x9023;&#x7D9A;&#x3067;&#x307E;&#x3060;&#x3001;replisome&#x3001;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x51E6;&#x7406;&#x4E2D;&#x306B;&#x305D;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x3068; DNA &#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x307E;&#x307E;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x3001;replisome &#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x30D1;&#x30B9;&#x306B;&#x969C;&#x5BB3;&#x7269;&#x3092;&#x56DE;&#x907F;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x52D5;&#x4F5C;&#x3057;&#x3066;&#x306A;&#x305C;&#x3001;&#x4E00;&#x6D41;&#x7E4A;&#x7DAD;&#x4E0D;&#x9023;&#x7D9A;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x3067;&#x5408;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x8AAC;&#x660E;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x306E;&#x8457;&#x3057;&#x3044;&#x53EF;&#x5851;&#x6027;&#x3092;&#x5F37;&#x8ABF;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Replisome &#x306F;&#x3001;RNA &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;&#x885D;&#x7A81;&#x3057;&#x305F;&#x5F8C;&#x3001;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066; mRNA &#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xBCF5;&#xC81C; &#xD3EC;&#xD06C;&#xB294; DNA &#xC190;&#xC0C1; &#xBC0F; &#xC18D;&#xAE30; RNA &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC640; &#xAC19;&#xC740; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD575; &#xC0B0; &#xB2E8;&#xC9C0; &#xC7A5;&#xC560;&#xAC00; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC608;&#xB97C; &#xB4E4;&#xC5B4;, RNA &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC640; replisome&#xC758; &#xC815;&#xBA74; &#xCDA9;&#xB3CC; &#xBCF5;&#xC81C; &#xD3EC;&#xD06C; &#xCCB4;&#xD3EC; &#xACB0;&#xACFC;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, RNA &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC640; replisome&#xC758; co-directional &#xCDA9;&#xB3CC; &#xD3EC;&#xD06C; &#xC9C4;&#xD589;&#xC5D0; &#xAC70;&#xC758; &#xB610;&#xB294; &#xC804;&#xD600; &#xD6A8;&#xACFC;&#xAC00; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; replisome&#xC640; RNA &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C;&#xB294; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; co-directional &#xCDA9;&#xB3CC; &#xAC80;&#xC0AC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0; replisome RNA &#xC0AC;&#xBCF8;&#xC744; &#xC785;&#xBB38;&#xC11C;&#xB85C;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC120;&#xB3C4; &#xAC00;&#xB2E5; &#xD569;&#xC131; RNA &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C;&#xB294; DNA&#xC5D0;&#xC11C; &#xB09C;&#xBBFC;&#xACFC; &#xCDA9;&#xB3CC; &#xD6C4; &#xACC4;&#xC18D; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC120;&#xB3C4; &#xAC00;&#xB2E5;&#xC5D0; &#xBD88;&#xC5F0;&#xC18D;&#xC131;&#xC774;&#xC774; &#xC791;&#xC5C5;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xC544;&#xC9C1;&#xB294; replisome &#xADF8;&#xB300;&#xB85C; &#xB0A8;&#xC544; &#xC804;&#xCCB4; &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; DNA&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC;&#xB294; replisome &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xACBD;&#xB85C;&#xC5D0; &#xC7A5;&#xC560;&#xBB3C;&#xC744; &#xD68C;&#xD53C; &#xB3D9;&#xC791; &#xD558; &#xACE0; &#xC120;&#xB3C4; &#xAC00;&#xB2E5; discontinuously vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xD569;&#xC131;&#xC740; &#xC65C; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC744; &#xC124;&#xBA85;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC8FC;&#xBAA9;&#xD560; &#xB9CC;&#xD55C; &#xC18C;&#xC131; &#xBC11;&#xC904;.

Replisome RNA &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC640; &#xCDA9;&#xB3CC; &#xD55C; &#xD6C4; &#xB1CC;&#xAD00;&#xC73C;&#xB85C; Mrna&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Las horquillas de replicaci&oacute;n son obstaculizadas por da&ntilde;os en el ADN y prote&iacute;na-nucleicos &aacute;cidos complejos como transcripci&oacute;n de ARN polimerasa. Por ejemplo, el choque frontal del replisoma con ARN polimerasa resultados en la detenci&oacute;n de la horquilla de replicaci&oacute;n. Sin embargo, la colisi&oacute;n codireccional del replisoma con ARN polimerasa tiene poco o ning&uacute;n efecto sobre la progresi&oacute;n de la horquilla. Aqu&iacute; examinamos codireccional colisiones entre el replisoma y ARN polimerasa in vitro. Mostramos que el replisoma de Escherichia coli utiliza la transcripci&oacute;n del RNA como una cartilla para continuar la s&iacute;ntesis de la cadena l&iacute;der despu&eacute;s de la colisi&oacute;n con que se desplaza de la DNA polimerasa del RNA. Esta acci&oacute;n produce una discontinuidad en la cadena l&iacute;der, pero el replisoma sigue intacto y obligado a ADN durante todo el proceso. Estos resultados subrayan la plasticidad notable por el cual el replisoma opera para sortear obst&aacute;culos en su camino y puede explicar por qu&eacute; la cadena principal se sintetiza discontinuo en vivo.

El replisoma utiliza mRNA como una cartilla despu&eacute;s de chocar con la RNA polimerasa.

&#x4F53;&#x5185;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x53C9;&#x90FD;&#x88AB;&#x902E;&#x6355;&#x7684;&#x590D;&#x5236;&#x9047;&#x5230;&#x7684;&#x8FCE;&#x5934;&#x8F6C;&#x5F55;&#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;replisome &#x548C; RNA &#x805A;&#x5408;&#x9176; (RNAP) &#x8FCE;&#x5934;&#x76F8;&#x649E;&#x540E;&#x7684;&#x547D;&#x8FD0;&#x662F;&#x672A;&#x77E5;&#x7684;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x5927;&#x80A0;&#x57C3;&#x5E0C;&#x6C0F;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC; replisome &#x6863;&#x540E;&#x4E0E;&#x590D;&#x6742;&#xFF0C;&#x8FCE;&#x5934;&#x8F6C;&#x5F55;&#x78B0;&#x649E;&#x4F46;&#x800C;&#x4E0D;&#x662F;&#x6298;&#x53E0;&#xFF0C;&#x590D;&#x5236;&#x53C9;&#x4FDD;&#x6301;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x7A33;&#x5B9A;&#x548C;&#x6700;&#x7EC8;&#x6062;&#x590D;&#x540E;&#x53D6;&#x4EE3;&#x4ECE; DNA RNAP &#x4F38;&#x957F;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x53D1;&#x73B0;&#x8F6C;&#x5F55;&#x4FEE;&#x590D;&#x8026;&#x5408;&#x56E0;&#x5B50; Mfd &#x76F8;&#x649E;&#x540E;&#x901A;&#x8FC7;&#x4FC3;&#x8FDB; RNAP &#x4F4D;&#x79FB;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x5206;&#x53C9;&#x7684;&#x76F4;&#x63A5;&#x91CD;&#x542F;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x5185;&#x5728;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x7684;&#x590D;&#x5236;&#x7684;&#x5668;&#x5177;&#x548C;&#x4EE5;&#x524D;&#x672A;&#x77E5;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x5728;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x8FC7;&#x53BB; RNAP &#x5757;&#x590D;&#x5236;&#x8F6C;&#x5F55;&#x8026;&#x5408;&#x7684;&#x4FEE;&#x590D;&#x9014;&#x5F84;&#x3002;

&#x76F4;&#x63A5;&#x590D;&#x5236;&#x53C9;&#x53D7;&#x963B;&#x8FCE;&#x5934; RNA &#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x7684;&#x91CD;&#x65B0;&#x542F;&#x52A8;&#x3002;

In vivo studies suggest that replication forks are arrested by encounters with head-on transcription complexes. Yet, the fate of the replisome and RNA polymerase (RNAP) after a head-on collision is unknown. We found that the Escherichia coli replisome stalls upon collision with a head-on transcription complex, but instead of collapsing, the replication fork remains highly stable and eventually resumes elongation after displacing the RNAP from DNA. We also found that the transcription-repair coupling factor Mfd promotes direct restart of the fork after the collision by facilitating displacement of the RNAP. These findings demonstrate the intrinsic stability of the replication apparatus and a previously unknown role for the transcription-coupled repair pathway in promoting replication past a RNAP block.

Direct restart of a replication fork stalled by a head-on RNA polymerase.

Des &eacute;tudes in vivo sugg&egrave;rent que les fourches sont arr&ecirc;t&eacute;s par la r&eacute;plication de rencontres avec des complexes de transcription frontale. Pourtant, le sort de le replisome et l&#39;ARN polym&eacute;rase (RNAP) apr&egrave;s une collision frontale est inconnu. Nous avons trouv&eacute; que l&#39;Escherichia coli replisome cale apr&egrave;s une collision avec une complexe de transcription frontale, mais au lieu de s&#39;effondrer, la fourche de r&eacute;plication reste tr&egrave;s stable et reprend finalement &eacute;longation apr&egrave;s le d&eacute;placement de la carte de l&#39;ADN. Nous avons &eacute;galement constat&eacute; que le facteur de couplage de transcription-r&eacute;paration Mfd favorise la reprise directe de la fourche apr&egrave;s la collision en facilitant le d&eacute;placement de la carte. Ces r&eacute;sultats d&eacute;montrent la stabilit&eacute; intrins&egrave;que de l&#39;appareil de r&eacute;plication et un r&ocirc;le jusque-l&agrave; inconnu pour la voie de r&eacute;paration transcription coupl&eacute;s dans la promotion de r&eacute;plication pass&eacute; un bloc RNAP.

Red&eacute;marrez direct d&#39;une fourche de r&eacute;plication bloqu&eacute;e par une ARN polym&eacute;rase frontale.

In-vivo-Studien deuten darauf hin, dass die Replikation, die Gabeln von verhaftet sind Begegnungen mit frontalen Transkription-komplexe. Dennoch ist das Schicksal des Replisom und der RNS-Polymerase (Name) nach einer frontalen Kollision unbekannt. Wir fanden, dass die Escherichia-coli-Replisom nach Kollision mit einem frontalen Transkription, die komplexe St&auml;nden, aber statt st&uuml;rzt, der Wiederholunggabel bleibt sehr stabil und schlie&szlig;lich setzt Bruchdehnung verdr&auml;ngen die Name von DNA. Wir fanden auch, dass die Transkription-Reparatur-Kopplungsfaktor Mfd direkten Neustart der Gabel nach der Kollision f&ouml;rdert durch die Verdr&auml;ngung der Name Erleichterung. Diese Ergebnisse zeigen die innere Stabilit&auml;t der Replikation-Apparat und eine bisher unbekannte Rolle f&uuml;r die Transkription gekuppelte Reparatur-Signalweg bei der F&ouml;rderung der Replikation &uuml;ber ein Name-Block.

Starten Sie direkt eine Replikation-Gabel von einer frontalen RNA-Polymerase ins Stocken geraten.

Studi in vivo suggeriscono che replica le forcelle vengono arrestate da incontri con complessi di trascrizione frontali. Eppure, il destino del replisome e RNA polimerasi (RNAP) dopo un urto frontale &egrave; sconosciuto. Abbiamo trovato che l&#39;Escherichia coli replisome bancarelle sulla collisione con una complessa di trascrizione frontale, ma invece di crollare, la forcella replica rimane altamente stabile e alla fine riprende allungamento dopo spostando le RNAP da DNA. Abbiamo anche trovato che il fattore di trascrizione-riparazione accoppiamento Mfd promuove diretto riavvio della forcella dopo la collisione facilitando la cilindrata delle RNAP. Questi risultati dimostrano la stabilit&agrave; intrinseca dell&#39;apparato di replicazione e un ruolo precedentemente sconosciuto per il percorso di riparazione trascrizione-accoppiata nel promuovere la replica del passato un blocco RNAP.

Riavviare diretto di una forcella replica in stallo da una RNA polimerasi frontale.

&#x8907;&#x88FD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30AF;&#x306E;&#x902E;&#x6355;&#x304C;&#x6B63;&#x9762;&#x8EE2;&#x5199;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3068;&#x51FA;&#x4F1A;&#x3044;&#x306E;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x7814;&#x7A76;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x3060;&#x3001;replisome &#x3068; RNA &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; (RNAP) &#x6B63;&#x9762;&#x885D;&#x7A81;&#x5F8C;&#x306E;&#x904B;&#x547D;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x5927;&#x8178;&#x83CC; replisome &#x306B;&#x885D;&#x7A81;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x8907;&#x96D1;&#x3067;&#x3001;&#x6B63;&#x9762;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x3068;&#x5C4B;&#x53F0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x5D29;&#x58CA;&#x3001;&#x4EE3;&#x308F;&#x308A;&#x8907;&#x88FD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30AF;&#x306F;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x6700;&#x7D42;&#x7684;&#x306B; DNA &#x304B;&#x3089; RNAP displacing &#x5F8C;&#x4F38;&#x9577;&#x3092;&#x518D;&#x958B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3092;&#x8EE2;&#x5199;&#x4FEE;&#x7406;&#x7D50;&#x5408;&#x4FC2;&#x6570; Mfd &#x76F4;&#x63A5;&#x518D;&#x8D77;&#x52D5;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30AF;&#x306E;&#x885D;&#x7A81;&#x5F8C;&#x3001;RNAP &#x306E;&#x5909;&#x4F4D;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;. &#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x77E5;&#x898B;&#x306E;&#x8907;&#x88FD;&#x88C5;&#x7F6E;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; RNAP &#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x904E;&#x53BB;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x8EE2;&#x5199;&#x5171;&#x5F79;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x672A;&#x77E5;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306F;&#x3001;&#x672C;&#x8CEA;&#x7684;&#x306A;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x76F4;&#x63A5;&#x6B63;&#x9762;&#x306E; RNA &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5931;&#x901F;&#x8907;&#x88FD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30AF;&#x306E;&#x518D;&#x8D77;&#x52D5;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

In vivo &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC81C;&#xC548; &#xBA38;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC804;&#xC0AC; &#xB2E8;&#xC9C0;&#xC640; &#xD3EC;&#xD06C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCCB4;&#xD3EC;&#xB294; &#xBCF5;&#xC81C;&#xAC00; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, replisome &#xBC0F; RNA &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C; (RNAP) &#xC815;&#xBA74; &#xCDA9;&#xB3CC; &#xD6C4;&#xC758; &#xC6B4;&#xBA85;&#xC744; &#xC54C; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0; replisome&#xC758; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD558; &#xACE0;, &#xBA38;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC804;&#xC0AC;&#xC640; &#xCDA9;&#xB3CC; &#xC2DC; &#xD3EC;&#xC7A5; &#xB9C8;&#xCC28; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xCD95;&#xC18C;, &#xB300;&#xC2E0; &#xBCF5;&#xC81C; &#xD3EC;&#xD06C; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558; &#xACE0; &#xACB0;&#xAD6D; &#xC2E0;&#xC7A5; displacing DNA&#xC5D0;&#xC11C; RNAP &#xD6C4; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xC2DC;&#xC791; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xC804;&#xC0AC; &#xC218;&#xB9AC; &#xCEE4;&#xD50C;&#xB9C1; &#xACC4;&#xC218; Mfd&#xB294; RNAP&#xC758; &#xBCC0;&#xC704;&#xB97C; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558; &#xC5EC; &#xCDA9;&#xB3CC; &#xD6C4; &#xD3EC;&#xD06C;&#xB97C; &#xC9C1;&#xC811; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xC2DC;&#xC791; &#xC99D;&#xC9C4;&#xC744; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xBCF5;&#xC81C; &#xC7A5;&#xCE58; &#xBC0F; &#xACFC;&#xAC70;&#xC758; RNAP &#xBE14;&#xB85D; &#xBCF5;&#xC81C; &#xD64D;&#xBCF4; &#xC804;&#xC0AC; &#xACB0;&#xD569; &#xBCF5;&#xAD6C; &#xD1B5;&#xB85C; &#xB300; &#xD55C; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C0;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xC5ED;&#xD560;&#xC758; &#xBCF8;&#xC9C8;&#xC801;&#xC778; &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC9C1;&#xC811; &#xBA38;&#xB9AC; RNA &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC9C0;&#xC5F0; &#xBCF5;&#xC81C; &#xD3EC;&#xD06C;&#xC758; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xC2DC;&#xC791; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Estudios in vivo indican que la replicaci&oacute;n tenedores son arrestados por encuentros con complejos de transcripci&oacute;n frontal. Sin embargo, desconoce el destino del replisoma y ARN polimerasa (RNAP) despu&eacute;s de una colisi&oacute;n frontal. Se encontr&oacute; que el replisoma de Escherichia coli se atasca colisi&oacute;n con una compleja de transcripci&oacute;n frontal, pero en lugar de derrumbarse, la horquilla de replicaci&oacute;n se mantiene muy estable y finalmente reanuda alargamiento despu&eacute;s de desplazar el descubrimiento del ADN. Tambi&eacute;n encontramos que el factor de acoplamiento de reparaci&oacute;n transcripci&oacute;n Mfd promueve directa reinicio de la horquilla despu&eacute;s de la colisi&oacute;n, facilitando el desplazamiento de la RNAP. Estos resultados demuestran la estabilidad intr&iacute;nseca del aparato replicaci&oacute;n y un papel previamente desconocido para la v&iacute;a de reparaci&oacute;n transcripci&oacute;n-juntada en la promoci&oacute;n de replicaci&oacute;n m&aacute;s all&aacute; de un bloque de descubrimiento.

Reiniciar directo de una horquilla de replicaci&oacute;n que se estanc&oacute; por una frente de ARN polimerasa.

&#x7531;&#x4E8E;&#x4E0E;&#x8F6C;&#x5F55;&#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x78B0;&#x649E;&#x590D;&#x5236;&#x53C9;&#x7684;&#x902E;&#x6355;&#x5BFC;&#x81F4;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x4E0D;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x3002;&#x4FC3;&#x590D;&#x5236;&#x53C9;&#x8FC7;&#x53BB;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#x7E41;&#x6B96;&#x548C;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7684;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x76F4;&#x63A5;&#x8C03;&#x67E5;&#x7684;&#x78B0;&#x649E;&#x4E0E;&#x4F53;&#x5916; RNAP &#x805A;&#x5408;&#x9176; (RNAP) replisome &#x7684;&#x540E;&#x679C;&#xFF0C;&#x5E76;&#x63D0;&#x4F9B;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x9047;&#x5230;&#x7684;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B0;&#x578B;&#x673A;&#x5236;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x89E3;&#x51B3;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x4F53;&#x5185;&#x548C;&#x4F53;&#x5916;&#x7814;&#x7A76;&#x8F85;&#x52A9; DNA helicases &#x4FC3;&#x8FDB;&#x8F6C;&#x5F55;&#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x8DEF;&#x969C;&#x901A;&#x8FC7;&#x590D;&#x5236;&#x7684;&#x957F;&#x671F;&#x5047;&#x8BBE;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x652F;&#x6301;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BA1;&#x67E5;&#x5236;&#x8BA2;&#x7EC6;&#x83CC; replisome &#x5982;&#x4F55;&#x5904;&#x7406;&#x8F6C;&#x5F55;&#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x6CBF;&#x8DEF;&#x5F84;&#x7684;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x91CD;&#x590D;&#x6211;&#x4EEC;&#x76EE;&#x524D;&#x4E86;&#x89E3;&#x7684;&#x8FC7;&#x53BB;&#x548C;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x8FDB;&#x5C55;&#x3002;

&#x5F53;&#x590D;&#x5236;&#x548C;&#x8F6C;&#x5F55;&#x7269;&#x76F8;&#x649E;&#x65F6;&#xFF0C;&#x4F1A;&#x53D1;&#x751F;&#x4EC0;&#x4E48;&#xFF1F;

The arrest of replication forks due to collisions with transcription complexes leads to genomic instability and cell death. Mechanisms that promote the progression of replication forks past transcription complexes are therefore essential for propagation and preservation of the genome. Recent studies of E. coli directly investigate the consequences of collisions of the replisome with RNAP polymerase (RNAP) in vitro and provide novel mechanisms by which these encounters may be resolved. Additionally, recent in vivo and in vitro studies support the longstanding hypothesis that auxiliary DNA helicases promote replication through roadblocks such as transcription complexes. Here we review past and recent advances that formulate our current understanding of how the bacterial replisome deals with transcription complexes along the path of chromosome duplication.

What happens when replication and transcription complexes collide?

L&#39;arrestation de fourches de r&eacute;plication &agrave; cause de collisions avec des complexes de transcription conduit &agrave; l&#39;instabilit&eacute; g&eacute;nomique et de la mort cellulaire. M&eacute;canismes qui facilitent la progression des fourches de r&eacute;plication pass&eacute; complexes de transcription sont donc essentielles pour la propagation et de la pr&eacute;servation du g&eacute;nome. Des &eacute;tudes r&eacute;centes d&#39;e. coli directement enqu&ecirc;ter sur les cons&eacute;quences des collisions de la replisome avec la polym&eacute;rase RNAP (RNAP) in vitro et fournissent de nouveaux m&eacute;canismes par lesquels ces rencontres peuvent &ecirc;tre r&eacute;solus. En outre, r&eacute;centes &eacute;tudes in vivo et in vitro appuient l&#39;hypoth&egrave;se de longue date qu&#39;auxiliaires ADN h&eacute;licases promouvoir la reproduction par le biais de barrages routiers tels que les complexes de transcription. Ici nous passons en revue les progr&egrave;s pass&eacute;s et r&eacute;cents que formuler notre compr&eacute;hension actuelle de la fa&ccedil;on dont la replisome bact&eacute;rienne traite complexes de transcription sur le chemin de la duplication du chromosome.

Que se passe-t-il lorsque des complexes de r&eacute;plication et la transcription en collision ?

Die Verhaftung von Replikation Gabeln durch Kollisionen mit Transkription-komplexe f&uuml;hrt zu genomische Instabilit&auml;t und Zelltod. Mechanismen, die das Fortschreiten der Replikation Gabeln Vergangenheit Transkription-komplexe zu f&ouml;rdern sind daher wesentlich f&uuml;r die Verbreitung und Bewahrung des Genoms. Neuere Studien von E. Coli direkt untersuchen die Folgen von Kollisionen von Replisom mit Name Polymerase (Name) in-vitro- und bieten neuartige Mechanismen, mit denen diese Begegnungen, gel&ouml;st werden k&ouml;nnen. Dar&uuml;ber hinaus unterst&uuml;tzen aktuelle in-vivo und in vitro Studien die langj&auml;hrige Hypothese, dass zus&auml;tzliche DNA-Helikasen Replikation durch Hindernisse wie Transkription-komplexe f&ouml;rdern. Hier &uuml;berpr&uuml;fen wir vergangene und aktuelle Fortschritte, die unser gegenw&auml;rtige Verst&auml;ndnis des bakteriellen Replisom mit Transkription-komplexe entlang des Chromosoms Vervielf&auml;ltigung zu formulieren.

Was passiert, wenn die Replikation und Transkription komplexe kollidieren?

L&#39;arresto di forcelle replica a causa di collisioni con complessi di trascrizione porta alla instabilit&agrave; genomica e delle cellule morte. Meccanismi che promuovono la progressione delle forcelle replica passato trascrizione complessi sono quindi essenziali per la propagazione e conservazione del genoma. Recenti studi di e. coli direttamente indagare le conseguenze delle collisioni di replisome con la polimerasi RNAP (RNAP) in vitro e forniscono nuovi meccanismi con cui questi incontri possono essere risolti. Inoltre, recenti studi in vivo e in vitro supportano l&#39;ipotesi pluriennale che ausiliari DNA elicasi promuovano replica attraverso blocchi stradali quali complessi di trascrizione. Qui recensiamo passati e recenti progressi che formulare la nostra attuale comprensione di come il replisome batterica si occupa di complessi di trascrizione lungo il percorso della duplicazione del cromosoma.

Cosa succede quando si scontrano complessi replica e trascrizione?

&#x8EE2;&#x5199;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3068;&#x306E;&#x885D;&#x7A81;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x8907;&#x88FD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30AF;&#x306E;&#x902E;&#x6355;&#x306F;&#x3001;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x306B; &#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x904E;&#x53BB;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x8907;&#x88FD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30AF;&#x306E;&#x9032;&#x884C;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x4F1D;&#x64AD;&#x3068;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x4FDD;&#x5168;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x306E;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;&#x76F4;&#x63A5; replisome RNAP &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; (RNAP) in vitro &#x3067;&#x306E;&#x885D;&#x7A81;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3092;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3057;&#x3001;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x304C;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x65B0;&#x898F;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x304C;&#x89E3;&#x6C7A;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E; in vivo &#x304A;&#x3088;&#x3073; in vitro &#x3067;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x88DC;&#x52A9; DNA &#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x8EE2;&#x5199;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x969C;&#x5BB3;&#x7269;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x9577;&#x5E74;&#x306E;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x3069;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x7D30;&#x83CC; replisome &#x8EE2;&#x5199;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x306E;&#x91CD;&#x8907;&#x306E;&#x30D1;&#x30B9;&#x306B;&#x6CBF;&#x3063;&#x3066;&#x3092;&#x6271;&#x3046;&#x5F53;&#x793E;&#x306E;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x7406;&#x89E3;&#x3092;&#x7B56;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x904E;&#x53BB;&#x3068;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x9032;&#x6B69;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x8907;&#x88FD;&#x3068;&#x8EE2;&#x5199;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x885D;&#x7A81;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x304D;&#x4F55;&#x304C;&#x8D77;&#x3053;&#x308B;&#x304B;&#xFF1F;

&#xC804;&#xC0AC; &#xB2E8;&#xC9C0;&#xC640;&#xC758; &#xCDA9;&#xB3CC; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xBCF5;&#xC81C; &#xD3EC;&#xD06C;&#xC758; &#xCCB4;&#xD3EC; genomic &#xBD88;&#xC548;&#xC815;&#xC131; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC5D0; &#xC774;&#xB974;&#xAC8C;. &#xBCF5;&#xC81C; &#xD3EC;&#xD06C; &#xC804;&#xC0AC; &#xB2E8;&#xC9C0; &#xACFC;&#xAC70;&#xC758; &#xC9C4;&#xD589;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558;&#xB294; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC740; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC804;&#xD30C; &#xBC0F; &#xAC8C;&#xB188;&#xC758; &#xBCF4;&#xC874;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0;&#xC758; &#xCD5C;&#xADFC; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xC9C1;&#xC811; RNAP &#xD6A8;&#xC18C; (RNAP) &#xCCB4; &#xC678;&#xC640; replisome&#xC758; &#xCDA9;&#xB3CC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558; &#xACE0; &#xC18C;&#xC124; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC740; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC870;&#xC6B0;&#xB97C; &#xD574;&#xACB0;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xCD5C;&#xADFC; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC624;&#xB79C; &#xAC00;&#xC124; &#xBCF4;&#xC870; DNA helicases &#xD64D;&#xBCF4; &#xC804;&#xC0AC; &#xB2E8;&#xC9C0; &#xAC19;&#xC740;&#xB85C; &#xD1B5;&#xD574; &#xBCF5;&#xC81C;&#xB97C; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; &#xC138;&#xADE0; replisome &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xBCF5;&#xC81C; &#xACBD;&#xB85C; &#xB530;&#xB77C; &#xC804;&#xC1A1; &#xB2E8;&#xC9C0; &#xB2E4;&#xB8E8;&#xB294; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xD604;&#xC7AC; &#xC774;&#xD574;&#xB97C; &#xACF5;&#xC2DD;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xACFC;&#xAC70;&#xC640; &#xCD5C;&#xADFC; &#xC9C4;&#xBCF4; &#xAC80;&#xD1A0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBCF5;&#xC81C; &#xBC0F; &#xC804;&#xC0AC; &#xB2E8;&#xC9C0; &#xCDA9;&#xB3CC; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0; &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; &#xB429;&#xB2C8;&#xAE4C;?

La detenci&oacute;n de las horquillas de replicaci&oacute;n debido a las colisiones con los complejos de transcripci&oacute;n conduce a la inestabilidad gen&oacute;mica y muerte celular. Mecanismos que promueven la progresi&oacute;n de las horquillas de replicaci&oacute;n m&aacute;s all&aacute; de los complejos de transcripci&oacute;n por lo tanto son esenciales para la propagaci&oacute;n y preservaci&oacute;n del genoma. Estudios recientes de e. coli directamente investigar las consecuencias de las colisiones del replisoma con polimerasa ARNP (RNAP) in vitro y proporcionan nuevos mecanismos por los que estos encuentros se pueden resolver. Adem&aacute;s, recientes estudios in vivo e in vitro apoyan la hip&oacute;tesis de larga data que auxiliar ADN helicasas promoci&oacute;n la replicaci&oacute;n a trav&eacute;s de obst&aacute;culos tales como los complejos de transcripci&oacute;n. Aqu&iacute; se revisan los avances pasados y recientes que formulan nuestra actual comprensi&oacute;n de c&oacute;mo el replisoma bacteriano se trata con los complejos de transcripci&oacute;n a lo largo de la ruta de la duplicaci&oacute;n del cromosoma.

&iquest;Qu&eacute; sucede cuando chocan complejos de replicaci&oacute;n y la transcripci&oacute;n?

&#x8F6C;&#x5F55;&#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x548C;&#x590D;&#x5236;&#x53C9;&#x7ECF;&#x5E38;&#x78B0;&#x649E;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5728;&#x7A81;&#x53D8;&#x548C;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x91CD;&#x6392;&#x3002;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x7684;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x5728;&#x51CF;&#x5C11;&#x51B2;&#x7A81;&#x4E4B;&#x95F4;&#x590D;&#x5236;&#x548C;&#x8F6C;&#x5F55;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x8F6C;&#x5F55;&#x76D1;&#x7BA1;&#x673A;&#x6784;&#x4FDD;&#x6301;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x5B8C;&#x6574;&#x6027;&#xFF0C;&#x9632;&#x6B62;&#x590D;&#x5236;&#x53C9;&#x902E;&#x6355;&#x3002;

&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x8D29;&#x8FD0;&#xFF1A; &#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x9632;&#x6B62;&#x590D;&#x5236;&#x53C9;&#x902E;&#x6355;&#x3002;

Replication forks and transcription complexes often collide, which can result in mutagenesis and chromosomal rearrangements. Recent studies of E. coli demonstrate a role for transcription factors in reducing conflicts between replication and transcription. These findings suggest that transcription regulators preserve genome integrity by preventing replication fork arrest.

Polymerase trafficking: A role for transcription factors in preventing replication fork arrest.

Fourches de r&eacute;plication et des complexes de transcription collision souvent, entra&icirc;ner par mutagen&egrave;se et de r&eacute;arrangements chromosomiques. Des &eacute;tudes r&eacute;centes d&#39;e. coli d&eacute;montrent un r&ocirc;le pour les facteurs de transcription dans la r&eacute;duction des conflits entre la r&eacute;plication et la transcription. Ces r&eacute;sultats sugg&egrave;rent que les r&eacute;gulateurs de transcription pr&eacute;servent l&#39;int&eacute;grit&eacute; du g&eacute;nome en emp&ecirc;chant l&#39;arrestation de fourche de r&eacute;plication.

Trafic de polym&eacute;rase : un r&ocirc;le pour la transcription factors in emp&ecirc;chant l&#39;arrestation de fourche de r&eacute;plication.

Gabeln der Replikation und Transkription-komplexe kollidieren oft, was zu Mutagenese und chromosomale Rearrangements f&uuml;hren. Neuere Studien von E. Coli zeigen eine Rolle f&uuml;r Transkriptionsfaktoren in Konflikten zwischen Replikation und Transkription. Diese Forschungsergebnisse legen nahe, dass Transkription Regulierungsbeh&ouml;rden Genom Integrit&auml;t zu wahren, indem verhindert die Replikation Gabel Verhaftung.

Polymerase Menschenhandel: Faktoren eine Rolle f&uuml;r die Transkription, Replikation Gabel Verhaftung zu verhindern.

Forche di replicazione e trascrizione complessi spesso collidono, che pu&ograve; causare mutagenesi e riarrangiamenti cromosomici. Recenti studi di e. coli dimostrano un ruolo per i fattori di trascrizione nel ridurre i conflitti tra replica e trascrizione. Questi risultati suggeriscono che regolatori di trascrizione preservano l&#39;integrit&agrave; del genoma impedendo l&#39;arresto forcella replica.

Polimerasi traffico: un ruolo per trascrizione fattori nella prevenzione di arresto forcella replica.

&#x8907;&#x88FD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30AF;&#x3068;&#x8EE2;&#x5199;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x983B;&#x7E41;&#x306F;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x8A98;&#x767A;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x518D;&#x914D;&#x5217;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x885D;&#x7A81;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x306E;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;&#x8907;&#x88FD;&#x3068;&#x8EE2;&#x5199;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x7AF6;&#x5408;&#x3092;&#x6E1B;&#x3089;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8907;&#x88FD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30AF;&#x505C;&#x6B62;&#x3092;&#x9632;&#x3050;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8EE2;&#x5199;&#x5236;&#x5FA1;&#x56E0;&#x5B50;&#x304C;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x6574;&#x5408;&#x6027;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x4EBA;&#x8EAB;&#x58F2;&#x8CB7;&#xFF1A; &#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x8907;&#x88FD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30AF;&#x505C;&#x6B62;&#x3092;&#x9632;&#x3050;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3002;

&#xBCF5;&#xC81C; &#xD3EC;&#xD06C;&#xC640; &#xC804;&#xC0AC; &#xB2E8;&#xC9C0; &#xC790;&#xC8FC; &#xCDA9;&#xB3CC;, &#xC788;&#xB294; mutagenesis &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xC7AC;&#xBC30;&#xC5F4; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0;&#xC758; &#xCD5C;&#xADFC; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB530;&#xB974;&#xBA74; &#xBCF5;&#xC81C;&#xC640; &#xC804;&#xC0AC; &#xAC04;&#xC758; &#xCDA9;&#xB3CC;&#xC744; &#xAC10;&#xC18C; &#xC2DC;&#xD0A4;&#xB294; &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC804;&#xC0AC; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130; &#xBCF5;&#xC81C; &#xD3EC;&#xD06C; &#xCCB4;&#xD3EC;&#xB97C; &#xBC29;&#xC9C0; &#xD558; &#xC5EC; &#xAC8C;&#xB188; &#xBB34;&#xACB0;&#xC131;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD6A8;&#xC18C; &#xC778;&#xC2E0; &#xB9E4;&#xB9E4;: &#xC804;&#xC0AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560; &#xBCF5;&#xC81C; &#xD3EC;&#xD06C; &#xCCB4;&#xD3EC; &#xC608;&#xBC29; &#xC694;&#xC778;.

Las horquillas de replicaci&oacute;n y transcripci&oacute;n complejos a menudo chocan, que puede resultar en mutag&eacute;nesis y cambios cromos&oacute;micos. Estudios recientes de e. coli demuestran un papel para los factores de transcripci&oacute;n en reducir los conflictos entre la replicaci&oacute;n y la transcripci&oacute;n. Estos resultados sugieren que los reguladores de la transcripci&oacute;n preservan la integridad de genoma por impedir detenci&oacute;n de horquilla de replicaci&oacute;n.

Polimerasa tr&aacute;fico: un papel para la transcripci&oacute;n de factores en la prevenci&oacute;n de la detenci&oacute;n de horquilla de replicaci&oacute;n.

Article	Year
A tightly regulated molecular motor based upon T7 RNA polymerase. Nano letters\| PubMed ID: 16159208	2005
A mechanism of nucleotide misincorporation during transcription due to template-strand misalignment. Molecular cell\| PubMed ID: 17052458	2006
Template misalignment in multisubunit RNA polymerases and transcription fidelity. Molecular cell\| PubMed ID: 17052459	2006
Replisome mechanics: insights into a twin DNA polymerase machine. Trends in microbiology\| PubMed ID: 17350265	2007
The replisome uses mRNA as a primer after colliding with RNA polymerase. Nature\| PubMed ID: 19020502	2008
Direct restart of a replication fork stalled by a head-on RNA polymerase. Science (New York, N.Y.)\| PubMed ID: 20110508	2010
What happens when replication and transcription complexes collide? Cell cycle (Georgetown, Tex.)\| PubMed ID: 20581460	2010
Polymerase trafficking: A role for transcription factors in preventing replication fork arrest. Transcription\| PubMed ID: 21326887	2010

Richard T. Pomerantz

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