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<em>In situ</em> Subcellular Fractionation of Adherent and Non-adherent Mammalian Cells

Protein function is intimately coupled to protein localization. Although some proteins are restricted to a specific location or subcellular compartment, ...

University of Bristol

&#x5BCC;&#x542B;&#x812F;&#x6C28;&#x9178;&#x7684; homeodomain &#x86CB;&#x767D; (&#x516C;/&#x5341;&#x516D;&#x8FDB;&#x5236;) &#x8C03;&#x8282;&#x8F6C;&#x5F55;&#x901A;&#x8FC7;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684; DNA &#x5E8F;&#x5217;&#xFF0C;&#x5E76;&#x89C4;&#x5B9A;&#x901A;&#x8FC7;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x8D77;&#x59CB;&#x56E0;&#x5B50; eIF4E mRNA &#x8FD0;&#x8F93;&#x3002;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; CK2 &#x5728;&#x8C03;&#x8282;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x4E2D;&#x626E;&#x6F14;&#x591A;&#x4E2A;&#x89D2;&#x8272;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x516C;&#x4EA4;&#x4E92; &beta; &#x4E9A;&#x57FA; CK2 &#x4F53;&#x5916;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C; CK2 phosphorylates &#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x3002;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x7684;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x7684; CK2 &#x6291;&#x5236; DNA &#x7ED3;&#x5408;&#x7684;&#x8FD9;&#x79CD;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#x548C;&#x8131;&#x6C2E;&#x9664;&#x78F7;&#x8FD8;&#x539F; DNA &#x5177;&#x6709;&#x7EA6;&#x675F;&#x529B;&#xFF0C;&#x8BE5;&#x503C;&#x6307;&#x793A;&#x6B64;&#x4FEE;&#x6539;&#x5145;&#x5F53;&#x4E00;&#x4E2A;&#x53EF;&#x9006;&#x5F00;&#x5173;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; homeodomain &#x7684;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x662F;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x963B;&#x6B62; DNA &#x7ED1;&#x5B9A;&#x548C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC6;&#x522B;&#x5185;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x90FD;&#x7531; CK2 &#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x7684;&#x57DF;&#xFF1A; S163 &#x548C; S177&#x3002;&#x5B9A;&#x70B9;&#x7A81;&#x53D8;&#x6F14;&#x793A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6B8B;&#x7559;&#x5BF9;&#x8C37;&#x6C28;&#x9178;&#x4E4B;&#x4E00;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x90E8;&#x5206;&#x6A21;&#x4EFF;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x5B8C;&#x5168;&#x963B;&#x6B62; DNA &#x7ED1;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x800C; S163E/S177E &#x53CC;&#x7A81;&#x53D8;&#x4E25;&#x91CD;&#x6291;&#x5236; DNA &#x7ED1;&#x5B9A;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;S163E &#x548C; S177E &#x57FA;&#x56E0;&#x7A81;&#x53D8;&#x548C; S163E/S177E &#x53CC;&#x7A81;&#x53D8;&#x6291;&#x5236;&#x8C03;&#x8282;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8F6C;&#x5F55;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x7531;&#x4E8E;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x5B88;&#x6052;&#x8BB8;&#x591A; homeodomain &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4E4B;&#x95F4;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x5EFA;&#x8BAE; CK2 &#x53EF;&#x89C4;&#x7BA1;&#x4EE5;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B9;&#x5F0F;&#x7684;&#x51E0;&#x4E2A; homeodomain &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;

CK2 &#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x516C;/&#x5341;&#x516D;&#x8FDB;&#x5236; homeodomain DNA &#x7ED1;&#x5B9A;&#x7684;&#x53EF;&#x9006;&#x5F00;&#x5173;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

The proline-rich homeodomain protein (PRH/Hex) regulates transcription by binding to specific DNA sequences and regulates mRNA transport by binding to translation initiation factor eIF4E. Protein kinase CK2 plays multiple roles in the regulation of gene expression and cell proliferation. Here, we show that PRH interacts with the beta subunit of CK2 in vitro and in cells and that CK2 phosphorylates PRH. Phosphorylation of PRH by CK2 inhibits the DNA binding activity of this protein and dephosphorylation restores DNA binding indicating that this modification acts as a reversible switch. We show that phosphorylation of the homeodomain is sufficient to block DNA binding and we identify two amino acids within this the domain that are phosphorylated by CK2: S163 and S177. Site-directed mutagenesis demonstrates that mutation of either of these residues to glutamic acid partially mimics phosphorylation but is insufficient to completely block DNA binding whereas an S163E/S177E double mutation severely inhibits DNA binding. Significantly, the S163E and S177E mutations and the S163E/S177E double mutation all inhibit the ability of PRH to regulate transcription in cells. Since these amino acids are conserved between many homeodomain proteins, our results suggest that CK2 may regulate the activity of several homeodomain proteins in this manner.

CK2 phosphorylation of the PRH/Hex homeodomain functions as a reversible switch for DNA binding.

La prot&#xE9;ine hom&#xE9;odomaine riche en proline (PRH / Hex) r&#xE9;gule la transcription en se liant &#xE0; des s&#xE9;quences d&#x26;#39;ADN sp&#xE9;cifiques et r&#xE9;gule le transport des ARNm en se liant &#xE0; eIF4E facteur d&#x26;#39;initiation de traduction. La prot&#xE9;ine kinase CK2 joue de multiples r&#xF4;les dans la r&#xE9;gulation de l&#x26;#39;expression g&#xE9;nique et la prolif&#xE9;ration cellulaire. Ici, nous montrons que PRH interagit avec la sous-unit&#xE9; b&#xEA;ta de la CK2 in vitro et dans les cellules et que CK2 phosphoryle PRH. La phosphorylation de la PRH par CK2 inhibe l&#x26;#39;activit&#xE9; de liaison d&#x26;#39;ADN de cette prot&#xE9;ine et la d&#xE9;phosphorylation restaure liaison &#xE0; l&#x26;#39;ADN indiquant que cette modification agit comme un interrupteur r&#xE9;versible. Nous montrons que la phosphorylation de l&#x26;#39;hom&#xE9;odomaine est suffisante pour bloquer liaison &#xE0; l&#x26;#39;ADN et nous identifions deux acides amin&#xE9;s au sein de ce domaine qui sont la phosphorylation par CK2: S163 et S177. Mutagen&#xE8;se dirig&#xE9;e montre que la mutation de l&#x26;#39;un de ces r&#xE9;sidus &#xE0; l&#x26;#39;acide glutamique imite partiellement la phosphorylation, mais est insuffisant pour bloquer compl&#xE8;tement liaison &#xE0; l&#x26;#39;ADN alors une mutation S163E/S177E &#xE0; double inhibe fortement liaison &#xE0; l&#x26;#39;ADN. De mani&#xE8;re significative, les mutations et S163E S177E et la mutation S163E/S177E doubles, toutes inhiber la capacit&#xE9; de PRH pour r&#xE9;guler la transcription dans les cellules. &#xC9;tant donn&#xE9; que ces acides amin&#xE9;s sont conserv&#xE9;s entre les prot&#xE9;ines &#xE0; hom&#xE9;odomaine nombreux, nos r&#xE9;sultats sugg&#xE8;rent que CK2 peut r&#xE9;glementer l&#x26;#39;activit&#xE9; des prot&#xE9;ines &#xE0; hom&#xE9;odomaine plusieurs de cette mani&#xE8;re.

La phosphorylation de la CK2 les fonctions hom&#xE9;odomaine PRH / Hex comme un interrupteur r&#xE9;versible pour liaison &#xE0; l&#x26;#39;ADN

Das Prolin-reiche Hom&ouml;odom&auml;ne-Protein (PRH/Hex) regelt die Transkription durch Bindung an spezifische DNA-Sequenzen und mRNA-Transport durch Bindung an &Uuml;bersetzung Einleitung Faktor eIF4E regelt. Proteinkinase CK2 spielt mehrere Rollen bei der Regulierung der Genexpression und Zellvermehrung. Hier zeigen wir, dass die Beta-Untereinheit des CK2 in-vitro- und in den Zellen PRH interagiert und CK2 PRH phosphorylates. Phosphorylierung von PRH von CK2 hemmt die DNA-bindende Aktivit&auml;t dieses Proteins und Dephosphorylierung stellt DNA Bindung darauf hinweist, dass diese &Auml;nderung als reversible Switch fungiert. Wir zeigen, dass die Phosphorylierung von der Hom&ouml;odom&auml;ne ist ausreichend, um die DNA-Bindung zu blockieren und wir identifizieren zwei Aminos&auml;uren innerhalb dieser Dom&auml;ne, die von CK2 phosphoryliert sind: S163 und S177. Site-verwiesene Mutagenese zeigt, dass die Mutation eines dieser R&uuml;ckst&auml;nde zu Glutamins&auml;ure teilweise imitiert Phosphorylierung ist jedoch nicht ausreichend, DNA-Bindung vollst&auml;ndig zu blockieren, w&auml;hrend eine doppelte S163E/S177E-Mutation stark hemmt die DNA-Bindung. Deutlich, die S163E und S177E-Mutationen und die doppelte S163E/S177E-Mutation alle hemmen die F&auml;higkeit von PRH, Transkription in den Zellen zu regulieren. Da diese Aminos&auml;uren zwischen vielen Hom&ouml;odom&auml;ne Proteinen konserviert werden, zufolge unseren Ergebnissen CK2 die Aktivit&auml;t von mehreren Hom&ouml;odom&auml;ne-Proteinen auf diese Weise regulieren kann.

CK2 Phosphorylierung von PRH/Hex-Hom&ouml;odom&auml;ne fungiert als reversible Schalter f&uuml;r DNA-Bindung.

La proteina homeodomain ricco di prolina (PRH/Hex) regola la trascrizione, legandosi a specifiche sequenze di DNA e regola il trasporto di mRNA legandosi alla traduzione iniziazione fattore eIF4E. Proteina chinasi CK2 svolge molteplici ruoli nella regolazione dell&#39;espressione genica e la proliferazione cellulare. Qui, vi mostriamo che PRH interagisce con la subunit&agrave; beta di CK2 in vitro e nelle cellule e che CK2 tirosine PRH. Il DNA che attivit&agrave; di questa proteina inibisce la fosforilazione di PRH da CK2 e defosforilazione Ripristina DNA binding che indica che questa modifica agisce come un interruttore reversibile. Mostriamo che la fosforilazione dell&#39;omeodominio &egrave; sufficiente a bloccare il legame del DNA e identifichiamo due amminoacidi all&#39;interno di questo dominio che sono fosforilati da CK2: S163 e S177. Mutagenesi luogo-diretta dimostra che la mutazione di uno di questi residui di acido glutammico parzialmente imita la fosforilazione ma non &egrave; sufficiente a bloccare completamente il legame del DNA mentre una S163E/S177E doppia mutazione inibisce gravemente grippaggio del DNA. Significativamente, le mutazioni S163E e S177E e la S163E/S177E doppia mutazione tutti inibiscono la capacit&agrave; di regolare la trascrizione nelle cellule PRH. Poich&eacute; questi amminoacidi sono conservati tra molte proteine homeodomain, i nostri risultati suggeriscono che CK2 possono disciplinare l&#39;attivit&agrave; di diverse proteine homeodomain in questo modo.

CK2 fosforilazione dell&#39;omeodominio PRH/Hex funziona come un interruttore reversibile per grippaggio del DNA.

&#x30D7;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C1;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;PRH /&#x30D8;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;DNA&#x914D;&#x5217;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8EE2;&#x5199;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x3001;&#x7FFB;&#x8A33;&#x958B;&#x59CB;&#x56E0;&#x5B50;eIF4E&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;mRNA&#x306E;&#x8F38;&#x9001;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;CK2&#x306F;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;PRH&#x306F;&#x3001;in vitro&#x3067;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x305D;&#x306E;CK2&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;PRH&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;CK2&#x306E;&#x3B2;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; CK2&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;PRH&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x306F;&#x3053;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;DNA&#x7D50;&#x5408;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x3001;&#x8131;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x5909;&#x66F4;&#x306F;&#x53EF;&#x9006;&#x30B9;&#x30A4;&#x30C3;&#x30C1;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;DNA&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x3092;&#x5FA9;&#x5143;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x306F;&#x3001;DNA&#x7D50;&#x5408;&#x3092;&#x963B;&#x6B62;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5341;&#x5206;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;CK2&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x5185;&#x306E;2&#x3064;&#x306E;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;S163&#x3068;S177&#x3002;&#x90E8;&#x4F4D;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x8A98;&#x767A;&#x6CD5;&#x306F;&#x3001;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x9178;&#x306B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6B8B;&#x57FA;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x304C;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306B;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3092;&#x6A21;&#x5023;&#x3057;&#x306A;&#x304F;S163E/S177E&#x4E8C;&#x91CD;&#x5909;&#x7570;&#x306F;&#x6DF1;&#x523B;&#x306A;DNA&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3001;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;DNA&#x7D50;&#x5408;&#x3092;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x4E0D;&#x5341;&#x5206;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x304B;&#x306A;&#x308A;&#x3001;S163E S177E&#x3068;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x3068;S163E/S177E&#x4E8C;&#x91CD;&#x5909;&#x7570;&#x306F;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;PRH&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x9593;&#x3067;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;CK2&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;

DNA&#x7D50;&#x5408;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x53EF;&#x9006;&#x30B9;&#x30A4;&#x30C3;&#x30C1;&#x3068;&#x3057;&#x3066;HEX / PRH&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;CK2&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;

&#xD504;&#xB864;&#xB9B0; &#xBD80;&#xC720;&#xD55C; homeodomain &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (PRH/16 &#xC9C4;&#xC218;) &#xD2B9;&#xC815; DNA &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xC5EC; &#xC804;&#xC0AC; &#xC870;&#xC808; &#xBC0F; mRNA &#xC804;&#xC1A1; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xBC88;&#xC5ED; &#xAC1C;&#xC2DC; &#xC778;&#xC790; Eif4e&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC870;&#xC808;. &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; CK2 &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD;&#xC758; &#xADDC;&#xC815;&#xC5D0; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; PRH CK2 &#xCCB4; &#xC678;&#xC758; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704;&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558; &#xACE0; CK2 PRH phosphorylates &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. CK2 &#xD558; &#xC5EC; PRH&#xC758; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; &#xC5B5;&#xC81C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC774; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xBB36;&#xB294; DNA&#xC640; dephosphorylation DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294;&#xC774; &#xC218;&#xC815; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD574; &#xC2A4;&#xC704;&#xCE58; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xBCF5;&#xC6D0;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; homeodomain&#xC758; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xB294; DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xCC28;&#xB2E8; &#xD558;&#xAE30;&#xC5D0; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0;&#xC774; &#xB0B4; ck2&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; phosphorylated &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD45C;&#xC2DC;: S163 &#xBC0F; S177. &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xC9C0;&#xC2DC; &#xB41C; mutagenesis &#xAE00;&#xB8E8;&#xD0D0;&#xC0B0;&#xC744; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC758; &#xBCC0;&#xC774; &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xB97C; &#xBAA8;&#xBC29; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; S163E/S177E &#xC774;&#xC911; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC2EC;&#xAC01; DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xBC18;&#xBA74; DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC744; &#xC644;&#xC804;&#xD788; &#xCC28;&#xB2E8; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD06C;&#xAC8C;, S163E &#xBC0F; S177E &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; S163E/S177E &#xC774;&#xC911; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC804;&#xC0AC;&#xB97C; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294; PRH&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0;&#xC740; &#xB9CE;&#xC740; homeodomain &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xBCF4;&#xC874;, &#xC774;&#xD6C4; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; CK2 &#xC774;&#xC640;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC00;&#xC9C0; homeodomain &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

PRH/16 &#xC9C4;&#xC218; homeodomain&#xC758; CK2 &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC00;&#xC5ED; &#xC2A4;&#xC704;&#xCE58;&#xB85C; &#xC791;&#xB3D9;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La prote&#xED;na homeodominio rica en prolina (PRH / Hex) regula la transcripci&#xF3;n mediante la uni&#xF3;n a secuencias espec&#xED;ficas de ADN y regula el transporte del ARNm al unirse a eIF4E factor de iniciaci&#xF3;n de la traducci&#xF3;n. La prote&#xED;na quinasa CK2 desempe&#xF1;a m&#xFA;ltiples funciones en la regulaci&#xF3;n de la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica y la proliferaci&#xF3;n celular. Aqu&#xED;, mostramos que el PRH interact&#xFA;a con la subunidad beta de CK2 in vitro y en c&#xE9;lulas y que CK2 fosforila PRH. La fosforilaci&#xF3;n de PRH por CK2 inhibe la actividad de uni&#xF3;n al ADN de esta prote&#xED;na y la desfosforilaci&#xF3;n restaura uni&#xF3;n al ADN que indica que esta modificaci&#xF3;n act&#xFA;a como un interruptor reversible. Se demuestra que la fosforilaci&#xF3;n de la homeodominio es suficiente para bloquear la uni&#xF3;n al ADN y nos identificamos dos amino&#xE1;cidos dentro de este dominio del que se fosforila por CK2: S163 y S177. Sitio de mutag&#xE9;nesis dirigida demuestra que la mutaci&#xF3;n de cualquiera de estos residuos a &#xE1;cido glut&#xE1;mico parte imita la fosforilaci&#xF3;n, pero no es suficiente para bloquear por completo la uni&#xF3;n al ADN, mientras que una doble mutaci&#xF3;n S163E/S177E gravemente inhibe la uni&#xF3;n al ADN. Significativamente, las mutaciones S163E y S177E y la mutaci&#xF3;n doble S163E/S177E todo inhibir la capacidad de PRH para regular la transcripci&#xF3;n en las c&#xE9;lulas. Puesto que estos amino&#xE1;cidos se conserva entre las prote&#xED;nas homeodominio muchos, nuestros resultados sugieren que CK2 puede regular la actividad de las prote&#xED;nas homeodominio varios de esta manera.

CK2 fosforilaci&#xF3;n de las funciones del homeodominio PRH / Hex como un interruptor reversible para la uni&#xF3;n al ADN

&#x5BCC;&#x542B;&#x812F;&#x6C28;&#x9178;&#x7684; homeodomain &#x86CB;&#x767D; &#xFF08;&#x516C;&#x5C4B;&#xFF09; &#x626E;&#x6F14;&#x591A;&#x4E2A;&#x89D2;&#x8272;&#x5728;&#x80DA;&#x80CE;&#x53D1;&#x80B2;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x63A7;&#x5236;&#x548C;&#x6210;&#x4EBA;&#x3002;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50; (VEGF) &#x662F;&#x523A;&#x6FC0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x53D7;&#x4F53;&#x5305;&#x62EC;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x53D7;&#x4F53; 1 &#x548C;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x53D7;&#x4F53;-2 &#x901A;&#x8FC7;&#x751F;&#x5B58;&#x7684;&#x4E1D;&#x3002;VEGF &#x4FE1;&#x53F7;&#x662F;&#x5173;&#x952E;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x548C;&#x9020;&#x8840;&#x529F;&#x80FD;&#xFF0C;&#x63D0;&#x5347;&#x5728;&#x8BB8;&#x591A;&#x80BF;&#x7624;&#x4E2D;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x76F4;&#x63A5;&#x5411;&#x5728;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x6848;&#x4F8B;&#x7684;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B; Vegf&#x3001; &#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x53D7;&#x4F53;-1 &#x548C;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x53D7;&#x4F53;-2 &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x533A;&#x57DF;&#x538B;&#x6291;&#x8F6C;&#x5F55;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC1;&#x660E;&#x8FC7;&#x5EA6;&#x8868;&#x8FBE;&#x6216;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x7684;&#x7EC4;&#x5408;&#x5F0F;&#x76F4;&#x63A5;&#x59A8;&#x788D;&#x751F;&#x5B58;&#x7684;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x548C;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4EE5;&#x53CA;&#xFF0C;&#x8C03;&#x5236; VEGF &#x548C; VEGF &#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6548;&#x679C;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x662F; VEGF &#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x901A;&#x8DEF;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x8C03;&#x8282;&#x5668;&#xFF0C;&#x63CF;&#x8FF0;&#x5373;&#x516C;&#x5C4B;&#x53D1;&#x6325;&#x7740;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5728;&#x80BF;&#x7624;&#x548C;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x53D1;&#x75C5;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;/Hhex &#x63A7;&#x4EF6;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x5750;&#x6807;&#x8F6C;&#x5F55;&#x8C03;&#x63A7;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8FC7;&#x751F;&#x5B58;&#x3002;

The proline-rich homeodomain protein (PRH) plays multiple roles in the control of gene expression during embryonic development and in the adult. Vascular endothelial growth factor (VEGF) is a mitogen that stimulates cell proliferation and survival via cell surface receptors including VEGFR-1 and VEGFR-2. VEGF signaling is of critical importance in angiogenesis and hematopoiesis and is elevated in many tumors. Here we show that PRH binds directly to the promoter regions of the Vegf, Vegfr-1, and Vegfr-2 genes and that in each case PRH represses transcription. We demonstrate that overexpression or knockdown of PRH directly impinges on the survival of both leukemic and tumor cells and that the modulation of VEGF and VEGF receptor signaling by PRH mediates these effects. Our findings demonstrate that PRH is a key regulator of the VEGF signaling pathway and describe a mechanism whereby PRH plays an important role in tumorigenesis and leukemogenesis.

PRH/Hhex controls cell survival through coordinate transcriptional regulation of vascular endothelial growth factor signaling.

La prot&#xE9;ine hom&#xE9;odomaine riche en proline (PRH) joue de multiples r&#xF4;les dans le contr&#xF4;le de l&#x26;#39;expression g&#xE9;nique pendant le d&#xE9;veloppement embryonnaire et chez l&#x26;#39;adulte. Facteur de croissance vasculaire endoth&#xE9;liale (VEGF) est un mitog&#xE8;ne qui stimule la prolif&#xE9;ration et la survie cellulaire via des r&#xE9;cepteurs de surface cellulaires, y compris VEGFR-1 et VEGFR-2. Signalisation du VEGF est d&#x26;#39;une importance critique dans l&#x26;#39;angiogen&#xE8;se et l&#x26;#39;h&#xE9;matopo&#xEF;&#xE8;se et est &#xE9;lev&#xE9;e dans de nombreuses tumeurs. Ici, nous montrons que PRH se lie directement &#xE0; des r&#xE9;gions promotrices du VEGF, VEGFR-1, et VEGFR-2 g&#xE8;nes et que dans chaque cas PRH r&#xE9;prime la transcription. Nous d&#xE9;montrons que la surexpression ou inactivation de PRH empi&#xE8;te directement sur la survie des deux cellules leuc&#xE9;miques et de la tumeur et que la modulation du VEGF et de signalisation du r&#xE9;cepteur VEGF par la m&#xE9;diation PRH ces effets. Nos r&#xE9;sultats d&#xE9;montrent que PRH est un r&#xE9;gulateur cl&#xE9; de la voie de signalisation du VEGF et de d&#xE9;crire un m&#xE9;canisme par lequel PRH joue un r&#xF4;le important dans la tumorigen&#xE8;se et la leuc&#xE9;mogen&#xE8;se.

PRH / HHEX contr&#xF4;le la survie cellulaire Par le r&#xE8;glement de la transcription de coordonn&#xE9;es de facteur de croissance vasculaire endoth&#xE9;liale de signalisation

Das Prolin-reiche Hom&ouml;odom&auml;ne-Protein (PRH) spielt mehrere Rollen in der Kontrolle der Genexpression w&auml;hrend der Embryonalentwicklung und in den Erwachsenen. Vaskul&auml;ren endothelialen Wachstumsfaktor (VEGF) ist ein Mitogen, der Zellproliferation und &Uuml;berleben &uuml;ber Zelle Oberfl&auml;che Rezeptoren VEGFR-1 und VEGFR-2 stimuliert. VEGF ist von entscheidender Bedeutung in der Angiogenese und Blutbildung und ist in vielen Tumoren erh&ouml;ht. Hier zeigen wir, dass PRH bindet direkt an die Projekttr&auml;ger Regionen der Vegf, Vegfr-1 und Vegfr-2-gen und, in jedem Fall PRH unterdr&uuml;ckt Transkription. Wir zeigen, dass eine &Uuml;berexpression oder Niederschlag von PRH direkt auf das &Uuml;berleben beide leuk&auml;mischen Tumorzellen und auswirkt die Modulation von VEGF und VEGF-Rezeptor-Signalisierung durch PRH vermittelt diese Effekte. Unsere Ergebnisse zeigen, dass PRH ist ein wichtiger Regulator der VEGF-Signalweg und beschreiben einen Mechanismus, bei dem PRH eine wichtige Rolle bei der Tumorentstehung und Leukemogenesis spielt.

PRH/Hhex Steuerelemente Zelle &Uuml;berleben durch Koordinaten Transkriptionsregulation vaskul&auml;ren endothelialen Wachstumsfaktor zu signalisieren.

La proteina homeodomain ricco di prolina (PRH) svolge molteplici ruoli nel controllo dell&#39;espressione genica durante lo sviluppo embrionale e nell&#39;adulto. Fattore di crescita endoteliale vascolare (VEGF) &egrave; un mitogeno che stimola la proliferazione cellulare e la sopravvivenza tramite recettori di superficie cellulare VEGFR-1 e VEGFR-2. Segnalazione di VEGF &egrave; di importanza critica nella angiogenesi ed ematopoiesi ed &egrave; elevata in molti tumori. Qui vi mostriamo che PRH si lega direttamente alle regioni promotore di geni Vegf, Vegfr-1 e Vegfr-2 e che in ogni caso PRH reprime trascrizione. Dimostriamo che iperespressione o atterramento di PRH incide direttamente sulla sopravvivenza di entrambi leucemici e cellule tumorali e che la modulazione di VEGF e VEGF receptor signaling by PRH media questi effetti. I nostri risultati dimostrano che PRH &egrave; un regolatore chiave della via di segnalazione di VEGF e descrivere un meccanismo per cui PRH gioca un ruolo importante nella tumorigenesi e leucemogenesi.

PRH/Hhex controlli delle cellule di sopravvivenza attraverso coordinate regolazione trascrizionale del fattore di crescita vascolare endoteliale di segnalazione.

&#x30D7;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C1;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;PRH&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x80DA;&#x767A;&#x751F;&#x6642;&#x3084;&#x6210;&#x4F53;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x306B;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x5897;&#x6B96;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF08;VEGF&#xFF09;&#x306F;&#x3001;VEGFR-1&#x3068;VEGFR-2&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x3068;&#x751F;&#x5B58;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3059;&#x308B;&#x30DE;&#x30A4;&#x30C8;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002; VEGF&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306F;&#x3001;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x3068;&#x9020;&#x8840;&#x3067;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x816B;&#x760D;&#x3067;&#x4E0A;&#x6607;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;PRH&#x306F;&#x3001;VEGF&#x3001;VEGFR-1&#x3001;VEGFR-2&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x76F4;&#x63A5;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x306E;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B9;&#x3067;PRH&#x306F;&#x3001;&#x8EE2;&#x5199;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;PRH&#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x3084;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x304C;&#x76F4;&#x63A5;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x3068;&#x816B;&#x760D;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x3068;VEGF&#x3068;VEGF&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x5909;&#x8ABF;&#x304C;PRH&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x305D;&#x306E;&#x200B;&#x200B;&#x885D;&#x7A81;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;PRH&#x306F;&#x3001;VEGF&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;PRH&#x304C;&#x816B;&#x760D;&#x3068;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x8A18;&#x8FF0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

PRH / Hhex&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x5897;&#x6B96;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x5EA7;&#x6A19;&#x8EE2;&#x5199;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;

&#xD504;&#xB864;&#xB9B0; &#xBD80;&#xC720;&#xD55C; homeodomain &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (PRH) &#xBC30;&#xC544; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604; &#xC81C;&#xC5B4; &#xBC0F; &#xC131;&#xC778; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xD608;&#xAD00; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; (VEGF)&#xC740; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD;&#xACFC; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; VEGFR 1 &#xB4F1; VEGFR 2&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC0DD;&#xC874;&#xC744; &#xC790;&#xADF9; &#xD558;&#xB294; &#xBB3C;&#xC9C8;. VEGF &#xC2E0;&#xD638; &#xC911;&#xC694; &#xC2E0;&#xC0DD; &#xBC0F; &#xC870; &#xC774;&#xBA70; &#xB9CE;&#xC740; &#xC885;&#xC591;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0C1;&#xC2B9; &#xB41C; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; PRH &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC9C1;&#xC811; &#xAC01; &#xC0AC;&#xB840; PRH&#xC5D0;&#xC11C; Vegf, Vegfr 1 &#xBC0F; Vegfr-2 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xC9C0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB204;&#xB974;&#xB294; &#xD544; &#xC0AC; &#xC1FC;. Overexpression &#xB610;&#xB294; PRH&#xC758; &#xCD5C;&#xC800;&#xC758; &#xC9C1;&#xC811; leukemic &#xBAA8;&#xB450; &#xC885;&#xC591; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xADF8;&#xC758; &#xC0DD;&#xC874;&#xC5D0; impinges&#xB97C; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xBCC0;&#xC870; VEGF&#xC640; VEGF &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC2E0;&#xD638; PRH&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC911;&#xC7AC;&#xC774; &#xD6A8;&#xACFC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC785;&#xC99D; PRH VEGF &#xC2E0;&#xD638; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xD0A4; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130; &#xC774;&#xBA70;, &#xADF8;&#xAC83;&#xC5D0; &#xC758;&#xD558;&#xC5EC; PRH&#xC740; tumorigenesis&#xC640; leukemogenesis&#xC5D0;&#xC11C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560; &#xD558;&#xB294; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC124;&#xBA85;.

PRH/Hhex &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864;&#xC758; &#xD608;&#xAD00; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; &#xC2E0;&#xD638; &#xC88C;&#xD45C; transcriptional &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xC158;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC0DD;&#xC874; &#xC138;&#xD3EC;.

La prote&#xED;na homeodominio rica en prolina (PRH), desempe&#xF1;a m&#xFA;ltiples funciones en el control de la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica durante el desarrollo embrionario y en el adulto. Factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) es un mit&#xF3;geno que estimula la proliferaci&#xF3;n celular y la supervivencia a trav&#xE9;s de receptores de superficie celular, incluyendo VEGFR-1 y VEGFR-2. Se&#xF1;alizaci&#xF3;n VEGF es de importancia fundamental en la angiog&#xE9;nesis y la hematopoyesis y es elevado en muchos tumores. Aqu&#xED; nos muestran que PRH se une directamente a las regiones promotoras del VEGF, VEGFR-1 y VEGFR-2 genes y que en cada caso PRH reprime la transcripci&#xF3;n. Nos demuestran que la sobreexpresi&#xF3;n o una ca&#xED;da del PRH afecta directamente a la supervivencia de ambas c&#xE9;lulas leuc&#xE9;micas y el tumor y que la modulaci&#xF3;n del VEGF y del receptor de VEGF media la se&#xF1;alizaci&#xF3;n de PRH estos efectos. Nuestros resultados demuestran que PRH es un regulador clave de la v&#xED;a de se&#xF1;alizaci&#xF3;n VEGF y describir un mecanismo por el cual PRH juega un papel importante en la tumorig&#xE9;nesis y leucemog&#xE9;nesis.

PRH / HHEX Controles de supervivencia celular a trav&#xE9;s del Reglamento de coordenadas de la transcripci&#xF3;n del factor de crecimiento endotelial vascular de se&#xF1;alizaci&#xF3;n

&#x81EA;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x86CB;&#x767D;&#x662F;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x548C;&#x7EF4;&#x6301;&#x6838;&#x7ED3;&#x6784;&#x548C;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x8C03;&#x63A7;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4EE5;&#x524D;&#x6240;&#x793A;&#x81EA;&#x4EA7;&#x8FD9;&#x79CD;&#x5BCC;&#x542B;&#x812F;&#x6C28;&#x9178;&#x7684; Homeodomain &#x86CB;&#x767D; (&#x516C;/&#x5341;&#x516D;&#x8FDB;&#x5236;) &#x5F62;&#x6210;&#x5C06;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x6570;&#x7EC4;&#x7684;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x4E0E;&#x9AD8;&#x4EB2;&#x548C;&#x529B;&#x548C;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x7ED3;&#x5408;&#x4F4D;&#x70B9;&#x7684;&#x5BE1;&#x805A;&#x7269;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4E5F;&#x5DF2;&#x8868;&#x660E;&#x8BB8;&#x591A;&#x516C;&#x5C4B;&#x76EE;&#x6807;&#x57FA;&#x56E0;&#x5305;&#x542B;&#x5141;&#x8BB8;&#x8FD9;&#x79CD;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x80FD;&#x591F;&#x7ED1;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x5E76;&#x8C03;&#x8282;&#x8F6C;&#x5F55;&#x7684;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x7F51;&#x7AD9;&#x7684;&#x9002;&#x5F53;&#x95F4;&#x9694;&#x7684;&#x9635;&#x5217;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x5206;&#x6790;&#x8D85;&#x901F;&#x79BB;&#x5FC3;&#x6CD5;&#x548C;&#x7535;&#x5B50;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x6765;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x63CF;&#x8FF0;&#x516C;&#x5C4B;&#x4F4E;&#x805A;&#x7269;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x6280;&#x672F;&#x6765;&#x663E;&#x793A;&#x7684;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x7684;&#x4F4E;&#x805A;&#x7269;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x957F;&#x9AD8;&#x6709;&#x5E8F;&#x7684;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x96C6;&#x7684;&#x5F62;&#x5F0F;&#x5411; self-associate DNA &#x7247;&#x6BB5;&#x3002;&#x7535;&#x5B50;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x548C;&#x7EBF;&#x6027;&#x4E8C;&#x8272;&#x63ED;&#x793A;&#x516C;&#x5C4B;&#x4F4E;&#x805A;&#x7269;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5F62;&#x6210; DNA-&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EA4;&#x7EF4;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E14;&#x80FD;&#x591F;&#x7D27;&#x51D1; DNA &#x4E2D;&#x7684;&#x5176;&#x4ED6;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6CA1;&#x6709;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x660E; DNA &#x538B;&#x5B9E;&#x662F;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x591F;&#x7684;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x76EE;&#x6807;&#x57FA;&#x56E0;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x9547;&#x538B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x65AD;&#x5B9A; DNA &#x538B;&#x5B9E;&#x662F;&#x5927;&#x578B;&#x516C;&#x5C4B;&#x9F50;&#x805A;&#x7269;&#x5230;&#x9635;&#x5217;&#x7684;&#x7ED3;&#x5408;&#x4F4D;&#x70B9;&#x7684;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7684;&#x540E;&#x679C;&#x800C;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x529F;&#x80FD;&#x4E0A;&#x548C;&#x7ED3;&#x6784;&#x4E0A;&#x4E0E;&#x6709;&#x5173;&#x7684;&#x86CB;&#x767D; Lrp/AsnC &#x5BB6;&#x5EAD;&#x4ECE;&#x7EC6;&#x83CC;&#x548C;&#x53E4;&#x7EC6;&#x83CC;&#xFF0C;&#x539F;&#x6765;&#x88AB;&#x65E0;&#x771F;&#x6838;&#x5F53;&#x91CF;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x3002;

DNA &#x538B;&#x5B9E;&#x7684;&#x9AD8;&#x9636;&#x5927;&#x4F1A;&#x7684;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;/&#x5341;&#x516D;&#x8FDB;&#x5236; homeodomain &#x86CB;&#x767D;&#x4F4E;&#x805A;&#x7269;&#x3002;

Protein self-organization is essential for the establishment and maintenance of nuclear architecture and for the regulation of gene expression. We have shown previously that the Proline-Rich Homeodomain protein (PRH/Hex) self-assembles to form oligomeric complexes that bind to arrays of PRH binding sites with high affinity and specificity. We have also shown that many PRH target genes contain suitably spaced arrays of PRH sites that allow this protein to bind and regulate transcription. Here, we use analytical ultracentrifugation and electron microscopy to further characterize PRH oligomers. We use the same techniques to show that PRH oligomers bound to long DNA fragments self-associate to form highly ordered assemblies. Electron microscopy and linear dichroism reveal that PRH oligomers can form protein-DNA fibres and that PRH is able to compact DNA in the absence of other proteins. Finally, we show that DNA compaction is not sufficient for the repression of PRH target genes in cells. We conclude that DNA compaction is a consequence of the binding of large PRH oligomers to arrays of binding sites and that PRH is functionally and structurally related to the Lrp/AsnC family of proteins from bacteria and archaea, a group of proteins formerly thought to be without eukaryotic equivalents.

DNA compaction by the higher-order assembly of PRH/Hex homeodomain protein oligomers.

Prot&#xE9;ines d&#x26;#39;auto-organisation est essentielle pour l&#x26;#39;&#xE9;tablissement et le maintien de l&#x26;#39;architecture nucl&#xE9;aire et pour la r&#xE9;gulation de l&#x26;#39;expression g&#xE9;nique. Nous avons montr&#xE9; pr&#xE9;c&#xE9;demment que la prot&#xE9;ine &#xE0; hom&#xE9;odomaine riche en proline (PRH / Hex) s&#x26;#39;auto-assemble pour former des complexes oligom&#xE9;riques qui se lient &#xE0; des tableaux de PRH sites de liaison ayant une affinit&#xE9; et une sp&#xE9;cificit&#xE9; &#xE9;lev&#xE9;es. Nous avons &#xE9;galement montr&#xE9; que de nombreux g&#xE8;nes cibles PRH contenir des tableaux convenablement espac&#xE9;es de sites PRH qui permettent cette prot&#xE9;ine de se lier et de r&#xE9;guler la transcription. Ici, nous utilisons ultracentrifugation analytique et la microscopie &#xE9;lectronique pour caract&#xE9;riser davantage oligom&#xE8;res PRH. Nous utilisons les m&#xEA;mes techniques pour montrer que les oligom&#xE8;res PRH li&#xE9;s &#xE0; l&#x26;#39;ADN longs fragments d&#x26;#39;auto-associ&#xE9; pour former des ensembles hautement ordonn&#xE9;s. Microscopie &#xE9;lectronique et dichro&#xEF;sme lin&#xE9;aire r&#xE9;v&#xE8;le que les oligom&#xE8;res PRH peut former prot&#xE9;ine-ADN fibres et que PRH est capable d&#x26;#39;ADN compacte en l&#x26;#39;absence d&#x26;#39;autres prot&#xE9;ines. Enfin, nous montrons que compaction de l&#x26;#39;ADN n&#x26;#39;est pas suffisante pour la r&#xE9;pression des g&#xE8;nes cibles PRH dans les cellules. Nous concluons que compaction de l&#x26;#39;ADN est une cons&#xE9;quence de la fixation des grandes oligom&#xE8;res PRH &#xE0; des r&#xE9;seaux de sites de liaison et que PRH est fonctionnellement et structurellement li&#xE9;es &#xE0; la famille LRP / AESN de prot&#xE9;ines &#xE0; partir des bact&#xE9;ries et des arch&#xE9;es, un groupe de prot&#xE9;ines autrefois consid&#xE9;r&#xE9; comme sans &#xE9;quivalents eucaryotes.

Compaction de l&#x26;#39;ADN par l&#x26;#39;Assembl&#xE9;e d&#x26;#39;ordre sup&#xE9;rieur de PRH / Hex oligom&#xE8;res prot&#xE9;ine &#xE0; hom&#xE9;odomaine

Protein Selbstorganisation ist unerl&auml;sslich f&uuml;r die Einrichtung und Unterhaltung der nuklearen Architektur und f&uuml;r die Regulierung der Genexpression. Wir haben bereits gezeigt, dass das Proline-Rich Hom&ouml;odom&auml;ne-Protein (PRH/Hex) self-assembles um Oligomere komplexe bilden, die Arrays von PRH Bindungsstellen mit hoher Affinit&auml;t und Spezifit&auml;t binden. Wir haben auch gezeigt, dass viele PRH Zielgene entsprechend angeordnete Arrays PRH-Sites enthalten, die es erm&ouml;glichen dieses Protein binden und die Transkription zu regulieren. Hier verwenden wir analytische Ultrazentrifugation und Elektronenmikroskopie, um PRH Oligomere weiter zu charakterisieren. Wir verwenden die gleichen Techniken um zu zeigen, dass lange DNA-Fragmente self-associate Formular hoch bestellt Assemblys PRH Oligomere gebunden. Elektronenmikroskopie und linearen Dichroismus zeigen, dass PRH Oligomere Protein-DNA Fasern bilden k&ouml;nnen und dass PRH DNA in Ermangelung anderer Proteine komprimieren kann. Schlie&szlig;lich zeigen wir, dass DNA-Verdichtung f&uuml;r die Unterdr&uuml;ckung der PRH Zielgene in Zellen nicht ausreicht. Wir folgern, dass DNA-Verdichtung eine Folge der Bindung von gro&szlig;en PRH Oligomeren Arrays verbindliche Aufstellungsorte und dass PRH funktionell und strukturell die Lrp/AsnC-Familie der Proteine aus Bakterien und Archaeen, einer Gruppe von Proteinen, die fr&uuml;her angenommen, dass ohne eukaryotischen Entsprechungen zusammenh&auml;ngt.

DNA-Verdichtung von der &uuml;bergeordneten Baugruppe von PRH/Hex Hom&ouml;odom&auml;ne Protein Oligomeren.

Auto-organizzazione della proteina &egrave; essenziale per la creazione e la manutenzione dell&#39;architettura nucleare e per la regolazione dell&#39;espressione genica. In precedenza abbiamo dimostrato che la proteina Homeodomain Proline-Rich (PRH/Hex) self-assembles per formare complessi oligomerici che si legano alle matrici di siti leganti PRH con alta affinit&agrave; e specificit&agrave;. Abbiamo anche dimostrato che molti geni bersaglio PRH contengono matrici opportunamente distanziati di siti PRH che permettono questa proteina di legare e regolare la trascrizione. Qui, usiamo ultracentrifugazione analitica e la microscopia elettronica per caratterizzare ulteriormente gli oligomeri PRH. Utilizziamo le stesse tecniche per mostrare che gli oligomeri PRH associata a lunghi frammenti di DNA self-associate in forma altamente ordinato gli assembly. Microscopia elettronica e dicroismo lineare rivelano che gli oligomeri PRH possono formare fibre proteina-DNA e che PRH &egrave; in grado di compattare il DNA in assenza di altre proteine. Infine, ci mostrano che la compattazione del DNA non &egrave; sufficiente per la repressione dei geni bersaglio PRH nelle cellule. Concludiamo che compattazione del DNA &egrave; una conseguenza dell&#39;associazione di oligomeri PRH grandi matrici di siti di legame e che PRH &egrave; funzionalmente e strutturalmente correlati alla famiglia Lrp/AASN delle proteine da batteri e archaea, un gruppo di proteine precedentemente pensato per essere senza equivalenti negli eucarioti.

Compattazione del DNA da parte dell&#39;Assemblea di ordine superiore di oligomeri PRH/Hex homeodomain protein.

&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x81EA;&#x5DF1;&#x7D44;&#x7E54;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x6838;&#x306E;&#x30A2;&#x30FC;&#x30AD;&#x30C6;&#x30AF;&#x30C1;&#x30E3;&#x306E;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3068;&#x7DAD;&#x6301;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C1;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;PRH /&#x30D8;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#xFF09;&#x306F;&#x9AD8;&#x3044;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x3068;&#x7279;&#x7570;&#x6027;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;PRH&#x7D50;&#x5408;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;&#x914D;&#x5217;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x81EA;&#x5DF1;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EB;&#x3059;&#x308B;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;PRH&#x306E;&#x6A19;&#x7684;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x3053;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x304C;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x3001;&#x8EE2;&#x5199;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;PRH&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306E;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x9593;&#x9694;&#x306E;&#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;PRH&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x5206;&#x6790;&#x8D85;&#x9060;&#x5FC3;&#x5206;&#x96E2;&#x3068;&#x96FB;&#x5B50;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;PRH&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x306F;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x306B;&#x200B;&#x200B;&#x79E9;&#x5E8F;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x81EA;&#x5DF1;&#x4F1A;&#x5408;&#x9577;&#x3044;DNA&#x65AD;&#x7247;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x540C;&#x3058;&#x30C6;&#x30AF;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x96FB;&#x5B50;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7DDA;&#x5F62;&#x4E8C;&#x8272;&#x6027;&#x306F;&#x3001;PRH&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;-DNA&#x7E4A;&#x7DAD;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;PRH&#x306F;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x975E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x30C8;&#x306A;DNA&#x306B;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;DNA&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;PRH&#x6A19;&#x7684;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5341;&#x5206;&#x3067;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;DNA&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x7D50;&#x5408;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;&#x914D;&#x5217;&#x306B;&#x5927;&#x304D;&#x306A;PRH&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x305D;&#x306E;PRH&#x306F;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x69CB;&#x9020;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x30D0;&#x30AF;&#x30C6;&#x30EA;&#x30A2;&#x3084;&#x53E4;&#x7D30;&#x83CC;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;LRP / AsnC&#x5BB6;&#x65CF;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x7D50;&#x8AD6;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306F;&#x3001;&#x4EE5;&#x524D;&#x306F;&#x306A;&#x3057;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x3068;&#x540C;&#x7B49;&#x3002;

PRH /&#x516D;&#x89D2;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x306E;&#x9AD8;&#x6B21;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x306B;&#x3088;&#x308B;DNA&#x30B3;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;

&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC790;&#xAE30; &#xC124;&#xB9BD; &#xBC0F; &#xD575; &#xC544;&#xD0A4;&#xD14D;&#xCC98;&#xC758; &#xC720;&#xC9C0; &#xBCF4;&#xC218; &#xBC0F; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC758; &#xC870;&#xC808;&#xC5D0; &#xD544;&#xC218;&#xC801; &#xC774;&#xB2E4;. &#xD504;&#xB864;&#xB9B0; &#xBD80;&#xC720;&#xD55C; Homeodomain &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (PRH/16 &#xC9C4;&#xC218;) oligomeric &#xB2E8;&#xC9C0; &#xB192;&#xC740; &#xCE5C; &#xD654;&#xB825; &#xBC0F; &#xD2B9;&#xC774;&#xC131; PRH &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC758; &#xBC30;&#xC5F4;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xB294; &#xD615;&#xC131; self-assembles &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC8FC;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB610;&#xD55C; &#xB9CE;&#xC740; PRH &#xB300;&#xC0C1; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xACE0; &#xC804;&#xC0AC; &#xC870;&#xC808;&#xC774; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC774; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; PRH &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC758; &#xC801;&#xB2F9; &#xD55C; &#xAC04;&#xACA9;&#xB41C; &#xBC30;&#xC5F4; &#xD3EC;&#xD568; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; PRH &#xC62C;&#xB9AC;&#xACE0; &#xCD94;&#xAC00;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBD84;&#xC11D; ultracentrifugation &#xBC0F; &#xC804;&#xC790; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9;. &#xC6B0;&#xB9AC; PRH &#xC62C;&#xB9AC;&#xACE0; &#xAE34; DNA &#xC870;&#xAC01; &#xC591;&#xC2DD;&#xC5D0; &#xB192;&#xC740; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC; &#xBA85;&#xB839; self-associate&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xAC19;&#xC740; &#xAE30;&#xBC95;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC804;&#xC790; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95; &#xBC0F; &#xC120;&#xD615; &#x9EC4; PRH &#xC62C;&#xB9AC;&#xACE0; DNA &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC12C;&#xC720;&#xB97C; &#xD615;&#xC131;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC73C;&#xBA70; PRH &#xB2E4;&#xB978; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xACB0;&#xD54D;&#xC5D0;&#xC11C; DNA&#xB97C; &#xC555;&#xCD95; &#xC218; &#xACF5;&#xAC1C;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; DNA &#xC555;&#xCD95; &#xC140;&#xC5D0; PRH &#xB300;&#xC0C1; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBD80;&#xC871; &#xD55C; &#xAC83;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; DNA &#xC555;&#xCD95;&#xC740; &#xB300;&#xD615; PRH &#xC62C;&#xB9AC;&#xACE0; &#xBC30;&#xC5F4; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC758; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xACB0;&#xACFC; PRH&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD00;&#xB828; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; Lrp/AsnC &#xC81C;&#xD488;&#xAD70;&#xC5D0; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xC640; &#xACE0;&#xC138;&#xADE0;, &#xC774;&#xC804; &#xC9C4; &#xD575;&#xC5D0; &#xC0C1;&#xC751; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xACE0; &#xB420; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0DD;&#xAC01; &#xD558;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACB0;&#xB860;.

PRH/16 &#xC9C4;&#xC218; homeodomain &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC62C;&#xB9AC;&#xACE0; DNA &#xC21C;&#xC704;&#xAC00; &#xB192;&#xC740; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC; &#xD558; &#xC5EC; &#xC555;&#xCD95;.

La prote&#xED;na auto-organizaci&#xF3;n es esencial para el establecimiento y mantenimiento de la arquitectura nuclear y para la regulaci&#xF3;n de la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica. Hemos demostrado anteriormente que la prote&#xED;na Homeodominio Proline-Rico (PRH / Hex) se auto-ensambla para formar complejos oligom&#xE9;ricos que se unen a las matrices de PRH sitios de uni&#xF3;n con alta afinidad y especificidad. Tambi&#xE9;n hemos mostrado que muchos genes diana PRH contener matrices convenientemente espaciados de los sitios que permiten PRH esta prote&#xED;na de atar y regular la transcripci&#xF3;n. Aqu&#xED;, nosotros usamos ultracentrifugaci&#xF3;n anal&#xED;tica y microscop&#xED;a electr&#xF3;nica para caracterizar mejor olig&#xF3;meros PRH. Nosotros usamos las mismas t&#xE9;cnicas para mostrar que los olig&#xF3;meros de PRH con destino a la larga de ADN se fragmenta la auto-se asocian para formar conjuntos altamente ordenados. La microscop&#xED;a electr&#xF3;nica y dicro&#xED;smo lineal revelan que los olig&#xF3;meros PRH puede formar prote&#xED;nas de ADN y las fibras que PRH es capaz de ADN compacto en ausencia de otras prote&#xED;nas. Finalmente, mostramos que la compactaci&#xF3;n del ADN no es suficiente para la represi&#xF3;n de los genes diana en las c&#xE9;lulas del PRH. Se concluye que la compactaci&#xF3;n del ADN es una consecuencia de la uni&#xF3;n de grandes olig&#xF3;meros PRH a las matrices de los sitios de uni&#xF3;n y que se PRH funcional y estructuralmente relacionados con la familia Lrp / ASNC de prote&#xED;nas de bacterias y arqueas, un grupo de prote&#xED;nas anteriormente cree que sin equivalentes eucari&#xF3;ticas.

Article	Year
CK2 phosphorylation of the PRH/Hex homeodomain functions as a reversible switch for DNA binding. Nucleic acids research\| PubMed ID: 19324893	2009
PRH/Hhex controls cell survival through coordinate transcriptional regulation of vascular endothelial growth factor signaling. Molecular and cellular biology\| PubMed ID: 20176809	2010
DNA compaction by the higher-order assembly of PRH/Hex homeodomain protein oligomers. Nucleic acids research\| PubMed ID: 20675722	2010

Anyaporn Sawasdichai

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