in-situ-subcellular-fractionation-adherent-non-adherent-mammalian

<em>In situ</em> Subcellular Fractionation of Adherent and Non-adherent Mammalian Cells

Protein function is intimately coupled to protein localization. Although some proteins are restricted to a specific location or subcellular compartment, ...

University of Birmingham

&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B; &#xFF08;&#x5BCC;&#x542B;&#x812F;&#x6C28;&#x9178;&#x7684; homeodomain &#x86CB;&#x767D;) &#x5341;&#x516D;&#x8FDB;&#x5236;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x548C;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x63A7;&#x5236;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x8868;&#x660E;&#x4EE5;&#x524D;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x5305;&#x542B;&#x4E24;&#x4E2A;&#x57DF;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4F7F;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6291;&#x5236;&#x72EC;&#x7ACB; &#xFF1B;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B; homeodomain &#x538B;&#x6291;&#x901A;&#x8FC7;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x5854;&#x5854;&#x6846;&#x5E8F;&#x5217;&#xFF0C;&#x8F6C;&#x5F55;&#x800C;&#x5BCC;&#x542B;&#x812F;&#x6C28;&#x9178;&#x7684; N-&#x672B;&#x7AEF;&#x57DF;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4E0E; co-repressor &#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x7F57;&#x514B;/tle &#x53F7; &#xFF08;transducin &#x6837;&#x540C;&#x6E90;&#x6027;&#x62C6;&#x5206;&#xFF09; &#x5BB6;&#x5EAD;&#x6210;&#x5458;&#x7684;&#x4EA4;&#x4E92;&#x6765;&#x538B;&#x5236;&#x8F6C;&#x5F55;&#x3002;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x662F;&#x4E00;&#x79CD;&#x590D;&#x6742;&#x7684; multi-subunit &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x52A0;&#x5DE5;&#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x964D;&#x89E3;&#x7684;&#x53C2;&#x4E0E;&#x3002;&#x63D0;&#x51FA;&#x4E86;&#x4E00;&#x4E9B;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x4E9A;&#x57FA;&#x5728;&#x8F6C;&#x5F55;&#x8C03;&#x8282;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x5728;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A;&#x516C;&#x4EA4;&#x4E92; HC8 20 &#x548C; 26 S proteasomes &#x7684;&#x4E0A;&#x4E0B;&#x6587;&#x4E2D;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x7684;&#x4E9A;&#x5355;&#x4F4D;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x516C;&#x5C4B;&#x662F;&#x5728;&#x9020;&#x8840;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4E0E;&#x5173;&#x8054;&#x548C;&#x5BCC;&#x542B;&#x812F;&#x6C28;&#x9178;&#x7684;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B; N &#x7EC8;&#x7AEF;&#x57DF;&#x662F;&#x8D1F;&#x8D23;&#x8FD9;&#x79CD;&#x4E92;&#x52A8;&#x3002;&#x800C;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x5207;&#x5272;&#xFF0C;&#x5B83;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x5E76;&#x4E0D;&#x8FC5;&#x901F;&#x5728;&#x4F53;&#x5916;&#x6216;&#x4F53;&#x5185;&#xFF0C;&#x88AB;&#x964D;&#x7EA7;&#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x6C34;&#x89E3;&#x6D3B;&#x6027;&#x4E0D;&#x9700;&#x8981;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6291;&#x5236;&#x7684;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x6D88;&#x5316;&#x53EF;&#x4EE5;&#x89E3;&#x653E;&#x622A;&#x65AD;&#x4FDD;&#x7559;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#xFF0C;&#x5C06;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; DNA &#x7684;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x57FA;&#x56E0;&#x8C03;&#x63A7;&#x5728;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x4F5C;&#x7528;&#x548C;&#x63A7;&#x5236;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;

&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x963B;&#x904F;&#x7269;&#x86CB;&#x767D;&#x4E0E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#x3002;

PRH (proline-rich homeodomain protein)/Hex is important in the control of cell proliferation and differentiation. We have shown previously that PRH contains two domains that can bring about transcriptional repression independently; the PRH homeodomain represses transcription by binding to TATA box sequences, whereas the proline-rich N-terminal domain can repress transcription by interacting with members of the Groucho/TLE (transducin-like enhancer of split) family of co-repressor proteins. The proteasome is a multi-subunit protein complex involved in the processing and degradation of proteins. Some proteasome subunits have been suggested to play a role in the regulation of transcription. In the present study, we show that PRH interacts with the HC8 subunit of the proteasome in the context of both 20 and 26 S proteasomes. Moreover, we show that PRH is associated with the proteasome in haematopoietic cells and that the proline-rich PRH N-terminal domain is responsible for this interaction. Whereas PRH can be cleaved by the proteasome, it does not appear to be degraded rapidly in vitro or in vivo, and the proteolytic activity of the proteasome is not required for transcriptional repression by PRH. However, proteasomal digestion of PRH can liberate truncated PRH proteins that retain the ability to bind to DNA. We discuss these findings in terms of the biological role of PRH in gene regulation and the control of cell proliferation.

The transcriptional repressor protein PRH interacts with the proteasome.

PRH (prot&#xE9;ine &#xE0; hom&#xE9;odomaine riche en proline) / Hex est important dans le contr&#xF4;le de la prolif&#xE9;ration et la diff&#xE9;renciation cellulaire. Nous avons montr&#xE9; pr&#xE9;c&#xE9;demment que PRH contient deux domaines qui peuvent apporter sur la r&#xE9;pression de la transcription de fa&#xE7;on ind&#xE9;pendante; l&#x26;#39;hom&#xE9;odomaine PRH r&#xE9;prime la transcription en se liant &#xE0; des s&#xE9;quences de bo&#xEE;te TATA, tandis que le riche en proline domaine N-terminal peut r&#xE9;primer la transcription en interagissant avec les membres de la Groucho / TLE (transducine-comme exhausteur de scission) de la famille de la co-r&#xE9;presseurs prot&#xE9;ines. Le prot&#xE9;asome est un complexe prot&#xE9;ique multi-sous-unit&#xE9; impliqu&#xE9;e dans la transformation et la d&#xE9;gradation des prot&#xE9;ines. Certains sous-unit&#xE9;s du prot&#xE9;asome ont &#xE9;t&#xE9; sugg&#xE9;r&#xE9;es &#xE0; jouer un r&#xF4;le dans la r&#xE9;gulation de la transcription. Dans la pr&#xE9;sente &#xE9;tude, nous montrons que PRH interagit avec la sous-unit&#xE9; HC8 du prot&#xE9;asome dans le contexte de prot&#xE9;asomes S &#xE0; la fois 20 et 26. En outre, nous montrons que PRH est associ&#xE9;e &#xE0; du prot&#xE9;asome dans les cellules h&#xE9;matopo&#xEF;&#xE9;tiques et que le riche en proline PRH domaine N-terminal est responsable de cette interaction. Attendu que PRH peut &#xEA;tre cliv&#xE9; par le prot&#xE9;asome, il ne semble pas se d&#xE9;grader rapidement in vitro ou in vivo, et l&#x26;#39;activit&#xE9; prot&#xE9;olytique du prot&#xE9;asome n&#x26;#39;est pas requise pour la r&#xE9;pression de la transcription par PRH. Toutefois, la digestion par le prot&#xE9;asome de PRH peut lib&#xE9;rer prot&#xE9;ines tronqu&#xE9;es PRH qui conservent la capacit&#xE9; de se lier &#xE0; l&#x26;#39;ADN. Nous discutons ces r&#xE9;sultats en termes du r&#xF4;le biologique de PRH dans la r&#xE9;gulation des g&#xE8;nes et le contr&#xF4;le de la prolif&#xE9;ration cellulaire.

Le PRH prot&#xE9;ine r&#xE9;presseur transcriptionnel interagit avec le prot&#xE9;asome

Die transkriptionelle Repressor-Protein interagiert mit dem PRH Proteasom.

PRH (ricco di prolina homeodomain protein) / Hex &egrave; importante nel controllo della proliferazione cellulare e la differenziazione. Abbiamo dimostrato in precedenza che PRH contiene due domini che possono portare alla repressione trascrizionale indipendentemente; L&#39;omeodominio PRH reprime la trascrizione, legandosi alle sequenze di TATA box, considerando che il dominio N-terminale ricco di prolina pu&ograve; reprimere la trascrizione interagendo con i membri della famiglia (transducina-come esaltatore di Spalato) Groucho/TLE di proteine co-repressor. Il proteasoma &egrave; un complesso proteico multi-subunit coinvolti nella trasformazione e degradazione delle proteine. Alcune subunit&agrave; del proteasoma sono state suggerite per giocare un ruolo nella regolazione della trascrizione. Nel presente studio, mostriamo che PRH interagisce con la subunit&agrave; HC8 del proteasoma nel contesto dei proteasomi S 20 e 26. Inoltre, mostriamo che PRH &egrave; associato con il proteasoma in cellule ematopoietiche e che il dominio PRH N-terminale ricco di prolina &egrave; responsabile di questa interazione. Considerando che PRH pu&ograve; essere clivata da proteasoma, non sembra di essere degradato rapidamente in vitro o in vivo, e l&#39;attivit&agrave; proteolitica del proteasoma non &egrave; richiesto per la repressione trascrizionale da PRH. Tuttavia, proteosomale digestione del PRH pu&ograve; liberare troncate PRH proteine che mantengono la capacit&agrave; di legare il DNA. Discutiamo di questi risultati in termini di ruolo biologico di PRH nella regolazione genica e il controllo della proliferazione cellulare.

La proteina repressore trascrizionale PRH interagisce con il proteasoma.

PRH&#xFF08;&#x30D7;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C1;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF09;/ Hex&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x3068;&#x5206;&#x5316;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x30D7;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x306B;&#x5BCC;&#x3080;N&#x672B;&#x7AEF;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306F;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30C1;&#x30E7;/ TLE&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x3068;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x8EE2;&#x5199;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x4E00;&#x65B9;PRH&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;TATA&#x30DC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x914D;&#x5217;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x3066;&#x8EE2;&#x5199;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;PRH&#x306F;&#x3001;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x3066;&#x8EE2;&#x5199;&#x6291;&#x5236;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;2&#x3064;&#x306E;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30B3;&#x30EA;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#xFF08;&#x5206;&#x5272;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C7;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30A8;&#x30F3;&#x30CF;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#xFF09;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x3002;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306F;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x51E6;&#x7406;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5206;&#x89E3;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x8EE2;&#x5199;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;PRH&#x306F;20&#x3068;26&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;S&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30AD;&#x30B9;&#x30C8;&#x5185;&#x3067;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;HC8&#x3068;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;PRH&#x306F;&#x9020;&#x8840;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x3068;&#x3068;&#x30D7;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x306B;&#x5BCC;&#x3080;PRH N&#x672B;&#x7AEF;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x8CAC;&#x4EFB;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; PRH&#x306F;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5207;&#x65AD;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x3001;&#x4E00;&#x65B9;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;in vitro&#x307E;&#x305F;&#x306F;in vivo&#x3067;&#x901F;&#x3084;&#x304B;&#x306B;&#x5206;&#x89E3;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x898B;&#x3048;&#x308B;&#x3093;&#x3057;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5206;&#x89E3;&#x6D3B;&#x6027;&#x306F;&#x3001;PRH&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8EE2;&#x5199;&#x6291;&#x5236;&#x306B;&#x306F;&#x5FC5;&#x8981;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;PRH&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x6D88;&#x5316;DNA&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x4FDD;&#x6301;&#x3057;&#x3066;&#x5207;&#x308A;&#x6368;&#x3066;PRH&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x89E3;&#x653E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;PRH&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x5F79;&#x5272;&#x306E;&#x89B3;&#x70B9;&#x304B;&#x3089;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x77E5;&#x898B;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x8EE2;&#x5199;&#x30EA;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;PRH&#x306F;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x3068;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;

PRH (&#xD504;&#xB864;&#xB9B0; &#xBD80;&#xC720;&#xD55C; homeodomain &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;) / 16 &#xC9C4;&#xC218; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD; &#xBC0F; &#xBD84;&#xD654; &#xC81C;&#xC5B4;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD558;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; PRH &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;; transcriptional &#xC5B5;&#xC555;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD558;&#xC9C0; &#xAC00;&#xC838;&#xC62C; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xD3EC;&#xD568; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xB294; PRH homeodomain &#xD504;&#xB864;&#xB9B0; &#xBD80;&#xC720;&#xD55C; N &#xB9E8;&#xB05D; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; co-repressor &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xADF8;&#xB8E8;&#xCD08;/TLE (&#xBD84;&#xD560;&#xC758; transducin &#xAC19;&#xC740; &#xC99D;&#xAC15;) &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0;&#xACFC; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC804;&#xC0AC;&#xB97C; &#xC8FC;&#xCCB4; &#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xBC18;&#xBA74; &#xD0C0; &#xD0C0; &#xC0C1;&#xC790; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xC5EC; &#xC804;&#xC0AC;&#xB97C; &#xB204;&#xB974;&#xB294;. &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880;&#xC740; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; multi-subunit &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xCC98;&#xB9AC;&#xC640; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC800;&#xD558;&#xC5D0; &#xCC38;&#xC5EC;. &#xC804;&#xC1A1; &#xADDC;&#xCE59;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC77C;&#xBD80; &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880; subunits &#xC81C;&#xC548; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD604;&#xC7AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; PRH 20 &#xBC0F; 26 S proteasomes&#xC758; &#xCEE8;&#xD14D;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880;&#xC758; HC8 &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704;&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC6B0;&#xB9AC; PRH &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880; haematopoietic &#xC140;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB418; &#xACE0; &#xD504;&#xB864;&#xB9B0; &#xBD80;&#xC720;&#xD55C; PRH N &#xB9E8;&#xB05D; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC740;&#xC774; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCC45;&#xC784;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. PRH&#xB294; &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBD99;&#xC5B4; &#xC788;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;, &#xBC18;&#xBA74; &#xBE60;&#xB974;&#xAC8C; &#xCCB4; &#xC678; &#xB610;&#xB294; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74;, &#xC131;&#xB2A5; &#xC800;&#xD558;&#xB97C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0;&#xB294; &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880;&#xC758; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD65C;&#xB3D9; PRH&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; transcriptional &#xC5B5;&#xC555;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, PRH&#xC758; proteasomal &#xC18C;&#xD654; &#xC798;&#xB9B0;&#xB41C; PRH &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; DNA&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xD574;&#xBC29; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC870;&#xC808;&#xC5D0;&#xC11C; PRH&#xC758; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xC5ED;&#xD560; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD; &#xC81C;&#xC5B4; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xB300;&#xD574;.

PRH transcriptional &#xC9C4;&#xC555; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC740; &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

PRH (rico en prolina prote&#xED;na homeodominio) / Hex es importante en el control de la proliferaci&#xF3;n y diferenciaci&#xF3;n celular. Hemos demostrado anteriormente que el PRH contiene dos dominios que pueden dar lugar a la represi&#xF3;n de la transcripci&#xF3;n de manera independiente, el homeodominio PRH reprime la transcripci&#xF3;n mediante la uni&#xF3;n a las secuencias de caja TATA, mientras que el rico en prolina dominio N-terminal puede reprimir la transcripci&#xF3;n mediante la interacci&#xF3;n con los miembros de la Groucho / TLE (transducina-como potenciador de la divisi&#xF3;n) de la familia de los co-represor prote&#xED;nas. El proteasoma es un complejo de prote&#xED;nas m&#xFA;ltiples subunidad implicado en el procesamiento y la degradaci&#xF3;n de las prote&#xED;nas. Algunas subunidades del proteasoma se han propuesto para desempe&#xF1;ar un papel en la regulaci&#xF3;n de la transcripci&#xF3;n. En el presente estudio, mostramos que el PRH interact&#xFA;a con la subunidad HC8 del proteasoma en el contexto tanto de 20 y 26 de proteasomas S. Adem&#xE1;s, nos muestran que PRH est&#xE1; asociado con el proteasoma en c&#xE9;lulas hematopoy&#xE9;ticas y que el rico en prolina PRH dominio N-terminal es responsable de esta interacci&#xF3;n. Considerando PRH puede ser escindida por el proteasoma, no parecen ser degradado r&#xE1;pidamente in vitro o in vivo, y la actividad proteol&#xED;tica del proteasoma no se requiere para la represi&#xF3;n transcripcional por PRH. Sin embargo, la digesti&#xF3;n proteasomal de PRH puede liberar prote&#xED;nas truncadas PRH que retienen la capacidad de unirse al ADN. Se discuten estos resultados en t&#xE9;rminos de la funci&#xF3;n biol&#xF3;gica de PRH en la regulaci&#xF3;n g&#xE9;nica y el control de la proliferaci&#xF3;n celular.

El PRH prote&#xED;na represora transcripcional Interact&#xFA;a con el proteasoma

&#x5BCC;&#x542B;&#x812F;&#x6C28;&#x9178;&#x7684; homeodomain &#x86CB;&#x767D; (&#x516C;/&#x5341;&#x516D;&#x8FDB;&#x5236;) &#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x548C;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x63A7;&#x5236;&#x548C;&#x8C03;&#x8282;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x53D1;&#x80B2;&#x4E2D;&#x7684;&#x591A;&#x4E2A;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4EE5;&#x524D;&#x6240;&#x793A;&#x516C;&#x5C4B;&#x5305;&#x542B;&#x4E24;&#x4E2A;&#x57DF;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x72EC;&#x7ACB;&#x5730;&#x5E26;&#x6765;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6291;&#x5236;&#x3002;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B; homeodomain &#x538B;&#x6291;&#x901A;&#x8FC7;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x5854;&#x5854;&#x6846;&#x5E8F;&#x5217;&#xFF0C;&#x8F6C;&#x5F55;&#x800C;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x7684;&#x5BCC;&#x542B;&#x812F;&#x6C28;&#x9178;&#x7684; N-&#x672B;&#x7AEF;&#x57DF;&#x53EF;&#x4EE5;&#x538B;&#x5236;&#x65F6;&#x9644;&#x52A0;&#x5230;&#x5916;&#x6E90; DNA &#x7ED3;&#x5408;&#x57DF;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x3002;&#x7F57;&#x514B;/transducin &#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x540C;&#x6E90;&#x6027;&#x62C6;&#x5206; &#xFF08;TLE&#xFF09; &#x5BB6;&#x5EAD;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x662F;&#x8F6C;&#x5F55;&#x5171;&#x6291;&#x5236;&#x5B50;&#x4E0E;&#x5927;&#x91CF; DNA &#x7ED1;&#x5B9A;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x7684;&#x4EA4;&#x4E92;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5728;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x626E;&#x6F14;&#x591A;&#x4E2A;&#x89D2;&#x8272;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A;&#x7684;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x7684;&#x5BCC;&#x542B;&#x812F;&#x6C28;&#x9178;&#x7684; N-&#x7AEF;&#x57DF;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; TLE1 &#x4F53;&#x5916;&#x548C;&#x9175;&#x6BCD;&#x53CC;&#x6742;&#x4EA4;&#x68C0;&#x6D4B;&#x4E2D;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x516C;&#x5C4B;&#x548C; TLE &#x86CB;&#x767D;&#x5728;&#x9020;&#x8840;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D; co-expressed &#x548C; co &#x6C89;&#x6DC0;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x7684;&#x4EA4;&#x4E92;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC1;&#x660E; TLE1 &#x589E;&#x52A0;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x7684;&#x77AC;&#x65F6;&#x8F6C;&#x67D3;&#x5316;&#x9A8C;&#x9547;&#x538B;&#x548C;&#x5185;&#x6E90;&#x6027; TLE &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x5171; Grg5&#xFF0C;&#x81EA;&#x7136;&#x8DE8;&#x663E;&#x6027;&#x8D1F;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x6EF4;&#x5B9A;&#x6CD5;&#x7F13;&#x89E3;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6291;&#x5236;&#x7684;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x963B;&#x6B62;&#x4F53;&#x5916;&#x7684;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B; TLE1 &#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B; N &#x7EC8;&#x7AEF;&#x57DF;&#x4E2D;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x6D88;&#x9664;&#x4E86; co-repression&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x89D2;&#x8272;&#x7684;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x548C; TLE &#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x548C;&#x53D1;&#x5C55;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6210;&#x679C;&#x3002;

&#x5BCC;&#x542B;&#x812F;&#x6C28;&#x9178;&#x7684; homeodomain &#x86CB;&#x767D;&#x62DB;&#x52DF;&#x6210;&#x5458;&#x7F57;&#x514B; Transducin &#x6837;&#x540C;&#x6E90;&#x6027;&#x62C6;&#x5206;&#x86CB;&#x767D;&#x5BB6;&#x65CF;&#xFF0C;co-repress &#x5728;&#x9020;&#x8840;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x3002;

The proline-rich homeodomain protein (PRH/Hex) is important in the control of cell proliferation and differentiation and in the regulation of multiple processes in embryonic development. We have shown previously that PRH contains two domains that can independently bring about transcriptional repression. The PRH homeodomain represses transcription by binding to TATA box sequences, whereas the proline-rich N-terminal domain of PRH can repress transcription when attached to a heterologous DNA-binding domain. The Groucho/transducin-like enhancer of split (TLE) family of proteins are transcriptional co-repressors that interact with a number of DNA-bound transcription factors and play multiple roles in development. Here we demonstrate that the proline-rich N-terminal domain of PRH binds to TLE1 in vitro and in yeast two-hybrid assays. We show that PRH and TLE proteins are co-expressed in hematopoietic cells and interact in co-immunoprecipitation assays. We demonstrate that TLE1 increases repression by PRH in transient transfection assays and that titration of endogenous TLE proteins by co-expression of Grg5, a natural trans-dominant negative protein, alleviates transcriptional repression by PRH. Finally, we show that a mutation in the PRH N-terminal domain that blocks the PRH-TLE1 interaction in vitro eliminates co-repression. We discuss these results in terms of the roles of PRH and TLE in cell differentiation and development.

The proline-rich homeodomain protein recruits members of the Groucho/Transducin-like enhancer of split protein family to co-repress transcription in hematopoietic cells.

La prot&eacute;ine riche en proline hom&eacute;odomaine (PRH/Hex) est importante dans le contr&ocirc;le de la prolif&eacute;ration cellulaire et la diff&eacute;renciation et dans la r&eacute;gulation de nombreux processus dans le d&eacute;veloppement embryonnaire. Nous avons montr&eacute; pr&eacute;c&eacute;demment que PRH contienne deux domaines qui peuvent amener ind&eacute;pendamment de r&eacute;pression transcriptionnelle. L&#39;hom&eacute;odomaine PRH r&eacute;prime la transcription en se liant &agrave; des s&eacute;quences de bo&icirc;te TATA, tandis que le domaine N-terminal riche en proline de PRH peut r&eacute;primer la transcription lorsqu&#39;il est attach&eacute; &agrave; un domaine de liaison &agrave; l&#39;ADN h&eacute;t&eacute;rologue. Le renforceur de Groucho/transducin-like de split (TLE) famille de prot&eacute;ines sont co-repressors de transcriptionnelles qui interagissent avec un certain nombre de facteurs de transcription ADN-bondissent et jouent plusieurs r&ocirc;les dans le d&eacute;veloppement. Nous d&eacute;montrons que le domaine N-terminal riche en proline de PRH se lie aux TLE1 in vitro et dans les tests de deux-hybride de levure. Nous montrons que les prot&eacute;ines PRH et TLE sont co-exprim&eacute;e dans les cellules h&eacute;matopo&iuml;&eacute;tiques et interagissent dans des essais de co-immunopr&eacute;cipitation. Nous d&eacute;montrons que TLE1 augmente la r&eacute;pression par PRH dans des essais de transfection transitoire et ce titrage des prot&eacute;ines endog&egrave;nes de TLE par co-expression de Grg5, une prot&eacute;ine naturelle de n&eacute;gative dominante trans, soulage la r&eacute;pression transcriptionnelle de PRH. Enfin, nous montrons qu&#39;une mutation dans le domaine de PRH N-terminal qui bloque l&#39;interaction de PRH-TLE1 in vitro &eacute;limine les co-repression. Nous discutons de ces r&eacute;sultats en ce qui concerne les r&ocirc;les de PRH et TLE dans la diff&eacute;renciation cellulaire et d&eacute;veloppement.

La prot&eacute;ine riche en proline hom&eacute;odomaine recrute des membres de l&#39;enrichisseur de Groucho/Transducin-comme de la famille de prot&eacute;ines de split &agrave; co-repress de transcription dans des cellules h&eacute;matopo&iuml;&eacute;tiques.

Die Prolin-reiche Protein Hom&#xF6;odom&#xE4;ne Rekruten Mitglieder des Groucho / Transducin-like Enhancer of Split-Protein-Familie, die Zusammenarbeit die Transkription in h&#xE4;matopoetischen Zellen.

La proteina homeodomain ricco di prolina (PRH/Hex) &egrave; importante nel controllo della proliferazione cellulare e la differenziazione e nella regolazione di processi multipli nello sviluppo embrionale. Abbiamo dimostrato in precedenza che PRH contiene due domini che indipendentemente possono portare alla repressione trascrizionale. L&#39;omeodominio PRH reprime la trascrizione, legandosi alle sequenze di TATA box, considerando che il dominio N-terminale ricco di prolina di PRH pu&ograve; reprimere la trascrizione quando collegato a un dominio DNA-binding eterologo. Il rinforzatore di Groucho, transducina-come di Spalato (TLE) famiglia di proteine sono co-repressors trascrizionale che interagiscono con un numero di fattori di trascrizione del DNA-bound e giocare pi&ugrave; ruoli in via di sviluppo. Qui dimostriamo che il dominio N-terminale ricco di prolina di PRH associa a TLE1 in vitro e in dosaggi di due-ibrido del lievito. Mostriamo che PRH e TLE proteine sono co-expressed in cellule ematopoietiche e interagiscono in dosaggi di co-immunoprecipitazione. Dimostriamo che TLE1 aumenta la repressione di PRH trasfezione transiente dosaggi e tale titolazione delle proteine TLE endogene di co-expression di Grg5, una proteina negativa a trans-dominante naturale, allevia transcriptional repressione da PRH. Infine, ci mostra che una mutazione nel dominio PRH N-terminale che blocca l&#39;interazione PRH-TLE1 in vitro Elimina co-repression. Discutiamo di questi risultati in termini di ruoli di PRH e TLE nella differenziazione delle cellule e lo sviluppo.

La proteina ricca di prolina homeodomain recluta membri del rinforzatore di Groucho/Transducin-come della famiglia della proteina di Spalato a co-repress la trascrizione nelle cellule ematopoietiche.

&#x30D7;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA; &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; (PRH/16 &#x9032;) &#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x3068;&#x5206;&#x5316;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x3068;&#x80DA;&#x5185;&#x306E;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x4EE5;&#x524D; PRH &#x8EE2;&#x5199;&#x6291;&#x5236;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x500B;&#x5225;&#x306B;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B; 2 &#x3064;&#x306E;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;PRH &#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A; N &#x672B;&#x7AEF;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306F;&#x7570;&#x7A2E;&#x306E; DNA &#x7D50;&#x5408;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x63A5;&#x7D9A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x304D;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057; PRH &#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF; TATA &#x30DC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9; &#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x3078;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8EE2;&#x5199;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30C1;&#x30E7;/&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C7;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30A8;&#x30F3;&#x30CF;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x5206;&#x5272; (TLE) &#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E; DNA &#x7D50;&#x5408;&#x306E;&#x6570;&#x3068;&#x5BFE;&#x8A71;&#x3057;&#x3001;&#x767A;&#x5C55;&#x306B;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x8EE2;&#x5199; co-repressors &#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x30D7;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A; N &#x672B;&#x7AEF;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3; PRH &#x306E; TLE1 &#x4F53;&#x5916;&#x3078;&#x3068;&#x9175;&#x6BCD; 2 &#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C9;&#x8A66;&#x91D1;&#x3067;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;PRH &#x3068; TLE &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x9020;&#x8840;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5171;&#x540C;&#x3067;&#x3001;co &#x514D;&#x75AB;&#x6C88;&#x964D;&#x306E;&#x8A66;&#x91D1;&#x306E;&#x5BFE;&#x8A71;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;TLE1 &#x5F3E;&#x5727; PRH &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x904E;&#x6E21;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x8A66;&#x91D1;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x6EF4;&#x5B9A;&#x5171;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x81EA;&#x7136;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x652F;&#x914D;&#x7684;&#x306A;&#x8CA0;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3001;Grg5 &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5185;&#x56E0;&#x6027; TLE &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x6291;&#x5236; PRH &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8EFD;&#x6E1B;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;, in vitro PRH TLE1 &#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF; PRH N &#x672B;&#x7AEF;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570; co-repression &#x3092;&#x6392;&#x9664;. &#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x3068;&#x958B;&#x767A; PRH &#x3068; TLE &#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306E;&#x9762;&#x3067;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3092;&#x8B70;&#x8AD6;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30D7;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA; &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x9020;&#x8840;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x8EE2;&#x5199; co-repress &#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30C1;&#x30E7;/Transducin &#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30A8;&#x30F3;&#x30CF;&#x30F3;&#x30B5;&#x5206;&#x5272;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x52DF;&#x96C6;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xD504;&#xB864;&#xB9B0; &#xBD80;&#xC720;&#xD55C; homeodomain &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (PRH/16 &#xC9C4;&#xC218;)&#xC740; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD; &#xBC0F; &#xBD84;&#xD654; &#xC81C;&#xC5B4; &#xBC0F; &#xBC30;&#xC544; &#xBC1C;&#xB2EC;&#xC5D0; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC758; &#xADDC;&#xC81C; &#xC911;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; PRH transcriptional &#xC5B5;&#xC555;&#xC5D0; &#xB300;&#xD574; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC00;&#xC838;&#xC62C; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. PRH homeodomain PRH&#xC758; &#xD504;&#xB864;&#xB9B0; &#xBD80;&#xC720;&#xD55C; N &#xB9E8;&#xB05D; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xC804;&#xC0AC; heterologous DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0;&#xD560; &#xB54C; &#xC8FC;&#xCCB4; &#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xBC18;&#xBA74; &#xD0C0; &#xD0C0; &#xC0C1;&#xC790; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xC5EC; &#xC804;&#xC0AC;&#xB97C; &#xB204;&#xB974;&#xB294;. &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xBD84;&#xD560; (TLE) &#xD328;&#xBC00;&#xB9AC;&#xC758; &#xADF8;&#xB8E8;&#xCD08;/transducin &#xAC19;&#xC740; &#xC99D;&#xAC15; transcriptional co-repressors DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790; &#xC218;&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD558;&#xB294;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xD504;&#xB864;&#xB9B0; &#xBD80;&#xC720;&#xD55C; N &#xB9E8;&#xB05D; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; PRH&#xC758; TLE1 &#xCCB4; &#xC678; &#xD558; &#xACE0; &#xD6A8; &#xBAA8; 2 &#xC7A1;&#xC885; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; PRH&#xC640; TLE &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC870; &#xD608; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; co-expressed&#xC640; &#xACF5;&#xB3D9; immunoprecipitation &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. TLE1 &#xC99D;&#xAC00; &#xACFC;&#xB3C4; transfection &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0;&#xC11C; PRH&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC5B5;&#xC555; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8; &#xC801;&#xC815; Grg5, &#xCC9C;&#xC5F0; &#xD2B8;&#xB79C;&#xC2A4; &#xC9C0;&#xBC30;&#xC801;&#xC778; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; co-expression&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0DD; TLE &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; PRH&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; transcriptional &#xC5B5;&#xC555; &#xC644;&#xD654; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xCCB4; &#xC678; PRH TLE1 &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xCC28;&#xB2E8; &#xD558;&#xB294; PRH N &#xB9E8;&#xB05D; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC5D0;&#xC11C; co-repression&#xB97C; &#xC81C;&#xAC70; &#xBCF4;&#xC5EC;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xD654; &#xBC0F; &#xAC1C;&#xBC1C; PRH&#xC640; TLE&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC758; &#xAD00;&#xC810;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD504;&#xB864;&#xB9B0; &#xBD80;&#xC720;&#xD55C; homeodomain &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; co-repress &#xC870; &#xD608; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC804;&#xC0AC;&#xB97C; &#xBD84;&#xD560; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xADF8;&#xB8E8;&#xCD08;/Transducin &#xAC19;&#xC740; &#xC99D;&#xAC15;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0;&#xC744; &#xCC44;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Las prote&iacute;nas homeodomain ricos en prolina (PRH/Hex) es importante en el control de la proliferaci&oacute;n y diferenciaci&oacute;n celular y en la regulaci&oacute;n de varios procesos en el desarrollo embrionario. Hemos demostrado previamente que PRH contiene dos dominios que pueden traer independientemente sobre represi&oacute;n transcripcional. El homeodomain PRH reprime la transcripci&oacute;n al unirse a secuencias de caja TATA, mientras que el dominio N-terminal de ricos en prolina de PRH puede reprimir la transcripci&oacute;n cuando conectado a un dominio de uni&oacute;n al ADN heter&oacute;logo. El optimizador de Groucho/Transducina-como de split (TLE) familia de prote&iacute;nas son co-repressors transcripcionales que interact&uacute;an con un n&uacute;mero de factores de transcripci&oacute;n del ADN-limite y desempe&ntilde;an m&uacute;ltiples funciones en desarrollo. Aqu&iacute; demostramos que el dominio N-terminal de ricos en prolina de PRH se une a TLE1 in vitro y en ensayos de dos h&iacute;bridos de levadura. Demostramos que las prote&iacute;nas PRH y TLE son co-expressed en c&eacute;lulas hematopoy&eacute;ticas e interactuan en co-inmunoprecipitaci&oacute;n ensayos. Demostramos que TLE1 aumenta represi&oacute;n por PRH en ensayos de transfecci&oacute;n transitoria y la titulaci&oacute;n de prote&iacute;nas end&oacute;genas TLE por coexpresi&oacute;n de Grg5, una prote&iacute;na natural de negativa de trans-dominante, alivia la represi&oacute;n transcripcional por PRH. Finalmente, demostramos que una mutaci&oacute;n en el dominio de PRH N-terminal que bloquea la interacci&oacute;n de PRH-TLE1 in vitro elimina co-repression. Se discuten estos resultados en t&eacute;rminos de los roles de PRH y TLE en diferenciaci&oacute;n celular y el desarrollo.

La prote&iacute;na ricos en prolina homeodomain recluta a miembros del reforzador de Groucho/Transducin-como de la familia de prote&iacute;nas de split a co-repress de la transcripci&oacute;n en c&eacute;lulas hematopoy&eacute;ticas.

&#x5BCC;&#x542B;&#x812F;&#x6C28;&#x9178;&#x7684; Homeodomain (&#x516C;) &#x86CB;&#x767D;&#x662F;&#x8C03;&#x8282;&#x5668;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x548C;&#x7FFB;&#x8BD1;&#xFF0C;&#x5728;&#x63A7;&#x5236;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x7740;&#x5173;&#x952E;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x5305;&#x542B;&#x53EF;&#x4EE5;&#x538B;&#x5236;&#x8F6C;&#x5F55;&#x65F6;&#x8868;&#x793A;&#x4E3A;&#x4E0E;&#x65E0;&#x5173;&#x7684; DNA &#x7ED3;&#x5408;&#x57DF;&#x7684;&#x878D;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x7684; N &#x672B;&#x7AEF;&#x5BCC;&#x542B;&#x812F;&#x6C28;&#x9178;&#x7684;&#x57DF;&#x3001; &#x4E2D;&#x592E; homeodomain &#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684; DNA &#x5E8F;&#x5217;&#x548C;&#x9178;&#x6027; C &#x672B;&#x7AEF;&#x57DF;&#x6CA1;&#x6709;&#x5DF2;&#x77E5;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x8C03;&#x67E5;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x6211;&#x4EEC;&#x6709;&#x51C0;&#x5316;&#x5168;&#x957F;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x548C;&#x7EC4;&#x6C28;&#x9178;&#x6807;&#x8BB0;&#x5BF9;&#x5E94;&#x4E8E;&#x4E0D;&#x540C;&#x57DF;&#x7684;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x7684;&#x622A;&#x65AD;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x878D;&#x5408;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x6BD4;&#x8F83;&#x6D17;&#x8131;&#x6761;&#x4EF6;&#x548C;&#x5217;&#x5377;&#x5BF9;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EAF;&#x5316;&#x548C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8C03;&#x67E5;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684; DNA &#x7ED3;&#x5408;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x6838;&#x9178;&#x9176;&#x6CBB;&#x7597;&#x540E;&#x5373;&#x4F7F;&#x516C; homeodomain co-purifies &#x4E0E;&#x6838;&#x9178;&#x548C;&#x9AD8;&#x76D0;&#x6D17;&#x662F;&#x9700;&#x8981;&#x5220;&#x9664;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7684;&#x6838;&#x9178;&#x3002;&#x5168;&#x957F;&#x7684;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x516C;&#x5C4B; homeodomain &#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; DNA &#x9AD8;&#x4EB2;&#x548C;&#x6027;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x622A;&#x65AD;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#xFF0C;&#x8FD8;&#x5305;&#x62EC; homeodomain &#x548C; C &#x672B;&#x7AEF;&#x57DF;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; DNA &#x9AD8;&#x4EB2;&#x548C;&#x529B;&#x548C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F97;&#x51FA;&#x7684;&#x7ED3;&#x8BBA;&#x7684;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x7684; N-&#x7AEF;&#x57DF;&#x6291;&#x5236; homeodomain DNA &#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x5206;&#x79BB;&#x7EAF;&#x5316;&#x548C;&#x9274;&#x5B9A;&#x7684;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B; homeodomain&#xFF1A; &#x53BB;&#x9664;&#x7684;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x7684; N-&#x672B;&#x7AEF;&#x57DF;&#x589E;&#x52A0;&#x516C;&#x5C4B; homeodomain DNA &#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

The Proline-Rich Homeodomain (PRH) protein is a regulator of transcription and translation and plays a key role in the control of cell proliferation and cell differentiation. PRH contains an N-terminal proline-rich domain that can repress transcription when expressed as a fusion protein with an unrelated DNA binding domain, a central homeodomain that binds to specific DNA sequences and an acidic C-terminal domain of no known function. In order to investigate the structure and functions of PRH we have purified the full-length protein and truncated proteins corresponding to different domains of PRH fused to histidine tags. Here we compare the effects of elution conditions and column volume on protein purification and we investigate the DNA binding activity of these proteins. We show that the PRH homeodomain co-purifies with nucleic acids even after nuclease treatment and that a high salt-wash is required to remove bound nucleic acids. In contrast with the full-length PRH protein, the PRH homeodomain binds to DNA with high affinity. We show that a truncated protein comprising the homeodomain and C-terminal domain also binds to DNA with high affinity and we conclude that the N-terminal domain of PRH inhibits the homeodomain-DNA interaction.

Purification and characterisation of the PRH homeodomain: Removal of the N-terminal domain of PRH increases the PRH homeodomain-DNA interaction.

La riche en proline hom&#xE9;odomaine (PRH) prot&#xE9;ine est un r&#xE9;gulateur de la transcription et la traduction et joue un r&#xF4;le cl&#xE9; dans le contr&#xF4;le de la prolif&#xE9;ration cellulaire et la diff&#xE9;renciation cellulaire. PRH contient une N-terminale du domaine riche en proline qui peut r&#xE9;primer la transcription lorsqu&#x26;#39;il est exprim&#xE9; comme une prot&#xE9;ine de fusion avec un domaine d&#x26;#39;ADN non li&#xE9; liaison, un hom&#xE9;odomaine centrale qui se lie &#xE0; des s&#xE9;quences d&#x26;#39;ADN sp&#xE9;cifiques et une acide C-terminal du domaine de pas de fonction connue. Afin d&#x26;#39;&#xE9;tudier la structure et les fonctions de PRH Nous avons purifi&#xE9; la prot&#xE9;ine pleine longueur et des prot&#xE9;ines tronqu&#xE9;es correspondant &#xE0; diff&#xE9;rents domaines de la PRH fusionn&#xE9;s &#xE0; des balises histidine. Ici, nous comparons les effets des conditions d&#x26;#39;&#xE9;lution et le volume sur une colonne de purification des prot&#xE9;ines et nous &#xE9;tudions l&#x26;#39;activit&#xE9; de liaison d&#x26;#39;ADN de ces prot&#xE9;ines. Nous montrons que la PRH hom&#xE9;odomaine co-purifie avec les acides nucl&#xE9;iques, m&#xEA;me apr&#xE8;s le traitement nucl&#xE9;ase et qu&#x26;#39;une grande sel de lavage est n&#xE9;cessaire pour &#xE9;liminer les acides nucl&#xE9;iques li&#xE9;s. En contraste avec la prot&#xE9;ine PRH pleine longueur, l&#x26;#39;hom&#xE9;odomaine PRH lie &#xE0; l&#x26;#39;ADN avec une grande affinit&#xE9;. Nous montrons que la prot&#xE9;ine tronqu&#xE9;e comprenant l&#x26;#39;hom&#xE9;odomaine et domaine C-terminal se lie &#xE9;galement &#xE0; l&#x26;#39;ADN avec une grande affinit&#xE9; et nous concluons que le domaine N-terminal de PRH inhibe l&#x26;#39;interaction hom&#xE9;odomaine-ADN.

Purification et caract&#xE9;risation de l&#x26;#39;hom&#xE9;odomaine PRH: Retrait du domaine N-terminal de PRH Augmente la PRH hom&#xE9;odomaine ADN Interaction

Das Proline-Rich Hom&ouml;odom&auml;ne (PRH)-Protein ist ein Regulator der Transkription und &Uuml;bersetzung und spielt eine Schl&uuml;sselrolle bei der Kontrolle der Zellproliferation und Zelldifferenzierung. PRH enth&auml;lt eine N-terminale Prolin-reiche-Dom&auml;ne, die Transkription, ausgedr&uuml;ckt als ein Fusionsprotein mit einem unabh&auml;ngigen DNA-bindende Dom&auml;ne unterdr&uuml;cken kann, eine zentrale Hom&ouml;odom&auml;ne, die an bestimmte DNA-Sequenzen und einer sauren C-terminalen Dom&auml;ne keine bekannte Funktion bindet. Um die Struktur und Funktionen der PRH zu untersuchen haben wir das in Protein gereinigt und abgeschnittene Proteine entsprechend verschiedenen Dom&auml;nen von PRH verschmolzen Histidin-Tags. Hier vergleichen wir die Auswirkungen der Elution Bedingungen und Spalte Volumen auf Proteinreinigung, und wir untersuchen die DNA-Bindung-Aktivit&auml;t dieser Proteine. Wir zeigen, dass die PRH-Hom&ouml;odom&auml;ne mit Nukleins&auml;uren auch nach Nuklease Behandlung co-purifies und eine hohe Salz-W&auml;sche gebundenen Nukleins&auml;uren entfernen erforderlich ist. Im Gegensatz zu der in PRH-Protein bindet die PRH-Hom&ouml;odom&auml;ne an DNA mit hoher Affinit&auml;t. Wir zeigen, dass eine abgeschnittene Protein, bestehend aus der Hom&ouml;odom&auml;ne und C-terminalen Dom&auml;ne auch an DNA mit hoher Affinit&auml;t bindet und wir schlie&szlig;en, dass die N-terminalen Dom&auml;ne von PRH die Hom&ouml;odom&auml;ne-DNA-Interaktion hemmt.

Reinigung und Charakterisierung von PRH-Hom&ouml;odom&auml;ne: Entfernung der N-terminalen Dom&auml;ne des PRH erh&ouml;ht die PRH-Hom&ouml;odom&auml;ne-DNA-Interaktion.

La proteina Proline-Rich Homeodomain (PRH) &egrave; un regolatore della trascrizione e traduzione e svolge un ruolo chiave nel controllo della proliferazione cellulare e la differenziazione delle cellule. PRH contiene un dominio N-terminale ricco di prolina che pu&ograve; reprimere la trascrizione quando espresso come una proteina di fusione con un dominio di legame del DNA estraneo, un omeodominio centrale che si lega a specifiche sequenze di DNA e un dominio C-terminale acidulo di alcuna funzione conosciuta. Al fine di indagare la struttura e le funzioni del PRH noi abbiamo purificato la proteina full-length e troncate proteine corrispondenti ai diversi domini di PRH fuso a tag di istidina. Qui mettiamo a confronto gli effetti delle condizioni di eluizione e colonna volume sulla purificazione della proteina e indaghiamo l&#39;attivit&agrave; di legame del DNA di queste proteine. Dimostriamo che l&#39;omeodominio PRH co-purifies con acidi nucleici anche dopo il trattamento della nucleasi e che un alto sale-lavaggio &egrave; necessario per rimuovere associati gli acidi nucleici. In contrasto con la proteina PRH full-length, l&#39;omeodominio PRH si lega al DNA con alta affinit&agrave;. Mostriamo che una proteina tronca, comprendente anche l&#39;omeodominio e dominio C-terminale si lega al DNA con alta affinit&agrave; e concludiamo che il dominio N-terminale del PRH inibisce l&#39;interazione homeodomain-DNA.

Purificazione e caratterizzazione dell&#39;omeodominio PRH: rimozione del dominio N-terminale del PRH aumenta l&#39;interazione di homeodomain-DNA PRH.

&#x30D7;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C1;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#xFF08;PRH&#xFF09;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x8EE2;&#x5199;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7FFB;&#x8A33;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; PRH&#x306F;&#x7121;&#x95A2;&#x4FC2;&#x306E;DNA&#x7D50;&#x5408;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;DNA&#x914D;&#x5217;&#x3068;&#x65E2;&#x77E5;&#x306E;&#x95A2;&#x6570;&#x306E;&#x9178;&#x6027;&#x306E;C&#x672B;&#x7AEF;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x3066;&#x4E2D;&#x592E;&#x306E;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3068;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x3001;N&#x672B;&#x7AEF;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C1;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30D2;&#x30B9;&#x30C1;&#x30B8;&#x30F3;&#x30BF;&#x30B0;&#x306B;&#x878D;&#x5408;&#x3057;&#x305F;PRH&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B;&#x5B8C;&#x5168;&#x9577;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5207;&#x308A;&#x6368;&#x3066;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3057;&#x305F;PRH&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x7CBE;&#x88FD;&#x306E;&#x6EB6;&#x96E2;&#x6761;&#x4EF6;&#x3068;&#x30AB;&#x30E9;&#x30E0;&#x4F53;&#x7A4D;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;DNA&#x7D50;&#x5408;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;PRH&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3082;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x51E6;&#x7406;&#x5F8C;&#x3001;&#x9AD8;&#x5869;&#x6D17;&#x6D44;&#x304C;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x305F;&#x6838;&#x9178;&#x3092;&#x9664;&#x53BB;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x6838;&#x9178;&#x3068;&#x306E;&#x5171;&#x540C;&#x6D44;&#x5316;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x30D5;&#x30EB;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B0;&#x30B9;PRH&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3068;&#x306F;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;PRH&#x306E;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x9AD8;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x3067;DNA&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3068;C&#x672B;&#x7AEF;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x77ED;&#x7E2E;&#x578B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x9AD8;&#x3044;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;DNA&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;PRH&#x306E;N&#x672B;&#x7AEF;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;-DNA&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x7D50;&#x8AD6;&#x3065;&#x3051;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

PRH&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3068;&#x30AD;&#x30E3;&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30EA;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#xFF1A;PRH&#x306E;N&#x672B;&#x7AEF;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x524A;&#x9664;&#x306F;&#x3001;PRH&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;-DNA&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3055;&#x305B;&#x308B;

&#xD504;&#xB864;&#xB9B0; &#xBD80;&#xC720;&#xD55C; Homeodomain (PRH) &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC804;&#xC0AC; &#xBC0F; &#xBC88;&#xC5ED;&#xC758; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130; &#xC774;&#xBA70;, &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD;&#xACFC; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xD654; &#xC81C;&#xC5B4;&#xC5D0; &#xD575;&#xC2EC; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4;. PRH &#xC804;&#xC0AC; &#xAD00;&#xB828; &#xC5C6;&#xB294; DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xC735;&#xD569; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC73C;&#xB85C; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xBA74; &#xC8FC;&#xCCB4; &#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; N-&#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xD504;&#xB864;&#xB9B0; &#xBD80;&#xC720;&#xD55C; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;, &#xD2B9;&#xC815; DNA &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC640; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4;&#xB41C; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC758; &#xC2E0;&#xB784; &#xD55C; C &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC911;&#xC559; homeodomain &#xD3EC;&#xD568; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAD6C;&#xC870;&#xC640; PRH&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574;&#xC11C;&#xB294; &#xC804;&#xCCB4; &#xAE38;&#xC774; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC815;&#xD654;&#xB294; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC640; PRH&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC5D0; &#xD574;&#xB2F9; &#xD558;&#xB294; &#xC798;&#xB9B0;&#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD788;&#xC2A4;&#xD2F0;&#xB518; &#xD0DC;&#xADF8;&#xB97C; &#xC735;&#xD569;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC815;&#xD654;&#xC5D0; &#xCC28;&#xC785; &#xC870;&#xAC74;&#xACFC; &#xC5F4; &#xBCFC;&#xB968;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xBE44;&#xAD50; &#xD558; &#xACE0;&#xC774; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC870;&#xC0AC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; PRH homeodomain co-purifies &#xD575; &#xC0B0;&#xACFC; nuclease &#xCE58;&#xB8CC; &#xD6C4;&#xC5D0; &#xB192;&#xC740; &#xC18C;&#xAE08; &#xC6CC;&#xC2DC;&#xB294; &#xBC14;&#xC6B4;&#xB4DC; &#xD575; &#xC0B0;&#xC744; &#xC81C;&#xAC70; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xD544;&#xC694;&#xD55C;&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC804;&#xCCB4; &#xAE38;&#xC774; PRH &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB2EC;&#xB9AC; PRH homeodomain&#xC5D0; &#xB192;&#xC740; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4;&#xC640; DNA&#xB97C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB192;&#xC740; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4;&#xC640; DNA&#xAC00; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC798;&#xB9B0;&#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAD6C;&#xC131; &#xB41C; homeodomain&#xC640; C &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xB610;&#xD55C; &#xC6B0;&#xB9AC; PRH&#xC758; N &#xB9E8;&#xB05D; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; homeodomain DNA &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xC5B5;&#xC81C; &#xACB0;&#xB860; &#xD45C;&#xC2DC;.

&#xC815;&#xD654; &#xBC0F; PRH homeodomain &#xD2B9;&#xC131;: PRH&#xC758; N &#xB9E8;&#xB05D; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC758; &#xC81C;&#xAC70; PRH homeodomain DNA &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xC99D;&#xAC00;.

La prolina-Rich Homeodominio (PRH) la prote&#xED;na es un regulador de la transcripci&#xF3;n y la traducci&#xF3;n y juega un papel clave en el control de la proliferaci&#xF3;n y diferenciaci&#xF3;n celular. PRH contiene un N-terminal rica en prolina dominio que puede reprimir la transcripci&#xF3;n cuando se expresa como una prote&#xED;na de fusi&#xF3;n con un dominio de uni&#xF3;n ADN no relacionado, un homeodominio central que une a las secuencias espec&#xED;ficas de ADN y un &#xE1;cido C-terminal del dominio de ninguna funci&#xF3;n conocida. Con el fin de investigar la estructura y las funciones de PRH hemos purificado la prote&#xED;na de longitud completa y prote&#xED;nas truncadas que corresponde a diferentes dominios de PRH fusionados a las etiquetas de histidina. Aqu&#xED; se comparan los efectos de las condiciones de eluci&#xF3;n y el volumen de la columna en la purificaci&#xF3;n de prote&#xED;nas y se investiga la actividad de uni&#xF3;n al ADN de estas prote&#xED;nas. Se demuestra que el PRH homeodominio co-purifica con los &#xE1;cidos nucleicos, incluso despu&#xE9;s del tratamiento con nucleasa y que un gran lavado de la sal es necesaria para eliminar los &#xE1;cidos nucleicos unidos. En contraste con la prote&#xED;na de longitud completa PRH, el homeodominio PRH se une al ADN con alta afinidad. Se demuestra que una prote&#xED;na truncada que comprende el homeodominio y el dominio C-terminal tambi&#xE9;n se une al ADN con alta afinidad y llegamos a la conclusi&#xF3;n de que el dominio N-terminal de PRH inhibe la interacci&#xF3;n homeodominio-ADN.

Purificaci&#xF3;n y Caracterizaci&#xF3;n de la Homeodominio PRH: La eliminaci&#xF3;n del dominio N-terminal de PRH Aumenta el PRH Homeodominio de ADN Interacci&#xF3;n

Homeodomain &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x901A;&#x8FC7;&#x6539;&#x53D8;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x6682;&#x65F6;&#x548C;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x8C03;&#x8282;&#x591A;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E4B;&#x8DEF;&#x3002;&#x812F;&#x6C28;&#x9178;&#x5BCC; Homeodomain &#x86CB;&#x767D; (&#x516C;/&#x5341;&#x516D;&#x8FDB;&#x5236;) &#x662F;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x4E0E;&#x5173;&#x952E;&#x8C03;&#x8282;&#x5668;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x53D1;&#x80B2;&#x548C;&#x9020;&#x8840;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x53D1;&#x73B0;&#x6709;&#x7275;&#x8FDE;&#x81EA;&#x7F14;&#x5408;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x91CD;&#x8981;&#x7279;&#x70B9;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x5404;&#x79CD;&#x6280;&#x672F;&#x5305;&#x62EC;&#x51DD;&#x80F6;&#x8FC7;&#x6EE4;&#x3001; &#x5206;&#x6790;&#x8D85;&#x901F;&#x79BB;&#x5FC3;&#x6CD5;&#x3001; &#x7535;&#x955C;&#x548C;&#x4F53;&#x5916;&#x4EA4;&#x8054;&#xFF0C;&#x7EAF;&#x5316;&#x91CD;&#x7EC4;&#x516C;&#x5C4B;&#x662F;&#x5BE1;&#x805A;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x4F53;&#x5185;&#x4EA4;&#x8054;&#x6765;&#x786E;&#x8BA4;&#x8FD9;&#x79CD;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F4E;&#x805A;&#x7269;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;&#x8FD9;&#x662F; homeodomain &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5728;&#x4F53;&#x5185;&#x53EF;&#x4EE5; oligomerise &#x7684;&#x9996;&#x6B21;&#x5C55;&#x793A;&#x3002;&#x7B26;&#x5408;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x5185;&#x6E90;&#x6027;&#x548C;&#x5916;&#x6E90;&#x6027;&#x7684;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x7684;&#x4E00;&#x5C0F;&#x90E8;&#x5206;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x79BB;&#x6563;&#x75AB;&#x6E90;&#x5730;&#x5185;&#x539F;&#x5B50;&#x6838;&#x548C;&#x6838;&#x8FB9;&#x7F18;&#x663E;&#x793A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x7684; N-&#x672B;&#x7AEF;&#x57DF;&#x53C2;&#x4E0E;&#x8C03;&#x8282;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x548C;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6291;&#x5236;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4F7F;&#x591A;&#x4E2A;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;-&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A;&#x8FD9;&#x4E00;&#x533A;&#x57DF;&#x7684;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x5305;&#x542B;&#x65B0;&#x578B;&#x5BCC;&#x542B;&#x812F;&#x6C28;&#x9178;&#x7684; dimerisation &#x57DF;&#x7684;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x4F4E;&#x805A;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x7684;&#x6A21;&#x578B;&#xFF0C;&#x89E3;&#x91CA;&#x4E86;&#x5982;&#x4F55;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x5F62;&#x6210;&#x4F4E;&#x805A;&#x7269;&#x548C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4F4E;&#x805A;&#x7269;&#x53EF;&#x80FD;&#x5982;&#x4F55;&#x63A7;&#x5236;&#x8F6C;&#x5F55;&#x3002;

&#x4F4E;&#x805A;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x8C03;&#x8282;&#x5668;&#x812F;&#x6C28;&#x9178;&#x4E30;&#x5BCC; homeodomain &#xFF08;&#x516C;/&#x5341;&#x516D;&#x8FDB;&#x5236;&#xFF09; &#x88AB;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x65B0;&#x578B;&#x5BCC;&#x542B;&#x812F;&#x6C28;&#x9178;&#x7684; dimerisation &#x57DF;&#x3002;

Homeodomain proteins regulate multiple developmental pathways by altering gene expression temporally and in a tissue-specific fashion. The Proline Rich Homeodomain protein (PRH/Hex) is a transcription factor and an essential regulator of embryonic development and haematopoiesis. Recent discoveries have implicated self-association as an important feature of transcription factor function. Here, we show using a variety of techniques including gel-filtration, analytical ultracentrifugation, electron microscopy and in vitro cross-linking, that purified recombinant PRH is oligomeric and we use in vivo cross-linking to confirm that this protein exists as oligomers in cells. This is the first demonstration that a homeodomain protein can oligomerise in vivo. Consistent with these findings we show that a fraction of endogenous and exogenous PRH appears as discrete foci within the nucleus and at the nuclear periphery. The N-terminal domain of PRH is involved in the regulation of cell proliferation and transcriptional repression and can make multiple protein-protein interactions. We show that this region of PRH contains a novel proline-rich dimerisation domain that mediates oligomerisation. We propose a model that explains how PRH forms oligomers and we discuss how these oligomers might control transcription.

Oligomerisation of the developmental regulator proline rich homeodomain (PRH/Hex) is mediated by a novel proline-rich dimerisation domain.

Prot&#xE9;ines &#xE0; hom&#xE9;odomaine r&#xE9;guler de multiples voies de d&#xE9;veloppement en modifiant l&#x26;#39;expression des g&#xE8;nes dans le temps et dans un mode sp&#xE9;cifique d&#x26;#39;un tissu. La prot&#xE9;ine &#xE0; hom&#xE9;odomaine Proline Rich (PRH / Hex) est un facteur de transcription et un r&#xE9;gulateur essentiel du d&#xE9;veloppement embryonnaire et l&#x26;#39;h&#xE9;matopo&#xEF;&#xE8;se. Des d&#xE9;couvertes r&#xE9;centes ont mis en cause l&#x26;#39;auto-association comme une caract&#xE9;ristique importante de la fonction de facteur de transcription. Ici, nous montrons en utilisant une vari&#xE9;t&#xE9; de techniques, y compris de filtration sur gel, ultracentrifugation analytique, la microscopie &#xE9;lectronique et in vitro r&#xE9;ticulation, qui purifie PRH recombinant est oligom&#xE9;rique et nous utilisons in vivo de r&#xE9;ticulation pour confirmer que cette prot&#xE9;ine existe sous forme d&#x26;#39;oligom&#xE8;res dans les cellules . Il s&#x26;#39;agit de la premi&#xE8;re d&#xE9;monstration qu&#x26;#39;une prot&#xE9;ine hom&#xE9;odomaine peut oligom&#xE9;riser in vivo. Conform&#xE9;ment &#xE0; ces r&#xE9;sultats, nous montrons que d&#x26;#39;une fraction de PRH endog&#xE8;ne et exog&#xE8;ne appara&#xEE;t comme foyers discrets au sein du noyau et &#xE0; la p&#xE9;riph&#xE9;rie nucl&#xE9;aire. Le domaine N-terminal de PRH est impliqu&#xE9;e dans la r&#xE9;gulation de la prolif&#xE9;ration cellulaire et de la r&#xE9;pression de la transcription et peut faire plusieurs interactions prot&#xE9;ine-prot&#xE9;ine. Nous montrons que cette r&#xE9;gion de PRH contient un domaine de dim&#xE9;risation roman riche en proline qui oligom&#xE9;risation m&#xE9;diateur. Nous proposons un mod&#xE8;le qui explique comment PRH oligom&#xE8;res formes et nous discutons de la fa&#xE7;on dont ces oligom&#xE8;res pourraient contr&#xF4;ler la transcription.

Oligom&#xE9;risation de l&#x26;#39;autorit&#xE9; de d&#xE9;veloppement Proline Rich hom&#xE9;odomaine (PRH / Hex) est m&#xE9;di&#xE9;e par un domaine riche en proline dim&#xE9;risation Novel

Hom&ouml;odom&auml;ne Proteine regulieren mehrere entwicklungsbedingte Bahnen von Genexpression zeitlich und in Gewebe-spezifischen Weise zu ver&auml;ndern. Das Proline Rich Homeodomain Protein (PRH/Hex) ist ein Transkriptionsfaktor und eine wesentliche Regulator der embryonalen Entwicklung und Blutbildung. Neue Entdeckungen haben Self-association als ein wichtiges Merkmal der Transkription Faktor Funktion verwickelt. Hier zeigen wir mit einer Vielzahl von Techniken, einschlie&szlig;lich Gel-Filtration, analytische Ultrazentrifugation, Elektronenmikroskopie und in-vitro-Vernetzung, das rekombinante gereinigt PRH ist Oligomere und in-vivo Vernetzung um zu best&auml;tigen, dass dieses Protein als Oligomere in Zellen vorhanden ist. Dies ist die erste Demonstration, die ein Hom&ouml;odom&auml;ne-Protein in Vivo oligomerise kann. Mit diesen Erkenntnissen zeigen wir, dass ein Bruchteil der endogenen und exogenen PRH als diskrete Foki innerhalb des Kerns und der Umfang der nuklearen angezeigt wird. Die N-terminalen Dom&auml;ne von PRH kann ist die Regulierung der Zellproliferation und transcriptional Repression beteiligt und mehrere Proteinprotein Interaktionen. Wir zeigen, dass diese Region von PRH eine neuartige Prolin-reiche Dimerisierung-Dom&auml;ne enth&auml;lt, die Oligomerisierung vermittelt. Wir schlagen ein Modell, das erkl&auml;rt, wie PRH Oligomere bildet und wir diskutieren, wie diese Oligomere Transkription Steuern k&ouml;nnte.

Oligomerisierung von Entwicklungsst&ouml;rungen Regler Prolin reichen Hom&ouml;odom&auml;ne (PRH/Hex) ist durch eine neuartige Prolin-reiche Dimerisierung Dom&auml;ne vermittelt.

Le proteine homeodomain regolano molteplici percorsi dello sviluppo alterando l&#39;espressione di gene temporaneamente e in maniera tessuto-specifica. La Proline Rich Homeodomain protein (PRH/Hex) &egrave; un fattore di trascrizione e un regolatore essenziale dello sviluppo embrionale ed emopoiesi. Recenti scoperte hanno implicato moltiplicava come una caratteristica importante della funzione del fattore di trascrizione. Mostriamo qui, utilizzando una variet&agrave; di tecniche compreso gel-filtrazione, ultracentrifugazione analitica, microscopia elettronica e cross-linking in vitro, che purificato ricombinante PRH &egrave; oligomerica e usiamo cross-linking in vivo per confermare che questa proteina esiste come oligomeri nelle cellule. Questa &egrave; la prima dimostrazione che una proteina homeodomain pu&ograve; oligomerise in vivo. Coerente con queste scoperte che ci mostrano che una frazione di PRH endogeni ed esogeni appare come discreti fuochi all&#39;interno del nucleo e alla periferia nucleare. Il dominio N-terminale del PRH &egrave; coinvolto nella regolazione della proliferazione cellulare e repressione trascrizionale e pu&ograve; rendere pi&ugrave; interazioni proteina-proteina. Dimostriamo che questa regione del PRH contiene un dominio romanzo ricco di prolina dimerizzazione che media oligomerizzazione. Vi proponiamo un modello che spiega come PRH forma oligomeri e discutiamo di come questi oligomeri potrebbero controllare la trascrizione.

Oligomerizzazione del regolatore dello sviluppo proline rich homeodomain (PRH/Hex) &egrave; mediata da un dominio di dimerizzazione di romanzo ricco di prolina.

&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x4E00;&#x6642;&#x7684;&#x306B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x5909;&#x5316;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x7D44;&#x7E54;&#x56FA;&#x6709;&#x306E;&#x65B9;&#x5F0F;&#x3067;&#x3001;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x30D7;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C1;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;PRH /&#x30D8;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#xFF09;&#x306F;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x3068;&#x80DA;&#x767A;&#x751F;&#x3068;&#x9020;&#x8840;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x306A;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x767A;&#x898B;&#x306F;&#x3001;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x81EA;&#x5DF1;&#x4F1A;&#x5408;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;PRH&#x3092;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3059;&#x308B;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x3001;&#x30B2;&#x30EB;&#x6FFE;&#x904E;&#x3001;&#x5206;&#x6790;&#x8D85;&#x9060;&#x5FC3;&#x5206;&#x96E2;&#x3001;&#x96FB;&#x5B50;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x304A;&#x3088;&#x3073;in vitro&#x67B6;&#x6A4B;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x5404;&#x7A2E;&#x306E;&#x624B;&#x6CD5;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3053;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x304C;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x3067;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;in vivo&#x3067;&#x67B6;&#x6A4B;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x304C;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x3067;oligomerise&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x30C7;&#x30E2;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5916;&#x56E0;&#x6027;PRH&#x306E;&#x5272;&#x5408;&#x306F;&#x3001;&#x6838;&#x5185;&#x3068;&#x6838;&#x5468;&#x8FBA;&#x3067;&#x306E;&#x96E2;&#x6563;&#x75C5;&#x5DE3;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x77E5;&#x898B;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; PRH&#x306E;N&#x672B;&#x7AEF;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x304C;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x3068;&#x8EE2;&#x5199;&#x6291;&#x5236;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x9593;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x884C;&#x3046;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;PRH&#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x9818;&#x57DF;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5A92;&#x4ECB;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x5C0F;&#x8AAC;&#x30D7;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x306B;&#x5BCC;&#x3080;&#x4E8C;&#x91CF;&#x4F53;&#x5316;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3069;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;PRH&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3059;&#x308B;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3057;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x304C;&#x8EE2;&#x5199;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x767A;&#x9054;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x30D7;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C1;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#xFF08;PRH /&#x5341;&#x516D;&#x9032;&#x6CD5;&#xFF09;&#x306E;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x65B0;&#x898F;&#x30D7;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x306B;&#x5BCC;&#x3080;&#x4E8C;&#x91CF;&#x4F53;&#x5316;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3055;&#x308C;&#x308B;

Homeodomain &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC77C;&#xC2DC;&#xC801; &#xBC0F; &#xC870;&#xC9C1; &#xAD00;&#xB828; &#xD328;&#xC158; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC744; &#xBCC0;&#xACBD; &#xD558; &#xC5EC; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xD1B5;&#xB85C; &#xADDC;&#xC81C;. &#xD504;&#xB864;&#xB9B0; &#xBD80;&#xC720;&#xD55C; Homeodomain &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (PRH/16 &#xC9C4;&#xC218;)&#xB294; &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790;&#xC640; &#xBC30;&#xC544; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xBC0F; haematopoiesis&#xC758; &#xD544;&#xC218; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;. &#xCD5C;&#xADFC;&#xC758; &#xBC1C;&#xACAC; &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790; &#xD568;&#xC218;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC73C;&#xB85C; self-association&#xC744; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; PRH oligomeric&#xC740; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xC815;&#xD654; &#xC824; &#xC5EC;&#xACFC;, &#xBD84;&#xC11D; ultracentrifugation, &#xC804;&#xC790; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95; &#xBC0F; &#xCCB4; &#xC678; &#xAD50;&#xCC28; &#xB4F1; &#xAE30;&#xBC95;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xACE0;&#xC774; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC774; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC62C;&#xB9AC;&#xACE0;&#xB85C; &#xC874;&#xC7AC; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC778;&#xC9C0; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2ED;&#xC790;&#xAC00; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xAC83;&#xC740; homeodomain &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBE44;&#xBCF4;&#xC5D0; oligomerise &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xB370;&#xBAA8;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC0DD; exogenous PRH &#xC77C;&#xBD80; &#xAC1C;&#xBCC4; foci &#xD575; &#xB0B4; &#xD575; &#xC8FC;&#xBCC0;&#xC5D0;&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0A9;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. PRH&#xC758; N &#xB9E8;&#xB05D; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD; &#xBC0F; transcriptional &#xC5B5;&#xC555;&#xC758; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xC158;&#xC5D0; &#xCC38;&#xC5EC; &#xD558; &#xACE0; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xB9CC;&#xB4E4; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; PRH&#xC758;&#xC774; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0; oligomerisation &#xC911;&#xC7AC; &#xC18C;&#xC124; &#xD504;&#xB864;&#xB9B0; &#xBD80;&#xC720;&#xD55C; dimerisation &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xD3EC;&#xD568; &#xB418;&#xC5B4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; PRH &#xC62C;&#xB9AC;&#xACE0;&#xB97C; &#xD615;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC5D0; &#xB300;&#xD574; &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xB294; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD558; &#xACE0; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC62C;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC218; &#xC804;&#xC0AC;&#xB97C; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC5D0; &#xB300;&#xD574; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Oligomerisation &#xBC1C;&#xB2EC; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130; &#xD504;&#xB864;&#xB9B0; &#xBD80;&#xC720;&#xD55C; homeodomain (PRH/16 &#xC9C4;&#xC218;)&#xC758; &#xC18C;&#xC124; &#xD504;&#xB864;&#xB9B0; &#xBD80;&#xC720;&#xD55C; dimerisation &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC911;&#xC7AC;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Prote&#xED;nas homeodominio regular m&#xFA;ltiples v&#xED;as de desarrollo mediante la alteraci&#xF3;n de la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica temporalmente y de una manera espec&#xED;fica de tejido. La prote&#xED;na prolina Homeodominio enriquecido (PRH / Hex) es un factor de transcripci&#xF3;n y un regulador esencial del desarrollo embrionario y la hematopoyesis. Descubrimientos recientes han implicado a la libre asociaci&#xF3;n como una caracter&#xED;stica importante de la funci&#xF3;n del factor de transcripci&#xF3;n. Aqu&#xED;, se muestra usando una variedad de t&#xE9;cnicas que incluyen filtraci&#xF3;n en gel, ultracentrifugaci&#xF3;n anal&#xED;tica, microscop&#xED;a electr&#xF3;nica e in vitro reticulaci&#xF3;n, que se purific&#xF3; PRH recombinante es oligom&#xE9;rica y se utiliza in vivo de reticulaci&#xF3;n para confirmar que esta prote&#xED;na existe como olig&#xF3;meros en c&#xE9;lulas . Esta es la primera demostraci&#xF3;n de que una prote&#xED;na homeodominio puede oligomerise in vivo. De acuerdo con estos hallazgos nos muestran que una fracci&#xF3;n de PRH end&#xF3;genos y ex&#xF3;genos aparece como focos discretos dentro del n&#xFA;cleo y en la periferia nuclear. El dominio N-terminal de PRH est&#xE1; implicado en la regulaci&#xF3;n de la proliferaci&#xF3;n celular y la represi&#xF3;n transcripcional y puede hacer m&#xFA;ltiples interacciones prote&#xED;na-prote&#xED;na. Se demuestra que esta regi&#xF3;n del PRH contiene una novela rica en prolina de dominio dimerizaci&#xF3;n que oligomerizaci&#xF3;n media. Proponemos un modelo que explica c&#xF3;mo PRH olig&#xF3;meros de formas y se discute c&#xF3;mo estos olig&#xF3;meros pueden controlar la transcripci&#xF3;n.

Oligomerizaci&#xF3;n del regulador del desarrollo Proline Rich Homeodominio (PRH / Hex) est&#xE1; mediada por un dominio de dimerizaci&#xF3;n novela rica en prolina

[&#x4E5F;&#x79F0;&#x4E3A;&#x5341;&#x516D;&#x8FDB;&#x5236; &#xFF08;&#x8868;&#x793A; haematopoietically &#x540C;&#x6E90;&#x76D2;&#x57FA;&#x56E0;)] &#x7684;&#x516C;&#x5C4B; &#xFF08;&#x5BCC;&#x542B;&#x812F;&#x6C28;&#x9178;&#x7684; homeodomain) &#x86CB;&#x767D;&#x662F;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x53D1;&#x80B2;&#x5173;&#x952E;&#x8C03;&#x8282;&#x5668;&#x3002;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x662F;&#x80FD;&#x591F;&#x8C03;&#x8282;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x548C;&#x5206;&#x5316;&#xFF0C;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x8EAB;&#x4F53;&#x8F74;&#x3001; &#x9020;&#x8840;&#x548C;&#x8840;&#x7BA1;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x548C;&#x5F88;&#x591A;&#x91CD;&#x8981;&#x5668;&#x5B98;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x6240;&#x5FC5;&#x9700;&#x7684;&#x3002;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x662F;&#x4E00;&#x79CD; DNA &#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x538B;&#x5236;&#x5E76;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x4F7F;&#x7528;&#x591A;&#x91CD;&#x673A;&#x5236;&#x53CA;&#x5176;&#x9776;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x53EF;&#x8C03;&#x8282;&#x6838;&#x8FD0;&#x8F93;&#x7684;&#x7279;&#x5B9A;&#x5206;&#x6CCC;&#x4F7F;&#x9009;&#x5B9A;&#x7684;&#x63A7;&#x5236;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x548C;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x7684;&#x6210;&#x5458;&#x7684;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x3002;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x6700;&#x8FD1;&#x751F;&#x7269;&#x7269;&#x7406;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#x5B83;&#x5F62;&#x6210;&#x540C;&#x6E90;&#x5BE1;&#x805A;&#x7269;&#x5728;&#x4F53;&#x5185;&#x548C;&#x4F53;&#x5916;&#x548C;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x7684;&#x5BCC;&#x542B;&#x812F;&#x6C28;&#x9178;&#x7684;&#x533A;&#x57DF;&#x5F62;&#x6210;&#x4E00;&#x4E2A;&#x65B0;&#x578B;&#x4E8C;&#x805A;&#x754C;&#x9762;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F1A;&#x68C0;&#x8BA8;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x7684;&#x5F53;&#x524D;&#x6587;&#x732E;&#x548C;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x96C6;&#x4E2D;&#x4E8E;&#x8FD9;&#x79CD;&#x591A;&#x529F;&#x80FD;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x590D;&#x6742;&#x7F51;&#x7EDC;&#x3002;

&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;/&#x5341;&#x516D;&#x8FDB;&#x5236;&#xFF1A; &#x5BE1;&#x805A;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x548C;&#x591A;&#x529F;&#x80FD;&#x7A33;&#x538B;&#x5668;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x547D;&#x8FD0;&#x3002;

The PRH (proline-rich homeodomain) [also known as Hex (haematopoietically expressed homeobox)] protein is a critical regulator of vertebrate development. PRH is able to regulate cell proliferation and differentiation and is required for the formation of the vertebrate body axis, the haematopoietic and vascular systems and the formation of many vital organs. PRH is a DNA-binding protein that can repress and activate the transcription of its target genes using multiple mechanisms. In addition, PRH can regulate the nuclear transport of specific mRNAs making PRH a member of a select group of proteins that control gene expression at the transcriptional and translational levels. Recent biophysical analysis of the PRH protein has shown that it forms homo-oligomeric complexes in vivo and in vitro and that the proline-rich region of PRH forms a novel dimerization interface. Here we will review the current literature on PRH and discuss the complex web of interactions centred on this multifunctional protein.

PRH/Hex: an oligomeric transcription factor and multifunctional regulator of cell fate.

Le PRH (riche en proline hom&eacute;odomaine) [&eacute;galement appel&eacute;e Hex (haematopoietically exprim&eacute; hom&eacute;otique)] prot&eacute;ine est un r&eacute;gulateur essentiel du d&eacute;veloppement des vert&eacute;br&eacute;s. PRH est capable de r&eacute;guler la diff&eacute;renciation et la prolif&eacute;ration cellulaire et est requis pour la formation de l&#39;axe du corps vert&eacute;br&eacute;s, le h&eacute;matopo&iuml;&eacute;tique et syst&egrave;mes vasculaires et de la formation de nombreux organes vitaux. PRH est une prot&eacute;ine de liaison &agrave; l&#39;ADN qui peut r&eacute;primer et activer la transcription de ses g&egrave;nes cibles &agrave; l&#39;aide de plusieurs m&eacute;canismes. En outre, PRH peut r&eacute;glementer le transport nucl&eacute;aire des ARNm sp&eacute;cifiques faisant PRH, membre d&#39;un groupe restreint de prot&eacute;ines qui contr&ocirc;lent l&#39;expression des g&egrave;nes au niveau transcriptionnel et translationnelle. R&eacute;cente analyse biophysique de la prot&eacute;ine PRH a montr&eacute; qu&#39;il forme des complexes homo-oligom&egrave;res in vivo et in vitro et que la r&eacute;gion riche en proline de PRH forme une interface novatrice de dim&eacute;risation. Ici nous passerons en revue la documentation actuelle sur PRH et discuter l&#39;&eacute;cheveau complexe des interactions centr&eacute;es sur cette prot&eacute;ine multifonctionnelle.

PRH/Hex : un facteur de transcription oligom&eacute;riques et d&eacute;tendeur multifonctions de cellule sort.

Die PRH (Prolin-reiche Hom&ouml;odom&auml;ne) [auch bekannt als Hex (Haematopoietically ausgedr&uuml;ckt Homeobox)] Protein ist ein wichtiger Regulator der vertebrate Entwicklung. PRH ist in der Lage, die Zellproliferation und Differenzierung regulieren und ist erforderlich f&uuml;r die Bildung der vertebrate K&ouml;rperachse, der h&auml;matopoetischen und vaskul&auml;re Systeme und die Bildung von vielen lebenswichtigen Organe. PRH ist ein DNA-bindenden-Protein, das kann zu unterdr&uuml;cken und die Transkription seiner Zielgene &uuml;ber mehrere Mechanismen zu aktivieren. Dar&uuml;ber hinaus kann PRH regulieren den nuklearen Transport bestimmter mRNAs machen PRH Mitglied einer ausgew&auml;hlten Gruppe von Proteinen, die Genexpression auf transkriptionelle und translational Ebene steuern. Aktuellen Biophysikalische Untersuchungen &uuml;ber die PRH-Protein hat gezeigt, dass Homo-Oligomere komplexe in-vivo und in vitro bildet und dass die Prolin-reiche Region PRH eine neuartige Dimerisierung-Schnittstelle bildet. Hier werden wir aktuelle Literatur zu PRH und das komplexe Netz von Mittelpunkt dieses multifunktionale Protein-Interaktionen zu diskutieren.

PRH/Hex: eine Oligomere &Uuml;bertragungfaktor und multifunktionale Regulator Zelle Schicksal.

PRH (ricco di prolina homeodomain) [anche conosciuto come Hex (haematopoietically espresso homeobox)] proteine sono un regolatore critico dello sviluppo vertebrato. PRH &egrave; in grado di regolare la differenziazione e la proliferazione delle cellule ed &egrave; necessario per la formazione dell&#39;asse corporeo vertebrati, l&#39;ematopoietiche e sistemi vascolari e la formazione di molti organi vitali. PRH &egrave; una DNA-binding protein che pu&ograve; reprimere e attivare la trascrizione dei suoi geni bersaglio mediante meccanismi multipli. Inoltre, PRH pu&ograve; regolare il trasporto nucleare di specifici mRNA rendendo PRH un membro di un gruppo selezionato di proteine che controllano l&#39;espressione genica a livello trascrizionale e traslazionale. Recenti analisi biofisiche della proteina PRH ha dimostrato che forma complessi oligomerici homo in vivo e in vitro e che la regione ricca di prolina di PRH un interfaccia di dimerizzazione romanzo. Qui noi esamineremo la letteratura corrente su PRH e discutere la complessa rete di interazioni centrato su questa proteina multifunzionale.

PRH/Hex: un fattore di trascrizione oligomerici e regolatore multifunzionale di cella destino.

[16 &#x9032;&#x6570; (&#x8868;&#x73FE; haematopoietically &#x30DB;&#x30E1;&#x30AA; &#x30DC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#xFF09; &#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3082;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;] PRH (&#x30D7;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;) &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3042;&#x308B;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x3002;PRH &#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x3084;&#x5206;&#x5316;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x3001;&#x9020;&#x8840;&#x30FB;&#x8840;&#x7BA1;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0; &#x30FB;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x4F53;&#x8EF8;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5668;&#x5B98;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;PRH &#x93AE;&#x5727;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x305D;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x3092;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059; DNA &#x7D50;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;PRH PRH &#x8EE2;&#x5199;&#x3068;&#x4E26;&#x9032;&#x30FB; &#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x3057;&#x305F;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x3092;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E; Mrna &#x306E;&#x6838;&#x5185;&#x8F38;&#x9001;&#x3092;&#x8ABF;&#x6574;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x5E74;&#x4F1A;&#x5206;&#x6790; PRH &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E; in vivo &#x304A;&#x3088;&#x3073; in vitro &#x3067;&#x306E;&#x30D2;&#x30C8; &#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x932F;&#x4F53;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A;&#x5730;&#x57DF; PRH &#x306E;&#x65B0;&#x898F;&#x4E8C;&#x91CF;&#x4F53;&#x5316;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30A4;&#x30B9;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x79C1;&#x305F;&#x3061; PRH &#x4E0A;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x6587;&#x732E;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x3066;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x591A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x6027;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x30A6;&#x30A7;&#x30D6;&#x3092;&#x8A71;&#x3057;&#x5408;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

PRH/Hex: &#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x3068;&#x591A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x306E;&#x904B;&#x547D;&#x3092;&#x30BB;&#x30EB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

[16 &#xC9C4;&#xC218; (haematopoietically &#xD45C;&#xD604; homeobox) &#xB77C;&#xACE0;&#xB3C4; &#xD568;] PRH (&#xD504;&#xB864;&#xB9B0; &#xBD80;&#xC720;&#xD55C; homeodomain) &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC740; &#xCC99;&#xCD94; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;. PRH &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD;&#xACFC; &#xBD84;&#xD654; &#xC870;&#xC808; &#xC218; &#xC774;&#xBA70; &#xCC99;&#xCD94; &#xBAB8; &#xCD95;&#xB294; haematopoietic &#xBC0F; &#xD608;&#xAD00; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; &#xD615;&#xC131; &#xBC0F; &#xB9CE;&#xC740; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC7A5;&#xAE30;&#xC758; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C;. PRH&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB300;&#xC0C1; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC804;&#xC0AC;&#xB97C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xACE0; &#xC8FC;&#xCCB4; &#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; DNA &#xC758;&#xBB34;&#xC801;&#xC778; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC774;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, PRH&#xB294; PRH transcriptional &#xBC0F; &#xBCC0;&#xD658; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC120;&#xD0DD; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0;&#xC744; &#xB9CC;&#xB4DC;&#xB294; &#xD2B9;&#xC815; Mrnas&#xC758; &#xD575; &#xC6B4;&#xC1A1;&#xC744; &#xC870;&#xC808;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD5C;&#xADFC; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xB9AC; &#xBD84;&#xC11D; PRH &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD638;&#xBAA8; oligomeric &#xB2E8;&#xC9C0; &#xD615;&#xC131; PRH&#xC758; &#xD504;&#xB864;&#xB9B0; &#xBD80;&#xC720;&#xD55C; &#xC9C0;&#xC5ED; &#xC18C;&#xC124; dimerization &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xC774;&#xC2A4;&#xB97C; &#xD615;&#xC131; &#xD558; &#xACE0; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; PRH&#xC5D0;&#xC11C; &#xD604;&#xC7AC; &#xBB38;&#xD559; &#xAC80;&#xD1A0; &#xD558;&#xACA0;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;&#xC774; &#xB2E4;&#xAE30;&#xB2A5; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xC911;&#xC2EC;&#xC73C;&#xB85C; &#xD558;&#xB294; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC6F9;&#xC5D0; &#xC124;&#xBA85; &#xD558; &#xACE0;.

PRH/16 &#xC9C4;&#xC218;: oligomeric &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790;&#xC640; &#xB2E4;&#xAE30;&#xB2A5; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;&#xC758; &#xC6B4;&#xBA85;&#xC744; &#xC138;&#xD3EC;.

El PRH (ricos en prolina homeodomain) [tambi&eacute;n conocido como hexagonal (haematopoietically expresada homeobox)] es un regulador fundamental del desarrollo de vertebrados. PRH es capaz de regular la diferenciaci&oacute;n y proliferaci&oacute;n celular y es necesario para la formaci&oacute;n del eje del cuerpo de vertebrados, las hematopoy&eacute;ticas y sistemas vasculares y la formaci&oacute;n de muchos &oacute;rganos vitales. PRH es una prote&iacute;na de uni&oacute;n al ADN que puede reprimir y activar la transcripci&oacute;n de sus genes diana mediante varios mecanismos. Adem&aacute;s, PRH puede regular el transporte nuclear de mRNAs espec&iacute;ficos hacer PRH un miembro de un selecto grupo de prote&iacute;nas que controlan la expresi&oacute;n g&eacute;nica a nivel transcripcional y traslacional. Recientes an&aacute;lisis biof&iacute;sico de la prote&iacute;na PRH ha demostrado que forma complejos homo-oligom&eacute;ricas in vivo e in vitro y que la regi&oacute;n de ricos en prolina de PRH forma una interfaz de dimerizaci&oacute;n de novela. Aqu&iacute; vamos a revisar la literatura actual en PRH y discutir la compleja red de interacciones centrado en esta prote&iacute;na multifuncional.

PRH/Hex: un factor de transcripci&oacute;n oligom&eacute;ricas y regulador de m&uacute;ltiples funciones de destino de la c&eacute;lula.

[&#x4E5F;&#x79F0;&#x4E3A;&#x5341;&#x516D;&#x8FDB;&#x5236; &#xFF08;&#x8868;&#x793A; haematopoietically &#x540C;&#x6E90;&#x76D2;&#x57FA;&#x56E0;)] &#x7684;&#x516C;&#x5C4B; &#xFF08;&#x5BCC;&#x542B;&#x812F;&#x6C28;&#x9178;&#x7684; homeodomain) &#x86CB;&#x767D;&#x662F;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x53D1;&#x80B2;&#x548C;&#x8BB8;&#x591A;&#x5176;&#x5B83;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x5305;&#x62EC;&#x9020;&#x8840;&#x7684;&#x6210;&#x4EBA;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x8C03;&#x8282;&#x5668;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x3002;Co-repressor &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x7F57;&#x514B;/tle &#x53F7; &#xFF08;transducin &#x6837;&#x5242;) &#x5BB6;&#x5EAD;&#x4E5F;&#x89C4;&#x7BA1;&#x53D1;&#x5C55;&#x548C;&#x5728;&#x4E00;&#x7CFB;&#x5217;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC7;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x9020;&#x8840;&#x7684;&#x8C03;&#x8282;&#x8BB8;&#x591A; dna &#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x8868;&#x660E;&#x4EE5;&#x524D;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x662F;&#x963B;&#x904F;&#x7269;&#x7684;&#x9020;&#x8840;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x548C; Eh-1 (&#x952F;&#x9F7F;&#x540C;&#x6E90;) &#x6BCD;&#x9898;&#x672C;&#x7684;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x7684; N-&#x7AEF;&#x8F6C;&#x5F55;&#x9547;&#x538B;&#x57DF;&#x5185;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x7F57;&#x514B;/TLE &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x548C;&#x542F;&#x7528; co-repression&#x3002;&#x5728;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x516C;&#x5C4B;&#x89C4;&#x5B9A; TLE &#x86CB;&#x767D;&#x6838;&#x4FDD;&#x7559;&#x4E86;&#x5728;&#x8702;&#x7A9D;&#x5206;&#x998F;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x660E;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6291;&#x5236;&#x548C; TLE &#x86CB;&#x767D;&#x6838;&#x4FDD;&#x7559;&#x9700;&#x8981;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x8981;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; TLE &#x548C; DNA&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x662F;&#x4E00;&#x79CD;&#x8DE8;&#x663E;&#x6027;&#x8D1F;&#x516C;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x7531;&#x6263;&#x62BC;&#x5230;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x8D77;&#x4F0F;&#x57DF; TLE &#x86CB;&#x767D;&#x6291;&#x5236;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x516C;&#x5C4B;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6291;&#x5236;&#x662F;&#x4F9D;&#x8D56; TLE &#x53EF;&#x7528;&#x6027;&#xFF0C;&#x5EFA;&#x8BAE; TLE &#x7684;&#x8D77;&#x4F0F;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x7684;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6291;&#x5236;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x7740;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;/&#x5341;&#x516D;&#x8FDB;&#x5236;&#x963B;&#x904F;&#x7269;&#x86CB;&#x767D;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7F57;&#x514B;/tle &#x53F7;&#x5171;&#x6291;&#x5236;&#x5B50;&#x6838;&#x7684;&#x4FDD;&#x7559;&#x3002;

The PRH (proline-rich homeodomain) [also known as Hex (haematopoietically expressed homeobox)] protein is a transcription factor that functions as an important regulator of vertebrate development and many other processes in the adult including haematopoiesis. The Groucho/TLE (transducin-like enhancer) family of co-repressor proteins also regulate development and modulate the activity of many DNA-binding transcription factors during a range of diverse cellular processes including haematopoiesis. We have shown previously that PRH is a repressor of transcription in haematopoietic cells and that an Eh-1 (Engrailed homology) motif present within the N-terminal transcription repression domain of PRH mediates binding to Groucho/TLE proteins and enables co-repression. In the present study we demonstrate that PRH regulates the nuclear retention of TLE proteins during cellular fractionation. We show that transcriptional repression and the nuclear retention of TLE proteins requires PRH to bind to both TLE and DNA. In addition, we characterize a trans-dominant-negative PRH protein that inhibits wild-type PRH activity by sequestering TLE proteins to specific subnuclear domains. These results demonstrate that transcriptional repression by PRH is dependent on TLE availability and suggest that subnuclear localization of TLE plays an important role in transcriptional repression by PRH.

The PRH/Hex repressor protein causes nuclear retention of Groucho/TLE co-repressors.

Le PRH (riche en proline hom&#xE9;odomaine) [&#xE9;galement connue sous le nom Hex (haematopoietically exprim&#xE9; hom&#xE9;obo&#xEE;te)] prot&#xE9;ine est un facteur de transcription qui fonctionne comme un r&#xE9;gulateur important du d&#xE9;veloppement des vert&#xE9;br&#xE9;s et de nombreux autres processus chez l&#x26;#39;adulte, y compris l&#x26;#39;h&#xE9;matopo&#xEF;&#xE8;se. La famille Groucho / TLE (transducine-comme activateur) de la co-r&#xE9;presseurs prot&#xE9;ines r&#xE9;gulent &#xE9;galement le d&#xE9;veloppement et de moduler l&#x26;#39;activit&#xE9; de nombreux facteurs de transcription liant l&#x26;#39;ADN au cours d&#x26;#39;une gamme de divers processus cellulaires, y compris l&#x26;#39;h&#xE9;matopo&#xEF;&#xE8;se. Nous avons montr&#xE9; pr&#xE9;c&#xE9;demment que PRH est un r&#xE9;presseur de la transcription dans les cellules h&#xE9;matopo&#xEF;&#xE9;tiques et que la pr&#xE9;sence d&#x26;#39;un motif Eh-1 (homologie Engrailed) dans le domaine N-terminal de transcription de la r&#xE9;pression de m&#xE9;diateur PRH contraignantes pour Groucho / TLE prot&#xE9;ines et permet la co-r&#xE9;pression. Dans la pr&#xE9;sente &#xE9;tude, nous d&#xE9;montrons que PRH r&#xE9;gule la r&#xE9;tention nucl&#xE9;aire des prot&#xE9;ines au cours du fractionnement cellulaire TLE. Nous montrons que la r&#xE9;pression de la transcription et la r&#xE9;tention nucl&#xE9;aire des prot&#xE9;ines TLE exige PRH de se lier &#xE0; la fois TLE et l&#x26;#39;ADN. En outre, nous caract&#xE9;risons une prot&#xE9;ine PRH trans-dominant n&#xE9;gatif qui inhibe l&#x26;#39;activit&#xE9; PRH de type sauvage par les prot&#xE9;ines TLE s&#xE9;questrants &#xE0; des domaines sp&#xE9;cifiques subnucl&#xE9;aires. Ces r&#xE9;sultats d&#xE9;montrent que la r&#xE9;pression de la transcription par PRH d&#xE9;pend de la disponibilit&#xE9; TLE et sugg&#xE8;rent que la localisation de la TLE subnucl&#xE9;aire joue un r&#xF4;le important dans la r&#xE9;pression transcriptionnelle par PRH.

La prot&#xE9;ine PRH / Hex Repressor provoque une r&#xE9;tention nucl&#xE9;aire de Groucho / TLE co-r&#xE9;presseurs

Die PRH (Prolin-reiche Hom&ouml;odom&auml;ne) [auch bekannt als Hex (Haematopoietically ausgedr&uuml;ckt Homeobox)] Protein ist ein Transkriptionsfaktor, der als ein wichtiger Regulator der vertebrate Entwicklung und viele andere Prozesse in den Erwachsenen, einschlie&szlig;lich H&auml;matopoese fungiert. Die Groucho/TLE (transducin-wie E621)-Familie von Co-repressor Proteinen auch Entwicklung zu regulieren und modulieren die Aktivit&auml;t von vielen DNA-bindenen Transkriptionsfaktoren in einem Datumsbereich vielf&auml;ltige zellul&auml;re Prozesse, einschlie&szlig;lich der Blutbildung. Wir haben bereits gezeigt, dass PRH ein Verdr&auml;nger der Transkription in h&auml;matopoetischen Zellen und ein Eh-1 (Engrailed Homologie) Motiv in der N-terminalen Transkription Repression Dom&auml;ne von PRH Bindung an Groucho/TLE Proteine vermittelt und Co-repression erm&ouml;glicht. In der vorliegenden Studie zeigen wir, dass PRH die nukleare Vorratsspeicherung von TLE Proteine w&auml;hrend zellulare Fraktionierung regelt. Wir zeigen, dass transkriptionelle Repression und der Kernenergie Speicherung TLE Proteine erfordert PRH TLE und DNA zu binden. Dar&uuml;ber hinaus zeichnen wir ein Trans-Dominant-negativ-PRH-Protein, das Wildtyp PRH Aktivit&auml;t hemmt durch Sequestrierung TLE-Proteine auf bestimmte Elementarpartikel Dom&auml;nen. Diese Ergebnisse zeigen, dass transkriptionelle Unterdr&uuml;ckung von PRH TLE Verf&uuml;gbarkeit abh&auml;ngig und schlagen vor, da&szlig; Elementarpartikel Lokalisierung von TLE spielt eine wichtige Rolle in transcriptional Repression von PRH.

Das PRH/Hex-Repressor-Protein bewirkt, dass nukleare Aufbewahrung von Groucho/TLE Co-repressors.

PRH (ricco di prolina homeodomain) [anche conosciuto come Hex (haematopoietically espresso homeobox)] la proteina &egrave; un fattore di trascrizione che funziona come un regolatore importante di sviluppo vertebrato e molti altri processi nell&#39;adulto compreso emopoiesi. La famiglia di Groucho/TLE (transducina-come potenziatore) delle proteine co-repressor anche regola lo sviluppo e modula l&#39;attivit&agrave; di molti fattori della trascrizione del DNA-binding durante un intervallo di diversi processi cellulari, tra cui emopoiesi. Abbiamo dimostrato in precedenza che PRH &egrave; un repressore della trascrizione in cellule ematopoietiche e che un motivo di Eh-1 (Engrailed omologia) presente all&#39;interno del dominio N-terminale trascrizione repressione del PRH da intermediario associazione a proteine Groucho/TLE e consente di co-repression. In questo studio dimostriamo che PRH regola la ritenzione nucleare delle proteine TLE durante il frazionamento cellulare. Mostriamo che la repressione trascrizionale e la conservazione delle proteine TLE nucleare richiede PRH di legarsi al DNA e TLE. Inoltre, noi caratterizzare una proteina PRH trans-dominante-negativo che inibisce l&#39;attivit&agrave; di selvaggio-tipo PRH sequestrando proteine TLE a domini specifici subnucleari. Questi risultati dimostrano che la repressione trascrizionale di PRH dipende dalla disponibilit&agrave; TLE e indicano che subnucleare localizzazione di TLE svolge un ruolo importante nella repressione trascrizionale di PRH.

La proteina repressore PRH/Hex provoca ritenzione nucleare di co-repressors Groucho/TLE.

PRH&#x306F;&#x3001;&#xFF08;&#x30D7;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C1;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#xFF09;&#x3082;16&#x9032;&#x6570;&#xFF08;haematopoietically&#x8868;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30DC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#xFF09;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x308B;]&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x767A;&#x751F;&#x3068;&#x9020;&#x8840;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x6210;&#x4EBA;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x4ED6;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3059;&#x308B;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x30B3;&#x30EA;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30C1;&#x30E7;/ TLE&#xFF08;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C7;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30A8;&#x30F3;&#x30CF;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#xFF09;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x306F;&#x3001;&#x958B;&#x767A;&#x3092;&#x8ABF;&#x6574;&#x3057;&#x3001;&#x9020;&#x8840;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x591A;&#x69D8;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x7BC4;&#x56F2;&#x5185;&#x306B;&#x591A;&#x304F;&#x306E;DNA&#x7D50;&#x5408;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;PRH&#x306F;&#x9020;&#x8840;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x8EE2;&#x5199;&#x306E;&#x30EA;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC;&#x3068;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30C1;&#x30E7;/ TLE&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x3001;&#x5171;&#x540C;&#x5F3E;&#x5727;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3059;&#x308B;PRH&#x4EF2;&#x4ECB;&#x306E;N&#x672B;&#x7AEF;&#x8EE2;&#x5199;&#x200B;&#x200B;&#x6291;&#x5236;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x5185;&#x306E;EH-1&#xFF08;&#x7E01;&#x3092;&#x30AE;&#x30B6;&#x30AE;&#x30B6;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x76F8;&#x540C;&#x6027;&#xFF09;&#x3092;&#x30E2;&#x30C1;&#x30FC;&#x30D5;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;PRH&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x753B;&#x4E2D;&#x306E;TLE&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x6838;&#x4FDD;&#x6301;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x8EE2;&#x5199;&#x6291;&#x5236;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3001;TLE&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x6838;&#x4FDD;&#x6301;&#x306F;&#x3001;TLE&#x3068;DNA&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;PRH&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x6838;&#x5185;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3078;&#x306E;&#x91D1;&#x5C5E;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x5C01;&#x9396;TLE&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;PRH&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C9;&#x30DF;&#x30CA;&#x30F3;&#x30C8;&#x30CD;&#x30AC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;PRH&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;PRH&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x8EE2;&#x5199;&#x6291;&#x5236;&#x306F;&#x3001;TLE&#x53EF;&#x7528;&#x6027;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x3001;TLE&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x6838;&#x5185;&#x5C40;&#x5728;&#x304C;PRH&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x8EE2;&#x5199;&#x6291;&#x5236;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

PRH /&#x516D;&#x89D2;&#x30EA;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30C1;&#x30E7;/ TLE&#x30B3;&#x30EA;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC;&#x306E;&#x6838;&#x4FDD;&#x6301;&#x306E;&#x539F;&#x56E0;

[16 &#xC9C4;&#xC218; (haematopoietically &#xD45C;&#xD604; homeobox) &#xB77C;&#xACE0;&#xB3C4; &#xD568;] PRH (&#xD504;&#xB864;&#xB9B0; &#xBD80;&#xC720;&#xD55C; homeodomain) &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xCC99;&#xCD94; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xBC0F; haematopoiesis&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD55C; &#xC131;&#xC778;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xB2E4;&#xB978; &#xB9CE;&#xC740; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;&#xB85C; &#xAE30;&#xB2A5; &#xD558;&#xB294; &#xC804;&#xC0AC; &#xC694;&#xC18C; &#xC774;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C; co-repressor &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xADF8;&#xB8E8;&#xCD08;/TLE (transducin &#xAC19;&#xC740; &#xC99D;&#xAC15;) &#xC81C;&#xD488;&#xAD70; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xADDC;&#xC81C; &#xD558; &#xACE0; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; haematopoiesis&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; &#xB3D9;&#xC548; &#xB9CE;&#xC740; DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB179;&#xC74C; &#xBC29;&#xC1A1; &#xC694;&#xC778;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC870;&#xC808;. PRH&#xC740; haematopoietic &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC804;&#xC0AC;&#xC758; &#xC9C4;&#xC555; &#xD558; &#xACE0; PRH&#xC758; N &#xB2E8;&#xC790; &#xC804;&#xC0AC; &#xC5B5;&#xC555; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xB0B4;&#xC758; Eh-1 (Engrailed homology) &#xBAA8;&#xD2F0;&#xBE0C;&#xB294; &#xADF8;&#xB8E8;&#xCD08;/TLE &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC911;&#xC7AC; &#xBC0F; co-repression&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xBA74; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC8FC;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD604;&#xC7AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; PRH &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xBCC4; &#xBC95; &#xC911; TLE &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD575; &#xBCF4;&#xC720;&#xB97C; &#xADDC;&#xC81C; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; transcriptional &#xC5B5;&#xC555;&#xACFC; TLE &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD575; &#xBCF4;&#xC720; PRH TLE &#xBC0F; DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD560; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; TLE &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD2B9;&#xC815; subnuclear &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC744; &#xACA9;&#xB9AC; &#xD558; &#xC5EC; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; PRH &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xD2B8;&#xB79C;&#xC2A4; &#xC9C0;&#xBC30; &#xC74C;&#xC218;&#xAC00; PRH &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD2B9;&#xC9D5;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC785;&#xC99D; PRH&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; transcriptional &#xC5B5;&#xC555; TLE &#xAC00;&#xC6A9;&#xC131;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2EC;&#xB77C; &#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4; TLE &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xD30C;&#xC77C;&#xC774; subnuclear PRH&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; transcriptional &#xC5B5;&#xC555;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

PRH/16 &#xC9C4;&#xC218; &#xC9C4;&#xC555; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xADF8;&#xB8E8;&#xCD08;/TLE co-repressors&#xC758; &#xD575; &#xBCF4;&#xC720; &#xD558;&#xBA74;.

El PRH (rico en prolina homeodominio) [tambi&#xE9;n conocido como Hexagonal (haematopoietically expres&#xF3; homeobox)] prote&#xED;na es un factor de transcripci&#xF3;n que funciona como un regulador importante del desarrollo de los vertebrados y muchos otros procesos en el adulto incluyendo la hematopoyesis. La familia Groucho / TLE (transducina-como potenciador) de co-represor prote&#xED;nas tambi&#xE9;n regulan el desarrollo y modulan la actividad de muchos factores de transcripci&#xF3;n de uni&#xF3;n al ADN en una gama de diversos procesos celulares, incluyendo la hematopoyesis. Hemos demostrado previamente que PRH es un represor de la transcripci&#xF3;n en las c&#xE9;lulas hematopoy&#xE9;ticas y que un motivo presente Eh-1 (homolog&#xED;a Engrailed) dentro del dominio N-terminal de la transcripci&#xF3;n represi&#xF3;n de media PRH uni&#xF3;n a Groucho / TLE prote&#xED;nas y permite la co-represi&#xF3;n. En el presente estudio hemos demostrado que la PRH regula la retenci&#xF3;n nuclear de prote&#xED;nas TLE durante el fraccionamiento celular. Se demuestra que la represi&#xF3;n de la transcripci&#xF3;n y la retenci&#xF3;n nuclear de prote&#xED;nas ELT requiere PRH que se unen a los dos ELT y el ADN. Adem&#xE1;s, podemos caracterizar una prote&#xED;na trans-PRH dominante negativo que inhibe la actividad de tipo salvaje PRH por prote&#xED;nas TLE secuestro de dominios espec&#xED;ficos de subnuclear. Estos resultados demuestran que la represi&#xF3;n transcripcional por PRH depende de la disponibilidad TLE y sugieren que la localizaci&#xF3;n subnuclear de TLE juega un papel importante en la represi&#xF3;n transcripcional por PRH.

La prote&#xED;na represora PRH / Hex Causa retenci&#xF3;n nuclear de Groucho / TLE co-represores

&#x8BB8;&#x591A;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x6539;&#x53D8; DNA &#x6216;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x7ED3;&#x6784;&#x3002;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x5F80;&#x5F80;&#x5E26;&#x6765;&#x7684;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x3001; &#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x4FEE;&#x9970;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6216;&#x5176;&#x4ED6;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6210;&#x866B;&#x6216; co-repressor &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x62DB;&#x8058;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x4E00;&#x4E9B;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x5F62;&#x6210;&#x5BE1;&#x805A;&#x81EA;&#x5DF1;&#x8BF1;&#x4F7F; DNA &#x6784;&#x8C61;&#x548C;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x7ED3;&#x6784;&#x53D8;&#x5316;&#x7684;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x96C6;&#x3002;&#x5BCC;&#x542B;&#x812F;&#x6C28;&#x9178;&#x7684; homeodomain (&#x516C;/&#x5341;&#x516D;&#x8FDB;&#x5236;) &#x86CB;&#x767D;&#x662F;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF0C;&#x8C03;&#x8282;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x548C;&#x589E;&#x6B96;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5728;&#x80DA;&#x80CE;&#x53D1;&#x80B2;&#x4E2D;&#x5177;&#x6709;&#x591A;&#x4E2A;&#x89D2;&#x8272;&#x3002;&#x65E9;&#x4E9B;&#x65F6;&#x5019;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x660E;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7531;&#x591A;&#x4E2A;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC; co-repressor &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5C5E;&#x4E8E;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D; TLE &#x5BB6;&#x5EAD;&#x62DB;&#x52DF;&#x538B;&#x5236;&#x8F6C;&#x5F55;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F53;&#x5185;&#x4EA4;&#x8054;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x516C;&#x5C4B;&#x5F62;&#x6210;&#x5BE1;&#x805A;&#x7269;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E0E;&#x591A;&#x79CD;&#x751F;&#x7269;&#x7269;&#x7406;&#x6280;&#x672F;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5F62;&#x6210; octamers&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C1A;&#x672A;&#x6709;&#x5C0F;&#x77E5;&#x8BC6;&#x7684;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x4F4E;&#x805A;&#x53CD;&#x5E94;&#x8C03;&#x63A7;&#x7684;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x6D3B;&#x6027;&#x6216;&#x76F4;&#x63A5;&#x53D7;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x7684;&#x5BA3;&#x4F20;&#x5458;&#x7684;&#x4F53;&#x7CFB;&#x7ED3;&#x6784;&#x6240;&#x8D77;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6BD4;&#x8F83;&#x7684;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x7684;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x548C;&#x5B64;&#x7ACB;&#x7684;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B; homeodomain dna &#x7247;&#x6BB5;&#x4E0E;&#x4F7F;&#x7528;&#x51DD;&#x80F6;&#x8FDF;&#x7F13;&#x68C0;&#x6D4B;&#x548C;&#x6838;&#x7CD6;&#x6838;&#x9178;&#x7684;&#x5355;&#x4E2A;&#x548C;&#x591A;&#x4E2A;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x7F51;&#x7AD9;&#x6211;&#x548C;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x8DB3;&#x8FF9;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x7684;&#x4F4E;&#x805A;&#x7269;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x591A;&#x4E2A;&#x7AD9;&#x70B9;&#x5185;&#x9AD8;&#x4EB2;&#x548C;&#x529B;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B; Goosecoid &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x548C;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x7684;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5E26;&#x6765; DNA &#x5931;&#x771F;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x516C;&#x5C4B; octamers &#x73AF;&#x7ED5; DNA&#xFF0C;&#x4F7F;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6291;&#x5236;&#x3002;

DNA &#x73AF;&#x7ED5;&#x548C;&#x5BE1;&#x805A; homeodomain &#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x5931;&#x771F;&#x3002;

Many transcription factors alter DNA or chromatin structure. Changes in chromatin structure are often brought about by the recruitment of chromatin-binding proteins, chromatin-modifying proteins, or other transcription co-activator or co-repressor proteins. However, some transcription factors form oligomeric assemblies that may themselves induce changes in DNA conformation and chromatin structure. The proline-rich homeodomain (PRH/Hex) protein is a transcription factor that regulates cell differentiation and cell proliferation, and has multiple roles in embryonic development. Earlier, we showed that PRH can repress transcription by multiple mechanisms, including the recruitment of co-repressor proteins belonging to the TLE family of chromatin-binding proteins. Our in vivo crosslinking studies have shown that PRH forms oligomeric complexes in cells and a variety of biophysical techniques suggest that the protein forms octamers. However, as yet we have little knowledge of the role played by PRH oligomerisation in the regulation of promoter activity or of the architecture of promoters that are regulated directly by PRH in cells. Here, we compare the binding of PRH and the isolated PRH homeodomain to DNA fragments with single and multiple PRH sites, using gel retardation assays and DNase I and chemical footprinting. We show that the PRH oligomer binds to multiple sites within the human Goosecoid promoter with high affinity and that the binding of PRH brings about DNA distortion. We suggest that PRH octamers wrap DNA in order to bring about transcriptional repression.

DNA wrapping and distortion by an oligomeric homeodomain protein.

De nombreux facteurs de transcription modifient l&#x26;#39;ADN ou de structure de la chromatine. Changements dans la structure chromatine sont souvent caus&#xE9;s par le recrutement de la chromatine des prot&#xE9;ines de liaison, la chromatine modificateurs de prot&#xE9;ines, ou la transcription d&#x26;#39;autres co-activateurs ou co-r&#xE9;presseurs des prot&#xE9;ines. Cependant, certains facteurs de transcription former des ensembles oligom&#xE8;res qui peuvent eux-m&#xEA;mes induisent des changements de conformation de l&#x26;#39;ADN et structure de la chromatine. La riche en proline hom&#xE9;odomaine (PRH / Hex) prot&#xE9;ine est un facteur de transcription qui r&#xE9;gule la diff&#xE9;renciation cellulaire et la prolif&#xE9;ration cellulaire, et a de multiples r&#xF4;les dans le d&#xE9;veloppement embryonnaire. Plus t&#xF4;t, nous avons montr&#xE9; que PRH peut r&#xE9;primer la transcription par des m&#xE9;canismes multiples, y compris le recrutement de co-r&#xE9;presseurs des prot&#xE9;ines appartenant &#xE0; la famille TLE de la chromatine des prot&#xE9;ines de liaison. Notre &#xE9;tudes in vivo ont montr&#xE9; que de r&#xE9;ticulation des formes complexes oligom&#xE9;riques PRH dans les cellules et une vari&#xE9;t&#xE9; de techniques biophysiques sugg&#xE8;rent que la prot&#xE9;ine forme octam&#xE8;res. Cependant, encore que nous avons peu de connaissances sur le r&#xF4;le jou&#xE9; par oligom&#xE9;risation PRH dans la r&#xE9;gulation de l&#x26;#39;activit&#xE9; du promoteur ou de l&#x26;#39;architecture de promoteurs qui sont r&#xE9;glement&#xE9;s directement par PRH dans les cellules. Ici, nous comparons la liaison de PRH et le PRH isol&#xE9; hom&#xE9;odomaine de fragments d&#x26;#39;ADN avec des sites PRH uniques et multiples, en utilisant des tests de retard sur gel et DNase I et l&#x26;#39;empreinte chimique. Nous montrons que l&#x26;#39;oligom&#xE8;re PRH se lie &#xE0; des sites multiples dans le promoteur humain Goosecoid avec une haute affinit&#xE9; et que la liaison de PRH entra&#xEE;ne une distorsion d&#x26;#39;ADN. Nous sugg&#xE9;rons que l&#x26;#39;ADN PRH enveloppement octam&#xE8;res afin de mettre sur la r&#xE9;pression de la transcription.

Emballage d&#x26;#39;ADN et de la distorsion par une prot&#xE9;ine &#xE0; hom&#xE9;odomaine oligom&#xE9;rique

Viele Transkriptionsfaktoren ver&auml;ndern DNA oder Chromatin-Struktur. &Auml;nderungen in der Chromatin Struktur sind oft durch die Einstellung von Chromatin-bindenen Proteine, &Auml;ndern von Chromatin Proteine oder andere Transkription Coaktivator oder Co-repressor Proteine gebracht. Jedoch bilden einige Transkriptionsfaktoren Oligomere Assemblys, die sich Ver&auml;nderungen der Konformation der DNA und Chromatin-Struktur f&uuml;hren k&ouml;nnen. Das Prolin-reiche Hom&ouml;odom&auml;ne (PRH/Hex)-Protein ist ein Transkriptionsfaktor, der regelt, Zelldifferenzierung und Zellproliferation und hat mehrere Rollen in der embryonalen Entwicklung. Fr&uuml;her haben wir gezeigt, dass PRH Transkription durch mehrere Mechanismen, einschlie&szlig;lich der Einstellung von Co-repressor Proteinen geh&ouml;ren die TLE-Familie der Chromatin-bindenen Proteine unterdr&uuml;cken kann. Unsere Vernetzung in-vivo-Studien haben gezeigt, dass PRH Oligomere komplexen in Zellen bildet und eine Vielzahl von biophysikalischen Techniken schlagen vor, da&szlig; das Protein Octamers bildet. Wir haben jedoch noch wenig Wissen &uuml;ber die Rolle von PRH Oligomerisierung in der Verordnung der Promotor-Aktivit&auml;t oder der Architektur der Promotoren, die direkt von PRH in Zellen reguliert werden. Hier vergleichen wir die Bindung von PRH und die isolierten PRH-Hom&ouml;odom&auml;ne DNA-Fragmente mit einzelnen und mehreren PRH-Websites, die mit Gel Retardierung Assays und DNase I und chemischen Fu&szlig;abdruck. Wir zeigen, dass die PRH-Oligomer an mehreren Standorten innerhalb der menschlichen Goosecoid Projekttr&auml;ger mit hoher Affinit&auml;t bindet und die Bindung von PRH von DNA Verzerrung mit sich bringen. Wir schlagen vor, da&szlig; PRH Octamers DNA wickeln um transcriptional Repression herbeizuf&uuml;hren.

DNA umh&uuml;llen und Verzerrung durch eine Oligomere Hom&ouml;odom&auml;ne-Protein.

Molti fattori di trascrizione alterano la struttura del DNA o della cromatina. Cambiamenti nella struttura della cromatina sono spesso provocate dall&#39;assunzione di cromatina-binding proteins, proteine della cromatina-modificando o altre proteine di trascrizione coattivatore o co-repressor. Tuttavia, alcuni fattori di trascrizione formano oligomerica assembly che essi stessi possono indurre cambiamenti nella conformazione del DNA e della struttura della cromatina. La proteina homeodomain ricco di prolina (PRH/Hex) &egrave; un fattore di trascrizione che regola la differenziazione cellulare e la proliferazione cellulare e ha pi&ugrave; ruoli nello sviluppo embrionale. In precedenza, vi abbiamo mostrato che PRH pu&ograve; reprimere la trascrizione da meccanismi multipli, tra cui l&#39;assunzione di proteine co-repressor appartenente alla famiglia TLE della cromatina-binding proteins. I nostri studi di reticolazione in vivo hanno dimostrato che PRH forma oligomerica complessi nelle cellule e una variet&agrave; di tecniche biofisiche suggeriscono che la proteina forme octamers. Tuttavia, abbiamo ancora poca conoscenza del ruolo svolto da oligomerizzazione PRH nella regolazione dell&#39;attivit&agrave; di promotore o dell&#39;architettura dei promotori che sono regolati direttamente da PRH nelle cellule. Qui, si confronta l&#39;associazione di PRH e l&#39;omeodominio PRH isolato al DNA frammenti con siti PRH singole e multiple, utilizzando gel ritardo dosaggi e dnasi I e chimica dell&#39;impronta. Dimostriamo che l&#39;oligomero PRH associa a pi&ugrave; siti all&#39;interno del promotore Goosecoid umano con alta affinit&agrave; e che l&#39;associazione di PRH porta sulla distorsione del DNA. Suggeriamo che PRH octamers avvolgere del DNA al fine di portare transcriptional repressione.

Avvolgimento del DNA e la distorsione di una proteina oligomerica omeodominio.

&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;DNA&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x69CB;&#x9020;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x3070;&#x3057;&#x3070;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D50;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3001;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x4FEE;&#x98FE;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x4ED6;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x30B3;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3084;&#x30B3;&#x30EA;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x63A1;&#x7528;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x81EA;&#x4F53;&#x304C;DNA&#x306E;&#x7ACB;&#x4F53;&#x69CB;&#x9020;&#x3068;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x30D7;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C1;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#xFF08;PRH /&#x5341;&#x516D;&#x9032;&#x6CD5;&#xFF09;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x3084;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x3001;&#x80DA;&#x767A;&#x751F;&#x3067;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;PRH&#x306F;&#x3001;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D50;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;TLE&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306B;&#x5C5E;&#x3059;&#x308B;&#x5171;&#x30EA;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x88DC;&#x5145;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x8EE2;&#x5199;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;in vivo&#x3067;&#x67B6;&#x6A4B;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;PRH&#x5F62;&#x614B;&#x306F;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x3067;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3068;&#x751F;&#x7269;&#x7269;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x624B;&#x6CD5;&#x306E;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x304C;&#x516B;&#x91CF;&#x4F53;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x307E;&#x3060;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x304B;&#x3001;&#x76F4;&#x63A5;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;PRH&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x30A2;&#x30FC;&#x30AD;&#x30C6;&#x30AF;&#x30C1;&#x30E3;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;PRH&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x5316;&#x304C;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x5F79;&#x5272;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x306E;&#x77E5;&#x8B58;&#x306F;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30B2;&#x30EB;&#x9045;&#x5EF6;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3068;DNase I&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5316;&#x5B66;&#x30D5;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x5358;&#x4E00;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x8907;&#x6570;&#x306E;PRH&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3068;DNA&#x65AD;&#x7247;&#x306B;PRH&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x3068;&#x5206;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x305F;PRH&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;PRH&#x306E;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x9AD8;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x30D2;&#x30C8;Goosecoid&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x5185;&#x304A;&#x3088;&#x3073;PRH&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x306F;&#x3001;DNA&#x306E;&#x6B6A;&#x307F;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3057;&#x3001;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x8EE2;&#x5199;&#x6291;&#x5236;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3059;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x305D;&#x306E;PRH&#x516B;&#x91CF;&#x4F53;&#x30E9;&#x30C3;&#x30D7;DNA&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306B;&#x3088;&#x308B;DNA&#x306E;&#x6298;&#x308A;&#x8FD4;&#x200B;&#x200B;&#x3057;&#x3068;&#x6B6A;&#x307F;

&#xB9CE;&#xC740; &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790;&#xB294; DNA &#xB610;&#xB294; chromatin &#xAD6C;&#xC870; &#xBCC0;&#xACBD;. Chromatin &#xAD6C;&#xC870; &#xBCC0;&#xD654;&#xB294; &#xC885;&#xC885; chromatin &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;, &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; chromatin &#xC218;&#xC815; &#xB610;&#xB294; &#xB2E4;&#xB978; &#xB179;&#xC74C; &#xBC29;&#xC1A1; &#xB610;&#xB294; co-repressor &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xCC44;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCD08;&#xB798; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC77C;&#xBD80; &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790; &#xC2A4;&#xC2A4;&#xB85C; DNA &#xB098; &#xB780; &#xD558; &#xACE0; chromatin &#xAD6C;&#xC870;&#xC5D0; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xC77C;&#xC73C;&#xD0AC; &#xC218; &#xC788;&#xB294; oligomeric &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC;&#xB97C; &#xD615;&#xC131; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD504;&#xB864;&#xB9B0; &#xBD80;&#xC720;&#xD55C; homeodomain (PRH/16 &#xC9C4;&#xC218;) &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC740; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xD654;&#xC640; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD558; &#xACE0; &#xBC30;&#xC544; &#xBC1C;&#xB2EC;&#xC5D0; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC5ED;&#xD560; &#xC804;&#xC0AC; &#xC694;&#xC18C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC804;&#xC5D0;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; PRH chromatin &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; TLE &#xC81C;&#xD488;&#xAD70;&#xC5D0; &#xC18D;&#xD558;&#xB294; co-repressor &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC2E0;&#xADDC; &#xBAA8;&#xC9D1;&#xC744; &#xBE44;&#xB86F; &#xD55C; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC804;&#xC0AC; &#xC8FC;&#xCCB4; &#xD560; &#xC218; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;. PRH &#xC140; oligomeric &#xBCF5;&#xD569;&#xBB3C;&#xC744; &#xD615;&#xC131; &#xD558; &#xACE0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD615;&#xC131; octamers&#xB97C; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xB9AC; &#xAE30;&#xC220; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC00;&#xAD50; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC544;&#xC9C1; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xB610;&#xB294; &#xC140;&#xC5D0; PRH&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC9C1;&#xC811; &#xADDC;&#xC81C;&#xB294; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC758; &#xC544;&#xD0A4;&#xD14D;&#xCC98;&#xC758; &#xADDC;&#xCE59;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; PRH oligomerisation&#xAC00; &#xC5F0;&#xAE30;&#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC758; &#xC57D;&#xAC04;&#xC758; &#xC9C0;&#xC2DD;&#xC744;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; PRH&#xC758; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xBE44;&#xAD50; &#xD558; &#xACE0; &#xB098; &#xD558; &#xACE0; &#xD654;&#xD559; &#xD504;&#xB9B0;&#xD305; DNA &#xACE0;&#xB9BD; &#xB41C; PRH homeodomain &#xC824; &#xC9C0;&#xCCB4; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xBC0F; Dnase&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB2E8;&#xC77C; &#xBC0F; &#xB2E4;&#xC911; PRH &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC640; &#xC870;&#xAC01;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; PRH &#xC62C;&#xB9AC;&#xACE0; &#xB192;&#xC740; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4;&#xC640; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; Goosecoid &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xB0B4;&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xACE0; PRH &#xBC14;&#xC778;&#xB529; DNA &#xC65C;&#xACE1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC81C;&#xACF5;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. PRH octamers transcriptional &#xC5B5;&#xC555;&#xC744; &#xCD08;&#xB798; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD558;&#xC5EC; DNA&#xB97C; &#xD3EC;&#xC7A5; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

DNA &#xD3EC;&#xC7A5;&#xACFC; oligomeric homeodomain &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC65C;&#xACE1;.

Muchos factores de transcripci&#xF3;n alterar el ADN o la estructura de la cromatina. Los cambios en la estructura de la cromatina a menudo provocada por el reclutamiento de prote&#xED;nas de uni&#xF3;n a la cromatina, la cromatina modificaci&#xF3;n de prote&#xED;nas, o de transcripci&#xF3;n otro co-activador o prote&#xED;nas co-represor. Sin embargo, algunos factores de transcripci&#xF3;n formar conjuntos oligom&#xE9;ricos que pueden ellos mismos inducen cambios en la conformaci&#xF3;n del ADN y la estructura de la cromatina. El rico en prolina homeodominio (PRH / Hex) la prote&#xED;na es un factor de transcripci&#xF3;n que regula la diferenciaci&#xF3;n celular y la proliferaci&#xF3;n celular, y tiene m&#xFA;ltiples funciones en el desarrollo embrionario. Anteriormente, hemos demostrado que PRH puede reprimir la transcripci&#xF3;n por m&#xFA;ltiples mecanismos, incluyendo la contrataci&#xF3;n de co-represor prote&#xED;nas que pertenecen a la familia de la cromatina-ELT prote&#xED;nas de uni&#xF3;n. Nuestra estudios in vivo de reticulaci&#xF3;n han demostrado que las formas PRH complejos oligom&#xE9;ricos en las c&#xE9;lulas y una variedad de t&#xE9;cnicas biof&#xED;sicas sugieren que la prote&#xED;na forma oct&#xE1;meros. Sin embargo, a&#xFA;n tenemos poco conocimiento del papel desempe&#xF1;ado por oligomerizaci&#xF3;n PRH en la regulaci&#xF3;n de la actividad del promotor o de la arquitectura de los promotores que est&#xE1;n regulados directamente por el PRH en las c&#xE9;lulas. En este caso, se compara la uni&#xF3;n de PRH y el PRH aislado homeodominio de fragmentos de ADN con sitios de PRH &#xFA;nicas y m&#xFA;ltiples, utilizando los ensayos de retardo en gel y DNasa I y huella qu&#xED;mica. Se demuestra que el olig&#xF3;mero PRH se une a varios sitios dentro del promotor humano Goosecoid con alta afinidad y que la uni&#xF3;n de PRH produce distorsi&#xF3;n de ADN. Le sugerimos que PRH ADN envoltura octamers con el fin de llevar a cabo la represi&#xF3;n de la transcripci&#xF3;n.

El envasado y el ADN de distorsi&#xF3;n por una prote&#xED;na oligom&#xE9;rica Homeodominio

&#x5BCC;&#x542B;&#x812F;&#x6C28;&#x9178;&#x7684; homeodomain &#x86CB;&#x767D; (&#x516C;/&#x5341;&#x516D;&#x8FDB;&#x5236;) &#x8C03;&#x8282;&#x8F6C;&#x5F55;&#x901A;&#x8FC7;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684; DNA &#x5E8F;&#x5217;&#xFF0C;&#x5E76;&#x89C4;&#x5B9A;&#x901A;&#x8FC7;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x8D77;&#x59CB;&#x56E0;&#x5B50; eIF4E mRNA &#x8FD0;&#x8F93;&#x3002;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; CK2 &#x5728;&#x8C03;&#x8282;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x4E2D;&#x626E;&#x6F14;&#x591A;&#x4E2A;&#x89D2;&#x8272;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x516C;&#x4EA4;&#x4E92; &beta; &#x4E9A;&#x57FA; CK2 &#x4F53;&#x5916;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C; CK2 phosphorylates &#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x3002;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x7684;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x7684; CK2 &#x6291;&#x5236; DNA &#x7ED3;&#x5408;&#x7684;&#x8FD9;&#x79CD;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#x548C;&#x8131;&#x6C2E;&#x9664;&#x78F7;&#x8FD8;&#x539F; DNA &#x5177;&#x6709;&#x7EA6;&#x675F;&#x529B;&#xFF0C;&#x8BE5;&#x503C;&#x6307;&#x793A;&#x6B64;&#x4FEE;&#x6539;&#x5145;&#x5F53;&#x4E00;&#x4E2A;&#x53EF;&#x9006;&#x5F00;&#x5173;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; homeodomain &#x7684;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x662F;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x963B;&#x6B62; DNA &#x7ED1;&#x5B9A;&#x548C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC6;&#x522B;&#x5185;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x90FD;&#x7531; CK2 &#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x7684;&#x57DF;&#xFF1A; S163 &#x548C; S177&#x3002;&#x5B9A;&#x70B9;&#x7A81;&#x53D8;&#x6F14;&#x793A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6B8B;&#x7559;&#x5BF9;&#x8C37;&#x6C28;&#x9178;&#x4E4B;&#x4E00;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x90E8;&#x5206;&#x6A21;&#x4EFF;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x5B8C;&#x5168;&#x963B;&#x6B62; DNA &#x7ED1;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x800C; S163E/S177E &#x53CC;&#x7A81;&#x53D8;&#x4E25;&#x91CD;&#x6291;&#x5236; DNA &#x7ED1;&#x5B9A;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;S163E &#x548C; S177E &#x57FA;&#x56E0;&#x7A81;&#x53D8;&#x548C; S163E/S177E &#x53CC;&#x7A81;&#x53D8;&#x6291;&#x5236;&#x8C03;&#x8282;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8F6C;&#x5F55;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x7531;&#x4E8E;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x5B88;&#x6052;&#x8BB8;&#x591A; homeodomain &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4E4B;&#x95F4;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x5EFA;&#x8BAE; CK2 &#x53EF;&#x89C4;&#x7BA1;&#x4EE5;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B9;&#x5F0F;&#x7684;&#x51E0;&#x4E2A; homeodomain &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;

CK2 &#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x516C;/&#x5341;&#x516D;&#x8FDB;&#x5236; homeodomain DNA &#x7ED1;&#x5B9A;&#x7684;&#x53EF;&#x9006;&#x5F00;&#x5173;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

The proline-rich homeodomain protein (PRH/Hex) regulates transcription by binding to specific DNA sequences and regulates mRNA transport by binding to translation initiation factor eIF4E. Protein kinase CK2 plays multiple roles in the regulation of gene expression and cell proliferation. Here, we show that PRH interacts with the beta subunit of CK2 in vitro and in cells and that CK2 phosphorylates PRH. Phosphorylation of PRH by CK2 inhibits the DNA binding activity of this protein and dephosphorylation restores DNA binding indicating that this modification acts as a reversible switch. We show that phosphorylation of the homeodomain is sufficient to block DNA binding and we identify two amino acids within this the domain that are phosphorylated by CK2: S163 and S177. Site-directed mutagenesis demonstrates that mutation of either of these residues to glutamic acid partially mimics phosphorylation but is insufficient to completely block DNA binding whereas an S163E/S177E double mutation severely inhibits DNA binding. Significantly, the S163E and S177E mutations and the S163E/S177E double mutation all inhibit the ability of PRH to regulate transcription in cells. Since these amino acids are conserved between many homeodomain proteins, our results suggest that CK2 may regulate the activity of several homeodomain proteins in this manner.

CK2 phosphorylation of the PRH/Hex homeodomain functions as a reversible switch for DNA binding.

La prot&#xE9;ine hom&#xE9;odomaine riche en proline (PRH / Hex) r&#xE9;gule la transcription en se liant &#xE0; des s&#xE9;quences d&#x26;#39;ADN sp&#xE9;cifiques et r&#xE9;gule le transport des ARNm en se liant &#xE0; eIF4E facteur d&#x26;#39;initiation de traduction. La prot&#xE9;ine kinase CK2 joue de multiples r&#xF4;les dans la r&#xE9;gulation de l&#x26;#39;expression g&#xE9;nique et la prolif&#xE9;ration cellulaire. Ici, nous montrons que PRH interagit avec la sous-unit&#xE9; b&#xEA;ta de la CK2 in vitro et dans les cellules et que CK2 phosphoryle PRH. La phosphorylation de la PRH par CK2 inhibe l&#x26;#39;activit&#xE9; de liaison d&#x26;#39;ADN de cette prot&#xE9;ine et la d&#xE9;phosphorylation restaure liaison &#xE0; l&#x26;#39;ADN indiquant que cette modification agit comme un interrupteur r&#xE9;versible. Nous montrons que la phosphorylation de l&#x26;#39;hom&#xE9;odomaine est suffisante pour bloquer liaison &#xE0; l&#x26;#39;ADN et nous identifions deux acides amin&#xE9;s au sein de ce domaine qui sont la phosphorylation par CK2: S163 et S177. Mutagen&#xE8;se dirig&#xE9;e montre que la mutation de l&#x26;#39;un de ces r&#xE9;sidus &#xE0; l&#x26;#39;acide glutamique imite partiellement la phosphorylation, mais est insuffisant pour bloquer compl&#xE8;tement liaison &#xE0; l&#x26;#39;ADN alors une mutation S163E/S177E &#xE0; double inhibe fortement liaison &#xE0; l&#x26;#39;ADN. De mani&#xE8;re significative, les mutations et S163E S177E et la mutation S163E/S177E doubles, toutes inhiber la capacit&#xE9; de PRH pour r&#xE9;guler la transcription dans les cellules. &#xC9;tant donn&#xE9; que ces acides amin&#xE9;s sont conserv&#xE9;s entre les prot&#xE9;ines &#xE0; hom&#xE9;odomaine nombreux, nos r&#xE9;sultats sugg&#xE8;rent que CK2 peut r&#xE9;glementer l&#x26;#39;activit&#xE9; des prot&#xE9;ines &#xE0; hom&#xE9;odomaine plusieurs de cette mani&#xE8;re.

La phosphorylation de la CK2 les fonctions hom&#xE9;odomaine PRH / Hex comme un interrupteur r&#xE9;versible pour liaison &#xE0; l&#x26;#39;ADN

Das Prolin-reiche Hom&ouml;odom&auml;ne-Protein (PRH/Hex) regelt die Transkription durch Bindung an spezifische DNA-Sequenzen und mRNA-Transport durch Bindung an &Uuml;bersetzung Einleitung Faktor eIF4E regelt. Proteinkinase CK2 spielt mehrere Rollen bei der Regulierung der Genexpression und Zellvermehrung. Hier zeigen wir, dass die Beta-Untereinheit des CK2 in-vitro- und in den Zellen PRH interagiert und CK2 PRH phosphorylates. Phosphorylierung von PRH von CK2 hemmt die DNA-bindende Aktivit&auml;t dieses Proteins und Dephosphorylierung stellt DNA Bindung darauf hinweist, dass diese &Auml;nderung als reversible Switch fungiert. Wir zeigen, dass die Phosphorylierung von der Hom&ouml;odom&auml;ne ist ausreichend, um die DNA-Bindung zu blockieren und wir identifizieren zwei Aminos&auml;uren innerhalb dieser Dom&auml;ne, die von CK2 phosphoryliert sind: S163 und S177. Site-verwiesene Mutagenese zeigt, dass die Mutation eines dieser R&uuml;ckst&auml;nde zu Glutamins&auml;ure teilweise imitiert Phosphorylierung ist jedoch nicht ausreichend, DNA-Bindung vollst&auml;ndig zu blockieren, w&auml;hrend eine doppelte S163E/S177E-Mutation stark hemmt die DNA-Bindung. Deutlich, die S163E und S177E-Mutationen und die doppelte S163E/S177E-Mutation alle hemmen die F&auml;higkeit von PRH, Transkription in den Zellen zu regulieren. Da diese Aminos&auml;uren zwischen vielen Hom&ouml;odom&auml;ne Proteinen konserviert werden, zufolge unseren Ergebnissen CK2 die Aktivit&auml;t von mehreren Hom&ouml;odom&auml;ne-Proteinen auf diese Weise regulieren kann.

CK2 Phosphorylierung von PRH/Hex-Hom&ouml;odom&auml;ne fungiert als reversible Schalter f&uuml;r DNA-Bindung.

La proteina homeodomain ricco di prolina (PRH/Hex) regola la trascrizione, legandosi a specifiche sequenze di DNA e regola il trasporto di mRNA legandosi alla traduzione iniziazione fattore eIF4E. Proteina chinasi CK2 svolge molteplici ruoli nella regolazione dell&#39;espressione genica e la proliferazione cellulare. Qui, vi mostriamo che PRH interagisce con la subunit&agrave; beta di CK2 in vitro e nelle cellule e che CK2 tirosine PRH. Il DNA che attivit&agrave; di questa proteina inibisce la fosforilazione di PRH da CK2 e defosforilazione Ripristina DNA binding che indica che questa modifica agisce come un interruttore reversibile. Mostriamo che la fosforilazione dell&#39;omeodominio &egrave; sufficiente a bloccare il legame del DNA e identifichiamo due amminoacidi all&#39;interno di questo dominio che sono fosforilati da CK2: S163 e S177. Mutagenesi luogo-diretta dimostra che la mutazione di uno di questi residui di acido glutammico parzialmente imita la fosforilazione ma non &egrave; sufficiente a bloccare completamente il legame del DNA mentre una S163E/S177E doppia mutazione inibisce gravemente grippaggio del DNA. Significativamente, le mutazioni S163E e S177E e la S163E/S177E doppia mutazione tutti inibiscono la capacit&agrave; di regolare la trascrizione nelle cellule PRH. Poich&eacute; questi amminoacidi sono conservati tra molte proteine homeodomain, i nostri risultati suggeriscono che CK2 possono disciplinare l&#39;attivit&agrave; di diverse proteine homeodomain in questo modo.

CK2 fosforilazione dell&#39;omeodominio PRH/Hex funziona come un interruttore reversibile per grippaggio del DNA.

&#x30D7;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C1;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;PRH /&#x30D8;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;DNA&#x914D;&#x5217;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8EE2;&#x5199;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x3001;&#x7FFB;&#x8A33;&#x958B;&#x59CB;&#x56E0;&#x5B50;eIF4E&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;mRNA&#x306E;&#x8F38;&#x9001;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;CK2&#x306F;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;PRH&#x306F;&#x3001;in vitro&#x3067;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x305D;&#x306E;CK2&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;PRH&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;CK2&#x306E;&#x3B2;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; CK2&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;PRH&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x306F;&#x3053;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;DNA&#x7D50;&#x5408;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x3001;&#x8131;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x5909;&#x66F4;&#x306F;&#x53EF;&#x9006;&#x30B9;&#x30A4;&#x30C3;&#x30C1;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;DNA&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x3092;&#x5FA9;&#x5143;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x306F;&#x3001;DNA&#x7D50;&#x5408;&#x3092;&#x963B;&#x6B62;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5341;&#x5206;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;CK2&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x5185;&#x306E;2&#x3064;&#x306E;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;S163&#x3068;S177&#x3002;&#x90E8;&#x4F4D;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x8A98;&#x767A;&#x6CD5;&#x306F;&#x3001;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x9178;&#x306B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6B8B;&#x57FA;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x304C;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306B;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3092;&#x6A21;&#x5023;&#x3057;&#x306A;&#x304F;S163E/S177E&#x4E8C;&#x91CD;&#x5909;&#x7570;&#x306F;&#x6DF1;&#x523B;&#x306A;DNA&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3001;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;DNA&#x7D50;&#x5408;&#x3092;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x4E0D;&#x5341;&#x5206;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x304B;&#x306A;&#x308A;&#x3001;S163E S177E&#x3068;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x3068;S163E/S177E&#x4E8C;&#x91CD;&#x5909;&#x7570;&#x306F;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;PRH&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x9593;&#x3067;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;CK2&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;

DNA&#x7D50;&#x5408;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x53EF;&#x9006;&#x30B9;&#x30A4;&#x30C3;&#x30C1;&#x3068;&#x3057;&#x3066;HEX / PRH&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;CK2&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;

&#xD504;&#xB864;&#xB9B0; &#xBD80;&#xC720;&#xD55C; homeodomain &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (PRH/16 &#xC9C4;&#xC218;) &#xD2B9;&#xC815; DNA &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xC5EC; &#xC804;&#xC0AC; &#xC870;&#xC808; &#xBC0F; mRNA &#xC804;&#xC1A1; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xBC88;&#xC5ED; &#xAC1C;&#xC2DC; &#xC778;&#xC790; Eif4e&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC870;&#xC808;. &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; CK2 &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD;&#xC758; &#xADDC;&#xC815;&#xC5D0; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; PRH CK2 &#xCCB4; &#xC678;&#xC758; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704;&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558; &#xACE0; CK2 PRH phosphorylates &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. CK2 &#xD558; &#xC5EC; PRH&#xC758; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; &#xC5B5;&#xC81C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC774; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xBB36;&#xB294; DNA&#xC640; dephosphorylation DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294;&#xC774; &#xC218;&#xC815; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD574; &#xC2A4;&#xC704;&#xCE58; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xBCF5;&#xC6D0;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; homeodomain&#xC758; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xB294; DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xCC28;&#xB2E8; &#xD558;&#xAE30;&#xC5D0; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0;&#xC774; &#xB0B4; ck2&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; phosphorylated &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD45C;&#xC2DC;: S163 &#xBC0F; S177. &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xC9C0;&#xC2DC; &#xB41C; mutagenesis &#xAE00;&#xB8E8;&#xD0D0;&#xC0B0;&#xC744; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC758; &#xBCC0;&#xC774; &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xB97C; &#xBAA8;&#xBC29; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; S163E/S177E &#xC774;&#xC911; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC2EC;&#xAC01; DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xBC18;&#xBA74; DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC744; &#xC644;&#xC804;&#xD788; &#xCC28;&#xB2E8; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD06C;&#xAC8C;, S163E &#xBC0F; S177E &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; S163E/S177E &#xC774;&#xC911; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC804;&#xC0AC;&#xB97C; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294; PRH&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0;&#xC740; &#xB9CE;&#xC740; homeodomain &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xBCF4;&#xC874;, &#xC774;&#xD6C4; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; CK2 &#xC774;&#xC640;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC00;&#xC9C0; homeodomain &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

PRH/16 &#xC9C4;&#xC218; homeodomain&#xC758; CK2 &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC00;&#xC5ED; &#xC2A4;&#xC704;&#xCE58;&#xB85C; &#xC791;&#xB3D9;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La prote&#xED;na homeodominio rica en prolina (PRH / Hex) regula la transcripci&#xF3;n mediante la uni&#xF3;n a secuencias espec&#xED;ficas de ADN y regula el transporte del ARNm al unirse a eIF4E factor de iniciaci&#xF3;n de la traducci&#xF3;n. La prote&#xED;na quinasa CK2 desempe&#xF1;a m&#xFA;ltiples funciones en la regulaci&#xF3;n de la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica y la proliferaci&#xF3;n celular. Aqu&#xED;, mostramos que el PRH interact&#xFA;a con la subunidad beta de CK2 in vitro y en c&#xE9;lulas y que CK2 fosforila PRH. La fosforilaci&#xF3;n de PRH por CK2 inhibe la actividad de uni&#xF3;n al ADN de esta prote&#xED;na y la desfosforilaci&#xF3;n restaura uni&#xF3;n al ADN que indica que esta modificaci&#xF3;n act&#xFA;a como un interruptor reversible. Se demuestra que la fosforilaci&#xF3;n de la homeodominio es suficiente para bloquear la uni&#xF3;n al ADN y nos identificamos dos amino&#xE1;cidos dentro de este dominio del que se fosforila por CK2: S163 y S177. Sitio de mutag&#xE9;nesis dirigida demuestra que la mutaci&#xF3;n de cualquiera de estos residuos a &#xE1;cido glut&#xE1;mico parte imita la fosforilaci&#xF3;n, pero no es suficiente para bloquear por completo la uni&#xF3;n al ADN, mientras que una doble mutaci&#xF3;n S163E/S177E gravemente inhibe la uni&#xF3;n al ADN. Significativamente, las mutaciones S163E y S177E y la mutaci&#xF3;n doble S163E/S177E todo inhibir la capacidad de PRH para regular la transcripci&#xF3;n en las c&#xE9;lulas. Puesto que estos amino&#xE1;cidos se conserva entre las prote&#xED;nas homeodominio muchos, nuestros resultados sugieren que CK2 puede regular la actividad de las prote&#xED;nas homeodominio varios de esta manera.

CK2 fosforilaci&#xF3;n de las funciones del homeodominio PRH / Hex como un interruptor reversible para la uni&#xF3;n al ADN

&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x53D7;&#x4F53; 2 (PAR 2) &#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x589E;&#x52A0;&#x4ECE;&#x598A;&#x9AD8;&#x5F81;&#xFF0C;&#x7279;&#x70B9;&#x662F;&#x666E;&#x904D;&#x4EA7;&#x5987;&#x7684;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x635F;&#x4F24;&#xFF0C;&#x53D1;&#x751F;&#x7531;&#x4E8E;&#x9AD8;&#x67B6;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x53D7;&#x4F53;-1 &#x7684;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE; (sVEGFR-1 &#xFF1B; &#x4F17;&#x6240;&#x5468;&#x77E5;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027; 1) &#x4EA7;&#x5987;&#x7684;&#x6D41;&#x901A;&#x3002;&#x56E0;&#x4E3A; PAR 2 &#x662F;&#x7531;&#x708E;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x589E;&#x9AD8;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7531;&#x8840;&#x6DB2;&#x51DD;&#x8840;&#x4E1D;&#x6C28;&#x9178;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x6FC0;&#x6D3B;&#xFF0C;&#x8C03;&#x67E5;&#x662F;&#x5426;&#x6FC0;&#x6D3B; PAR 2 &#x8D21;&#x732E;&#x7684;&#x7248;&#x672C; sVEGFR-1&#x3002;PAR 2 &#x6FC0;&#x6D3B;&#x591A;&#x80BD; &#xFF08;SLIGRL-NH(2) &#x548C; 2-furoyl-LIGRLO-NH(2)) &#x53CA;&#x51DD;&#x8840;&#x56E0;&#x5B50; Xa &#x589E;&#x52A0;&#x4ECE;&#x4EBA;&#x8110;&#x9759;&#x8109;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x91CA;&#x653E;&#x7684; sVEGFR-1 &#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x7279;&#x5B9A;&#x9176;&#x7684;&#x3001; &#x663E;&#x6027;&#x8D1F;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x548C;&#x5C0F;&#x5206;&#x5B50;&#x5E72;&#x6270; RNA &#x88AB;&#x7528;&#x6765;&#x8BC1;&#x660E;&#x4ECB;&#x5BFC; PAR 2 sVEGFR 1 &#x91CA;&#x653E;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; C-beta(1) &#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; C-epsilon&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x8868;&#x76AE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x53D7;&#x4F53; 1 &#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6FC0;&#x6D3B;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4E1D;&#x88C2;&#x7D20;&#x6D3B;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176;&#x7684;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;&#x8840;&#x7EA2;&#x7D20;&#x52A0;&#x6C27;&#x9176; 1 &#x548C;&#x5176;&#x6C14;&#x6001;&#x4EA7;&#x54C1;&#xFF0C;&#x4E00;&#x6C27;&#x5316;&#x78B3;&#xFF0C;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E0B;&#x964D;&#x523A;&#x6FC0; PAR 2 sVEGFR-1 &#x91CA;&#x653E;&#x7684;&#x4EBA;&#x8110;&#x9759;&#x8109;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x8F9B;&#x4F10;&#x4ED6;&#x6C40;&#xFF0C;&#x54EA;&#x4E9B;&#x4E0A;&#x8C03;&#x8840;&#x7EA2;&#x7D20;&#x52A0;&#x6C27;&#x9176; 1&#xFF0C;&#x8FD8;&#x538B;&#x5236;&#x4ECB;&#x5BFC; PAR 2 sVEGFR 1 &#x91CA;&#x653E;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x76AE; PAR 2 &#x6FC0;&#x6D3B;&#x5BFC;&#x81F4;&#x589E;&#x52A0; sVEGFR 1 &#x91CA;&#x653E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x5728;&#x5B50;&#x75EB;&#x524D;&#x671F;&#x4E2D;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684;&#x4EA7;&#x5987;&#x8840;&#x7BA1;&#x529F;&#x80FD;&#x5931;&#x8C03;&#x548C;&#x7A81;&#x51FA; PAR 2 &#x901A;&#x8DEF;&#x4E3A;&#x6F5C;&#x5728;&#x9776;&#x70B9;&#x6CBB;&#x7597;&#x5148;&#x5146;&#x5B50;&#x75EB;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x3002;

&#x6FC0;&#x6D3B;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x53D7;&#x4F53; 2 &#x7684;&#x523A;&#x6FC0;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x53D7;&#x4F53; 1 &#x91CA;&#x653E;&#x7ECF;&#x7531;&#x8868;&#x76AE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x53D7;&#x4F53;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;

The proteinase-activated receptor 2 (PAR-2) expression is increased in endothelial cells derived from women with preeclampsia, characterized by widespread maternal endothelial damage, which occurs as a consequence of elevated soluble vascular endothelial growth factor receptor-1 (sVEGFR-1; commonly known as sFlt-1) in the maternal circulation. Because PAR-2 is upregulated by proinflammatory cytokines and activated by blood coagulation serine proteinases, we investigated whether activation of PAR-2 contributed to sVEGFR-1 release. PAR-2-activating peptides (SLIGRL-NH(2) and 2-furoyl-LIGRLO-NH(2)) and factor Xa increased the expression and release of sVEGFR-1 from human umbilical vein endothelial cells. Enzyme-specific, dominant-negative mutants and small interfering RNA were used to demonstrate that PAR-2-mediated sVEGFR-1 release depended on protein kinase C-beta(1) and protein kinase C-epsilon, which required intracellular transactivation of epidermal growth factor receptor 1, leading to mitogen-activated protein kinase activation. Overexpression of heme oxygenase 1 and its gaseous product, carbon monoxide, decreased PAR-2-stimulated sVEGFR-1 release from human umbilical vein endothelial cells. Simvastatin, which upregulates heme oxygenase 1, also suppressed PAR-2-mediated sVEGFR-1 release. These results show that endothelial PAR-2 activation leading to increased sVEGFR-1 release may contribute to the maternal vascular dysfunction observed in preeclampsia and highlights the PAR-2 pathway as a potential therapeutic target for the treatment of preeclampsia.

Activation of proteinase-activated receptor 2 stimulates soluble vascular endothelial growth factor receptor 1 release via epidermal growth factor receptor transactivation in endothelial cells.

La prot&eacute;inase-activated receptor 2 (PAR-2) l&#39;expression est augment&eacute;e dans les cellules endoth&eacute;liales, d&eacute;riv&eacute;s de femmes pr&eacute;sentant une pr&eacute;&eacute;clampsie, caract&eacute;ris&eacute;e par des l&eacute;sions endoth&eacute;liales maternelle g&eacute;n&eacute;ralis&eacute;e, qui se produit par suite de l&#39;&eacute;l&eacute;vation soluble vascular endothelial growth factor receptor-1 (sVEGFR-1, commun&eacute;ment connu comme sFlt-1) dans la circulation maternelle. Car PAR-2 est augment&eacute;e par les cytokines pro-inflammatoires et activ&eacute;s par des prot&eacute;ases de s&eacute;rine coagulation sanguine, nous avons examin&eacute; si l&#39;activation de PAR-2 a contribu&eacute; &agrave; la lib&eacute;ration sVEGFR-1. Peptides activant PAR-2 (SLIGRL-NH(2) et 2-furoyl-LIGRLO-NH(2)) et le facteur Xa &agrave; l&#39;augmentation de l&#39;expression et la lib&eacute;ration de sVEGFR-1 par les cellules endoth&eacute;liales de veine ombilicale humaine. Enzyme sp&eacute;cifique, dominant n&eacute;gatif des mutants et des petits ARN interf&eacute;rents servaient &agrave; d&eacute;montrer que m&eacute;di&eacute;e PAR-2 sVEGFR-1 sortie d&eacute;pendait de la prot&eacute;ine kinase C-beta(1) et la prot&eacute;ine kinase C-epsilon, qui exigeait la transactivation intracellulaire du r&eacute;cepteur du facteur de croissance &eacute;pidermique 1, conduisant &agrave; l&#39;activation de la kinase mitog&egrave;ne-prot&eacute;ine. La surexpression de l&#39;h&egrave;me oxyg&eacute;nase 1 et son produit gazeux, monoxyde de carbone, a diminu&eacute; la lib&eacute;ration stimul&eacute;e par-2 sVEGFR-1 de cellules endoth&eacute;liales de veine ombilicale humaine. Simvastatine, qui r&eacute;gule &agrave; la hausse l&#39;h&egrave;me oxyg&eacute;nase 1, supprima &eacute;galement v&eacute;hicul&eacute;e par-2 sVEGFR-1 sortie. Ces r&eacute;sultats montrent qu&#39;endoth&eacute;liale PAR-2 activation menant &agrave; la lib&eacute;ration accrue de sVEGFR-1 peut contribuer &agrave; la dysfonction vasculaire maternelle observ&eacute;e en pr&eacute;-&eacute;clampsie et met en &eacute;vidence la voie PAR-2 comme une cible th&eacute;rapeutique potentielle pour le traitement de la pr&eacute;&eacute;clampsie.

L&#39;activation du r&eacute;cepteur activ&eacute; par la prot&eacute;inase 2 stimule la lib&eacute;ration de r&eacute;cepteur 1 de facteur de croissance endoth&eacute;lial vasculaire soluble par transactivation de r&eacute;cepteur de facteur de croissance &eacute;pidermique dans les cellules endoth&eacute;liales.

Der Proteinase-aktivierter Rezeptor 2 (PAR-2) Ausdruck steigt in Endothelzellen, abgeleitet von Frauen mit Pr&auml;eklampsie, zeichnet sich durch weit verbreitete m&uuml;tterlichen endotheliale Sch&auml;den, die als Folge erh&ouml;hten l&ouml;slichen vaskul&auml;ren endothelialen Wachstumsfaktor-Rezeptor-1, (sVEGFR-1; bekannt als sFlt-1) in den m&uuml;tterlichen Kreislauf. Da PAR-2 herraufreguliert von Proinflammatory Cytokines und durch Blut Koagulation Serin Proteinasen aktiviert, wir wurde untersucht, ob die Aktivierung des PAR-2 sVEGFR-1-Ver&ouml;ffentlichung beigetragen. PAR-2-Aktivierung Peptide (SLIGRL-NH(2) und 2-furoyl-LIGRLO-NH(2)) und Faktor Xa erh&ouml;ht den Ausdruck und die Freisetzung von sVEGFR-1 aus menschlichen Nabel-Vene Endothelzellen. Enzym-spezifische, Dominant-Negative Mutanten und small interfering RNA dienten zu demonstrieren, dass PAR-2-vermittelten sVEGFR-1-Version von Protein-Kinase C-beta(1) und Protein-Kinase C-Epsilon, der intrazellul&auml;ren Transactivation epidermalen Wachstumsfaktor-Rezeptor 1 erforderlich Abh&auml;nge, zur Aktivierung der Mitogen-aktivierte Protein-Kinase. Eine &Uuml;berexpression von H&auml;m-Oxygenase 1 und seine gasf&ouml;rmigen Produkt, Kohlenmonoxid, verringerten sich um PAR-2-stimuliert sVEGFR-1-Freisetzung aus Endothelzellen menschliche Nabelschnur Venen. Simvastatin, welche Upregulates H&auml;m-Oxygenase 1, unterdr&uuml;ckt auch PAR-2-vermittelten sVEGFR-1-Version. Diese Ergebnisse zeigen, dass die endotheliale PAR-2-Aktivierung f&uuml;hrt zu erh&ouml;hten sVEGFR-1-Version kann dazu beitragen, die m&uuml;tterliche vaskul&auml;re Dysfunktion bei Pr&auml;eklampsie beobachtet und hebt den PAR-2-Weg als ein potenzieller Therapeutisches Zielmolek&uuml;l f&uuml;r die Behandlung von Pr&auml;eklampsie.

Aktivierung des Proteinase-aktivierter Rezeptor 2 stimuliert l&ouml;sliche vaskul&auml;ren endothelialen Wachstumsfaktor-Rezeptor 1 Freigabe &uuml;ber epidermalen Wachstumsfaktor-Rezeptor Transactivation in Endothelzellen.

Il recettore della proteinasi attivata (PAR-2) 2 espressione &egrave; maggiore nelle cellule endoteliali, derivate dalle donne con preeclampsia, caratterizzata da diffuso danno endoteliale materna, che si verifica come conseguenza di elevati solubile vascular endothelial growth factor receptor-1 (sVEGFR-1; comunemente noto come sFlt-1) nella circolazione materna. Perch&eacute; PAR-2 &egrave; sovraregolati di citochine proinfiammatorie e attivato da proteinases serina della coagulazione di sangue, abbiamo studiato se attivazione di PAR-2 ha contribuito al rilascio di sVEGFR-1. PAR-2-attivazione di peptidi (SLIGRL-NH(2) e 2-furoyl-LIGRLO-NH(2)) e fattore Xa aumentato l&#39;espressione e il rilascio di sVEGFR-1 da cellule endoteliali di vena ombelicale umana. Enzima specifico, la dominante-negativo mutanti e piccolo RNA interferente sono stati utilizzati per dimostrare che mediata da PAR-2 sVEGFR-1 rilascio dipendeva dalla chinasi C-beta(1) e la proteina chinasi di proteina C-epsilon, che richiedevano intracellulare transattivazione del recettore del fattore di crescita epidermico 1, che porta all&#39;attivazione della chinasi di proteina mitogene-attivata. Sovraespressione di eme ossigenasi 1 e del suo prodotto gassoso, monossido di carbonio, diminuito rilascio di sVEGFR-1 PAR-2-stimolato da cellule endoteliali di vena ombelicale umana. Simvastatina, quale sopraregola le eme ossigenasi 1, soppressi anche PAR-2-mediato rilascio sVEGFR-1. Questi risultati mostrano che endoteliali attivazione di PAR-2 che porta al rilascio aumentato di sVEGFR-1 pu&ograve; contribuire alla disfunzione vascolare materna osservata in preeclampsia e mette in evidenza il percorso PAR-2 come un potenziale bersaglio terapeutico per il trattamento della preeclampsia.

Attivazione del recettore attivato proteinasi 2 stimola solubile vascular endothelial growth factor receptor 1 rilascio via transactivation di epidermal growth factor receptor in cellule endoteliali.

&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; 2 &#xFF08;&#x30D1;&#x30FC;-2) &#x5F0F;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x4E0A;&#x6607;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x5897;&#x6B96;&#x56E0;&#x5B50;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; 1 &#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x5E83;&#x7BC4;&#x306A;&#x6BCD;&#x6027;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x640D;&#x50B7;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x308B; preeclampsia &#x306E;&#x5973;&#x6027;&#x304B;&#x3089;&#x7531;&#x6765;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067; (sVEGFR 1; &#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x65E2;&#x77E5;&#x3068;&#x3057;&#x3066; sFlt 1) &#x6BCD;&#x4F53;&#x306E;&#x5FAA;&#x74B0;&#x3002;&#x30D1;&#x30FC; 2 &#x708E;&#x75C7;&#x6027;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x767A;&#x73FE;&#x304C;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x8840;&#x6DB2;&#x51DD;&#x56FA;&#x30BB;&#x30EA;&#x30F3;&#x86CB;&#x767D;&#x5206;&#x89E3;&#x9175;&#x7D20;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x30D1;&#x30FC; 2 &#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316; sVEGFR 1 &#x306E;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3057;&#x305F;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30D1;&#x30FC; 2 &#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E; &#xFF08;SLIGRL-NH(2) &#x3068; 2-furoyl-LIGRLO-NH(2)) &#x3068;&#x30D5;&#x30A1;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC; Xa &#x5F0F;&#x3068; sVEGFR 1 &#x306E;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3072;&#x3068;&#x81CD;&#x5E2F;&#x9759;&#x8108;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x3001;&#x30C9;&#x30DF;&#x30CA;&#x30F3;&#x30C8; &#x30CD;&#x30AC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x4F4E;&#x5206;&#x5B50;&#x5E72;&#x6E09; RNA sVEGFR 1 &#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30D1;&#x30FC; 2 &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x8EE2;&#x5199;&#x4E0A;&#x76AE;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; 1 &#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; C-beta(1) &#x3068;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x4E0A; C &#x30A4;&#x30D7;&#x30B7;&#x30ED;&#x30F3;&#x3092;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30DE;&#x30A4;&#x30C8;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C9;&#x3057;&#x3066;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30D8;&#x30E0;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30B2;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; 1 &#x3084;&#x4E00;&#x9178;&#x5316;&#x70AD;&#x7D20;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30AC;&#x30B9;&#x88FD;&#x54C1;&#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x30D1;&#x30FC; 2 &#x523A;&#x6FC0; sVEGFR 1 &#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3072;&#x3068;&#x81CD;&#x5E2F;&#x9759;&#x8108;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30B7;&#x30F3;&#x30D0;&#x30B9;&#x30BF;&#x30C1;&#x30F3;, &#x3069;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0; &#x30D8;&#x30E0;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30B2;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; 1&#x3001;&#x30D1;&#x30FC; 2 &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F; sVEGFR 1 &#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3082;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x5897;&#x52A0;&#x306E; sVEGFR 1 &#x306E;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x5185;&#x76AE;&#x30D1;&#x30FC; 2 &#x598A;&#x5A20;&#x4E2D;&#x6BD2;&#x75C7;&#x3067;&#x89B3;&#x6E2C;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6BCD;&#x4F53;&#x8840;&#x7BA1;&#x6A5F;&#x80FD;&#x4E0D;&#x5168;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3057;&#x3001;&#x30D1;&#x30FC; 2 &#x7D4C;&#x8DEF;&#x5B50;&#x7647;&#x524D;&#x75C7;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x6CBB;&#x7642;&#x4E0A;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30CF;&#x30A4;&#x30E9;&#x30A4;&#x30C8;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; 2 &#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x4E0A;&#x76AE;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x8EE2;&#x5199;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x5897;&#x6B96;&#x56E0;&#x5B50;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; 1 &#x306E;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC131;&#xBD84;&#xC744; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; 2 (&#xD30C;-2) &#xC2DD; &#xC790;&#xAC04; &#xC804; &#xC99D;, &#xB192;&#xC740; &#xC6A9; &#xD574; &#xD608;&#xAD00; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; 1&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;&#xB85C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xC0B0; &#xBAA8; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC190;&#xC0C1;&#xC744; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC73C;&#xB85C; &#xC5EC;&#xC131;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; (sVEGFR-1, &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4; sFlt-1) &#xC0B0; &#xBAA8; &#xD608;&#xC561; &#xC21C;&#xD658;&#xC5D0;&#xC11C;. &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xD30C;-2 upregulated proinflammatory cytokines, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xD608;&#xC561; &#xC751;&#xACE0; &#xB5A0;&#xB4E4;&#xACE0; proteinases&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;, &#xC6B0;&#xB9AC; sVEGFR 1 &#xCD9C;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xD30C; 2&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xAE30;&#xC5EC; &#xC5EC;&#xBD80; &#xC870;&#xC0AC;. &#xD30C; 2 &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; (SLIGRL-NH(2) &#xBC0F; 2-furoyl-ligrlo-nh(2))&#xC640; &#xC694;&#xC778; Xa &#xC99D;&#xAC00; &#xD45C;&#xD604;&#xACFC; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xD0EF; &#xC904; &#xC815; &#xB9E5; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; sVEGFR-1&#xC758; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4;. &#xD6A8;&#xC18C; &#xAD00;&#xB828;, &#xC9C0;&#xBC30; &#xC74C;&#xC218;&#xAC00; &#xBBA4;&#xD134;&#xD2B8; &#xC791;&#xC740; &#xAC04;&#xC12D; RNA &#xB370; &#xD30C; 2 &#xC911;&#xC7AC; sVEGFR 1 &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; C-beta(1) &#xBC0F; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; kinase C &#xC5E1;&#xC2E4;&#xB860; &#xD45C; &#xD53C; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; 1&#xC758; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; transactivation &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC758;&#xC874; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xBB3C;&#xC9C8; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD55C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB85C; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9C0;&#xB294;. Heme oxygenase 1 &#xBC0F; &#xC77C;&#xC0B0;&#xD654; &#xD0C4;&#xC18C; &#xAC00;&#xC2A4; &#xC81C;&#xD488;&#xC758; overexpression &#xC778;&#xAC04; &#xD0EF; &#xC904; &#xC815; &#xB9E5; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; sVEGFR 1 &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4; &#xD30C; 2 &#xC790;&#xADF9; &#xAC10;&#xC18C;. Simvastatin, &#xC5B4;&#xB5A4; upregulates heme oxygenase 1, sVEGFR 1 &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xB97C; &#xD30C; 2 &#xC911;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xB610;&#xD55C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xACB0;&#xACFC; &#xC99D;&#xAC00; sVEGFR 1 &#xCD9C;&#xC2DC;&#xB85C; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9C0;&#xB294; &#xB0B4; &#xD53C; &#xD30C; 2 &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC790;&#xAC04; &#xC804; &#xC99D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB41C; &#xBAA8;&#xC131; &#xD608;&#xAD00; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC7A5;&#xC560;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC;&#xD560; &#xC218; &#xD30C; 2 &#xD1B5;&#xB85C; &#xC790;&#xAC04; &#xC804; &#xC99D;&#xC758; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xCE58;&#xB8CC; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC15;&#xC870; &#xD45C;&#xC2DC; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC131;&#xBD84;&#xC744; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; 2&#xC758; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD45C; &#xD53C; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; transactivation &#xD1B5;&#xD574; &#xC6A9; &#xD574; &#xD608;&#xAD00; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; 1 &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4; &#xC790;&#xADF9;.

El receptor activado proteinasa 2 (PAR-2) expresi&oacute;n es mayor en las c&eacute;lulas endoteliales, derivadas de las mujeres con preeclampsia, caracterizado por extenso da&ntilde;o endotelial materna, que se produce como consecuencia de la elevada soluble vascular endothelial growth factor receptor-1 (sVEGFR-1; com&uacute;nmente conocido como el sFlt-1) en la circulaci&oacute;n materna. Porque PAR-2 es el alza por citocinas proinflamatorias y activado por Proteinasas de serina de coagulaci&oacute;n de sangre, investigamos si activaci&oacute;n de PAR-2 contribuy&oacute; a la liberaci&oacute;n de sVEGFR-1. PAR-2-activaci&oacute;n de p&eacute;ptidos (SLIGRL-NH(2) y 2-furoyl-LIGRLO-NH(2)) y factor Xa aumentaron la expresi&oacute;n y la liberaci&oacute;n de sVEGFR-1 de las c&eacute;lulas endoteliales de la vena umbilical humana. Enzima espec&iacute;fica dominante negativo mutantes y ARN interferente peque&ntilde;o fueron utilizados para demostrar que mediada por PAR-2 sVEGFR-1 lanzamiento depend&iacute;a de la prote&iacute;na quinasa C-beta(1) y prote&iacute;na quinasa C-epsilon, que requiri&oacute; la transactivaci&oacute;n intracelular del receptor 1 de factor de crecimiento epid&eacute;rmico, conduce a la activaci&oacute;n de la cinasa de prote&iacute;na mitogen-activados. Sobreexpresi&oacute;n de heme oxigenasa 1 y su producto gaseoso, mon&oacute;xido de carbono, disminuy&oacute; PAR-2-estimulados sVEGFR-1 lanzamiento de las c&eacute;lulas endoteliales de la vena umbilical humana. Simvastatina, que estimula heme oxigenasa 1, tambi&eacute;n suprimi&oacute; PAR-2 mediada por liberaci&oacute;n de sVEGFR-1. Estos resultados muestran que la activaci&oacute;n endotelial de PAR-2 hacia la mayor liberaci&oacute;n de sVEGFR-1 puede contribuir a la disfunci&oacute;n vascular materna observada en la preeclampsia y destaca la v&iacute;a PAR-2 como una potencial diana terap&eacute;utica para el tratamiento de la preeclampsia.

Activaci&oacute;n de los receptores proteinasa activado 2 estimula soluble vascular endothelial growth factor receptor 1 liberaci&oacute;n v&iacute;a la transactivaci&oacute;n del receptor de factor de crecimiento epid&eacute;rmico en c&eacute;lulas endoteliales.

&#x5BCC;&#x542B;&#x812F;&#x6C28;&#x9178;&#x7684; homeodomain &#x86CB;&#x767D; &#xFF08;&#x516C;&#x5C4B;&#xFF09; &#x626E;&#x6F14;&#x591A;&#x4E2A;&#x89D2;&#x8272;&#x5728;&#x80DA;&#x80CE;&#x53D1;&#x80B2;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x63A7;&#x5236;&#x548C;&#x6210;&#x4EBA;&#x3002;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50; (VEGF) &#x662F;&#x523A;&#x6FC0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x53D7;&#x4F53;&#x5305;&#x62EC;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x53D7;&#x4F53; 1 &#x548C;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x53D7;&#x4F53;-2 &#x901A;&#x8FC7;&#x751F;&#x5B58;&#x7684;&#x4E1D;&#x3002;VEGF &#x4FE1;&#x53F7;&#x662F;&#x5173;&#x952E;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x548C;&#x9020;&#x8840;&#x529F;&#x80FD;&#xFF0C;&#x63D0;&#x5347;&#x5728;&#x8BB8;&#x591A;&#x80BF;&#x7624;&#x4E2D;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x76F4;&#x63A5;&#x5411;&#x5728;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x6848;&#x4F8B;&#x7684;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B; Vegf&#x3001; &#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x53D7;&#x4F53;-1 &#x548C;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x53D7;&#x4F53;-2 &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x533A;&#x57DF;&#x538B;&#x6291;&#x8F6C;&#x5F55;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC1;&#x660E;&#x8FC7;&#x5EA6;&#x8868;&#x8FBE;&#x6216;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x7684;&#x7EC4;&#x5408;&#x5F0F;&#x76F4;&#x63A5;&#x59A8;&#x788D;&#x751F;&#x5B58;&#x7684;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x548C;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4EE5;&#x53CA;&#xFF0C;&#x8C03;&#x5236; VEGF &#x548C; VEGF &#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6548;&#x679C;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x662F; VEGF &#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x901A;&#x8DEF;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x8C03;&#x8282;&#x5668;&#xFF0C;&#x63CF;&#x8FF0;&#x5373;&#x516C;&#x5C4B;&#x53D1;&#x6325;&#x7740;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5728;&#x80BF;&#x7624;&#x548C;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x53D1;&#x75C5;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;/Hhex &#x63A7;&#x4EF6;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x5750;&#x6807;&#x8F6C;&#x5F55;&#x8C03;&#x63A7;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8FC7;&#x751F;&#x5B58;&#x3002;

The proline-rich homeodomain protein (PRH) plays multiple roles in the control of gene expression during embryonic development and in the adult. Vascular endothelial growth factor (VEGF) is a mitogen that stimulates cell proliferation and survival via cell surface receptors including VEGFR-1 and VEGFR-2. VEGF signaling is of critical importance in angiogenesis and hematopoiesis and is elevated in many tumors. Here we show that PRH binds directly to the promoter regions of the Vegf, Vegfr-1, and Vegfr-2 genes and that in each case PRH represses transcription. We demonstrate that overexpression or knockdown of PRH directly impinges on the survival of both leukemic and tumor cells and that the modulation of VEGF and VEGF receptor signaling by PRH mediates these effects. Our findings demonstrate that PRH is a key regulator of the VEGF signaling pathway and describe a mechanism whereby PRH plays an important role in tumorigenesis and leukemogenesis.

PRH/Hhex controls cell survival through coordinate transcriptional regulation of vascular endothelial growth factor signaling.

La prot&#xE9;ine hom&#xE9;odomaine riche en proline (PRH) joue de multiples r&#xF4;les dans le contr&#xF4;le de l&#x26;#39;expression g&#xE9;nique pendant le d&#xE9;veloppement embryonnaire et chez l&#x26;#39;adulte. Facteur de croissance vasculaire endoth&#xE9;liale (VEGF) est un mitog&#xE8;ne qui stimule la prolif&#xE9;ration et la survie cellulaire via des r&#xE9;cepteurs de surface cellulaires, y compris VEGFR-1 et VEGFR-2. Signalisation du VEGF est d&#x26;#39;une importance critique dans l&#x26;#39;angiogen&#xE8;se et l&#x26;#39;h&#xE9;matopo&#xEF;&#xE8;se et est &#xE9;lev&#xE9;e dans de nombreuses tumeurs. Ici, nous montrons que PRH se lie directement &#xE0; des r&#xE9;gions promotrices du VEGF, VEGFR-1, et VEGFR-2 g&#xE8;nes et que dans chaque cas PRH r&#xE9;prime la transcription. Nous d&#xE9;montrons que la surexpression ou inactivation de PRH empi&#xE8;te directement sur la survie des deux cellules leuc&#xE9;miques et de la tumeur et que la modulation du VEGF et de signalisation du r&#xE9;cepteur VEGF par la m&#xE9;diation PRH ces effets. Nos r&#xE9;sultats d&#xE9;montrent que PRH est un r&#xE9;gulateur cl&#xE9; de la voie de signalisation du VEGF et de d&#xE9;crire un m&#xE9;canisme par lequel PRH joue un r&#xF4;le important dans la tumorigen&#xE8;se et la leuc&#xE9;mogen&#xE8;se.

PRH / HHEX contr&#xF4;le la survie cellulaire Par le r&#xE8;glement de la transcription de coordonn&#xE9;es de facteur de croissance vasculaire endoth&#xE9;liale de signalisation

Das Prolin-reiche Hom&ouml;odom&auml;ne-Protein (PRH) spielt mehrere Rollen in der Kontrolle der Genexpression w&auml;hrend der Embryonalentwicklung und in den Erwachsenen. Vaskul&auml;ren endothelialen Wachstumsfaktor (VEGF) ist ein Mitogen, der Zellproliferation und &Uuml;berleben &uuml;ber Zelle Oberfl&auml;che Rezeptoren VEGFR-1 und VEGFR-2 stimuliert. VEGF ist von entscheidender Bedeutung in der Angiogenese und Blutbildung und ist in vielen Tumoren erh&ouml;ht. Hier zeigen wir, dass PRH bindet direkt an die Projekttr&auml;ger Regionen der Vegf, Vegfr-1 und Vegfr-2-gen und, in jedem Fall PRH unterdr&uuml;ckt Transkription. Wir zeigen, dass eine &Uuml;berexpression oder Niederschlag von PRH direkt auf das &Uuml;berleben beide leuk&auml;mischen Tumorzellen und auswirkt die Modulation von VEGF und VEGF-Rezeptor-Signalisierung durch PRH vermittelt diese Effekte. Unsere Ergebnisse zeigen, dass PRH ist ein wichtiger Regulator der VEGF-Signalweg und beschreiben einen Mechanismus, bei dem PRH eine wichtige Rolle bei der Tumorentstehung und Leukemogenesis spielt.

PRH/Hhex Steuerelemente Zelle &Uuml;berleben durch Koordinaten Transkriptionsregulation vaskul&auml;ren endothelialen Wachstumsfaktor zu signalisieren.

La proteina homeodomain ricco di prolina (PRH) svolge molteplici ruoli nel controllo dell&#39;espressione genica durante lo sviluppo embrionale e nell&#39;adulto. Fattore di crescita endoteliale vascolare (VEGF) &egrave; un mitogeno che stimola la proliferazione cellulare e la sopravvivenza tramite recettori di superficie cellulare VEGFR-1 e VEGFR-2. Segnalazione di VEGF &egrave; di importanza critica nella angiogenesi ed ematopoiesi ed &egrave; elevata in molti tumori. Qui vi mostriamo che PRH si lega direttamente alle regioni promotore di geni Vegf, Vegfr-1 e Vegfr-2 e che in ogni caso PRH reprime trascrizione. Dimostriamo che iperespressione o atterramento di PRH incide direttamente sulla sopravvivenza di entrambi leucemici e cellule tumorali e che la modulazione di VEGF e VEGF receptor signaling by PRH media questi effetti. I nostri risultati dimostrano che PRH &egrave; un regolatore chiave della via di segnalazione di VEGF e descrivere un meccanismo per cui PRH gioca un ruolo importante nella tumorigenesi e leucemogenesi.

PRH/Hhex controlli delle cellule di sopravvivenza attraverso coordinate regolazione trascrizionale del fattore di crescita vascolare endoteliale di segnalazione.

&#x30D7;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C1;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;PRH&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x80DA;&#x767A;&#x751F;&#x6642;&#x3084;&#x6210;&#x4F53;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x306B;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x5897;&#x6B96;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF08;VEGF&#xFF09;&#x306F;&#x3001;VEGFR-1&#x3068;VEGFR-2&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x3068;&#x751F;&#x5B58;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3059;&#x308B;&#x30DE;&#x30A4;&#x30C8;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002; VEGF&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306F;&#x3001;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x3068;&#x9020;&#x8840;&#x3067;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x816B;&#x760D;&#x3067;&#x4E0A;&#x6607;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;PRH&#x306F;&#x3001;VEGF&#x3001;VEGFR-1&#x3001;VEGFR-2&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x76F4;&#x63A5;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x306E;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B9;&#x3067;PRH&#x306F;&#x3001;&#x8EE2;&#x5199;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;PRH&#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x3084;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x304C;&#x76F4;&#x63A5;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x3068;&#x816B;&#x760D;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x3068;VEGF&#x3068;VEGF&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x5909;&#x8ABF;&#x304C;PRH&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x305D;&#x306E;&#x200B;&#x200B;&#x885D;&#x7A81;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;PRH&#x306F;&#x3001;VEGF&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;PRH&#x304C;&#x816B;&#x760D;&#x3068;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x8A18;&#x8FF0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

PRH / Hhex&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x5897;&#x6B96;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x5EA7;&#x6A19;&#x8EE2;&#x5199;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;

&#xD504;&#xB864;&#xB9B0; &#xBD80;&#xC720;&#xD55C; homeodomain &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (PRH) &#xBC30;&#xC544; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604; &#xC81C;&#xC5B4; &#xBC0F; &#xC131;&#xC778; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xD608;&#xAD00; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; (VEGF)&#xC740; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD;&#xACFC; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; VEGFR 1 &#xB4F1; VEGFR 2&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC0DD;&#xC874;&#xC744; &#xC790;&#xADF9; &#xD558;&#xB294; &#xBB3C;&#xC9C8;. VEGF &#xC2E0;&#xD638; &#xC911;&#xC694; &#xC2E0;&#xC0DD; &#xBC0F; &#xC870; &#xC774;&#xBA70; &#xB9CE;&#xC740; &#xC885;&#xC591;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0C1;&#xC2B9; &#xB41C; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; PRH &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC9C1;&#xC811; &#xAC01; &#xC0AC;&#xB840; PRH&#xC5D0;&#xC11C; Vegf, Vegfr 1 &#xBC0F; Vegfr-2 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xC9C0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB204;&#xB974;&#xB294; &#xD544; &#xC0AC; &#xC1FC;. Overexpression &#xB610;&#xB294; PRH&#xC758; &#xCD5C;&#xC800;&#xC758; &#xC9C1;&#xC811; leukemic &#xBAA8;&#xB450; &#xC885;&#xC591; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xADF8;&#xC758; &#xC0DD;&#xC874;&#xC5D0; impinges&#xB97C; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xBCC0;&#xC870; VEGF&#xC640; VEGF &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC2E0;&#xD638; PRH&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC911;&#xC7AC;&#xC774; &#xD6A8;&#xACFC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC785;&#xC99D; PRH VEGF &#xC2E0;&#xD638; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xD0A4; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130; &#xC774;&#xBA70;, &#xADF8;&#xAC83;&#xC5D0; &#xC758;&#xD558;&#xC5EC; PRH&#xC740; tumorigenesis&#xC640; leukemogenesis&#xC5D0;&#xC11C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560; &#xD558;&#xB294; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC124;&#xBA85;.

PRH/Hhex &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864;&#xC758; &#xD608;&#xAD00; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; &#xC2E0;&#xD638; &#xC88C;&#xD45C; transcriptional &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xC158;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC0DD;&#xC874; &#xC138;&#xD3EC;.

La prote&#xED;na homeodominio rica en prolina (PRH), desempe&#xF1;a m&#xFA;ltiples funciones en el control de la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica durante el desarrollo embrionario y en el adulto. Factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) es un mit&#xF3;geno que estimula la proliferaci&#xF3;n celular y la supervivencia a trav&#xE9;s de receptores de superficie celular, incluyendo VEGFR-1 y VEGFR-2. Se&#xF1;alizaci&#xF3;n VEGF es de importancia fundamental en la angiog&#xE9;nesis y la hematopoyesis y es elevado en muchos tumores. Aqu&#xED; nos muestran que PRH se une directamente a las regiones promotoras del VEGF, VEGFR-1 y VEGFR-2 genes y que en cada caso PRH reprime la transcripci&#xF3;n. Nos demuestran que la sobreexpresi&#xF3;n o una ca&#xED;da del PRH afecta directamente a la supervivencia de ambas c&#xE9;lulas leuc&#xE9;micas y el tumor y que la modulaci&#xF3;n del VEGF y del receptor de VEGF media la se&#xF1;alizaci&#xF3;n de PRH estos efectos. Nuestros resultados demuestran que PRH es un regulador clave de la v&#xED;a de se&#xF1;alizaci&#xF3;n VEGF y describir un mecanismo por el cual PRH juega un papel importante en la tumorig&#xE9;nesis y leucemog&#xE9;nesis.

PRH / HHEX Controles de supervivencia celular a trav&#xE9;s del Reglamento de coordenadas de la transcripci&#xF3;n del factor de crecimiento endotelial vascular de se&#xF1;alizaci&#xF3;n

&#x81EA;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x86CB;&#x767D;&#x662F;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x548C;&#x7EF4;&#x6301;&#x6838;&#x7ED3;&#x6784;&#x548C;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x8C03;&#x63A7;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4EE5;&#x524D;&#x6240;&#x793A;&#x81EA;&#x4EA7;&#x8FD9;&#x79CD;&#x5BCC;&#x542B;&#x812F;&#x6C28;&#x9178;&#x7684; Homeodomain &#x86CB;&#x767D; (&#x516C;/&#x5341;&#x516D;&#x8FDB;&#x5236;) &#x5F62;&#x6210;&#x5C06;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x6570;&#x7EC4;&#x7684;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x4E0E;&#x9AD8;&#x4EB2;&#x548C;&#x529B;&#x548C;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x7ED3;&#x5408;&#x4F4D;&#x70B9;&#x7684;&#x5BE1;&#x805A;&#x7269;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4E5F;&#x5DF2;&#x8868;&#x660E;&#x8BB8;&#x591A;&#x516C;&#x5C4B;&#x76EE;&#x6807;&#x57FA;&#x56E0;&#x5305;&#x542B;&#x5141;&#x8BB8;&#x8FD9;&#x79CD;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x80FD;&#x591F;&#x7ED1;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x5E76;&#x8C03;&#x8282;&#x8F6C;&#x5F55;&#x7684;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x7F51;&#x7AD9;&#x7684;&#x9002;&#x5F53;&#x95F4;&#x9694;&#x7684;&#x9635;&#x5217;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x5206;&#x6790;&#x8D85;&#x901F;&#x79BB;&#x5FC3;&#x6CD5;&#x548C;&#x7535;&#x5B50;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x6765;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x63CF;&#x8FF0;&#x516C;&#x5C4B;&#x4F4E;&#x805A;&#x7269;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x6280;&#x672F;&#x6765;&#x663E;&#x793A;&#x7684;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x7684;&#x4F4E;&#x805A;&#x7269;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x957F;&#x9AD8;&#x6709;&#x5E8F;&#x7684;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x96C6;&#x7684;&#x5F62;&#x5F0F;&#x5411; self-associate DNA &#x7247;&#x6BB5;&#x3002;&#x7535;&#x5B50;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x548C;&#x7EBF;&#x6027;&#x4E8C;&#x8272;&#x63ED;&#x793A;&#x516C;&#x5C4B;&#x4F4E;&#x805A;&#x7269;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5F62;&#x6210; DNA-&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EA4;&#x7EF4;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E14;&#x80FD;&#x591F;&#x7D27;&#x51D1; DNA &#x4E2D;&#x7684;&#x5176;&#x4ED6;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6CA1;&#x6709;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x660E; DNA &#x538B;&#x5B9E;&#x662F;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x591F;&#x7684;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x76EE;&#x6807;&#x57FA;&#x56E0;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x9547;&#x538B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x65AD;&#x5B9A; DNA &#x538B;&#x5B9E;&#x662F;&#x5927;&#x578B;&#x516C;&#x5C4B;&#x9F50;&#x805A;&#x7269;&#x5230;&#x9635;&#x5217;&#x7684;&#x7ED3;&#x5408;&#x4F4D;&#x70B9;&#x7684;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7684;&#x540E;&#x679C;&#x800C;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;&#x529F;&#x80FD;&#x4E0A;&#x548C;&#x7ED3;&#x6784;&#x4E0A;&#x4E0E;&#x6709;&#x5173;&#x7684;&#x86CB;&#x767D; Lrp/AsnC &#x5BB6;&#x5EAD;&#x4ECE;&#x7EC6;&#x83CC;&#x548C;&#x53E4;&#x7EC6;&#x83CC;&#xFF0C;&#x539F;&#x6765;&#x88AB;&#x65E0;&#x771F;&#x6838;&#x5F53;&#x91CF;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x3002;

DNA &#x538B;&#x5B9E;&#x7684;&#x9AD8;&#x9636;&#x5927;&#x4F1A;&#x7684;&#x79DF;&#x4F4F;&#x516C;&#x5C4B;/&#x5341;&#x516D;&#x8FDB;&#x5236; homeodomain &#x86CB;&#x767D;&#x4F4E;&#x805A;&#x7269;&#x3002;

Protein self-organization is essential for the establishment and maintenance of nuclear architecture and for the regulation of gene expression. We have shown previously that the Proline-Rich Homeodomain protein (PRH/Hex) self-assembles to form oligomeric complexes that bind to arrays of PRH binding sites with high affinity and specificity. We have also shown that many PRH target genes contain suitably spaced arrays of PRH sites that allow this protein to bind and regulate transcription. Here, we use analytical ultracentrifugation and electron microscopy to further characterize PRH oligomers. We use the same techniques to show that PRH oligomers bound to long DNA fragments self-associate to form highly ordered assemblies. Electron microscopy and linear dichroism reveal that PRH oligomers can form protein-DNA fibres and that PRH is able to compact DNA in the absence of other proteins. Finally, we show that DNA compaction is not sufficient for the repression of PRH target genes in cells. We conclude that DNA compaction is a consequence of the binding of large PRH oligomers to arrays of binding sites and that PRH is functionally and structurally related to the Lrp/AsnC family of proteins from bacteria and archaea, a group of proteins formerly thought to be without eukaryotic equivalents.

DNA compaction by the higher-order assembly of PRH/Hex homeodomain protein oligomers.

Prot&#xE9;ines d&#x26;#39;auto-organisation est essentielle pour l&#x26;#39;&#xE9;tablissement et le maintien de l&#x26;#39;architecture nucl&#xE9;aire et pour la r&#xE9;gulation de l&#x26;#39;expression g&#xE9;nique. Nous avons montr&#xE9; pr&#xE9;c&#xE9;demment que la prot&#xE9;ine &#xE0; hom&#xE9;odomaine riche en proline (PRH / Hex) s&#x26;#39;auto-assemble pour former des complexes oligom&#xE9;riques qui se lient &#xE0; des tableaux de PRH sites de liaison ayant une affinit&#xE9; et une sp&#xE9;cificit&#xE9; &#xE9;lev&#xE9;es. Nous avons &#xE9;galement montr&#xE9; que de nombreux g&#xE8;nes cibles PRH contenir des tableaux convenablement espac&#xE9;es de sites PRH qui permettent cette prot&#xE9;ine de se lier et de r&#xE9;guler la transcription. Ici, nous utilisons ultracentrifugation analytique et la microscopie &#xE9;lectronique pour caract&#xE9;riser davantage oligom&#xE8;res PRH. Nous utilisons les m&#xEA;mes techniques pour montrer que les oligom&#xE8;res PRH li&#xE9;s &#xE0; l&#x26;#39;ADN longs fragments d&#x26;#39;auto-associ&#xE9; pour former des ensembles hautement ordonn&#xE9;s. Microscopie &#xE9;lectronique et dichro&#xEF;sme lin&#xE9;aire r&#xE9;v&#xE8;le que les oligom&#xE8;res PRH peut former prot&#xE9;ine-ADN fibres et que PRH est capable d&#x26;#39;ADN compacte en l&#x26;#39;absence d&#x26;#39;autres prot&#xE9;ines. Enfin, nous montrons que compaction de l&#x26;#39;ADN n&#x26;#39;est pas suffisante pour la r&#xE9;pression des g&#xE8;nes cibles PRH dans les cellules. Nous concluons que compaction de l&#x26;#39;ADN est une cons&#xE9;quence de la fixation des grandes oligom&#xE8;res PRH &#xE0; des r&#xE9;seaux de sites de liaison et que PRH est fonctionnellement et structurellement li&#xE9;es &#xE0; la famille LRP / AESN de prot&#xE9;ines &#xE0; partir des bact&#xE9;ries et des arch&#xE9;es, un groupe de prot&#xE9;ines autrefois consid&#xE9;r&#xE9; comme sans &#xE9;quivalents eucaryotes.

Compaction de l&#x26;#39;ADN par l&#x26;#39;Assembl&#xE9;e d&#x26;#39;ordre sup&#xE9;rieur de PRH / Hex oligom&#xE8;res prot&#xE9;ine &#xE0; hom&#xE9;odomaine

Protein Selbstorganisation ist unerl&auml;sslich f&uuml;r die Einrichtung und Unterhaltung der nuklearen Architektur und f&uuml;r die Regulierung der Genexpression. Wir haben bereits gezeigt, dass das Proline-Rich Hom&ouml;odom&auml;ne-Protein (PRH/Hex) self-assembles um Oligomere komplexe bilden, die Arrays von PRH Bindungsstellen mit hoher Affinit&auml;t und Spezifit&auml;t binden. Wir haben auch gezeigt, dass viele PRH Zielgene entsprechend angeordnete Arrays PRH-Sites enthalten, die es erm&ouml;glichen dieses Protein binden und die Transkription zu regulieren. Hier verwenden wir analytische Ultrazentrifugation und Elektronenmikroskopie, um PRH Oligomere weiter zu charakterisieren. Wir verwenden die gleichen Techniken um zu zeigen, dass lange DNA-Fragmente self-associate Formular hoch bestellt Assemblys PRH Oligomere gebunden. Elektronenmikroskopie und linearen Dichroismus zeigen, dass PRH Oligomere Protein-DNA Fasern bilden k&ouml;nnen und dass PRH DNA in Ermangelung anderer Proteine komprimieren kann. Schlie&szlig;lich zeigen wir, dass DNA-Verdichtung f&uuml;r die Unterdr&uuml;ckung der PRH Zielgene in Zellen nicht ausreicht. Wir folgern, dass DNA-Verdichtung eine Folge der Bindung von gro&szlig;en PRH Oligomeren Arrays verbindliche Aufstellungsorte und dass PRH funktionell und strukturell die Lrp/AsnC-Familie der Proteine aus Bakterien und Archaeen, einer Gruppe von Proteinen, die fr&uuml;her angenommen, dass ohne eukaryotischen Entsprechungen zusammenh&auml;ngt.

DNA-Verdichtung von der &uuml;bergeordneten Baugruppe von PRH/Hex Hom&ouml;odom&auml;ne Protein Oligomeren.

Auto-organizzazione della proteina &egrave; essenziale per la creazione e la manutenzione dell&#39;architettura nucleare e per la regolazione dell&#39;espressione genica. In precedenza abbiamo dimostrato che la proteina Homeodomain Proline-Rich (PRH/Hex) self-assembles per formare complessi oligomerici che si legano alle matrici di siti leganti PRH con alta affinit&agrave; e specificit&agrave;. Abbiamo anche dimostrato che molti geni bersaglio PRH contengono matrici opportunamente distanziati di siti PRH che permettono questa proteina di legare e regolare la trascrizione. Qui, usiamo ultracentrifugazione analitica e la microscopia elettronica per caratterizzare ulteriormente gli oligomeri PRH. Utilizziamo le stesse tecniche per mostrare che gli oligomeri PRH associata a lunghi frammenti di DNA self-associate in forma altamente ordinato gli assembly. Microscopia elettronica e dicroismo lineare rivelano che gli oligomeri PRH possono formare fibre proteina-DNA e che PRH &egrave; in grado di compattare il DNA in assenza di altre proteine. Infine, ci mostrano che la compattazione del DNA non &egrave; sufficiente per la repressione dei geni bersaglio PRH nelle cellule. Concludiamo che compattazione del DNA &egrave; una conseguenza dell&#39;associazione di oligomeri PRH grandi matrici di siti di legame e che PRH &egrave; funzionalmente e strutturalmente correlati alla famiglia Lrp/AASN delle proteine da batteri e archaea, un gruppo di proteine precedentemente pensato per essere senza equivalenti negli eucarioti.

Compattazione del DNA da parte dell&#39;Assemblea di ordine superiore di oligomeri PRH/Hex homeodomain protein.

&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x81EA;&#x5DF1;&#x7D44;&#x7E54;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x6838;&#x306E;&#x30A2;&#x30FC;&#x30AD;&#x30C6;&#x30AF;&#x30C1;&#x30E3;&#x306E;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3068;&#x7DAD;&#x6301;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C1;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;PRH /&#x30D8;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#xFF09;&#x306F;&#x9AD8;&#x3044;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x3068;&#x7279;&#x7570;&#x6027;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;PRH&#x7D50;&#x5408;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;&#x914D;&#x5217;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x81EA;&#x5DF1;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EB;&#x3059;&#x308B;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;PRH&#x306E;&#x6A19;&#x7684;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x3053;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x304C;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x3001;&#x8EE2;&#x5199;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;PRH&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306E;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x9593;&#x9694;&#x306E;&#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;PRH&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x5206;&#x6790;&#x8D85;&#x9060;&#x5FC3;&#x5206;&#x96E2;&#x3068;&#x96FB;&#x5B50;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;PRH&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x306F;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x306B;&#x200B;&#x200B;&#x79E9;&#x5E8F;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x81EA;&#x5DF1;&#x4F1A;&#x5408;&#x9577;&#x3044;DNA&#x65AD;&#x7247;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x540C;&#x3058;&#x30C6;&#x30AF;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x96FB;&#x5B50;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7DDA;&#x5F62;&#x4E8C;&#x8272;&#x6027;&#x306F;&#x3001;PRH&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;-DNA&#x7E4A;&#x7DAD;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;PRH&#x306F;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x975E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x30C8;&#x306A;DNA&#x306B;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;DNA&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;PRH&#x6A19;&#x7684;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5341;&#x5206;&#x3067;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;DNA&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x7D50;&#x5408;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;&#x914D;&#x5217;&#x306B;&#x5927;&#x304D;&#x306A;PRH&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x305D;&#x306E;PRH&#x306F;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x69CB;&#x9020;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x30D0;&#x30AF;&#x30C6;&#x30EA;&#x30A2;&#x3084;&#x53E4;&#x7D30;&#x83CC;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;LRP / AsnC&#x5BB6;&#x65CF;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x7D50;&#x8AD6;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306F;&#x3001;&#x4EE5;&#x524D;&#x306F;&#x306A;&#x3057;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x3068;&#x540C;&#x7B49;&#x3002;

PRH /&#x516D;&#x89D2;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x306E;&#x9AD8;&#x6B21;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x306B;&#x3088;&#x308B;DNA&#x30B3;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;

&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC790;&#xAE30; &#xC124;&#xB9BD; &#xBC0F; &#xD575; &#xC544;&#xD0A4;&#xD14D;&#xCC98;&#xC758; &#xC720;&#xC9C0; &#xBCF4;&#xC218; &#xBC0F; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC758; &#xC870;&#xC808;&#xC5D0; &#xD544;&#xC218;&#xC801; &#xC774;&#xB2E4;. &#xD504;&#xB864;&#xB9B0; &#xBD80;&#xC720;&#xD55C; Homeodomain &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (PRH/16 &#xC9C4;&#xC218;) oligomeric &#xB2E8;&#xC9C0; &#xB192;&#xC740; &#xCE5C; &#xD654;&#xB825; &#xBC0F; &#xD2B9;&#xC774;&#xC131; PRH &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC758; &#xBC30;&#xC5F4;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xB294; &#xD615;&#xC131; self-assembles &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC8FC;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB610;&#xD55C; &#xB9CE;&#xC740; PRH &#xB300;&#xC0C1; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xACE0; &#xC804;&#xC0AC; &#xC870;&#xC808;&#xC774; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC774; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; PRH &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC758; &#xC801;&#xB2F9; &#xD55C; &#xAC04;&#xACA9;&#xB41C; &#xBC30;&#xC5F4; &#xD3EC;&#xD568; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; PRH &#xC62C;&#xB9AC;&#xACE0; &#xCD94;&#xAC00;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBD84;&#xC11D; ultracentrifugation &#xBC0F; &#xC804;&#xC790; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9;. &#xC6B0;&#xB9AC; PRH &#xC62C;&#xB9AC;&#xACE0; &#xAE34; DNA &#xC870;&#xAC01; &#xC591;&#xC2DD;&#xC5D0; &#xB192;&#xC740; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC; &#xBA85;&#xB839; self-associate&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xAC19;&#xC740; &#xAE30;&#xBC95;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC804;&#xC790; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95; &#xBC0F; &#xC120;&#xD615; &#x9EC4; PRH &#xC62C;&#xB9AC;&#xACE0; DNA &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC12C;&#xC720;&#xB97C; &#xD615;&#xC131;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC73C;&#xBA70; PRH &#xB2E4;&#xB978; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xACB0;&#xD54D;&#xC5D0;&#xC11C; DNA&#xB97C; &#xC555;&#xCD95; &#xC218; &#xACF5;&#xAC1C;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; DNA &#xC555;&#xCD95; &#xC140;&#xC5D0; PRH &#xB300;&#xC0C1; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBD80;&#xC871; &#xD55C; &#xAC83;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; DNA &#xC555;&#xCD95;&#xC740; &#xB300;&#xD615; PRH &#xC62C;&#xB9AC;&#xACE0; &#xBC30;&#xC5F4; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC758; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xACB0;&#xACFC; PRH&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD00;&#xB828; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; Lrp/AsnC &#xC81C;&#xD488;&#xAD70;&#xC5D0; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xC640; &#xACE0;&#xC138;&#xADE0;, &#xC774;&#xC804; &#xC9C4; &#xD575;&#xC5D0; &#xC0C1;&#xC751; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xACE0; &#xB420; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0DD;&#xAC01; &#xD558;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACB0;&#xB860;.

PRH/16 &#xC9C4;&#xC218; homeodomain &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC62C;&#xB9AC;&#xACE0; DNA &#xC21C;&#xC704;&#xAC00; &#xB192;&#xC740; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC; &#xD558; &#xC5EC; &#xC555;&#xCD95;.

La prote&#xED;na auto-organizaci&#xF3;n es esencial para el establecimiento y mantenimiento de la arquitectura nuclear y para la regulaci&#xF3;n de la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica. Hemos demostrado anteriormente que la prote&#xED;na Homeodominio Proline-Rico (PRH / Hex) se auto-ensambla para formar complejos oligom&#xE9;ricos que se unen a las matrices de PRH sitios de uni&#xF3;n con alta afinidad y especificidad. Tambi&#xE9;n hemos mostrado que muchos genes diana PRH contener matrices convenientemente espaciados de los sitios que permiten PRH esta prote&#xED;na de atar y regular la transcripci&#xF3;n. Aqu&#xED;, nosotros usamos ultracentrifugaci&#xF3;n anal&#xED;tica y microscop&#xED;a electr&#xF3;nica para caracterizar mejor olig&#xF3;meros PRH. Nosotros usamos las mismas t&#xE9;cnicas para mostrar que los olig&#xF3;meros de PRH con destino a la larga de ADN se fragmenta la auto-se asocian para formar conjuntos altamente ordenados. La microscop&#xED;a electr&#xF3;nica y dicro&#xED;smo lineal revelan que los olig&#xF3;meros PRH puede formar prote&#xED;nas de ADN y las fibras que PRH es capaz de ADN compacto en ausencia de otras prote&#xED;nas. Finalmente, mostramos que la compactaci&#xF3;n del ADN no es suficiente para la represi&#xF3;n de los genes diana en las c&#xE9;lulas del PRH. Se concluye que la compactaci&#xF3;n del ADN es una consecuencia de la uni&#xF3;n de grandes olig&#xF3;meros PRH a las matrices de los sitios de uni&#xF3;n y que se PRH funcional y estructuralmente relacionados con la familia Lrp / ASNC de prote&#xED;nas de bacterias y arqueas, un grupo de prote&#xED;nas anteriormente cree que sin equivalentes eucari&#xF3;ticas.

Article	Year
The transcriptional repressor protein PRH interacts with the proteasome. The Biochemical journal\| PubMed ID: 12826010	2003
The proline-rich homeodomain protein recruits members of the Groucho/Transducin-like enhancer of split protein family to co-repress transcription in hematopoietic cells. The Journal of biological chemistry\| PubMed ID: 15187083	2004
Purification and characterisation of the PRH homeodomain: Removal of the N-terminal domain of PRH increases the PRH homeodomain-DNA interaction. International journal of biological macromolecules\| PubMed ID: 16494938	2006
Oligomerisation of the developmental regulator proline rich homeodomain (PRH/Hex) is mediated by a novel proline-rich dimerisation domain. Journal of molecular biology\| PubMed ID: 16540119	2006
PRH/Hex: an oligomeric transcription factor and multifunctional regulator of cell fate. The Biochemical journal\| PubMed ID: 18498250	2008
The PRH/Hex repressor protein causes nuclear retention of Groucho/TLE co-repressors. The Biochemical journal\| PubMed ID: 18713067	2009
DNA wrapping and distortion by an oligomeric homeodomain protein. Journal of molecular biology\| PubMed ID: 18755198	2008
CK2 phosphorylation of the PRH/Hex homeodomain functions as a reversible switch for DNA binding. Nucleic acids research\| PubMed ID: 19324893	2009
Activation of proteinase-activated receptor 2 stimulates soluble vascular endothelial growth factor receptor 1 release via epidermal growth factor receptor transactivation in endothelial cel... Hypertension\| PubMed ID: 20124108	2010
PRH/Hhex controls cell survival through coordinate transcriptional regulation of vascular endothelial growth factor signaling. Molecular and cellular biology\| PubMed ID: 20176809	2010
DNA compaction by the higher-order assembly of PRH/Hex homeodomain protein oligomers. Nucleic acids research\| PubMed ID: 20675722	2010

Padma-Sheela Jayaraman

Biography

JoVE Journal Publications

Other Publications