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Preparation of <em>Drosophila</em> S2 cells for Light Microscopy

The ideal experimental system would be cheap and easy to maintain, amenable to a variety of techniques, and would be supported by an extensive literature ...

University of Arizona (UOA)

EB1 &#x662F;&#x8FDB;&#x5316;&#x4FDD;&#x6301;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x52A0;&#x4E0A;&#x7AEF;&#x70B9;&#x4E0A;&#x65E5;&#x76CA;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x7684;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x3002;&#x5728;&#x9175;&#x6BCD;&#xFF0C;EB1 &#x540C;&#x7CFB;&#x7269; (BIM1) &#x5DF2;&#x88AB;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x8C03;&#x5236;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x548C;&#x94FE;&#x63A5;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x5411;&#x76AE;&#x5C42;&#xFF0C;&#x4F46;&#x540E;&#x751F; EB1 &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x4ECD;&#x7136;&#x672A;&#x77E5;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x65B0;&#x578B;&#x5236;&#x5907;&#x7684;&#x679C;&#x8747; S2 &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x884C;&#x7684;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9644;&#x7740;&#x548C;&#x8513;&#x5EF6;&#xFF0C;&#x53EF;&#x89C6;&#x5316;&#x5B9E;&#x65F6;&#x5FAE;&#x5355;&#x7BA1;&#x7684;&#x52A8;&#x6001;&#xFF0C;&#x53D1;&#x73B0; EB1 &#x95F4;&#x671F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684; RNA &#x4ECB;&#x5BFC;&#x6291;&#x5236; &#xFF08;RNAi&#xFF09; &#x6D88;&#x8017;&#x6025;&#x5267;&#x589E;&#x52A0;&#x5BFC;&#x81F4;&#x975E;&#x52A8;&#x6001;&#x5FAE;&#x7BA1; (&#x589E;&#x957F;&#x65E2;&#x6536;&#x7F29;&#xFF09;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x6539;&#x53D8;&#x6574;&#x4F53;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x5728;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x51E0;&#x4E2A;&#x7F3A;&#x9677; RNAi &#x6CBB;&#x7597;&#x7684;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x5927;&#x5E45;&#x524A;&#x51CF;&#x4E2D;&#x661F;&#x4F53;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x3001; &#x683C;&#x5F0F;&#x4E0D;&#x6B63;&#x786E;&#x7684;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x7EBA;&#x9524;&#x3001; &#x6563;&#x7126;&#x7684;&#x4E3B;&#x8F74;&#x7535;&#x6746;&#x548C; mispositioning &#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x8F74;&#x4E2D;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x3002;&#x5728;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x7EBA;&#x9524;&#x4F53;&#x88AB;&#x5FAE;&#x91CF;&#x6CE8;&#x5C04;&#x6297; EB1 &#x6297;&#x4F53;&#x7684;&#x679C;&#x8747;&#x80DA;&#x80CE;&#x4E2D;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x8868;&#x578B;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x5C45;&#x4F4F;&#x5728;&#x679C;&#x8747;&#x80DA;&#x80CE;&#x63ED;&#x793A;&#x4E86;&#x6709;&#x7F3A;&#x9677;&#x7684;&#x4E3B;&#x8F74;&#x65AD;&#x88C2;&#x4F38;&#x957F;&#x7387;&#x548C;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x5206;&#x79BB;&#x540E;&#x671F;&#x6297;&#x4F53;&#x6CE8;&#x5C04;&#x540E;&#x7684;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6210;&#x50CF;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x6211;&#x4EEC;&#x5047;&#x5B9A;&#x6D89;&#x53CA;&#x5176;&#x80FD;&#x529B;&#x4EE5;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x589E;&#x957F;&#x548C;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x5185;&#x4E2D;&#x592E;&#x4E3B;&#x8F74;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x76AE;&#x5C42;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x4E3A; EB1 &#x5C55;&#x73B0;&#x4E86;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x679C;&#x8747; EB1 &#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#x4E3B;&#x8F74;&#x7684;&#x6B63;&#x786E;&#x7684;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x96C6;&#x3001; &#x52A8;&#x6001;&#x548C;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x7684;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x3002;

EB1 is an evolutionarily conserved protein that localizes to the plus ends of growing microtubules. In yeast, the EB1 homologue (BIM1) has been shown to modulate microtubule dynamics and link microtubules to the cortex, but the functions of metazoan EB1 proteins remain unknown. Using a novel preparation of the Drosophila S2 cell line that promotes cell attachment and spreading, we visualized dynamics of single microtubules in real time and found that depletion of EB1 by RNA-mediated inhibition (RNAi) in interphase cells causes a dramatic increase in nondynamic microtubules (neither growing nor shrinking), but does not alter overall microtubule organization. In contrast, several defects in microtubule organization are observed in RNAi-treated mitotic cells, including a drastic reduction in astral microtubules, malformed mitotic spindles, defocused spindle poles, and mispositioning of spindles away from the cell center. Similar phenotypes were observed in mitotic spindles of Drosophila embryos that were microinjected with anti-EB1 antibodies. In addition, live cell imaging of mitosis in Drosophila embryos reveals defective spindle elongation and chromosomal segregation during anaphase after antibody injection. Our results reveal crucial roles for EB1 in mitosis, which we postulate involves its ability to promote the growth and interactions of microtubules within the central spindle and at the cell cortex.

Drosophila EB1 is important for proper assembly, dynamics, and positioning of the mitotic spindle.

EB1 est une prot&#xE9;ine conserv&#xE9;e &#xE9;volutivement qui localise aux extr&#xE9;mit&#xE9;s ainsi que des microtubules en croissance. Chez la levure, l&#x26;#39;homologue EB1 (Bim1) a &#xE9;t&#xE9; montr&#xE9; pour moduler la dynamique des microtubules et des microtubules lien vers le cortex, mais les fonctions de m&#xE9;tazoaires EB1 prot&#xE9;ines reste inconnue. En utilisant une pr&#xE9;paration roman de la ligne de drosophile S2 cellule qui favorise la fixation des cellules et la diffusion, nous avons visualis&#xE9; la dynamique des microtubules simples en temps r&#xE9;el et constat&#xE9; que l&#x26;#39;appauvrissement de la EB1 par l&#x26;#39;ARN-inhibition (ARNi) dans les cellules en interphase provoque une augmentation spectaculaire dans les microtubules non dynamiques (n&#x26;#39;augmentant ni ne diminuant), mais ne modifie pas l&#x26;#39;organisation des microtubules dans son ensemble. En revanche, plusieurs d&#xE9;fauts dans l&#x26;#39;organisation des microtubules sont observ&#xE9;s dans les cellules mitotiques ARNi-trait&#xE9;s, y compris une r&#xE9;duction drastique des microtubules astraux, mitotique malform&#xE9; broches, p&#xF4;les du fuseau defocused, et mauvais positionnement de broches loin de la centre de la cellule. Ph&#xE9;notypes similaires ont &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9;s dans les fuseaux mitotiques des embryons de drosophile qui ont &#xE9;t&#xE9; micro-inject&#xE9; avec anti-EB1 anticorps. En outre, l&#x26;#39;imagerie des cellules vivantes de la mitose dans les embryons de drosophile r&#xE9;v&#xE8;le d&#xE9;fectueuse allongement de la broche et la s&#xE9;gr&#xE9;gation des chromosomes lors de l&#x26;#39;anaphase apr&#xE8;s l&#x26;#39;injection d&#x26;#39;anticorps. Nos r&#xE9;sultats r&#xE9;v&#xE8;lent un r&#xF4;le crucial pour EB1 dans la mitose, qui nous postulons implique sa capacit&#xE9; &#xE0; promouvoir la croissance et les interactions des microtubules dans l&#x26;#39;axe central et au niveau du cortex cellulaire.

Drosophila EB1 est importante pour l&#x26;#39;Assembl&#xE9;e correcte, dynamique, et le positionnement du fuseau mitotique

Drosophila EB1 ist f&#xFC;r die ordnungsgem&#xE4;&#xDF;e Montage, Dynamik und Positionierung der mitotischen Spindel wichtig.

EB1 &egrave; una proteina evolutivamente conservata che si localizza alle estremit&agrave; plus dei microtubuli in crescita. In lievito, l&#39;omologo EB1 (BIM1) ha dimostrato di modulare dei microtubuli dinamiche e collegamento microtubule alla corteccia, ma le funzioni delle proteine EB1 metazoi rimangono sconosciute. Utilizzando una romanzo preparazione della linea cellulare della drosofila S2 che promuove la cella attaccamento e diffusione, abbiamo visualizzato dinamiche dei microtubuli singoli in tempo reale e trovato che la deplezione di EB1 di inibizione mediata da RNA (RNAi) nelle cellule in interfase provoca un aumento drammatico nei microtubuli non dinamici (n&eacute; in crescita n&eacute; contrazione), ma non altera l&#39;organizzazione complessiva dei microtubuli. Al contrario, diversi difetti nell&#39;organizzazione dei microtubuli sono osservati nelle cellule mitotic RNAi-trattati, tra cui una drastica riduzione nei microtubuli astrali, malformati fusi mitotici, mandrino defocused polacchi e mispositioning di fusi dal centro della cellula. Fenotipi simili sono stati osservati in fusi mitotici degli embrioni di Drosophila che erano microinjected con anticorpi anti-EB1. Inoltre, live imaging cellulare mitosi in drosofila embrioni rivela mandrino difettoso allungamento e segregazione cromosomica durante l&#39;anafase dopo iniezione di anticorpi. I nostri risultati rivelano ruoli cruciali per EB1 in mitosi, che abbiamo postulato implica la sua capacit&agrave; di promuovere la crescita e le interazioni dei microtubuli all&#39;interno del mandrino centrale e presso la corteccia cellulare.

Drosofila EB1 &egrave; importante per un montaggio corretto, dinamiche e posizionamento del fuso mitotico.

EB1&#x306F;&#x6210;&#x9577;&#x3057;&#x3001;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x7AEF;&#x306B;&#x5C40;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x9032;&#x5316;&#x7684;&#x306B;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x9175;&#x6BCD;&#x3067;&#x306F;&#x3001;EB1&#x306E;&#x30DB;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B0;&#xFF08;BIM1&#xFF09;&#x306F;&#x76AE;&#x8CEA;&#x306B;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x3068;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x5F8C;&#x751F;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;EB1&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x63A5;&#x7740;&#x3068;&#x62E1;&#x6563;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;S2&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x306E;&#x65B0;&#x898F;&#x4F5C;&#x6210;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30EA;&#x30A2;&#x30EB;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0;&#x3067;&#x5358;&#x4E00;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x3092;&#x53EF;&#x8996;&#x5316;&#x3057;&#x3001;&#x9593;&#x671F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;RNA-&#x5A92;&#x4ECB;&#x963B;&#x5BB3;&#xFF08;RNAi&#xFF09;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;EB1&#x306E;&#x305D;&#x306E;&#x67AF;&#x6E07;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x975E;&#x52D5;&#x7684;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x5287;&#x7684;&#x306A;&#x5897;&#x52A0;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#xFF08;&#x6210;&#x9577;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x3082;&#x7E2E;&#x5C0F;&#x3082;&#xFF09;&#x304C;&#x3001;&#x5168;&#x4F53;&#x7684;&#x306A;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x5185;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x306F;&#x3001;&#x661F;&#x72B6;&#x4F53;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x5927;&#x5E45;&#x524A;&#x6E1B;&#x306A;&#x3069;&#x306E;RNAi&#x51E6;&#x7406;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x5947;&#x5F62;&#x306E;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x7D21;&#x9318;&#x4F53;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x7D21;&#x9318;&#x4F53;&#x6975;&#x3092;&#x30C7;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30AB;&#x30B9;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x306E;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x305A;&#x308C;&#x96E2;&#x308C;&#x3066;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x304B;&#x3089;&#x3002;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306F;&#x3001;&#x6297;EB1&#x6297;&#x4F53;&#x3068;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B8;&#x30A7;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;&#x306E;&#x80DA;&#x306E;&#x7D21;&#x9318;&#x4F53;&#x304C;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;&#x306E;&#x80DA;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x306E;&#x751F;&#x7D30;&#x80DE;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x200B;&#x200B;&#x3001;&#x6297;&#x4F53;&#x6CE8;&#x5C04;&#x5F8C;&#x306E;&#x5F8C;&#x671F;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x6B20;&#x9665;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x7D21;&#x9318;&#x4F53;&#x306E;&#x4F38;&#x9577;&#x3068;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x5206;&#x96E2;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x6211;&#x3005;&#x304C;&#x4EEE;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;EB1&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x3001;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x4E2D;&#x592E;&#x306E;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x5185;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x5C64;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;EB1&#x306F;&#x3001;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x3001;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x7D21;&#x9318;&#x4F53;&#x306E;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x6C7A;&#x3081;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;

EB1 microtubules &#xC131;&#xC7A5;&#xC758; &#xB354;&#xD558;&#xAE30; &#xB05D; localizes &#xC9C4;&#xD654; &#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC774;&#xB2E4;. &#xD6A8; &#xBAA8;, EB1 homologue (BIM1) &#xD53C; &#xC9C8;, microtubule &#xC5ED;&#xD559; &#xBC0F; &#xB9C1;&#xD06C; microtubules &#xBCC0;&#xC870; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; metazoan EB1 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC54C; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xC720;&#xC9C0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC140; &#xCCA8;&#xBD80; &#xBC0F; &#xD655;&#xC0B0;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558;&#xB294; &#xCD08;&#xD30C;&#xB9AC; S2 &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778;&#xC758; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC900;&#xBE44;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC2E4;&#xC2DC;&#xAC04;&#xC73C;&#xB85C; &#xB2E8;&#xC77C; microtubules&#xC758; &#xC5ED;&#xD559; &#xAD00;&#xACC4;&#xB97C; &#xC2DC;&#xAC01;&#xD654; &#xD558; &#xACE0; RNA &#xC911;&#xC7AC; (RNAi) &#xC800;&#xD574; &#xACC4;&#xBA74; &#xC140;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; eb1&#xC758; &#xACE0;&#xAC08; (&#xC131;&#xC7A5; &#xD558; &#xACE0;&#xB3C4; &#xCD95;&#xC18C;), &#xBE44;&#xB3D9;&#xC801; microtubules&#xC5D0; &#xADF9;&#xC801;&#xC778; &#xC99D;&#xAC00; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC804;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; microtubule &#xC870;&#xC9C1; &#xBCC0;&#xACBD; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xBC18;&#xBA74;, microtubule &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xACB0;&#xD568; RNAi &#xCDE8;&#xAE09; mitotic &#xC140;, &#xC544; &#xC2A4; &#xD2B8; &#xB784; microtubules, &#xC798;&#xBABB; mitotic &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4;, defocused &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; &#xAE30;&#xB465; &#xBC0F; mispositioning &#xC140; &#xC911;&#xC2EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4;&#xC758; &#xAE09;&#xACA9; &#xD55C; &#xAC10;&#xC18C; &#xB4F1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xACE0;&#xAE30; &#xC548;&#xD2F0; EB1 &#xD56D; &#xCCB4;&#xC640; microinjected &#xD588;&#xB2E4; &#xCD08;&#xD30C;&#xB9AC; &#xBC30;&#xC544;&#xC758; mitotic &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC140; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xCD08;&#xD30C;&#xB9AC; &#xBC30;&#xC544; &#xBC1D;&#xD600; &#xACB0;&#xD568;&#xC774; &#xC788;&#xB294; &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; &#xC5F0;&#xC2E0; &#xC728;&#xACFC; &#xD56D; &#xCCB4; &#xC8FC;&#xC0AC; &#xD6C4; anaphase &#xB3D9;&#xC548; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xBD84;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xC720;&#xC0AC; &#xBD84;&#xC5F4;&#xC758;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; EB1 &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xACF5;&#xC900; &#xC131;&#xC7A5;&#xACFC; microtubules &#xC911;&#xC559; &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; &#xB0B4; &#xACE0; &#xC140; &#xD53C; &#xC9C8;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xC720;&#xC0AC; &#xBD84;&#xC5F4;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560; &#xACF5;&#xAC1C;.

Drosophila EB1 &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC;, &#xC5ED;&#xD559;, &#xBC0F; mitotic &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4;&#xC758; &#xC704;&#xCE58;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD558;&#xB2E4;.

EB1 es una prote&#xED;na conservada evolutivamente que se localiza en el extremo positivo de microt&#xFA;bulos en crecimiento. En la levadura, el hom&#xF3;logo EB1 (BIM1) se ha demostrado que modulan la din&#xE1;mica de los microt&#xFA;bulos y los microt&#xFA;bulos enlace a la corteza, pero las funciones de los metazoos EB1 prote&#xED;nas sigue siendo desconocido. Usando una nueva preparaci&#xF3;n de la l&#xED;nea celular de Drosophila S2 que promueve la adhesi&#xF3;n celular y la propagaci&#xF3;n, que visualiza la din&#xE1;mica de los microt&#xFA;bulos individuales en tiempo real y se encontr&#xF3; que el agotamiento de EB1 por ARN mediada por la inhibici&#xF3;n (RNAi) en c&#xE9;lulas de interfase provoca un aumento espectacular en los microt&#xFA;bulos no din&#xE1;micas (ni crecimiento ni contracci&#xF3;n), pero no altera la organizaci&#xF3;n global de microt&#xFA;bulos. En contraste, varios defectos en la organizaci&#xF3;n de los microt&#xFA;bulos se observan en las c&#xE9;lulas mit&#xF3;ticas RNAi tratados, incluyendo una dr&#xE1;stica reducci&#xF3;n de los microt&#xFA;bulos astrales, malformaciones husos mit&#xF3;ticos, desenfocado polos del huso, y mispositioning de ejes del centro de la c&#xE9;lula. Fenotipos similares se observaron en husos mit&#xF3;ticos de embriones de Drosophila que se microinyectaron con anti-anticuerpos EB1. Adem&#xE1;s, im&#xE1;genes de c&#xE9;lulas vivas de la mitosis en embriones de Drosophila revela defectuosa alargamiento del husillo y la segregaci&#xF3;n cromos&#xF3;mica durante la anafase despu&#xE9;s de la inyecci&#xF3;n de anticuerpos. Nuestros resultados revelan un papel crucial para la EB1 en la mitosis, lo que postulamos implica su capacidad para promover el crecimiento y la interacci&#xF3;n de los microt&#xFA;bulos en el huso central y en la corteza celular.

EB1 Drosophila es importante para la Asamblea adecuada, din&#xE1;mica y posicionamiento del huso mit&#xF3;tico

&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x9700;&#x8981;&#x534F;&#x8C03;&#x4E00;&#x81F4;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7684;&#x591A;&#x4E2A;&#x5FAE;&#x7BA1; (MT)-&#x57FA;&#x4E8E;&#x9A6C;&#x8FBE;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BA1;&#x67E5;&#x7684; chromokinesin&#xFF0C;KLP3A&#xFF0C;&#x5728;&#x679C;&#x8747;&#x80DA;&#x80CE;&#x548C; S2 &#x7EC6;&#x80DE;&#x7EBA;&#x9524;&#x5F62;&#x6001;&#x548C;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x8FD0;&#x52A8;&#x7684;&#x8D21;&#x732E;&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x8367;&#x5149;&#xFF0C;KLP3A &#x5C06;&#x4E0E;&#x975E;&#x7EA4; punctae&#xFF0C;&#x96C6;&#x4E2D;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x5E76;&#x663E;&#x793A;&#x952D;&#x5C71;&#x4F9D;&#x8D56;&#x5173;&#x8054;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B; punctae &#x7CBE;&#x77FF;&#x6A21;&#x7CCA;&#x4E0E;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x548C;&#x4E2D;&#x592E;&#x4E3B;&#x8F74;&#x548C;&#x7A97;&#x4F53;&#x4E0D;&#x540C;&#x4E50;&#x961F;&#x4E0E;&#x7EC8;&#x672B;&#x671F; midbodies &#x5173;&#x8054;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x57DF;&#x4E2D;&#x3002;KLP3A &#x7531;&#x6297;&#x4F53;&#x6216;&#x663E;&#x6027;&#x8D1F;&#x86CB;&#x767D;&#x5728;&#x80DA;&#x80CE;&#xFF0C;&#x6216;&#x5728; S2 &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684; RNA &#x5E72;&#x6270; (RNAi) &#x529F;&#x80FD;&#x4E2D;&#x65AD;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x963B;&#x6B62;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4EA7;&#x751F;&#x7F3A;&#x9677;&#x7684;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x7684;&#x5FC3;&#x8F74;&#x3002;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x7684;&#x6D3B;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x7684;&#x5EF6;&#x65F6;&#x5171;&#x7126;&#x89C2;&#x5BDF;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E; KLP3A &#x6291;&#x5236;&#x6270;&#x4E71;&#x4E86;&#x8010; (ip) MTs &#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#xFF0C;&#x5E76;&#x751F;&#x6210;&#x77ED;&#x8F74;&#x3002;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E; KLP3A &#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x4E3B;&#x8F74;&#x6746;&#x5206;&#x79BB;&#x671F;&#x95F4;&#x7684;&#x524D;&#x4E2D;&#x671F;&#x8FC7;&#x6E21; &#xFF08;&#x5F53;&#x5B83;&#x654C;&#x89C6; Ncd&#xFF09; &#x548C;&#x540E;&#x671F; B&#x3001; A&#x3001; &#x540E;&#x671F;&#x7684;&#x67D3;&#x8272;&#x5355;&#x4F53;&#x52A8;&#x529B;&#x6B63;&#x5E38;&#x7387;&#x548C;&#x5973;&#x513F;&#x539F;&#x5B50;&#x6838;&#x5728;&#x7EC8;&#x672B;&#x671F;&#x671F;&#x95F4;&#x9002;&#x5F53;&#x7684;&#x95F4;&#x8DDD;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE; KLP3A &#x7684;&#x884C;&#x4E3A;&#x5BF9;&#x591A;&#x8FB9;&#x8D38;&#x6613;&#x4F53;&#x5236;&#x7684;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x6B66;&#x5668;&#x548C;&#x4E2D;&#x592E;&#x4E3B;&#x8F74;&#x4E0E;&#x76F8;&#x5173;&#x7EC4;&#x7EC7; ipMT &#x675F;&#xFF0C;&#x9A71;&#x52A8;&#x5668;&#x4E3B;&#x8F74;&#x6746;&#x5206;&#x79BB;&#x548C;&#x4FBF;&#x4E8E;&#x67D3;&#x8272;&#x5355;&#x4F53;&#x52A8;&#x529B;&#x3002;

Chromokinesin&#xFF0C;KLP3A&#xFF0C;&#x6F5C;&#x6C34;&#x671F;&#x95F4;&#x524D;&#x7EBA;&#x9524;&#x6781;&#x5206;&#x79BB;&#x548C;&#x540E;&#x671F;&#x548C;&#x4FBF;&#x4E8E;&#x67D3;&#x8272;&#x5355;&#x4F53;&#x52A8;&#x529B;&#x3002;

Mitosis requires the concerted activities of multiple microtubule (MT)-based motor proteins. Here we examined the contribution of the chromokinesin, KLP3A, to mitotic spindle morphogenesis and chromosome movements in Drosophila embryos and cultured S2 cells. By immunofluorescence, KLP3A associates with nonfibrous punctae that concentrate in nuclei and display MT-dependent associations with spindles. These punctae concentrate in indistinct domains associated with chromosomes and central spindles and form distinct bands associated with telophase midbodies. The functional disruption of KLP3A by antibodies or dominant negative proteins in embryos, or by RNA interference (RNAi) in S2 cells, does not block mitosis but produces defects in mitotic spindles. Time-lapse confocal observations of mitosis in living embryos reveal that KLP3A inhibition disrupts the organization of interpolar (ip) MTs and produces short spindles. Kinetic analysis suggests that KLP3A contributes to spindle pole separation during the prometaphase-to-metaphase transition (when it antagonizes Ncd) and anaphase B, to normal rates of chromatid motility during anaphase A, and to the proper spacing of daughter nuclei during telophase. We propose that KLP3A acts on MTs associated with chromosome arms and the central spindle to organize ipMT bundles, to drive spindle pole separation and to facilitate chromatid motility.

The chromokinesin, KLP3A, dives mitotic spindle pole separation during prometaphase and anaphase and facilitates chromatid motility.

La mitose n&#xE9;cessite des actions concert&#xE9;es de microtubules multiple (MT) &#xE0; base de prot&#xE9;ines motrices. Ici nous avons examin&#xE9; la contribution de la chromokinesin, KLP3A, &#xE0; la morphogen&#xE8;se du fuseau mitotique et les mouvements chromosomiques dans les embryons de drosophile et des cellules cultiv&#xE9;es de S2. Par immunofluorescence, associ&#xE9;s KLP3A avec punctae non fibreuse qui se concentrent dans les noyaux et afficher MT-d&#xE9;pendantes des associations dont les broches sont. Ces concentr&#xE9; punctae dans des domaines li&#xE9;s &#xE0; indistinctes chromosomes et centrale broches et forment des bandes distinctes associ&#xE9;es &#xE0; midbodies t&#xE9;lophase. La perturbation fonctionnelle de KLP3A par des anticorps ou prot&#xE9;ines dominantes n&#xE9;gatives dans les embryons, ou par interf&#xE9;rence ARN (ARNi) dans les cellules S2, ne bloque pas la mitose, mais produit des d&#xE9;fauts dans fuseau mitotique. Time-lapse observations confocale de la mitose dans les embryons vivants r&#xE9;v&#xE8;lent que l&#x26;#39;inhibition KLP3A perturbe l&#x26;#39;organisation de interpolaire (ip) MT et produit axes courts. Analyse cin&#xE9;tique indique que KLP3A contribue &#xE0; la s&#xE9;paration p&#xF4;le broche lors de la transition prom&#xE9;taphase-&#xE0;-m&#xE9;taphase (quand il antagonise NCD) et l&#x26;#39;anaphase B, &#xE0; des taux normaux de la motilit&#xE9; chromatides pendant l&#x26;#39;anaphase A, et &#xE0; l&#x26;#39;espacement appropri&#xE9; de noyaux fils pendant la t&#xE9;lophase. Nous proposons que les actes KLP3A sur MTS associ&#xE9;e &#xE0; bras des chromosomes et l&#x26;#39;axe central d&#x26;#39;organiser faisceaux INTPER, &#xE0; conduire la s&#xE9;paration p&#xF4;le du fuseau et de faciliter la mobilit&#xE9; des chromatides.

Le Chromokinesin, KLP3A, mitotique Dives broche S&#xE9;paration p&#xF4;le Pendant prom&#xE9;taphase et Anaphase et facilite la motilit&#xE9; chromatides

Die chromokinesin, KLP3A, Tauchg&#xE4;nge Mitosespindel Pol Trennung w&#xE4;hrend Prometaphase und Anaphase und erleichtert Chromatid Motilit&#xE4;t.

Mitosi richiede le attivit&agrave; concordate del microtubule multiple (MT)-basato su proteine motrici. Qui abbiamo esaminato il contributo della chromokinesin, KLP3A, ai movimenti di morfogenesi e cromosoma mitotico in drosofila embrioni e cellule coltivate S2. Con l&#39;immunofluorescenza, KLP3A associa punctae nonfibrous che si concentrano nei nuclei e visualizzare le associazioni MT-dipendente con mandrini. Questi punctae concentrato nell&#39;indistinti domini associati con cromosomi e centrale fusi e fasce distinte forma associate midbodies telofase. La perturbazione funzionale di KLP3A da anticorpi o proteine negative dominante in embrioni o di interferenza del RNA (RNAi) nelle cellule di S2, non bloccare la mitosi ma produce difetti di fusi mitotici. Time-lapse osservazioni confocale di mitosi in embrioni di vita rivelano che l&#39;inibizione KLP3A sconvolge l&#39;organizzazione del interpolar (ip) MTs e produce Mandrini corti. Analisi cinetica suggeriscono che KLP3A contribuisce a mandrino separazione Polo durante la transizione della metafase prometafase (quando esso antagonizza Ncd) e anafase B, per tariffe normali della motilit&agrave; cromatidi durante l&#39;anafase A e per la corretta spaziatura dei nuclei della figlia durante la telofase. Proponiamo che KLP3A agisce su MTs associati con bracci del cromosoma e il perno centrale per organizzare i fasci di interessi, alla separazione di azionamento mandrino pole e a facilitare la motilit&agrave; Cromatidio.

Chromokinesin, KLP3A, immersioni separazione pole mitotico durante prometafase e anafase e facilita la motilit&agrave; Cromatidio.

&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x306F;&#x3001;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#xFF08;MT&#xFF09;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x5354;&#x8ABF;&#x7684;&#x306A;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3092;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x7D21;&#x9318;&#x4F53;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x3068;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;&#x306E;&#x80DA;&#x57F9;&#x990A;S2&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x306E;&#x52D5;&#x304D;&#x306B;&#x3001;chromokinesin&#x3001;KLP3A&#x306E;&#x5BC4;&#x4E0E;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x86CD;&#x5149;&#x6CD5;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x6838;&#x306B;&#x96C6;&#x4E2D;&#x3057;&#x3001;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x306E;MT-&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x306E;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x975E;&#x7E4A;&#x7DAD;&#x72B6;punctae&#x3068;KLP3A&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x3068;&#x4E2D;&#x592E;&#x306E;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x3068;&#x7D42;&#x671F;midbodies&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30D0;&#x30F3;&#x30C9;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x4E0D;&#x660E;&#x77AD;&#x306A;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x5185;&#x306E;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;punctae&#x96C6;&#x4E2D;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x80DA;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;S2&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;RNA&#x5E72;&#x6E09;&#xFF08;RNAi&#xFF09;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x6297;&#x4F53;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30C9;&#x30DF;&#x30CA;&#x30F3;&#x30C8;&#x30CD;&#x30AC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306B;&#x3088;&#x308B;KLP3A&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7834;&#x58CA;&#x306F;&#x3001;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x3092;&#x963B;&#x6B62;&#x3059;&#x308B;&#x304C;&#x7D21;&#x9318;&#x4F53;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x751F;&#x304D;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x80DA;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0;&#x30E9;&#x30D7;&#x30B9;&#x5171;&#x7126;&#x70B9;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x89B3;&#x5BDF;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;KLP3A&#x963B;&#x5BB3;&#x306F;&#x4E21;&#x6975;&#x9593;&#x306E;&#xFF08;IP&#xFF09;MT&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x3092;&#x7834;&#x58CA;&#x3059;&#x308B;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x3001;&#x30B7;&#x30E7;&#x30FC;&#x30C8;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x52D5;&#x614B;&#x89E3;&#x6790;&#x3067;&#x306F;&#x3001;KLP3A&#x306F;&#x5F8C;&#x671F;&#x3001;&#x6642;&#x306E;&#x67D3;&#x8272;&#x5206;&#x4F53;&#x904B;&#x52D5;&#x306E;&#x901A;&#x5E38;&#x6599;&#x91D1;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7D42;&#x671F;&#x306B;&#x5A18;&#x6838;&#x306E;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x9593;&#x9694;&#x306B;&#x3001;&#x524D;&#x4E2D;&#x671F;&#x304B;&#x3089;&#x4E2D;&#x671F;&#x3078;&#x306E;&#x79FB;&#x884C;&#x6642;&#x306E;&#x7D21;&#x9318;&#x4F53;&#x6975;&#x5206;&#x96E2;&#xFF08;&#x305D;&#x308C;&#x304C;&#x62EE;&#x200B;&#x200B;&#x6297;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x304D;NCD&#xFF09;&#x3068;&#x5F8C;&#x671F;B&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x8155;&#x3068;&#x4E2D;&#x592E;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;MTS&#x306E;KLP3A&#x306E;&#x884C;&#x70BA;&#x306F;&#x3001;IPMT&#x30D0;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x3092;&#x6574;&#x7406;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x7D21;&#x9318;&#x4F53;&#x6975;&#x5206;&#x96E2;&#x3092;&#x99C6;&#x52D5;&#x3057;&#x3001;&#x67D3;&#x8272;&#x5206;&#x4F53;&#x904B;&#x52D5;&#x3092;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;&#x3002;

&#x524D;&#x4E2D;&#x671F;&#x3068;&#x5F8C;&#x671F;&#x306E;&#x9593;&#x306B;Chromokinesin&#x3001;KLP3A&#x3001;&#x30C0;&#x30A4;&#x30D6;&#x306E;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x7D21;&#x9318;&#x4F53;&#x6975;&#x5206;&#x96E2;&#x3068;&#x67D3;&#x8272;&#x5206;&#x4F53;&#x904B;&#x52D5;&#x3092;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;

&#xC5EC;&#xB7EC; microtubule (MT)&#xC758; &#xACF5;&#xB3D9;&#xB41C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xD544;&#xC694;&#xB85C; &#xD558;&#xB294; &#xC720;&#xC0AC; &#xBD84;&#xC5F4;-&#xBAA8;&#xD130; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xAE30;&#xBC18;&#xC73C;&#xB85C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC870;&#xC0AC; &#xCD08;&#xD30C;&#xB9AC; &#xBC30;&#xC544; &#xBC0F; &#xAD50;&#xC591;&#xB41C; S2 &#xC140; mitotic &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; morphogenesis &#xBC0F; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xC6C0;&#xC9C1;&#xC784;&#xC5D0; chromokinesin, KLP3A, &#xAE30;&#xC5EC;&#xB97C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBA74;&#xC5ED; &#xD615;&#xAD11; &#xAC80;&#xC0AC;, &#xC5EC; KLP3A &#xD575;&#xC5D0; &#xC9D1;&#xC911; &#xD558; &#xACE0; &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; MT &#xC885;&#xC18D; &#xC5F0;&#xACB0;&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD558;&#xB294; nonfibrous punctae&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4;&#xC640; &#xC911;&#xC559; &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; &#xBC0F; &#xC591;&#xC2DD; &#xB69C;&#xB837;&#xD55C; &#xBC34;&#xB4DC; telophase midbodies&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC5F0;&#xAD00; &#xBD88;&#xBA85;&#xB8CC; &#xD55C; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC5D0; punctae &#xC9D1;&#xC911;. &#xD56D; &#xCCB4; &#xB610;&#xB294; &#xBC30;&#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C0;&#xBC30;&#xC801;&#xC778; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB610;&#xB294; RNA &#xAC04;&#xC12D; (RNAi) S2 &#xC140;&#xC5D0; klp3a&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC7A5;&#xC560; &#xC720;&#xC0AC; &#xBD84;&#xC5F4;&#xC744; &#xCC28;&#xB2E8; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; mitotic &#xC2A4;&#xD540;&#xC5D0; &#xACB0;&#xD568;&#xC744; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD558; &#xACE0; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC0B4;&#xC544;&#xC788;&#xB294; &#xBC30;&#xC544;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC720;&#xC0AC; &#xBD84;&#xC5F4;&#xC758; &#xC2DC;&#xAC04; &#xACBD;&#xACFC; confocal &#xAD00;&#xCE21; &#xACF5;&#xAC1C; KLP3A &#xC800;&#xD574; interpolar (ip) Mts&#xC758; &#xC870;&#xC9C1; &#xBC29;&#xD574; &#xD558; &#xACE0; &#xC9E7;&#xC740; &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4;&#xC744; &#xC0DD;&#xC0B0;. &#xD0A4;&#xB124;&#xD2F1; &#xBD84;&#xC11D; &#xC81C;&#xC548; KLP3A anaphase A, &#xB3D9;&#xC548; chromatid &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; &#xC815;&#xC0C1; &#xC694;&#xAE08; &#xBC0F; telophase &#xC911; &#xB538; &#xD575;&#xC758; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xAC04;&#xACA9; prometaphase &#xBD84;&#xC5F4; &#xC804;&#xD658; (&#xD574;&#xB2F9; &#xB418;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0; Ncd &#xBC18;&#xAC10;) &#xBC0F; anaphase B, &#xC911; &#xADF9; &#xBD84;&#xB9AC;&#xB97C; &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; KLP3A MTs &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xD314;&#xACFC; &#xC911;&#xC559; &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4;&#xACFC; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xB4DC;&#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; &#xADF9; &#xBD84;&#xB9AC; ipMT &#xBC88;&#xB4E4;&#xC744; &#xAD6C;&#xC131; &#xD558; &#xACE0; chromatid &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Chromokinesin, KLP3A, prometaphase &#xC911; &#xADF9; &#xBD84;&#xB9AC; mitotic &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; &#xB2E4;&#xC774;&#xBE59; &#xBC0F; anaphase chromatid &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD55C;&#xB2E4;.

La mitosis requiere que las actividades concertadas de los microt&#xFA;bulos m&#xFA;ltiple (MT) a base de prote&#xED;nas motoras. Aqu&#xED; se analiz&#xF3; la contribuci&#xF3;n de la chromokinesin, KLP3A, a la morfog&#xE9;nesis huso mit&#xF3;tico y los movimientos de los cromosomas en los embriones de Drosophila y c&#xE9;lulas cultivadas S2. Por inmunofluorescencia, se asocia con KLP3A punctae fibrosa que se concentran en los n&#xFA;cleos y mostrar MT-dependientes de las asociaciones con husillos. Estos se concentran en los dominios punctae indistintas asociados con los cromosomas y los ejes centrales y las bandas de forma distinta asociados con midbodies telofase. La alteraci&#xF3;n funcional de KLP3A por los anticuerpos o prote&#xED;nas dominantes negativas en los embriones, o de ARN de interferencia (RNAi) en c&#xE9;lulas S2, no bloquea la mitosis, pero produce defectos en los husos mit&#xF3;ticos. Time-lapse observaciones confocal de la mitosis en embriones vivos revelan que la inhibici&#xF3;n KLP3A altera la organizaci&#xF3;n de interpolar (ip), MTS y produce ejes corta. El an&#xE1;lisis cin&#xE9;tico sugiere que KLP3A contribuye a la separaci&#xF3;n del cabezal polo durante la transici&#xF3;n prometafase a metafase (cuando se antagoniza NCD) y B anafase, a tasas normales de la motilidad crom&#xE1;tida durante anafase A, y para la separaci&#xF3;n adecuada de los n&#xFA;cleos durante la telofase hija. Proponemos que los actos KLP3A en MTs asociados con los brazos cromos&#xF3;micos y el eje central para organizar paquetes IPMT, para impulsar la separaci&#xF3;n del eje poste y para facilitar la movilidad de crom&#xE1;tidas.

El Chromokinesin, KLP3A, mit&#xF3;tica inmersiones separaci&#xF3;n del eje Polo durante la prometafase y anafase y facilita la motilidad cromat&#xED;dica

&#x5728;&#x540E;&#x671F;&#x76F8;&#x540C;&#x59D0;&#x59D0; chromatids &#x5206;&#x9694;&#x5E76;&#x8D70;&#x5411;&#x622A;&#x7136;&#x7684;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x7684;&#x4E3B;&#x8F74;&#x3002;&#x5728;&#x4E3B;&#x8F74;&#x52A8;&#x7C92;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x6709;&#x5176;&#x52A0;&#x53F7;&#x7ED3;&#x675F;&#x5D4C;&#x5165;&#x5728;&#x7EBA;&#x9524;&#x548C;&#x5176;&#x8D1F;&#x7ED3;&#x675F;&#x5728;&#x4E3B;&#x8F74;&#x6781;&#x70B9;&#x3002;&#x4E24;&#x4E2A;&#x6A21;&#x578B;&#x6709;&#x62DF;&#x5728;&#x540E;&#x671F;&#x6D41;&#x52A8;&#x7684; chromatids &#x5E10;&#x6237;&#x3002;&#x5728;&#x5403;&#x8C46;&#x4EBA;&#x6A21;&#x578B;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x9002;&#x5EA6;&#x8BF1;&#x4F7F;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x52A0;&#x4E0A;&#x4E24;&#x7AEF;&#x7684;&#x7EBA;&#x9524;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x7684;&#x89E3;&#x805A;&#x4F7F; chromatids &#39;&#x56BC; &#39; &#x5FAE;&#x7BA1;&#x7684;&#x8D70;&#x5411;&#x6781;&#x70B9;&#x66F2;&#x76EE;&#x3002;&#x5728;&#x5411;&#x6781;&#x901A;&#x6A21;&#x578B;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x9002;&#x5EA6;&#x951A;&#x5B9A;&#x52A8;&#x7C92;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x548C; chromatids &#x88AB;&#x62C9;&#x5411;&#x4E24;&#x6781;&#x901A;&#x8FC7;&#x52A8;&#x7C92;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x7684;&#x89E3;&#x805A;&#x51CF;&#x53F7;&#x4E24;&#x7AEF;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x660E;&#x4E24;&#x79CD;&#x529F;&#x80FD;&#x4E0D;&#x540C;&#x7834;&#x574F;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x5FAE;&#x7BA1; KinI &#x9A71;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; &#xFF08;&#x8FD9;&#x6837;&#x547D;&#x540D;&#xFF0C;&#x662F;&#x56E0;&#x4E3A;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x62E5;&#x6709;&#x5728;&#x591A;&#x80BD;&#x4E2D;&#x5185;&#x90E8;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x9A71;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x6837; ATPase &#x57DF;&#xFF09; &#x662F;&#x8D1F;&#x8D23;&#x5728;&#x679C;&#x8747;&#x6B63;&#x5E38;&#x67D3;&#x8272;&#x5355;&#x4F53;&#x67F1;&#x8BAE;&#x6848;&#x3002;KLP59C&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x4E4B;&#x4E00;&#x662F;&#x9700;&#x8981; depolymerize &#x5728;&#x5176;&#x7EBA;&#x9524;&#x5173;&#x8054;&#x52A8;&#x7C92;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x518D;&#x52A0;&#x4E0A;&#x4E24;&#x7AEF;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x67D3;&#x8272;&#x5355;&#x4F53;&#x52A8;&#x529B;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E00;&#x4E2A;&#x57FA;&#x4E8E; Pac &#x7537;&#x5B50;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x5176;&#x4ED6;&#x7684; KLP10A&#xFF0C;&#x662F;&#x9700;&#x8981; depolymerize &#x5728;&#x672B;&#x7AEF;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x901A;&#x8FC7;&#x5411;&#x6781;&#x901A;&#x79FB;&#x52A8; chromatids &#x51CF;&#x53BB;&#x5176;&#x6746;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x3002;

&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x9A71;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x4E3A;&#x9A71;&#x52A8;&#x5668;&#x59B9;&#x59B9;&#x5408;&#x4F5C;&#x540E;&#x671F;&#x7684;&#x67D3;&#x8272;&#x5355;&#x4F53;&#x5206;&#x79BB;&#x3002;

During anaphase identical sister chromatids separate and move towards opposite poles of the mitotic spindle. In the spindle, kinetochore microtubules have their plus ends embedded in the kinetochore and their minus ends at the spindle pole. Two models have been proposed to account for the movement of chromatids during anaphase. In the 'Pac-Man' model, kinetochores induce the depolymerization of kinetochore microtubules at their plus ends, which allows chromatids to move towards the pole by 'chewing up' microtubule tracks. In the 'poleward flux' model, kinetochores anchor kinetochore microtubules and chromatids are pulled towards the poles through the depolymerization of kinetochore microtubules at the minus ends. Here, we show that two functionally distinct microtubule-destabilizing KinI kinesin enzymes (so named because they possess a kinesin-like ATPase domain positioned internally within the polypeptide) are responsible for normal chromatid-to-pole motion in Drosophila. One of them, KLP59C, is required to depolymerize kinetochore microtubules at their kinetochore-associated plus ends, thereby contributing to chromatid motility through a Pac-Man-based mechanism. The other, KLP10A, is required to depolymerize microtubules at their pole-associated minus ends, thereby moving chromatids by means of poleward flux.

Two mitotic kinesins cooperate to drive sister chromatid separation during anaphase.

Lors de l&#x26;#39;anaphase chromatides s&#x153;urs identiques s&#xE9;par&#xE9;e et d&#x26;#39;aller vers les p&#xF4;les oppos&#xE9;s du fuseau mitotique. Dans la broche, les microtubules kin&#xE9;tochoriens ont leur plus les extr&#xE9;mit&#xE9;s incorpor&#xE9; dans le kin&#xE9;tochore et leurs extr&#xE9;mit&#xE9;s au p&#xF4;le moins de la broche. Deux mod&#xE8;les ont &#xE9;t&#xE9; propos&#xE9;s pour rendre compte de la circulation des chromatides lors de l&#x26;#39;anaphase. Dans le mod&#xE8;le de la &#xAB;Pac-Man &#x26;#39;, kin&#xE9;tochores induire la d&#xE9;polym&#xE9;risation des microtubules du kin&#xE9;tochore &#xE0; leurs extr&#xE9;mit&#xE9;s, ce qui permet ainsi chromatides se d&#xE9;placer vers le p&#xF4;le par&#xAB; m&#xE2;cher jusqu&#x26;#39;&#xE0; &#xAB;pistes microtubules. Dans le mod&#xE8;le de la &#xAB;p&#xF4;le de flux&#xBB;, kin&#xE9;tochores d&#x26;#39;ancrage des microtubules du kin&#xE9;tochore et chromatides sont tir&#xE9;es vers les p&#xF4;les par la d&#xE9;polym&#xE9;risation des microtubules du kin&#xE9;tochore aux extr&#xE9;mit&#xE9;s moins. Ici, nous montrons que deux fonctionnellement distinctes microtubules d&#xE9;stabilisateurs Kini enzymes kin&#xE9;sine (ainsi nomm&#xE9;s parce qu&#x26;#39;ils poss&#xE8;dent un domaine kin&#xE9;sine-ATPase positionn&#xE9; &#xE0; l&#x26;#39;int&#xE9;rieur comme dans le polypeptide) sont responsables de la normale chromatides-p&#xF4;le de mouvement chez la drosophile. L&#x26;#39;un d&#x26;#39;eux, KLP59C, est n&#xE9;cessaire pour d&#xE9;polym&#xE9;riser les microtubules du kin&#xE9;tochore &#xE0; leurs extr&#xE9;mit&#xE9;s, plus kin&#xE9;tochore-associ&#xE9;s, contribuant ainsi &#xE0; la motilit&#xE9; de chromatides par un m&#xE9;canisme de Pac-Man bas&#xE9;e sur. L&#x26;#39;autre, KLP10A, est n&#xE9;cessaire pour d&#xE9;polym&#xE9;riser les microtubules &#xE0; leurs p&#xF4;les associ&#xE9;s extr&#xE9;mit&#xE9;s moins, d&#xE9;pla&#xE7;ant ainsi chromatides au moyen de flux vers les p&#xF4;les.

Deux kin&#xE9;sines mitotiques Coop&#xE9;rer &#xE0; conduire des v&#xE9;hicules de s&#xE9;paration de chromatides-s&#x153;urs durant l&#x26;#39;anaphase

Zwei mitotischen Kinesinen zusammenarbeiten, um die Trennung der Schwesterchromatiden w&#xE4;hrend der Anaphase zu fahren.

Durante la anafase identica sorella cromatidi separano e si muovono verso poli opposti del fuso mitotico. Nel mandrino, microtubuli del cinetocoro hanno loro plus finisce incorporato il cinetocore e loro meno termina presso il polo di mandrino. Due modelli sono stati proposti per spiegare il movimento dei cromatidi durante l&#39;anafase. Nel modello di &#39;Pac-Man&#39; cinetocori inducono la depolimerizzazione dei microtubuli del cinetocoro alle loro estremit&agrave; plus, che permette di cromatidi a muoversi verso il polo di microtubuli &#39;masticare &#39; tracce. Nel modello di &#39;flusso perturbato&#39; cinetocori ancorano microtubuli del cinetocoro e i cromatidi sono tirati verso i poli attraverso la depolimerizzazione dei microtubuli del cinetocoro alle estremit&agrave; meno. Mostriamo qui, che due distinti funzionalmente microtubule-destabilizzante KinI chinesina enzimi (cos&igrave; denominato perch&eacute; possiedono un dominio di ATPasi chinesina simile posizionato internamente all&#39;interno del polipeptide) sono responsabili per normale movimento tra cromatidi fratelli a poli in drosofila. Uno di loro, KLP59C, &egrave; necessario depolymerize microtubuli del cinetocoro a loro associati al cinetocore pi&ugrave; finisce, contribuendo cos&igrave; alla motilit&agrave; Cromatidio attraverso un meccanismo basato su Pac-Man. L&#39;altra, KLP10A, &egrave; necessaria depolymerize microtubuli al loro polo associato al meno le estremit&agrave;, quindi spostando i cromatidi mediante flusso perturbato.

Due kinesins mitotica cooperare sorella unit&agrave; di separazione cromatidi durante l&#39;anafase.

&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x7D21;&#x9318;&#x4F53;&#x306E;&#x53CD;&#x5BFE;&#x306E;&#x6975;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x5F8C;&#x671F;&#x540C;&#x4E00;&#x306E;&#x59C9;&#x59B9;&#x67D3;&#x8272;&#x5206;&#x4F53;&#x5206;&#x96E2;&#x3057;&#x3066;&#x79FB;&#x52D5;&#x4E2D;&#x3002;&#x4E3B;&#x8EF8;&#x306B;&#x3001;&#x52D5;&#x539F;&#x4F53;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x306F;&#x7D21;&#x9318;&#x4F53;&#x6975;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x52D5;&#x539F;&#x4F53;&#x3068;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30CA;&#x30B9;&#x7AEF;&#x306B;&#x57CB;&#x3081;&#x8FBC;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x7D42;&#x4E86;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E8C;&#x3064;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x5F8C;&#x671F;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x67D3;&#x8272;&#x5206;&#x4F53;&#x306E;&#x52D5;&#x304D;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x63D0;&#x6848;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; &#x26;quot;&#x30D1;&#x30C3;&#x30AF;&#x30DE;&#x30F3;&#x26;quot;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x52D5;&#x539F;&#x4F53;&#x306F;&#x67D3;&#x8272;&#x5206;&#x4F53;&#x304C; &#x26;quot;&#x306E;&#x4E0A;&#x565B;&#x3080;&#x26;quot;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30C3;&#x200B;&#x200B;&#x30AF;&#x3067;&#x30DD;&#x30FC;&#x30EB;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x79FB;&#x52D5;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306B;&#x52A0;&#x3048;&#x3066;&#x4E21;&#x7AEF;&#x306B;&#x52D5;&#x539F;&#x4F53;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x8131;&#x91CD;&#x5408;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3002; &#x26;quot;&#x6975;&#x65B9;&#x5411;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x26;quot;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x52D5;&#x539F;&#x4F53;&#x306E;&#x30A2;&#x30F3;&#x30AB;&#x30FC;&#x52D5;&#x539F;&#x4F53;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x3068;&#x67D3;&#x8272;&#x306F;&#x30DE;&#x30A4;&#x30CA;&#x30B9;&#x7AEF;&#x90E8;&#x52D5;&#x539F;&#x4F53;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x8131;&#x91CD;&#x5408;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x6975;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x5F15;&#x3063;&#x5F35;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;2&#x3064;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x200B;&#x200B;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x30AD;&#x30CB;&#x30AD;&#x30CD;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x306F;&#xFF08;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x30DD;&#x30EA;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x5185;&#x90E8;&#x3067;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x4ED8;&#x3051;&#x30AD;&#x30CD;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;ATP&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x547D;&#x540D;&#xFF09;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;&#x306E;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;&#x67D3;&#x8272;&#x5206;&#x4F53;&#x9593;&#x306E;&#x6975;&#x904B;&#x52D5;&#x306E;&#x8CAC;&#x4EFB;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x3046;&#x3061;&#x306E;&#x4E00;&#x3064;&#x3001;KLP59C&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30D1;&#x30C3;&#x30AF;&#x30DE;&#x30F3;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30E1;&#x200B;&#x200B;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x67D3;&#x8272;&#x5206;&#x4F53;&#x306E;&#x904B;&#x52D5;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x52D5;&#x539F;&#x4F53;&#x95A2;&#x9023;&#x306B;&#x52A0;&#x3048;&#x3001;&#x4E21;&#x7AEF;&#x306B;&#x52D5;&#x539F;&#x4F53;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x3092;&#x89E3;&#x91CD;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x4ED6;&#x3001;KLP10A&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6975;&#x65B9;&#x5411;&#x78C1;&#x675F;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x67D3;&#x8272;&#x3092;&#x79FB;&#x52D5;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x6975;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x30DE;&#x30A4;&#x30CA;&#x30B9;&#x306E;&#x4E21;&#x7AEF;&#x306B;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x3092;&#x89E3;&#x91CD;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x4E8C;&#x3064;&#x306E;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x30AD;&#x30CD;&#x30B7;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x5F8C;&#x671F;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x59C9;&#x59B9;&#x67D3;&#x8272;&#x5206;&#x4F53;&#x5206;&#x96E2;&#x3092;&#x30C9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5354;&#x529B;&#x3059;&#x308B;

&#xB3D9;&#xC548; anaphase &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xC790;&#xB9E4; chromatids &#xAD6C;&#xBD84; &#xBC0F; mitotic &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4;&#xC758; &#xBC18;&#xB300; &#xADF9; &#xCABD;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xB3D9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4;, kinetochore microtubules&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xC790;&#xC2E0;&#xC758; &#xD50C;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xB294; kinetochore&#xC5D0; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xB05D; &#xBC0F; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xB9C8;&#xC774;&#xB108;&#xC2A4; &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; &#xADF9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB05D;&#xB0A9;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB450; &#xBAA8;&#xB378;&#xC740; anaphase &#xC911; chromatids&#xC758; &#xC6C0;&#xC9C1;&#xC784;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xACC4;&#xC815; &#xC81C;&#xC548; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#39; &#xD329; &#xB9E8; &#39; &#xBAA8;&#xB378; kinetochores &#xC720;&#xB3C4; &#39;&#xC539;&#xB294;&#39; microtubule &#xC5EC; &#xADF9; &#xCABD;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xB3D9; &#xD558;&#xB294; chromatids &#xC218; &#xC788;&#xB294; kinetochore microtubules &#xD50C;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xB05D;&#xC5D0;&#xC11C; depolymerization &#xD2B8;&#xB799;. &#39;Poleward &#xD50C;&#xB7ED;&#xC2A4;&#39; &#xBAA8;&#xB378;&#xC758; kinetochores kinetochore microtubules &#xC575;&#xCEE4;&#xC640; chromatids kinetochore microtubules depolymerization &#xD1B5;&#xD574; &#xADF9;&#xC744; &#xD5A5;&#xD574; &#xBE7C;&#xAE30; &#xB05D;&#xC5D0; &#xAEBC; &#xB0C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB69C;&#xB837;&#xD55C; microtubule &#xBD88;&#xC548;&#xC815; KinI kinesin &#xD6A8;&#xC18C; (&#xB77C;&#xB294; &#xB0B4;&#xBD80;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; polypeptide &#xB0B4; &#xBC30;&#xCE58; kinesin &#xAC19;&#xC740; ATPase &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC744; &#xC18C;&#xC720; &#xD558;&#xAE30; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xADF8;&#xB798;&#xC11C;) &#xCD08;&#xD30C;&#xB9AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; chromatid &#xD3F4; &#xBAA8;&#xC158;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCC45;&#xC784;&#xC744; &#xC9C0;&#xB294; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. KLP59C, &#xADF8;&#xB4E4; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xB294; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; kinetochore &#xAD00;&#xB828; &#xB41C;&#xC5D0;&#xC11C; kinetochore microtubules &#xD50C;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xB05D;, Pac &#xB0A8;&#xC790; &#xAE30;&#xBC18; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; chromatid &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD568;&#xC73C;&#xB85C;&#xC368; depolymerize &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. KLP10A, &#xAE30;&#xD0C0;&#xAC00; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xADF9;-&#xB05D;, poleward &#xD50C;&#xB7ED;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; chromatids&#xB97C; &#xC774;&#xB3D9; &#xD568;&#xC73C;&#xB85C;&#xC368; &#xB9C8;&#xC774;&#xB108;&#xC2A4; &#xAD00;&#xB828;&#xC5D0;&#xC11C; microtubules depolymerize &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB450; mitotic kinesins anaphase &#xB3D9;&#xC548; chromatid &#xBD84;&#xB9AC; &#xB4DC;&#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC790;&#xB9E4; &#xD611;&#xB825;.

Durante la anafase las crom&#xE1;tidas hermanas id&#xE9;nticas separadas y se mueven hacia polos opuestos del huso mit&#xF3;tico. En el huso, los microt&#xFA;bulos kinetochore tienen su m&#xE1;s termina incrustado en el cinetocoro y sus extremos menos en el polo del huso. Dos modelos han sido propuestos para explicar el movimiento de las crom&#xE1;tidas durante la anafase. En el modelo de &#x26;quot;Pac-Man &#x26;#39;, cinetocoros inducen la despolimerizaci&#xF3;n de los microt&#xFA;bulos del cinetocoro en sus extremos, lo que permite, adem&#xE1;s de las crom&#xE1;tidas a moverse hacia el polo de&#x26;#39; masticar &#x26;#39;senderos de los microt&#xFA;bulos. En el modelo de &#x26;quot;polos de flujo&#x26;quot;, cinetocoros de anclaje kinetochore microt&#xFA;bulos y crom&#xE1;tidas son atra&#xED;dos hacia los polos a trav&#xE9;s de la despolimerizaci&#xF3;n de los microt&#xFA;bulos del cinetocoro en los extremos negativos. Aqu&#xED;, mostramos que dos funcionalmente diferentes de desestabilizaci&#xF3;n de los microt&#xFA;bulos-Kini enzimas kinesin (llamado as&#xED; debido a que poseen un dominio kinesin-como la ATPasa posici&#xF3;n interna dentro del polip&#xE9;ptido) son responsables de lo normal de crom&#xE1;tidas a polo de movimiento en la mosca Drosophila. Uno de ellos, KLP59C, est&#xE1; obligado a despolimerizar kinetochore microt&#xFA;bulos del cinetocoro a sus asociados a extremos positivo, lo que contribuye a la movilidad de crom&#xE1;tidas a trav&#xE9;s de un mecanismo de Pac-Man con sede en. El KLP10A otra, est&#xE1; obligado a despolimerizar microt&#xFA;bulos a sus asociados de polos extremos menos, moviendo as&#xED; crom&#xE1;tidas por medio de flujo hacia el polo.

Dos Kinesins mit&#xF3;ticas Cooperar para impulsar la separaci&#xF3;n de crom&#xE1;tidas hermanas durante anafase

&#x5728;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x540E;&#x671F; A &#x67D3;&#x8272;&#x5355;&#x4F53;&#x67F1;&#x52A8;&#x8BAE;&#x662F;&#x9002;&#x5F53;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x5206;&#x79BB;&#x7684;&#x6839;&#x672C;&#x3002;&#x5728;&#x8FC7;&#x53BB;&#x7684;&#x51E0;&#x5341;&#x5E74;&#x91CC;&#xFF0C;&#x540E;&#x671F; A &#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x4E24;&#x79CD;&#x6A21;&#x578B;&#x6765;&#x5230;&#x4E86;&#x7A81;&#x51FA;&#x5730;&#x4F4D;&#x3002;Pacman &#x6A21;&#x578B;&#x5047;&#x8BBE; chromatids &#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x52A0;&#x4E24;&#x7AEF;&#x5D4C;&#x5165;&#x5728;&#x9002;&#x5EA6;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x5480;&#x56BC;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x5411;&#x6781;&#x89E3;&#x805A;&#x3002;&#x6216;&#x8005;&#xFF0C;&#x5411;&#x6781;&#x901A;&#x91CF;&#x6A21;&#x578B;&#x5047;&#x8BBE; chromatids &#x662F;&#x7EDE;&#x8FDB;&#x5230;&#x6781;&#x70B9;&#x7684;&#x7EBA;&#x9524;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x5FAE;&#x7BA1;&#xFF0C;&#x90FD;&#x96C6;&#x4E2D;&#x5728;&#x4E3B;&#x8F74;&#x4E24;&#x6781;&#x7684;&#x51CF;&#x53F7;&#x4E24;&#x7AEF;&#x7684;&#x4E0D;&#x65AD;&#x964D;&#x89E3;&#x3002;&#x5728;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x66FE;&#x62A5;&#x9053;&#xFF0C;&#x540E;&#x671F; A &#x5728;&#x679C;&#x8747;&#x4E2D;&#x7684;&#x540C;&#x65F6;&#x8981;&#x6C42;&#x4E24;&#x7AEF;&#x7EBA;&#x9524;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x7684;&#x89E3;&#x805A;&#x3002;&#x8FD9;&#x7531;&#x4E24;&#x540D;&#x6210;&#x5458;&#x7684;&#x5065;&#x6211;&#x7684;&#x9A71;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x5206;&#x522B;&#x79F0;&#x4E3A; KLP59C &#x548C; KLP10A&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x76EE;&#x6807;&#x5177;&#x4F53;&#x5230; chromatids&#x3001; &#x8F74;&#x6746;&#x3001; &#x4E9A;&#x79D1;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x79F0;&#x4E4B;&#x4E3A;&#x6B64;&#x6DF7;&#x5408; Pacman &#x548C;&#x5411;&#x6781;&#x901A;&#x91CF;&#x7684;&#x540E;&#x671F; A.&#x575A;&#x4F9D;&#x8D56;&#x7684; Pacman-&#x901A;&#x91CF;&#x673A;&#x5236;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#xFF0C;&#x5E76;&#x63A2;&#x8BA8;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x9644;&#x52A0;&#x7EC4;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x6240;&#x9700;&#x9A71;&#x52A8;&#x5668;&#x5355;&#x4F53;&#x67F1;&#x8BAE;&#x6848;&#x7684;&#x8FD9;&#x6837;&#x4E00;&#x79CD;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

A.&#x540E;&#x671F;&#x5065;&#x4F9D;&#x8D56;&#x7684; Pacman-&#x901A;&#x91CF;&#x673A;&#x5236;

Anaphase A chromatid-to-pole motion is fundamental for proper chromosome segregation in most systems. During the past several decades, two models for the mechanism of anaphase A have come to prominence. The Pacman model posits that chromatids induce the depolymerization of microtubule plus-ends embedded in kinetochores, thereby 'chewing' their way poleward. Alternatively, the Poleward-flux model posits that chromatids are 'reeled-in' to poles by the continual depolymerization of the minus-ends of kinetochore-associated microtubules, which are focused at spindle poles. In a recent study, we reported that anaphase A in Drosophila requires the depolymerization of both ends of kinetochore-associated microtubules, simultaneously. This is driven by two members of the Kin I subfamily of kinesins, termed KLP59C and KLP10A, which target specifically to chromatids and spindle poles, respectively. We have termed this hybrid of Pacman and Poleward flux the Kin I-dependent Pacman-flux mechanism for anaphase A. Here, we discuss the implications of these findings and explore potential additional components required to drive chromatid-to-pole motion by such a mechanism.

A Kin I-dependent Pacman-flux mechanism for anaphase A.

Anaphase Une motion de chromatides-p&#xF4;le est fondamentale pour la s&#xE9;gr&#xE9;gation correcte des chromosomes dans la plupart des syst&#xE8;mes. Au cours des derni&#xE8;res d&#xE9;cennies, deux mod&#xE8;les pour le m&#xE9;canisme de l&#x26;#39;anaphase A ont pris de l&#x26;#39;importance. Selon le mod&#xE8;le que Pacman chromatides induisent la d&#xE9;polym&#xE9;risation des microtubules, plus-ends int&#xE9;gr&#xE9;s dans kin&#xE9;tochores, ce qui &#xAB;m&#xE2;cher&#xBB; leur p&#xF4;le fa&#xE7;on. Alternativement, les mod&#xE8;le avance vers le p&#xF4;le-flux qui chromatides sont &#xAB;enroul&#xE9; en&#xAB; p&#xF4;les de par la d&#xE9;polym&#xE9;risation continue des extr&#xE9;mit&#xE9;s des moins de kin&#xE9;tochore associ&#xE9;s microtubules, qui sont ax&#xE9;s &#xE0; p&#xF4;les du fuseau. Dans une &#xE9;tude r&#xE9;cente, nous avons signal&#xE9; que l&#x26;#39;anaphase A chez la drosophile n&#xE9;cessite la d&#xE9;polym&#xE9;risation des deux extr&#xE9;mit&#xE9;s de kin&#xE9;tochore associ&#xE9;s microtubules, en m&#xEA;me temps. Cela se justifie par deux membres de la sous-famille de Kin je kin&#xE9;sines, appel&#xE9; KLP59C et KLP10A, qui cible sp&#xE9;cifiquement pour chromatides et p&#xF4;les du fuseau, respectivement. Nous avons appel&#xE9; cet hybride de Pacman et vers le p&#xF4;le flux de la Kin I-d&#xE9;pendante Pacman-flux m&#xE9;canisme de l &#x26;#39;anaphase A. Ici, nous discutons les implications de ces r&#xE9;sultats et &#xE9;tudier d&#x26;#39;&#xE9;ventuelles autres composants n&#xE9;cessaires pour conduire de chromatides-p&#xF4;le de mouvement par un tel m&#xE9;canisme .

Un Kin I-d&#xE9;pendante Pacman-flux M&#xE9;canisme pour Anaphase A

Ein Kin I-abh&#xE4;ngige Pacman-Flux-Mechanismus f&#xFC;r die Anaphase A.

Anafase A Cromatidio-Polo moto &egrave; fondamentale per la segregazione del cromosoma corretta nella maggior parte dei sistemi. Nel corso degli ultimi decenni, due modelli per il meccanismo dell&#39;anafase A sono venuti alla ribalta. Il modello Pacman postula che i cromatidi inducono la depolimerizzazione dei microtubuli plus-estremit&agrave; incorporato in cinetocori, quindi &#39;masticare&#39; loro modo perturbato. In alternativa, il modello di flusso perturbato postula che i cromatidi sono &#39;annaspato-in&#39; per pali dalla depolimerizzazione continuo delle minus-estremit&agrave; dei microtubuli associati al cinetocore, che si concentrano a poli mandrino. In un recente studio, abbiamo segnalato che A anafase in drosofila richiede la depolimerizzazione di entrambe le estremit&agrave; dei microtubuli associati al cinetocore, simultaneamente. Questo &egrave; guidato da due membri del Kin io sottofamiglia di kinesins, chiamati KLP59C e KLP10A, quale destinazione specificamente di cromatidi e mandrino poli, rispettivamente. Noi abbiamo definito questo ibrido di disossidante Pacman e perturbato il meccanismo di Pacman-flusso-dipendente Kin anafase A. Qui, noi discutere le implicazioni di queste scoperte ed esplorare potenziali componenti supplementari necessari al movimento di unit&agrave; tra cromatidi fratelli a poli di tale meccanismo.

Un meccanismo di Pacman-flusso-dipendente Kin anafase A.

&#x67D3;&#x8272;&#xB7;&#x30C4;&#x30FC;&#xB7;&#x30DD;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x52D5;&#x304D;&#x304C;&#x3001;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3067;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x5206;&#x96E2;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x57FA;&#x672C;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x5F8C;&#x671F;&#x306B;&#x304B;&#x3051;&#x3066;&#x3002;&#x904E;&#x53BB;&#x6570;&#x5341;&#x5E74;&#x306E;&#x9593;&#x3001;&#x5F8C;&#x671F;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306E;2&#x3064;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x304C;&#x76EE;&#x7ACB;&#x3064;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x304D;&#x305F;&#x3002;&#x67D3;&#x8272;&#x5206;&#x4F53;&#x306F;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x8131;&#x91CD;&#x5408;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x30D1;&#x30C3;&#x30AF;&#x30DE;&#x30F3;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306E;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x3067;&#x7D42;&#x4E86;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x6975;&#x65B9;&#x5411;&#x3092; &#x26;quot;&#x565B;&#x3080;&#x26;quot;&#x3001;&#x52D5;&#x539F;&#x4F53;&#x306B;&#x57CB;&#x3081;&#x8FBC;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x67D3;&#x8272;&#x306F; &#x26;#39;&#x30EA;&#x30FC;&#x30EB;&#x30A4;&#x30F3; &#x26;quot;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x6975;&#x306B;&#x7D21;&#x9318;&#x4F53;&#x6975;&#x306B;&#x96C6;&#x4E2D;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x52D5;&#x539F;&#x4F53;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x305F;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30CA;&#x30B9;&#x7AEF;&#x306E;&#x7D99;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x89E3;&#x91CD;&#x5408;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30F4;&#x30A1;&#x30EB;&#x6975;&#x5074;&#x6D41;&#x675F;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306E;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5F8C;&#x671F;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;&#x3067;&#x540C;&#x6642;&#x306B;&#x3001;&#x52D5;&#x539F;&#x4F53;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x305F;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x4E21;&#x7AEF;&#x306E;&#x89E3;&#x91CD;&#x5408;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x30AD;&#x30CD;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x91D1;&#x6B66;I&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;2&#x4EBA;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x99C6;&#x52D5;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3001;&#x67D3;&#x8272;&#x5206;&#x4F53;&#x3068;&#x7D21;&#x9318;&#x4F53;&#x6975;&#x306B;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x306B;&#x6A19;&#x7684;KLP59C&#x3068;KLP10A&#x306F;&#x3001;&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30D1;&#x30C3;&#x30AF;&#x30DE;&#x30F3;&#x3068;&#x30F4;&#x30A1;&#x30EB;&#x6975;&#x5074;&#x306E;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C9;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x5F8C;&#x671F;A&#x306E;&#x91D1;&#x6B66;I-&#x4F9D;&#x5B58;&#x30D1;&#x30C3;&#x30AF;&#x30DE;&#x30F3;&#x675F;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x305F;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x77E5;&#x898B;&#x306E;&#x542B;&#x610F;&#x3092;&#x8B70;&#x8AD6;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x67D3;&#x8272;&#x5206;&#x4F53;&#x9593;&#x306E;&#x6975;&#x904B;&#x52D5;&#x3092;&#x99C6;&#x52D5;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x8FFD;&#x52A0;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x63A2;&#x308B;&#x3002;

&#x5F8C;&#x671F;&#x7528;&#x91D1;&#x6B66;I-&#x4F9D;&#x5B58;&#x30D1;&#x30C3;&#x30AF;&#x30DE;&#x30F3;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x6A5F;&#x69CB;

Anaphase A chromatid &#xD3F4; &#xBAA8;&#xC158;&#xC740; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xBD84;&#xB9AC;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xAE30;&#xBCF8;. &#xC9C0;&#xB09C; &#xBA87; &#xC2ED;&#xB144; &#xB3D9;&#xC548; anaphase A&#xC758; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xBAA8;&#xB378; &#xB208;&#xC5D0; &#xC654;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD329; &#xB9E8; &#xBAA8;&#xB378; posits chromatids &#xC720;&#xB3C4; microtubule &#xD50C;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xB05D; &#xD568;&#xC73C;&#xB85C;&#xC368; &#39;&#xC539;&#xB294;&#39; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; poleward kinetochores&#xC5D0; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; depolymerization. &#xB610;&#xB294; Poleward &#xD50C;&#xB7ED;&#xC2A4; &#xBAA8;&#xB378; chromatids&#xB294; &#39; reeled-&#39; &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; &#xADF9;&#xC5D0; &#xCD08;&#xC810;&#xC744; &#xB9DE;&#xCD94;&#xACE0; &#xC788;&#xB294; kinetochore &#xAD00;&#xB828; microtubules &#xBE7C;&#xAE30; &#xB05D;&#xC758; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; depolymerization&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xADF9;&#xC744; posits. &#xCD5C;&#xADFC; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xCD08;&#xD30C;&#xB9AC;&#xC5D0; anaphase A &#xADF8; &#xD544;&#xC694; microtubules kinetochore &#xC5F0;&#xACB0;&#xC758; &#xC591; &#xB05D;&#xC758; depolymerization &#xB3D9;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xACE0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xAC83;&#xC740; &#xAD6C;&#xB3D9; &#xD0A8;&#xC758; &#xB450; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0;&#xC774; &#xB098; kinesins, KLP59C &#xBC0F; KLP10A, chromatids &#xBC0F; &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; &#xAE30;&#xB465;&#xC744; &#xAD6C;&#xCCB4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC5B4;&#xB5A4; &#xBAA9;&#xD45C;&#xB97C; &#xAC01;&#xAC01; &#xB418; &#xB098; &#xC544;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC774; &#xD558;&#xC774;&#xBE0C;&#xB9AC;&#xB4DC; &#xD329; &#xB9E8;&#xACFC; Poleward &#xD50C;&#xB7ED;&#xC2A4;&#xC758; anaphase 1. &#xD0A8; &#xB098; &#xC758;&#xC874; &#xD329; &#xB9E8;-&#xD50C;&#xB7ED;&#xC2A4; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xB418; &#xB098; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC;&#xC758; &#xC758;&#xBBF8;&#xB97C; &#xB17C;&#xC758; &#xAC19;&#xC740; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB4DC;&#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; chromatid &#xD3F4; &#xBAA8;&#xC158; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xCD94;&#xAC00; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xD0D0;&#xC0C9; &#xD558; &#xACE0; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

A. anaphase&#xC758; &#xCE5C;&#xCC99;-&#xC885;&#xC18D; &#xD329; &#xB9E8;-&#xD50C;&#xB7ED;&#xC2A4; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;

Anafase una moci&#xF3;n de crom&#xE1;tidas a polo es fundamental para la correcta segregaci&#xF3;n cromos&#xF3;mica en la mayor&#xED;a de los sistemas. Durante las &#xFA;ltimas d&#xE9;cadas, dos modelos para el mecanismo de la anafase A han llegado a la prominencia. El modelo postula que el Pacman crom&#xE1;tidas inducen la despolimerizaci&#xF3;n de los microt&#xFA;bulos m&#xE1;s-termina incrustado en cinetocoros, con lo que &#x26;quot;masticar&#x26;quot; su camino hacia los polos. Por otra parte, los postulados de modelo hacia el polo-flujo que crom&#xE1;tidas son &#x26;quot;tambale&#xF3;-in&#x26;quot; a los polos de la despolimerizaci&#xF3;n continua de los extremos de menos de cinetocoro asociadas a los microt&#xFA;bulos, que se concentran en los polos del huso. En un estudio reciente, se inform&#xF3; de que la anafase A en Drosophila requiere la despolimerizaci&#xF3;n de los dos extremos del cinetocoro asociadas a los microt&#xFA;bulos, al mismo tiempo. Esto se debe a dos miembros de la subfamilia de Kin que kinesins, denominado KLP59C y KLP10A, que se dirigen espec&#xED;ficamente a las crom&#xE1;tidas y los polos del huso, respectivamente. Hemos llamado a este h&#xED;brido de Pacman y el flujo hacia el polo del Kin I-dependiente de Pacman de flujo mecanismo para la anafase A. A continuaci&#xF3;n, se discuten las implicaciones de estos hallazgos y explorar los posibles componentes adicionales que se requieren para conducir crom&#xE1;tidas a polo movimiento por un mecanismo de .

Un Kin I-dependiente de Pacman de flujo Mecanismo para un Anafase

&#x9700;&#x8981;&#x9002;&#x5F53;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x53D1;&#x5C55;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x805A;&#x5408;&#x548C;&#x89E3;&#x805A;&#x7684;&#x89C4;&#x4F8B;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x4E24;&#x79CD;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x679C;&#x8747;&#x679C;&#x8747;-&#x80DE;&#x819C;&#xFF0C;KLP10A &#x548C; KLP59C&#xFF0C;&#x5408;&#x4F5C;&#x5230;&#x9A71;&#x52A8;&#x5668;&#x95F4;&#x671F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x89E3;&#x805A;&#x3002;S2 &#x8017;&#x5C3D;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x523A;&#x6FC0;&#x89E3;&#x805A;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6539;&#x53D8;&#x4E0D;&#x540C;&#x53C2;&#x6570;&#x7684;&#x52A8;&#x6001;&#x4E0D;&#x7A33;&#x5B9A; &#xFF1B;KLP10A &#x523A;&#x6FC0;&#x707E;&#x96BE; &#xFF08;&#x4EA4;&#x6362;&#x673A;&#x4ECE;&#x589E;&#x957F;&#x5230;&#x6536;&#x7F29;&#xFF09; &#x800C; KLP59C &#x53D6;&#x6D88;&#x6551;&#x63F4; &#xFF08;&#x4EA4;&#x6362;&#x673A;&#x4ECE;&#x6536;&#x7F29;&#x5230;&#x589E;&#x957F;&#xFF09;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x514D;&#x75AB;&#x8367;&#x5149;&#x548C;&#x8868;&#x793A;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x9A71;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6D3B;&#x5206;&#x6790;&#x63ED;&#x793A;&#x4E86;&#x805A;&#x5408;&#x548C;&#x89E3;&#x805A;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x518D;&#x52A0;&#x4E0A;&#x4E24;&#x7AEF;&#xFF0C;&#x5206;&#x522B;&#x4E3A; KLP10A &#x548C; KLP59C &#x76EE;&#x6807;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x4E5F;&#x8868;&#x660E; KLP10A &#x6C89;&#x79EF;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x7684;&#x52A0;&#x53F7;&#x7ED3;&#x675F;&#x8DDF;&#x8E2A;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;EB1&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x652F;&#x6301;&#x4E00;&#x79CD;&#x6A21;&#x578B;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x4E24;&#x4F4D;&#x6210;&#x5458;&#x7684;&#x80DE;&#x819C;&#x5212;&#x5206;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x89E3;&#x805A;&#x7684;&#x52B3;&#x5DE5;&#x3002;

&#x529F;&#x80FD;&#x4E0A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x9A71;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;-13 &#x5BB6;&#x5EAD;&#x6210;&#x5458;&#x5408;&#x4F5C;&#xFF0C;&#x8C03;&#x8282;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x95F4;&#x671F;&#x3002;

Regulation of microtubule polymerization and depolymerization is required for proper cell development. Here, we report that two proteins of the Drosophila melanogaster kinesin-13 family, KLP10A and KLP59C, cooperate to drive microtubule depolymerization in interphase cells. Analyses of microtubule dynamics in S2 cells depleted of these proteins indicate that both proteins stimulate depolymerization, but alter distinct parameters of dynamic instability; KLP10A stimulates catastrophe (a switch from growth to shrinkage) whereas KLP59C suppresses rescue (a switch from shrinkage to growth). Moreover, immunofluorescence and live analyses of cells expressing tagged kinesins reveal that KLP10A and KLP59C target to polymerizing and depolymerizing microtubule plus ends, respectively. Our data also suggest that KLP10A is deposited on microtubules by the plus-end tracking protein, EB1. Our findings support a model in which these two members of the kinesin-13 family divide the labour of microtubule depolymerization.

Functionally distinct kinesin-13 family members cooperate to regulate microtubule dynamics during interphase.

R&#xE8;glement de la polym&#xE9;risation des microtubules et de d&#xE9;polym&#xE9;risation est n&#xE9;cessaire pour le d&#xE9;veloppement des cellules bonne. Ici, nous d&#xE9;clarons que deux prot&#xE9;ines de la Drosophila melanogaster kin&#xE9;sine-13 de la famille, et KLP10A KLP59C, coop&#xE9;rer pour conduire d&#xE9;polym&#xE9;risation des microtubules dans les cellules en interphase. Les analyses de la dynamique des microtubules dans les cellules S2 &#xE9;puis&#xE9;s de ces prot&#xE9;ines indiquent que les deux prot&#xE9;ines stimulent la d&#xE9;polym&#xE9;risation, mais modifier les param&#xE8;tres distincts de l&#x26;#39;instabilit&#xE9; dynamique; KLP10A stimule la catastrophe (un commutateur de la croissance au retrait), tandis que KLP59C supprime sauvetage (un commutateur de retrait &#xE0; la croissance). En outre, les analyses d&#x26;#39;immunofluorescence et en direct de cellules exprimant kin&#xE9;sines marqu&#xE9;s r&#xE9;v&#xE8;lent que KLP10A et cible KLP59C &#xE0; la polym&#xE9;risation et la d&#xE9;polym&#xE9;risation des microtubules, plus fins, respectivement. Nos donn&#xE9;es sugg&#xE8;rent &#xE9;galement que KLP10A est d&#xE9;pos&#xE9; sur les microtubules par la prot&#xE9;ine de suivi plus-fin, EB1. Nos r&#xE9;sultats appuient un mod&#xE8;le dans lequel ces deux membres de la kin&#xE9;sine-13 de la famille de diviser le travail de d&#xE9;polym&#xE9;risation des microtubules.

Fonctionnellement distinct Membres kin&#xE9;sine-13 visant &#xE0; r&#xE9;glementer la famille Coop&#xE9;rer la dynamique des microtubules durant l&#x26;#39;interphase

Funktionell unterschiedlichen Kinesin-13 Familienmitglieder zusammen, um die Dynamik der Mikrotubuli w&#xE4;hrend der Interphase zu regulieren.

Regolamento di polimerizzazione dei microtubuli e depolimerizzazione &egrave; necessaria per lo sviluppo corretto delle cellule. Riportiamo qui, che due proteine della Drosophila melanogaster chinesina-13 famiglia, KLP10A e KLP59C, cooperano alla depolimerizzazione dei microtubuli in auto nelle cellule in interfase. Analisi della dinamica dei microtubuli nelle cellule S2 impoverite di queste proteine indicano che entrambe le proteine stimolano la depolimerizzazione, ma modificare diversi parametri di instabilit&agrave; dinamica; KLP10A stimola la catastrofe (un interruttore dalla crescita di restringimento) considerando che la KLP59C sopprime rescue (un interruttore dal ritiro di crescita). Inoltre, immunofluorescenza e analisi diretta delle cellule che esprimono tagged kinesins rivelano quel target KLP10A e KLP59C per polimerizzazione e depolymerizing ai microtubuli pi&ugrave; finisce, rispettivamente. I nostri dati suggeriscono anche che KLP10A &egrave; depositato su microtubuli dalla proteina plus-fine tracking, EB1. I nostri risultati supportano un modello in cui questi due membri della famiglia chinesina-13 dividono il lavoro di depolimerizzazione dei microtubuli.

Funzionalmente distinti chinesina-13 membri della famiglia collaborano per regolare la dinamica dei microtubuli durante l&#39;interfase.

&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x91CD;&#x5408;&#x3068;&#x8131;&#x91CD;&#x5408;&#x306E;&#x898F;&#x5236;&#x306F;&#x3001;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30AD;&#x30A4;&#x30ED;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;&#x30AD;&#x30CD;&#x30B7;&#x30F3;-13&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x3001;KLP10A&#x3068;KLP59C&#x306E;2&#x3064;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x9593;&#x671F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x8131;&#x91CD;&#x5408;&#x3092;&#x99C6;&#x52D5;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5354;&#x529B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x67AF;&#x6E07;S2&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x89E3;&#x6790;&#x306F;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x304C;&#x91CD;&#x5408;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x52D5;&#x7684;&#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;KLP59C&#x306F;&#xFF08;&#x6210;&#x9577;&#x3078;&#x306E;&#x53CE;&#x7E2E;&#x304B;&#x3089;&#x30B9;&#x30A4;&#x30C3;&#x30C1;&#xFF09;&#x6551;&#x52A9;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3001;KLP10A&#xFF08;&#x6210;&#x9577;&#x304B;&#x3089;&#x53CE;&#x7E2E;&#x3078;&#x306E;&#x5207;&#x308A;&#x66FF;&#x3048;&#xFF09;&#x7834;&#x5C40;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x30BF;&#x30B0;&#x4ED8;&#x304D;&#x306E;&#x30AD;&#x30CD;&#x30B7;&#x30F3;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x86CD;&#x5149;&#x3084;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3001;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x7AEF;&#x3092;&#x91CD;&#x5408;&#x3068;&#x8131;&#x91CD;&#x5408;&#x306B;&#x305D;&#x306E;KLP10A&#x3068;KLP59C&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;KLP10A&#x306F;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x8FFD;&#x8DE1;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3001;EB1&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x4E0A;&#x306B;&#x5806;&#x7A4D;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x4ECA;&#x56DE;&#x306E;&#x77E5;&#x898B;&#x306F;&#x3001;&#x30AD;&#x30CD;&#x30B7;&#x30F3;-13&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x306E;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;2&#x3064;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x304C;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x8131;&#x91CD;&#x5408;&#x306E;&#x52B4;&#x50CD;&#x3092;&#x5206;&#x5272;&#x3057;&#x305F;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306B;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30AD;&#x30CD;&#x30B7;&#x30F3;-13&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x9593;&#x671F;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5354;&#x529B;&#x3059;&#x308B;

Microtubule &#xC911; &#xD569; &#xBC0F; depolymerization&#xC758; &#xADDC;&#xC815;&#xC740; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xC804;&#xC9C0; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCF4;&#xACE0; Drosophila melanogaster kinesin 13 &#xAC00;&#xC871;, KLP10A &#xBC0F; KLP59C, &#xB450; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xACC4;&#xBA74; &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB4DC;&#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; microtubule depolymerization&#xC5D0; &#xD611;&#xC870; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. S 2 &#xC140;&#xC774; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xACE0;&#xAC08; microtubule &#xC5ED;&#xD559; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xB450; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; depolymerization, &#xC790;&#xADF9; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB3D9;&#xC801; &#xBD88;&#xC548;&#xC815;&#xC131;;&#xC758; &#xACE0;&#xC720;&#xD55C; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218;&#xB97C; &#xBCC0;&#xACBD; KLP10A KLP59C &#xAD6C;&#xC870; (&#xC131;&#xC7A5;&#xC5D0; &#xC218;&#xCD95;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2A4;&#xC704;&#xCE58;)&#xB97C; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xBC18;&#xBA74; &#xC7AC;&#xC559;&#xC744; (&#xC218;&#xCD95;&#xC5D0; &#xC131;&#xC7A5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2A4;&#xC704;&#xCE58;)&#xB97C; &#xC790;&#xADF9; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xBA74;&#xC5ED; &#xD615;&#xAD11; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC0F; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xBD84;&#xC11D; &#xD0DC;&#xADF8; kinesins&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xC140;&#xC758; polymerizing &#xBC0F; depolymerizing microtubule &#xD50C;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xB05D;, &#xAC01;&#xAC01; KLP10A &#xBC0F; KLP59C &#xB300;&#xC0C1; &#xACF5;&#xAC1C;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xB610;&#xD55C; EB1 &#xB354;&#xD558;&#xAE30; &#xC5D4;&#xB4DC; &#xCD94;&#xC801; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; KLP10A microtubules&#xC5D0; &#xC785;&#xAE08; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC;&#xB294; kinesin 13 &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xB450; &#xBA64;&#xBC84;&#xAC00; &#xBD84;&#xD560; microtubule depolymerization &#xB178;&#xB3D9; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC9C0;&#xC6D0;.

&#xAE30;&#xB2A5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB69C;&#xB837;&#xD55C; kinesin 13 &#xAC00;&#xC871; &#xACC4;&#xBA74; &#xC911; microtubule &#xC5ED;&#xD559; &#xADDC;&#xC81C; &#xD611;&#xC870;.

Reglamento de la polimerizaci&#xF3;n y despolimerizaci&#xF3;n de los microt&#xFA;bulos se requiere para el desarrollo adecuado de las c&#xE9;lulas. En este caso, nos informan de que dos prote&#xED;nas de la Drosophila melanogaster kinesina-13 de la familia, y KLP10A KLP59C, cooperar para impulsar la despolimerizaci&#xF3;n de los microt&#xFA;bulos en las c&#xE9;lulas en interfase. Los an&#xE1;lisis de din&#xE1;mica de los microt&#xFA;bulos en las c&#xE9;lulas S2 agotados de estas prote&#xED;nas indica que ambas prote&#xED;nas estimulan la despolimerizaci&#xF3;n, pero sin alterar los par&#xE1;metros distintos de la inestabilidad din&#xE1;mica; KLP10A estimula la cat&#xE1;strofe (un cambio de crecimiento a la contracci&#xF3;n), mientras que suprime KLP59C de rescate (un cambio de la contracci&#xF3;n del crecimiento). Por otra parte, los an&#xE1;lisis de inmunofluorescencia y en vivo de las c&#xE9;lulas que expresan kinesins etiquetados revelan que KLP10A y el objetivo KLP59C de polimerizaci&#xF3;n y despolimerizaci&#xF3;n de microt&#xFA;bulos m&#xE1;s extremos, respectivamente. Nuestros datos tambi&#xE9;n sugieren que KLP10A se deposita sobre los microt&#xFA;bulos por la prote&#xED;na de seguimiento, m&#xE1;s extremo, EB1. Nuestros resultados apoyan un modelo en el que estos dos miembros de la familia kinesin-13 se dividen el trabajo de la despolimerizaci&#xF3;n de los microt&#xFA;bulos.

Funcionalmente distintas Kinesin-13 miembros de la familia Cooperar para regular la din&#xE1;mica de microt&#xFA;bulos durante la interfase

&#x51C6;&#x786E;&#x548C;&#x53CA;&#x65F6;&#x7684;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x5206;&#x79BB;&#x662F;&#x7531;&#x4E13;&#x95E8;&#x7684;&#x521B;&#x9020;&#x529B;&#x91CF;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;--&#x4E3B;&#x8F74;&#x5728;&#x51CF;&#x6570;&#x5206;&#x88C2;&#x548C;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x6267;&#x884C;&#x4EFB;&#x52A1;&#x3002;&#x6B64;&#x5FAE;&#x578B;&#x673A;&#x68B0;&#x6784;&#x9020;&#x7684;&#x8BB8;&#x591A;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#xFF0C;&#x6700;&#x5F15;&#x4EBA;&#x6CE8;&#x76EE;&#x7684;&#x662F;&#x4E1D;&#x72B6;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6210;&#x4E3A;&#x4E3B;&#x8F74;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x6846;&#x67B6;&#x548C;&#x4E5F;&#x4F20;&#x8F93;&#x901A;&#x8FC7;&#x5B83;&#x7684;&#x529B;&#x91CF;&#x3002;&#x5411;&#x6781;&#x901A;&#x91CF;&#x662F;&#x7531;&#x4E3B;&#x8F74;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x4F7F;&#x7528;&#x79FB;&#x52A8;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#xFF0C;&#x89C4;&#x7BA1;&#x4E3B;&#x8F74;&#x957F;&#x5EA6;&#x8FDB;&#x5316;&#x4FDD;&#x6301;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x5DF2;&#x786E;&#x5B9A;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x89E3;&#x805A;&#x9A71;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x4E3A;&#x901A;&#x91CF;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x529B;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5173;&#x952E;&#x7EC4;&#x6210;&#x90E8;&#x5206;&#x3002;&#x6839;&#x636E;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8C03;&#x67E5;&#x7ED3;&#x679C;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B0;&#x6A21;&#x578B;&#x653E;&#x7F6E;&#x5728;&#x7EBA;&#x9524;&#x6781;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x62C6;&#x5378;&#x673A;&#x5236;&#x7531;&#x4F9B;&#x7535;&#x7684;&#x901A;&#x91CF;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x901A;&#x91CF;&#x6A21;&#x578B;&#x6765;&#x89E3;&#x91CA;&#x4E3B;&#x8F74;&#x64CD;&#x7EB5;&#x5B9E;&#x9A8C;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x8BF4;&#x660E;&#x9002;&#x5F53;&#x7684;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x7684;&#x901A;&#x91CF;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;

&#x4E3B;&#x8F74;&#x4E2D;&#x901A;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x3002;

Accurate and timely chromosome segregation is a task performed within meiotic and mitotic cells by a specialized force-generating structure--the spindle. This micromachine is constructed from numerous proteins, most notably the filamentous microtubules that form a structural framework for the spindle and also transmit forces through it. Poleward flux is an evolutionarily conserved mechanism used by spindle microtubules both to move chromosomes and to regulate spindle length. Recent studies have identified a microtubule-depolymerizing kinesin as a key force-generating component required for flux. On the basis of these findings, we propose a new model for flux powered by a microtubule-disassembly mechanism positioned at the spindle pole. In addition, we use the flux model to explain the results of spindle manipulation experiments to illustrate the importance of flux for proper chromosome positioning.

Spindle microtubules in flux.

La s&#xE9;gr&#xE9;gation des chromosomes pr&#xE9;cises et actuelles est une t&#xE2;che effectu&#xE9;e dans les cellules m&#xE9;iotiques et mitotiques par une soci&#xE9;t&#xE9; sp&#xE9;cialis&#xE9;e g&#xE9;n&#xE9;ratrice de force de la structure - la broche. Cette micromachine est construit &#xE0; partir de nombreuses prot&#xE9;ines, notamment les microtubules filamenteux qui forment un cadre structurel pour la broche et aussi transmettre des forces &#xE0; travers elle. Vers le p&#xF4;le de flux est un m&#xE9;canisme &#xE9;volutif conserv&#xE9; utilis&#xE9; par microtubules du fuseau &#xE0; la fois de se d&#xE9;placer chromosomes et &#xE0; r&#xE9;glementer la longueur de la broche. Des &#xE9;tudes r&#xE9;centes ont identifi&#xE9; une kin&#xE9;sine microtubules d&#xE9;polym&#xE9;risation comme une cl&#xE9; de g&#xE9;n&#xE9;ration de force composante n&#xE9;cessaire pour le flux. Sur la base de ces constatations, nous proposons un nouveau mod&#xE8;le pour le flux g&#xE9;n&#xE9;r&#xE9; par un m&#xE9;canisme de microtubules d&#xE9;montage positionn&#xE9; au p&#xF4;le du fuseau. En outre, nous utilisons le mod&#xE8;le de flux d&#x26;#39;expliquer les r&#xE9;sultats des exp&#xE9;riences de manipulation de broche pour illustrer l&#x26;#39;importance du flux pour le positionnement correcte des chromosomes.

Microtubules du fuseau dans Flux

Spindel-Mikrotubuli im Fluss.

Accurate e tempestive cromosoma segregazione &egrave; un&#39;operazione eseguita all&#39;interno delle cellule meiotica e mitotica da una struttura specializzata forza generatrice - mandrino. Questo micromachine &egrave; costruito da numerose proteine, in particolare i microtubuli filamentosi che formano un quadro strutturale per il mandrino e anche trasmettono forze attraverso di essa. Flusso perturbato &egrave; un meccanismo evolutivamente conservato usato dai microtubuli del fuso per spostare i cromosomi e di regolare la lunghezza del mandrino. Recenti studi hanno identificato una chinesina microtubule-depolymerizing come una componente chiave di generazione di forza necessaria per il flusso. Sulla base di questi risultati, vi proponiamo un nuovo modello per disossidante alimentato da un meccanismo di disassemblaggio dei microtubuli posizionato presso il polo di mandrino. Inoltre, utilizziamo il modello di flusso per spiegare i risultati degli esperimenti di manipolazione mandrino per illustrare l&#39;importanza del flusso per il cromosoma corretto posizionamento.

Mandrino microtubuli nel flusso.

&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB; - &#x6B63;&#x78BA;&#x304B;&#x3064;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0;&#x30EA;&#x30FC;&#x306A;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x306E;&#x5206;&#x96E2;&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x6B8A;&#x306A;&#x529B;&#x3092;&#x767A;&#x751F;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x69CB;&#x9020;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x6E1B;&#x6570;&#x5206;&#x88C2;&#x3068;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x3067;&#x5B9F;&#x884C;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30BF;&#x30B9;&#x30AF;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30B7;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x306B;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3001;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x7684;&#x306A;&#x67A0;&#x7D44;&#x307F;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3057;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x305D;&#x308C;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x529B;&#x3092;&#x4F1D;&#x3048;&#x308B;&#x200B;&#x200B;&#x7CF8;&#x72B6;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x304B;&#x3089;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6975;&#x65B9;&#x5411;&#x3078;&#x306E;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x3092;&#x79FB;&#x52D5;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x306E;&#x9577;&#x3055;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x9032;&#x5316;&#x7684;&#x306B;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x9375;&#x306E;&#x529B;&#x3092;&#x767A;&#x751F;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x6210;&#x5206;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x8131;&#x91CD;&#x5408;&#x30AD;&#x30CD;&#x30B7;&#x30F3;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x77E5;&#x898B;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x7D21;&#x9318;&#x4F53;&#x6975;&#x306B;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x3057;&#x3001;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x5206;&#x89E3;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4F9B;&#x7D66;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x306E;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x6C7A;&#x3081;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x64CD;&#x4F5C;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3059;&#x308B;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;

&#xC815;&#xD655; &#xD558; &#xACE0; &#xC2DC;&#xAE30; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xBD84;&#xB9AC; &#xC804;&#xBB38;&#xB41C; &#xD3EC;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xAD6C;&#xC870;-&#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; meiotic&#xC640; mitotic &#xC140; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC218;&#xD589; &#xD558;&#xB294; &#xC791;&#xC5C5;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; micromachine &#xC218;&#xB9CE;&#xC740; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC74;&#xC124; &#xD2B9;&#xD788; filamentous microtubules &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAD6C;&#xC870; &#xD504;&#xB808;&#xC784; &#xC6CC;&#xD06C;&#xB97C; &#xD615;&#xC131; &#xD558; &#xACE0; &#xB610;&#xD55C; &#xADF8;&#xAC83;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xD798;&#xC744; &#xC804;&#xC1A1; &#xD558;&#xB294;. Poleward &#xC18D;&#xC740; &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; microtubules &#xC0AC;&#xC6A9; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xC774;&#xB3D9; &#xD558; &#xACE0; &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; &#xAE38;&#xC774; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294; &#xC9C4;&#xD654; &#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD5C;&#xADFC; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC790; &#xC18D;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xD0A4; &#xD3EC;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB85C; microtubule depolymerizing kinesin&#xC744; &#xD655;&#xC778; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xADFC;&#xAC70; &#xD558; &#xC5EC; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xD50C;&#xB7ED;&#xC2A4; &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; &#xADF9;&#xC5D0; &#xC704;&#xCE58; microtubule &#xBD84;&#xD574; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC81C;&#xACF5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xD50C;&#xB7ED;&#xC2A4; &#xBAA8;&#xB378; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xC704;&#xCE58;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC720;&#xB7C9;&#xC758; &#xC911;&#xC694;&#xC131;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; &#xC870;&#xC791; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; microtubules &#xC720;&#xB3D9;&#xC801;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La segregaci&#xF3;n de cromosomas precisa y oportuna es una tarea que se realiza dentro de las c&#xE9;lulas mei&#xF3;ticas y mit&#xF3;ticas por un organismo especializado de generaci&#xF3;n de fuerza la estructura - el eje. Este microm&#xE1;quinas se construye a partir de numerosas prote&#xED;nas, en particular los microt&#xFA;bulos filamentosos que forman un marco estructural para el eje y tambi&#xE9;n transmiten las fuerzas a trav&#xE9;s de &#xE9;l. Hacia el polo de flujo es un mecanismo conservado evolutivamente utilizado por los microt&#xFA;bulos del huso tanto para mover los cromosomas y para regular la longitud del eje. Estudios recientes han identificado una quinesina microt&#xFA;bulos depolymerizing como una clave de generaci&#xF3;n de fuerza componente requerido para el flujo. Sobre la base de estos resultados, proponemos un nuevo modelo para el flujo impulsado por un mecanismo de microt&#xFA;bulos desmontaje situado en el polo del huso. Adem&#xE1;s, se utiliza el modelo de flujo para explicar los resultados de los experimentos de manipulaci&#xF3;n del huso para ilustrar la importancia del flujo para la colocaci&#xF3;n correcta del cromosoma.

Los microt&#xFA;bulos del huso en el flujo de

Dynactin &#x94FE;&#x63A5;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x808C;&#x548C;&#x5176;&#x4ED6;&#x8D27;&#x7269;&#x7535;&#x673A;&#x662F;&#x53C2;&#x4E0E;&#x7B79;&#x529E;&#x5F84;&#x5411;&#x5FAE;&#x9635;&#x5217;&#x3002;&#x5927;&#x4E9A;&#x57FA;&#x7684; dynactin&#xFF0C;p150(glued)&#xFF0C;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x808C;&#x4E2D;&#x95F4;&#x94FE;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5177;&#x6709; N-&#x7AEF;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x7ED3;&#x5408;&#x57DF;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x68C0;&#x67E5;&#x7531; p150(glued) &#x5FAE;&#x7BA1;&#x7ED3;&#x5408;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x66FF;&#x6362;&#x91CE;&#x751F;&#x578B; p150(glued) &#x5728;&#x679C;&#x8747; S2 &#x679C;&#x8747;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53; DeltaN p150 &#x7F3A;&#x4E4F;&#x6B8B;&#x7559; 1-200&#xFF0C;&#x5373;&#x65E0;&#x6CD5;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x3002;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6CBB;&#x7597; cytochalasin D &#x7528;&#x4E8E;&#x8D27;&#x7269;&#x6CBF;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x7684;&#x8FD0;&#x52A8;&#x5206;&#x6790;&#x3002;&#x5F15;&#x4EBA;&#x6CE8;&#x76EE;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x819C;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5668;&#x548C;&#x4FE1;&#x4F7F;&#x6838;&#x7CD6;&#x6838;&#x86CB;&#x767D;&#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x808C;&#x548C;&#x9A71;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;-1 &#x7684;&#x6D41;&#x52A8;&#x9700;&#x8981; dynactin&#xFF0C;&#x5168;&#x957F; p150(glued) &#x4E0E; DeltaN-p150(glued) &#x7684;&#x66FF;&#x4EE3;&#x5DF2;&#x6CA1;&#x6709;&#x5F71;&#x54CD;&#x7387;&#x3001; processivity &#x6216;&#x6B65;&#x957F;&#x7684;&#x8FD0;&#x8F93;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;p150(glued) &#x7684;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x7ED3;&#x5408;&#x57DF;&#x7684;&#x622A;&#x65AD;&#x4E86;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#xFF0C;&#x5728;&#x4EE3;&#x7684;&#x591A;&#x6781;&#x5FC3;&#x8F74;&#x548C;&#x514D;&#x8D39;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x9020;&#x6210;&#x5DE8;&#x5927;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x9700;&#x8981;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E3B;&#x8F74;&#x5FAE;&#x9635;&#x5217;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x5728;&#x4F53;&#x5185;&#x8D27;&#x7269;&#x52A8;&#x529B; dynactin &#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x3002;

Dynactin &#x7531;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x662F;&#x5FC5;&#x9700;&#x7684;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x7EC4;&#x7EC7;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E0D;&#x662F;&#x8D27;&#x7269;&#x8FD0;&#x8F93;&#x3002;

Dynactin links cytoplasmic dynein and other motors to cargo and is involved in organizing radial microtubule arrays. The largest subunit of dynactin, p150(glued), binds the dynein intermediate chain and has an N-terminal microtubule-binding domain. To examine the role of microtubule binding by p150(glued), we replaced the wild-type p150(glued) in Drosophila melanogaster S2 cells with mutant DeltaN-p150 lacking residues 1-200, which is unable to bind microtubules. Cells treated with cytochalasin D were used for analysis of cargo movement along microtubules. Strikingly, although the movement of both membranous organelles and messenger ribonucleoprotein complexes by dynein and kinesin-1 requires dynactin, the substitution of full-length p150(glued) with DeltaN-p150(glued) has no effect on the rate, processivity, or step size of transport. However, truncation of the microtubule-binding domain of p150(glued) has a dramatic effect on cell division, resulting in the generation of multipolar spindles and free microtubule-organizing centers. Thus, dynactin binding to microtubules is required for organizing spindle microtubule arrays but not cargo motility in vivo.

Microtubule binding by dynactin is required for microtubule organization but not cargo transport.

Liens dynactine dyn&#xE9;ine cytoplasmique et autres moteurs &#xE0; la cargaison et est impliqu&#xE9; dans l&#x26;#39;organisation des microtubules tableaux radiaux. La plus grande sous-unit&#xE9; de dynactine, p150 (coll&#xE9;e), la cha&#xEE;ne se lie dyn&#xE9;ine interm&#xE9;diaire et a une extr&#xE9;mit&#xE9; N-terminale le domaine de liaison aux microtubules. Pour examiner le r&#xF4;le de la liaison des microtubules par p150 (coll&#xE9;), nous avons remplac&#xE9; le p150 de type sauvage (coll&#xE9;) dans les cellules S2 de Drosophila melanogaster avec mutantes DELTAN-P150 r&#xE9;sidus manquent 1-200, ce qui est incapable de se lier les microtubules. Les cellules trait&#xE9;es avec la cytochalasine D ont &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9;s pour l&#x26;#39;analyse des mouvements de marchandises le long des microtubules. &#xC9;tonnamment, bien que le mouvement des deux organites membraneux et complexes ribonucl&#xE9;oprot&#xE9;iques messagers par la dyn&#xE9;ine et la kin&#xE9;sine-1 n&#xE9;cessite dynactine, la substitution de pleine longueur p150 (coll&#xE9;) avec DELTAN-p150 (coll&#xE9;) n&#x26;#39;a aucun effet sur le taux, la processivit&#xE9;, ou &#xE9;tape la taille de transport. Toutefois, la troncature du domaine de liaison de microtubules p150 (coll&#xE9;) a un effet dramatique sur la division cellulaire, ce qui entra&#xEE;ne la g&#xE9;n&#xE9;ration d&#x26;#39;multipolaire broches et libres d&#x26;#39;organiser des centres microtubules. Ainsi, la liaison aux microtubules dynactine est n&#xE9;cessaire pour l&#x26;#39;organisation de r&#xE9;seaux de microtubules broche, mais pas la motilit&#xE9; du fret in vivo.

Microtubules reliure par Dynactin est requis pour l&#x26;#39;organisation des microtubules, mais Cargo Transport Non

Dctn3 verbindet cytoplasmatische Dynein und andere Motoren Cargo und engagiert sich in der Organisation von radial Microtubule-Arrays. Die gr&ouml;&szlig;te Untereinheit des DCTN3, p150(glued), bindet die Dynein-Mittelstufe-Kette und hat eine N-terminale Microtubule-bindende Dom&auml;ne. Um die Rolle des Microtubule-Bindung von p150(glued) zu untersuchen, ersetzt wir den Wildtyp-p150(glued) in Drosophila Melanogaster S2 Zellen mit Mutant Deltaner-p150 fehlt R&uuml;ckst&auml;nde 1-200, die Mikrotubuli binden kann. Zellen mit Cytochalasin D behandelt wurden f&uuml;r die Analyse von Ladung Bewegung entlang der Mikrotubuli verwendet. Auff&auml;llig ist, obwohl die Bewegung der membran&ouml;se Organellen und Kurier-Gebiets-komplexen durch Dynein und Kinesin-1 DCTN3 erfordert, hat die Substitution von in p150(glued) mit DeltaN-p150(glued) keine Auswirkung auf die Bewertung, Processivity oder Schrittgr&ouml;&szlig;e des Verkehrs. Allerdings hat das Abschneiden der Dom&auml;ne Microtubule-Bindung des p150(glued) einen dramatischen Effekt auf Zellteilung, was zu der Generation von multipolaren Spindeln und kostenlose Microtubule organizing Center. So ist DCTN3 Bindung an Mikrotubuli ben&ouml;tigt f&uuml;r die Organisation der Spindel Microtubule Arrays aber keine Ladung Motilit&auml;t in-vivo.

Microtubule-Bindung durch DCTN3 ist f&uuml;r Microtubule Organisation aber nicht lastentransport erforderlich.

Dctn1 collega dineina citoplasmatica ed altri motori a carico ed &egrave; coinvolto nell&#39;organizzazione di matrici radiali dei microtubuli. La subunit&agrave; pi&ugrave; grande di DCTN1, p150(glued), si lega la catena intermedia dineina e ha un dominio del microtubule-associazione N-terminale. Per esaminare il ruolo dell&#39;associazione microtubule di p150(glued), abbiamo sostituito il selvaggio-tipo p150(glued) nelle cellule di Drosophila melanogaster S2 con mutante Deltana-p150 carente residui 1-200, che &egrave; in grado di associare dei microtubuli. Le cellule trattate con citocalasina D sono state utilizzate per l&#39;analisi del movimento di carico lungo microtubuli. Sorprendentemente, anche se il movimento di membranous organelli e di complessi ribonucleoproteina Messaggero di dineina e chinesina-1 richiede DCTN1, la sostituzione del full-length p150(glued) con DeltaN-p150(glued) non ha alcun effetto sul tasso, processivity o passo dimensioni di trasporto. Tuttavia, troncamento del dominio microtubule-associazione di p150(glued) ha un effetto drammatico sulla divisione delle cellule, con conseguente generazione di mandrini multipolari e liberi microtubule-organizzare centri. Cos&igrave;, DCTN1 associazione di microtubuli &egrave; necessaria per l&#39;organizzazione di mandrino microtubule matrici ma non carico motilit&agrave; in vivo.

Associazione microtubule di DCTN1 &egrave; necessaria per la organizzazione dei microtubuli, ma non il trasporto merci.

&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CB;&#x30F3;&#x3068;&#x8CA8;&#x7269;&#x306B;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x3068;&#x653E;&#x5C04;&#x72B6;&#x306E;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x914D;&#x5217;&#x3092;&#x7D44;&#x7E54;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3001;P150&#xFF08;&#x63A5;&#x7740;&#xFF09;&#x306E;&#x6700;&#x5927;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CB;&#x30F3;&#x4E2D;&#x9593;&#x9396;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x3001;N&#x672B;&#x7AEF;&#x306E;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x7D50;&#x5408;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; P150&#xFF08;&#x63A5;&#x7740;&#xFF09;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x7D50;&#x5408;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x3092;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x306A;&#x3044;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3067;&#x308B;-P150&#x6B20;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x6B8B;&#x57FA;1&#x304B;&#x3089;200&#x307E;&#x3067;&#x3001;&#x3068;&#x30AD;&#x30A4;&#x30ED;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;S2&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;P150&#x3092;&#xFF08;&#x63A5;&#x7740;&#xFF09;&#x7F6E;&#x304D;&#x63DB;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30E9;&#x30B7;&#x30F3;D&#x3067;&#x51E6;&#x7406;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306B;&#x6CBF;&#x3063;&#x3066;&#x8CA8;&#x7269;&#x306E;&#x52D5;&#x304D;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x306B;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CB;&#x30F3;&#x3068;&#x30AD;&#x30CD;&#x30B7;&#x30F3;-1&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x819C;&#x5C0F;&#x5668;&#x5B98;&#x3084;&#x30E1;&#x30C3;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B8;&#x30E3;&#x30FC;&#x30EA;&#x30DC;&#x6838;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x52D5;&#x304D;&#x304C;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x304C;&#x9A5A;&#x304F;&#x3079;&#x304D;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;&#x3001;&#x3067;&#x308B;-P150&#xFF08;&#x63A5;&#x7740;&#xFF09;&#x3068;&#x30D5;&#x30EB;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B0;&#x30B9;P150&#xFF08;&#x63A5;&#x7740;&#xFF09;&#x306E;&#x7F6E;&#x63DB;&#x306F;&#x901F;&#x5EA6;&#x3001;&#x80FD;&#x529B;&#xFF08;processivity&#xFF09;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x8F38;&#x9001;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;P150&#xFF08;&#x63A5;&#x7740;&#xFF09;&#x306E;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x7D50;&#x5408;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x5207;&#x308A;&#x6368;&#x3066;&#x304C;&#x591A;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x3001;&#x30D5;&#x30EA;&#x30FC;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x7D44;&#x7E54;&#x5316;&#x30BB;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x4E16;&#x4EE3;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x306B;&#x5287;&#x7684;&#x306A;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306F;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x914D;&#x5217;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;in vivo&#x3067;&#x8CA8;&#x7269;&#x306E;&#x904B;&#x52D5;&#x3092;&#x7D44;&#x7E54;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x306F;&#x3001;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x8CA8;&#x7269;&#x8F38;&#x9001;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;

Dynactin &#xB9C1;&#xD06C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xD68C; &#xBC0F; &#xAE30;&#xD0C0; &#xD654;&#xBB3C; &#xBAA8;&#xD130; &#xBC29;&#xC0AC;&#xD615; microtubule &#xBC30;&#xC5F4; &#xAD6C;&#xC131;&#xC5D0; &#xAD00;&#xC5EC;. Dynactin&#xC758; &#xAC00;&#xC7A5; &#xD070; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; p150(glued), &#xD68C; &#xC911;&#xAC04; &#xCCB4;&#xC778;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xACE0; N &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; microtubule &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xC788;&#xB2E4;. P150(glued) &#xC5EC; microtubule &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD655;&#xC778; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; microtubules &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD560; &#xC218; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; DeltaN p150 &#xBD80;&#xC871; &#xD55C; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C; 1-200, Drosophila melanogaster S2 &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; p150(glued)&#xB294; &#xAD50;&#xCCB4;. Cytochalasin D&#xB85C; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC140; microtubules &#xB530;&#xB77C; &#xD654;&#xBB3C; &#xC774;&#xB3D9;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xAE30; &#xB9C9;&#xD788;&#xAC8C;, &#xC561;&#xCCB4;&#xB85C; organelles &#xBC0F; &#xBA54;&#xC2E0;&#xC800; ribonucleoprotein &#xB2E8;&#xC9C0; &#xD68C; &#xBC0F; kinesin 1 &#xC6B4;&#xB3D9;&#xC758; &#xD544;&#xC694; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; dynactin, Deltan-p150(glued)&#xC640; &#xC804;&#xCCB4; &#xAE38;&#xC774; p150(glued)&#xC758; &#xB300;&#xCCB4;&#xB294; &#xC18D;&#xB3C4;, processivity, &#xB610;&#xB294; &#xC804;&#xC1A1;&#xC758; &#xC2A4;&#xD15D; &#xD06C;&#xAE30;&#xC5D0;&#xB294; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC8FC;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, p150(glued)&#xC758; microtubule &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC758; &#xC798;&#xB9BC; &#xB2E4; &#xADF9; &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; &#xBC0F; &#xBB34;&#xB8CC; microtubule &#xC870;&#xC9C1; &#xC13C;&#xD130;&#xC758; &#xC138;&#xB300;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;&#xB85C; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xC5F4;&#xC5D0; &#xADF9;&#xC801;&#xC778; &#xD6A8;&#xACFC;&#xAC00; &#xC788;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, dynactin &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC744; microtubules&#xB294; &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; microtubule &#xBC30;&#xC5F4;&#xC744; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2CC; &#xD654;&#xBB3C; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD6C;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Dynactin&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; microtubule &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC740; microtubule &#xC870;&#xC9C1; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD654;&#xBB3C; &#xC218;&#xC1A1; &#xD558;&#xC9C0; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Enlaces dynactin dine&#xED;na citoplasm&#xE1;tica y otros motores de la carga y est&#xE1; involucrado en la organizaci&#xF3;n de las matrices radiales de los microt&#xFA;bulos. La subunidad mayor de dinactina, p150 (pegado), se une a la cadena intermedia de dine&#xED;na y tiene un N-terminal de dominio de uni&#xF3;n a los microt&#xFA;bulos. Para examinar el papel de la uni&#xF3;n de los microt&#xFA;bulos por el p150 (pegado), que sustituy&#xF3; a la p150 de tipo salvaje (pegado) en Drosophila melanogaster c&#xE9;lulas S2 con mutantes deltana-P150 que carecen de los residuos 1-200, que es incapaz de obligar a los microt&#xFA;bulos. Las c&#xE9;lulas tratadas con citocalasina D se utiliza para el an&#xE1;lisis del movimiento de carga a lo largo de los microt&#xFA;bulos. Sorprendentemente, aunque el movimiento de ambos organelos membranosos y complejos de ribonucleoprote&#xED;na mensajero de la dine&#xED;na y la kinesina 1-requiere dinactina, la sustituci&#xF3;n de larga duraci&#xF3;n p150 (pegado) con deltana-p150 (pegado) no tiene ning&#xFA;n efecto sobre la tasa, procesividad, o el paso tama&#xF1;o de transporte. Sin embargo, el truncamiento de los microt&#xFA;bulos del dominio de uni&#xF3;n de p150 (pegado) tiene un efecto dram&#xE1;tico en la divisi&#xF3;n celular, lo que resulta en la generaci&#xF3;n de multipolar husos y libres de centros de la organizaci&#xF3;n de los microt&#xFA;bulos. Por lo tanto, la uni&#xF3;n a los microt&#xFA;bulos dinactina se requiere para la organizaci&#xF3;n de las matrices del huso de microt&#xFA;bulos, pero no la motilidad de carga en vivo.

Microt&#xFA;bulos vinculante por dynactin se requiere para la organizaci&#xF3;n de microt&#xFA;bulos, pero no del transporte de carga

&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7EBA;&#x9524;&#x6746;&#x7531; Pacman-&#x901A;&#x91CF;&#x673A;&#x5236;&#x8D70;&#x5411;&#x94FE;&#x63A5;&#x5230;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x89E3;&#x805A;&#xFF1A; &#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x79EF;&#x6781; depolymerize &#x9644;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x52A0;&#x4E0A;&#x4E24;&#x7AEF; (Pacman&#xFF09; &#x540C;&#x65F6;&#x7F29;&#x56DE;&#xFF0C;&#x4E3B;&#x8F74;&#x7531;&#x4E0D;&#x65AD;&#x5411;&#x6781;&#x6D41;&#x9A71;&#x52A8;&#x7684;&#x8D1F;&#x7AEF;&#x89E3;&#x805A; &#xFF08;&#x5149;&#x901A;&#x91CF;) &#x7684;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x86CB;&#x767D;&#x4E9A;&#x57FA;&#x7535;&#x6746;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A; Pacman-&#x901A;&#x91CF;&#x5728;&#x679C;&#x8747;&#x4E2D;&#x5305;&#x542B;&#x4E86;&#x4E09;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x5272;&#x65AD;&#x9176;&#x3001; Spastin&#x3001; Fidgetin &#x548C; Katanin &#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;Spastin &#x548C; Fidgetin &#x88AB;&#x7528;&#x6765;&#x523A;&#x6FC0;&#x8D1F;&#x7AEF;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x89E3;&#x805A;&#x548C;&#x901A;&#x91CF;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x96C6;&#x4E2D;&#x4E2D;&#x5FC3;&#xFF0C;&#x5728;&#x90A3;&#x91CC;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x50AC;&#x5316; &gamma;-&#x5FAE;&#x7BA1;&#x86CB;&#x767D;&#x4E0E;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x91CA;&#x653E;&#x7A33;&#x5B9A; &gamma;-&#x5FAE;&#x7BA1;&#x86CB;&#x767D;&#x73AF;&#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x4ECE;&#x51CF;&#x53BB;&#x4E24;&#x7AEF;&#x65BD;&#x52A0;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x5047;&#x8BBE;&#x4E00;&#x81F4;&#x7684;&#x8425;&#x4E1A;&#x989D;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;Katanin &#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x4E3B;&#x8981;&#x662F;&#x5728;&#x540E;&#x671F;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#xFF0C;&#x51FA;&#x73B0;&#x5728;&#x5B83;&#x523A;&#x6FC0;&#x52A0;&#x7AEF;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x89E3;&#x805A;&#x548C;&#x57FA;&#x4E8E; Pacman &#x7684;&#x67D3;&#x8272;&#x5355;&#x4F53;&#x52A8;&#x529B;&#x3002;&#x96C6;&#x4F53;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x63ED;&#x793A;&#x5C0F;&#x8BF4;&#x548C;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x5207;&#x65AD;&#x4E3B;&#x8F74;&#x5185;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x53CA;&#x6269;&#x9614;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7528;&#x4E8E;&#x79FB;&#x52A8;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x7406;&#x89E3;&#x3002;

&#x4E09;&#x79CD;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x5272;&#x65AD;&#x9176;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x79FB;&#x52A8;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7684;&quot;Pacman-&#x901A;&quot;&#x673A;&#x68B0;&#x3002;

Chromosomes move toward mitotic spindle poles by a Pacman-flux mechanism linked to microtubule depolymerization: chromosomes actively depolymerize attached microtubule plus ends (Pacman) while being reeled in to spindle poles by the continual poleward flow of tubulin subunits driven by minus-end depolymerization (flux). We report that Pacman-flux in Drosophila melanogaster incorporates the activities of three different microtubule severing enzymes, Spastin, Fidgetin, and Katanin. Spastin and Fidgetin are utilized to stimulate microtubule minus-end depolymerization and flux. Both proteins concentrate at centrosomes, where they catalyze the turnover of gamma-tubulin, consistent with the hypothesis that they exert their influence by releasing stabilizing gamma-tubulin ring complexes from minus ends. In contrast, Katanin appears to function primarily on anaphase chromosomes, where it stimulates microtubule plus-end depolymerization and Pacman-based chromatid motility. Collectively, these findings reveal novel and significant roles for microtubule severing within the spindle and broaden our understanding of the molecular machinery used to move chromosomes.

Three microtubule severing enzymes contribute to the "Pacman-flux" machinery that moves chromosomes.

Les chromosomes se d&#xE9;placer vers les p&#xF4;les du fuseau mitotique par un m&#xE9;canisme de Pacman-flux li&#xE9;s &#xE0; la d&#xE9;polym&#xE9;risation des microtubules: chromosomes activement d&#xE9;polym&#xE9;riser microtubules ci-joint ainsi que les extr&#xE9;mit&#xE9;s (Pacman) tout en &#xE9;tant enroul&#xE9; pour p&#xF4;les du fuseau par le flux continu vers le p&#xF4;le de sous-unit&#xE9;s de tubuline entra&#xEE;n&#xE9;e par la fin de d&#xE9;polym&#xE9;risation moins (flux ). Nous signalons que Pacman-flux dans Drosophila melanogaster int&#xE8;gre les activit&#xE9;s de trois diff&#xE9;rentes enzymes de sectionnement des microtubules, SPASTIN, Fidgetin, et Katanin. Spastin et Fidgetin sont utilis&#xE9;s pour stimuler la microtubules moins la fin de d&#xE9;polym&#xE9;risation et de flux. Les deux prot&#xE9;ines se concentrer &#xE0; centrosomes, o&#xF9; ils catalysent le chiffre d&#x26;#39;affaires de la gamma-tubuline, compatible avec l&#x26;#39;hypoth&#xE8;se selon laquelle ils exercent leur influence en lib&#xE9;rant de stabilisation complexes annulaires gamma-tubuline &#xE0; partir des extr&#xE9;mit&#xE9;s moins. En revanche, Katanin semble fonctionner principalement sur les chromosomes en anaphase, o&#xF9; elle stimule des microtubules ainsi que la fin de d&#xE9;polym&#xE9;risation et de Pacman bas&#xE9; sur la motilit&#xE9; des chromatides. Collectivement, ces r&#xE9;sultats r&#xE9;v&#xE8;lent de nouveaux r&#xF4;les et significatif pour rupture des microtubules dans la broche et d&#x26;#39;&#xE9;largir notre compr&#xE9;hension de la machinerie mol&#xE9;culaire utilis&#xE9;e pour d&#xE9;placer les chromosomes.

Trois enzymes Severing microtubules Contribuer &#xE0; la &#x26;quot;Pacman-flux&#x26;quot; Machines That Moves chromosomes

Chromosomen einen Schritt in Richtung mitotische Spindel Polen durch einen Pacman-Flux-Mechanismus verbunden Microtubule Depolymerisation: Chromosomen depolymerize aktiv angeschlossenen Microtubule zuz&uuml;glich enden (Pacman) zwar wieder zu Polen durch die kontinuierliche Mantelkante Str&ouml;mung Tubulin-Untereinheiten, die angetrieben von Minus-Ende Depolymerisation (Fluss)-Spindel, eingefangen. Wir berichten, dass Pacman-Flux in Drosophila Melanogaster die Aktivit&auml;ten der drei verschiedenen Microtubule ausgel&ouml;st Enzyme, Spastin, Fidgetin und Katanin umfasst. Spastin und Fidgetin werden eingesetzt, um Microtubule Minus-Ende Depolymerisation und Flussmittel zu stimulieren. Beide Proteine konzentrieren auf Centrosomes, wo sie katalysieren den Umsatz der Gamma-Tubulin, untermauern die Hypothese, dass sie ihren Einfluss nehmen, indem Sie freigeben, Gamma-Tubulin-Ring-komplexe aus abz&uuml;glich enden zu stabilisieren. Im Gegensatz dazu scheint Katanin Funktion in erster Linie bei Anaphase Chromosomen, wo es stimuliert Microtubule Plus-End Depolymerisation und Pacman-basierte Chromatid Motilit&auml;t. Gemeinsam diese Befunde zeigen, Roman und bedeutende Rollen f&uuml;r Microtubule Abbruch innerhalb der Spindel und erweitern unser Verst&auml;ndnis der molekularen Maschinerie verwendet, um Chromosomen zu verschieben.

Drei Microtubule ausgel&ouml;st Enzyme dazu beitragen, die &quot;Pacman-Flux&quot;-Maschinerie, die Chromosomen bewegt.

Cromosomi sposta verso i poli del fuso mitotico da un meccanismo di Pacman-flusso legato alla depolimerizzazione dei microtubuli: cromosomi depolymerize attivamente associato ai microtubuli plus finisce (Pacman) pur essendo annaspato in al mandrino polacchi dal flusso perturbato continuo di subunit&agrave; di tubulina guidato da minus-fine depolimerizzazione (flusso). Segnaliamo che Pacman-flux in Drosophila melanogaster incorpora le attivit&agrave; dei tre enzimi rottura microtubuli diversi, Spastin, Fidgetin e Katanin. Spastin e Fidgetin sono utilizzate per stimolare il flusso e depolimerizzazione minus-fine dei microtubuli. Entrambe le proteine concentrano a cntrosome, dove essi catalizzano il fatturato della gamma-tubulina, coerenza con l&#39;ipotesi che esercitano la loro influenza rilasciando stabilizzazione complessi di anello gamma-tubulina da meno le estremit&agrave;. Al contrario, Katanin appare ai cromosomi di anafase principalmente in funzione, dove stimola la depolimerizzazione plus-fine dei microtubuli e motilit&agrave; basati su Pacman Cromatidio. Collettivamente, questi risultati rivelano romanzo e ruoli significativi per microtubule recisione all&#39;interno del mandrino e ampliano la nostra comprensione di macchine molecolari utilizzate per spostare i cromosomi.

Tre enzimi rottura microtubuli contribuiscono al macchinario &quot;Pacman-flux&quot; che si muove di cromosomi.

&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x306F;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x8131;&#x91CD;&#x5408;&#x306B;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30D1;&#x30C3;&#x30AF;&#x30DE;&#x30F3;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x7D21;&#x9318;&#x4F53;&#x6975;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x79FB;&#x52D5;&#xFF1A;&#x30DE;&#x30A4;&#x30CA;&#x30B9;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x89E3;&#x91CD;&#x5408;&#xFF08;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x99C6;&#x52D5;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x7D99;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x6975;&#x65B9;&#x5411;&#x306E;&#x6D41;&#x308C;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7D21;&#x9318;&#x4F53;&#x6975;&#x306B;&#x30EA;&#x30FC;&#x30EB;&#x308C;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x306F;&#x7A4D;&#x6975;&#x7684;&#x306B;&#x63A5;&#x7D9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x7AEF;&#xFF08;&#x30D1;&#x30C3;&#x30AF;&#x30DE;&#x30F3;&#xFF09;&#x3092;&#x89E3;&#x91CD;&#x5408;&#x3002;&#xFF09;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30AD;&#x30A4;&#x30ED;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;&#x3067;&#x30D1;&#x30C3;&#x30AF;&#x30DE;&#x30F3;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;3&#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x5207;&#x65AD;&#x9175;&#x7D20;&#x3001;Spastin&#x3001;Fidgetin&#x3001;&#x3068;Katanin&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3092;&#x7D44;&#x307F;&#x8FBC;&#x3093;&#x3060;&#x3068;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; Spastin&#x3068;Fidgetin&#x306F;&#x3001;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x30DE;&#x30A4;&#x30CA;&#x30B9;&#x7AEF;&#x89E3;&#x91CD;&#x5408;&#x3068;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5229;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x304C;&#x30DE;&#x30A4;&#x30CA;&#x30B9;&#x7AEF;&#x304B;&#x3089;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3B3;-&#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3092;&#x89E3;&#x653E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x305D;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x529B;&#x3092;&#x884C;&#x4F7F;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3001;&#x3B3;-&#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x58F2;&#x4E0A;&#x9AD8;&#x3092;&#x89E6;&#x5A92;&#x3059;&#x308B;&#x5834;&#x5408;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x306B;&#x96C6;&#x4E2D;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;Katanin&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x304C;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x7AEF;&#x89E3;&#x91CD;&#x5408;&#x3068;&#x30D1;&#x30C3;&#x30AF;&#x30DE;&#x30F3;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x67D3;&#x8272;&#x5206;&#x4F53;&#x306E;&#x904B;&#x52D5;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3057;&#x3001;&#x5F8C;&#x671F;&#x306E;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x4E0A;&#x3067;&#x4E3B;&#x306B;&#x52D5;&#x4F5C;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x898B;&#x3048;&#x308B;&#x3002;&#x7DCF;&#x79F0;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x77E5;&#x898B;&#x306F;&#x3001;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x5185;&#x3067;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x5207;&#x65AD;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5C0F;&#x8AAC;&#x3084;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x3001;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x3092;&#x79FB;&#x52D5;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x5206;&#x5B50;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306E;&#x7406;&#x89E3;&#x3092;&#x5E83;&#x3052;&#x308B;&#x3002;

&#x4E09;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x5207;&#x65AD;&#x9175;&#x7D20;&#x306F;&#x3001;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x3092;&#x79FB;&#x52D5;&#x3057;&#x3001; &#x26;quot;&#x30D1;&#x30C3;&#x30AF;&#x30DE;&#x30F3;&#xB7;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x26;quot;&#x6A5F;&#x68B0;&#x3078;&#x306E;&#x8CA2;&#x732E;

&#xD329; &#xB9E8;-&#xD50C;&#xB7ED;&#xC2A4; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; mitotic &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; &#xAE30;&#xB465;&#xC744; &#xD5A5;&#xD574; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xC774;&#xB3D9; microtubule depolymerization&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0;: &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4;&#xB294; &#xC801;&#xADF9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; microtubule depolymerize &#xD50C;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xB05D; (&#xD329; &#xB9E8;) &#xB418;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xD3F4;&#xB780;&#xB4DC;&#xC758; tubulin subunits &#xBE7C;&#xAE30; &#xC5D4;&#xB4DC; depolymerization (&#xD50C;&#xB7ED;&#xC2A4;)&#xC5D0; &#xD798;&#xC785;&#xC5B4; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; poleward &#xD750;&#xB984;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4;&#xC5D0; reeled. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCF4;&#xACE0; Drosophila melanogaster&#xC758; &#xD329; &#xB9E8;-&#xD50C;&#xB7ED;&#xC2A4; &#xC138; &#xB2E4;&#xB978; microtubule severing &#xD6A8;&#xC18C;, Spastin, Fidgetin, &#xBC0F; Katanin&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xD1B5;&#xD569; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Spastin &#xBC0F; Fidgetin microtubule &#xBE7C;&#xAE30; &#xC5D4;&#xB4DC; depolymerization &#xBC0F; &#xD50C;&#xB7ED;&#xC2A4; &#xC790;&#xADF9;&#xC744; &#xD65C;&#xC6A9; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB450; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; centrosomes, &#xC5B4;&#xB514; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xAC10;&#xB9C8;-tubulin, &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xAC10;&#xB9C8; tubulin &#xBC18;&#xC9C0; &#xBCF5;&#xD569;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB05D;&#xC744; &#xBE80; &#xC548;&#xC815;&#xD654;&#xB97C; &#xBC29;&#xCD9C; &#xD558; &#xC5EC; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC601;&#xD5A5;&#xB825;&#xC744; &#xBC1C;&#xD718; &#xD558;&#xB294; &#xAC00;&#xC124;&#xACFC; &#xC77C;&#xCE58;&#xC758; &#xB9E4;&#xCD9C; &#xC9C4;&#xC791; &#xC9D1;&#xC911;. &#xB300;&#xC870;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, Katanin &#xD568;&#xC218;&#xC5D0; &#xC8FC;&#xB85C; anaphase &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; microtubule &#xD50C;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC5D4;&#xB4DC; depolymerization&#xC640; &#xD329; &#xB9E8; &#xAE30;&#xBC18; chromatid &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; &#xC790;&#xADF9; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0A9;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD1D;&#xCE6D; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC18C;&#xC124; &#xBC0F; &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; severing microtubule &#xC704;&#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xACC4;&#xC2DC; &#xD558; &#xACE0; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xC774;&#xB3D9; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xBD84;&#xC790; &#xAE30;&#xACC4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC774;&#xD574;&#xB97C; &#xD655;&#xB300;.

3 Microtubule severing &#xD6A8;&#xC18C;&#xB294; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xC774;&#xB3D9; &quot;&#xD329; &#xB9E8;-&#xD50C;&#xB7ED;&#xC2A4;&quot; &#xAE30;&#xACC4;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD55C;&#xB2E4;.

Los cromosomas se mueven hacia los polos del huso mit&#xF3;tico mediante un mecanismo de Pacman de flujo relacionado con la despolimerizaci&#xF3;n de microt&#xFA;bulos: cromosomas activamente despolimerizaci&#xF3;n de los microt&#xFA;bulos incorporado, extremos (Pacman), mientras que se tambale&#xF3; en el que los polos del huso por el flujo continuo hacia el polo de las subunidades de tubulina impulsado por menos de fin de despolimerizaci&#xF3;n (flujo de ). Nos informan de que Pacman de flujo en la Drosophila melanogaster incorpora las actividades de las tres enzimas diferentes microt&#xFA;bulos cortar las Spastin, Fidgetin y Katanin. Spastin y Fidgetin se utilizan para estimular microt&#xFA;bulos menos extremo despolimerizaci&#xF3;n y fundente. Ambas prote&#xED;nas se concentran en los centrosomas, que catalizan la cifra de negocios de la gamma-tubulina, en consonancia con la hip&#xF3;tesis de que ejercen su influencia mediante la liberaci&#xF3;n de la estabilizaci&#xF3;n de la gamma-tubulina complejos de anillos de los extremos de menos. Por el contrario, Katanin parece funcionar principalmente en los cromosomas en anafase, donde estimula los microt&#xFA;bulos m&#xE1;s extremo despolimerizaci&#xF3;n y Pacman con sede en la motilidad de crom&#xE1;tidas. En conjunto, estos resultados revelan nuevos roles y significativo para la ruptura de los microt&#xFA;bulos en el huso y ampliar nuestra comprensi&#xF3;n de la maquinaria molecular utilizada para mover los cromosomas.

Tres enzimas Severing microt&#xFA;bulos Contribuir al &#x26;quot;Pacman-flux&#x26;quot; La maquinaria que mueve los cromosomas

&#x57F9;&#x517B;&#x7684;&#x679C;&#x8747;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB;&#x5DF2;&#x6210;&#x4E3A;&#x8D8A;&#x6765;&#x8D8A;&#x53D7;&#x6B22;&#x8FCE;&#x7684;&#x6A21;&#x578B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;&#x5176;&#x4E2D;&#x6700;&#x5E38;&#x7528;&#x7684;&#x7EBF;&#x3001; S2 &#x7EC6;&#x80DE;&#x3001; &#x662F;&#x7279;&#x522B;&#x6709;&#x7528;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x5B83;&#x662F;&#x5BB9;&#x6613;&#x589E;&#x957F;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x7EF4;&#x6301;&#x5728;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5BA4;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x5F88;&#x5BB9;&#x6613;&#x53D7;&#x5230;&#x4F7F;&#x7528; RNAi &#x57FA;&#x56E0;&#x6291;&#x5236;&#x548C;&#x662F;&#x9002;&#x5408;&#x4E8E;&#x9AD8;&#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#x5149;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63D0;&#x4F9B;&#x534F;&#x8BAE;&#x7684;&#x65E5;&#x5E38;&#x6587;&#x5316;&#x548C; RNAi &#x6CBB;&#x7597; S2 &#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x8367;&#x5149;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x4E3A;&#x51C6;&#x5907;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6280;&#x672F;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x540E; 4 7 d RNAi &#x4ECB;&#x5BFC;&#x86CB;&#x767D;&#x8017;&#x5C3D;&#x7684;&#x6267;&#x884C;&#x529F;&#x80FD;&#x635F;&#x5931;&#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x3002;

&#x679C;&#x8747; S2 &#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x5BFC; RNAi &#x529F;&#x80FD;&#x635F;&#x5931;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x548C;&#x514D;&#x75AB;&#x8367;&#x5149;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x53CA;&#x5176;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x533A;&#x57DF;&#x6027;&#x3002;

Cultured Drosophila cell lines have become an increasingly popular model system for cell biological and functional genomic studies. One of the most commonly used lines, S2 cells, is particularly useful as it is easy to grow and maintain in the lab, is highly susceptible to gene inhibition using RNAi and is well suited to high-resolution light microscopic assays. Here, we provide protocols for the routine culture and RNAi treatment of S2 cells and methods to prepare these cells for fluorescence microscopy. Using these techniques, loss-of-function experiments may be performed after 4-7 d of RNAi-mediated protein depletion.

Culture of Drosophila S2 cells and their use for RNAi-mediated loss-of-function studies and immunofluorescence microscopy.

De culture des lign&#xE9;es de cellules de drosophile sont devenus un mod&#xE8;le de syst&#xE8;me de plus en plus populaire pour les cellules biologiques et fonctionnelles des &#xE9;tudes g&#xE9;nomiques. L&#x26;#39;une des lignes les plus couramment utilis&#xE9;s, les cellules S2, est particuli&#xE8;rement utile, car elle est facile &#xE0; cultiver et &#xE0; entretenir dans le laboratoire, est tr&#xE8;s sensible &#xE0; l&#x26;#39;inhibition des g&#xE8;nes en utilisant l&#x26;#39;ARNi et est bien adapt&#xE9; &#xE0; des essais de lumi&#xE8;re &#xE0; haute r&#xE9;solution microscopiques. Ici, nous fournir des protocoles pour la culture de routine et le traitement des cellules S2 ARNi et des m&#xE9;thodes pour pr&#xE9;parer ces cellules pour la microscopie de fluorescence. Gr&#xE2;ce &#xE0; ces techniques, la perte de fonction des exp&#xE9;riences peut &#xEA;tre r&#xE9;alis&#xE9; apr&#xE8;s 4-7 d de l&#x26;#39;appauvrissement de la prot&#xE9;ine ARNi m&#xE9;diation.

Culture de cellules S2 de drosophile et leur utilisation pour l&#x26;#39;ARNi &#xE0; m&#xE9;diation perte de fonction des &#xE9;tudes et microscopie &#xE0; immunofluorescence

Kultivierte Drosophila-Zelllinien sind ein immer beliebter Modellsystem f&uuml;r Zelle biologischen und funktionale genomischer Studien geworden. Einer der wichtigsten gebr&auml;uchlichsten Linien, S2 Zellen, ist besonders n&uuml;tzlich, da es leicht zu wachsen und pflegen im Labor, ist sehr anf&auml;llig f&uuml;r gen-Hemmung mit RNAi und ist gut geeignet f&uuml;r hochaufl&ouml;sende Licht mikroskopischen Proben. Hier bieten wir Protokolle f&uuml;r die routinem&auml;&szlig;ige Kultur und RNAi Behandlung von S2-Zellen und Methoden, diese Zellen f&uuml;r die Fluoreszenzmikroskopie vorzubereiten. Mit diesen Techniken k&ouml;nnen Verlust der Funktion Experimente nach 4-7 d der RNAi-vermittelte Protein Ersch&ouml;pfung durchgef&uuml;hrt werden.

Kultur von Drosophila S2-Zellen und deren Verwendung f&uuml;r RNAi-vermittelte Verlustfunktion von Studien und Immunfluoreszenz-Mikroskopie.

Colte linee di cellule di Drosophila sono diventati un modello sempre pi&ugrave; diffuso sistema per studi biologici e funzionali genomiche sulle cellule. Uno dei pi&ugrave; comunemente utilizzate linee, S2 cells, &egrave; particolarmente utile in quanto &egrave; facile da crescere e mantenere in laboratorio, &egrave; altamente sensibile alla inibizione genica mediante RNAi ed &egrave; adatti all&#39;alta risoluzione luce dosaggi microscopiche. Qui, forniamo i protocolli per la coltura ordinaria e trattamento RNAi delle cellule S2 e metodi per preparare queste cellule per la microscopia di fluorescenza. Usando queste tecniche, esperimenti di perdita di funzione possono essere eseguiti dopo 4-7 d di deplezione proteica RNAi-mediata.

Coltura di cellule di Drosophila S2 e il loro utilizzo per gli studi di perdita di funzione RNAi-mediata e microscopia di immunofluorescenza.

&#x57F9;&#x990A;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306A;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x307E;&#x3059;&#x307E;&#x3059;&#x4EBA;&#x6C17;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3068;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x3082;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x3001;S2&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4E00;&#x3064;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x304C;&#x5B9F;&#x9A13;&#x5BA4;&#x3067;&#x6210;&#x9577;&#x3057;&#x3001;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5BB9;&#x6613;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x7279;&#x306B;&#x6709;&#x7528;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;RNAi&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x6291;&#x5236;&#x306B;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x654F;&#x611F;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x3082;&#x9AD8;&#x89E3;&#x50CF;&#x5EA6;&#x306E;&#x5149;&#x5B66;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306B;&#x9069;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30EB;&#x30FC;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x6587;&#x5316;&#x3084;&#x86CD;&#x5149;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x6CD5;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x6E96;&#x5099;&#x3059;&#x308B;S2&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306E;RNAi&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30B3;&#x30EB;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6280;&#x8853;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6A5F;&#x80FD;&#x55AA;&#x5931;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306F;RNAi&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x67AF;&#x6E07;&#x306E;4-7&#x65E5;&#x5F8C;&#x306B;&#x5B9F;&#x884C;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;

&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;S2&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x57F9;&#x990A;&#x3068;RNAi&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x6A5F;&#x80FD;&#x55AA;&#x5931;&#x7814;&#x7A76;&#x3068;&#x514D;&#x75AB;&#x86CD;&#x5149;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;

&#xAD50;&#xC591;&#xB41C; Drosophila &#xC140; &#xB77C;&#xC778; &#xC140; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xBC0F; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xAC8C;&#xB188; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xC810;&#xC810; &#xB354; &#xC778;&#xAE30; &#xC788;&#xB294; &#xBAA8;&#xB378; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xB418;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. &#xD558;&#xB098;&#xB294; &#xAC00;&#xC7A5; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xB77C;&#xC778;, S2 &#xC138;&#xD3EC;, Rnai&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC27D;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;, &#xADF8;&#xAC83;&#xC774; &#xC27D;&#xAC8C; &#xC131;&#xC7A5; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC2E4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xB9AC;&#xD560; &#xB54C; &#xD2B9;&#xD788; &#xC720;&#xC6A9;, &#xACE0;&#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xC801;&#xD569;&#xB41C; &#xAC00;&#xBCBC;&#xC6B4; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC740;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0;&#xC11C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC77C;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xBB38;&#xD654;&#xC640; RNAi &#xCE58;&#xB8CC; S2 &#xC140; &#xBC0F; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC140; &#xD615;&#xAD11; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC900;&#xBE44; &#xBC29;&#xBC95;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0;&#xCF5C;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAE30;&#xBC95;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, RNAi &#xC911;&#xC7AC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xACE0;&#xAC08;&#xC758; 4-7 d &#xD6C4; &#xC190;&#xC2E4;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC744; &#xC218;&#xD589;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xCD08;&#xD30C;&#xB9AC; S2 &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; RNAi &#xC911;&#xC7AC; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC190;&#xC2E4; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xBC0F; &#xBA74;&#xC5ED; &#xD615;&#xAD11; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC758; &#xBB38;&#xD654;.

L&#xED;neas de c&#xE9;lulas de Drosophila se han convertido en un sistema de modelo cada vez m&#xE1;s popular para celulares gen&#xF3;micos estudios biol&#xF3;gicos y funcionales. Una de las l&#xED;neas m&#xE1;s utilizadas, las c&#xE9;lulas S2, es particularmente &#xFA;til ya que es f&#xE1;cil de cultivar y mantener en el laboratorio, es altamente susceptible a la inhibici&#xF3;n de genes utilizando RNAi y se adapta bien a los ensayos de luz de alta resoluci&#xF3;n microsc&#xF3;picas. En este sentido, proporcionar protocolos para el cultivo de rutina y el tratamiento de RNAi c&#xE9;lulas S2 y los m&#xE9;todos para preparar estas c&#xE9;lulas para la microscop&#xED;a de fluorescencia. El uso de estas t&#xE9;cnicas, la p&#xE9;rdida de la funci&#xF3;n de los experimentos pueden realizarse despu&#xE9;s de 4-7 d&#xED;as de depleci&#xF3;n proteica mediada por RNAi.

Cultivo de las c&#xE9;lulas S2 de Drosophila y su uso para RNAi mediada por la p&#xE9;rdida de la funci&#xF3;n de Estudios y microscop&#xED;a de inmunofluorescencia

&#x5728;&#x52A8;&#x7269;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x6838;&#x5F62;&#x6210;&#x6781;&#x5316;&#x7684;&#x9635;&#x5217;&#x6765;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x7684;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x3002;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6709;&#x8DA3;&#x7684;&#x6096;&#x8BBA;&#x4E0D;&#x8FC7;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x7F3A;&#x9677;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x52A8;&#x7269;&#x53D1;&#x5C55;&#x6210;&#x4E3A;&#x53EF;&#x884C;&#x7684;&#x6210;&#x5E74;&#x4EBA;&#x7684;&#x679C;&#x8747;&#x793C;&#x7269;&#x3002;&#x8981;&#x4E86;&#x89E3;&#x8FD9;&#x79CD;&#x5DEE;&#x5F02;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5206;&#x6790;&#x4E86;&#x884C;&#x4E3A;&#x7684;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x548C;&#x5FAE;&#x5728;&#x679C;&#x8747;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3001; &#x6587;&#x5316;&#x548C;&#x4F53;&#x5185;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x7528;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6210;&#x50CF;&#x3001; &#x7535;&#x5B50;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x548C; rnai &#x6280;&#x672F;&#x7684;&#x7EC4;&#x5408;&#x3002;&#x52A8;&#x7269;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56FD;&#x5BB6;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x884C;&#x4E8B;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x5468;&#x671F;&#x7684;&#x89C4;&#x8303;&#x6A21;&#x578B;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x5728;&#x6574;&#x4E2A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x3002;&#x610F;&#x5916;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x8BB8;&#x591A;&#x679C;&#x8747;&#x7EC6;&#x80DE;-&#x7C7B;&#x578B;&#x663E;&#x793A;&#x6539;&#x53D8;&#x7684;&#x5468;&#x671F;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x529F;&#x80FD;&#x6027;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x90FD;&#x53EA;&#x5B58;&#x5728;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x5728;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x9000;&#x51FA;&#x65F6;&#xFF0C;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x5206;&#x89E3;&#x751F;&#x4EA7;&#x95F4;&#x671F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x542B;&#x6709;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x6210;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x6838;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7684;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x7A33;&#x6001;&#x76F8;&#x95F4;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x7EA7;&#x522B;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x66F4;&#x6539;&#x7531; codepleting &#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A; &gamma;-tubulins&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&gamma;-&#x5FAE;&#x7BA1;&#x86CB;&#x767D; RNAi &#x5EF6;&#x8FDF;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x518D;&#x751F;&#x540E;&#x89E3;&#x805A;&#xFF0C;&#x6697;&#x793A;&#x5B83;&#x53EF;&#x80FD;&#x90E8;&#x5206;&#x5197;&#x4F59;&#x529F;&#x80FD;&#x4E0E;&#x53E6;&#x4E00;&#x79CD;&#x9014;&#x5F84;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4E86;&#x989D;&#x5916;&#x7684;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x6210;&#x6838;&#x56E0;&#x7D20;&#x548C;&#x53D1;&#x73B0;&#xFF0C;&#x8FF7;&#x4F60;-&#x952D;&#xFF0C;&#x526A;&#x8F91; 190&#x3001; EB1 &#x6216;&#x808C; RNAi &#x4E5F;&#x5EF6;&#x8FDF;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x518D;&#x751F; &#xFF1B;&#x5947;&#x602A;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E0D;&#x53C8;&#x5EF6;&#x957F;&#x65F6;&#x6211;&#x4EEC; codepleted &gamma;-tubulins&#x3002;&#x4E24;&#x8005;&#x5408;&#x8BA1;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x4FEE;&#x6539;&#x6211;&#x4EEC;&#x89C6;&#x56FE;&#x7684;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x51FD;&#x6570;&#x7684;&#x5468;&#x671F;&#x548C;&#x63ED;&#x793A;&#x591A;&#x7EC4;&#x5206; acentrosomal &#x5FAE;&#x7BA1;&#x5927;&#x4F1A;&#x901A;&#x8DEF;&#x5728;&#x679C;&#x8747;&#x4E2D;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x76F8;&#x95F4;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x9635;&#x5217;&#x3002;

&#x591A;&#x7EC4;&#x5206;&#x7684;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x96C6;&#x8DEF;&#x5F84;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x5F62;&#x6210;&#x7684; acentrosomal &#x76F8;&#x95F4;&#x679C;&#x8747;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x9635;&#x5217;&#x3002;

In animal cells, centrosomes nucleate microtubules that form polarized arrays to organize the cytoplasm. Drosophila presents an interesting paradox however, as centrosome-deficient mutant animals develop into viable adults. To understand this discrepancy, we analyzed behaviors of centrosomes and microtubules in Drosophila cells, in culture and in vivo, using a combination of live-cell imaging, electron microscopy, and RNAi. The canonical model of the cycle of centrosome function in animal cells states that centrosomes act as microtubule-organizing centers throughout the cell cycle. Unexpectedly, we found that many Drosophila cell-types display an altered cycle, in which functional centrosomes are only present during cell division. On mitotic exit, centrosomes disassemble producing interphase cells containing centrioles that lack microtubule-nucleating activity. Furthermore, steady-state interphase microtubule levels are not changed by codepleting both gamma-tubulins. However, gamma-tubulin RNAi delays microtubule regrowth after depolymerization, suggesting that it may function partially redundantly with another pathway. Therefore, we examined additional microtubule nucleating factors and found that Mini-spindles, CLIP-190, EB1, or dynein RNAi also delayed microtubule regrowth; surprisingly, this was not further prolonged when we codepleted gamma-tubulins. Taken together, these results modify our view of the cycle of centrosome function and reveal a multi-component acentrosomal microtubule assembly pathway to establish interphase microtubule arrays in Drosophila.

A multicomponent assembly pathway contributes to the formation of acentrosomal microtubule arrays in interphase Drosophila cells.

Dans les cellules animales, les microtubules nucl&#xE9;&#xE9;s centrosomes qui forment des tableaux polaris&#xE9;s pour organiser le cytoplasme. Drosophile pr&#xE9;sente un paradoxe int&#xE9;ressant cependant, comme centrosome d&#xE9;ficientes animaux mutants de devenir des adultes viables. Pour comprendre cet &#xE9;cart, nous avons analys&#xE9; les comportements de centrosomes et des microtubules dans les cellules de drosophile, dans la culture et in vivo, en utilisant une combinaison de imagerie des cellules vivantes, microscopie &#xE9;lectronique, et RNAi. Le mod&#xE8;le canonique du cycle de la fonction du centrosome dans les Etats de cellules animales qui agissent comme des centrosomes microtubules organisation des centres &#xE0; travers le cycle cellulaire. De fa&#xE7;on inattendue, nous avons constat&#xE9; que de nombreux types de cellules chez la drosophile afficher un cycle alt&#xE9;r&#xE9;, dans lequel centrosomes fonctionnels ne sont pr&#xE9;sents que pendant la division cellulaire. Sur la sortie de mitose, centrosomes d&#xE9;monter la production de cellules en interphase contenant centrioles qui n&#x26;#39;ont pas les microtubules nucl&#xE9;ation activit&#xE9;. En outre, l&#x26;#39;&#xE9;tat d&#x26;#39;&#xE9;quilibre les niveaux de microtubules d&#x26;#39;interphase ne sont pas modifi&#xE9;es par les deux tubulines codepleting gamma-. Toutefois, la gamma-tubuline repousse ARNi microtubules retards apr&#xE8;s d&#xE9;polym&#xE9;risation, ce qui sugg&#xE8;re qu&#x26;#39;il peut fonctionner partiellement redondante avec une autre voie. Par cons&#xE9;quent, nous avons examin&#xE9; des microtubules suppl&#xE9;mentaire de nucl&#xE9;ation facteurs et conclu que Mini-broches, CLIP-190, EB1, ou la dyn&#xE9;ine ARNi a &#xE9;galement retard&#xE9; la repousse des microtubules; &#xE9;tonnamment, ce n&#x26;#39;&#xE9;tait pas encore prolong&#xE9;e lorsque nous codepleted gamma-tubuline. Pris dans leur ensemble, ces r&#xE9;sultats modifient notre vision du cycle de la fonction du centrosome et r&#xE9;v&#xE8;lent un multi-composants voie acentrosomales l&#x26;#39;assemblage des microtubules pour &#xE9;tablir des tableaux de microtubules d&#x26;#39;interphase chez la drosophile.

Un sentier multicomposant Assembl&#xE9;e Contribue &#xE0; la formation de r&#xE9;seaux microtubules dans les cellules de drosophile acentrosomales Interphase

In Tierzellen nucleate Centrosomes Mikrotubuli, die polarisierten Arrays Zytoplasma zu organisieren, zu bilden. Taufliege pr&auml;sentiert ein interessantes Paradox in tragf&auml;hige Erwachsene jedoch als Zentrosom-defizienten mutierte Tiere entwickeln. Um diese Diskrepanz zu verstehen, analysierten wir Verhalten von Centrosomes und Mikrotubuli in Drosophila Zellen, in der Kultur und in Vivo mit einer Kombination von Leben-Zelle Darstellung, Elektronenmikroskopie und RNAi. Das kanonische Modell des Zyklus der Zentrosom Funktion in Tierzellen Staaten Centrosomes wie Microtubule-Organisation handeln zentriert im gesamten Zellzyklus. Unerwartet, fanden wir, dass viele Drosophila-Zelltypen einen ver&auml;nderten Zyklus, Anzeigen in dem funktionalen Centrosomes nur w&auml;hrend der Zellteilung vorhanden sind. Auf mitotische Ausgang zerlegen Centrosomes produzierenden Interphase Zellen, die Centrioles, die Microtubule-Nukleierungsmittel Aktivit&auml;t fehlen. Dar&uuml;ber hinaus sind station&auml;re Zwischenphase Microtubule Ebenen nicht ver&auml;ndert codepleting beide Gamma-Tubulins. Jedoch verz&ouml;gert Gamma-Tubulin RNAi Microtubule nachwachsen nach Depolymerisation, was darauf hindeutet, dass es teilweise redundant funktionieren, mit einem anderen Weg. Daher wir zus&auml;tzliche Microtubule Nukleierungsmittel Faktoren untersucht und festgestellt, dass Mini-Spindeln, CLIP-190, ES1 oder Dynein RNAi auch verz&ouml;gert Microtubule nachwachsen; &Uuml;berraschenderweise wurde dies nicht weiter verl&auml;ngert wenn wir Gamma-Tubulins codepleted. Zusammen genommen, diese Ergebnisse &auml;ndern unsere Sicht des Zyklus der Zentrosom Funktion und offenbaren einen Mehrkomponenten Acentrosomal Microtubule Montage Weg Zwischenphase Microtubule-Arrays in Drosophila zu etablieren.

Multikomponenten Montage Weg tr&auml;gt zur Bildung von Acentrosomal Microtubule-Arrays in Interphase Drosophila Zellen.

In cellule animali, cntrosome nucleano microtubuli che formano polarizzate matrici per organizzare il citoplasma. Presenta drosofila un paradosso interessante, tuttavia, come animali mutanti carenti centrosoma sviluppano in adulti vitali. Per comprendere questa discrepanza, abbiamo analizzato i comportamenti di cntrosome e microtubuli nelle cellule di Drosophila, nella cultura e in vivo, utilizzando una combinazione di live cell imaging, microscopia elettronica e RNAi. Il modello canonico del ciclo della funzione centrosoma negli Stati di cellule animali che cntrosome agiscano come microtubule-organizzazione di centri in tutto il ciclo cellulare. Inaspettatamente, abbiamo trovato che molti tipi di cellule della drosofila visualizzano un ciclo alterato, in cui sono presenti durante la divisione cellulare solo funzionale cntrosome. All&#39;uscita mitotica, cntrosome smontare producendo interfase celle contenenti centrioli che la mancanza di attivit&agrave; nucleare dei microtubuli. Inoltre, livelli di steady-state interfase microtubule non vengono modificati da codepleting entrambi gamma-tubulins. Tuttavia, gamma-tubulina RNAi ritarda la ricrescita dei microtubuli dopo depolimerizzazione, suggerendo che esso pu&ograve; funzionare parzialmente ridondante con un altro percorso. Pertanto, abbiamo esaminato microtubule ulteriore fattori di nucleare e ha scoperto che Mini-mandrini, CLIP-190, EB1 o dineina RNAi ritardati anche ricrescita dei microtubuli; Sorprendentemente, questo non era ulteriormente prolungato quando abbiamo codepleted gamma-tubulins. Presi insieme, questi risultati modificare la nostra visione del ciclo della funzione centrosoma e rivelano un percorso di assemblaggio microtubule multicomponente acentrosomal stabilire interfase microtubule matrici in drosofila.

Un percorso di assemblaggio multicomponenti contribuisce alla formazione di matrici microtubule acentrosomal nelle cellule in interfase della drosofila.

&#x52D5;&#x7269;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x3092;&#x6574;&#x7406;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x504F;&#x5149;&#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x6838;&#x306E;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x3092;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x3002;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x6B20;&#x640D;&#x5909;&#x7570;&#x52D5;&#x7269;&#x306F;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x5927;&#x4EBA;&#x306B;&#x306A;&#x308B;&#x3068;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;&#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x8208;&#x5473;&#x6DF1;&#x3044;&#x30D1;&#x30E9;&#x30C9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3092;&#x63D0;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x77DB;&#x76FE;&#x3092;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30BB;&#x30EB;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x3001;&#x96FB;&#x5B50;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;RNAi&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6587;&#x5316;&#x304A;&#x3088;&#x3073;in vivo&#x3067;&#x3001;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x3068;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x6319;&#x52D5;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x7D44;&#x7E54;&#x5316;&#x30BB;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x884C;&#x70BA;&#x3092;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x304C;&#x52D5;&#x7269;&#x7D30;&#x80DE;&#x72B6;&#x614B;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x306E;&#x6A19;&#x6E96;&#x7684;&#x306A;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3002;&#x4E0D;&#x610F;&#x306B;&#x3001;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x306F;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306A;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x6642;&#x306B;&#x306E;&#x307F;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x6539;&#x5909;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x306E;&#x7D42;&#x4E86;&#x6642;&#x306B;&#x3001;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x306F;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x6838;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x6B20;&#x304F;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x76F8;&#x9593;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x7523;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x5206;&#x89E3;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x5B9A;&#x5E38;&#x72B6;&#x614B;&#x306E;&#x76F8;&#x9593;&#x306E;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306F;&#x4E21;&#x65B9;&#x3068;&#x3082;&#x3B3;-&#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3;&#x3092;codepleting&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5909;&#x66F4;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x91CD;&#x5408;&#x5F8C;&#x306E;&#x3B3;-&#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;RNAi&#x9045;&#x5EF6;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x518D;&#x6210;&#x9577;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x304C;&#x5225;&#x306E;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3067;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306B;&#x91CD;&#x8907;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x8981;&#x56E0;&#x3092;&#x6838;&#x306B;&#x8FFD;&#x52A0;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x3001;&#x30DF;&#x30CB;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x3001;CLIP-190&#x3001;EB1&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CB;&#x30F3;RNAi&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x3092;&#x9045;&#x3089;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3B3;-&#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3;&#x3092;codepleted&#x6642;&#x9A5A;&#x304F;&#x3079;&#x304D;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x9577;&#x671F;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x306E;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x898B;&#x89E3;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3057;&#x3001;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;&#x306E;&#x76F8;&#x9593;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x914D;&#x5217;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x591A;&#x6210;&#x5206;acentrosomal&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x306E;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x591A;&#x6210;&#x5206;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306F;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;&#x9593;&#x671F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;Acentrosomal&#x5FAE;&#x5C0F;&#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x5BC4;&#x4E0E;

&#xB3D9;&#xBB3C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; centrosomes nucleate microtubules &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xAD6C;&#xC131; &#xD3B8;&#xAD11;&#xB41C; &#xBC30;&#xC5F4;&#xC744; &#xD615;&#xC131;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xD765;&#xBBF8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC5ED;&#xC124; centrosome &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xB4E4;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xC131;&#xC778;&#xC73C;&#xB85C; &#xCD08;&#xD30C;&#xB9AC; &#xC120;&#xBB3C;. &#xC774; &#xCC28;&#xC774; &#xC774;&#xD574; &#xD558;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC870;&#xD569;&#xC758; &#xD55C; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5;, &#xC804;&#xC790; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD;, Rnai&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; centrosomes microtubules &#xBE44;&#xBCF4;, &#xBB38;&#xD654; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xCD08;&#xD30C;&#xB9AC; &#xC140; &#xB3D9;&#xC791; &#xBD84;&#xC11D;. Centrosomes&#xB85C; microtubule &#xC870;&#xC9C1; &#xD589;&#xB3D9; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xC5D0;&#xC11C; centrosome &#xD568;&#xC218;&#xC758; &#xC0AC;&#xC774;&#xD074;&#xC758; &#xC815;&#xC2DD; &#xBAA8;&#xB378; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30; &#xC13C;&#xD130;. &#xC608;&#xAE30;&#xCE58; &#xC54A;&#xAC8C;, &#xB9CE;&#xC740; &#xCD08;&#xD30C;&#xB9AC; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xD615; &#xD45C;&#xC2DC;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5; centrosomes&#xC740; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xC5F4; &#xB3D9;&#xC548; &#xC874;&#xC7AC; &#xBCC0;&#xACBD;&#xB41C; &#xC8FC;&#xAE30;&#xB97C; &#xCC3E;&#xC558;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Mitotic &#xCD9C;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; centrosomes centrioles microtubule nucleating &#xD65C;&#xB3D9; &#xBD80;&#xC871;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xACC4;&#xBA74; &#xC140; &#xBD84;&#xD574;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC815;&#xC0C1; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC758; &#xACC4;&#xBA74; microtubule &#xB808;&#xBCA8; &#xBAA8;&#xB450; &#xAC10;&#xB9C8; tubulins codepleting&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBCC0;&#xACBD; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xAC10;&#xB9C8; tubulin RNAi &#xC9C0;&#xC5F0; microtubule &#xC790;&#xB77C;&#xB098; &#xD6C4;&#xC5D0; depolymerization, &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xB610; &#xB2E4;&#xB978; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC640; &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC911;&#xBCF5; &#xC791;&#xB3D9; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xCD94;&#xAC00; microtubule &#xC694;&#xC778; nucleating&#xB97C; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD558; &#xACE0; &#xBC1C;&#xACAC; &#xBBF8;&#xB2C8; &#xC2A4;&#xD540; &#xB4E4; &#xD074;&#xB9BD;-190, EB1, &#xB610;&#xB294; &#xD68C; RNAi &#xB610;&#xD55C; &#xC9C0;&#xC5F0; microtubule &#xC790;&#xB77C;&#xB098;; &#xB180;&#xB78D;&#xAC8C;&#xB3C4;,&#xC774; &#xD558;&#xC9C0; &#xCD94;&#xAC00; &#xC5F0;&#xC7A5; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xAC10;&#xB9C8; tubulins codepleted &#xB54C;. &#xD568;&#xAED8; &#xCC0D;&#xC740; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; centrosome &#xD568;&#xC218;&#xC758; &#xC0AC;&#xC774;&#xD074;&#xC758; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xBDF0;&#xB97C; &#xC218;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; &#xCD08;&#xD30C;&#xB9AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACC4;&#xBA74; microtubule &#xBC30;&#xC5F4;&#xC744; &#xC124;&#xC815; &#xD558; &#xC774;&#xC1A1; acentrosomal microtubule &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC; &#xACBD;&#xB85C; &#xACF5;&#xAC1C;.

&#xAE61;&#xD1B5;&#xC774; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC; &#xACBD;&#xB85C; &#xACC4;&#xBA74; &#xCD08;&#xD30C;&#xB9AC; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; acentrosomal microtubule &#xBC30;&#xC5F4;&#xC744; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD55C;&#xB2E4;.

En las c&#xE9;lulas animales, los centrosomas microt&#xFA;bulos nucleados que forman matrices de polarizados para organizar el citoplasma. Drosophila presenta una paradoja interesante, sin embargo, como centrosoma con deficiencia de animales mutantes se convierten en adultos viables. Para entender esta discrepancia, se analizaron los comportamientos de los centrosomas y los microt&#xFA;bulos en c&#xE9;lulas de Drosophila, en la cultura e in vivo, utilizando una combinaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas vivas im&#xE1;genes, microscop&#xED;a electr&#xF3;nica, y RNAi. El modelo can&#xF3;nico del ciclo de la funci&#xF3;n del centrosoma en c&#xE9;lulas animales establece que los centrosomas act&#xFA;an como la organizaci&#xF3;n de los microt&#xFA;bulos centros de todo el ciclo celular. Inesperadamente, se encontr&#xF3; que muchos tipos de c&#xE9;lulas de Drosophila mostrar un ciclo alterado, en el que centrosomas funcionales s&#xF3;lo est&#xE1;n presentes durante la divisi&#xF3;n celular. A la salida de mitosis, los centrosomas desmontar las c&#xE9;lulas productoras de interfase que contienen centr&#xED;olos que carecen de los microt&#xFA;bulos de nucleaci&#xF3;n actividad. Por otra parte, los niveles de estado estacionario de los microt&#xFA;bulos en interfase no se cambian por codepleting ambos tubulinas gamma. Sin embargo, la gamma-tubulina ARNi rebrote microt&#xFA;bulos retrasos despu&#xE9;s de despolimerizaci&#xF3;n, sugiriendo que puede funcionar parcialmente redundante con otra v&#xED;a. Por lo tanto, hemos examinado m&#xE1;s de nucleaci&#xF3;n de microt&#xFA;bulos y se encontr&#xF3; que los factores de Mini-husillos, CLIP-190, EB1, o RNAi dine&#xED;na tambi&#xE9;n retras&#xF3; la regeneraci&#xF3;n de los microt&#xFA;bulos, sorprendentemente, esto no fue m&#xE1;s prolongada cuando codepleted gamma tubulinas. En conjunto, estos resultados modificar nuestro punto de vista del ciclo de la funci&#xF3;n del centrosoma y revelan un multi-componente de la v&#xED;a acentrosomal ensamblaje de los microt&#xFA;bulos para establecer arreglos de interfase microt&#xFA;bulos en Drosophila.

Un Camino de multicomponentes Asamblea Contribuye a la formaci&#xF3;n de matrices de microt&#xFA;bulos en la interfase Acentrosomal c&#xE9;lulas de Drosophila

&#x9650;&#x5236;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5668;&#x8FDB;&#x884C;&#x590D;&#x5236;&#x5230;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x7684;&#x4E00;&#x6B21;&#x5173;&#x952E;&#x7684;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x5206;&#x79BB;&#x548C;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7684;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6B64;&#x5757;&#x91CD;&#x53E0;&#x5230;&#x7684;&#x57FA;&#x672C;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x5C1A;&#x4E0D;&#x6E05;&#x695A;&#x3002;&#x9057;&#x4F20;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#x53C2;&#x4E0E;&#x7684; Skp Cullin &#x697C;&#x6846; (SCF)-&#x7C7B;&#x6CDB;&#x7D20;&#x8FDE;&#x63A5;&#x9176;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E00;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63CF;&#x8FF0;&#x4E86;&#x4E00;&#x79CD;&#x673A;&#x5236;&#x4EE5;&#x9632;&#x6B62;&#x5728;&#x679C;&#x8747;&#x5373; F &#x6846;&#x86CB;&#x767D; Slimb &#x4E0E;&#x590D;&#x6742; SCF E3 &#x6CDB;&#x7D20;&#x8FDE;&#x63A5;&#x9176;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x86CB;&#x767D;&#x6C34;&#x89E3;&#x964D;&#x89E3; centrosomal &#x76D1;&#x7BA1;&#x6FC0;&#x9176; Plk4 &#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5668;&#x8FDB;&#x884C;&#x91CD;&#x53E0;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A; SCF(Slimb) &#x4F5C;&#x4E3A;&#x901A;&#x8FC7; RNA &#x5E72;&#x6270; (RNAi) &#x5C4F;&#x5E55; Cullin &#x57FA;&#x4E8E;&#x6CDB;&#x7D20;&#x8FDE;&#x63A5;&#x9176;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5668;&#x8FDB;&#x884C;&#x91CD;&#x590D;&#x7684;&#x76D1;&#x7BA1;&#x673A;&#x6784;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0; Plk4 &#x5C06;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; Slimb&#xFF0C;SCF(Slimb) &#x76EE;&#x6807;&#x3002;Slimb &#x548C; Plk4 &#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x7684;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#xFF0C;Plk4 &#x6C34;&#x5E73;&#x6700;&#x9AD8;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x548C;&#x7F3A;&#x5E2D; S &#x9636;&#x6BB5;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528; Plk4 Slimb &#x7ED1;&#x5B9A;&#x7A81;&#x53D8;&#x548C; Slimb RNAi&#xFF0C;&#x663E;&#x793A; Slimb &#x89C4;&#x7BA1; Plk4 &#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x518D;&#x5230;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x5728;&#x95F4;&#x671F;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#x76D1;&#x7BA1;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x7C92;&#x6570;&#x548C;&#x786E;&#x4FDD;&#x5230;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5668;&#x8FDB;&#x884C;&#x91CD;&#x53E0;&#x5757;&#x3002;

SCF Slimb &#x6CDB;&#x7D20;&#x8FDE;&#x63A5;&#x9176;&#x8C03;&#x8282; Plk4/Sak &#x7EA7;&#x522B;&#x963B;&#x6B62;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5668;&#x8FDB;&#x884C;&#x91CD;&#x53E0;&#x3002;

Restricting centriole duplication to once per cell cycle is critical for chromosome segregation and genomic stability, but the mechanisms underlying this block to reduplication are unclear. Genetic analyses have suggested an involvement for Skp/Cullin/F box (SCF)-class ubiquitin ligases in this process. In this study, we describe a mechanism to prevent centriole reduplication in Drosophila melanogaster whereby the SCF E3 ubiquitin ligase in complex with the F-box protein Slimb mediates proteolytic degradation of the centrosomal regulatory kinase Plk4. We identified SCF(Slimb) as a regulator of centriole duplication via an RNA interference (RNAi) screen of Cullin-based ubiquitin ligases. We found that Plk4 binds to Slimb and is an SCF(Slimb) target. Both Slimb and Plk4 localize to centrioles, with Plk4 levels highest at mitosis and absent during S phase. Using a Plk4 Slimb-binding mutant and Slimb RNAi, we show that Slimb regulates Plk4 localization to centrioles during interphase, thus regulating centriole number and ensuring the block to centriole reduplication.

The SCF Slimb ubiquitin ligase regulates Plk4/Sak levels to block centriole reduplication.

Restreindre centriole duplication de cycle cellulaire une fois par est essentielle pour la s&#xE9;gr&#xE9;gation des chromosomes et de la stabilit&#xE9; g&#xE9;nomique, mais les m&#xE9;canismes sous-jacents &#xE0; ce bloc redoublement ne sont pas claires. Les analyses g&#xE9;n&#xE9;tiques ont sugg&#xE9;r&#xE9; une implication pour Skp / Cullin / F bo&#xEE;te (EFC) de classe ubiquitine ligases dans ce processus. Dans cette &#xE9;tude, nous d&#xE9;crivons un m&#xE9;canisme visant &#xE0; emp&#xEA;cher la r&#xE9;duplication centriole chez Drosophila melanogaster par lequel le SCF ubiquitine ligase E3 dans un complexe avec le F-box Slimb prot&#xE9;ines m&#xE9;diatise la d&#xE9;gradation prot&#xE9;olytique de la kinase centrosomale r&#xE9;glementaire Plk4. Nous avons identifi&#xE9; l&#x26;#39;EFC (Slimb) en tant que r&#xE9;gulateur de centriole duplication via une interf&#xE9;rence ARN (ARNi) &#xE9;cran de Cullin &#xE0; base ubiquitine ligases. Nous avons constat&#xE9; que Plk4 se lie &#xE0; Slimb et est un SCF (Slimb) cible. Les deux Slimb et Plk4 localiser &#xE0; centrioles, avec Plk4 niveaux les plus &#xE9;lev&#xE9;s lors de la mitose et absent lors de la phase S. L&#x26;#39;utilisation d&#x26;#39;un Plk4 Slimb contraignant mutant et Slimb ARNi, nous montrons que Slimb r&#xE9;glemente Plk4 localisation &#xE0; centrioles durant l&#x26;#39;interphase, r&#xE9;gulant ainsi le num&#xE9;ro centriole et d&#x26;#39;assurer le bloc au centriole redoublement.

La ligase SCF ubiquitine Slimb r&#xE9;gule le taux de Plk4/Sak pour bloquer R&#xE9;duplication Centriole

Einschr&auml;nken des Zentriol Vervielf&auml;ltigung auf einmal pro Zellzyklus ist entscheidend f&uuml;r Chromosome Segregation und genomischen Stabilit&auml;t, aber die Mechanismen dieser Block zu Reduplikation sind unklar. Genetische Untersuchungen haben eine Beteiligung f&uuml;r Skp/Cullin/F-Box (SCF) vorgeschlagen-Klasse Ubiquitin-Verkn&uuml;pfung in diesem Prozess. In dieser Studie beschreiben wir einen Mechanismus um Zentriol Reduplikation in Drosophila Melanogaster zu verhindern, wobei die SCF E3 Ubiquitin Ligase im Komplex mit dem F-Box-Protein Slimb proteolytischen Abbau der centrosomal regulatorische Kinase Plk4 vermittelt. Wir haben SCF(Slimb) als Regulator des Zentriol Vervielf&auml;ltigung &uuml;ber ein RNA-Interferenz (RNAi)-Bildschirm des Ubiquitin Cullin basierenden Verkn&uuml;pfung identifiziert. Wir fanden, dass Plk4 an Slimb bindet und ein SCF(Slimb) Ziel ist. Slimb und Plk4 zu Centrioles, mit Plk4 Ebenen h&ouml;chste bei Mitose zu lokalisieren und fehlt in S-Phase. Mit einem Plk4 Slimb-Bindung Mutant und Slimb RNAi, zeigen wir, dass Slimb Plk4 Lokalisierung zu Centrioles w&auml;hrend der Interphase, regelt somit Regulierung Zentriol Anzahl und die Gew&auml;hrleistung des Blocks Zentriol Reduplikation.

Der SCF Slimb Ubiquitin Ligase regelt Plk4/Sak Ebenen um Zentriol Reduplikation zu blockieren.

Limitando la duplicazione Centriolo a una volta per ciclo cellulare &egrave; fondamentale per la segregazione del cromosoma e stabilit&agrave; genomica, ma i meccanismi alla base di questo blocco di reduplication sono chiari. Le analisi genetiche hanno suggerito un coinvolgimento per scatola Skp/Cullin/F (SCF)-ubiquitina ligasi in questo processo di classe. In questo studio, descriviamo un meccanismo per evitare Riduplicazione Centriolo nella Drosophila melanogaster, per cui il SCF E3 ubiquitina ligasi nel complesso con la proteina F-box Daniela da intermediario degradazione proteolitica della chinasi normativa centrosomal Plk4 di. Abbiamo identificato SCF(Slimb) come un regolatore di duplicazione Centriolo tramite uno schermo di RNA interference (RNAi) di Cullin-based ubiquitina ligasi. Abbiamo trovato che Plk4 si associa a Daniela ed &egrave; una destinazione SCF(Slimb). Daniela sia Plk4 localizzare a centrioli, con Plk4 livelli pi&ugrave; alti a mitosi e assente durante la fase S. Utilizzando un mutante Plk4 Daniela-associazione e Slimb RNAi, mostriamo che Daniela regola Plk4 localizzazione di centrioli durante l&#39;interfase, cos&igrave; regolando il numero Centriolo e assicurando il blocco di Riduplicazione Centriolo.

il SCF Daniela ubiquitina ligasi regola i livelli di Plk4/Sak per bloccare riduplicazione Centriolo.

1&#x56DE;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x306B;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x5C0F;&#x4F53;&#x306E;&#x8907;&#x88FD;&#x3092;&#x5236;&#x9650;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x306E;&#x5206;&#x96E2;&#x3068;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x306B;&#x3068;&#x3063;&#x3066;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x91CD;&#x8907;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B66;&#x7684;&#x89E3;&#x6790;&#x306F;&#x3001;SKP /&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;/ F&#x30DC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#xFF08;SCF&#xFF09;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x30EA;&#x30AC;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30AD;&#x30A4;&#x30ED;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;&#x3067;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x5C0F;&#x4F53;&#x91CD;&#x8907;&#x3092;&#x9632;&#x3050;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;Plk4&#x306E;F-box&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;Slimb&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5206;&#x89E3;&#x3068;&#x306E;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;SCF E3&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x30EA;&#x30AC;&#x30FC;&#x30BC;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;RNA&#x5E72;&#x6E09;&#xFF08;RNAi&#xFF09;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x30EA;&#x30AC;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x753B;&#x9762;&#x3092;&#x7D4C;&#x7531;&#x3057;&#x3066;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x5C0F;&#x4F53;&#x306E;&#x8907;&#x88FD;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x3068;&#x3057;&#x3066;SCF&#xFF08;Slimb&#xFF09;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;Plk4&#x304C;Slimb&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x3001;SCF&#xFF08;Slimb&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002; Slimb&#x3068;Plk4&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x304C;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x3067;&#x6700;&#x3082;&#x9AD8;&#x3044;&#x3068;S&#x671F;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x306A;&#x3044;Plk4&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x3001;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x306B;&#x5C40;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x3002; Plk4 Slimb&#x7D50;&#x5408;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3068;Slimb RNAi&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x305D;&#x306E;Slimb&#x306F;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x5C0F;&#x4F53;&#x6570;&#x3092;&#x8ABF;&#x6574;&#x3057;&#x3001;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x5C0F;&#x4F53;&#x91CD;&#x8907;&#x3059;&#x308B;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3092;&#x78BA;&#x4FDD;&#x3057;&#x3001;&#x9593;&#x671F;&#x306B;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;Plk4&#x5C40;&#x5728;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

SCF Slimb&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x30EA;&#x30AC;&#x30FC;&#x30BC;&#x306F;&#x3001;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x5C0F;&#x4F53;&#x91CD;&#x8907;&#x3092;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3059;&#x308B;Plk4/Sak&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;

&#xC911;&#xC2EC;&#xC18C;&#xCCB4; &#xC911;&#xBCF5; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30; &#xB9C8;&#xB2E4; &#xC81C;&#xD55C; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xBD84;&#xB9AC; &#xBC0F; &#xAC8C;&#xB188; &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; reduplication&#xC5D0;&#xC774; &#xBE14;&#xB85D;&#xC744; &#xAE30;&#xBCF8; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC740; &#xBA85;&#xD655; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB2E4;. &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBD84;&#xC11D; Skp/Cullin/F &#xC0C1;&#xC790; (SCF)&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCC38;&#xC5EC;&#xB97C; &#xC81C;&#xC548; &#xD588;&#xB2E4;-&#xC774; &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; ligases &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC; Drosophila melanogaster SCF E3 &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4; &#xB9AC;&#xAC00; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; F &#xC0C1;&#xC790; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; Slimb&#xC758; centrosomal &#xADDC;&#xC81C; &#xB2C8; plk4&#xC758; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC800;&#xD558;&#xB97C; &#xC911;&#xC7AC; &#xD558;&#xB294; &#xC57D;&#xC790;&#xC758; &#xC911;&#xC2EC;&#xC18C;&#xCCB4; reduplication&#xB97C; &#xBC29;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. SCF(Slimb) Cullin &#xAE30;&#xBC18; &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4; ligases RNA &#xAC04;&#xC12D; (RNAi) &#xC2A4;&#xD06C;&#xB9B0;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC911;&#xBCF5; &#xC911;&#xC2EC;&#xC18C;&#xCCB4;&#xC758; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;&#xB85C; &#xD30C;&#xC545;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBC1C;&#xACAC; Plk4 Slimb&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; SCF(Slimb) &#xB300;&#xC0C1; &#xC774;&#xB2E4;. Slimb &#xBC0F; Plk4 centrioles, Plk4 &#xC218;&#xC900; &#xB192;&#xC740; &#xC720;&#xC0AC; &#xBD84;&#xC5F4;&#xC5D0; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xBC0F; &#xACB0; &#xC11D; S &#xB2E8;&#xACC4;. Plk4 Slimb &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBC0F; Slimb Rnai&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC911;&#xC2EC;&#xC18C;&#xCCB4; &#xBC88;&#xD638; &#xADDC;&#xC81C; &#xACE0; &#xC911;&#xC2EC;&#xC18C;&#xCCB4; reduplication &#xBE14;&#xB85D; Slimb &#xACC4;&#xBA74;, &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; centrioles Plk4 &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xC870;&#xC808; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

SCF Slimb &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4; &#xB9AC;&#xAC00; &#xC911;&#xC2EC;&#xC18C;&#xCCB4; reduplication&#xB97C; &#xCC28;&#xB2E8; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; Plk4/Sak &#xC218;&#xC900;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La restricci&#xF3;n de la duplicaci&#xF3;n de centr&#xED;olo ciclo celular una vez por es fundamental para la segregaci&#xF3;n de los cromosomas y la estabilidad gen&#xF3;mica, pero los mecanismos subyacentes a este bloque a la duplicaci&#xF3;n no son claras. Los an&#xE1;lisis gen&#xE9;ticos han sugerido una implicaci&#xF3;n de Skp / Cullin / F caja (SCF) de la clase ligasas de ubiquitina en este proceso. En este estudio, se describe un mecanismo para evitar la duplicaci&#xF3;n de centr&#xED;olos en Drosophila melanogaster mediante el cual el SCF E3 ubiquitina ligasa en el complejo con la degradaci&#xF3;n de las prote&#xED;nas de la caja F SLIMB proteol&#xED;tica media de la quinasa reguladora centrosomal Plk4. Se identificaron SCF (SLIMB) como regulador de la duplicaci&#xF3;n de esfuerzos a trav&#xE9;s de un centr&#xED;olo ARN de interferencia (RNAi), pantalla de Cullin basados &#x200B;&#x200B;ligasas de ubiquitina. Hemos encontrado que se une a Plk4 SLIMB y es un SCF (SLIMB) objetivo. Tanto SLIMB y Plk4 localizar a los centr&#xED;olos, con Plk4 niveles m&#xE1;s altos de la mitosis y ausente durante la fase S. El uso de un Plk4 SLIMB vinculante mutante y RNAi SLIMB, nos muestran que SLIMB Plk4 regula la localizaci&#xF3;n de los centr&#xED;olos durante la interfase, regulando as&#xED; el n&#xFA;mero de centr&#xED;olos y la garant&#xED;a de que el bloque centr&#xED;olo reduplicaci&#xF3;n.

La ligasa de ubiquitina SCF SLIMB Regula los niveles de Plk4/Sak para bloquear reduplicaci&#xF3;n centr&#xED;olo

&#x4E25;&#x683C;&#x76D1;&#x7BA1;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x91CD;&#x53E0;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x662F;&#x8981;&#x786E;&#x4FDD;&#x6570;&#x91CF;&#x4E24;&#x500D;&#x7684;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x7684;&#x4E00;&#x6B21;&#x4E14;&#x4EC5;&#x4E00;&#x6B21;&#x3002;&#x5230;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x91CD;&#x590D;&#x5468;&#x671F;&#x53E0;&#x52A0;&#x662F;&#x5E73;&#x9759;&#x548C;&#x9C81;&#x68D2;&#x5FAE;&#x7BA1; (MT) &#x5F62;&#x6838;&#x9636;&#x6BB5;&#x548C;&#x5C71;&#x951A;&#x56FA;&#x6D3B;&#x52A8;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x4EA4;&#x66FF;&#x529F;&#x80FD;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x5468;&#x671F;&#x3002;&#x5728;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x5FAA;&#x73AF;&#x7EC6;&#x80DE;&#x76F8;&#x95F4;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x79EF;&#x7D2F;&#x51CF;&#x5C11;&#x5176;&#x5C71;&#x6210;&#x6838;&#x80FD;&#x529B;&#x8F83;&#x5C11; pericentriolar &#x6750;&#x6599; (PCM)&#x3002;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#xFF0C;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x6210;&#x719F;&#xFF0C;&#x79EF;&#x7D2F;&#x66F4;&#x591A;&#x7684; PCM&#xFF0C;&#x4EE5;&#x589E;&#x52A0;&#x5176;&#x5F62;&#x6838;&#x548C;&#x951A;&#x5B9A;&#x80FD;&#x529B;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x5F62;&#x6210;&#x5F3A;&#x5065;&#x5C71; asters&#x3002;&#x6709;&#x8DA3;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x5468;&#x671F;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6539;&#x53D8;&#x4EE5;&#x9002;&#x5E94;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x9700;&#x8981;&#x3002;&#x4E00;&#x4E9B;&#x76F8;&#x95F4;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x901A;&#x8FC7;&#x589E;&#x52A0;&#x5176;&#x5C06;&#x951A; MTs &#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x4FBF;&#x5F62;&#x6210; centrosomal &#x5F84;&#x5411;&#x9635;&#x5217;&#x3002;&#x5176;&#x4ED6;&#x76F8;&#x95F4;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x4FDD;&#x6301;&#x5176;&#x5C71;&#x6210;&#x6838;&#x80FD;&#x529B;&#xFF0C;&#x4F46;&#x51CF;&#x5C11;&#x6D88;&#x9664;&#x5176;&#x5C71;&#x951A;&#x56FA;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x8868;&#x660E;&#x679C;&#x8747;&#x7EC6;&#x80DE;&#x91C7;&#x53D6;&#x8FD9;&#x6837;&#x6781;&#x7AEF;&#xFF0C;&#x5373;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x5728;&#x95F4;&#x671F;&#xFF0C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x89E3;&#x91CA;&#x5982;&#x4F55;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x7F3A;&#x82CD;&#x8747;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x4E22;&#x5931;&#x6240;&#x6709;&#x63A2;&#x6D4B; PCM &#x53D1;&#x5C55;&#x5230;&#x6210;&#x5E74;&#x3002;&#x679C;&#x8747;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x4FEE;&#x6539;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x5468;&#x671F;&#x5DEE;&#x5F02;&#x8C03;&#x8282;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x7C92;-&#x98CE;&#x6F6E;&#x7684;&#x5E72;/&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x91CD;&#x53E0;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x80BF;&#x7624;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x597D;&#x50CF;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0D;&#x5BF9;&#x79F0;&#x5206;&#x88C2;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x60C5;&#x51B5;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x68C0;&#x8BA8;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x8C03;&#x67E5;&#x7ED3;&#x679C;&#xFF0C;&#x5373;&#x63CF;&#x8FF0;&#x529F;&#x80FD;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x7684;&#x5468;&#x671F;&#x4E2D;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;

&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x529F;&#x80FD;&#xFF1A; &#x6709;&#x65F6;&#x5C11;&#x5C31;&#x662F;&#x591A;&#x3002;

Tight regulation of centrosome duplication is critical to ensure that centrosome number doubles once and only once per cell cycle. Superimposed onto this centrosome duplication cycle is a functional centrosome cycle in which they alternate between phases of quiescence and robust microtubule (MT) nucleation and MT-anchoring activities. In vertebrate cycling cells, interphase centrioles accumulate less pericentriolar material (PCM), reducing their MT nucleation capacity. In mitosis, centrosomes mature, accumulating more PCM to increase their nucleation and anchoring capacities to form robust MT asters. Interestingly, functional cycles of centrosomes can be altered to suit the cell's needs. Some interphase centrosomes function as a microtubule-organizing center by increasing their ability to anchor MTs to form centrosomal radial arrays. Other interphase centrosomes maintain their MT nucleation capacity but reduce/eliminate their MT-anchoring capacity. Recent work demonstrates that Drosophila cells take this to the extreme, whereby centrioles lose all detectable PCM during interphase, offering an explanation as to how centrosome-deficient flies develop to adulthood. Drosophila stem cells further modify the functional cycle by differentially regulating their two centrioles - a situation that seems important for stem cell asymmetric divisions, as misregulation of centrosome duplication in stem/progenitor cells can promote tumor formation. Here, we review recent findings that describe variations in the functional cycle of centrosomes.

Centrosome function: sometimes less is more.

Une r&#xE9;glementation stricte de la duplication du centrosome est crucial pour s&#x26;#39;assurer que le nombre centrosome double une fois et une seule fois par cycle cellulaire. En surimpression sur ce cycle centrosome duplication est un cycle fonctionnel du centrosome dans lequel ils alternent entre des phases de repos et de microtubules robuste (MT) la nucl&#xE9;ation et la MT-ancrage des activit&#xE9;s. Dans les cellules de cyclisme vert&#xE9;br&#xE9;s, les centrioles en interphase accumuler du mat&#xE9;riel moins p&#xE9;ricentriolaire (PCM), ce qui r&#xE9;duit leur capacit&#xE9; de nucl&#xE9;ation MT. Dans la mitose, centrosomes maturit&#xE9;, accumulant plus PCM pour augmenter leur germination et l&#x26;#39;ancrage des capacit&#xE9;s pour former les asters MT robustes. Fait int&#xE9;ressant, les cycles fonctionnels de centrosomes peut &#xEA;tre modifi&#xE9; pour r&#xE9;pondre aux besoins de la cellule. Certains interphase centrosomes fonctionner comme un centre de microtubules organisation en augmentant leur capacit&#xE9; &#xE0; ancrer MT pour former centrosomales tableaux radiaux. Centrosomes interphase Autres maintenir leur capacit&#xE9; de germination MT, mais de r&#xE9;duire / &#xE9;liminer leur ancrage MT-capacit&#xE9;. Des travaux r&#xE9;cents d&#xE9;montrent que les cellules de drosophile prendre cela &#xE0; l&#x26;#39;extr&#xEA;me, dans lequel centrioles perdre tout d&#xE9;tectable PCM durant l&#x26;#39;interphase, offrant une explication quant &#xE0; la fa&#xE7;on centrosome d&#xE9;ficientes mouches d&#xE9;velopper &#xE0; l&#x26;#39;&#xE2;ge adulte. Cellules souches de drosophile en outre de modifier le cycle de fonctionnement par diff&#xE9;remment la r&#xE9;glementation de leurs deux centrioles - une situation qui semble important pour les divisions asym&#xE9;triques des cellules souches, comme un d&#xE9;r&#xE8;glement de la duplication du centrosome dans cellules souches / prog&#xE9;nitrices peuvent favoriser la formation de tumeurs. Ici, nous passons en revue les r&#xE9;sultats r&#xE9;cents qui d&#xE9;crivent les variations du cycle fonctionnel des centrosomes.

Fonction Centrosome: Parfois Less is More

Enge Regelung der Zentrosom Vervielf&auml;ltigung ist entscheidend f&uuml;r das Zentrosom Anzahl Doppelzimmer nur einmal pro Zelle Zyklus zu gew&auml;hrleisten. &Uuml;berlagert dieser Zentrosom Vervielf&auml;ltigung-Zyklus ist ein funktionale Zentrosom-Zyklus, in dem sie zwischen Phasen der Ruhe und robuste Microtubule (MT) Keimbildung und MT-Verankerung Aktivit&auml;ten abwechseln. Interphase Centrioles sich in vertebrate Radfahren Zellen weniger Pericentriolar Material (PCM), ihre MT Keimbildung Kapazit&auml;tsabbau ansammeln. In Mitose Reifen Centrosomes, Anh&auml;ufung von mehr PCM um die Keimbildung zu erh&ouml;hen und Verankerung von Kapazit&auml;ten, robuste MT Astern zu bilden. Interessanterweise k&ouml;nnen funktionelle Zyklen der Centrosomes der Zelle Anforderungen entsprechend ge&auml;ndert werden. Einige Zwischenphase Centrosomes fungieren als Microtubule organizing Center durch die Erh&ouml;hung ihrer F&auml;higkeit, Anker MTs centrosomal radial Arrays zu bilden. Andere Zwischenphase Centrosomes pflegen ihre MT Keimbildung Kapazit&auml;t aber ihre MT-Verankerung-Kapazit&auml;t verringern/beseitigen. Aktuelle Arbeit zeigt, dass Drosophila Zellen nehmen dies auf die Spitze, wobei Centrioles verlieren alle nachweisbaren PCM w&auml;hrend der Interphase, bietet eine Erkl&auml;rung, wie Zentrosom-defizienten fliegen entwickeln bis zum Erwachsenenalter. Taufliege-Stammzellen weiter &auml;ndern den funktionalen Zyklus indem differentiell reguliert ihre zwei Centrioles - eine Situation, die wichtig f&uuml;r Stammzelle asymmetrische Teilungen, scheint wie Misregulation Zentrosom &Uuml;berschneidungen in Stammzellen und Vorl&auml;uferzellen Tumorbildung f&ouml;rdern kann. Hier &uuml;berpr&uuml;fen wir neuere Befunde, die Variationen in den funktionalen Kreislauf von Centrosomes zu beschreiben.

Zentrosom Funktion: weniger ist manchmal mehr.

Stretto regolamento di duplicazione centrosoma &egrave; fondamentale per garantire che raddoppia di numero centrosoma una volta e una sola volta per ogni ciclo cellulare. Sovrapposto su questo ciclo di duplicazione centrosoma &egrave; un ciclo di centrosoma funzionale in cui si alternano tra attivit&agrave; MT-ancoraggio e fasi di quiescenza e di nucleazione microtubuli robusto (MT). Nei vertebrati cellule ciclismo, interfase centrioli si accumulano meno materiale pericentriolar (PCM), riducendo la loro capacit&agrave; di nucleazione MT. Nella mitosi, cntrosome maturo, accumulando pi&ugrave; PCM per aumentare la loro nucleazione e capacit&agrave; a formare gli astri MT robusti di ancoraggio. &Egrave; interessante notare che, cicli funzionali di cntrosome possono essere modificati per soddisfare le esigenze della cellula. Alcuni cntrosome interfase funzionano come centro di organizzazione dei microtubuli, aumentando la loro capacit&agrave; di ancoraggio MTs a formare matrici radiali centrosomal. Altri cntrosome interfase mantengono la loro capacit&agrave; di nucleazione MT ma riducono/eliminano la loro capacit&agrave; di ancoraggio MT. Lavoro recente dimostra che le cellule di Drosophila prendono questo fino all&#39;estremo, per cui centrioli perdono tutti i PCM rilevabile durante l&#39;interfase, offrendo una spiegazione come deficit di centrosoma mosche sviluppare fino all&#39;et&agrave; adulta. Le cellule staminali della drosofila ulteriormente modificare il ciclo funzionale regolando differenzialmente loro due centrioli - una situazione che sembra importante per divisioni asimmetriche delle cellule staminali, come misregolazione di duplicazione centrosoma in cellule staminali/progenitrici pu&ograve; promuovere la formazione di tumori. Qui, passiamo in rassegna risultati recenti che descrivono le variazioni nel ciclo funzionale di cntrosome.

Funzione centrosoma: a volte meno &egrave; pi&ugrave;.

&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x306E;&#x8907;&#x88FD;&#x306E;&#x53B3;&#x3057;&#x3044;&#x898F;&#x5236;&#x306F;&#x3001;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x6570;&#x306F;&#x4E00;&#x5EA6;&#x3060;&#x3051;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x3054;&#x3068;&#x306B;&#x500D;&#x5897;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x306E;&#x8907;&#x88FD;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x306E;&#x91CD;&#x7573;&#x306F;&#x4F11;&#x6B62;&#x3068;&#x5805;&#x7262;&#x306A;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#xFF08;MT&#xFF09;&#x6838;&#x3068;MT-&#x30A2;&#x30F3;&#x30AB;&#x30FC;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306E;&#x30D5;&#x30A7;&#x30FC;&#x30BA;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x304C;&#x5225;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x76F8;&#x9593;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;MT&#x306E;&#x6838;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x524A;&#x6E1B;&#x3057;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x5468;&#x8FBA;&#x7269;&#x8CEA;&#xFF08;PCM&#xFF09;&#x3092;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5805;&#x7262;&#x306A;MT&#x306E;&#x30A2;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x6838;&#x3068;&#x30A2;&#x30F3;&#x30AB;&#x30FC;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;PCM&#x3092;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3057;&#x3001;&#x6210;&#x719F;&#x3057;&#x305F;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x3002;&#x8208;&#x5473;&#x6DF1;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306A;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x30CB;&#x30FC;&#x30BA;&#x306B;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3066;&#x5909;&#x66F4;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x306E;&#x534A;&#x5F84;&#x65B9;&#x5411;&#x306E;&#x914D;&#x5217;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;MT&#x3092;&#x56FA;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6210;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x76F8;&#x9593;&#x306E;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3002;&#x4ED6;&#x306E;&#x76F8;&#x9593;&#x306E;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;MT&#x306E;&#x6838;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x306E;MT-&#x30A2;&#x30F3;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x5BB9;&#x91CF;&#x3092;&#x524A;&#x6E1B;/&#x6392;&#x9664;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x306F;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x6B20;&#x640D;&#x30CF;&#x30A8;&#x304C;&#x5927;&#x4EBA;&#x306B;&#x958B;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x8AAC;&#x660E;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3001;&#x9593;&#x671F;&#x306E;&#x9593;&#x3001;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x691C;&#x51FA;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;PCM&#x3092;&#x5931;&#x3046;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x6975;&#x7AEF;&#x306B;&#x3053;&#x308C;&#x3092;&#x53D6;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;&#x306E;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x5DEE;&#x52D5;&#x4E8C;&#x4EBA;&#x306E;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306A;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3059;&#x308B; - &#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x975E;&#x5BFE;&#x79F0;&#x5206;&#x88C2;&#x306F;&#x3001;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;/&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x306E;&#x8907;&#x88FD;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x30DF;&#x30B9;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x816B;&#x760D;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x72B6;&#x6CC1;&#x3092;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306A;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x306E;&#x5909;&#x52D5;&#x3092;&#x8A18;&#x8FF0;&#x3059;&#x308B;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x77E5;&#x898B;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x6A5F;&#x80FD;&#xFF1A;&#x6642;&#x3005;&#x3001;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#xAF49; centrosome &#xC911;&#xBCF5; &#xADDC;&#xC81C;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30; &#xB2F9; &#xD55C; &#xBC88;&#xB9CC; &#xADF8; centrosome &#xBC88;&#xD638; &#xBCF5;&#xC2DD;&#xC744; &#xBCF4;&#xC7A5; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC911;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; centrosome &#xC911;&#xBCF5; &#xC0AC;&#xC774;&#xD074;&#xC5D0; &#xACB9;&#xCCD0; MT&#xC5D0; &#xC815;&#xBC15; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC815;&#xC9C0; &#xBC0F; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; microtubule (MT) nucleation &#xB2E8;&#xACC4; &#xC0AC;&#xC774; &#xB300;&#xCCB4; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC131; centrosome &#xC8FC;&#xAE30;&#xAC00;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCC99;&#xCD94; &#xC790;&#xC804;&#xAC70; &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACC4;&#xBA74; centrioles &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; MT nucleation &#xC6A9;&#xB7C9;&#xC744; &#xC904;&#xC774;&#xACE0; &#xC801;&#xC740; pericentriolar &#xC7AC;&#xB8CC; (PCM) &#xCD95;&#xC801;. &#xC720;&#xC0AC; &#xBD84;&#xC5F4;&#xC5D0;&#xC11C; centrosomes &#xC131;&#xC219;, &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; nucleation &#xC99D;&#xAC00; &#xB354; &#xB9CE;&#xC740; PCM&#xC744; &#xCD95;&#xC801; &#xD558; &#xACE0; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC0B0; &#xAF43;&#xC744; &#xD615;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xC6A9;&#xB7C9;&#xC744; &#xACE0;&#xC815; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD765;&#xBBF8;&#xB86D;&#xAC8C;&#xB3C4;, centrosomes&#xC758; &#xC791;&#xB3D9; &#xC0AC;&#xC774;&#xD074; &#xC140;&#xC758; &#xC694;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB9DE;&#xAC8C; &#xBCC0;&#xACBD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC77C;&#xBD80; &#xACC4;&#xBA74; centrosomes centrosomal &#xBC29;&#xC0AC;&#xD615; &#xBC30;&#xC5F4; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xC575;&#xCEE4; MTs &#xD558; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xC99D;&#xAC00; &#xC2DC;&#xCF1C; microtubule &#xC870;&#xC9C1; &#xC911;&#xC2EC;&#xC73C;&#xB85C; &#xC791;&#xB3D9;. &#xB2E4;&#xB978; &#xACC4;&#xBA74; centrosomes &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; MT nucleation &#xC6A9;&#xB7C9;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; MT &#xACE0;&#xC815; &#xC6A9;&#xB7C9; &#xAC10;&#xC18C;/&#xC81C;&#xAC70; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Centrioles &#xACC4;&#xBA74;, &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; centrosome &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xD30C;&#xB9AC;&#xB3C4; &#xC124;&#xBA85;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xAC10;&#xC9C0; PCM&#xC744; &#xC783;&#xACE0;&#xAC00; &#xBA74; &#xC131;&#xC778; &#xAE30;&#xB97C; &#xAC1C;&#xBC1C;, &#xCD5C;&#xADFC; &#xC791;&#xD488; Drosophila &#xC140; &#xADF9;&#xB2E8;&#xC774; &#xAC78;&#xB9B4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. Drosophila &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xCD94;&#xAC00; &#xCC28;&#xB3D9; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xB450; centrioles-misregulation centrosome &#xC911;&#xBCF5; &#xC904;&#xAE30;/&#xC2DC; &#xC870; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC885;&#xC591; &#xD615;&#xC131; &#xD64D;&#xBCF4;&#xD560; &#xC218;&#xB85C; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xBE44;&#xB300;&#xCE6D; &#xBD84;&#xD560;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xBCF4;&#xC774;&#xB294; &#xC0C1;&#xD669;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD558; &#xC5EC; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC0AC;&#xC774;&#xD074;&#xC744; &#xC218;&#xC815; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; centrosomes&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC21C;&#xD658;&#xC5D0; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xB294; &#xCD5C;&#xADFC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xAC80;&#xD1A0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Centrosome &#xD568;&#xC218;: &#xB54C;&#xB85C;&#xB294; &#xB354; &#xC801;&#xC740; &#xC774;&#xB2E4;.

Una regulaci&#xF3;n estricta de la duplicaci&#xF3;n del centrosoma es fundamental para garantizar que el n&#xFA;mero centrosoma se duplica una vez y s&#xF3;lo una vez por ciclo celular. Sobrepuesto a este ciclo de la duplicaci&#xF3;n del centrosoma es un ciclo centrosoma funcional en el que se alternan entre las fases de la quietud y robusta microt&#xFA;bulos (MT) y las actividades de fijaci&#xF3;n de nucleaci&#xF3;n MT-. En ciclo de las c&#xE9;lulas de vertebrados, los centr&#xED;olos interfase acumulan menos materia pericentriolar (PCM), lo que reduce su capacidad de nucleaci&#xF3;n de MT. En la mitosis, los centrosomas madura, acumulando m&#xE1;s PCM para aumentar su capacidad de nucleaci&#xF3;n y anclaje para formar asteres robustos MT. Interesantemente, los ciclos funcionales de centrosomas puede alterarse para adaptarse a las necesidades de la c&#xE9;lula. Algunos interfase centrosomas funcionan como un centro de organizaci&#xF3;n de los microt&#xFA;bulos mediante el aumento de su capacidad para anclar MTs para formar centrosomales matrices radiales. Centrosomas Otros interfase mantener su capacidad de nucleaci&#xF3;n de MT, pero reducir / eliminar la MT-anclaje de la capacidad. Un trabajo reciente demuestra que las c&#xE9;lulas de Drosophila llevar esto al extremo, por el cual los centr&#xED;olos perder todo detectable PCM durante la interfase, que ofrece una explicaci&#xF3;n de c&#xF3;mo centrosoma con deficiencia de las moscas desarrollan hasta la edad adulta. Drosophila c&#xE9;lulas madre modificar a&#xFA;n m&#xE1;s el ciclo funcional de forma diferente la regulaci&#xF3;n de sus dos centr&#xED;olos - una situaci&#xF3;n que parece importante para las divisiones asim&#xE9;tricas de c&#xE9;lulas madre, como una regulaci&#xF3;n deficiente de la duplicaci&#xF3;n del centrosoma en las c&#xE9;lulas madre / progenitoras pueden promover la formaci&#xF3;n de tumores. En este art&#xED;culo examinamos los hallazgos recientes que describen las variaciones en el ciclo funcional de los centrosomas.

Centrosoma Funci&#xF3;n: A veces menos es m&#xE1;s

&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x8FD0;&#x52A8;&#x76F8;&#x8FDE;&#x6D3B;&#x52A8;&#x964D;&#x89E3;&#x7684;&#x4E3B;&#x8F74;&#x5FAE;&#x7BA1; (MT) &#x7ED3;&#x675F;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC6;&#x522B;&#x9A71;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;-13 &#x5BB6;&#x5EAD;&#x6210;&#x5458;&#xFF0C;KLP59D&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5C0F;&#x8BF4;&#x548C;&#x4E3B;&#x8F74;&#x5C71;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x548C;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x52A8;&#x529B;&#x7684;&#x679C;&#x8747;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x552F;&#x4E00;&#x91CD;&#x8981;&#x8C03;&#x8282;&#x5668;&#x3002;&#x671F;&#x95F4;&#x524D;&#x548C;&#x4E2D;&#x665A;&#x671F;&#x3001; &#x67AF;&#x7AED;&#x7684; KLP59D&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x5BF9;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x548C;&#x5916;&#x9002;&#x5EA6;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#xFF0C;&#x6291;&#x5236;&#x964D;&#x89E3;&#x7684;&#x4E3B;&#x8F74;&#x6746;&#x5173;&#x8054;&#x5C71;&#x51CF;&#x53BB;&#x4E24;&#x7AEF;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x6291;&#x5236;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x86CB;&#x767D;&#x5411;&#x6781;&#x901A;&#x91CF;&#x3002;&#x968F;&#x540E;&#xFF0C;&#x5728;&#x540E;&#x671F;&#xFF0C;&#x671F;&#x95F4;&#x635F;&#x5931; KLP59D &#x5F3A;&#x70C8;&#x8870;&#x51CF;&#x67D3;&#x8272;&#x5355;&#x4F53;&#x5230;&#x6781;&#x70B9;&#x7684;&#x8BAE;&#x6848;&#x901A;&#x8FC7;&#x6291;&#x5236;&#x4E24;&#x4E2A;&#x51CF;&#x53F7;&#x7684;&#x89E3;&#x805A;&#x548C;&#x52A0;&#x7EBA;&#x9524;&#x5173;&#x8054; MTs &#x7684;&#x4E24;&#x7AEF;&#x3002;&#x5BF9;&#x4E3B;&#x8F74;&#x5C71;&#x52A0;&#x548C;&#x51CF;&#x4E24;&#x7AEF;&#x7684; KLP59D &#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x673A;&#x5236;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x5B58;&#x5728;&#x5206;&#x6B67;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x652F;&#x6301;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x89E3;&#x805A;&#x7684; KLP59D &#x76F4;&#x63A5;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x52A0;&#x4E0A;&#x4E24;&#x7AEF;&#x7684;&#x7EBA;&#x9524;&#x76F8;&#x5173;&#x671F;&#x95F4;&#x540E;&#x671F;&#xFF0C;&#x4F46;&#x51CF;&#x53BB;&#x95F4;&#x63A5;&#x901A;&#x8FC7;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x6746;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x5C71;&#x7ED3;&#x675F;&#x5F71;&#x54CD; depolymerase KLP10A &#x6A21;&#x578B;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x7535;&#x5B50;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x6307;&#x793A;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x5176;&#x4ED6;&#x679C;&#x8747;&#x9A71;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;-13 &#x4E32;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x662F; KLP59D &#x662F; oligomerizing &#x6210;&#x5C71;&#x76F8;&#x5173;&#x73AF;&#x4F53;&#x5916;&#xFF0C;&#x5F88;&#x5927;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E0A;&#x80FD;&#x8868;&#x660E;&#x8FD9;&#x79CD;&#x7ED3;&#x6784;&#x5E76;&#x4E0D; MT &#x7EBA;&#x9524;&#x53CD;&#x6C47;&#x7F16;&#x548C;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x8FD0;&#x52A8;&#x5FC5;&#x8981;&#x7279;&#x5F81;&#x3002;

&#x679C;&#x8747;&#x9A71;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;-13&#xFF0C;KLP59D&#xFF0C;&#x4F1A;&#x5F71;&#x54CD;&#x57FA;&#x4E8E; Pacman &#x548C;&#x901A;&#x91CF;&#x7684;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x8FD0;&#x52A8;&#x3002;

Chromosome movements are linked to the active depolymerization of spindle microtubule (MT) ends. Here we identify the kinesin-13 family member, KLP59D, as a novel and uniquely important regulator of spindle MT dynamics and chromosome motility in Drosophila somatic cells. During prometaphase and metaphase, depletion of KLP59D, which targets to centrosomes and outer kinetochores, suppresses the depolymerization of spindle pole-associated MT minus ends, thereby inhibiting poleward tubulin Flux. Subsequently, during anaphase, loss of KLP59D strongly attenuates chromatid-to-pole motion by suppressing the depolymerization of both minus and plus ends of kinetochore-associated MTs. The mechanism of KLP59D's impact on spindle MT plus and minus ends appears to differ. Our data support a model in which KLP59D directly depolymerizes kinetochore-associated plus ends during anaphase, but influences minus ends indirectly by localizing the pole-associated MT depolymerase KLP10A. Finally, electron microscopy indicates that, unlike the other Drosophila kinesin-13s, KLP59D is largely incapable of oligomerizing into MT-associated rings in vitro, suggesting that such structures are not a requisite feature of kinetochore-based MT disassembly and chromosome movements.

The Drosophila kinesin-13, KLP59D, impacts Pacman- and Flux-based chromosome movement.

Mouvements chromosomiques sont li&#xE9;s &#xE0; la d&#xE9;polym&#xE9;risation des microtubules active de broche (MT) extr&#xE9;mit&#xE9;s. Ici nous identifions la kin&#xE9;sine-13 membre de la famille, KLP59D, comme un roman et un r&#xE9;gulateur unique et important de la dynamique des MT broche et de la motilit&#xE9; des chromosomes dans les cellules somatiques de Drosophila. Au cours de la m&#xE9;taphase et prom&#xE9;taphase, l&#x26;#39;&#xE9;puisement des KLP59D, qui vise &#xE0; centrosomes et kin&#xE9;tochores ext&#xE9;rieures, supprime la d&#xE9;polym&#xE9;risation de la broche p&#xF4;le associ&#xE9; MT moins extr&#xE9;mit&#xE9;s, ce qui inhibe la tubuline Flux vers les p&#xF4;les. Par la suite, lors de l&#x26;#39;anaphase, la perte de KLP59D att&#xE9;nue fortement chromatides-p&#xF4;le de mouvement en supprimant la d&#xE9;polym&#xE9;risation des extr&#xE9;mit&#xE9;s &#xE0; la fois moins et plus de kin&#xE9;tochore-MTS Associated. Le m&#xE9;canisme de l&#x26;#39;impact sur KLP59D MT broche en plus et se termine moins semble diff&#xE9;rer. Nos donn&#xE9;es appuient un mod&#xE8;le dans lequel KLP59D d&#xE9;polym&#xE9;rise directement kin&#xE9;tochore-associ&#xE9; ainsi que se termine lors de l&#x26;#39;anaphase, mais les influences se termine moins indirectement, par la localisation du p&#xF4;le associ&#xE9; d&#xE9;polym&#xE9;rase MT KLP10A. Enfin, la microscopie &#xE9;lectronique indique que, contrairement &#xE0; l&#x26;#39;autre chez la drosophile kin&#xE9;sine-13s, KLP59D est en grande partie incapable de oligom&#xE9;risation dans MT-associ&#xE9;s anneaux in vitro, ce qui sugg&#xE8;re que ces structures ne sont pas une caract&#xE9;ristique requise de d&#xE9;montage MT kin&#xE9;tochore base et les mouvements des chromosomes.

La drosophile Kinesin-13, KLP59D, Impacts Pacman et le mouvement des chromosomes fond&#xE9;e sur les flux

Chromosom Bewegungen sind verbunden mit der aktiven Depolymerisation der Spindel Microtubule (MT) enden. Hier erkennen wir das Kinesin-13 Familienmitglied, KLP59D, als neuartige, eindeutig wichtiger Regulator der Spindel MT Dynamik und Chromosom Motilit&auml;t Drosophila somatischer Zellen. W&auml;hrend der Spindelapparat und Metaphase, Ersch&ouml;pfung der KLP59D, die Centrosomes und &auml;u&szlig;ere Kinetochores abzielt, unterdr&uuml;ckt die Depolymerisation der Spindel Pol-assoziierte MT abz&uuml;glich enden, was wiederum behindert Mantelkante Tubulin Flux. Sp&auml;ter, w&auml;hrend Anaphase, Verlust des KLP59D stark d&auml;mpft Chromatid-zu-Pol-Bewegung durch die Unterdr&uuml;ckung der Depolymerisation von beiden Minus und plus Enden der Kinetochor-assoziierte MTs. Der Mechanismus der KLP59Ds Auswirkungen auf Spindel MT plus und minus enden scheint zu unterscheiden. Unsere Daten unterst&uuml;tzen ein Modell in der KLP59D direkt w&auml;hrend der Anaphase depolymerizes Kinetochor-assoziierte zuz&uuml;glich enden, sondern Einfl&uuml;sse abz&uuml;glich enden indirekt durch Lokalisierung von die Pole Position-assoziierte MT depolymerase KLP10A. Schlie&szlig;lich gibt Elektronenmikroskopie, dass, wie 13 der anderen Drosophila Kinesin-s, KLP59D oligomerizing in MT-assoziierte Ringe in vitro weitgehend unf&auml;hig darauf hindeutet, dass solche Strukturen keine erforderliche Funktion Kinetochor-basierte MT Demontage und Chromosom Bewegungen sind.

Die Drosophila Kinesin-13, KLP59D, wirkt Pacman und Flux-basierte Chromosom Bewegung.

Movimenti del cromosoma sono legati per la depolimerizzazione attivo del mandrino microtubulo (MT) finisce. Qui ci identifichiamo il chinesina-13 membro della famiglia, KLP59D, come un romanzo e univocamente importante regolatore del mandrino motilit&agrave; di dinamiche e cromosoma MT nelle cellule somatiche della drosofila. Durante l&#39;analisi e la metafase, deplezione di KLP59D, che si rivolge a cntrosome ed esterni cinetocori, sopprime la depolimerizzazione dei MT di associato al palo della mandrino meno finisce, inibendo implicando tubulina Flux. Successivamente, durante l&#39;anafase, perdita di KLP59D fortemente attenua Cromatidio-Polo movimento sopprimendo la depolimerizzazione di entrambi minus e plus le estremit&agrave; del cinetocore associati MTs. Il meccanismo dell&#39;impatto di KLP59D sul mandrino MT plus e minus finisce sembra differire. I nostri dati supportano un modello in cui KLP59D depolymerizes direttamente associato al cinetocore pi&ugrave; estremit&agrave; durante l&#39;anafase, ma influenze meno finisce indirettamente da localizzare la MT associato al Polo depolymerase KLP10A. Infine, la microscopia elettronica indica che, a differenza di altro drosofila chinesina-13s, KLP59D &egrave; in gran parte incapace di oligomerizing in MT-associated anelli in vitro, suggerendo che tali strutture non sono una caratteristica necessaria del cinetocore MT smontaggio e cromosoma movimenti.

La drosofila chinesina-13, KLP59D, effetti movimento cromosoma Pacman e Flux-based.

&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x306E;&#x52D5;&#x304D;&#x306F;&#x3001;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#xFF08;MT&#xFF09;&#x306E;&#x7AEF;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306A;&#x89E3;&#x306B;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x306E;MT&#x306E;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x3068;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;&#x306E;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x904B;&#x52D5;&#x306E;&#x5C0F;&#x8AAC;&#x3068;&#x4E00;&#x610F;&#x7684;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30AD;&#x30CD;&#x30B7;&#x30F3;-13&#x5BB6;&#x65CF;&#x306E;&#x4E00;&#x54E1;&#x3001;KLP59D&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4F53;&#x3068;&#x5916;&#x5074;&#x306E;&#x52D5;&#x539F;&#x4F53;&#x306B;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x524D;&#x4E2D;&#x671F;&#x3001;&#x4E2D;&#x671F;&#x3001;KLP59D&#x306E;&#x67AF;&#x6E07;&#x3001;&#x4E2D;&#x306B;&#x3001;&#x7D21;&#x9318;&#x4F53;&#x6975;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x305F;MT&#x30DE;&#x30A4;&#x30CA;&#x30B9;&#x304C;&#x7D42;&#x4E86;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x963B;&#x5BB3;&#x6975;&#x5074;&#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30D6;&#x675F;&#x306E;&#x8131;&#x91CD;&#x5408;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x5F8C;&#x671F;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x3001;KLP59D&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x306F;&#x5F37;&#x304F;&#x52D5;&#x539F;&#x200B;&#x200B;&#x4F53;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x305F;MT&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30CA;&#x30B9;&#x3068;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x306E;&#x4E21;&#x7AEF;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x89E3;&#x91CD;&#x5408;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x67D3;&#x8272;&#xB7;&#x30C4;&#x30FC;&#xB7;&#x30DD;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x52D5;&#x304D;&#x3092;&#x6E1B;&#x8870;&#x3055;&#x305B;&#x307E;&#x3059;&#x3002; KLP59D&#x306E;&#x30B9;&#x30D4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;MT&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x3068;&#x30DE;&#x30A4;&#x30CA;&#x30B9;&#x7AEF;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x304C;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x898B;&#x3048;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x5F8C;&#x671F;&#x4E2D;&#x306B;&#x76F4;&#x63A5;&#x52D5;&#x539F;&#x4F53;&#x95A2;&#x9023;depolymerizes&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x7AEF;&#x3092;KLP59D&#x3059;&#x308B;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x30DE;&#x30A4;&#x30CA;&#x30B9;&#x6975;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x305F;MT&#x30C7;&#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;KLP10A&#x3092;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x9593;&#x63A5;&#x7684;&#x306B;&#x7D42;&#x4E86;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x96FB;&#x5B50;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x306F;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;&#x306E;&#x30AD;&#x30CD;&#x30B7;&#x30F3;-13S&#x3068;&#x306F;&#x7570;&#x306A;&#x308A;&#x3001;KLP59D&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x69CB;&#x9020;&#x304C;&#x52D5;&#x539F;&#x4F53;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;MT&#x306E;&#x5206;&#x89E3;&#x3068;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x306E;&#x52D5;&#x304D;&#x306E;&#x5FC5;&#x9808;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3067;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3001;in vitro&#x3067;&#x306E;MT&#x95A2;&#x9023;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x5316;&#x306E;&#x5927;&#x90E8;&#x5206;&#x306F;&#x4E0D;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3001;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

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Gregory C. Rogers

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