differential-imaging-biological-structures-with-doubly-resonant

Differential Imaging of Biological Structures with Doubly-resonant Coherent Anti-stokes Raman Scattering (CARS)

Coherent Raman imaging techniques have seen a dramatic increase in activity over the past decade due to their promise to enable label-free optical imaging ...

University of California, Davis

&#x4E2A;&#x522B; Au &#x7EB3;&#x7C73;&#x5FAE;&#x7403;&#x3001; &#x7EB3;&#x7C73;&#x9897;&#x7C92;&#xFF0C;&#x548C;&#x975E;&#x5171;&#x632F;&#x5206;&#x5B50;&#x5305;&#x8986;&#x7684;&#x7EB3;&#x7C73;&#x548C; nanoshell &#x7684;&#x4E8C;&#x805A;&#x4F53;&#x8868;&#x9762;&#x589E;&#x5F3A;&#x62C9;&#x66FC;&#x6563;&#x5C04; (SERS) &#x5F3A;&#x5EA6;&#x6765;&#x5EA6;&#x91CF;&#xFF0C;&#x5982;&#x901A;&#x8FC7;&#x539F;&#x4F4D;&#x539F;&#x5B50;&#x529B;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x786E;&#x8BA4;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x5355;&#x4F53;&#x53CA;&#x4E8C;&#x805A;&#x4F53;&#x7684;&#x7CBE;&#x7EC6;&#x7EB3;&#x7C73;&#x7EA7;&#x51E0;&#x4F55;&#x3002;&#x4E3A;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x7EB3;&#x7C73;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x51E0;&#x4F55;&#x8BA1;&#x7B97;&#x7EFC;&#x5408;&#x56DB;&#x6B21;&#x672C;&#x5730;&#x7535;&#x78C1;&#x573A;&#x4E0E;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684;&#x5F3A;&#x5EA6;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x627E;&#x5230;&#x9002;&#x5F53;&#x88C5;&#x914D;&#x5F0F;&#x7EB3;&#x7C73;&#x9897;&#x7C92;&#x53EF;&#x4EE5;&#x63D0;&#x4F9B;&#x8868;&#x9762;&#x589E;&#x5F3A;&#x62C9;&#x66FC;&#x589E;&#x5F3A;&#x7EB3;&#x7C73;&#x4E8C;&#x805A;&#x4F53;&#x76F8;&#x5AB2;&#x7F8E;&#x3002;

&#x8868;&#x9762;&#x589E;&#x5F3A;&#x62C9;&#x66FC;&#x6563;&#x5C04;&#x4ECE;&#x4E2A;&#x522B;&#x91D1;&#x7EB3;&#x7C73;&#x7C92;&#x5B50;&#x548C;&#x7EB3;&#x7C73;&#x7C92;&#x5B50;&#x4E8C;&#x805A;&#x4F53;&#x886C;&#x5E95;&#x3002;

Surface-enhanced Raman scattering (SERS) intensities for individual Au nanospheres, nanoshells, and nanosphere and nanoshell dimers coated with nonresonant molecules are measured, where the precise nanoscale geometry of each monomer and dimer is identified through in situ atomic force microscopy. The observed intensities correlate with the integrated quartic local electromagnetic field calculated for each specific nanostructure geometry. In this study, we find that suitably fabricated nanoshells can provide SERS enhancements comparable to nanosphere dimers.

Surface-enhanced Raman scattering from individual au nanoparticles and nanoparticle dimer substrates.

Surface am&#xE9;lior&#xE9;es diffusion Raman (SERS) intensit&#xE9;s pour individuelle Au nanosph&#xE8;res, nanobilles, et nanosph&#xE8;re et dim&#xE8;res nanoshell recouvertes de mol&#xE9;cules non r&#xE9;sonantes sont mesur&#xE9;es, o&#xF9; la g&#xE9;om&#xE9;trie pr&#xE9;cise de chaque &#xE9;chelle nanom&#xE9;trique monom&#xE8;re et dim&#xE8;re est identifi&#xE9;e &#xE0; l&#x26;#39;aide de la microscopie &#xE0; force atomique in situ. Les intensit&#xE9;s observ&#xE9;es en corr&#xE9;lation avec le champ &#xE9;lectromagn&#xE9;tique int&#xE9;gr&#xE9; quartique locale calcul&#xE9;e pour chaque g&#xE9;om&#xE9;trie nanostructure sp&#xE9;cifique. Dans cette &#xE9;tude, nous constatons que nanobilles convenablement fabriqu&#xE9;s peuvent am&#xE9;liorer la qualit&#xE9; SERS comparables &#xE0; des dim&#xE8;res de nanosph&#xE8;res.

Surface-enhanced Raman Scattering &#xE0; partir de nanoparticules Au individuels et des nanoparticules Substrats Dim&#xE8;res

Surface-enhanced Raman-Streuung von einzelnen Au-Nanopartikel und Nanopartikel-Dimer-Substraten.

Intensit&agrave; di dispersione (SERS) Raman superficie-enhanced per singoli Au nanosfere, nanoshells e nanosfere e nanoshell dimeri rivestiti con molecole di oggetti sono misurati, dove la geometria precisa su scala nanometrica di ogni monomero e dimero &egrave; identificata tramite microscopia a forza atomica in situ. L&#39;intensit&agrave; osservate in correlazione con l&#39;integrato quartica locale campo elettromagnetico calcolato per ogni geometria specifica nanostruttura. In questo studio, troviamo che nanoshells opportunamente fabbricato pu&ograve; fornire miglioramenti SERS paragonabile a nanosfere dimeri.

Superficie-enhanced Raman scattering da nanoparticelle e nanoparticelle di au singoli substrati dimero.

&#x5404;&#x5358;&#x91CF;&#x4F53;&#x3068;&#x4E8C;&#x91CF;&#x4F53;&#x306E;&#x6B63;&#x78BA;&#x306A;&#x30CA;&#x30CE;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30EB;&#x5F62;&#x72B6;&#x304C;&#x305D;&#x306E;&#x5834;&#x539F;&#x5B50;&#x9593;&#x529B;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x500B;&#x3005;&#x306E;Au&#x30CA;&#x30CE;&#x7C92;&#x5B50;&#x3001;&#x30CA;&#x30CE;&#x30B7;&#x30A7;&#x30EB;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30CA;&#x30CE;&#x7C92;&#x5B50;&#x3068;&#x975E;&#x5171;&#x9CF4;&#x5206;&#x5B50;&#x3067;&#x88AB;&#x8986;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30CA;&#x30CE;&#x30B7;&#x30A7;&#x30EB;&#x4E8C;&#x91CF;&#x4F53;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x5897;&#x5F37;&#x30E9;&#x30DE;&#x30F3;&#x6563;&#x4E71;&#xFF08;SERS&#xFF09;&#x306E;&#x5F37;&#x5EA6;&#x306F;&#x3001;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x89B3;&#x6E2C;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5F37;&#x5EA6;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x306E;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30CA;&#x30CE;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x5F62;&#x72B6;&#x3092;&#x8A08;&#x7B97;&#x3057;&#x7D71;&#x5408;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x56DB;&#x6B21;&#x73FE;&#x5730;&#x96FB;&#x78C1;&#x754C;&#x3068;&#x76F8;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x9069;&#x5207;&#x306B;&#x4F5C;&#x88FD;&#x3057;&#x305F;&#x30CA;&#x30CE;&#x30B7;&#x30A7;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x30CA;&#x30CE;&#x7C92;&#x5B50;&#x30C0;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x306B;&#x5339;&#x6575;&#x3059;&#x308B;SERS&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x5F37;&#x5316;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x500B;&#x3005;&#x306E;&#x91D1;&#x30CA;&#x30CE;&#x7C92;&#x5B50;&#x3068;&#x30CA;&#x30CE;&#x7C92;&#x5B50;&#x30C0;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x57FA;&#x677F;&#x304B;&#x3089;&#x8868;&#x9762;&#x5897;&#x5F37;&#x30E9;&#x30DE;&#x30F3;&#x6563;&#x4E71;

&#xAC1C;&#xBCC4; Au &#xB098;&#xB178;, nanoshells, &#xBC0F; &#xB098;&#xB178; &#xBC0F; nanoshell &#xC774;&#xD569;&#xCCB4; nonresonant &#xBD84;&#xC790; &#xCF54;&#xD305; &#xD45C;&#xBA74; &#xAC15;&#xD654; &#xB77C;&#xB9CC; &#xC0B0;&#xB780; (SERS) &#xB18D;&#xB3C4; &#xCE21;&#xC815;, &#xAC01; &#xB2E8;&#xC704;&#xCCB4;&#xC640; &#xC774;&#xD569;&#xCCB4;&#xC758; &#xC815;&#xD655;&#xD55C; &#xB098;&#xB178; &#xD615;&#xC0C1; &#xC6D0;&#xB798;&#xC758; &#xC6D0;&#xC790; &#xD798; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD1B5;&#xD569;&#xB41C; &#xC0AC;&#xCC28; &#xB85C;&#xCEEC; &#xC804;&#xC790;&#xAE30; &#xD544;&#xB4DC; &#xAC01; &#xD2B9;&#xC815; nanostructure &#xD615;&#xC0C1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xACC4;&#xC0B0; &#xB41C; &#xAD00;&#xCC30;&#xB41C; &#xB18D;&#xB3C4; &#xC0C1;&#xAD00;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC801;&#xC808; &#xD558; &#xAC8C; &#xC870;&#xB9BD;&#xB41C; nanoshells &#xB098;&#xB178; &#xC774;&#xD569;&#xCCB4;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xAD00;&#xB828; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5;&#xD560; &#xC218; &#xCC3E;&#xC73C;&#xC2ED;&#xC2DC;&#xC624;.

&#xD45C;&#xBA74; &#xAC15;&#xD654; &#xB77C;&#xB9CC; dimer &#xAE30;&#xD310; &#xAC1C;&#xBCC4; au &#xB098;&#xB178; &#xC785;&#xC790; &#xBC0F; &#xB098;&#xB178; &#xC785;&#xC790; &#xBE44; &#xC0B0;.

Mejora de la superficie de dispersi&#xF3;n Raman (SERS) intensidades de nanoesferas persona Au, nanoc&#xE1;psulas y nanoesfera y d&#xED;meros nanocapas recubiertas con mol&#xE9;culas se miden no resonante, donde la geometr&#xED;a precisa a nanoescala de cada mon&#xF3;mero y el d&#xED;mero se identifica a trav&#xE9;s de microscop&#xED;a in situ de fuerza at&#xF3;mica. Las intensidades observadas se correlacionan con el campo de cuarto grado integrada electromagn&#xE9;tica local calculada para cada geometr&#xED;a espec&#xED;fica nanoestructura. En este estudio, nos encontramos con que nanoc&#xE1;psulas convenientemente fabricados pueden proporcionar mejoras SERS comparables a los d&#xED;meros nanoesfera.

Superficie mayor dispersi&#xF3;n Raman de nanopart&#xED;culas de oro individuales y Sustratos nanopart&#xED;culas D&#xED;mero

&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x662F;&#x8981;&#x6BD4;&#x8F83;&#x7684;&#x751F;&#x957F;&#x548C;&#x5206;&#x5316;&#x6F5C;&#x80FD;&#x7684;&#x6052;&#x6CB3;&#x7334;&#x9AA8;&#x9AD3;&#x95F4;&#x5145;&#x8D28;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE; (rhMSCs)&#xFF0C;&#x4ECE;&#x4E0D;&#x540C;&#x5E74;&#x9F84;&#x6BB5; &#xFF08;&#x80CE;&#x513F;&#x3001; &#x65B0;&#x751F;&#x513F;&#x3001; &#x5A74;&#x513F;&#x3001; &#x5C11;&#x5E74;&#xFF09;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5229;&#x7528;&#x5171;&#x7126;&#x663E;&#x5FAE;&#x62C9;&#x66FC;&#x5149;&#x8C31;&#x6765;&#x8BC4;&#x4F30;&#x4E2A;&#x522B; rhMSCs &#x56FA;&#x6709;&#x751F;&#x7269;&#x5206;&#x5B50;&#x56FE;&#x8C31;&#x3002;&#x7ED3;&#x679C;&#x663E;&#x793A;&#x80CE;&#x513F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x5927;&#x5927;&#x7F29;&#x77ED;&#x65E5;&#x5FD7;&#x589E;&#x957F;&#x9636;&#x6BB5; (+ /-1.3 h 23.3&#xFF09; &#x5C31;&#x7FFB;&#x4E00;&#x756A;&#x548C;&#x66F4;&#x5927;&#x4EBA;&#x53E3;&#x589E;&#x52A0;&#x4E00;&#x500D;&#x65F6;&#x95F4; (+ /-6.5 66.5) &#x65F6;&#x76F8;&#x6BD4;&#x5176;&#x4ED6;&#x5E74;&#x9F84;&#x7EC4; &#xFF08;&#x65B0;&#x751F;&#x513F; 51.9 + /-2.3&#x3001; &#x5A74;&#x513F; 38.2 + /-3.1&#x3001; &#x5C11;&#x5E74; 40.7 + /-4.1&#xFF09;&#x3002;&#x80CE;&#x513F; rhMSCs &#x4E5F;&#x5411;&#x6210;&#x9AA8;&#x5206;&#x5316;&#x548C;&#x6210;&#x8102;&#x8C31;&#x7CFB;&#x66F4;&#x5FEB;&#x7684;&#x901F;&#x5EA6;&#x65F6;&#x4ECE;&#x8D8A;&#x8001;&#x7684;&#x52A8;&#x7269;&#x7EC6;&#x80DE;&#x76F8;&#x6BD4;&#x3002;&#x62C9;&#x66FC;&#x5149;&#x8C31;&#x5206;&#x6790;&#x663E;&#x793A;&#x66F4;&#x5927;&#x7684; DNA&#xFF0C;&#x5728;&#x80CE;&#x513F;&#x86CB;&#x767D;&#x6D53;&#x5EA6;&#x4F4E;&#x76F8;&#x6BD4;&#x5C11;&#x5E74; rhMSCs&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x4ECE;&#x4E0D;&#x540C;&#x5E74;&#x9F84;&#x7EC4;&#x8C31;&#x5171;&#x4EAB;&#x8BB8;&#x591A;&#x76F8;&#x4F3C;&#x7684;&#x7279;&#x6027;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x4E3B;&#x6210;&#x5206;&#x5206;&#x6790; (PCA)&#xFF0C;&#x7528;&#x6765;&#x533A;&#x522B;&#x5BF9;&#x5F85; rhMSCs&#xFF0C;&#x652F;&#x6301;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x57F9;&#x517B;&#x7684; rhMSCs &#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&#x5F02;&#x6784;&#x5355;&#x5143;&#x4EBA;&#x53E3;&#x7684;&#x4E8B;&#x5148;&#x8C03;&#x67E5;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x4E86; rhMSCs &#x4ECE;&#x5E74;&#x8F7B;&#x7684;&#x5E74;&#x9F84;&#x7684;&#x589E;&#x957F;&#x6F5C;&#x529B;&#xFF0C;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x7814;&#x7A76;&#x5C06;&#x6709;&#x5FC5;&#x8981;&#x5145;&#x5206;&#x53D1;&#x6398;&#x6F5C;&#x5728;&#x7528;&#x9014;&#x7684;&#x62C9;&#x66FC;&#x5149;&#x8C31;&#x7279;&#x5F81;&#x5982; rhMSCs &#x5E72;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;

&#x751F;&#x957F;&#x3001; &#x5206;&#x5316;&#x3001; &#x548C;&#x6052;&#x6CB3;&#x7334;&#x9AA8;&#x9AD3;&#x95F4;&#x5145;&#x8D28;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x751F;&#x5316;&#x7B7E;&#x540D;&#x3002;

The goal of this study was to compare the growth and differentiation potential of rhesus monkey mesenchymal stem cells (rhMSCs) from different age groups (fetal, newborn, infant, juvenile), and to use confocal micro-Raman spectroscopy to assess the intrinsic biomolecular profiles of individual rhMSCs. Results indicated that fetal cells had significantly shorter population doubling times during the log growth phase (23.3 +/- 1.3 h) and greater population doubling times (66.5 +/- 6.5) when compared to other age groups (newborn 51.9 +/- 2.3, infant 38.2 +/- 3.1, juvenile 40.7 +/- 4.1). Fetal rhMSCs also differentiated toward osteogenic and adipogenic lineages at a faster rate when compared to cells from older animals. The Raman spectral analysis showed greater DNA and lower protein concentration in fetal compared to juvenile rhMSCs, although the spectra from different age groups shared many similar features. Additionally, principal component analysis (PCA), which is used to discriminate between rhMSCs, supported prior findings that suggested that cultured rhMSCs consist of a heterogeneous cell population. Although the growth potential of rhMSCs from the younger age groups was confirmed, further studies will be necessary to fully explore the potential usefulness of Raman micro-spectroscopy to characterize stem and progenitor cells such as rhMSCs.

Growth, differentiation, and biochemical signatures of rhesus monkey mesenchymal stem cells.

Le but de cette &#xE9;tude &#xE9;tait de comparer la croissance et le potentiel de diff&#xE9;renciation des cellules de singe rh&#xE9;sus souches m&#xE9;senchymateuses (rhMSCs) &#xE0; partir de diff&#xE9;rents groupes d&#x26;#39;&#xE2;ge (f&#x153;tus, nouveau-n&#xE9;, enfant, des mineurs), et d&#x26;#39;utiliser confocale micro-spectroscopie Raman pour &#xE9;valuer les profils biomol&#xE9;culaires intrins&#xE8;ques des rhMSCs individuels. Les r&#xE9;sultats indiquent que des cellules foetales avaient population significativement plus courte temps de doublement au cours de la phase de croissance logarithmique (23,3 + / - 1,3 h) et plus le temps de doublement de la population (66,5 + / - 6,5) par rapport &#xE0; d&#x26;#39;autres groupes d&#x26;#39;&#xE2;ge (nouveau-n&#xE9; 51,9 + / - 2,3, infantile 38,2 + / - 3,1, juv&#xE9;nile 40,7 + / - 4.1). RhMSCs f&#x153;tus diff&#xE9;rencient &#xE9;galement vers lign&#xE9;es ost&#xE9;og&#xE9;niques et adipog&#xE9;nique &#xE0; un rythme plus rapide par rapport aux cellules provenant d&#x26;#39;animaux &#xE2;g&#xE9;s. L&#x26;#39;analyse spectrale Raman a montr&#xE9; une plus grande concentration de l&#x26;#39;ADN et de prot&#xE9;ines dans f&#x153;tale inf&#xE9;rieure par rapport &#xE0; rhMSCs mineurs, bien que les spectres de diff&#xE9;rents groupes d&#x26;#39;&#xE2;ge partagent de nombreuses caract&#xE9;ristiques similaires. En outre, l&#x26;#39;analyse en composantes principales (ACP), qui est utilis&#xE9; pour discriminer entre rhMSCs, ont appuy&#xE9; les conclusions ant&#xE9;rieures qui sugg&#xE9;raient que rhMSCs culture consistent d&#x26;#39;une population h&#xE9;t&#xE9;rog&#xE8;ne de cellules. Bien que le potentiel de croissance de rhMSCs des groupes d&#x26;#39;&#xE2;ge les plus jeunes a &#xE9;t&#xE9; confirm&#xE9;e, d&#x26;#39;autres &#xE9;tudes seront n&#xE9;cessaires pour explorer pleinement l&#x26;#39;utilit&#xE9; potentielle des micro-spectroscopie Raman pour caract&#xE9;riser les cellules souches et prog&#xE9;nitrices comme rhMSCs.

Signatures croissance, la diff&#xE9;renciation, et biochimiques des cellules de singe rh&#xE9;sus souches m&#xE9;senchymateuses

Das Ziel dieser Studie war es, das Wachstum zu vergleichen und Differenzierung Potenzial des Rhesus Affen mesenchymalen Stammzellen (RhMSCs) aus verschiedenen Altersgruppen (fetale, Neugeborenes, Kind, juvenile) und konfokale Mikro-Raman-Spektroskopie zu verwenden, um die systeminterne Biomolekulare-Profile der einzelnen RhMSCs zu bewerten. Ergebnisse zeigten, dass f&ouml;tale Zellen erheblich k&uuml;rzere Bev&ouml;lkerung Verdoppelung Mal w&auml;hrend der Wachstumsphase Protokoll (23,3 +/-1,3 h) und gr&ouml;&szlig;ere Bev&ouml;lkerung Verdoppelung Mal (66,5 +/-6,5) hatte im Vergleich zu anderen Altersgruppen (Neugeborene 51,9 +/-2,3, Kleinkinder 38,2 +/-3.1, juvenile 40,7 +/-4.1). Fetale RhMSCs auch differenziert in Richtung osteogenen und Adipogenic-Linien mit einer schnelleren Rate im Vergleich zu Zellen von &auml;lteren Tieren. Die Raman-Spektralanalyse zeigte gr&ouml;&szlig;ere DNA und geringer Proteinkonzentration im fetalen im Vergleich zu juvenile RhMSCs, obwohl die Spektren von verschiedenen Altersgruppen viele &auml;hnliche Funktionen freigegeben. Dar&uuml;ber hinaus unterst&uuml;tzt die Hauptkomponentenanalyse (PCA), die verwendet wird, zu unterscheiden zwischen RhMSCs, fr&uuml;here Erkenntnisse, die vorgeschlagen, eine heterogene Zellpopulation kultivierten RhMSCs bestehen. Obwohl das Wachstumspotenzial der RhMSCs aus der j&uuml;ngeren Altersgruppen best&auml;tigt wurde, weitere werden Studien vollst&auml;ndig den potenziellen Nutzen der Mikro-Ramanspektroskopie, Stamm- und Vorl&auml;uferzellen Zellen wie RhMSCs zu charakterisieren erkunden.

Wachstum, Differenzierung und biochemische Signaturen Rhesus-Affen mesenchymaler Stammzellen.

L&#39;obiettivo di questo studio era di confrontare la crescita e il potenziale di differenziazione di rhesus monkey cellule staminali mesenchimali (rhMSCs) da diversi gruppi di et&agrave; (fetale, neonatale, infantile, giovanile) e utilizzare confocal spettroscopia micro-Raman per valutare i profili di intrinseca biomolecolare dei singoli rhMSCs. Risultati hanno indicato che le cellule fetali avevano raddoppiamento volte durante la fase di crescita del Registro (23,3 + 1,3 h) significativamente pi&ugrave; breve della popolazione e raddoppiamento volte (66,5 + 6,5) maggiore della popolazione rispetto alle altre fasce d&#39;et&agrave; (neonato 51,9 + 2.3, neonato 38.2 + /-3.1, 40,7 giovanile + 4.1). RhMSCs fetale anche differenziati verso osteogeniche e lignaggi di adipogenic a un ritmo pi&ugrave; veloce rispetto a celle da animali pi&ugrave; vecchi. L&#39;analisi spettrale Raman ha mostrato maggiore del DNA e bassa concentrazione di proteine nel fetale rispetto al rhMSCs giovanile, anche se gli spettri da diversi gruppi di et&agrave; condiviso molte caratteristiche simili. Inoltre, analisi delle componenti principali (PCA), che viene utilizzato per discriminare tra rhMSCs, supportata risultati precedenti che ha suggerito che colta rhMSCs costituiti da una popolazione cellulare eterogenea. Anche se &egrave; stato confermato il potenziale di crescita di rhMSCs dai gruppi di et&agrave; pi&ugrave; giovani, ulteriori studi saranno necessari per esplorare pienamente il potenziale utilit&agrave; del micro-spettroscopia Raman per caratterizzare le cellule staminali e progenitrici come rhMSCs.

Crescita, differenziazione e firme biochimiche delle cellule staminali mesenchimali scimmia rhesus.

&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x76EE;&#x7684;&#x306F;&#x3001;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x5E74;&#x9F62;&#x5C64;&#x304B;&#x3089;&#x30A2;&#x30AB;&#x30B2;&#x30B6;&#x30EB;&#x9593;&#x8449;&#x7CFB;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;rhMSCs&#xFF09;&#xFF08;&#x80CE;&#x5150;&#x3001;&#x65B0;&#x751F;&#x5150;&#x3001;&#x5E7C;&#x5150;&#x3001;&#x5C11;&#x5E74;&#xFF09;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x3068;&#x5206;&#x5316;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x672C;&#x8CEA;&#x7684;&#x306A;&#x751F;&#x4F53;&#x5206;&#x5B50;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x5171;&#x7126;&#x70B9;&#x9855;&#x5FAE;&#x30E9;&#x30DE;&#x30F3;&#x5206;&#x5149;&#x6CD5;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x500B;&#x3005;&#x306E;rhMSCs&#x306E;&#x3002;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x80CE;&#x5150;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x5BFE;&#x6570;&#x5897;&#x6B96;&#x671F;&#xFF08;23.3 + /  -  1.3 h&#xFF09;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x500D;&#x306B;&#x500D;&#x306B;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x77ED;&#x7E2E;&#x4EBA;&#x53E3;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x96C6;&#x56E3;&#x306E;&#x500D;&#x52A0;&#x6642;&#x9593;&#xFF08;66.5&#x3092;+ /  -  6.5&#xFF09;&#x4ED6;&#x306E;&#x5E74;&#x9F62;&#x5C64;&#xFF08;51.9&#x65B0;&#x751F;&#x5150;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;+ /  -  2.3&#x3001;&#x5E7C;&#x5150;38.2 + /  -  3.1&#x3001;&#x5C11;&#x5E74;40.7 + /  -  4.1&#xFF09;&#x3002;&#x80CE;&#x5150;&#x306E;rhMSCs&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x53E4;&#x3044;&#x52D5;&#x7269;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x901F;&#x3044;&#x901F;&#x5EA6;&#x3067;&#x9AA8;&#x3068;&#x8102;&#x80AA;&#x7D30;&#x80DE;&#x7CFB;&#x7D71;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x5206;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5E74;&#x9F62;&#x5225;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x306F;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x5171;&#x6709;&#x3057;&#x305F;&#x3082;&#x306E;&#x306E;&#x3001;&#x30E9;&#x30DE;&#x30F3;&#x5206;&#x5149;&#x5206;&#x6790;&#x306F;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x5927;&#x304D;&#x306A;DNA&#x3068;&#x5C11;&#x5E74;rhMSCs&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x80CE;&#x5150;&#x306E;&#x4F4E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;rhMSCs&#x3092;&#x533A;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x4E3B;&#x6210;&#x5206;&#x5206;&#x6790;&#xFF08;PCA&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x57F9;&#x990A;rhMSCs&#x3001;&#x7570;&#x7A2E;&#x7D30;&#x80DE;&#x96C6;&#x56E3;&#x304B;&#x3089;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x524D;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x82E5;&#x3044;&#x5E74;&#x9F62;&#x5C64;&#x304B;&#x3089;rhMSCs&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306A;&#x308B;&#x7814;&#x7A76;&#x304C;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;rhMSCs&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30E9;&#x30DE;&#x30F3;&#x9855;&#x5FAE;&#x5206;&#x5149;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x6709;&#x7528;&#x6027;&#x3092;&#x63A2;&#x7D22;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30A2;&#x30AB;&#x30B2;&#x30B6;&#x30EB;&#x9593;&#x8449;&#x7CFB;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x3001;&#x5206;&#x5316;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x751F;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x7F72;&#x540D;

&#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xBAA9;&#xD45C;&#xB294; &#xC131;&#xC7A5;&#xC744; &#xBE44;&#xAD50; &#xD558; &#xACE0; &#xBD89;&#xC740; &#xD138;&#xC758; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131; confocal &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; &#xB77C;&#xB9CC; &#xBD84;&#xAD11;&#xD559;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xAC1C;&#xBCC4; Rhmscs&#xC758; &#xBCF8;&#xC9C8;&#xC801;&#xC778; &#xBD84;&#xC790; &#xD504;&#xB85C; &#xD30C;&#xC77C; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD558; &#xACE0; &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xC5F0;&#xB839; &#xADF8;&#xB8F9; (&#xD0DC;&#xC544;, &#xC2E0;&#xC0DD;&#xC544;, &#xC720;&#xC544;, &#xCCAD;&#xC18C;&#xB144;)&#xC5D0;&#xC11C; &#xC911;&#xAC04; &#xC5FD; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; (rhMSCs) &#xC6D0;&#xC22D;&#xC774;. &#xACB0;&#xACFC; &#xD0DC;&#xC544;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xB85C;&#xADF8; &#xC131;&#xC7A5; &#xB2E8;&#xACC4; (1.3 h + 23.3) &#xC911;&#xC5D0; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC744; &#xB450; &#xBC30;&#xB85C; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD788; &#xC9E7;&#xC740; &#xC778;&#xAD6C; &#xBC0F; &#xD070; &#xC778;&#xAD6C; (6.5 + 66.5) &#xC2DC;&#xAC04;&#xC744; &#xB450; &#xBC30;&#xB85C; &#xD588;&#xB2E4; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xB54C; &#xB2E4;&#xB978; &#xC5F0;&#xB839; &#xADF8;&#xB8F9; (2.3, &#xC720;&#xC544; 38.2 &plusmn; 3.1, 4.1 + &#xCCAD;&#xC18C;&#xB144; 40.7 + &#xC2E0;&#xC0DD;&#xC544; 51.9)&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574;. &#xD0DC;&#xC544; rhMSCs &#xB610;&#xD55C; osteogenic &#xCABD;&#xC73C;&#xB85C; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xD558; &#xACE0; &#xC624;&#xB798; &#xB41C; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xB354; &#xBE60;&#xB978; &#xC18D;&#xB3C4;&#xB85C; adipogenic &#xACC4;&#xBCF4;. &#xB77C;&#xB9CC; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC; &#xBD84;&#xC11D; &#xD070; DNA &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC8FC;&#xBA70; &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xC5F0;&#xB839; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC; &#xACF5;&#xC720; &#xB9CE;&#xC740; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC774;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD0DC;&#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB0AE;&#xC740; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB18D;&#xB3C4; &#xCCAD;&#xC18C;&#xB144; Rhmscs&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574;. &#xB610;&#xD55C; Rhmscs&#xB97C; &#xAD6C;&#xBCC4; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;, &#xC8FC;&#xC131;&#xBD84; &#xBD84;&#xC11D; (PCA), &#xAD50;&#xC591;&#xB41C; rhMSCs &#xC774;&#xC885; &#xC138;&#xD3EC; &#xC778;&#xAD6C; &#xAD6C;&#xC131; &#xC81C;&#xC548; &#xC0AC;&#xC804; &#xC870;&#xC0AC; &#xACB0;&#xACFC; &#xC9C0;&#xC6D0;. &#xBE44;&#xB85D; &#xC80A;&#xC740; &#xB098;&#xC774; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC5D0;&#xC11C; Rhmscs&#xC758; &#xC131;&#xC7A5; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC744; &#xD655;&#xC778; &#xCD94;&#xAC00; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC644;&#xC804;&#xD788; rhMSCs &#xAC19;&#xC740; &#xC904;&#xAE30;&#xC640; &#xC870;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xB77C;&#xB9CC; &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; &#xBD84;&#xAD11;&#xD559;&#xC758; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xC720;&#xC6A9;&#xC131;&#xC744; &#xCC3E;&#xC544;&#xBCF4;&#xAE30; &#xD544;&#xC694;&#xAC00; &#xC788;&#xC744; &#xAC83;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC131;&#xC7A5;, &#xBD84;&#xD654;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xBD89;&#xC740; &#xD138; &#xC6D0;&#xC22D;&#xC774; &#xC911;&#xAC04; &#xC5FD; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC0DD; &#xD654; &#xD655; &#xC801;&#xC778; &#xC11C;&#xBA85;.

El objetivo de este estudio fue comparar el potencial de crecimiento y diferenciaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas madre de monos rhesus mesenquimales (rhMSCs) de diferentes grupos de edad (fetal, neonatal, infantil, juvenil), y para usar confocal de micro-espectroscopia Raman para evaluar los perfiles de biomoleculares intr&#xED;nsecos de rhMSCs individuales. Los resultados indicaron que las c&#xE9;lulas fetales de la poblaci&#xF3;n ten&#xED;a significativamente m&#xE1;s corto duplicando el tiempo durante la fase de crecimiento logar&#xED;tmico (23,3 + / - 1,3 h) y mayores tiempos de duplicaci&#xF3;n de la poblaci&#xF3;n (66,5 + / - 6,5) en comparaci&#xF3;n con otros grupos de edad (reci&#xE9;n nacido 51.9 + / - 2.3, infantil 38,2 + / - 3.1, juvenil 40,7 + / - 4.1). RhMSCs fetales tambi&#xE9;n diferenciarse hacia linajes osteog&#xE9;nicas y adipog&#xE9;nica a un ritmo m&#xE1;s r&#xE1;pido en comparaci&#xF3;n con las c&#xE9;lulas de los animales m&#xE1;s viejos. El an&#xE1;lisis espectral de Raman de ADN mostraron una mayor y menor concentraci&#xF3;n de prote&#xED;nas en comparaci&#xF3;n con los del feto rhMSCs de menores, a pesar de los espectros de los diferentes grupos de edad comparten muchas caracter&#xED;sticas similares. Adem&#xE1;s, el an&#xE1;lisis de componentes principales (ACP), que se utiliza para discriminar entre rhMSCs, con el apoyo hallazgos previos que suger&#xED;an que rhMSCs cultivos consisten en una poblaci&#xF3;n heterog&#xE9;nea de c&#xE9;lulas. Aunque el potencial de crecimiento de rhMSCs de los grupos de menor edad fue confirmado, otros estudios ser&#xE1;n necesarios para explorar a fondo la utilidad potencial de la espectroscopia Raman micro-para caracterizar las c&#xE9;lulas madre y progenitoras como rhMSCs.

Crecimiento, diferenciaci&#xF3;n y Bioqu&#xED;micos Firmas de Rhesus c&#xE9;lulas madre mesenquimales del mono

Polylipid &#x7EB3;&#x7C73;&#x7C92;&#x5B50; (PLNP) &#x8868;&#x660E;&#x5728;&#x63D0;&#x4F9B;&#x6297;&#x6C27;&#x5316;&#x57FA;&#x56E0;&#x5728;&#x5C0F;&#x9F20;&#x809D;&#x635F;&#x4F24;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x975E;&#x5E38;&#x6709;&#x6548;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4EE5;&#x524D;&#x5B66;&#x7684;&#x57FA;&#x7840;&#x4E0A;&#x518D;&#x63A5;&#x518D;&#x5389;&#xFF0C;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x63CF;&#x8FF0; PLNP (PCL) &#x9633;&#x79BB;&#x5B50;&#x8102;&#x8D28;&#x548C;&#x80C6;&#x56FA;&#x9187;&#x4ECE;&#x5236;&#x8BA2;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6765;&#x8FD9;&#x91CC;&#x62A5;&#x5230;&#x7684; PCL multigram &#x6570;&#x91CF;&#x7684;&#x5408;&#x6210;&#x548C;&#x5229;&#x7528;&#x5206;&#x6790;&#x5DE5;&#x5177;&#xFF0C;&#x5982;&#x5355; PLNP &#x62C9;&#x66FC;&#x5149;&#x8C31;&#x548C;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6210;&#x50CF;&#x7684;&#x8102;&#x8D28;&#x4F53;&#x3001; &#x7406;&#x5316;&#x7279;&#x6027;&#x7684; PCL&#x3001; PLNP &#x548C;&#x8F6C;&#x67D3;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x8D28;&#x8C31;&#x6CD5;&#x6F14;&#x793A;&#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x8840;&#x8102;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x3002;&#x62C9;&#x66FC;&#x5149;&#x8C31;&#x7684; PCL &#x63ED;&#x793A;&#x4E86;&#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x805A;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x3002;PLNP &#x914D;&#x65B9;&#x4E2D;&#x80C6;&#x56FA;&#x9187;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x5E76;&#x6CA1;&#x6709;&#x663E;&#x8457;&#x6539;&#x53D8;&#x62C9;&#x66FC;&#x5149;&#x8C31;&#x3002;PLNP &#x6D3E;&#x751F;&#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x975E;&#x5E38;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E; PLNP &#x7684;&#x62C9;&#x66FC;&#x5149;&#x8C31;&#x4E0D;&#x540C;&#x4E4B;&#x5904;&#x5728;&#x4E8E;&#x5927;&#x5927;&#x538B;&#x6291;&#x805A;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x8102;&#x8D28;&#x7684; C H &#x51FA;&#x7684;&#x5E73;&#x9762;&#x53D8;&#x5F62;&#x6A21;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x8BE5;&#x503C;&#x4E0E;&#x8D28;&#x7C92; DNA &#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;Zeta &#x7535;&#x4F4D;&#x6D4B;&#x91CF;&#x6307;&#x793A; PLNP &#x7684; DNA &#x643A;&#x5E26;&#x5927;&#x5BB9;&#x91CF;&#x548C;&#x4F53;&#x5185;&#x57FA;&#x56E0;&#x4F20;&#x9012;&#x5176;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x3002;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8367;&#x5149;&#x6210;&#x50CF;&#x52A8;&#x6001;&#x663E;&#x793A; PLNP &#x65BD;&#x52A0;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x5728;&#x6D3B;&#x809D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x65E9;&#x671F;&#x8BB0;&#x8005;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x5BFC;&#x81F4;&#x8102;&#x8D28;&#x4F53;&#x8F6C;&#x67D3;&#x6548;&#x7387;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;polylipid &#x7EB3;&#x7C73;&#x7C92;&#x5B50;&#x62E5;&#x6709; DNA &#x8F7D;&#x5BA2;&#x91CF;&#x9AD8;&#x800C;&#x8102;&#x8D28;&#x4F53;&#x6548;&#x7387;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x5176;&#x9002;&#x7528;&#x4E8E;&#x5728;&#x5927;&#x578B;&#x52A8;&#x7269;&#x4E2D;&#x7684;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x3002;&#x5C31;&#x4E1A;&#x7684;&#x8102;&#x8D28;&#x4F53;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x65B0;&#x578B;&#x5148;&#x8FDB;&#x7684;&#x6280;&#x672F;&#x4EE3;&#x8868;&#x7406;&#x5316;&#x548C;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7279;&#x6027;&#xFF0C;&#x6700;&#x597D;&#x4E86;&#x89E3;&#x8102;&#x8D28;&#x4F53;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x6D89;&#x53CA;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x8981;&#x7D20;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#x3002;

Polylipid &#x7EB3;&#x7C73;&#x7C92;&#x57FA;&#x56E0;&#x4F20;&#x9012;&#x5230;&#x809D;&#x810F;&#x7684;&#x7406;&#x5316;&#x8868;&#x5F81;&#x3002;

Polylipid nanoparticles (PLNP) have been shown to be very effective in delivering antioxidative genes in the treatment of liver injury in mice. To build on our previous studies and to further characterize PLNP formulated from polycationic lipid (PCL) and cholesterol, we report here the synthesis of multigram quantities of PCL and employ analytical tools, such as Raman spectroscopy of single PLNP and live-cell imaging of lipofection, for the physicochemical characterization of PCL, PLNP, and the transfection process. Mass spectrometry demonstrates the characteristics of polymeric lipids. Raman spectrum of PCL reveals the polymeric structure of the polymers. The presence of cholesterol in PLNP formulation did not markedly change the Raman spectrum. PLNP-derived polyplexes exhibit Raman spectra very similar to PLNP except that the C-H out-of-plane deformation mode of the polymeric lipid is significantly suppressed, indicating the interaction with plasmid DNA. Zeta potential measurement indicates a large DNA-carrying capacity of PLNP and their stability for in vivo gene delivery. The live-cell fluorescent imaging dynamically shows that PLNP exerts transfection efficiency similar to lipofectamine in leading to early reporter gene expression in live hepatic cells. In conclusion, polylipid nanoparticles possess a high DNA carrying capacity and lipofection efficiency, rendering them suitable for testing in large animals. The employment of novel state-of-the-art technologies in the study of lipofection represents the level of physicochemical and biological characterization that is needed to best understand the key elements involved in the lipofection process.

Physico-chemical characterization of polylipid nanoparticles for gene delivery to the liver.

Nanoparticules Polylipid (PLNP) ont &#xE9;t&#xE9; montr&#xE9; pour &#xEA;tre tr&#xE8;s efficace dans la prestation de g&#xE8;nes antioxydants dans le traitement des l&#xE9;sions du foie chez la souris. Pour tirer parti de nos &#xE9;tudes ant&#xE9;rieures et de mieux caract&#xE9;riser PLNP formul&#xE9; &#xE0; partir des lipides polycationique (PCL) et le cholest&#xE9;rol, nous pr&#xE9;sentons ici la synth&#xE8;se de quantit&#xE9;s multigramme de PCL et utiliser des outils analytiques, tels que la spectroscopie Raman de PLNP unique et imagerie des cellules vivantes de lipofection , pour la caract&#xE9;risation physico-chimique de PCL, PLNP, et le processus de transfection. La spectrom&#xE9;trie de masse montre les caract&#xE9;ristiques de lipides polym&#xE8;res. Spectre Raman de PCL r&#xE9;v&#xE8;le la structure polym&#xE8;re des polym&#xE8;res. La pr&#xE9;sence de cholest&#xE9;rol dans la formulation PLNP n&#x26;#39;a pas sensiblement modifier le spectre Raman. PLNP d&#xE9;riv&#xE9;s polyplexes pr&#xE9;sentent des spectres Raman tr&#xE8;s similaire &#xE0; PLNP sauf que le mode de d&#xE9;formation CH hors plan du lipide polym&#xE8;re est sensiblement supprim&#xE9;, indiquant l&#x26;#39;interaction avec l&#x26;#39;ADN plasmidique. Mesure du potentiel z&#xEA;ta indique une grande capacit&#xE9; de transport de l&#x26;#39;ADN-du PLNP et leur stabilit&#xE9; dans la livraison de g&#xE8;nes in vivo. L&#x26;#39;imagerie des cellules vivantes fluorescent montre que l&#x26;#39;efficacit&#xE9; dynamique PLNP transfection exerce similaire &#xE0; lipofectamine qui conduisent &#xE0; l&#x26;#39;expression du g&#xE8;ne rapporteur d&#xE9;but dans les cellules h&#xE9;patiques vivantes. En conclusion, les nanoparticules poss&#xE8;dent un ADN polylipid haute capacit&#xE9; de charge et l&#x26;#39;efficacit&#xE9; lipofection, les rendant appropri&#xE9;es pour tester chez les gros animaux. L&#x26;#39;emploi de nouveaux state-of-the-art technologies dans l&#x26;#39;&#xE9;tude de lipofection repr&#xE9;sente le niveau de la caract&#xE9;risation physico-chimique et biologique qui est n&#xE9;cessaire pour mieux comprendre les &#xE9;l&#xE9;ments cl&#xE9;s impliqu&#xE9;s dans le processus de lipofection.

Caract&#xE9;risation physico-chimique des nanoparticules Polylipid de transfert de g&#xE8;nes au Foie

PolyLipid Nanopartikel (PLNP) wurden gezeigt, sehr wirkungsvoll bei der Bereitstellung von antioxidativen Gene in der Behandlung von Leber-Sch&auml;digung in den M&auml;usen. Um auf unsere fr&uuml;heren Studien aufbauen und weiter PLNP formuliert aus Polycationic Lipid (PCL) und Cholesterin zu charakterisieren, wir berichten hier die Synthese Multigramm Mengen von PCL und besch&auml;ftigen analytische Tools wie Raman-Spektroskopie der einzelnen PLNP und Leben-Zelle Darstellung der Lipofektion, f&uuml;r die physikalisch-chemische Charakterisierung von PCL, PLNP und der Transfektion-Prozess. Massenspektrometrie veranschaulicht die Eigenschaften von Polymeren Lipiden. Raman-Spektrum von PCL offenbart die Polymere Struktur der Polymere. Die Anwesenheit von Cholesterin in PLNP Formulierung hat das Raman-Spektrum nicht merklich ver&auml;ndert. PLNP abgeleitete Polyplexes weisen Raman Spektren PLNP sehr &auml;hnlich, au&szlig;er dass der C-H-Out-of-Plane Verformung-Modus von Polymeren Lipid deutlich unterdr&uuml;ckt wird, der angibt, der Interaktion mit Plasmid DNA. Zeta-Potenzial-Messung zeigt eine gro&szlig;e DNA-Transportkapazit&auml;t des PLNP und ihrer Stabilit&auml;t f&uuml;r die Lieferung der in-vivo-gen. Die Leben-Zelle-Fluoreszenz-Bildgebung zeigt dynamisch, dass PLNP &auml;hnlich wie Lipofectamine im zu fr&uuml;hen Reporter-Gen-Ausdrucks in lebenden Zellen der Leber Transfektionseffizienz aus&uuml;bt. Polylipid Nanopartikel besitzen abschlie&szlig;end eine hohe Tragf&auml;higkeit der DNA und Lipofektion Effizienz, Rendern sie f&uuml;r Tests in gro&szlig;e Tiere geeignet. Die Besch&auml;ftigung von neuartigen Zustand-of-the-Art-Technologien in der Studie von Lipofektion stellt die Ebene der physikalisch-chemische und biologische Charakterisierung, die notwendig ist, um die Schl&uuml;sselelemente Lipofektion Prozess beteiligt am besten verstehen.

Physikalisch-chemische Charakterisierung von Polylipid Nanopartikeln f&uuml;r gen-&Uuml;bermittlung an die Leber.

Polylipid nanoparticelle (PLNP) hanno dimostrate di essere molto efficace nel fornire geni antiossidanti nel trattamento delle lesioni epatiche nei topi. Per costruire i nostri studi precedenti e caratterizzare ulteriormente PLNP formulato da colesterolo e lipidi polycationic (PCL), abbiamo relazione qui la sintesi di multigram quantit&agrave; di PCL e impiegare strumenti analitici, quali la spettroscopia Raman di PLNP singolo e live cell imaging del lipofection, per la caratterizzazione fisico-chimica del PCL, PLNP e il processo di trasfezione. Spettrometria di massa viene illustrato le caratteristiche dei lipidi polimerici. Spettro Raman di PCL rivela la struttura polimerica dei polimeri. La presenza di colesterolo nella formulazione PLNP non cambia notevolmente lo spettro Raman. Polyplexes derivato da PLNP esibiscono gli spettri Raman molto simili a PLNP ad eccezione del fatto che la modalit&agrave; out-of-plane deformazione di C-H dei lipidi polimerici &egrave; significativamente soppressa, che indica l&#39;interazione con il DNA del plasmide. Misurazione potenziale zeta indica una grande capacit&agrave; di trasporto del DNA di PLNP e la loro stabilit&agrave; per la consegna del gene in vivo. L&#39;imaging fluorescente live-cella dinamicamente dimostra che PLNP esercita una efficienza di trasfezione simile a lipofectamine in che portano alla precoce espressione del gene reporter in vivo delle cellule epatiche. In conclusione, le nanoparticelle polylipid possiedono un&#39;elevata capacit&agrave; di carico del DNA e lipofection efficienza, rendendoli adatti per i test in grandi animali. L&#39;occupazione del romanzo stato-of-the-art tecnologie nello studio della lipofection rappresenta il livello di caratterizzazione fisico-chimiche e biologiche che &egrave; necessaria per meglio comprendere gli elementi chiave coinvolti nel processo di lipofection.

Caratterizzazione fisico-chimiche delle nanoparticelle polylipid per la consegna del gene per il fegato.

Polylipid&#x30CA;&#x30CE;&#x7C92;&#x5B50;&#xFF08;PLNP&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x809D;&#x969C;&#x5BB3;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306B;&#x6297;&#x9178;&#x5316;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x4E0A;&#x3067;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x6709;&#x52B9;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x4EE5;&#x524D;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x69CB;&#x7BC9;&#x3057;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x30DD;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C1;&#x30AA;&#x30F3;&#x6027;&#x8102;&#x8CEA;&#xFF08;PCL&#xFF09;&#x3068;&#x30B3;&#x30EC;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x304B;&#x3089;&#x7B56;&#x5B9A;PLNP&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;PCL&#x306E;&#x6570;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x306E;&#x91CF;&#x306E;&#x5408;&#x6210;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x5358;&#x4E00;PLNP&#x3068;&#x30EA;&#x30DD;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30BB;&#x30EB;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x30E9;&#x30DE;&#x30F3;&#x5206;&#x5149;&#x6CD5;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x63A1;&#x7528;&#x3001;PCL&#x3001;PLNP&#x3001;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x904E;&#x7A0B;&#x306E;&#x7269;&#x7406;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x7279;&#x6027;&#x8A55;&#x4FA1;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3002;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x6CD5;&#x306F;&#x3001;&#x30DD;&#x30EA;&#x30DE;&#x30FC;&#x8102;&#x8CEA;&#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; PCL&#x306E;&#x30E9;&#x30DE;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x30DD;&#x30EA;&#x30DE;&#x30FC;&#x306E;&#x30DD;&#x30EA;&#x30DE;&#x30FC;&#x69CB;&#x9020;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3002; PLNP&#x88FD;&#x5264;&#x4E2D;&#x306E;&#x30B3;&#x30EC;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x304C;&#x9855;&#x8457;&#x306B;&#x30E9;&#x30DE;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002; PLNP&#x7531;&#x6765;polyplexes&#x306F;&#x3001;&#x30DD;&#x30EA;&#x30DE;&#x30FC;&#x8102;&#x8CEA;&#x306E;CH&#x9762;&#x5916;&#x5909;&#x5F62;&#x30E2;&#x30FC;&#x30C9;&#x304C;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C9;DNA&#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3001;&#x6291;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x9664;&#x3044;&#x3066;PLNP&#x306B;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x3088;&#x304F;&#x4F3C;&#x3066;&#x30E9;&#x30DE;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x30BC;&#x30FC;&#x30BF;&#x96FB;&#x4F4D;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x306F;&#x3001;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;DNA&#x904B;&#x642C;PLNP&#x306E;&#x5BB9;&#x91CF;&#x304A;&#x3088;&#x3073;in vivo&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x9001;&#x9054;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x305D;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x751F;&#x7D30;&#x80DE;&#x86CD;&#x5149;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x200B;&#x200B;&#x3001;&#x52D5;&#x7684;&#x306B;&#x751F;&#x304D;&#x3066;&#x809D;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x3001;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x306E;&#x30EA;&#x30DD;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x306B;&#x4F3C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;PLNP&#x767A;&#x63EE;&#x3059;&#x308B;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x52B9;&#x7387;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D50;&#x8AD6;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;polylipid&#x30CA;&#x30CE;&#x7C92;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x5927;&#x578B;&#x52D5;&#x7269;&#x3067;&#x306E;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x306B;&#x9069;&#x3057;&#x3066;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C0;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3001;&#x5BB9;&#x91CF;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30EA;&#x30DD;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x52B9;&#x7387;&#x3092;&#x904B;&#x3076;&#x9AD8;&#x3044;DNA&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30EA;&#x30DD;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x5C0F;&#x8AAC;&#x306E;&#x6700;&#x5148;&#x7AEF;&#x6280;&#x8853;&#x306E;&#x63A1;&#x7528;&#x306F;&#x3001;&#x6700;&#x9AD8;&#x306E;&#x30EA;&#x30DD;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x8981;&#x7D20;&#x3092;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x7269;&#x7406;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x7279;&#x6027;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x809D;&#x81D3;&#x3078;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x9001;&#x9054;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;Polylipid&#x30CA;&#x30CE;&#x7C92;&#x5B50;&#x306E;&#x7269;&#x7406;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x7279;&#x6027;

Polylipid &#xB098;&#xB178; &#xC785;&#xC790; (PLNP)&#xC740; &#xC950;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xAC04; &#xC190;&#xC0C1;&#xC758; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0;&#xC11C; antioxidative &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xC804;&#xB2EC; &#xD558;&#xB294; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC778; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC774;&#xC804; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD6C;&#xCD95; &#xD558; &#xACE0; &#xB354; PLNP polycationic &#xC9C0;&#xC9C8; (PCL)&#xACFC; &#xCF5C;&#xB808;&#xC2A4;&#xD14C;&#xB864;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACF5;&#xC2DD;&#xD654;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xBCF4;&#xACE0; &#xC5EC;&#xAE30; PCL multigram &#xC591;&#xC758; &#xD569;&#xC131; &#xD558; &#xACE0; &#xB2E8;&#xC77C; PLNP&#xC758; &#xB77C;&#xB9CC; &#xBD84;&#xAD11;&#xD559; &#xBC0F; PCL, PLNP, transfection &#xACFC;&#xC815;&#xC758; &#xBB3C;&#xB9AC; &#xD654;&#xD559;&#xC801; &#xD2B9;&#xC131; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; lipofection&#xC758; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC140; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xB4F1;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9;. &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D; &#xACE0;&#xBD84;&#xC790; &#xC9C0;&#xC9C8; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. PCL&#xC758; &#xB77C;&#xB9CC; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC;&#xC740; &#xACE0;&#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xC911; &#xD569; &#xAD6C;&#xC870;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900;&#xB2E4;. PLNP &#xBC30;&#xD569;&#xC5D0; &#xCF5C;&#xB808;&#xC2A4;&#xD14C;&#xB864;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xB294; &#xB77C;&#xB9CC; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC; &#xD604;&#xC800; &#xD558; &#xAC8C; &#xBCC0;&#xD654; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. PLNP&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; polyplexes &#xC81C;&#xC678; &#xD558; &#xACE0; &#xACE0;&#xBD84;&#xC790; &#xC9C0;&#xC9C8; C H-&#xD3C9;&#xBA74; &#xBCC0;&#xD615; &#xBAA8;&#xB4DC; &#xD06C;&#xAC8C; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC; DNA&#xC640;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; Raman &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC; PLNP&#xC640; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC804;&#xC2DC;. &#xC81C;&#xD0C0; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xCE21;&#xC815; DNA&#xB97C; &#xC6B4;&#xBC18; PLNP&#xC758; &#xB300;&#xC6A9;&#xB7C9; in vivo &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC30;&#xB2EC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC140; &#xD615;&#xAD11; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xB3D9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; PLNP &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xAC04;&#xC7A5; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xCD08;&#xAE30; &#xB9AC;&#xD3EC;&#xD130; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC744; &#xC120;&#xB3C4;&#xC5D0; lipofectamine&#xC640; &#xC720;&#xC0AC;&#xD55C; transfection &#xD6A8;&#xC728;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB05D;&#xC73C;&#xB85C;, polylipid &#xB098;&#xB178; &#xC785;&#xC790; &#xC18C;&#xC720; &#xB192;&#xC740; DNA &#xC6B4;&#xBC18; &#xB2A5;&#xB825; &#xBC0F; lipofection &#xD6A8;&#xC728;, &#xD070; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB97C; &#xC704;&#xD574; &#xC801;&#xD569; &#xD55C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC744; &#xB80C;&#xB354;&#xB9C1; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Lipofection&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xCD5C;&#xC2E0;&#xC758; &#xAE30;&#xC220; &#xACE0;&#xC6A9; &#xCD5C;&#xACE0;&#xC758; lipofection &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xD575;&#xC2EC; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xC774;&#xD574; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xBB3C;&#xB9AC; &#xD654;&#xD559;&#xC801; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559;&#xC801; &#xD2B9;&#xC131; &#xBD84;&#xC11D;&#xC758; &#xC218;&#xC900;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Physico &#xD654;&#xD559; &#xAC04; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC30;&#xB2EC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; polylipid &#xB098;&#xB178; &#xC785;&#xC790;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131; &#xBD84;&#xC11D;.

Nanopart&#xED;culas Polylipid (PLNP) han demostrado ser muy eficaz en la entrega de los genes antioxidantes en el tratamiento de lesi&#xF3;n hep&#xE1;tica en ratones. Para continuar con nuestros estudios previos y de caracterizar mejor PLNP formulado a partir de l&#xED;pidos policati&#xF3;nico (PCL) y el colesterol, se presenta aqu&#xED; la s&#xED;ntesis de cantidades multigramos de PCL y emplear herramientas de an&#xE1;lisis, como la espectroscopia de Raman de PLNP &#xFA;nico y en vivo de c&#xE9;lulas de imagen de lipofecci&#xF3;n , para la caracterizaci&#xF3;n fisicoqu&#xED;mica de PCL, PLNP, y el proceso de la transfecci&#xF3;n. La espectrometr&#xED;a de masas muestra las caracter&#xED;sticas de los l&#xED;pidos polim&#xE9;ricos. Espectro Raman de PCL revela la estructura polim&#xE9;rica de los pol&#xED;meros. La presencia de colesterol en la formulaci&#xF3;n de PLNP no cambiar notablemente el espectro Raman. PLNP derivados polyplexes exhiben espectros Raman muy similar a PLNP excepto que el CH fuera del plano de modo de deformaci&#xF3;n del l&#xED;pido polim&#xE9;rico se suprimi&#xF3; significativamente, lo que indica la interacci&#xF3;n con el ADN del pl&#xE1;smido. Medici&#xF3;n potencial Zeta indica una gran capacidad de transporte de ADN de PLNP y su estabilidad en el suministro in vivo de genes. La proyecci&#xF3;n de imagen fluorescente en vivo de c&#xE9;lulas de forma din&#xE1;mica muestra que la eficiencia de transfecci&#xF3;n PLNP ejerce similar a lipofectamina en el que conduce a la expresi&#xF3;n de principios de gen reportero en las c&#xE9;lulas hep&#xE1;ticas vivas. En conclusi&#xF3;n, las nanopart&#xED;culas polylipid poseen un ADN de alta capacidad de carga y la eficiencia lipofecci&#xF3;n, lo que hace que sean adecuadas para las pruebas en animales de gran tama&#xF1;o. El empleo de los nuevos estado-de-la m&#xE1;s moderna tecnolog&#xED;a en el estudio de lipofecci&#xF3;n representa el nivel de la caracterizaci&#xF3;n f&#xED;sico-qu&#xED;mica y biol&#xF3;gica que se necesita para entender mejor los elementos que intervienen en el proceso de lipofecci&#xF3;n.

Caracterizaci&#xF3;n f&#xED;sico-qu&#xED;mica de nanopart&#xED;culas Polylipid la incorporaci&#xF3;n de genes en el h&#xED;gado

&#x5355;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6210;&#x4E3A;&#x916F;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x5176;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x673A;&#x5236;&#x662F;&#x66B4;&#x9732;&#x4E8E;&#x5BCC;&#x542B;&#x7518;&#x6CB9;&#x4E09;&#x916F;&#x7684;&#x8102;&#x86CB;&#x767D;&#x6781;&#x4F4E;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x8102;&#x86CB;&#x767D; (VLDL) &#x7B49;&#x3002;VLDL &#x88AB;&#x6C34;&#x89E3;&#x8102;&#x86CB;&#x767D;&#x8102;&#x80AA;&#x9176;&#x5728;&#x8840;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x754C;&#x9762;&#xFF0C;&#x91CA;&#x653E;&#x6E38;&#x79BB;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4E86;&#x9910;&#x540E;&#x5355;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6D3B;&#x5316;&#x7684;&#x66F4;&#x591A;&#x7EC6;&#x8282;&#xFF0C;&#x5E76;&#x53D1;&#x73B0;&#x8102;&#x80AA;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4EA7;&#x54C1;&#x4ECE;&#x9910;&#x540E; VLDL &#x751F;&#x6210;&#x8BF1;&#x4F7F;&#x517B;&#x6B96; thp-1 &#x5355;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x7279;&#x70B9;&#x662F;&#x8FDE;&#x8D2F; antistokes &#x62C9;&#x66FC;&#x5149;&#x8C31;&#x5185;&#x8102;&#x586B;&#x5145;&#x6DB2;&#x6EF4;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;&#x7279;&#x5B9A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5668;&#x7684;&#x6C61;&#x6E0D;&#x900F;&#x9732;&#x5185;&#x8D28;&#x7F51;&#x3001; &#x7535;&#x955C;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x7684;&#x8102;&#x8D28;&#x6EF4;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x8102;&#x86CB;&#x767D;&#x8102;&#x80AA;&#x9176;&#x91CA;&#x653E;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x88AB;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7684;&#x725B;&#x8840;&#x6E05;&#x767D;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E5F;&#x51CF;&#x5C11;&#x4E86;&#x7EC6;&#x80DE;&#x708E;&#x75C7;&#x65F6;&#x51CF;&#x5C11;&#x8102;&#x8D28;&#x6DB2;&#x6EF4;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x9971;&#x548C;&#x7684;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5355;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x76F8;&#x6BD4;&#x5355;&#x58F0;&#x9053;&#x548C;&#x591A;&#x4E0D;&#x9971;&#x548C;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x66F4;&#x591A;&#x8102;&#x6DB2;&#x6EF4;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;&#x5355;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6CBB;&#x7597;&#x9910;&#x540E; VLDL &#x6EB6;&#x8102;&#x6280;&#x672F;&#x4EA7;&#x54C1;&#x6240;&#x8F7D;&#x8102;&#x8D28;&#x6DB2;&#x6EF4;&#x4E0E;&#x66F4;&#x5F3A;&#x7684;&#x9971;&#x548C;&#x62C9;&#x66FC;&#x5149;&#x8C31;&#x4FE1;&#x53F7;&#x6BD4;&#x5355;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6CBB;&#x7597;&#x7A7A;&#x8179; VLDL &#x6EB6;&#x8102;&#x6280;&#x672F;&#x4EA7;&#x54C1;&#x3002;&#x53E6;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x4EBA;&#x5355;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x79BB;&#x7684;&#x9AD8;&#x5CF0;&#x65F6;&#x6BB5;&#x9910;&#x540E;&#x5305;&#x542B;&#x66F4;&#x591A;&#x7684;&#x8102;&#x8D28;&#x6DB2;&#x6EF4;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E0E;&#x90A3;&#x4E9B;&#x4ECE;&#x7A7A;&#x8179;&#x72B6;&#x6001;&#xFF0C;&#x6807;&#x5FD7;&#x7740;&#x5176;&#x53D1;&#x5C55;&#x5E76;&#x4E0D;&#x5C40;&#x9650;&#x4E8E;&#x57F9;&#x517B;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E5F;&#x4F1A;&#x53D1;&#x751F;&#x5728;&#x4F53;&#x5185;&#x3002;&#x603B;&#x4E4B;&#xFF0C;&#x5FAA;&#x73AF;&#x7684;&#x6E38;&#x79BB;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8C03;&#x89E3;&#x4E2D;&#x5355;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8102;&#x8D28;&#x6DB2;&#x6EF4;&#x5F62;&#x6210;&#x548C;&#x53EF;&#x80FD;&#x88AB;&#x7528;&#x4E8E;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x751F;&#x7269;&#x6807;&#x8BB0;&#x7269;&#x8BC4;&#x4F30;&#x4E2A;&#x4EBA;&#x53D1;&#x5C55;&#x52A8;&#x8109;&#x7CA5;&#x6837;&#x786C;&#x5316;&#x6027;&#x5FC3;&#x8840;&#x7BA1;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x98CE;&#x9669;&#x3002;

&#x4ECE;&#x6781;&#x4F4E;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x8102;&#x86CB;&#x767D;&#x8102;&#x80AA;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4EA7;&#x54C1;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x4EBA;&#x5355;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x8102;&#x8D28;&#x6EF4;&#x79EF;&#x7D2F;&#x3002;

One mechanism by which monocytes become activated postprandially is by exposure to triglyceride-rich lipoproteins such as very low-density lipoproteins (VLDL). VLDL are hydrolyzed by lipoprotein lipase at the blood-endothelial cell interface, releasing free fatty acids. In this study, we examined postprandial monocyte activation in more detail, and found that lipolysis products generated from postprandial VLDL induce the formation of lipid-filled droplets within cultured THP-1 monocytes, characterized by coherent antistokes Raman spectroscopy. Organelle-specific stains revealed an association of lipid droplets with the endoplasmic reticulum, confirmed by electron microscopy. Lipid droplet formation was reduced when lipoprotein lipase-released fatty acids were bound by BSA, which also reduced cellular inflammation. Furthermore, saturated fatty acids induced more lipid droplet formation in monocytes compared with mono- and polyunsaturated fatty acids. Monocytes treated with postprandial VLDL lipolysis products contained lipid droplets with more intense saturated Raman spectroscopic signals than monocytes treated with fasting VLDL lipolysis products. In addition, we found that human monocytes isolated during the peak postprandial period contain more lipid droplets compared with those from the fasting state, signifying that their development is not limited to cultured cells but also occurs in vivo. In summary, circulating free fatty acids can mediate lipid droplet formation in monocytes and potentially be used as a biomarker to assess an individual's risk of developing atherosclerotic cardiovascular disease.

Fatty acids from very low-density lipoprotein lipolysis products induce lipid droplet accumulation in human monocytes.

Un m&#xE9;canisme par lequel les monocytes sont activ&#xE9;es apr&#xE8;s le repas est par l&#x26;#39;exposition &#xE0; lipoprot&#xE9;ines riches en triglyc&#xE9;rides comme les lipoprot&#xE9;ines de tr&#xE8;s faible densit&#xE9; (VLDL). VLDL sont hydrolys&#xE9;s par la lipoprot&#xE9;ine lipase &#xE0; l&#x26;#39;interface de globules-endoth&#xE9;lial, lib&#xE9;rant des acides gras libres. Dans cette &#xE9;tude, nous avons examin&#xE9; l&#x26;#39;activation des monocytes postprandiale plus en d&#xE9;tail, et a constat&#xE9; que les produits g&#xE9;n&#xE9;r&#xE9;s &#xE0; partir de la lipolyse des VLDL postprandiale induisent la formation de gouttelettes de lipides remplis au sein de culture de monocytes THP-1, caract&#xE9;ris&#xE9;s par spectroscopie Raman coh&#xE9;rente antistokes. Organite sp&#xE9;cifiques taches r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; une association de gouttelettes lipidiques avec le r&#xE9;ticulum endoplasmique, confirm&#xE9;e par microscopie &#xE9;lectronique. La formation de gouttelettes de lipides a &#xE9;t&#xE9; r&#xE9;duite lorsque la lipoprot&#xE9;ine lipase-acides gras lib&#xE9;r&#xE9;s sont li&#xE9;s par BSA, qui a &#xE9;galement r&#xE9;duit l&#x26;#39;inflammation cellulaire. En outre, les acides gras satur&#xE9;s induit la formation de gouttelettes de lipides plus dans les monocytes rapport avec des mono-et acides gras polyinsatur&#xE9;s. Les monocytes trait&#xE9;s avec des produits de lipolyse des VLDL postprandiaux contenait des gouttelettes lipidiques avec plus intenses satur&#xE9;s signaux Raman spectroscopiques que les monocytes trait&#xE9;s avec le je&#xFB;ne produits de lipolyse des VLDL. En outre, nous avons constat&#xE9; que les monocytes humains isol&#xE9;s au cours de la p&#xE9;riode de pic postprandial contiennent des gouttelettes lipidiques de plus par rapport &#xE0; ceux de l&#x26;#39;&#xE9;tat de je&#xFB;ne, ce qui signifie que leur d&#xE9;veloppement ne se limite pas &#xE0; des cellules en culture, mais se produit &#xE9;galement in vivo. En r&#xE9;sum&#xE9;, acides gras libres circulants peut servir de m&#xE9;diateur formation de gouttelettes de lipides dans les monocytes et potentiellement &#xEA;tre utilis&#xE9; comme un biomarqueur pour &#xE9;valuer le risque d&#x26;#39;un individu de d&#xE9;velopper une maladie cardiovasculaire ath&#xE9;roscl&#xE9;reuse.

Acides gras de tr&#xE8;s faible densit&#xE9; Produits lipolyse des lipoprot&#xE9;ines induisent une accumulation de gouttelettes lipidiques dans les monocytes humains

Ein Mechanismus mit dem postprandially Monozyten aktiviert sind durch Aussetzung zu den Triglycerid-reiche Lipoproteine wie sehr Low-Density-Lipoproteine (VLDL). VLDL sind durch Lipoproteinlipase an der Schnittstelle von Blut-endothelial Zelle hydrolysiert, freie Fetts&auml;uren die Freigabe. In dieser Studie wir Miniature Monozyte Aktivierung genauer untersucht und festgestellt, dass die Lipolyse Produkte aus Miniature VLDL generiert induzieren die Bildung von Lipid-gef&uuml;llte Tr&ouml;pfchen in kultivierten THP-1 Monozyten, gekennzeichnet durch koh&auml;rente Antistokes Raman-Spektroskopie. Organell-spezifische Flecken ergab eine Vereinigung von Lipid-Tr&ouml;pfchen mit dem Endoplasmatischen Retikulum, best&auml;tigt durch Elektronenmikroskopie. Lipid-Tr&ouml;pfchen-Bildung wurde reduziert, wenn Lipoprotein Lipase ver&ouml;ffentlicht Fetts&auml;uren von BSA, verpflichtet waren, die auch zellul&auml;re Entz&uuml;ndung reduziert. Dar&uuml;ber hinaus induzierte ges&auml;ttigter Fetts&auml;uren mehr Lipid-Tr&ouml;pfchen-Formation in Monozyten gegen&uuml;ber Mono- und mehrfach unges&auml;ttigten Fetts&auml;uren. Monozyten mit Miniature VLDL Lipolyse enthaltenen Erzeugnisse Lipid Tr&ouml;pfchen mit intensiver ges&auml;ttigten Raman Spektroskopie-Signale als Monozyten behandelt, die mit Fasten VLDL Lipolyse Produkten behandelt werden. Dar&uuml;ber hinaus fanden wir, dass die menschliche Monozyten isoliert w&auml;hrend des Zeitraums Miniature enthalten weitere Lipid-Tr&ouml;pfchen, die im Vergleich zu denen vom Fasten Staat, signalisieren, dass ihre Entwicklung beschr&auml;nkt sich nicht auf kultivierten Zellen, sondern auch in-vivo tritt. Zusammenfassend l&auml;sst sich sagen zirkulierende freie Fetts&auml;uren k&ouml;nnen vermitteln Lipid-Tr&ouml;pfchen-Formation in Monozyten und potenziell als Biomarker zur Bewertung eines Individuums Risiko der Entwicklung von atherosklerotischen Herz-Kreislauf-Erkrankungen verwendet werden.

Fetts&auml;uren aus very low density Lipoprotein Lipolyse Produkte induzieren Lipid Tr&ouml;pfchen Anreicherung im menschlichen Monozyten.

Un meccanismo da cui i monociti attivati postprandially &egrave; da esposizione alle lipoproteine ricche di trigliceridi come molto lipoproteine a bassa densit&agrave; (VLDL). VLDL sono idrolizzato dalla lipoproteina lipasi all&#39;interfaccia cellula endoteliale sangue, liberando acidi grassi liberi. In questo studio, abbiamo esaminato Attivazione monociti postprandiale pi&ugrave; in dettaglio e trovato che prodotti di lipolisi generati da VLDL postprandiale inducono la formazione di goccioline pieni di lipidi all&#39;interno colti monociti THP-1, caratterizzate da coerente antistokes spettroscopia Raman. Le macchie specifiche dell&#39;organello ha rivelato un&#39;associazione di gocce lipidiche con il reticolo endoplasmatico, confermato da microscopia elettronica. Formazione di goccioline di lipidi &egrave; stato ridotto lipoproteina lipasi-rilasciato gli acidi grassi sono stati vincolati da BSA, che ha anche ridotto l&#39;infiammazione cellulare. Inoltre, gli acidi grassi saturi indotta pi&ugrave; formazione di goccioline di lipidi nei monociti rispetto ai mono - e acidi grassi polinsaturi. Monociti trattati con post-prandiale VLDL lipolisi prodotti contenuti lipidici goccioline con pi&ugrave; intensi segnali spettroscopici saturi Raman di monociti trattate con prodotti di lipolisi digiuno VLDL. Inoltre, abbiamo trovato che monociti umani isolati durante il periodo di picco post-prandiale contengono pi&ugrave; goccioline di lipidi rispetto a quelli di stato digiuno, indicante che il loro sviluppo non &egrave; limitato alle cellule coltivate ma si verifica anche in vivo. In sintesi, gli acidi grassi liberi circolanti possono mediare la formazione di goccioline di lipidi nei monociti e potenzialmente essere usati come un biomarker per valutare il rischio di un individuo di sviluppare una malattia cardiovascolare aterosclerotica.

Acidi grassi da lipoproteine a densit&agrave; molto prodotti lipolisi indurre accumulo gocciolina lipidica nei monociti umani.

&#x5358;&#x7403;&#x306F;&#x3001;&#x98DF;&#x5F8C;&#x306B;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;1&#x3064;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x4F4E;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x30EA;&#x30DD;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;VLDL&#xFF09;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30C8;&#x30EA;&#x30B0;&#x30EA;&#x30BB;&#x30EA;&#x30C9;&#x306B;&#x5BCC;&#x3093;&#x3060;&#x30EA;&#x30DD;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3078;&#x306E;&#x66B4;&#x9732;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x3082;&#x306E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002; VLDL&#x306F;&#x3001;&#x904A;&#x96E2;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x3092;&#x653E;&#x51FA;&#x3057;&#x3001;&#x8840;&#x6DB2;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30A4;&#x30B9;&#x3067;&#x30EA;&#x30DD;&#x86CB;&#x767D;&#x30EA;&#x30D1;&#x30FC;&#x30BC;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x8A73;&#x7D30;&#x306B;&#x98DF;&#x5F8C;&#x5358;&#x7403;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x3001;&#x98DF;&#x5F8C;&#x306E;VLDL&#x304B;&#x3089;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x8102;&#x80AA;&#x306E;&#x88FD;&#x54C1;&#x306F;&#x4E00;&#x8CAB;&#x3057;&#x305F;antistokes&#x30E9;&#x30DE;&#x30F3;&#x5206;&#x5149;&#x6CD5;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x57F9;&#x990A;THP-1&#x5358;&#x7403;&#x3001;&#x5185;&#x8102;&#x8CEA;&#x3067;&#x6E80;&#x305F;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6DB2;&#x6EF4;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x30AA;&#x30EB;&#x30AC;&#x30CD;&#x30E9;&#x7279;&#x6709;&#x306E;&#x6C5A;&#x308C;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x96FB;&#x5B50;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x5C0F;&#x80DE;&#x4F53;&#x306E;&#x8102;&#x8CEA;&#x6EF4;&#x306E;&#x95A2;&#x9023;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30EA;&#x30DD;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30EA;&#x30D1;&#x30FC;&#x30BC;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x708E;&#x75C7;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x305B;BSA&#x3001;&#x62D8;&#x675F;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x306B;&#x8102;&#x8CEA;&#x6EF4;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x304C;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x98FD;&#x548C;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x306F;&#x3001;&#x30E2;&#x30CE; - &#x53CA;&#x3073;&#x591A;&#x4FA1;&#x4E0D;&#x98FD;&#x548C;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x5358;&#x7403;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x3088;&#x308A;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x8102;&#x8CEA;&#x6EF4;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x98DF;&#x5F8C;&#x306E;VLDL&#x8102;&#x80AA;&#x88FD;&#x54C1;&#x3067;&#x51E6;&#x7406;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5358;&#x7403;&#x306F;VLDL&#x8102;&#x80AA;&#x88FD;&#x54C1;&#x3092;&#x65AD;&#x98DF;&#x3067;&#x51E6;&#x7406;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5358;&#x7403;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x5F37;&#x70C8;&#x306A;&#x98FD;&#x548C;&#x30E9;&#x30DE;&#x30F3;&#x5206;&#x5149;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3068;&#x8102;&#x80AA;&#x6EF4;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x30D4;&#x30FC;&#x30AF;&#x98DF;&#x5F8C;&#x306E;&#x671F;&#x9593;&#x4E2D;&#x306B;&#x5358;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30D2;&#x30C8;&#x5358;&#x7403;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306F;&#x3001;&#x57F9;&#x990A;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x9650;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x610F;&#x5473;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x7D76;&#x98DF;&#x72B6;&#x614B;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x3082;&#x306E;&#x3068;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x3088;&#x308A;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x8102;&#x80AA;&#x6EF4;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x3067;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x8981;&#x7D04;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x904A;&#x96E2;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x3092;&#x5FAA;&#x74B0;&#x3059;&#x308B;&#x5358;&#x7403;&#x306E;&#x8102;&#x8CEA;&#x6EF4;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3001;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306B;&#x30A2;&#x30C6;&#x30ED;&#x30FC;&#x30E0;&#x6027;&#x52D5;&#x8108;&#x786C;&#x5316;&#x75C7;&#x3092;&#x767A;&#x75C7;&#x3059;&#x308B;&#x500B;&#x3005;&#x306E;&#x30EA;&#x30B9;&#x30AF;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x8D85;&#x4F4E;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x30EA;&#x30DD;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x8102;&#x80AA;&#x5206;&#x89E3;&#x88FD;&#x54C1;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x306F;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;&#x5358;&#x7403;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x8102;&#x80AA;&#x6EF4;&#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;

&#xC544;&#xC8FC; &#xC800;&#xBC00;&#xB3C4; &#xC9C0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (VLDL) &#xB4F1; &#xB9AC;&#xC138; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; &#xC9C0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; monocytes postprandially &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB418;&#xB294; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. VLDL &#xBB34;&#xB8CC; &#xC9C0;&#xBC29;&#xC0B0; &#xBC29;&#xCD9C; &#xD608;&#xC561; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xC774;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E8;&#xBC31; lipase&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBD84;&#xD574; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC2DD; &#xD6C4; monocyte &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB354; &#xC790;&#xC138;&#xD788; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD558; &#xACE0; &#xC2DD; &#xD6C4; VLDL&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0DD;&#xC131; &#xB41C; lipolysis &#xC81C;&#xD488; &#xC77C;&#xAD00; &#xB41C; antistokes &#xB77C;&#xB9CC; &#xBD84;&#xAD11;&#xD559;&#xC774; &#xD2B9;&#xC9D5; &#xAD50;&#xC591;&#xB41C; THP 1 monocytes &#xB0B4; &#xC9C0;&#xC9C8; &#xAC00;&#xB4DD; &#xBC29;&#xC6B8;&#xC758; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xC720;&#xBC1C; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xD2B8;&#xB294; &#xD2B9;&#xC815; &#xC5BC;&#xB8E9; &#xBC1D;&#xD600; &#xC804;&#xC790; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD655;&#xC778; endoplasmic &#xADF8;&#xBB3C;&#xACFC; &#xC9C0;&#xC9C8; &#xBC29;&#xC6B8;&#xC758; &#xD611;&#xD68C;. &#xC9C0; &#xB2E8;&#xBC31; lipase &#xCD9C;&#xC2DC; &#xC9C0;&#xBC29;&#xC0B0;&#xC774; &#xC138;&#xD3EC; &#xC5FC;&#xC99D; &#xAC10;&#xC18C; BSA&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBB36;&#xC5EC; &#xC788;&#xB358; &#xB54C; &#xC9C0;&#xC9C8; &#xBC29;&#xC6B8; &#xD615;&#xC131; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xD3EC;&#xD654; &#xC9C0;&#xBC29;&#xC0B0; &#xBAA8;&#xB178;-&#xACE0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xD3EC;&#xD654; &#xC9C0;&#xBC29;&#xC0B0;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; monocytes&#xC5D0; &#xB354; &#xB9CE;&#xC740; &#xC9C0;&#xC9C8; &#xBC29;&#xC6B8; &#xD615;&#xC131; &#xC720;&#xB3C4;. Monocytes monocytes &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB354; &#xAC15;&#xB82C;&#xD55C; &#xD3EC;&#xD654; &#xB77C;&#xB9CC; &#xBD84; &#xAD11; &#xC2E0;&#xD638; &#xC2DD; &#xD6C4; VLDL lipolysis &#xC81C;&#xD488;&#xC5D0; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xC9C0;&#xC9C8; &#xBC29;&#xC6B8;&#xC73C;&#xB85C; &#xCE58;&#xB8CC; &#xACF5; &#xBCF5; &#xC2DC; VLDL lipolysis &#xC81C;&#xD488; &#xCDE8;&#xAE09;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD53C;&#xD06C; &#xC2DD; &#xD6C4; &#xAE30;&#xAC04; &#xB3D9;&#xC548; &#xACE0;&#xB9BD; &#xB41C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; monocytes &#xAE08;&#xC2DD; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADF8;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xB354; &#xB9CE;&#xC740; &#xC9C0;&#xC9C8; &#xBC29;&#xC6B8; &#xD3EC;&#xD568; &#xC0C1;&#xC9D5; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xACBD;&#xC791;&#xB41C; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xAD6D;&#xD55C; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0; &#xBC1C;&#xC0DD;. &#xC694;&#xC57D; &#xD558;&#xC790;&#xBA74;, &#xC21C;&#xD658; &#xBB34;&#xB8CC; &#xC9C0;&#xBC29;&#xC0B0; monocytes&#xC5D0; &#xC9C0;&#xC9C8; &#xBC29;&#xC6B8; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xC911;&#xC7AC;&#xD560; &#xC218; &#xBC0F; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB3D9;&#xB9E5; &#xACBD; &#xD654;&#xC131; &#xC2EC;&#xD608; &#xAD00; &#xC9C8;&#xD658;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC758; &#xAC1C;&#xC778;&#xC758; &#xC704;&#xD5D8;&#xC744; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD558;&#xB294; biomarker&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB420;.

&#xC544;&#xC8FC; &#xC800;&#xBC00;&#xB3C4; &#xC9C0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; lipolysis &#xC81C;&#xD488;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C0;&#xBC29;&#xC0B0;&#xC740; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; monocytes&#xC5D0; &#xC9C0;&#xC9C8; &#xBC29;&#xC6B8; &#xCD95;&#xC801; &#xC720;&#xB3C4;.

Un mecanismo por el cual los monocitos se activan despu&#xE9;s de la ingesti&#xF3;n es por la exposici&#xF3;n a lipoprote&#xED;nas ricas en triglic&#xE9;ridos como las lipoprote&#xED;nas de muy baja densidad (VLDL). VLDL son hidrolizados por la lipoprote&#xED;na lipasa en la interfase de c&#xE9;lulas sangu&#xED;neas-endotelial, la liberaci&#xF3;n de &#xE1;cidos grasos libres. En este estudio, se analiz&#xF3; la activaci&#xF3;n de los monocitos postprandial con m&#xE1;s detalle, y se encontr&#xF3; que los productos generados a partir de la lip&#xF3;lisis de VLDL postprandial inducir la formaci&#xF3;n de l&#xED;pidos dentro de las gotitas llenas de cultivos de monocitos THP-1, caracterizados por espectroscop&#xED;a Raman coherente antistokes. Org&#xE1;nulos espec&#xED;ficos de las manchas se encontr&#xF3; una asociaci&#xF3;n de gotitas de l&#xED;pidos en el ret&#xED;culo endopl&#xE1;smico, confirmado por microscop&#xED;a electr&#xF3;nica. La formaci&#xF3;n de gotas de l&#xED;pidos se reduce cuando la lipoprote&#xED;na lipasa, los &#xE1;cidos grasos liberados fueron obligados por la BSA, que tambi&#xE9;n redujo la inflamaci&#xF3;n celular. Adem&#xE1;s, los &#xE1;cidos grasos saturados inducida m&#xE1;s la formaci&#xF3;n de gotitas de l&#xED;pidos en los monocitos en comparaci&#xF3;n con los &#xE1;cidos grasos mono y poli-insaturados. Los monocitos tratados con los productos de la lip&#xF3;lisis postprandial VLDL conten&#xED;a gotas de l&#xED;pidos saturados con m&#xE1;s intensidad las se&#xF1;ales espectrosc&#xF3;picas Raman que los monocitos tratados con el ayuno productos VLDL lip&#xF3;lisis. Adem&#xE1;s, hemos encontrado que los monocitos humanos aislados durante el per&#xED;odo postprandial pico contienen m&#xE1;s gotitas de l&#xED;pidos en comparaci&#xF3;n con los del estado de ayuno, lo que significa que su desarrollo no se limita a las c&#xE9;lulas cultivadas, sino tambi&#xE9;n se produce in vivo. En resumen, &#xE1;cidos grasos libres circulantes pueden mediar en la formaci&#xF3;n de gotitas de l&#xED;pidos en los monocitos y, potencialmente, ser utilizada como un marcador biol&#xF3;gico para evaluar el riesgo individual de desarrollar enfermedad cardiovascular ateroscler&#xF3;tica.

Los &#xE1;cidos grasos de muy baja densidad de lipoprote&#xED;na Productos lip&#xF3;lisis inducen la acumulaci&#xF3;n de l&#xED;pidos en la gota de los monocitos humanos

&#x5371;&#x7684;&#x6BDB;&#x5B54;&#x4E2D;&#x809D;&#x7AA6;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7B5B;&#x9009;&#x886C;&#x5E95;&#x548C;&#x8840;&#x4E0E;&#x809D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x788E;&#x7247;&#x3002;&#x5371;&#x5DF2;&#x8001;&#x5316;&#x548C;&#x8102;&#x86CB;&#x767D;&#x8C03;&#x63A7;&#x4E2D;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x4E0D;&#x8FC7;&#x89C4;&#x6A21;&#x8F83;&#x5C0F; &#xFF08;&lt; 200 nm&#xFF09; &#x5DF2;&#x901A;&#x8FC7;&#x5149;&#x955C;&#x7981;&#x6B62;&#x4EFB;&#x4F55;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x91C7;&#x7528;&#x7ED3;&#x6784;&#x5316;&#x7684;&#x7167;&#x660E;&#x5149;&#x955C;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5371;&#x5728;&#x79BB;&#x4F53;&#x5927;&#x9F20;&#x809D;&#x7AA6;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E;&#x975E;&#x5E38;&#x660E;&#x786E;&#x548C;&#x7A7A;&#x95F4;&#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x6B64;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x5371;&#x7684;&#x4E09;&#x7EF4;&#x7ED3;&#x6784; (&#x76F4;&#x5F84; 123 + /-24 nm&#xFF09; &#x7B5B;&#x677F;&#x9610;&#x660E;&#x548C;&#x663E;&#x793A;&#xFF0C;&#x5371;&#x53D1;&#x751F;&#x7A81;&#x7136;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x7A00;&#x758F;&#x7684;&#x5730;&#x533A; &#xFF08;+ /-54 165 &#x4E0E; 292 + /-103 nm nm P &#x975E;&#x5F00;&#x5730;&#x533A; &lt; 0.0001)&#x3002;&#x7B5B;&#x677F;&#x4E0D;&#x662F;&#x4F18;&#x5148;&#x4E0E;&#x9057;&#x4F20;&#x7269;&#x8D28;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684; F-&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x5E94;&#x529B;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x548C;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E00;&#x6C27;&#x5316;&#x6C2E;&#x5408;&#x9176; co-localized&#xFF0C;&#x4F46;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x819C;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x662F;&#x51CF;&#x6BD2;&#x975E;&#x7B4F;&#x5730;&#x533A;&#x51FA;&#x73B0;&#x3002;&#x672A;&#x770B;&#x5230;&#x8FF7;&#x5BAB;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x548C;&#x6240;&#x6709;&#x5371;&#x77ED;&#x5706;&#x67F1;&#x5B54;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x4E09;&#x7EF4;&#x7ED3;&#x6784;&#x5316;&#x7684;&#x7167;&#x660E;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x5DF2;&#x542F;&#x7528;&#x86CB;&#x767D;&#x514D;&#x75AB;&#x8367;&#x5149;&#x67D3;&#x8272;&#x548C;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7ECF;&#x65E0;&#x9650;&#x7684;&#x7684;&#x6743;&#x529B;&#x63ED;&#x793A;&#x6709;&#x5173;&#x5371;&#x548C;&#x7B5B;&#x677F;&#x65B0;&#x7ED3;&#x6784;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x4FE1;&#x606F;&#x3002;

&#x4E09;&#x7EF4;&#x7ED3;&#x6784;&#x7167;&#x660E;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x7684;&#x809D;&#x7AA6;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5371;&#x3002;

Fenestrations are pores in liver sinusoidal endothelial cells that filter substrates and debris between the blood and hepatocytes. Fenestrations have significant roles in aging and the regulation of lipoproteins. However their small size (<200 nm) has prohibited any functional analysis by light microscopy. We employed structured illumination light microscopy to observe fenestrations in isolated rat liver sinusoidal endothelial cells with great clarity and spatial resolution. With this method, the three-dimensional structure of fenestrations (diameter 123+/-24 nm) and sieve plates was elucidated and it was shown that fenestrations occur in areas of abrupt cytoplasmic thinning (165+/-54 nm vs. 292+/-103 nm in non-fenestrated regions, P<0.0001). Sieve plates were not preferentially co-localized with fluorescently labeled F-actin stress fibers and endothelial nitric oxide synthase but appeared to occur in primarily attenuated non-raft regions of the cell membrane. Labyrinthine structures were not seen and all fenestrations were short cylindrical pores. In conclusion, three-dimensional structured illumination microscopy has enabled the unlimited power of fluorescent immunostaining and co-localization to reveal new structural and functional information about fenestrations and sieve plates.

Three-dimensional structured illumination microscopy of liver sinusoidal endothelial cell fenestrations.

Fenestrations sont des pores dans les cellules endoth&#xE9;liales sinuso&#xEF;dales du foie que les supports de filtres et de d&#xE9;bris entre le sang et les h&#xE9;patocytes. Fenestrations ont des r&#xF4;les importants dans le vieillissement et la r&#xE9;glementation des lipoprot&#xE9;ines. Cependant, leur petite taille (&#x26;lt;200 nm) a interdit toute analyse fonctionnelle par microscopie optique. Nous avons utilis&#xE9; la microscopie optique d&#x26;#39;illumination structur&#xE9;e pour observer fenestrations dans isol&#xE9;es de foie de rat les cellules endoth&#xE9;liales sinuso&#xEF;dales avec une grande clart&#xE9; et une r&#xE9;solution spatiale. Avec cette m&#xE9;thode, la structure tridimensionnelle de fenestrations (diam&#xE8;tre 123 + / -24 nm) et des plaques de tamis a &#xE9;t&#xE9; &#xE9;lucid&#xE9; et il a &#xE9;t&#xE9; montr&#xE9; que fenestrations se produire dans les zones de brusque &#xE9;claircie cytoplasmique (165 + / -54 nm vs 292 + / -103 nm non-fen&#xEA;tr&#xE9;es r&#xE9;gions, P &#x26;lt;0,0001). Plateaux perfor&#xE9;s ne sont pas de pr&#xE9;f&#xE9;rence co-localis&#xE9;e avec marqu&#xE9;es par fluorescence des fibres de stress d&#x26;#39;actine et F-synthase endoth&#xE9;liale de l&#x26;#39;oxyde nitrique, mais semblait se produire principalement dans des att&#xE9;nu&#xE9;s non-raft r&#xE9;gions de la membrane cellulaire. Labyrinthiques structures n&#x26;#39;ont pas &#xE9;t&#xE9; vu et toutes les fenestrations &#xE9;taient courtes pores cylindriques. En conclusion, en trois dimensions microscopie illumination structur&#xE9;e a permis &#xE0; la puissance illimit&#xE9;e de immunomarquage fluorescent et la co-localisation de r&#xE9;v&#xE9;ler de nouvelles informations structurales et fonctionnelles sur les fenestrations et des plaques de tamis.

Tridimensionnelle Microscopie illumination structur&#xE9;e de sinuso&#xEF;dales h&#xE9;patiques fenestrations cellules endoth&#xE9;liales

Fenestrations sind Poren in Leber sinusf&ouml;rmige Endothelzellen, die Substrate und Tr&uuml;mmer zwischen Blut und Hepatozyten zu filtern. Fenestrations haben bedeutende Rollen in Altern und die Regulierung der Lipoproteine. Doch ihre geringe Gr&ouml;&szlig;e (&lt; 200 nm) hat jede funktionale Analyse durch Lichtmikroskopie verboten. Wir besch&auml;ftigten strukturierte Beleuchtung Lichtmikroskopie Fenestrations in isolierten Ratte Leber sinusf&ouml;rmige Endothelzellen mit gro&szlig;er Klarheit und r&auml;umliche Aufl&ouml;sung beobachten. Mit dieser Methode, die dreidimensionale Struktur des Fenestrations (Durchmesser 123 +/-24 nm) und Sieb Platten wurde aufgekl&auml;rt und es wurde gezeigt, dass Fenestrations in Bereichen des abrupten zytoplasmatischen Ausd&uuml;nnung auftreten (165 +/-54 nm vs. 292 +/-103 nm in nicht-gefenstertes Regionen, P &lt; 0,0001). Sieb-Platten wurden nicht bevorzugt co-localized mit Leuchtstoff beschriftetem F-Actin-Spannung-Fasern und endotheliale Stickstoffmonoxid-Synthase aber schien in haupts&auml;chlich abgeschw&auml;chte nicht-Raft-Regionen der Zellmembran auftreten. Labyrinthische Strukturen wurden nicht gesehen, und alle Fenestrations wurden kurze zylindrische Poren. Abschlie&szlig;end konnten dreidimensional strukturierte Beleuchtung, Mikroskopie unbegrenzte Kraft der fluoreszierenden Paraffinschnitten und Doppelhybridisierung, neue strukturelle und funktionelle Informationen &uuml;ber Fenestrations und Sieb Platten zu offenbaren.

Dreidimensional strukturierte Beleuchtung Mikroskopie der Leber sinusf&ouml;rmige endothelial Zellen Fenestrations.

Finestrature sono pori nel fegato cellule endoteliali sinusoidali che filtrano i substrati e detriti tra il sangue e gli epatociti. Finestrature hanno ruoli significativi nell&#39;invecchiamento e il regolamento delle lipoproteine. Tuttavia loro piccole dimensioni (&lt; 200 nm) ha proibito qualsiasi analisi funzionale di microscopia chiara. Abbiamo impiegato la microscopia in luce illuminazione strutturata per osservare finestrature nel ratto isolato le cellule endoteliali sinusoidali epatiche con grande chiarezza e risoluzione spaziale. Con questo metodo, la struttura tridimensionale delle finestrature (diametro 123 + 24 nm) e piastre setaccio &egrave; stata chiarita e si era dimostrato che finestrature si verificano nelle zone di assottigliamento brusco citoplasmatici (165 + 54 nm vs 292 + 103 nm in regioni non fenestrate, P &lt; 0.0001). Setaccio piastre non erano preferenzialmente co-localized con fibre di stress di F-actina fluorescente contrassegnati ed endoteliali di ossido nitrico sintasi, ma sembrava verificarsi nelle regioni non-zattera principalmente attenuati della membrana cellulare. Strutture labirintiche non erano visti e tutte le finestrature sono stati brevi pori cilindrici. In conclusione, microscopia tridimensionale strutturato illuminazione ha permesso il potere illimitato di immunostaining fluorescenti e collocazione rivelare nuove informazioni strutturali e funzionali su finestrature e piastre di setaccio.

Microscopia tridimensionale illuminazione strutturata delle finestrature delle cellule endoteliali sinusoidali del fegato.

&#x30D4;&#x30F3;&#x30DB;&#x30FC;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x8840;&#x6DB2;&#x3068;&#x809D;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30BF;&#x57FA;&#x677F;&#x3068;&#x7834;&#x7247;&#x3001;&#x809D;&#x985E;&#x6D1E;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7D30;&#x5B54;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D4;&#x30F3;&#x30DB;&#x30FC;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x9AD8;&#x9F62;&#x5316;&#x3084;&#x30EA;&#x30DD;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x5C0F;&#x3055;&#x3044;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#xFF08;&#x26;lt;200 nm&#xFF09;&#x306F;&#x5149;&#x5B66;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3067;&#x4EFB;&#x610F;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x89E3;&#x6790;&#x3092;&#x7981;&#x6B62;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x5049;&#x5927;&#x306A;&#x660E;&#x5FEB;&#x3055;&#x3068;&#x7A7A;&#x9593;&#x5206;&#x89E3;&#x80FD;&#x3067;&#x5206;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x809D;&#x985E;&#x6D1E;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x30D4;&#x30F3;&#x30DB;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3059;&#x308B;&#x69CB;&#x9020;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7167;&#x660E;&#x5149;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30D4;&#x30F3;&#x30DB;&#x30FC;&#x30EB;&#xFF08;&#x76F4;&#x5F84;123 + / -24 nm&#xFF09;&#x3068;&#x7BE9;&#x677F;&#x306E;&#x4E09;&#x6B21;&#x5143;&#x69CB;&#x9020;&#x304C;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x305F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x304C;&#x30D4;&#x30F3;&#x30DB;&#x30FC;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#xFF08;165 + / -54&#x30CA;&#x30CE;&#x30E1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EB;&#x5BFE;292 + /&#x9593;&#x4F10;&#x7A81;&#x7136;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x9818;&#x57DF;&#x3067;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x975E;&#x6709;&#x7A93;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;-103 nm&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;P &#x26;lt;0.0001&#xFF09;&#x3002;&#x3075;&#x308B;&#x3044;&#x677F;&#x306F;&#x512A;&#x5148;&#x7684;&#x306B;&#x5171;&#x5C40;&#x5728;&#x86CD;&#x5149;&#x6A19;&#x8B58;F-&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30D0;&#x30FC;&#x3068;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x578B;&#x4E00;&#x9178;&#x5316;&#x7A92;&#x7D20;&#x5408;&#x6210;&#x9175;&#x7D20;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x306E;&#x4E3B;&#x306B;&#x6E1B;&#x8870;&#x3057;&#x3001;&#x975E;&#x30E9;&#x30D5;&#x30C8;&#x9818;&#x57DF;&#x3067;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x898B;&#x3048;&#x305F;&#x3002;&#x8FF7;&#x8DEF;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x69CB;&#x9020;&#x304C;&#x898B;&#x3089;&#x308C;&#x3001;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x30D4;&#x30F3;&#x30DB;&#x30FC;&#x30EB;&#x306F;&#x77ED;&#x3044;&#x5186;&#x7B52;&#x72B6;&#x306E;&#x5B54;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D50;&#x8AD6;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x4E09;&#x6B21;&#x5143;&#x69CB;&#x9020;&#x5316;&#x7167;&#x660E;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x306F;&#x3001;&#x958B;&#x7A93;&#x3068;&#x3075;&#x308B;&#x3044;&#x677F;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x69CB;&#x9020;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x60C5;&#x5831;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x86CD;&#x5149;&#x514D;&#x75AB;&#x67D3;&#x8272;&#x3068;&#x5171;&#x5C40;&#x5728;&#x306E;&#x7121;&#x9650;&#x306E;&#x529B;&#x3092;&#x6709;&#x52B9;&#x306B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x809D;&#x985E;&#x6D1E;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30D4;&#x30F3;&#x30DB;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x4E09;&#x6B21;&#x5143;&#x69CB;&#x9020;&#x5316;&#x7167;&#x660E;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;

Fenestrations&#xB294; &#xD544;&#xD130; &#xAE30;&#xD310; &#xBC0F; &#xD608;&#xC561; &#xC0AC;&#xC774; hepatocytes &#xD30C;&#xD3B8; &#xAC04; &#xC815;&#xD604;&#xD30C; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xBAA8; &#xACF5;. Fenestrations &#xC5D0;&#xC774;&#xC9D5; &#xBC0F; &#xC9C0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC870;&#xC808;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC791;&#xC740; &#xD06C;&#xAE30; (&lt; 200 nm) &#xAC00;&#xBCBC;&#xC6B4; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xAE08;&#xC9C0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC88B;&#xC740; &#xC120;&#xBA85;&#xB3C4;&#xC640; &#xACF5;&#xAC04; &#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; &#xAC04; &#xC815;&#xD604;&#xD30C; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xACA9;&#xB9AC; &#xB41C; &#xC950;&#xC5D0; fenestrations&#xB97C; &#xAD00;&#xCC30; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801;&#xB41C; &#xC870;&#xBA85; &#xBE5B; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xACE0;&#xC6A9;. &#xC774; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; fenestrations&#xC758; 3 &#xCC28;&#xC6D0; &#xAD6C;&#xC870; (24 + &#xC9C1;&#xACBD; 123 nm) &#xCCB4; &#xC811;&#xC2DC;&#xB294; &#xD574;&#xBA85; &#xBC0F; fenestrations &#xAC11;&#xC791;&#xC2A4;&#xB7EC;&#xC6B4; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xC231;&#xC774;&#xC758; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4; (54 + 165 103 + 292 &#xB300; nm nm &#xBE44; fenestrated &#xC9C0;&#xC5ED;, P &lt; 0.0001). &#xCCB4; &#xD310; &#xC6B0;&#xC120;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBD99;&#xC77C; &#xB808;&#xC774;&#xBE14;&#xB41C; F &#xB9D0;&#xB77C; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xC12C;&#xC720; &#xBC0F; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC0B0;&#xD654; &#xC9C8;&#xC18C; synthase co-localized &#xD588;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9;&#xC758; &#xC8FC;&#xB85C; &#xAC10;&#xC1E0; &#xB5CF;&#xBAA9;&#xC774; &#xC544;&#xB2CC; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD560; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC778;&#xB2E4;. &#xBBF8;&#xB85C; &#xAD6C;&#xC870; &#xBCFC; &#xC218; &#xC788;&#xC5C8;&#xB2E4; &#xACE0; &#xBAA8;&#xB4E0; fenestrations &#xD588;&#xB2E4; &#xC9E7;&#xC740; &#xC6D0;&#xD1B5;&#xD615; &#xBAA8; &#xACF5;. &#xB05D;&#xC73C;&#xB85C;, 3 &#xCC28;&#xC6D0; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801;&#xB41C; &#xC870;&#xBA85; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; fenestrations &#xBC0F; &#xCCB4; &#xD310;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xAD6C;&#xC870;&#xC640; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC815;&#xBCF4; &#xD615;&#xAD11; immunostaining&#xC640; co-localization&#xC758; &#xBB34;&#xD55C; &#xD55C; &#xD798;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xAC8C; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xAC04; &#xC815;&#xD604;&#xD30C; fenestrations&#xC758; 3 &#xCC28;&#xC6D0; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801;&#xB41C; &#xC870;&#xBA85; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD;.

Fenestraciones son poros en las c&#xE9;lulas endoteliales del h&#xED;gado sinusoidales que los sustratos de filtro y los desechos entre la sangre y los hepatocitos. Fenestraciones tienen un papel importante en el envejecimiento y la regulaci&#xF3;n de las lipoprote&#xED;nas. Sin embargo, su peque&#xF1;o tama&#xF1;o (&#x26;lt;200 nm) se ha prohibido cualquier an&#xE1;lisis funcional por microscop&#xED;a de luz. Se emple&#xF3; el microscopio de iluminaci&#xF3;n de luz estructurada para observar fenestraciones en aisladas de h&#xED;gado de rata c&#xE9;lulas endoteliales sinusoidales con gran claridad y resoluci&#xF3;n espacial. Con este m&#xE9;todo, la estructura tridimensional de fenestraciones (di&#xE1;metro 123 + / -24 nm) y las placas de criba fue aclarada y se demostr&#xF3; que fenestraciones se producen en zonas de abrupta citopl&#xE1;smica adelgazamiento (165 + / -54 nm frente a 292 + / -103 nm de no fenestrados regiones, P &#x26;lt;0,0001). Placas-tamiz no eran preferentemente co-localizado con la etiqueta fluorescente fibras de estr&#xE9;s de actina F-sintetasa endotelial, y el &#xF3;xido n&#xED;trico, pero parece que se produzca en primer lugar atenuadas no balsa regiones de la membrana celular. Laber&#xED;nticas estructuras no fueron vistos y todas las fenestraciones eran cortos poros cil&#xED;ndricos. En conclusi&#xF3;n, la microscop&#xED;a tridimensional de iluminaci&#xF3;n estructurada ha permitido que el poder ilimitado de inmunomarcaci&#xF3;n fluorescente y la co-localizaci&#xF3;n para revelar nueva informaci&#xF3;n estructural y funcional de fenestraciones y placas-tamiz.

Tridimensional Microscop&#xED;a iluminaci&#xF3;n estructurada de h&#xED;gado fenestraciones las c&#xE9;lulas endoteliales sinusoidales

&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D; (GFP) &#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x529F;&#x80FD;&#x5F3A;&#x5927;&#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x6807;&#x8BB0;&#x5DE5;&#x5177;&#xFF0C;&#x5728;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x611F;&#x67D3;&#x671F;&#x95F4;&#x542F;&#x7528;&#x4E86;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5B66;&#x76D1;&#x6D4B;&#x548C;&#x8DDF;&#x8E2A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x4F18;&#x5316; Gag GFP &#x6784;&#x9020;&#x5DF2;&#x7528;&#x4E8E;&#x7814;&#x7A76;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6837;&#x9897;&#x7C92; &#xFF08;VLP&#xFF09; &#x7A0B;&#x5E8F;&#x96C6;&#x548C;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x5F88;&#x5BB9;&#x6613;&#x8F6C;&#x67D3;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C7B;&#x578B;&#x4E2D;&#x3002;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2; 1 &#x53D8;&#x79CD;&#x643A;&#x5E26;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x8303;&#x56F4;&#x5185;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x4E86;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E00;&#x76F4;&#x5728;&#x76D1;&#x6D4B;&#x75C5;&#x6BD2;&#x540E;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5B66;&#x7A81;&#x89E6;&#x5F62;&#x6210;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x8F6C;&#x8BA9;&#x7279;&#x522B;&#x6709;&#x7528;&#x3002;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2; Gag iGFP&#xFF0C;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6027;&#x7684;&#x514B;&#x9686;&#x5305;&#x542B;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x57FA;&#x56E0;&#x63D2;&#x5165;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x77E9;&#x9635; (MA) &#x548C;&#x8863;&#x58F3; (CA) &#x57DF;&#xFF0C;&#x662F;&#x538B;&#x5236;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x590D;&#x5236;&#x4E3B;&#x7BA1;&#x5206;&#x5B50;&#x514B;&#x9686;&#x751F;&#x6210;&#x8367;&#x5149;&#x4F20;&#x67D3;&#x6027;&#x9897;&#x7C92;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x4E00;&#x4E9B;&#x5229;&#x7528;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2; Gag iGFP &#x6D41;&#x5F0F;&#x91CF;&#x5316;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x75C5;&#x6BD2;&#x4F20;&#x64AD;&#x7684;&#x5728;&#x5927;&#x4F1A;&#x548C;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6210;&#x50CF;&#x4F20;&#x8F93;&#x671F;&#x95F4;&#x8DDF;&#x8E2A;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;

&#x8DDF;&#x8E2A;&#x548C;&#x5B9A;&#x91CF;&#x8367;&#x5149;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5728;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4F20;&#x9001;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;

The green fluorescent protein (GFP) is a powerful genetic marking tool that has enabled virologists to monitor and track viral proteins during HIV infection. Expression-optimized Gag-GFP constructs have been used to study virus-like particle (VLP) assembly and localization in cell types that are easily transfected. The development of HIV-1 variants carrying GFP within the context of the viral genome has facilitated the study of infection and has been particularly useful in monitoring the transfer of virus between cells following virological synapse formation. HIV Gag-iGFP, a viral clone that contains GFP inserted between the matrix (MA) and capsid (CA) domains of Gag, is the first replication competent molecular clone that generates fluorescent infectious particles. Here, we discuss some methods that exploit HIV Gag-iGFP to quantify cell-to-cell transmission of virus by flow cytometry and to track the proteins during assembly and transmission using live-cell imaging.

Tracking and quantitation of fluorescent HIV during cell-to-cell transmission.

La prot&#xE9;ine fluorescente verte (GFP) est un puissant outil de marquage g&#xE9;n&#xE9;tique qui a permis virologues pour surveiller et suivre les prot&#xE9;ines virales lors de l&#x26;#39;infection par le VIH. Expression optimis&#xE9;s Gag-GFP ont &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9;es pour &#xE9;tudier les virus-like particle (VLP) de montage et de la localisation dans des types cellulaires qui sont facilement transfect&#xE9;es. Le d&#xE9;veloppement de la lutte contre le VIH-1 des variantes portant GFP dans le contexte du g&#xE9;nome viral a facilit&#xE9; l&#x26;#39;&#xE9;tude de l&#x26;#39;infection et a &#xE9;t&#xE9; particuli&#xE8;rement utile dans le suivi du transfert du virus entre les cellules suivantes formation de la synapse virologique. VIH-gag iGFP, un clone viral qui contient la GFP ins&#xE9;r&#xE9; entre la matrice (MA) et de capside (CA) de domaines Gag, la premi&#xE8;re r&#xE9;plication est comp&#xE9;tente clone mol&#xE9;culaire qui g&#xE9;n&#xE8;re fluorescentes particules infectieuses. Ici, nous discutons de certaines m&#xE9;thodes qui exploitent le VIH Gag-iGFP de quantifier de cellule &#xE0; cellule de transmission du virus par cytom&#xE9;trie de flux et de suivre les prot&#xE9;ines lors de l&#x26;#39;assemblage et la transmission en utilisant imagerie des cellules vivantes.

Suivi et quantification de Fluorescent VIH cours de cellule &#xE0; cellule-Transmission

Das gr&uuml;ne fluoreszierende Protein (GFP) ist eine starke genetische Kennzeichnung-Tool, mit dem Virologen zur &Uuml;berwachung und Verfolgung virale Proteine w&auml;hrend der HIV-Infektion aktiviert hat. Optimiert f&uuml;r Ausdruck Gag-GFP-Konstrukte sind benutzt worden, Virus-Like Particle (VLP) Montage und Lokalisierung in Zelltypen, die leicht die transfected sind zu studieren. Die Entwicklung von HIV-1 Varianten mit GFP im Rahmen des viralen Genoms hat erleichtert das Studium der Infektion und wurde besonders f&uuml;r die &Uuml;bertragung des Virus zwischen Zellen, die nach Gr&uuml;ndung der virologischen Synapse &Uuml;berwachung. HIV Gag-iGFP, eine virale Klon, die GFP eingef&uuml;gt zwischen der Matrix (MA) und Kapsid (CA) Dom&auml;nen der Gag, enth&auml;lt ist die erste Replikation zust&auml;ndigen Molekulare Klon, der fluoreszierende infekti&ouml;se Partikel erzeugt. Hier diskutieren wir einige Methoden, die HIV Gag-iGFP, Zell-Zell-&Uuml;bertragung des Virus durch Durchflusszytometrie zu quantifizieren und die Proteine w&auml;hrend der Versammlung und Getriebe nach Leben-Zelle Darstellung verfolgen ausnutzen.

Tracking und quantitative Bestimmung der fluoreszierenden HIV w&auml;hrend der &Uuml;bertragung von Zelle zu Zelle.

La proteina fluorescente verde (GFP) &egrave; uno strumento potente marcatura genetica che ha permesso i virologi a monitor e traccia le proteine virali durante l&#39;infezione da HIV. Espressione-ottimizzato costrutti Gag-GFP sono stati utilizzati per studiare le particelle virus-simili (VLP) montaggio e localizzazione in tipi di celle transfected facilmente. Lo sviluppo delle varianti di HIV-1 che trasportano GFP all&#39;interno del contesto del genoma virale ha facilitato lo studio dell&#39;infezione ed &egrave; stato particolarmente utile nel monitoraggio il trasferimento del virus tra cellule in seguito formazione sinapsi virologiche. HIV Gag-iGFP, un clone virale contenente GFP inserito tra i domini di capside (CA) di Gag, e matrix (MA) &egrave; il primo replica competente molecular clone che genera particelle infettive fluorescenti. Qui, discuteremo alcuni metodi che sfruttano l&#39;HIV Gag-iGFP per quantificare la cella di trasmissione del virus tramite citometria a flusso e per tenere traccia delle proteine durante la trasmissione utilizzando live-cell imaging e assemblaggio.

Rilevamento e la quantificazione dell&#39;HIV fluorescenti durante la trasmissione di cella.

&#x7DD1;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;GFP&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x5B66;&#x8005;&#x306F;&#x3001;HIV&#x611F;&#x67D3;&#x6642;&#x306B;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x76E3;&#x8996;&#x3057;&#x3001;&#x8FFD;&#x8DE1;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AD;&#x30F3;&#x30B0;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30AE;&#x30E3;&#x30B0;-GFP&#x30B3;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C8;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x304C;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7A2E;&#x985E;&#x306B;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x69D8;&#x7C92;&#x5B50;&#xFF08;VLP&#xFF09;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30AD;&#x30B9;&#x30C8;&#x5185;&#x3067;GFP&#x3092;&#x904B;&#x3076;HIV-1&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306F;&#x3001;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3057;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x5B66;&#x7684;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5F62;&#x6210;&#x5F8C;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x8EE2;&#x9001;&#x306E;&#x76E3;&#x8996;&#x306B;&#x7279;&#x306B;&#x6709;&#x7528;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002; HIV GAG-iGFP&#x3001;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#xFF08;MA&#xFF09;&#x3068;Gag&#x306E;&#x30AB;&#x30D7;&#x30B7;&#x30C9;&#xFF08;CA&#xFF09;&#x306E;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x9593;&#x306B;&#x633F;&#x5165;&#x3055;&#x308C;&#x305F;GFP&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x86CD;&#x5149;&#x611F;&#x67D3;&#x6027;&#x7C92;&#x5B50;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x8907;&#x88FD;&#x80FD;&#x3092;&#x5206;&#x5B50;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;HIV GAG-iGFP&#x306F;&#x3001;&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30E1;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x306E;&#x4F1D;&#x9054;&#x3092;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x3057;&#x3001;&#x751F;&#x7D30;&#x80DE;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x3001;&#x4F1D;&#x9001;&#x4E2D;&#x306B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x8FFD;&#x8DE1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6D3B;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30BB;&#x30EB;&#x3078;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x9001;&#x4FE1;&#x6642;&#x306E;&#x8FFD;&#x8DE1;&#x3068;&#x86CD;&#x5149;HIV&#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;

&#xB179;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (GFP)&#xB294; HIV &#xAC10;&#xC5FC; &#xC2DC; virologists &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1; &#xBC0F; &#xCD94;&#xC801; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAC1C; &#xADF8;-GFP &#xAD6C;&#xBB38; &#xC2DD; &#xCD5C;&#xC801;&#xD654; &#xC27D;&#xAC8C; &#xD398; &#xC140; &#xD615;&#xC2DD;&#xC758; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xAC19;&#xC740; &#xC785;&#xC790; (VLP) &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC;&#xB97C; &#xACF5;&#xBD80; &#xD558; &#xACE0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Hiv-1 &#xBCC0;&#xC885; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xAC8C;&#xB188;&#xC758; &#xCEE8;&#xD14D;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; GFP&#xB97C; &#xC6B4;&#xBC18;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xAC10;&#xC5FC; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB97C; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558;&#xB294; &#xACE0; virological &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC140; &#xAC04;&#xC758; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC804;&#xC1A1;&#xC744; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1;&#xC5D0; &#xD2B9;&#xD788; &#xC720;&#xC6A9; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5D0;&#xC774;&#xC988; &#xAC1C; &#xADF8;-iGFP, GFP &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; (MA)&#xACFC; &#xAC1C; &#xADF8;&#xC758; capsid (CA) &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xC0AC;&#xC774; &#xC788;&#xB294; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xBCF5;&#xC81C;&#xB294; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xBCF5;&#xC81C; &#xC720;&#xB2A5;&#xD55C; &#xBD84;&#xC790; &#xD074;&#xB860;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD615;&#xAD11; &#xC804;&#xC5FC; &#xC131; &#xC785;&#xC790;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC545;&#xC6A9; HIV &#xAC1C; &#xADF8;-iGFP cytometry&#xB85C; &#xC140; &#xC804;&#xC1A1; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; &#xACC4;&#xB7C9; &#xD558; &#xACE0; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC; &#xBC0F; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC140; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC804;&#xC1A1; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xCD94;&#xC801; &#xD558;&#xB294; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xCD94;&#xC801; &#xBC0F; &#xC140; &#xC804;&#xC1A1; &#xC911; &#xD615;&#xAD11; HIV&#xC758; &#xC815;&#xB7C9;.

La prote&#xED;na verde fluorescente (GFP) es una poderosa herramienta de marcado gen&#xE9;tico que ha permitido a los vir&#xF3;logos para supervisar y realizar un seguimiento de las prote&#xED;nas virales durante la infecci&#xF3;n por el VIH. Optimizaci&#xF3;n de la expresi&#xF3;n-GFP Gag-construcciones se han utilizado para estudiar el virus-como part&#xED;cula (VLP) de la Asamblea y la localizaci&#xF3;n de los tipos de c&#xE9;lulas que son f&#xE1;cilmente transfectadas. El desarrollo de VIH-1 variantes que llevan GFP en el contexto del genoma viral ha facilitado el estudio de la infecci&#xF3;n y ha sido particularmente &#xFA;tiles para controlar la transferencia de virus entre las c&#xE9;lulas siguientes formaci&#xF3;n de sinapsis virol&#xF3;gicas. VIH Gag-iGFP, un clon viral que contiene las buenas pr&#xE1;cticas agrarias insertada entre la matriz (MA) y la c&#xE1;pside (CA) los dominios de la mordaza, es la primera replicaci&#xF3;n competente clon molecular que genera fluorescentes part&#xED;culas infecciosas. En este caso, hablamos de algunos de los m&#xE9;todos que se aprovechan de VIH Gag-iGFP para cuantificar la c&#xE9;lula a c&#xE9;lula de transmisi&#xF3;n del virus por citometr&#xED;a de flujo y para realizar un seguimiento de las prote&#xED;nas durante el montaje y la transmisi&#xF3;n que utiliza c&#xE9;lulas vivas im&#xE1;genes.

Seguimiento y cuantificaci&#xF3;n de VIH durante el fluorescente de la c&#xE9;lula a c&#xE9;lula de transmisi&#xF3;n

&#x62C9;&#x66FC;&#x6563;&#x5C04;&#x975E;&#x5F39;&#x6027;&#x6563;&#x5C04;&#x7684;&#x5316;&#x5B66;&#x952E;&#xFF0C;&#x5173;&#x706F;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#x53EF;&#x4EE5;&#x663E;&#x793A;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x3002;&#x5B83;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7528;&#x5728;&#x6210;&#x50CF;&#x6A21;&#x5F0F;&#x548C;&#x7EAF;&#x5149;&#x8C31;&#x6A21;&#x5F0F;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x5230;&#x76EE;&#x524D;&#x4E3A;&#x6B62;&#x5DF2;&#x8BC1;&#x660E;&#x62C9;&#x66FC;&#x5149;&#x8C31;&#x548C;&#x6210;&#x50CF;&#x6280;&#x672F;&#x5728;&#x751F;&#x7269;&#x533B;&#x5B66;&#x9886;&#x57DF;&#x4E2D;&#x7684;&#x8BB8;&#x591A;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#xFF0C;&#x75C5;&#x7406;&#x7533;&#x8BF7;&#x4F7F;&#x7528;&#x8FD9;&#x9879;&#x6280;&#x672F;&#x662F;&#x4ECD;&#x5904;&#x4E8E;&#x65E9;&#x671F;&#x9636;&#x6BB5;&#x3002;&#x5728;&#x672C;&#x767D;&#x76AE;&#x4E66;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x68C0;&#x8BA8;&#x4E00;&#x4E9B;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E00;&#x9886;&#x57DF;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x63CF;&#x8FF0;&#x6709;&#x5173;&#x7684;&#x6280;&#x672F;&#x3001; &#x5206;&#x5B50;&#x4F20;&#x611F;&#x4E2D;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x3001; &#x8868;&#x5F81;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x5229;&#x76CA;&#xFF0C;&#x6700;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x6700;&#x8FD1;&#x53D1;&#x5C55;&#x548C;&#x75BE;&#x75C5;&#x68C0;&#x6D4B;&#x901A;&#x8FC7;&#x62C9;&#x66FC;&#x6563;&#x5C04;&#x3002;

&#x62C9;&#x66FC;&#x6563;&#x5C04;&#x7684;&#x75C5;&#x7406;&#x3002;

Raman scattering is the inelastic scattering of light off chemical bonds, and can therefore show molecular specificity. It can be used both in pure spectroscopy mode, and in imaging mode. While many applications of Raman spectroscopy and imaging in the biomedical field have been so far demonstrated, the use of this technology for pathology applications is still in early stages. In this paper we review some of the most important recent developments in this field, including a description of relevant technologies, applications to molecular sensing, characterization of cells and tissues of interest, and disease detection via Raman scattering.

Raman scattering in pathology.

Diffusion Raman est la diffusion in&#xE9;lastique de la lumi&#xE8;re sur les liaisons chimiques, et peut donc montrer la sp&#xE9;cificit&#xE9; mol&#xE9;culaire. Il peut &#xEA;tre utilis&#xE9; &#xE0; la fois en mode spectroscopie pur, et en mode d&#x26;#39;imagerie. Alors que de nombreuses applications de la spectroscopie Raman et de l&#x26;#39;imagerie dans le domaine biom&#xE9;dical ont &#xE9;t&#xE9; jusqu&#x26;#39;ici d&#xE9;montr&#xE9;, l&#x26;#39;utilisation de cette technologie pour des applications de pathologie est encore aux premiers stades. Dans cet article nous passons en revue quelques-uns des d&#xE9;veloppements les plus importants des derni&#xE8;res ann&#xE9;es dans ce domaine, y compris une description des technologies pertinentes, les applications &#xE0; la d&#xE9;tection mol&#xE9;culaires, caract&#xE9;risation des cellules et des tissus d&#x26;#39;int&#xE9;r&#xEA;t, et la d&#xE9;tection des maladies par le biais de diffusion Raman.

Raman Scattering en pathologie

Raman Streuung ist die inelastische Streuung von Licht aus chemischen Verbindungen, und k&ouml;nnen daher molekularen Spezifit&auml;t zeigen. Es kann sowohl in reine Spektroskopie-Modus als auch in imaging Modus verwendet werden. W&auml;hrend viele Anwendungen von Raman-Spektroskopie und Imaging im biomedizinischen Bereich bisher nachgewiesen wurden, ist der Einsatz dieser Technologie f&uuml;r Pathologie-Anwendungen noch in fr&uuml;hen Stadien. In diesem Papier &uuml;berpr&uuml;fen wir einige der wichtigsten neueren Entwicklungen in diesem Bereich, einschlie&szlig;lich einer Beschreibung der relevanten Technologien, Anwendungen, um molekulare Sensorik, Charakterisierung von Zellen und Geweben von Interesse, und Krankheit Erkennung &uuml;ber Raman-Streuung.

Raman Streuung in der Pathologie.

Raman scattering &egrave; la dispersione anelastica della luce fuori legami chimici e quindi pu&ograve; mostrare specificit&agrave; molecolare. Pu&ograve; essere utilizzato sia in modalit&agrave; spettroscopia puro sia in modalit&agrave; di imaging. Mentre molte applicazioni della spettroscopia Raman e imaging in campo biomedico hanno dimostrate finora, l&#39;uso di questa tecnologia per applicazioni di patologia &egrave; ancora nelle fasi iniziali. In questo articolo passiamo in rassegna alcuni dei pi&ugrave; importanti sviluppi recenti in questo campo, compresa una descrizione delle relative tecnologie, applicazioni di telerilevamento molecolare, caratterizzazione delle cellule e dei tessuti di interesse, e l&#39;individuazione della malattia tramite Raman scattering.

Raman scattering in patologia.

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Dispersi&#xF3;n Raman es la dispersi&#xF3;n inel&#xE1;stica de la luz en los enlaces qu&#xED;micos, y por lo tanto puede mostrar la especificidad molecular. Se puede utilizar tanto en el modo de espectroscop&#xED;a puro, y en el modo de imagen. Mientras que muchas aplicaciones de la espectroscopia Raman y la imagen en el campo de la biomedicina se han demostrado hasta ahora, el uso de esta tecnolog&#xED;a para aplicaciones de patolog&#xED;a se encuentra a&#xFA;n en etapas tempranas. En este art&#xED;culo revisamos algunos de los desarrollos recientes m&#xE1;s importantes en este campo, incluyendo una descripci&#xF3;n de las tecnolog&#xED;as pertinentes, las aplicaciones a la detecci&#xF3;n molecular, caracterizaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas y tejidos de inter&#xE9;s, y la detecci&#xF3;n de la enfermedad a trav&#xE9;s de la dispersi&#xF3;n Raman.

Article	Year
Surface-enhanced Raman scattering from individual au nanoparticles and nanoparticle dimer substrates. Nano letters\| PubMed ID: 16089490	2005
Growth, differentiation, and biochemical signatures of rhesus monkey mesenchymal stem cells. Stem cells and development\| PubMed ID: 18211228	2008
Physico-chemical characterization of polylipid nanoparticles for gene delivery to the liver. Bioconjugate chemistry\| PubMed ID: 19860429	2009
Fatty acids from very low-density lipoprotein lipolysis products induce lipid droplet accumulation in human monocytes. Journal of immunology (Baltimore, Md. : 1950)\| PubMed ID: 20208007	2010
Three-dimensional structured illumination microscopy of liver sinusoidal endothelial cell fenestrations. Journal of structural biology\| PubMed ID: 20570732	2010
Tracking and quantitation of fluorescent HIV during cell-to-cell transmission. Methods (San Diego, Calif.)\| PubMed ID: 20627127	2011
Raman scattering in pathology. Analytical cellular pathology (Amsterdam)\| PubMed ID: 22155991	2011

Thomas R. Huser

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