detection-neu1-sialidase-activity-regulating-toll-like-receptor

Detection of  Neu1 Sialidase Activity in Regulating TOLL-like Receptor Activation

Mammalian Toll-like receptors (TLRs) are a family of receptors that recognize pathogen-associated molecular patterns. Not only are TLRs crucial sensors of ...

Queen's University - Kingston, Ontario

&#x8DE8;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x9525; (TS) &#x662F;&#x4E00;&#x79CD;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176; hydrolyzes alpha2&#xFF0C;3 &#x94FE;&#x63A5;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x5E76;&#x5C06;&#x5B83;&#x4EEC;&#x4F20;&#x8F93;&#x5230;&#x53D7;&#x4F53;&#x5206;&#x5B50;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x7EAF;&#x5316;&#x7684;&#x91CD;&#x7EC4; TS T.&#x7814;&#x7A76;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x76EE;&#x6807; TrkA &#x8868;&#x8FBE; PC12 &#x7EC6;&#x80DE; TrkA &#x53D7;&#x4F53;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x548C; colocalizes &#x4E0E; TrkA &#x5185;&#x5728;&#x5316;&#x548C;&#x78F7;&#x9178;&#x5316; (pTrkA)&#x3002;&#x69D0;&#x5C71;&#x51DD;&#x96C6;&#x7D20; II (&#x4EF2;&#x88C1;&#x6CD5; &#x300B;-II) &#x548C;&#x63A5;&#x9AA8;&#x9ED1;&#x8D28;&#x51DD;&#x96C6;&#x7D20; &#xFF08;SNA&#xFF09; &#x963B;&#x6B62; TS &#x5728;&#x968F;&#x540E;&#x7684; TS &#x5171;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x4E0E; pTrkA &#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x4E0E;&#x5242;&#x91CF;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; TrkA PC12 &#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51DD;&#x96C6;&#x7D20;&#x5355;&#x72EC;&#x6CBB;&#x7597;&#x4E0D;&#x8981;&#x53D1;&#x8868; pTrkA&#x3002;&#x50AC;&#x5316;&#x5904;&#x4E8E;&#x975E;&#x6D3B;&#x52A8;&#x72B6;&#x6001;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53; TSDeltaAsp98 Glu &#x4E5F;&#x5C06;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; TrkA &#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x80FD;&#x8BF1;&#x4F7F; pTrkA&#x3002;TrkA PC12 &#x7EC6;&#x80DE;&#x6CBB;&#x7597;&#x4E0E;&#x7EAF;&#x5316;&#x7684;&#x91CD;&#x7EC4; alpha2&#xFF0C;3-&#x795E;&#x7ECF;&#x6C28;&#x9178;&#x9176; (&#x80BA;&#x708E;&#x94FE;&#x7403;&#x83CC;) &#x5FEB;&#x9012; pTrkA&#x3002;&#x91CE;&#x751F;&#x578B; TS &#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53; TSDeltaAsp98 Glu &#x4FC3;&#x8FDB;&#x8F74;&#x7A81; TrkA &#x8868;&#x8FBE; PC12 &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5F71;&#x54CD; TrkA &#x4E0D;&#x8DB3; PC12nnr5 &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x5E76;&#x6CA1;&#x6709;&#x9075;&#x5B88;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5728; PC12nnr5 &#x7EC6;&#x80DE;&#x7A33;&#x5B9A; TrkA &#x8F6C;&#x67D3;&#x548C;&#x88AB;&#x5927;&#x5927;&#x963B;&#x6B62;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x6FC0;&#x9176; (K-252a) &#x548C;&#x5730;&#x56FE;/&#x7532;&#x4E59;&#x916E;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; (PD98059) &#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x4F1A;&#x91CD;&#x65B0;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x3002;&#x5728;&#x4E00;&#x8D77;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x610F;&#x89C1;&#x8868;&#x660E;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x7684;&#x553E;&#x6DB2; alpha2&#xFF0C;3 &#x94FE;&#x63A5;&#x8BE5;&#x6C34;&#x89E3; &beta;-&#x534A;&#x4E73;&#x7CD6;&#x6B8B;&#x7559;&#x7684; TrkA &#x53D7;&#x4F53; TrkA &#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x6D3B;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316; &#xFF08;&#x7A81;&#x8D77;&#xFF09; &#x72EC;&#x7ACB;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x4E2D;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x514B;&#x6C0F;&#x9525;&#x866B;&#x8DE8;-&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x548C;&#x76EE;&#x6807; TrkA &#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x6FC0;&#x9176;&#x53D7;&#x4F53;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x53D7;&#x4F53;&#x5185;&#x90E8;&#x5316;&#x548C;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;

Trypanosome trans-sialidase (TS) is a sialic acid-transferring enzyme that hydrolyzes alpha2,3-linked sialic acids and transfers them to acceptor molecules. Here we show that a highly purified recombinant TS derived from T. cruzi parasites targets TrkA receptors on TrkA-expressing PC12 cells and colocalizes with TrkA internalization and phosphorylation (pTrkA). Maackia amurensis lectin II (MAL-II) and Sambucus nigra lectin (SNA) block TS binding to TrkA-PC12 cells in a dose-dependent manner with subsequent inhibition of TS colocalization with pTrkA. Cells treated with lectins alone do not express pTrkA. The catalytically inactive mutant TSDeltaAsp98-Glu also binds to TrkA-expressing cells, but is unable to induce pTrkA. TrkA-PC12 cells treated with a purified recombinant alpha2,3-neuraminidase (Streptococcus pneumoniae) express pTrkA. Wild-type TS but not the mutant TSDeltaAsp98-Glu promotes neurite outgrowth in TrkA-expressing PC12 cells. In contrast, these effects are not observed in TrkA deficient PC12nnr5 cells but are reestablished in PC12nnr5 cells stably transfected with TrkA and are significantly blocked by inhibitors of tyrosine kinase (K-252a) and MAP/MEK protein kinase (PD98059). Together these observations suggest for the first time that hydrolysis of sialyl alpha2,3-linked beta-galactosyl residues of TrkA receptors plays an important role in TrkA receptor activation, sufficient to promote cell differentiation (neurite outgrowth) independent of nerve growth factor.

Trypanosome trans-sialidase targets TrkA tyrosine kinase receptor and induces receptor internalization and activation.

Trypanosome trans-sialidase (TS) est un acide sialique-transfert enzyme qui hydrolyse les alpha2 ,3-linked acides sialiques et les transf&#xE8;re &#xE0; des mol&#xE9;cules accepteurs. Ici, nous montrons qu&#x26;#39;un TS recombinant hautement purifi&#xE9; d&#xE9;riv&#xE9; de parasites T. cruzi cible les r&#xE9;cepteurs TrkA sur TrkA-exprimant les cellules PC12 et co-localise avec l&#x26;#39;internalisation TrkA et la phosphorylation (pTrkA). Bloc Maackia lectine amurensis II (LAM-II) et Sambucus nigra lectine (SCN) TS se lier &#xE0; TrkA-cellules PC12 de mani&#xE8;re dose-d&#xE9;pendante avec l&#x26;#39;inhibition subs&#xE9;quente de colocalisation TS avec pTrkA. Les cellules trait&#xE9;es avec des lectines ne suffisent pas &#xE0; exprimer pTrkA. Le mutant catalytiquement inactif TSDeltaAsp98-Glu se lie &#xE9;galement &#xE0; des cellules exprimant le r&#xE9;cepteur TrkA, mais est incapable d&#x26;#39;induire pTrkA. TrkA-cellules PC12 trait&#xE9;es avec un recombinant purifi&#xE9; alpha2 ,3-neuraminidase pTrkA (Streptococcus pneumoniae) express. Wild-type TS, mais pas le mutant TSDeltaAsp98-Glu favorise la croissance des neurites dans TrkA-exprimant les cellules PC12. En revanche, ces effets ne sont pas observ&#xE9;es dans TrkA d&#xE9;ficientes PC12nnr5 cellules, mais est r&#xE9;tabli dans PC12nnr5 cellules transfect&#xE9;es de fa&#xE7;on stable avec TrkA et sont significativement bloqu&#xE9;e par les inhibiteurs de tyrosine kinase (K-252a) et la prot&#xE9;ine kinase MAP / MEK (PD98059). Ensemble, ces observations sugg&#xE8;rent pour la premi&#xE8;re fois que l&#x26;#39;hydrolyse de la sialyl alpha2 ,3-linked b&#xEA;ta-galactosyl r&#xE9;sidus de r&#xE9;cepteurs TrkA joue un r&#xF4;le important dans l&#x26;#39;activation du r&#xE9;cepteur TrkA, suffisante pour favoriser la diff&#xE9;renciation des cellules (croissance des neurites) ind&#xE9;pendante du facteur de croissance nerveuse.

Trypanosomes Trans-sialidase Cibles TrkA r&#xE9;cepteur tyrosine kinase et induit l&#x26;#39;internalisation du r&#xE9;cepteur et l&#x26;#39;activation

Trypanosomen-Transsialidase Ziele TrkA-Tyrosinkinase-Rezeptor und induziert Rezeptor-Internalisierung und Aktivierung.

Trypanosome trans-sialidasi (TS) sono un enzima acido sialico-trasferimento che idrolizza alfa2, 3-linked sialico acidi e li trasferisce alle molecole di accettore. Qui vi mostriamo che un ricombinante altamente purificato TS derivato da T. cruzi parassiti obiettivi TrkA recettori sulle cellule che esprimono TrkA PC12 e colocalizza con TrkA interiorizzazione e fosforilazione (pTrkA). Maackia amurensis lectin II (MAL-II) e Sambucus nigra lectin (SNA) blocco TS vincolanti alle cellule PC12 TrkA in modo dose-dipendente con conseguente inibizione della presenza di TS con pTrkA. Le cellule trattate con solo le lectine non esprimono pTrkA. Il mutante cataliticamente inattivo TSDeltaAsp98-Glu inoltre si lega alle cellule che esprimono TrkA, ma &egrave; in grado di indurre pTrkA. TrkA-PC12 cellule trattate con un alfa2 ricombinante purificato, 3-neuraminidasi (Streptococcus pneumoniae) espresso pTrkA. Selvaggio-tipo TS, ma non il mutante TSDeltaAsp98-Glu promuove la crescita dei neuriti in cellule che esprimono TrkA PC12. Al contrario, questi effetti non sono osservati nelle cellule PC12nnr5 carente TrkA ma sono ristabiliti in PC12nnr5 cellule stabile transfected con TrkA e significativamente sono bloccate da inibitori della tirosina chinasi (K-252a) e la chinasi di proteina mappa/MEK (PD98059). Insieme queste osservazioni suggeriscono per la prima volta che idrolisi del sialil alfa2, legati a 3 beta-galattosil residui dei recettori TrkA gioca un ruolo importante nell&#39;attivazione del recettore TrkA, sufficiente per promuovere la differenziazione delle cellule (dei neuriti escrescenza) indipendente del fattore di crescita nervosa.

Trypanosome trans-sialidasi obiettivi recettore della chinasi della tirosina di TrkA e induce l&#39;attivazione e l&#39;internalizzazione del recettore.

&#x30C8;&#x30EA;&#x30D1;&#x30CE;&#x30BD;&#x30FC;&#x30DE;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;TS&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EB;&#x9178;&#x3092;&#x8EE2;&#x9001;&#x3059;&#x308B;&#x9175;&#x7D20;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1;2 ,3-&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x305F;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EB;&#x9178;&#x3068;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BB;&#x30D7;&#x30BF;&#x30FC;&#x5206;&#x5B50;&#x306B;&#x8EE2;&#x9001;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;T. cruzi&#x306E;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x304B;&#x3089;&#x6D3E;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x306B;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3057;&#x305F;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;TS&#x306F;TrkA&#x306E;&#x767A;&#x73FE;PC12&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x3042;&#x308B;TrkA&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x6A19;&#x7684;&#x3068;TrkA&#x306E;&#x5185;&#x5728;&#x5316;&#x3068;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#xFF08;pTrkA&#xFF09;&#x3068;&#x5171;&#x5C40;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; Maackia amurensis&#x30EC;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;II&#xFF08;MAL-II&#xFF09;&#x3068;&#x30CB;&#x30EF;&#x30C8;&#x30B3;&#x9ED2;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#xFF08;SNA&#xFF09;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;TS&#x306F;pTrkA&#x306E;TS&#x5C40;&#x5728;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x304C;&#x7528;&#x91CF;&#x4F9D;&#x5B58;&#x7684;&#x306B;&#x3042;&#x308B;TrkA-PC12&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x5358;&#x72EC;&#x3067;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3067;&#x51E6;&#x7406;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;pTrkA&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x3002;&#x89E6;&#x5A92;&#x7684;&#x306B;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x6027;&#x306A;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;TSDeltaAsp98-Glu&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;TrkA&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x304C;&#x3001;pTrkA&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002; TrkA&#x306E;-PC12&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1;2 ,3-&#x30CE;&#x30A4;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CB;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;&#x80BA;&#x708E;&#x7403;&#x83CC;&#xFF09;&#x30A8;&#x30AF;&#x30B9;&#x30D7;&#x30EC;&#x30B9;pTrkA&#x3067;&#x51E6;&#x7406;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;TS&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x5909;&#x7570;TSDeltaAsp98-Glu&#x3067;&#x306F;TrkA&#x306E;&#x767A;&#x73FE;PC12&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x795E;&#x7D4C;&#x7A81;&#x8D77;&#x4F38;&#x9577;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x306F;TrkA&#x306E;&#x6B20;&#x640D;PC12nnr5&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x304C;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x3066;&#x3042;&#x308B;TrkA&#x3092;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30C8;&#x3057;PC12nnr5&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;K-252A&#xFF09;&#x3068;MAP / MEK&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;PD98059&#xFF09;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x89B3;&#x200B;&#x200B;&#x5BDF;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#xFF08;&#x795E;&#x7D4C;&#x7A81;&#x8D77;&#x4F38;&#x9577;&#xFF09;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5341;&#x5206;&#x306A;&#x3001;&#x3042;&#x308B;TrkA&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EB;&#x9178;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1;2 ,3-&#x7D50;&#x5408;&#x578B;&#x3B2;-&#x30AC;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30B7;&#x30EB;&#x6B8B;&#x57FA;&#x306E;&#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;&#x304C;&#x3042;&#x308B;TrkA&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x521D;&#x3081;&#x3066;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x30C8;&#x30EA;&#x30D1;&#x30CE;&#x30BD;&#x30FC;&#x30DE;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;TrkA&#x306E;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3068;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x5185;&#x5728;&#x5316;&#x3068;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;

Trypanosome &#xD2B8;&#xB79C;&#xC2A4; sialidase (TS)&#xB294; alpha2 sialic &#xC0B0; 3&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; hydrolyzes&#xB294; &#xC218;&#xB77D;&#xC790; &#xBD84;&#xC790; &#xC804;&#xC1A1; sialic &#xC0B0; &#xC804;&#xC1A1; &#xD6A8;&#xC18C;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xACE0; &#xC21C;&#xB3C4; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; TS T. cruzi &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; &#xB300;&#xC0C1; TrkA &#xD45C;&#xD604; PC12 &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; TrkA &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB418;&#xBA70; TrkA &#xAD6D;&#xC81C;&#xD654; &#xBC0F; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; (pTrkA)&#xC640; colocalizes&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. Maackia &#xB098;&#xBB34; lectin II (MAL-II) &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; Sambucus nigra lectin (SNA) &#xCC28;&#xB2E8; TS TS colocalization&#xC640; Ptrka&#xC758; &#xD6C4;&#xC18D; &#xC800;&#xD574;&#xC640; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9; &#xC758;&#xC874; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC5D0;&#xC11C; TrkA PC12 &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;. Lectins &#xD63C;&#xC790; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD558;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; Ptrka&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Catalytically &#xBE44;&#xD65C;&#xC131; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; TSDeltaAsp98 Glu TrkA &#xD45C;&#xD604; &#xC140;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; Ptrka&#xC744; &#xC720;&#xBC1C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. TrkA PC12 &#xC138;&#xD3EC; &#xC815;&#xD654; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; alpha2 3 &#xC751;&#xC9D1; (&#xC5F0;&#xC1C4; &#xC0C1; &#xAD6C; &#xADE0; &#xADE0;) &#xC775;&#xC2A4;&#xD504;&#xB808;&#xC2A4; Ptrka&#xB85C; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; TS &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; TSDeltaAsp98 Glu TrkA &#xD45C;&#xD604; PC12 &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; neurite &#xD30C;&#xC0DD;&#xBB3C;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC18;&#xBA74;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD6A8;&#xACFC; TrkA &#xACB0;&#xD54D; PC12nnr5 &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xD558;&#xC9C0; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; PC12nnr5 &#xC140; &#xC548;&#xC815;&#xC801; Trka&#xC640; &#xD398; &#xD558; &#xACE0; &#xD06C;&#xAC8C; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; (252a K) &#xBC0F; &#xC9C0;&#xB3C4;/MEK &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; (PD98059)&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCC28;&#xB2E8;&#xC5D0; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xC124;&#xC815; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD568;&#xAED8; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAD00;&#xCE21; &#xC81C;&#xC548; &#xCC98;&#xC74C; 3 &#xC5F0;&#xACB0; sialyl alpha2 &#xADF8; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; TrkA &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xBCA0;&#xD0C0; galactosyl &#xC794;&#xB958;&#xBB3C; TrkA &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;, &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xD654; (neurite &#xD30C;&#xC0DD;&#xBB3C;) &#xC2E0;&#xACBD; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790;&#xC5D0; &#xAD00;&#xACC4; &#xC5C6;&#xC774; &#xD64D;&#xBCF4; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4;.

Trypanosome &#xD2B8;&#xB79C;&#xC2A4; sialidase TrkA &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB97C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xD558; &#xACE0; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xAD6D;&#xC81C;&#xD654; &#xBC0F; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4; &#xD55C;&#xB2E4;.

Tripanosoma trans-sialidasa (TS) es un &#xE1;cido si&#xE1;lico de transferencia de enzima que hidroliza alfa2 ,3-enlazadas &#xE1;cidos si&#xE1;licos y los transfiere a mol&#xE9;culas aceptoras. Aqu&#xED; nos muestran que un TS altamente purificada recombinante derivado de T. cruzi con los receptores TrkA de TrkA que expresan las c&#xE9;lulas PC12 y la co-localiza con la internalizaci&#xF3;n y la fosforilaci&#xF3;n de TrkA (pTrkA). Maackia amurensis lectina II (MAL-II) y la lectina Sambucus nigra (SNA) TS bloque de uni&#xF3;n a las c&#xE9;lulas PC12-TrkA de una manera dosis-dependiente con la consiguiente inhibici&#xF3;n de la colocalizaci&#xF3;n de TS con pTrkA. Las c&#xE9;lulas tratadas con lectinas por s&#xED; solos no expresan pTrkA. El mutante catal&#xED;ticamente inactiva TSDeltaAsp98-Glu tambi&#xE9;n se une a c&#xE9;lulas que expresan TrkA, pero es incapaz de inducir pTrkA. TrkA-PC12 c&#xE9;lulas tratadas con un alfa 2 recombinante purificada ,3-neuraminidasa pTrkA (Streptococcus pneumoniae) expreso. De tipo salvaje TS no pero el mutante TSDeltaAsp98-Glu promueve el crecimiento neur&#xED;tico en TrkA-expresi&#xF3;n de las c&#xE9;lulas PC12. Por el contrario, estos efectos no se observan en TrkA deficientes PC12nnr5 c&#xE9;lulas, pero se restableci&#xF3; en PC12nnr5 c&#xE9;lulas transfectadas establemente con TrkA y est&#xE1;n significativamente bloqueadas por los inhibidores de la tirosina cinasa (K-252a) y MAP / MEK prote&#xED;na quinasa (PD98059). En conjunto, estas observaciones sugieren por primera vez que la hidr&#xF3;lisis de sialil alfa2 ,3-enlazadas beta-galactosilo residuos de receptores TrkA juega un papel importante en la activaci&#xF3;n del receptor TrkA, suficiente para promover la diferenciaci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas (neuritas) independiente del factor de crecimiento nervioso.

Tripanosoma Trans-sialidasa objetivos TrkA tirosina quinasa del receptor e induce la internalizaci&#xF3;n del receptor y la activaci&#xF3;n

&#x53D7;&#x4F53;&#x7CD6;&#x57FA;&#x5316;&#x4E0E;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x6CA1;&#x6709;&#x9075;&#x5B88;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x5929;&#x7136;&#x914D;&#x4F53;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F4;&#x63A5;&#x8054;&#x7CFB;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x4E00;&#x4E2A;&#x819C;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x63A7;&#x5236;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x54EA;&#x4E9B;&#x76EE;&#x6807;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x5176;&#x53D7;&#x4F53;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x914D;&#x4F53;&#x548C;&#x53D7;&#x4F53; desialylates &#x548C;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x53D7;&#x4F53;&#x4E8C;&#x805A;&#x548C;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x611F;&#x5E94;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x553E;&#x6DB2;&#x7684;&#x94FE;&#x63A5;&#x963F;&#x5C14;&#x6CD5; 2&#xFF0C;3 &beta;-&#x534A;&#x4E73;&#x7CD6;&#x7CD6;&#x6B8B;&#x7559;&#x7269; TrkA &#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x6FC0;&#x9176;&#x53D7;&#x4F53;&#x901A;&#x8FC7;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x6C34;&#x89E3;&#x5E76;&#x8FC5;&#x901F;&#x6709;&#x9488;&#x5BF9;&#x6027;&#x7684;&#x3002;Trk &#x8868;&#x8FBE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x521D;&#x7EA7;&#x4E0E;&#x7279;&#x5B9A;&#x795E;&#x7ECF;&#x8425;&#x517B;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x523A;&#x6FC0;&#x540E;&#x7684;&#x76AE;&#x5C42;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x8868;&#x8FBE;&#x6709;&#x529B;&#x819C;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x795E;&#x7ECF;&#x6C28;&#x9178;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#xFF0C;&#x8FBE;&#x83F2;&#x3001; BCX1812 &#x548C; BCX1827&#xFF0C;&#x963B;&#x6B62;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x795E;&#x7ECF;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50; (NGF) TrkA PC12 &#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x8111;&#x6E90;&#x6027;&#x795E;&#x7ECF;&#x8425;&#x517B;&#x56E0;&#x5B50; (BDNF) &#x76AE;&#x5C42;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x795E;&#x7ECF;&#x6C28;&#x9178;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x3001; 2-deoxy-2,3-dehydro-N-acetylneuraminic &#x9178;&#x3001; &#x795E;&#x7ECF;&#x8282;&#x82F7;&#x8102;&#x7B49;&#x79BB;&#x5B50;&#x819C; Neu3 &#x548C; Neu2 sialidases &#x5177;&#x4F53;&#x6709;&#x6CA1;&#x6709;&#x5BF9;&#x795E;&#x7ECF;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684; pTrkA &#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;GM1 &#x795E;&#x7ECF;&#x8282;&#x82F7;&#x8102;&#x5177;&#x4F53;&#x970D;&#x4E71;&#x6BD2;&#x7D20;&#x4E9A;&#x57FA; B &#x9002;&#x7528;&#x4E8E; TrkA PC12 &#x7EC6;&#x80DE;&#x6709;&#x6CA1;&#x6709;&#x5BF9;&#x795E;&#x7ECF;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x8FBE;&#x83F2;&#x663E;&#x8457;&#x6291;&#x5236;&#x8F74;&#x7A81;&#x751F;&#x6280;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x795E;&#x7ECF;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x6CBB;&#x7597; TrkA PC12 &#x548C;&#x7A33;&#x5B9A;&#x8F6C;&#x67D3;&#x4E0E; TrkB &#x53D7;&#x4F53; (TrkB nnr5) &#x7EC6;&#x80DE;&#x6E90;&#x6027;&#x795E;&#x7ECF;&#x8425;&#x517B;&#x56E0;&#x5B50;&#x6CBB;&#x7597; PC12(nnr5)&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x901A;&#x8FC7;&#x5176;&#x5929;&#x7136;&#x914D;&#x4F53;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x65B0;&#x578B;&#x6A21;&#x5F0F;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x8C03;&#x8282;&#x548C;&#x5B9A;&#x4E49;&#x4E3A;&#x7EC6;&#x80DE; sialidases &#x7684;&#x65B0;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;

&#x5BF9;&#x8702;&#x7A9D;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x8425;&#x517B;&#x56E0;&#x5B50;&#x6FC0;&#x6D3B; Trk &#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x6FC0;&#x9176;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x4F9D;&#x8D56;&#x3002;

A direct link between receptor glycosylation and activation following natural ligand interaction has not been observed. Here, we discover a membrane sialidase-controlling mechanism that depends on ligand binding to its receptor to induce enzyme activity which targets and desialylates the receptor and, consequently, causes the induction of receptor dimerization and activation. We also identify a specific sialyl alpha-2,3-linked beta-galactosyl sugar residue of TrkA tyrosine kinase receptor, which is rapidly targeted and hydrolyzed by the sialidase. Trk-expressing cells and primary cortical neurons following stimulation with specific neurotrophic growth factors express a vigorous membrane sialidase activity. Neuraminidase inhibitors, Tamiflu, BCX1812, and BCX1827, block sialidase activity induced by nerve growth factor (NGF) in TrkA-PC12 cells and by brain-derived neurotrophic factor (BDNF) in primary cortical neurons. In contrast, the neuraminidase inhibitor, 2-deoxy-2,3-dehydro-N-acetylneuraminic acid, specific for plasma membrane ganglioside Neu3 and Neu2 sialidases has no inhibitory effect on NGF-induced pTrkA. The GM1 ganglioside specific cholera toxin subunit B applied to TrkA-PC12 cells has no inhibitory effect on NGF-induced sialidase activity. Neurite outgrowths induced by NGF-treated TrkA-PC12 and BDNF-treated PC12(nnr5) stably transfected with TrkB receptors (TrkB-nnr5) cells are significantly inhibited by Tamiflu. Our results establish a novel mode of regulation of receptor activation by its natural ligand and define a new function for cellular sialidases.

Dependence of neurotrophic factor activation of Trk tyrosine kinase receptors on cellular sialidase.

Un lien direct entre la glycosylation du r&#xE9;cepteur et l&#x26;#39;activation apr&#xE8;s une interaction ligand naturel n&#x26;#39;a pas &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9;e. Ici, on d&#xE9;couvre une membrane de commande du m&#xE9;canisme de la sialidase qui d&#xE9;pend de la liaison du ligand &#xE0; son r&#xE9;cepteur pour induire une activit&#xE9; enzymatique qui cible et le r&#xE9;cepteur desialylates et, par cons&#xE9;quent, provoque l&#x26;#39;induction de la dim&#xE9;risation du r&#xE9;cepteur et l&#x26;#39;activation. Nous avons &#xE9;galement identifier un particulier sialyl alpha-2 ,3-linked r&#xE9;sidu de sucre b&#xEA;ta-galactosyl du r&#xE9;cepteur tyrosine kinase TrkA, qui est rapidement cibl&#xE9; et hydrolys&#xE9; par la sialidase. Trk cellules exprimant et primaires neurones corticaux apr&#xE8;s stimulation avec certains facteurs de croissance neurotrophiques exprimer une activit&#xE9; vigoureuse membrane sialidase. Inhibiteurs de la neuraminidase, Tamiflu, BCX1812, et BCX1827, l&#x26;#39;activit&#xE9; sialidase bloc induite par le facteur de croissance nerveuse (NGF) dans les cellules PC12-TrkA et par le facteur neurotrophique d&#xE9;riv&#xE9; du cerveau (BDNF) dans les neurones corticaux primaires. En revanche, l&#x26;#39;inhibiteur de la neuraminidase, 2-d&#xE9;soxy-2 ,3-d&#xE9;hydro-N-ac&#xE9;tylneuraminique, sp&#xE9;cifique pour la membrane plasmique ganglioside Neu3 et Neu2 sialidases n&#x26;#39;a pas d&#x26;#39;effet inhibiteur sur le NGF induit pTrkA. Le ganglioside GM1 sp&#xE9;cifique toxine chol&#xE9;rique sous-unit&#xE9; B appliqu&#xE9; &#xE0; TrkA-cellules PC12 n&#x26;#39;a pas d&#x26;#39;effet inhibiteur sur l&#x26;#39;activit&#xE9; sialidase NGF induite. Excroissances neurites induite par le NGF-TrkA-trait&#xE9; PC12 et PC12 BDNF-trait&#xE9;e (nnr5) transfect&#xE9;es de fa&#xE7;on stable avec des r&#xE9;cepteurs TrkB (TrkB-nnr5) les cellules sont significativement inhib&#xE9;e par Tamiflu. Nos r&#xE9;sultats &#xE9;tablissent un nouveau mode de r&#xE9;gulation de l&#x26;#39;activation du r&#xE9;cepteur par son ligand naturel et de d&#xE9;finir une nouvelle fonction pour sialidases cellulaires.

D&#xE9;pendance &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;gard de l&#x26;#39;activation du facteur neurotrophique des r&#xE9;cepteurs Trk tyrosine kinase sur sialidase cellulaire

Eine direkte Verbindung zwischen Rezeptor Glycosylation und Aktivierung, die folgende nat&uuml;rliche Ligand Interaktion nicht beobachtet hat. Hier entdecken wir einen Membran Sialidase-Steuerung Mechanismus, der von Liganden binden an seinen Rezeptor an Enzymaktivit&auml;t induzieren welche Ziele abh&auml;ngt und Desialylates des Rezeptors und folglich verursacht die Induktion der Dimerisierung des Rezeptors und Aktivierung. Wir erkennen au&szlig;erdem spezifische Sialyl Alpha-2,3-chromosomale Beta-Galaktosyltransferase Zucker Reste 1q21-Tyrosin-Kinase-Rezeptor, die schnell ausgerichtet ist und durch die Sialidase hydrolysiert. TRK-Ausdruck Zellen und prim&auml;re kortikale Neuronen nach Stimulation mit bestimmten neurotrophe Wachstumsfaktoren Ausdr&uuml;cken eine kr&auml;ftige Membran Sialidase Aktivit&auml;t. Neuraminidase-Hemmer, Tamiflu, BCX1812 und BCX1827, blockieren Sialidase Aktivit&auml;t induziert durch Nerv Wachstumfaktor (NGF) in 1q21-PC12 Zellen und von Brain-derived Neurotrophic Factor (BDNF) in prim&auml;ren kortikalen Neuronen. Im Gegensatz dazu hat die Neuraminidasehemmer, 2-deoxy-2,3-dehydro-N-acetylneuraminic Acid, speziell f&uuml;r die Plasmamembran Ganglioside Neu3 und Neu2 Sialidases keine hemmende Wirkung auf NGF-induzierte pTrkA. Die GM1 Ganglioside spezifischen Cholera Toxin-Untereinheit B auf 1q21-PC12 Zellen angewendet hat keine hemmende Wirkung auf Sialidase NGF-induzierte Aktivit&auml;t. Neurit Ausw&uuml;chse hervorgerufen durch NGF-behandelten 1q21-PC12 und BDNF-behandelte PC12(nnr5) stabil transfected mit TrkB Rezeptoren (TrkB-nnr5) Zellen sind durch Tamiflu erheblich gehemmt. Unsere Ergebnisse stellen eine neuartige Mode Verordnung der Rezeptor-Aktivierung durch seine nat&uuml;rlichen Liganden und definieren eine neue Funktion zur zellul&auml;ren Sialidases.

Abh&auml;ngigkeit von zellul&auml;ren Sialidase Neurotrophic Faktor Aktivierung von Trk-Tyrosin-Kinase-Rezeptoren.

Un collegamento diretto tra recettore glicosilazione e attivazione seguente interazione ligando naturale non &egrave; stata osservata. Qui, scopriamo un meccanismo di controllo sialidasi membrana che dipende dal ligando quali obiettivi vincolanti al suo recettore per indurre l&#39;attivit&agrave; dell&#39;enzima e desialylates il recettore e, di conseguenza, causa l&#39;induzione di dimerizzazione del recettore e attivazione. Abbiamo anche identificare un residuo di zucchero beta legata all&#39;alfa-2,3-galattosil sialil specifico del recettore di TrkA tirosina chinasi, che &egrave; rapidamente mirato ed idrolizzato dalla sialidasi. Cellule che esprimono TRK e primari dei neuroni corticali dopo stimolazione con fattori di crescita neurotrofici specifici esprimono un&#39;attivit&agrave; sialidasi membrana vigorosa. Inibitori della neuraminidasi, Tamiflu, BCX1812 e BCX1827, bloccare attivit&agrave; sialidasi indotta dal nerve growth factor (NGF) in cellule PC12 TrkA e di brain-derived neurotrophic factor (BDNF) in neuroni corticali primari. Al contrario, l&#39;inibitore della neuraminidasi, acido 2-deoxy-2,3-dehydro-N-acetylneuraminic, specifico per la membrana del plasma dei gangliosidi Neu3 e sialidases Neu2 non ha alcun effetto inibitorio su pTrkA NGF-indotta. La subunit&agrave; tossina per colera specifico di ganglioside GM1 B applicata a cellule PC12 TrkA non ha alcun effetto inibitorio sull&#39;attivit&agrave; sialidasi NGF-indotta. Escrescenze dei neuriti indotte da PC12-TrkA NGF-trattati e BDNF-trattato PC12(nnr5) stabile transfected con TrkB cellule recettori (TrkB-nnr5) sono significativamente inibito da Tamiflu. I nostri risultati per stabilire una modalit&agrave; di regolazione dell&#39;attivazione del recettore romanzo suo ligando naturale e definiscono una nuova funzione per cellulare sialidases.

Dipendenza di attivazione fattore neurotrophic di recettori della chinasi della tirosina di Trk sul cellulare sialidasi.

&#x5929;&#x7136;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x5F8C;&#x306B;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x30B0;&#x30EA;&#x30B3;&#x30B7;&#x30EB;&#x5316;&#x3068;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x76F4;&#x63A5;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x306F;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x6A19;&#x7684;&#x3068;&#x3057;desialylates&#x9175;&#x7D20;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x305D;&#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3078;&#x306E;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x7D50;&#x5408;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3059;&#x308B;&#x819C;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x5236;&#x5FA1;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3001;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x4E8C;&#x91CF;&#x4F53;&#x5316;&#x3068;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x6025;&#x901F;&#x306B;&#x5BFE;&#x8C61;&#x3068;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;&#x3055;&#x308C;&#x3066;TrkA&#x306E;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30EB;&#x3B1;-2,3  - &#x7D50;&#x5408;&#x3B2;-&#x30AC;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30B7;&#x30EB;&#x7CD6;&#x6B8B;&#x57FA;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x523A;&#x6FC0;&#x5F8C;&#x306B;TRK-&#x767A;&#x73FE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x4E00;&#x6B21;&#x76AE;&#x8CEA;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x7A4D;&#x6975;&#x7684;&#x306A;&#x819C;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x30CE;&#x30A4;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CB;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x963B;&#x5BB3;&#x85AC;&#x3001;&#x30BF;&#x30DF;&#x30D5;&#x30EB;&#x3001;BCX1812&#x3001;&#x3068;BCX1827&#x3001;TrkA&#x306E;&#x3001;PC12&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x795E;&#x7D4C;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF08;NGF&#xFF09;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA;&#x76AE;&#x8CEA;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x8133;&#x7531;&#x6765;&#x795E;&#x7D4C;&#x6804;&#x990A;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF08;BDNF&#xFF09;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x306E;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x30AC;&#x30F3;&#x30B0;&#x30EA;&#x30AA;&#x30B7;&#x30C9;NEU3&#x3068;Neu2&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30CE;&#x30A4;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CB;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x3001;2  - &#x30C7;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;-2,3  - &#x30C7;&#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;-N-&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30CE;&#x30A4;&#x30E9;&#x30DF;&#x30F3;&#x9178;&#x306F;&#x3001;NGF-&#x8A98;&#x767A;pTrkA&#x306B;&#x306F;&#x6291;&#x5236;&#x52B9;&#x679C;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002; TrkA&#x306E;&#x3001;PC12&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x9069;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x308B;GM1&#x30AC;&#x30F3;&#x30B0;&#x30EA;&#x30AA;&#x30B7;&#x30C9;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30B3;&#x30EC;&#x30E9;&#x6BD2;&#x7D20;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;B&#x306F;&#x3001;NGF-&#x8A98;&#x767A;&#x6027;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x6291;&#x5236;&#x52B9;&#x679C;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002; NGF-TrkA&#x306E;&#x51E6;&#x7406;-PC12&#x3068;&#x5B89;&#x5B9A;TrkB&#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#xFF08;TrkB&#x306E;-nnr5&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;BDNF&#x51E6;&#x7406;PC12&#xFF08;nnr5&#xFF09;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x795E;&#x7D4C;&#x7A81;&#x8D77;outgrowths&#x304C;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x30BF;&#x30DF;&#x30D5;&#x30EB;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x963B;&#x5BB3;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5929;&#x7136;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30E2;&#x30FC;&#x30C9;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3057;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x95A2;&#x6570;&#x3092;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x643A;&#x5E2F;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x3067;Trk&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x6804;&#x990A;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;

&#xB2E4;&#xC74C; &#xC790;&#xC5F0; ligand &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xAD00;&#xCC30; &#xD558;&#xC9C0; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; glycosylation &#xC0AC;&#xC774; &#xC9C1;&#xC811; &#xC5F0;&#xACB0;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; ligand &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xD6A8;&#xC18C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xB294; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB294; &#xB300;&#xC0C1;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; sialidase &#xC81C;&#xC5B4; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xBC1C;&#xACAC; &#xBC0F; desialylates &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xACB0;&#xACFC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; dimerization &#xBC0F; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xBA74;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xAE09;&#xC18D; &#xD558; &#xAC8C; &#xD45C;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD558; &#xACE0;&#xB294; sialidase&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBD84;&#xD574; TrkA &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xD2B9;&#xC815; sialyl &#xBCA0;&#xD0C0; galactosyl &#xC54C;&#xD30C; 2, 3 &#xC5F0;&#xACB0; &#xC124;&#xD0D5; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Trk &#xD45C;&#xD604; &#xC140; &#xAE30;&#xBCF8; &#xB300;&#xB1CC; &#xD53C; &#xC9C8;&#xC758; &#xB274;&#xB7F0; &#xC790;&#xADF9; &#xD2B9;&#xC815; &#x79D1; &#xC131;&#xC7A5; &#xC694;&#xC778;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xD65C;&#xBC1C; &#xD55C; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; sialidase &#xD65C;&#xB3D9; &#xC775;&#xC2A4;&#xD504;&#xB808;&#xC2A4;. TrkA PC12 &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xB450;&#xB1CC; &#xD30C;&#xC0DD; &#xD55C; neurotrophic &#xC694;&#xC778; (BDNF) &#xAE30;&#xBCF8; &#xB300;&#xB1CC; &#xD53C; &#xC9C8;&#xC758; &#xB274;&#xB7F0;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC751;&#xC9D1; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;, &#xD0C0; &#xBBF8; &#xD50C; &#xB8E8;, BCX1812, &#xBC0F; BCX1827, &#xC2E0;&#xACBD; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; (NGF)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; sialidase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xCC28;&#xB2E8; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB300;&#xC870;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC751;&#xC9D1; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;, 2-deoxy-2,3-dehydro-N-acetylneuraminic &#xC0B0;, &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; ganglioside Neu3 &#xBC0F; Neu2 sialidases&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD2B9;&#xC815;&#xC740; NGF &#xC720;&#xB3C4; Ptrka&#xC5D0; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD6A8;&#xACFC;&#xAC00; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC18C;&#xB294; GM1 ganglioside &#xD2B9;&#xC815; &#xCF5C;&#xB808;&#xB77C; &#xB3C5; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; TrkA PC12 &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC801;&#xC6A9; B NGF &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; sialidase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD6A8;&#xACFC;&#xAC00; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Neurite outgrowths TrkA PC12 NGF &#xCC98;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C;&#xC640; BDNF &#xB300;&#xC6B0; PC12(nnr5) &#xC548;&#xC815;&#xC801; TrkB &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (TrkB nnr5) &#xC140;&#xACFC; &#xD398;&#xB294; &#xD0C0; &#xBBF8; &#xD50C; &#xB8E8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD06C;&#xAC8C; &#xC800;&#xD574; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xC790;&#xC5F0;&#xC758; &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC758; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xC158;&#xC758; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xBAA8;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC124;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; &#xD734;&#xB300; &#xC804;&#xD654; sialidases&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xD568;&#xC218; &#xC815;&#xC758;.

&#xD734;&#xB300; &#xC804;&#xD654; sialidase&#xC5D0; neurotrophic &#xC694;&#xC778; Trk &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC758; &#xC758;&#xC874; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Una relaci&#xF3;n directa entre la glicosilaci&#xF3;n del receptor y la activaci&#xF3;n despu&#xE9;s de la interacci&#xF3;n ligando natural no se ha observado. Aqu&#xED;, se descubre una membrana de control de sialidasa mecanismo que depende de la uni&#xF3;n del ligando a su receptor para inducir la actividad enzim&#xE1;tica que se dirige y desialylates el receptor y, en consecuencia, provoca la inducci&#xF3;n de la dimerizaci&#xF3;n del receptor y la activaci&#xF3;n. Tambi&#xE9;n identificar un espec&#xED;fico sialil alfa-2 ,3-beta-galactosilo vinculado residuo de az&#xFA;car de receptor TrkA tirosina quinasa, que es r&#xE1;pidamente dirigido y se hidroliza por la sialidasa. Trk-que expresan las c&#xE9;lulas y neuronas corticales primarias tras la estimulaci&#xF3;n con factores neurotr&#xF3;ficos de crecimiento expresar una actividad de la membrana sialidasa vigoroso. Inhibidores de la neuraminidasa, Tamiflu, BCX1812 y BCX1827, bloquear la actividad sialidasa inducida por el factor de crecimiento nervioso (NGF) en las c&#xE9;lulas PC12-TrkA y por el factor neurotr&#xF3;fico derivado del cerebro (BDNF) en la ense&#xF1;anza primaria neuronas corticales. En contraste, el inhibidor de la neuraminidasa, 2-desoxi-2 ,3-deshidro-&#xE1;cido N-acetilneuram&#xED;nico, espec&#xED;fico para la membrana plasm&#xE1;tica gangli&#xF3;sido Neu3 y sialidasas Neu2 no tiene ning&#xFA;n efecto inhibitorio sobre el NGF inducida pTrkA. El gangli&#xF3;sido GM1 espec&#xED;fica toxina del c&#xF3;lera subunidad B se aplica a TrkA-c&#xE9;lulas PC12 no tiene ning&#xFA;n efecto inhibidor sobre la actividad sialidasa inducida por NGF. Excrecencias neuritas inducida por NGF TrkA tratada-PC12 y PC12 tratadas con BDNF (nnr5) transfectadas establemente con los receptores TrkB (TrkB-nnr5) las c&#xE9;lulas se inhibi&#xF3; de Tamiflu. Nuestros resultados establecen un nuevo modo de regulaci&#xF3;n de la activaci&#xF3;n del receptor por su ligando natural y definir una nueva funci&#xF3;n para sialidasas celulares.

La dependencia de la activaci&#xF3;n del factor neurotr&#xF3;fico de los receptores Trk tirosina quinasa de sialidasa celular

&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176;&#x3001; &#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x6FC0;&#x9176; (TrkA) &#x53D7;&#x4F53;&#x800C;&#x4E0D;&#x662F;&#x795E;&#x7ECF;&#x8425;&#x517B;&#x56E0;&#x5B50;&#x53D7;&#x4F53; p75NTR &#x65B0;&#x578B;&#x914D;&#x4F53;&#x8DE8;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x9525; (TS)&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; TS &#x76EE;&#x6807; TrkB &#x53D7;&#x4F53; TrkB &#x8868;&#x8FBE;&#x55DC;&#x94EC;&#x7EC6;&#x80DE; PC12 &#x7EC6;&#x80DE;&#x548C; colocalizes &#x4E0E; TrkB &#x53D7;&#x4F53;&#x5185;&#x90E8;&#x5316;&#x548C;&#x78F7;&#x9178;&#x5316; (pTrkB)&#x3002;&#x91CE;&#x751F;&#x578B; TS &#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x50AC;&#x5316;&#x5904;&#x4E8E;&#x975E;&#x6D3B;&#x52A8;&#x72B6;&#x6001;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8; TSDeltaAsp98 Glu &#x8BF1;&#x5BFC; pTrkB &#x548C;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x5B58;&#x53CD;&#x5E94;&#x5BF9;&#x6C27;&#x5316;&#x5E94;&#x6FC0;&#x7684; TrkA &#x548C; TrkB &#x8868;&#x8FBE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E;&#x795E;&#x7ECF;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50; (NGF) &#x548C;&#x8111;&#x6E90;&#x6027;&#x795E;&#x7ECF;&#x8425;&#x517B;&#x56E0;&#x5B50; (BDNF) &#x53D1;&#x751F;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x81F4;&#x4EBA;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x540C;&#x6837;&#x5F71;&#x54CD;&#x5E76;&#x6CA1;&#x6709;&#x9075;&#x5B88;&#x5728;&#x957F;&#x91CE;&#x4E0D;&#x8DB3; PC12(nnr5) &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x4F46;&#x90FD;&#x5728; PC12(nnr5) &#x7EC6;&#x80DE;&#x7A33;&#x5B9A;&#x8F6C;&#x67D3; TrkA &#x6216; TrkB&#xFF0C;&#x91CD;&#x65B0;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x90E8;&#x5206;&#x963B;&#x6B62;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x6FC0;&#x9176; (K-252a)&#x3001; &#x4E1D;&#x88C2;&#x7D20;&#x6D3B;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;&#x4E1D;&#x88C2;&#x7D20;&#x6D3B;&#x5316;&#x6FC0;&#x9176; (PD98059) &#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x548C; LY294002&#xFF0C;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x78F7;&#x8102;&#x9170;&#x808C;&#x9187;-3 &#x6FC0;&#x9176; (&#x808C;&#x9187;) &#x88AB;&#x5B8C;&#x5168;&#x963B;&#x6B62;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x9884;&#x5904;&#x7406;&#x4E0E; TS &#x6216;&#x5176;&#x5929;&#x7136;&#x914D;&#x4F53;&#x7684; TrkA &#x548C; TrkB &#x8868;&#x8FBE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x514D;&#x53D7;&#x7531;&#x8840;&#x6E05;/&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x5265;&#x593A;&#x6216;&#x4ECE;&#x4F4E;&#x6C27;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x8F74;&#x7A81;&#x7275;&#x62C9;&#x5F15;&#x8D77;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x3002;NGF &#x548C; BDNF &#x5BF9;&#x6C27;&#x5316;&#x5E94;&#x6FC0;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x5B58;&#x5F71;&#x54CD;&#x90FD;&#x5927;&#x5927;&#x6291;&#x5236;&#x795E;&#x7ECF;&#x6C28;&#x9178;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#xFF0C;&#x8FBE;&#x83F2;&#x3002;&#x5728;&#x4E00;&#x8D77;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x610F;&#x89C1;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x9525; TS &#x6A21;&#x4EFF;&#x795E;&#x7ECF;&#x8425;&#x517B;&#x56E0;&#x5B50;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x5B58;&#x53CD;&#x5E94;&#x5BF9;&#x6C27;&#x5316;&#x5E94;&#x6FC0;&#x3001; &#x4F4E;&#x6C27;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x8F74;&#x7A81;&#x9000;&#x7F29;&#x548C;&#x8840;&#x6E05;/&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x88AB;&#x5265;&#x593A;&#x3002;

&#x514B;&#x6C0F;&#x9525;&#x866B;&#x8DE8;-&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x6C27;&#x5316;&#x5E94;&#x6FC0;&#x3001; &#x8840;&#x6E05;/&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x5265;&#x593A;&#x548C; Trk &#x8868;&#x8FBE; PC12 &#x7EC6;&#x80DE;&#x7F3A;&#x6C27;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x8F74;&#x7A81;&#x9000;&#x7F29;&#x5BF9;&#x795E;&#x7ECF;&#x7684;&#x4FDD;&#x62A4;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Trypanosome trans-sialidase (TS) is a sialic acid-transferring enzyme and a novel ligand of tyrosine kinase (TrkA) receptors but not of neurotrophin receptor p75NTR. Here, we show that TS targets TrkB receptors on TrkB-expressing pheochromocytoma PC12 cells and colocalizes with TrkB receptor internalization and phosphorylation (pTrkB). Wild-type TS but not the catalytically inactive mutant TSDeltaAsp98-Glu induces pTrkB and mediates cell survival responses against death caused by oxidative stress in TrkA- and TrkB-expressing cells like those seen with nerve growth factor (NGF) and brain-derived neurotrophic factor (BDNF). These same effects are not observed in Trk deficient PC12(nnr5) cells, but are re-established in PC12(nnr5) cells stably transfected with TrkA or TrkB, are partially blocked by inhibitors of tyrosine kinase (K-252a), mitogen-activated protein/mitogen-activated kinase (PD98059) and completely blocked by LY294002, an inhibitor of phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K). Both TrkA- and TrkB-expressing cells pretreated with TS or their natural ligands are protected against cell death caused by serum/glucose deprivation or from hypoxia-induced neurite retraction. The cell survival effects of NGF and BDNF against oxidative stress are significantly inhibited by the neuraminidase inhibitor, Tamiflu. Together, these observations suggest that trypanosome TS mimics neurotrophic factors in cell survival responses against oxidative stress, hypoxia-induced neurite retraction and serum/glucose deprivation.

Trypanosome trans-sialidase mediates neuroprotection against oxidative stress, serum/glucose deprivation, and hypoxia-induced neurite retraction in Trk-expressing PC12 cells.

Trypanosome trans-sialidase (TS) est un acide sialique enzyme de transfert de et d&#x26;#39;un nouveau ligand de tyrosine kinase (TrkA) r&#xE9;cepteurs, mais non de p75NTR r&#xE9;cepteur de neurotrophine. Ici, nous montrons que TS cible les r&#xE9;cepteurs TrkB sur TrkB-exprimant ph&#xE9;ochromocytome cellules PC12 et co-localise avec l&#x26;#39;internalisation du r&#xE9;cepteur TrkB et la phosphorylation (pTrkB). Wild-type TS, mais pas le mutant inactif catalytiquement TSDeltaAsp98-Glu induit pTrkB et les r&#xE9;ponses sert de m&#xE9;diateur de survie cellulaire contre la mort caus&#xE9;e par le stress oxydatif dans TrkA et TrkB cellules exprimant comme ceux observ&#xE9;s avec le facteur de croissance nerveuse (NGF) et le facteur neurotrophique d&#xE9;riv&#xE9; du cerveau (BDNF). Ces m&#xEA;mes effets ne sont pas observ&#xE9;es dans Trk d&#xE9;ficientes PC12 (nnr5) des cellules, mais sont r&#xE9;tablis dans PC12 (nnr5) des cellules transfect&#xE9;es de fa&#xE7;on stable avec TrkA ou TrkB, sont partiellement bloqu&#xE9;s par des inhibiteurs de tyrosine kinase (K-252a), les mitogen-activated prot&#xE9;ines / mitogen-activated kinase (PD98059) et compl&#xE8;tement bloqu&#xE9;e par LY294002, un inhibiteur de la phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K). Les deux TrkA et TrkB cellules exprimant pr&#xE9;trait&#xE9; avec TS ou de leurs ligands naturels sont prot&#xE9;g&#xE9;s contre la mort cellulaire provoqu&#xE9;e par le s&#xE9;rum / glucose privation ou de r&#xE9;traction des neurites induite par l&#x26;#39;hypoxie. Les effets de survie cellulaire du NGF et de BDNF contre le stress oxydatif sont significativement inhib&#xE9;e par l&#x26;#39;inhibiteur de la neuraminidase, Tamiflu. Ensemble, ces observations sugg&#xE8;rent que TS trypanosome imite facteurs neurotrophiques dans les r&#xE9;ponses de survie cellulaire contre le stress oxydatif, la r&#xE9;traction des neurites induite par l&#x26;#39;hypoxie et la privation de s&#xE9;rum / glucose.

Trypanosomes Trans-sialidase neuroprotection m&#xE9;diation contre le stress, oxydatif S&#xE9;rum / glucose privation, et r&#xE9;traction des neurites induite par l&#x26;#39;hypoxie dans Trk-exprimant les cellules PC12

Trypanosomatida Trans-Sialidase (TS) ist ein Enzym Sialins&auml;ure-&uuml;bertragen und eine neuartige Ligand von Tyrosin-Kinase (1q21)-Rezeptoren, aber nicht der Neurotrophin Rezeptor p75NTR. Hier zeigen wir, dass TS Ziele TrkB Rezeptoren auf TrkB auszudr&uuml;cken Ph&auml;ochromozytom PC12 Zellen / colocalizes mit TrkB Rezeptor Internalisierung und Phosphorylierung (pTrkB). Wild-Typ TS aber nicht die katalytisch inaktive Mutant TSDeltaAsp98-Glu pTrkB induziert und vermittelt Zelle &uuml;berleben Antworten gegen Tod durch oxidativen Stress in den Zellen 1q21 und TrkB auszudr&uuml;cken, wie jene mit Nerv Wachstumfaktor (NGF) und Brain-derived Neurotrophic Factor (BDNF) gesehen. Dieselben Effekte sind nicht in Trk mangelhaft PC12(nnr5) Zellen beobachtet, aber sind in PC12(nnr5)-Zellen, die transfected stabil mit 1q21 oder TrkB, wiederhergestellt sind teilweise blockiert durch Inhibitoren der Tyrosinkinase (K-252a), Mitogen-aktivierte Protein/Mitogen-aktivierte Kinase (PD98059) und von LY294002, einem Inhibitor der Phosphatidylinositol-3-Kinase (PI3K) vollst&auml;ndig blockiert. Beide 1q21 und TrkB Ausdruck Zellen vorbehandelt mit TS oder ihrer nat&uuml;rlichen Liganden sind gegen Zellentod verursacht durch Serum/Glukose Deprivation oder von Hypoxie-induzierten Neurit Retraktion gesch&uuml;tzt. Die Zelle &uuml;berleben Auswirkungen von NGF und BDNF gegen oxidativen Stress sind deutlich durch die Neuraminidasehemmer Tamiflu gehemmt. Zusammen, schlagen diese Beobachtungen, dass gei&szlig;eltragenden TS Neurotrophic Faktoren in Zelle &uuml;berleben Antworten gegen oxidativen Stress, Hypoxie-induzierten Neurit Retraktion und Serum/Glukose Entbehrung imitiert.

Trypanosomatida Trans-Sialidase vermittelt Neuroprotection gegen oxidativen Stress, Serum/Glukose Entbehrung und Hypoxie-induzierten Neurit Retraktion in Trk-Ausdr&uuml;cken PC12 Zellen.

Trypanosome trans-sialidasi (TS) sono un enzima acido sialico-trasferimento e un romanzo ligando di recettori di tirosina chinasi (TrkA) ma non della Neurotrofina ricettore p75NTR. Qui, ci mostra che TS obiettivi TrkB recettori TrkB-esprimendo feocromocitoma PC12 cells e colocalizza con l&#39;internalizzazione del recettore TrkB e fosforilazione (pTrkB). Selvaggio-tipo TS ma non i mutanti cataliticamente inattivo TSDeltaAsp98-Glu induce pTrkB e media risposte sopravvivenza cellulare contro la morte causata da stress ossidativo in cellule che esprimono TrkA e TrkB come quelli visti con nerve growth factor (NGF) e di brain-derived neurotrophic factor (BDNF). Questi stessi effetti non vengono osservati nelle cellule PC12(nnr5) carente Trk, ma sono ristabiliti nelle cellule PC12(nnr5) stabile transfected con TrkA o TrkB, sono parzialmente bloccati da inibitori della chinasi della tirosina (K-252a), mitogene-attivata chinasi di proteina/mitogene-attivato (PD98059) e completamente bloccati da LY294002, un inibitore del fosfatidilinositolo 3-chinasi (PI3K). Entrambe le cellule che esprimono TrkA e TrkB pretrattate con TS o loro ligandi naturali sono protetti contro la morte cellulare causata da deprivazione di siero/glucosio o da retrazione dei neuriti indotta da ipossia. Gli effetti di sopravvivenza delle cellule di NGF e BDNF contro lo stress ossidativo sono significativamente inibiti da inibitore della neuraminidasi, Tamiflu. Insieme, queste osservazioni suggeriscono che trypanosome TS imita fattori neurotrofici nelle risposte di sopravvivenza delle cellule contro lo stress ossidativo, retrazione dei neuriti indotta da ipossia e deprivazione di siero/glucosio.

Trypanosome trans-sialidasi media neuroprotezione contro lo stress ossidativo, deprivazione di siero/glucosio e retrazione di ipossia-indotto dei neuriti in cellule PC12 Trk-esprimere.

&#x30C8;&#x30EA;&#x30D1;&#x30CE;&#x30BD;&#x30FC;&#x30DE;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;TS&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30C8;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;p75NTR&#x306E;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EB;&#x9178;&#x3092;&#x8EE2;&#x9001;&#x3059;&#x308B;&#x9175;&#x7D20;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;TrkA&#x306E;&#xFF09;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x65B0;&#x898F;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;TS&#x306F;TrkB&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x8910;&#x8272;&#x7D30;&#x80DE;&#x816B;PC12&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;TrkB&#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x6A19;&#x7684;&#x3068;TrkB&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x5185;&#x5728;&#x5316;&#x3068;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#xFF08;pTrkB&#xFF09;&#x3068;&#x5171;&#x5C40;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;TS&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x89E6;&#x5A92;&#x7684;&#x306B;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x6027;&#x306A;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;TSDeltaAsp98-Glu&#x306F;&#x9178;&#x5316;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x6B7B;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;pTrkB&#x3068;&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x3042;&#x308B;TrkA&#x3068;TrkB&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x795E;&#x7D4C;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF08;NGF&#xFF09;&#x53CA;&#x3073;&#x8133;&#x7531;&#x6765;&#x795E;&#x7D4C;&#x6804;&#x990A;&#x56E0;&#x5B50;&#x3068;&#x898B;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#xFF08;BDNF&#xFF09;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x3068;&#x540C;&#x3058;&#x52B9;&#x679C;&#x304C;Trk&#x306E;&#x6B20;&#x4E4F;PC12&#xFF08;nnr5&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x304C;&#x3001;&#x5B89;&#x5B9A;&#x7684;&#x306B;&#x3042;&#x308B;TrkA&#x307E;&#x305F;&#x306F;TrkB&#x306E;&#x3001;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4E00;&#x90E8;&#x304C;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#xFF08;K-252A&#xFF09;&#x3001;&#x30DE;&#x30A4;&#x30C8;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;PC12&#xFF08;nnr5&#xFF09;&#x306B;&#x518D;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;/&#x30DE;&#x30A4;&#x30C8;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;PD98059&#xFF09;&#x3068;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;LY294002&#x3001;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30C1;&#x30B8;&#x30EB;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;3  - &#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;PI3K&#xFF09;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; TS&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x5929;&#x7136;&#x306E;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x3067;&#x524D;&#x51E6;&#x7406;&#x3057;&#x305F;&#x4E21;&#x65B9;&#x3042;&#x308B;TrkA&#x3068;TrkB&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x8840;&#x6E05;/&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x6B20;&#x4E4F;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x4F4E;&#x9178;&#x7D20;&#x8A98;&#x5C0E;&#x6027;&#x795E;&#x7D4C;&#x7A81;&#x8D77;&#x9000;&#x7E2E;&#x304B;&#x3089;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x4FDD;&#x8B77;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9178;&#x5316;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;NGF&#x3068;BDNF&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x751F;&#x5B58;&#x7387;&#x3078;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x304C;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x30CE;&#x30A4;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CB;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x963B;&#x5BB3;&#x85AC;&#x3001;&#x30BF;&#x30DF;&#x30D5;&#x30EB;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x963B;&#x5BB3;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x89B3;&#x200B;&#x200B;&#x5BDF;&#x306F;&#x3001;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D1;&#x30CE;&#x30BD;&#x30FC;&#x30DE;TS&#x306F;&#x3001;&#x9178;&#x5316;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x3001;&#x4F4E;&#x9178;&#x7D20;&#x8A98;&#x5C0E;&#x6027;&#x795E;&#x7D4C;&#x7A81;&#x8D77;&#x306E;&#x9000;&#x7E2E;&#x3068;&#x8840;&#x6E05;/&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x6B20;&#x4E4F;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x795E;&#x7D4C;&#x6804;&#x990A;&#x56E0;&#x5B50;&#x3092;&#x6A21;&#x5023;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

Trk&#x306E;&#x767A;&#x73FE;PC12&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x9178;&#x5316;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x3001;&#x8840;&#x6E05;/&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x6B20;&#x4E4F;&#x3057;&#x3001;&#x4F4E;&#x9178;&#x7D20;&#x8A98;&#x5C0E;&#x6027;&#x795E;&#x7D4C;&#x7A81;&#x8D77;&#x9000;&#x7E2E;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D1;&#x30CE;&#x30BD;&#x30FC;&#x30DE;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x795E;&#x7D4C;&#x4FDD;&#x8B77;

Trypanosome &#xD2B8;&#xB79C;&#xC2A4; sialidase (TS) sialic &#xC0B0; &#xC804;&#xC1A1; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC640; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; (TrkA) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xC544;&#xB2C8;&#xC9C0;&#xB9CC; neurotrophin &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; p75ntr&#xC758; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; TS TrkB TrkB &#xD45C;&#xD604; pheochromocytoma PC12 &#xC138;&#xD3EC; &#xBC0F; TrkB &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xAD6D;&#xC81C;&#xD654; &#xBC0F; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; (pTrkB)&#xC640; colocalizes &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB97C; &#xB300;&#xC0C1; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; TS&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0; catalytically &#xBE44;&#xD65C;&#xC131; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; TSDeltaAsp98 Glu pTrkB &#xC720;&#xB3C4; &#xD558; &#xACE0; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xC874; &#xC751;&#xB2F5; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; (NGF)&#xC640; &#xB450;&#xB1CC; &#xD30C;&#xC0DD; &#xD55C; neurotrophic &#xC694;&#xC778; (BDNF)&#xACFC; &#xBCF8; &#xADF8; &#xAC19;&#xC740; &#xC140; TrkA TrkB &#xD45C;&#xD604;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0B0;&#xD654; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC7AC;. &#xC774; &#xAC19;&#xC740; &#xD6A8;&#xACFC; Trk &#xACB0;&#xD54D; PC12(nnr5) &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294; &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xC548;&#xC815;&#xC801; TrkA &#xB610;&#xB294; TrkB, &#xD398; PC12(nnr5) &#xC140;&#xC5D0; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; (252a K), &#xBB3C;&#xC9C8; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;/&#xBB3C;&#xC9C8; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD0A4; (PD98059)&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCC28;&#xB2E8; &#xC788;&#xC73C;&#xBA70; LY294002, phosphatidylinositol 3-&#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; (PI3K)&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC644;&#xC804;&#xD788; &#xCC28;&#xB2E8;. TS &#xB610;&#xB294; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC790;&#xC5F0;&#xC801;&#xC778; ligands pretreated TrkA TrkB &#xD45C;&#xD604; &#xC140; &#xB450; hypoxia &#xC720;&#xBC1C; neurite &#xCCA0;&#xD68C; &#xB610;&#xB294; &#xD608; &#xCCAD;/&#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xBD80;&#xC871;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C; &#xC73C;&#xB85C;&#xBD80;&#xD130; &#xBCF4;&#xD638; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC0B0;&#xD654; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; NGF&#xC640; BDNF&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xC874; &#xD6A8;&#xACFC; &#xD06C;&#xAC8C; &#xC751;&#xC9D1; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;, &#xD0C0; &#xBBF8; &#xD50C; &#xB8E8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC5B5;&#xC81C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD568;&#xAED8;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAD00;&#xCC30; &#xADF8; trypanosome TS &#xBAA8;&#xBC29;&#xD55C; neurotrophic &#xC694;&#xC778; &#xC0B0;&#xD654; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;, hypoxia &#xC720;&#xBC1C; neurite &#xCCA0;&#xD68C;&#xC640; &#xD608; &#xCCAD;/&#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xBD80;&#xC871;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xC874; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Trypanosome &#xD2B8;&#xB79C;&#xC2A4; sialidase neuroprotection &#xC0B0;&#xD654; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;, &#xD608; &#xCCAD;/&#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xBD80;&#xC871;&#xACFC; Trk &#xD45C;&#xD604; PC12 &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; hypoxia &#xC720;&#xBC1C; neurite &#xCCA0;&#xD68C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC7AC;.

Tripanosoma trans-sialidasa (TS) es un &#xE1;cido si&#xE1;lico enzima de transferencia y un nuevo ligando de tirosina quinasa (TrkA) receptores pero no de p75 del receptor de neurotrofina. En este sentido, muestran que el TS apunta a los receptores TrkB en TrkB-que expresan las c&#xE9;lulas PC12 de feocromocitoma y co-localiza con la internalizaci&#xF3;n del receptor TrkB y fosforilaci&#xF3;n (pTrkB). Wild-tipo TS, pero no la mutante catal&#xED;ticamente inactiva TSDeltaAsp98-Glu induce pTrkB y las respuestas de media en la supervivencia celular contra la muerte causada por el estr&#xE9;s oxidativo en TrkA y TrkB-que expresan las c&#xE9;lulas, como las observadas con el factor de crecimiento nervioso (NGF) y el cerebro factor neurotr&#xF3;fico derivado del (BDNF). Estos mismos efectos no se observan en Trk deficiencia de PC12 (nnr5) las c&#xE9;lulas, pero se restableci&#xF3; en la PC12 (nnr5), las c&#xE9;lulas transfectadas establemente con TrkA y TrkB, est&#xE1;n parcialmente bloqueadas por los inhibidores de la tirosina cinasa (K-252a) y activadas por mit&#xF3;genos prote&#xED;na / quinasa activada por mit&#xF3;genos (PD98059) y totalmente bloqueada por el LY294002, un inhibidor de la fosfatidilinositol 3-quinasa (PI3K). Tanto TrkA y TrkB-que expresan las c&#xE9;lulas pretratadas con TS o sus ligandos naturales est&#xE1;n protegidos contra la muerte celular causada por el suero / glucosa en la privaci&#xF3;n o de retracci&#xF3;n de las neuritas inducida por hipoxia. Los efectos de supervivencia de c&#xE9;lulas de NGF y BDNF contra el estr&#xE9;s oxidante son significativamente inhibido por el inhibidor de la neuraminidasa, Tamiflu. En conjunto, estas observaciones sugieren que el ST tripanosoma imita los factores neurotr&#xF3;ficos en las respuestas de supervivencia de las c&#xE9;lulas contra el estr&#xE9;s oxidativo, la hipoxia inducida por la retracci&#xF3;n de las neuritas y la privaci&#xF3;n de suero / glucosa.

Tripanosoma Trans-sialidasa media la neuroprotecci&#xF3;n contra el estr&#xE9;s oxidativo, Suero / Privaci&#xF3;n de glucosa, y la hipoxia inducida por la retracci&#xF3;n de las neuritas en Trk-que expresan las c&#xE9;lulas PC12

(&#x5355;&#x53CD;) &#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269; Toll &#x6837;&#x53D7;&#x4F53;&#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8DEF;&#x597D;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5B9A;&#x4E49;&#x7684;&#x521D;&#x59CB;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x914D;&#x4F53;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x4ECD;&#x7136;&#x5F88;&#x5DEE;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x819C;&#x63A7;&#x5236;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x7531;&#x914D;&#x4F53;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x5355;&#x53CD;-2&#xFF0C;-3 &#x548C;-4 &#x5206;&#x949F;&#x5185;&#x6D3B;&#x4E3B;&#x9AA8;&#x9AD3; (BM) &#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x8BF1;&#x5BFC; Neu1 &#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E00;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x6838;&#x5FC3;&#x662F;&#xFF0C;Neu1 &#x5E76;&#x4E0D;&#x662F; Neu2-3 &#x548C; 4 &#x6784;&#x6210;&#x590D;&#x6742;&#x4E0E;&#x5355;&#x53CD;-2&#xFF0C;-3 &#x548C;-4 &#x5E7C;&#x7A1A;&#x7684;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x3002;&#x795E;&#x7ECF;&#x6C28;&#x9178;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242; BCX1827&#xFF0C;2-deoxy-2,3-dehydro-N-acetylneuraminic &#x9178; (DANA)&#x3001; &#x624B;&#x5E15;&#x548C;&#x5965;&#x53F8;&#x4ED6;&#x97E6;&#x7FA7;&#x9178;&#x76D0;&#x5177;&#x6709;&#x6709;&#x9650;&#x7684;&#x663E;&#x8457;&#x6291;&#x5236;&#x7684;&#x5185;&#x6BD2;&#x7D20;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x751F;&#x6D3B;&#x4F46;&#x8FBE;&#x83F2; &#xFF08;&#x78F7;&#x9178;&#x5965;&#x53F8;&#x4ED6;&#x97E6;) BMC 2 &#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5B8C;&#x5168;&#x5757;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x8FBE;&#x83F2;&#x6291;&#x5236;&#x4E0E; IC(50) &#x76F8;&#x6BD4;&#xFF0C;&#x5176;&#x6C34;&#x89E3;&#x4EE3;&#x8C22;&#x7269;&#x5965;&#x53F8;&#x4ED6;&#x97E6;&#x7FA7;&#x9178;&#x76D0;&#x7684; 1015 microM &#x7684; IC(50) 1.2 microM &#x7684;&#x6D3B; BMC 2 &#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x6BD2;&#x7D20;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;Anticarboxylesterase &#x5242;&#x6C2F;&#x5421;&#x683C;&#x96F7;&#x9884;&#x5904;&#x7406;&#x7684; BMC 2 &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E2D;&#x8FBE;&#x83F2;&#x5835;&#x585E;&#x7684;&#x5185;&#x6BD2;&#x7D20; Neu1 &#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x4E0D;&#x53D7;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x5185;&#x6BD2;&#x7D20; LPS &#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; TLR4 &#x8BF1;&#x5BFC; Neu1 &#x4E0E; NFkappaB &#x7684;&#x540E;&#x7EED;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x548C;&#x4E00;&#x6C27;&#x5316;&#x6C2E;&#x53CA;&#x708E;&#x75C7;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-6 &#x548C; TNFalpha &#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x5728;&#x5C0F;&#x5B66;&#x548C;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x682A;&#x751F;&#x4EA7;&#x3002;&#x4E2D;&#x5B66; Neu1 &#x865A; Hypomorphic &#x7EC4;&#x7EC7;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; A &#x5C0F;&#x9F20;&#x5DEE;&#x56DE;&#x5E94;&#x76F8;&#x6BD4; A &#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x6216; hypomorphic &#x7EC4;&#x7EC7;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4E0E;&#x6B63;&#x5E38; Neu1 &#x5C0F;&#x9F20;&#x5185;&#x6BD2;&#x7D20; pro &#x708E;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x524D;&#x6240;&#x672A;&#x6709;&#x7684;&#x75C5;&#x539F;&#x5206;&#x5B50;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5355;&#x53CD;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x673A;&#x5236;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x529F;&#x80FD;&#xFF0C;&#x5173;&#x952E;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x5BF9; Neu1 &#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x4E0E;&#x5355;&#x53CD;&#x914D;&#x4F53;&#x76F8;&#x5173;&#x6CBB;&#x7597;&#x6D3B;&#x4E3B;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x682A;&#x3002;

Neu1 &#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x5BF9;&#x75C5;&#x539F;&#x5206;&#x5B50;&#x8BF1;&#x5BFC; toll &#x6837;&#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x4F9D;&#x8D56;&#x3002;

The signaling pathways of mammalian Toll-like receptors (TLR) are well characterized, but the initial molecular mechanisms activated following ligand interactions with the receptors remain poorly defined. Here, we show a membrane controlling mechanism that is initiated by ligand binding to TLR-2, -3 and-4 to induce Neu1 sialidase activity within minutes in live primary bone marrow (BM) macrophage cells and macrophage and dendritic cell lines. Central to this process is that Neu1 and not Neu2,-3 and-4 forms a complex with TLR-2,-3 and-4 on the cell surface of naÃ¯ve macrophage cells. Neuraminidase inhibitors BCX1827, 2-deoxy-2,3-dehydro-N-acetylneuraminic acid (DANA), zanamivir and oseltamivir carboxylate have a limited significant inhibition of the LPS-induced sialidase activity in live BMC-2 macrophage cells but Tamiflu (oseltamivir phosphate) completely blocks this activity. Tamiflu inhibits LPS-induced sialidase activity in live BMC-2 cells with an IC(50) of 1.2 microM compared to an IC(50) of 1015 microM for its hydrolytic metabolite oseltamivir carboxylate. Tamiflu blockage of LPS-induced Neu1 sialidase activity is not affected in BMC-2 cells pretreated with anticarboxylesterase agent clopidogrel. Endotoxin LPS binding to TLR4 induces Neu1 with subsequent activation of NFkappaB and the production of nitric oxide and pro-inflammatory IL-6 and TNFalpha cytokines in primary and macrophage cell lines. Hypomorphic cathepsin A mice with a secondary Neu1 deficiency respond poorly to LPS-induced pro-inflammatory cytokines compared to the wild-type or hypomorphic cathepsin A with normal Neu1 mice. Our findings establish an unprecedented mechanism for pathogen molecule-induced TLR activation and cell function, which is critically dependent on Neu1 sialidase activity associated with TLR ligand treated live primary macrophage cells and macrophage and dendritic cell lines.

Dependence of pathogen molecule-induced toll-like receptor activation and cell function on Neu1 sialidase.

Les voies de signalisation de mammif&#xE8;res r&#xE9;cepteurs Toll-like (TLR) sont bien caract&#xE9;ris&#xE9;s, mais les m&#xE9;canismes mol&#xE9;culaires initiales activ&#xE9; interactions ligand suivantes avec les r&#xE9;cepteurs restent encore mal d&#xE9;finies. Ici, nous montrons un m&#xE9;canisme de contr&#xF4;le de membrane qui est initi&#xE9;e par la liaison du ligand au TLR-2, -3 et-4 pour induire l&#x26;#39;activit&#xE9; Neu1 sialidase en quelques minutes dans la moelle osseuse en direct primaire (BM) et les cellules macrophages et des macrophages lign&#xE9;es de cellules dendritiques. Au centre de ce processus est que les formes Neu1 et non Neu2, -3 et-4 un complexe avec TLR-2, -3 et-4 sur la surface cellulaire des cellules macrophages na&#xEF;fs. Inhibiteurs de la neuraminidase, les BCX1827 2-d&#xE9;soxy-2 ,3-d&#xE9;hydro-N-ac&#xE9;tylneuraminique (DANA), le zanamivir et l&#x26;#39;oseltamivir carboxylate ont une inhibition limit&#xE9;e significative de l&#x26;#39;activit&#xE9; sialidase induite par le LPS en direct BMC-2 des cellules macrophages, mais le Tamiflu (phosphate d&#x26;#39;oseltamivir ) bloque compl&#xE8;tement cette activit&#xE9;. Tamiflu inhibe l&#x26;#39;activit&#xE9; sialidase induite par le LPS de vivants BMC-2 des cellules avec un circuit int&#xE9;gr&#xE9; (50) de 1,2 pM rapport &#xE0; un circuit int&#xE9;gr&#xE9; (50) de 1015 pM pour son m&#xE9;tabolite oseltamivir hydrolytique carboxylate. Blocage de Tamiflu induite par le LPS activit&#xE9; sialidase Neu1 n&#x26;#39;est pas affect&#xE9;e dans BMC-2 cellules pr&#xE9;trait&#xE9;es avec le clopidogrel agent de anticarboxylesterase. LPS liaison d&#x26;#39;endotoxine de TLR4 induit Neu1 avec l&#x26;#39;activation subs&#xE9;quente de NFkappaB et la production d&#x26;#39;oxyde nitrique et pro-inflammatoires IL-6 et TNF cytokines dans des lign&#xE9;es cellulaires primaires et des macrophages. Cathepsine Hypomorphic A des souris ayant une d&#xE9;ficience secondaire Neu1 r&#xE9;pondent mal au LPS-induites cytokines pro-inflammatoires par rapport &#xE0; la cathepsine de type sauvage ou hypomorphic Un normales Neu1 souris. Nos r&#xE9;sultats &#xE9;tablissent un m&#xE9;canisme sans pr&#xE9;c&#xE9;dent pour l&#x26;#39;activation TLR pathog&#xE8;ne mol&#xE9;cule-induite et la fonction des cellules, ce qui est fortement tributaire de l&#x26;#39;activit&#xE9; Neu1 sialidase associ&#xE9;e avec le ligand TLR trait&#xE9;s en direct les cellules macrophages primaires et des macrophages et des lign&#xE9;es de cellules dendritiques.

D&#xE9;pendance &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;gard des agents pathog&#xE8;nes mol&#xE9;cule induite par l&#x26;#39;activation des r&#xE9;cepteurs Toll-like et la fonction cellulaire sur Neu1 sialidase

Die Signalwege der S&auml;ugetier-Toll-Like Rezeptoren (TLR) sind gut gekennzeichnet, aber die anf&auml;nglichen molekularen Mechanismen aktiviert folgende Ligand-Interaktionen mit den Rezeptoren schlecht bleiben definiert. Hier zeigen wir eine Membran, die Kontrolle der Mechanismus, der durch Ligand-Bindung an TLR-2,-3 initiiert wird und-4 Neu1 Sialidase Aktivit&auml;t innerhalb von Minuten im Leben prim&auml;re (BM) Makrophagen Knochenmarkzellen und Makrophagen und dendritischen Zelllinien zu veranlassen. Zentrales Element dieses Prozesses ist, dass Neu1 und nicht Neu2,-3 und-4 bildet einen Komplex mit TLR-2,-3 und-4 auf der Zelloberfl&auml;che naiver Makrophagen Zellen. Neuraminidase-Hemmer BCX1827, 2-deoxy-2,3-dehydro-N-acetylneuraminic S&auml;ure (DANA), Zanamivir und Oseltamivir carboxylat haben eine begrenzte signifikante Hemmung der die LPS-induzierte Sialidase-Aktivit&auml;t im BMC-2 Makrophagen Zellen aber Tamiflu (Oseltamivir-Phosphat) Leben komplett blockiert diese Aktivit&auml;t. Tamiflu hemmt Sialidase LPS-induzierte Aktivit&auml;t in lebenden Zellen, den BMC-2 mit einem IC (50) von 1,2 MicroM im Vergleich zu einem IC von 1015 MicroM f&uuml;r seine hydrolytische Metabolit Oseltamivir-carboxylat (50). Tamiflu Blockade des LPS-induzierte Neu1 Sialidase Aktivit&auml;t wird in den BMC-2 Zellen vorbehandelt mit Anticarboxylesterase Agent Clopidogrel nicht beeinflusst. Endotoxin LPS binden an TLR4 induziert Neu1 mit anschlie&szlig;ende Aktivierung von NFkappaB und die Produktion von Stickstoffmonoxid und Pro-inflammatorische Zytokine f&uuml;r IL-6 und TNFalpha in Prim&auml;r- und Makrophagen-Zelllinien. Hypomorphen Kathepsin A M&auml;use mit einem sekund&auml;ren Neu1 Mangel reagieren schlecht auf LPS-induzierte Pro-inflammatorische Zytokine im Vergleich zu den Wildtyp oder hypomorphen Kathepsin A mit normalen Neu1 M&auml;use. Unsere Erkenntnisse Einrichtung eines beispiellosen Mechanismus f&uuml;r Erreger induziert durch Molek&uuml;l TLR-Aktivierung und Zellfunktion, die kritisch abh&auml;ngig Neu1 Sialidase Aktivit&auml;t im Zusammenhang mit TLR-Liganden behandelt, live prim&auml;ren Makrophagen-Zellen und Makrophagen und dendritischen Zelllinien.

Abh&auml;ngigkeit Neu1 Sialidase Pathogen Molek&uuml;l-induzierte Toll-Like-Rezeptor-Aktivierung und Zelle-Funktion.

Le vie di segnalazione dei mammiferi recettori Toll-like (TLR) sono ben caratterizzate, ma i meccanismi molecolari iniziali attivata seguenti interazioni ligando con i recettori restano scarsamente definita. Qui, vi mostriamo una membrana che controlla il meccanismo che viene avviato tramite l&#39;associazione del ligando di TLR-2, -3 e-4 per indurre Neu1 sialidasi attivit&agrave; in pochi minuti nelle cellule macrofagi vivere midollare primario (BM) e di macrofagi e di linee di cellule dendritiche. Centrale di questo processo &egrave; che Neu1 e non Neu2,-3 e-4 forma un complesso con TLR-2,-3 e-4 sulla superficie delle cellule delle cellule macrofagi na&iuml;ve. Inibitori della neuraminidasi BCX1827, acido 2-deoxy-2,3-dehydro-N-acetylneuraminic (DANA), zanamivir e oseltamivir carbossilato hanno una limitata inibizione significativa dell&#39;attivit&agrave; sialidasi LPS-indotta in BMC-2 macrofago cellule vive ma Tamiflu (oseltamivir fosfato) completamente blocchi questa attivit&agrave;. Tamiflu inibisce l&#39;attivit&agrave; della sialidasi LPS-indotta in cellule vive di BMC-2 con un IC(50) di 1.2 microM rispetto a un IC(50) di 1015 microM per suo metabolita idrolitica oseltamivir carbossilato. Tamiflu blocco di Neu1 indotta da LPS sialidasi attivit&agrave; non &egrave; influenzata in BMC-2 cellule pretrattate con clopidogrel agente anticarboxylesterase. Endotossina LPS binding a TLR4 induce Neu1 con conseguente attivazione di NFkappaB e la produzione di ossido nitrico e citochine pro-infiammatorie IL-6 e TNFalpha in linee cellulari primarie e dei macrofagi. Topi catepsina A Hypomorphic con un deficit secondario di Neu1 rispondono poco a LPS-indotta di citochine pro-infiammatorie rispetto alla catepsina wild-type o hypomorphic A con Neu1 topi normali. I nostri risultati stabilire un meccanismo senza precedenti per l&#39;attivazione di TLR molecola indotta dal patogeno e funzione delle cellule, che dipende criticamente Neu1 sialidasi attivit&agrave; associata ligando TLR trattati diretta primaria macrofago cellule e macrofagi e linee di cellule dendritiche.

Dipendenza della funzione di attivazione e cellulare indotta da molecola recettore toll-like patogeno Neu1 sialidasi.

&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;Toll&#x69D8;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#xFF08;TLR&#xFF09;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306F;&#x5341;&#x5206;&#x306B;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3068;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x5F8C;&#x306B;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3055;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x307E;&#x307E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x306E;&#x4E3B;&#x9AA8;&#x9AC4;&#xFF08;BM&#xFF09;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x7D30;&#x80DE;&#x3084;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x3084;&#x6A39;&#x72B6;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x3067;&#x306F;&#x6570;&#x5206;&#x4EE5;&#x5185;&#x306B;Neu1&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;TLR-2&#x3001;-3&#x3001;A-4&#x3078;&#x306E;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x958B;&#x59CB;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x819C;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x3068;&#x306A;&#x308B;&#x306E;&#x306F;&#x305D;&#x306E;Neu1&#x306A;&#x304F;Neu2&#x3001;-3&#x3001;A-4&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x30CA;&#x30A4;&#x30FC;&#x30D6;&#x306A;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x306E;TLR-2&#x3001;-3&#x3068;-4&#x8907;&#x96D1;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30CE;&#x30A4;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CB;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;BCX1827&#x3001;2  - &#x30C7;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;-2,3  - &#x30C7;&#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;-N-&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30CE;&#x30A4;&#x30E9;&#x30DF;&#x30F3;&#x9178;&#xFF08;DANA&#xFF09;&#x3001;&#x30B6;&#x30CA;&#x30DF;&#x30D3;&#x30EB;&#x3068;&#x30AA;&#x30BB;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30D3;&#x30EB;&#x30AB;&#x30EB;&#x30DC;&#x30F3;&#x9178;&#x5869;&#x306F;&#x3001;&#x9650;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;BMC-2&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;LPS&#x8A98;&#x5C0E;&#x6027;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x304C;&#x30BF;&#x30DF;&#x30D5;&#x30EB;&#xFF08;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x30AA;&#x30BB;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30D3;&#x30EB;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#xFF09;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x3053;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3092;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30BF;&#x30DF;&#x30D5;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x30AB;&#x30EB;&#x30DC;&#x30F3;&#x9178;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x7269;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x30AA;&#x30BB;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30D3;&#x30EB;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;1015&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#x306E;IC&#xFF08;50&#xFF09;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;1.2&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#x306E;IC&#xFF08;50&#xFF09;&#x3068;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;BMC-2&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;LPS&#x8A98;&#x5C0E;&#x6027;&#x306E;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x3002; LPS&#x8A98;&#x767A;Neu1&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x30BF;&#x30DF;&#x30D5;&#x30EB;&#x9589;&#x585E;&#x306F;anticarboxylesterase&#x30A8;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x30C8;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D4;&#x30C9;&#x30B0;&#x30EC;&#x30EB;&#x3067;&#x524D;&#x51E6;&#x7406;&#x3057;&#x305F;BMC-2&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002; TLR4&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x6BD2;&#x7D20;LPS&#x306F;&#x3001;&#x5F8C;&#x7D9A;&#x306E;&#x5E30;&#x7740;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3001;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x4E00;&#x9178;&#x5316;&#x7A92;&#x7D20;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x708E;&#x75C7;&#x8A98;&#x767A;&#x6027;IL-6&#x304A;&#x3088;&#x3073;TNF&#x3B1;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x7523;&#x751F;&#x3068;Neu1&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3002; Hypomorphic&#x30AB;&#x30C6;&#x30D7;&#x30B7;&#x30F3;&#x4E8C;Neu1&#x6B20;&#x4E4F;&#x3057;&#x305F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;Neu1&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3068;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x307E;&#x305F;&#x306F;hypomorphic&#x30AB;&#x30C6;&#x30D7;&#x30B7;&#x30F3;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;LPS&#x8A98;&#x5C0E;&#x6027;&#x708E;&#x75C7;&#x6027;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;TLR&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x6271;&#x308F;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x4E3B;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x7D30;&#x80DE;&#x3084;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x3084;&#x6A39;&#x72B6;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;Neu1&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x306B;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x7684;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x306E;&#x5206;&#x200B;&#x200B;&#x5B50;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;TLR&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3001;&#x524D;&#x4F8B;&#x306E;&#x306A;&#x3044;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Neu1&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x3067;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x306E;&#x5206;&#x200B;&#x200B;&#x5B50;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;Toll&#x69D8;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;

&#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD1B5;&#xD589;&#xC138; &#xAC19;&#xC774; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; (TLR)&#xC758; &#xC2E0;&#xD638; &#xACBD;&#xB85C; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC774; &#xC798; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB2E4;&#xC74C;&#xC640; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; ligand &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xC81C;&#xB300;&#xB85C; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xCD08;&#xAE30; &#xBD84;&#xC790; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xC815;&#xC758;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xB9C9; ligand &#xBC14;&#xC778;&#xB529; TLR-2,-3&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC2DC;&#xC791; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4;&#xC640;-4 &#xBD84; &#xC774;&#xB0B4; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC8FC; &#xACE8; (BM) &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC0F; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778; Neu1 sialidase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC758; &#xD575;&#xC2EC;&#xC740; &#xADF8; neu1&#xC640; Neu2-3 &#xBC0F; 4 &#xC591;&#xC2DD; TLR-2,-3&#xC640;-4 &#xC21C;&#xC9C4;&#xD55C; macrophage &#xC140;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C;. &#xC751;&#xC9D1; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; BCX1827, 2-deoxy-2,3-dehydro-N-acetylneuraminic &#xC0B0; (&#xB2E4; &#xB098;), zanamivir &#xBC0F; oseltamivir &#xCE74;&#xBCF5;&#xC2E4;&#xC0B0;&#xC740; &#xD0C0;&#xBBF8;&#xD50C;&#xB8E8; (oseltamivir &#xC778;&#xC0B0; &#xC5FC;) &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; BMC 2 macrophage &#xC140; &#xC644;&#xC804;&#xD788; &#xBE14;&#xB85D;&#xC744; &#xC0B4;&#xACE0;&#xC774; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0;&#xC11C; LPS &#xC720;&#xBC1C; sialidase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xC81C;&#xD55C; &#xB41C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC800;&#xD574;. &#xD0C0; &#xBBF8; &#xD50C; &#xB8E8;&#xC758; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xB300;&#xC0AC; &#xC0B0;&#xBB3C; oseltamivir &#xCE74;&#xBCF5;&#xC2E4;&#xC0B0;&#xC758; 1015 Microm&#xC758; IC(50)&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; 1.2 Microm&#xC758; IC(50)&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; BMC 2 &#xC140;&#xC5D0; sialidase LPS-&#xC720;&#xBC1C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD55C;&#xB2E4;. LPS &#xC720;&#xBC1C; Neu1 sialidase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xD0C0; &#xBBF8; &#xD50C; &#xB8E8; &#xCC28;&#xB2E8;&#xC740; anticarboxylesterase &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8; clopidogrel&#xACFC; pretreated BMC 2 &#xC140;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBC1B;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC120;&#xCC98;&#xB9AC; LPS TLR4 &#xBC14;&#xC778;&#xB529; Neu1 Nfkappab&#xC758; &#xD6C4;&#xC18D; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBC0F; &#xC9C8;&#xC18C; &#xC0B0;&#xD654;&#xBB3C; &#xBC0F; &#xAE30;&#xBCF8; &#xBC0F; macrophage &#xC140; &#xB77C;&#xC778;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD504;&#xB85C;-&#xC5FC;&#xC99D; &#xC131; &#xC77C;&#xB9AC;&#xB178;&#xC774;-6&#xC640; TNFalpha cytokines&#xC758; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Hypomorphic cathepsin A &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBCF4;&#xC870; Neu1 &#xACB0;&#xD54D;&#xACFC; LPS &#xC720;&#xBC1C; &#xD504;&#xB85C; &#xC5FC;&#xC99D; &#xC131; cytokines &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; Neu1 &#xC950;&#xC640; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xB610;&#xB294; hypomorphic cathepsin A&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xC800;&#xC870;&#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xD560;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4; &#xBD84;&#xC790; &#xC720;&#xB3C4; TLR &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC804;&#xB840; &#xC5C6;&#xB294; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC124;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; TLR ligand&#xC640; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; Neu1 sialidase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD310;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC885;&#xC18D; &#xC140; &#xD568;&#xC218; &#xCC98;&#xB9AC; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xAE30;&#xBCF8; macrophage &#xC804;&#xC9C0;&#xC640; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778;.

&#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4; &#xC218;&#xC2E0;&#xC790; &#xAC19;&#xC740; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xBD84;&#xC790; &#xC720;&#xB3C4; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC758;&#xC874; Neu1 sialidase.

Las v&#xED;as de se&#xF1;alizaci&#xF3;n de los mam&#xED;feros receptores Toll-like (TLR) est&#xE1;n bien caracterizados, pero los mecanismos moleculares que activan iniciales siguientes interacciones ligando con los receptores que siguen estando mal definido. A continuaci&#xF3;n, mostramos un mecanismo de control de la membrana que se inicia por la uni&#xF3;n del ligando al TLR-2, -3 y 4 para inducir la actividad de sialidasa Neu1 en cuesti&#xF3;n de minutos en la m&#xE9;dula &#xF3;sea en vivo primaria (BM) los macr&#xF3;fagos y los macr&#xF3;fagos y las l&#xED;neas de c&#xE9;lulas dendr&#xED;ticas. Central de este proceso es que las formas Neu1 y no Neu2, -3 y 4-un complejo con TLR-2, -3 y-4 en la superficie celular de c&#xE9;lulas de macr&#xF3;fagos no tratados previamente. Inhibidores de la neuraminidasa BCX1827, 2-desoxi-2 ,3-dehidro-N-acetilneuram&#xED;nico (DANA), el zanamivir y el oseltamivir carboxilato tienen una inhibici&#xF3;n significativa de la limitada actividad de sialidasa inducida por LPS en vivo BMC-2, pero los macr&#xF3;fagos Tamiflu (fosfato de oseltamivir ) bloquea completamente esta actividad. Tamiflu inhibe la actividad inducida por LPS sialidasa en vivo BMC-2 c&#xE9;lulas con un IC (50) de 1,2 microM en comparaci&#xF3;n con un IC (50) de 1015 microM para su oseltamivir carboxilato hidrol&#xED;tica metabolito. Bloqueo de Tamiflu de LPS inducido por la actividad sialidasa Neu1 no se ve afectada en el BMC-2 c&#xE9;lulas pretratadas con clopidogrel anticarboxylesterase agente. Endotoxina LPS de uni&#xF3;n a TLR4 induce Neu1 con la consiguiente activaci&#xF3;n de la NFkappaB y la producci&#xF3;n de &#xF3;xido n&#xED;trico y pro-inflamatoria IL-6 y las citocinas TNFalfa en l&#xED;neas celulares primarias y los macr&#xF3;fagos. Catepsina hypomorphic A los ratones con una deficiencia secundaria Neu1 no responden bien al LPS-inducida por citoquinas pro-inflamatorias en comparaci&#xF3;n con la catepsina de tipo salvaje o hypomorphic A con normales Neu1 ratones. Nuestros resultados establecen un mecanismo sin precedentes para la activaci&#xF3;n pat&#xF3;geno TLR inducida por mol&#xE9;cula y la funci&#xF3;n celular, que es cr&#xED;ticamente dependiente de la actividad sialidasa Neu1 asociado con el ligando TLR tratada vivos macr&#xF3;fagos primarios y los macr&#xF3;fagos y las l&#xED;neas de c&#xE9;lulas dendr&#xED;ticas.

La dependencia de la mol&#xE9;cula de pat&#xF3;genos inducida por la activaci&#xF3;n del receptor Toll-like y la funci&#xF3;n celular de Neu1 sialidasa

&#x80DE;&#x5916;&#x533A;&#x7684; TOLL &#x6837;&#x53D7;&#x4F53; (&#x5355;&#x53CD;) &#x9AD8;&#x5EA6;&#x662F;&#x4E0E;&#x51E0;&#x4E2A; N &#x94FE;&#x63A5; gylcosylation &#x7AD9;&#x70B9;&#x4F4D;&#x4E8E;&#x5185;&#x51F9;&#x8868;&#x9762;&#x7CD6;&#x57FA;&#x5316;&#x3002;&#x672A;&#x77E5;&#x7684;&#x5355;&#x53CD;&#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7CD6; N-&#x805A;&#x7CD6;&#x7684;&#x786E;&#x5207;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x8868;&#x660E;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176; Neu1 &#x5E76;&#x4E0D;&#x662F; Neu2&#xFF0C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x590D;&#x6742;&#x4E0E;&#x5355;&#x53CD;-2-3 &#x548C;-4 &#x5F62;&#x5F0F;&#x3001;-3&#x3001;-4 &#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#x4E0A;&#x7684;&#x5E7C;&#x7A1A;&#x548C;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x819C;&#x7EC6;&#x80DE; (Glycoconj J DOI 10.1007/s10719-009-9239-8)&#x3002;Neu1 &#x6FC0;&#x6D3B;&#x88AB;&#x8BF1;&#x5BFC; TLR &#x914D;&#x4F53;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x5176;&#x5404;&#x81EA;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x8BE5;&#x5185;&#x6BD2;&#x7D20;&#x8102;&#x591A;&#x7CD6; (LPS)-&#x81F4; MyD88/TLR4 &#x590D;&#x6742;&#x5730;&#x5C42;&#x548C;&#x968F;&#x540E; NFkappaB &#x6FC0;&#x6D3B;&#x662F;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x901A;&#x8FC7;&#x5173;&#x8054;&#x4E0E;&#x8102;&#x591A;&#x7CD6;&#x523A;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x4E3B;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3001; &#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x4E0E;&#x4E3B; Neu1 &#x7F3A;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684; Neu1 &#x6D3B;&#x52A8;&#x7684;&#x94FE;&#x63A5;&#x5230; &beta;-&#x82F7; TLR4 &#x7684; &alpha;-2&#xFF0C;3-&#x553E;&#x6DB2;&#x6B8B;&#x7559;&#x7684;&#x53BB;&#x9664;&#x3002;&#x5916;&#x6E90;&#x6027; &alpha;-2&#xFF0C;3 &#x553E;&#x6DB2;&#x7279;&#x5B9A;&#x795E;&#x7ECF;&#x6C28;&#x9178;&#x9176; (Streptoccocus &#x80BA;&#x708E;&#xFF09; &#x548C;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x7814;&#x7A76;&#x8DE8;-&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176; T.(TS) &#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x50AC;&#x5316;&#x5904;&#x4E8E;&#x975E;&#x6D3B;&#x52A8;&#x72B6;&#x6001;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53; TSAsp98 Glu &#x8C03;&#x89E3; TLR4 &#x4E8C;&#x805A;&#x53CD;&#x5E94;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x4FBF; MyD88/TLR4 &#x590D;&#x6742;&#x5730;&#x5C42;&#x548C; NFkappaB &#x6FC0;&#x6D3B;&#x76F8;&#x4F3C;&#x4E0E;&#x8102;&#x591A;&#x7CD6;&#x770B;&#x5230;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7B54;&#x590D;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x5355;&#x53CD;&#x914D;&#x4F53;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684; NFkappaB &#x54CD;&#x5E94;&#x5E76;&#x6CA1;&#x6709;&#x9075;&#x5B88;&#x5728;&#x5355;&#x53CD;&#x6709;&#x7F3A;&#x9677;&#x7684;&#x4EBA;&#x80DA;&#x80CE;&#x80BE; 293 &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4F46;&#x90FD;&#x5728;&#x4EBA;&#x80DA;&#x80CE;&#x80BE; 293 &#x7EC6;&#x80DE;&#x7A33;&#x5B9A;&#x8F6C;&#x67D3; TLR4/MD2&#xFF0C;&#x91CD;&#x65B0;&#x5EFA;&#x7ACB;&#xFF0C;&#x5747;&#x6709;&#x663E;&#x8457;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684; &alpha;-2&#xFF0C;3-&#x553E;&#x6DB2;&#x5177;&#x4F53;&#x69D0;&#x5C71; &#xFF08;&#x4EF2;&#x88C1;&#x6CD5; &#x300B;-2) &#x51DD;&#x96C6;&#x7D20;&#x3001; &alpha;-2&#xFF0C;3-&#x553E;&#x6DB2;&#x5177;&#x4F53;&#x534A;&#x4E73;&#x7CD6;&#x51DD;&#x96C6;&#x7D20;-1 &#x548C;&#x795E;&#x7ECF;&#x6C28;&#x9178;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x8FBE;&#x83F2;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x7531; &alpha;-2&#xFF0C;6-&#x553E;&#x6DB2;&#x5177;&#x4F53;&#x63A5;&#x9AA8;&#x9ED1;&#x8D28;&#x51DD;&#x96C6;&#x7D20; &#xFF08;SNA&#xFF09;&#x3002;&#x4E24;&#x8005;&#x5408;&#x8BA1;&#xFF0C;&#x8C03;&#x67E5;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E; Neu1 desialylation &#x7684;&#x5355;&#x53CD;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684; &alpha;-2&#xFF0C;3-&#x553E;&#x6DB2;&#x6B8B;&#x7559;&#x4F7F;&#x4E2D;&#x79FB;&#x9664;&#x5355;&#x53CD;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4FE1;&#x53F7;&#x53D7;&#x4F53;&#x534F;&#x4F1A;&#x7A7A;&#x95F4;&#x4F4D;&#x963B;&#x52A8;&#x5F39;&#x3002;

Neu1 desialylation &#x553E;&#x6DB2;&#x94FE;&#x63A5;&#x963F;&#x5C14;&#x6CD5; 2&#xFF0C;3 &beta;-&#x534A;&#x4E73;&#x7CD6;&#x6B8B;&#x7559;&#x7684; TOLL &#x6837;&#x53D7;&#x4F53; 4 &#x5BF9;&#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4FE1;&#x53F7;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x3002;

The ectodomain of TOLL-like receptors (TLR) is highly glycosylated with several N-linked gylcosylation sites located in the inner concave surface. The precise role of these sugar N-glycans in TLR receptor activation is unknown. Recently, we have shown that Neu1 sialidase and not Neu2, -3 and -4 forms a complex with TLR-2, -3 and -4 receptors on the cell-surface membrane of naÃ¯ve and activated macrophage cells (Glycoconj J DOI 10.1007/s10719-009-9239-8). Activation of Neu1 is induced by TLR ligands binding to their respective receptors. Here, we show that endotoxin lipopolysaccharide (LPS)-induced MyD88/TLR4 complex formation and subsequent NFkappaB activation is dependent on the removal of alpha-2,3-sialyl residue linked to beta-galactoside of TLR4 by the Neu1 activity associated with LPS-stimulated live primary macrophage cells, macrophage and dendritic cell lines but not with primary Neu1-deficient macrophage cells. Exogenous alpha-2,3 sialyl specific neuraminidase (Streptoccocus pneumoniae) and wild-type T. cruzi trans-sialidase (TS) but not the catalytically inactive mutant TSAsp98-Glu mediate TLR4 dimerization to facilitate MyD88/TLR4 complex formation and NFkappaB activation similar to those responses seen with LPS. These same TLR ligand-induced NFkappaB responses are not observed in TLR deficient HEK293 cells, but are re-established in HEK293 cells stably transfected with TLR4/MD2, and are significantly inhibited by alpha-2,3-sialyl specific Maackia amurensis (MAL-2) lectin, alpha-2,3-sialyl specific galectin-1 and neuraminidase inhibitor Tamiflu but not by alpha-2,6-sialyl specific Sambucus nigra lectin (SNA). Taken together, the findings suggest that Neu1 desialylation of alpha-2,3-sialyl residues of TLR receptors enables in removing a steric hinderance to receptor association for TLR activation and cellular signaling.

Neu1 desialylation of sialyl alpha-2,3-linked beta-galactosyl residues of TOLL-like receptor 4 is essential for receptor activation and cellular signaling.

L&#x26;#39;ectodomaine de r&#xE9;cepteurs de type Toll (TLR) est fortement glycosyl&#xE9;e avec plusieurs sites de liaison N gylcosylation situ&#xE9;s dans la surface int&#xE9;rieure concave. Le r&#xF4;le pr&#xE9;cis de ces sucre N-glycanes dans l&#x26;#39;activation des r&#xE9;cepteurs TLR est inconnue. R&#xE9;cemment, nous avons montr&#xE9; que Neu1 sialidase et non Neu2, formes -3 et -4 un complexe avec TLR-2, -3 et -4 r&#xE9;cepteurs sur la membrane de surface cellulaire des cellules macrophages na&#xEF;fs et activ&#xE9; (Glycoconj J DOI 10.1007/s10719 -009-9239-8). L&#x26;#39;activation de Neu1 est induite par les ligands de TLR contraignantes &#xE0; leurs r&#xE9;cepteurs respectifs. Ici, nous montrons que le lipopolysaccharide endotoxine (LPS) induit la formation de complexes MyD88/TLR4 et l&#x26;#39;activation NFkappaB ult&#xE9;rieure d&#xE9;pend de l&#x26;#39;&#xE9;limination de l&#x26;#39;alpha-2 ,3-sialyl r&#xE9;sidus li&#xE9;s aux b&#xEA;ta-galactoside de TLR4 par l&#x26;#39;activit&#xE9; associ&#xE9;e &#xE0; Neu1 LPS- stimul&#xE9; les cellules vivantes macrophages primaires, des macrophages et des lign&#xE9;es de cellules dendritiques, mais pas avec des cellules primaires de macrophages Neu1-d&#xE9;ficientes. Exog&#xE8;ne alpha-2, 3 sialyl sp&#xE9;cifique neuraminidase (Streptococcus pneumoniae) et de type sauvage par T. cruzi trans-sialidase (TS), mais pas le mutant catalytiquement inactif TSAsp98-Glu m&#xE9;diate TLR4 dim&#xE9;risation pour faciliter la formation du complexe MyD88/TLR4 et l&#x26;#39;activation similaire &#xE0; NFkappaB ces r&#xE9;ponses vu avec le LPS. Ces m&#xEA;mes TLR ligand-r&#xE9;ponses induites par NFkappaB ne sont pas observ&#xE9;s dans les cellules HEK293 TLR d&#xE9;ficientes, mais sont r&#xE9;tablis dans les cellules HEK293 transfect&#xE9;es de fa&#xE7;on stable avec TLR4/MD2, et sont significativement inhib&#xE9;e par alpha-2 ,3-sialyl Maackia amurensis sp&#xE9;cifique (MAL- 2) la lectine, de l&#x26;#39;alpha-2 ,3-sialyl inhibiteur sp&#xE9;cifique galectine-1 et de la neuraminidase Tamiflu mais pas par l&#x26;#39;alpha-2 ,6-sialyl lectine sp&#xE9;cifique Sambucus nigra (SNA). Pris dans leur ensemble, les r&#xE9;sultats sugg&#xE8;rent que Neu1 d&#xE9;sialylation d&#x26;#39;alpha-2 ,3-sialyl r&#xE9;sidus de r&#xE9;cepteurs TLR permet &#xE0; la suppression d&#x26;#39;un encombrement st&#xE9;rique &#xE0; l&#x26;#39;association du r&#xE9;cepteur pour l&#x26;#39;activation de TLR et de la signalisation cellulaire.

Neu1 d&#xE9;sialylation de Sialyl Alpha-2 ,3-linked b&#xEA;ta-galactosyl r&#xE9;sidus de Toll-like receptor 4 est essentielle pour l&#x26;#39;activation des r&#xE9;cepteurs et signalisation cellulaires

Die APPs&alpha; von TOLL-Like Rezeptoren (TLR) ist sehr stark glykosyliert mit mehreren N verkn&uuml;pfte Gylcosylation-Standorte in die konkave Innenfl&auml;che. Die genaue Rolle der diese Zucker N-Glykane in TLR-Aktivierung ist unbekannt. Vor kurzem haben wir gezeigt, dass Neu1 Sialidase und nicht Neu2,-3 und-4 bildet einen Komplex mit TLR-2,-3 und-4 Rezeptoren auf der Zelloberfl&auml;che Membran der naive und aktivierte Makrophagen cells (Glycoconj J DOI 10.1007/s10719-009-9239-8). Aktivierung des Neu1 wird von TLR-Liganden binden an ihre entsprechenden Rezeptoren induziert. Hier zeigen wir, dass Endotoxin Lipopolysaccharid (LPS)-induzierte MyD88/TLR4-Komplexbildung und nachfolgende NFkappaB Aktivierung ist die Beseitigung von Alpha-2,3-Sialyl-R&uuml;ckstand mit dem Beta-galactopyranosid von TLR4 durch die Neu1 Aktivit&auml;t im Zusammenhang mit LPS stimuliert Leben prim&auml;ren Makrophagen-Zellen, Makrophagen und dendritischen Zelllinien aber nicht mit prim&auml;ren Neu1-defizienten Makrophagen Zellen abh&auml;ngig. Exogene Alpha-2,3 Sialyl spezifische Neuraminidase (Streptoccocus Pneumoniae) und Wildtyp T. Cruzi Trans-Sialidase (TS), aber nicht die katalytisch inaktive mutant TSAsp98-Glu vermitteln TLR4 Dimerisierung MyD88/TLR4-Komplexbildung und NFkappaB Aktivierung &auml;hnlich wie diese Antworten gesehen mit LPS zu erleichtern. Diese gleichen TLR Liganden induziert NFkappaB Antworten nicht in TLR mangelhaft HEK293 Zellen zu beobachten sind, aber in HEK293 Zellen stabil die mit TLR4/MD2 transfected wiederhergestellt werden und sind deutlich gehemmt, von Alpha-2,3-Sialyl spezifische Maackia Amurensis (MAL-2) Lektin, Alpha-2,3-Sialyl spezifische Galectin-1 und Neuraminidasehemmer Tamiflu aber nicht von Alpha-2,6-Sialyl spezifische Sambucus Nigra Lektin (SNA). Zusammengenommen zufolge die Feststellungen Neu1 Desialylation Alpha-2,3-Sialyl R&uuml;ckst&auml;nde von TLR-Rezeptoren erm&ouml;glicht eine sterische Hinderniss Rezeptor Vereinigung f&uuml;r TLR-Aktivierung und zellularen Signalisierens zu entfernen.

Neu1 Desialylation Sialyl Alpha-2,3-chromosomale Beta-Galaktosyltransferase R&uuml;ckst&auml;nde von TOLL-Like Receptor 4 unbedingt Rezeptor-Aktivierung und zellulare signalisieren.

Il ectodomain di recettori TOLL-like (TLR) &egrave; altamente glicosilata con diversi siti di N-linked gylcosylation situato nella superficie interna concava. Il ruolo preciso di questi zucchero N-glicani nell&#39;attivazione del recettore TLR &egrave; sconosciuto. Recentemente, abbiamo dimostrato che sialidasi Neu1 e non Neu2, forma il complesso con TLR-2-3 e -4, -3 e -4 recettori sulla superficie cellulare membrana di ingenui e macrofagi attivati cellule (Glycoconj J DOI 10.1007/s10719-009-9239-8). Attivazione del Neu1 &egrave; indotta da ligandi TLR vincolante ai loro rispettivi recettori. Qui, vi mostriamo quella lipopolisaccaride (LPS) di endotossina-indotta MyD88/TLR4 formazione complessa e NFkappaB successiva attivazione dipende la rimozione di residui alfa-2,3-sialil legata alla beta-Galattoside di TLR4 dall&#39;attivit&agrave; Neu1 associati con LPS-stimolata dal vivo primaria macrofago cellule, macrofagi e linee di cellule dendritiche, ma non con le cellule primarie del macrofago Neu1-carenti. Esogeno alfa-2,3 sialil specifico neuraminidasi (Streptoccocus pneumoniae) e wild-type T. cruzi trans-sialidasi (TS) ma non il mutante cataliticamente inattivo TSAsp98-Glu mediare TLR4 dimerizzazione per facilitare la formazione dei complessi MyD88/TLR4 e attivazione di NFkappaB simili a quelle risposte vista con LPS. Queste stesse TLR NFkappaB risposte non sono state osservate cellule HEK293 carente TLR, ma sono ristabilite in cellule HEK293 stabile transfected con TLR4/MD2 indotta dal ligando e sono significativamente inibito da alfa-2,3-sialil specifico Maackia amurensis (MAL-2) lectina, alfa-2,3-sialil specifico galectin-1 e neuraminidasi inibitore Tamiflu ma non da alfa-2,6-sialil specifico Sambucus nigra lectin (SNA). Presi insieme, i risultati suggeriscono che Neu1 desialylation di alfa-2,3-sialil residui di recettori TLR consente a rimuovere un impedimento sterico all&#39;associazione del recettore per l&#39;attivazione di TLR e segnalazione cellulare.

Neu1 desialylation di sialil beta legata all&#39;alfa-2,3-galattosil residui del recettore TOLL-like 4 &egrave; essenziale per l&#39;attivazione del recettore e di segnalazione cellulare.

Toll&#x69D8;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#xFF08;TLR&#xFF09;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306F;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x5185;&#x5074;&#x306E;&#x51F9;&#x9762;&#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;N-&#x7D50;&#x5408;gylcosylation&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x200B;&#x200B;&#x3068;&#x30B0;&#x30EA;&#x30B3;&#x30B7;&#x30EB;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; TLR&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7CD6;&#x306E;N-&#x7D50;&#x5408;&#x578B;&#x7CD6;&#x9396;&#x306E;&#x6B63;&#x78BA;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30CA;&#x30A4;&#x30FC;&#x30D6;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;Glycoconj J DOI 10.1007/s10719&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x306E;Neu1&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;Neu2&#x3001;-3&#x304A;&#x3088;&#x3073;-4&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;TLR-2&#x3001;-3&#x304A;&#x3088;&#x3073;-4&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3068;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;-009-9239-8&#xFF09;&#x3002; Neu1&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;TLR&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30C8;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3;&#x30EA;&#x30DD;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B5;&#x30C3;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30C9;&#xFF08;LPS&#xFF09;&#x8A98;&#x767A;MyD88/TLR4&#x8907;&#x200B;&#x200B;&#x5408;&#x4F53;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x306E;&#x5E30;&#x7740;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306F;LPS-&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;Neu1&#x6D3B;&#x6027;&#x306B;&#x3088;&#x308A;TLR4&#x306E;&#x3B2;-&#x30AC;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30B7;&#x30C9;&#x306B;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3B1;-2 ,3-&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30EB;&#x6B8B;&#x57FA;&#x306E;&#x9664;&#x53BB;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x4E3B;Neu1&#x6B20;&#x640D;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x4E3B;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x3001;&#x6A39;&#x72B6;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5916;&#x56E0;&#x6027;&#x306E;&#x3B1;-2&#x3001;3&#x30B7;&#x30A2;&#x30EB;&#x9178;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#xFF08;Streptoccocus&#x80BA;&#x708E;&#xFF09;&#x30CE;&#x30A4;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CB;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x306E;T. cruzi&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;TS&#xFF09;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x306B;&#x4F3C;&#x3066;MyD88/TLR4&#x8907;&#x200B;&#x200B;&#x5408;&#x4F53;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x5E30;&#x7740;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x89E6;&#x5A92;&#x7684;&#x306B;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x6027;&#x306A;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;TSAsp98-Glu&#x306E;&#x4EF2;&#x4ECB;TLR4&#x4E8C;&#x91CF;&#x5316;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306F;&#x3001;LPS&#x3068;&#x898B;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x540C;&#x4E00;&#x306E;TLR&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x8A98;&#x5C0E;&#x5E30;&#x7740;&#x5FDC;&#x7B54;&#x304C;TLR&#x6B20;&#x640D;HEK293&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x304C;&#x3001;&#x5B89;&#x5B9A;TLR4/MD2&#x3067;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30C8;&#x3057;&#x305F;HEK293&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x518D;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x3B1;-2 ,3-&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30EB;&#x7279;&#x5B9A;Maackia&#x306E;amurensis&#xFF08;MAL-&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x963B;&#x5BB3;&#x3055;&#x308C;&#x308B;2&#xFF09;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3001;&#x3B1;-2 ,6-&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30EB;&#x7279;&#x5B9A;&#x30CB;&#x30EF;&#x30C8;&#x30B3;&#x9ED2;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#xFF08;SNA&#xFF09;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30BF;&#x30DF;&#x30D5;&#x30EB;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3B1;-2 ,3-&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30EB;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30AC;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;-1&#x3068;&#x30CE;&#x30A4;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CB;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3001;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;TLR&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x3B1;-2 ,3-&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30EB;&#x6B8B;&#x57FA;&#x306E;Neu1&#x8131;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30EB;&#x5316;&#x306F;&#x3001;TLR&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3084;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x5354;&#x4F1A;&#x306B;&#x7ACB;&#x4F53;&#x969C;&#x5BB3;&#x3092;&#x9664;&#x53BB;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

Toll&#x69D8;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;4&#x306E;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30EB;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1;-2,3  - &#x7D50;&#x5408;&#x3B2;-&#x30AC;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30B7;&#x30EB;&#x6B8B;&#x57FA;&#x306E;Neu1&#x8131;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30EB;&#x5316;&#x306F;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306B;&#x5FC5;&#x9808;&#x3067;&#x3042;&#x308B;

&#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD1B5;&#xD589;&#xC138; &#xAC19;&#xC774; (TLR)&#xC758; ectodomain&#xB294; &#xB192;&#xC740; &#xB2F9;&#xD654; &#xC548;&#xCABD; &#xC624;&#xBAA9;&#xD55C; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC5EC;&#xB7EC; gylcosylation N &#xC5F0;&#xACB0; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC640;. TLR &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC124;&#xD0D5; N glycans&#xC758; &#xC815;&#xD655;&#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC54C; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xCD5C;&#xADFC;&#xC5D0;, &#xC6B0;&#xB9AC; Neu1 sialidase &#xBC0F; &#xD558;&#xC9C0; Neu2, TLR-2 &#xB2E8;&#xC9C0; a-3&#xC640;-4 &#xD615;&#xD0DC;, &#xC21C;&#xC9C4;&#xD55C; &#xACE0; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB41C; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74; &#xB9C9;-3&#xACFC;-4 &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC138;&#xD3EC; (Glycoconj J DOI 10.1007/s10719-009-9239-8) &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Neu1&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB294; &#xAC01;&#xAC01; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; TLR ligands&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xBC1C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC790;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xADF8; &#xC120;&#xCC98;&#xB9AC; lipopolysaccharide (LPS)-&#xC720;&#xB3C4; MyD88/TLR4 &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xD615;&#xC131; &#xBC0F; &#xD6C4;&#xC18D; NFkappaB &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xAE30;&#xBCF8; macrophage LPS &#xC790;&#xADF9; &#xC138;&#xD3EC;, &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778; &#xC544;&#xB2C8;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xAE30;&#xBCF8; Neu1 &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; macrophage &#xC140; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; Neu1 &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; tlr4&#xC758; &#xBCA0;&#xD0C0;-galactoside&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0; &#xD558;&#xB294; &#xC54C;&#xD30C;-2, 3-sialyl &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC758; &#xC81C;&#xAC70;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2EC;&#xB77C; &#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;. Exogenous &#xC54C;&#xD30C;-2, 3 sialyl &#xD2B9;&#xC815; &#xC751;&#xC9D1; (Streptoccocus &#xADE0;)&#xC640; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; T. cruzi &#xD2B8;&#xB79C;&#xC2A4;-sialidase (TS) &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; catalytically &#xBE44;&#xD65C;&#xC131; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; TSAsp98 Glu TLR4 dimerization MyD88/TLR4 &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xD615;&#xC131;&#xACFC; &#xADF8; &#xC751;&#xB2F5; LPS&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xBCFC; &#xC218;&#xC640; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; NFkappaB &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD558;&#xC5EC; &#xC911;&#xC7AC;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; TLR &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC; &#xC720;&#xB3C4; NFkappaB &#xC751;&#xB2F5; TLR &#xACB0;&#xD54D; HEK293 &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xD558;&#xC9C0; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC548;&#xC815;&#xC801; TLR4/m d 2&#xC640; &#xD398; HEK293 &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xACE0; &#xC54C;&#xD30C;-2, 6-sialyl &#xD2B9;&#xC815; Sambucus nigra lectin (SNA) &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC54C;&#xD30C;-2, 3-sialyl &#xD2B9;&#xC815; Maackia &#xB098;&#xBB34; (MAL-2) lectin, &#xC54C;&#xD30C;-2, 3-sialyl &#xD2B9;&#xC815; galectin-1 &#xBC0F; &#xC751;&#xC9D1; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; &#xD0C0; &#xBBF8; &#xD50C; &#xB8E8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD06C;&#xAC8C; &#xC800;&#xD574; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD568;&#xAED8; &#xCC0D;&#xC740; &#xACB0;&#xACFC; TLR &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xC54C;&#xD30C;-2, 3-sialyl &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC758; Neu1 desialylation &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD611;&#xD68C; TLR &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBC0F; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC785;&#xCCB4;&#xC801; hinderance &#xC81C;&#xAC70;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xBA74; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD1B5;&#xD589;&#xC138; &#xAC19;&#xC774; 4&#xC758; sialyl &#xC54C;&#xD30C; 2, 3 &#xC5F0;&#xACB0; &#xBCA0;&#xD0C0; galactosyl &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC758; Neu1 desialylation &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBC0F; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC218;&#xC801; &#xC774;&#xB2E4;.

El ectodominio de receptores de tipo Toll (TLR) es altamente glicosilada con varios sitios de N-gylcosylation de destino ubicados en la superficie interna c&#xF3;ncava. El papel exacto de estos de az&#xFA;car en la N-glicanos en la activaci&#xF3;n de los receptores TLR es desconocida. Recientemente, hemos demostrado que Neu1 sialidasa y no Neu2, formas -3 y -4 un complejo con TLR-2, -3 y -4 receptores en la membrana de la superficie celular de c&#xE9;lulas de macr&#xF3;fagos no tratados previamente y activado (Glycoconj J DOI 10.1007/s10719 -009-9239-8). La activaci&#xF3;n de Neu1 es inducida por ligandos TLR de uni&#xF3;n a sus respectivos receptores. Aqu&#xED;, se muestra que lipopolisac&#xE1;rido endotoxina (LPS)-inducida MyD88/TLR4 formaci&#xF3;n de complejos y la activaci&#xF3;n NFkappaB posterior depende de la eliminaci&#xF3;n de alfa-2 ,3-sialil residuo ligado a la beta-galact&#xF3;sido de TLR4 por la actividad Neu1 asociado con LPS- estimulado en vivo los macr&#xF3;fagos primarios, los macr&#xF3;fagos y las l&#xED;neas de c&#xE9;lulas dendr&#xED;ticas, pero no con c&#xE9;lulas primarias de los macr&#xF3;fagos deficientes en Neu1. Ex&#xF3;geno alfa-2, 3 sialil espec&#xED;fica neuraminidasa (Streptoccocus pneumoniae) y de tipo salvaje T. cruzi trans-sialidasa (TS), pero no la catal&#xED;ticamente inactiva mutante TSAsp98-Glu mediata TLR4 dimerizaci&#xF3;n para facilitar la formaci&#xF3;n de complejos y MyD88/TLR4 activaci&#xF3;n NFkappaB similar a dichas respuestas visto con LPS. Estas mismas TLR inducida por ligandos respuestas NFkappaB no se observan en las c&#xE9;lulas HEK293 TLR deficientes, pero se restableci&#xF3; en las c&#xE9;lulas HEK293 transfectadas establemente con TLR4/MD2, y se inhibi&#xF3; por la alfa-2 ,3-sialil espec&#xED;fica amurensis Maackia (MAL- 2) lectina, alfa-2 ,3-sialil inhibidor espec&#xED;fico galectina-1 y neuraminidasa Tamiflu pero no por la alfa-2 ,6-sialil espec&#xED;fico lectina Sambucus nigra (SCN). En conjunto, los hallazgos sugieren que Neu1 desialilaci&#xF3;n de la alfa-2 ,3-sialil los residuos de los receptores TLR permite que en la eliminaci&#xF3;n de un impedimento est&#xE9;rico a la asociaci&#xF3;n de receptores para la activaci&#xF3;n de TLR y la se&#xF1;alizaci&#xF3;n celular.

Neu1 desialilaci&#xF3;n de sialil Alfa-2 ,3-beta-vinculados a los residuos de galactosilo Toll-like receptor 4 es esencial para la activaci&#xF3;n del receptor y la se&#xF1;alizaci&#xF3;n celular

&#x5355;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x4E3A;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x88AB;&#x4F34;&#x968F;&#x7740;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x795E;&#x7ECF;&#x6C28;&#x9178;&#x9176; 1 (Neu1) &#x548C;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; (CathA)&#xFF0C;&#x540E;&#x8005;&#x5F62;&#x6210;&#x4E00;&#x4E2A;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x548C;&#x6FC0;&#x6D3B; Neu1&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x6F84;&#x6E05;&#x8FD9;&#x4E00;&#x73B0;&#x8C61;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x6211;&#x4EEC;&#x5236;&#x8BA2;&#x4E86;&#x9488;&#x5BF9;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x75C7; &#xFF08;CathA(S190A)) &#x548C; CathA/Neu1 &#x53CC;&#x7F3A;&#x9677; (CathA(S190A-Neo))&#x3002;CathA(S190A-Neo) &#x5C0F;&#x9F20;&#x4E0E;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x672A;&#x6210;&#x719F;&#x7684;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x663E;&#x793A;&#x541E;&#x6CA1;&#x9769;&#x5170;&#x9633;&#x6027;&#x548C;&#x9769;&#x5170;&#x9634;&#x6027;&#x7EC6;&#x83CC;&#x548C;&#x79EF;&#x6781;&#x548C;&#x6D88;&#x6781;&#x5E26;&#x7535;&#x7684;&#x805A;&#x5408;&#x7269;&#x73E0;&#x4EE5;&#x53CA; IgG &#x8C03;&#x7406;&#x73E0;&#x548C;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x80FD;&#x529B;&#x5927;&#x5927;&#x964D;&#x4F4E;&#x3002;CathA(S190A) &#x5C0F;&#x9F20;&#x4ECE;&#x6D3E;&#x751F;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x5C5E;&#x6027;&#x662F;&#x96BE;&#x4EE5;&#x533A;&#x5206;&#x7684;&#x4ECE;&#x90A3;&#x4E9B;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x63A7;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x6697;&#x793A;&#x7684; Neu1&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x86CB;&#x767D;&#x589E;&#x52A0;&#x800C;&#x4E14;&#xFF0C;&#x6CA1;&#x6709;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x5F71;&#x54CD;&#x591A;&#x4E2A;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x541E;&#x566C;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x4E8B;&#x5B9E;&#x4E0A;&#xFF0C;&#x7528;&#x7EAF;&#x51C0;&#x7684;&#x9F20;&#x6807; Neu1 &#x7EC6;&#x80DE;&#x6CBB;&#x7597;&#x51CF;&#x5C11;&#x8868;&#x9762;&#x800C;&#x4E14;&#x548C;&#x6062;&#x590D;&#x541E;&#x566C;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x56E0;&#x4E3A; Neu1 &#x7F3A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x663E;&#x793A;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684;&#x5185;&#x5728;&#x5316; IgG &#x8C03;&#x7406;&#x7EF5;&#x7F8A;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x800C;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x5728; 4 &#x5EA6; C &#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x575A;&#x6301;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63A8;&#x6D4B; Neu1 &#x6CA1;&#x6709;&#x7279;&#x522B;&#x662F;&#x53D7;&#x5F71;&#x54CD;&#x4F20;&#x5BFC;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4ECE; Fc &#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x7403;&#x86CB;&#x767D; G (FcgammaR)&#x3002;&#x4E8B;&#x5B9E;&#x4E0A;&#x4ECE; Neu1 &#x57FA;&#x56E0;&#x7F3A;&#x9677;&#x5C0F;&#x9F20;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x663E;&#x793A;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x800C;&#x4E14;&#x548C;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x7684; FcgammaR &#x4EE5;&#x53CA;&#x663E;&#x8457;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684;&#x78F7;&#x9178;&#x5316; Syk &#x6FC0;&#x9176;&#x6CBB;&#x7597; IgG &#x8C03;&#x7406;&#x73E0;&#x56DE;&#x5E94;&#x800C;&#x53D7;&#x635F;&#x3002;&#x5171;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x8BE5;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x8868;&#x9762; Neu1 &#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;desialylation &#x901A;&#x8FC7;&#x541E;&#x566C;&#x8D21;&#x732E;&#x5176;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x5B8C;&#x6574;&#x6027;&#x3002;

&#x8C03;&#x8282;&#x795E;&#x7ECF;&#x6C28;&#x9178;&#x9176; 1 &#x7684;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x541E;&#x566C;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;

The differentiation of monocytes into macrophages and dendritic cells is accompanied by induction of cell-surface neuraminidase 1 (Neu1) and cathepsin A (CathA), the latter forming a complex with and activating Neu1. To clarify the biological importance of this phenomenon we have developed the gene-targeted mouse models of a CathA deficiency (CathA(S190A)) and a double CathA/Neu1 deficiency (CathA(S190A-Neo)). Macrophages of CathA(S190A-Neo) mice and their immature dendritic cells showed a significantly reduced capacity to engulf Gram-positive and Gram-negative bacteria and positively and negatively charged polymer beads as well as IgG-opsonized beads and erythrocytes. Properties of the cells derived from CathA(S190A) mice were indistinguishable from those of wild-type controls, suggesting that the absence of Neu1, which results in the increased sialylation of the cell surface proteins, probably affects multiple receptors for phagocytosis. Indeed, treatment of the cells with purified mouse Neu1 reduced surface sialylation and restored phagocytosis. Because Neu1-deficient cells showed reduced internalization of IgG-opsonized sheep erythrocytes whereas binding of the erythrocytes to the cells at 4 degrees C persisted, we speculate that the absence of Neu1 in particular affected transduction of signals from the Fc receptors for immunoglobulin G (FcgammaR). Indeed the macrophages from the Neu1-deficient mice showed increased sialylation and impaired phosphorylation of FcgammaR as well as markedly reduced phosphorylation of Syk kinase in response to treatment with IgG-opsonized beads. Altogether our data suggest that the cell surface Neu1 activates the phagocytosis in macrophages and dendritic cells through desialylation of surface receptors, thus, contributing to their functional integrity.

Regulation of phagocytosis in macrophages by neuraminidase 1.

La diff&#xE9;renciation des monocytes en macrophages et de cellules dendritiques est accompagn&#xE9;e par l&#x26;#39;induction d&#x26;#39;une surface cellulaire neuraminidase (Neu1) et de la cathepsine A (Catha), ce dernier formant un complexe avec l&#x26;#39;activation et Neu1. Afin de clarifier l&#x26;#39;importance biologique de ce ph&#xE9;nom&#xE8;ne, nous avons d&#xE9;velopp&#xE9; des mod&#xE8;les de souris de g&#xE8;nes cibl&#xE9;s d&#x26;#39;une carence en Catha (Catha (S190A)) et un double d&#xE9;ficit CathA/Neu1 (Catha (S190A-Neo)). Les macrophages de Catha (S190A-Neo) souris et leurs cellules dendritiques immatures ont montr&#xE9; une capacit&#xE9; significativement r&#xE9;duite pour les bact&#xE9;ries Gram-positives engloutir et Gram-n&#xE9;gatives et charg&#xE9;es positivement et n&#xE9;gativement billes de polym&#xE8;re ainsi que IgG-opsonis&#xE9;es perles et les &#xE9;rythrocytes. Propri&#xE9;t&#xE9;s des cellules d&#xE9;riv&#xE9;es de Catha (S190A) souris sont indiscernables de ceux de type sauvage contr&#xF4;les, ce qui sugg&#xE8;re que l&#x26;#39;absence de Neu1, qui se traduit par la sialylation accrue des prot&#xE9;ines de surface cellulaire, affecte probablement de multiples r&#xE9;cepteurs pour la phagocytose. En effet, le traitement des cellules avec la souris purifi&#xE9; Neu1 r&#xE9;duite sialylation de surface et la phagocytose restaur&#xE9;. Parce que Neu1 cellules d&#xE9;ficientes ont montr&#xE9; l&#x26;#39;internalisation r&#xE9;duite des &#xE9;rythrocytes de mouton IgG-opsonis&#xE9;es tandis que la liaison des &#xE9;rythrocytes aux cellules &#xE0; 4 &#xB0; C ont persist&#xE9;, nous pensons que l&#x26;#39;absence de Neu1 dans la transduction des signaux affect&#xE9;e notamment par les r&#xE9;cepteurs Fc pour l&#x26;#39;immunoglobuline G (FcgammaR ). En effet, les macrophages des souris d&#xE9;ficientes en Neu1 montr&#xE9; sialylation accrue et la phosphorylation de facult&#xE9;s affaiblies FcgammaR ainsi que la phosphorylation de la kinase nettement r&#xE9;duit Syk en r&#xE9;ponse &#xE0; un traitement par IgG-opsonis&#xE9;es perles. Au total, nos donn&#xE9;es sugg&#xE8;rent que la surface Neu1 cellule active de la phagocytose dans les macrophages et les cellules dendritiques par le biais des r&#xE9;cepteurs de surface d&#xE9;sialylation, ainsi, contribuer &#xE0; leur int&#xE9;grit&#xE9; fonctionnelle.

R&#xE8;glement de la phagocytose dans les macrophages de 1 neuraminidase

Die Differenzierung von Monozyten in Makrophagen und dendritischen Zellen wird durch Induktion der Zelloberfl&auml;che Neuraminidase 1 (Neu1) Kathepsin ein (CathA) die letzteren bilden einen Komplex mit und Aktivierung Neu1 begleitet. Die biologische Bedeutung dieses Ph&auml;nomens zu kl&auml;ren haben wir entwickelt, die gen-bezogene Mausmodelle eines CathA-Mangels (CathA(S190A)) und eine doppelte CathA/Neu1-Mangel (CathA(S190A-Neo)). Makrophagen von CathA(S190A-Neo) M&auml;usen und ihren unreifen dendritischen Zellen zeigten eine deutlich geringere Kapazit&auml;t, Gram-positive und Gram-negative Bakterien und positiv und negativ geladenen Polymer Perlen sowie IgG-opsonized Perlen und Erythrozyten zu verschlingen. Eigenschaften der Zellen abgeleitet CathA(S190A) M&auml;use waren nicht zu unterscheiden von denen der Wildtyp-Steuerelemente, was darauf hindeutet, dass das Fehlen von Neu1, was die erh&ouml;hte Sialylation der Zelle Oberfl&auml;che Proteine f&uuml;hrt, wahrscheinlich mehrere Rezeptoren f&uuml;r Phagozytose betrifft. In der Tat, Behandlung der Zellen mit gereinigtem Maus Neu1 reduziert Oberfl&auml;che Sialylation und Phagozytose wiederhergestellt. Weil Neu1-defizienten Zellen reduzierten Internalisierung der IgG-opsonized Schafe Erythrozyten zeigte w&auml;hrend der Bindung der Erythrozyten auf die Zellen bei 4 Grad C beibehalten, spekulieren wir, dass das Fehlen von Neu1 insbesondere Transduktion von Signalen aus der Fc-Rezeptoren f&uuml;r Immunglobulin G (FcgammaR) betroffen. In der Tat die Makrophagen aus den Neu1-defizienten M&auml;usen zeigten erh&ouml;hte Sialylation und beeintr&auml;chtigt die Phosphorylierung von FcgammaR sowie deutlich reduzierte Phosphorylierung von Syk-Kinase in Reaktion auf die Behandlung mit IgG-opsonized Perlen. Unsere Daten zufolge insgesamt die Zelle Oberfl&auml;che Neu1 der Phagozytose in Makrophagen und dendritischen Zellen durch Desialylation Oberfl&auml;che Rezeptoren, also aktiviert einen Beitrag zu ihrer funktionellen Integrit&auml;t.

Regulierung der Phagozytose in Makrophagen von Neuraminidase 1.

La differenziazione dei monociti in macrofagi e cellule dendritiche &egrave; accompagnata da induzione della cellula-superficie neuraminidasi 1 (Neu1) e catepsina A (CathA), quest&#39;ultimo formando un complesso con e attivazione Neu1. Per chiarire l&#39;importanza di questo fenomeno biologico abbiamo sviluppato i modelli del mouse gene-bersaglio di un deficit di CathA (CathA(S190A)) e un doppio deficit d&eacute;cisive/Neu1 (CathA(S190A-Neo)). Macrofagi di topi CathA(S190A-Neo) e loro cellule dendritiche immature hanno dimostrato una significativamente ridotta capacit&agrave; di fagocitare i batteri Gram-positivi e Gram-negativi e polimeri caricati positivamente e negativamente perline cos&igrave; come IgG-opsonized perline ed eritrociti. Propriet&agrave; delle cellule derivate da CathA(S190A) topi erano indistinguibili da quelle del selvaggio-tipo controlli, suggerendo che l&#39;assenza di Neu1, che provoca l&#39;aumento sialylation delle proteine di superficie delle cellule, probabilmente colpisce pi&ugrave; recettori per la fagocitosi. Infatti, trattamento delle cellule con purificati del mouse Neu1 ridotta superficie sialylation e restaurata la fagocitosi. Perch&eacute; le cellule Neu1-deficient ha mostrato ridotta interiorizzazione di IgG-opsonized pecore eritrociti considerando vincolante di eritrociti per le celle a 4 gradi C persistente, si ipotizzano che l&#39;assenza di Neu1 colpiti in particolare trasduzione di segnali dai recettori Fc per l&#39;immunoglobulina G (FcgammaR). Infatti i macrofagi dai topi deficienti Neu1 ha mostrato maggiore sialylation e ridotta fosforilazione di FcgammaR nonch&eacute; marcatamente ridotta fosforilazione della chinasi Syk in risposta al trattamento con perline IgG-opsonized. Complessivamente i nostri dati suggeriscono che la cella Neu1 superficie attiva la fagocitosi in macrofagi e cellule dendritiche attraverso desialylation di recettori di superfici, quindi, contribuire alla loro integrit&agrave; funzionale.

Regolamento della fagocitosi in macrofagi di neuraminidasi 1.

&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x3084;&#x6A39;&#x72B6;&#x7D30;&#x80DE;&#x3078;&#x306E;&#x5358;&#x7403;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x30CE;&#x30A4;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CB;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;1&#xFF08;Neu1&#xFF09;&#x3068;&#x30AB;&#x30C6;&#x30D7;&#x30B7;&#x30F3;A&#xFF08;CathA&#xFF09;&#x3068;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3057;&#x3001;Neu1&#x3092;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3057;&#x3001;&#x5F8C;&#x8005;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3092;&#x4F34;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x73FE;&#x8C61;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3092;&#x660E;&#x78BA;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6211;&#x3005;&#x306F;CathA&#x6B20;&#x4E4F;&#xFF08;CathA&#xFF08;S190A&#xFF09;&#xFF09;&#x3068;&#x4E8C;&#x91CD;CathA/Neu1&#x6B20;&#x4E4F;&#xFF08;CathA&#xFF08;S190A-NEO&#xFF09;&#xFF09;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x305F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; CathA&#xFF08;S190A-&#x30CD;&#x30AA;&#xFF09;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x672A;&#x719F;&#x6A39;&#x72B6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x304C;&#x8CAA;&#x98DF;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x967D;&#x6027;&#x83CC;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x9670;&#x6027;&#x83CC;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6B63;&#x3068;&#x8CA0;&#x306B;&#x5E2F;&#x96FB;&#x3057;&#x305F;&#x30DD;&#x30EA;&#x30DE;&#x30FC;&#x30D3;&#x30FC;&#x30BA;&#x306A;&#x3069;&#x306E;IgG&#x30AA;&#x30D7;&#x30BD;&#x30CB;&#x30F3;&#x5316;&#x30D3;&#x30FC;&#x30BA;&#x3068;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x306B;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x524A;&#x6E1B;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002; CathA&#xFF08;S190A&#xFF09;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30EB;&#x5316;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x200B;&#x200B;&#x3089;&#x3059;Neu1&#x306E;&#x4E0D;&#x5728;&#x306F;&#x3001;&#x304A;&#x305D;&#x3089;&#x304F;&#x98DF;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x5BFE;&#x7167;&#x306E;&#x3082;&#x306E;&#x3068;&#x533A;&#x5225;&#x304C;&#x3064;&#x304B;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x78BA;&#x304B;&#x306B;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;Neu1&#x3092;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x51E6;&#x7406;&#x306F;&#x3001;&#x8868;&#x9762;&#x306E;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30EB;&#x5316;&#x3068;&#x5FA9;&#x5143;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x8CAA;&#x98DF;&#x3092;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3002; C&#x304C;&#x6301;&#x7D9A;4&#x2103;&#x3067;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x514D;&#x75AB;&#x30B0;&#x30ED;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3;G&#xFF08;FcgammaR&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;Fc&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x4FE1;&#x53F7;&#x306E;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x308B;&#x5F62;&#x8CEA;&#x3067;Neu1&#x306E;&#x6709;&#x7121;&#x3068;&#x63A8;&#x6E2C;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3001;Neu1&#x6B20;&#x640D;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;IgG-&#x30AA;&#x30D7;&#x30BD;&#x30CB;&#x30F3;&#x5316;&#x30D2;&#x30C4;&#x30B8;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x5185;&#x5728;&#x5316;&#x3092;&#x8A8D;&#x3081;&#x305F;&#x305F;&#x3081;&#x3002;&#xFF09;&#x78BA;&#x304B;&#x306B;Neu1&#x6B20;&#x640D;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306F;IgG-&#x30AA;&#x30D7;&#x30BD;&#x30CB;&#x30F3;&#x5316;&#x30D3;&#x30FC;&#x30BA;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x6CBB;&#x7642;&#x306B;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3057;&#x3066;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30EB;&#x5316;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x969C;&#x5BB3;&#x30EA;&#x30F3;FcgammaR&#x306E;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;Syk&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x304C;&#x8457;&#x3057;&#x304F;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;Neu1&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x6574;&#x5408;&#x6027;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3001;&#x8868;&#x9762;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x8131;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30EB;&#x5316;&#x3092;&#x901A;&#x3057;&#x3066;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x3084;&#x6A39;&#x72B6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8CAA;&#x98DF;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30CE;&#x30A4;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CB;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;1&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306E;&#x8CAA;&#x98DF;&#x306E;&#x898F;&#x5236;

&#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; monocytes&#xC758; &#xBD84;&#xD654; &#xC720;&#xB3C4; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74; &#xC751;&#xC9D1; 1 (Neu1) cathepsin (CathA), &#xD6C4;&#xC790;&#xC758; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xD615;&#xC131; &#xBC0F; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; Neu1 &#xD568;&#xAED8; &#xC81C;&#xACF5; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xD604;&#xC0C1;&#xC758; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559;&#xC801; &#xC911;&#xC694;&#xC131;&#xC744; &#xBA85;&#xD655; &#xD558; &#xAC8C; &#xC6B0;&#xB9AC; (Catha(s190a))&#xC640; &#xB354;&#xBE14; CathA/Neu1 &#xACB0;&#xD54D; (CathA(S190A-Neo)) CathA &#xACB0;&#xD54D;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD45C;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBAA8;&#xB378; &#xAC1C;&#xBC1C;. CathA(S190A-Neo) &#xC950; &#xB4E4;&#xACFC; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xBBF8; &#xC131;&#xC219;&#xD55C; &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC; &#xADF8;&#xB78C; &#xC591;&#xC131; &#xBC0F; &#xADF8;&#xB78C; &#xC74C;&#xC131; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xC640; &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xCDA9;&#xC804;&#xB41C; &#xD3F4;&#xB9AC;&#xBA38; &#xBE44;&#xC988; &#xAD6C;&#xC2AC; IgG &#xCE68; &#xBC0F; &#xC801;&#xD608;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC0BC; &#xCF1C;&#xB3C4; &#xD06C;&#xAC8C; &#xAC10;&#xC18C; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4;. CathA(S190A) &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xC140; &#xC18D;&#xC131;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; sialylation, neu1&#xC758; &#xBD80;&#xC7AC;&#xB294; &#xC544;&#xB9C8; &#xC2DD; &#xADE0; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD6C;&#xBCC4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC2E4;&#xC81C;&#xB85C;, &#xCE58;&#xB8CC; Neu1 &#xC815;&#xD654; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xB85C; &#xC140;&#xC758; &#xD45C;&#xBA74; sialylation &#xC904;&#xC5B4;&#xB4E4;&#xACE0; &#xBCF5;&#xC6D0; &#xC2DD; &#xADE0; &#xC791;&#xC6A9;. 4 &#xC12D;&#xC528; &#xC628;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC801;&#xD608;&#xAD6C;&#xC758; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xBC18;&#xBA74; Neu1 &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC801;&#xD608;&#xAD6C; IgG &#xCE68; &#xC591; &#xAC10;&#xC18C; internalization&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900;, &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; neu1&#xC758; &#xBD80;&#xC7AC;&#xB294; &#xBA74;&#xC5ED; &#xAE00;&#xB85C;&#xBD88;&#xB9B0; G&#xC5D0; Fc &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E0;&#xD638;&#xC758; &#xBCC0;&#xD658; (FcgammaR)&#xC744; &#xD2B9;&#xD788; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC0AC;&#xC0C9; &#xD55C;&#xB2E4;. Neu1 &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xAC00; &#xC2E4;&#xC81C;&#xB85C; &#xC99D;&#xAC00; sialylation &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; Fcgammar&#xC758; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; &#xBB3C;&#xB860; Syk &#xB2C8; &#xBE44;&#xC988; IgG &#xCE68; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xD604;&#xC800; &#xD558; &#xAC8C; &#xAC10;&#xC18C; &#xB41C; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; &#xC7A5;&#xC560;. &#xBAA8;&#xB450; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; &#xC140; &#xD45C;&#xBA74; Neu1 &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD55C; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;, &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, desialylation &#xD1B5;&#xD574; &#xC2DD; &#xADE0; &#xC791;&#xC6A9; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBB34;&#xACB0;&#xC131;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD558; &#xACE0; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

1 &#xC751;&#xC9D1; &#xD558; &#xC5EC; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC2DD; &#xADE0; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xADDC;&#xC815;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La diferenciaci&#xF3;n de monocitos en macr&#xF3;fagos y c&#xE9;lulas dendr&#xED;ticas est&#xE1; acompa&#xF1;ada por la inducci&#xF3;n de una superficie celular neuraminidasa (Neu1) y catepsina A (Catha), esta &#xFA;ltima formando un complejo con la activaci&#xF3;n y Neu1. Para aclarar la importancia biol&#xF3;gica de este fen&#xF3;meno, hemos desarrollado los modelos de ratones de genes espec&#xED;ficos de una deficiencia de Catha (Catha (S190A)) y un doble CathA/Neu1 deficiencia (Catha (S190A-Neo)). Los macr&#xF3;fagos de Catha (S190A-neo) ratones y sus c&#xE9;lulas dendr&#xED;ticas inmaduras mostraron una capacidad significativamente reducida a bacterias engullen Gram-positivas y Gram-negativas y cargadas positiva y negativamente perlas de pol&#xED;mero, as&#xED; como de IgG-opsonizadas perlas y eritrocitos. Las propiedades de las c&#xE9;lulas derivadas de Catha (S190A) ratones eran indistinguibles de las de los controles de tipo salvaje, lo que sugiere que la ausencia de Neu1, lo que resulta en el aumento de sialilaci&#xF3;n de las prote&#xED;nas de la superficie celular, probablemente afecta a m&#xFA;ltiples receptores para la fagocitosis. De hecho, el tratamiento de las c&#xE9;lulas con purific&#xF3; rat&#xF3;n Neu1 reducido sialilaci&#xF3;n superficie y fagocitosis restaurada. Debido a que las c&#xE9;lulas deficientes en Neu1 mostr&#xF3; internalizaci&#xF3;n reducido de eritrocitos de oveja IgG opsonizadas mientras que la uni&#xF3;n de los eritrocitos a las c&#xE9;lulas a 4 &#xBA; C persistieron, se especula que la ausencia de Neu1 en la transducci&#xF3;n de particular en el caso de las se&#xF1;ales de los receptores Fc de inmunoglobulina G (FcgammaR ). De hecho, los macr&#xF3;fagos de los ratones deficientes en Neu1 mostr&#xF3; sialilaci&#xF3;n aumentado y la fosforilaci&#xF3;n alterada de FcgammaR as&#xED; como la fosforilaci&#xF3;n marcadamente reducido de quinasa Syk en respuesta al tratamiento con IgG-opsonizadas perlas. En total, nuestros datos sugieren que la superficie de la c&#xE9;lula Neu1 activa la fagocitosis de macr&#xF3;fagos y c&#xE9;lulas dendr&#xED;ticas a trav&#xE9;s desialilaci&#xF3;n de receptores de superficie, por lo tanto, contribuyendo a su integridad funcional.

Reglamento de la fagocitosis por los macr&#xF3;fagos en la neuraminidasa 1

Thymoquinone (TQ) &#x6297;&#x708E;&#x6D3B;&#x52A8;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x88AB;&#x8BC1;&#x660E;&#x5728;&#x4F53;&#x5916;&#x548C;&#x4F53;&#x5185;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;TQ &#x7684;&#x786E;&#x5207;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6D3B;&#x52A8;&#x4E2D;&#x6297;&#x708E;&#x4F5C;&#x7528;&#x4E0D;&#x662F;&#x5F88;&#x4E86;&#x89E3;&#x7684;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B0;&#x5F00;&#x53D1;&#x7684;&#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x6765;&#x68C0;&#x6D4B;&#x6D3B;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027; (Glycoconj J doi: 10.1007/s10719-009-9239-8&#xFF09;&#xFF0C;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A; TQ &#x6D3B; BMC 2 &#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x6709;&#x6CA1;&#x6709;&#x5BF9;&#x5185;&#x6BD2;&#x7D20;&#x8102;&#x591A;&#x7CD6; (LPS) &#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x5F15;&#x8D77;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x7236;&#x9ED1;&#x7C7D;&#x6CB9; (BSO) &#x548C;&#x53E6;&#x4E00;&#x6210;&#x5206;&#x7684;&#x4F1E;&#x82B1;&#x6BB5; BSO (p CY) &#x5B8C;&#x5168;&#x963B;&#x6B62; LPS &#x8BF1;&#x5BFC;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x90FD;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x5F71;&#x54CD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x53E6;&#x4E00;&#x65B9;&#x9762;&#xFF0C;TQ &#x4EE5;&#x5242;&#x91CF;&#x4F9D;&#x8D56;&#x65B9;&#x5F0F;&#x4EE5;&#x53CA;&#x5728;&#x73B0;&#x573A;&#x76F4;&#x6D41;-2.4 &#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x6D3B; BMC 2 &#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x6709;&#x529B;&#x7684;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#xFF0C;&#x952E;&#x5165; sialidosis &#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x66FC;&#x6D66;&#x6C49;&#x514B;-TLR4/MD2&#x3001; &#x4EBA;&#x80DA;&#x80CE;&#x80BE; 293&#x3001; SP1 &#x4E73;&#x817A;&#x817A;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3001; &#x4EBA;&#x7C7B; WT &#x548C; 1140F01 &#x548C; WG0544&#x3002;&#x8FBE;&#x83F2; &#xFF08;&#x78F7;&#x9178;&#x5965;&#x53F8;&#x4ED6;&#x97E6;) &#x6291;&#x5236;&#x6D3B; BMC 2 &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E; IC(50) &#x76F8;&#x6BD4;&#xFF0C;IC(50) &#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x6C28;&#x9178;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242; (2-deoxy-2,3-dehydro-N-acetylneuraminic acid) DANA 19.1 microM 0.0194 microM &#x7684; TQ &#x81F4;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x6297;-Neu1-2 &#x548C;-3 &#x6297;&#x4F53;&#x5728;&#x8BF1;&#x5BFC; TQ &#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x65E0;&#x6291;&#x5236;&#x6D3B; BMC-2 &#x548C;&#x4EBA;&#x7C7B; thp-1 &#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F46;&#x6297; Neu4 &#x6297;&#x4F53;&#x5B8C;&#x5168;&#x5757;&#x8FD9;&#x9879;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x6709;&#x6765;&#x81EA; WT &#x548C; hypomorphic &#x7EC4;&#x7EC7;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; A &#x5C0F;&#x9F20;&#x8F85;&#x52A9; Neu1 &#x865A; (NeuI &#x79D1;&#x5A01;&#x7279;&#x7B2C;&#x7EB3;&#x5C14;)&#xFF0C;&#x800C;&#x4E0D;&#x662F;&#x4ECE; Neu4 &#xFF08;Neu4 KO) &#x57FA;&#x56E0;&#x6572;&#x9664;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7684; TQ &#x6CBB;&#x7597;&#x6D3B;&#x4E3B;&#x9AA8;&#x9AD3; (BM) &#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E;&#x5173;&#x8054;&#x6709;&#x529B;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x767E;&#x65E5;&#x54B3;&#x6BD2;&#x7D20; &#xFF08;PTX&#xFF09;&#xFF0C;&#x4E00;&#x79CD;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x5242; Galphai &#x86CB;&#x767D;&#x7684; G &#x86CB;&#x767D;&#x5076;&#x8054;&#x53D7;&#x4F53; &#xFF08;&#x6C14;&#x76F8;&#xFF09; &#x5E7F;&#x6CDB;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; &#xFF08;MMP&#xFF09; galardin &#x548C;&#x54CC;&#x55EA;&#x5E94;&#x7528;&#x4E8E;&#x6D3B; BMC 2&#x3001; THP-1 &#x548C;&#x4E3B; BM &#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5B8C;&#x5168;&#x963B;&#x6B62; TQ &#x81F4;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x4E0E; GM1 &#x795E;&#x7ECF;&#x8282;&#x82F7;&#x8102;&#x5177;&#x4F53;&#x970D;&#x4E71;&#x6BD2;&#x7D20;&#x4E9A;&#x57FA; B (CTXB) &#x4EE5;&#x53CA;&#x73AF;&#x78F7;&#x9170;&#x80FA;&#x3001; &#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x6FC0;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242; K252a &#x548C;&#x8303;&#x56F4;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x5404;&#x79CD;&#x6C14;&#x76F8;&#x7F13;&#x8680;&#x5242;&#x82CF;&#x62C9;&#x660E;&#x4E0D;&#x9075;&#x5B88;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-9&#x3001; &#x53CD;-&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-9 &#x7684;&#x6297;&#x4F53;&#x548C;&#x6297; Neu4 &#x6297;&#x4F53;&#x7684;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6CA1;&#x6709;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x7684;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-3 &#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x5B8C;&#x5168;&#x963B;&#x6B62;&#x6D3B; thp-1 &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x8868;&#x8FBE; Neu4 &#x548C;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-9 &#x7684; TQ &#x81F4;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;Neu4 &#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x88C2;&#x89E3; TQ &#x6CBB;&#x7597;&#x6D3B; THP 1 &#x4ECE;&#x7EC6;&#x80DE; desialylates &#x5929;&#x7136;&#x795E;&#x7ECF;&#x8282;&#x82F7;&#x8102;&#x548C;&#x9ECF;&#x86CB;&#x767D;&#x57FA;&#x5E95;&#x3002;&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;-&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x94FE;&#x53CD;&#x5E94;&#x548C;&#x5370;&#x8FF9;&#x5206;&#x6790;&#x63ED;&#x793A;&#x5728;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x5355;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE; thp-1 &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;Neu4 &#x548C; Neu3 &#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x503C;&#x4E4B;&#x95F4;&#x6CA1;&#x6709;&#x5173;&#x8054;&#x6697;&#x793A;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x72EC;&#x7ACB;&#x7684; TQ &#x6FC0;&#x6D3B;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4E24;&#x4E2A;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269; sialidases &#x4E0D;&#x540C;&#x8F6C;&#x5F55;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x524D;&#x6240;&#x672A;&#x6709;&#x7684; Neu4 thymoquinone&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x6765;&#x81EA;&#x4FDD;&#x5065;&#x54C1;&#x9ED1;&#x5B5C;&#x7136;&#x6CB9;&#x901A;&#x8FC7;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x7684;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;&#x957F;&#x65F6;&#x7A0B;&#x589E;&#x5F3A;&#x6C14;&#x76F8;&#x5316;&#x5B66;&#x8FD8;&#x539F;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7531; TQ &#x901A;&#x8FC7;&#x819C;&#x9488;&#x5BF9; Galphai &#x4E9A;&#x57FA;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; 9 &#x6FC0;&#x6D3B;&#x53EF;&#x80FD;&#x53C2;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762; Neu4 &#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x7684;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;

&#x4ECE;&#x4FDD;&#x5065;&#x54C1;&#x9ED1;&#x5B5C;&#x7136;&#x6CB9; Thymoquinone &#x6FC0;&#x6D3B; Neu4 &#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x6D3B;&#x7684;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3001; &#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#xFF0C;&#x548C;&#x6B63;&#x5E38;&#x548C;&#x7B2C;&#x4E00;&#x7C7B;&#x901A;&#x8FC7;&#x6C14;&#x76F8;&#x5316;&#x5B66;&#x8FD8;&#x539F; Galphai &#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-9 sialidosis &#x4EBA;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;

Anti-inflammatory activities of thymoquinone (TQ) have been demonstrated in in vitro and in vivo studies. However, the precise mechanism(s) of TQ in these anti-inflammatory activities is not well understood. Using a newly developed assay to detect sialidase activity in live macrophage cells (Glycoconj J doi: 10.1007/s10719-009-9239-8 ), here we show that TQ has no inhibitory effect on endotoxin lipopolysaccharide (LPS) induced sialidase activity in live BMC-2 macrophage cells. In contrast, the parent black seed oil (BSO) and another constituent of BSO para-cymene (p-CY) completely block LPS induced sialidase activity. All of these compounds had no effect on cell viability. On the other hand, TQ induces a vigorous sialidase activity in live BMC-2 macrophage cells in a dose dependent manner as well in live DC-2.4 dendritic cells, HEK-TLR4/MD2, HEK293, SP1 mammary adenocarcinoma cells, human WT and 1140F01 and WG0544 type I sialidosis fibroblast cells. Tamiflu (oseltamivir phosphate) inhibits TQ-induced sialidase activity in live BMC-2 cells with an IC(50) of 0.0194 microM compared to an IC(50) of 19.1 microM for neuraminidase inhibitor DANA (2-deoxy-2,3-dehydro-N-acetylneuraminic acid). Anti-Neu1, -2 and -3 antibodies have no inhibition of TQ-induced sialidase activity in live BMC-2 and human THP-1 macrophage cells but anti-Neu4 antibodies completely block this activity. There is a vigorous sialidase activity associated with TQ treated live primary bone marrow (BM) macrophage cells derived from WT and hypomorphic cathepsin A mice with a secondary Neu1 deficiency (NeuI KD), but not from Neu4 knockout (Neu4 KO) mice. Pertussis toxin (PTX), a specific inhibitor of Galphai proteins of G-protein coupled receptor (GPCR) and the broad range inhibitors of matrix metalloproteinase (MMP) galardin and piperazine applied to live BMC-2, THP-1 and primary BM macrophage cells completely block TQ-induced sialidase activity. These same inhibitory effects are not observed with the GM1 ganglioside specific cholera toxin subunit B (CTXB) as well as with CTX, tyrosine kinase inhibitor K252a, and the broad range GPCR inhibitor suramin. The specific inhibitor of MMP-9, anti-MMP-9 antibody and anti-Neu4 antibody, but not the specific inhibitor of MMP-3 completely block TQ-induced sialidase activity in live THP-1 cells, which express Neu4 and MMP-9 on the cell surface. Neu4 sialidase activity in cell lysates from TQ-treated live THP-1 cells desialylates natural gangliosides and mucin substrates. RT-PCR and western blot analyses reveal no correlation between mRNA and protein values for Neu3 and Neu4 in human monocytic THP-1 cells, suggesting for the first time a varied post-transcriptional mechanism for these two mammalian sialidases independent of TQ activation. Our findings establish an unprecedented activation of Neu4 sialidase on the cell surface by thymoquinone, which is derived from the nutraceutical black cumin oil. The potentiation of GPCR-signaling by TQ via membrane targeting of Galphai subunit proteins and matrix metalloproteinase-9 activation may be involved in the activation process of Neu4 sialidase on the cell surface.

Thymoquinone from nutraceutical black cumin oil activates Neu4 sialidase in live macrophage, dendritic, and normal and type I sialidosis human fibroblast cells via GPCR Galphai proteins and matrix metalloproteinase-9.

Activit&#xE9;s anti-inflammatoires de thymoquinone (TQ) ont &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;montr&#xE9;s in vitro et in vivo. Cependant, le m&#xE9;canisme pr&#xE9;cis (s) de TQ dans ces activit&#xE9;s anti-inflammatoires n&#x26;#39;est pas bien comprise. L&#x26;#39;utilisation d&#x26;#39;un test r&#xE9;cemment mis au point pour d&#xE9;tecter l&#x26;#39;activit&#xE9; sialidase dans les cellules macrophages vivants (Glycoconj J doi: 10.1007/s10719-009-9239-8), ici nous montrons que TQ n&#x26;#39;a pas d&#x26;#39;effet inhibiteur sur la lipopolysaccharide endotoxine (LPS) d&#x26;#39;activit&#xE9; induite par la sialidase en direct BMC -2 cellules macrophages. En revanche, l&#x26;#39;huile de graine noire parent (BSO) et un autre constituant de BSO para-cym&#xE8;ne (p-CY) de bloquer compl&#xE8;tement l&#x26;#39;activit&#xE9; LPS sialidase induite. Tous ces compos&#xE9;s n&#x26;#39;a eu aucun effet sur la viabilit&#xE9; cellulaire. D&#x26;#39;autre part, TQ induit une activit&#xE9; sialidase vigoureuse dans les cellules vivantes macrophages BMC-2 d&#x26;#39;une mani&#xE8;re dose-d&#xE9;pendante aussi bien en direct DC-2.4 des cellules dendritiques, HEK-TLR4/MD2, HEK293, les cellules SP1 ad&#xE9;nocarcinome mammaire humain WT et 1140F01 et les cellules de type I WG0544 fibroblastes sialidose. Tamiflu (phosphate d&#x26;#39;oseltamivir) inhibe l&#x26;#39;activit&#xE9; sialidase TQ induite dans vivantes BMC-2 des cellules avec un circuit int&#xE9;gr&#xE9; (50) de 0,0194 microM par rapport &#xE0; un circuit int&#xE9;gr&#xE9; (50) de 19,1 pour microM inhibiteur de la neuraminidase DANA (2-d&#xE9;soxy-2 ,3-d&#xE9;shydro -N-ac&#xE9;tylneuraminique). Anti-Neu1, -2 et -3 anticorps n&#x26;#39;ont pas l&#x26;#39;inhibition de l&#x26;#39;activit&#xE9; sialidase TQ-induite en direct BMC-2 et les cellules humaines macrophages THP-1, mais l&#x26;#39;anti-Neu4 anticorps bloquer compl&#xE8;tement cette activit&#xE9;. Il s&#x26;#39;agit d&#x26;#39;une activit&#xE9; vigoureuse sialidase associ&#xE9;e &#xE0; TQ trait&#xE9;s en direct la moelle osseuse primaire (BM), les cellules macrophages d&#xE9;riv&#xE9;s de la cathepsine WT et hypomorphic A des souris ayant une d&#xE9;ficience secondaire Neu1 (NeuI KD), mais pas de Neu4 knock-out (KO Neu4) chez la souris. La toxine de pertussis (PTX), un inhibiteur sp&#xE9;cifique de prot&#xE9;ines Galphai de G-r&#xE9;cepteurs coupl&#xE9;s aux prot&#xE9;ines (RCPG) et les inhibiteurs large gamme de m&#xE9;talloprot&#xE9;inases matricielles (MMP) et la pip&#xE9;razine galardin appliqu&#xE9;e &#xE0; vivre BMC-2, THP-1 et des cellules primaires de macrophages BM bloquer compl&#xE8;tement l&#x26;#39;activit&#xE9; sialidase TQ-induite. Ces m&#xEA;mes effets inhibiteurs ne sont pas observ&#xE9;es avec le ganglioside GM1 sp&#xE9;cifique B du chol&#xE9;ra sous-unit&#xE9; toxine (ctxB) ainsi qu&#x26;#39;avec CTX, tyrosine kinase K252a, et l&#x26;#39;inhibiteur de large gamme GPCR suramine. L&#x26;#39;inhibiteur sp&#xE9;cifique de la MMP-9, l&#x26;#39;anti-MMP-9 anticorps et l&#x26;#39;anticorps anti-Neu4, mais pas l&#x26;#39;inhibiteur sp&#xE9;cifique de la MMP-3 compl&#xE8;tement l&#x26;#39;activit&#xE9; de bloc sialidase TQ induite dans vivantes cellules THP-1, qui expriment Neu4 et MMP-9 sur la surface cellulaire. Neu4 activit&#xE9; sialidase dans les lysats cellulaires de TQ-trait&#xE9;s en direct cellules THP-1 desialylates gangliosides naturels et des substrats de mucine. RT-PCR et analyses western blot n&#x26;#39;ont pas r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; de corr&#xE9;lation entre l&#x26;#39;ARNm et de prot&#xE9;ines pour les valeurs Neu3 et Neu4 dans l&#x26;#39;homme monocytaires THP-1 des cellules, sugg&#xE9;rant pour la premi&#xE8;re fois une gamme vari&#xE9;e post-transcriptionnelle m&#xE9;canisme de ces deux mammif&#xE8;res sialidases ind&#xE9;pendants de l&#x26;#39;activation TQ. Nos r&#xE9;sultats &#xE9;tablir une activation pr&#xE9;c&#xE9;dent de la sialidase Neu4 sur la surface de la cellule par thymoquinone, qui est d&#xE9;riv&#xE9; de l&#x26;#39;huile de nigelle nutraceutique noir. La potentialisation de GPCR de signalisation par TQ via la membrane des prot&#xE9;ines sous-unit&#xE9;s Galphai et la m&#xE9;talloprot&#xE9;inase matricielle-9 d&#x26;#39;activation peuvent &#xEA;tre impliqu&#xE9;s dans le processus d&#x26;#39;activation de Neu4 sialidase sur la surface de la cellule.

Thymoquinone partir d&#x26;#39;huile de cumin noir Nutraceutique Active Neu4 sialidase dans des macrophages vivants, dendritiques, et normales et cellules de type I sialidose fibroblastes humains Via GPCR prot&#xE9;ines Galphai et Matrix Metalloproteinase-9

Entz&uuml;ndungshemmende Aktivit&auml;ten der Thymoquinone (TQ) ist in in-vitro und in vivo Studien bewiesen. Die genauen Mechanismen der TQ in diese entz&uuml;ndungshemmenden Aktivit&auml;ten ist jedoch nicht gut verstanden. Mit einer neu entwickelten Assay um Sialidase Aktivit&auml;t in live Makrophagen Zellen zu erreichen (Glycoconj J Doi: 10.1007/s10719-009-9239-8), hier zeigen wir, dass TQ keine hemmende Wirkung auf Endotoxin Lipopolysaccharid (LPS) induzierte Sialidase Aktivit&auml;t in lebenden Zellen der BMC-2-Makrophagen hat. Im Gegensatz dazu blockieren die &uuml;bergeordneten schwarz Kern&ouml;l (BSO) und ein weiterer Bestandteil des BSO Para-Cymol (p-CY) vollst&auml;ndig LPS-induzierte Sialidase Aktivit&auml;t. Alle diese Verbindungen hatten keine Auswirkung auf die Zellviabilit&auml;t. Auf der anderen Seite, TQ induziert eine kr&auml;ftige Sialidase-Aktivit&auml;t in lebenden Zellen der BMC-2-Makrophagen in gewissem Dosis abh&auml;ngige als auch in lebenden DC-2.4 dendritischen Zellen, HEK-TLR4/MD2, HEK293, SP1 Mamma Adenokarzinom Zellen, menschliche WT und 1140F01 und WG0544 Typ I Sialidose L929. Tamiflu (Oseltamivir-Phosphat) hemmt Sialidase TQ-induzierte Aktivit&auml;t in lebenden Zellen, den BMC-2 mit einem IC (50) der 0.0194 MicroM im Vergleich zu einem IC (50) von 19,1 MicroM f&uuml;r Neuraminidasehemmer DANA (2-deoxy-2,3-dehydro-N-acetylneuraminic S&auml;ure). Anti-Neu1,-2 und-3 Antik&ouml;rper haben keine Hemmung der TQ-induzierte Sialidase Aktivit&auml;t in lebenden BMC-2 und menschlichen THP-1 Makrophagen Zellen aber Anti-Neu4 Antik&ouml;rper vollst&auml;ndig blockieren diese Aktivit&auml;t. Es gibt eine kr&auml;ftige Sialidase Aktivit&auml;t im Zusammenhang mit TQ behandelt Leben prim&auml;re (BM) Makrophagen Knochenmarkzellen abgeleitet von WT und hypomorphen Kathepsin A-M&auml;use mit einem sekund&auml;ren Neu1-Mangel (NeuI KD), aber nicht von Neu4 (Neu4 KO) k.o.-M&auml;use. Pertussis-Toxin (PTX), ein spezifischer Hemmer von Galphai Proteinen von G-Protein-gekoppelte Rezeptor (GPCR) und die breite Palette-Inhibitoren von Matrix-Metalloproteasen (MMP)-Galardin und Piperazin auf Leben BMC-2 angewendet, THP-1 und prim&auml;re BM Makrophagen Zellen vollst&auml;ndig blockieren Sialidase TQ-induzierte Aktivit&auml;t. Diese gleichen hemmenden Effekte sind nicht mit der GM1 Ganglioside spezifischen Cholera Toxin Untereinheit B (CTXB) sowie mit CTX, Tyrosinkinase-Hemmer der K252a und die breite Palette GPCR Inhibitor Suramin beobachtet. Die spezifischen Inhibitor von MMP-9, Anti-MMP-9-Antik&ouml;rper und Anti-Neu4 Antik&ouml;rper, aber nicht die spezifischen Inhibitor der MMP-3 komplett blockieren Sialidase TQ-induzierte Aktivit&auml;t in lebenden Zellen der THP-1, welche Neu4 und MMP-9 auf der Zelloberfl&auml;che. Neu4 Sialidase Aktivit&auml;t in Zelllysate von TQ-behandelten Leben THP-1 Zellen Desialylates nat&uuml;rliche Ganglioside und Mucin-Substrate. RT-PCR und western-Blot-Analysen zeigen keine Korrelation zwischen mRNA und Protein-Werte f&uuml;r Neu3 und Neu4 in humanen monozyt&auml;ren THP-1-Zellen, schl&auml;gt zum ersten Mal einen abwechslungsreichen Posttranskriptionale Mechanismus f&uuml;r diese zwei S&auml;ugetier-Sialidases unabh&auml;ngig von TQ-Aktivierung. Unsere Sachaufkl&auml;rung eine beispiellose Aktivierung des Neu4 Sialidase auf der Zelloberfl&auml;che von Thymoquinone, die von den Nutraceutical Schwarzk&uuml;mmel&ouml;l abgeleitet ist. Die Potenzierung von GPCR-Signalisierung von TQ &uuml;ber die Membran auf der Galphai-Untereinheit Proteine und Matrix Metalloprotease-9-Aktivierung kann bei der Aktivierung von Neu4 Sialidase auf der Zelloberfl&auml;che hinzugezogen werden.

Thymoquinone von Nutraceutical Schwarzk&uuml;mmel&ouml;l Neu4 Sialidase im Leben Makrophagen, dendritischen und normale aktiviert und Typ I Sialidose menschlichen L929 via GPCR Galphai Proteine und Matrix-Metalloproteasen-9.

Attivit&agrave; antinfiammatoria di thymoquinone (TQ) sono state dimostrate in studi in vitro e in vivo. Tuttavia, i meccanismi precisi comprendono di TQ in queste attivit&agrave; anti-infiammatorie non sono ben compreso. Utilizzando un dosaggio di recente sviluppato per rilevare attivit&agrave; sialidasi nel vivo dei macrofagi cellule (J Glycoconj doi: 10.1007/s10719-009-9239-8), qui vi mostriamo che TQ non ha alcuna attivit&agrave; sialidasi effetto inibitorio su lipopolisaccaride (LPS) di endotossina indotta in cellule vive di macrofago BMC-2. Al contrario, l&#39;olio di seme nero padre (BSO) e un altro costituente della BSO para-cimene (p-CY) bloccare completamente attivit&agrave; sialidasi indotta da LPS. Tutti questi composti ha avuto alcun effetto sulla vitalit&agrave; delle cellule. D&#39;altra parte, TQ induce un&#39;attivit&agrave; vigorosa sialidasi in cellule vive di macrofago BMC-2 in modo dose dipendente pure in diretta DC-2.4 le cellule dendritiche, HEK-TLR4/MD2, HEK293, cellule di adenocarcinoma mammario SP1, WT umano e 1140F01 e WG0544 di tipo sialidosi cellule di fibroblasti. Tamiflu (oseltamivir fosfato) inibisce l&#39;attivit&agrave; della sialidasi TQ-indotta in cellule vive di BMC-2 con un IC(50) di microM 0.0194 rispetto a un IC(50) di 19,1 microM per inibitore della neuraminidasi DANA (acido 2-deoxy-2,3-dehydro-N-acetylneuraminic). Anti-Neu1,-2 e -3 anticorpi non hanno inibizione dell&#39;attivit&agrave; sialidasi TQ-indotta in BMC-2 e umane THP-1 macrofagi cellule vive ma anticorpi anti-Neu4 completamente isolato questa attivit&agrave;. C&#39;&egrave; un&#39;attivit&agrave; vigorosa sialidasi associata TQ trattati dal vivo midollo osseo primario (BM) macrofago cellule derivate da topi catepsina A WT e hypomorphic con un deficit secondario di Neu1 (NeuI KD), ma non da topi knockout (KO Neu4) Neu4. Tossina pertosse (PTX), un inibitore specifico delle proteine Galphai della G-proteina coupled receptor (GPCR) e gli inibitori della vasta gamma di matrix metalloproteinase (MMP) galardin e piperazina applicato alla diretta BMC-2, THP-1 e le cellule primarie del macrofago BM completamente bloccano attivit&agrave; sialidasi TQ-indotta. Questi stessi effetti inibitori non vengono osservati con la subunit&agrave; del tossina di colera specifici dei gangliosidi GM1 B (CTXB), nonch&eacute; con CTX, inibitore di tirosin chinasi K252a e la vasta gamma GPCR inibitore suramina. L&#39;inibitore specifico dell&#39;anticorpo dell&#39;anticorpo e anti-Neu4 MMP-9, anti-MMP-9, ma non specifico inibitore della MMP-3 blocca completamente attivit&agrave; sialidasi TQ-indotta in cellule THP-1 vive, che esprimono Neu4 e MMP-9 sulla superficie della cellula. Neu4 sialidasi attivit&agrave; nei lisati cellulari da TQ-trattati dal vivo THP-1 cellule desialylates naturale gangliosidi e substrati di mucina. RT-PCR e western blot analisi non rivelano alcuna correlazione tra i valori di mRNA e proteine per Neu3 e Neu4 nelle cellule umane THP-1 monocitica, suggerendo per la prima volta un meccanismo di espresione vario per questi due sialidases dei mammiferi indipendente di attivazione TQ. I nostri risultati stabiliscono un&#39;attivazione senza precedenti della sialidasi Neu4 sulla superficie delle cellule di thymoquinone, che &egrave; derivato dall&#39;olio di cumino nero nutraceutico. Il potenziamento di GPCR-segnalazione da TQ tramite membrana targeting di attivazione Galphai subunit&agrave; proteine e matrix metalloproteinase-9 possa essere coinvolti nel processo di attivazione della sialidasi Neu4 sulla superficie delle cellule.

Thymoquinone dall&#39;olio di cumino nero nutraceutico attiva sialidasi Neu4 nel vivo dei macrofagi, dendritiche e normali e di tipo cellule di fibroblasti umani sialidosi via GPCR Galphai proteine e matrix metalloproteinase-9.

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Galphai&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3068;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30E1;&#x30BF;&#x30ED;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;-9&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x6A19;&#x7684;&#x819C;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;TQ&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;GPCR&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x5897;&#x5F37;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x306E;Neu4&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x6804;&#x990A;&#x88DC;&#x52A9;&#x98DF;&#x54C1;&#x30D6;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30AF;&#x30DF;&#x30F3;&#x30AA;&#x30A4;&#x30EB;&#x304B;&#x3089;Thymoquinone&#x306F;Neu4&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x3001;&#x6A39;&#x72B6;&#x7A81;&#x8D77;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;GPCR Galphai&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30E1;&#x30BF;&#x30ED;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;9&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30CE;&#x30FC;&#x30DE;&#x30EB;&#x3068;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;I&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C9;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30D2;&#x30C8;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3059;&#x308B;

Thymoquinone (TQ)&#xC758; &#xD56D; &#xC5FC;&#xC99D; &#xC81C; &#xD65C;&#xB3D9; &#xCCB4; &#xC678; in vivo &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC99D;&#xBA85; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC7A5;&#xCE58;&#xB97C; &#xC815;&#xD655;&#xD55C; &#xB9C8;&#xB354;&#xBCF4;&#xB4DC;&#xC5D0; TQ&#xC758; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD56D; &#xC5FC;&#xC99D; &#xC81C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC798; &#xC774;&#xD574; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294;&#xB2E4;. &#xC0C8;&#xB85C; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xB41C; &#xB41C; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; macrophage &#xC140;&#xC5D0; sialidase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xAC10;&#xC9C0; &#xD558; (Glycoconj J doi: 10.1007/s10719-009-9239-8), &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; TQ &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; BMC 2 macrophage &#xC140;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; lipopolysaccharide (LPS)&#xC5D0; &#xC720;&#xBC1C; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD6A8;&#xACFC; sialidase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC774; &#xC788;&#xB2E4;&#xB294; &#xD45C;&#xC2DC;. &#xBC18;&#xBA74;, &#xBD80;&#xBAA8; &#xAC80;&#xC740; &#xC885;&#xC790; &#xC624;&#xC77C; (BSO) &#xBC0F; BSO &#xD30C;&#xB77C; cymene (p-CY)&#xC758; &#xB610; &#xB2E4;&#xB978; &#xAD6C;&#xC131; &#xC644;&#xC804;&#xD788; LPS &#xC720;&#xBC1C; sialidase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xCC28;&#xB2E8;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xC874; &#xB2A5;&#xB825;&#xC5D0; &#xC544;&#xBB34;&#xB7F0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xC9C0;&#xB97C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB2E4;&#xB978; &#xD55C;&#xD3B8;&#xC73C;&#xB85C;, TQ &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; DC 2.4 &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9; &#xC758;&#xC874; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; BMC 2 macrophage &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD65C;&#xBC1C; &#xD55C; sialidase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4;, HEK-TLR4/MD2, HEK293, SP1 &#xC720; &#xBC29; &#xC120; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC;, &#xC778;&#xAC04;&#xC758; WT &#xBC0F; 1140F01 &#xBC0F; WG0544 sialidosis fibroblast &#xC138;&#xD3EC; &#xD0C0;&#xC785;. &#xD0C0;&#xBBF8;&#xD50C;&#xB8E8; (oseltamivir &#xC778;&#xC0B0; &#xC5FC;) 19.1 microM &#xC751;&#xC9D1; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; &#xB2E4; &#xB098; (2-deoxy-2,3-dehydro-N-acetylneuraminic &#xC0B0;)&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C;&#xC758; IC(50)&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; 0.0194 Microm&#xC758; IC(50)&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; BMC 2 &#xC140;&#xC5D0; TQ &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; sialidase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC548;&#xD2F0;-Neu1,-2 &#xBC0F;-3 &#xD56D; &#xCCB4; &#xC788;&#xB294; TQ &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; sialidase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xC544;&#xBB34; &#xC800;&#xD574; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; BMC 2 &#xC778;&#xAC04;&#xACFC; THP 1 macrophage &#xB2E4;&#xB978; &#xC548;&#xD2F0;-Neu4 &#xD56D; &#xCCB4; &#xC644;&#xC804;&#xD788; &#xCC28;&#xB2E8; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC140;&#xC774;&#xC774; &#xD65C;&#xB3D9;. TQ &#xCE58;&#xB8CC; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC8FC; &#xACE8; (BM) macrophage &#xC140; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xBCF4;&#xC870; Neu1 &#xACB0;&#xD54D; (NeuI KD) &#xB41C; WT &#xBC0F; hypomorphic cathepsin A &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; Neu4 &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; (Neu4 KO) &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xD65C;&#xBC1C; &#xD55C; sialidase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC774;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC31; &#xC77C; &#xD574; &#xB3C5; &#xC18C; (PTX), G-&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; Galphai &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD2B9;&#xC815; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; &#xACB0;&#xD569; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (GPCR)&#xC640; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; metalloproteinase (MMP) galardin &#xBC0F; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; BMC 2&#xC5D0; &#xC801;&#xC6A9; &#xB41C; piperazine&#xC758; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;, THP 1&#xACFC; &#xAE30;&#xBCF8; BM macrophage &#xC140; &#xC644;&#xC804;&#xD788; TQ &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; sialidase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xCC28;&#xB2E8;. CTX, &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; K252a, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; GPCR &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; suramin &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC18C;&#xB97C; GM1 ganglioside &#xD2B9;&#xC815; &#xCF5C;&#xB808;&#xB77C; &#xB3C5; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; B (CTXB)&#xC640; &#xAC19;&#xC740; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD6A8;&#xACFC; &#xAD00;&#xCC30; &#xD558;&#xC9C0;&#xB294;. MMP 9, &#xC548;&#xD2F0; MMP 9 &#xD56D; &#xCCB4; &#xBC0F; &#xC548;&#xD2F0;-Neu4 &#xD56D; &#xCCB4;&#xC758; &#xD2B9;&#xC815; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; MMP 3 &#xD558;&#xC9C0; &#xD2B9;&#xC815; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; &#xC644;&#xC804;&#xD788; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; Neu4 &#xBC0F; MMP 9 &#xC775;&#xC2A4;&#xD504;&#xB808;&#xC2A4; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; THP 1 &#xC140;&#xC5D0; TQ &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; sialidase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xCC28;&#xB2E8; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. TQ &#xCDE8;&#xAE09; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; THP-1&#xC5D0;&#xC11C; &#xC140; lysates&#xC5D0;&#xC11C; Neu4 sialidase &#xD65C;&#xB3D9; &#xC138;&#xD3EC; desialylates &#xC790;&#xC5F0; gangliosides, mucin &#xAE30;&#xD310;. RT-PCR &#xBC0F; &#xC11C;&#xCABD; &#xC624; &#xC810; &#xBD84;&#xC11D; &#xACF5;&#xAC1C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; monocytic THP 1 &#xC140;&#xC5D0; neu4&#xACFC; neu3&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; Mrna&#xC640; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAC12; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC0C1;&#xAD00; &#xAD00;&#xACC4;&#xAC00; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB450; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; sialidases TQ &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC758; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; post-transcriptional &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xCC98;&#xC74C;&#xC73C;&#xB85C; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; nutraceutical &#xBE14;&#xB799; &#xCEE4; &#xBBFC; &#xC624;&#xC77C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB418;&#xB294; thymoquinone&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; Neu4 sialidase&#xC758; &#xC804;&#xB840; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xC124;&#xC815; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; Galphai &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC0F; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; metalloproteinase 9 &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC758; &#xD0C0;&#xAC9F;&#xD305;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; TQ&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; GPCR &#xC2E0;&#xD638; potentiation &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; Neu4 sialidase&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB418;&#xC5B4;&#xC788;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Nutraceutical &#xBE14;&#xB799; &#xCEE4; &#xBBFC; &#xC624;&#xC77C;&#xC5D0;&#xC11C; Thymoquinone Neu4 sialidase &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;, &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1;, &#xBC0F; &#xC815;&#xC0C1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558; &#xACE0; &#xC720;&#xD615; I GPCR Galphai &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC0F; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; metalloproteinase-9&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; sialidosis &#xC778;&#xAC04;&#xC758; fibroblast &#xC138;&#xD3EC;.

Anti-inflamatorios actividades de timoquinona (TQ) ha sido demostrada in vitro e in vivo. Sin embargo, el mecanismo exacto (s) de TQ en estas actividades anti-inflamatorios no se entiende bien. El uso de un ensayo de reciente desarrollo para detectar la actividad sialidasa en las c&#xE9;lulas vivas, los macr&#xF3;fagos Glycoconj J doi: 10.1007/s10719-009-9239-8), aqu&#xED; se demuestra que CA no tiene ning&#xFA;n efecto inhibitorio sobre la lipopolisac&#xE1;rido endotoxina (LPS) inducida por la actividad sialidasa en vivo BMC -2 macr&#xF3;fagos. En contraste, el aceite de semilla de matriz negro (BSO) y otro componente de la BSO para cimeno (p-CY) bloquean completamente LPS actividad sialidasa inducido. Todos estos compuestos no tuvo ning&#xFA;n efecto sobre la viabilidad celular. Por otro lado, TQ induce una actividad sialidasa vigorosa en c&#xE9;lulas vivas macr&#xF3;fagos BMC-2 en una forma dependiente de dosis, as&#xED; como en vivo DC-2.4 c&#xE9;lulas dendr&#xED;ticas, HEK-TLR4/MD2, HEK293, c&#xE9;lulas de adenocarcinoma mamario SP1, humanos y WT 1140F01 y WG0544 c&#xE9;lulas de tipo I sialidosis fibroblastos. Tamiflu (oseltamivir fosfato) inhibe la actividad inducida por TQ sialidasa en vivo BMC-2 c&#xE9;lulas con un IC (50) de 0,0194 microM en comparaci&#xF3;n con un IC (50) de 19,1 microM para inhibidor de la neuraminidasa DANA (2-desoxi-2 ,3-deshidro -&#xE1;cido N-acetilneuram&#xED;nico). Anti-Neu1, -2 y -3 anticuerpos no tienen inhibici&#xF3;n de la actividad sialidasa TQ-inducida en vivo BMC-2 y humanos THP-1 macr&#xF3;fagos, sino contra la Neu4 anticuerpos bloquean completamente esta actividad. No es una actividad sialidasa vigorosa asociada a TQ en vivo de m&#xE9;dula &#xF3;sea tratada primaria (BM) los macr&#xF3;fagos derivados de la catepsina WT y hypomorphic A los ratones con una deficiencia secundaria Neu1 (NeuI KD), pero no de Neu4 nocaut (KO Neu4) ratones. La toxina pertussis (PTX), un inhibidor espec&#xED;fico de las prote&#xED;nas de los receptores de Galphai acoplados a prote&#xED;nas G (GPCR) y los inhibidores de la amplia gama de metaloproteinasas de matriz (MMP) y piperazina galardina aplicada a vivir BMC-2, THP-1 y macr&#xF3;fagos, c&#xE9;lulas primarias de BM bloquear completamente TQ-inducida por la actividad sialidasa. Estos efectos inhibitorios mismos no se observan con el gangli&#xF3;sido GM1 B espec&#xED;fico c&#xF3;lera subunidad toxina (ctxB), as&#xED; como con CTX, tirosina quinasa K252a, y la amplia gama GRCP inhibidor suramina. El inhibidor espec&#xED;fico de la MMP-9, anti-MMP-9 anticuerpos y anticuerpos anti-Neu4, pero no el inhibidor espec&#xED;fico de la MMP-3 completamente la actividad sialidasa bloque TQ inducida en vivo c&#xE9;lulas THP-1, que expresa Neu4 y MMP 9- en la superficie celular. Neu4 la actividad sialidasa en lisados &#x200B;&#x200B;celulares de TQ tratados en vivo c&#xE9;lulas THP-1 desialylates gangli&#xF3;sidos naturales y sustratos de mucina. RT-PCR y an&#xE1;lisis de Western blot revelar ninguna correlaci&#xF3;n entre los valores de ARNm y prote&#xED;na para Neu3 y Neu4 en humanos monoc&#xED;ticas THP-1 en las c&#xE9;lulas, lo que sugiere por primera vez una variada post-transcripcional mecanismo para estos dos sialidasas mam&#xED;feros independientes de activaci&#xF3;n CA. Nuestros resultados establecer una activaci&#xF3;n sin precedentes de Neu4 sialidasa en la superficie celular por timoquinona, que se deriva del aceite nutrac&#xE9;utico comino negro. La potenciaci&#xF3;n de GPCR se&#xF1;alizaci&#xF3;n por TQ a trav&#xE9;s de la membrana focalizaci&#xF3;n de prote&#xED;nas de las subunidades Galphai y matriz de activaci&#xF3;n metaloproteinasa-9 pueden estar implicados en el proceso de activaci&#xF3;n de Neu4 sialidasa en la superficie celular.

Timoquinona del aceite de Comino Negro Nutraceutical Activa Neu4 sialidasa en los macr&#xF3;fagos en vivo, dendr&#xED;ticas y normales y c&#xE9;lulas de tipo I sialidosis Humanos fibroblastos Via GPCR prote&#xED;nas Galphai y metaloproteinasas de la matriz-9

&#x5DF2;&#x62A5;&#x544A;&#x795E;&#x7ECF;&#x8425;&#x517B;&#x56E0;&#x5B50;&#x8BF1;&#x5BFC; Trk &#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x6FC0;&#x9176;&#x53D7;&#x4F53;&#x6D3B;&#x5316;&#x548C;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x5B58;&#x53CD;&#x5E94;&#x8981;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x819C;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x7684;&#x63A7;&#x5236;&#x4E0B;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x795E;&#x7ECF;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50; (NGF) &#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; TrkA &#x4EE5;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x901A;&#x8FC7;&#x819C;&#x7684;&#x6C14;&#x76F8;&#x5316;&#x5B66;&#x8FD8;&#x539F;&#x4FE1;&#x53F7; Galphai &#x4E9A;&#x57FA;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-9 (MMP-9) &#x6FC0;&#x6D3B;&#x8BF1;&#x4F7F;&#x6D3B;&#x539F;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x53CA; TrkA &#x548C; TrkB &#x8868;&#x8FBE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB; Neu1 &#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7531;&#x53D1;&#x8D77;&#x524D;&#x6240;&#x672A;&#x6709;&#x7684;&#x819C;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E00;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x6838;&#x5FC3;&#x662F; Neu1/&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-9 &#x590D;&#x6742;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; TrkA TrkA &#x8868;&#x8FBE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x5E7C;&#x7A1A;&#x521D;&#x7EA7;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x3002;&#x8FBE;&#x83F2;&#x5B8C;&#x5168;&#x963B;&#x6B62;&#x6B64;&#x6D3B; TrkA PC12 &#x7EC6;&#x80DE;&#x6CBB;&#x7597;&#x795E;&#x7ECF;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x4E0E; IC(50) &#x7684; 3.876 microM &#x4E0E;&#x968F;&#x540E;&#x6291;&#x5236;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143; Trk &#x6FC0;&#x6D3B;&#x53CA; TrkA PC12 &#x7EC6;&#x80DE;&#x7A81;&#x8D77;&#x7684;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x53D1;&#x73B0; Neu1 &#x548C;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-9 &#x4E32;&#x6270;&#x662F;&#x5371;&#x91CD;&#x548C;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x8425;&#x517B;&#x56E0;&#x5B50;&#x8BF1;&#x5BFC; Trk &#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x6FC0;&#x9176;&#x53D7;&#x4F53;&#x6D3B;&#x5316;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x3002;

Neu1 &#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x548C;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; 9 &#x76F8;&#x58F0;&#x662F;&#x795E;&#x7ECF;&#x8425;&#x517B;&#x56E0;&#x5B50;&#x6D3B;&#x5316;&#x7684; Trk &#x53D7;&#x4F53;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;

Neurotrophin-induced Trk tyrosine kinase receptor activation and neuronal cell survival responses have been reported to be under the control of a membrane associated sialidase. Here, we identify an unprecedented membrane sialidase mechanism initiated by nerve growth factor (NGF) binding to TrkA to potentiate GPCR-signaling via membrane Galphai subunit proteins and matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) activation to induce Neu1 sialidase activation in live primary neurons and TrkA- and TrkB-expressing cell lines. Central to this process is that Neu1/MMP-9 complex is bound to TrkA on the cell surface of naÃ¯ve primary neurons and TrkA-expressing cells. Tamiflu completely blocks this sialidase activity in live TrkA-PC12 cells treated with NGF with an IC(50) of 3.876 microM with subsequent inhibition of Trk activation in primary neurons and neurite outgrowth in TrkA-PC12 cells. Our findings uncover a Neu1 and MMP-9 cross-talk on the cell surface that is critically essential for neurotrophin-induced Trk tyrosine kinase receptor activation and cellular signaling.

Neu1 sialidase and matrix metalloproteinase-9 cross-talk is essential for neurotrophin activation of Trk receptors and cellular signaling.

Neurotrophine Trk activation induite par la tyrosine kinase du r&#xE9;cepteur neuronal et r&#xE9;ponses de survie cellulaire ont &#xE9;t&#xE9; signal&#xE9;s &#xE0; &#xEA;tre sous le contr&#xF4;le d&#x26;#39;une sialidase membrane associ&#xE9;e. Ici, nous identifions un m&#xE9;canisme sans pr&#xE9;c&#xE9;dent membrane sialidase initi&#xE9;e par le facteur de croissance nerveuse (NGF) se liant &#xE0; TrkA pour potentialiser GPCR de signalisation par l&#x26;#39;interm&#xE9;diaire de sous-unit&#xE9;s des prot&#xE9;ines membranaires Galphai et la matrice m&#xE9;talloprot&#xE9;inase-9 (MMP-9) pour induire l&#x26;#39;activation Neu1 activation sialidase en direct des neurones primaires et TrkA et TrkB-exprimant des lign&#xE9;es cellulaires. Au centre de ce processus est que Neu1/MMP-9 complexe est li&#xE9; &#xE0; TrkA sur la surface de la cellule de na&#xEF;fs neurones primaires et les cellules exprimant le r&#xE9;cepteur TrkA. Tamiflu bloque compl&#xE8;tement cette activit&#xE9; sialidase dans vivantes TrkA-PC12 cellules trait&#xE9;es avec NGF, avec une CI (50) de 3,876 microM &#xE0; l&#x26;#39;inhibition de l&#x26;#39;activation subs&#xE9;quente Trk dans les neurones primaires et l&#x26;#39;excroissance des neurites dans les cellules PC12 TrkA-. Nos r&#xE9;sultats d&#xE9;couvrir un Neu1 et MMP-9 de diaphonie sur la surface de la cellule qui est un &#xE9;l&#xE9;ment vital pour la neurotrophine-induite Trk kinase activation du r&#xE9;cepteur de la tyrosine et la signalisation cellulaire.

Neu1 sialidase et Matrix Metalloproteinase-9 de la Croix-talk est essentielle pour l&#x26;#39;activation des r&#xE9;cepteurs Trk neurotrophine et signalisation cellulaires

Neurotrophin-induzierte Trk Tyrosin Kinase-Aktivierung und neuronale Zelle &uuml;berleben Antworten berichtet von einer Membran verbundenen Sialidase gesteuert werden. Hier identifizieren wir einen beispiellose Membran Sialidase Mechanismus initiierten Nerv Wachstumfaktor (NGF) binden an 1q21 zu potenzieren von GPCR-Signalisierung &uuml;ber Membrane Galphai Untereinheit Proteine und Matrix Metalloprotease-9 (MMP-9) Aktivierung Neu1 Sialidase Aktivierung im Leben prim&auml;re Neuronen und Zelllinien 1q21 und TrkB-Ausdr&uuml;cken zu veranlassen. Zentrales Element dieses Prozesses ist, dass Neu1/MMP-9 Komplex auf der Zelloberfl&auml;che von naiven prim&auml;re Neuronen und 1q21-Ausdruck Zellen 1q21 gebunden ist. Tamiflu blockiert vollst&auml;ndig Sialidase T&auml;tigkeit in lebenden 1q21-PC12 Zellen mit NGF mit IC (50 ein) von 3.876 MicroM mit nachfolgenden Hemmung der Trk-Aktivierung im prim&auml;ren Neuronen und Neurit Auswuchs in 1q21-PC12 Zellen behandelt. Unsere Erkenntnisse aufdecken ein Neu1 und MMP-9 Nebensprechen auf der Zelloberfl&auml;che, die kritisch f&uuml;r Neurotrophin-induzierte Trk Tyrosin Kinase-Aktivierung und zellularen Signalisierens wichtig.

Neu1 Sialidase und Matrix-Metalloproteasen-9 Nebensprechen essentiell f&uuml;r Neurotrophin-Aktivierung von Trk-Rezeptoren und zellulare signalisieren.

Neurotrofina-indotta Trk tirosina chinasi del recettore attivazione e risposte di sopravvivenza delle cellule neuronali sono state segnalate per essere sotto il controllo di una membrana associato sialidasi. Qui, ci identifichiamo un meccanismo sialidasi membrana senza precedenti avviato dal nerve growth factor (NGF) associazione a TrkA per potenziare GPCR-segnalazione tramite membrana Galphai subunit&agrave; proteine e matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) attivazione per indurre l&#39;attivazione sialidasi Neu1 in neuroni primari dal vivo e linee cellulari che esprimono TrkA e TrkB. Centrale di questo processo &egrave; che il complesso Neu1/MMP-9 &egrave; associato a TrkA sulla superficie cellulare dei neuroni primari ingenuo e le cellule che esprimono TrkA. Tamiflu blocca completamente questa attivit&agrave; sialidasi in cellule PC12 TrkA vive trattati con NGF con un IC(50) di 3.876 microM, con conseguente inibizione della attivazione Trk in neuroni primari e crescita dei neuriti in cellule PC12 TrkA. I nostri risultati scoprono un Neu1 e MMP-9 cross-talk sulla superficie della cellula che &egrave; criticamente essenziale per Neurotrofina-indotta Trk tirosina chinasi del recettore attivazione e segnalazione cellulare.

Neu1 sialidasi e matrix metalloproteinase-9 cross-talk &egrave; essenziale per l&#39;attivazione dei recettori Trk e segnalazione cellulare Neurotrofina.

&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30C8;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x8A98;&#x767A;&#x6027;Trk&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3068;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306F;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x305F;&#x819C;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x4E0B;&#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x819C;Galphai&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3084;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x4E00;&#x6B21;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3067;Neu1&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30E1;&#x30BF;&#x30ED;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;-9&#xFF08;MMP-9&#xFF09;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;GPCR&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x5897;&#x5F37;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3042;&#x308B;TrkA&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x795E;&#x7D4C;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF08;NGF&#xFF09;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x958B;&#x59CB;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x524D;&#x4F8B;&#x306E;&#x306A;&#x3044;&#x819C;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3042;&#x308B;TrkA&#x3068;TrkB&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x3092;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x3068;&#x306A;&#x308B;&#x306E;&#x306F;Neu1/MMP-9&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306F;&#x30CA;&#x30A4;&#x30FC;&#x30D6;&#x306A;&#x4E00;&#x6B21;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3068;TrkA&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x3042;&#x308B;TrkA&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30BF;&#x30DF;&#x30D5;&#x30EB;&#x306F;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x4E00;&#x6B21;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3068;TrkA&#x306E;&#x3001;PC12&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x795E;&#x7D4C;&#x7A81;&#x8D77;&#x4F38;&#x9577;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;Trk&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x304C;3.876&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#x306E;IC&#xFF08;50&#xFF09;&#x3068;NGF&#x3067;&#x51E6;&#x7406;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x306E;&#x3042;&#x308B;TrkA-PC12&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30C8;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x8A98;&#x767A;&#x6027;Trk&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x7684;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x306E;Neu1&#x3068;MMP-9&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9;&#x30C8;&#x30FC;&#x30AF;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3002;

Neu1&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30E1;&#x30BF;&#x30ED;-9&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9;&#x30C8;&#x30FC;&#x30AF;&#x306F;&#x3001;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30C8;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x306E;Trk&#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306B;&#x5FC5;&#x9808;&#x3067;&#x3042;&#x308B;

Neurotrophin &#xC720;&#xB3C4; Trk &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBC0F; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xC874; &#xC751;&#xB2F5; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; sialidase&#xC758; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864; &#xC544;&#xB798;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xACE0; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; (NGF) &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD560; GPCR &#xC2E0;&#xD638; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC57D;&#xD6A8;&#xB97C; TrkA Galphai &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC0F; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; metalloproteinase-9 (MMP 9) &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778; TrkA TrkB &#xD45C;&#xD604; Neu1 sialidase &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558; &#xC5EC; &#xC2DC;&#xC791; &#xD558;&#xB294; &#xC804;&#xB840; &#xC5C6;&#xB294; &#xB9C9; sialidase &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0; &#xC911;&#xC559; Neu1/MMP-9 &#xB2E8;&#xC9C0; TrkA TrkA &#xD45C;&#xD604; &#xC140; &#xC21C;&#xC9C4;&#xD55C; &#xC8FC; &#xB274;&#xB7F0;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C;&#xC740; &#xC774;&#xB2E4;. &#xD0C0; &#xBBF8; &#xD50C; &#xB8E8;&#xB294; &#xC644;&#xC804;&#xD788; NGF Trk &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xAE30;&#xBCF8; &#xB274;&#xB7F0;&#xC5D0;&#xC11C; TrkA PC12 &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; neurite &#xD30C;&#xC0DD;&#xBB3C;&#xC758; &#xD6C4;&#xC18D; &#xC800;&#xD574;&#xC640; 3.876 Microm&#xC758; IC(50)&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xCE58;&#xB8CC; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; TrkA PC12 &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC774; sialidase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xCC28;&#xB2E8; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; Neu1 &#xBC0F; MMP 9 &#xC7A1;&#xB2F4; neurotrophin &#xC720;&#xB3C4; Trk &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBC0F; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBE44;&#xD310;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xD3ED;&#xB85C;.

Neu1 sialidase &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; metalloproteinase 9 &#xD06C;&#xB85C;&#xC2A4; &#xD1A0;&#xD06C; Trk &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC640; &#xC138;&#xD3EC; &#xC2E0;&#xD638; neurotrophin &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Neurotrofina inducida Trk tirosina quinasa del receptor de activaci&#xF3;n y neuronal respuestas de supervivencia de c&#xE9;lulas se ha informado a estar bajo el control de un sialidasa membrana asociada. En este sentido, identificar un mecanismo de membrana sialidasa sin precedentes iniciada por el factor de crecimiento nervioso (NGF) que se une a TrkA para potenciar GPCR se&#xF1;alizaci&#xF3;n a trav&#xE9;s de prote&#xED;nas de la membrana y la matriz de la subunidad Galphai metaloproteinasa-9 (MMP-9) para inducir la activaci&#xF3;n de la activaci&#xF3;n Neu1 sialidasa en vivo las neuronas primarias y TrkA y TrkB-que expresan las l&#xED;neas celulares. Central para este proceso es que Neu1/MMP-9 complejo se une a TrkA en la superficie celular de las neuronas primarias naive y c&#xE9;lulas que expresan TrkA. Tamiflu bloquea completamente esta actividad sialidasa en vivo TrkA-PC12 c&#xE9;lulas tratadas con NGF con un IC (50) de 3,876 microM con posterior inhibici&#xF3;n de la activaci&#xF3;n de Trk en neuronas primarias y el crecimiento neur&#xED;tico en TrkA-c&#xE9;lulas PC12. Nuestros resultados descubrir un Neu1 y MMP-9 diafon&#xED;a en la superficie celular que es cr&#xED;ticamente esencial para la neurotrofina-inducida Trk tirosina quinasa del receptor de activaci&#xF3;n y la se&#xF1;alizaci&#xF3;n celular.

Neu1 sialidasa y metaloproteinasas de la matriz-9 Diafon&#xED;a es esencial para la activaci&#xF3;n de los receptores Trk neurotrofinas y la se&#xF1;alizaci&#xF3;n celular

Thymoquinone (TQ) &#x6765;&#x81EA;&#x4FDD;&#x5065;&#x54C1;&#x9ED1;&#x5B5C;&#x7136;&#x6CB9;&#x636E;&#x62A5;&#x662F;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE; (Glycoconj J DOI 10.1007/s10719-010-9281-6) Neu4 &#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x65B0;&#x578B;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x3002;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x7684; TQ Neu4 &#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#x6D89;&#x53CA;&#x6C14;&#x76F8;&#x5316;&#x5B66;&#x8FD8;&#x539F;&#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8FC7;&#x819C;&#x9488;&#x5BF9; G&alpha;i &#x4E9A;&#x57FA;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; 9 &#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;&#x4E0E;&#x5176;&#x4ED6;&#x62A5;&#x544A;&#xFF0C;TQ &#x4E86;&#x4F53;&#x5916;&#x65E0;&#x6297;&#x708E;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; MyD88/TLR4 &#x590D;&#x6742;&#x5730;&#x5C42;&#x548C;&#x968F;&#x540E; NF&kappa;B &#x6FC0;&#x6D3B;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5173;&#x8054; TQ &#x523A;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x4E3B; (BM) &#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E;&#x9AA8;&#x9AD3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECE; WT &#x548C; Neu1 &#x7F3A;&#x9677;&#x5C0F;&#x9F20;&#x3001; &#x66FC;&#x6D66;&#x6C49;&#x514B;-TLR4/MD2 &#x7EC6;&#x80DE; BMC 2 &#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x4E0E;&#x539F;&#x53D1;&#x6027;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECE; Neu4 &#x57FA;&#x56E0;&#x6572;&#x9664;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7684; Neu4 &#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x8FBE;&#x83F2; &#xFF08;&#x78F7;&#x9178;&#x5965;&#x53F8;&#x4ED6;&#x97E6;)&#x3001; &#x767E;&#x65E5;&#x54B3;&#x6BD2;&#x7D20; &#xFF08;PTX&#xFF09;&#xFF0C;&#x4E00;&#x79CD;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x5242; G&alpha;i &#x86CB;&#x767D; G &#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x8026;&#x5408; &#xFF08;&#x6C14;&#x76F8;&#xFF09; &#x53D7;&#x4F53;&#x548C;&#x8303;&#x56F4;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x5404;&#x79CD;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; &#xFF08;MMP&#xFF09; galardin &#x5E94;&#x7528;&#x4F4F;&#x4E3B; BM &#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5B8C;&#x5168;&#x5757; TQ &#x8BF1;&#x5BFC; MyD88/TLR4 &#x590D;&#x6742;&#x5730;&#x5C42;&#x3002;&#x91C7;&#x7528;&#x514D;&#x75AB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5316;&#x5B66;&#x548C;&#x5370;&#x8FF9;&#x5206;&#x6790;&#xFF0C;&#x8FBE;&#x83F2;&#x3001; galardin &#x548C; PTX &#x6291;&#x5236; NF&kappa;B &#x6FC0;&#x6D3B;&#x4E0E; TQ &#x523A;&#x6FC0; BMC-2 &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3001; &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x66FC;&#x6D66;&#x6C49;&#x514B;-TLR4/MD2 &#x548C; WT &#x5C0F;&#x9F20;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE; BM &#x4E3B;&#x8981;&#x5173;&#x8054;&#x7684; Neu4 &#x6D3B;&#x52A8;&#x6240;&#x81F4;&#x3002;&#x5730;&#x9AD8;&#x8F9B;&#x5206;&#x6790;&#x5BF9;&#x66FC;&#x6D66;&#x6C49;&#x514B;-TLR4/MD2 &#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x63D0;&#x53D6;&#x786E;&#x8BA4;&#x6838;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x548C; DNA &#x7ED1;&#x5B9A;&#x7684; TQ &#x8BF1;&#x5BFC; NF&kappa;B &#x6FC0;&#x6D3B;&#x5185; 30 &#x5206;&#x949F; Co &#x6C89;&#x6DC0;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x53CC;&#x76F8;&#x5730;&#x63ED;&#x793A;&#x4E86;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; 9 &#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x4E2D;&#x95F4;&#x73AF;&#x8282;&#xFF0C;&#x54C8;&#x514B;&#x9488;&#x5BF9; TLR4 &#x53D7;&#x4F53;&#x8BF1;&#x5BFC; TQ Neu4 &#x6D3B;&#x52A8;&#x4E2D;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x3002;&#x4E2D;&#x592E;&#x5BF9;&#x8FD9;&#x4E00;&#x8FDB;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x5E76;&#x662F; Neu4 &#x5F62;&#x5F0F;&#x4E0E;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-9&#xFF0C;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x662F;&#x4E00;&#x79CD;&#x590D;&#x6742;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; TLR4 &#x53D7;&#x4F53;&#x3002;CD14 THP1 &#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8367;&#x5149;&#x5206;&#x5149;&#x5149;&#x5EA6;&#x8BA1;&#x5206;&#x6790;&#x6CBB;&#x7597; TQ &#x4F7F;&#x7528;&#x6D41;&#x6D41;&#x5F0F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4EEA;&#x5206;&#x6790;&#xFF0C;&#x663E;&#x793A; Neu4 &#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x8D85;&#x8FC7; 5 &#x5206;&#x949F; CD14 THP1 &#x7EC6;&#x80DE;&#x6CBB;&#x7597; TQ &#x5FEB;&#x9012;&#x7A33;&#x5B9A;&#x86CB;&#x767D;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684; Neu4&#x3001; TLR4 &#x548C; MMP9 &#x5BF9;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x9664;&#x4E86;&#x5728; 15 &#x5206;&#x949F;&#x4F7F;&#x7528;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x9635;&#x5217;&#x5256;&#x9762;&#x5206;&#x6790;&#x8840;&#x6E05; MMP9 &#x663E;&#x8457;&#x51CF;&#x5C11;&#x8D85;&#x8FC7; 30 &#x5206;&#x949F;&#xFF0C;Neu4 &#x57FA;&#x56E0;&#x6572;&#x9664;&#x5C0F;&#x9F20;&#x54CD;&#x5E94;&#x5DEE; TQ &#x751F;&#x4EA7;&#x4FC3;&#x708E;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x3001; &#x8D8B;&#x5316;&#x56E0;&#x5B50;&#x4E0E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x76F8;&#x6BD4; 5 h &#x6CBB;&#x7597;&#x540E;&#x7684;&#x6216;hypomorphic &#x7EC4;&#x7EC7;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; A &#x4E2D;&#x5B66; 90 %neu1 &#x7F3A;&#x9677;&#x5C0F;&#x9F20;&#x5C0F;&#x9F20;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x8BF1;&#x5BFC; TQ Neu4 &#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x7A7A;&#x524D;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4F20;&#x8F93;&#x6A21;&#x5F0F;&#x3002;&#x5B83;&#x6807;&#x5FD7;&#x7740;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-9 &#x4E0E; TLR4 &#x53D7;&#x4F53;&#x80DE;&#x5916;&#x533A;&#x5728;&#x590D;&#x6742;&#x5F62;&#x5F0F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x4FE1;&#x53F7;&#x5E73;&#x53F0;&#x548C;&#x5145;&#x5F53;&#x4E2D;&#x751F;&#x6210;&#x529F;&#x80FD;&#x53D7;&#x4F53;&#x4E0E;&#x968F;&#x540E; NF&kappa;B &#x6FC0;&#x6D3B;&#x548C;&#x708E;&#x75C7;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x751F;&#x4EA7;&#x4F53;&#x5185;&#x8BF1;&#x5BFC; TQ Neu4 &#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x7684;&#x4E2D;&#x4ECB;&#x73AF;&#x8282;&#x3002;

Thymoquinone &#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176; Neu4 &#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x708E;&#x75C7;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x5728;&#x4F53;&#x5185;&#x7684; NF&kappa;B&#x3002;

Thymoquinone (TQ) derived from the nutraceutical black cumin oil has been reported to be a novel agonist of Neu4 sialidase activity in live cells (Glycoconj J DOI 10.1007/s10719-010-9281-6). The activation of Neu4 sialidase on the cell surface by TQ was found to involve GPCR-signaling via membrane targeting of GÎ±i subunit proteins and matrix metalloproteinase-9 activation. Contrary to other reports, TQ had no anti-inflammatory effects in vitro. Here, we show that MyD88/TLR4 complex formation and subsequent NFÎºB activation are induced by the Neu4 activity associated with TQ-stimulated live primary bone marrow (BM) macrophage cells from WT and Neu1-deficient mice, HEK-TLR4/MD2 cells and BMC-2 macrophage cell line but not with primary macrophage cells from Neu4-knockout mice. Tamiflu (oseltamivir phosphate), pertussis toxin (PTX), a specific inhibitor of GÎ±i proteins of G-protein coupled receptor (GPCR) and the broad range inhibitor of matrix metalloproteinase (MMP) galardin applied to live primary BM macrophage cells completely block TQ-induced MyD88/TLR4 complex formation. Using immunocytochemistry and western blot analyses, Tamiflu, galardin and PTX inhibit NFÎºB activation induced by Neu4 activity associated with TQ-stimulated BMC-2 cells, HEK-TLR4/MD2 cells and primary BM macrophages from WT mice. EMSA analyses on HEK-TLR4/MD2 nuclear cell extracts confirm the nuclear localization and DNA binding of TQ-induced NFÎºB activation in a biphasic manner within 30Â min. Co-immunoprecipitation experiments reveal for the first time that MMP-9 may be an important intermediate link in the TQ-induced Neu4 activity circuitously targeting TLR4 receptors. Central to this process is that Neu4 forms a complex with MMP-9, which is already bound to TLR4 receptors. Fluorescence spectrophotometer analyses of live CD14-THP1 cells treated with TQ show Neu4 sialidase activity over 5Â min. Using flow cytometry analyses, CD14-THP1 cells treated with TQ express stable protein levels of Neu4, TLR4 and MMP9 on the cell surface over 30Â min except for a marked diminution of MMP9 at 15Â min. Using cytokine array profiling analyses of serum, Neu4-knockout mice respond poorly to TQ in producing pro-inflammatory cytokines and chemokines after 5-h treatment compared to the wild-type or hypomorphic cathepsin A mice with a secondary 90% Neu1 deficient mice. Our findings establish an unprecedented signaling paradigm for TQ-induced Neu4 sialidase activity. It signifies that MMP-9 forms an important molecular signaling platform in complex with TLR4 receptors at the ectodomain and acts as the intermediate link for TQ-induced Neu4 sialidase in generating a functional receptor with subsequent NFÎºB activation and pro-inflammatory cytokine production in vivo.

Thymoquinone-induced Neu4 sialidase activates NFÎºB in macrophage cells and pro-inflammatory cytokines in vivo.

Thymoquinone (TQ) d&#xE9;riv&#xE9; de l&#x26;#39;huile de cumin noir nutraceutique a &#xE9;t&#xE9; signal&#xE9; comme &#xE9;tant un agoniste roman de Neu4 activit&#xE9; sialidase dans les cellules vivantes (Glycoconj J DOI 10.1007/s10719-010-9281-6). L&#x26;#39;activation de la sialidase Neu4 sur la surface de la cellule par TQ a &#xE9;t&#xE9; trouv&#xE9;e &#xE0; associer RCPG-signalisation via la membrane des prot&#xE9;ines de sous-unit&#xE9;s G&#x3B1;i et la matrice m&#xE9;talloprot&#xE9;inase-9 activation. Contrairement &#xE0; d&#x26;#39;autres rapports, TQ n&#x26;#39;a eu aucun effet anti-inflammatoires in vitro. Ici, nous montrons que la formation du complexe MyD88/TLR4 et l&#x26;#39;activation subs&#xE9;quente NFkB sont induits par l&#x26;#39;activit&#xE9; Neu4 associ&#xE9;e &#xE0; TQ-stimul&#xE9; la moelle osseuse en direct primaire (BM) &#xE0; partir de cellules macrophages et WT Neu1 souris d&#xE9;ficientes, HEK-TLR4/MD2 cellules et BMC -2 lign&#xE9;e cellulaire de macrophages, mais pas avec les cellules macrophages primaires de Neu4-souris d&#xE9;ficientes en prot&#xE9;ine. Tamiflu (phosphate d&#x26;#39;oseltamivir), la toxine de pertussis (PTX), un inhibiteur sp&#xE9;cifique de prot&#xE9;ines G&#x3B1;i du r&#xE9;cepteur coupl&#xE9; aux prot&#xE9;ines G (GPCR) et l&#x26;#39;inhibiteur large &#xE9;ventail de m&#xE9;talloprot&#xE9;inases matricielles (MMP) galardin appliqu&#xE9;e &#xE0; vivre des cellules primaires de macrophages BM bloquer compl&#xE8;tement TQ- induite MyD88/TLR4 formation du complexe. Utilisation de l&#x26;#39;immunocytochimie et des analyses western blot, le Tamiflu, galardin et PTX inhiber l&#x26;#39;activation induite par NFKB Neu4 activit&#xE9; associ&#xE9;e &#xE0; TQ-stimul&#xE9; BMC-2 des cellules, des cellules et HEK-TLR4/MD2 primaires des macrophages BM de souris WT. Analyses EMSA sur HEK-TLR4/MD2 extraits cellulaires nucl&#xE9;aires confirmer la localisation nucl&#xE9;aire et liaison &#xE0; l&#x26;#39;ADN de TQ-activation induite par NFKB d&#x26;#39;une mani&#xE8;re biphasique dans les 30 minutes. Co-immunopr&#xE9;cipitation exp&#xE9;riences r&#xE9;v&#xE8;lent pour la premi&#xE8;re fois que la MMP-9 peut &#xEA;tre un lien important interm&#xE9;diaire dans la TQ-induite Neu4 activit&#xE9; d&#xE9;tours ciblage TLR4 r&#xE9;cepteurs. Au centre de ce processus est que Neu4 forme un complexe avec MMP-9, qui est d&#xE9;j&#xE0; li&#xE9; &#xE0; TLR4 r&#xE9;cepteurs. Analyses spectrophotom&#xE8;tre &#xE0; fluorescence de CD14-vivants THP1 cellules trait&#xE9;es avec TQ spectacle de l&#x26;#39;activit&#xE9; sialidase Neu4 plus de 5 min. En utilisant des analyses de cytom&#xE9;trie en flux, CD14-THP1 cellules trait&#xE9;es avec des niveaux de prot&#xE9;ines stables express TQ de Neu4, TLR4 et MMP9 sur la surface des cellules pendant 30 min, sauf pour une diminution marqu&#xE9;e de la MMP9 &#xE0; 15 min. L&#x26;#39;aide d&#x26;#39;analyses de cytokines tableau de profilage de s&#xE9;rum, Neu4-souris d&#xE9;ficientes en prot&#xE9;ine r&#xE9;agissent mal &#xE0; TQ dans la production de cytokines pro-inflammatoires et des chimiokines apr&#xE8;s 5 h de traitement par rapport &#xE0; la cathepsine de type sauvage ou hypomorphic A des souris avec un secondaire de 90% Neu1 souris d&#xE9;ficientes. Nos r&#xE9;sultats &#xE9;tablir un paradigme de signalisation sans pr&#xE9;c&#xE9;dent pour TQ-induite Neu4 activit&#xE9; sialidase. Cela signifie que les MMP-9 formes une importante plate-forme mol&#xE9;culaire de signalisation dans un complexe avec TLR4 r&#xE9;cepteurs &#xE0; l&#x26;#39;ectodomaine et agit comme interm&#xE9;diaire pour le lien TQ-induite Neu4 sialidase &#xE0; g&#xE9;n&#xE9;rer un r&#xE9;cepteur fonctionnel avec l&#x26;#39;activation de NFkB et la production subs&#xE9;quente cytokine pro-inflammatoire in vivo.

Thymoquinone induite Neu4 sialidase Active NFkB dans les cellules macrophages et cytokines pro-inflammatoires dans Vivo

Thymoquinone (TQ) abgeleitet vom Nutraceutical Schwarzk&uuml;mmel&ouml;l wurde berichtet, ein neuartiges Agonist Neu4 Sialidase Aktivit&auml;t in lebenden Zellen (Glycoconj J DOI 10.1007/s10719-010-9281-6) sein. Die Aktivierung des Neu4 Sialidase auf der Zelloberfl&auml;che von TQ wurde festgestellt, dass GPCR-Signalisierung &uuml;ber die Membran auf der G&alpha;i-Untereinheit Proteine und Matrix Metalloprotease-9-Aktivierung beinhalten. Im Gegensatz zu anderen Berichten hatte TQ keine entz&uuml;ndungshemmende Wirkung, die in-vitro. Hier zeigen wir, da&szlig; MyD88/TLR4-Komplexbildung und anschlie&szlig;ende NF&kappa;B-Aktivierung der Neu4 Aktivit&auml;t im Zusammenhang mit TQ-stimuliert Leben prim&auml;re (BM) Makrophagen Knochenmarkzellen von WT und Neu1-defizienten M&auml;usen, HEK-TLR4/MD2-Zellen und Makrophagen-Zelllinie BMC-2 aber nicht mit prim&auml;ren Makrophagen Zellen von Neu4-Knockout-M&auml;usen hervorruft. Tamiflu (Oseltamivir-Phosphat), Pertussis-Toxin (PTX), einen spezifischen Hemmer von G&alpha;i Proteinen von G-Protein-gekoppelte Rezeptoren (GPCR) und die breite Palette-Inhibitor der Matrix-Metalloproteasen (MMP)-Galardin angewendet, um prim&auml;re BM Makrophagen Zellen vollst&auml;ndig Block TQ-induzierte MyD88/TLR4-Komplexbildung zu leben. Mit Immunzytochemie und western-Blot Analysen, hemmen Tamiflu, Galardin und PTX NF&kappa;B-Aktivierung von Neu4 Aktivit&auml;t im Zusammenhang mit TQ-stimuliert BMC-2 Zellen, HEK-TLR4/MD2 Zellen und prim&auml;re BM Makrophagen aus WT M&auml;use induziert. EMSA Analysen auf HEK-TLR4/MD2 atomare Zelle, Extrakte best&auml;tigen, dass die nukleare Lokalisierung und DNA-Bindung der TQ-induzierte NF&kappa;B-Aktivierung in gewissem biphasische innerhalb 30 min. Co-Immunopr&auml;zipitation Experimente zum ersten Mal zu offenbaren, dass MMP-9 m&ouml;glicherweise ein wichtiges Zwischenglied in der TQ-induzierte Neu4-Aktivit&auml;t auf Umwegen TLR4-Rezeptoren. Zentrale zu diesem Prozess Neu4 bildet einen Komplex mit MMP-9, die bereits an TLR4-Rezeptor gebunden ist. Fluoreszenz-Spektralphotometer-Analysen von lebenden Zellen in Verwendung CD14-THP1 behandelt mit TQ zeigen Neu4 Sialidase Aktivit&auml;t mehr als 5 min. Using flie&szlig;en Cytometry Analysen, Verwendung CD14-THP1 Zellen behandelt mit TQ ausdr&uuml;ckliche stabilen Protein-Ebene Neu4, TLR4 und MMP9 auf der Zelle Oberfl&auml;che &amp;gt; 30 min bis auf eine markierte Verringerung der MMP9 bei 15 min. Using Cytokine Array Profilerstellung Analysen von Serum, Neu4-Knockout-M&auml;usen reagieren schlecht auf TQ Produktion Pro-inflammatorische Zytokine und Chemokine nach 5-h-Behandlung im Vergleich zu den Wildtyp oder hypomorphen Kathepsin A M&auml;use mit einer sekund&auml;ren 90 % Neu1 unzul&auml;nglichen M&auml;usen. Unsere Sachaufkl&auml;rung eine beispiellose Signalling Paradigma f&uuml;r TQ-induzierte Neu4 Sialidase Aktivit&auml;t. Es bedeutet, dass MMP-9 eine wichtige Molekulare Signalling-Plattform im Komplex mit TLR4-Rezeptoren an den APPs&alpha; bildet und als Zwischenglied f&uuml;r TQ-induzierte Neu4 Sialidase fungiert bei der Erzeugung eines funktionellen Rezeptors mit anschlie&szlig;ende NF&kappa;B-Aktivierung und Pro-inflammatorische Zytokin-Produktion in-vivo.

Thymoquinone induziert Neu4 Sialidase aktiviert NF&kappa;B in Makrophagen Zellen und Pro-inflammatorische Zytokine in-vivo.

Thymoquinone (TQ) derivati dall&#39;olio di cumino nero nutraceutico &egrave; stato segnalato per essere un romanzo agonista di attivit&agrave; sialidasi Neu4 in cellule vive (Glycoconj J DOI 10.1007/s10719-010-9281-6). L&#39;attivazione della sialidasi Neu4 sulla superficie delle cellule da TQ &egrave; stato trovato a coinvolgere GPCR-segnalazione tramite membrana targeting di attivazione G&alpha;i subunit&agrave; proteine e matrix metalloproteinase-9. Contrariamente alle altre relazioni, TQ ha avuto effetti anti-infiammatori in vitro. Qui, ci mostra che MyD88/TLR4 formazione complessa e successiva attivazione di NF&kappa;B sono indotte dall&#39;attivit&agrave; Neu4 associati con TQ-stimolata dal vivo primaria cellule del midollo osseo (BM) macrofago dai topi WT e deficit di Neu1, le cellule HEK-TLR4/MD2 e BMC-2 macrofago cella linea, ma non con cellule macrofagi primari da topi knockout Neu4. Tamiflu (oseltamivir fosfato), tossina di pertussis (PTX), un inibitore specifico delle proteine G&alpha;i della G-proteina coupled receptor (GPCR) e l&#39;inibitore della vasta gamma di matrix metalloproteinase (MMP) galardin applicato per vivere cellule primarie di macrofago BM blocco completamente formazione complesso TLR4/MyD88 TQ-indotta. Mediante analisi western blot e immunocitochimica, Tamiflu, galardin e PTX inibire l&#39;attivazione di NF&kappa;B indotta da Neu4 attivit&agrave; associate TQ-stimolato BMC-2 cellule, le cellule HEK-TLR4/MD2 e macrofagi BM primari da topi WT. Analisi EMSA su cellule nucleari HEK-TLR4/MD2 estratti confermano che la localizzazione nucleare e DNA binding di attivazione indotta da TQ NF&kappa;B in maniera bifasica entro 30 min Co-immunoprecipitazione esperimenti rivelano per la prima volta che la MMP-9 pu&ograve; essere un importante collegamento intermedio nell&#39;attivit&agrave; Neu4-TQ-induced tortuosamente targeting TLR4 recettori. Centrale di questo processo &egrave; che Neu4 forma un complesso con MMP-9, che &egrave; gi&agrave; associato a recettori TLR4. Analisi spettrofotometro fluorescenza delle cellule CD14-THP1 live trattati con TQ mostrano Neu4 sialidasi attivit&agrave; oltre 5 min utilizzando analisi di citometria a flusso, le cellule CD14-THP1 trattati con stabile espresso TQ livelli della proteina di Neu4, TLR4 e MMP9 sul cellulare di superficie oltre 30 min ad eccezione di una marcata diminuzione di MMP9 a 15 min usando cytokine matrice profiling analisi del siero, topi knockout Neu4 rispondono male a TQ nella produzione di citochine pro-infiammatorie e chemochine dopo trattamento di 5 h rispetto al wild-type o topi di catepsina A hypomorphic con un secondario topi carenti di 90% Neu1. I nostri risultati stabiliscono un paradigma di segnalazione senza precedenti per attivit&agrave; sialidasi Neu4 TQ-indotta. Significa che la MMP-9 costituisce un&#39;importante piattaforma di segnalazione molecolare nel complesso TLR4 recettori presso il ectodomain e funge da collegamento intermedio per sialidasi Neu4 TQ-indotta nella generazione di un recettore funzionale con conseguente attivazione di NF&kappa;B e produzione di citochine pro-infiammatorie in vivo.

Thymoquinone-induced Neu4 sialidasi attiva NF&kappa;B in macrofago cellule e le citochine pro-infiammatorie in vivo.

&#x6804;&#x990A;&#x88DC;&#x52A9;&#x98DF;&#x54C1;&#x30D6;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30AF;&#x30DF;&#x30F3;&#x6CB9;&#x7531;&#x6765;&#x306E;Thymoquinone&#xFF08;TQ&#xFF09;&#x306F;&#x751F;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;Neu4&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#xFF08;Glycoconj J DOI 10.1007/s10719-010-9281-6&#xFF09;&#x306E;&#x65B0;&#x898F;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; TQ&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;Neu4&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306F;G&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3068;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30E1;&#x30BF;&#x30ED;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;-9&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x6A19;&#x7684;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x3092;&#x7D4C;&#x7531;&#x3057;&#x3066;GPCR&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x4F34;&#x3046;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5224;&#x660E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4ED6;&#x306E;&#x5831;&#x544A;&#x306B;&#x53CD;&#x3057;&#x3066;&#x3001;TQ&#x306F;&#x3001;in vitro&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x6297;&#x708E;&#x75C7;&#x52B9;&#x679C;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;MyD88/TLR4&#x8907;&#x200B;&#x200B;&#x5408;&#x4F53;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x306E;NF&#x3BA;B&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x200B;&#x200B;&#x306F;&#x3001;TQ-&#x523A;&#x6FC0;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x9AA8;&#x9AC4;&#xFF08;BM&#xFF09;WT&#x3068;Neu1&#x6B20;&#x640D;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3001;HEK-TLR4/MD2&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;BMC&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;Neu4&#x6D3B;&#x52D5;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;-2&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;Neu4&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x4E3B;&#x306A;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x30BF;&#x30DF;&#x30D5;&#x30EB;&#xFF08;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x30AA;&#x30BB;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30D3;&#x30EB;&#xFF09;&#x3001;&#x767E;&#x65E5;&#x54B3;&#x6BD2;&#x7D20;&#xFF08;PTX&#xFF09;&#x3001;G&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5171;&#x5F79;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#xFF08;GPCR&#xFF09;&#x3068;galardin&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA;BM&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x751F;&#x304D;&#x3066;&#x9069;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30E1;&#x30BF;&#x30ED;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;MMP&#xFF09;&#x306E;&#x5E83;&#x7BC4;&#x306A;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306E;G&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306F;&#x3001;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;TQ- MyD88/TLR4&#x8907;&#x200B;&#x200B;&#x5408;&#x4F53;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x7D30;&#x80DE;&#x5316;&#x5B66;&#x3068;&#x30A6;&#x30A7;&#x30B9;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C8;&#x5206;&#x6790;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30BF;&#x30DF;&#x30D5;&#x30EB;&#x3001;galardin&#x3068;PTX&#x306F;&#x3001;TQ-&#x523A;&#x6FC0;BMC-2&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;HEK-TLR4/MD2&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;WT&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x4E3B;&#x306A;BM&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;Neu4&#x6D3B;&#x52D5;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;NF&#x3BA;B&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x3002; HEK-TLR4/MD2&#x6838;&#x7D30;&#x80DE;&#x62BD;&#x51FA;&#x7269;&#x306B;EMSA&#x5206;&#x6790;&#x3067;&#x306F;&#x3001;30&#x5206;&#x4EE5;&#x5185;&#x306B;&#x76F8;&#x6027;&#x7684;&#x306B;TQ-&#x8A98;&#x5C0E;NF&#x3BA;B&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x6838;&#x5C40;&#x5728;&#x3068;DNA&#x7D50;&#x5408;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5171;&#x514D;&#x75AB;&#x6C88;&#x964D;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3067;&#x306F;&#x3001;MMP-9&#x306F;circuitously TLR4&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x6A19;&#x7684;&#x3068;TQ-&#x8A98;&#x5C0E;Neu4&#x6D3B;&#x6027;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x4E2D;&#x9593;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x521D;&#x3081;&#x3066;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x4E2D;&#x5FC3;Neu4&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x65E2;&#x306B;TLR4&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3055;&#x308C;&#x305F;MMP-9&#x3001;&#x3068;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002; TQ&#x3067;&#x51E6;&#x7406;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;CD14-THP1&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x5206;&#x5149;&#x5206;&#x6790;&#x3067;&#x306F;&#x3001;5&#x5206;&#x9593;&#x306B;&#x308F;&#x305F;&#x3063;&#x3066;Neu4&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30E1;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x89E3;&#x6790;&#x3001;15&#x5206;&#x3067;MMP9&#x306E;&#x9855;&#x8457;&#x306A;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3092;&#x9664;&#x3044;&#x3066;30&#x5206;&#x9593;&#x304B;&#x3051;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x306E;Neu4&#x3001;TLR4&#x3068;MMP9&#x306E;TQ&#x6025;&#x884C;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x51E6;&#x7406;&#x3055;&#x308C;&#x305F;CD14-THP1&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x8840;&#x6E05;&#x4E2D;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x5206;&#x6790;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x3001;Neu4&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x30BB;&#x30AB;&#x30F3;&#x30C0;&#x30EA;90&#x30D1;&#x30FC;&#x30BB;&#x30F3;&#x30C8;Neu1&#x6B20;&#x640D;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3068;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x307E;&#x305F;&#x306F;hypomorphic&#x30AB;&#x30C6;&#x30D7;&#x30B7;&#x30F3;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;5&#x6642;&#x9593;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x5F8C;&#x306B;&#x708E;&#x75C7;&#x6027;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30B1;&#x30E2;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x306B;TQ&#x306B;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x3002;&#x4ECA;&#x56DE;&#x306E;&#x77E5;&#x898B;&#x306F;&#x3001;TQ-&#x8A98;&#x5C0E;Neu4&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x524D;&#x4F8B;&#x306E;&#x306A;&#x3044;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x30D1;&#x30E9;&#x30C0;&#x30A4;&#x30E0;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x306E;NF&#x3BA;B&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x200B;&#x200B;&#x3068;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x524D;&#x708E;&#x75C7;&#x6027;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x7523;&#x751F;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;TQ-&#x8A98;&#x5C0E;Neu4&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x4E2D;&#x9593;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3068;&#x884C;&#x70BA;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;TLR4&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3068;&#x306E;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5206;&#x5B50;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x305D;&#x306E;MMP-9&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x610F;&#x5473;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Thymoquinone&#x8A98;&#x8D77;Neu4&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x3067;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x708E;&#x75C7;&#x6027;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x3067;NF&#x3BA;B&#x3092;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;

Thymoquinone (TQ) nutraceutical &#xBE14;&#xB799; &#xCEE4; &#xBBFC; &#xC624;&#xC77C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C;&#xC740; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC140; (Glycoconj J DOI 10.1007/s10719-010-9281-6)&#xC5D0;&#xC11C; Neu4 sialidase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xACE0; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. TQ &#xD558; &#xC5EC; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; Neu4 sialidase&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; G&alpha;i &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; metalloproteinase 9 &#xC815;&#xD488; &#xC778;&#xC99D;&#xC758; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; GPCR &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB410;&#xB2E4;. &#xB2E4;&#xB978; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;&#xC5D0; &#xBC18;&#xD558;&#xB294; TQ &#xCCB4; &#xC678; &#xD56D; &#xC5FC;&#xC99D; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC5C6;&#xC774; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; MyD88/TLR4 &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xD615;&#xC131; &#xBC0F; &#xD6C4;&#xC18D; NF&kappa;B &#xD65C;&#xC131;&#xD654; TQ &#xC790;&#xADF9; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC8FC; &#xACE8; (BM) macrophage &#xC140; WT &#xBC0F; Neu1 &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; m d HEK TLR4 2/&#xC140;&#xC640; BMC 2 macrophage &#xC140; &#xB77C;&#xC778; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xAE30;&#xBCF8; macrophage &#xC140; Neu4 &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; Neu4 &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xBC1C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD0C0;&#xBBF8;&#xD50C;&#xB8E8; (oseltamivir &#xC778;&#xC0B0; &#xC5FC;), &#xBC31; &#xC77C; &#xD574; &#xB3C5; &#xC18C; (PTX), G-&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; G&alpha;i &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD2B9;&#xC815; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; &#xACB0;&#xD569; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (GPCR)&#xC640; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; metalloproteinase (MMP) galardin&#xC758; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; &#xC8FC;&#xC694; BM macrophage &#xC140; &#xBE14;&#xB85D; &#xC644;&#xC804;&#xD788; TQ &#xC720;&#xB3C4; MyD88/TLR4 &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xD615;&#xC131; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xC5D0; &#xC801;&#xC6A9;. Immunocytochemistry &#xC11C;&#xCABD; &#xC624; &#xC810; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xD0C0; &#xBBF8; &#xD50C; &#xB8E8;, galardin &#xBC0F; PTX TQ &#xC790;&#xADF9; BMC 2 &#xC804;&#xC9C0;&#xC640; HEK-TLR4/MD2 &#xC140; WT &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC8FC;&#xC694; BM &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; Neu4 &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; NF&kappa;B &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. EMSA &#xBD84;&#xC11D; m d HEK TLR4 2/&#xD575; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xCD94;&#xCD9C; &#xBB3C; &#xD655;&#xC778; &#xD575; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xBC0F; 30 &#xBD84; Co immunoprecipitation &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC774;&#xB0B4; &#xB098;&#xC544;&#xC84C;&#xB2E4; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC5D0;&#xC11C; TQ &#xC720;&#xB3C4; NF&kappa;B &#xC815;&#xD488; &#xC778;&#xC99D; DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; MMP 9 circuitously TLR4 &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB97C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; Neu4 TQ &#xC720;&#xB3C4; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC911;&#xAC04; &#xB9C1;&#xD06C; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xCC98;&#xC74C;&#xC73C;&#xB85C; &#xACF5;&#xAC1C;. &#xC774; &#xACFC;&#xC815;&#xC758; &#xC911;&#xC2EC; TLR4 &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C; Neu4 MMP 9, &#xC774;&#xBBF8; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xD615;&#xD0DC;. &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; CD14-THP1 &#xC140;&#xC758; &#xD615;&#xAD11; &#xBD84; &#xAD11; &#xAD11;&#xB3C4; &#xACC4; &#xBD84;&#xC11D;&#xC73C;&#xB85C; &#xCE58;&#xB8CC; TQ &#xD45C;&#xC2DC; Neu4 sialidase &#xD65C;&#xB3D9; 5 &#xBD84; &#xC774;&#xC0C1; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD750;&#xB984; cytometry &#xBD84;&#xC11D;, CD14-THP1 &#xC138;&#xD3EC; &#xCE58;&#xB8CC; TQ &#xC775;&#xC2A4;&#xD504;&#xB808;&#xC2A4; &#xC548;&#xC815; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD504;&#xB85C; &#xC5FC;&#xC99D; &#xC131; cytokines, chemokines &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; 5-h &#xCE58;&#xB8CC; &#xD6C4;&#xC5D0; TQ&#xB97C; &#xC81C;&#xB300;&#xB85C; Neu4 &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC751;&#xB2F5; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC218;&#xC900;&#xC758; Neu4, TLR4 &#xBC0F; &#xC140; MMP9 &#xD45C;&#xBA74; MMP9 &#xD608; &#xCCAD; &#xBD84;&#xC11D; &#xD504;&#xB85C; &#xD30C;&#xC77C;&#xB9C1; 15 &#xBD84; &#xC0AC;&#xC6A9; cytokine &#xBC30;&#xC5F4;&#xC5D0; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xAC10;&#xC18C;&#xB97C; &#xC81C;&#xC678; &#xD558; &#xACE0; 30 &#xBD84; &#xC774;&#xC0C1;, &#xB610;&#xB294; hypomorphic &#xBCF4;&#xC870; 90 %neu1 &#xACB0;&#xD54D; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; cathepsin A &#xC950;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; TQ &#xC720;&#xB3C4; Neu4 sialidase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC804;&#xB840; &#xC5C6;&#xB294; &#xC2E0;&#xD638; &#xD328;&#xB7EC;&#xB2E4;&#xC784;&#xC744; &#xC124;&#xC815;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. MMP 9 TLR4 &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB294; ectodomain&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xBD84;&#xC790; &#xC2E0;&#xD638; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC;&#xC744; &#xD615;&#xC131; &#xD558; &#xACE0; &#xD6C4;&#xC18D; NF&kappa;B &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC640; &#xD504;&#xB85C;-&#xC5FC;&#xC99D; &#xC131; cytokine &#xC0DD;&#xC0B0; in vivo &#xAE30;&#xB2A5; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC0DD;&#xC131;&#xC5D0; TQ &#xC720;&#xB3C4; Neu4 sialidase&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xAC04; &#xB9C1;&#xD06C;&#xB85C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Neu4 sialidase Thymoquinone&#xC744; &#xC774;&#xC6A9;&#xD55C; NF&kappa;B macrophage &#xC140; &#xD504;&#xB85C; &#xC5FC;&#xC99D; &#xC131; cytokines in vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Timoquinona (TQ) derivado del aceite de comino negro nutrac&#xE9;utico ha sido informado de que un agonista de la novela de la actividad sialidasa Neu4 en c&#xE9;lulas vivas (DOI 10.1007/s10719-010-9281-6 Glycoconj J). La activaci&#xF3;n de Neu4 sialidasa en la superficie celular por TQ se encontr&#xF3; que implican a GPCR se&#xF1;alizaci&#xF3;n a trav&#xE9;s de la membrana focalizaci&#xF3;n de prote&#xED;nas de las subunidades G&#x3B1;i y la matriz metaloproteinasa-9 de activaci&#xF3;n. A diferencia de otros informes, CA no tiene efectos anti-inflamatorios in vitro. Aqu&#xED;, mostramos que MyD88/TLR4 la formaci&#xF3;n de complejos y la activaci&#xF3;n de NFkB posteriores son inducidos por la actividad asociada con Neu4 TQ-estimulado la m&#xE9;dula &#xF3;sea en vivo primaria (BM) los macr&#xF3;fagos de ratones WT y deficientes Neu1, las c&#xE9;lulas HEK-TLR4/MD2 y BMC -2 l&#xED;nea celular de macr&#xF3;fagos, pero no con los macr&#xF3;fagos primarios de los ratones knock-out Neu4. Tamiflu (oseltamivir fosfato), la toxina pertussis (PTX), un inhibidor espec&#xED;fico de prote&#xED;nas G&#x3B1;i de receptor acoplado a prote&#xED;na G (GPCR) y el inhibidor de la amplia gama de metaloproteinasas de matriz (MMP) galardina aplicado en las c&#xE9;lulas primarias de los macr&#xF3;fagos BM bloquear completamente TQ- inducida MyD88/TLR4 formaci&#xF3;n del complejo. Utilizando inmunocitoqu&#xED;mica y an&#xE1;lisis de Western blot, el Tamiflu, galardina y PTX inhibir la activaci&#xF3;n de NFkB inducida por Neu4 actividad asociada con la CA-estimulado BMC-2 c&#xE9;lulas, las c&#xE9;lulas HEK-TLR4/MD2 y primaria macr&#xF3;fagos de ratones WT BM. An&#xE1;lisis de la EMSA en extractos de c&#xE9;lulas nucleares HEK-TLR4/MD2 confirmar la localizaci&#xF3;n nuclear y de uni&#xF3;n al ADN de la CA-inducida por la activaci&#xF3;n NFkB en una forma bif&#xE1;sica en 30 minutos. Co-inmunoprecipitaci&#xF3;n experimentos revelan por primera vez que la MMP-9 puede ser un enlace intermedio importante en la CA inducida Neu4 actividad tortuosamente focalizaci&#xF3;n TLR4 receptores. Centro de este proceso es que Neu4 forma un complejo con la MMP-9, que ya est&#xE1; enlazado a receptores TLR4. An&#xE1;lisis espectrofot&#xF3;metro de fluorescencia de vivos CD14-THP1 c&#xE9;lulas tratadas con TQ actividad sialidasa muestran Neu4 durante 5 min. El uso de an&#xE1;lisis de citometr&#xED;a de flujo, CD14-THP1 c&#xE9;lulas tratadas con los niveles de prote&#xED;na TQ expresas estables de Neu4, TLR4 y MMP9 en la superficie celular durante 30 minutos a excepci&#xF3;n de una marcada disminuci&#xF3;n de MMP9 a los 15 min. Utilizando an&#xE1;lisis de perfiles de citoquinas de la matriz de suero, Neu4 ratones knock-out no responden bien a la CA en la producci&#xF3;n de citoquinas pro-inflamatorias y quimiocinas despu&#xE9;s de 5-h de tratamiento en comparaci&#xF3;n con la catepsina de tipo salvaje o hypomorphic A los ratones con un intermedio 90% Neu1 ratones deficientes. Nuestros resultados establecen un paradigma sin precedentes para la se&#xF1;alizaci&#xF3;n de CA inducida por la actividad sialidasa Neu4. Significa que la MMP-9 forma una importante plataforma de se&#xF1;alizaci&#xF3;n molecular en el complejo con TLR4 receptores en el ectodominio y act&#xFA;a como el eslab&#xF3;n intermedio de CA inducida Neu4 sialidasa en la generaci&#xF3;n de un receptor funcional con la activaci&#xF3;n de NFkB posterior y pro-inflamatorias producci&#xF3;n de citoquinas in vivo.

Timoquinona inducida Neu4 sialidasa activa NFkB en las c&#xE9;lulas de los macr&#xF3;fagos y las citoquinas pro-inflamatorias en Vivo

(TLRs) &#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269; Toll &#x6837;&#x53D7;&#x4F53;&#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8DEF;&#x597D;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5176;&#x4E2D; TLRs &#x88AB;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x540E;&#x914D;&#x4F53;&#x7ED3;&#x5408;&#x4ECD;&#x5DEE;&#x5B9A;&#x4E49;&#x7684;&#x786E;&#x5207;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x9053;&#x4E86;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B0;&#x578B;&#x819C;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x63A7;&#x5236;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x914D;&#x4F53;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x5176;&#x5355;&#x53CD;&#x8BF1;&#x4F7F;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x795E;&#x7ECF;&#x6C28;&#x9178;&#x9176;-1 (Neu1) &#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#xFF0C;&#x6765;&#x5F71;&#x54CD;&#x53D7;&#x4F53; desialylation &#x548C;&#x968F;&#x540E;&#x8BF1;&#x4F7F;&#x5355;&#x53CD;&#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x548C;&#x751F;&#x4EA7;&#x7684;&#x4E00;&#x6C27;&#x5316;&#x6C2E;&#x548C;&#x708E;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x7684;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x548C;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x5355;&#x53CD; &alpha;-2&#xFF0C;3-&#x553E;&#x6DB2;&#x6B8B;&#x7559;&#xFF0C;Neu1 &#x5C06;&#x88AB;&#x89C6;&#x4E3A;&#x6C34;&#x89E3;&#x7684;&#x5177;&#x4F53;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x4FE1;&#x53F7;&#x6A21;&#x5F0F;&#x53D1;&#x8D77;&#x7684;&#x5185;&#x6BD2;&#x7D20;&#x8102;&#x591A;&#x7CD6; (LPS) &#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; TLR4 &#x8981;&#x52A0;&#x5F3A; G &#x86CB;&#x767D;&#x5076;&#x8054;&#x53D7;&#x4F53; (&#x6C14;&#x76F8;) &#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8FC7;&#x819C; G&alpha;(i) &#x4E9A;&#x57FA;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-9 (MMP9) &#x6FC0;&#x6D3B;&#xFF0C;&#x4FC3;&#x4F7F; Neu1 &#x819C;&#x3002;&#x4E2D;&#x592E;&#x5BF9;&#x8FD9;&#x4E00;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x662F;&#x4E00;&#x4E2A; Neu1 MMP9 &#x590D;&#x6742;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; TLR4 &#x5E7C;&#x7A1A;&#x7684;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x3002;MMP9 &#x548C;&#x6C14;&#x76F8;&#x5316;&#x5B66;&#x8FD8;&#x539F; G&alpha; (i) &#x7684;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x6291;&#x5236;-&#x4FE1;&#x53F7;&#x86CB;&#x767D;&#x8102;&#x591A;&#x7CD6;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684; Neu1 &#x5757;&#x6D3B;&#x52A8;&#x548C; NF&kappa;B &#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;&#x6C89;&#x9ED8;&#x4F7F;&#x7528;&#x6162;&#x75C5;&#x6BD2; MMP9 shRNA &#x8F6C;&#x5BFC;&#x6216; siRNA &#x8F6C;&#x67D3;&#x7684;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C; MMP9 MMP9 mRNA &#x6572;&#x539F;&#x53D1;&#x6027;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x663E;&#x8457;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684; Neu1 &#x6D3B;&#x52A8;&#x548C; NF&kappa;B &#x6FC0;&#x6D3B;&#x4E0E;&#x8102;&#x591A;&#x7CD6;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x63ED;&#x793A;&#x65B0;&#x578B; Neu1 &#x548C; MMP9-&#x76F8;&#x58F0;&#x8054;&#x76DF;&#x4E0E; TLR4 &#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x914D;&#x4F53;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684; TLRs &#x548C;&#x968F;&#x540E;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x5206;&#x5B50;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x5E73;&#x53F0;&#x3002;

Neu1 &#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x548C;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; 9 &#x76F8;&#x58F0;&#x662F; Toll &#x6837;&#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x3002;

The signaling pathways of mammalian Toll-like receptors (TLRs) are well characterized, but the precise mechanism(s) by which TLRs are activated upon ligand binding remains poorly defined. Recently, we reported a novel membrane sialidase-controlling mechanism that depends on ligand binding to its TLR to induce mammalian neuraminidase-1 (Neu1) activity, to influence receptor desialylation, and subsequently to induce TLR receptor activation and the production of nitric oxide and proinflammatory cytokines in dendritic and macrophage cells. The Î±-2,3-sialyl residue of TLR was identified as the specific target for hydrolysis by Neu1. Here, we report a membrane signaling paradigm initiated by endotoxin lipopolysaccharide (LPS) binding to TLR4 to potentiate G protein-coupled receptor (GPCR) signaling via membrane GÎ±(i) subunit proteins and matrix metalloproteinase-9 (MMP9) activation to induce Neu1. Central to this process is that a Neu1-MMP9 complex is bound to TLR4 on the cell surface of naive macrophage cells. Specific inhibition of MMP9 and GPCR GÎ±(i)-signaling proteins blocks LPS-induced Neu1 activity and NFÎºB activation. Silencing MMP9 mRNA using lentivirus MMP9 shRNA transduction or siRNA transfection of macrophage cells and MMP9 knock-out primary macrophage cells significantly reduced Neu1 activity and NFÎºB activation associated with LPS-treated cells. These findings uncover a molecular organizational signaling platform of a novel Neu1 and MMP9 cross-talk in alliance with TLR4 on the cell surface that is essential for ligand activation of TLRs and subsequent cellular signaling.

Neu1 sialidase and matrix metalloproteinase-9 cross-talk is essential for Toll-like receptor activation and cellular signaling.

Les voies de signalisation de mammif&#xE8;res r&#xE9;cepteurs Toll-like (TLR) sont bien caract&#xE9;ris&#xE9;s, mais le m&#xE9;canisme pr&#xE9;cis (s) par lequel les TLR sont activ&#xE9;s lors de la liaison ligand reste mal d&#xE9;finie. R&#xE9;cemment, nous avons enregistr&#xE9; une nouvelle membrane sialidase contr&#xF4;le m&#xE9;canisme qui d&#xE9;pend de la liaison du ligand &#xE0; son TLR d&#x26;#39;induire l&#x26;#39;activit&#xE9; des mammif&#xE8;res neuraminidase-1 (Neu1), d&#x26;#39;influencer d&#xE9;sialylation r&#xE9;cepteur, et par la suite pour induire l&#x26;#39;activation des r&#xE9;cepteurs TLR et la production d&#x26;#39;oxyde nitrique et pro-inflammatoires cytokines dans les cellules dendritiques et des macrophages. Le &#x3B1;-2 ,3-sialyl r&#xE9;sidu de TLR a &#xE9;t&#xE9; identifi&#xE9;e comme la cible sp&#xE9;cifique pour l&#x26;#39;hydrolyse par Neu1. Nous rapportons ici un paradigme de signalisation initi&#xE9;e par la membrane lipopolysaccharide endotoxine (LPS) de liaison &#xE0; TLR4 pour potentialiser G r&#xE9;cepteur coupl&#xE9; aux prot&#xE9;ines (RCPG) par l&#x26;#39;interm&#xE9;diaire de signalisation membrane Ga (i) les prot&#xE9;ines de sous-unit&#xE9;s et de la matrice m&#xE9;talloprot&#xE9;inase-9 (MMP9) pour induire l&#x26;#39;activation Neu1. Au centre de ce processus, c&#x26;#39;est que un complexe Neu1-MMP9 est li&#xE9; &#xE0; TLR4 &#xE0; la surface cellulaire des cellules macrophages na&#xEF;fs. Inhibition sp&#xE9;cifique de la MMP9 et GPCR Ga (i)-prot&#xE9;ines de signalisation induite par le LPS blocs Neu1 activit&#xE9; d&#x26;#39;activation et NFkB. Taire MMP9 ARNm en utilisant des lentivirus MMP9 transduction shRNA ou transfection de siRNA de cellules macrophages et MMP9 knock-out cellules macrophages primaires consid&#xE9;rablement r&#xE9;duit l&#x26;#39;activit&#xE9; et l&#x26;#39;activation Neu1 NFKB associ&#xE9;e &#xE0; des cellules LPS-trait&#xE9;s. Ces r&#xE9;sultats d&#xE9;couvrir une plate-forme de signalisation mol&#xE9;culaire de l&#x26;#39;organisation d&#x26;#39;un roman Neu1 et MMP9 diaphonie en alliance avec TLR4 &#xE0; la surface cellulaire qui est essentiel pour l&#x26;#39;activation ligand des TLR et la suite de signalisation cellulaire.

Neu1 sialidase et Matrix Metalloproteinase-9 de la Croix-talk est essentielle pour l&#x26;#39;activation des r&#xE9;cepteurs Toll-like et de signalisation cellulaires

Die Signalwege S&auml;ugetier-Toll-Like Rezeptoren (TLRs) sind gut charakterisiert durch die TLRs bei Ligand-Bindung bleibt schlecht definierten aktiviert sind, aber die genauen Mechanismen. Vor kurzem berichteten wir einen neuartigen Membran Sialidase-Steuerung Mechanismus, der Ligand-Bindung an seine TLR S&auml;ugetier-Neuraminidase-1 (Neu1) Aktivit&auml;t, veranlassen Rezeptor Desialylation zu beeinflussen, und anschlie&szlig;end TLR-Aktivierung und die Produktion von Stickstoffmonoxid und Proinflammatory Cytokines in dendritischen induzieren abh&auml;ngt und Makrophagen-Zellen. Neu1 nannte als das spezifische Ziel der Hydrolyse &alpha;-2,3-Sialyl R&uuml;ckst&auml;nde von TLR. Hier berichten wir &uuml;ber eine Membran, die Signalisierung Paradigma von Endotoxin Lipopolysaccharid (LPS) Bindung an TLR4 um G-Protein-gekoppelter Rezeptor (GPCR) Signalisierung durch die Membran G&alpha;(i) Untereinheit Proteine und Matrix Metalloprotease-9 (MMP9) Aktivierung Neu1 induzieren potenzieren initiiert. Zentrales Element dieses Prozesses ist, dass ein Neu1-MMP9-Komplex auf der Zelloberfl&auml;che naiver Makrophagen Zellen TLR4 gebunden ist. Spezifische Hemmung der MMP9 und GPCR G&alpha; (i)-Signalisierung Proteine Bl&ouml;cke Neu1 LPS-induzierte Aktivit&auml;t und NF&kappa;B-Aktivierung. Unterdr&uuml;ckender MMP9 mRNA mit Lentiviren MMP9 ShRNA Transduktion oder SiRNA Transfektion von Zellen Makrophagen und MMP9 Zellen Knock-out-prim&auml;ren Makrophagen deutlich reduzierten Neu1 Aktivit&auml;t und NF&kappa;B-Aktivierung LPS behandelten Zellen zugeordnet. Diese Erkenntnisse aufdecken eine molekulare organisatorische Signalling Plattform &uuml;ber eine neuartige Neu1 und MMP9 Nebensprechen im B&uuml;ndnis mit TLR4 auf der Zelloberfl&auml;che, die notwendig f&uuml;r Ligand Aktivierung von TLR und nachfolgende zellulares signalisieren.

Neu1 Sialidase und Matrix-Metalloproteasen-9 Nebensprechen essentiell f&uuml;r Toll-Like-Rezeptor-Aktivierung und zellulare signalisieren.

Le vie di segnalazione dei mammiferi recettori Toll-like (TLR) sono ben caratterizzate, ma i precisi meccanismi comprendono da cui TLR sono attivati su Associazione ligando rimane scarsamente definite. Recentemente, abbiamo segnalato un meccanismo di controllo sialidasi romanzo membrana che dipende dall&#39;associazione ligando alla sua TLR per indurre l&#39;attivit&agrave; dei mammiferi neuraminidasi-1 (Neu1), per influenza del recettore desialylation e successivamente per indurre l&#39;attivazione del recettore TLR e la produzione di ossido nitrico e di citochine proinfiammatorie in dendritiche e macrofagi cellule. Il residuo di &alpha;-2,3-sialil di TLR &egrave; stato identificato come target specifici per idrolisi da Neu1. Riportiamo una segnalazione paradigma avviato legandosi endotossina lipopolisaccaride (LPS) di TLR4 per potenziare G protein-coupled receptor (GPCR) segnalazione tramite membrana G&alpha;(i) subunit&agrave; proteine e matrix metalloproteinase-9 (MMP9) attivazione per indurre Neu1 di membrana. Centrale di questo processo &egrave; che un complesso Neu1-MMP9 &egrave; associato a TLR4 sulla superficie delle cellule delle cellule naive dei macrofagi. Inibizione specifica di MMP9 e G&alpha; GPCR (i)-segnalazione attivit&agrave; blocchi Neu1 LPS-indotta di proteine e l&#39;attivazione di NF&kappa;B. Silenziamento MMP9 mRNA usando lentivirus MMP9 shRNA trasduzione o siRNA transfezione delle celle dei macrofagi e MMP9 knock-out primaria macrofago cellule significativamente ridotta attivit&agrave; Neu1 e attivazione di NF&kappa;B associati con le cellule trattate con LPS. Queste scoperte scoprono una piattaforma di segnalazione molecolare organizzativa di un romanzo Neu1 e MMP9 cross-talk in alleanza con TLR4 sulla superficie della cellula che &egrave; essenziale per l&#39;attivazione del ligando di TLR e successiva segnalazione cellulare.

Neu1 sialidasi e matrix metalloproteinase-9 cross-talk &egrave; essenziale per l&#39;attivazione del recettore Toll-like e di segnalazione cellulare.

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TLR&#x306E;&#x3B1;-2 ,3-&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30EB;&#x6B8B;&#x6E23;&#x3092;Neu1&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;Neu1&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x819C;G&#x3B1;&#xFF08;i&#xFF09;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3068;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30E1;&#x30BF;&#x30ED;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;9&#xFF08;MMP9&#xFF09;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;G&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5171;&#x5F79;&#x578B;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#xFF08;GPCR&#xFF09;&#x3092;&#x5897;&#x5F37;&#x3059;&#x308B;TLR4&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30C8;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3;&#x30EA;&#x30DD;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B5;&#x30C3;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30C9;&#xFF08;LPS&#xFF09;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x958B;&#x59CB;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x819C;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x30D1;&#x30E9;&#x30C0;&#x30A4;&#x30E0;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x306E;&#x306F;&#x3001;Neu1&#x3001;MMP9&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306F;&#x30CA;&#x30A4;&#x30FC;&#x30D6;&#x306A;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x306E;TLR4&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;MMP9&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x3068;GPCRG&#x3B1;&#xFF08;I&#xFF09;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;LPS&#x8A98;&#x767A;Neu1&#x6D3B;&#x6027;&#x3068;NF&#x3BA;B&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x200B;&#x200B;&#x3002;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x7D30;&#x80DE;&#x304A;&#x3088;&#x3073;MMP9&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x4E3B;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C1;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;MMP9&#x306E;shRNA&#x5C0E;&#x5165;&#x3084;siRNA&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;MMP9&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x6709;&#x610F;&#x306B;LPS&#x51E6;&#x7406;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;Neu1&#x6D3B;&#x6027;&#x3068;NF&#x3BA;B&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x200B;&#x200B;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x77E5;&#x898B;&#x306F;&#x3001;&#x5C0F;&#x8AAC;Neu1&#x304A;&#x3088;&#x3073;MMP9 TLR&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x5FC5;&#x9808;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x306E;TLR4&#x3068;&#x306E;&#x63D0;&#x643A;&#x3067;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9;&#x30C8;&#x30FC;&#x30AF;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x7D44;&#x7E54;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Neu1&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30E1;&#x30BF;&#x30ED;-9&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9;&#x30C8;&#x30FC;&#x30AF;&#x306F;&#x3001;Toll&#x69D8;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306B;&#x5FC5;&#x9808;&#x3067;&#x3042;&#x308B;

&#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC218;&#xC2E0;&#xC790; &#xAC19;&#xC740; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (TLRs)&#xC758; &#xC2E0;&#xD638; &#xACBD;&#xB85C; ligand &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC720;&#xACE8; &#xAC00;&#xB09C; &#xD558; &#xAC8C; &#xC815;&#xC758; &#xB41C; &#xB530;&#xB77C; Tlrs&#xC744; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xC815;&#xD655;&#xD55C; &#xC7A5;&#xCE58;&#xB97C; &#xB9C8;&#xB354;&#xBCF4;&#xB4DC;&#xC5D0; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC798; &#xD2B9;&#xC9D5;. &#xCD5C;&#xADFC;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCF4;&#xACE0; ligand &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC751;&#xC9D1;-1 (Neu1) &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xB294; TLR &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; desialylation&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xD558; &#xACE0; &#xC774;&#xD6C4;&#xC5D0; TLR &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBC0F; &#xC9C8;&#xC18C; &#xC0B0;&#xD654;&#xBB3C;&#xACFC; &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1;&#xC5D0; proinflammatory cytokines&#xC758; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xB294; &#xC18C;&#xC124; &#xB9C9; sialidase &#xC81C;&#xC5B4; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xBC0F; macrophage &#xC140;. TLR&#xC758; &alpha;-2, 3-sialyl &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC740; neu1&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD2B9;&#xC815; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCF4;&#xACE0; &#xB9C9; &#xD328;&#xB7EC;&#xB2E4;&#xC784; &#xC218;&#xC6A9; G &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xACB0;&#xD569; &#xCCB4; (GPCR) Neu1 &#xC720;&#xB3C4; &#xB9C9; G&alpha;(i) &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC0F; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; metalloproteinase-9 (MMP9)&#xB97C; &#xC815;&#xD488; &#xC778;&#xC99D;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC2E0;&#xD638; &#xC57D;&#xD6A8; TLR4 &#xC120;&#xCC98;&#xB9AC; lipopolysaccharide (LPS) &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xC5EC; &#xC2DC;&#xC791; &#xC2E0;&#xD638;. &#xC774; &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0; &#xC911;&#xC559;&#xC740; &#xC21C;&#xC9C4;&#xD55C; macrophage &#xC140;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; tlr4&#xC5D0; Neu1 MMP9 &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C;. &#xD2B9;&#xC815; &#xD55C; &#xC5B5;&#xC81C; MMP9 &#xBC0F; GPCR G&alpha; (i)-NF&kappa;B &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBE14;&#xB85D; Neu1 LPS-&#xC720;&#xBC1C; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC2E0;&#xD638;. &#xC785;&#xC744; MMP9 Mrna&#xC758; macrophage &#xC804;&#xC9C0;&#xC640; MMP9 lentivirus MMP9 shRNA &#xBCC0;&#xD658; &#xB610;&#xB294; siRNA transfection&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB178;&#xD06C; &#xC544;&#xC6C3; &#xAE30;&#xBCF8; macrophage &#xD604;&#xC800; &#xD558; &#xAC8C; &#xAC10;&#xC18C; &#xB41C; Neu1 &#xD65C;&#xB3D9; &#xBC0F; NF&kappa;B &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC140; LPS &#xCC98;&#xB9AC;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC18C;&#xC124; Neu1 &#xBC0F; MMP9 &#xC7A1;&#xB2F4; TLR4 Tlrs&#xC640; &#xD6C4;&#xC18D; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xC2E0;&#xD638;&#xC758; &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xC81C;&#xD734;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xC870;&#xC9C1; &#xC2E0;&#xD638; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC;&#xC744; &#xBC1D;&#xD788;&#xAE30;.

Neu1 sialidase &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; metalloproteinase 9 &#xD06C;&#xB85C;&#xC2A4; &#xD1A0;&#xD06C; &#xC218;&#xC2E0;&#xC790; &#xAC19;&#xC740; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBC0F; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Las v&#xED;as de se&#xF1;alizaci&#xF3;n de los mam&#xED;feros receptores Toll-like (TLRs) est&#xE1;n bien caracterizados, pero el mecanismo exacto (s) por el cual se activan los TLR en la uni&#xF3;n del ligando sigue estando mal definido. Recientemente, se inform&#xF3; de una membrana nueva sialidasa de control de mecanismo que depende de la uni&#xF3;n del ligando a su TLR para inducir la actividad de mam&#xED;feros neuraminidasa-1 (Neu1), para influir en desialilaci&#xF3;n receptor, y posteriormente para inducir la activaci&#xF3;n de TLR receptor y la producci&#xF3;n de &#xF3;xido n&#xED;trico y proinflamatorios citocinas en las c&#xE9;lulas dendr&#xED;ticas y los macr&#xF3;fagos. La &#x3B1;-2 ,3-sialil residuo de TLR fue identificado como el objetivo espec&#xED;fico para la hidr&#xF3;lisis por Neu1. Aqu&#xED; se presenta un paradigma de la membrana de se&#xF1;alizaci&#xF3;n iniciada por lipopolisac&#xE1;rido endotoxina (LPS) de la uni&#xF3;n a TLR4 para potenciar la prote&#xED;na G-receptor acoplado (GPCR) de se&#xF1;alizaci&#xF3;n a trav&#xE9;s de la membrana G&#x3B1; (i) prote&#xED;nas de las subunidades y metaloproteinasas de matriz-9 (MMP9) para inducir la activaci&#xF3;n Neu1. Central para este proceso es que un complejo Neu1-MMP9 est&#xE1; obligado a TLR4 en la superficie celular de c&#xE9;lulas macr&#xF3;fagas ingenuas. La inhibici&#xF3;n espec&#xED;fica de MMP9 y G&#x3B1; GPCR (i)-prote&#xED;nas de se&#xF1;alizaci&#xF3;n bloques inducida por LPS Neu1 actividad y la activaci&#xF3;n NFkB. Silenciar MMP9 ARNm utilizando lentivirus shRNA MMP9 transducci&#xF3;n o transfecci&#xF3;n de siRNA de los macr&#xF3;fagos y MMP9 knock-out macr&#xF3;fagos primarios redujo significativamente la actividad Neu1 y la activaci&#xF3;n de NFkB asociado con las c&#xE9;lulas tratadas con LPS. Estos resultados descubren una plataforma molecular de se&#xF1;alizaci&#xF3;n de organizaci&#xF3;n de una novela Neu1 y MMP9 cross-talk, en alianza con TLR4 en la superficie celular, que es esencial para la activaci&#xF3;n de los TLRs ligando y la se&#xF1;alizaci&#xF3;n celular posterior.

Neu1 sialidasa y metaloproteinasas de la matriz-9 Diafon&#xED;a es esencial para la activaci&#xF3;n del receptor Toll-like y la se&#xF1;alizaci&#xF3;n celular

Article	Year
Trypanosome trans-sialidase targets TrkA tyrosine kinase receptor and induces receptor internalization and activation. Glycobiology\| PubMed ID: 15240558	2004
Dependence of neurotrophic factor activation of Trk tyrosine kinase receptors on cellular sialidase. Glycobiology\| PubMed ID: 16971381	2007
Trypanosome trans-sialidase mediates neuroprotection against oxidative stress, serum/glucose deprivation, and hypoxia-induced neurite retraction in Trk-expressing PC12 cells. Glycobiology\| PubMed ID: 17389653	2007
Dependence of pathogen molecule-induced toll-like receptor activation and cell function on Neu1 sialidase. Glycoconjugate journal\| PubMed ID: 19430901	2009
Neu1 desialylation of sialyl alpha-2,3-linked beta-galactosyl residues of TOLL-like receptor 4 is essential for receptor activation and cellular signaling. Cellular signalling\| PubMed ID: 19796680	2010
Regulation of phagocytosis in macrophages by neuraminidase 1. The Journal of biological chemistry\| PubMed ID: 19889639	2010
Thymoquinone from nutraceutical black cumin oil activates Neu4 sialidase in live macrophage, dendritic, and normal and type I sialidosis human fibroblast cells via GPCR Galphai proteins and ... Glycoconjugate journal\| PubMed ID: 20213245	2010
Neu1 sialidase and matrix metalloproteinase-9 cross-talk is essential for neurotrophin activation of Trk receptors and cellular signaling. Cellular signalling\| PubMed ID: 20347965	2010
Thymoquinone-induced Neu4 sialidase activates NFÎºB in macrophage cells and pro-inflammatory cytokines in vivo. Glycoconjugate journal\| PubMed ID: 20697956	2010
Neu1 sialidase and matrix metalloproteinase-9 cross-talk is essential for Toll-like receptor activation and cellular signaling. The Journal of biological chemistry\| PubMed ID: 21873432	2011

Myron R. Szewczuk

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