pdms-device-fabrication-and-surface-modification

PDMS Device Fabrication and Surface Modification

Cell Capture Using a Microfluidic Device

MGH - Massachusetts General Hospital

Eta(3)-TpRh(CO)(2) &#x7684;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x5316;&#x5B66;&#x53CD;&#x5E94; C H (Tp = HB-Pz(3)&#xFF0C;Pz = 3&#xFF0C;5-dimethylpyrazolyl&#xFF09; &#x548C; CpRh(CO)(2) &#xFF08;Cp = C(5)H(5)) &#x5DF2;&#x7814;&#x7A76;&#x4E86;&#x4E00;&#x7CFB;&#x5217;&#x7684;&#x7EBF;&#x6027;&#x3001; &#x5FAA;&#x73AF;&#xFF0C;&#x548C;&#x82B3;&#x9999;&#x65CF;&#x70C3;&#x7C7B;&#x6EB6;&#x5242;&#x5BF9;&#x98DE;&#x79D2;&#x5230;&#x5FAE;&#x79D2;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x5C3A;&#x5EA6;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x70C3;&#x57FA;&#x5E95;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x4F1A;&#x5F71;&#x54CD;&#x6700;&#x540E;&#x4E00;&#x4E2A; C-H &#x503A;&#x5238;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x6B65;&#x9AA4;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x662F;&#x7B26;&#x5408;&#x503A;&#x5238;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x8D70;&#x5411;&#x4E3B; C H &#x70B9;&#x7684;&#x5DF2;&#x77E5;&#x9996;&#x9009;&#x9879;&#x3002;&#x5728;&#x6FC0;&#x6D3B;&#xFF0C;C H &#x82B3;&#x9999;&#x53CD;&#x5E94;&#x5206;&#x4E3A;&#x5E73;&#x884C;&#x6E20;&#x9053;&#x6D89;&#x53CA;&#x897F;&#x683C;&#x739B;&#x548C; pi &#x6EB6;&#x89E3;&#x4E2D;&#x95F4;&#x4F53;&#x3002;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684; CpRh(CO)(2) &#x5206;&#x5B50;&#xFF0C;&#x7ED3;&#x679C;&#x663E;&#x793A;&#x73AF;&#x620A;&#x4E8C;&#x70EF;&#x914D;&#x4F53;&#x7684;&#x534F;&#x8C03;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#xFF0C;&#x800C;&#x5728; eta(3)-TpRh(CO)(2) &#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684; C H &#x6FC0;&#x6D3B;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x52A8;&#x6001;&#x65F6;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x53D1;&#x6325;&#x76F4;&#x63A5;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

C-H &#x6D3B;&#x5316;&#x7684;&#x8D85;&#x5FEB; UV &#x6CF5;/&#x7EA2;&#x5916;&#x63A2;&#x6D4B;&#x5668;&#x7814;&#x7A76;&#x7EBF;&#x6027;&#x3001; &#x5FAA;&#x73AF;&#xFF0C;&#x548C;&#x82B3;&#x9999;&#x70C3;&#x3002;

The photochemical C-H activation reactions of eta(3)-TpRh(CO)(2) (Tp = HB-Pz(3), Pz = 3,5-dimethylpyrazolyl) and CpRh(CO)(2) (Cp = C(5)H(5)) have been studied in a series of linear, cyclic, and aromatic hydrocarbon solvents on a femtosecond to microsecond time scale. These results have revealed that the structure of the hydrocarbon substrate affects the final C-H bond activation step, which is in accordance with the known preference of bond activation toward primary C-H sites. In the case of aromatic C-H activation, the reaction is divided into parallel channels involving sigma- and pi-solvated intermediates. Results for the analogous CpRh(CO)(2) molecule have shown that the coordination of the cyclopentadienyl ligand does not play a direct role in the dynamics of the reaction, in contrast to the C-H activation mechanism observed in eta(3)-TpRh(CO)(2) studies.

Ultrafast UV pump/IR probe studies of C-H activation in linear, cyclic, and aryl hydrocarbons.

Les r&eacute;actions photochimiques de l&#39;activation C-H de eta(3)-TpRh(CO)(2) (Tp = HB-Pz(3), Pz = 3, 5-dimethylpyrazolyl) et CpRh(CO)(2) (Cp = C(5)H(5)) ont &eacute;t&eacute; &eacute;tudi&eacute;s dans une s&eacute;rie de lin&eacute;aire et cyclique, et solvants hydrocarbures aromatiques sur une femtoseconde &agrave; microseconde &eacute;chelle de temps. Ces r&eacute;sultats ont r&eacute;v&eacute;l&eacute; que la structure du substrat d&#39;hydrocarbures influe sur la derni&egrave;re &eacute;tape d&#39;activation de liaison C-H qui est en accord avec les pr&eacute;f&eacute;rences connues d&#39;activation d&#39;une liaison vers les principaux sites de C-H. Dans le cas de l&#39;activation de C-H aromatique, la r&eacute;action est divis&eacute;e en canaux parall&egrave;les impliquant des interm&eacute;diaires de sigma et de pi solvat&eacute;s. R&eacute;sulats de la mol&eacute;cule de CpRh(CO)(2) analogue ont montr&eacute; que la coordination du ligand cyclopentadi&eacute;nyl ne joue pas un r&ocirc;le direct dans la dynamique de la r&eacute;action, &agrave; la diff&eacute;rence du m&eacute;canisme d&#39;activation C-H observ&eacute; dans les &eacute;tudes de eta(3)-TpRh(CO)(2).

Ultrarapides &eacute;tudes de sonde de pompe/IR UV d&#39;activation C-H en lin&eacute;aire et cyclique et des hydrocarbures aromatiques.

Ultraschnelle UV Pumpe / IR-Sonde Studien der CH-Aktivierung in lineare, cyclische und Arylkohlenwasserstoffen.

Le reazioni fotochimiche di attivazione C-H del eta(3)-TpRh(CO)(2) (Tp = HB-Pz(3), Pz = 3,5-dimethylpyrazolyl) e CpRh(CO)(2) (Cp = C(5)H(5)) sono stati studiati in una serie lineare, ciclica, e solventi di idrocarburi aromatici su un femtosecondo al microsecondo tempo scala. Questi risultati hanno rivelato che la struttura del substrato idrocarburo colpisce il C-H bond attivazione passo finale, che &egrave; in conformit&agrave; con il nota preferenza di attivazione di bond verso siti primari-C-H. Nel caso di attivazione di C-H aromatico, la reazione &egrave; diviso in canali paralleli che coinvolgono sigma e pi solvatato intermedi. Risultati per la molecola di CpRh(CO)(2) analoga hanno dimostrato che il coordinamento del legante ciclopentadienilici non gioca un ruolo diretto nella dinamica della reazione, in contrasto con il meccanismo di attivazione di C-H osservato negli studi di eta(3)-TpRh(CO)(2).

Gli Ultrafast UV IR/pompa sonda studi di attivazione di C-H in lineare, ciclica e idrocarburi arilici.

Eta(3)-TpRh(CO)(2) &#x306E;&#x5149;&#x5316;&#x5B66; C H &#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x53CD;&#x5FDC; (Tp HB-Pz(3)&#x3001;Pz = = 3, 5-dimethylpyrazolyl) &#x3068; CpRh(CO)(2) (Cp = C(5)H(5)) &#x306F;&#x3001;&#x7DDA;&#x5F62;&#x3001;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF; &#x30EC;&#x30D0;&#x30FC;&#x306E;&#x30B7;&#x30EA;&#x30FC;&#x30BA;&#x3067;&#x691C;&#x8A0E;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x82B3;&#x9999;&#x65CF;&#x70AD;&#x5316;&#x6C34;&#x7D20;&#x6EB6;&#x5264;&#x306B;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x79D2;&#x306B;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E0;&#x30C8;&#x79D2;&#x6642;&#x9593;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30EB;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x70AD;&#x5316;&#x6C34;&#x7D20;&#x57FA;&#x6750;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x7D50;&#x5408;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x5411;&#x3051;&#x3066; C H &#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306E;&#x65E2;&#x77E5;&#x306E;&#x597D;&#x307F;&#x306B;&#x5F93;&#x3063;&#x3066;&#x3067;&#x3059;&#x3001;&#x6700;&#x7D42;&#x7684;&#x306A; C H &#x30DC;&#x30F3;&#x30C9; &#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x624B;&#x9806;&#x3001;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x82B3;&#x9999;&#x65CF; C H &#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x5834;&#x5408;&#x306F;&#x3001;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306F;&#x30B7;&#x30B0;&#x30DE;&#x3068; pi &#x6EB6;&#x5A92;&#x548C;&#x91D1;&#x4E2D;&#x9593;&#x4F53;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x4E26;&#x5217;&#x306E;&#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306B;&#x5206;&#x304B;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D50;&#x679C;&#x985E;&#x4F3C;&#x3057;&#x3066; CpRh(CO)(2) &#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x8ABF;&#x6574;&#x30B7;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DA;&#x30F3;&#x30BF;&#x30B8;&#x30A8;&#x30CB;&#x30EB;&#x914D;&#x4F4D;&#x5B50;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x7684;&#x306A;&#x5F79;&#x5272; eta(3)-TpRh(CO)(2) &#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF; C H &#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3068;&#x306F;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306E;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x3067;&#x518D;&#x751F;&#x3055;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x8D85;&#x9AD8;&#x901F;&#x306E; UV &#x30DD;&#x30F3;&#x30D7;/IR &#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;&#x7814;&#x7A76;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316; C H &#x3067;&#x306E;&#x7DDA;&#x5F62;&#x306E;&#x7E70;&#x8FD4;&#x3057;&#x3001;&#x30A2;&#x30EA;&#x30FC;&#x30EB;&#x70AD;&#x5316;&#x6C34;&#x7D20;&#x3002;

Eta(3)-tprh(co)(2)&#xC758; &#xAD11;&#xD654;&#xD559; C H &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBC18;&#xC751; (Tp HB-Pz(3), Pz = = 3, 5-dimethylpyrazolyl) &#xBC0F; CpRh(CO)(2) (Cp = C(5)H(5)) &#xC77C;&#xB828;&#xC758; &#xC120;&#xD615;, &#xC8FC;&#xAE30;&#xC801;, &#xACF5;&#xBD80;&#xAC00; &#xC2DC;&#xAC04;&#xACFC; &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C;&#xCD08;&#xC5D0; &#xD3A8;&#xC5D0; &#xBC29;&#xD5A5;&#xC871; &#xD0C4;&#xD654;&#xC218;&#xC18C; &#xC6A9; &#xB9E4; &#xADDC;&#xBAA8;. &#xC774; &#xACB0;&#xACFC; &#xD0C4;&#xD654;&#xC218;&#xC18C; &#xAE30;&#xD310; &#xAD6C;&#xC870; &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9; C H &#xBCF8;&#xB4DC; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB2E8;&#xACC4;, &#xAE30;&#xBCF8; C H &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xCABD;&#xC73C;&#xB85C; &#xCC44;&#xAD8C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC758; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4;&#xB41C; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC124;&#xC815;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC5B4;&#xB5A4; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBC1D;&#xD600;. &#xC544;&#xB85C;&#xB9C8; C H &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC758; &#xACBD;&#xC6B0; &#xBC18;&#xC751; &#xC2DC;&#xADF8;&#xB9C8;&#xC640; &#xD30C;&#xC774; solvated &#xC911;&#xAC04;&#xCCB4;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xBCD1;&#xB82C; &#xCC44;&#xB110;&#xB85C; &#xB098;&#xB204;&#xC5B4;&#xC838; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC720;&#xC0AC;&#xD55C; CpRh(CO)(2) &#xBD84;&#xC790;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; cyclopentadienyl ligand&#xC758; &#xC870;&#xC815; eta(3)-TpRh(CO)(2) &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB41C; C H &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xB2EC;&#xB9AC; &#xBC18;&#xC751;&#xC758; &#xC5ED;&#xD559; &#xAD00;&#xACC4;&#xC5D0; &#xC9C1;&#xC811;&#xC801;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xCD08;&#xACE0;&#xC18D; UV &#xD38C;&#xD504;/IR &#xC870;&#xC0AC; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; C H &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC758; &#xC120;&#xD615;, &#xC21C;&#xD658;, &#xBC0F; aryl &#xD0C4; &#xD654; &#xC218;&#xC18C;.

Las reacciones fotoqu&iacute;micas de la activaci&oacute;n del C-H de eta(3)-TpRh(CO)(2) (Tp = HB-Pz(3), Pz = 3,5-dimethylpyrazolyl) y CpRh(CO)(2) (Cp = C(5)H(5)) han sido estudiados en una serie de lineal, c&iacute;clica, y solventes de hidrocarburos arom&aacute;ticos en un femtosegundo a microsegundo escala de tiempo. Estos resultados han revelado que la estructura del sustrato hidrocarburos afecta el C-H enlace activaci&oacute;n paso final, que est&aacute; de acuerdo con la conocida preferencia de activaci&oacute;n del v&iacute;nculo hacia sitios primarios de C-H. En el caso de la activaci&oacute;n C-H arom&aacute;tica, la reacci&oacute;n se divide en canales paralelos que sigma y pi solvatados intermedios. Resultados para la mol&eacute;cula an&aacute;loga de CpRh(CO)(2) han mostrado que la coordinaci&oacute;n del ligand ciclopentadienilo no desempe&ntilde;a un papel directo en la din&aacute;mica de la reacci&oacute;n, en contraste con el mecanismo de activaci&oacute;n C-H observado en estudios eta(3)-TpRh(CO)(2).

Estudios de sonda de bomba/IR de UV ultrarr&aacute;pidos de activaci&oacute;n C-H en lineal, c&iacute;clica y aril hidrocarburos.

&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A;&#x8868;&#x6F14;&#x5F88;&#x5C0F;&#x5377;&#x4E0E;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x82AF;&#x7247;&#x7684;&#x65B0;&#x65B9;&#x6CD5; (14 &#x5230;&#x5927;&#x7EA6; 1.7 muL pL&#xFF09;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x6FC0;&#x5149;&#x6765;&#x4FEE;&#x6539;&#x5C40;&#x90E8;&#x8868;&#x9762;&#x80FD;&#x91CF;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x64CD;&#x7EB5;&#x3001; &#x4FDD;&#x9669;&#x4E1D;&#xFF0C;&#x548C;&#x6DF7;&#x5408;&#x6DB2;&#x6EF4;&#x542B;&#x6709;&#x8FA3;&#x6839;&#x8FC7;&#x6C27;&#x5316;&#x7269;&#x9176;&#x548C;&#x5176;&#x57FA;&#x5E95;&#x3002;&#x5927;&#x7EA6; 30 attomoles &#x53CD;&#x5E94;&#x9176;&#x7684;&#x68C0;&#x6D4B;&#x9650;&#x662F;&#x7528;&#x5149;&#x5438;&#x6536;&#x6765;&#x8861;&#x91CF;&#x7684;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x5EF6;&#x957F;&#x6B64;&#x4E0B;&#x9650;&#x5230; zeptomoles &#x7684;&#x9176;&#x7684;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3002;

&#x5149;&#x5BFB;&#x5740;&#x57FA;&#x4E8E;&#x6DB2;&#x6EF4;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x542B;&#x91CF;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x3002;

We demonstrate a new method for performing protein assays with very small volumes ( approximately 1.7 muL to 14 pL). Using a laser to modify local surface energy, we manipulate, fuse, and mix droplets containing horseradish peroxidase and its substrates. A detection limit of approximately 30 attomoles of reacting enzyme was measured by optical absorption. We discuss the possibility of extending this lower limit to zeptomoles of enzyme.

Optically addressed droplet-based protein assay.

Nous d&eacute;montrons une nouvelle m&eacute;thode permettant d&#39;effectuer des analyses de prot&eacute;ines avec tr&egrave;s petits volumes (environ 1,7 muL &agrave; 14 pL). &Agrave; l&#39;aide d&#39;un laser pour modifier l&#39;&eacute;nergie de surface locale, nous manipuler, fusible et m&eacute;langer les gouttelettes contenant ses substrats et la peroxydase de raifort. Une limite de d&eacute;tection d&#39;environ 30 attomoles de la r&eacute;action enzymatique a &eacute;t&eacute; mesur&eacute;e par absorption optique. Nous discutons de la possibilit&eacute; d&#39;&eacute;tendre cette limite inf&eacute;rieure &agrave; la zeptomoles de l&#39;enzyme.

Optiquement adress&eacute;e dosage prot&eacute;ique ax&eacute;e sur la goutte.

Optisch adressierte tr&#xF6;pfchenbasierten Protein-Assay.

Mostriamo un nuovo metodo per l&#39;esecuzione di analisi della proteina con volumi molto piccoli (circa 1,7 muL a 14 pL). Utilizzando un laser a modificare l&#39;energia di superficie locale, abbiamo manipolare, fusibile e mescolare goccioline contenenti perossidasi di rafano e i suoi substrati. Un limite di circa 30 attomoles della reazione enzimatica &egrave; stato misurato mediante assorbimento ottico. Discutiamo la possibilit&agrave; di estendere questo limite inferiore a zeptomoles dell&#39;enzima.

Otticamente affrontate analisi basate su goccia della proteina.

&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x5C0F;&#x3055;&#x3044;&#x30DC;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x8A66;&#x91D1;&#x3092;&#x5B9F;&#x884C;&#x3059;&#x308B;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x305F;&#x3081; (&#x7D04; 1.7 muL 14 pL)&#x3002;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EB;&#x8868;&#x9762;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B6;&#x30FC;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x64CD;&#x4F5C;&#x3001;&#x30D2;&#x30E5;&#x30FC;&#x30BA;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x897F;&#x6D0B;&#x308F;&#x3055;&#x3073;&#x30DA;&#x30EB;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x57FA;&#x677F;&#x3092;&#x542B;&#x3093;&#x3067;&#x3044;&#x308B;&#x5C0F;&#x6EF4;&#x3092;&#x6DF7;&#x305C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x7D04; 30 attomoles &#x306E;&#x691C;&#x51FA;&#x9650;&#x754C;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5149;&#x5438;&#x53CE;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x4E0B;&#x9650;&#x9175;&#x7D20;&#x306E; zeptomoles &#x306B;&#x62E1;&#x5F35;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x8B70;&#x8AD6;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x5149;&#x5B66;&#x7684;&#x6DB2;&#x6EF4;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x8A66;&#x91D1;&#x306B;&#x5BFE;&#x51E6;&#x3002;

&#xC544;&#xC8FC; &#xC791;&#xC740; &#xBCFC;&#xB968;&#xC73C;&#xB85C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC744; &#xC218;&#xD589; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4; (&#xC57D; 1.7 muL 14 pL). &#xB808;&#xC774;&#xC800;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB85C;&#xCEEC; &#xD45C;&#xBA74; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xC218;&#xC815;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC870;&#xC791;, &#xC735;&#xD569;, &#xBC0F; &#xC591; &#xACE0;&#xCD94;&#xB0C9;&#xC774; &#xACFC;&#xC0B0;&#xD654; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC640; &#xADF8; &#xAE30;&#xC9C8;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xC6B8; &#xD63C;&#xD569;. &#xBC18;&#xC751; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; &#xC57D; 30 attomoles&#xC758; &#xAC80;&#xCD9C; &#xD55C;&#xACC4;&#xB294; &#xAD11; &#xD761;&#xC218;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCE21;&#xC815; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xD6A8;&#xC18C; zeptomoles &#xD558;&#xD55C;&#xAC12;&#xC774; &#xC5F0;&#xC7A5;&#xC758; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC744; &#xB17C;&#xC758;.

&#xAD11;&#xD559; &#xB4DC;&#xB86D;&#xB9BF; &#xAE30;&#xBC18; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xD574;&#xACB0;.

Demostramos un nuevo m&eacute;todo para realizar ensayos de prote&iacute;na con vol&uacute;menes muy peque&ntilde;os (aproximadamente 1.7 muL a 14 pL). Usando un laser para modificar la energ&iacute;a superficial local, manipular, fusible y mezclar las gotas que contienen peroxidasa de r&aacute;bano picante y sus substratos. Un l&iacute;mite de detecci&oacute;n de aproximadamente 30 attomoles de reacci&oacute;n de la enzima se midi&oacute; por absorci&oacute;n &oacute;ptica. Discutimos la posibilidad de ampliar este l&iacute;mite inferior a zeptomoles de la enzima.

&Oacute;pticamente abord&oacute; el an&aacute;lisis de prote&iacute;na de la gotita.

&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x79CD;&#x53EF;&#x80FD;&#x7684;&#x9014;&#x5F84;&#x6765;&#x589E;&#x52A0;&#x5BF9;&#x6BD4;&#x5EA6;&#x5149;&#x5B66;&#x6210;&#x50CF;&#x7684;&#x764C;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x5438;&#x5165;&#x7684;&#x6C27;&#x548C;&#x4E8C;&#x6C27;&#x5316;&#x78B3;&#x7684;&#x4F7F;&#x7528;&#x3002;&#x5DEE;&#x5206;&#x6210;&#x50CF;&#x5728;&#x764C;&#x75C7;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x5F02;&#x79CD;&#x556E;&#x9F7F;&#x52A8;&#x7269;&#x6A21;&#x578B;&#x5C55;&#x54C1;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4E4B;&#x95F4;&#x6B63;&#x5E38;&#x53CA;&#x764C;&#x53D8;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x7684;&#x91CD;&#x5927;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x8FD9;&#x5DEE;&#x522B;&#x7684;&#x7279;&#x5B9A;&#x764C;&#x75C7;&#x7684;&#x5BF9;&#x6BD4;&#x662F;&#x66F4;&#x5F3A;&#x6709;&#x529B;&#x548C;&#x66F4;&#x4E00;&#x81F4;&#x6BD4;&#x5E38;&#x89C4;&#x9759;&#x6001;&#x5BF9;&#x6BD4;&#x5EA6;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x9274;&#x522B;&#x6280;&#x672F;&#x5229;&#x7528;&#x5BF9;&#x5438;&#x5165;&#x6C14;&#x4F53;&#x5F02;&#x5E38;&#x80BF;&#x7624;&#x8840;&#x7BA1;&#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#x548C;&#x53EF;&#x80FD;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6709;&#x524D;&#x9014;&#x7684;&#x66FF;&#x4EE3;&#x65B9;&#x6848;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x8865;&#x5145;&#x4E3B;&#x6D41;&#x6A21;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x5982; x &#x5149;&#x7247;&#x548C;&#x78C1;&#x5171;&#x632F;&#x6210;&#x50CF;&#x7684;&#x764C;&#x75C7;&#x3002;

&#x5438;&#x6C14;&#x4F53;&#x5185;&#x5149;&#x5B66;&#x6210;&#x50CF;&#x5BF9;&#x6BD4;&#x5EA6;&#x3002;

We demonstrate the use of inspired oxygen and carbon dioxide as a possible route to increase contrast in optical imaging of cancerous tissue. Differential imaging in human xenograft rodent models of cancer exhibits significant variation in signal between normal and cancerous tissue. This differential cancer-specific contrast is stronger and more consistent than the conventional static contrast. This differential technique exploits the response of abnormal tumor vasculature to inhaled gases and could provide a promising alternative to supplement mainstream cancer imaging modalities such as x-rays and MRI.

Inspiratory contrast for in vivo optical imaging.

Nous montrons l&#39;utilisation de dioxyde de carbone et d&#39;oxyg&egrave;ne inspir&eacute; comme une voie possible pour augmenter le contraste en imagerie optique des tissus canc&eacute;reux. Imagerie diff&eacute;rentielle dans des mod&egrave;les de x&eacute;nogreffes humaines rongeurs du cancer pr&eacute;sente de variation significative de signal entre les tissus normaux et canc&eacute;reux. Ce contraste sp&eacute;cifique du cancer diff&eacute;rentiel est plus forte et plus uniforme que le contraste statique conventionnels. Cette technique diff&eacute;rentielle exploite la r&eacute;action de la vascularisation tumorale anormale &agrave; gaz inhal&eacute;s et pourrait offrir une alternative prometteuse pour compl&eacute;ter le cancer traditionnel tels que les radiographies et l&#39;IRM imagerie.

Inspiratoire contraste pour l&#39;imagerie optique in vivo.

Wir demonstrieren die Verwendung von inspiriert Sauerstoff und Kohlendioxid als ein m&ouml;glicher Weg, um Kontrast in der optischen Bildgebung von Krebsgewebe zu erh&ouml;hen. Differenzielle Bildgebung im menschlichen Xenograft-Nagetier Modelle von Krebs weist erhebliche Schwankungen der Signal zwischen normal und krebsartigen Gewebes. Diese differenzielle krebsspezifische Kontrast ist st&auml;rker und konsequenter als der herk&ouml;mmlichen statischen Kontrast. Diese differenzielle Technik k&ouml;nnte nutzt die Reaktion der anormalen Tumor Gef&auml;&szlig;system auf inhalative Gase und eine viel versprechende Alternative zur Erg&auml;nzung der etablierten Krebs imaging Modalit&auml;ten wie R&ouml;ntgen und MRI.

INSPIRATORISCHE Kontrast f&uuml;r in-vivo Bildgebung.

Noi dimostrare l&#39;uso ispirato ossigeno e anidride carbonica come un possibile percorso per aumentare il contrasto in imaging ottico del tessuto canceroso. Differenziale imaging in modelli roditore xenoinnesto umana del cancro esibisce significativa variazione nel segnale tra tessuti normali e tumorali. Questo contrasto differenziale specifico del cancro &egrave; pi&ugrave; forte e pi&ugrave; coerente di contrasto statico convenzionale. Questa tecnica differenziale sfrutta la risposta del sistema vascolare tumorale anomala di gas inalato e potrebbe fornire un&#39;alternativa promettente per integrare cancro mainstream di imaging come radiografie e risonanza magnetica.

Inspiratorio contrasto per imaging ottico in vivo.

&#x6211;&#x3005; &#x764C;&#x6027;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x5149;&#x5B66;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x3067;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30E9;&#x30B9;&#x30C8;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30EB;&#x30FC;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D4;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x9178;&#x7D20;&#x3068;&#x4E8C;&#x9178;&#x5316;&#x70AD;&#x7D20;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x3092;&#x30C7;&#x30E2;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3072;&#x3068;&#x7570;&#x7A2E;&#x79FB;&#x690D;&#x764C;&#x306E;&#x9F67;&#x6B6F;&#x985E;&#x52D5;&#x7269;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5DEE;&#x5206;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x4FE1;&#x53F7;&#x6B63;&#x5E38;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x764C;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x306F;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x3070;&#x3089;&#x3064;&#x304D;&#x3092;&#x5C55;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x5DEE;&#x5206;&#x306E;&#x764C;&#x7279;&#x7570;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30E9;&#x30B9;&#x30C8;&#x306F;&#x3088;&#x308A;&#x5F37;&#x304F;&#x3088;&#x308A;&#x4E00;&#x8CAB;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x5F93;&#x6765;&#x306E;&#x9759;&#x7684;&#x306A;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30E9;&#x30B9;&#x30C8;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x5DEE;&#x5206;&#x624B;&#x6CD5;&#x306F;&#x5438;&#x5165;&#x30AC;&#x30B9;&#x3078;&#x306E;&#x7570;&#x5E38;&#x3001;&#x816B;&#x760D;&#x8840;&#x7BA1;&#x7CFB;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x60AA;&#x7528;&#x3057;&#x3001;&#x4E3B;&#x6D41;&#x306E;&#x764C;&#x306E; x &#x7DDA;&#x5199;&#x771F;&#x3001;MRI &#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x30E2;&#x30C0;&#x30EA;&#x30C6;&#x30A3;&#x3092;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x88DC;&#x5B8C;&#x3059;&#x308B;&#x6709;&#x671B;&#x306A;&#x4EE3;&#x66FF;&#x624B;&#x6BB5;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30A4;&#x30F3;&#x30D3;&#x30DC;&#x5149;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x5438;&#x6C17;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30E9;&#x30B9;&#x30C8;&#x3002;

&#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC554; &#xC870;&#xC9C1;&#xC758; &#xAD11;&#xD559; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5;&#xC5D0; &#xB300;&#xBE44; &#xC99D;&#xAC00;&#xB97C; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xACBD;&#xB85C;&#xB85C; &#xC601;&#xAC10;&#xB41C; &#xC0B0;&#xC18C;&#xC640; &#xC774;&#xC0B0;&#xD654;&#xD0C4;&#xC18C;&#xC758; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xB1CC;&#xC885;&#xC591; &#xC554;&#xC758; &#xC124;&#xCE58;&#xB958; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCC28;&#xB3D9; &#xC601;&#xC0C1; &#xC804;&#xC2DC; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; &#xC554; &#xC870;&#xC9C1; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xBCC0;&#xD654;. &#xC774; &#xCC28;&#xB3D9; &#xC554; &#xAD00;&#xB828; &#xB300;&#xBE44;&#xB294; &#xAC15;&#xD558;&#xACE0; &#xAE30;&#xC874;&#xC758; &#xC815;&#xC801; &#xB300;&#xBE44; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xC77C;&#xAD00;&#xC131;. &#xC774; &#xCC28;&#xB3D9; &#xAE30;&#xC220;&#xACFC; &#xD761;&#xC785;&#xB41C; &#xAC00;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBE44;&#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xC885;&#xC591; &#xD608;&#xAD00;&#xC758; &#xC751;&#xB2F5; &#xC545;&#xC6A9; &#xC8FC;&#xB958; &#xC554; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; x-&#xB808;&#xC774; MRI &#xAC19;&#xC740; modalities&#xB97C; &#xBCF4;&#xC644; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC720;&#xB9DD;&#xD55C; &#xB300;&#xC548;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;.

Vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD11;&#xD559; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB300;&#xBE44;&#xB97C; inspiratory&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Se demuestra el uso de ox&iacute;geno inspirado y di&oacute;xido de carbono como una ruta posible para aumentar el contraste en im&aacute;genes &oacute;pticas de tejido canceroso. Proyecci&oacute;n de imagen diferencial en modelos de roedores de xenoinjerto humanas de c&aacute;ncer exhibe una variaci&oacute;n significativa en la se&ntilde;al entre el tejido normal y canceroso. Este contraste diferencial de espec&iacute;fica del c&aacute;ncer es m&aacute;s fuerte y m&aacute;s constantes que el contraste est&aacute;tico convencional. Esta t&eacute;cnica diferencial explota la respuesta de la vasculatura tumoral anormal a gases inhalados y podr&iacute;a proporcionar una alternativa prometedora para complementar los c&aacute;ncer modalidades tales como radiograf&iacute;as y resonancia magn&eacute;tica de la proyecci&oacute;n de imagen.

Inspiratoria contraste de imagen &oacute;ptico in vivo.

&#x8C03;&#x67E5;&#x65B0;&#x578B;&#x653E;&#x5316;&#x7597;&#x65B9;&#x6848;&#x65E8;&#x5728;&#x6700;&#x5927;&#x9650;&#x5EA6;&#x5730;&#x63A7;&#x5236;&#x5C40;&#x90E8;&#x533A;&#x57DF; (LRC) &#x548C;&#x5C3D;&#x91CF;&#x51CF;&#x5C11;&#x60A3;&#x8005;&#x665A;&#x671F;&#x5934;&#x9888;&#x90E8;&#x9CDE;&#x764C; (HNSCC) &#x7684;&#x6BD2;&#x6027;&#x3002;

&#x9636;&#x6BB5;&#x4E8C;&#x5BA1;&#x5224;&#x8D85;&#x5206;&#x5272;&#x8C03;&#x5F3A;&#x653E;&#x5C04;&#x6CBB;&#x7597;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E3A;&#x7B2C;&#x4E09;&#x9636;&#x6BB5;&#x53CA; iva &#x90E8;&#x5934;&#x9888;&#x90E8;&#x764C;&#x5E76;&#x53D1;&#x6BCF;&#x5468;&#x987A;&#x94C2;&#x3002;

To investigate a novel chemoradiation regimen designed to maximize locoregional control (LRC) and minimize toxicity for patients with advanced head-and-neck squamous cell carcinoma (HNSCC).

Phase II trial of hyperfractionated intensity-modulated radiation therapy and concurrent weekly cisplatin for Stage III and IVa head-and-neck cancer.

Pour enqu&ecirc;ter sur un sch&eacute;ma de la chimioradioth&eacute;rapie roman con&ccedil;u pour maximiser le contr&ocirc;le locor&eacute;gional (LRC) et minimiser la toxicit&eacute; chez les patients avec t&ecirc;te-&agrave;-coude carcinome &eacute;pidermo&iuml;de avanc&eacute; (HNSCC).

La phase II trial of hyperfractionn&eacute;e la radioth&eacute;rapie intensit&eacute;-modul&eacute;e et simultan&eacute;e cisplatine hebdomadaire pour le cancer de t&ecirc;te-&agrave;-coude de stade III et IVa.

Eine neuartige Radiochemotherapie-Regime untersuchen sollen Lokoregionale Kontrolle (LRC) maximieren und minimieren von Toxizit&auml;t f&uuml;r Patienten mit fortgeschrittenen Kopf-Hals-Plattenepithelkarzinome (HNSCC).

Phase II-Studie von Akzelerierte Intensit&auml;t-modulierte Strahlentherapie und gleichzeitige pro Cisplatin f&uuml;r Phase III und IV a Kopf-Hals-Krebs.

Per indagare su un regime di chemioradioterapia romanzo progettato per ottimizzare il controllo locoregionale (LRC) e ridurre al minimo la tossicit&agrave; per i pazienti con avanzato testa-e-collo a cellule squamose (HNSCC).

Phase II trial di radioterapia iperfrazionata, intensit&agrave; modulata e cisplatino settimana simultanea per tumori testa-collo e stadio III e IVa.

&#x65B0;&#x898F;&#x5316;&#x5B66;&#x653E;&#x5C04;&#x7DDA;&#x7642;&#x6CD5;&#x3092;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x816B;&#x760D;&#x306E;&#x5C40;&#x6240;&#x5236;&#x5FA1; (LRC) &#x3092;&#x6700;&#x5927;&#x5316;&#x3057;&#x3001;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x306A;&#x982D;&#x9838;&#x90E8;&#x6241;&#x5E73;&#x4E0A;&#x76AE;&#x764C; (HNSCC) &#x60A3;&#x8005;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x6BD2;&#x6027;&#x3092;&#x6700;&#x5C0F;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x8A2D;&#x8A08;&#x3002;

&#x76F8; II &#x8A66;&#x9A13;&#x904E;&#x5206;&#x5F37;&#x5EA6;&#x5909;&#x8ABF;&#x653E;&#x5C04;&#x7DDA;&#x7642;&#x6CD5;&#x3068;&#x540C;&#x6642;&#x30B9;&#x30C6;&#x30FC;&#x30B8; III, IVa &#x306E;&#x982D;&#x9838;&#x90E8;&#x764C;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x30B7;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x3002;

&#xC18C;&#xC124; chemoradiation &#xCC98;&#xBC29; &#xC870;&#xC0AC; locoregional &#xC81C;&#xC5B4; (LRC)&#xB97C; &#xADF9;&#xB300;&#xD654; &#xD558; &#xACE0; &#xACE0;&#xAE09; &#xBA38;&#xB9AC; &#xBAA9; &#xD3B8;&#xD3C9; &#xC138;&#xD3EC; &#xC554; &#xC885; (HNSCC) &#xD658;&#xC790;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB3C5;&#xC131;&#xC744; &#xCD5C;&#xC18C;&#xD654; &#xD558;&#xB3C4;&#xB85D; &#xC124;&#xACC4; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Hyperfractionated &#xAC15;&#xB3C4; &#xBCC0;&#xC870; &#xBC29;&#xC0AC;&#xC120; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC640; &#xB3D9;&#xC2DC; &#xC8FC;&#xAC04; cisplatin &#xB2E8;&#xACC4; III &#xBC0F; IVa &#xBA38;&#xB9AC;&#xC640; &#xBAA9; &#xC554;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; 2 &#xCC28; &#xC7AC;&#xD310; &#xB2E8;&#xACC4;.

Para investigar un r&eacute;gimen de quimiorradiaci&oacute;n novela dise&ntilde;ado para maximizar el control locorregional (LRC) y minimizar la toxicidad para los pacientes con carcinoma de c&eacute;lulas escamosas (HNSCC) de cabeza y cuello avanzado.

Fase II trial of radioterapia hiperfraccionada, intensidad modulada y cisplatino semanal concurrente para el c&aacute;ncer de cabeza y cuello etapa III y IVa.

&#x55DC;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5177;&#x6709;&#x8C03;&#x8282;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x89D2;&#x8272;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x76EE;&#x524D;&#x4E0E;&#x82AF;&#x7247;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x5B66;&#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x5B66;&#x7684; mRNA &#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x5206;&#x79BB;&#x52A0;&#x5DE5;&#x8FC5;&#x901F;&#x9694;&#x79BB;&#x76F4;&#x63A5;&#x4ECE;&#x5168;&#x8840;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6709;&#x529B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4E0E;&#x524D;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x6B64;&#x8BBE;&#x5907;&#x7684;&#x4F53;&#x5185;&#x523A;&#x6FC0;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x548C;&#x4E0E;&#x6807;&#x51C6;&#x6279;&#x91CF;&#x5206;&#x79BB;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5904;&#x7406;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x5185;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x4E25;&#x91CD;&#x521B;&#x4F24;&#x7684;&#x591A;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4E34;&#x5E8A;&#x7814;&#x7A76;&#x8FD1;&#x75C5;&#x4EBA;&#x8840;&#x6DB2;&#x7684;&#x4E00;&#x90E8;&#x5206;&#x6267;&#x884C;&#x6B64;&#x5DE5;&#x5177;&#x548C;&#x70E7;&#x4F24;&#x3002;&#x4ECE;&#x4E00;&#x5C0F;&#x7FA4;&#x5728;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x548C;&#x5065;&#x5EB7;&#x63A7;&#x5236;&#x79D1;&#x76EE;&#x7684;&#x521D;&#x6B65;&#x7ED3;&#x679C;&#x663E;&#x793A;&#x6E05;&#x695A;&#x5730;&#x663E;&#x793A;&#x51FA;&#x6B64;&#x5DE5;&#x5177;&#x80FD;&#x591F;&#x533A;&#x522B;&#x65F6;&#x7A7A;&#x8F6C;&#x5F55;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x7684;&#x55DC;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x4E34;&#x5E8A;&#x8BBE;&#x7F6E;&#x552F;&#x4E00;&#x4F9D;&#x8D56;&#x65F6;&#x95F4;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x8C31;&#x3002;

&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x5B66;&#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x5B66;&#x7684;&#x4E34;&#x5E8A;&#x5FAE;&#x6D41;&#x4F53;&#x3002;

Neutrophils have key roles in modulating the immune response. We present a robust methodology for rapidly isolating neutrophils directly from whole blood with 'on-chip' processing for mRNA and protein isolation for genomics and proteomics. We validate this device with an ex vivo stimulation experiment and by comparison with standard bulk isolation methodologies. Last, we implement this tool as part of a near-patient blood processing system within a multi-center clinical study of the immune response to severe trauma and burn injury. The preliminary results from a small cohort of subjects in our study and healthy controls show a unique time-dependent gene expression pattern clearly demonstrating the ability of this tool to discriminate temporal transcriptional events of neutrophils within a clinical setting.

Clinical microfluidics for neutrophil genomics and proteomics.

Les neutrophiles ont un r&#xF4;le cl&#xE9; dans la modulation de la r&#xE9;ponse immunitaire. Nous pr&#xE9;sentons une m&#xE9;thodologie robuste pour rapidement isoler directement &#xE0; partir de neutrophiles du sang total avec &#xAB;on-chip&#x26;quot; de traitement pour l&#x26;#39;ARNm et l&#x26;#39;isolement de prot&#xE9;ines pour la g&#xE9;nomique et la prot&#xE9;omique. Nous validons ce dispositif avec une exp&#xE9;rience de stimulation ex vivo et par comparaison avec les m&#xE9;thodes standards d&#x26;#39;isolation en vrac. Enfin, nous mettons en &#x153;uvre cet outil dans le cadre d&#x26;#39;un syst&#xE8;me quasi-patient de traitement du sang dans une &#xE9;tude clinique multi-centres de la r&#xE9;ponse immunitaire &#xE0; un traumatisme grave et de br&#xFB;lures. Les r&#xE9;sultats pr&#xE9;liminaires d&#x26;#39;une petite cohorte de sujets dans notre &#xE9;tude et des contr&#xF4;les sains ont montr&#xE9; un unique d&#xE9;pendant du temps profil d&#x26;#39;expression g&#xE9;nique qui d&#xE9;montre clairement la capacit&#xE9; de cet outil pour discriminer temporelles &#xE9;v&#xE9;nements transcriptionnels de neutrophiles dans un cadre clinique.

Microfluidique cliniques pour la g&#xE9;nomique et la prot&#xE9;omique neutrophiles

Neutrophile haben Schl&uuml;sselrollen in der Modulation der Immunantwort. Wir pr&auml;sentieren eine robuste Methodik f&uuml;r die Neutrophilen direkt aus Vollblut in rasantem mit &#39;on-Chip&#39; Verarbeitung f&uuml;r die Isolierung von mRNA und Protein f&uuml;r Genomik und Proteomik. Wir &uuml;berpr&uuml;fen dieses Ger&auml;t mit einer Ex Vivo Stimulierung Experiment und im Vergleich zu standard Masse isoliert Methoden. Schlie&szlig;lich wir implementieren dieses Tool als Teil einer nahe-Patienten Blut Verarbeitung System innerhalb einer multizentrischen klinischen Studie der Immunantwort zu schweren Traumata und Verletzungen zu brennen. Die vorl&auml;ufigen Ergebnisse einer kleinen Kohorte von Themen in unserer Studie und gesunden Kontrollen zeigen Muster ein einzigartigen zeitabh&auml;ngige Gen-Ausdrucks deutlich demonstriert die F&auml;higkeit dieses Werkzeugs zeitliche transkriptionelle Ereignisse der Neutrophilen innerhalb einer klinischen Einstellung zu unterscheiden.

Klinische Biochips f&uuml;r neutrophil Genomik und Proteomik.

I neutrofili hanno ruoli chiave nella modulazione della risposta immunitaria. Vi presentiamo una robusta metodologia per isolare rapidamente i neutrofili direttamente dal sangue intero con &#39;on-chip&#39; elaborazione per l&#39;isolamento di mRNA e proteine per la genomica e proteomica. Noi convalidare questo dispositivo con un ex vivo esperimento stimolo e confronto con metodologie di isolamento standard alla rinfusa. Ultima, noi attuare questo strumento come parte di un vicino-paziente sangue elaborazione sistema all&#39;interno di uno studio clinico multicentrico della risposta immunitaria a gravi traumi e bruciare lesioni. I risultati preliminari di una piccola coorte di soggetti nel nostro studio e controlli sani mostrano un pattern di espressione unico gene dipendente dal tempo chiaramente dimostrando la capacit&agrave; di questo strumento per discriminare eventi transcriptional temporali dei neutrofili all&#39;interno di un contesto clinico.

Clinica microfluidics per neutrofili genomica e proteomica.

&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x306F;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x6025;&#x901F;&#x306B;&#x30B2;&#x30CE;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;mRNA&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5206;&#x96E2;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E; &#x26;quot;&#x30AA;&#x30F3;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x26;quot;&#x306E;&#x51E6;&#x7406;&#x3092;&#x5168;&#x8840;&#x304B;&#x3089;&#x76F4;&#x63A5;&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x3092;&#x5358;&#x96E2;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5805;&#x7262;&#x306A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x8AD6;&#x3092;&#x63D0;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;ex vivo&#x3067;&#x523A;&#x6FC0;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3067;&#x3001;&#x6A19;&#x6E96;&#x7684;&#x306A;&#x30D0;&#x30EB;&#x30AF;&#x5206;&#x96E2;&#x624B;&#x6CD5;&#x3068;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x3092;&#x691C;&#x8A3C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x91CD;&#x7BE4;&#x306A;&#x5916;&#x50B7;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x591A;&#x65BD;&#x8A2D;&#x81E8;&#x5E8A;&#x8A66;&#x9A13;&#x306E;&#x4E2D;&#x3067;&#x8FD1;&#x3044;&#x60A3;&#x8005;&#x306E;&#x8840;&#x6DB2;&#x51E6;&#x7406;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306E;&#x4E00;&#x90E8;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3053;&#x306E;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x5B9F;&#x88C5;&#x3057;&#x3001;&#x602A;&#x6211;&#x3092;&#x71C3;&#x3084;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3068;&#x5065;&#x5E38;&#x8005;&#x306E;&#x88AB;&#x9A13;&#x8005;&#x306E;&#x5C0F;&#x3055;&#x306A;&#x30B3;&#x30DB;&#x30FC;&#x30C8;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x4E88;&#x5099;&#x7684;&#x306A;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x81E8;&#x5E8A;&#x73FE;&#x5834;&#x5185;&#x3067;&#x306E;&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x306E;&#x4E00;&#x6642;&#x7684;&#x306A;&#x8EE2;&#x5199;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x306A;&#x6642;&#x9593;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3002;

&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x81E8;&#x5E8A;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A4;&#x30C7;&#x30A3;&#x30AF;&#x30B9;

&#xD638; &#xC911;&#xAD6C;&#xB294; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC751;&#xB2F5; &#xBCC0;&#xC870;&#xC5D0; &#xC8FC;&#xC694; &#xC5ED;&#xD560;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBE60;&#xB974;&#xAC8C; neutrophils &#xC804;&#xCCB4; &#xD608;&#xC561;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C1;&#xC811; &#39; &#xB0B4;&#xC7A5; &#39; &#xC720;&#xC804;&#xCCB4;&#xD559;&#xACFC; proteomics&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; mRNA &#xBC0F; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBD84;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCC98;&#xB9AC;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xACE0;&#xB9BD; &#xC2DC;&#xD0A4;&#xAE30;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xBC29;&#xBC95;&#xB860;&#xC744; &#xC81C;&#xC2DC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC804;&#xC9C1;&#xC774;&#xC774; &#xC7A5;&#xCE58; &#xC720;&#xD6A8;&#xC131; &#xAC80;&#xC0AC; vivo &#xC790;&#xADF9; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xBC0F; &#xD45C;&#xC900; &#xB300;&#xB7C9; &#xACA9;&#xB9AC; &#xBC29;&#xBC95;&#xB860; &#xBE44;&#xAD50;&#xD574;&#xBCF4;&#xBA74;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xADFC;&#xCC98; &#xD658;&#xC790; &#xD608;&#xC561; &#xCC98;&#xB9AC; &#xC2EC;&#xD55C; &#xC678;&#xC0C1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBA74;&#xC5ED; &#xBC18;&#xC751;&#xC758; &#xBA40;&#xD2F0; &#xC13C;&#xD130; &#xC784;&#xC0C1; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; &#xC77C;&#xD658;&#xC73C;&#xB85C;&#xC774; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xB97C; &#xAD6C;&#xD604; &#xD558; &#xACE0; &#xBD80;&#xC0C1;&#xC744; &#xAD6C;&#xC6B8;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC640; &#xAC74;&#xAC15; &#xD55C; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864;&#xC758; &#xC791;&#xC740; &#xCF54; &#xD638;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC608;&#xBE44; &#xACB0;&#xACFC; &#xBA85;&#xD655; &#xD558; &#xAC8C; &#xC784;&#xC0C1; &#xC124;&#xC815; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD638; &#xC911;&#xAD6C;&#xC758; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC801; transcriptional &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8; &#xCC28;&#xBCC4;&#xC774; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xC758; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xB294; &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC9C4; &#xC2DD; &#xD328;&#xD134;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC784;&#xC0C1; microfluidics &#xD638; &#xC720;&#xC804;&#xCCB4;&#xD559;&#xACFC; proteomics&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Los neutr&#xF3;filos tienen un papel clave en la modulaci&#xF3;n de la respuesta inmune. Se presenta una metodolog&#xED;a s&#xF3;lida para el r&#xE1;pido aislamiento de los neutr&#xF3;filos directamente de la sangre total con &#x26;#39;on-chip&#x26;#39; de procesamiento de mRNA y de aislamiento de las prote&#xED;nas de la gen&#xF3;mica y la prote&#xF3;mica. Validamos este dispositivo con un experimento in vivo la estimulaci&#xF3;n ex y en comparaci&#xF3;n con las metodolog&#xED;as est&#xE1;ndar de aislamiento a granel. Por &#xFA;ltimo, ponemos en pr&#xE1;ctica esta herramienta como parte de un sistema de la sangre cerca del paciente de procesamiento dentro de un estudio cl&#xED;nico multic&#xE9;ntrico de la respuesta inmune a un traumatismo grave y lesiones por quemadura. Los resultados preliminares de un peque&#xF1;o grupo de sujetos de nuestro estudio y los controles sanos muestran una &#xFA;nica funci&#xF3;n del tiempo patr&#xF3;n de expresi&#xF3;n g&#xE9;nica que demuestra claramente la capacidad de esta herramienta para discriminar los eventos temporales de la transcripci&#xF3;n de los neutr&#xF3;filos en un entorno cl&#xED;nico.

Microflu&#xED;dica cl&#xED;nicas para la Gen&#xF3;mica y Prote&#xF3;mica de neutr&#xF3;filos

&#x4E25;&#x91CD;&#x70E7;&#x4F24;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7684; T &#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7279;&#x5B9A;&#x514D;&#x75AB;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x5916;&#x5468;&#x8840;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#x4E0B;&#x964D;&#xFF0C;&#x9664;&#x4E86;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x5206;&#x6CCC;&#x548C;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E5F;&#x53D1;&#x751F;&#x66F4;&#x6539;&#x3002;&#x708E;&#x6027;&#x53CD;&#x5E94;&#x6211;&#x4EEC;&#x66F4;&#x597D;&#x7684;&#x7406;&#x89E3;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x9776;&#x5411;&#x7597;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x53D1;&#x5C55;&#x9700;&#x8981;&#x4E13;&#x95E8;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x76D1;&#x6D4B;&#x3002;&#x65B0;&#x5174;&#x9886;&#x57DF;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x5FAE;&#x578B;&#x673A;&#x7535;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7528;&#x4E8E;&#x5728;&#x4E34;&#x5E8A;&#x4E0A;&#x6709;&#x5173;&#x548C;&#x53CA;&#x65F6;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x4E3A;&#x4E0B;&#x6E38;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x5206;&#x6790;&#x4E2D;&#x9694;&#x79BB;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x7EAF; T &#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x4ECE;&#x5065;&#x5EB7;&#x5FD7;&#x613F;&#x8005;&#x548C;&#x70E7;&#x4F24;&#x75C5;&#x4EBA;&#x7684;&#x8840;&#x6DB2;&#x6837;&#x672C;&#x88AB;&#x5F15;&#x5165;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x8BBE;&#x5907;&#x5F00;&#x53D1;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5BA4;&#x3002;&#x8BBE;&#x5907;&#x5229;&#x7528;&#x79EF;&#x6781;&#x9009;&#x62E9; T &#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x4EB2;&#x548C;&#x5C42;&#x6790;&#xFF0C;&#x62C5;&#x4EFB; RNA &#x63D0;&#x53D6;&#x548C;&#x4E0B;&#x6E38;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x5206;&#x6790;&#x901A;&#x8FC7;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5B9E;&#x65F6;&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x94FE;&#x53CD;&#x5E94; (PCR) &#x7684;&#x5E73;&#x53F0;&#x3002;&#x4ECE; 0.5 &#x6BEB;&#x5347;&#x5168;&#x8840;&#x6837;&#x672C;&#xFF0C;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x8BBE;&#x5907;&#x6355;&#x83B7;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x7EAF;&#x4ECE;&#x5065;&#x5EB7;&#x5FD7;&#x613F;&#x8005;&#x548C;&#x70E7;&#x4F24;&#x60A3;&#x8005;&#x7684; T &#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6355;&#x83B7;&#x8DB3;&#x591F;&#x6570;&#x91CF;&#x548C;&#x8D28;&#x91CF;&#x8DB3;&#x591F;&#x597D;&#xFF0C;&#x8BC4;&#x4EF7;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x662F;&#x63D0;&#x53D6;&#x7684; RNA&#xFF1A; &#x5E72;&#x6270;&#x7D20;&#x3001; &#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-2&#x3001; &#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-4 &#x548C;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-10&#x3002;&#x5FAE;&#x6D41;&#x4F53;&#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6709;&#x7528;&#x7684;&#x5DE5;&#x5177;&#xFF0C;&#x5728;&#x5904;&#x7406;&#x4ECE;&#x70E7;&#x4F24;&#x60A3;&#x8005;&#x7684;&#x8840;&#x6DB2;&#x4E2D;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x5728;&#x53D1;&#x5C55;&#x5176;&#x975E;&#x5E38;&#x65E9;&#x671F;&#x7684;&#x9636;&#x6BB5;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x8FD9;&#x4E00;&#x5E73;&#x53F0;/&#x6280;&#x672F;&#x83B7;&#x5F97;&#x7684;&#x7279;&#x5B9A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x4FE1;&#x606F;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x63A5;&#x8FD1;&#x75C5;&#x4EBA;&#x5206;&#x5B50;&#x8BCA;&#x65AD;&#x5B66;&#x548C;&#x4E2A;&#x6027;&#x5316;&#x7684;&#x533B;&#x5B66;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x7EC4;&#x6210;&#x90E8;&#x5206;&#x3002;

T &#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x79BB;&#x548C;&#x708E;&#x75C7;&#x76D1;&#x6D4B;&#x5728;&#x5FAE;&#x6D41;&#x4F53;&#x70E7;&#x4F24;&#x75C5;&#x4EBA;&#x3002;

Severe burns result in T lymphocyte specific immunologic changes. In addition to decreased levels of circulating lymphocytes, changes in cytokine secretion and receptor expression also take place. Our finer understanding of the inflammatory response has led to the development of immune-targeted therapeutics, requiring specialized gene-expression monitoring. The emerging field of bio-micro-electromechanical systems can be used to isolate highly pure T lymphocytes in a clinically relevant and timely manner for downstream genomic analysis. Blood samples from healthy volunteers and burn-injured patients were introduced into microfluidic devices developed in our laboratory. Utilizing cell-affinity chromatography for positive selection of T lymphocytes, the devices served as a platform for RNA extraction and downstream cytokine analysis via quantitative real-time polymerase chain reaction (PCR). From a 0.5-mL whole blood sample, the microfluidic devices captured highly pure T lymphocytes from healthy volunteers and burn-injured patients. Cell capture was of sufficient quantity, and extracted RNA was of sufficient quality, for evaluating the gene expression of cytokines: interferon-gamma, interleukin-2, interleukin-4, and interleukin-10. Microfluidics is a useful tool in processing blood from burn-injured patients. Though in its very early stages of development, cell-specific information obtained by this platform/technology will likely be an important component of near-patient molecular diagnostics and personalized medicine.

Microfluidics for T- lymphocyte cell separation and inflammation monitoring in burn patients.

Provoquer des br&ucirc;lures graves changements immunologiques sp&eacute;cifiques des lymphocytes T. En plus des niveaux une diminution des lymphocytes circulants, changements dans l&#39;expression de r&eacute;cepteurs et de la s&eacute;cr&eacute;tion de cytokines ont &eacute;galement lieu. Notre compr&eacute;hension plus fine de la r&eacute;ponse inflammatoire a conduit au d&eacute;veloppement de th&eacute;rapies cibl&eacute;es immunitaire, n&eacute;cessitant une surveillance sp&eacute;cialis&eacute;e-l&#39;expression du g&egrave;ne. Le domaine &eacute;mergent des syst&egrave;mes bio-micro-ELECTROMECANIQUE permet d&#39;isoler des lymphocytes T tr&egrave;s pures de fa&ccedil;on cliniquement pertinente et opportune pour l&#39;analyse g&eacute;nomique en aval. Des &eacute;chantillons de sang de volontaires sains et des patients de br&ucirc;lure-bless&eacute;s furent introduites dans les dispositifs microfluidiques d&eacute;velopp&eacute;s dans notre laboratoire. Les dispositifs utilisant la chromatographie d&#39;affinit&eacute; cellulaire pour la s&eacute;lection positive des lymphocytes T, servi comme une plate-forme pour l&#39;extraction de l&#39;ARN et l&#39;analyse de cytokine en aval via quantitative en temps r&eacute;el amplification g&eacute;nique (PCR). Aupr&egrave;s d&#39;un &eacute;chantillon de sang entier 0,5 mL, les dispositifs microfluidiques captur&eacute; des lymphocytes T tr&egrave;s pures de volontaires sains et des patients de br&ucirc;lure-bless&eacute;s. Capture cellulaire &eacute;tait de quantit&eacute; suffisante, et l&#39;ARN extrait a &eacute;t&eacute; d&#39;une qualit&eacute; suffisante, pour l&#39;&eacute;valuation de l&#39;expression des g&egrave;nes des cytokines : interf&eacute;ron-gamma, interleukine-2, interleukine-4 et interleukin-10. La microfluidique est un outil utile dans le traitement de sang chez des patients de br&ucirc;lure-bless&eacute;s. Mais dans ses tout premiers stades de d&eacute;veloppement, informations sp&eacute;cifiques des cellules obtenues par cette plate-forme/technologie aura vraisemblablement un &eacute;l&eacute;ment important du diagnostic mol&eacute;culaire de cliniques et de la m&eacute;decine personnalis&eacute;e.

Microfluidique pour la s&eacute;paration des cellules lymphocytes T et l&#39;inflammation dans les patients br&ucirc;l&eacute;s.

Schwere Verbrennungen f&uuml;hren T-Lymphozyten spezifische immunologische Ver&auml;nderungen. Neben verringerte Niveaus der zirkulierenden Lymphozyten finden &Auml;nderungen in Zytokin-Sekretion und Rezeptor-Ausdruck auch statt. Unser feiner Verst&auml;ndnis der Entz&uuml;ndung f&uuml;hrte zu der Entwicklung von immun-bezogene Therapeutik, erfordern spezielle Genexpression-&Uuml;berwachung. Dem aufstrebenden Gebiet der Bio-Mikro-Elektromechanische Systeme kann verwendet werden, um hochreines T-Lymphozyten auf eine klinisch relevante und aktuelle Weise f&uuml;r nachgeschaltete genomische Analyse zu isolieren. Blutproben von gesunden Probanden und Patienten brennen-verletzt wurden in mikrofluidische Ger&auml;te entwickelt, die in unserem Labor eingef&uuml;hrt. Verwendung von Zelle-Affinit&auml;ts-Chromatographie f&uuml;r positive Auswahl von T-Lymphozyten, die Ger&auml;te diente als Plattform f&uuml;r RNA-Extraktion und Analyse der nachgeschalteten Cytokine &uuml;ber quantitative Real-Time Polymerase-Kettenreaktion (PCR). Von einer 0,5 mL Vollblut-Probe erfasst die Microfluidic Vorrichtungen hochreines T-Lymphozyten von gesunden Probanden und Patienten brennen-verletzt. Zelle erfassen der gen&uuml;genden Quantit&auml;t und extrahierten RNA war von ausreichender Qualit&auml;t, f&uuml;r die Bewertung der Genexpression von Zytokinen: Interferon-Gamma, Interleukin-2, Interleukin-4 und Interleukin-10. Mikrofluidik ist ein n&uuml;tzliches Werkzeug bei der Verarbeitung von Blut aus brennen-verletzten Patienten. Obwohl in seinen sehr fr&uuml;hen Stadien der Entwicklung, d&uuml;rfte zellspezifische Informationen von dieser Plattform/Technologie ein wichtiger Bestandteil in der N&auml;he von Patient molecular Diagnostics und personalisierte Medizin.

Biochips f&uuml;r T-Lymphozyten Zellseparation und Entz&uuml;ndungen, die &Uuml;berwachung von brennen Patienten.

Cambiamenti immunologici specifici linfociti T causare gravi ustioni. Oltre alla diminuzione dei livelli circolanti di linfociti, cambiamenti nell&#39;espressione secrezione e recettori delle citochine anche avvengono. La nostra comprensione pi&ugrave; sottile della risposta infiammatoria ha portato allo sviluppo di terapie mirate immunitario, che richiedono monitoraggio specializzato di espressione del gene. Il campo emergente della bio-micro-electromechanical systems pu&ograve; essere utilizzato per isolare i linfociti T altamente puri in maniera clinicamente rilevante e tempestiva per analisi genomiche a valle. Campioni di sangue da volontari sani e pazienti burn-feriti furono introdotte in dispositivi microfluidici sviluppati nel nostro laboratorio. I dispositivi utilizzando la cromatografia di affinit&agrave; delle cellule per selezione positiva dei linfociti T, servito come una piattaforma per l&#39;estrazione di RNA e l&#39;analisi di cytokine a valle via quantitativa Real-Time polymerase chain reaction (PCR). Da un campione di 0.5 mL di sangue intero, i dispositivi microfluidici catturarono altamente puri linfociti T da volontari sani e pazienti feriti da ustione. Cella cattura era di quantit&agrave; sufficienti, e RNA estratto di qualit&agrave; sufficiente, per valutare l&#39;espressione genica delle citochine: l&#39;interferone gamma, interleuchina-2, Interleuchina-4 e interleukin-10. Microfluidica &egrave; un utile strumento nell&#39;elaborazione di sangue da pazienti feriti da ustione. Anche se nelle sue prime fasi di sviluppo, informazioni specifiche delle cellule ottenute da questa piattaforma tecnologia sar&agrave; probabilmente una componente importante della diagnostica molecolare vicino a paziente e medicina personalizzata.

Microfluidics per separazione delle cellule T-linfociti e infiammazione monitoraggio nel bruciare i pazienti.

&#x91CD;&#x5EA6;&#x306E;&#x3084;&#x3051;&#x3069;&#x306F;&#x3001;T &#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x5B66;&#x7684;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x5FAA;&#x74B0;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306B;&#x52A0;&#x3048;&#x3066;&#x3001;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x5206;&#x6CCC;&#x3068;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3082;&#x884C;&#x308F;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x708E;&#x75C7;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306E;&#x7D30;&#x304B;&#x3044;&#x7406;&#x89E3;&#x306F;&#x5C02;&#x9580;&#x7684;&#x306A;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x30E2;&#x30CB;&#x30BF;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x5B9F;&#x65BD;&#x3059;&#x308B;&#x6CBB;&#x7642;&#x85AC;&#x3001;&#x514D;&#x75AB;&#x3092;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA; &#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x96FB;&#x6C17;&#x6A5F;&#x68B0;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306E;&#x65B0;&#x8208;&#x5206;&#x91CE;&#x306F;&#x81E8;&#x5E8A;&#x7684;&#x306B;&#x9069;&#x5207;&#x304B;&#x3064;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0;&#x30EA;&#x30FC;&#x4E0B;&#x6D41;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x89E3;&#x6790;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x9AD8;&#x7D14;&#x5EA6; T &#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#x3092;&#x5206;&#x96E2;&#x3059;&#x308B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5065;&#x5EB7;&#x306A;&#x30DC;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30A2;&#x3068;&#x706B;&#x50B7;&#x8CA0;&#x50B7;&#x3057;&#x305F;&#x60A3;&#x8005;&#x304B;&#x3089;&#x8840;&#x6DB2;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x306F;&#x5F53;&#x7814;&#x7A76;&#x5BA4;&#x3067;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x305F;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x306B;&#x5C0E;&#x5165;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;T &#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#x306E;&#x6B63;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x3092;&#x5229;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x306E; RNA &#x306E;&#x62BD;&#x51FA;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30EA;&#x30A2;&#x30EB;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0;&#x306E;&#x91CF;&#x7684;&#x306A;&#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x9023;&#x9396;&#x53CD;&#x5FDC; (PCR) &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x4E0B;&#x6D41;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x89E3;&#x6790;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x52D9;&#x3081;&#x305F;&#x3002;0.5 ML &#x5168;&#x8840;&#x306E;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x304B;&#x3089;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x306F;&#x5065;&#x5EB7;&#x306A;&#x30DC;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30A2;&#x3068;&#x706B;&#x50B7;&#x8CA0;&#x50B7;&#x3057;&#x305F;&#x60A3;&#x8005;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x9AD8;&#x7D14;&#x5EA6;&#x306E; T &#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#x3092;&#x6355;&#x7372;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x6355;&#x7372;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5341;&#x5206;&#x306A;&#x91CF;&#x3068;&#x62BD;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F; RNA &#x306E;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5341;&#x5206;&#x306A;&#x54C1;&#x8CEA;&#x3001;: &#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30F3;-&gamma;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30ED;&#x30A4;&#x30AD;&#x30F3; 2&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30ED;&#x30A4;&#x30AD;&#x30F3; 4 &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30ED;&#x30A4;&#x30AD;&#x30F3;-10&#x3002;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A4;&#x30C7;&#x30A3;&#x30AF;&#x30B9;&#x706B;&#x50B7;&#x8CA0;&#x50B7;&#x3057;&#x305F;&#x60A3;&#x8005;&#x304B;&#x3089;&#x8840;&#x6DB2;&#x3092;&#x51E6;&#x7406;&#x306B;&#x4FBF;&#x5229;&#x306A;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x30BB;&#x30EB;&#x56FA;&#x6709;&#x306E;&#x60C5;&#x5831;&#x3092;&#x3053;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;/&#x6280;&#x8853;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x60A3;&#x8005;&#x306B;&#x8FD1;&#x3044;&#x5206;&#x5B50;&#x8A3A;&#x65AD;&#x3068;&#x500B;&#x5225;&#x5316;&#x533B;&#x7642;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x306B;&#x304F;&#x3044;&#x3002;

T &#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x96E2;&#x3068;&#x708E;&#x75C7;&#x306E;&#x76E3;&#x8996;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A4;&#x30C7;&#x30A3;&#x30AF;&#x30B9;&#x71B1;&#x50B7;&#x60A3;&#x8005;&#x3002;

&#xC2EC;&#xD55C; &#xD654;&#xC0C1; T &#xB9BC;&#xD504; &#xAD6C; &#xD2B9;&#xC815; &#xB0B4;&#xBD84;&#xBE44;&#xD559; &#xBCC0;&#xACBD; &#xB420;. &#xB9BC;&#xD504; &#xC21C;&#xD658;&#xC758; &#xC800;&#xD558; &#xC218;&#xC900; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; cytokine&#xC758; &#xBD84; &#xBE44;&#xC640; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC2DD;&#xC5D0; &#xBCC0;&#xACBD; &#xC790;&#xB9AC;&#xB97C; &#xCC28;&#xC9C0;&#xD560;. &#xC5FC;&#xC99D; &#xBC18;&#xC751;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC138;&#xBC00; &#xD558; &#xAC8C; &#xC774;&#xD574; &#xBA74;&#xC5ED; &#xD0C0;&#xAC9F; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD559; &#xBC1C;&#xC804;&#xC5D0; &#xD2B9;&#xC218; &#xD55C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1; &#xC694;&#xAD6C; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xBC14;&#xC774;&#xC624; &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; &#xC804;&#xC790; &#xAE30;&#xACC4; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; &#xC2E0;&#xD765; &#xBD84;&#xC57C; &#xB2E4;&#xC6B4;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xAC8C;&#xB188; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC784;&#xC0C1; &#xAD00;&#xB828; &#xACE0; &#xC2DC;&#xC758; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xB192;&#xC740; &#xC21C;&#xC218; T &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xB9AC; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAC74;&#xAC15; &#xD55C; &#xC9C0;&#xC6D0;&#xC790;&#xC640; &#xD654;&#xC0C1; &#xC190;&#xC0C1; &#xD658;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD608;&#xC561; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC744; &#xC800;&#xD76C; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC2E4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB41C; &#xBBF8;&#xC138; &#xC18C;&#xC790;&#xC5D0; &#xB3C4;&#xC785; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC120;&#xD0DD; T &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xCE5C;&#xD654;&#xC131; &#xD06C;&#xB85C;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xADF8;&#xB798;&#xD53C;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC7A5;&#xCE58; RNA &#xCD94;&#xCD9C; &#xBC0F; &#xC815;&#xB7C9; &#xC2E4;&#xC2DC;&#xAC04; &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C; &#xC5F0;&#xC1C4; &#xBC18;&#xC751; (PCR)&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xB2E4;&#xC6B4;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; cytokine &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC;&#xC73C;&#xB85C; &#xC81C;&#xACF5; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. 0.5 ML &#xC804;&#xCCB4; &#xD608;&#xC561; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBBF8;&#xC138; &#xC18C;&#xC790; &#xAC74;&#xAC15; &#xD55C; &#xC790;&#xC6D0; &#xBD09;&#xC0AC;&#xC790;&#xC640; &#xD654;&#xC0C1; &#xC190;&#xC0C1; &#xD658;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC21C;&#xC218; T &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC810;&#xB839;. &#xC140; &#xCEA1;&#xCC98;&#xB294; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xC218;&#xB7C9; &#xBC0F; cytokines&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC744; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xD488;&#xC9C8;&#xC758; &#xCD94;&#xCD9C; &#xB41C; RNA&#xB294;: &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xB860;-&#xAC10;&#xB9C8;, interleukin-2, &#xC778;&#xD130; &#xB8E8; &#xD0A8;-4 &#xBC0F; &#xC778;&#xD130; &#xB8E8; &#xD0A8;-10. Microfluidics &#xD654;&#xC0C1; &#xC190;&#xC0C1; &#xD658;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD608;&#xC561; &#xCC98;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xC720;&#xC6A9;&#xD55C; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC758; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xCD08;&#xAE30; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC;&#xC774; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC;/&#xAE30;&#xC220;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC5BB;&#xC740; &#xC138;&#xD3EC; &#xD2B9;&#xC815; &#xC815;&#xBCF4; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xADFC;&#xCC98; &#xD658;&#xC790; &#xBD84;&#xC790; &#xC9C4;&#xB2E8; &#xBC0F; &#xB9DE;&#xCDA4;&#xB41C; &#xC758;&#xD559;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC694;&#xC18C; &#xAC83;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

T-&#xB9BC;&#xD504; &#xAD6C; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xB9AC; &#xBC0F; &#xC5FC;&#xC99D;&#xC5D0; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1; Microfluidics &#xD654;&#xC0C1; &#xD658;&#xC790;.

Ocasionar quemaduras graves cambios inmunol&oacute;gicos espec&iacute;ficos de linfocitos T. Adem&aacute;s de la disminuci&oacute;n de los niveles de linfocitos circulantes, cambios en la expresi&oacute;n de secreci&oacute;n y receptores de citoquinas tambi&eacute;n llevar&aacute; a cabo. Nuestra comprensi&oacute;n m&aacute;s fino de la respuesta inflamatoria ha llevado al desarrollo de la terap&eacute;utica orientada inmune, que requieren supervisi&oacute;n especializada expresi&oacute;n g&eacute;nica. El emergente campo de los sistemas bio-micro-electromec&aacute;nicos puede utilizarse para aislar los linfocitos de T altamente puros en forma cl&iacute;nicamente relevante y oportuna para posteriores an&aacute;lisis gen&oacute;mico. Muestras de sangre de voluntarios sanos y pacientes con lesi&oacute;n quemadura fueron introducidas en dispositivos microflu&iacute;dicos desarrollados en nuestro laboratorio. Utilizando cromatograf&iacute;a de afinidad de la c&eacute;lula para la selecci&oacute;n positiva de los linfocitos T, los dispositivos sirvieron como plataforma para la extracci&oacute;n de RNA y aguas abajo de la citoquina an&aacute;lisis mediante reacci&oacute;n en cadena en tiempo real cuantitativa de la polimerasa (PCR). De una muestra de sangre entera de 0.5 mL, los dispositivos microflu&iacute;dicos capturaron altamente puros linfocitos T de voluntarios sanos y pacientes con lesi&oacute;n de quemadura. C&eacute;lula captura era cantidad suficiente, y ARN extra&iacute;da era de suficiente calidad, para la evaluaci&oacute;n de la expresi&oacute;n g&eacute;nica de citoquinas: interfer&oacute;n-gamma, interleuquina-2, interleuquina-4 e Interleucina-10. Microflu&iacute;dica es una herramienta &uacute;til en el procesamiento de sangre de pacientes con lesi&oacute;n de quemadura. Aunque en sus primeras etapas de desarrollo, informaci&oacute;n espec&iacute;fica de c&eacute;lulas obtenida por esta plataforma/tecnolog&iacute;a ser&aacute; un componente importante de diagn&oacute;stico molecular cerca del paciente y de la medicina personalizada.

Microflu&iacute;dica para separaci&oacute;n de c&eacute;lulas de linfocitos T y la inflamaci&oacute;n en quema a pacientes.

&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x7684;&#x8868;&#x76AE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x53D7;&#x4F53; (EGFR) &#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x86CB;&#x767D;&#x5BF9;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE; A431 &#x5E94;&#x7528;&#x53CC;&#x5149;&#x5B50;&#x6FC0;&#x53D1;&#x94D5;&#x87AF;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x3002;&#x94D5;&#x87AF;&#x5408;&#x7269;&#x662F;&#x5174;&#x594B;&#x4E0E;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5149;&#x5B50;&#x7684;&#x7EA2;&#x5916;&#x706F;&#xFF0C;&#x53D1;&#x51FA;&#x4E2D;&#x6E05;&#x6670;&#x53EF;&#x89C1;&#x3002;&#x94D5;&#x87AF;&#x5408;&#x7269;&#x88AB;&#x5171;&#x8F6D;&#x6297;&#x4F53;&#x4E3A;&#x8868;&#x76AE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x3002;A431 (&#x4EBA;&#x7C7B;&#x8868;&#x76AE;&#x6837;&#x764C;) &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x6807;&#x6709;&#x6B64;&#x5171;&#x8F6D;&#x548C;&#x6620;&#x50CF;&#x4F7F;&#x7528;&#x591A;&#x5149;&#x5B50;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x3002;&#x540C;&#x65F6;&#xFF0C;&#x5C3D;&#x91CF;&#x51CF;&#x5C11;&#x4FE1;&#x53F7;&#x635F;&#x5931;&#x5BFF;&#x547D;&#x76F8;&#x5BF9;&#x8F83;&#x957F;&#x7684; Eu(3+) &#x6392;&#x653E;&#xFF0C;&#x591A;&#x5149;&#x5B50;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x7528;&#x626B;&#x63CF;&#x6FC0;&#x5149;&#x53CC;&#x5149;&#x5B50;&#x6FC0;&#x53D1;&#x548C;&#x975E;&#x626B;&#x63CF;&#x68C0;&#x6D4B;&#x4E0E;&#x9632;&#x6CBB;&#x8352;&#x6F20;&#x5316;&#x516C;&#x7EA6;&#x3002;&#x87AF;&#x5408;&#x7684;&#x6807;&#x7B7E;&#x663E;&#x793A;&#x5F88;&#x5C11;&#x5149;&#x6F02;&#x767D; (&#x5C11;&#x4E8E; 1%&#x671F;&#x95F4;&#x8FDE;&#x7EED;&#x7167;&#x660E;&#x7684;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C; 20 &#x5206;&#x949F;) &#x548C;&#x4F4E;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x81EA;&#x4F53;&#x8367;&#x5149; (&#x5C11;&#x4E8E; 1%&#x7684;&#x5E26;&#x6807;&#x7B7E;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;)&#x3002;&#x68C0;&#x6D4B;&#x9650;&#x7684;&#x94D5;&#x6807;&#x7B7E;&#x4E2D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x68C0;&#x6D4B;&#x80DC;&#x8FC7; 100 zeptomoles&#x3002;

&#x4F7F;&#x7528;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5149;&#x5B50;&#x6FC0;&#x53D1;&#x94D5;&#x87AF;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x68C0;&#x6D4B;&#x3002;

We report application of two-photon excitation of europium chelates to immunolabeling of epidermal growth factor receptor (EGFR) cell surface proteins on A431 cancer cells. The europium chelates are excited with two photons of infrared light and emit in the visible. Europium chelates are conjugated to antibodies for EGFR. A431 (human epidermoid carcinoma) cells are labeled with this conjugate and imaged using a multiphoton microscope. To minimize signal loss due to the relatively long-lived Eu(3+) emission, the multiphoton microscope is used with scanning laser two-photon excitation and non-scanning detection with a CCD. The chelate labels show very little photobleaching (less than 1% during continuous illumination in the microscope for 20 minutes) and low levels of autofluorescence (less than 1% of the signal from labeled cells). The detection limit of the europium label in the cell assay is better than 100 zeptomoles.

Cell assay using a two-photon-excited europium chelate.

Nous rapportons demande d&#39;excitation &agrave; deux photons de l&#39;europium ch&eacute;lates d&#39;immunomarquage des prot&eacute;ines de surface epidermal growth factor receptor (EGFR) cellule sur les cellules canc&eacute;reuses A431. Les ch&eacute;lates de l&#39;europium sont excit&eacute;s avec deux photons de la lumi&egrave;re infrarouge et &eacute;mettent dans le visible. L&#39;europium ch&eacute;lates sont conjugu&eacute;s d&#39;anticorps pour l&#39;EGFR. Les cellules A431 (carcinome &eacute;pidermo&iuml;de humain) sont marqu&eacute;s avec ce conjugu&eacute; et photographi&eacute; &agrave; l&#39;aide d&#39;un microscope multiphoton. Pour minimiser la perte de signal due &agrave; l&#39;&eacute;mission de Eu(3+) vit relativement longtemps, le microscope multiphoton est utilis&eacute; avec excitation &agrave; deux photons balayage laser et non d&eacute;tection d&eacute;tection avec un CCD. Les &eacute;tiquettes ch&eacute;lates montrent tr&egrave;s peu de photoblanchiment (moins de 1 % au cours de l&#39;&eacute;clairement continu au microscope pendant 20 minutes) et de faibles niveaux d&#39;autofluorescence (moins de 1 % du signal de cellules marqu&eacute;es). La limite de d&eacute;tection de l&#39;&eacute;tiquette de l&#39;europium dans l&#39;analyse de cellules est mieux que 100 zeptomoles.

Analyse de cellules &agrave; l&#39;aide d&#39;un ch&eacute;late de deux photons-excit&eacute; l&#39;europium.

Wir berichten die Anwendung der zwei-Photonen-Anregung von Europium Chelate auf Immunolabeling der epidermalen Wachstumsfaktor-Rezeptor (EGFR) Zelle Oberfl&auml;che Proteine auf A431 Krebszellen. Europium-Chelate sind begeistert mit zwei Photonen von Infrarot-Licht und emittieren im sichtbaren. Europium Chelate sind f&uuml;r EGFR-Antik&ouml;rper konjugiert. A431 (menschliche Epidermoidzysten Karzinom) Zellen werden mit diesem Konjugat beschriftet und abgebildet ein multiphoton Mikroskop. Zur Minimierung von Signalverlust wegen der relativ langlebigen Eu(3+)-Emission ist das multiphoton-Mikroskop mit Scan Laser-zwei-Photonen-Anregung und Erkennung mit einem CCD-Scan verwendet. Die Chelat-Etiketten zeigen sehr wenig Photobleaching (weniger als 1 % w&auml;hrend Dauerleuchten im Mikroskop f&uuml;r 20 Minuten) und geringe Autofluoreszenz (weniger als 1 % des Signals von beschrifteten Zellen). Die Nachweisgrenze von Europium Label in die Zellenprobe ist besser als 100 Zeptomoles.

Mit einem zwei-Photonen-aufgeregt Europium-Chelat Zellenprobe.

Riportiamo applicazione di eccitazione del due-fotone di europio chelati di immunomarcatura di epidermal growth factor receptor (EGFR) delle cellule superficiali proteine sulle cellule cancerogene A431. L&#39;europio chelati sono eccitati con due fotoni di luce infrarossa ed emettono nel visibile. Europio chelati sono coniugati agli anticorpi per EGFR. A431 (carcinoma umano epidermoidi) le cellule vengono etichettate con questo coniugato e stampati utilizzando un microscopio multifotonica. Per minimizzare la perdita di segnale a causa dell&#39;emissione Eu(3+) relativamente longevo, viene utilizzato il microscopio multifotonica con scansione laser due-fotone eccitazione e non-la scansione di rilevamento con un CCD. Le etichette chelate mostrano molto poco photobleaching (meno dell&#39;1% durante continua illuminazione del microscopio per 20 minuti) e bassi livelli di autofluorescenza (meno dell&#39;1% del segnale da cellule con etichette). Il limite di rilevamento dell&#39;etichetta europio nel dosaggio delle cellule &egrave; meglio di 100 zeptomoles.

Analisi delle cellule usando un chelato del due-fotone-eccitato europio.

&#x30E6;&#x30FC;&#x30ED;&#x30D4;&#x30A6;&#x30E0;&#x932F;&#x4F53;&#x306E; 2 &#x5149;&#x5B50;&#x52B1;&#x8D77;&#x306E;&#x30A8;&#x30CA;&#x30E1;&#x30EB;&#x4E0A;&#x76AE;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; &#xFF08;EGFR&#xFF09; &#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; A431 &#x7D30;&#x80DE;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7528;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30E6;&#x30FC;&#x30ED;&#x30D4;&#x30A6;&#x30E0;&#x932F;&#x4F53;&#x8D64;&#x5916;&#x5149;&#x306E; 2 &#x3064;&#x306E;&#x5149;&#x5B50;&#x3068;&#x8208;&#x596E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x76EE;&#x306B;&#x898B;&#x3048;&#x308B;&#x3067;&#x51FA;&#x529B;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30E6;&#x30FC;&#x30ED;&#x30D4;&#x30A6;&#x30E0;&#x932F;&#x4F53;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x6297;&#x4F53;&#x306F; EGFR &#x306E;&#x62B1;&#x5408;&#x3067;&#x3059;&#x3002;A431 (&#x3072;&#x3068;&#x6241;&#x5E73;&#x4E0A;&#x76AE;&#x764C;) &#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x5171;&#x5F79;&#x3067;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EB;&#x4ED8;&#x3051;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x591A;&#x5149;&#x5B50;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x3092;&#x4F5C;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6BD4;&#x8F03;&#x7684;&#x9577;&#x547D;&#x306E; Eu(3+) &#x653E;&#x51FA;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x4FE1;&#x53F7;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x3092;&#x6700;&#x5C0F;&#x9650;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x5149;&#x5B50;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x8D70;&#x67FB;&#x578B;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B6;&#x30FC; 2 &#x5149;&#x5B50;&#x52B1;&#x8D77;&#x3068;&#x975E;&#x30B9;&#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x691C;&#x51FA; ccd &#x3068;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30AD;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x5C0F;&#x3055;&#x306A;&#x5149;&#x9000;&#x8272; (&#x9023;&#x7D9A;&#x7167;&#x660E;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3067; 20 &#x5206;&#x306E;&#x9593;&#x306B; 1 &#xFF05; &#x672A;&#x6E80;&#xFF09; &#x3068;&#x86CD;&#x5149; (&#x30E9;&#x30D9;&#x30EB;&#x4ED8;&#x304D;&#x30BB;&#x30EB;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x4FE1;&#x53F7;&#x306E; 1 &#xFF05; &#x672A;&#x6E80;&#xFF09; &#x306E;&#x4F4E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30E6;&#x30FC;&#x30ED;&#x30D4;&#x30A6;&#x30E0; &#x30E9;&#x30D9;&#x30EB; &#x30BB;&#x30EB; &#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3067;&#x306E;&#x691C;&#x51FA;&#x9650;&#x754C;&#x306F; 100 zeptomoles &#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x512A;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

2 &#x5149;&#x5B50;&#x52B1;&#x8D77;&#x30E6;&#x30FC;&#x30ED;&#x30D4;&#x30A6;&#x30E0;&#x932F;&#x4F53;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3002;

&#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCF4;&#xACE0; &#xC720;&#xB85C; &#xD4F8; &#xD0AC;&#xB808;&#xC774;&#xD2B8;&#xC758; 2 &#xAD11;&#xC790; &#xC5EC;&#xAE30; A431 &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD45C; &#xD53C; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (EGFR) &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; immunolabeling &#xC801;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC720;&#xB85C; &#xD4F8; &#xD0AC;&#xB808;&#xC774;&#xD2B8;&#xB294; &#xC801;&#xC678;&#xC120; &#xBE5B;&#xC758; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xAD11;&#xC790;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xAE30;&#xC058;&#xAC8C; &#xC0DD;&#xAC01; &#xD558; &#xACE0; &#xBCF4;&#xC774;&#xB294;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC29;&#xCD9C;. &#xC720;&#xB85C; &#xD4F8; &#xD0AC;&#xB808;&#xC774;&#xD2B8;&#xB294; EGFR&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD56D; &#xCCB4;&#xB97C; &#xD65C;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. A431 (&#xC778;&#xAC04;&#xC758; epidermoid &#xC554;) &#xC140;&#xC774;&#xC774; &#xACF5;&#xC561;&#xC73C;&#xB85C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD558; &#xACE0; multiphoton &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBA87; &#xAD70;&#xB370;. &#xC0C1;&#xB300;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC218;&#xBA85;&#xC774; &#xAE34; Eu(3+) &#xBC29;&#xCD9C; &#xC2E0;&#xD638; &#xC190;&#xC2E4;&#xC744; &#xCD5C;&#xC18C;&#xD654; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; multiphoton &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xC2A4;&#xCE90;&#xB2DD; &#xB808;&#xC774;&#xC800; 2 &#xAD11;&#xC790; &#xC5EC;&#xAE30; &#xBC0F; &#xBE44; &#xC2A4;&#xCE94; &#xD0D0;&#xC9C0;&#xB97C; CCD&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. Chelate &#xB808;&#xC774;&#xBE14;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC544;&#xC8FC; &#xC791;&#xC740; photobleaching (&#xC774; &#xD558; &#xC5F0;&#xC18D; &#xC870;&#xBA85; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD;&#xC5D0; 20 &#xBD84; &#xB3D9;&#xC548; 1%)&#xC640; autofluorescence (&#xC774; &#xD558; 1% &#xB808;&#xC774;&#xBE14;&#xC774; &#xC9C0;&#xC815; &#xB41C; &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E0;&#xD638;)&#xC758; &#xB0AE;&#xC740; &#xC218;&#xC900;. &#xC720;&#xB85C; &#xD4F8; &#xB808;&#xC774;&#xBE14; &#xC140; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC80;&#xCD9C; &#xD55C;&#xACC4; 100 zeptomoles &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB0AB;&#xB2E4;.

&#xC140; &#xC720;&#xB85C; &#xD4F8; 2 &#xAD11;&#xC790; &#xD765;&#xBD84; chelate&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC;.

Divulgamos aplicaci&oacute;n de excitaci&oacute;n de dos fotones de europio quelatos a inmunomarcaci&oacute;n de prote&iacute;nas de superficie factor de crecimiento epid&eacute;rmico (EGFR) del receptor celular en c&eacute;lulas de c&aacute;ncer A431. Los quelatos de europio est&aacute;n con dos fotones de luz infrarroja y emitan en el espectro visible. Quelatos de europio se conjugan para anticuerpos de EGFR. A431 (carcinoma epid&eacute;rmico humano) c&eacute;lulas est&aacute;n marcadas con este conjugado y fotografiada usando un microscopio multifot&oacute;n. Para minimizar la p&eacute;rdida de se&ntilde;al debido a la emisi&oacute;n de Eu(3+) relativamente duradera, se utiliza el microscopio multifot&oacute;n con excitaci&oacute;n de dos fotones de escaneo l&aacute;ser y detecci&oacute;n de an&aacute;lisis no con un CCD. Las etiquetas quelato Mostrar muy poco photobleaching (menos del 1% durante la iluminaci&oacute;n continua en el microscopio durante 20 minutos) y bajos niveles de autofluorescencia (menos del 1% de la se&ntilde;al de las c&eacute;lulas marcadas). El l&iacute;mite de detecci&oacute;n de la etiqueta de europio en el an&aacute;lisis de la c&eacute;lula es mejor que 100 zeptomoles.

An&aacute;lisis de la c&eacute;lula mediante un quelato de europio dos-fot&oacute;n-emocionado.

&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x5206;&#x6790;&#x53EF;&#x4EE5;&#x9884;&#x6D4B;&#x75C5;&#x4EBA;&#x9884;&#x540E;&#x548C;&#x67E5;&#x660E;&#x90A3;&#x4E9B;&#x53EF;&#x80FD;&#x53D7;&#x76CA;&#x4E8E;&#x9776;&#x5411;&#x6CBB;&#x7597;&#x7684;&#x75C5;&#x4EBA;&#x7684;&#x6709;&#x529B;&#x5DE5;&#x5177;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x9694;&#x79BB;&#x4EBA;&#x4F53;&#x8840;&#x6DB2;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE; (&#x4E2D;&#x6027;) &#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x5206;&#x6790;&#x6781;&#x5177;&#x6311;&#x6218;&#x6027;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B0;&#x578B;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x6280;&#x672F;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x6355;&#x83B7; CD66b(+) &#x7EC6;&#x80DE;&#x682A;&#x4E2D;&#x6027;&#x5E76;&#x6BD4;&#x8F83;&#x5B83;&#x4E0E;&#x8461;&#x805A;&#x7CD6; Ficoll &#x68AF;&#x5EA6;&#x5206;&#x79BB;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x4F7F;&#x7528;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x9694;&#x79BB;&#x6280;&#x672F;&#x7528;&#x4E8E;&#x6025;&#x6027;&#x547C;&#x5438;&#x7A98;&#x8FEB;&#x7EFC;&#x5408;&#x5F81; (ARDS) &#x60A3;&#x8005;&#x7684;&#x8840;&#x6DB2;&#x548C;&#x652F;&#x6C14;&#x7BA1;&#x80BA;&#x6CE1;&#x704C;&#x6D17; (BAL) &#x6837;&#x672C;&#x6765;&#x8BC4;&#x4F30;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x6539;&#x5EFA;&#x7EE7;&#x53D1;&#x80BA;&#x9694;&#x79BB;&#x3002;&#x4ECE;&#x83B7;&#x5F97; ex &#x4F53;&#x5185;&#x8102;&#x591A;&#x7CD6; (LPS) &#x7684;&#x4E2D;&#x6027;-&#x523A;&#x6FC0;-&#x6216;&#x9759;&#x6001;&#x7684;&#x5168;&#x8840;&#x4ECE;&#x4E94;&#x540D;&#x5065;&#x5EB7;&#x7684;&#x5FD7;&#x613F;&#x4EBA;&#x5458;&#x88AB;&#x9694;&#x79BB;&#x7684;&#x8461;&#x805A;&#x7CD6; Ficoll &#x68AF;&#x5EA6;&#x3001; &#x5FAE;&#x6D41;&#x4F53;&#x6355;&#x83B7;&#xFF0C;&#x6216;&#x8005;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x6280;&#x672F;&#x7684;&#x7EC4;&#x5408;&#x3002;&#x8840;&#x6DB2;&#x548C; BAL &#x6DB2;&#x4E2D;&#x6027;&#x4E5F;&#x5B64;&#x7ACB;&#x5FAE;&#x6D41;&#x4F53;&#x4ECE;&#x4E03;&#x540D;&#x4F4F;&#x9662;&#x75C5;&#x4EBA;&#x4F7F;&#x7528;&#x547C;&#x5438;&#x7A98;&#x8FEB;&#x7EFC;&#x5408;&#x5F81;&#x3002;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x662F;&#x4ECE;&#x4F7F;&#x7528;&#x597D;&#x5F97;&#x591A; U133 &#x52A0;&#x4E0A; 2.0 &#x82AF;&#x7247;&#x63D0;&#x53D6; RNA &#x63A8;&#x65AD;&#x7684;&#x3002;&#x6240;&#x6709;&#x7684;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x79BB;&#x65B9;&#x6CD5;&#x751F;&#x4EA7;&#x76F8;&#x540C;&#x6570;&#x91CF;&#x7684;&#x9AD8;&#x8D28;&#x91CF; RNA &#x65F6;&#x8C03;&#x6574;&#x7528;&#x4E8E;&#x6062;&#x590D;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x6570;&#x76EE;&#x3002;&#x975E;&#x76D1;&#x7763;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x548C;&#x5206;&#x5C42;&#x805A;&#x7C7B;&#x8868;&#x793A; LPS &#x523A;&#x6FC0;&#x5F71;&#x54CD;&#x6240;&#x6709; ex &#x4F53;&#x5185;&#x6837;&#x672C;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x6A21;&#x5F0F;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;&#x4ECE;&#x8840;&#x6DB2;&#x548C; BAL &#x4E2D;&#x6027;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x6A21;&#x5F0F;&#x4E0E;&#x547C;&#x5438;&#x7A98;&#x8FEB;&#x7EFC;&#x5408;&#x5F81;&#x60A3;&#x8005;&#x4ECE;&#x5F7C;&#x6B64;&#x5927;&#x5927;&#x4E0D;&#x540C;&#x3002;&#x4E2D;&#x6027;&#x7684;&#x5FAE;&#x6D41;&#x4F53;&#x5206;&#x79BB;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5E94;&#x7528;&#x4E8E;&#x8840;&#x6DB2;&#x548C; BAL &#x6807;&#x672C;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x5371;&#x91CD;&#x75C5;&#x4EBA;&#x3001; &#x4F4F;&#x9662;&#x75C5;&#x4EBA;&#x4E2D;&#x3002;&#x72EC;&#x7279;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x6A21;&#x5F0F;&#x83B7;&#x5F97;&#x7684;&#x8840;&#x6DB2;&#x548C;&#x547C;&#x5438;&#x7A98;&#x8FEB;&#x7EFC;&#x5408;&#x5F81;&#x3001; &#x5371;&#x91CD;&#x75C5;&#x60A3;&#x8005; BAL &#x6DB2;&#x548C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6709;&#x5F88;&#x5927;&#x4E0D;&#x540C;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x6A21;&#x5F0F;&#x770B;&#x5230; ex &#x4F53;&#x5185;&#x8102;&#x591A;&#x7CD6;&#x523A;&#x6FC0;&#x3002;

&#x57FA;&#x4E8E;&#x5FAE;&#x6D41;&#x4F53;&#x7684;&#x6355;&#x83B7;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x5206;&#x6790;&#x8840;&#x548C;&#x652F;&#x6C14;&#x7BA1;&#x80BA;&#x6CE1;&#x704C;&#x6D17;&#x6DB2;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;

Gene expression analysis can be a powerful tool in predicting patient outcomes and identifying patients who may benefit from targeted therapies. However, isolating human blood polymorphonuclear cells (PMNs) for genomic analysis has been challenging. We used a novel microfluidic technique that isolates PMNs by capturing CD66b(+) cells and compared it with dextran-Ficoll gradient isolation. We also used microfluidic isolation techniques for blood and bronchoalveolar lavage (BAL) samples of patients with acute respiratory distress syndrome (ARDS) to evaluate PMN genomic alterations secondary to pulmonary sequestration. PMNs obtained from ex vivo lipopolysaccharide (LPS)-stimulated or -unstimulated whole blood from five healthy volunteers were isolated by either dextran-Ficoll gradient, microfluidics capture, or a combination of the two techniques. Blood and BAL fluid PMNs were also isolated using microfluidics from seven hospitalized patients with ARDS. Gene expression was inferred from extracted RNA using Affymetrix U133 Plus 2.0 GeneChips. All methods of PMN isolation produced similar quantities of high-quality RNA, when adjusted for recovered cell number. Unsupervised analysis and hierarchical clustering indicated that LPS stimulation was the primary factor affecting gene expression patterns among all ex vivo samples. Patterns of gene expression from blood and BAL PMNs differed significantly from each other in the patients with ARDS. Isolation of PMNs by microfluidics can be applied to both blood and BAL specimens from critically ill, hospitalized patients. Unique genomic expression patterns are obtained from the blood and BAL fluid of critically ill patients with ARDS, and these differ significantly from genomic patterns seen after ex vivo LPS stimulation.

Microfluidics-based capture of human neutrophils for expression analysis in blood and bronchoalveolar lavage.

Analyse de l&#x26;#39;expression g&#xE9;nique peut &#xEA;tre un outil puissant pour pr&#xE9;dire les r&#xE9;sultats des patients et d&#x26;#39;identifier les patients qui pourraient b&#xE9;n&#xE9;ficier de th&#xE9;rapies cibl&#xE9;es. Cependant, l&#x26;#39;isolement des cellules sanguines humaines polymorphonucl&#xE9;aires (PMN) pour l&#x26;#39;analyse g&#xE9;nomique a &#xE9;t&#xE9; difficile. Nous avons utilis&#xE9; une nouvelle technique microfluidique qui isole PMN en capturant CD66b (+) des cellules et comparaison avec l&#x26;#39;isolement gradient Ficoll-dextrane. Nous avons &#xE9;galement utilis&#xE9; des techniques d&#x26;#39;isolement microfluidiques pour le sang et lavage broncho-alv&#xE9;olaire (LBA) des &#xE9;chantillons de patients atteints du syndrome de d&#xE9;tresse respiratoire aigu&#xEB; (SDRA) pour &#xE9;valuer PMN alt&#xE9;rations g&#xE9;nomiques secondaires &#xE0; la s&#xE9;questration pulmonaire. PMN obtenus &#xE0; partir de lipopolysaccharide ex vivo (LPS)-stimul&#xE9;es ou non stimul&#xE9;es-sang total de cinq volontaires sains ont &#xE9;t&#xE9; isol&#xE9;s par gradient soit dextrane-Ficoll, capture la microfluidique, ou une combinaison des deux techniques. PMN sang et le fluide BAL ont &#xE9;galement &#xE9;t&#xE9; isol&#xE9;s en utilisant la microfluidique de sept patients hospitalis&#xE9;s atteints de SDRA. L&#x26;#39;expression des g&#xE8;nes a &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;duit &#xE0; partir d&#x26;#39;ARN extrait en utilisant Affymetrix U133 Plus 2.0 GeneChips. Toutes les m&#xE9;thodes d&#x26;#39;isolement PMN produit des quantit&#xE9;s similaires de haute qualit&#xE9; de l&#x26;#39;ARN, apr&#xE8;s ajustement pour le nombre de cellules r&#xE9;cup&#xE9;r&#xE9;es. Analyse non supervis&#xE9;e et le clustering hi&#xE9;rarchique a indiqu&#xE9; que la stimulation du LPS a &#xE9;t&#xE9; le principal facteur influant sur l&#x26;#39;expression des g&#xE8;nes parmi tous les &#xE9;chantillons ex vivo. Modes d&#x26;#39;expression g&#xE9;n&#xE9;tique du sang et les PMN BAL diff&#xE9;raient significativement les uns des autres dans les patients pr&#xE9;sentant un SDRA. Isolement des PMN par microfluidique peut &#xEA;tre appliqu&#xE9; &#xE0; la fois le sang et les &#xE9;chantillons de BAL gravement malades, les patients hospitalis&#xE9;s. Profils d&#x26;#39;expression g&#xE9;nomique uniques sont obtenues &#xE0; partir du sang et des liquides BAL des patients gravement malades atteints de SDRA, et ceux-ci diff&#xE8;rent de fa&#xE7;on significative &#xE0; partir de motifs g&#xE9;nomiques observ&#xE9;es apr&#xE8;s stimulation ex vivo LPS.

Microfluidique bas&#xE9; sur la capture des neutrophiles humains pour analyser l&#x26;#39;expression dans le sang et lavage broncho-alv&#xE9;olaire

Genexpressionsanalyse kann ein m&auml;chtiges Werkzeug in die Vorhersage der geduldige Resultate und Identifizierung von Patienten, die von gezielter Therapien profitieren k&ouml;nnen. Isolieren von menschlichen neutrophilen Blutzellen (PMNs) f&uuml;r genomische Analyse wurde schwierig jedoch. Wir verwendeten eine neuartige Microfluidic-Technik, die PMNs durch die Erfassung von CD66b(+) Zellen isoliert und verglich sie mit Dextran-Ficoll-gradient-Isolation. Wir auch Microfluidic Isolierung Techniken f&uuml;r Blut und Bronchoalveol&auml;re Lavage (BAL) Proben von Patienten mit acute Respiratory Distress Syndrome (ARDS) PMN genomische Ver&auml;nderungen sekund&auml;re Lungenseqestration Auswertung verwendet. Entspricht ex Vivo Lipopolysaccharid (LPS) entnommen-angeregt oder - ab Vollblut aus f&uuml;nf gesunden Probanden wurden isoliert von Dextran-Ficoll Farbverlauf, Mikrofluidik erfassen oder eine Kombination der beiden Techniken. Blut und BAL-Fl&uuml;ssigkeit wurden PMNs auch isoliert mit Biochips aus sieben hospitalisierten Patienten mit ARDS. Genexpression wurde von extrahierten RNA mit Affymetrix U133 Plus 2.0 Augenentwicklung abgeleitet. Alle Methoden der PMN Isolation produziert &auml;hnliche Mengen an qualitativ hochwertigen RNA, bereinigt um wiederhergestellte Zellenzahl. Unbeaufsichtigt Analyse und hierarchischen clustering angedeutet, dass LPS Stimulierung der wichtigste Faktor f&uuml;r Genausdruck Muster unter allen ex Vivo Proben war. Muster der Genexpression aus Blut und BAL PMNs Unterschied sich wesentlich von einander bei den Patienten mit ARDS. Isolierung von PMNs von Biochips kann auf Blut und BAL-Proben von kritisch kranken, hospitalisierten Patienten angewendet werden. Einzigartige genomische Ausdrucksmuster stammen aus dem Blut und BAL-Fl&uuml;ssigkeit von kritisch kranken Patienten mit ARDS und diese unterscheiden sich erheblich von genomischen Muster gesehen nach ex-Vivo-LPS-Stimulierung.

Mikrofluidik-basierte Erfassung von menschlichen Neutrophilen f&uuml;r Expressionsanalyse in Blut und Bronchoalveol&auml;re Lavage.

Analisi di espressione genica pu&ograve; essere un potente strumento in previsione risultati per il paziente e identificare i pazienti che possono beneficiare di terapie mirate. Tuttavia, isolando cellule polimorfonucleari sangue umano (PMN) per analisi genomica &egrave; stato impegnativo. Abbiamo usato una tecnica di microfluidica romanzo che isola i PMN catturando le cellule CD66b(+) e confrontato con isolamento gradiente di Ficoll-destrano. Abbiamo utilizzato tecniche di isolamento di microfluidica per campioni di sangue e broncoalveolare lavaggio (BAL) dei pazienti con sindrome da distress respiratorio acuto (ARDS) per valutare le alterazioni genomiche PMN secondarie a sequestro polmonare. PMN ottenuta dall&#39;ex vivo lipopolisaccaride (LPS)-stimolato o - sangue intero sia da cinque volontari sani sono stati isolati dal gradiente di Ficoll-Destrano, microfluidica cattura o una combinazione delle due tecniche. Sangue e fluidi BAL PMN anche sono stati isolati mediante microfluidica da sette pazienti ospedalizzati con ARDS. Espressione genica &egrave; stata dedotta dal RNA estratto utilizzando Affymetrix U133 Plus 2.0 GeneChips. Tutti i metodi di isolamento PMN prodotto simili quantit&agrave; di RNA di alta qualit&agrave;, quando regolato per numero di cellule recuperati. Analisi non supervisionato e clustering gerarchico indicato che la stimolazione di LPS &egrave; stato il fattore primario che interessano i modelli di espressione genica tra tutte le ex vivo campioni. Pattern di espressione genica da sangue e BAL PMN differiva significativamente da altro nei pazienti con ARDS. Isolamento di PMN di microfluidics pu&ograve; essere applicato sia sangue e campioni di BAL da pazienti criticamente malati ospedalizzati. Modelli unico espressione genomica sono ottenuti dal sangue e fluido del BAL di pazienti gravemente malati con ARDS, e questi differiscono significativamente dalla genomiche modelli visualizzati ex vivo stimolazione di LPS.

Basato su microfluidics cattura dei neutrofili umani per l&#39;analisi di espressione nel sangue e broncoalveolare lavaggio.

&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x89E3;&#x6790;&#x306F;&#x3001;&#x60A3;&#x8005;&#x306E;&#x4E88;&#x5F8C;&#x3092;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3057;&#x3001;&#x6A19;&#x7684;&#x7642;&#x6CD5;&#x306E;&#x6069;&#x6075;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x60A3;&#x8005;&#x3092;&#x7279;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068;&#x306A;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x89E3;&#x6790;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30D2;&#x30C8;&#x306E;&#x8840;&#x6DB2;&#x591A;&#x5F62;&#x6838;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;&#x591A;&#x5F62;&#x6838;&#x767D;&#x8840;&#x7403;&#xFF09;&#x3092;&#x5358;&#x96E2;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x6311;&#x6226;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;CD66b&#xFF08;+&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x30AD;&#x30E3;&#x30D7;&#x30C1;&#x30E3;&#x3057;&#x3001;&#x30C7;&#x30AD;&#x30B9;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x3001;&#x30D5;&#x30A3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x52FE;&#x914D;&#x5206;&#x96E2;&#x3068;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x591A;&#x5F62;&#x6838;&#x767D;&#x8840;&#x7403;&#x3092;&#x5206;&#x96E2;&#x3059;&#x308B;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x6280;&#x8853;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x8840;&#x6DB2;&#x3084;&#x6C17;&#x7BA1;&#x652F;&#x80BA;&#x80DE;&#x6D17;&#x6D44;&#xFF08;BAL&#xFF09;&#x80BA;&#x5206;&#x753B;&#x75C7;&#x306B;&#x7D9A;&#x767A;&#x3059;&#x308B;PMN&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6025;&#x6027;&#x547C;&#x5438;&#x7AAE;&#x8FEB;&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#xFF08;ARDS&#xFF09;&#x306E;&#x60A3;&#x8005;&#x306E;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x306E;&#x6D41;&#x4F53;&#x5206;&#x96E2;&#x6280;&#x8853;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; ex vivo&#x3067;&#x306E;&#x30EA;&#x30DD;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B5;&#x30C3;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30C9;&#xFF08;LPS&#xFF09;&#x523A;&#x6FC0;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x523A;&#x6FC0;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;5&#x4EBA;&#x306E;&#x5065;&#x5EB7;&#x306A;&#x30DC;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30A2;&#x304B;&#x3089;&#x5168;&#x8840;&#x3092;&#x304B;&#x3089;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x591A;&#x5F62;&#x6838;&#x767D;&#x8840;&#x7403;&#x306F;&#x3001;&#x30C7;&#x30AD;&#x30B9;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x3001;&#x30D5;&#x30A3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x52FE;&#x914D;&#x3001;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A4;&#x30C7;&#x30A3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x30AD;&#x30E3;&#x30D7;&#x30C1;&#x30E3;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;2&#x3064;&#x306E;&#x6280;&#x8853;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x5358;&#x96E2;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8840;&#x6DB2;&#x3084;BAL&#x6DB2;&#x591A;&#x5F62;&#x6838;&#x767D;&#x8840;&#x7403;&#x306F;&#x3001;ARDS&#x306E;7&#x306E;&#x5165;&#x9662;&#x60A3;&#x8005;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A4;&#x30C7;&#x30A3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x5358;&#x96E2;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;Affymetrix U133 Plus 2.0&#x306E;GeneChips&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x62BD;&#x51FA;&#x3057;&#x305F;RNA&#x304B;&#x3089;&#x63A8;&#x6E2C;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x56DE;&#x5FA9;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x6570;&#x3092;&#x8ABF;&#x6574;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x304D;PMN&#x5206;&#x96E2;&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306F;&#x3001;&#x9AD8;&#x54C1;&#x8CEA;&#x306E;RNA&#x306E;&#x985E;&#x4F3C;&#x3057;&#x305F;&#x91CF;&#x3092;&#x751F;&#x7523;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6559;&#x5E2B;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x3068;&#x968E;&#x5C64;&#x578B;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3067;&#x306F;&#x3001;LPS&#x523A;&#x6FC0;&#x306F;&#x3001;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;ex vivo&#x3067;&#x306E;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x9593;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x8981;&#x56E0;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x8840;&#x6DB2;&#x3084;BAL&#x591A;&#x5F62;&#x6838;&#x767D;&#x8840;&#x7403;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;ARDS&#x60A3;&#x8005;&#x3067;&#x306F;&#x4E92;&#x3044;&#x306B;&#x304B;&#x306A;&#x308A;&#x7570;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A4;&#x30C7;&#x30A3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306B;&#x3088;&#x308B;PMN&#x306E;&#x5358;&#x96E2;&#x306F;&#x3001;&#x91CD;&#x75C7;&#x3001;&#x5165;&#x9662;&#x60A3;&#x8005;&#x304B;&#x3089;&#x8840;&#x6DB2;&#x3084;BAL&#x691C;&#x4F53;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306B;&#x9069;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x306A;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;ARDS&#x306E;&#x91CD;&#x75C7;&#x60A3;&#x8005;&#x306E;&#x8840;&#x6DB2;&#x304A;&#x3088;&#x3073;BAL&#x6DB2;&#x304B;&#x3089;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306F;ex vivo&#x3067;LPS&#x523A;&#x6FC0;&#x5F8C;&#x306B;&#x898B;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x304B;&#x3089;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x8840;&#x3068;&#x6C17;&#x7BA1;&#x652F;&#x80BA;&#x80DE;&#x3067;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x89E3;&#x6790;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30D2;&#x30C8;&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30AD;&#x30E3;&#x30D7;&#x30C1;&#x30E3;

&#xC9C4; &#xC2DD; &#xBD84;&#xC11D; &#xD658;&#xC790; &#xACB0;&#xACFC; &#xC608;&#xCE21; &#xD558; &#xACE0; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD658;&#xC790; &#xB300;&#xC0C1;&#xB41C; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD61C;&#xD0DD;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xAC00; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xAC8C;&#xB188; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xD53C; polymorphonuclear &#xC140; (PMNs) &#xBD84;&#xB9AC; &#xB3C4;&#xC804; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. PMNs CD66b(+) &#xC140;&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xD558; &#xC5EC; &#xACA9;&#xB9AC; &#xD558; &#xACE0; dextran Ficoll &#xADF8;&#xB77C;&#xB370;&#xC774;&#xC158; &#xACA9;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xC18C;&#xC124; &#xACB0;&#xD569; &#xAE30;&#xBC95;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xD3C9;&#xAC00; PMN &#xAC8C;&#xB188; &#xBCC0;&#xACBD; &#xBCF4;&#xC870; &#xD3D0; &#xACA9;&#xB9AC; &#xD558; &#xAE09;&#xC131; &#xD638;&#xD761; &#xACE4;&#xB780; &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70; (&#xC544;&#xC988;) &#xD658;&#xC790;&#xC758; &#xD608;&#xC561;&#xACFC; bronchoalveolar &#xC138;&#xCC99; (BAL) &#xC0D8;&#xD50C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBBF8;&#xC138; &#xC808;&#xC5F0; &#xAE30;&#xC220;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9;. Ex vivo lipopolysaccharide (LPS)&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5BB;&#xC740; PMNs-&#xC790;&#xADF9; &#xB610;&#xB294;-5 &#xBA85;&#xC758; &#xAC74;&#xAC15; &#xD55C; &#xC9C0;&#xC6D0;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; unstimulated &#xC804;&#xCCB4; &#xD608;&#xC561; dextran Ficoll &#xADF8;&#xB77C;&#xB370;&#xC774;&#xC158;, microfluidics &#xCEA1;&#xCC98; &#xB610;&#xB294; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xAE30;&#xC220; &#xC870;&#xD569; &#xD558; &#xC5EC; &#xACE0;&#xB9BD; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xD608;&#xC561;&#xACFC; &#xBC1C; &#xC720;&#xCCB4; PMNs &#xC544;&#xC988; microfluidics 7 &#xC785;&#xC6D0;&#xB41C; &#xD658;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xACA9;&#xB9AC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604; Affymetrix U133 &#xD50C;&#xB7EC;&#xC2A4; 2.0 Genechips&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xCD94;&#xCD9C; &#xB41C; RNA&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xCD94; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBCF5;&#xAD6C; &#xB41C; &#xD734;&#xB300;&#xD3F0; &#xBC88;&#xD638;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC870;&#xC815; PMN &#xACA9;&#xB9AC;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xB192;&#xC740; &#xD488;&#xC9C8; RNA, &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xC591;&#xC758; &#xC0DD;&#xC0B0;. &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC2E4;&#xB41C; &#xBD84;&#xC11D; &#xBC0F; &#xACC4;&#xCE35;&#xC801; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130;&#xB9C1; LPS &#xC790;&#xADF9; ex vivo &#xC0D8;&#xD50C; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD45C;&#xD604; &#xD328;&#xD134;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; &#xC8FC;&#xC694; &#xC694;&#xC18C;&#xB294; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C;. &#xD608;&#xC561;&#xACFC; &#xBC1C; Pmns&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC758; &#xD328;&#xD134; &#xC544;&#xC988;&#xB97C; &#xAC00;&#xC9C4; &#xD658;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC11C;&#xB85C; &#xD06C;&#xAC8C; &#xB2EC;&#xB790;&#xB2E4;. &#xBE44;&#xD310;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC544;&#xD508;, &#xC785;&#xC6D0; &#xD658;&#xC790;&#xC5D0; &#xAC8C; &#xC11C; &#xD608;&#xC561;&#xC744; &#xBC1C; &#xD45C;&#xBCF8; microfluidics Pmns&#xC758; &#xACA9;&#xB9AC;&#xB97C; &#xC801;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; &#xAC8C;&#xB188; &#xC2DD; &#xD328;&#xD134; &#xD608;&#xC561;&#xACFC; &#xC544;&#xC988;, &#xBE44;&#xD310;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC544;&#xD508; &#xD658;&#xC790;&#xC758; &#xBC1C; &#xC561;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5BB;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC0F; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; ex vivo LPS &#xC790;&#xADF9; &#xBCF8; &#xAC8C;&#xB188; &#xD328;&#xD134;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD06C;&#xAC8C; &#xB2E4;&#xB985;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD608;&#xC561; &#xBC0F; bronchoalveolar &#xC138;&#xCC99; &#xC2DD; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xD638; &#xC911;&#xAD6C;&#xC758; Microfluidics &#xAE30;&#xBC18; &#xCEA1;&#xCC98;.

La expresi&#xF3;n de genes puede ser una poderosa herramienta en la predicci&#xF3;n de los resultados del paciente y la identificaci&#xF3;n de pacientes que podr&#xED;an beneficiarse de terapias dirigidas. Sin embargo, aislar las c&#xE9;lulas de la sangre humana polimorfonucleares (PMN) para el an&#xE1;lisis gen&#xF3;mico ha sido un desaf&#xED;o. Se utiliz&#xF3; una nueva t&#xE9;cnica de microfluidos que a&#xED;sla a los PMNs mediante la captura de CD66b (+) las c&#xE9;lulas y lo compar&#xF3; con el aislamiento gradiente de Ficoll-dextrano. Tambi&#xE9;n se utilizaron las t&#xE9;cnicas de aislamiento de microfluidos para la sangre y lavado broncoalveolar (LBA) de muestras de pacientes con s&#xED;ndrome de distr&#xE9;s respiratorio agudo (SDRA) para evaluar los PMN alteraciones gen&#xF3;micas secundarias a secuestro pulmonar. PMN obtenidos a partir de ex vivo lipopolisac&#xE1;rido (LPS)-estimuladas o no estimuladas-sangre entera a partir de cinco voluntarios sanos se aislaron por cualquiera de gradiente de Ficoll-dextrano, captura microflu&#xED;dica, o una combinaci&#xF3;n de las dos t&#xE9;cnicas. PMN de sangre y fluidos BAL tambi&#xE9;n fueron aislados usando microfluidos de siete pacientes hospitalizados con SDRA. La expresi&#xF3;n g&#xE9;nica se infiere a partir de ARN extra&#xED;do utilizando Affymetrix U133 Plus 2.0 GeneChips. Todos los m&#xE9;todos de aislamiento de PMN produjeron cantidades similares de alta calidad del ARN, cuando se ajusta por el n&#xFA;mero de c&#xE9;lulas recuperadas. El an&#xE1;lisis de agrupamiento jer&#xE1;rquico no supervisado, y se indica que la estimulaci&#xF3;n con LPS fue el factor principal que afecta patrones de expresi&#xF3;n g&#xE9;nica entre todas las muestras ex vivo. Los patrones de expresi&#xF3;n g&#xE9;nica de la sangre y los PMN BAL difer&#xED;an significativamente entre s&#xED; en los pacientes con SDRA. Aislamiento de PMN de microflu&#xED;dica se puede aplicar a la sangre y las muestras de BAL de los pacientes cr&#xED;ticamente enfermos, hospitalizados. Distintos patrones de expresi&#xF3;n gen&#xF3;mica se obtienen de la sangre y el l&#xED;quido LBA de los pacientes cr&#xED;ticamente enfermos con SDRA, y que difieren significativamente de los patrones gen&#xF3;micos vistos despu&#xE9;s de la estimulaci&#xF3;n con LPS ex vivo.

Microflu&#xED;dica basada en la captura de los neutr&#xF3;filos humanos para el An&#xE1;lisis de Expresi&#xF3;n en la sangre y el lavado broncoalveolar

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Kenneth Kotz

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