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Bioenergetic Profile Experiment using C2C12 Myoblast Cells

The ability to measure cellular metabolism and understand mitochondrial dysfunction, has enabled scientists worldwide to advance their research in ...

North Billerica, MA

CD2 &#x662F;&#x6CDB; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x6807;&#x8BB0;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136; CD19 &#x548C; CD21 &#x5728; B &#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x4E2D;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x5206;&#x5B50;&#x3002;CD19 &#x548C; CD21 &#x90FD;&#x5B58;&#x5728;&#x4E8E;&#x6210;&#x719F; B &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136; CD19 &#x76EE;&#x524D;&#x8FD8;&#x5728;&#x5F00;&#x53D1; B &#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x6D46;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x9CB8;&#x76EE;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6307;&#x8BA4;&#x540C;&#x7CFB;&#x7269;&#x7684; CD2 &#x5355;&#x514B;&#x9686;&#x6297;&#x4F53; &#xFF08;Mab&#xFF09; &#xFF08;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x6297;&#x4F53;&#xFF09;&#xFF0C;CD19 &#x53CA; CD21 &#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x662F;&#x3002;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28; immunoprecipitated &#x5982;&#x4E0B;&#xFF1A; F21&#x3002;&#x6211; &#xFF08;&#x5047;&#x5B9A;&#x5B58;&#x5728;&#x6297;-CD2)&#x3001; 43 &#x548C; 59kDa &#xFF1B;F21&#x3002;B &#xFF08;&#x5047;&#x5B9A;&#x5B58;&#x5728;&#x6297;-CD19&#xFF09;&#xFF0C;83 &#x548C; 127kDa &#xFF1B;F21&#x3002;F &#xFF08;&#x5047;&#x5B9A;&#x5B58;&#x5728;&#x6297;-CD21&#xFF09;&#xFF0C;144kDa&#x3002;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x6B21;&#x7684;&#x63A8;&#x5B9A;&#x6297; CD2 (F21&#x3002;C&#xFF09; &#x6709;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x5730;&#x6291;&#x5236; F21 &#x7684;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x3002;&#x4E00;&#x3001; &#x4E24;&#x4E2A;&#x5047;&#x5B9A;&#x5B58;&#x5728;&#x6297;-CD2 (T &#x7EC6;&#x80DE;&#x6807;&#x8BB0;&#xFF09; &#x67D3; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x533A;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7ED3;&#x8282;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A; B &#x7EC6;&#x80DE;&#x6807;&#x8BB0; &#xFF08;&#x5047;&#x5B9A; CD19 &#x548C; CD21&#xFF09; &#x67D3; B &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x533A;&#x57DF;&#x3002;F21&#x3002;B &#x548C; F21&#x3002;F &#x6CA1;&#x6709;&#x4ECE;&#x5355;&#x4E00;&#x7684;&#x80F8;&#x817A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F46;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684; 63 &#x548C; 65%&#x80A0;&#x7CFB;&#x819C;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7ED3;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x60AC;&#x6D6E;&#x5206;&#x522B;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A; F21&#x3002;C &#x548C; F21&#x3002;F &#x5728;&#x573A; 100%&#x80F8;&#x817A;&#x548C;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7ED3;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8F83;&#x5C11;&#x3002;B &#x548C; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x6807;&#x8BB0;&#x4E86;&#x4E92;&#x65A5;&#x4E0A;&#x53CC;&#x6807;&#x8BB0;&#x4F7F;&#x7528;&#x6D41;&#x5F0F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x672F;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B; Mab &#x9884;&#x8BA1;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x4EF7;&#x503C;&#x7684;&#x8BCA;&#x65AD;&#x548C;&#x7814;&#x7A76;&#x5DE5;&#x5177;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x8BC4;&#x4F30;&#x5708;&#x517B;&#x548C;&#x91CE;&#x751F;&#x9CB8;&#x76EE;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;

&#x5BF9;&#x9CB8;&#x7C7B;&#x540C;&#x7CFB;&#x7269; CD2&#x3001; CD19 &#x548C; CD21 &#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x6297;&#x539F;&#x7684;&#x5355;&#x514B;&#x9686;&#x6297;&#x4F53;&#x3002;

CD2 is a pan-T cell marker, while CD19 and CD21 are important molecules in signal transduction of B lymphocytes. CD19 and CD21 are both present on mature B cells, while CD19 is also present in developing B cells and plasma cells. Monoclonal antibodies (mAbs) against cetacean lymphocyte putative homologues to CD2 (two different antibodies), CD19 and CD21 were characterized. The proteins immunoprecipitated were as follows: F21.I (putative anti-CD2), 43 and 59kDa; F21.B (putative anti-CD19), 83 and 127kDa; F21.F (putative anti-CD21), 144kDa. The second putative anti-CD2 (F21.C) selectively inhibited the binding of F21.I. Both the putative anti-CD2 (T cell markers) stained T-cell zones on lymph node sections, while both the B cell markers (putative CD19 and CD21) stained B-cell zones. F21.B and F21.F were absent from thymus single cell suspension but labeled 63 and 65% mesenteric lymph node lymphocytes, respectively, while both F21.C and F21.F were present on 100% thymocytes and fewer lymph node lymphocytes. B and T cell markers were mutually exclusive on double labeling using flow cytometry. These mAbs are foreseen as possible valuable diagnostic and research tools to assess immune functions of captive and wild cetaceans.

Monoclonal antibodies to lymphocyte surface antigens for cetacean homologues to CD2, CD19 and CD21.

CD2 est un marqueur des cellules pan-T, tandis que CD19 et CD21 sont des mol&#xE9;cules importantes dans la transduction du signal des lymphocytes B. CD19 et CD21 sont tous deux pr&#xE9;sents sur les cellules B m&#xFB;res, tandis CD19 est &#xE9;galement pr&#xE9;sent dans le d&#xE9;veloppement des cellules B et les cellules plasmatiques. Les anticorps monoclonaux (mAb) contre c&#xE9;tac&#xE9;s lymphocytes homologues putatifs &#xE0; CD2 (deux anticorps diff&#xE9;rents), CD19 et CD21 ont &#xE9;t&#xE9; caract&#xE9;ris&#xE9;s. Les prot&#xE9;ines immunopr&#xE9;cipit&#xE9;es &#xE9;taient comme suit: F21.I (putative anti-CD2), 43 et 59kDa; F21.B (putative anti-CD19), 83 et 127kDa; F21.F (putative anti-CD21), 144kDa. La seconde putative anti-CD2 (F21.C) inhiber s&#xE9;lectivement la liaison de F21.I. Tant le pr&#xE9;sum&#xE9; anti-CD2 (marqueurs des cellules T) tach&#xE9;s de cellules T zones sur les sections des ganglions lymphatiques, alors que les deux marqueurs des cellules B (CD19 et CD21 putative) color&#xE9;es des cellules B des zones. F21.B et F21.F &#xE9;taient absents de la suspension cellulaire du thymus unique, mais marqu&#xE9; 63 et 65% des lymphocytes des ganglions lymphatiques m&#xE9;sent&#xE9;riques, respectivement, tandis que les deux F21.C et F21.F &#xE9;taient pr&#xE9;sents sur les thymocytes 100% et moins de lymphocytes des ganglions lymphatiques. Des marqueurs de cellules B et T &#xE9;taient mutuellement exclusives sur un double marquage en utilisant la cytom&#xE9;trie en flux. Ces anticorps monoclonaux sont pr&#xE9;vus comme possibles de pr&#xE9;cieux outils de diagnostic et de recherche pour &#xE9;valuer les fonctions immunitaires de c&#xE9;tac&#xE9;s captifs et sauvages.

Anticorps monoclonaux &#xE0; antig&#xE8;nes de surface lymphocytaires pour homologues des c&#xE9;tac&#xE9;s &#xE0; CD2, CD19 et CD21

Monoklonale Antik&#xF6;rper gegen Oberfl&#xE4;chenantigene f&#xFC;r Wale Homologen auf CD2, CD19 und CD21 Lymphozyten.

CD2 &egrave; un marcatore di cella pan-T, mentre CD19 e CD21 sono importanti molecole di trasduzione del segnale dei linfociti B. CD19 e CD21 sono entrambi presenti sulle cellule B mature, mentre CD19 &egrave; anche presente nello sviluppo di cellule B e plasmacellule. Gli anticorpi monoclonali (mAbs) contro putativo omologhi dei linfociti dei cetacei a CD2 (due differenti anticorpi), CD19 e CD21 sono stati caratterizzati. Le proteine immunoprecipitated erano come segue: F21.I (presunti anti-CD2), 43 e 59kDa; F21.B (anti-CD19 putativo), 83 e 127kDa; F21.F (putativo anti-CD21), 144kDa. Il secondo anti-CD2 putativo (F21.C) selettivamente inibita l&#39;associazione di F21.I. sia anti-CD2 putativo (marcatori delle cellule T) macchiato T-cell zone su sezioni del linfonodo, mentre entrambi i marcatori delle cellule B (CD19 putativo e CD21) macchiato zone B-cell. F21.B e F21.F erano assenti da Timo singola cella sospensione ma con etichetta 63 e linfociti linfonodi mesenterici 65%, rispettivamente, mentre entrambi F21.C e F21.F erano presenti sul 100% di timociti e linfociti linfonodi meno. B e T cell marcatori erano mutualmente esclusivi su doppia etichettatura mediante citometria a flusso. Questi mAbs sono previste come possibili preziosi strumenti diagnostici e ricerca per valutare le funzioni immunitarie dei cetacei in cattivit&agrave; e selvatici.

Anticorpi monoclonali per antigeni superficiali dei linfociti per cetacei omologhi CD2, CD19 e CD21.

CD19&#x3068;CD21&#x304C;B&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5206;&#x5B50;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x3001;CD2&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x6C4E;T&#x7D30;&#x80DE;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002; CD19&#x306F;&#x3001;B&#x7D30;&#x80DE;&#x3084;&#x5F62;&#x8CEA;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x9593;&#x306B;CD19&#x3068;CD21&#x306F;&#x3001;&#x6210;&#x719F;B&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; CD2&#x306B;&#x9BE8;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#x306E;&#x63A8;&#x5B9A;&#x540C;&#x65CF;&#x4F53;&#xFF08;2&#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x6297;&#x4F53;&#xFF09;&#x3001;CD19&#x304A;&#x3088;&#x3073;CD21&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x30E2;&#x30CE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CA;&#x30EB;&#x6297;&#x4F53;&#xFF08;mAb&#xFF09;&#x304C;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x6B21;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x514D;&#x75AB;&#x6C88;&#x964D;&#x3057;&#x305F;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#xFF1A;F21.I&#xFF08;&#x63A8;&#x5B9A;&#x6297;CD2&#xFF09;&#x3001;43&#x304A;&#x3088;&#x3073;59kDa; F21.B&#xFF08;&#x63A8;&#x5B9A;&#x6297;CD19&#xFF09;&#x3001;83&#x3001;127kDa&#x3001;F21.F&#xFF08;&#x63A8;&#x5B9A;&#x6297;CD21&#xFF09;&#x3001;144kDa&#x3002;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x306E;&#x63A8;&#x5B9A;&#x6297;CD2&#xFF08;F21.C&#xFF09;&#x3092;&#x9078;&#x629E;F21.I.&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x4E21;&#x65B9;&#x3068;&#x3082;&#x63A8;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x6297;CD2&#xFF08;T&#x7D30;&#x80DE;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#xFF09;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7BC0;&#x5207;&#x7247;&#x4E0A;&#x3067;&#x67D3;&#x8272;&#x3055;&#x308C;&#x305F;T&#x7D30;&#x80DE;&#x30BE;&#x30FC;&#x30F3;&#x4E00;&#x65B9;&#x3001;B&#x7D30;&#x80DE;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#xFF08;CD19&#x53CA;&#x3073;CD21&#x306E;&#x63A8;&#x5B9A;&#xFF09;&#x67D3;&#x8272;&#x3055;&#x308C;&#x305F;B&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30BE;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3002; F21.C&#x3068;F21.F&#x4E21;&#x65B9;&#x304C;100&#xFF05;&#x306E;&#x80F8;&#x817A;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x5C11;&#x6570;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7BC0;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#x4E0A;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x9593;&#x306B;F21.B&#x3068;F21.F&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3001;&#x80F8;&#x817A;&#x306E;&#x5358;&#x4E00;&#x7D30;&#x80DE;&#x61F8;&#x6FC1;&#x6DB2;&#x304B;&#x3089;&#x4E0D;&#x5728;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x304C;&#x3001;63&#x3068;65&#x30D1;&#x30FC;&#x30BB;&#x30F3;&#x30C8;&#x8178;&#x9593;&#x819C;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7BC0;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#x3092;&#x6A19;&#x8B58;&#x3057;&#x305F;&#x3002; B&#x304A;&#x3088;&#x3073;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30E1;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x4E8C;&#x91CD;&#x6A19;&#x8B58;&#x4E0A;&#x3067;&#x76F8;&#x4E92;&#x306B;&#x6392;&#x4ED6;&#x7684;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;mAb&#x306F;&#x3001;&#x30AD;&#x30E3;&#x30D7;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x3068;&#x91CE;&#x751F;&#x306E;&#x9BE8;&#x985E;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x8CB4;&#x91CD;&#x306A;&#x8A3A;&#x65AD;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x8ABF;&#x67FB;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x4E88;&#x898B;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

CD2&#x306B;&#x9BE8;&#x540C;&#x65CF;&#x4F53;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#x8868;&#x9762;&#x6297;&#x539F;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x30E2;&#x30CE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CA;&#x30EB;&#x6297;&#x4F53;&#x3001;CD19&#x3068;CD21

Cd19&#xC640; CD21 B &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC2E0;&#xD638; &#xC804;&#xB2EC;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xBD84;&#xC790;&#xB294; c d 2&#xB97C; &#xD32C; T &#xC140; &#xD45C;&#xC2DD;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. CD19 &#xBC0F; CD21 CD19 &#xB610;&#xD55C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; B &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC874;&#xC7AC; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC131;&#xC219; B &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xBAA8;&#xB450; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. C d 2&#xC5D0; cetacean &#xB9BC;&#xD504; &#xAD6C; &#xC0C1; homologues&#xC5D0; &#xB300;&#xD558;&#xC5EC; &#xB2E8;&#xC77C; &#xD074;&#xB860; &#xD56D; &#xCCB4; (mAbs) (&#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xD56D; &#xCCB4;), CD19 CD21 &#xD2B9;&#xC9D5; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; immunoprecipitated &#xD588;&#xB2E4; &#xB2E4;&#xC74C;&#xACFC; &#xAC19;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;: F21.&#xB09C; (putative &#xC548;&#xD2F0;-CD2), 43 &#xBC0F; 59kDa; F21&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.B (putative &#xC548;&#xD2F0;-CD19), 83 &#xBC0F; 127kDa; F21&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.F (putative &#xC548;&#xD2F0;-CD21), 144kDa. &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC0C1; &#xC548;&#xD2F0;-CD2 (F21.F21 &#xBC14;&#xC778;&#xB529; C) &#xC120;&#xD0DD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC800;&#xD574; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.&#xB098; &#xB450; &#xC0C1; &#xC548;&#xD2F0;-CD2 (T &#xC140; &#xD45C;&#xC2DD;) &#xC2A4;&#xD14C;&#xC778;&#xB4DC; T-&#xC140; &#xC601;&#xC5ED; &#xB9BC;&#xD504; &#xB178;&#xB4DC; &#xC139;&#xC158;, (putative CD19 &#xBC0F; CD21) &#xBAA8;&#xB450;&#xB97C; B &#xC140; &#xD45C;&#xC2DD; &#xC2A4;&#xD14C;&#xC778;&#xB4DC; B &#xC140; &#xC601;&#xC5ED; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548;&#xC5D0;. F21&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.B&#xC640; f21&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.F &#xACB0; &#xC11D; &#xD588;&#xB2E4; &#xB2E8;&#xC77C; thymus&#xC5D0;&#xC11C; &#xC140; &#xB808;&#xC774;&#xBE14;&#xB41C; 63&#xC640; 65 %mesenteric &#xB9BC;&#xD504;&#xC808; &#xC138;&#xD3EC; &#xD604; &#xD0C1; &#xC561; &#xAC01;&#xAC01; &#xB450; F21 &#xD558;&#xBA74;&#xC11C;.C&#xC640; f21&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.F 100 %thymocytes &#xC801;&#xC740; &#xB9BC;&#xD504;&#xC808; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xCC38;&#xC11D; &#xD588;&#xB2E4;. B &#xBC0F; T &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C8;&#xCEE4; &#xD588;&#xB2E4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0C1;&#xD638; &#xBC30;&#xD0C0;&#xC801; cytometry&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB808;&#xC774;&#xBE14; &#xB450; &#xBC88;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; mAbs &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xADC0;&#xC911; &#xD55C; &#xC9C4;&#xB2E8; &#xBC0F; &#xC870;&#xC784; &#xBC0F; &#xC57C;&#xC0DD; &#xACE0;&#xB798;&#xC758; &#xBA74;&#xC5ED; &#xAE30;&#xB2A5; &#xD3C9;&#xAC00; &#xB3C4;&#xAD6C; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB85C; &#xC608;&#xACAC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB9BC;&#xD504; &#xAD6C; &#xD45C;&#xBA74; &#xD56D; &#xC6D0; c d 2&#xC640; CD19 CD21 cetacean homologues&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB2E8;&#xC77C; &#xD074;&#xB860; &#xD56D; &#xCCB4;.

CD2 es un marcador de c&#xE9;lulas pan-T, mientras que CD19 y CD21 son mol&#xE9;culas importantes en la transducci&#xF3;n de se&#xF1;al de los linfocitos B. CD19 y CD21 est&#xE1;n presentes en las c&#xE9;lulas B maduras, mientras que CD19 est&#xE1; presente tambi&#xE9;n en el desarrollo de las c&#xE9;lulas B y c&#xE9;lulas plasm&#xE1;ticas. Los anticuerpos monoclonales (mAb) contra cet&#xE1;ceos linfocitos hom&#xF3;logos putativo a CD2 (dos anticuerpos diferentes), CD19 y CD21 se caracterizaron. Las prote&#xED;nas inmunoprecipitadas fueron como sigue: F21.I (putativo anti-CD2), 43 y 59kDa; F21.B (putativo anti-CD19), y 83 127kDa; F21.F (anti-CD21 putativo), 144kDa. El segundo putativo anti-CD2 (F21.C) inhibe selectivamente la uni&#xF3;n de F21.I. Tanto el putativo anti-CD2 (marcadores de c&#xE9;lulas T) manchadas de c&#xE9;lulas T en las zonas de las secciones de ganglios linf&#xE1;ticos, mientras que tanto los marcadores de c&#xE9;lulas B (putativo CD19 y CD21) manchadas de c&#xE9;lulas B zonas. F21.B y F21.F estaban ausentes de suspensi&#xF3;n timo sola c&#xE9;lula, pero etiquetados 63 y 65% &#x200B;&#x200B;linfocitos linf&#xE1;ticos mesent&#xE9;ricos de nodo, respectivamente, mientras que tanto F21.C y F21.F estaban presentes en los timocitos 100% y menos linfocitos de ganglios linf&#xE1;ticos. Marcadores de c&#xE9;lulas B y T se excluyen mutuamente en el doble etiquetado mediante citometr&#xED;a de flujo. Estos mAbs se prev&#xE9;n como posibles herramientas valiosas de diagn&#xF3;stico e investigaci&#xF3;n para evaluar las funciones inmunol&#xF3;gicas de los cet&#xE1;ceos en cautiverio y silvestres.

Anticuerpos monoclonales para ant&#xED;genos de superficie para Linfocito Hom&#xF3;logos de cet&#xE1;ceos a CD2, CD19 y CD21

&#x67D0;&#x4E9B;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;&#x8C03;&#x8282;&#x56E0;&#x5B50; (IRF) &#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x901A;&#x8FC7;&#x8C03;&#x8282;&#x751F;&#x4EA7;&#x7684;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-12 &#x95F4;&#x63A5;&#x5F71;&#x54CD; T &#x52A9;&#x624B; (Th) &#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; IRF4 &#x76F4;&#x63A5;&#x8C03;&#x8282; Th &#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x4F53;&#x5916;&#x548C;&#x4F53;&#x5185;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x5C0F;&#x9F20;&#x5229;&#x4EC0;&#x66FC;&#x75C5;&#x3002;&#x5728;&#x6CA1;&#x6709; IRF4 &#x7684;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-12 &#x8BF1;&#x5BFC; Th1 &#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x906D;&#x5230;&#x7834;&#x574F;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136; IL-4 &#x5931;&#x8D25;&#xFF0C;&#x4FC3;&#x4F7F; Th2 &#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x3002;&#x76F8;&#x53CD;&#xFF0C;IL-4 &#x503E;&#x5411;&#x8BF1;&#x5BFC; Th1 &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x7531;&#x751F;&#x4EA7;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20; &gamma;&#x3001; &#x80BF;&#x7624;&#x574F;&#x6B7B;&#x56E0;&#x5B50;&#x7684;&#x5B9A;&#x4E49;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x5728; IRF4(-/-) Th &#x7EC6;&#x80DE;&#x65E9;&#x671F;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-4 &#x4FE1;&#x53F7;&#x662F;&#x6B63;&#x5E38;&#xFF0C;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;-3&#xFF0C;Th2 &#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x86CB;&#x767D;&#x4E0D;&#x662F;&#x4E0A;&#x8C03;&#x540E;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-4 &#x6CBB;&#x7597;&#x3002;&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF; 3 &#x6551;&#x51FA; Th2 &#x5206;&#x5316;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;IRF4 &#x865A;&#x8868;&#x73B0;&#x4E3A;&#x4E25;&#x91CD;&#x6C34;&#x5E73;&#x53CA; Th &#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x3002;

&#x6C34;&#x5E73;&#x53CA; T &#x8F85;&#x52A9;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x7F3A;&#x5E2D;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;&#x8C03;&#x8282;&#x56E0;&#x5B50; 4&#x3002;

Certain IFN regulatory factor (IRF) transcription factors indirectly influence T helper (Th) cell differentiation by regulating the production of IL-12. Here, we show that IRF4 directly regulates Th cell differentiation in vitro and in vivo during murine leishmaniasis. In the absence of IRF4, IL-12-induced Th1 cell differentiation was compromised, while IL-4 failed to induce Th2 cell differentiation. Instead, IL-4 tended to induce Th1 cells, defined by production of IFN-gamma and TNF. Although early IL-4 signaling was normal in IRF4(-/-) Th cells, the protein GATA-3, a transcription factor critical for Th2 development, was not up-regulated following IL-4 treatment. Retroviral overexpression of GATA-3 rescued Th2 differentiation. Therefore, IRF4 deficiency manifests itself as severely dysregulated Th cell differentiation.

Dysregulated T helper cell differentiation in the absence of interferon regulatory factor 4.

Certains facteurs r&#xE9;glementaires IFN facteur de transcription (IRF) influencer indirectement T helper de la diff&#xE9;renciation cellulaire (Th) en r&#xE9;gulant la production de l&#x26;#39;IL-12. Ici, nous montrons que IRF4 r&#xE9;git directement la diff&#xE9;renciation des cellules Th in vitro et in vivo au cours de la leishmaniose murine. En l&#x26;#39;absence de IRF4, IL-12 induit la diff&#xE9;renciation des cellules Th1 a &#xE9;t&#xE9; compromise, tandis que l&#x26;#39;IL-4 n&#x26;#39;a pas induit la diff&#xE9;renciation des cellules Th2. Au lieu, l&#x26;#39;IL-4 tendance &#xE0; induire les cellules Th1, d&#xE9;finies par la production d&#x26;#39;IFN-gamma et le TNF. Bien que les premiers IL-4 de signalisation &#xE9;tait normale dans IRF4 (- / -) des cellules Th, la prot&#xE9;ine GATA-3, un facteur de transcription essentiel pour le d&#xE9;veloppement Th2, n&#x26;#39;&#xE9;tait pas r&#xE9;glement&#xE9; l&#x26;#39;IL-4 qui suit le traitement. Surexpression r&#xE9;trovirale de GATA-3 a sauv&#xE9; la diff&#xE9;renciation Th2. Par cons&#xE9;quent, IRF4 carence se manifeste par la diff&#xE9;renciation des cellules Th s&#xE9;v&#xE8;rement d&#xE9;r&#xE9;gul&#xE9;e.

D&#xE9;r&#xE9;gul&#xE9;e diff&#xE9;renciation des lymphocytes T auxiliaires en l&#x26;#39;absence d&#x26;#39;interf&#xE9;ron facteur r&#xE9;glementaire 4

Dysregulierte Helfer-T-Zell-Differenzierung in der Abwesenheit von Interferon regulatorischer Faktor 4.

Alcuni fattori di trascrizione del fattore regolatore (IRF) IFN influenzano indirettamente la differenziazione delle cellule di T helper (Th) regolando la produzione di IL-12. Qui, ci mostra che IRF4 regola direttamente la differenziazione delle cellule Th in vitro e in vivo durante la leishmaniosi murino. In assenza di IRF4, differenziazione delle cellule Th1 indotta da IL-12 &egrave; stata compromessa, mentre IL 4 non &egrave; riuscito a indurre la differenziazione delle cellule Th2. Invece, IL-4 tendevano ad indurre le cellule Th1, definite dalla produzione di IFN-gamma e TNF. Anche se presto IL-4 segnalazione era normale in cellule Th IRF4(-/-), la proteina GATA-3, un fattore di trascrizione critico per lo sviluppo di Th2, non era up-regolata dopo il trattamento IL-4. Retrovirale sovraespressione di GATA-3 salvato Th2 differenziazione. Pertanto, IRF4 deficit si manifesta come gravemente differenziazione delle cellule Th.

Dysregulated T helper differenziamento cellulare in assenza del fattore regolatore interferone 4.

&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;IFN&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF08;IRF&#xFF09;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x9593;&#x63A5;&#x7684;&#x306B;IL-12&#x306E;&#x7523;&#x751F;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;T&#x30D8;&#x30EB;&#x30D1;&#x30FC;&#xFF08;Th&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;IRF4&#x306F;&#x3001;&#x76F4;&#x63A5;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E5;&#x30DE;&#x30CB;&#x30A2;&#x75C7;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x3001;in vitro&#x304A;&#x3088;&#x3073;in vivo&#x3067;&#x306E;Th&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; IL-4&#x306F;Th2&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5931;&#x6557;&#x3057;&#x306A;&#x304C;&#x3089;IRF4&#x306E;&#x4E0D;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x3001;IL-12&#x8A98;&#x5C0E;&#x6027;Th1&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x4FB5;&#x5BB3;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x4EE3;&#x308F;&#x308A;&#x306B;&#x3001;IL-4&#x306F;IFN-&#x3B3;&#x304A;&#x3088;&#x3073;TNF&#x306E;&#x7523;&#x751F;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;Th1&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x50BE;&#x5411;&#x304C;&#x307F;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x3002; &#xFF08; -  /  - &#xFF09;&#x521D;&#x671F;&#x306E;IL-4&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x304C;IRF4&#x306B;&#x6B63;&#x5E38;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x304C;&#x3001;Th&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;GATA-3&#x306F;Th2&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x3001;&#x6B21;&#x306E;IL-4&#x6CBB;&#x7642;&#x3067;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002; GATA-3&#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x30EC;&#x30C8;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306F;Th2&#x5206;&#x5316;&#x3092;&#x6551;&#x52A9;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;IRF4&#x306E;&#x6B20;&#x4E4F;&#x306F;&#x6DF1;&#x523B;&#x306A;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x4E0D;&#x5168;&#x306E;Th&#x7D30;&#x200B;&#x200B;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x73FE;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30F3;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;4&#x306E;&#x4E0D;&#x5728;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x4E0D;&#x5168;&#x306E;&#x30D8;&#x30EB;&#x30D1;&#x30FC;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x5316;

&#xD2B9;&#xC815; IFN &#xADDC;&#xC81C; &#xC694;&#xC18C; (IRF) &#xB179;&#xC74C; &#xBC29;&#xC1A1; &#xC694;&#xC778; IL-12&#xC758; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC744; &#xADDC;&#xC81C; &#xD558; &#xC5EC; T &#xB3C4;&#xC6B0;&#xBBF8; (Th) &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xD654; &#xC9C1;&#xC811; &#xC601;&#xD5A5; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; IRF4 &#xC9C1;&#xC811; murine leishmaniasis &#xB3D9;&#xC548; Th &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xD654; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xC870;&#xC808; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. IRF4 &#xBD80;&#xC7AC;&#xC5D0;&#xC11C; IL-4 Th2 &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xD654;&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC2E4;&#xD328; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC77C;&#xB9AC;&#xB178;&#xC774; 12 &#xC720;&#xB3C4; Th1 &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xD654; &#xD6FC;&#xC190; &#xB410;&#xB2E4;. &#xB300;&#xC2E0;, IL-4 &#xC720;&#xB3C4; Th1 &#xC138;&#xD3EC;, TNF&#xC640; IFN-&#xAC10;&#xB9C8;&#xC758; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC815;&#xC758; &#xB41C; &#xACBD;&#xD5A5;&#xC774; &#xC788;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xCD08;&#xAE30; IL-4 &#xC2E0;&#xD638;&#xB294; IRF4(-/-) Th &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC815;&#xC0C1;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; GATA-3, Th2 &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790;&#xB294; &#xCD5C;&#xB300;-&#xADDC;&#xC81C; &#xB418;&#xC9C0; IL-4 &#xCE58;&#xB8CC; &#xB2E4;&#xC74C;&#xACFC;. GATA 3 retroviral overexpression Th2 &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;&#xB97C; &#xAD6C;&#xCD9C;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; IRF4 &#xACB0;&#xD54D; &#xC2EC;&#xAC01; dysregulated Th &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xD654;&#xB85C; &#xC790;&#xC2E0;&#xC744; &#xC2B9;&#xAC1D; &#xBA85;&#xB2E8;.

&#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xB860; &#xADDC;&#xC81C; &#xC694;&#xC18C; 4&#xC758; &#xBD80;&#xC7AC;&#xC5D0;&#xC11C; Dysregulated T &#xB3C4;&#xC6B0;&#xBBF8; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xD654;.

Algunos de los factores reguladores de IFN (IRF) factores de transcripci&#xF3;n indirectamente, influir en T helper (Th) la diferenciaci&#xF3;n celular mediante la regulaci&#xF3;n de la producci&#xF3;n de IL-12. Aqu&#xED;, mostramos que IRF4 regula directamente la diferenciaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas Th in vitro e in vivo, durante la leishmaniasis murina. En ausencia de IRF4, IL-12-inducida por la diferenciaci&#xF3;n celular Th1 fue comprometido, mientras que la IL-4 no para inducir la diferenciaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas Th2. En su lugar, la IL-4 tendieron a inducir las c&#xE9;lulas Th1, definidos por la producci&#xF3;n de IFN-gamma y TNF. Aunque los primeros IL-4 de se&#xF1;alizaci&#xF3;n fue normal en IRF4 (- / -) las c&#xE9;lulas Th, la prote&#xED;na GATA-3, un factor de transcripci&#xF3;n cr&#xED;tico para el desarrollo Th2, no fue reglamentado hasta la IL-4 despu&#xE9;s del tratamiento. Sobreexpresi&#xF3;n retroviral de GATA-3 rescatado diferenciaci&#xF3;n Th2. Por lo tanto, la deficiencia de IRF4 se manifiesta como la diferenciaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas Th gravemente desregulaci&#xF3;n.

Desregulada Helper la diferenciaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas T en ausencia de interfer&#xF3;n factor regulador 4

&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;&#x8C03;&#x8282;&#x56E0;&#x5B50; (IRF) &#x5BB6;&#x65CF;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x548C;&#x51CB;&#x4EA1;&#x7684;&#x8C03;&#x63A7;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; CD4(+) T &#x5916;&#x7C4D;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x4F63;&#x5DE5; (Th) &#x7EC6;&#x80DE;&#x7F3A;&#x4E4F; IRF4 &#xFF08;IRF4(-/-)) &#x662F;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x654F;&#x611F;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x3002;&#x5728;&#x611F;&#x67D3;&#x540E;&#x7684;&#x539F;&#x751F;&#x52A8;&#x7269;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x5229;&#x4EC0;&#x66FC;&#x539F;&#x866B;&#x4E3B;&#x8981; IRF4(-/-) &#x5C0F;&#x9F20;&#xFF0C;&#x75C5;&#x53D8;&#x5F15;&#x6D41;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7ED3;&#x540E; 4 wk&#xFF0C;&#x53D1;&#x8FBE;&#x56FD;&#x5BB6;&#x7684;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7684;&#x539F;&#x578B;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7ED3;&#x80BF;&#x5927;&#x4F46;&#x8868;&#x73B0;&#x51E0;&#x4E4E;&#x5B8C;&#x5168;&#x4E27;&#x5931;&#x7684;&#x6784;&#x6210;&#x53D8;&#x5316;&#x76D1;&#x6D4B;&#x548C;&#x589E;&#x5F3A; 7 wk &#x540E;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x3002;IRF4(-/-) CD4(+) Th &#x7EC6;&#x80DE;&#x6D3B;&#x5316;&#x7684;&#x4F53;&#x5916;&#xFF0C;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4E0E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x76F8;&#x6BD4;&#x5927;&#x5927;&#x589E;&#x52A0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x3002;IRF4(-/-) &#x548C; IRF4(+/+) CD4(+) &#x7EC6;&#x80DE;&#x5171;&#x57F9;&#x517B;&#x5E76;&#x6CA1;&#x6709;&#x589E;&#x52A0; IRF4(-/-) CD4(+) &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x6307;&#x793A;&#x589E;&#x5F3A;&#x7684; IRF4(-/-) Th &#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x7387;&#x65E2;&#x4E0D;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8F6C;&#x8BA9;&#xFF0C;&#x4E5F;&#x4E0D;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x5B58;&#x6D3B;&#x3002;&#x589E;&#x5F3A;&#x7684; CD4(+) &#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x4E5F;&#x6709;&#x4EBA;&#x6297; CD95 &#x5355;&#x514B;&#x9686;&#x6297;&#x4F53;&#x6CBB;&#x7597;&#x540E;&#xFF0C;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x6B63;&#x5E38; CD95 &#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x53BB;&#x9664;&#x5185;&#x6E90;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF0C;&#x503C;&#x5F97;&#x6CE8;&#x610F;&#x7684;&#x662F;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20; (IL)-4&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x589E;&#x52A0;&#x548C;&#x540C;&#x6837;&#x9AD8;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684; IRF4(-/-) &#x548C; IRF4(+/+) &#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#xFF0C;&#x800C;&#x5728; IRF4(-/-) CD4(+) &#x7EC6;&#x80DE;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x6B63;&#x5E38;&#x7684;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-4 &#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x51CF;&#x5C11;&#x5916;&#x6E90;&#x6027; IL-4 &#x7684;&#x4FDD;&#x62A4;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x4E2D;&#x592E;&#x5728;&#x4FDD;&#x62A4; CD4(+) &#x7EC6;&#x80DE;&#x6297;&#x51CB;&#x4EA1;&#x523A;&#x6FC0; IRF4&#x3002;

&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;&#x8C03;&#x8282;&#x56E0;&#x5B50; 4 &#x7F3A; CD4(+) Th &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x589E;&#x5F3A;&#x7684; TCR &#x8BF1;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x3002;

Transcription factors of the interferon regulatory factor (IRF) family contribute to the regulation of cell proliferation and apoptosis. Here, we show that CD4(+) T helper (Th) cells lacking IRF4 (IRF4(-/-)) are highly sensitive to apoptosis. After infection of IRF4(-/-) mice with the protozoan parasite Leishmania major, the lesion-draining lymph nodes developed the prototypic lymphadenopathy of wild-type mice after 4 wk, but demonstrated almost total loss of cellularity and enhanced apoptosis after 7 wk. In vitro, activation of IRF4(-/-) CD4(+) Th cells led to greatly increased apoptosis compared with wild-type cells. Coculture of IRF4(-/-) and IRF4(+/+) CD4(+) cells did not increase survival of IRF4(-/-) CD4(+) cells, indicating that the enhanced rate of IRF4(-/-) Th cell apoptosis was neither transferable nor due to lack of a cytokine. Enhanced CD4(+) cell apoptosis was also observed after anti-CD95 mAb treatment, despite normal CD95 expression. Removal of endogenous cytokines, notably interleukin (IL)-4, led to increased and equally high levels of IRF4(-/-) and IRF4(+/+) cell apoptosis, whereas the protective activity of exogenous IL-4 was reduced in IRF4(-/-) CD4(+) cells despite normal expression of the IL-4 receptor. Therefore, IRF4 is central in protecting CD4(+) cells against proapoptotic stimuli.

Enhanced TCR-induced apoptosis in interferon regulatory factor 4-deficient CD4(+) Th cells.

Les facteurs de transcription de l&#x26;#39;interf&#xE9;ron facteur de r&#xE9;gulation (FRI) de la famille contribuent &#xE0; la r&#xE9;gulation de la prolif&#xE9;ration cellulaire et l&#x26;#39;apoptose. Ici, nous montrons que les cellules CD4 (+) T auxiliaires (Th) des cellules d&#xE9;pourvues de IRF4 (IRF4 (- / -)) sont tr&#xE8;s sensibles &#xE0; l&#x26;#39;apoptose. Apr&#xE8;s infection de IRF4 (- / -) chez la souris avec le grand protozoaire parasite Leishmania, les ganglions lymphatiques drainant la l&#xE9;sion-d&#xE9;velopp&#xE9; le prototype d&#x26;#39;une ad&#xE9;nopathie souris de type sauvage apr&#xE8;s 4 semaines, mais a montr&#xE9; presque une perte totale de la cellularit&#xE9; et l&#x26;#39;apoptose accrue apr&#xE8;s 7 sem. In vitro, l&#x26;#39;activation de IRF4 (- / -) CD4 (+) des cellules Th ont conduit &#xE0; l&#x26;#39;apoptose grandement augment&#xE9; par rapport &#xE0; cellules de type sauvage. La coculture de IRF4 (- / -) et IRF4 (+ / +) CD4 (+) des cellules n&#x26;#39;a pas augment&#xE9; la survie des IRF4 (- / -) CD4 (+) des cellules, ce qui indique que le taux bonifi&#xE9; de IRF4 (- / -) Th l&#x26;#39;apoptose des cellules n&#x26;#39;&#xE9;tait ni transf&#xE9;rables, ni en raison du manque d&#x26;#39;une cytokine. CD4 am&#xE9;lior&#xE9; (+) l&#x26;#39;apoptose des cellules a &#xE9;galement &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9;s apr&#xE8;s un traitement anti-CD95 monoclonal, en d&#xE9;pit de la normale CD95 expression. Suppression des cytokines endog&#xE8;nes, notamment l&#x26;#39;interleukine (IL) -4, conduit &#xE0; des niveaux accrus et tout aussi &#xE9;lev&#xE9; de IRF4 (- / -) et IRF4 (+ / +) l&#x26;#39;apoptose des cellules, alors que l&#x26;#39;activit&#xE9; de protection de l&#x26;#39;IL-4 exog&#xE8;ne a &#xE9;t&#xE9; r&#xE9;duite en IRF4 (- / -) CD4 (+) des cellules malgr&#xE9; l&#x26;#39;expression normale du r&#xE9;cepteur IL-4. Par cons&#xE9;quent, IRF4 est un &#xE9;l&#xE9;ment central dans la protection de CD4 (+) des cellules contre des stimuli pro-apoptotiques.

Am&#xE9;lioration de l&#x26;#39;apoptose induite par TCR dans interf&#xE9;ron r&#xE9;glementation Facteur 4-d&#xE9;ficientes CD4 (+) des cellules Th

Verbesserte TCR-induzierte Apoptose in interferon regulatory factor 4-defizienten CD4 (+) Th-Zellen.

Fattori di trascrizione della famiglia interferone fattore regolatore (IRF) contribuiscono alla regolazione della proliferazione cellulare e l&#39;apoptosi. Qui, ci mostra che CD4(+) T helper cellule (Th) privo di IRF4 (IRF4(-/-)) sono altamente sensibili all&#39;apoptosi. Dopo l&#39;infezione di IRF4(-/-) topi con il protozoo parassita Leishmania major, i linfonodi lesione-drenante sviluppato la linfoadenopatia prototipiche di topi wild-type dopo 4 sett, ma hanno dimostrato la perdita quasi totale della cellularit&agrave; ed enhanced apoptosi dopo 7 wk. In vitro, attivazione di cellule IRF4(-/-) CD4(+) Th portato al apoptosis aumentato notevolmente rispetto con selvaggio-tipo celle. Coculture delle cellule IRF4(-/-) e IRF4(+/+) CD4(+) non ha fatto aumentare la sopravvivenza delle cellule di IRF4(-/-) CD4(+), che indica che il maggiore tasso di apoptosi delle cellule Th IRF4(-/-) era n&eacute; trasferibili n&eacute; a causa della mancanza di una citochina. CD4(+) Enhanced cell apoptosis &egrave; stato osservato anche dopo il trattamento di mAb anti-CD95, nonostante la normale espressione di CD95. Rimozione di citochine endogene, in particolare l&#39;interleuchina (IL) -4, ha portato a livelli altrettanto alti e aumentati dell&#39;apoptosi delle cellule IRF4(-/-) e IRF4(+/+), mentre l&#39;attivit&agrave; protettiva di esogeno IL-4 &egrave; stato ridotto nelle cellule IRF4(-/-) CD4(+) nonostante la normale espressione del recettore IL-4. IRF4 &egrave; quindi centrale nel proteggere le cellule CD4(+) contro Miselli stimoli.

Enhanced TCR-induced apoptosis in cellule di interferone fattore regolatore 4-carenti CD4(+) Th.

&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30F3;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF08;IRF&#xFF09;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x304C;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x3068;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;IRF4&#xFF08; -  /  -  IRF4&#xFF08;&#xFF09;&#xFF09;&#x3092;&#x6B20;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x308B;CD4 + T&#x30D8;&#x30EB;&#x30D1;&#x30FC;&#xFF08;Th&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306B;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x654F;&#x611F;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002; IRF4&#x306E;&#x611F;&#x67D3;&#x5F8C;&#x306B;&#xFF08; -  /  - &#xFF09;&#x539F;&#x751F;&#x52D5;&#x7269;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E5;&#x30DE;&#x30CB;&#x30A2;&#x539F;&#x866B;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3001;&#x75C5;&#x5909;&#x6240;&#x5C5E;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7BC0;&#x306F;&#x3001;4&#x9031;&#x9593;&#x5F8C;&#x306B;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x539F;&#x578B;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7BC0;&#x816B;&#x8139;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3001;7&#x9031;&#x5F8C;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5145;&#x5B9F;&#x6027;&#x3068;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306E;&#x307B;&#x307C;&#x5168;&#x640D;&#x5931;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002; in vitro&#x3067;&#x3001;IRF4&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#xFF08; -  /  - &#xFF09;CD4&#xFF08;+&#xFF09;Th&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x3063;&#x305F;&#x3002; &#xFF08; -  /  - &#xFF09;IRF4&#x306E;&#x5171;&#x57F9;&#x990A;&#x3068;IRF4&#xFF08;+ / +&#xFF09;CD4&#xFF08;+&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;IRF4&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x7387;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3055;&#x305B;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#xFF08; -  /  - &#xFF09;CD4&#xFF08;+&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;IRF4&#x306E;&#x62E1;&#x5F35;&#x7387;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#xFF08; -  /  - &#xFF09;&#x306F;Th&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x8B72;&#x6E21;&#x3084;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x6B20;&#x5982;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3067;&#x3082;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;CD4&#xFF08;+&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;CD95&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x6297;CD95&#x30E2;&#x30CE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CA;&#x30EB;&#x6297;&#x4F53;&#x51E6;&#x7406;&#x5F8C;&#x306B;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x9664;&#x53BB;&#x3001;&#x7279;&#x306B;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30ED;&#x30A4;&#x30AD;&#x30F3;&#xFF08;IL&#xFF09;-4&#x3001;IRF4&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x9AD8;&#x3044;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x3063;&#x305F;&#x5916;&#x56E0;&#x6027;&#x306E;IL-4&#x306E;&#x4FDD;&#x8B77;&#x6D3B;&#x52D5;&#x304C;IRF4&#x306B;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F;&#x4E00;&#x65B9;&#x3068;IRF4&#xFF08;+ / +&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3001;&#xFF08; -  /  - &#xFF09; &#xFF08; -  /  - &#xFF09;CD4&#xFF08;+&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;IL-4&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x6B63;&#x5E38;&#x306A;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;IRF4&#x306F;&#x3001;CD4&#xFF08;+&#xFF09;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x523A;&#x6FC0;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x4FDD;&#x8B77;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x3068;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30F3;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x3067;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;TCR&#x8A98;&#x767A;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;4&#x6B20;&#x640D;CD4&#xFF08;+&#xFF09;Th&#x7D30;&#x80DE;

&#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xB860; &#xADDC;&#xC81C; &#xC694;&#xC18C; (IRF) &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790; apoptosis &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD; &#xC870;&#xC808;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xADF8; CD4(+) T &#xB3C4;&#xC6B0;&#xBBF8; IRF4 &#xBD80;&#xC871; (&#xC77C;) &#xC140; &#xD45C;&#xC2DC; (IRF4(-/-))&#xB294; apoptosis&#xC5D0; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Protozoan &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; &#xC8FC;&#xC694; Leishmania&#xC640; IRF4(-/-) &#xC950;, &#xAC10;&#xC5FC; &#xD6C4; &#xBCD1; &#xBCC0; &#xBC30;&#xCD9C; &#xB9BC;&#xD504;&#xC808; 4 &#xC8FC; &#xD6C4; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC758; prototypic lymphadenopathy &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; cellularity&#xC758; &#xAC70;&#xC758; &#xCD1D; &#xC190;&#xC2E4;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xB294; 7 &#xC8FC; &#xD6C4; apoptosis&#xB97C; &#xD5A5;&#xC0C1;. &#xC2DC;&#xD5D8;&#xAD00;&#xC5D0;&#xC11C; IRF4(-/-) CD4(+) Th &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB294; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xC140;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xD06C;&#xAC8C; &#xC99D;&#xAC00; apoptosis&#xB97C; &#xC774;&#xB04C;&#xC5C8;&#xB2E4;. IRF4(-/-) &#xBC0F; IRF4(+/+) CD4(+) &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; coculture IRF4(-/-) Th &#xC138;&#xD3EC; apoptosis&#xC758; &#xD5A5;&#xC0C1;&#xB41C; &#xC728;&#xC740; &#xC591;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC5C6;&#xACE0; &#xBD80;&#xC871; &#xD558;&#xB294; cytokine&#xC758; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; IRF4(-/-) CD4(+) &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC0DD;&#xC874;&#xC744; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; CD4(+) &#xC140; apoptosis &#xB610;&#xD55C; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; CD95 &#xC2DD;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xC548;&#xD2F0; CD95 mAb &#xCE58;&#xB8CC; &#xD6C4; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC81C;&#xAC70; &#xC0DD; cytokines, &#xD2B9;&#xD788; &#xC778;&#xD130; &#xB8E8; &#xD0A8; (IL)-4, IL-4 &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xD45C;&#xD604;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; IRF4(-/-) CD4(+) &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; exogenous IL-4&#xC758; &#xBCF4;&#xD638; &#xD65C;&#xB3D9; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4; &#xBC18;&#xBA74; &#xC99D;&#xAC00; &#xB3D9;&#xB4F1; &#xD558; &#xAC8C; &#xB192;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC758; IRF4(-/-) &#xBC0F; IRF4(+/+) &#xC140; apoptosis &#xC8FC;&#xB3C4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; irf4&#xC740; CD4(+) &#xC140; proapoptotic &#xC790;&#xADF9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBCF4;&#xD638;&#xC758; &#xC911;&#xC2EC; &#xC774;&#xB2E4;.

&#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; TCR &#xC720;&#xB3C4; apoptosis &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xB860; &#xADDC;&#xC81C; &#xC694;&#xC18C; 4 &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; CD4(+) Th &#xC140;&#xC5D0;.

Los factores de transcripci&#xF3;n del factor regulador del interfer&#xF3;n (IRF) de la familia contribuyen a la regulaci&#xF3;n de la proliferaci&#xF3;n celular y la apoptosis. En este sentido, muestran que las c&#xE9;lulas CD4 (+) T helper (Th) las c&#xE9;lulas que carecen IRF4 (IRF4 (- / -)) son muy sensibles a la apoptosis. Despu&#xE9;s de la infecci&#xF3;n de IRF4 (- / -) ratones con el protozoo Leishmania major, los ganglios linf&#xE1;ticos que drenan la lesi&#xF3;n ha desarrollado el prototipo de la linfadenopat&#xED;a ratones de tipo salvaje despu&#xE9;s de 4 semanas, pero ha demostrado casi p&#xE9;rdida total de la celularidad y aumento de la apoptosis despu&#xE9;s de 7 semanas. In vitro, la activaci&#xF3;n de IRF4 (- / -) CD4 (+) las c&#xE9;lulas Th llevaron a la apoptosis aumentado considerablemente en comparaci&#xF3;n con c&#xE9;lulas de tipo salvaje. Cocultivo de IRF4 (- / -) y IRF4 (+ / +) CD4 (+) las c&#xE9;lulas no aument&#xF3; la supervivencia de la IRF4 (- / -) CD4 (+) las c&#xE9;lulas, lo que indica que la mayor tasa de IRF4 (- / -) Th apoptosis de las c&#xE9;lulas era transferible ni debido a la falta de una citoquina. Mejora de CD4 (+) apoptosis de las c&#xE9;lulas tambi&#xE9;n se observ&#xF3; despu&#xE9;s de anti-CD95 tratamiento con mAb, a pesar de lo normal CD95 de expresi&#xF3;n. La eliminaci&#xF3;n de citoquinas end&#xF3;genas, especialmente interleucina (IL) -4, llevado a niveles cada vez mayores y alta igualmente de IRF4 (- / -) y IRF4 (+ / +) apoptosis de las c&#xE9;lulas, mientras que la actividad protectora de ex&#xF3;gena de IL-4 se redujo en IRF4 (- / -) de CD4 (+) las c&#xE9;lulas a pesar de expresi&#xF3;n normal del receptor de IL-4. Por lo tanto, IRF4 es central en la protecci&#xF3;n de CD4 (+) las c&#xE9;lulas contra los est&#xED;mulos pro-apopt&#xF3;ticos.

Mayor TCR la apoptosis inducida por interfer&#xF3;n factor regulador de 4 deficientes CD4 (+) las c&#xE9;lulas Th

&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x86CB;&#x767D; (&#x4E2A;&#x522B;&#x884C;&#x52A8;&#x8BA1;&#x5212;) c-IAP1 &#x548C; c IAP2 &#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x88AB;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E3A;&#x80BF;&#x7624;&#x574F;&#x6B7B;&#x56E0;&#x5B50;&#x53D7;&#x4F53; 2 (TNFR2) &#x4FE1;&#x53F7;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x4E00;&#x90E8;&#x5206;&#x548C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E2D;&#x4ECB;&#x4EBA;&#x80BF;&#x7624;&#x574F;&#x6B7B;&#x56E0;&#x5B50; &alpha; &#x4FE1;&#x53F7;&#x6709;&#x7275;&#x8FDE;&#x3002;&#x50CF;&#x6240;&#x6709;&#x73AF;&#x57DF;&#x5305;&#x542B;&#x7684;&#x4E2A;&#x522B;&#x884C;&#x52A8;&#x8BA1;&#x5212;&#xFF0C;c IAP1 &#x548C; c IAP2 &#x6709;&#x6CDB;&#x7D20;&#x86CB;&#x767D;&#x8FDE;&#x63A5;&#x9176; &#xFF08;E3&#xFF09; &#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x63A2;&#x7D22;&#x7684; c IAP1 &#x5728;&#x751F;&#x7406;&#x7684;&#x8BBE;&#x7F6E;&#x529F;&#x80FD;&#xFF0C;&#x751F;&#x6210; c-IAP1-&#x7F3A;&#x9677;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7684;&#x540C;&#x6E90;&#x57FA;&#x56E0;&#x91CD;&#x7EC4;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x52A8;&#x7269;&#x90FD;&#x662F;&#x53EF;&#x884C;&#x548C;&#x6709;&#x6CA1;&#x6709;&#x660E;&#x663E;&#x7684;&#x5BA3;&#x4F20;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x6D46;&#x6DB2;&#x7684;&#x523A;&#x6FC0;&#x3002;C-IAP1(-/-) &#x5C0F;&#x9F20;&#x7EC6;&#x80DE;&#x505A;&#xFF0C;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x8868;&#x793A; c IAP2 &#x86CB;&#x767D;&#x5728;&#x6CA1;&#x6709;&#x589E;&#x52A0;&#x7684; c IAP2 mRNA &#x6C34;&#x5E73;&#x663E;&#x8457;&#x5347;&#x9AD8;&#x3002;&#x4E0E;&#x7275;&#x8FDE;&#x5728;&#x6D3B;&#x5316;&#x7684; NF &#x6D3B;&#x5316;&#x7684; c &#x4E2A;&#x522B;&#x884C;&#x52A8;&#x8BA1;&#x5212;&#x7684;&#x62A5;&#x544A;&#xFF0C;&#x4F11;&#x606F;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x9ECF;&#x6DB2;&#x662F; c-IAP1-&#x7F3A;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E2D;&#x4E0D;&#x53D7;&#x635F;&#x3002;&#x77AC;&#x65F6;&#x8F6C;&#x67D3;&#x4E0E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x548C; E3 &#x7F3A;&#x9677; c IAP1 &#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;c IAP2 &#x662F; c IAP1 &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x6CDB;&#x548C;&#x968F;&#x540E;&#x7684;&#x9000;&#x5316;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x7531; TRAF2 &#x9002;&#x914D;&#x5668;&#x529F;&#x80FD;&#x5F3A;&#x5316;&#x7684;&#x76F4;&#x63A5;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;c &#x4E2A;&#x522B;&#x884C;&#x52A8;&#x8BA1;&#x5212;&#x4EE3;&#x8868;&#x4F53;&#x5173;&#x8054;&#x6CDB;&#x7D20;&#x86CB;&#x767D;&#x8FDE;&#x63A5;&#x9176;&#x5728;&#x5176;&#x4E2D;&#x4E4B;&#x4E00;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x540E;&#x6C34;&#x5E73;&#x548C; E3 &#x4F9D;&#x8D56;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x89C4;&#x8303;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x53E6;&#x4E00;&#x5BF9;&#x3002;

&#x8F6C;&#x5F55;&#x540E;&#x6C34;&#x5E73;&#x4E0B;&#x8C03;&#x7684; c IAP2 &#x7684;&#x6CDB;&#x7D20;&#x86CB;&#x767D;&#x8FDE;&#x63A5;&#x9176; c-IAP1 &#x4F53;&#x5185;&#x3002;

Inhibitor of apoptosis proteins (IAPs) c-IAP1 and c-IAP2 were identified as part of the tumor necrosis factor receptor 2 (TNFR2) signaling complex and have been implicated as intermediaries in tumor necrosis factor alpha signaling. Like all RING domain-containing IAPs, c-IAP1 and c-IAP2 have ubiquitin protein ligase (E3) activity. To explore the function of c-IAP1 in a physiologic setting, c-IAP1-deficient mice were generated by homologous gene recombination. These animals are viable and have no obvious sensitization to proapoptotic stimuli. Cells from c-IAP1(-/-) mice do, however, express markedly elevated levels of c-IAP2 protein in the absence of increased c-IAP2 mRNA. In contrast to reports implicating c-IAPs in the activation of NF-kappaB, resting and cytokine-induced NF-kappaB activation was not impaired in c-IAP1-deficient cells. Transient transfection studies with wild-type and E3-defective c-IAP1 revealed that c-IAP2 is a direct target for c-IAP1-mediated ubiquitination and subsequent degradation, which are potentiated by the adaptor function of TRAF2. Thus, the c-IAPs represent a pair of TNFR-associated ubiquitin protein ligases in which one regulates the expression of the other by a posttranscriptional and E3-dependent mechanism.

Posttranscriptional downregulation of c-IAP2 by the ubiquitin protein ligase c-IAP1 in vivo.

Inhibiteur de prot&#xE9;ines de l&#x26;#39;apoptose (IAP) c-IAP1 et c-IAP2 ont &#xE9;t&#xE9; identifi&#xE9;s comme faisant partie du r&#xE9;cepteur du facteur de n&#xE9;crose tumorale 2 (TNFR2) complexe de signalisation et ont &#xE9;t&#xE9; impliqu&#xE9;s comme interm&#xE9;diaires dans la signalisation des facteurs de n&#xE9;crose tumorale alpha. Comme tous les RING de domaine contenant des FAI, c-IAP1 et c-IAP2 ont ubiquitine ligase de prot&#xE9;ine (E3) l&#x26;#39;activit&#xE9;. Pour explorer la fonction de c-IAP1 dans un cadre physiologique, c-IAP1 souris d&#xE9;ficientes ont &#xE9;t&#xE9; g&#xE9;n&#xE9;r&#xE9;s par recombinaison homologue du g&#xE8;ne. Ces animaux sont viables et n&#x26;#39;ont pas la sensibilisation &#xE0; des stimuli pro-apoptotiques &#xE9;vidente. Des cellules provenant de c-IAP1 (- / -) chez la souris ne, cependant, exprimer des niveaux nettement &#xE9;lev&#xE9;s de c-IAP2 prot&#xE9;ines en l&#x26;#39;absence d&#x26;#39;une augmentation de c-IAP2 ARNm. Contrairement aux rapports impliquant c-FAI dans l&#x26;#39;activation de NF-kB, de repos et induite par les cytokines NF-kappaB activation n&#x26;#39;a pas &#xE9;t&#xE9; alt&#xE9;r&#xE9;e chez les c-IAP1 cellules d&#xE9;ficientes. Des &#xE9;tudes de transfection transitoire avec de type sauvage et E3-d&#xE9;fectueux c-IAP1 r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; que c-IAP2 est une cible directe pour le c-IAP1 m&#xE9;di&#xE9;e par ubiquitination et la d&#xE9;gradation subs&#xE9;quente, qui sont potentialis&#xE9;s par la fonction adaptateur de TRAF2. Ainsi, c-PAI les repr&#xE9;sentent une paire de TNFR associ&#xE9;es ligases prot&#xE9;ines ubiquitine dans lequel on r&#xE9;gule l&#x26;#39;expression de l&#x26;#39;autre par un m&#xE9;canisme de post-transcriptionnelle et E3-d&#xE9;pendante.

R&#xE9;gulation &#xE0; la baisse posttranscriptionnelle de loi C-IAP2 par la voie ubiquitine ligase prot&#xE9;ine C-IAP1 in vivo

Posttranskriptionelle Herunterregulierung von c-IAP2 durch den Ubiquitin-Protein-Ligase c-IAP1 in vivo.

Inibitore dell&#39;apoptosi (IAPs) proteine c-IAP1 e c-IAP2 sono stati identificati come parte del fattore di necrosi tumorale recettore 2 (TNFR2) complesso di segnalazione e sono stati implicati come intermediari del fattore di necrosi tumorale alfa segnalazione. Come tutti i RING dominio-contenente IAPs, c-IAP1 e c-IAP2 hanno attivit&agrave; di ubiquitin protein ligasi (E3). Per esplorare la funzione del c-IAP1 in un ambiente fisiologico, c-IAP1-deficient mice sono stati generati tramite la ricombinazione omologa gene. Questi animali sono vitali e non evidente sensibilizzazione agli stimoli Miselli. Le cellule da topi c-IAP1(-/-), tuttavia, esprimono marcatamente elevati livelli di proteina c-IAP2 in assenza di c-IAP2 aumento mRNA. In contrasto con rapporti implicando c-IAPs nell&#39;attivazione di NF-kappaB, riposo e cytokine-induced attivazione di NF-kappaB non &egrave; stato alterato in cellule c-IAP1-carenti. Gli studi di trasfezione transiente con selvaggio-tipo ed E3-difettoso c-IAP1 rivelato che quello c-IAP2 &egrave; un obiettivo diretto per c-IAP1-mediata ubiquitination e successiva degradazione, che sono potenziate dalla funzione di adattatore di TRAF2. Cos&igrave;, il c-IAPs rappresentano una coppia di TNFR-associated ubiquitina ligasi di proteina in cui uno regola l&#39;espressione di altro da un meccanismo di posttranscriptional ed E3-dipendente.

Posttranscriptional downregulation del c-IAP2 dal ubiquitin protein ligasi c-IAP1 in vivo.

&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#xFF08;IAP&#x3092;&#xFF09;C-IAP1&#x304A;&#x3088;&#x3073;c-IAP2&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306F;&#x3001;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x816B;&#x760D;&#x58CA;&#x6B7B;&#x56E0;&#x5B50;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;2&#xFF08;TNFR2&#xFF09;&#x306E;&#x4E00;&#x90E8;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x816B;&#x760D;&#x58CA;&#x6B7B;&#x56E0;&#x5B50;&#x3B1;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x8005;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;RING&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x542B;&#x6709;&#x306E;IAP&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x3001;C-IAP1&#x304A;&#x3088;&#x3073;c-IAP2&#x306F;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30EA;&#x30AC;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;E3&#xFF09;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x306A;&#x8A2D;&#x5B9A;&#x3067;&#x306F;c-IAP1&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;C-IAP1&#x6B20;&#x640D;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x76F8;&#x540C;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x52D5;&#x7269;&#x306F;&#x751F;&#x5B58;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x523A;&#x6FC0;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x660E;&#x767D;&#x306A;&#x611F;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002; C-IAP1&#x304B;&#x3089;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08; -  /  - &#xFF09;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;C-IAP2 mRNA&#x306E;&#x4E0D;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x306E;c-IAP2&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x9855;&#x8457;&#x306A;&#x4E0A;&#x6607;&#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x3067;&#x304F;&#x3060;&#x3055;&#x3044;&#x3002; &#x3001;NF-&#x3BA;B&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x200B;&#x200B;&#x306B;&#x306F;c-IAP&#x3092;&#x304C;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x4F11;&#x3093;&#x3067;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x8A98;&#x5C0E;NF-&#x3BA;B&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x200B;&#x200B;&#x306F;&#x3001;C-IAP1&#x6B20;&#x640D;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x640D;&#x306A;&#x308F;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3068;&#x306F;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x304A;&#x3088;&#x3073;E3-&#x6B20;&#x9665;&#x306E;&#x3042;&#x308B;C-IAP1&#x306E;&#x4E00;&#x904E;&#x6027;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;c-IAP2&#x306F;TRAF2&#x306E;&#x30A2;&#x30C0;&#x30D7;&#x30BF;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x5897;&#x5F37;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;C-IAP1&#x5A92;&#x4ECB;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x5316;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x306E;&#x52A3;&#x5316;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x7684;&#x306A;&#x6A19;&#x7684;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;C-IAP&#x306F;&#x4E00;&#x8EE2;&#x5199;&#x5F8C;&#x304A;&#x3088;&#x3073;E3&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;TNFR&#x95A2;&#x9023;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x30EA;&#x30AC;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x30DA;&#x30A2;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

in vivo&#x3067;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30EA;&#x30AC;&#x30FC;&#x30BC;C-IAP1&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;C-IAP2&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x5F8C;&#x767A;&#x73FE;&#x6291;&#x5236;

Apoptosis &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (IAPs) c-IAP1 &#xBC0F; c IAP2 &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC885;&#xC591; &#xAD34; &#xC0AC; &#xC694;&#xC778; &#xC54C;&#xD30C; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC911; &#xAC1C;&#xC778;&#xC73C;&#xB85C; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xB418;&#xC5B4; &#xC885;&#xC591; &#xAD34; &#xC0AC; &#xC778;&#xC790; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC2E0;&#xD638; 2 (TNFR2)&#xC758; &#xC77C;&#xD658;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;. IAPs &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xBC18;&#xC9C0; &#xCC98;&#xB7FC; c iap1&#xC640; c IAP2 &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB9AC;&#xAC00; (E3) &#xD65C;&#xB3D9;&#xC774; &#xC788;&#xC5B4;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801;&#xC778; &#xD658;&#xACBD;&#xC5D0;&#xC11C; c-iap1&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xD0D0;&#xAD6C; &#xD558; c IAP1 &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xC950; &#xB3D9;&#xC885; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0DD;&#xC131; &#xB41C;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xACFC; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; proapoptotic &#xC790;&#xADF9;&#xC5D0; &#xC544;&#xBB34;&#xB7F0; &#xBD84;&#xBA85; &#xD55C; &#xBBFC;&#xAC10;&#xC131;&#xC744;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; c-IAP1(-/-) &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC140; c IAP2 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC99D;&#xAC00; c IAP2 Mrna&#xC758; &#xBD80;&#xC7AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD604;&#xC800; &#xD558; &#xAC8C; &#xB192;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xC775;&#xC2A4;&#xD504;&#xB808;&#xC2A4;. &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C; NF kappaB &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; c-IAPs &#xC5F0;&#xB8E8;, &#xBC18;&#xBA74; &#xD734;&#xC2DD; &#xBC0F; cytokine &#xC720;&#xB3C4; NF kappaB &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB294; c IAP1 &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC190;&#xC0C1; &#xB418;&#xC9C0;. &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xBC0F; E3 &#xACB0;&#xD568; c-IAP1 &#xACFC;&#xB3C4; transfection &#xC5F0;&#xAD6C; &#xADF8; c IAP2 TRAF2 &#xC5B4;&#xB311;&#xD130; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; potentiated ubiquitination c IAP1 &#xC911;&#xC7AC; &#xBC0F; &#xD6C4;&#xC18D; &#xC800;&#xD558;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC9C1;&#xC811;&#xC801;&#xC778; &#xB300;&#xC0C1; &#xBC1D;&#xD614;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, c IAPs TNFR &#xAD00;&#xB828; &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; ligases&#xB294; &#xD558;&#xB098; posttranscriptional&#xC640; e 3 &#xC885;&#xC18D; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB2E4;&#xB978; &#xD45C;&#xD604; &#xADDC;&#xC81C;&#xC758; &#xC30D;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

C-iap2&#xB294; &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB9AC;&#xAC00; c-IAP1 in vivo&#xC5D0;&#xC11C; posttranscriptional downregulation.

Prote&#xED;nas inhibidoras de la apoptosis (IAP) c-IAP1 y c-IAP2 fueron identificados como parte del receptor del factor de necrosis tumoral 2 (TNFR2) de se&#xF1;alizaci&#xF3;n complejos y han sido implicados como intermediarios en la se&#xF1;alizaci&#xF3;n del factor de necrosis tumoral alfa. Al igual que todos los anillos que contiene el dominio IAP, c-IAP1 y c-IAP2 tienen la prote&#xED;na ubiquitina ligasa (E3) de actividad. Para explorar la funci&#xF3;n de c-IAP1 en un entorno fisiol&#xF3;gico, c-IAP1 deficientes en ratones se generan mediante la recombinaci&#xF3;n hom&#xF3;loga del gen. Estos animales son viables y no tienen la sensibilizaci&#xF3;n obvio est&#xED;mulos pro-apopt&#xF3;ticos. Las c&#xE9;lulas de c-IAP1 (- / -) ratones, sin embargo, expresar niveles marcadamente elevados de c-IAP2 prote&#xED;na en ausencia de un aumento de c-IAP2 ARNm. En contraste con los informes que implican a c-IAP en la activaci&#xF3;n de NF-kappaB, descansando y de citoquinas inducida por la activaci&#xF3;n de NF-kappaB no se vio afectada en el c-IAP1 c&#xE9;lulas deficientes. Los estudios de transfecci&#xF3;n transitoria con la naturaleza y tipo E3 defectuosos-c-IAP1 revel&#xF3; que el c-IAP2 es un objetivo directo de c-IAP1 mediada por ubiquitinaci&#xF3;n y posterior degradaci&#xF3;n, que son potenciados por la funci&#xF3;n de adaptador de TRAF2. As&#xED;, los c-IAP representan un par de TNFR-asociadas ligasas prote&#xED;na ubiquitina en el que una regula la expresi&#xF3;n de la otra por un mecanismo postranscripcional y E3-dependiente.

Regulaci&#xF3;n a la baja postranscripcional de la C-IAP2 por la ubiquitina ligasa de prote&#xED;na C-IAP1 en Vivo

&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x8F6C;&#x5316;&#x4E3A;&#x4E73;&#x9178;&#x51CF;&#x5C11;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x547C;&#x5438;&#x4E0E;&#x5173;&#x8054;&#x662F;&#x5728; 1920 &#x5E74;&#x9996;&#x6B21;&#x63CF;&#x8FF0;&#x4E86;&#x5965;&#x6258;&#x534E;&#x5B9D;&#x80BF;&#x7624;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x72EC;&#x7279;&#x7279;&#x5F81;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x534E;&#x5B9D;&#x6548;&#x679C;&#x7531;&#x764C;&#x57FA;&#x56E0;&#x5F15;&#x8D77;&#x7684;&#x5E76;&#x662F;&#x6076;&#x6027;&#x8F6C;&#x5316;&#x7684;&#x57FA;&#x7840;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x8FD9;&#x751F;&#x547D;&#x7684;&#x57FA;&#x7840;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B0;&#x65B9;&#x6CD5;&#x6765;&#x8861;&#x91CF;&#x4F53;&#x5916;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4EE3;&#x8C22;&#x7387;&#xFF0C;&#x589E;&#x52A0;&#x7CD6;&#x9175;&#x89E3;&#xFF0C;&#x51CF;&#x5C11;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x547C;&#x5438;&#x529F;&#x80FD;&#x5728;&#x4E24;&#x4E2A;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;H460 &#x548C; A549 &#x4E2D;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x8C03;&#x67E5;&#x3002;&#x751F;&#x547D;&#x8868;&#x578B;&#x662F;&#x901A;&#x8FC7;&#x6D4B;&#x91CF;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x547C;&#x5438;&#x3001; &#x7CD6;&#x9175;&#x89E3;&#x901F;&#x7387;&#x548C; ATP &#x8425;&#x4E1A;&#x989D;&#x7684;&#x5404;&#x79CD;&#x836F;&#x7406;&#x8C03;&#x5236;&#x5668;&#x54CD;&#x5E94;&#x4E2D;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x8FDB;&#x884C;&#x5206;&#x6790;&#x3002;H460 &#x548C; A549 &#x7EC6;&#x80DE;&#x4F9D;&#x8D56;&#x7CD6;&#x9175;&#x89E3;&#x548C;&#x80FD;&#x529B;&#x4E0A;&#x65F6;&#x663E;&#x793A;&#x7ED9;&#x5927;&#x5927;&#x957F;&#x671F;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x9014;&#x5F84;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5176;&#x547C;&#x5438;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x53CD;&#x8FC7;&#x6765;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x662F;&#x771F;&#x5B9E;&#x7684;&#x3002;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB;&#x5728;&#x6C27;&#x5316;&#x78F7;&#x9178;&#x5316; &#xFF08;OXPHOS&#xFF09; &#x80FD;&#x529B;&#x5F31;&#x6BD2;&#x75AB;&#x82D7;&#x548C;&#x627E;&#x4E0D;&#x5230;&#x8DB3;&#x591F;&#x7684;&#x957F;&#x671F;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53; OXPHOS &#x65F6;&#x7CD6;&#x9175;&#x89E3;&#x5DF2;&#x88AB;&#x7981;&#x7528;&#x3002;&#x8FD9;&#x89C2;&#x5BDF;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x529F;&#x80FD;&#x969C;&#x788D;&#x4E0E;&#x5BC6;&#x5207;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x7CD6;&#x9175;&#x89E3;&#x589E;&#x52A0;&#x4F9D;&#x8D56;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x5B83;&#x88AB;&#x8868;&#x660E; h460 &#x66F4;&#x7CD6;&#x9175;&#x89E3;&#xFF0C;&#x5177;&#x6709;&#x76F8;&#x6BD4; A549 &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x547C;&#x5438;&#x7684;&#x66F4;&#x5927;&#x635F;&#x5BB3;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x54CD;&#x5E94;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53; ATP &#x5408;&#x6210;&#x6291;&#x5236;&#x7CD6;&#x9175;&#x89E3;&#x4E0A;&#x8C03;&#x662F;&#x4F9D;&#x8D56; AMP &#x6D3B;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x603B;&#x4E4B;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x751F;&#x547D;&#x8868;&#x578B;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x662F;&#x7CD6;&#x9175;&#x89E3;&#x548C;&#x94FE;&#x63A5;&#x5728;&#x5176; OXPHOS &#x5BB9;&#x91CF;&#x8870;&#x51CF;&#x7387;&#x589E;&#x52A0;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4E24;&#x4E2A;&#x764C;&#x75C7;&#x7EC6;&#x80DE;&#x682A;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4EE3;&#x8C22;&#x7684;&#x6539;&#x53D8;&#x63D0;&#x4F9B;&#x589E;&#x957F;&#x4F18;&#x52BF;&#x548C;&#x51CB;&#x4EA1;&#x62B5;&#x6297;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x673A;&#x7406;&#x89E3;&#x91CA;&#x3002;

&#x591A;&#x53C2;&#x91CF;&#x4EE3;&#x8C22;&#x5206;&#x6790;&#x63ED;&#x793A;&#x4E86;&#x51CF;&#x6BD2;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x751F;&#x7269;&#x80FD;&#x91CF;&#x529F;&#x80FD;&#x548C;&#x589E;&#x5F3A;&#x7CD6;&#x9175;&#x89E3;&#x5728;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F9D;&#x8D56;&#x9879;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x5BC6;&#x5207;&#x8054;&#x7CFB;&#x3002;

Increased conversion of glucose to lactic acid associated with decreased mitochondrial respiration is a unique feature of tumors first described by Otto Warburg in the 1920s. Recent evidence suggests that the Warburg effect is caused by oncogenes and is an underlying mechanism of malignant transformation. Using a novel approach to measure cellular metabolic rates in vitro, the bioenergetic basis of this increased glycolysis and reduced mitochondrial respiration was investigated in two human cancer cell lines, H460 and A549. The bioenergetic phenotype was analyzed by measuring cellular respiration, glycolysis rate, and ATP turnover of the cells in response to various pharmacological modulators. H460 and A549 cells displayed a dependency on glycolysis and an ability to significantly upregulate this pathway when their respiration was inhibited. The converse, however, was not true. The cell lines were attenuated in oxidative phosphorylation (OXPHOS) capacity and were unable to sufficiently upregulate mitochondrial OXPHOS when glycolysis was disabled. This observed mitochondrial impairment was intimately linked to the increased dependency on glycolysis. Furthermore, it was demonstrated that H460 cells were more glycolytic, having a greater impairment of mitochondrial respiration, compared with A549 cells. Finally, the upregulation of glycolysis in response to mitochondrial ATP synthesis inhibition was dependent on AMP-activated protein kinase activity. In summary, our results demonstrate a bioenergetic phenotype of these two cancer cell lines characterized by increased rate of glycolysis and a linked attenuation in their OXPHOS capacity. These metabolic alterations provide a mechanistic explanation for the growth advantage and apoptotic resistance of tumor cells.

Multiparameter metabolic analysis reveals a close link between attenuated mitochondrial bioenergetic function and enhanced glycolysis dependency in human tumor cells.

La conversion accrue de glucose en acide lactique associ&#xE9;e &#xE0; la respiration mitochondriale diminu&#xE9; est une caract&#xE9;ristique unique des tumeurs d&#x26;#39;abord d&#xE9;crit par Otto Warburg dans les ann&#xE9;es 1920. Des donn&#xE9;es r&#xE9;centes sugg&#xE8;rent que l&#x26;#39;effet Warburg est caus&#xE9;e par des oncog&#xE8;nes et constitue un m&#xE9;canisme sous-jacent de la transformation maligne. En utilisant une nouvelle approche pour mesurer les taux m&#xE9;taboliques cellulaires in vitro, la base bio&#xE9;nerg&#xE9;tique de cette augmentation de la glycolyse et la r&#xE9;duction de la respiration mitochondriale a &#xE9;t&#xE9; &#xE9;tudi&#xE9;e dans deux lign&#xE9;es cellulaires humaines de cancer, H460 et A549. Le ph&#xE9;notype bio&#xE9;nerg&#xE9;tique a &#xE9;t&#xE9; analys&#xE9;e par la mesure de la respiration cellulaire, le taux de glycolyse, et renouvellement de l&#x26;#39;ATP des cellules en r&#xE9;ponse &#xE0; divers modulateurs pharmacologiques. H460 et cellules A549 affich&#xE9; une d&#xE9;pendance de la glycolyse et une capacit&#xE9; &#xE0; r&#xE9;guler &#xE0; la hausse de mani&#xE8;re significative cette voie lorsque leur respiration a &#xE9;t&#xE9; inhib&#xE9;e. L&#x26;#39;inverse, cependant, n&#x26;#39;&#xE9;tait pas vrai. Les lign&#xE9;es cellulaires ont &#xE9;t&#xE9; att&#xE9;nu&#xE9;es dans la phosphorylation (la phosphorylation oxydative) la capacit&#xE9; oxydative et &#xE9;taient incapables de r&#xE9;guler &#xE0; la hausse la phosphorylation oxydative mitochondriale suffisamment lorsque la glycolyse a &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;sactiv&#xE9;. Cette d&#xE9;pr&#xE9;ciation observ&#xE9;e mitochondrial a &#xE9;t&#xE9; intimement li&#xE9;e &#xE0; la d&#xE9;pendance accrue de la glycolyse. En outre, il a &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;montr&#xE9; que les cellules H460 sont plus glycolytique, ayant une plus grande d&#xE9;pr&#xE9;ciation de la respiration mitochondriale, comparativement &#xE0; des cellules A549. Enfin, la r&#xE9;gulation positive de la glycolyse en r&#xE9;ponse &#xE0; l&#x26;#39;inhibition de la synth&#xE8;se d&#x26;#39;ATP mitochondriale &#xE9;tait d&#xE9;pendante de l&#x26;#39;AMP-activated protein kinase activit&#xE9;. En r&#xE9;sum&#xE9;, nos r&#xE9;sultats d&#xE9;montrent un ph&#xE9;notype m&#xE9;tabolique de ces deux lign&#xE9;es de cellules canc&#xE9;reuses caract&#xE9;ris&#xE9;es par un taux accru de la glycolyse et une att&#xE9;nuation li&#xE9;e &#xE0; leur capacit&#xE9; OXPHOS. Ces alt&#xE9;rations m&#xE9;taboliques fournir une explication m&#xE9;caniste de l&#x26;#39;avantage de croissance et la r&#xE9;sistance apoptotique des cellules tumorales.

Analyse m&#xE9;tabolique multiparam&#xE8;tre r&#xE9;v&#xE8;le un lien &#xE9;troit entre att&#xE9;nu&#xE9; Fonction bio&#xE9;nerg&#xE9;tique mitochondriale et la d&#xE9;pendance accrue dans la glycolyse des cellules tumorales humaines

Erh&ouml;hte Umwandlung von Glukose zu Milchs&auml;ure verminderte mitochondriale Atmung zugeordnet ist ein einzigartiges Merkmal von Tumoren, die zuerst beschrieben von Otto Warburg in den 1920er Jahren. J&uuml;ngste Hinweise, dass der Warburg-Effekt durch Onkogene verursacht wird und eine zugrunde liegende Mechanismus einer malignen Transformation ist. Verwenden einen neuen Ansatz zur zellul&auml;ren Stoffwechsels in-vitro-Messung, bioenergetische Grundlage dieses erh&ouml;hte Glykolyse und reduzierte mitochondriale Atmung wurde in zwei menschliche Krebszelllinien, H460 und A549 untersucht. Die bioenergetische Ph&auml;notyp wurde durch Messung der Zellatmung, Glykolyse Rate und ATP-Umsatz der Zellen als Reaktion auf verschiedene pharmakologische Modulatoren analysiert. H460 und A549 Zellen angezeigt einer Abh&auml;ngigkeit auf Glykolyse und der F&auml;higkeit zu deutlich Upregulate diese Option, wenn ihre Atmung gehemmt wurde. Das Gegenteil war jedoch nicht wahr. Die Zelllinien wurden abgeschw&auml;cht, Oxidative Phosphorylierung (OXPHOS) Kapazit&auml;t und konnten nicht ausreichend Upregulate mitochondrialen OXPHOS wenn Glykolyse deaktiviert wurde. Dies beobachtet, mitochondriale Wertminderung der erh&ouml;hte Abh&auml;ngigkeit auf Glykolyse eng verbunden war. Dar&uuml;ber hinaus wurde nachgewiesen, dass H460 Zellen mehr glykolytischen, haben eine gr&ouml;&szlig;ere Beeintr&auml;chtigung der mitochondrialen Atmung, verglichen mit A549 Zellen waren. Schlie&szlig;lich war die Hochregulation der Glykolyse als Reaktion auf die mitochondriale ATP-Synthese-Hemmung AMP-aktivierte Protein-Kinase-Aktivit&auml;t abh&auml;ngig. Zusammenfassend l&auml;sst sich sagen zeigen unsere Ergebnisse einen bioenergetische Ph&auml;notyp von diesen beiden Krebszelllinien zeichnet sich durch erh&ouml;hte Rate der Glykolyse und eine verkn&uuml;pfte D&auml;mpfung in ihrer OXPHOS-Eigenschaft. Diese metabolischen Ver&auml;nderungen bieten eine mechanistische Erkl&auml;rung f&uuml;r Wachstum nutzen und Apoptotic Widerstands von Tumorzellen.

Multiparameter metabolische Analyse zeigt eine enge Verbindung zwischen abgeschw&auml;chte mitochondriale bioenergetische Funktion und verbesserte Glykolyse Abh&auml;ngigkeit in menschlichen Tumorzellen.

Maggiore conversione di glucosio ad acido lattico associato a ridotta respirazione mitocondriale &egrave; una caratteristica unica dei tumori descritto per la prima volta da Otto Warburg nel 1920. Recenti evidenze suggeriscono che l&#39;effetto Warburg &egrave; causata da oncogeni ed &egrave; un meccanismo sottostante di trasformazione maligna. Utilizzando un approccio innovativo per misurare i tassi metabolici cellulari in vitro, la bioenergetica base di questo aumento glicolisi e respirazione mitocondriale ridotta &egrave; stato indagato in due linee di cellule tumorali umane, H460 e A549. Il fenotipo della bioenergetico &egrave; stato analizzato misurando la respirazione cellulare, glicolisi tasso e fatturato di ATP delle cellule in risposta a vari modulatori farmacologici. Cellule H460 e A549 visualizzata una dipendenza sulla glicolisi e un&#39;abilit&agrave; di potenziamento significativamente questo percorso quando era inibito la loro respirazione. L&#39;inverso, tuttavia, non era vero. Le linee cellulari sono state attenuate nella fosforilazione ossidativa (OXPHOS) capacit&agrave; e non erano in grado di potenziamento sufficientemente mitocondriali OXPHOS quando la glicolisi &egrave; stata disabilitata. Questo osservato danno mitocondriale era intimamente legato alla aumentata dipendenza sulla glicolisi. Inoltre, &egrave; stato dimostrato che le cellule H460 erano pi&ugrave; glicolitica, avendo una maggiore compromissione della respirazione mitocondriale, confrontato con le cellule A549. Infine, la sovraregolazione di glicolisi in risposta all&#39;inibizione di sintesi ATP mitocondriale &egrave; stato dipendente da attivit&agrave; della chinasi di proteina attivata da AMP. In sintesi, i nostri risultati dimostrano un fenotipo bioenergetico di queste linee di cellule di due cancro caratterizzata da aumento della frequenza della glicolisi e un&#39;attenuazione collegata nella loro capacit&agrave; OXPHOS. Queste alterazioni metaboliche forniscono una spiegazione meccanicistica per la resistenza di vantaggio e apoptotic di crescita delle cellule tumorali.

Analisi metaboliche multiparametrico rivelano uno stretto legame tra funzione bioenergetica mitocondriale attenuato e rafforzata la glicolisi dipendenza in cellule tumorali umane.

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in vitro&#x3067;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x7387;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65AC;&#x65B0;&#x306A;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x89E3;&#x7CD6;&#x3068;&#x4F4E;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x547C;&#x5438;&#x306E;&#x751F;&#x4F53;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x306E;&#x57FA;&#x790E;&#x306F;&#x4E8C;&#x3064;&#x306E;&#x30D2;&#x30C8;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x3001;H460&#x3068;A549&#x3067;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x751F;&#x4F53;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x547C;&#x5438;&#x3001;&#x89E3;&#x7CD6;&#x901F;&#x5EA6;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7A2E;&#x3005;&#x306E;&#x85AC;&#x7406;&#x5909;&#x8ABF;&#x5668;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;ATP&#x4EE3;&#x8B1D;&#x56DE;&#x8EE2;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x5206;&#x6790;&#x3057;&#x305F;&#x3002; 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&#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xAC10;&#xC18C; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; &#xD638;&#xD761;&#xACFC; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC816; &#xC0B0; &#xC99D;&#xAC00; &#xBCC0;&#xD658; 1920 &#xB144;&#xB300;&#xC5D0; &#xCC98;&#xC74C;&#xC73C;&#xB85C; &#xC624;&#xD1A0; &#xBC14;&#xB974; &#xBD80;&#xB974; &#xD06C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xB294; &#xC885;&#xC591;&#xC758; &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD5C;&#xADFC; &#xC99D;&#xAC70;&#xAC00; &#xB098;&#xC654;&#xB2E4; &#xBC14;&#xB974; &#xBD80;&#xB974; &#xD06C; &#xD6A8;&#xACFC; oncogenes &#xAE30;&#xC778;&#xD55C; &#xC545;&#xC131; &#xBCC0;&#xD658;&#xC758; &#xAE30;&#xBCF8; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC811;&#xADFC; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xCCB4; &#xC678; &#xC138;&#xD3EC; &#xC2E0;&#xC9C4; &#xB300;&#xC0AC; &#xC18D;&#xB3C4; &#xCE21;&#xC815;, bioenergetic &#xAE30;&#xCD08; &#xBD84;&#xD574; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558; &#xACE0; &#xAC10;&#xC18C; &#xB41C; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; &#xD638;&#xD761;&#xC740; &#xB450; &#xC778;&#xAC04; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC; &#xC120;, H460 &#xBC0F; a549&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC870;&#xC0AC;. Bioenergetic &#xD45C;&#xD604; &#xD615; &#xC138;&#xD3EC; &#xD638;&#xD761;, &#xBD84;&#xD574; &#xC18D;&#xB3C4; &#xBC0F; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC57D;&#xB9AC; &#xBCC0;&#xC870;&#xAE30;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; ATP &#xD68C;&#xC804;&#xC728;&#xC744; &#xCE21;&#xC815; &#xD558; &#xC5EC; &#xBD84;&#xC11D; &#xD588;&#xB2E4;. H460 A549 &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xC2DC; &#xC885;&#xC18D;&#xC131;&#xC744; &#xBD84;&#xD574; &#xD558; &#xACE0; &#xB2A5;&#xB825;&#xC5D0; &#xD06C;&#xAC8C; upregulate&#xC774;&#xC774; &#xD1B5;&#xB85C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xD638;&#xD761;&#xC744; &#xC800;&#xD574; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xBC18;&#xB300;&#xB85C;,, &#xC0AC;&#xC2E4;&#xC774; &#xC544;&#xB2C8;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC138;&#xD3EC; &#xC120;&#xACFC; &#xC0B0;&#xD654; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; (OXPHOS) &#xC6A9;&#xB7C9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC10;&#xC1E0; &#xD588;&#xB2E4; &#xCDA9;&#xBD84;&#xD788; upregulate &#xD558;&#xC9C0; &#xBABB;&#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; OXPHOS &#xBD84;&#xD574;&#xB294; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0;. &#xC774; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC; &#xB9AC;&#xC544; &#xC7A5;&#xC560; &#xC99D;&#xAC00; &#xC758;&#xC874; &#xBD84;&#xD574; &#xBC00;&#xC811; &#xD558; &#xAC8C; &#xC5F0;&#xACB0; &#xD588;&#xB2E4; &#xAD00;&#xCC30; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, H460 &#xC140; A549 &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; &#xD638;&#xD761;&#xC758; &#xD070; &#xC7A5;&#xC560;&#xB97C; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xB354; glycolytic &#xD588;&#xB2E4; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; ATP &#xD569;&#xC131; &#xC800;&#xD574;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xD574;&#xC758; upregulation AMP &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD55C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xC758;&#xC874; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC694;&#xC57D; &#xD558;&#xC790;&#xBA74;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xBD84;&#xD574; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; OXPHOS &#xC6A9;&#xB7C9;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; &#xAC10;&#xC1E0;&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; &#xC18D;&#xB3C4; &#xC758;&#xD574; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC774; &#xB450; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778; bioenergetic &#xD615;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB300;&#xC0AC; &#xBCC0;&#xACBD; &#xC885;&#xC591; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC131;&#xC7A5; &#xBC0F; apoptotic &#xC800;&#xD56D; &#xAE30;&#xACC4; &#xC124;&#xBA85;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Multiparameter &#xC2E0;&#xC9C4; &#xB300;&#xC0AC; &#xBD84;&#xC11D; &#xAC04;&#xC758; &#xAC10;&#xC1E0; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC; &#xB9AC;&#xC544; bioenergetic &#xAE30;&#xB2A5;&#xACFC; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xBD84;&#xD574; &#xC885;&#xC18D;&#xC131; &#xC778;&#xAC04; &#xC885;&#xC591; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xAC00;&#xAE4C;&#xC6B4; &#xC5F0;&#xACB0;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900;&#xB2E4;.

El aumento de la conversi&#xF3;n de la glucosa en &#xE1;cido l&#xE1;ctico asociada con la respiraci&#xF3;n mitocondrial reducida es una caracter&#xED;stica &#xFA;nica de los tumores describi&#xF3; por primera vez por Otto Warburg en la d&#xE9;cada de 1920. La evidencia reciente sugiere que el efecto Warburg es causada por los oncogenes y es un mecanismo subyacente de la transformaci&#xF3;n maligna. El uso de un nuevo enfoque para medir las tasas metab&#xF3;licas celulares in vitro, la base de este bioenerg&#xE9;tico gluc&#xF3;lisis y el aumento de la respiraci&#xF3;n mitocondrial reducida se ha investigado en dos l&#xED;neas celulares de c&#xE1;ncer humano, la H460 y A549. El fenotipo bioenerg&#xE9;tico se analiz&#xF3; mediante la medici&#xF3;n de la respiraci&#xF3;n celular, la tasa de glic&#xF3;lisis, y recambio de ATP de las c&#xE9;lulas en respuesta a diversos moduladores farmacol&#xF3;gicos. H460 y A549 c&#xE9;lulas muestran una dependencia de la gluc&#xF3;lisis y una habilidad de aumentar considerablemente esta v&#xED;a, cuando su respiraci&#xF3;n se inhibi&#xF3;. Lo contrario, sin embargo, no era cierto. Las l&#xED;neas celulares fueron atenuados en la fosforilaci&#xF3;n oxidativa (fosforilaci&#xF3;n oxidativa) de la capacidad y eran incapaces de regular al alza lo suficientemente fosforilaci&#xF3;n oxidativa mitocondrial en la gluc&#xF3;lisis se ha desactivado. Este deterioro mitocondrial observada est&#xE1; &#xED;ntimamente ligado a la mayor dependencia de la gluc&#xF3;lisis. Adem&#xE1;s, se demostr&#xF3; que las c&#xE9;lulas H460 eran m&#xE1;s glicol&#xED;tica, que tiene un mayor deterioro de la respiraci&#xF3;n mitocondrial, en comparaci&#xF3;n con las c&#xE9;lulas A549. Por &#xFA;ltimo, la regulaci&#xF3;n al alza de la gluc&#xF3;lisis en respuesta a la inhibici&#xF3;n de la s&#xED;ntesis de ATP mitocondrial es dependiente de AMP-activada la actividad de la prote&#xED;na quinasa. En resumen, nuestros resultados demuestran un fenotipo bioenerg&#xE9;tico de estas dos l&#xED;neas celulares de c&#xE1;ncer que se caracterizan por una mayor tasa de gluc&#xF3;lisis y una atenuaci&#xF3;n vinculados en su capacidad de fosforilaci&#xF3;n oxidativa. Estas alteraciones metab&#xF3;licas proporcionar una explicaci&#xF3;n mecanicista de la ventaja de crecimiento y resistencia a la apoptosis de las c&#xE9;lulas tumorales.

An&#xE1;lisis metab&#xF3;lico multipar&#xE1;metro revela una estrecha relaci&#xF3;n entre atenuada funci&#xF3;n bioenerg&#xE9;tica mitocondrial y de dependencia glic&#xF3;lisis mejorada en c&#xE9;lulas tumorales humanas

gammadelta T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53D1;&#x6325;&#x5173;&#x952E;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC4;&#x7EC7;&#xFF0C;&#x708E;&#x75C7;&#x53CD;&#x5E94;&#x8C03;&#x63A7;&#x548C;&#x81EA;&#x9002;&#x5E94;&#x514D;&#x75AB;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A; gammadelta T &#x7EC6;&#x80DE;&#x7F3A;&#x9677;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6709;&#x4E25;&#x91CD;&#x53D7;&#x635F;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x6E05;&#x9664;&#x80BA;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x3002;gammadelta T &#x7EC6;&#x80DE;&#x8C03;&#x8282;&#x5FAE;&#x751F;&#x7269;&#x5165;&#x4FB5;&#x5230;&#x521D;&#x59CB;&#x7684;&#x708E;&#x6027;&#x53CD;&#x5E94;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x4FDD;&#x62A4;&#x5BF9;&#x8F6F;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x635F;&#x4F24;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4E86;&#x5BF9;&#x535A;&#x83B1;&#x9709;&#x7D20;&#xFF0C;&#x81F4;&#x529B;&#x4E8E;&#x7814;&#x7A76;&#x6CA1;&#x6709;&#x4EFB;&#x4F55;&#x81EA;&#x9002;&#x5E94;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#x5BF9;&#x75C5;&#x539F;&#x83CC;&#x708E;&#x75C7;&#x53CD;&#x5E94;&#x80BA;&#x635F;&#x4F24; gammadelta T &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;

&#x535A;&#x83B1;&#x9709;&#x7D20;&#x81F4;&#x80BA;&#x635F;&#x4F24;&#x540E;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-17 &#x751F;&#x4EA7; gammadelta T &#x7EC6;&#x80DE;&#x90FD;&#x9700;&#x8981;&#x63A7;&#x5236;&#x7684;&#x708E;&#x75C7;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;

gammadelta T cells play a key role in the regulation of inflammatory responses in epithelial tissue, and in adaptive immunity, as gammadelta T cell deficient mice have a severely impaired capacity to clear lung pathogens. gammadelta T cells regulate the initial inflammatory response to microbial invasion and thereby protect against tissue injury. Here we examined the response of gammadelta T cells to lung injury induced by bleomycin, in an effort to study the inflammatory response in the absence of any adaptive immune response to a pathogen.

IL-17 producing gammadelta T cells are required for a controlled inflammatory response after bleomycin-induced lung injury.

gammadelta cellules T jouent un r&#xF4;le cl&#xE9; dans la r&#xE9;gulation des r&#xE9;ponses inflammatoires dans le tissu &#xE9;pith&#xE9;lial, et dans l&#x26;#39;immunit&#xE9; adaptative, que les souris d&#xE9;ficientes en cellules T gammadelta ont une capacit&#xE9; gravement compromise pour effacer les agents pathog&#xE8;nes pulmonaires. gammadelta cellules T r&#xE9;gulent la r&#xE9;ponse inflammatoire initiale &#xE0; l&#x26;#39;invasion microbienne et de prot&#xE9;ger ainsi contre les l&#xE9;sions tissulaires. Ici nous avons examin&#xE9; la r&#xE9;ponse des cellules T gammadelta une l&#xE9;sion pulmonaire induite par la bl&#xE9;omycine, dans un effort visant &#xE0; &#xE9;tudier la r&#xE9;ponse inflammatoire en l&#x26;#39;absence de toute r&#xE9;ponse immunitaire adaptative &#xE0; un agent pathog&#xE8;ne.

IL-17 Produire gammadelta cellules T sont n&#xE9;cessaires pour une r&#xE9;ponse inflammatoire contr&#xF4;l&#xE9;e apr&#xE8;s une blessure du poumon induites par la bl&#xE9;omycine

Gammadelta T-Zellen spielen eine wichtige Rolle bei der Regulierung der entz&uuml;ndlichen Reaktionen in Epithelgewebe, und der adaptiven Immunit&auml;t als Gammadelta T Zell unzul&auml;ngliche M&auml;usen haben eine stark eingeschr&auml;nkt Kapazit&auml;t Lunge Krankheitserreger zu l&ouml;schen. Gammadelta T-Zellen die anf&auml;ngliche Entz&uuml;ndungsreaktion auf mikrobielle Invasion zu regulieren und dadurch sch&uuml;tzen vor Gewebeverletzungen. Hier haben wir die Antwort des Gammadelta T-Zellen auf Respiratory Distress Syndrome induziert durch Bleomycin, in einer Bem&uuml;hung, die entz&uuml;ndliche Reaktion in Ermangelung einer adaptiven Immunantwort auf ein Pathogen zu studieren.

IL-17 produzierenden Gammadelta T Zellen sind erforderlich f&uuml;r eine kontrollierte Entz&uuml;ndungsreaktion nach Bleomycin-induzierte Lungeninsuffizienz.

gammadelta T cellule svolgono un ruolo chiave nella regolazione delle risposte infiammatorie nel tessuto epiteliale, e nell&#39;immunit&agrave; adattativa, come gammadelta T cell topi carenti hanno una capacit&agrave; gravemente compromessa per eliminare agenti patogeni polmonari. gammadelta T cellule regolano la risposta infiammatoria iniziale all&#39;invasione microbica e quindi proteggono contro i danni del tessuto. Qui abbiamo esaminato la risposta delle cellule T gammadelta al danno polmonare indotta da bleomicina, nel tentativo di studiare la risposta infiammatoria in assenza di qualsiasi risposta immunitaria adattativa di un agente patogeno.

IL-17 producendo gammadelta T cellule sono necessarie per una risposta infiammatoria controllata dopo danno polmonare indotta da bleomicina.

&#x30AC;&#x30F3;&#x30DE;&#x30C7;&#x30EB;&#x30BF;T&#x7D30;&#x80DE;&#x6B20;&#x640D;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x80BA;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x3092;&#x30AF;&#x30EA;&#x30A2;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x6DF1;&#x523B;&#x306A;&#x969C;&#x5BB3;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30AC;&#x30F3;&#x30DE;&#x30C7;&#x30EB;&#x30BF;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D44;&#x7E54;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x9069;&#x5FDC;&#x514D;&#x75AB;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x708E;&#x75C7;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x30AC;&#x30F3;&#x30DE;&#x30C7;&#x30EB;&#x30BF;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x5FAE;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x4FB5;&#x5165;&#x3078;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x708E;&#x75C7;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x640D;&#x50B7;&#x304B;&#x3089;&#x4FDD;&#x8B77;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x3078;&#x306E;&#x9069;&#x5FDC;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x4E0D;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x708E;&#x75C7;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x52AA;&#x529B;&#x3067;&#x3001;&#x30D6;&#x30EC;&#x30AA;&#x30DE;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x80BA;&#x969C;&#x5BB3;&#x306B;&#x30AC;&#x30F3;&#x30DE;&#x30C7;&#x30EB;&#x30BF;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3002;

IL-17&#x7523;&#x751F;&#x30AC;&#x30F3;&#x30DE;&#x30C7;&#x30EB;&#x30BF;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x30D6;&#x30EC;&#x30AA;&#x30DE;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x8A98;&#x767A;&#x80BA;&#x640D;&#x50B7;&#x5F8C;&#x306E;&#x708E;&#x75C7;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x3001;

gammadelta T &#xC138;&#xD3EC; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xC5FC;&#xC99D; &#xBC18;&#xC751;&#xC758; &#xC870;&#xC808;&#xC5D0; &#xD575;&#xC2EC;&#xC801;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD558;&#xBA70; &#xC801;&#xC751; &#xBA74;&#xC5ED;&#xC5D0; gammadelta T &#xC138;&#xD3EC;&#xB85C; &#xACB0;&#xD54D; &#xC0DD;&#xC950; &#xC2EC;&#xAC01; &#xC7A5;&#xC560;&#xC778;&#xB41C; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xD3D0; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4;&#xB97C; &#xC9C0;&#xC6B0;&#xB824;&#xBA74;. gammadelta T &#xC804;&#xC9C0;&#xC640; &#xBBF8;&#xC0DD;&#xBB3C; &#xCE68;&#xACF5; &#xCD08;&#xAE30; &#xC5FC;&#xC99D; &#xBC18;&#xC751;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD568;&#xC73C;&#xB85C;&#xC368; &#xC870;&#xC9C1; &#xC0C1;&#xD574;&#xB97C; &#xBC29;&#xC9C0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xC5B4;&#xB5A4; &#xC801;&#xD569; &#xD55C; &#xBA74;&#xC5ED; &#xBC18;&#xC751;&#xC758; &#xBD80;&#xC7AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5FC;&#xC99D; &#xC131; &#xBC18;&#xC751;&#xC744; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574;&#xC5D0;&#xC11C; bleomycin&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; &#xD3D0; &#xBD80;&#xC0C1;&#xC744; gammadelta T &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xBC18;&#xC751; &#xAC80;&#xC0AC;.

IL-17 &#xC0DD;&#xC0B0; gammadelta T &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; bleomycin &#xC720;&#xBC1C; &#xD3D0; &#xC190;&#xC0C1; &#xD6C4; &#xC81C;&#xC5B4; &#xC5FC;&#xC99D; &#xBC18;&#xC751;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

gammadelta las c&#xE9;lulas T juegan un papel clave en la regulaci&#xF3;n de respuestas inflamatorias en el tejido epitelial, y en la inmunidad adaptativa, como gammadelta los ratones con deficiencia de c&#xE9;lulas T tienen una capacidad gravemente afectada para eliminar los pat&#xF3;genos pulmonares. gammadelta c&#xE9;lulas T regulan la respuesta inflamatoria inicial a la invasi&#xF3;n microbiana y por lo tanto proteger contra la lesi&#xF3;n de los tejidos. Aqu&#xED; se examin&#xF3; la respuesta de c&#xE9;lulas T gammadelta a la lesi&#xF3;n pulmonar inducida por bleomicina, en un esfuerzo para estudiar la respuesta inflamatoria en la ausencia de cualquier respuesta adaptativa inmune a un pat&#xF3;geno.

La producci&#xF3;n de IL-17 Gammadelta las c&#xE9;lulas T son necesarios para una respuesta inflamatoria controlada despu&#xE9;s de bleomicina lesi&#xF3;n pulmonar inducida por

&#x57FA;&#x4E8E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x68C0;&#x5B9A;&#x5DF2;&#x6210;&#x4E3A;&#x836F;&#x7269;&#x53D1;&#x73B0;&#x7684;&#x9752;&#x7750;&#x7684;&#x683C;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x590D;&#x6742;&#x6027;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E14;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5BF9;&#x5C4F;&#x5E55;&#x4E0A;&#x7684;&#x6BD2;&#x54C1;&#x548C;&#x5176;&#x673A;&#x5236;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x591A;&#x8DEF;&#x590D;&#x7528;&#x3002;&#x54CD;&#x5E94;&#x4E0D;&#x65AD;&#x53D8;&#x5316;&#x7684;&#x80DE;&#x5916;&#x73AF;&#x5883;&#x3001; &#x75BE;&#x75C5;&#x548C;/&#x6216;&#x836F;&#x7269;&#x63A5;&#x89E6;&#xFF0C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x91CD;&#x5851;&#x751F;&#x547D;&#x901A;&#x8DEF;&#x5728;&#x77ED;&#x77ED;&#x51E0;&#x5206;&#x949F;&#x4FBF;&#x5230;&#x9A71;&#x52A8;&#x5668;&#x4E0E;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6270;&#x52A8;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x8868;&#x578B;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x6D4B;&#x91CF;&#x80DE;&#x5916;&#x7684;&#x901A;&#x91CF; (XF)&#xFF0C;&#x8FD9;&#x662F;&#x5468;&#x56F4;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x4ECB;&#x8D28;&#x4E2D;&#x7684;&#x6C27;&#x548C;&#x8D28;&#x5B50;&#x6D53;&#x5EA6;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x4E00;&#x4E2A;&#x53EF;&#x4EE5;&#x540C;&#x65F6;&#x786E;&#x5B9A;&#x5B83;&#x4EEC;&#x7684;&#x76F8;&#x5BF9;&#x72B6;&#x6001;&#x597D;&#x6C27;&#x548C;&#x7CD6;&#x9175;&#x89E3;&#x4EE3;&#x8C22;&#x7684;&#x5206;&#x522B;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;XF &#x662F;&#x65F6;&#x95F4;&#x5206;&#x8FA8;&#x548C;&#x975E;&#x4FB5;&#x5165;&#x6027;&#x7684;&#x4F7F;&#x5B83;&#x6709;&#x5438;&#x5F15;&#x529B;&#x7814;&#x7A76;&#x4F53;&#x5916;&#x836F;&#x7269;&#x6548;&#x679C;&#x683C;&#x5F0F;&#x3002;

&#x6D4B;&#x91CF;&#x4F7F;&#x7528;&#x80DE;&#x5916;&#x901A;&#x91CF;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x7269;&#x80FD;&#x91CF;&#x5B66;&#x7814;&#x7A76;&#x8FDB;&#x5C55;&#x3002;

Cell-based assays have become a favored format for drug discovery because living cells have relevant biological complexity and can be highly multiplexed to screen for drugs and their mechanisms. In response to a changing extracellular environment, disease and/or drug exposure, cells remodel bioenergetic pathways in a matter of minutes to drive phenotypic changes associated with these perturbations. By measuring the extracellular flux (XF), that is the changes in oxygen and proton concentrations in the media surrounding cells, one can simultaneously determine their relative state of aerobic and glycolytic metabolism, respectively. In addition, XF is time-resolved and non-invasive, making it an attractive format for studying drug effects in vitro.

Advances in measuring cellular bioenergetics using extracellular flux.

Essais cellulaires sont devenus un format privil&#xE9;gi&#xE9; pour la d&#xE9;couverte de m&#xE9;dicaments parce que les cellules vivantes ont concern&#xE9; la complexit&#xE9; biologique et peut &#xEA;tre tr&#xE8;s multiplex&#xE9; &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;cran pour les m&#xE9;dicaments et leurs m&#xE9;canismes. En r&#xE9;ponse &#xE0; un environnement changeant extracellulaire, la maladie et / ou l&#x26;#39;exposition au m&#xE9;dicament, les cellules des voies bio&#xE9;nerg&#xE9;tiques remodeler dans une affaire de minutes pour conduire &#xE0; des changements ph&#xE9;notypiques associ&#xE9;s &#xE0; ces perturbations. En mesurant le flux extracellulaire (XF), c&#x26;#39;est &#xE0; dire les changements dans les concentrations d&#x26;#39;oxyg&#xE8;ne et de protons dans les m&#xE9;dias entourant les cellules, on peut simultan&#xE9;ment d&#xE9;terminer leur &#xE9;tat relatif du m&#xE9;tabolisme a&#xE9;robie et glycolytique, respectivement. En outre, XF est r&#xE9;solue dans le temps et non-invasive, ce qui en fait un format attrayant pour &#xE9;tudier les effets des m&#xE9;dicaments in vitro.

Les progr&#xE8;s &#xE0; la mesure de bio&#xE9;nerg&#xE9;tique cellulaire en utilisant le flux extracellulaire

Zellbasierte Assays sind ein beliebtes Format f&uuml;r Drogeentdeckung geworden, weil lebende Zellen relevanten biologischen Komplexit&auml;t haben und sein hoch-Bildschirm f&uuml;r Drogen und ihre Mechanismen Multiplex k&ouml;nnen. Als Reaktion auf eine wechselnde extrazellul&auml;ren Umwelt, Krankheit und/oder Drogen-Exposition umgestalten Zellen bioenergetische Bahnen in wenigen Minuten mit dem ph&auml;notypische Ver&auml;nderungen dieser Perturbationen zugeordnet. Durch die Messung des extrazellul&auml;ren Fluss (XF), der die &Auml;nderungen in Sauerstoff und Protonen-Konzentrationen in den Medien, die umgebenden Zellen, kann man gleichzeitig ihren relativen Zustand des aeroben und glykolytischen Stoffwechsel, bzw. feststellen. Dar&uuml;ber hinaus ist XF Zeit aufgel&ouml;st und nicht-invasive, damit eine attraktive Format f&uuml;r die Wirkungen der Droge in-vitro-Untersuchung.

Fortschritte bei der Messung der zellul&auml;ren Bioenergetik mit extrazellul&auml;ren Flussmittel.

Cell-based assays sono diventati un formato favorito per scoperta della droga, perch&eacute; le cellule viventi hanno rilevante complessit&agrave; biologica e possono essere altamente multiplexed a schermo per le droghe e i loro meccanismi. In risposta a un cambiamento esposizione extracellulare ambiente, malattia e/o droga, cellule rimodellare bioenergetici percorsi in pochi minuti ai cambiamenti fenotipici unit&agrave; associate a queste perturbazioni. Misurando il flusso extracellulare (XF), che &egrave; i cambiamenti nelle concentrazioni di ossigeno e protone nei mezzi di comunicazione che circondano le cellule, si pu&ograve; contemporaneamente determinare loro stato relativo del metabolismo aerobico e glicolitico, rispettivamente. Inoltre, XF &egrave; time-resolved e non-invasiva, rendendolo un formato attraente per studiare gli effetti della droga in vitro.

Progressi nella misurazione bioenergetica cellulare usando flux extracellulare.

&#x751F;&#x304D;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x306A;&#x8907;&#x96D1;&#x3055;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x3001;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x85AC;&#x5264;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306E;&#x753B;&#x9762;&#x306B;&#x591A;&#x91CD;&#x5316;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x30BB;&#x30EB;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;&#x3001;&#x5275;&#x85AC;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6709;&#x5229;&#x306A;&#x5F62;&#x5F0F;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5909;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x74B0;&#x5883;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x75BE;&#x60A3;&#x304A;&#x3088;&#x3073;/&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x85AC;&#x7269;&#x66B4;&#x9732;&#x3001;&#x307B;&#x3093;&#x306E;&#x6570;&#x5206;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x6539;&#x9020;&#x751F;&#x4F53;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6442;&#x52D5;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x99C6;&#x52D5;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x53D6;&#x308A;&#x5DFB;&#x304F;&#x30E1;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x306E;&#x9178;&#x7D20;&#x3068;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30F3;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#xFF08;XF&#xFF09;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x4EBA;&#x306F;&#x540C;&#x6642;&#x306B;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x597D;&#x6C17;&#x6027;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7CD6;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x76F8;&#x5BFE;&#x7684;&#x306A;&#x72B6;&#x614B;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;XF&#x306F;&#x3001;in vitro&#x3067;&#x306E;&#x85AC;&#x7269;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x9B45;&#x529B;&#x7684;&#x306A;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30DE;&#x30C3;&#x30C8;&#x4F5C;&#x308A;&#x3001;&#x6642;&#x9593;&#x5206;&#x89E3;&#x3068;&#x975E;&#x4FB5;&#x8972;&#x7684;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;

&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x305F;&#x643A;&#x5E2F;&#x96FB;&#x8A71;&#x751F;&#x4F53;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x306E;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x306E;&#x9032;&#x6B69;

&#xC138;&#xD3EC; &#xAE30;&#xBC18; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC0B4;&#xC544;&#xC788;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC; &#xAD00;&#xB828; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559;&#xC801; &#xBCF5;&#xC7A1;&#xC131;&#xC774; &#xC788;&#xACE0; &#xC57D;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD654;&#xBA74; &#xBC0F; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xB2E4;&#xC911;&#xD654; &#xB420; &#xC57D;&#xBB3C; &#xBC1C;&#xACAC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC120;&#xD638; &#xD615;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xB418; &#xACE0; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBCC0;&#xD654; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xD658;&#xACBD;, &#xC9C8;&#xBCD1; &#xBC0F; &#xC57D;&#xBB3C; &#xB178;&#xCD9C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;, &#xC140; bioenergetic &#xACBD;&#xB85C; &#xB4DC;&#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; phenotypic &#xBCC0;&#xACBD; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBB3C;&#xACB0;&#xC5D0; &#xBD84; &#xBB38;&#xC81C;&#xC5D0; &#xAC1C;&#xC7A5;. &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xC720;&#xCD9C; (XF) &#xC140;&#xC744; &#xB458;&#xB7EC;&#xC2FC; &#xBBF8;&#xB514;&#xC5B4;&#xC5D0; &#xC0B0;&#xC18C;&#xC640; &#xC591;&#xC131;&#xC790; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC758; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xCE21;&#xC815; &#xD558; &#xC5EC; &#xD558;&#xB098; &#xB3D9;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xAC01;&#xAC01; &#xC5D0;&#xC5B4;&#xB85C;&#xBE45; glycolytic &#xB300;&#xC0AC;&#xC758; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801;&#xC778; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xB85C; &#xD655;&#xC778;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, XF&#xB294; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC774; &#xD574;&#xACB0; &#xBC0F; &#xBE44;-&#xCE68;&#xB7B5; &#xC801;, &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678; &#xC57D;&#xBB3C; &#xD6A8;&#xACFC; &#xACF5;&#xBD80;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB9E4;&#xB825;&#xC801;&#xC778; &#xD3EC;&#xB9F7;&#xC744; &#xB9CC;&#xB4DC;&#xB294;.

&#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xD50C;&#xB7ED;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; bioenergetics &#xCE21;&#xC815;&#xC758; &#xBC1C;&#xC804;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Ensayos basados &#x200B;&#x200B;en c&#xE9;lulas se han convertido en un formato preferido para el descubrimiento de f&#xE1;rmacos, porque las c&#xE9;lulas vivas tienen la complejidad biol&#xF3;gica relevante y puede ser altamente multiplexado para la detecci&#xF3;n de drogas y sus mecanismos. En respuesta a un entorno cambiante extracelular, la enfermedad y / o la exposici&#xF3;n al f&#xE1;rmaco, las c&#xE9;lulas de las v&#xED;as de remodelaci&#xF3;n de bioenerg&#xE9;ticos en cuesti&#xF3;n de minutos para conducir los cambios fenot&#xED;picos asociados a estas perturbaciones. Al medir el flujo extracelular (XF), es decir, los cambios en las concentraciones de ox&#xED;geno y un prot&#xF3;n en los medios que rodean las c&#xE9;lulas, una vez se puede determinar su estado relativo de metabolismo aer&#xF3;bico y glicol&#xED;tico, respectivamente. Adem&#xE1;s, el XF es resuelta en el tiempo y no invasiva, por lo que es un formato atractivo para el estudio de los efectos del f&#xE1;rmaco in vitro.

Los avances en la medici&#xF3;n de la bioenerg&#xE9;tica celular mediante flujo extracelular

&#x4F7F;&#x7528;&#x4FEE;&#x6539;&#x540E;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x6587;&#x5316;&#x5FAE;&#x578B;&#x547C;&#x5438;&#x6D4B;&#x91CF;&#x6280;&#x672F;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x589E;&#x52A0;&#x541E;&#x5410;&#x91CF;&#x5E76;&#x51CF;&#x5C11;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x68C0;&#x6D4B;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x6750;&#x6599;&#x3002;&#x57FA;&#x4E8E;&#x677F;&#x900F;&#x6C14;&#x90FD;&#x5BB9;&#x6613;&#x53D7;&#x5230;&#x5404;&#x79CD;&#x5404;&#x6837;&#x7684;&#x6269;&#x6563;&#x73B0;&#x8C61; &#xFF1B;&#x968F;&#x7740; O(2) &#x7684;&#x8BD5;&#x6837;&#x6240;&#x6D88;&#x8017;&#x7684;&#x5927;&#x6C14; O(2) &#x6CC4;&#x6F0F;&#x5230;&#x6D4B;&#x91CF;&#x5377;&#x3002;&#x6C27;&#x8FD8;&#x4E2D;&#x6EB6;&#x89E3;&#xFF0C;&#x548C;&#x88AB;&#x52A8;&#x5730;&#x901A;&#x8FC7;&#x5FAE;&#x5B54;&#x677F;&#x6750;&#x6599;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5E38;&#x7528;&#x7684;&#x805A;&#x82EF;&#x4E59;&#x70EF;&#x6F2B;&#x53CD;&#x5C04;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#x8FD9;&#x79CD;&#x547C;&#x5438;&#x5668;&#x5404;&#x5206;&#x5EAD;&#x7684;&#x5899;&#x4E0D;&#x53EA;&#x662F;&#x6E17;&#x900F;&#x5230; O(2)&#xFF0C;&#x4F46;&#x8FD8;&#x5B58;&#x50A8;&#x5927;&#x91CF;&#x7684;&#x6C14;&#x4F53;&#x3002;O(2) &#x901A;&#x91CF;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x5899;&#x548C;&#x6D4B;&#x91CF;&#x5377;&#x504F;&#x89C1;&#x6839;&#x636E;&#x5B9E;&#x9645;&#x7684; [O(2)] &#x68AF;&#x5EA6;&#x6D4B;&#x91CF;&#x7684;&#x6C27;&#x6D88;&#x8017;&#x7387;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x63CF;&#x8FF0; deconvolute &#x751F;&#x7269;&#x6C27;&#x6D88;&#x8017;&#x7387;&#x6D4B;&#x91CF;&#x7684; [O(2)] &#x4ECE;&#x8F66;&#x53A2;&#x57FA;&#x4E8E;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x4FEE;&#x6B63;&#x7B97;&#x6CD5;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F18;&#x5316;&#x7B97;&#x6CD5;&#x4E0E;&#x6D77;&#x9A6C; XF24 &#x80DE;&#x5916;&#x6D41;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x4EEA;&#x7684;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x3002;&#x6821;&#x6B63;&#x7B97;&#x6CD5;&#x751F;&#x7269;&#x4F7F;&#x7528;&#x9F20;&#x6807;&#x76AE;&#x5C42;&#x7A81;&#x89E6;&#x548C;&#x9644;&#x52A0;&#x5230;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x6587;&#x5316;&#x5C0F;&#x578B;&#x63A5;&#x9AA8;&#x677F;&#x575A;&#x5F3A; XF24 V7 &#x548C;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#x5230;&#x53E4;&#x5178;&#x514B;&#x62C9;&#x514B;&#x7535;&#x6781; oxygraph &#x6D4B;&#x91CF;&#x809D;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x8FDB;&#x884C;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x3002;&#x7B97;&#x6CD5;&#x4F1A;&#x589E;&#x52A0;&#x6709;&#x7528;&#x7684;&#x8017;&#x6C27;&#x7387;&#x8303;&#x56F4;&#x3001; &#x65F6;&#x95F4;&#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#x548C;&#x6D4B;&#x91CF;&#x7684;&#x6301;&#x7EED;&#x65F6;&#x95F4;&#x3002;&#x8BE5;&#x7B97;&#x6CD5;&#x63D0;&#x51FA;&#x5728;&#x5E38;&#x89C4;&#x683C;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#x9002;&#x7528;&#x4E8E;&#x5176;&#x4ED6;&#x547C;&#x5438;&#x5668;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x3002;

&#x4E0E;&#x6821;&#x6B63;&#x7684;&#x6C27;&#x6269;&#x6563;&#x7684;&#x5B9A;&#x91CF;&#x57FA;&#x4E8E;&#x5FAE;&#x5B54;&#x677F;&#x7684;&#x547C;&#x5438;&#x8BA1;&#x91CF;&#x3002;

Respirometry using modified cell culture microplates offers an increase in throughput and a decrease in biological material required for each assay. Plate based respirometers are susceptible to a range of diffusion phenomena; as O(2) is consumed by the specimen, atmospheric O(2) leaks into the measurement volume. Oxygen also dissolves in and diffuses passively through the polystyrene commonly used as a microplate material. Consequently the walls of such respirometer chambers are not just permeable to O(2) but also store substantial amounts of gas. O(2) flux between the walls and the measurement volume biases the measured oxygen consumption rate depending on the actual [O(2)] gradient. We describe a compartment model-based correction algorithm to deconvolute the biological oxygen consumption rate from the measured [O(2)]. We optimize the algorithm to work with the Seahorse XF24 extracellular flux analyzer. The correction algorithm is biologically validated using mouse cortical synaptosomes and liver mitochondria attached to XF24 V7 cell culture microplates, and by comparison to classical Clark electrode oxygraph measurements. The algorithm increases the useful range of oxygen consumption rates, the temporal resolution, and durations of measurements. The algorithm is presented in a general format and is therefore applicable to other respirometer systems.

Quantitative microplate-based respirometry with correction for oxygen diffusion.

Mise en utilisant Respirom&#xE9;trie microplaques de culture cellulaire offre une augmentation de d&#xE9;bit et une diminution de la mati&#xE8;re biologique requis pour chaque analyse. Respirom&#xE8;tres plaques &#xE0; base de sont sensibles &#xE0; une gamme de ph&#xE9;nom&#xE8;nes de diffusion, comme O (2) est consomm&#xE9; par l&#x26;#39;&#xE9;chantillon, l &#x26;#39;oxyg&#xE8;ne atmosph&#xE9;rique (2) les fuites dans le volume de mesure. L&#x26;#39;oxyg&#xE8;ne dissout aussi dans et diffuse passivement &#xE0; travers le polystyr&#xE8;ne couramment utilis&#xE9; comme mat&#xE9;riau de microplaque. Cons&#xE9;quent les parois des chambres respirom&#xE8;tre ne sont pas seulement perm&#xE9;able &#xE0; O (2), mais aussi stocker des quantit&#xE9;s substantielles de gaz. O (2) de flux entre les murs et les pr&#xE9;jug&#xE9;s de volume de mesure du taux d&#x26;#39;oxyg&#xE8;ne mesur&#xE9; la consommation en fonction de la r&#xE9;elle [O (2)] d&#xE9;grad&#xE9;. On d&#xE9;crit un algorithme de correction bas&#xE9; sur un mod&#xE8;le compartiment &#xE0; d&#xE9;convoluer le taux de consommation d&#x26;#39;oxyg&#xE8;ne biologique mesur&#xE9;e de la [O (2)]. Nous optimisons l&#x26;#39;algorithme de travailler avec le Seahorse XF24 analyseur de flux extracellulaire. L&#x26;#39;algorithme de correction est biologiquement valid&#xE9;s &#xE0; l&#x26;#39;aide de la souris synaptosomes corticaux et les mitochondries h&#xE9;patiques li&#xE9;s &#xE0; XF24 V7 microplaques de culture cellulaire, et par comparaison aux mesures classiques Clark oxygraphe &#xE9;lectrodes. L&#x26;#39;algorithme augmente la port&#xE9;e utile des taux de consommation d&#x26;#39;oxyg&#xE8;ne, la r&#xE9;solution temporelle et les dur&#xE9;es de mesures. L&#x26;#39;algorithme est pr&#xE9;sent&#xE9; dans un format g&#xE9;n&#xE9;ral et est donc applicable aux syst&#xE8;mes de respirom&#xE8;tre autres.

Quantitative sur microplaques respirom&#xE9;trie avec correction pour la diffusion d&#x26;#39;oxyg&#xE8;ne

Respirationstest mit modifizierten Zellkultur Microplatte bietet mehr Durchsatz und eine Abnahme der biologischen Material ben&ouml;tigt f&uuml;r jede Probe. Platte basierten Respirometer sind anf&auml;llig f&uuml;r eine Vielzahl Verbreitung Ph&auml;nomene; wie O(2) durch die Probe verbraucht wird, verliert atmosph&auml;rischen O(2) in das Messvolumen. Sauerstoff l&ouml;st sich in auch passiv durch die gemeinhin als ein Mikroplatten-Material Polystyrol diffundiert. Daher die W&auml;nde der solche Respirometer-Kammern sind nicht nur durchl&auml;ssig zu O(2), sondern auch erhebliche Mengen an Gas zu speichern. O(2) Fluss zwischen den W&auml;nden und das Messvolumen Vorurteile die gemessenen Sauerstoff Verbrauch Rate abh&auml;ngig von der tats&auml;chlichen [O(2)]-Farbverlauf. Wir beschreiben einen Fach-Modell-basierte Korrektur-Algorithmus, um die biologische Sauerstoff-Verbrauch aus den gemessenen [O(2)] deconvolute. Wir optimieren den Algorithmus mit der Seahorse XF24 extrazellul&auml;re Flussmittel Analyzer arbeiten. Der Korrektur-Algorithmus ist biologisch mit Maus kortikale Synaptosomes und Leber Mitochondrien XF24 V7 Zellkultur Microplatte und im Vergleich zu klassischen Clark-Elektrode Oxygraph Messungen &uuml;berpr&uuml;ft. Der Algorithmus erh&ouml;ht die n&uuml;tzliche mehrere Sauerstoff Verbrauch raten, die zeitliche Aufl&ouml;sung und die Dauer der Messungen. Der Algorithmus ist in einem allgemeinen Format dargestellt und ist daher f&uuml;r andere Respirometer-Systeme anwendbar.

Quantitative Mikroplatten-basierte Respirationstest mit Korrektur f&uuml;r Sauerstoff-Diffusion.

Respirometry utilizzando piastre microtiter cultura cella modificata offre un aumento della produttivit&agrave; e una diminuzione di materiale biologico richiesto per ogni dosaggio. Respirometers piastra basata sono suscettibili di una vasta gamma di fenomeni di diffusione; come apparato &egrave; consumato da campione, apparato atmosferico perdite in volume di misura. Ossigeno inoltre si dissolve in e diffonde passivamente attraverso il polistirolo comunemente usato come materiale di micropiastre. Di conseguenza le pareti di tali alloggiamenti respirometro non sono poco permeabile all&#39;apparato ma anche immagazzinare notevoli quantit&agrave; di gas. Apparato flusso tra le pareti e il volume di misura pregiudizi il tasso di consumo di ossigeno misurato a seconda del gradiente reale [apparato]. Descriviamo un algoritmo di correzione basati sul modello di vano per deconvolute il tasso di consumo di ossigeno biologico da misurata [apparato]. Ottimizziamo l&#39;algoritmo a lavorare con l&#39;analizzatore flux extracellulare XF24 cavalluccio marino. L&#39;algoritmo di correzione &egrave; biologicamente convalidato utilizzando ad corticale del mouse e mitocondri epatici associati a XF24 V7 cell cultura micropiastre e Clark in confronto al classico elettrodo oxygraph misure. L&#39;algoritmo aumenta la gamma utile di tassi di consumo di ossigeno, la risoluzione temporale e le durate delle misurazioni. L&#39;algoritmo &egrave; presentato in un formato generale ed &egrave; pertanto applicabile ad altri sistemi respirometro.

Respirometry quantitative basate su micropiastra con la correzione per la diffusione dell&#39;ossigeno.

&#x5909;&#x66F4;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x57F9;&#x990A;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x547C;&#x5438;&#x8A08;&#x6E2C;&#x306F;&#x3001;&#x30B9;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3068;&#x5404;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x7269;&#x8CEA;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x547C;&#x5438;&#x8A08;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x62E1;&#x6563;&#x73FE;&#x8C61;&#x306E;&#x7BC4;&#x56F2;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x3084;&#x3059;&#x3044;&#x3067;&#x3059;&#x3002;O&#xFF08;2&#xFF09;&#x8A66;&#x6599;&#x3001;&#x5927;&#x6C17;&#x4E2D;&#x306E;O&#xFF08;2&#xFF09;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x4F53;&#x7A4D;&#x306B;&#x30EA;&#x30FC;&#x30AF;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6D88;&#x8CBB;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x9178;&#x7D20;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x4E2D;&#x306B;&#x6EB6;&#x89E3;&#x3057;&#x3001;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306B;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6750;&#x6599;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x7528;&#x3044;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B9;&#x30C1;&#x30EC;&#x30F3;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x53D7;&#x52D5;&#x7684;&#x306B;&#x62E1;&#x6563;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x547C;&#x5438;&#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x306E;&#x58C1;&#x306F;&#x308F;&#x305A;&#x304B;O&#xFF08;2&#xFF09;&#x306B;&#x900F;&#x904E;&#x3067;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x304C;&#x3001;&#x30AC;&#x30B9;&#x306E;&#x304B;&#x306A;&#x308A;&#x306E;&#x91CF;&#x3092;&#x683C;&#x7D0D;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; O&#xFF08;2&#xFF09;&#x58C1;&#x3084;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x4F53;&#x7A4D;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30A2;&#x30B9;&#x5B9F;&#x969B;&#x306B;&#x5FDC;&#x3058;&#x3066;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x9178;&#x7D20;&#x6D88;&#x8CBB;&#x901F;&#x5EA6;&#x3068;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;[O&#xFF08;2&#xFF09;]&#x30B0;&#x30E9;&#x30C7;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;[O&#xFF08;2&#xFF09;]&#x304B;&#x3089;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x9178;&#x7D20;&#x6D88;&#x8CBB;&#x7387;&#x3092;deconvolute&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x200B;&#x200B;&#x88DC;&#x6B63;&#x30A2;&#x30EB;&#x30B4;&#x30EA;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x8A18;&#x8FF0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30C4;&#x30CE;&#x30AA;&#x30C8;&#x30B7;&#x30B4;XF24&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30A2;&#x30CA;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B6;&#x30FC;&#x3067;&#x52D5;&#x4F5C;&#x3059;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x30A2;&#x30EB;&#x30B4;&#x30EA;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x88DC;&#x6B63;&#x30A2;&#x30EB;&#x30B4;&#x30EA;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x306B;XF24 V7&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x57F9;&#x990A;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x306B;&#x53D6;&#x308A;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x5927;&#x8133;&#x76AE;&#x8CEA;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x3068;&#x809D;&#x81D3;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x691C;&#x8A3C;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x53E4;&#x5178;&#x7684;&#x306A;&#x30AF;&#x30E9;&#x30FC;&#x30AF;&#x96FB;&#x6975;oxygraph&#x6E2C;&#x5B9A;&#x306B;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A2;&#x30EB;&#x30B4;&#x30EA;&#x30BA;&#x30E0;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x9178;&#x7D20;&#x6D88;&#x8CBB;&#x7387;&#x3001;&#x6642;&#x9593;&#x5206;&#x89E3;&#x80FD;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x306E;&#x6301;&#x7D9A;&#x6642;&#x9593;&#x306E;&#x6709;&#x7528;&#x306A;&#x7BC4;&#x56F2;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3055;&#x305B;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A2;&#x30EB;&#x30B4;&#x30EA;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x5F62;&#x5F0F;&#x3067;&#x63D0;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;&#x547C;&#x5438;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306B;&#x9069;&#x7528;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#x9178;&#x7D20;&#x62E1;&#x6563;&#x306E;&#x88DC;&#x6B63;&#x3068;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x306A;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x547C;&#x5438;&#x8A08;&#x6E2C;

Respirometry &#xC218;&#xC815;&#xB41C; &#xC140; &#xBB38;&#xD654; microplates&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xCC98;&#xB9AC;&#xB7C9;&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; &#xAC01; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xBB3C;&#xC9C8;&#xC758; &#xAC10;&#xC18C;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAE30;&#xBC18;&#xC73C;&#xB85C; &#xD558;&#xB294; &#xD50C;&#xB808;&#xC774;&#xD2B8; respirometers&#xC740; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xD655;&#xC0B0; &#xD604;&#xC0C1;;&#xC5D0; &#xCDE8;&#xC57D; O(2) &#xD45C;&#xBCF8;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC73C;&#xB85C; &#xB300;&#xAE30; O(2) &#xCE21;&#xC815; &#xBCFC;&#xB968;&#xC5D0; &#xB204;&#xCD9C;. &#xC0B0;&#xC18C;&#xB294; &#xB610;&#xD55C;&#xC5D0; &#xB179;&#xC774; &#xACE0; &#xBBF8; &#xD310; &#xC18C;&#xC7AC;&#xB85C; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xB294; &#xD3F4;&#xB9AC;&#xC2A4; &#xD2F0; &#xB80C;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC218; &#xB3D9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD655;&#xC0B0;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; respirometer &#xCC54;&#xBC84;&#xC758; &#xBCBD;&#xC740; O(2)&#xB97C; &#xADF8;&#xB0E5; &#xD22C;&#xACFC; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB610;&#xD55C; &#xAC00;&#xC2A4;&#xC758; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xAE08;&#xC561;&#xC744; &#xC800;&#xC7A5;. &#xBCBD; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xCE21;&#xC815; &#xBCFC;&#xB968; O(2) &#xD50C;&#xB7ED;&#xC2A4; &#xC2E4;&#xC81C; [O(2)] &#xADF8;&#xB77C;&#xB370;&#xC774;&#xC158;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xCE21;&#xC815; &#xB41C; &#xC0B0;&#xC18C; &#xC18C;&#xBE44; &#xC18D;&#xB3C4; &#xD3B8;&#xACAC;. &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559;&#xC801; &#xC0B0;&#xC18C; &#xC18C;&#xBE44; &#xC18D;&#xB3C4; &#xCE21;&#xC815;&#xB41C; [O(2)]&#xC5D0;&#xC11C; deconvolute &#xAD6C;&#xD68D; &#xBAA8;&#xB378; &#xAE30;&#xBC18; &#xBCF4;&#xC815; &#xC54C;&#xACE0;&#xB9AC;&#xC998;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xD574; &#xB9C8; XF24 &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xC720;&#xCD9C; &#xBD84;&#xC11D;&#xAE30;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xC791;&#xB3D9; &#xD558;&#xB3C4;&#xB85D; &#xC54C;&#xACE0;&#xB9AC;&#xC998;&#xC744; &#xCD5C;&#xC801;&#xD654; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBCF4;&#xC815; &#xC54C;&#xACE0;&#xB9AC;&#xC998;&#xC740; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xB300;&#xB1CC; &#xD53C; &#xC9C8;&#xC758; synaptosomes &#xBC0F; XF24 v 7 &#xC140; &#xBB38;&#xD654; microplates&#xC640; &#xBE44;&#xAD50; &#xD558; &#xC5EC;&#xC5D0; &#xACE0;&#xC804; &#xD074;&#xB77D; &#xC804;&#xADF9; oxygraph &#xCE21;&#xC815;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; &#xAC04; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC720;&#xD6A8;&#xC131; &#xAC80;&#xC0AC;. &#xC54C;&#xACE0;&#xB9AC;&#xC998; &#xC0B0;&#xC18C; &#xC18C;&#xBE44; &#xC18D;&#xB3C4;&#xC758; &#xC720;&#xC6A9;&#xD55C; &#xBC94;&#xC704;, &#xC2DC;&#xAC04;&#xC801; &#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; &#xBC0F; &#xCE21;&#xC815;&#xC758; &#xAE30;&#xAC04;&#xC744; &#xC99D;&#xAC00; &#xC2DC;&#xD0B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC54C;&#xACE0;&#xB9AC;&#xC998;&#xACFC; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xD615;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xB2E4;&#xB978; respirometer &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xC801;&#xC6A9; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC0B0;&#xC18C; &#xD655;&#xC0B0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBCF4;&#xC815;&#xC73C;&#xB85C; &#xC591;&#xC801; &#xBBF8; &#xD310;&#xC5D0; &#xAE30;&#xCD08;&#xB97C; &#xB454; respirometry.

Respirometr&#xED;a utilizando modificados microplacas de cultivo celular ofrece un aumento en el rendimiento y una disminuci&#xF3;n en el material biol&#xF3;gico necesario para cada ensayo. Respir&#xF3;metros placa base son susceptibles a una serie de fen&#xF3;menos de difusi&#xF3;n; como O (2) es consumido por la muestra, atmosf&#xE9;rica O (2) las fugas en el volumen de medici&#xF3;n. El ox&#xED;geno tambi&#xE9;n se disuelve y difunde en pasivamente a trav&#xE9;s del poliestireno de uso general como un material de microplacas. En consecuencia, las paredes de las c&#xE1;maras respir&#xF3;metro tales no son s&#xF3;lo permeable al O (2), sino tambi&#xE9;n almacenar cantidades importantes de gas. O (2) el flujo entre las paredes y los sesgos de medici&#xF3;n de volumen de la tasa de consumo de ox&#xED;geno medido en funci&#xF3;n de la real [O (2)] degradado. Se describe un compartimento modelo basado en el algoritmo de correcci&#xF3;n para deconvolute la tasa de consumo biol&#xF3;gico de ox&#xED;geno de la medida [O (2)]. Nos optimizar el algoritmo para trabajar con el analizador de flujo de caballitos de mar XF24 extracelular. El algoritmo de correcci&#xF3;n est&#xE1; biol&#xF3;gicamente validado utilizando sinaptosomas corticales de rat&#xF3;n y las mitocondrias de h&#xED;gado vinculados a XF24 V7 microplacas de cultivo celular, y en comparaci&#xF3;n a las cl&#xE1;sicas medidas de Clark oxygraph de los electrodos. El algoritmo incrementa el rango &#xFA;til de las tasas de consumo de ox&#xED;geno, la resoluci&#xF3;n temporal y duraci&#xF3;n de las mediciones. El algoritmo se presenta en un formato general y por tanto es aplicable a los sistemas respir&#xF3;metro otros.

Cuantitativo basado en una microplaca respirometr&#xED;a con la correcci&#xF3;n de la difusi&#xF3;n de ox&#xED;geno

&#x6B63;&#x5E38;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E3B;&#x8981;&#x662F;&#x4F9D;&#x9760;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x6C27;&#x5316;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#xFF0C;&#x4EA7;&#x751F;&#x4E09;&#x78F7;&#x9178;&#x817A;&#x82F7; (ATP)&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E09;&#x4E2A;&#x4E3B;&#x8981;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x80FD;&#x91CF;&#x71C3;&#x6599;&#x4FDD;&#x6301;&#x5176;&#x6D3B;&#x529B;&#x548C;&#x804C;&#x80FD;&#xFF1A; &#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x3001; &#x8C37;&#x6C28;&#x9170;&#x80FA;&#x548C;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x3002;&#x5F88;&#x591A;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x4F9D;&#x8D56;&#x5B83;&#x4EEC;&#x7684;&#x751F;&#x957F;&#x548C;&#x5B58;&#x6D3B;&#xFF0C;&#x6709;&#x6C27;&#x7CD6;&#x9175;&#x89E3;&#x548C;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x4E00;&#x4E9B;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x4EE5;&#x53CA;&#x8C37;&#x6C28;&#x9170;&#x80FA;&#x3002;&#x8FD9;&#x6539;&#x53D8;&#x7684;&#x4EE3;&#x8C22;&#x7684;&#x764C;&#x75C7;&#x53D1;&#x751F;&#x901A;&#x8FC7;&#x764C;&#x57FA;&#x56E0;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x6216;&#x6291;&#x764C;&#x57FA;&#x56E0;&#x5728;&#x591A;&#x4E2A;&#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8DEF;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x78F7;&#x8102;&#x9170;&#x808C;&#x9187; 3-&#x6FC0;&#x9176;&#x548C; Myc &#x901A;&#x8DEF;&#x4E2D;&#x7684;&#x635F;&#x5931;&#x3002;&#x76F8;&#x5BF9;&#x4E86;&#x89E3;&#x751A;&#x5C11;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x8FC7;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x589E;&#x957F;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x80FD;&#x91CF;&#x71C3;&#x6599;&#x7684;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x4F5C;&#x7528;&#x548C;&#x764C;&#x75C7;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5B58;&#x6D3B;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x4EBA;&#x80F6;&#x8D28;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7624; SF188 &#x7EC6;&#x80DE;&#x6C27;&#x5316;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x548C;&#x8102;&#x80AA;&#x9178; &beta;-&#x6C27;&#x5316; etomoxir&#x3001; &#x8089;&#x6BD2;&#x78B1; palmitoyltransferase 1 &#x6291;&#x5236;&#x5242;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x663E;&#x8457;&#x964D;&#x4F4E;&#x7EC6;&#x80DE; ATP &#x6C34;&#x5E73;&#x548C;&#x751F;&#x5B58;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x53D1;&#x73B0;&#x6291;&#x5236;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x6C27;&#x5316;&#x51CF;&#x5C11;&#x70DF;&#x9170;&#x80FA;&#x817A;&#x560C;&#x5464;&#x4E8C;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x78F7;&#x9178; &#xFF08;NADPH&#xFF09; &#x6C34;&#x5E73;&#x548C;&#x51CF;&#x5C11;&#x8C37;&#x80F1;&#x7518;&#x80BD; (GSH) &#x542B;&#x91CF;&#x548C;&#x63D0;&#x5347;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x6D3B;&#x6027;&#x6C27;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x8C03;&#x5236;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x6C27;&#x5316;&#x63A7;&#x5236; NADPH &#x7EA7;&#x522B;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5B58;&#x5728;&#x6D3B;&#x6027;&#x6C27;&#x7269;&#x79CD;&#x6E05;&#x9053;&#x592B;&#x8BD5;&#x5242;&#xFF0C;ATP &#x6D88;&#x8017;&#x963B;&#x6B62;&#x800C;&#x4E0D;&#x6062;&#x590D;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x6C27;&#x5316;&#x3002;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E;&#x6C27;&#x5316;&#x5E94;&#x6FC0;&#x53EF;&#x80FD;&#x5BFC;&#x81F4;&#x751F;&#x547D;&#x7684;&#x5931;&#x8D25;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x8BC1;&#x636E;&#xFF0C;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x6C27;&#x5316;&#x53EF;&#x80FD;&#x63D0;&#x4F9B; NADPH &#x6C27;&#x5316;&#x5E94;&#x6FC0;&#x7684;&#x9632;&#x5FA1;&#x548C;&#x9632;&#x6B62; ATP &#x635F;&#x5931;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x3002;

Etomoxir &#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x6C27;&#x5316;&#x6291;&#x5236;&#x635F;&#x5BB3; NADPH &#x751F;&#x4EA7;&#x548C;&#x589E;&#x52A0; ATP &#x8017;&#x7AED;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7ED3;&#x679C;&#x5728;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x80F6;&#x8D28;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#x6C27;&#x3002;

Normal differentiated cells rely primarily on mitochondrial oxidative phosphorylation to produce adenosine triphosphate (ATP) to maintain their viability and functions by using three major bioenergetic fuels: glucose, glutamine and fatty acids. Many cancer cells, however, rely on aerobic glycolysis for their growth and survival, and recent studies indicate that some cancer cells depend on glutamine as well. This altered metabolism in cancers occurs through oncogene activation or loss of tumor suppressor genes in multiple signaling pathways, including the phosphoinositide 3-kinase and Myc pathways. Relatively little is known, however, about the role of fatty acids as a bioenergetic fuel in growth and survival of cancer cells. Here, we report that human glioblastoma SF188 cells oxidize fatty acids and that inhibition of fatty acid Î²-oxidation by etomoxir, a carnitine palmitoyltransferase 1 inhibitor, markedly reduces cellular ATP levels and viability. We also found that inhibition of fatty acid oxidation decreases nicotinamide adenine dinucleotide phosphate (NADPH) levels and the reduced glutathione (GSH) content and elevates intracellular reactive oxygen species. These results suggest that modulation of fatty acid oxidation controls the NADPH level. In the presence of reactive oxygen species scavenger tiron, however, ATP depletion is prevented without restoring fatty acid oxidation. This suggests that oxidative stress may lead to bioenergetic failure and cell death. Our work provides evidence that mitochondrial fatty acid oxidation may provide NADPH for defense against oxidative stress and prevent ATP loss and cell death.

Inhibition of fatty acid oxidation by etomoxir impairs NADPH production and increases reactive oxygen species resulting in ATP depletion and cell death in human glioblastoma cells.

Cellules diff&#xE9;renci&#xE9;es normales s&#x26;#39;appuient essentiellement sur la phosphorylation oxydative mitochondriale pour produire l&#x26;#39;ad&#xE9;nosine triphosphate (ATP) pour maintenir leur viabilit&#xE9; et les fonctions en utilisant trois principaux combustibles bio&#xE9;nerg&#xE9;tiques: glucose, de glutamine et des acides gras. De nombreuses cellules canc&#xE9;reuses, toutefois, compter sur la glycolyse a&#xE9;robie pour leur croissance et la survie, et des &#xE9;tudes r&#xE9;centes indiquent que certaines cellules canc&#xE9;reuses d&#xE9;pendent glutamine ainsi. Cette alt&#xE9;ration du m&#xE9;tabolisme dans les cancers se produit &#xE0; travers l&#x26;#39;activation des oncog&#xE8;nes ou la perte de g&#xE8;nes suppresseurs de tumeurs dans plusieurs voies de signalisation, y compris les voies de phosphoinositide 3-kinase et Myc. On sait relativement peu, cependant, sur le r&#xF4;le des acides gras comme carburant bio&#xE9;nerg&#xE9;tique de la croissance et la survie des cellules canc&#xE9;reuses. Ici, nous d&#xE9;clarons que les cellules de glioblastome humain SF188 oxyder les acides gras et que l&#x26;#39;inhibition de la &#x3B2;-acide gras oxydation par &#xE9;tomoxir, un inhibiteur de la carnitine palmitoyltransf&#xE9;rase 1, permet de r&#xE9;duire consid&#xE9;rablement les niveaux d&#x26;#39;ATP cellulaire et de la viabilit&#xE9;. Nous avons &#xE9;galement constat&#xE9; que l&#x26;#39;inhibition de l&#x26;#39;oxydation des acides gras diminue la nicotinamide ad&#xE9;nine dinucl&#xE9;otide phosphate (NADPH) et les niveaux de la glutathion r&#xE9;duit (GSH) contenu et &#xE9;l&#xE8;ve intracellulaires esp&#xE8;ces r&#xE9;actives de l&#x26;#39;oxyg&#xE8;ne. Ces r&#xE9;sultats sugg&#xE8;rent que la modulation de l&#x26;#39;oxydation des acides gras contr&#xF4;le le niveau de NADPH. En pr&#xE9;sence de l&#x26;#39;oxyg&#xE8;ne au tr&#xE9;sor tiron esp&#xE8;ces r&#xE9;actives, cependant, la d&#xE9;pl&#xE9;tion en ATP est emp&#xEA;ch&#xE9; sans restaurer l&#x26;#39;oxydation des acides gras. Ceci sugg&#xE8;re que le stress oxydatif peut conduire &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;chec bio&#xE9;nerg&#xE9;tique et la mort cellulaire. Notre travail apporte la preuve que mitochondrial oxydation des acides gras peuvent fournir NADPH pour la d&#xE9;fense contre le stress oxydatif et pr&#xE9;venir la perte de l&#x26;#39;ATP et la mort cellulaire.

L&#x26;#39;inhibition de l&#x26;#39;oxydation des acides gras par les &#xE9;tomoxir &#xE0; porter atteinte &#xE0; la production de NADPH et augmente les esp&#xE8;ces r&#xE9;actives de l&#x26;#39;oxyg&#xE8;ne entra&#xEE;ne l&#x26;#39;&#xE9;puisement ATP et la mort cellulaire dans les cellules de glioblastome humain

Normale differenzierte Zellen st&uuml;tzen sich haupts&auml;chlich auf Mitochondrien Oxidative Phosphorylierung zu produzieren Adenosintriphosphat (ATP), deren Lebensf&auml;higkeit und Funktionen beizubehalten und mit drei gro&szlig;e bioenergetische Brennstoffen: Glukose, Glutamin und Fetts&auml;uren. Viele Krebszellen, st&uuml;tzen sich jedoch auf aerobe Glykolyse f&uuml;r ihr Wachstum und &uuml;berleben, und neuere Studien zeigen, dass Glutamin sowie einige Krebszellen abh&auml;ngen. Diese ver&auml;nderten Metabolismus bei Krebserkrankungen erfolgt &uuml;ber Onkogen-Aktivierung oder Verlust der Tumorsuppressorgene in mehrere Signalwege, darunter die Phosphoinositid-3-Kinase und Myc Wege. Relativ wenig, jedoch &uuml;ber die Rolle der Fetts&auml;uren als bioenergetische Brennstoff in Wachstum und &Uuml;berleben von Krebszellen bekannt. Hier berichten wir, dass menschliche Glioblastoma SF188 Zellen Fetts&auml;uren oxidieren und Hemmung der Fetts&auml;ure-&beta;-Oxidation von Etomoxir, ein Carnitin-Palmitoyl-Transferase 1-Hemmer, deutlich reduziert die zellul&auml;ren ATP-Level und Lebensf&auml;higkeit. Wir fanden auch, dass die Hemmung der Fetts&auml;ure-Oxidation Nicotinamid-adenin-dinucleotid-phosphat (NADPH) Ebenen und den reduzierten Glutathion (GSH) Inhalt verringert und hebt intrazellul&auml;re reaktive Sauerstoffspezies. Diese Ergebnisse legen nahe, dass die Modulation der Fetts&auml;ure-Oxidation der NADPH-Level-Regler. In Anwesenheit von reaktive Sauerstoff Spezies Aasfresser Tiron jedoch ohne Wiederherstellen der Fetts&auml;ure-Oxidation die ATP-Abbau verhindert. Dies l&auml;sst vermuten, dass oxidativer Stress zu bioenergetische Scheitern und Zelle Tod f&uuml;hren kann. Unsere Arbeit stellt Beweis dieser mitochondrialen Fetts&auml;ure Oxidation bieten NADPH f&uuml;r Verteidigung gegen oxidativen Stress und ATP-Verlust und Zelle Tod verhindern kann.

Hemmung der Fetts&auml;ure-Oxidation durch Etomoxir beeintr&auml;chtigt die NADPH Produktion und reaktive Sauerstoffspezies, die ATP Ersch&ouml;pfung und Zelle Tod in den menschlichen Glioblastom-Zellen erh&ouml;ht.

Normali cellule differenziate si basano principalmente sulla fosforilazione ossidativa mitocondriale per la produzione di adenosina trifosfato (ATP) per mantenere la loro vitalit&agrave; e funzioni tramite tre principali combustibili bioenergetici: glucosio, glutamina e acidi grassi. Molte cellule tumorali, tuttavia, si basano sulla glicolisi aerobica per la loro crescita e la sopravvivenza, e studi recenti indicano che alcune cellule tumorali dipendono dalla glutammina pure. Questo metabolismo alterato in tumori si verifica attraverso l&#39;attivazione del oncogene o perdita di geni oncosoppressori in pi&ugrave; percorsi di segnalazione, compreso il fosfoinositide 3-chinasi e percorsi di Myc. Relativamente poco si conosce, tuttavia, circa il ruolo degli acidi grassi come carburante bioenergetico in crescita e la sopravvivenza delle cellule tumorali. Qui, segnaliamo che le cellule di glioblastoma umano SF188 ossidano gli acidi grassi e che l&#39;inibizione della &beta;-ossidazione degli acidi grassi da etomoxir, un inibitore di carnitina palmitoiltransferasi 1, riduce marcatamente cellulare livelli di ATP e vitalit&agrave;. Abbiamo anche trovato che l&#39;inibizione dell&#39;ossidazione degli acidi grassi diminuisce i livelli di nicotinammide adenina dinucleotide fosfato (NADPH) e il contenuto di glutatione ridotto (GSH) ed eleva le specie ossigenate reattive intracellulare. Questi risultati suggeriscono che la modulazione dell&#39;ossidazione degli acidi grassi controlla il livello di NADPH. In presenza di specie reattive dell&#39;ossigeno scavenger tiron, tuttavia, deplezione di ATP &egrave; impedito senza ripristinare l&#39;ossidazione degli acidi grassi. Questo suggerisce che lo stress ossidativo pu&ograve; portare alla morte delle cellule e fallimento bioenergetica. Il nostro lavoro fornisce la prova che mitocondriale degli acidi grassi ossidazione pu&ograve; fornire NADPH per la difesa contro lo stress ossidativo e prevenire la morte delle cellule e perdita di ATP.

Inibizione dell&#39;ossidazione degli acidi grassi da etomoxir altera la produzione di NADPH e aumenta le specie reattive dell&#39;ossigeno, causando la morte di deplezione e cella di ATP nelle cellule di glioblastoma umano.

&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x3001;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#xFF1A;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x4E09;&#x5927;&#x751F;&#x4F53;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x71C3;&#x6599;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x305D;&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE;&#x30B7;&#x30F3;&#x4E09;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#xFF08;ATP&#xFF09;&#x3092;&#x751F;&#x7523;&#x3059;&#x308B;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x9178;&#x5316;&#x7684;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x306B;&#x4E3B;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x3068;&#x751F;&#x5B58;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x597D;&#x6C17;&#x7684;&#x89E3;&#x7CD6;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x3001;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x304C;&#x3093;&#x7D30;&#x80DE;&#x3082;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x764C;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x3053;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x306F;&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C1;&#x30C9;3  - &#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;Myc&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x816B;&#x760D;&#x6291;&#x5236;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x764C;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3084;&#x640D;&#x5931;&#x3001;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x884C;&#x308F;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6BD4;&#x8F03;&#x7684;&#x5C0F;&#x3055;&#x306A;&#x304C;&#x3093;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x3068;&#x751F;&#x5B58;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x751F;&#x4F53;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x71C3;&#x6599;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;SF188&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x3068;&#x30A8;&#x30C8;&#x30E2;&#x30AD;&#x30B7;&#x30EB;&#x3001;&#x30AB;&#x30EB;&#x30CB;&#x30C1;&#x30F3;&#x30D1;&#x30EB;&#x30DF;&#x30C8;&#x30A4;&#x30EB;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;1&#x963B;&#x5BB3;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x3B2;-&#x9178;&#x5316;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x3092;&#x9178;&#x5316;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30D2;&#x30C8;&#x795E;&#x7D4C;&#x81A0;&#x82BD;&#x816B;&#x3001;&#x9855;&#x8457;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;ATP&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3068;&#x751F;&#x5B58;&#x7387;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x9178;&#x5316;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x306F;&#x3001;&#x30CB;&#x30B3;&#x30C1;&#x30F3;&#x30A2;&#x30DF;&#x30C9;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B8;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#xFF08;NADPH&#xFF09;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3068;&#x9084;&#x5143;&#x578B;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30C1;&#x30AA;&#x30F3;&#xFF08;GSH&#xFF09;&#x542B;&#x6709;&#x91CF;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x305B;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x9178;&#x7D20;&#x7A2E;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x9178;&#x5316;&#x306E;&#x5909;&#x8ABF;&#x304C;NADPH&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6D3B;&#x6027;&#x9178;&#x7D20;&#x7A2E;&#x306E;&#x30B9;&#x30AB;&#x30D9;&#x30F3;&#x30B8;&#x30E3;&#x30FC;&#x30BF;&#x30A4;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;ATP&#x306E;&#x67AF;&#x6E07;&#x306F;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x9178;&#x5316;&#x3092;&#x5FA9;&#x5143;&#x305B;&#x305A;&#x306B;&#x9632;&#x6B62;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x9178;&#x5316;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x304C;&#x751F;&#x4F53;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x969C;&#x5BB3;&#x3084;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x4ED5;&#x4E8B;&#x306F;&#x3001;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x9178;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x9178;&#x5316;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x9632;&#x5FA1;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;NADPH&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3001;ATP&#x6D88;&#x5931;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x3092;&#x9632;&#x3050;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30A8;&#x30C8;&#x30E2;&#x30AD;&#x30B7;&#x30EB;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x9178;&#x5316;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x306F;NADPH&#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;&#x81A0;&#x82BD;&#x816B;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306F;ATP&#x306E;&#x67AF;&#x6E07;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3059;&#x6D3B;&#x6027;&#x9178;&#x7D20;&#x7A2E;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3055;&#x305B;&#x308B;

&#xC544;&#xB370;&#xB178;&#xC2E0; &#xC0BC;&#xC778;&#xC0B0; (ATP) &#xC138; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC8FC;&#xC694; bioenergetic &#xC5F0;&#xB8CC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC0DD;&#xC874; &#xB2A5;&#xB825; &#xBC0F; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC; &#xB9AC;&#xC544; &#xC0B0;&#xD654; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xC5D0; &#xC8FC;&#xB85C; &#xC758;&#xC874; &#xD558;&#xB294; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB41C; &#xC815;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC;: &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9;, &#xAE00;&#xB8E8;&#xD0C0;&#xBBFC; &#xBC0F; &#xC9C0;&#xBC29;&#xC0B0;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xB9CE;&#xC740; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC;, &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC131;&#xC7A5; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xC874;, &#xD638; &#xAE30;&#xC131; &#xBD84;&#xD574;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xACE0; &#xCD5C;&#xADFC; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC77C;&#xBD80; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xAE00;&#xB8E8;&#xD0C0;&#xBBFC;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2EC;&#xB77C; &#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC554; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC774; &#xBCC0;&#xACBD; &#xB41C; &#xB300;&#xC0AC; oncogene &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB610;&#xB294; phosphoinositide 3-kinase&#xC640; Myc &#xACBD;&#xB85C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC2E0;&#xD638; &#xACBD;&#xB85C; &#xC788;&#xB294; &#xC885;&#xC591; &#xC5B5;&#xC81C;&#xAE30; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC870;&#xAE08; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xB2E4;,, &#xC554; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC0DD;&#xC874;&#xACFC; &#xC131;&#xC7A5;&#xC5D0; bioenergetic &#xC5F0;&#xB8CC;&#xB85C; &#xC11C; &#xC9C0;&#xBC29;&#xC0B0;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCF4;&#xACE0; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; glioblastoma SF188 &#xC138;&#xD3EC; &#xC9C0;&#xBC29;&#xC0B0; &#xC0B0;&#xD654;&#xC640; etomoxir, carnitine palmitoyltransferase 1 &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC9C0;&#xBC29;&#xC0B0; &beta;-&#xC0B0;&#xD654;&#xC758; &#xC800;&#xD574; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; ATP &#xC218;&#xC900; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xC874; &#xB2A5;&#xB825; &#xD604;&#xC800; &#xD558; &#xAC8C; &#xAC10;&#xC18C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xC9C0;&#xBC29;&#xC0B0; &#xC0B0;&#xD654;&#xC758; &#xC800;&#xD574; &#xB2C8;&#xCF54;&#xD2F4;&#xC544;&#xBBF8;&#xB4DC; &#xC544;&#xB370;&#xB2CC; &#xB514;&#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC; &#xC778;&#xC0B0; (NADPH) &#xC218;&#xC900; &#xBC0F; &#xAC10;&#xC18C; glutathione (GSH) &#xCF58;&#xD150;&#xCE20; &#xAC10;&#xC18C; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xBC18;&#xC751; &#xC0B0;&#xC18C; &#xC885; &#xB04C;&#xC5B4;&#xC62C;&#xB9AC;&#xACE0; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xC774; &#xACB0;&#xACFC; &#xC9C0;&#xBC29;&#xC0B0; &#xC0B0;&#xD654;&#xC758; &#xBCC0;&#xC870; NADPH &#xC218;&#xC900;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xBC18;&#xC751;&#xC131; &#xC0B0;&#xC18C; &#xC885; &#xD3D0;&#xD488; &#xC2AC;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC; ATP &#xACE0;&#xAC08; &#xC9C0;&#xBC29;&#xC0B0; &#xC0B0;&#xD654;&#xB97C; &#xBCF5;&#xC6D0; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xACE0; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xAC83;&#xC740; &#xC0B0;&#xD654; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; bioenergetic &#xC2E4;&#xD328; &#xD558; &#xACE0; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9C8; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC77C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xC99D;&#xAC70;&#xB294; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC; &#xB9AC;&#xC544; &#xC9C0;&#xBC29;&#xC0B0; &#xC0B0;&#xD654; NADPH &#xC0B0;&#xD654; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBC29;&#xC5B4;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558; &#xACE0; ATP &#xC190;&#xC2E4; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0AC;&#xB9DD;&#xC744; &#xBC29;&#xC9C0; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Etomoxir&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC9C0;&#xBC29;&#xC0B0; &#xC0B0;&#xD654;&#xC758; &#xC800;&#xD574; NADPH &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC744; &#xC190;&#xC0C1; &#xD558; &#xACE0; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; glioblastoma &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; ATP &#xACE0;&#xAC08; &#xBC0F; &#xC140; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC5D0; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xBC18;&#xC751;&#xC131; &#xC0B0;&#xC18C; &#xC885; &#xC99D;&#xAC00;.

Normales de las c&#xE9;lulas diferenciadas se basan principalmente en la fosforilaci&#xF3;n oxidativa mitocondrial para producir trifosfato de adenosina (ATP) para mantener su viabilidad y las funciones a trav&#xE9;s de tres principales combustibles bioenerg&#xE9;ticos: glucosa, glutamina y los &#xE1;cidos grasos. Muchas c&#xE9;lulas cancerosas, sin embargo, dependen de la gluc&#xF3;lisis aer&#xF3;bica para su crecimiento y supervivencia, y estudios recientes indican que algunas c&#xE9;lulas cancerosas depende de la glutamina como as&#xED;. Esta alteraci&#xF3;n del metabolismo de los c&#xE1;nceres ocurre a trav&#xE9;s de la activaci&#xF3;n de oncogenes o la p&#xE9;rdida de genes supresores de tumores en m&#xFA;ltiples v&#xED;as de se&#xF1;alizaci&#xF3;n, incluyendo las v&#xED;as phosphoinositide 3-kinasa y Myc. Se sabe relativamente poco, sin embargo, sobre el papel de los &#xE1;cidos grasos como combustible bioenerg&#xE9;tico en el crecimiento y la supervivencia de las c&#xE9;lulas cancerosas. En este caso, nos informan de que las c&#xE9;lulas de glioblastoma humano SF188 oxidaci&#xF3;n de los &#xE1;cidos grasos y que la inhibici&#xF3;n de los &#xE1;cidos grasos &#x3B2;-oxidaci&#xF3;n por etomoxir, un inhibidor de la carnitina palmitoil 1, reduce notablemente los niveles celulares de ATP y la viabilidad. Tambi&#xE9;n se encontr&#xF3; que la inhibici&#xF3;n de la oxidaci&#xF3;n de &#xE1;cidos grasos disminuye la nicotinamida adenina dinucle&#xF3;tido fosfato (NADPH) y la reducci&#xF3;n de los niveles de contenido de glutati&#xF3;n (GSH) y eleva intracelulares especies reactivas del ox&#xED;geno. Estos resultados sugieren que la modulaci&#xF3;n de la oxidaci&#xF3;n de &#xE1;cidos grasos controla el nivel de NADPH. En presencia del tiron captador de ox&#xED;geno reactivo especies, sin embargo, el agotamiento de ATP se impide sin restaurar la oxidaci&#xF3;n de &#xE1;cidos grasos. Esto sugiere que el estr&#xE9;s oxidativo puede conducir a insuficiencia bioenerg&#xE9;tica y la muerte celular. Nuestro trabajo proporciona evidencia de que la oxidaci&#xF3;n mitocondrial de los &#xE1;cidos grasos pueden proporcionar NADPH para la defensa contra el estr&#xE9;s oxidante y evitar la p&#xE9;rdida de ATP y la muerte celular.

La inhibici&#xF3;n de la oxidaci&#xF3;n de &#xE1;cidos grasos por etomoxir un modo que afecte la producci&#xF3;n de NADPH y aumenta las especies reactivas de ox&#xED;geno resultante en la depleci&#xF3;n de ATP y muerte celular en c&#xE9;lulas de glioblastoma humano

&#x800C;&#x771F;&#x6B63;&#x6700;&#x4F73;&#x8868;&#x6F14;&#x8005;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x88AB;&#x62D2;&#x7EDD;&#x5728;&#x7B5B;&#x9009;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x65E9;&#x671F;&#x751F;&#x4EA7;&#x89C4;&#x6A21;&#x88AB;&#x5931;&#x8D25;&#x9876;&#x7EA7;&#x8868;&#x6F14;&#x514B;&#x9686;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4F7F;&#x7528;&#x5C4F;&#x5E55;&#x5728;&#x4F7F;&#x7528;&#x591A;&#x4E2A;&#x5DE5;&#x827A;&#x53C2;&#x6570;&#x53D8;&#x5316;&#x7684;&#x590D;&#x6742;&#x5206;&#x6279;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x591A;&#x4E2A;&#x514B;&#x9686;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x9C81;&#x68D2;&#x6027;&#x8BC4;&#x4F30;&#xFF0C;&#x5E76;&#x786E;&#x5B9A;&#x5173;&#x952E;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;&#x6B64;&#x52A8;&#x6001;&#x6392;&#x540D;&#x7684;&#x514B;&#x9686;&#x7684;&#x6218;&#x7565;&#x9700;&#x8981;&#x8BB8;&#x591A;&#x5E73;&#x884C;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x6BD4;&#x4F20;&#x7EDF;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x6267;&#x884C;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#x662F;&#x6700;&#x9002;&#x5408;&#x4E8E;&#x5FAE;&#x578B;&#x53CD;&#x5E94;&#x5668;&#x6A21;&#x578B;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8FC5;&#x901F;&#x6709;&#x6548;&#x5730;&#x6267;&#x884C;&#x6570;&#x4EE5;&#x767E;&#x8BA1;&#x7684;&#x8BD5;&#x9A8C;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x5B8C;&#x5168;&#x88AB;&#x76D1;&#x89C6;&#x548C;&#x63A7;&#x5236;&#x89C4;&#x6A21;&#x5C0F;&#x5E73;&#x53F0;&#x7528;&#x4E8E;&#x5C4F;&#x5E55;&#x516B;&#x4E2A;&#x7956;&#x514B;&#x9686;&#x91CD;&#x7EC4;&#x5355;&#x514B;&#x9686;&#x6297;&#x4F53;&#x751F;&#x4EA7;&#x8DE8;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x7684;&#x51E0;&#x79CD;&#x53D8;&#x4F53;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x4E0D;&#x540C;&#x5582;&#x517B;&#x6218;&#x7565;&#x3001; &#x6E29;&#x5EA6;&#x53D8;&#x5316;&#x548C; ph &#x503C;&#x63A7;&#x5236;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#x3002;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x5229;&#x7528;&#x5C4F;&#x5E55; 240 &#x5FAE;-&#x53CD;&#x5E94;&#x5668;&#x8FD0;&#x884C;&#x8FD9;&#x4E00;&#x8BC4;&#x4F30;&#x7684;&#x7F29;&#x5C0F;&#x6A21;&#x578B;&#x4E3A;&#x9AD8;&#x541E;&#x5410;&#x91CF;&#x7684;&#x5DE5;&#x5177;&#x514B;&#x9686;&#x8BC4;&#x4EF7;&#x4E24;&#x4E2A;&#x661F;&#x671F;&#x3002;&#x7ED3;&#x679C;&#x6570;&#x636E;&#x7684;&#x4E30;&#x5BCC;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4F7F;&#x6E05;&#x695A;&#x5730;&#x786E;&#x5B9A;&#x6700;&#x4F73;&#x548C;&#x6700;&#x5DEE;&#x7684;&#x514B;&#x9686;&#x4EE5;&#x53CA;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x5728;&#x4EFB;&#x671F;&#x5185;&#x6700;&#x5927;&#x7684;&#x5355;&#x514B;&#x9686;&#x6297;&#x4F53;&#x6EF4;&#x5EA6;&#x3002;&#x540E;&#x7EED;&#x6BD4;&#x8F83;&#x7814;&#x7A76;&#x5229;&#x7528; 180 &#x5FAE;&#x53CD;&#x5E94;&#x5668;&#x4E2D;&#x5168;&#x9762;&#x6790;&#x56E0;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x548C; 12 &#x514B;&#x9686;/&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7EC4;&#x5408;&#x7684;&#x5B50;&#x96C6;&#x88AB;&#x9009;&#x4E3A;&#x5E73;&#x884C;&#x91CD;&#x590D;&#x6447;&#x74F6;&#x3002;&#x5FAE;&#x53CD;&#x5E94;&#x5668;&#x9884;&#x6D4B;&#x548C;&#x90A3;&#x4E9B;&#x5728;&#x76AE;&#x5C14;&#x900A;&#x76F8;&#x5173;&#x503C;&#x4E3A; 0.94 &#x6447;&#x74F6;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x826F;&#x597D;&#x5173;&#x7CFB;&#x3002;&#x7ED3;&#x679C;&#x4E5F;&#x8BC1;&#x660E;&#x6B64;&#x5FAE;&#x5C3A;&#x5EA6;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6267;&#x884C;&#x514B;&#x9686;&#x7B5B;&#x9009;&#x548C;&#x6D41;&#x7A0B;&#x4F18;&#x5316;&#x540C;&#x65F6;&#x83B7;&#x5F97;&#x91CD;&#x8981;&#x6EF4;&#x5EA6;&#x7684;&#x6539;&#x5584;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x52A8;&#x6001;&#x6392;&#x540D;&#x7B56;&#x7565;&#x53EF;&#x4EE5;&#x652F;&#x6301;&#x751F;&#x4EA7;&#x514B;&#x9686;&#x7684;&#x66F4;&#x597D;&#x7684;&#x9009;&#x62E9;&#x3002;

&#x514B;&#x9686;&#x9009;&#x62E9;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x751F;&#x4EA7;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x7684;&#x6218;&#x7565;&#x3002;

Top performing clones have failed at the manufacturing scale while the true best performer may have been rejected early in the screening process. Therefore, the ability to screen multiple clones in complex fed-batch processes using multiple process variations can be used to assess robustness and to identify critical factors. This dynamic ranking of clones' strategy requires the execution of many parallel experiments than traditional approaches. Therefore, this approach is best suited for micro-bioreactor models which can perform hundreds of experiments quickly and efficiently. In this study, a fully monitored and controlled small scale platform was used to screen eight CHO clones producing a recombinant monoclonal antibody across several process variations, including different feeding strategies, temperature shifts and pH control profiles. The first screen utilized 240 micro-bioreactors were run for two weeks for this assessment of the scale-down model as a high-throughput tool for clone evaluation. The richness of the outcome data enable to clearly identify the best and worst clone as well as process in term of maximum monoclonal antibody titer. The follow-up comparison study utilized 180 micro-bioreactors in a full factorial design and a subset of 12 clone/process combinations was selected to be run parallel in duplicate shake flasks. Good correlation between the micro-bioreactor predictions and those made in shake flasks with a Pearson correlation value of 0.94. The results also demonstrate that this micro-scale system can perform clone screening and process optimization for gaining significant titer improvements simultaneously. This dynamic ranking strategy can support better choices of production clones.

A strategy for clone selection under different production conditions.

Top clones plus performants ont &#xE9;chou&#xE9; &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;chelle de fabrication tandis que le meilleur interpr&#xE8;te vrai peut-&#xEA;tre &#xE9;t&#xE9; rejet&#xE9;e au d&#xE9;but du processus de d&#xE9;pistage. Par cons&#xE9;quent, la capacit&#xE9; de d&#xE9;pister de multiples clones de complexes processus fed-batch utilisant les variations de processus multiples peuvent &#xEA;tre utilis&#xE9;s pour &#xE9;valuer la robustesse et &#xE0; identifier les facteurs critiques. Ce classement dynamique de la strat&#xE9;gie de clones &#xBB;exige l&#x26;#39;ex&#xE9;cution de nombreuses exp&#xE9;riences parall&#xE8;les que les approches traditionnelles. Par cons&#xE9;quent, cette approche est la mieux adapt&#xE9;e pour les micro-bior&#xE9;acteurs mod&#xE8;les qui peuvent effectuer des centaines d&#x26;#39;exp&#xE9;riences rapidement et efficacement. Dans cette &#xE9;tude, une plate-forme balance enti&#xE8;rement surveill&#xE9; et contr&#xF4;l&#xE9; petite a &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9; pour cribler huit clones CHO produisant un anticorps monoclonal recombinant dans les variations de processus, y compris plusieurs strat&#xE9;gies d&#x26;#39;alimentation diff&#xE9;rentes, les changements de temp&#xE9;rature et les profils de contr&#xF4;le du pH. Le premier &#xE9;cran utilis&#xE9; 240 micro-bior&#xE9;acteurs ont &#xE9;t&#xE9; ex&#xE9;cut&#xE9;s pendant deux semaines pour cette &#xE9;valuation du mod&#xE8;le &#xE0; &#xE9;chelle r&#xE9;duite comme un outil &#xE0; haut d&#xE9;bit pour l&#x26;#39;&#xE9;valuation clone. La richesse des donn&#xE9;es sur les r&#xE9;sultats permettent d&#x26;#39;identifier clairement le clone meilleur et le pire aussi bien en tant que processus en terme de taux d&#x26;#39;anticorps monoclonal maximale. L&#x26;#39;&#xE9;tude comparative de suivi utilis&#xE9; 180 micro-bior&#xE9;acteurs dans un plan factoriel complet et un sous-ensemble de 12 clones / processus de combinaisons a &#xE9;t&#xE9; choisi pour &#xEA;tre ex&#xE9;cut&#xE9; en parall&#xE8;le dans des flacons agit&#xE9;s en double. Une bonne corr&#xE9;lation entre les pr&#xE9;dictions de micro-bior&#xE9;acteurs et ceux r&#xE9;alis&#xE9;s dans des flacons agit&#xE9;s avec une valeur de corr&#xE9;lation de Pearson de 0,94. Les r&#xE9;sultats d&#xE9;montrent &#xE9;galement que ce syst&#xE8;me &#xE0; micro-&#xE9;chelle peut r&#xE9;aliser un d&#xE9;pistage clone et optimisation de processus pour gagner des am&#xE9;liorations titrage significatives simultan&#xE9;ment. Cette strat&#xE9;gie de classement dynamique peut prendre en charge de meilleurs choix de clones de production.

Une strat&#xE9;gie pour la s&#xE9;lection de clones dans des conditions de production diff&#xE9;rentes

Obere darstellende Klone sind an der Fertigung-Skala gescheitert, w&auml;hrend wahre leistungsst&auml;rkstes fr&uuml;h in der Screening-Verfahren abgelehnt worden sind, kann. Daher kann die F&auml;higkeit, mehrere Klone in komplexe fed-Batch-Prozesse, die Verwendung mehrere Prozess-Variationen des Bildschirms Robustheit zu beurteilen und kritische Faktoren zu ermitteln, verwendet werden. Dieses dynamische Ranking der Klone-Strategie erfordert die Ausf&uuml;hrung von vielen parallelen Experimenten als traditionelle Ans&auml;tze. Daher ist dieser Ansatz am besten geeignet f&uuml;r Mikro-Bioreaktor-Modelle, die Hunderte von Experimenten schnell und effizient durchf&uuml;hren k&ouml;nnen. In dieser Studie wurde eine vollst&auml;ndig &uuml;berwachten und kontrollierten kleinen Ma&szlig;stab-Plattform zur Bildschirm-acht CHO-Klone produzieren einen rekombinanten monoklonaler Antik&ouml;rper &uuml;ber mehrere Prozess-Varianten, einschlie&szlig;lich unterschiedliche F&uuml;tterung Strategien, Ver&auml;nderungen der Temperatur und pH-Wert-Kontrolle-Profile. Die ersten Bildschirm genutzt 240 Mikro-Bioreaktoren wurden f&uuml;r zwei Wochen f&uuml;r diese Beurteilung des Modells Scale-Down als Hochdurchsatz-Werkzeug f&uuml;r Klon-Bewertung f&uuml;hren. Der Reichtum der Ergebnis-Daten erm&ouml;glichen, um die besten und schlechtesten Klon sowie Prozess in Bezug auf die maximale monoklonale Antik&ouml;rper-Titer klar zu identifizieren. Die Follow-up Vergleichsstudie genutzte 180 Mikro-Bioreaktoren in einem vollst&auml;ndigen faktoriellen Design und eine Teilmenge von 12 Klon/Prozess-Kombinationen wurde ausgew&auml;hlt, um in Flaschen, doppelte sch&uuml;tteln parallel ausgef&uuml;hrt werden. Gute Korrelation zwischen der Mikro-Bioreaktor-Vorhersagen und den Angaben in shake Flaschen mit Pearson Korrelationswert 0,94. Die Ergebnisse zeigen auch, dass dieses System Mikroskala-Klon-Screening durchf&uuml;hren und Prozessoptimierung f&uuml;r signifikante Titer Verbesserungen gleichzeitig zu gewinnen kann. Diese dynamische Rangliste-Strategie kann bessere Entscheidungen der Produktion Klone unterst&uuml;tzen.

Eine Strategie f&uuml;r Klon-Auswahl unter verschiedenen Produktionsbedingungen.

Top performing cloni hanno fallito alla scala di produzione, mentre il vero best performer sono state respinte all&#39;inizio del processo di screening. Pertanto, la capacit&agrave; di schermo pi&ugrave; cloni in complessi processi di fed-batch utilizzando molteplici variazioni di processo pu&ograve; essere utilizzata per valutare la robustezza e per identificare i fattori critici. Questa classifica dinamica della strategia di cloni richiede l&#39;esecuzione di molti esperimenti paralleli rispetto agli approcci tradizionali. Pertanto, questo approccio &egrave; pi&ugrave; adatto per i modelli micro-bioreattore che possono eseguire centinaia di esperimenti rapidamente ed efficientemente. In questo studio, una piattaforma completamente monitorato e controllato su piccola scala &egrave; stata utilizzata per schermo otto cloni CHO producendo un anticorpo monoclonale ricombinante attraverso diverse variazioni di processo, tra cui diverse strategie di alimentazione, variazioni di temperatura e pH controllo profili. I primi schermo utilizzato 240 micro-bioreattori sono stati eseguiti per due settimane per questa valutazione del modello di scala verso il basso come strumento high-throughput per la valutazione di clone. La ricchezza dei dati risultati permettono di identificare chiaramente i migliori e peggiori clone cos&igrave; come processo nel periodo di massima monoclonale anticorpale. Lo studio di follow-up di confronto utilizzato 180 micro-bioreattori in un disegno fattoriale completo e un sottoinsieme di 12 combinazioni di processo clone &egrave; stato selezionato per essere corrono parallele in matracci shake duplicate. Buona correlazione tra le previsioni di micro-bioreattore e quelle fatte shake beute con un valore di correlazione di Pearson di 0,94. I risultati dimostrano anche che questo sistema di micro-scala pu&ograve; eseguire lo screening clone e processo di ottimizzazione per ottenere miglioramenti significativi titolo simultaneamente. Questa strategia di posizionamento dinamico &egrave; in grado di supportare scelte migliori di produzione cloni.

Una strategia per la selezione del clone sotto condizioni differenti di produzione.

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&#xB2E4;&#xB978; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xC870;&#xAC74; &#xD558;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD074;&#xB860; &#xC120;&#xD0DD;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC804;&#xB7B5;.

Los mejores clones del espect&#xE1;culo han fracasado en la escala de fabricaci&#xF3;n, mientras que el mejor desempe&#xF1;o real puede haber sido rechazada al principio del proceso de selecci&#xF3;n. Por lo tanto, la capacidad de filtrar m&#xFA;ltiples clones en complejos fed-batch procesos que utilizan m&#xFA;ltiples variaciones de proceso se puede utilizar para evaluar la robustez y para identificar factores cr&#xED;ticos. Este ranking din&#xE1;mico de la estrategia de clones requiere la ejecuci&#xF3;n de muchos experimentos paralelos que los enfoques tradicionales. Por lo tanto, este enfoque es el m&#xE1;s adecuado para la micro-biorreactores modelos que se pueden realizar cientos de experimentos con rapidez y eficacia. En este estudio, una plataforma totalmente monitoreados y controlados a peque&#xF1;a escala se utiliza para evaluar a ocho clones CHO que producen un anticuerpo monoclonal recombinante a trav&#xE9;s de las variaciones del proceso, entre ellos varios diferentes estrategias de alimentaci&#xF3;n, cambios de temperatura y los perfiles de control de pH. La primera pantalla que utiliza 240 micro-biorreactores se llevaron a cabo durante dos semanas para que esta evaluaci&#xF3;n de un modelo a escala menor, como una herramienta de alto rendimiento para la evaluaci&#xF3;n de clones. La riqueza de los datos de los resultados permiten identificar claramente el clon mejor y lo peor, as&#xED; como el proceso en t&#xE9;rminos de t&#xED;tulo m&#xE1;ximo de anticuerpos monoclonales. El estudio comparativo de seguimiento utilizado 180 micro-biorreactores en un dise&#xF1;o factorial completo y un subconjunto de 12 clones / proceso de combinaciones fue seleccionado para ser ejecutado en paralelo en agitar frascos duplicados. Una buena correlaci&#xF3;n entre las predicciones de micro-biorreactores y las realizadas en matraces de agitaci&#xF3;n con un valor de correlaci&#xF3;n de Pearson de 0,94. Los resultados tambi&#xE9;n demuestran que este sistema de micro-escala puede realizar cribado clon y la optimizaci&#xF3;n del proceso para obtener mejoras significativas en los t&#xED;tulos de forma simult&#xE1;nea. Esta estrategia de ranking din&#xE1;mico puede apoyar una mejor selecci&#xF3;n de clones de producci&#xF3;n.

Una estrategia para la selecci&#xF3;n de clones bajo condiciones de producci&#xF3;n diferentes

&#x6B63;&#x5E38;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E3B;&#x8981;&#x662F;&#x4F9D;&#x9760;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x6C27;&#x5316;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#xFF0C;&#x4EA7;&#x751F;&#x4E09;&#x78F7;&#x9178;&#x817A;&#x82F7; (ATP)&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E09;&#x4E2A;&#x4E3B;&#x8981;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x80FD;&#x91CF;&#x71C3;&#x6599;&#x4FDD;&#x6301;&#x5176;&#x6D3B;&#x529B;&#x548C;&#x804C;&#x80FD;&#xFF1A; &#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x3001; &#x8C37;&#x6C28;&#x9170;&#x80FA;&#x548C;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x3002;&#x5F88;&#x591A;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x4F9D;&#x8D56;&#x5B83;&#x4EEC;&#x7684;&#x751F;&#x957F;&#x548C;&#x5B58;&#x6D3B;&#xFF0C;&#x6709;&#x6C27;&#x7CD6;&#x9175;&#x89E3;&#x548C;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x4E00;&#x4E9B;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x4EE5;&#x53CA;&#x8C37;&#x6C28;&#x9170;&#x80FA;&#x3002;&#x8FD9;&#x6539;&#x53D8;&#x7684;&#x4EE3;&#x8C22;&#x7684;&#x764C;&#x75C7;&#x53D1;&#x751F;&#x901A;&#x8FC7;&#x764C;&#x57FA;&#x56E0;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x6216;&#x6291;&#x764C;&#x57FA;&#x56E0;&#x5728;&#x591A;&#x4E2A;&#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8DEF;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x78F7;&#x8102;&#x9170;&#x808C;&#x9187; 3-&#x6FC0;&#x9176;&#x548C; Myc &#x901A;&#x8DEF;&#x4E2D;&#x7684;&#x635F;&#x5931;&#x3002;&#x76F8;&#x5BF9;&#x4E86;&#x89E3;&#x751A;&#x5C11;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x8FC7;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x589E;&#x957F;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x80FD;&#x91CF;&#x71C3;&#x6599;&#x7684;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x4F5C;&#x7528;&#x548C;&#x764C;&#x75C7;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5B58;&#x6D3B;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x4EBA;&#x80F6;&#x8D28;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7624; SF188 &#x7EC6;&#x80DE;&#x6C27;&#x5316;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x548C;&#x8102;&#x80AA;&#x9178; &beta;-&#x6C27;&#x5316; etomoxir&#x3001; &#x8089;&#x6BD2;&#x78B1; palmitoyltransferase 1 &#x6291;&#x5236;&#x5242;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x663E;&#x8457;&#x964D;&#x4F4E;&#x7EC6;&#x80DE; ATP &#x6C34;&#x5E73;&#x548C;&#x751F;&#x5B58;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x53D1;&#x73B0;&#x6291;&#x5236;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x6C27;&#x5316;&#x63A7;&#x5236; NADPH &#x6C34;&#x5E73;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5B58;&#x5728;&#x6D3B;&#x6027;&#x6C27;&#x7269;&#x79CD;&#x6E05;&#x9053;&#x592B;&#x8BD5;&#x5242;&#xFF0C;ATP &#x6D88;&#x8017;&#x963B;&#x6B62;&#x800C;&#x4E0D;&#x6062;&#x590D;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x6C27;&#x5316;&#x3002;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E;&#x6C27;&#x5316;&#x5E94;&#x6FC0;&#x53EF;&#x80FD;&#x5BFC;&#x81F4;&#x751F;&#x547D;&#x7684;&#x5931;&#x8D25;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x8BC1;&#x636E;&#xFF0C;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x6C27;&#x5316;&#x53EF;&#x80FD;&#x63D0;&#x4F9B; NADPH &#x6C27;&#x5316;&#x5E94;&#x6FC0;&#x7684;&#x9632;&#x5FA1;&#x548C;&#x9632;&#x6B62; ATP &#x635F;&#x5931;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x3002;

Normal differentiated cells rely primarily on mitochondrial oxidative phosphorylation to produce adenosine triphosphate (ATP) to maintain their viability and functions by using three major bioenergetic fuels: glucose, glutamine and fatty acids. Many cancer cells, however, rely on aerobic glycolysis for their growth and survival, and recent studies indicate that some cancer cells depend on glutamine as well. This altered metabolism in cancers occurs through oncogene activation or loss of tumor suppressor genes in multiple signaling pathways, including the phosphoinositide 3-kinase and Myc pathways. Relatively little is known, however, about the role of fatty acids as a bioenergetic fuel in growth and survival of cancer cells. Here, we report that human glioblastoma SF188 cells oxidize fatty acids and that inhibition of fatty acid Î²-oxidation by etomoxir, a carnitine palmitoyltransferase 1 inhibitor, markedly reduces cellular ATP levels and viability. We also found that inhibition of fatty acid oxidation controls the NADPH level. In the presence of reactive oxygen species scavenger tiron, however, ATP depletion is prevented without restoring fatty acid oxidation. This suggests that oxidative stress may lead to bioenergetic failure and cell death. Our work provides evidence that mitochondrial fatty acid oxidation may provide NADPH for defense against oxidative stress and prevent ATP loss and cell death.

Cellules diff&#xE9;renci&#xE9;es normales s&#x26;#39;appuient essentiellement sur la phosphorylation oxydative mitochondriale pour produire l&#x26;#39;ad&#xE9;nosine triphosphate (ATP) pour maintenir leur viabilit&#xE9; et les fonctions en utilisant trois principaux combustibles bio&#xE9;nerg&#xE9;tiques: glucose, de glutamine et des acides gras. De nombreuses cellules canc&#xE9;reuses, toutefois, compter sur la glycolyse a&#xE9;robie pour leur croissance et la survie, et des &#xE9;tudes r&#xE9;centes indiquent que certaines cellules canc&#xE9;reuses d&#xE9;pendent glutamine ainsi. Cette alt&#xE9;ration du m&#xE9;tabolisme dans les cancers se produit &#xE0; travers l&#x26;#39;activation des oncog&#xE8;nes ou la perte de g&#xE8;nes suppresseurs de tumeurs dans plusieurs voies de signalisation, y compris les voies de phosphoinositide 3-kinase et Myc. On sait relativement peu, cependant, sur le r&#xF4;le des acides gras comme carburant bio&#xE9;nerg&#xE9;tique de la croissance et la survie des cellules canc&#xE9;reuses. Ici, nous d&#xE9;clarons que les cellules de glioblastome humain SF188 oxyder les acides gras et que l&#x26;#39;inhibition de la &#x3B2;-acide gras oxydation par &#xE9;tomoxir, un inhibiteur de la carnitine palmitoyltransf&#xE9;rase 1, permet de r&#xE9;duire consid&#xE9;rablement les niveaux d&#x26;#39;ATP cellulaire et de la viabilit&#xE9;. Nous avons &#xE9;galement constat&#xE9; que l&#x26;#39;inhibition de l&#x26;#39;oxydation des acides gras contr&#xF4;le le niveau de NADPH. En pr&#xE9;sence de l&#x26;#39;oxyg&#xE8;ne au tr&#xE9;sor tiron esp&#xE8;ces r&#xE9;actives, cependant, la d&#xE9;pl&#xE9;tion en ATP est emp&#xEA;ch&#xE9; sans restaurer l&#x26;#39;oxydation des acides gras. Ceci sugg&#xE8;re que le stress oxydatif peut conduire &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;chec bio&#xE9;nerg&#xE9;tique et la mort cellulaire. Notre travail apporte la preuve que mitochondrial oxydation des acides gras peuvent fournir NADPH pour la d&#xE9;fense contre le stress oxydatif et pr&#xE9;venir la perte de l&#x26;#39;ATP et la mort cellulaire.

Normale differenzierte Zellen st&uuml;tzen sich haupts&auml;chlich auf Mitochondrien Oxidative Phosphorylierung zu produzieren Adenosintriphosphat (ATP), deren Lebensf&auml;higkeit und Funktionen beizubehalten und mit drei gro&szlig;e bioenergetische Brennstoffen: Glukose, Glutamin und Fetts&auml;uren. Viele Krebszellen, st&uuml;tzen sich jedoch auf aerobe Glykolyse f&uuml;r ihr Wachstum und &uuml;berleben, und neuere Studien zeigen, dass Glutamin sowie einige Krebszellen abh&auml;ngen. Diese ver&auml;nderten Metabolismus bei Krebserkrankungen erfolgt &uuml;ber Onkogen-Aktivierung oder Verlust der Tumorsuppressorgene in mehrere Signalwege, darunter die Phosphoinositid-3-Kinase und Myc Wege. Relativ wenig, jedoch &uuml;ber die Rolle der Fetts&auml;uren als bioenergetische Brennstoff in Wachstum und &Uuml;berleben von Krebszellen bekannt. Hier berichten wir, dass menschliche Glioblastoma SF188 Zellen Fetts&auml;uren oxidieren und Hemmung der Fetts&auml;ure-&beta;-Oxidation von Etomoxir, ein Carnitin-Palmitoyl-Transferase 1-Hemmer, deutlich reduziert die zellul&auml;ren ATP-Level und Lebensf&auml;higkeit. Wir fanden auch, dass die Hemmung der Fetts&auml;ure-Oxidation der NADPH-Level-Regler. In Anwesenheit von reaktive Sauerstoff Spezies Aasfresser Tiron jedoch ohne Wiederherstellen der Fetts&auml;ure-Oxidation die ATP-Abbau verhindert. Dies l&auml;sst vermuten, dass oxidativer Stress zu bioenergetische Scheitern und Zelle Tod f&uuml;hren kann. Unsere Arbeit stellt Beweis dieser mitochondrialen Fetts&auml;ure Oxidation bieten NADPH f&uuml;r Verteidigung gegen oxidativen Stress und ATP-Verlust und Zelle Tod verhindern kann.

Normali cellule differenziate si basano principalmente sulla fosforilazione ossidativa mitocondriale per la produzione di adenosina trifosfato (ATP) per mantenere la loro vitalit&agrave; e funzioni tramite tre principali combustibili bioenergetici: glucosio, glutamina e acidi grassi. Molte cellule tumorali, tuttavia, si basano sulla glicolisi aerobica per la loro crescita e la sopravvivenza, e studi recenti indicano che alcune cellule tumorali dipendono dalla glutammina pure. Questo metabolismo alterato in tumori si verifica attraverso l&#39;attivazione del oncogene o perdita di geni oncosoppressori in pi&ugrave; percorsi di segnalazione, compreso il fosfoinositide 3-chinasi e percorsi di Myc. Relativamente poco si conosce, tuttavia, circa il ruolo degli acidi grassi come carburante bioenergetico in crescita e la sopravvivenza delle cellule tumorali. Qui, segnaliamo che le cellule di glioblastoma umano SF188 ossidano gli acidi grassi e che l&#39;inibizione della &beta;-ossidazione degli acidi grassi da etomoxir, un inibitore di carnitina palmitoiltransferasi 1, riduce marcatamente cellulare livelli di ATP e vitalit&agrave;. Abbiamo anche trovato che l&#39;inibizione dell&#39;ossidazione degli acidi grassi controlla il livello di NADPH. In presenza di specie reattive dell&#39;ossigeno scavenger tiron, tuttavia, deplezione di ATP &egrave; impedito senza ripristinare l&#39;ossidazione degli acidi grassi. Questo suggerisce che lo stress ossidativo pu&ograve; portare alla morte delle cellule e fallimento bioenergetica. Il nostro lavoro fornisce la prova che mitocondriale degli acidi grassi ossidazione pu&ograve; fornire NADPH per la difesa contro lo stress ossidativo e prevenire la morte delle cellule e perdita di ATP.

&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x3001;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#xFF1A;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x4E09;&#x5927;&#x751F;&#x4F53;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x71C3;&#x6599;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x305D;&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE;&#x30B7;&#x30F3;&#x4E09;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#xFF08;ATP&#xFF09;&#x3092;&#x751F;&#x7523;&#x3059;&#x308B;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x9178;&#x5316;&#x7684;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x306B;&#x4E3B;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x3068;&#x751F;&#x5B58;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x597D;&#x6C17;&#x7684;&#x89E3;&#x7CD6;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x3001;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x304C;&#x3093;&#x7D30;&#x80DE;&#x3082;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x764C;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x3053;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x306F;&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C1;&#x30C9;3  - &#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;Myc&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x816B;&#x760D;&#x6291;&#x5236;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x764C;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3084;&#x640D;&#x5931;&#x3001;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x884C;&#x308F;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6BD4;&#x8F03;&#x7684;&#x5C0F;&#x3055;&#x306A;&#x304C;&#x3093;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x3068;&#x751F;&#x5B58;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x751F;&#x4F53;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x71C3;&#x6599;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;SF188&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x3068;&#x30A8;&#x30C8;&#x30E2;&#x30AD;&#x30B7;&#x30EB;&#x3001;&#x30AB;&#x30EB;&#x30CB;&#x30C1;&#x30F3;&#x30D1;&#x30EB;&#x30DF;&#x30C8;&#x30A4;&#x30EB;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;1&#x963B;&#x5BB3;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x3B2;-&#x9178;&#x5316;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x3092;&#x9178;&#x5316;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30D2;&#x30C8;&#x795E;&#x7D4C;&#x81A0;&#x82BD;&#x816B;&#x3001;&#x9855;&#x8457;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;ATP&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3068;&#x751F;&#x5B58;&#x7387;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x9178;&#x5316;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x306F;NADPH&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x6D3B;&#x6027;&#x9178;&#x7D20;&#x7A2E;&#x306E;&#x30B9;&#x30AB;&#x30D9;&#x30F3;&#x30B8;&#x30E3;&#x30FC;&#x30BF;&#x30A4;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;ATP&#x306E;&#x67AF;&#x6E07;&#x306F;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x9178;&#x5316;&#x3092;&#x5FA9;&#x5143;&#x305B;&#x305A;&#x306B;&#x9632;&#x6B62;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x9178;&#x5316;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x304C;&#x751F;&#x4F53;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x969C;&#x5BB3;&#x3084;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x4ED5;&#x4E8B;&#x306F;&#x3001;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x9178;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x9178;&#x5316;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x9632;&#x5FA1;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;NADPH&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3001;ATP&#x6D88;&#x5931;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x3092;&#x9632;&#x3050;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC544;&#xB370;&#xB178;&#xC2E0; &#xC0BC;&#xC778;&#xC0B0; (ATP) &#xC138; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC8FC;&#xC694; bioenergetic &#xC5F0;&#xB8CC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC0DD;&#xC874; &#xB2A5;&#xB825; &#xBC0F; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC; &#xB9AC;&#xC544; &#xC0B0;&#xD654; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xC5D0; &#xC8FC;&#xB85C; &#xC758;&#xC874; &#xD558;&#xB294; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB41C; &#xC815;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC;: &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9;, &#xAE00;&#xB8E8;&#xD0C0;&#xBBFC; &#xBC0F; &#xC9C0;&#xBC29;&#xC0B0;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xB9CE;&#xC740; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC;, &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC131;&#xC7A5; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xC874;, &#xD638; &#xAE30;&#xC131; &#xBD84;&#xD574;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xACE0; &#xCD5C;&#xADFC; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC77C;&#xBD80; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xAE00;&#xB8E8;&#xD0C0;&#xBBFC;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2EC;&#xB77C; &#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC554; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC774; &#xBCC0;&#xACBD; &#xB41C; &#xB300;&#xC0AC; oncogene &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB610;&#xB294; phosphoinositide 3-kinase&#xC640; Myc &#xACBD;&#xB85C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC2E0;&#xD638; &#xACBD;&#xB85C; &#xC788;&#xB294; &#xC885;&#xC591; &#xC5B5;&#xC81C;&#xAE30; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC870;&#xAE08; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xB2E4;,, &#xC554; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC0DD;&#xC874;&#xACFC; &#xC131;&#xC7A5;&#xC5D0; bioenergetic &#xC5F0;&#xB8CC;&#xB85C; &#xC11C; &#xC9C0;&#xBC29;&#xC0B0;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCF4;&#xACE0; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; glioblastoma SF188 &#xC138;&#xD3EC; &#xC9C0;&#xBC29;&#xC0B0; &#xC0B0;&#xD654;&#xC640; etomoxir, carnitine palmitoyltransferase 1 &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC9C0;&#xBC29;&#xC0B0; &beta;-&#xC0B0;&#xD654;&#xC758; &#xC800;&#xD574; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; ATP &#xC218;&#xC900; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xC874; &#xB2A5;&#xB825; &#xD604;&#xC800; &#xD558; &#xAC8C; &#xAC10;&#xC18C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xC9C0;&#xBC29;&#xC0B0; &#xC0B0;&#xD654;&#xC758; &#xC800;&#xD574; NADPH &#xC218;&#xC900;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xBC18;&#xC751;&#xC131; &#xC0B0;&#xC18C; &#xC885; &#xD3D0;&#xD488; &#xC2AC;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC; ATP &#xACE0;&#xAC08; &#xC9C0;&#xBC29;&#xC0B0; &#xC0B0;&#xD654;&#xB97C; &#xBCF5;&#xC6D0; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xACE0; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xAC83;&#xC740; &#xC0B0;&#xD654; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; bioenergetic &#xC2E4;&#xD328; &#xD558; &#xACE0; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9C8; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC77C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xC99D;&#xAC70;&#xB294; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC; &#xB9AC;&#xC544; &#xC9C0;&#xBC29;&#xC0B0; &#xC0B0;&#xD654; NADPH &#xC0B0;&#xD654; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBC29;&#xC5B4;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558; &#xACE0; ATP &#xC190;&#xC2E4; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0AC;&#xB9DD;&#xC744; &#xBC29;&#xC9C0; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Normales de las c&#xE9;lulas diferenciadas se basan principalmente en la fosforilaci&#xF3;n oxidativa mitocondrial para producir trifosfato de adenosina (ATP) para mantener su viabilidad y las funciones a trav&#xE9;s de tres principales combustibles bioenerg&#xE9;ticos: glucosa, glutamina y los &#xE1;cidos grasos. Muchas c&#xE9;lulas cancerosas, sin embargo, dependen de la gluc&#xF3;lisis aer&#xF3;bica para su crecimiento y supervivencia, y estudios recientes indican que algunas c&#xE9;lulas cancerosas depende de la glutamina como as&#xED;. Esta alteraci&#xF3;n del metabolismo de los c&#xE1;nceres ocurre a trav&#xE9;s de la activaci&#xF3;n de oncogenes o la p&#xE9;rdida de genes supresores de tumores en m&#xFA;ltiples v&#xED;as de se&#xF1;alizaci&#xF3;n, incluyendo las v&#xED;as phosphoinositide 3-kinasa y Myc. Se sabe relativamente poco, sin embargo, sobre el papel de los &#xE1;cidos grasos como combustible bioenerg&#xE9;tico en el crecimiento y la supervivencia de las c&#xE9;lulas cancerosas. En este caso, nos informan de que las c&#xE9;lulas de glioblastoma humano SF188 oxidaci&#xF3;n de los &#xE1;cidos grasos y que la inhibici&#xF3;n de los &#xE1;cidos grasos &#x3B2;-oxidaci&#xF3;n por etomoxir, un inhibidor de la carnitina palmitoil 1, reduce notablemente los niveles celulares de ATP y la viabilidad. Tambi&#xE9;n se encontr&#xF3; que la inhibici&#xF3;n de la oxidaci&#xF3;n de &#xE1;cidos grasos controla el nivel de NADPH. En presencia del tiron captador de ox&#xED;geno reactivo especies, sin embargo, el agotamiento de ATP se impide sin restaurar la oxidaci&#xF3;n de &#xE1;cidos grasos. Esto sugiere que el estr&#xE9;s oxidativo puede conducir a insuficiencia bioenerg&#xE9;tica y la muerte celular. Nuestro trabajo proporciona evidencia de que la oxidaci&#xF3;n mitocondrial de los &#xE1;cidos grasos pueden proporcionar NADPH para la defensa contra el estr&#xE9;s oxidante y evitar la p&#xE9;rdida de ATP y la muerte celular.

&#x6700;&#x8FD1;&#x5F00;&#x53D1;&#x7684;&#x6280;&#x672F;&#x5DF2;&#x542F;&#x7528;&#x591A;&#x4E95;&#x6D4B;&#x91CF;&#x7684; O(2) &#x6D88;&#x8D39;&#xFF0C;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x7814;&#x7A76;&#x7387;&#xFF0C;&#x5C24;&#x5176;&#x662F;&#x836F;&#x7269;&#x548C;&#x8C03;&#x8282;&#x4EE3;&#x8C22;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x673A;&#x7406;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6280;&#x672F;&#x4E4B;&#x95F4;&#x6D77;&#x9A6C; XF24 &#x5206;&#x6790;&#x5668;&#x88AB;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x7528;&#x4E8E;&#x9644;&#x52A0;&#x5728;&#x5355;&#x5C42;&#x5230;&#x591A;&#x4E95;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x57F9;&#x517B;&#x677F;&#x7684;&#x5B8C;&#x6574;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x4EE5;&#x5177;&#x6709;&#x9AD8;&#x541E;&#x5410;&#x91CF;&#x68C0;&#x6D4B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x65E2;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4E25;&#x683C;&#x63A7;&#x5236;&#x80FD;&#x6E90;&#x9700;&#x6C42;&#x548C;&#x886C;&#x5E95;&#x7684;&#x53EF;&#x7528;&#x6027;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F00;&#x53D1;&#x4E86;&#x4E00;&#x9879;&#x8BAE;&#x5B9A;&#x4E66;&#xFF0C;&#x5C55;&#x5F00; XF24 &#x5206;&#x6790;&#x4EEA;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x5206;&#x79BB;&#x7684;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x3002;&#x91C7;&#x96C6;&#x7684;&#x6700;&#x4F18;&#x5229;&#x7387;&#x9700;&#x8981;&#x662F;&#x610F;&#x5916;&#x6709;&#x522B;&#x4E8E;&#x5E38;&#x89C4;&#x7684;&#x6781;&#x8C31;&#x7684;&#x68C0;&#x6D4B;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;&#x5728;&#x4F18;&#x5316;&#x7684;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x6765;&#x81EA;&#x79BB;&#x4F53;&#x7684;&#x9F20;&#x809D;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x6240;&#x9644;&#x52A0;&#x5230;&#x7684; XF &#x6D4B;&#x5B9A;&#x677F;&#xFF0C;&#x5E95;&#x90E8;&#x7684;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x5141;&#x8BB8;&#x7387;&#x547C;&#x5438;&#x548C;&#x8D28;&#x5B50;&#x751F;&#x4EA7;&#x591A;&#x4E95;&#x8BC4;&#x4EF7;&#xFF0C;&#x5E76;&#x8981;&#x6C42;&#x6781;&#x5C0F;&#x6570;&#x91CF;&#x7684;&#x6750;&#x6599; (1-10 &#x5FAE;&#x514B;&#x7684;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D;&#x6BCF;&#x4E95;)&#x3002;&#x57FA;&#x5E95;&#x7684;&#x8FDE;&#x7EED;&#x6D4B;&#x91CF;&#xFF0C;&#x56FD; 3&#x3001; &#x56FD; 4 &#x548C;&#x5076;&#x8054;&#x523A;&#x6FC0;&#x547C;&#x5438;&#x53EF;&#x901A;&#x8FC7;&#x8BD5;&#x5242;&#x6DFB;&#x52A0;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x4E95;&#x4ECE;&#x6CE8;&#x5C04;&#x7AEF;&#x53E3;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x63CF;&#x8FF0;&#x4F7F;&#x7528;&#x9694;&#x79BB;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x809D;&#x548C;&#x5927;&#x9F20;&#x5FC3;&#x810F;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#xFF0C;&#x6B64;&#x6280;&#x672F;&#x7684;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x548C;&#x4F18;&#x5316;&#xFF0C;&#x5E76;&#x8FD0;&#x7528;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x6765;&#x53D1;&#x73B0;&#x78F7;&#x9178;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x5728;&#x5FC3;&#x810F;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x7ED3;&#x679C;&#x7684;&#x590D;&#x6742;&#x4F9D;&#x8D56;&#x7684;&#x547C;&#x5438;&#x7387;&#x5177;&#x4F53;&#x51CF;&#x5C11;&#x7F16;&#x5236;&#xFF0C;&#x5217;&#x5165;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x76F8;&#x4FE1;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B0;&#x6280;&#x672F;&#x5C06;&#x8FDB;&#x884C;&#x836F;&#x7269;&#x7B5B;&#x9009;&#x548C;&#x751F;&#x6210;&#x5C0F;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x6837;&#x672C;&#x4EE5;&#x524D;&#x65E0;&#x6CD5;&#x547C;&#x5438;&#x6570;&#x636E;&#x7279;&#x522B;&#x6709;&#x7528;&#x3002;

&#x9AD8;&#x541E;&#x5410;&#x91CF;&#x5FAE;&#x5B54;&#x677F;&#x4F7F;&#x7528;&#x6700;&#x5C11;&#x6570;&#x91CF;&#x7684;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x547C;&#x5438;&#x6D4B;&#x91CF;&#x3002;

Recently developed technologies have enabled multi-well measurement of O(2) consumption, facilitating the rate of mitochondrial research, particularly regarding the mechanism of action of drugs and proteins that modulate metabolism. Among these technologies, the Seahorse XF24 Analyzer was designed for use with intact cells attached in a monolayer to a multi-well tissue culture plate. In order to have a high throughput assay system in which both energy demand and substrate availability can be tightly controlled, we have developed a protocol to expand the application of the XF24 Analyzer to include isolated mitochondria. Acquisition of optimal rates requires assay conditions that are unexpectedly distinct from those of conventional polarography. The optimized conditions, derived from experiments with isolated mouse liver mitochondria, allow multi-well assessment of rates of respiration and proton production by mitochondria attached to the bottom of the XF assay plate, and require extremely small quantities of material (1-10 Âµg of mitochondrial protein per well). Sequential measurement of basal, State 3, State 4, and uncoupler-stimulated respiration can be made in each well through additions of reagents from the injection ports. We describe optimization and validation of this technique using isolated mouse liver and rat heart mitochondria, and apply the approach to discover that inclusion of phosphatase inhibitors in the preparation of the heart mitochondria results in a specific decrease in rates of Complex I-dependent respiration. We believe this new technique will be particularly useful for drug screening and for generating previously unobtainable respiratory data on small mitochondrial samples.

High throughput microplate respiratory measurements using minimal quantities of isolated mitochondria.

Technologies r&#xE9;cemment d&#xE9;velopp&#xE9;es ont permis multi-puits de mesure de O (2) la consommation, ce qui facilite le taux de la recherche mitochondriale, en particulier en ce qui concerne le m&#xE9;canisme d&#x26;#39;action des m&#xE9;dicaments et des prot&#xE9;ines qui modulent le m&#xE9;tabolisme. Parmi ces technologies, l&#x26;#39;analyseur de Seahorse XF24 a &#xE9;t&#xE9; con&#xE7;u pour &#xEA;tre utilis&#xE9; avec des cellules intactes attach&#xE9;s en une monocouche sur une plaque multi-puits de culture de tissu. Afin d&#x26;#39;avoir un syst&#xE8;me de dosage &#xE0; haut d&#xE9;bit dans lequel la demande d&#x26;#39;&#xE9;nergie et la disponibilit&#xE9; du substrat peuvent &#xEA;tre &#xE9;troitement contr&#xF4;l&#xE9;s, nous avons d&#xE9;velopp&#xE9; un protocole d&#x26;#39;&#xE9;tendre l&#x26;#39;application de l&#x26;#39;analyseur de XF24 pour inclure mitochondries isol&#xE9;es. Acquisition des taux optimaux n&#xE9;cessite des conditions d&#x26;#39;essai qui sont de fa&#xE7;on inattendue distincts de ceux de la polarographie classique. Les conditions optimis&#xE9;es, issues des exp&#xE9;riences avec du foie de souris mitochondries isol&#xE9;es, de permettre le multi-bien l&#x26;#39;&#xE9;valuation des taux de la respiration et la production de protons par joint mitochondries vers le bas de la plaque d&#x26;#39;essai XF, et n&#xE9;cessitent des quantit&#xE9;s extr&#xEA;mement faibles de mat&#xE9;riau (pg 1-10 de prot&#xE9;ine mitochondriale par puits). Mesure s&#xE9;quentielle de base, &#xC9;tat 3, &#xC9;tat 4, et d&#xE9;coupleur-stimul&#xE9; la respiration peut &#xEA;tre faite dans chaque puits gr&#xE2;ce &#xE0; l&#x26;#39;ajout de r&#xE9;actifs &#xE0; partir des ports d&#x26;#39;injection. Nous d&#xE9;crivons l&#x26;#39;optimisation et la validation de cette technique en utilisant le foie de souris isol&#xE9; et le c&#x153;ur de rat mitochondries, et d&#x26;#39;appliquer l&#x26;#39;approche de d&#xE9;couvrir que l&#x26;#39;inclusion d&#x26;#39;inhibiteurs de phosphatases dans la pr&#xE9;paration des r&#xE9;sultats mitochondries cardiaques dans une diminution des taux sp&#xE9;cifique du complexe I-d&#xE9;pendante la respiration. Nous croyons que cette nouvelle technique sera particuli&#xE8;rement utile pour le criblage de m&#xE9;dicaments et pour g&#xE9;n&#xE9;rer des donn&#xE9;es impossibles &#xE0; obtenir auparavant sur de petits &#xE9;chantillons respiratoires mitochondriales.

Hautes mesures de d&#xE9;bit respiratoire au moyen de microplaques des quantit&#xE9;s minimales de mitochondries isol&#xE9;es

Vor kurzem haben entwickelte Technologien erm&ouml;glicht multi-well Messung von O(2) Verbrauch, die Rate der mitochondrialen Forschung zu erleichtern, insbesondere hinsichtlich der Wirkmechanismus von Drogen und Proteine, die Stoffwechsel zu modulieren. Unter diesen Technologien wurde der Seahorse-XF24-Analyzer zur Verwendung mit intakten Zellen in eine Monolage ein multi-well Gewebe-Kultur-Kennzeichen angebracht entworfen. Um einen hohen Durchsatz-Testsystem in dem sowohl Energie-Nachfrage und Substrat-Verf&uuml;gbarkeit streng kontrolliert werden kann, haben wir ein Protokoll, um die Anwendung des XF24 Analyzer isolierte Mitochondrien zu erweitern entwickelt zu haben. Erwerb der optimale Preise erfordert Assay-Bedingungen, die unerwartet getrennt von denen der herk&ouml;mmlichen Polarographie sind. Die optimierten Bedingungen, abgeleitet von den Experimenten mit Leber isoliert Maus Mitochondrien, erm&ouml;glichen multi-well Bewertung der Preise der Atmung und der Proton-Produktion von Mitochondrien, die an der Unterseite der XF-Assay-Platte befestigt und extrem kleine Mengen von Material (1-10 &micro;g mitochondrial Protein pro Well) erfordern. Sequenzielle Messung der basal, State 3, Zustand 4 und Entkuppler stimuliert Atmung in jede Vertiefung durch Zus&auml;tze von Reagenzien von den H&auml;fen Injektion m&ouml;glich. Wir beschreiben, Optimierung und Validierung dieser Technik mit Leber isoliert Maus und Ratte Herz Mitochondrien, und wenden den Ansatz, dass die Aufnahme der Phosphatase-Inhibitoren bei der Vorbereitung des Herzen Mitochondrien ergibt einen spezifischen R&uuml;ckgang der Preise der komplexen-abh&auml;ngige Atmung zu entdecken. Wir glauben, dass diese neue Technik wird vor allem f&uuml;r Drogen-Screening und zum Generieren von zuvor unerreichbare Atemwege Daten auf kleine mitochondriale Proben.

Hochdurchsatz Microplatte Atemwege Messungen mit minimale Mengen an isolierten Mitochondrien.

Recentemente sviluppati tecnologie hanno permesso a piastre multi-pozzetto misurazione del consumo di apparato, facilitando la frequenza di ricerca mitocondriale, specialmente per quanto riguarda il meccanismo d&#39;azione dei farmaci e delle proteine che modulano il metabolismo. Tra queste tecnologie, il cavalluccio marino XF24 Analyzer &egrave; stato progettato per uso con cellule intatte attaccate in un monostrato ad una piastra di coltura del tessuto piastre multi-pozzetto. Al fine di avere un sistema di dosaggio ad alta velocit&agrave; effettiva in cui sia disponibilit&agrave; richiesta e substrato energetico pu&ograve; essere strettamente controllata, abbiamo sviluppato un protocollo per espandere l&#39;applicazione dell&#39;analizzatore XF24 per includere i mitocondri isolati. Acquisizione di tariffe ottimale richiede condizioni di dosaggio che sono inaspettatamente distinte da quelle di Polarografia convenzionale. Le condizioni ottimizzate, derivate da esperimenti con i mitocondri isolati mouse fegato, consentono piastre multi-pozzetto valutazione dei tassi di respirazione e di produzione di protoni da mitocondri attaccati al fondo della piastra di dosaggio XF e richiedono quantit&agrave; estremamente ridotte di materiale (1-10 &micro; g di proteina mitocondriale per pozzetto). Misurazione sequenziale di basale, stato 3, stato 4 e respirazione sono stimolati pu&ograve; essere fatto in ogni pozzetto attraverso aggiunte di reagenti dai porti di iniezione. Ci descrivono ottimizzazione e convalida di questa tecnica utilizzando il fegato di topo isolato e mitocondri di cuore di ratto e applicare l&#39;approccio per scoprire che l&#39;inclusione degli inibitori di fosfatasi nella preparazione dei risultati di mitocondri di cuore in una diminuzione nei tassi di respirazione-dipendente complessi specifico. Crediamo che questa nuova tecnica sar&agrave; particolarmente utile per lo screening di stupefacenti e per la generazione di dati precedentemente irraggiungibile respiratori su piccoli campioni mitocondriali.

High throughput micropiastra respiratoria misurazioni utilizzando minime quantit&agrave; di mitocondri isolati.

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Tecnolog&#xED;as desarrolladas recientemente han permitido m&#xFA;ltiples pocillos medici&#xF3;n de O (2) el consumo, lo que facilita la tasa de la investigaci&#xF3;n mitocondrial, particularmente con respecto al mecanismo de acci&#xF3;n de los f&#xE1;rmacos y las prote&#xED;nas que modulan el metabolismo. Entre estas tecnolog&#xED;as, el analizador Seahorse XF24 fue dise&#xF1;ado para uso con c&#xE9;lulas intactas unidos en una monocapa a una placa de tejido de m&#xFA;ltiples pocillos. Con el fin de tener un sistema de ensayo de rendimiento alto en el que puede ser tanto la demanda de energ&#xED;a y la disponibilidad de sustrato estrechamente controlada, hemos desarrollado un protocolo para ampliar la aplicaci&#xF3;n del Analizador XF24 para incluir las mitocondrias aisladas. Adquisici&#xF3;n de las tasas &#xF3;ptimas requiere de condiciones de ensayo que son inesperadamente distintos de los de la polarograf&#xED;a convencional. Las condiciones optimizadas, derivadas de los experimentos con h&#xED;gado de rat&#xF3;n mitocondrias aisladas, permiten m&#xFA;ltiples pocillos evaluaci&#xF3;n de las tasas de respiraci&#xF3;n y la producci&#xF3;n de protones por adjunto mitocondrias a la parte inferior de la placa de ensayo XF, y requieren cantidades muy peque&#xF1;as de material (1-10 microgramos de prote&#xED;na mitocondrial por pocillo). Medici&#xF3;n secuencial de basales, Estado 3, Estado 4, y desacoplador estimulada por la respiraci&#xF3;n puede hacerse en cada pocillo a trav&#xE9;s de las adiciones de reactivos de los orificios de inyecci&#xF3;n. Se describe la optimizaci&#xF3;n y validaci&#xF3;n de esta t&#xE9;cnica utilizando h&#xED;gado de rat&#xF3;n y el coraz&#xF3;n de rata aislado mitocondrias, y aplicar el enfoque para descubrir que la inclusi&#xF3;n de inhibidores de la fosfatasa en la preparaci&#xF3;n de los resultados del coraz&#xF3;n mitocondrias en una disminuci&#xF3;n espec&#xED;fica en las tasas de complejo I-dependiente respiraci&#xF3;n. Creemos que esta nueva t&#xE9;cnica ser&#xE1; especialmente &#xFA;til para la detecci&#xF3;n de drogas y para la generaci&#xF3;n de datos de las v&#xED;as respiratorias ya imposibles de conseguir en peque&#xF1;as muestras mitocondriales.

Article	Year
Monoclonal antibodies to lymphocyte surface antigens for cetacean homologues to CD2, CD19 and CD21. Veterinary immunology and immunopathology\| PubMed ID: 11777535	2002
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Enhanced TCR-induced apoptosis in interferon regulatory factor 4-deficient CD4(+) Th cells. The Journal of experimental medicine\| PubMed ID: 15249594	2004
Posttranscriptional downregulation of c-IAP2 by the ubiquitin protein ligase c-IAP1 in vivo. Molecular and cellular biology\| PubMed ID: 15798218	2005
Multiparameter metabolic analysis reveals a close link between attenuated mitochondrial bioenergetic function and enhanced glycolysis dependency in human tumor cells. American journal of physiology. Cell physiology\| PubMed ID: 16971499	2007
IL-17 producing gammadelta T cells are required for a controlled inflammatory response after bleomycin-induced lung injury. Inflammation\| PubMed ID: 18338242	2008
Advances in measuring cellular bioenergetics using extracellular flux. Drug discovery today\| PubMed ID: 18342804	2008
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Inhibition of fatty acid oxidation by etomoxir impairs NADPH production and increases reactive oxygen species resulting in ATP depletion and cell death in human glioblastoma cells. Biochimica et biophysica acta\| PubMed ID: 21075071	2010
A strategy for clone selection under different production conditions. Biotechnology progress\| PubMed ID: 21448991	2011
Inhibition of fatty acid oxidation by etomoxir impairs NADPH production and increases reactive oxygen species resulting in ATP depletion and cell death in human glioblastoma cells. Biochimica et biophysica acta\| PubMed ID: 21692241	2011
High throughput microplate respiratory measurements using minimal quantities of isolated mitochondria. PloS one\| PubMed ID: 21799747	2011

David A. Ferrick

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