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High-Efficiency Transduction of Liver Cancer Cells by Recombinant Adeno-Associated Virus Serotype 3 Vectors 

Recombinant vectors based on a non-pathogenic human parvovirus, the adeno-associated virus 2 (AAV2) have been developed, and are currently in use in a ...

University of Florida

&#x6D88;&#x9664;&#x7279;&#x5B9A;&#x8868;&#x9762;&#x66B4;&#x9732;&#x5355;&#x4E2A;&#x916A;&#x6C28;&#x9178; (Y) &#x6B8B;&#x7559;&#x7269;&#x53EF;&#x663E;&#x8457;&#x63D0;&#x9AD8;&#x809D;&#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x79FB;&#x4E0E;&#x817A;&#x76F8;&#x5173;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7C7B;&#x578B; 2 &#xFF08;AAV2&#xFF09; &#x8F7D;&#x4F53;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x5F3A;&#x5316;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x6548;&#x7387;&#x8BC4;&#x4EF7;&#x4E86;&#x7A81;&#x53D8;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E03;&#x4E2A;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x76F8;&#x5173; Y &#x6B8B;&#x7559;&#x7684;&#x7EC4;&#x5408;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53; capsids &#x6253;&#x5305;&#x5230;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x6548;&#x4EF7;&#x75C5;&#x6BD2;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x548C;&#x4FDD;&#x7559;&#x611F;&#x67D3;&#x529B;&#x3002;&#x4E09;&#x91CD;&#x7A81;&#x53D8; (Y444 + 500 + 730F&#xFF09; &#x77E2;&#x91CF;&#x4E00;&#x8D2F;&#x6709;&#x4F53;&#x5185;&#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x67D3;&#x5BF9;&#x5C0F;&#x9F20;&#x809D;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x6BD4;&#x6700;&#x4F73;&#x5355;-&#x7A81;&#x53D8;&#x548C; ~ 30-80 &#x500D;&#x9AD8;&#x4E0E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B; (WT) AAV2 capsids &#x76F8;&#x6BD4;&#x5927;&#x7EA6;&#x4E09;&#x500D;&#x66F4;&#x6709;&#x6548;&#x7684;&#x6700;&#x9AD8;&#x6C34;&#x5E73;&#x3002;&#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x79FB;&#x7684;&#x6539;&#x8FDB;&#x662F;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x5355;&#x7EDE;&#x57FA;&#x56E0;&#x817A;&#x76F8;&#x5173;&#x75C5;&#x6BD2; (ssAAV) &#x548C;&#x81EA;&#x6211;&#x8865;&#x5145;&#x7684;&#x817A;&#x76F8;&#x5173;&#x75C5;&#x6BD2; (scAAV) &#x5411;&#x91CF;&#xFF0C;&#x6307;&#x793A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5F71;&#x54CD;&#x72EC;&#x7ACB;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6027;&#x4E8C;&#x80A1; DNA &#x5408;&#x6210;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;Y730F &#x548C;&#x4E09;&#x7EA7;&#x8DF3;&#x8FDC;&#x7A81;&#x53D8;&#x8F7D;&#x4F53;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x56E0;&#x5B50; IX (hF.IX) &#x5728;&#x8840;&#x53CB;&#x75C5; B (HB) &#x5C0F;&#x9F20;&#x4E2D;&#x7684;&#x957F;&#x671F;&#x7597;&#x6548;&#x548C;&#x8010;&#x53D7;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x540E;&#x7BA1;&#x7406;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5411;&#x91CF;&#x7684;&#x5242;&#x91CF;&#x4E0E; WT AAV2 encapsidated &#x5411;&#x91CF;&#x7684;&#x5408;&#x6210;&#x548C;&#x77AC;&#x6001;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x4E2D;&#x7684;&#x552F;&#x4E00;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;&#x603B;&#x4E4B;&#xFF0C;&#x5728;&#x4EA7;&#x91CF;&#x81F3;&#x5C11; 30-fold &#x6539;&#x8FDB;&#x7684;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x8F7D;&#x4F53; AAV2 &#x8863;&#x58F3;&#x7ED3;&#x679C;&#x591A;&#x4E2A;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x7A81;&#x53D8;&#x5F15;&#x5165;&#x4ECE;&#x800C;&#x964D;&#x4F4E;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x5242;&#x91CF;&#x548C;&#x53EF;&#x80FD;&#x4E0E;&#x5411;&#x91CF;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x539F;&#x6027;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x8F7D;&#x4F53;&#x5E94;&#x5177;&#x5438;&#x5F15;&#x529B;&#x6CBB;&#x7597;&#x8840;&#x53CB;&#x75C5;&#x53CA;&#x5176;&#x4ED6;&#x9057;&#x4F20;&#x75BE;&#x75C5;&#x3002;

&#x9AD8;&#x6548;&#x7387;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x548C;&#x6821;&#x6B63;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x8840;&#x53CB;&#x75C5; B &#x4F7F;&#x7528;&#x6CA1;&#x6709;&#x591A;&#x4E2A;&#x8868;&#x9762;&#x66B4;&#x9732;&#x916A;&#x6C28;&#x9178; AAV2 &#x8F7D;&#x4F53;&#x3002;

Elimination of specific surface-exposed single tyrosine (Y) residues substantially improves hepatic gene transfer with adeno-associated virus type 2 (AAV2) vectors. Here, combinations of mutations in the seven potentially relevant Y residues were evaluated for further augmentation of transduction efficiency. These mutant capsids packaged viral genomes to similar titers and retained infectivity. A triple-mutant (Y444+500+730F) vector consistently had the highest level of in vivo gene transfer to murine hepatocytes, approximately threefold more efficient than the best single-mutants, and ~30-80-fold higher compared with the wild-type (WT) AAV2 capsids. Improvement of gene transfer was similar for both single-stranded AAV (ssAAV) and self-complementary AAV (scAAV) vectors, indicating that these effects are independent of viral second-strand DNA synthesis. Furthermore, Y730F and triple-mutant vectors provided a long-term therapeutic and tolerogenic expression of human factor IX (hF.IX) in hemophilia B (HB) mice after administration of a vector dose that only results in subtherapeutic and transient expression with WT AAV2 encapsidated vectors. In summary, introduction of multiple tyrosine-mutations into the AAV2 capsid results in vectors that yield at least 30-fold improvement of transgene expression, thereby lowering the required therapeutic dose and potentially vector-related immunogenicity. Such vectors should be attractive for treatment of hemophilia and other genetic diseases.

High-efficiency transduction and correction of murine hemophilia B using AAV2 vectors devoid of multiple surface-exposed tyrosines.

&#xC9;limination de sp&#xE9;cifiques expos&#xE9; en surface tyrosine seule (Y) sensiblement r&#xE9;sidus am&#xE9;liore le transfert de g&#xE8;nes de type h&#xE9;patique avec le virus ad&#xE9;no-associ&#xE9; 2 (AAV2) vecteurs. Ici, les combinaisons de mutations dans les sept r&#xE9;sidus Y potentiellement pertinents ont &#xE9;t&#xE9; &#xE9;valu&#xE9;s pour l&#x26;#39;extension de l&#x26;#39;efficacit&#xE9; de transduction. Ces mutants capsides emball&#xE9; g&#xE9;nomes viraux &#xE0; des titres d&#x26;#39;infectivit&#xE9; et similaires conserv&#xE9;s. Un triple-mutant (Y444 500 730 F) vecteur toujours eu le plus haut niveau de transfert de g&#xE8;ne in vivo &#xE0; des h&#xE9;patocytes murins, environ trois fois plus efficace que les meilleurs single-mutants, et ~ 30 &#xE0; 80 fois plus &#xE9;lev&#xE9;e par rapport &#xE0; la Nature (WT) capsides AAV2. Am&#xE9;lioration du transfert de g&#xE8;nes a &#xE9;t&#xE9; similaire pour les deux monocat&#xE9;naire AAV (ssAAV) et l&#x26;#39;auto-compl&#xE9;mentaires (AAV scAAV) vecteurs, ce qui indique que ces effets sont ind&#xE9;pendants de la synth&#xE8;se de l&#x26;#39;ADN viral second brin. En outre, Y730F et triple-mutants vecteurs fourni une expression th&#xE9;rapeutique &#xE0; long terme et tol&#xE9;rog&#xE8;ne du facteur IX humain (hF.IX) dans l&#x26;#39;h&#xE9;mophilie B (HB) des souris apr&#xE8;s l&#x26;#39;administration d&#x26;#39;une dose de vecteur que seuls les r&#xE9;sultats de l&#x26;#39;expression sous-th&#xE9;rapeutique et transitoires avec WT AAV2 vecteurs encapsid&#xE9;s. En r&#xE9;sum&#xE9;, l&#x26;#39;introduction de plusieurs tyrosine-mutations dans les r&#xE9;sultats AAV2 capside dans des vecteurs qui donnent au moins 30 fois l&#x26;#39;am&#xE9;lioration de l&#x26;#39;expression du transg&#xE8;ne, ce qui diminue la dose th&#xE9;rapeutique n&#xE9;cessaire et l&#x26;#39;immunog&#xE9;nicit&#xE9; potentiellement vecteur li&#xE9;. De tels vecteurs doivent &#xEA;tre attrayants pour le traitement de l&#x26;#39;h&#xE9;mophilie et d&#x26;#39;autres maladies g&#xE9;n&#xE9;tiques.

Haute-efficacit&#xE9; de la transduction et la correction de l&#x26;#39;h&#xE9;mophilie B murin utilisant AAV2 Vecteurs d&#xE9;pourvus de multiples expos&#xE9;s en surface tyrosines

Eliminaci&#xF3;n de la tirosina espec&#xED;ficos de superficie expuesta (Y) los residuos de mejora sustancialmente la transferencia g&#xE9;nica hep&#xE1;tica con el tipo de virus adeno-asociado 2 (AAV2) vectores. Aqu&#xED;, las combinaciones de mutaciones en los siete residuos Y potencialmente relevantes fueron evaluados para el aumento en la eficiencia de la transducci&#xF3;n. Estos mutantes c&#xE1;psidas envasados &#x200B;&#x200B;genomas virales a t&#xED;tulos similares y su infectividad retenido. Un triple mutante (Y444 500 730 F) de vectores tenido constantemente el mayor nivel de transferencia g&#xE9;nica in vivo de los hepatocitos de rat&#xF3;n, aproximadamente tres veces m&#xE1;s eficiente que la mejor medida &#xFA;nica mutantes, y ~ 30 a 80 veces mayor en comparaci&#xF3;n con su h&#xE1;bitat type (WT) AAV2 c&#xE1;psides. Mejora de la transferencia de genes es similar tanto para una sola cadena AAV (ssAAV) y la auto-complementarios vectores AAV (scAAV), lo que indica que estos efectos son independientes de la s&#xED;ntesis de ADN viral del segundo cap&#xED;tulo. Por otra parte, Y730F y los vectores de tres mutantes siempre una expresi&#xF3;n a largo plazo terap&#xE9;utico y tolerog&#xE9;nico de factor IX humano (hF.IX) en la hemofilia B (HB) en ratones despu&#xE9;s de la administraci&#xF3;n de una dosis de vector que s&#xF3;lo los resultados en la expresi&#xF3;n subterap&#xE9;uticas y transitorios con WT AAV2 vectores encapsulados. En resumen, la introducci&#xF3;n de m&#xFA;ltiples tirosina-mutaciones en los resultados AAV2 c&#xE1;pside en vectores que producen al menos 30 veces la mejora de la expresi&#xF3;n del transg&#xE9;n, reduciendo as&#xED; la dosis necesaria terap&#xE9;utico e inmunogenicidad potencialmente vectores relacionados. Tales vectores debe ser atractivo para el tratamiento de la hemofilia y otras enfermedades gen&#xE9;ticas.

Alta eficiencia de transducci&#xF3;n y correcci&#xF3;n de la hemofilia B murino Con AAV2 Vectores carentes de m&#xFA;ltiples expuestas en superficie tirosinas

Beseitigung der R&uuml;ckst&auml;nde der spezifischen Oberfl&auml;che exponierten einzelne Tyrosin (Y) verbessert deutlich die hepatische Gentransfer mit Adeno-assoziierte Virus Typ 2 (AAV2) Vektoren. Hier wurden Kombinationen von Mutationen in den sieben potenziell relevante Y-R&uuml;ckst&auml;nde f&uuml;r weitere Vermehrung des Transduktion Effizienz bewertet. Diese mutierten Capsids verpackt virale Genome, &auml;hnliche Titer und Infektiosit&auml;t beibehalten. Ein dreifach-Mutant (Y444 + 500 + 730F) Vektor hatte konsequent h&ouml;chste in-vivo Gentransfer in murinen Hepatozyten, etwa dreifach effizienter als die besten Einzel-Mutanten und ~ 30-80-Fach h&ouml;her gegen&uuml;ber dem Wildtyp (WT) AAV2 Capsids. Verbesserung des Gentransfers war bei einstr&auml;ngiger AAV (SsAAV) und selbst-erg&auml;nzende AAV (ScAAV)-Vektoren, die darauf hinweist, dass diese Effekte unabh&auml;ngig von viralen Sekunde-Strang-DNA-Synthese sind &auml;hnlich. Dar&uuml;ber hinaus zur Y730F und dreifach-Mutant Vektoren einen langfristigen therapeutischen und Tolerogenic Ausdruck der menschlichen Faktor IX (hF.IX) in H&auml;mophilie B (HB) M&auml;use, nachdem die Verwaltung eines Vektors Dosis, die nur Ergebnisse in subtherapeutic und vor&uuml;bergehende Ausdruck mit WT AAV2 Encapsidated Vektoren. Zusammenfassend, Einf&uuml;hrung von mehrere Tyrosin-Mutationen in der AAV2 Kapsid Ergebnisse in Vektoren, die mindestens 30-fold Verbesserung der Transgenexpression, ergeben senken somit die erforderlichen therapeutischen Dosis und potenziell Vektor-bezogene Immunogenit&auml;t. Solche Vektoren sollten zur Behandlung der H&auml;mophilie und andere Erbkrankheiten attraktiv sein.

Hocheffiziente Transduktion und Korrektur von murinen H&auml;mophilie B mit AAV2 Vektoren mehrere Oberfl&auml;che exponierten Tyrosines.

Eliminazione dei residui di tirosina singola superficie esposta specifico (Y) migliora sostanzialmente il trasferimento genico epatica con virus adeno-associati di tipo 2 (AAV2) vettori. Qui, combinazioni di mutazioni nei sette residui potenzialmente rilevanti Y sono state valutate per ulteriore aumento dell&#39;efficienza di trasduzione. Questi mutanti capsidi confezionato genomi virali per simili titoli e mantenuto infettivit&agrave;. Un vettore di triple-mutante (Y444 + 730F 500++) aveva costantemente il massimo livello di trasferimento genico in vivo di epatociti murini, circa triplice pi&ugrave; efficienti rispetto al miglior singolo-mutanti e ~ 30-80 volte superiore rispetto i capsidi AAV2 (WT) wild-type. Miglioramento del trasferimento del gene &egrave; stata simile per auto-complementare vettori di AAV (scAAV), che indica che questi effetti sono indipendenti della sintesi di DNA virale secondo-filo e single-stranded AAV (ssAAV). Inoltre, Y730F e triple-mutante vettori fornito un&#39;espressione terapeutica e tollerogenico a lungo termine di fattore IX (hF.IX) in topi di emofilia B (HB) dopo somministrazione di un vettore di dose che risultati solo nell&#39;espressione subterapeutiche e transitorio con WT AAV2 incapsidato vettori. In sintesi, introduzione di tirosina-mutazioni multiple nei risultati del capside AAV2 nei vettori che producono almeno 30-fold miglioramento dell&#39;espressione del transgene, quindi abbassare la dose terapeutica necessaria e potenzialmente correlati a vector immunogenicit&agrave;. Tali vettori dovrebbero essere attraente per il trattamento dell&#39;emofilia e altre malattie genetiche.

Ad alta efficienza trasduzione e correzione di murino emofilia B utilizzando vettori AAV2 privo di tirosine pi&ugrave; superficie esposta.

&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x9732;&#x51FA;&#x3057;&#x305F;&#x3001;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#xFF08;Y&#xFF09;&#x6B8B;&#x57FA;&#x306E;&#x9664;&#x53BB;&#x306F;&#x5B9F;&#x8CEA;&#x7684;&#x306B;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE;&#x968F;&#x4F34;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;2&#x578B;&#xFF08;AAV2&#xFF09;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x809D;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5C0E;&#x5165;&#x3092;&#x5411;&#x4E0A;&#x3055;&#x305B;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;7&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x306E;&#x3042;&#x308B;Y&#x6B8B;&#x57FA;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x306F;&#x3001;&#x5C0E;&#x5165;&#x52B9;&#x7387;&#x306E;&#x66F4;&#x306A;&#x308B;&#x5897;&#x5F37;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x30AD;&#x30E3;&#x30D7;&#x30B7;&#x30C9;&#x306F;&#x3001;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x529B;&#x4FA1;&#x3068;&#x4FDD;&#x6301;&#x3055;&#x308C;&#x611F;&#x67D3;&#x3059;&#x308B;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x3092;&#x30D1;&#x30C3;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x3002;&#x4E09;&#x91CD;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#xFF08;Y444 500 730 F&#xFF09;&#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x306F;&#x4E00;&#x8CAB;&#x3057;&#x3066;&#x7D04;3&#x500D;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x6700;&#x9AD8;&#x306E;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x30EB;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x809D;&#x7D30;&#x80DE;&#x3078;&#x306E;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5C0E;&#x5165;&#x3067;&#x306E;&#x6700;&#x9AD8;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x301C;30&#x304B;&#x3089;80&#x500D;&#x9AD8;&#x3044;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x578B;&#xFF08;WT&#xFF09;AAV2&#x30AD;&#x30E3;&#x30D7;&#x30B7;&#x30C9;&#x3002;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5C0E;&#x5165;&#x306E;&#x6539;&#x5584;&#x306F;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x4E8C;&#x672C;&#x9396;DNA&#x5408;&#x6210;&#x306E;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3001;&#x4E00;&#x672C;&#x9396;AAV&#xFF08;ssAAV&#xFF09;&#x3068;&#x81EA;&#x5DF1;&#x76F8;&#x88DC;&#x7684;AAV&#xFF08;scAAV&#xFF09;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306B;&#x985E;&#x4F3C;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;Y730F&#x3001;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D7;&#x30EB;&#x5909;&#x7570;&#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#xB7;&#x7528;&#x91CF;&#x306E;&#x6295;&#x4E0E;&#x5F8C;&#x3001;&#x8840;&#x53CB;&#x75C5;B&#xFF08;HB&#xFF09;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30D2;&#x30C8;&#x7B2C;IX&#x56E0;&#x5B50;&#xFF08;hF.IX&#xFF09;&#x306E;&#x9577;&#x671F;&#x6CBB;&#x7642;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x514D;&#x75AB;&#x5BDB;&#x5BB9;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x305F;WT AAV2&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x91CF;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x306E;&#x3068;&#x4E00;&#x904E;&#x6027;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306E;&#x307F;&#x30AB;&#x30D7;&#x30B7;&#x30C9;&#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x3002;&#x6982;&#x8981;&#x3001;&#x5C0E;&#x5165;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082;30&#x500D;&#x306E;&#x6539;&#x5584;&#x304C;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306B;AAV2&#x30AD;&#x30E3;&#x30D7;&#x30B7;&#x30C9;&#x7D50;&#x679C;&#x306B;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x5C0E;&#x5165;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x6CBB;&#x7642;&#x7528;&#x91CF;&#x3092;&#x524A;&#x6E1B;&#x3057;&#x3001;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x95A2;&#x9023;&#x514D;&#x75AB;&#x539F;&#x6027;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x8840;&#x53CB;&#x75C5;&#x3084;&#x305D;&#x306E;&#x4ED6;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x6027;&#x75BE;&#x60A3;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x9B45;&#x529B;&#x7684;&#x3067;&#x306A;&#x3051;&#x308C;&#x3070;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;

&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x9732;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x3092;&#x6B20;&#x3044;AAV2&#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x8840;&#x53CB;&#x75C5;B&#x306E;&#x9AD8;&#x52B9;&#x7387;&#x4F1D;&#x9054;&#x3068;&#x8A02;&#x6B63;

&#xD2B9;&#xC815; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C; &#xB41C; &#xB2E8;&#xC77C; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; (Y) &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC758; &#xC81C;&#xAC70;&#xB294; &#xC2E4;&#xC9C8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC04;&#xC7A5; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC804;&#xC1A1;&#xC744; &#xD5A5;&#xC0C1; adeno &#xC81C;&#xD734;&#xD574; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; 2 (AAV2) &#xACBD;&#xB85C; &#xC785;&#xB825; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, 7 &#xAC1C;&#xC758; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; Y &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC758; &#xC870;&#xD569; &#xBCC0;&#xD658; &#xD6A8;&#xC728;&#xC758; &#xCD94;&#xAC00; &#xD655;&#xB300;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; capsids &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; titers&#xC5D0; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xAC8C;&#xB188; &#xB418;&#xBA70; infectivity &#xC720;&#xC9C0;. &#xD2B8;&#xB9AC;&#xD50C;-&#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; (Y444 + 500 + 730F) &#xBCA1;&#xD130;&#xB294; &#xC77C;&#xAD00; &#xB418; &#xAC8C; murine hepatocytes, &#xC57D; &#xC0BC; &#xBC30; &#xB354; &#xCD5C;&#xACE0;&#xC758; &#xB2E8;&#xC77C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; ~ 30-80 &#xBC30; &#xB354; &#xB192;&#xC740; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; (WT) AAV2 capsids&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; in vivo &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC774;&#xB3D9;&#xC758; &#xAC00;&#xC7A5; &#xB192;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC744; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC774;&#xB3D9;&#xC758; &#xB2E8;&#xC77C; &#xAC00;&#xB2E5; AAV (ssAAV)&#xC640; &#xC790;&#xCCB4; &#xBCF4;&#xC644; AAV (scAAV) &#xBCA1;&#xD130;, &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD6A8;&#xACFC; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; 2 &#xAC00;&#xB2E5; DNA &#xD569;&#xC131;&#xC5D0; &#xAD00;&#xACC4; &#xC5C6;&#xC774; &#xBAA8;&#xB450; &#xBE44;&#xC2B7; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, Y730F &#xBC0F; &#xD2B8;&#xB9AC;&#xD50C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBCA1;&#xD130; &#xBCA1;&#xD130;&#xC758; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9; WT AAV2 encapsidated &#xBCA1;&#xD130;&#xC640; subtherapeutic &#xBC0F; &#xACFC;&#xB3C4; &#xC2DD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC77C;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xADF8; &#xD6C4; &#xD608;&#xC6B0;&#xBCD1; B (HB) &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC778;&#xAC04; &#xC778;&#xC790; IX (hF.IX)&#xC758; &#xC7A5;&#xAE30;&#xC801;&#xC778; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC640; tolerogenic &#xC2DD;&#xC5D0; &#xC81C;&#xACF5;. &#xC694;&#xC57D; &#xD558;&#xC790;&#xBA74;, &#xC801;&#xC5B4;&#xB3C4; 30-fold &#xAC1C;&#xC120; transgene &#xC2DD;&#xC758; &#xC591;&#xBCF4;&#xB294; &#xBCA1;&#xD130;&#xB97C; AAV2 capsid &#xACB0;&#xACFC;&#xC5D0; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0;-&#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC758; &#xB3C4;&#xC785; &#xD568;&#xC73C;&#xB85C;&#xC368; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xCE58;&#xB8CC; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9; &#xBC0F; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCA1;&#xD130; &#xAD00;&#xB828; immunogenicity &#xB0AE;&#xCD94;&#xB294;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBCA1;&#xD130; &#xD608;&#xC6B0;&#xBCD1;&#xACFC; &#xB2E4;&#xB978; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC9C8;&#xD658;&#xC758; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB9E4;&#xB825;&#xC774; &#xC788;&#xC5B4;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xACE0;&#xD6A8;&#xC728; &#xBCC0;&#xD658; &#xBC0F; murine &#xD608;&#xC6B0;&#xBCD1; B&#xC758; &#xAD50;&#xC815; &#xC5C6;&#xB294; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xD45C;&#xBA74; &#xB178;&#xCD9C; tyrosines AAV2 &#xBCA1;&#xD130;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;.

&#x817A;&#x76F8;&#x5173;&#x75C5;&#x6BD2; (&#x817A;&#x76F8;&#x5173;&#x75C5;&#x6BD2;&#xFF09; &#x4F53;&#x5185;&#x4EA4;&#x4ED8;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x66FF;&#x4EE3;&#x7597;&#x6CD5;&#x662F;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5404;&#x79CD;&#x9057;&#x4F20;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x6F5C;&#x5728;&#x6CBB;&#x7597;&#x6709;&#x5438;&#x5F15;&#x529B;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x817A;&#x76F8;&#x5173;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5DF2;&#x5728;&#x8BB8;&#x591A;&#x6A21;&#x578B;&#x4E2D;&#x6210;&#x529F;&#x4F7F;&#x7528;&#xFF0C;&#x5176;&#x4ED6;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5728;&#x4E34;&#x5E8A;&#x8BD5;&#x9A8C;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x5728;&#x52A8;&#x7269;&#x6A21;&#x578B;&#x4E2D;&#x53D7;&#x5230;&#x514D;&#x75AB;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x4E0D;&#x826F;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x817A;&#x76F8;&#x5173;&#x75C5;&#x6BD2;&#x514D;&#x75AB;&#x5B66;&#x6700;&#x8FD1;&#x7814;&#x7A76;&#x4FA7;&#x91CD;&#x4E8E;&#x8868;&#x8FBE;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6D88;&#x9664;&#x81EA;&#x9002;&#x5E94;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5148;&#x5929;&#x514D;&#x75AB;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x8FD8;&#x5177;&#x6709;&#x5173;&#x952E;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5728;&#x63D0;&#x793A;&#x6709;&#x5BB3;&#x7684;&#x81EA;&#x9002;&#x5E94;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x548C;&#x5411;&#x91CF;&#x7684;&#x521D;&#x6B65;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x817A;&#x76F8;&#x5173;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8F7D;&#x4F53;&#x7684;&#x56DE;&#x5E94;&#x4E3B;&#x8981;&#x4ECB;&#x5BFC; TLR9 MyD88 &#x901A;&#x8DEF;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x6FC0;&#x6D3B; NF-&kappa; B &#x901A;&#x8DEF;&#x548C;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x708E;&#x75C7;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x7684;&#x751F;&#x4EA7;&#x7684; I &#x578B;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;&#x751F;&#x4EA7; &#xFF1B;&#x81EA;&#x6211;&#x8865;&#x5145;&#x817A;&#x76F8;&#x5173;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8F7D;&#x4F53;&#x589E;&#x5F3A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x708E;&#x75C7;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x66FF;&#x4EE3;&#x7684; NF-&kappa; B &#x901A;&#x8DEF;&#x5F71;&#x54CD;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x817A;&#x76F8;&#x5173;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x3002;&#x8FD9;&#x6B21;&#x5BA1;&#x67E5;&#x7A81;&#x51FA;&#x4E86;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6700;&#x8FD1;&#x53D1;&#x73B0;&#x5173;&#x4E8E;&#x56FA;&#x6709;&#x7684;&#x817A;&#x76F8;&#x5173;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#xFF0C;&#x5E76;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x4E86; ablate &#x8FD9;&#x4E9B;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x6709;&#x5BB3;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4F20;&#x5BFC;&#x901A;&#x8DEF;&#x7684;&#x6218;&#x7565;&#x3002;

&#x817A;&#x76F8;&#x5173;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8F7D;&#x4F53;&#x5BF9;&#x56FA;&#x6709;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;

Gene replacement therapy by in vivo delivery of adeno-associated virus (AAV) is attractive as a potential treatment for a variety of genetic disorders. However, while AAV has been used successfully in many models, other experiments in clinical trials and in animal models have been hampered by undesired responses from the immune system. Recent studies of AAV immunology have focused on the elimination of transgene-expressing cells by the adaptive immune system, yet the innate immune system also has a critical role, both in the initial response to the vector and in prompting a deleterious adaptive immune response. Responses to AAV vectors are primarily mediated by the TLR9-MyD88 pathway, which induces the production of pro-inflammatory cytokines by activating the NF-ÎºB pathways and inducing type I IFN production; self-complementary AAV vectors enhance these inflammatory processes. Additionally, the alternative NF-ÎºB pathway influences transgene expression in cells transduced by AAV. This review highlights these recent discoveries regarding innate immune responses to AAV and discusses strategies to ablate these potentially detrimental signaling pathways.

Innate Immune Responses to AAV Vectors.

La terapia g&#xE9;nica de reemplazo por el suministro in vivo de virus adeno-asociado (AAV) es atractivo como un tratamiento potencial para una gran variedad de trastornos gen&#xE9;ticos. Sin embargo, mientras que AAV ha sido utilizado con &#xE9;xito en muchos modelos, otros experimentos en los ensayos cl&#xED;nicos y en modelos animales se han visto obstaculizados por las respuestas no deseadas del sistema inmune. Estudios recientes de la inmunolog&#xED;a AAV se han centrado en la eliminaci&#xF3;n de los transgenes que expresan las c&#xE9;lulas por el sistema inmune adaptativo, sin embargo, el sistema inmunitario innato tambi&#xE9;n tiene un papel fundamental, tanto en la respuesta inicial al vector y que provoc&#xF3; una nociva respuesta inmune adaptativa. Las respuestas a vectores AAV est&#xE1;n mediadas principalmente por la v&#xED;a TLR9-MyD88, que induce la producci&#xF3;n de citoquinas pro-inflamatorias mediante la activaci&#xF3;n de las v&#xED;as del NF-kB y la inducci&#xF3;n de la producci&#xF3;n de IFN tipo I, la auto-complementarios vectores AAV mejorar estos procesos inflamatorios. Adicionalmente, la alternativa de NF-kB v&#xED;a influye en la expresi&#xF3;n del transg&#xE9;n en las c&#xE9;lulas transducidas por AAV. Esta revisi&#xF3;n destaca los recientes descubrimientos sobre la respuesta inmune innata a la AAV y discute estrategias para la ablaci&#xF3;n de estas v&#xED;as de se&#xF1;alizaci&#xF3;n potencialmente perjudiciales.

La respuesta inmune innata a los vectores AAV

Th&#xE9;rapie de remplacement g&#xE9;nique par l&#x26;#39;administration in vivo de virus ad&#xE9;no-associ&#xE9; (AAV) est attrayant en tant que traitement potentiel pour une vari&#xE9;t&#xE9; de troubles g&#xE9;n&#xE9;tiques. Cependant, alors que l&#x26;#39;AAV a &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9; avec succ&#xE8;s dans de nombreux mod&#xE8;les, d&#x26;#39;autres exp&#xE9;riences dans les essais cliniques et dans des mod&#xE8;les animaux ont &#xE9;t&#xE9; entrav&#xE9;s par des r&#xE9;ponses ind&#xE9;sirables du syst&#xE8;me immunitaire. Des &#xE9;tudes r&#xE9;centes de l&#x26;#39;immunologie AAV ont mis l&#x26;#39;accent sur l&#x26;#39;&#xE9;limination de cellules exprimant le transg&#xE8;ne par le syst&#xE8;me immunitaire adaptatif, mais le syst&#xE8;me immunitaire inn&#xE9; a &#xE9;galement un r&#xF4;le essentiel, tant dans la r&#xE9;ponse initiale au vecteur et en d&#xE9;clenchant une r&#xE9;ponse immunitaire adaptative d&#xE9;l&#xE9;t&#xE8;re. Les r&#xE9;ponses &#xE0; des vecteurs AAV sont principalement m&#xE9;di&#xE9;e par la voie de TLR9-MyD88, qui induit la production de cytokines pro-inflammatoires par l&#x26;#39;activation des voies NF-kB et induire la production d&#x26;#39;IFN de type I, l&#x26;#39;auto-compl&#xE9;mentaires vecteurs AAV am&#xE9;liorer ces processus inflammatoires. En outre, l&#x26;#39;alternative la voie NF-kB influence l&#x26;#39;expression du transg&#xE8;ne dans les cellules transduites par AAV. Cette &#xE9;tude met en lumi&#xE8;re ces d&#xE9;couvertes r&#xE9;centes concernant les r&#xE9;ponses immunitaires inn&#xE9;es pour AAV et discute des strat&#xE9;gies pour l&#x26;#39;ablation de ces voies de signalisation potentiellement n&#xE9;fastes.

R&#xE9;ponses immunitaires inn&#xE9;es pour les vecteurs AAV

Gen-Ersatz-Therapie durch in-vivo Lieferung des Adeno-assoziierte Virus (AAV) ist attraktiv als potenzielle Behandlung f&uuml;r eine Vielzahl von genetischen Erkrankungen. Jedoch w&auml;hrend AAV erfolgreich in vielen Modellen verwendet wurde, haben andere Experimente in klinischen Studien und in Tiermodellen durch unerw&uuml;nschte Reaktionen des Immunsystems behindert. J&uuml;ngste Studien der AAV Immunologie konzentrierten sich auf die Beseitigung der Transgene Ausdruck Zellen durch das adaptive Immunsystem, doch das angeborene Immune System hat auch eine entscheidende Rolle sowohl in der ersten Reaktion auf den Vektor Aufforderung eine vernichtende adaptive Immunantwort. Antworten zu AAV Vektoren sind in erster Linie durch die TLR9-MyD88-Pathway, die die Produktion von Pro-inflammatorische Zytokine bedingt durch Aktivierung des NF-&kappa;B-Wege und induzierende vermittelte Typ I IFN-Produktion; selbst-erg&auml;nzende AAV-Vektoren verbessern diese entz&uuml;ndliche Prozesse. Dar&uuml;ber hinaus beeinflusst die alternative NF-&kappa;B-Signalweg Transgenexpression in Zellen von AAV ausgestrahlt. Diesen Bericht unterstreicht diese Neuentdeckungen &uuml;ber angeborene Immune Antworten zu AAV und erl&auml;utert Strategien, um diese m&ouml;glicherweise nachteilige Signalwege zu entfernen.

Angeborene Immune Antworten zu AAV Vektoren.

Terapia sostitutiva gene dalla consegna in vivo di virus adeno-associati (AAV) &egrave; attraente come un potenziale trattamento per una variet&agrave; di disordini genetici. Tuttavia, mentre AAV &egrave; stato utilizzato con successo in molti modelli, altri esperimenti in studi clinici e in modelli animali sono stati ostacolati da indesiderati risposte del sistema immunitario. Recenti studi di immunologia AAV si sono concentrati sull&#39;eliminazione delle cellule che esprimono transgene dal sistema immunitario adattativo, eppure il sistema immunitario innato ha anche un ruolo fondamentale sia nella risposta iniziale al vettore inducendo una deleteria risposta immunitaria adattativa. Risposte ai vettori di AAV sono principalmente mediate dal pathway TLR9-MyD88, che induce la produzione di citochine pro-infiammatorie attivando i percorsi di NF-&kappa;B e indurre di tipo produzione di IFN; auto-complementare vettori AAV migliorano questi processi infiammatori. Inoltre, la via alternativa di NF-&kappa;B influenze espressione del transgene in cellule transduced di AAV. Questa recensione mette in evidenza queste recenti scoperte per quanto riguarda la risposta immunitaria innata di AAV e discute delle strategie per ablazione queste vie di segnalazione potenzialmente dannosi.

Risposta immunitaria innata per i vettori di AAV.

&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE;&#x968F;&#x4F34;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#xFF08;AAV&#xFF09;&#x306E;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x9001;&#x9054;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x88DC;&#x5145;&#x7642;&#x6CD5;&#x306F;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x6027;&#x75BE;&#x60A3;&#x306E;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x6CBB;&#x7642;&#x6CD5;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x9B45;&#x529B;&#x7684;&#x3067;&#x3059;&#x3002; AAV&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3067;&#x6B63;&#x5E38;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x81E8;&#x5E8A;&#x8A66;&#x9A13;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x52D5;&#x7269;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x4ED6;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306F;&#x3001;&#x514D;&#x75AB;&#x7CFB;&#x304B;&#x3089;&#x671B;&#x307E;&#x3057;&#x304F;&#x306A;&#x3044;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x59A8;&#x3052;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; AAV&#x514D;&#x75AB;&#x5B66;&#x306E;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x9069;&#x5FDC;&#x514D;&#x75AB;&#x7CFB;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5C0E;&#x5165;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x9664;&#x53BB;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x81EA;&#x7136;&#x514D;&#x75AB;&#x7CFB;&#x306B;&#x7126;&#x70B9;&#x3092;&#x5F53;&#x3066;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x306B;&#x3082;&#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x306B;&#x521D;&#x671F;&#x5FDC;&#x7B54;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6709;&#x5BB3;&#x306A;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x4FC3;&#x3059;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3067;&#x3001;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x708E;&#x75C7;&#x6027;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x5F37;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x81EA;&#x5DF1;&#x76F8;&#x88DC;&#x7684;AAV&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x3001;AAV&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306F;&#x3001;&#x4E3B;&#x306B;NF-&#x3BA;B&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3057;&#x3001;I&#x578B;IFN&#x306E;&#x7523;&#x751F;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x708E;&#x75C7;&#x6027;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x7523;&#x751F;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;TLR9-MyD88&#x306B;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x5225;&#x306E;NF-&#x3BA;B&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306F;&#x3001;AAV&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5C0E;&#x5165;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x200B;&#x200B;&#x4E0E;&#x3048;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30EC;&#x30D3;&#x30E5;&#x30FC;&#x306F;AAV&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x81EA;&#x7136;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x767A;&#x898B;&#x306B;&#x7126;&#x70B9;&#x3092;&#x5F53;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306B;&#x6709;&#x5BB3;&#x306A;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x713C;&#x707C;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6226;&#x7565;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

AAV&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x81EA;&#x7136;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;

&#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xB300;&#xCCB4; &#xC694;&#xBC95; adeno &#xC81C;&#xD734;&#xD574; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (AAV)&#xC758; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC30;&#xB2EC; &#xD558; &#xC5EC; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC720;&#xC804; &#xC9C8;&#xD658;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xCE58;&#xB8CC;&#xB85C; &#xB9E4;&#xB825;&#xC801; &#xC774;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, AAV &#xB9CE;&#xC740; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0; &#xC131;&#xACF5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;, &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xB2E4;&#xB978; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC784;&#xC0C1; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xBC0F; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6D0;&#xCE58; &#xC54A;&#xB294; &#xC751;&#xB2F5; &#xBC29;&#xD574; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xB2E4;. AAV &#xBA74;&#xC5ED;&#xD559;&#xC758; &#xCD5C;&#xADFC; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xC801;&#xC751;&#xD615; &#xBA74;&#xC5ED; &#xCCB4;&#xACC4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; transgene &#xD45C;&#xD604; &#xC140;&#xC758; &#xC81C;&#xAC70;&#xC5D0; &#xCD08;&#xC810;&#xC744; &#xC544;&#xC9C1; &#xD0C0;&#xACE0; &#xB09C; &#xBA74;&#xC5ED; &#xCCB4;&#xACC4; &#xB610;&#xD55C; &#xBCA1;&#xD130;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCD08;&#xAE30; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC0F; &#xD574;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC801;&#xD569; &#xD55C; &#xBA74;&#xC5ED; &#xBC18;&#xC751; &#xC790;&#xADF9;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD588;&#xB2E4;. AAV &#xBCA1;&#xD130;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC740; &#xC8FC;&#xB85C; TLR9 MyD88 &#xD1B5;&#xB85C;, NF-&kappa;B &#xACBD;&#xB85C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558; &#xACE0; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558; &#xC5EC; &#xD504;&#xB85C; &#xC5FC;&#xC99D; &#xC131; cytokines&#xC758; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558; &#xC5EC; &#xC911;&#xC7AC; &#xC720;&#xD615; I IFN &#xC0DD;&#xC0B0;; &#xC790;&#xCCB4; &#xBCF4;&#xC644; AAV &#xBCA1;&#xD130; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5FC;&#xC99D; &#xC131; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; &#xD5A5;&#xC0C1;. &#xB610;&#xD55C;, &#xB300;&#xCCB4; NF &kappa;B &#xD1B5;&#xB85C; transgene &#xC2DD;&#xC744; AAV&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBD88;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC140;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xAC80;&#xD1A0;&#xB294; AAV &#xD0C0;&#xACE0; &#xB09C; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0; &#xAD00;&#xD55C; &#xCD5C;&#xADFC;&#xC758; &#xBC1C;&#xACAC;&#xC774; &#xAC15;&#xC870; &#xD558; &#xACE0; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD574;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC2E0;&#xD638; &#xACBD;&#xB85C; &#xC808;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xC804;&#xB7B5;&#xC5D0; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Article	Year
High-efficiency transduction and correction of murine hemophilia B using AAV2 vectors devoid of multiple surface-exposed tyrosines. Molecular therapy : the journal of the American Society of Gene Therapy\| PubMed ID: 20736929	2010
Innate Immune Responses to AAV Vectors. Frontiers in microbiology\| PubMed ID: 21954398	2011

George V. Aslanidi

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