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Separating Beads and Cells in Multi-channel Microfluidic Devices Using Dielectrophoresis and Laminar Flow

Microfluidic devices have advanced cell studies by providing a dynamic fluidic environment on the scale of the cell for studying, manipulating, sorting ...

University of Illinois at Urbana-Champaign

Dispositivi microfluidici sono stati usati per studiare le culture ad alta densit&agrave; di molti tipi di cellule. Perch&eacute; a cella di segnalazione &egrave; locale, tuttavia, esiste una necessit&agrave; di sviluppare sistemi di coltura che sostengono un piccolo numero di neuroni e attivare l&#39;analisi dei microambienti. Tali colture sono difficili da mantenere in forma stabile, ed &egrave; difficile evitare la morte cellulare quando usando neuroni primari dei mammiferi. Dimostriamo che postnatali neuroni hippocampal primari da rat possono essere messi in coltura a bassa densit&agrave; all&#39;interno del volume nanolitro microdevices fabbricato utilizzando il polidimetilsilossano (PDMS). In questo modo richiede un passo ulteriore fabbricazione, seriale estrazioni/lavaggi di PDMS con diversi solventi, che rimuove gli oligomeri reticolato, solvente e residui di catalizzatore di platino usato per curare il polimero. Abbiamo trovato che questo passaggio migliora significativamente la biocompatibilit&agrave; dei dispositivi PDMS. Considerando che i neuroni sopravvivono per &amp;gt; o = 7 giorni nel canale aperto microdevices, la capacit&agrave; di neuroni cultura nel canale chiuso dispositivi composto non trattato, nativi PDMS &egrave; limitata a &lt; o = 2 giorni. Quando vengono estratti i dispositivi PDMS canale chiuso, biocompatibilit&agrave; migliora permettendo per culture neurone affidabile a bassa densit&agrave; per &amp;gt; o = 7 giorni. I confronti eseguiti PDMS sterilizzati in autoclave e nativo, non trattata PDMS rivelano che il polimero solvente trattati &egrave; superiore nel sostenere le basse densit&agrave; di neuroni primari nella cultura. Quando un neurone affinit&agrave; per i substrati locali &egrave; osservato direttamente, troviamo che assoni localizzare per angoli del canale e preferiscono PDMS le superfici di vetro per dispositivi ibridi. Quando la perfusione dei canali con media di flusso di gravit&agrave;, i neuroni ippocampali colti sopravvivono per &amp;gt; o = 11 giorni. L&#39;estrazione PDMS migliora la biocompatibilit&agrave; di dispositivi microfluidici e quindi permette lo studio della differenziazione dei neuroni identificabili e la caratterizzazione dei segnali extracellulari locale.

Dispositivi microfluidici per la coltura di neuroni primari dei mammiferi a bassa densit&agrave;.

Microfluidic Vorrichtungen sind benutzt worden, um High-Density Kulturen von vielen Zelltypen zu studieren. Da Signale von Zelle zu Zelle ist, gibt es jedoch m&uuml;ssen Kultur-Systeme entwickelt, die kleine Anzahl von Neuronen aufrechtzuerhalten und erm&ouml;glichen Analysen der Mikroumgebungen. Solche Kulturen sind schwer zu pflegen in stabile Form, und es ist schwierig, den Zelltod zu verhindern, dass bei der Verwendung von prim&auml;rer S&auml;ugetier-Neurons. Wir zeigen, dass postnatale prim&auml;re Neuronen von Ratten bei niedrigen dichten innerhalb Nanoliter-Volume Mikrovorrichtungen hergestellt mit Polydimethylsiloxan (PDMS) kultiviert werden k&ouml;nnen. Dies erfordert einen zus&auml;tzliche Fertigung Schritt, serielle Extraktionen/Waschprogramme von PDMS mit mehreren L&ouml;sungsmitteln, der unvernetzte Oligomere, L&ouml;sungsmittel und R&uuml;ckst&auml;nde von den Platinkatalysator verwendet, um das Polymer heilen entfernt. Wir fanden, dass dieser Schritt die Biokompatibilit&auml;t der PDMS-Ger&auml;te deutlich verbessert. W&auml;hrend die Neuronen &uuml;berleben &gt; oder = 7 Tage im offenen Kanal Mikrovorrichtungen, die F&auml;higkeit, Kultur-Neuronen im geschlossen-Channel-Ger&auml;te hergestellt aus unbehandeltem, native PDMS beschr&auml;nkt sich auf &lt; oder = 2 Tage. Wenn die geschlossen-Kanal PDMS Ger&auml;te extrahiert werden, Biokompatibilit&auml;t verbessert f&uuml;r zuverl&auml;ssige Neuron Kulturen bei niedrigen dichten f&uuml;r die &gt; oder = 7 Tage. Vergleiche autoklaviert PDMS und native, unbehandelt PDMS zeigen, dass das L&ouml;sungsmittel-behandelte Polymer bei der Aufrechterhaltung der niedrigen Dichte der prim&auml;ren Neuronen in Kultur &uuml;berlegen ist. Wenn neuronale Affinit&auml;t f&uuml;r lokale Substrate direkt beobachtet wird, finden wir, dass die Axone zu Kanal Ecken zu lokalisieren und PDMS-Oberfl&auml;chen auf Glas in Hybrid-Ger&auml;te bevorzugen. Wenn die Kan&auml;le mit Medien durch Schwerkraft Fluss perfusing, kultivierte Neuronen, die f&uuml;r &Uuml;berleben &gt; oder = 11 Tage. Extrahieren von PDMS Biokompatibilit&auml;t Microfluidic Vorrichtungen verbessert und erm&ouml;glicht dadurch das Studium der Differenzierung von identifizierbaren Neuronen und die Charakterisierung der lokalen extrazellul&auml;re Signale.

Microfluidic Vorrichtungen zur Kultivierung von prim&auml;rer S&auml;ugetier-Neurons bei niedrigen dichten.

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Microfluidic devices have been used to study high-density cultures of many cell types. Because cell-to-cell signaling is local, however, there exists a need to develop culture systems that sustain small numbers of neurons and enable analyses of the microenvironments. Such cultures are hard to maintain in stable form, and it is difficult to prevent cell death when using primary mammalian neurons. We demonstrate that postnatal primary hippocampal neurons from rat can be cultured at low densities within nanoliter-volume microdevices fabricated using polydimethylsiloxane (PDMS). Doing so requires an additional fabrication step, serial extractions/washes of PDMS with several solvents, which removes uncrosslinked oligomers, solvent and residues of the platinum catalyst used to cure the polymer. We found this step improves the biocompatibility of the PDMS devices significantly. Whereas neurons survive for > or = 7 days in open channel microdevices, the ability to culture neurons in closed-channel devices made of untreated, native PDMS is limited to < or = 2 days. When the closed-channel PDMS devices are extracted, biocompatibility improves allowing for reliable neuron cultures at low densities for > or = 7 days. Comparisons made to autoclaved PDMS and native, untreated PDMS reveal that the solvent-treated polymer is superior in sustaining low densities of primary neurons in culture. When neuronal affinity for local substrates is observed directly, we find that axons localize to channel corners and prefer PDMS surfaces to glass in hybrid devices. When perfusing the channels with media by gravity flow, cultured hippocampal neurons survive for > or = 11 days. Extracting PDMS improves biocompatibility of microfluidic devices and thus enables the study of differentiation of identifiable neurons and the characterization of local extracellular signals.

Microfluidic devices for culturing primary mammalian neurons at low densities.

Dispositifs microfluidiques ont &eacute;t&eacute; utilis&eacute;s pour &eacute;tudier les cultures &agrave; haute densit&eacute; de nombreux types de cellules. Parce que la cellule-cellule signalisation est locale, cependant, il existe un besoin de d&eacute;velopper des syst&egrave;mes de culture qui soutiennent un petit nombre de neurones et de permettent des analyses des microenvironnements. Ces cultures sont difficiles &agrave; maintenir dans une forme stable, et il est difficile de pr&eacute;venir la mort cellulaire lors de l&#39;utilisation des neurones primaires chez les mammif&egrave;res. Nous d&eacute;montrons que postnatals primaires neurones de l&#39;hippocampe du rat peuvent &ecirc;tre cultiv&eacute;es &agrave; de faibles densit&eacute;s dans microdevices nanolitre-volume fabriqu&eacute;es &agrave; l&#39;aide de polydim&eacute;thylsiloxane (PDMS). Ce faisant n&eacute;cessite une &eacute;tape de fabrication suppl&eacute;mentaires, s&eacute;ries extractions/lavages du PDMS avec plusieurs solvants, qui supprime les oligom&egrave;res d&#39;angles, de solvant et de r&eacute;sidus du catalyseur platine utilis&eacute; pour soigner le polym&egrave;re. Nous avons trouv&eacute; que cette &eacute;tape am&eacute;liore de mani&egrave;re significative la biocompatibilit&eacute; des dispositifs PDMS. Consid&eacute;rant que les neurones survivent pour &gt; ou = 7 jours en canal ouvert microdevices, la capacit&eacute; de neurones de la culture dans des dispositifs de canal ferm&eacute; en PDMS non trait&eacute;e, natif est limit&eacute;e &agrave; &lt; ou = 2 jours. Lorsque les dispositifs PDMS voies ferm&eacute;es sont extraites, biocompatibilit&eacute; am&eacute;liore permettant aux cultures de neurones fiable &agrave; faible densit&eacute; pour &gt; ou = 7 jours. Comparaisons PDMS autoclav&eacute; et PDMS indig&egrave;ne, non trait&eacute;s r&eacute;v&egrave;lent que le polym&egrave;re impr&eacute;gn&eacute;es de solvant est sup&eacute;rieur dans le maintien de faibles densit&eacute;s des neurones en culture primaire. Lorsque l&#39;affinit&eacute; neuronale pour substrats les est observ&eacute;e directement, nous trouvons que les axones localiser aux coins de canal et pr&eacute;f&egrave;rent les surfaces de verre dans les dispositifs hybrides PDMS. Perfusant les canaux avec les m&eacute;dias par &eacute;coulement gravitaire, neurones hippocampal cultiv&eacute;s survivent pour &gt; ou = 11 jours. Extraction de PDMS am&eacute;liore la biocompatibilit&eacute; des dispositifs microfluidiques et permet ainsi l&#39;&eacute;tude de la diff&eacute;renciation des neurones identifiables et la caract&eacute;risation des signaux extracellulaires locaux.

Dispositifs microfluidiques pour la culture des neurones chez les mammif&egrave;res primaires &agrave; faible densit&eacute;.

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&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7; PDMS &#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x306E;&#x751F;&#x4F53;&#x9069;&#x5408;&#x6027;&#x304C;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x5411;&#x4E0A;&#x304C;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3092;&#x751F;&#x304D;&#x6B8B;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x76EE;&#x307E;&#x305F;&#x306F; = 7 &#x65E5;&#x30AA;&#x30FC;&#x30D7;&#x30F3; &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; &#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x3067;&#x6587;&#x5316;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x672A;&#x51E6;&#x7406;&#x3001;&#x30CD;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6; PDMS &#x88FD;&#x9589;&#x9396;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB; &#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x9650;&#x5B9A;&#x3067;&#x3059; &lt; &#x307E;&#x305F;&#x306F; = 2 &#x65E5;&#x3002;&#x9589;&#x3058;&#x305F;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB; PDMS &#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x304C;&#x62BD;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3068;&#x304D;&#x3001;&#x4FE1;&#x983C;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x6587;&#x5316;&#x306E;&#x4F4E;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x751F;&#x4F53;&#x9069;&#x5408;&#x6027;&#x3092;&#x5411;&#x4E0A;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x76EE;&#x307E;&#x305F;&#x306F; 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PDMS &#x8868;&#x9762;&#x3092;&#x597D;&#x3080;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x898B;&#x3064;&#x3051;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x91CD;&#x529B;&#x6D41;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30E1;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x306E;&#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3092; perfusing &#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x304D;&#x306F;&#x3001;&#x57F9;&#x990A;&#x6D77;&#x99AC;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x751F;&#x5B58;&#x76EE;&#x307E;&#x305F;&#x306F; = 11 &#x65E5;&#x3002;PDMS &#x62BD;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x306E;&#x751F;&#x4F53;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x304C;&#x5411;&#x4E0A;&#x3057;&#x3001;&#x8B58;&#x5225;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3068;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EB;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x306E;&#x30AD;&#x30E3;&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30EA;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x4F4E;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x3067;&#x4E00;&#x6B21;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x57F9;&#x990A;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x3002;

&#xB9CE;&#xC740; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xD615;&#xC758; &#xACE0;&#xBC00;&#xB3C4; &#xBB38;&#xD654; &#xACF5;&#xBD80; &#xD558; &#xACB0;&#xD569; &#xC7A5;&#xCE58; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xC140; &#xC2E0;&#xD638; &#xC9C0;&#xC5ED; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0;,,&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC791;&#xC740; &#xC22B;&#xC790;&#xB97C; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558; &#xACE0;&#xB294; microenvironments&#xC758; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xAC00;&#xB2A5; &#xD558; &#xAC8C; &#xD558;&#xB294; &#xBB38;&#xD654; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xD560; &#xD544;&#xC694;&#xAC00;. &#xAC19;&#xC740; &#xBB38;&#xD654;&#xB294; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xD615;&#xD0DC;&#xB85C; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xAE30; &#xD798;&#xB4E4; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC774;&#xC6A9;&#xC2DC; &#xAE30;&#xBCF8; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xB274;&#xB7F0; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC744; &#xBC29;&#xC9C0; &#xD558;&#xAE30; &#xC5B4;&#xB835;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xADF8; &#xC0B0; &#xD6C4; &#xAE30;&#xBCF8; hippocampal &#xB274;&#xB7F0; &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; nanoliter&#xC758; &#xB300;&#xC6A9;&#xB7C9; microdevices polydimethylsiloxane (PDMS)&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC870;&#xC791; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB0AE;&#xC740; &#xBC00;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD50;&#xC591; &#xC218; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB807;&#xAC8C; &#xCD94;&#xAC00; &#xC81C;&#xC870; &#xB2E8;&#xACC4;&#xAC00;, &#xC9C1;&#xB82C; &#xCD94;&#xCD9C;/&#xC138;&#xCC99; PDMS&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC6A9; &#xB9E4;&#xC640; uncrosslinked &#xC62C;&#xB9AC;&#xACE0;, &#xC6A9; &#xB9E4; &#xBC0F; &#xACE0;&#xBD84;&#xC790;&#xB97C; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xBC31; &#xAE08; &#xCD09;&#xB9E4;&#xC758; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC744; &#xC81C;&#xAC70; &#xD558;&#xB294; &#xD544;&#xC694;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294;&#xC774; &#xB2E8;&#xACC4;&#xB294; &#xD06C;&#xAC8C; PDMS &#xB514;&#xBC14;&#xC774;&#xC2A4;&#xC758; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC801;&#xD569;&#xC131;&#xC744; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xBC18;&#xBA74; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xC874;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &amp;gt; = 7 &#xC77C; &#xB610;&#xB294; &#xC624;&#xD508; &#xCC44;&#xB110; microdevices &#xBB38;&#xD654; &#xC2E0;&#xACBD; &#xCE58;&#xB8CC;, &#xB124;&#xC774;&#xD2F0;&#xBE0C; PDMS&#xC758; &#xB9CC;&#xB4E0; &#xD3D0;&#xC1C4; &#xCC44;&#xB110; &#xC7A5;&#xCE58;&#xC5D0; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xB2A5;&#xB825;&#xC740; &#xC81C;&#xD55C; &lt; &#xB610;&#xB294; = 2 &#xC77C;. &#xB2EB;&#xD78C; &#xCC44;&#xB110; PDMS &#xB514;&#xBC14;&#xC774;&#xC2A4;&#xC758; &#xC555;&#xCD95;&#xC744; &#xD480; &#xB54C; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC801;&#xD569;&#xC131; &#xD5A5;&#xC0C1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB0AE;&#xC740; &#xBC00;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E0;&#xB8B0;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC2E0;&#xACBD; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD5C8;&#xC6A9; &amp;gt; = 7 &#xC77C; &#xB610;&#xB294;. &#xC0DD;&#xC131;&#xBB3C; PDMS &#xBC0F; &#xB124;&#xC774;&#xD2F0;&#xBE0C;, &#xCE58;&#xB8CC; PDMS &#xBE44;&#xAD50; &#xACF5;&#xAC1C; &#xC6A9; &#xB9E4; &#xCC98;&#xB9AC; &#xD3F4;&#xB9AC;&#xBA38; &#xBB38;&#xD654; &#xC8FC; &#xB274;&#xB7F0;&#xC758; &#xB0AE;&#xC740; &#xBC00;&#xB3C4; &#xC720;&#xC9C0;&#xC5D0; &#xC6B0;&#xC218; &#xD558;&#xB2E4;. &#xB85C;&#xCEEC; &#xAE30;&#xD310;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xC9C1;&#xC811; &#xAD00;&#xCC30; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xCC3E;&#xC744; axons &#xCC44;&#xB110; &#xBAA8;&#xC11C;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xBC0F; PDMS &#xD45C;&#xBA74; &#xD558;&#xC774;&#xBE0C;&#xB9AC;&#xB4DC; &#xC7A5;&#xCE58;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xB9AC; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC744; &#xC120;&#xD638;. &#xAD50;&#xC591;&#xB41C; hippocampal &#xB274;&#xB7F0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0B4;&#xC544;&#xB0A8;&#xC744; &#xB54C; &#xC911;&#xB825; &#xD750;&#xB984;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBBF8;&#xB514;&#xC5B4; &#xCC44;&#xB110; perfusing, &amp;gt; = 11 &#xC77C; &#xB610;&#xB294;. PDMS &#xCD94;&#xCD9C; &#xBBF8;&#xC138; &#xC18C;&#xC790;&#xC758; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC801;&#xD569;&#xC131;&#xC744; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xD558; &#xACE0; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xBD84;&#xD654; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC640; &#xC9C0;&#xBC29; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xC2E0;&#xD638; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB0AE;&#xC740; &#xBC00;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAE30;&#xBCF8; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC30;&#xC591;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xBBF8;&#xC138; &#xC7A5;&#xCE58;.

Dispositivos microflu&iacute;dicos han utilizado para estudiar las culturas de alta densidad de muchos tipos de c&eacute;lulas. Porque la se&ntilde;alizaci&oacute;n de c&eacute;lula a c&eacute;lula es local, sin embargo, existe una necesidad de desarrollar sistemas de cultivo que sustentan una peque&ntilde;a cantidad de neuronas y permitan el an&aacute;lisis de los microambientes. Estas culturas son dif&iacute;ciles de mantener en forma estable, y es dif&iacute;cil evitar la muerte celular cuando se usa las neuronas primarias de mam&iacute;feras. Demostramos que postnatal primarias neuronas de hipocampales de rata pueden cultivarse en bajas densidades dentro de nanoliter-volumen microdispositivos fabricado usando polidimetilsiloxano (PDMS). Hacerlo requiere un paso adicional de la fabricaci&oacute;n, serial extracciones/lavados de PDMS con varios solventes, que elimina todo olig&oacute;meros, solvente y residuos del catalizador platino utilizada para curar el pol&iacute;mero. Encontramos que este paso mejora la biocompatibilidad de los dispositivos PDMS significativamente. Considerando que las neuronas sobreviven &gt; = 7 d&iacute;as en microdispositivos de canal abierto, se limita a la capacidad de las neuronas de la cultura en dispositivos de canal cerrado de PDMS no tratada, nativo &lt; o = 2 d&iacute;as. Cuando se extraen los dispositivos PDMS canal cerrado, biocompatibilidad mejora teniendo en cuenta las culturas fiable de la neurona en bajas densidades para &gt; = 7 d&iacute;as. Las comparaciones realizadas a autoclave PDMS y PDMS nativo, sin tratar revelan que el pol&iacute;mero disolvente tratados es superior en el sostenimiento de la baja densidad de neuronas primarias en cultura. Cuando neuronal afinidad para sustratos locales se observa directamente, encontramos que los axones localizaci&oacute;n a rincones de canal y prefieren las superficies PDMS al vidrio en dispositivos h&iacute;bridos. Cuando inunda los canales con los medios de comunicaci&oacute;n de flujo por gravedad, las neuronas de hipocampales cultivadas sobreviven &gt; = 11 d&iacute;as. Extracci&oacute;n de PDMS mejora la biocompatibilidad de los dispositivos microflu&iacute;dicos y as&iacute; permite el estudio de la diferenciaci&oacute;n de las neuronas de la identificaci&oacute;n y la caracterizaci&oacute;n de se&ntilde;ales extracelulares locales.

Dispositivos microflu&iacute;dicos para el cultivo de neuronas mam&iacute;feras primarias en bajas densidades.

Abbiamo sviluppato una tecnica di microscopia interferometric, di cui Jones fase microscopia, in grado di estrarre la matrice di polarizzazione Jones risolta spazialmente associata campioni trasparenti e anisotropici. Questa &egrave; una generalizzazione di imaging fase quantitativa, che viene recuperato da un elemento diagonale della matrice misurato. Il principio della tecnica &egrave; dimostrato con le misure di un modulatore di luce spaziale a cristalli liquidi ed il potenziale per live cell imaging con esperimenti su neuroni dal vivo nella cultura.

Microscopia di fase Jones dei campioni trasparenti e anisotropici.

Wir entwickelten eine interferometrische Mikroskopie-Technik, als Jones Mikroskopie, f&auml;hig die Ortsaufgel&ouml;ste Jones Polarisation Matrix zugeordnet ist transparent und anisotropen Proben extrahieren phase bezeichnet. Dies ist eine Verallgemeinerung des quantitativen Phase Bildgebung, die von einer Diagonale Element der gemessenen Matrix erstattet werden. Das Prinzip der Technik zeigt sich mit Messungen ein Fl&uuml;ssigkristall-spatial light Modulator und das Potenzial f&uuml;r live Cell imaging mit Experimenten auf Leben Neuronen in Kultur.

Jones Phase Mikroskopie von transparenten und anisotropen Proben.

&#x6211;&#x4EEC;&#x5F00;&#x53D1;&#x4E86;&#x5E72;&#x6D89;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x6280;&#x672F;&#xFF0C;&#x6240;&#x8FF0;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x743C;&#x65AF;&#x76F8;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#xFF0C;&#x80FD;&#x591F;&#x63D0;&#x53D6;&#x900F;&#x660E;&#x548C;&#x5404;&#x5411;&#x5F02;&#x6027;&#x6837;&#x672C;&#x4E0E;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x7A7A;&#x95F4;&#x5206;&#x8FA8;&#x7684;&#x743C;&#x65AF;&#x6781;&#x5316;&#x77E9;&#x9635;&#x3002;&#x8FD9;&#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x63A8;&#x5E7F;&#x7684;&#x5B9A;&#x91CF;&#x76F8;&#x6210;&#x50CF;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4ECE;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6D4B;&#x91CF;&#x77E9;&#x9635;&#x5BF9;&#x89D2;&#x5143;&#x7D20;&#x6062;&#x590D;&#x3002;&#x6280;&#x672F;&#x7684;&#x539F;&#x7406;&#x7528;&#x6DB2;&#x6676;&#x7A7A;&#x95F4;&#x5149;&#x8C03;&#x5236;&#x5668;&#x7684;&#x6D4B;&#x91CF;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6210;&#x50CF;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5BF9;&#x6D3B;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x6587;&#x5316;&#x3002;

&#x743C;&#x65AF;&#x9636;&#x6BB5;&#x955C;&#x89C2;&#x5BDF;&#x900F;&#x660E;&#x548C;&#x5404;&#x5411;&#x5F02;&#x6027;&#x7684;&#x6837;&#x672C;&#x3002;

We developed an interferometric microscopy technique, referred to as Jones phase microscopy, capable of extracting the spatially resolved Jones polarization matrix associated with transparent and anisotropic samples. This is a generalization of quantitative phase imaging, which is recovered from one diagonal element of the measured matrix. The principle of the technique is demonstrated with measurements of a liquid crystal spatial light modulator and the potential for live cell imaging with experiments on live neurons in culture.

Jones phase microscopy of transparent and anisotropic samples.

Nous avons d&eacute;velopp&eacute; une technique de microscopie interf&eacute;rom&eacute;trique, vis&eacute;e pour la microscopie, capable d&#39;extraire de la matrice de polarisation Jones r&eacute;solue spatialement associ&eacute;e aux &eacute;chantillons transparents et anisotropes de phase comme Jones. Il s&#39;agit d&#39;une g&eacute;n&eacute;ralisation de l&#39;imagerie quantitative phase, qui est extraite d&#39;un des &eacute;l&eacute;ments diagonaux de la matrice mesur&eacute;e. Le principe de la technique est d&eacute;montr&eacute; avec des mesures d&#39;un modulateur de lumi&egrave;re spatiale de cristaux liquides et le potentiel de l&#39;imagerie de cellules vivantes d&#39;exp&eacute;riences sur des neurones vivants dans la culture.

Microscopie de phase Jones d&#39;&eacute;chantillons transparents et anisotropes.

&#x6211;&#x3005; &#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30B8;&#x30E7;&#x30FC;&#x30F3;&#x30BA;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3001;&#x900F;&#x660E;&#x6027;&#x3068;&#x7570;&#x65B9;&#x6027;&#x306E;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x7A7A;&#x9593;&#x5206;&#x89E3;&#x306E;&#x30B8;&#x30E7;&#x30FC;&#x30F3;&#x30BA;&#x504F;&#x5149;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x62BD;&#x51FA;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30D5;&#x30A7;&#x30FC;&#x30BA;&#x306B;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x3001;&#x5E72;&#x6E09;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x6280;&#x8853;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x304B;&#x3089; 1 &#x3064;&#x306E;&#x5BFE;&#x89D2;&#x8981;&#x7D20;&#x3092;&#x56DE;&#x5FA9;&#x3001;&#x5B9A;&#x91CF;&#x4F4D;&#x76F8;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x4E00;&#x822C;&#x5316;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6DB2;&#x6676;&#x7A7A;&#x9593;&#x5149;&#x5909;&#x8ABF;&#x5668;&#x306E;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x624B;&#x6CD5;&#x306E;&#x539F;&#x7406;&#x3092;&#x767A;&#x63EE;&#x3001;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x306E;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x6587;&#x5316;&#x306E;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30BB;&#x30EB; &#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x6027;&#x3092;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30B8;&#x30E7;&#x30FC;&#x30F3;&#x30BA;&#x4F4D;&#x76F8;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x306E;&#x900F;&#x660E;&#x6027;&#x3068;&#x7570;&#x65B9;&#x6027;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x3002;

&#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC874;&#xC2A4;&#xB85C; &#xC704;&#xC0C1; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD;, &#xD22C;&#xBA85; &#xBC0F; &#xC774;&#xBC29;&#xC131; &#xC0D8;&#xD50C; &#xC5F0;&#xAD00; &#xACF5;&#xAC04;&#xC801; &#xD574;&#xACB0;&#xB41C; &#xC874;&#xC2A4; &#xC591;&#xADF9; &#xD654; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4;&#xB97C; &#xCD94;&#xCD9C; &#xD558;&#xB294; &#xB2A5;&#xB825; &#xC774;&#xB77C;&#xACE0;&#xB294; &#xAC04;&#xC12D; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAE30;&#xC220; &#xAC1C;&#xBC1C;. &#xC774;&#xAC83;&#xC740; &#xCE21;&#xC815; &#xB41C; &#xD589;&#xB82C;&#xC758; &#xB300;&#xAC01;&#xC120; &#xC694;&#xC18C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF5;&#xAD6C; &#xC591;&#xC801; &#xC704;&#xC0C1; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5;&#xC758; &#xC77C;&#xBC18;&#xD654; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC561;&#xC815; &#xACF5;&#xAC04; &#xAD11; &#xBCC0;&#xC870;&#xAE30;&#xC758; &#xCE21;&#xC815; &#xAE30;&#xC220;&#xC758; &#xC6D0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC2DC;&#xC5F0;&#xC640; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC140;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0; &#xC0B4;&#xC544;&#xC788;&#xB294; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC2E4;&#xD5D8;.

&#xD22C;&#xBA85; &#xBC0F; &#xC774;&#xBC29;&#xC131; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC758; &#xC874;&#xC2A4; &#xC704;&#xC0C1; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Hemos desarrollado una t&eacute;cnica de microscop&iacute;a interferom&eacute;trica, que se hace referencia como Jones fase microscopia, capaz de extraer la matriz espacial resuelta de polarizaci&oacute;n Jones asociada con las muestras transparentes y anisotr&oacute;picas. Se trata de una generalizaci&oacute;n de las im&aacute;genes de la fase cuantitativa, que se recuperaron de un elemento diagonal de la matriz medida. El principio de la t&eacute;cnica se demuestra con las mediciones de un modulador de luz espacial de cristal l&iacute;quido y el potencial de c&eacute;lulas vivas im&aacute;genes con experimentos en vivos neuronas en cultura.

Microscop&iacute;a de fase de Jones de muestras transparentes y anisotr&oacute;picas.

S&auml;ugetier-Supraoptic Kern (Sohn) ist ein Angriffspunkt im Gehirn eine Vielzahl von K&ouml;rperfunktionen regulieren. Innerhalb der Sohn sind peptiderge Magnocellular Neuronen, die als die Adenohypophyse (posterior Hypophyse) project beteiligt Steuern osmotische Gleichgewicht, Laktation und H&ouml;llenplanet, teilweise durch Sekretion Peptide wie Oxytocin und Vasopressin ins Blut zu signalisieren. Ein besseres Verst&auml;ndnis der Sohn Aktivit&auml;t und Funktion erfordert, Identifizierung und Charakterisierung der Peptide durch den Sohn verwendet. Hier sind kleine Beispiel Vorbereitung Ans&auml;tze f&uuml;r Neuropeptidomic Studien isoliert Sohn Proben von ganze Kerne bis auf einzelne Magnocellular Neuronen bis hin optimiert. Im Gegensatz zu den meisten fr&uuml;heren S&auml;ugetier-Peptidome Studien sind nicht sofort Gewebe erhitzt oder Mikrowelle. Sohn Proben stammen aus ex Vivo Gehirn Segment Vorbereitungen &uuml;ber Gewebe Punch und die Proben &uuml;ber Schrittabfolge Peptid-Extraktion verarbeitet. Analysen der Proben mittels Fl&uuml;ssigchromatographie-Massenspektrometrie und Tandem-Massenspektrometrie f&uuml;hren bei der Identifizierung von 85 Peptide, einschlie&szlig;lich 20 einzigartige Peptide aus bekannten prohormone. Die Stichprobengr&ouml;&szlig;e weiter reduziert wird, verringert sich die Tiefe der Peptid-Abdeckung; jedoch sind auch aus einzeln isolierte Magnocellular neuroendokriner Zellen, Vasopressin und mehrere andere Peptide gefunden.

Neuropeptidomics des Supraoptic Ratte Kerns.

Il nucleo supraoptic dei mammiferi (figlio) &egrave; un centro neuroendocrino nel cervello che regolano una variet&agrave; di funzioni fisiologiche. All&#39;interno il figlio, i neuroni magnocellulari peptidergic che proiettano per la Neuroipofisi isolata (ipofisi posteriore) sono coinvolti nel controllo di equilibrio osmotico, l&#39;allattamento e parto, in parte attraverso la secrezione di peptidi come l&#39;ossitocina e vasopressina di segnalazione nel sangue. Una migliore comprensione delle funzioni ed attivit&agrave; figlio richiede l&#39;identificazione e la caratterizzazione dei peptidi utilizzati dal figlio. Qui, piccolo-volume campione preparazione approcci sono ottimizzati per gli studi neuropeptidomic di campioni di figlio isolati che vanno dai nuclei interi verso i neuroni magnocellulari singolo. A differenza della maggior parte dei precedenti studi peptidome dei mammiferi, i tessuti sono non immediatamente riscaldati o microonde. FIGLIO campioni sono ottenuti da ex vivo preparazioni di fetta di cervello tramite tessuto punch e i campioni trattati attraverso passaggi sequenziali di estrazione del peptide. Analisi dei campioni mediante spettrometria di massa di cromatografia liquida e spettrometria di massa tandem come risultato l&#39;identificazione di 85 peptidi, compresi 20 peptidi unici dal noto pro-ormoni. La dimensione del campione &egrave; ulteriormente ridotta, diminuisce la profondit&agrave; di copertura del peptide; Tuttavia, anche da cellule neuroendocrine magnocellulari singolarmente isolati, vasopressina e diversi altri peptidi vengono rilevati.

Neuropeptidomics del nucleo supraoptic ratto.

&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x8996;&#x7D22;&#x4E0A;&#x6838; &#xFF08;&#x606F;&#x5B50;&#xFF09; &#x306F;&#x3001;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x751F;&#x7406;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x8133;&#x3067;&#x795E;&#x7D4C;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x30BB;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x606F;&#x5B50;&#x5185;&#x5408;&#x4F75; (&#x8133;&#x4E0B;&#x5782;&#x4F53;&#x5F8C;&#x8449;) &#x306B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B8;&#x30A7;&#x30AF;&#x30C8; &#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x5927;&#x7D30;&#x80DE;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x6D78;&#x900F;&#x5727;&#x30D0;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x3001;&#x6CCC;&#x4E73;&#x3068;&#x5206;&#x5A29;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9; &#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C8;&#x30B7;&#x30F3;&#x3068;&#x30D0;&#x30BD;&#x30D7;&#x30EC;&#x30B7;&#x30F3;&#x306A;&#x3069;&#x304C;&#x8840;&#x6DB2;&#x4E2D;&#x306B;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x5206;&#x6CCC;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x606F;&#x5B50;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x6539;&#x5584;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7406;&#x89E3;&#x306B;&#x606F;&#x5B50;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x540C;&#x5B9A;&#x3068;&#x89E3;&#x6790;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5C0F;&#x4F53;&#x7A4D;&#x8A66;&#x6599;&#x306E;&#x8ABF;&#x88FD;&#x65B9;&#x6CD5; neuropeptidomic &#x7814;&#x7A76;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x6838;&#x5358;&#x4E00;&#x5927;&#x7D30;&#x80DE;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x307E;&#x3067;&#x81F3;&#x308B;&#x5B64;&#x7ACB;&#x3057;&#x305F;&#x606F;&#x5B50;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306E;&#x4EE5;&#x524D;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3068;&#x306F;&#x7570;&#x306A;&#x308A;&#x3001;&#x7D44;&#x7E54;&#x304C;&#x306A;&#x3044;&#x3059;&#x3050;&#x306B;&#x52A0;&#x71B1;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x96FB;&#x5B50;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B8;&#x3067;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x606F;&#x5B50;&#x306E;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x304B;&#x3089; ex vivo &#x8133;&#x30B9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B9;&#x6A19;&#x672C;&#x7D44;&#x7E54;&#x30D1;&#x30F3;&#x30C1;&#x3068;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x62BD;&#x51FA;&#x306E;&#x4E00;&#x9023;&#x306E;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x3092;&#x901A;&#x3057;&#x3066;&#x51E6;&#x7406;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x53D6;&#x5F97;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6DB2;&#x4F53;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x6CD5;&#x53CA;&#x3073;&#x30BF;&#x30F3;&#x30C7;&#x30E0;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x6CD5;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x8A66;&#x6599;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30DB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30F3;&#x304B;&#x3089; 20 &#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x306A;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x3092;&#x542B;&#x3080; 85 &#x306E;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x540C;&#x5B9A;&#x7D50;&#x679C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB; &#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x3092;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x5C0F;&#x3055;&#x304F;&#x3068;&#x3001;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x30AB;&#x30D0;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B8;&#x306E;&#x6DF1;&#x3055;&#x304C;&#x6E1B;&#x5C11;;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x500B;&#x5225;&#x306B;&#x5B64;&#x7ACB;&#x3057;&#x305F;&#x5927;&#x7D30;&#x80DE;&#x795E;&#x7D4C;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x3001;&#x30D0;&#x30BD;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B7;&#x30F3;&#x3068;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x4ED6;&#x306E;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x304C;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x8996;&#x7D22;&#x4E0A;&#x306E;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x6838;&#x306E; Neuropeptidomics&#x3002;

&#xD3EC;&#xC720;&#xB958; supraoptic &#xD575; (&#xC544;&#xB4E4;)&#xC740; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294; &#xB1CC; neuroendocrine &#xC13C;&#xD130;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC544;&#xB4E4; &#xC544;, &#xB0B4; &#xD504;&#xB85C;&#xC81D;&#xD2B8; (&#xD6C4;&#xBD80; &#xB1CC; &#xD558; &#xC218; &#xCCB4;) neurohypophysis&#xB97C; peptidergic magnocellular &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0BC; &#xD22C; &#xADE0;&#xD615;, &#xC218; &#xC720;, &#xCD9C;&#xC0B0;, &#xD608;&#xC561;&#xC73C;&#xB85C; &#xC625; &#xC2DC; &#xD1A0; &#xC2E0;&#xACFC; &#xBC14;&#xC18C; &#xD504;&#xB808; &#xC2E0; &#xB4F1; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;&#xB97C; &#xC2DC;&#xADF8;&#xB110;&#xB9C1;&#xC758; &#xBD84; &#xBE44;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC81C;&#xC5B4;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828;. &#xC544;&#xB4E4; &#xD65C;&#xB3D9; &#xBC0F; &#xD568;&#xC218;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xC774;&#xD574; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xBC0F; &#xC544;&#xB4E4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;&#xC758; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC791;&#xC740; &#xBCFC;&#xB968; &#xC0D8;&#xD50C; &#xC900;&#xBE44; &#xBC29;&#xBC95;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E8;&#xC77C; magnocellular &#xC2E0;&#xACBD; &#xC544;&#xB798;&#xB85C; &#xC804;&#xCCB4; &#xD575; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC808;&#xC5F0;&#xB41C; &#xC544;&#xB4E4; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC758; neuropeptidomic &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCD5C;&#xC801;&#xD654; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xB2E4;. &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xC774;&#xC804; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; peptidome &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC640;&#xB294; &#xB2EC;&#xB9AC; &#xC870;&#xC9C1;&#xC740; &#xC989;&#xAC01; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xACE0; &#xC5F4;&#xC744; &#xD558;&#xAC70;&#xB098; microwaved. &#xC544;&#xB4E4; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC5D0;&#xC11C; ex vivo &#xB1CC; &#xC870;&#xAC01; &#xC900;&#xBE44; &#xC870;&#xC9C1; &#xD380;&#xCE58;&#xC640; &#xD3A9;&#xD0C0;&#xC774;&#xB4DC; &#xCD94;&#xCD9C;&#xC758; &#xC21C;&#xCC28;&#xC801;&#xC778; &#xB2E8;&#xACC4;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xCC98;&#xB9AC; &#xD558;&#xB294; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC5BB;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC561;&#xCCB4; &#xD06C;&#xB85C;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xADF8;&#xB798;&#xD53C; &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D; &#xBC0F; &#xD0E0;&#xB364; &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4;&#xB41C; prohormones 20 &#xACE0;&#xC720; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; 85 &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; &#xC2DD;&#xBCC4;. &#xC0D8;&#xD50C; &#xD06C;&#xAE30;&#xB97C; &#xC904;&#xC774;&#xBA74; &#xB354; &#xD3A9;&#xD0C0;&#xC774;&#xB4DC; &#xCDE8;&#xC7AC;&#xC758; &#xAE4A;&#xC774; &#xAC10;&#xC18C;; &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xAC1C;&#xBCC4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xACE0;&#xB9BD; &#xB41C; magnocellular neuroendocrine &#xC140; &#xC5D0;&#xC11C;&#xB3C4; &#xBC14;&#xC18C; &#xD504;&#xB808; &#xC2E0; &#xBC0F; &#xB2E4;&#xB978; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC00;&#xC9C0; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; &#xAC80;&#xC0C9; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Supraoptic &#xC950; &#xD575;&#xC758; Neuropeptidomics&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x89C6;&#x4E0A;&#x6838; &#xFF08;&#x513F;&#x5B50;&#xFF09; &#x662F;&#x8C03;&#x8282;&#x5404;&#x79CD;&#x751F;&#x7406;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x5927;&#x8111;&#x4E2D;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x3002;&#x5185;&#x5B50;&#xFF0C;&#x5230;&#x795E;&#x7ECF;&#x5782;&#x4F53; (&#x5782;&#x4F53;&#x540E;&#x53F6;) &#x9879;&#x76EE;&#x7684;&#x80BD;&#x80FD;&#x4E0B;&#x4E18;&#x8111;&#x5927;&#x7EC6;&#x80DE;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x53C2;&#x4E0E;&#x63A7;&#x5236;&#x6E17;&#x900F;&#x5E73;&#x8861;&#x3001; &#x54FA;&#x4E73;&#x548C;&#x5206;&#x5A29;&#xFF0C;&#x90E8;&#x5206;&#x901A;&#x8FC7;&#x5206;&#x6CCC;&#x5230;&#x8840;&#x6DB2;&#x4E2D;&#x4FE1;&#x53F7;&#x80BD;&#x50AC;&#x4EA7;&#x7D20;&#x548C;&#x52A0;&#x538B;&#x7D20;&#x7B49;&#x3002;&#x513F;&#x5B50;&#x6D3B;&#x6027;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x66F4;&#x597D;&#x5730;&#x4E86;&#x89E3;&#x9700;&#x8981;&#x7528;&#x513F;&#x5B50;&#x7684;&#x80BD;&#x7684;&#x9274;&#x5B9A;&#x53CA;&#x7279;&#x5F81;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x6574;&#x4E2A;&#x6838;&#x5230;&#x5355;&#x4E0B;&#x4E18;&#x8111;&#x5927;&#x7EC6;&#x80DE;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x5B64;&#x7ACB;&#x7684;&#x513F;&#x5B50;&#x6837;&#x672C; neuropeptidomic &#x7814;&#x7A76;&#x4F18;&#x5316;&#x5C0F;&#x4F53;&#x79EF;&#x6837;&#x54C1;&#x5236;&#x5907;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x4E0E;&#x4EE5;&#x524D;&#x7684;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269; peptidome &#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x540C;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x662F;&#x4E0D;&#x7ACB;&#x5373;&#x52A0;&#x70ED;&#x6216;&#x5FAE;&#x6CE2;&#x3002;&#x513F;&#x5B50;&#x6837;&#x672C;&#x88AB;&#x6765;&#x81EA; ex &#x4F53;&#x5185;&#x8111;&#x5207;&#x7247;&#x7B79;&#x5907;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x901A;&#x8FC7;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x62F3;&#x548C;&#x901A;&#x8FC7;&#x80BD;&#x63D0;&#x53D6;&#x7684;&#x6709;&#x5E8F;&#x6B65;&#x9AA4;&#x5904;&#x7406;&#x7684;&#x6837;&#x672C;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x9AD8;&#x6548;&#x6DB2;&#x76F8;&#x8272;&#x8C31;&#x8D28;&#x8C31;&#x6CD5;&#x548C;&#x6DB2;&#x76F8;&#x8272;&#x8C31;&#x4E32;&#x8054;&#x8D28;&#x8C31;&#x6837;&#x54C1;&#x5206;&#x6790;&#x5BFC;&#x81F4; 85 &#x80BD;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x4ECE;&#x5DF2;&#x77E5; prohormones 20 &#x72EC;&#x7279;&#x80BD;&#x7684;&#x9274;&#x5B9A;&#x3002;&#x968F;&#x7740;&#x6837;&#x672C;&#x5927;&#x5C0F;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x51CF;&#x5C11;&#xFF0C;&#x51CF;&#x5C11;&#x80BD;&#x8986;&#x76D6;&#x7684;&#x6DF1;&#x5EA6; &#xFF1B;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5373;&#x4F7F;&#x4ECE;&#x5355;&#x72EC;&#x5B64;&#x7ACB;&#x4E0B;&#x4E18;&#x8111;&#x5927;&#x7EC6;&#x80DE;&#x795E;&#x7ECF;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x52A0;&#x538B;&#x7D20;&#x548C;&#x51E0;&#x4E2A;&#x5176;&#x4ED6;&#x591A;&#x80BD;&#x68C0;&#x6D4B;&#x3002;

&#x5927;&#x9F20;&#x89C6;&#x4E0A;&#x6838;&#x7684; Neuropeptidomics&#x3002;

The mammalian supraoptic nucleus (SON) is a neuroendocrine center in the brain regulating a variety of physiological functions. Within the SON, peptidergic magnocellular neurons that project to the neurohypophysis (posterior pituitary) are involved in controlling osmotic balance, lactation, and parturition, partly through secretion of signaling peptides such as oxytocin and vasopressin into the blood. An improved understanding of SON activity and function requires identification and characterization of the peptides used by the SON. Here, small-volume sample preparation approaches are optimized for neuropeptidomic studies of isolated SON samples ranging from entire nuclei down to single magnocellular neurons. Unlike most previous mammalian peptidome studies, tissues are not immediately heated or microwaved. SON samples are obtained from ex vivo brain slice preparations via tissue punch and the samples processed through sequential steps of peptide extraction. Analyses of the samples via liquid chromatography mass spectrometry and tandem mass spectrometry result in the identification of 85 peptides, including 20 unique peptides from known prohormones. As the sample size is further reduced, the depth of peptide coverage decreases; however, even from individually isolated magnocellular neuroendocrine cells, vasopressin and several other peptides are detected.

Neuropeptidomics of the supraoptic rat nucleus.

Le noyau supraoptique mammif&egrave;res (fils) est un centre neuro-endocrines du cerveau r&eacute;gissant une vari&eacute;t&eacute; de fonctions physiologiques. Dans le fils, neurones magnocellulaires peptidergiques qui projettent de la neurohypophyse (hypophyse post&eacute;rieure) sont impliqu&eacute;s en contr&ocirc;lant l&#39;&eacute;quilibre osmotique, lactation et la parturition, en partie gr&acirc;ce &agrave; la s&eacute;cr&eacute;tion de la signalisation peptides tels que l&#39;ocytocine et la vasopressine dans le sang. Une meilleure compr&eacute;hension de l&#39;activit&eacute; de fils et de la fonction exige l&#39;identification et la caract&eacute;risation des peptides utilis&eacute;s par le fils. Ici, petit volume &eacute;chantillon pr&eacute;paration approches sont optimis&eacute;s pour neuropeptidomic &eacute;tudes d&#39;&eacute;chantillons de fils isol&eacute;s allant de noyaux ensemble vers le bas pour les neurones magnocellulaires unique. Contrairement &agrave; la plupart des &eacute;tudes ant&eacute;rieures peptidome chez les mammif&egrave;res, les tissus ne sont pas imm&eacute;diatement chauff&eacute;es ou au micro-ondes. Des &eacute;chantillons de fils sont obtenus &agrave; partir ex vivo pr&eacute;parations de tranches de cerveau via poin&ccedil;on de tissu et les &eacute;chantillons trait&eacute;s par &eacute;tapes s&eacute;quentielles d&#39;extraction de peptide. Les analyses des &eacute;chantillons par spectrom&eacute;trie de masse de chromatographie en phase liquide et spectrom&eacute;trie de masse r&eacute;sultent dans l&#39;identification des 85 peptides, dont 20 peptides uniques de prohormones connus. &Agrave; mesure que la taille de l&#39;&eacute;chantillon est plus r&eacute;duite, la profondeur de la couverture de peptide diminue ; Toutefois, m&ecirc;me &agrave; partir de cellules neuroendocrines magnocellulaires individuellement isol&eacute;es, vasopressine et plusieurs autres peptides sont d&eacute;tect&eacute;s.

Neuropeptidomics du noyau supraoptique rat.

El n&uacute;cleo supra&oacute;ptico mam&iacute;feros (hijo) es un centro neuroendocrino en el cerebro que regula una variedad de funciones fisiol&oacute;gicas. Dentro el hijo, las neuronas magnocelulares de peptid&eacute;rgicos que proyectan a la neurohip&oacute;fisis (hip&oacute;fisis posterior) est&aacute;n implicadas en el control de equilibrio osm&oacute;tico, lactancia y parto, en parte a trav&eacute;s de la secreci&oacute;n de p&eacute;ptidos como la oxitocina y la vasopresina de se&ntilde;alizaci&oacute;n en la sangre. Una mejor comprensi&oacute;n de la actividad del hijo y la funci&oacute;n requiere la identificaci&oacute;n y caracterizaci&oacute;n de los p&eacute;ptidos utilizados por el hijo. Aqu&iacute;, los m&eacute;todos de preparaci&oacute;n de muestras de peque&ntilde;o volumen est&aacute;n optimizados para neuropeptidomic estudios de muestras aisladas de hijo desde n&uacute;cleos todo hasta las neuronas magnocelulares solo. A diferencia de estudios anteriores la mayor&iacute;a de mam&iacute;feros peptidome, tejidos no inmediatamente se calienta o cocinados en el microondas. SON las muestras se obtienen de ex vivo preparaciones de rebanada de cerebro v&iacute;a golpe de tejido y las muestras procesadas a trav&eacute;s de pasos secuenciales de la extracci&oacute;n del p&eacute;ptido. An&aacute;lisis de las muestras mediante espectrometr&iacute;a de masas de cromatograf&iacute;a l&iacute;quida y espectrometr&iacute;a de masas en t&aacute;ndem como resultado la identificaci&oacute;n de 85 p&eacute;ptidos, incluyendo 20 p&eacute;ptidos &uacute;nicos de prohormonas conocido. Mientras m&aacute;s se reduce el tama&ntilde;o de muestra, disminuye la profundidad de la cobertura del p&eacute;ptido; sin embargo, incluso de las c&eacute;lulas neuroendocrinas magnocelulares individualmente aislados, vasopresina y varios otros p&eacute;ptidos son detectados.

Neuropeptidomics del n&uacute;cleo supra&oacute;ptico rata.

&#x5E03;&#x7EBF;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x63A7;&#x5236;&#x795E;&#x7ECF;&#x7A81;&#x8D77;&#x3001; &#x795E;&#x7ECF;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6781;&#x6027;&#x3001; &#x5DE5;&#x827A;&#x6210;&#x719F;&#x548C;&#x7ECF;&#x9A8C;&#x7EC6;&#x5316;&#x7684;&#x5185;&#x5728;&#x548C;&#x5916;&#x5728;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x5206;&#x5B50;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x5916;&#x5728;&#x4FE1;&#x53F7;&#x5EFA;&#x7ACB;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5728;&#x5F00;&#x53D1;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x4E30;&#x5BCC;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x4E86;&#x89E3;&#x5982;&#x4F55;&#x8FD9;&#x79CD;&#x5916;&#x5728;&#x7EBF;&#x7D22;&#x76F4;&#x63A5;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x795E;&#x7ECF;&#x8FDE;&#x63A5;&#x4F53;&#x5916;&#x6709;&#x52A9;&#x8C03;&#x67E5;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7F51;&#x7EDC;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x795E;&#x7ECF;&#x7F51;&#x7EDC;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;&#x751F;&#x4EA7;&#x4E0E;&#x4F53;&#x5916;&#x5B9A;&#x4E49;&#x8FDE;&#x63A5;&#x4E00;&#x8D77;&#x8BA2;&#x8D2D;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7F51;&#x7EDC;&#x5E26;&#x6765;&#x4E86;&#x7279;&#x6B8A;&#x7684;&#x6280;&#x672F;&#x6311;&#x6218;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x7ED3;&#x679C;&#x5FC5;&#x987B;&#x7B26;&#x5408;&#x751F;&#x7269;&#x7684;&#x7535;&#x7EBF;&#x795E;&#x7ECF;&#x7F51;&#x7EDC;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x793A;&#x8303;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#xFF0C;&#x5F62;&#x6210;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x3001; &#x6709;&#x542F;&#x53D1;&#x6027;&#x8868;&#x9762;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x6E10;&#x53D8;&#x5C42;&#x7C98;&#x8FDE;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x6307;&#x5BFC;&#x4EA7;&#x540E;&#x6D77;&#x9A6C;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4F53;&#x5916;&#x53D1;&#x80B2;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x5C06;&#x4F7F;&#x7528;&#x8BB8;&#x53EF;&#x8BC1;&#x751F;&#x4EA7;&#x7684; adlayers &#x901A;&#x8FC7;&#x5C42;&#x6D41;&#x3001; &#x6269;&#x6563;&#x548C;&#x7269;&#x7406;&#x5438;&#x9644;&#x7ED3;&#x5408;&#x5E73;&#x9762;&#x886C;&#x5E95;&#x7684;&#x4E09;&#x901A;&#x9053;&#x3001; &#x76F8;&#x4E92;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x8BBE;&#x5907;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x7B80;&#x5355;&#x7684;&#x6D41;&#x4FEE;&#x6539;&#x5404;&#x79CD;&#x56FE;&#x6848;&#x548C;&#x6E10;&#x53D8;&#x5C42;&#x7C98;&#x8FDE;&#x86CB;&#x767D; (LN) &#x548C;&#x8367;&#x5149;&#x7D20;&#x5F02;&#x786B;&#x6C30;&#x9178;&#x916F;&#x5171;&#x8F6D;&#x805A;-l-&#x8D56;&#x6C28;&#x9178; (&#x5F02;&#x786B;&#x6C30;&#x9178;-PLL) &#x88AB;&#x5B58;&#x5165;&#x672C;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x5177;&#x6709;&#x542F;&#x53D1;&#x6027;&#x7684;&#x4E0B;&#x5367;&#x5C42;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x53D1;&#x5C55;&#x63D0;&#x4F9B;&#x6307;&#x5F15;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x76EE;&#x524D;&#x5728;&#x57FA;&#x677F;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x4EA7;&#x751F;&#x660E;&#x663E;&#x589E;&#x957F;&#x65B9;&#x6848;&#x6CBB;&#x7597;&#x4EA7;&#x540E;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4E2D;&#x5206;&#x6563;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B;&#x7684;&#x4E09;&#x4E2A;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x7B2C;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x5728;&#x4E0A;&#x76D6;&#x5355;&#x6307;&#x5BFC;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x5BF9; LN &#x542B;&#x91CF;&#x4E0D;&#x65AD;&#x589E;&#x591A;&#xFF0C;&#x6210;&#x7ACB;&#x4E86;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x6269;&#x6563;&#x68AF;&#x5EA6;&#x7684; LN&#x3002;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x7ED3;&#x5408;&#x7684;&#x6E10;&#x53D8;&#x7684; LN &#x548C;&#x5F02;&#x786B;&#x6C30;&#x9178; PLL &#x5236;&#x4F5C;&#x4E86;&#x4F7F;&#x7528;&#x613F;&#x671B;&#x9A71;&#x52A8;&#x5C42;&#x6D41;&#x9650;&#x5236;&#x5230; 15 microm &#x5E7F;&#x6CDB;&#x589E;&#x957F;&#x533A;&#x57DF;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x7684;&#x4E24;&#x79CD;&#x53E0;&#x52A0;&#x6E10;&#x53D8;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x957F;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#x4E00;&#x79CD;&#x529E;&#x6CD5;&#x6F14;&#x793A;&#x5F02;&#x786B;&#x6C30;&#x9178; PLL &#x4E00;&#x8D77;&#x7684;&#x4E8C;&#x8FDB;&#x5236;&#x7EBF;&#x7ED3;&#x5408;&#x8868;&#x9762;&#x68AF;&#x5EA6;&#x7684; LN &#x548C;&#x725B;&#x8840;&#x6E05;&#x767D;&#x86CB;&#x767D; &#xFF08;BSA&#xFF09; &#x751F;&#x4EA7;&#x57FA;&#x677F; adlayers &#x63D0;&#x4F9B;&#x989D;&#x5916;&#x7EA7;&#x522B;&#x7684;&#x63A7;&#x5236;&#x751F;&#x957F;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x6F14;&#x793A;&#x65F6;&#x7A7A;&#x6D41;&#x4F53;&#x63A7;&#x5236;&#x9635;&#x5217;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7B80;&#x5355;&#x7684;&#x57FA;&#x4E8E;&#x5FAE;&#x6D41;&#x4F53;&#x7684;&#x886C;&#x5E95;&#x6C89;&#x79EF;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x8868;&#x9762;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x6E10;&#x53D8;&#x7684;&#x4F18;&#x52BF;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x9884;&#x6599;&#x8FD9;&#x79CD;&#x57FA;&#x4E8E;&#x5FAE;&#x6D41;&#x4F53;&#x7684;&#x9635;&#x5217;&#x64CD;&#x4F5C;&#x65B9;&#x6CD5;&#x5C06;&#x63D0;&#x4F9B;&#x6709;&#x76CA;&#x7684;&#x6A21;&#x5F0F;&#x548C;&#x8868;&#x9762;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x6E10;&#x53D8;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x63A7;&#x5236;&#x5728;&#x6307;&#x5BFC;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7F51;&#x7EDC;&#x548C;&#x53D1;&#x5C55;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x65B0;&#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#x3002;

&#x6307;&#x5BFC;&#x63D0;&#x793A;&#x886C;&#x5E95;&#x7684;&#x5E73;&#x9762;&#x8868;&#x9762;&#x68AF;&#x5EA6;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x53D1;&#x5C55;&#x5B58;&#x653E;&#x4F7F;&#x7528;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x8BBE;&#x5907;&#x3002;

Wiring the nervous system relies on the interplay of intrinsic and extrinsic signaling molecules that control neurite extension, neuronal polarity, process maturation and experience-dependent refinement. Extrinsic signals establish and enrich neuron-neuron interactions during development. Understanding how such extrinsic cues direct neurons to establish neural connections in vitro will facilitate the development of organized neural networks for investigating the development and function of nervous system networks. Producing ordered networks of neurons with defined connectivity in vitro presents special technical challenges because the results must be compliant with the biological requirements of rewiring neural networks. Here we demonstrate the ability to form stable, instructive surface-bound gradients of laminin that guide postnatal hippocampal neuron development in vitro. Our work uses a three-channel, interconnected microfluidic device that permits the production of adlayers of planar substrates through the combination of laminar flow, diffusion and physisorption. Through simple flow modifications, a variety of patterns and gradients of laminin (LN) and fluorescein isothiocyanate-conjugated poly-l-lysine (FITC-PLL) were deposited to present neurons with an instructive substratum to guide neuronal development. We present three variations in substrate design that produce distinct growth regimens for postnatal neurons in dispersed cell cultures. In the first approach, diffusion-mediated gradients of LN were formed on cover slips to guide neurons toward increasing LN concentrations. In the second approach, a combined gradient of LN and FITC-PLL was produced using aspiration-driven laminar flow to restrict neuronal growth to a 15 microm wide growth zone at the center of the two superimposed gradients. The last approach demonstrates the capacity to combine binary lines of FITC-PLL in conjunction with surface gradients of LN and bovine serum albumin (BSA) to produce substrate adlayers that provide additional levels of control over growth. This work demonstrates the advantages of spatio-temporal fluid control for patterning surface-bound gradients using a simple microfluidics-based substrate deposition procedure. We anticipate that this microfluidics-based patterning approach will provide instructive patterns and surface-bound gradients to enable a new level of control in guiding neuron development and network formation.

Guiding neuron development with planar surface gradients of substrate cues deposited using microfluidic devices.

C&acirc;bler le syst&egrave;me nerveux se fonde sur l&#39;interaction entre les mol&eacute;cules de signalisation intrins&egrave;ques et extrins&egrave;ques qui contr&ocirc;lent l&#39;extension neurites, polarit&eacute; neuronale, processus de maturation et le raffinement de l&#39;exp&eacute;rience-d&eacute;pendante. Signaux extrins&egrave;ques &eacute;tablissent et d&#39;enrichissent les interactions neurone-neurone au cours du d&eacute;veloppement. Comprendre comment ces signaux extrins&egrave;ques directement des neurones pour &eacute;tablir des connexions neuronales in vitro facilitera le d&eacute;veloppement de r&eacute;seaux de neurones organis&eacute;s pour &eacute;tudier le d&eacute;veloppement et le fonctionnement des r&eacute;seaux du syst&egrave;me nerveux. Produit command&eacute; des r&eacute;seaux de neurones avec connectivit&eacute; d&eacute;finie in vitro pr&eacute;sente des difficult&eacute;s techniques particuli&egrave;res parce que les r&eacute;sultats doivent &ecirc;tre conformes aux exigences biologiques de rec&acirc;blage des r&eacute;seaux neuronaux. Nous d&eacute;montrons la capacit&eacute; &agrave; former stables et instructifs surface li&eacute; aux gradients de laminine qui guident le d&eacute;veloppement postnatal neurones hippocampal in vitro. Notre travail utilise un dispositif microfluidique trois canaux, interconnect&eacute;s qui permet la production de couches de substrats planes gr&acirc;ce &agrave; la combinaison de flux laminaire, de diffusion et d&#39;adsorption. Gr&acirc;ce &agrave; des modifications de flux simple, une vari&eacute;t&eacute; de motifs et d&eacute;grad&eacute;s de la laminine (LN) et fluoresc&eacute;ine isothiocyanate conjugu&eacute; poly-l-lysine (FITC-PLL) ont &eacute;t&eacute; d&eacute;pos&eacute;s aux neurones pr&eacute;sents avec un substrat instructif pour guider le d&eacute;veloppement neuronal. Nous pr&eacute;sentons trois variations dans la conception de substrat qui produisent des sch&eacute;mas de croissance distinctes pour les neurones postnatals dans les cultures de cellules dispers&eacute;es. Dans la premi&egrave;re approche, induite par la diffusion des gradients de LN ont &eacute;t&eacute; form&eacute;s sur les lamelles pour guider les neurones vers une plus grande concentration de LN. Dans la seconde approche, un gradient combin&eacute; de LN et FITC-PLL fabriqu&eacute; &agrave; partir de pilot&eacute;e par aspiration hotte &agrave; flux laminaire pour restreindre la croissance neuronale &agrave; une zone de croissance large 15 microm au centre des deux gradients superpos&eacute;es. La derni&egrave;re approche illustre la capacit&eacute; de combiner des lignes binaires du FITC-PLL en conjonction avec des pentes surfaces LN et albumine s&eacute;rique bovine (BSA) pour produire des couches de substrat qui fournissent des niveaux suppl&eacute;mentaires de contr&ocirc;le de la croissance. Ce travail d&eacute;montre les avantages des &eacute;lectrovannes spatio-temporelle pour la structuration de surface li&eacute;s aux d&eacute;grad&eacute;s &agrave; l&#39;aide d&#39;une proc&eacute;dure de d&eacute;p&ocirc;t simple substrat ax&eacute;e sur la microfluidique. Nous pr&eacute;voyons que cette approche ax&eacute;e sur la microfluidique structuration fournira instructifs motifs et d&eacute;grad&eacute;s de surface-bondissent pour permettre &agrave; un nouveau niveau de contr&ocirc;le pour guider la formation d&eacute;veloppement et r&eacute;seau de neurone.

D&eacute;veloppement de neurones avec des pentes &agrave; surfaces planes d&#39;indices de substrat de guidage d&eacute;pos&eacute;s &agrave; l&#39;aide de dispositifs microfluidiques.

Verdrahtung des Nervensystems beruht auf das Zusammenspiel von intrinsische und extrinsische signalisierende Molek&uuml;le, die Neurit Erweiterung, neuronale Polarit&auml;t, Prozess-Reifung und Erfahrung-abh&auml;ngige Verfeinerung zu steuern. Extrinsische Signale etablieren und Neuron-Neuron-Interaktionen w&auml;hrend der Entwicklung zu bereichern. Verstehen, wie solche extrinsische Signale Neuronen in-vitro-neuronale Verbindungen herstellen direkter wird die Entwicklung der organisierten neuronale Netze f&uuml;r die Untersuchung der Entwicklung und Funktion des Nervensystems-Netzwerken erleichtern. Produzieren, Netzwerke von Nervenzellen mit in-vitro-definierten Konnektivit&auml;t bestellt stellt spezielle technische Herausforderungen, da die Ergebnisse mit den biologischen Anforderungen der Umpolung neuronaler Netzen kompatibel sein m&uuml;ssen. Hier zeigen wir die F&auml;higkeit, stabile, lehrreiche Oberfl&auml;che gebundene Gradienten von Laminin zu bilden, die postnatale hippocampal Neuron Entwicklung in-vitro-f&uuml;hren. Unsere Arbeit wird ein 3-Kanal, miteinander verbundenen Microfluidic-Ger&auml;t, das erm&ouml;glicht die Produktion von Adlayers von planaren Substraten durch die Kombination von Laminar-Flow, Diffusion und Physisorption verwendet. Durch einfache Str&ouml;mung Modifikationen waren eine Vielzahl von Mustern und Farbverl&auml;ufen Laminin (LN) und Fluoreszein Isothiocyanat-konjugierten Poly-l-Lysin (FITC-PLL) aufbewahrt vorhanden Neuronen mit einer lehrreichen Natursand, neuronale Entwicklung zu f&uuml;hren. Wir pr&auml;sentieren Ihnen drei Varianten im Substrat-Design, die deutliche Wachstum Therapien f&uuml;r postnatale Neuronen in verteilten Zellkulturen produzieren. Beim ersten Ansatz wurden Verbreitung-vermittelte Farbverl&auml;ufe LN Deckgl&auml;ser Neuronen zum Vergr&ouml;&szlig;ern von LN-Konzentrationen f&uuml;hren gebildet. Beim zweiten Ansatz wurde eine kombinierte Steigung von LN und FITC-PLL produziert neuronale Wachstum zu einer 15 Microm Breite Wachstum Zone in der Mitte der beiden &uuml;berlagerten Gradienten einschr&auml;nken mit Laminar-Flow Ehrgeiz getrieben. Der letzte Ansatz veranschaulicht die Kapazit&auml;t, bin&auml;re Linien der FITC-PLL in Verbindung mit Oberfl&auml;che Gradienten von LN und Rinderserumalbumin (BSA), Substrat-Adlayers zu produzieren, die zus&auml;tzliche Kontrolle &uuml;ber Wachstum erm&ouml;glichen zu kombinieren. Diese Arbeit wird die Vorteile der raumzeitlichen Fluidtechnik f&uuml;r Musterung Oberfl&auml;che gebundene Farbverl&auml;ufe mit einer einfachen Mikrofluidik-basierten Substrat Ablagerung Prozedur veranschaulicht. Wir erwarten, dass dieser Ansatz Mikrofluidik-basierte Musterung lehrreich Muster und Farbverl&auml;ufe der Oberfl&auml;che gebundene aktivieren Sie eine neue Ebene des Steuerelements in der F&uuml;hrung von Neuron Entwicklung und Netzwerk Bildung bieten wird.

F&uuml;hrung Neuron Entwicklung mit planaren Oberfl&auml;che Farbverl&auml;ufe der Substrat-Cues hinterlegt mit Microfluidic Vorrichtungen.

Cablaggio del sistema nervoso si basa sull&#39;interazione di molecole di segnalazione intrinseche ed estrinseche che controllo estensione dei neuriti, polarit&agrave; neuronale, processo di maturazione e affinamento di esperienza-dipendente. Segnali estrinseci stabilire e arricchiscono le interazioni neuron-neurone durante lo sviluppo. Comprendere come tali spunti estrinseci diretto neuroni per stabilire connessioni neurali in vitro faciliter&agrave; lo sviluppo delle reti neurali organizzate per indagare lo sviluppo e la funzione del sistema nervoso reti. Produrre ordinato reti di neuroni con connettivit&agrave; definiti in vitro presenta sfide tecniche speciali perch&eacute; i risultati devono essere conformi con i requisiti di cablaggio reti neurali biologici. Qui noi dimostrare la capacit&agrave; di formare stabile, istruttivi associato a superficie gradienti di laminina che guidano lo sviluppo postnatale neurone ippocampale in vitro. Il nostro lavoro utilizza un dispositivo microfluidico tre canali, interconnessi che consente la produzione di adlayers di substrati planari attraverso la combinazione di flusso laminare, diffusione e physisorption. Attraverso le modifiche di flusso semplice, una variet&agrave; di modelli e gradienti di laminina (LN) e fluoresceina isotiocianato-coniugato poly-l-lisina (FITC-PLL) sono stati depositati ai neuroni presenti con un substrato istruttivo per guidare lo sviluppo neuronale. Vi presentiamo tre variazioni nel design di substrato che producono regimi distinti di crescita per i neuroni postnatali in colture di cellule disperse. Nel primo approccio, gradienti di diffusione mediata ln si formarono sul coprioggetto per guidare i neuroni verso una maggiore concentrazione di LN. Il secondo approccio, una sfumatura combinata di LN e FITC-PLL &egrave; stato prodotto utilizzando basati sull&#39;aspirazione a flusso laminare per limitare la crescita neuronale per una zona ampia crescita 15 microm al centro dei due gradienti sovrapposti. L&#39;ultimo approccio dimostra la capacit&agrave; di combinare linee binari di FITC-PLL in congiunzione con superficie sfumature di LN e albumina di siero bovino (BSA) per produrre adlayers di substrato che forniscono ulteriori livelli di controllo sulla crescita. Questo lavoro illustra i vantaggi del controllo dei fluidi spazio-temporale per la creazione di serie di gradienti di superficie associato mediante un procedimento di deposizione semplice basata su microfluidics substrato. Anticipiamo che questo approccio basato su microfluidics patterning fornir&agrave; modelli istruttivi e gradienti associato a superficie per consentire un nuovo livello di controllo nella guida formazione sviluppo e rete neurone.

Guidare lo sviluppo di neurone con gradienti superficie planare di spunti substrato depositati utilizzando dispositivi microfluidici.

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&#xC2E0; &#xACBD;&#xACC4; &#xBC30;&#xC120; neurite &#xD655;&#xC7A5;, &#xC2E0;&#xACBD; &#xADF9;&#xC131;, &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; &#xC131;&#xC219;&#xACFC; &#xACBD;&#xD5D8;&#xC5D0; &#xC885;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; &#xC138;&#xB828;&#xBBF8;&#xB97C; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; &#xB0B4;&#xBD80; &#xBC0F; &#xC678;&#xBD80; &#xC2E0;&#xD638; &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xC758;&#xC874; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC678;&#xBD80; &#xC2E0;&#xD638; &#xC124;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xD48D;&#xC694;&#xB86D;&#xAC8C;. &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; &#xAC19;&#xC740; &#xC678;&#xBD80; &#xC2E0;&#xD638; &#xC9C1;&#xC811; &#xCCB4; &#xC678; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC5F0;&#xACB0;&#xC744; &#xC124;&#xC815; &#xD558;&#xB294; &#xB274;&#xB7F0; &#xC774;&#xD574; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xBC0F; &#xC2E0; &#xACBD;&#xACC4; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC870;&#xC9C1;&#xB41C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC815;&#xC758; &#xB41C; &#xC5F0;&#xACB0; &#xCCB4; &#xC678; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C;&#xB97C; &#xC8FC;&#xBB38; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xACB0;&#xACFC; rewiring &#xC2E0;&#xACBD;&#xB9DD;&#xC758; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xC694;&#xAD6C; &#xC0AC;&#xD56D;&#xC744; &#xC900;&#xC218; &#xD574;&#xC57C; &#xD558;&#xBBC0;&#xB85C; &#xD2B9;&#xBCC4; &#xD55C; &#xAE30;&#xC220; &#xB3C4;&#xC804;&#xC744; &#xC120;&#xBB3C; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; &#xC720;&#xC775;&#xD55C; &#xD45C;&#xBA74; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C; &#xADF8;&#xB77C;&#xB514;&#xC5B8;&#xD2B8; laminin&#xC758; &#xCCB4; &#xC678; &#xC0B0; &#xD6C4; hippocampal &#xC2E0;&#xACBD; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xAC00;&#xC774;&#xB4DC;&#xB97C; &#xD615;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC77C; adlayers &#xB958;, &#xD655;&#xC0B0; &#xBC0F; physisorption&#xC758; &#xACB0;&#xD569;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xD3C9;&#xBA74; &#xAE30;&#xD310;&#xC758; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC744; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; 3 &#xCC44;&#xB110;, &#xC0C1;&#xD638; &#xACB0;&#xD569; &#xC7A5;&#xCE58;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAC04;&#xB2E8;&#xD55C; &#xD750;&#xB984; &#xC218;&#xC815;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xD328;&#xD134; &#xBC0F; &#xADF8;&#xB77C;&#xB514;&#xC5B8;&#xD2B8; laminin (LN) &#xBC0F; fluorescein isothiocyanate conjugated &#xD3F4; &#xB9AC;-l-&#xB9AC; &#xC2E0; (FITC PLL) &#xC2E0;&#xACBD; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xAC00;&#xC774;&#xB4DC; &#xC720;&#xC775; &#xD558; &#xCE35;&#xC73C;&#xB85C; &#xD604;&#xC7AC; &#xB274;&#xB7F0;&#xC744; &#xC785;&#xAE08; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC0B0; &#xD6C4; &#xC2E0;&#xACBD; &#xBD84;&#xC0B0; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC30;&#xC591;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB69C;&#xB837;&#xD55C; &#xC131;&#xC7A5; regimens&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xD310; &#xB514;&#xC790;&#xC778;&#xC5D0; 3 &#xAC1C;&#xC758; &#xC720;&#xC0AC; &#xCF58;&#xD150;&#xCE20;&#xB97C; &#xC81C;&#xC2DC; &#xD558; &#xACE0;. &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC811;&#xADFC; &#xBC29;&#xBC95;&#xC5D0;&#xC11C; LN&#xC758; &#xADF8;&#xB77C;&#xB514;&#xC5B8;&#xD2B8; &#xBCF4;&#xAE09; &#xC911;&#xC7AC; LN &#xB18D;&#xB3C4; &#xC99D;&#xAC00; &#xD5A5;&#xD574; &#xB274;&#xB7F0; &#xC548;&#xB0B4; &#xD45C;&#xC9C0; &#xC804;&#xD45C;&#xC5D0; &#xD615;&#xC131; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; &#xBC29;&#xBC95;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; LN &#xBC0F; FITC PLL&#xC758; &#xACB0;&#xD569; &#xB41C; &#xADF8;&#xB77C;&#xB370;&#xC774;&#xC158; &#xD3EC;&#xBD80; &#xAD6C;&#xB3D9; &#xB958;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB450; &#xACB9;&#xCCD0; &#xADF8;&#xB77C;&#xB514;&#xC5B8;&#xD2B8;&#xC758; &#xC911;&#xC2EC;&#xC5D0;&#xC11C; 15 microm &#xB113;&#xC740; &#xC131;&#xC7A5; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC131;&#xC7A5;&#xC744; &#xC81C;&#xD55C; &#xC81C;&#xC791; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9; &#xC811;&#xADFC; &#xB2A5;&#xB825; &#xC131;&#xC7A5; &#xC81C;&#xC5B4; &#xC218;&#xC900;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xD310; adlayers &#xC0DD;&#xC0B0; LN &#xC18C; &#xD608; &#xCCAD; &#xC54C; &#xBD80; &#xBBFC; (BSA)&#xC758; &#xD45C;&#xBA74; &#xAE30;&#xC6B8;&#xAE30;&#xC640; &#xD568;&#xAED8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC774;&#xC9C4; &#xC904; FITC PLL&#xC758; &#xACB0;&#xD569;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC791;&#xD488;&#xC5D0; &#xAC04;&#xB2E8;&#xD55C; microfluidics &#xAE30;&#xBC18; &#xAE30;&#xD310; &#xC99D; &#xCC29; &#xC808;&#xCC28;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD45C;&#xBA74; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C; &#xADF8;&#xB77C;&#xB514;&#xC5B8;&#xD2B8; &#xD328;&#xD134;&#xD654;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; spatio &#xC2DC;&#xAC04;&#xC801; &#xC720;&#xCCB4; &#xC81C;&#xC5B4;&#xC758; &#xC7A5;&#xC810;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC720;&#xC775;&#xD55C; &#xD328;&#xD134; &#xBC0F; &#xD45C;&#xBA74; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C; &#xADF8;&#xB77C;&#xB514;&#xC5B8;&#xD2B8; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xC81C;&#xC5B4; &#xC2E0;&#xACBD; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xBC0F; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xC9C0;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D;&#xC774; &#xD328;&#xD134;&#xD654; microfluidics &#xAE30;&#xBC18; &#xC811;&#xADFC; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5;&#xD560; &#xAC83;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC608;&#xC0C1;.

&#xBBF8;&#xC138; &#xC18C;&#xC790;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC785;&#xAE08; &#xAE30;&#xD310; &#xB2E8;&#xC11C;&#xC758; &#xD3C9;&#xBA74; &#xC11C;&#xD53C;&#xC2A4; &#xADF8;&#xB77C;&#xB514;&#xC5B8;&#xD2B8; &#xC2E0;&#xACBD; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xC548;&#xB0B4;.

Cableado del sistema nervioso se basa en la interacci&oacute;n de mol&eacute;culas de se&ntilde;alizaci&oacute;n intr&iacute;nsecas y extr&iacute;nsecas que controlan la extensi&oacute;n neurita, polaridad neuronal, proceso de maduraci&oacute;n y refinamiento dependiente de la experiencia. Las se&ntilde;ales extr&iacute;nsecas establecen y enriquecen las interacciones de la neurona-neuronas durante el desarrollo. Entendiendo como tales se&ntilde;ales extr&iacute;nsecas dirigen las neuronas para establecer conexiones neuronales in vitro facilitar&aacute; el desarrollo de redes neuronales organizadas para investigar el desarrollo y funcionamiento de las redes del sistema nervioso. Producir orden&oacute; redes de neuronas con conectividad definido in vitro presenta desaf&iacute;os t&eacute;cnicos especiales ya que los resultados deben cumplir con los requisitos biol&oacute;gicos de cableado de redes neuronales. Aqu&iacute; demostramos la capacidad de forma estables, instructivos determinada superficie gradientes de laminina que gu&iacute;an el desarrollo postnatal neuronas de hipocampo in vitro. Nuestro trabajo utiliza un dispositivo microflu&iacute;dico tres canales, interconectadas que permite la producci&oacute;n de adlayers de sustratos planos mediante la combinaci&oacute;n de flujo laminar, la difusi&oacute;n y la fisisorci&oacute;n. A trav&eacute;s de modificaciones de flujo simple, una variedad de patrones y gradientes de laminina (LN) y fluoresce&iacute;na conjugados con isotiocianato poli-l-lisina (FITC-PLL) fueron depositados a neuronas presentes con un sustrato instructivo para guiar el desarrollo neuronal. Presentamos tres variaciones en dise&ntilde;o de sustrato que producen los reg&iacute;menes de crecimiento distinto para postnatales neuronas en cultivos de c&eacute;lulas dispersas. En el primer acercamiento, difusi&oacute;n mediada por gradientes de LN se formaron en cubreobjetos para guiar las neuronas hacia el aumento de las concentraciones de la LN. En el segundo enfoque, se produjo un gradiente combinado de LN y FITC-PLL usando basadas en la aspiraci&oacute;n flujo laminar para restringir el crecimiento neuronal a una zona de gran crecimiento 15 microm en el centro de los dos gradientes superpuestos. El &uacute;ltimo enfoque demuestra la capacidad para combinar l&iacute;neas binarias de FITC-PLL junto con superficies gradientes de LN y alb&uacute;mina s&eacute;rica bovina (BSA) para producir adlayers de sustrato que proporciona niveles adicionales de control sobre el crecimiento. Este trabajo demuestra las ventajas de control de fluidos spatio-temporal para patrones gradientes de la superficie determinada mediante un procedimiento de deposici&oacute;n de sustrato simple basada en microflu&iacute;dica. Anticipamos que este enfoque de patrones basados en microflu&iacute;dica proporcionar&aacute; patrones instructivos y gradientes de la superficie determinada para habilitar un nuevo nivel de control en la gu&iacute;a de formaci&oacute;n de desarrollo y red de neurona.

Gu&iacute;a de desarrollo de neurona con gradientes de superficies planares de se&ntilde;ales de sustrato depositado utilizando dispositivos microflu&iacute;dicos.

&#x4E13;&#x95E8;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x5927;&#x8111;&#x533A;&#x57DF;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x5B66;&#x7814;&#x7A76;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x8BC1;&#x636E;&#xFF0C;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x6C9F;&#x901A;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x4E0D;&#x540C;&#x5316;&#x5B66;&#x4FE1;&#x4F7F;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5206;&#x6790;&#x662F;&#x4E3B;&#x8981;&#x7EC4;&#x7EC7;-&#x6216;-&#x57FA;&#x4E8E;&#x4EBA;&#x53E3;&#xFF0C;&#x800C;&#x5B9E;&#x9645;&#x901A;&#x4FE1;&#x662F;&#x4ECE;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x4E86;&#x89E3;&#x5355;&#x4E2A;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x8865;&#x5145;&#xFF0C;&#x65B0;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x9700;&#x8981;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F00;&#x53D1;&#x4E86;&#x65B0;&#x578B;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;-&#x5230;-&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#xFF0C;&#x65E0;&#x8840;&#x6E05;&#x57F9;&#x517B;&#x529E;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x7528;&#x6765;&#x786E;&#x5B9A;&#x5404;&#x4E2A;&#x4E3B;&#x8981;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x66F4;&#x9AD8;&#x7EA7;&#x522B;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE; peptidome&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5B64;&#x7ACB;&#x4E0B;&#x4E18;&#x8111;&#x5927;&#x7EC6;&#x80DE;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4ECE;&#x65E9;&#x671F;&#x4EA7;&#x540E;&#x5927;&#x9F20;&#x89C6;&#x4E0A;&#x6838;&#x548C;&#x4FDD;&#x6301;&#x5B83;&#x4EEC;&#x5728;&#x65E0;&#x8840;&#x6E05;&#x4F4E;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x6587;&#x5316;&#x65E0;&#x80F6;&#x8D28;&#x652F;&#x6301;&#x56FE;&#x5C42; &#xFF1B;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x8981;&#x6C42;&#x4F4E;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x4E0E;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x3002;&#x5757;&#x4E0B;&#x4E18;&#x8111;&#x5927;&#x7EC6;&#x80DE;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4E0E;&#x6D77;&#x9A6C;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x5141;&#x8BB8;&#x672C;&#x5730;&#x8BBF;&#x95EE;&#x7684;&#x5355;&#x4E2A;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x5185;&#x6587;&#x5316;&#x4E3A;&#x8D28;&#x8C31;&#x6CD5;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x76F4;&#x63A5;&#x91C7;&#x6837;&#xFF0C;&#x7A7A;&#x95F4;&#x72EC;&#x7279;&#x7684;&#x53EF;&#x8BC6;&#x522B;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x5185;&#x5171;&#x57F9;&#x517B;&#x83B7;&#x5F97;&#x4E86;&#x80BD;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53CD;&#x590D;&#x68C0;&#x6D4B; 10 &#x9AD8;&#x5CF0;&#x6211;&#x4EEC;&#x5206;&#x914D;&#x7ED9;&#x4EE5;&#x524D;&#x4E3A;&#x7279;&#x5F81;&#x7684;&#x591A;&#x80BD;&#x548C;&#x4FDD;&#x6301;&#x672A;&#x8D4B;&#x503C;&#x72B6;&#x6001;&#x7684; 17 &#x9AD8;&#x5CF0;&#x3002;&#x800C;&#x795E;&#x7ECF;&#x6FC0;&#x80BD; A&#x3001; J&#x3001; &#x80BD;&#x548C;&#x795E;&#x7ECF;&#x6FC0;&#x80BD; B &#x5F52;&#x56E0;&#x4E8E;&#x4F53;&#x5916;&#x57F9;&#x517B;&#x6D77;&#x9A6C;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4E0B;&#x4E18;&#x8111;&#x5927;&#x7EC6;&#x80DE;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x539F;&#x56E0;&#x662F;&#x4ECE; prohormone &#x548C;&#x817A;&#x7EC6;&#x80DE;-2 &#x7684;&#x52A0;&#x538B;&#x7D20;&#x7684;&#x591A;&#x80BD;&#x3002;&#x6B64;&#x65B9;&#x6CD5;&#x4F7F;&#x6F84;&#x6E05;&#x8FD9;&#x79CD;&#x7279;&#x5B9A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684; prohormone &#x5904;&#x7406;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x80BD;&#x7684;&#x53D1;&#x73B0;&#x3002;

&#x89C6;&#x4E0A;&#x4E0B;&#x4E18;&#x8111;&#x5927;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x6D77;&#x9A6C;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x4F4E;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x83CC;&#x7FA4;&#x53D8;&#x5316;&#x7684;&#x76F4;&#x63A5;&#x7EC6;&#x80DE; peptidomics&#x3002;

Genomic and proteomic studies of brain regions of specialized function provide evidence that communication among neurons is mediated by systems of diverse chemical messengers. These analyses are largely tissue- or population-based, whereas the actual communication is from cell-to-cell. To understand the complement of intercellular signals produced by individual neurons, new methods are required. We have developed a novel neuron-to-neuron, serum-free, co-culture approach that was used to determine the higher-level cellular peptidome of individual primary mammalian neurons. We isolated magnocellular neurons from the supraoptic nucleus of early postnatal rat and maintained them in serum-free low density cultures without glial support layers; under these conditions they required low-density co-cultured neurons. Co-culturing magnocellular neurons with hippocampal neurons permitted local access to individual neurons within the culture for mass spectrometry. Using direct sampling, peptide profiles were obtained for spatially distinct, identifiable neurons within the co-culture. We repeatedly detected 10 peaks that we assign to previously characterized peptides and 17 peaks that remain unassigned. Peptides from the vasopressin prohormone and secretogranin-2 are attributed to magnocellular neurons, whereas neurokinin A, peptide J, and neurokinin B are attributed to cultured hippocampal neurons. This approach enables the elucidation of cell-specific prohormone processing and the discovery of cell-cell signaling peptides.

Direct cellular peptidomics of supraoptic magnocellular and hippocampal neurons in low-density co-cultures.

&Eacute;tudes de g&eacute;nomique et prot&eacute;omique des r&eacute;gions du cerveau des fonctions sp&eacute;cialis&eacute;es fournissent une preuve que la communication entre les neurones est m&eacute;di&eacute;e par syst&egrave;mes de messagers chimiques diverses. Ces analyses sont largement base de tissus ou de population, alors que la communication r&eacute;elle est de cellule &agrave; cellule. Pour comprendre le compl&eacute;ment des signaux intercellulaires produites par des neurones individuels, les nouvelles m&eacute;thodes sont n&eacute;cessaires. Nous avons d&eacute;velopp&eacute; un nouveau neurone-&agrave;-neurone, sans s&eacute;rum, approche de co-culture ayant servi &agrave; d&eacute;terminer le niveau sup&eacute;rieur peptidome cellulaire de neurones individuels de mammif&egrave;res primaires. Nous avons isol&eacute; des neurones magnocellulaire du noyau supraoptique de rat postnatale pr&eacute;coce et eux maintenus dans les cultures sans s&eacute;rum basse densit&eacute; sans soutien gliales couches ; dans ces conditions, ils tenus des neurones cultiv&eacute;s basse densit&eacute;s. Co-culture avec des neurones de l&#39;hippocampe, les neurones magnocellulaires autoris&eacute;s un acc&egrave;s local aux neurones individuels au sein de la culture pour la spectrom&eacute;trie de masse. En utilisant l&#39;&eacute;chantillonnage direct, profils peptidiques ont &eacute;t&eacute; obtenus pour les neurones spatialement distincts et identifiables au sein de la co-culture. &Agrave; plusieurs reprises, nous avons d&eacute;tect&eacute; 10 sommets que nous attribuons aux peptides pr&eacute;c&eacute;demment caract&eacute;ris&eacute;es et 17 pics qui demeurent non assign&eacute;es. Peptides de la vasopressine prohormone et secretogranin-2 sont attribu&eacute;es aux neurones magnocellulaires, tandis que la neurokinine A, peptide J et neurokinine B sont attribu&eacute;s &agrave; des neurones hippocampal cultiv&eacute;s. Cette approche permet &agrave; l&#39;&eacute;lucidation du traitement prohormone cellule sp&eacute;cifique et la d&eacute;couverte de peptides signalisation de cellules.

Direct peptidomique cellulaire de supraoptique magnocellulaire et les neurones de l&#39;hippocampe dans co-cultures de faible densit&eacute;s.

Genomic und Proteomic Studien Hirnregionen spezialisierte Funktion liefern Hinweise darauf, dass die Kommunikation zwischen den Neuronen durch Systeme der unterschiedlichen chemischen Botenstoffe vermittelt wird. Diese Analysen sind weitgehend Gewebe oder Bev&ouml;lkerung basieren, w&auml;hrend die eigentliche Kommunikation von Zelle zu Zelle ist. Um zu verstehen, die Erg&auml;nzung der interzellul&auml;ren Signale, die von einzelnen Neuronen produziert, sind neue Methoden erforderlich. Wir haben ein neuartiges Neuron-zu-Neuron, serumfreie, Kokulturen Ansatz entwickelt, die verwendet wurde, um die &uuml;bergeordneten zellul&auml;ren Peptidome der einzelnen prim&auml;ren S&auml;ugetier-Neuronen zu bestimmen. Wir isoliert Magnocellular Neuronen vom Supraoptic Kern der fr&uuml;hen postnatalen Ratte und verwaltet sie in serumfreien niedriger Dichte Kulturen ohne Gliazellen Unterst&uuml;tzung Schichten; unter diesen Bedingungen ben&ouml;tigte niedriger Dichte co-cultured Neuronen. Co-Culturing Magnocellular Neuronen mit Neuronen lokalen Zugriff auf einzelne Neuronen innerhalb der Kultur f&uuml;r Massenspektrometrie gestattet. Mit direkten Sampling, wurden Peptid-Profile f&uuml;r r&auml;umlich getrennte, identifizierbare Neuronen innerhalb der Kokulturen erzielt. Wir erkannt wiederholt 10 Spitzen, die wir zuvor gekennzeichneten Peptide zuweisen und 17 Spitzen, die nicht zugewiesenen bleiben. Peptide aus dem Vasopressin Prohormon und Secretogranin-2 sind Magnocellular Neuronen, zugeschrieben, w&auml;hrend Neurokinin A Peptid J und Neurokinin B kultivierten Neuronen zugeschrieben werden. Dieses Verfahren erm&ouml;glicht die Aufkl&auml;rung der zellspezifische Prohormon Verarbeitung und die Entdeckung der Zell-Zell-Signalling-Peptide.

Direkte zellul&auml;ren Peptidomics von Supraoptic Magnocellular und Neuronen in Low-Density Co-cultures.

Studi genomic e proteomic delle regioni del cervello della funzione specializzata di forniscono la prova che la comunicazione tra neuroni &egrave; mediata da sistemi di messaggeri chimici diversi. Queste analisi sono in gran parte dei tessuti - o basati sulla popolazione, considerando che la comunicazione effettiva &egrave; da cellula a cellula. Per capire il complemento dei segnali intercellulari prodotto da singoli neuroni, sono necessari nuovi metodi. Abbiamo sviluppato un romanzo neurone-a-neurone, serum-free, approccio co-culture che &egrave; stato utilizzato per determinare il livello superiore peptidome cellulare di singoli neuroni primari dei mammiferi. Abbiamo isolato i neuroni magnocellulari dal nucleo supraoptic di ratto postnatale precoce e li mantenne in culture serum-free bassa densit&agrave; senza supporto gliali strati; in queste condizioni hanno richiesto i neuroni coltivati a bassa densit&agrave;. Co-culturing neuroni magnocellulari con neuroni hippocampal consentito accesso locale ai singoli neuroni all&#39;interno della cultura per la spettrometria di massa. Mediante campionamento diretto, profili del peptide sono stati ottenuti per i neuroni spazialmente distinti, identificabili all&#39;interno del co-culture. Abbiamo pi&ugrave; volte rilevato 10 cime che assegniamo ai peptidi precedentemente caratterizzati e 17 vette che rimangono non assegnati. Peptidi da vasopressina Proormone e secretogranin-2 sono attribuiti ai neuroni magnocellulari, considerando che sono attribuite ai neuroni ippocampali colti Neurochinina A, peptide J e Neurochinina B. Questo approccio consente la delucidazione di Proormone elaborazione specifica della cellula e la scoperta dei peptidi segnali cellula-cellula.

Peptidomics cellulare diretto del supraoptic magnocellulari e neuroni ippocampali in co-cultures a bassa densit&agrave;.

&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30FC;&#x30E0;&#x7814;&#x7A76;&#x5C02;&#x9580;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x8133;&#x9818;&#x57DF;&#x306E;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x9593;&#x306E;&#x901A;&#x4FE1;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x591A;&#x69D8;&#x306A;&#x5316;&#x5B66;&#x30E1;&#x30C3;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B8;&#x30E3;&#x30FC;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3092;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x7D30;&#x80DE;&#x3078;&#x306E;&#x5B9F;&#x969B;&#x306E;&#x901A;&#x4FE1;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x306F;&#x4E3B;&#x7D44;&#x7E54;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x4EBA;&#x53E3;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x3001;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x500B;&#x3005; &#x306E;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x306E;&#x4FE1;&#x53F7;&#x306E;&#x88DC;&#x6570;&#x3092;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x5C0F;&#x8AAC;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;-&#x306B;-&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3001;&#x7121;&#x8840;&#x6E05;&#x3001;&#x500B;&#x3005; &#x306E;&#x4E00;&#x6B21;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x4E0A;&#x4F4D;&#x7D30;&#x80DE;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6DF7;&#x5408;&#x57F9;&#x990A;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5927;&#x7D30;&#x80DE;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x751F;&#x5F8C;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x8996;&#x7D22;&#x4E0A;&#x6838;&#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x96E2;&#x3057;&#x3001;&#x7121;&#x6599;&#x306E;&#x8840;&#x6E05;&#x4F4E;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x57F9;&#x990A;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2; &#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8; &#x30EC;&#x30A4;&#x30E4;&#x30FC;&#x306A;&#x3057;&#x3067;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6761;&#x4EF6;&#x306E;&#x4E0B;&#x3067;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x4F4E;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x5171;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6D77;&#x99AC;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3092;&#x5927;&#x7D30;&#x80DE;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6DF7;&#x5408;&#x57F9;&#x990A;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6587;&#x5316;&#x5185;&#x306E;&#x500B;&#x3005; &#x306E;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3078;&#x306E;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EB; &#x30A2;&#x30AF;&#x30BB;&#x30B9;&#x8A31;&#x53EF;&#x3002;&#x30C0;&#x30A4;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8; &#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x7A7A;&#x9593;&#x7684;&#x660E;&#x77AD;&#x3067;&#x3001;&#x500B;&#x4EBA;&#x3092;&#x7279;&#x5B9A;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x5185;&#x57F9;&#x990A;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9; &#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x304C;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x7E70;&#x308A;&#x8FD4;&#x3057;&#x6211;&#x3005; &#x306B;&#x65E2;&#x5831;&#x306E;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C3;&#x30C9;&#x3092;&#x5272;&#x308A;&#x5F53;&#x3066;&#x308B; 10 &#x306E;&#x30D4;&#x30FC;&#x30AF;&#x3068;&#x672A;&#x5272;&#x308A;&#x5F53;&#x3066;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x306B; 17 &#x306E;&#x30D4;&#x30FC;&#x30AF;&#x691C;&#x51FA;&#x3002;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30AD;&#x30CB;&#x30F3; A&#x3001;J&#x3001;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30AD;&#x30CB;&#x30F3; B &#x57F9;&#x990A;&#x6D77;&#x99AC;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9; &#x30D0;&#x30BD;&#x30D7;&#x30EC;&#x30B7;&#x30F3; &#x30D7;&#x30ED;&#x30DB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30F3;&#x3068; secretogranin 2 &#x304B;&#x3089;&#x5927;&#x7D30;&#x80DE;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306F;&#x30BB;&#x30EB;&#x7279;&#x5B9A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30DB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30F3;&#x51E6;&#x7406;&#x306E;&#x89E3;&#x660E;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x60C5;&#x5831;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x767A;&#x898B;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x76F4;&#x63A5;&#x7D30;&#x80DE; peptidomics &#x306E;&#x8996;&#x5927;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x6D77;&#x99AC;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x4F4E;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x306F;&#x3002;

Genomic &#xBC0F; proteomic &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC804;&#xBB38; &#xAE30;&#xB2A5; &#xB1CC; &#xC601;&#xC5ED;&#xC758; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC; &#xAC04; &#xD1B5;&#xC2E0; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xD654;&#xD559; &#xBA54;&#xC2E0;&#xC800; &#xC911;&#xC7AC; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBD84;&#xC11D;&#xC740; &#xC8FC;&#xB85C; &#xC870;&#xC9C1; &#xB610;&#xB294; &#xC778;&#xAD6C; &#xAE30;&#xBC18;, &#xBC18;&#xBA74; &#xC2E4;&#xC81C; &#xD1B5;&#xC2E0; &#xC140; &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC774;&#xB2E4;. &#xAC1C;&#xBCC4; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD558;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC644;&#xC744; &#xC54C;&#xC544;&#xC57C; &#xC0C8; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB294; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC18C;&#xC124; &#xB274;&#xB7F0;-&#xC744;-&#xC2E0;&#xACBD;, &#xD608; &#xCCAD; &#xBB34;&#xB8CC; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xAE30;&#xBCF8; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xB274;&#xB7F0;&#xC758; &#xC0C1;&#xC704; &#xC218;&#xC900; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; peptidome&#xB97C; &#xACB0;&#xC815; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB41C; co-culture &#xC811;&#xADFC; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; magnocellular &#xC870;&#xAE30; &#xC0B0; &#xD6C4; &#xC950;&#xC758; supraoptic &#xD575;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xAD50; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xB808;&#xC774;&#xC5B4;; &#xC5C6;&#xC774; &#xBC00;&#xB3C4;&#xAC00; &#xB0AE;&#xC740; &#xD608; &#xCCAD; &#xBB34;&#xB8CC; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC870;&#xAC74; &#xD558;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xC800;&#xBC00;&#xB3C4; co-cultured &#xC2E0;&#xACBD; &#xD544;&#xC694;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Co-culturing magnocellular hippocampal &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC; &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBB38;&#xD654;&#xAD8C; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xB274;&#xB7F0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB85C;&#xCEEC; &#xC561;&#xC138;&#xC2A4; &#xD5C8;&#xC6A9;. &#xC9C1;&#xC811;&#xC801;&#xC778; &#xC0D8;&#xD50C;&#xB9C1;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xD3A9;&#xD0C0;&#xC774;&#xB4DC; &#xD504;&#xB85C; &#xD30C;&#xC77C;&#xC5D0;&#xC11C; co-culture &#xB0B4;&#xC758; &#xACF5;&#xAC04;&#xC801; &#xAD6C;&#xBD84;, &#xC2DD;&#xBCC4; &#xB274;&#xB7F0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC00;&#xC838;&#xC628;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBC18;&#xBCF5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC774; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;&#xB97C; &#xD560;&#xB2F9; 10 &#xBD09;&#xC6B0;&#xB9AC;&#xC640; &#xD560;&#xB2F9; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xB294; 17 &#xBD09;&#xC6B0;&#xB9AC;&#xB97C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC14;&#xC18C; &#xD504;&#xB808; &#xC2E0; prohormone &#xBC0F; secretogranin 2&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; neurokinin A, J, &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; &#xBC0F; neurokinin B &#xAD50;&#xC591;&#xB41C; hippocampal &#xB274;&#xB7F0;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC778; &#xD558;&#xB294; &#xBC18;&#xBA74; magnocellular &#xB274;&#xB7F0;&#xC5D0; &#xD560;&#xB2F9; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC774;&#xB807;&#xAC8C; &#xC140; &#xAD00;&#xB828; prohormone &#xCC98;&#xB9AC;&#xC758; &#xD574;&#xBA85; &#xBC0F; &#xC140; &#xC2E0;&#xD638; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;&#xC758; &#xBC1C;&#xACAC; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC9C1;&#xC811; &#xC138;&#xD3EC; peptidomics supraoptic magnocellular &#xBC0F; &#xC800;&#xBC00;&#xB3C4; co-cultures hippocampal &#xB274;&#xB7F0;&#xC758;.

Estudios de gen&oacute;mica y prote&oacute;mica de regiones del cerebro de funci&oacute;n especializada evidencian que la comunicaci&oacute;n entre las neuronas es mediada por sistemas de diversos mensajeros qu&iacute;micos. Estos an&aacute;lisis son principalmente tejido - o poblacional, mientras que la comunicaci&oacute;n real es de c&eacute;lula a c&eacute;lula. Para entender el complemento de se&ntilde;ales intercelulares producidas por neuronas individuales, los nuevos m&eacute;todos son necesarios. Hemos desarrollado una novela neurona-a-neurona, libre de suero, enfoque de cocultivo que se utiliz&oacute; para determinar el nivel celular peptidome de neuronas individuales de mam&iacute;feras primarias. Nos aislaron neuronas magnocelulares del n&uacute;cleo supra&oacute;ptico de rata postnatal temprana y les mantiene en culturas sin suero baja densidad sin apoyo glial capas; en estas condiciones requieren las neuronas Co-cultivadas baja densidad. Co-cultivo neuronas magnocelulares con neuronas hipocampales permite el acceso local a neuronas individuales dentro de la cultura para espectrometr&iacute;a de masas. Mediante muestreo directo, perfiles de p&eacute;ptido se obtuvieron para las neuronas espacialmente distintas, identificables en el cocultivo. Repetidamente hemos detectado 10 picos que asignamos a p&eacute;ptidos previamente caracterizados y 17 picos que permanecen sin asignar. P&eacute;ptidos de la vasopresina prohormona y secretogranin-2 se atribuyen a las neuronas magnocelulares, Considerando que la neuroquinina A, p&eacute;ptido J y Neuroquinina B se atribuyen a las neuronas de hipocampales cultivadas. Este enfoque permite la elucidaci&oacute;n de procesamiento prohormona celular espec&iacute;fico y el descubrimiento de p&eacute;ptidos de se&ntilde;alizaci&oacute;n de c&eacute;lula.

Peptidomics celular directo de magnocelulares supra&oacute;ptico y neuronas de hipocampales en co-cultivos de baja densidad.

&#x5176;&#x8D28;&#x91CF;&#x548C;&#x521A;&#x5EA6;&#x7B49;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7269;&#x7406;&#x7279;&#x6027;&#x7684;&#x8868;&#x5F81;&#x4E00;&#x76F4;&#x7684;&#x6781;&#x5927;&#x7684;&#x5174;&#x8DA3;&#xFF0C;&#x5E76;&#x6709;&#x6DF1;&#x8FDC;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#xFF0C;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x3001; &#x7EC4;&#x7EC7;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x3001; &#x764C;&#x75C7;&#x3001; &#x548C;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;&#x4F8B;&#x5982;&#xFF0C;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x589E;&#x957F;&#x7387;&#x76F4;&#x63A5;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E2A;&#x522B;&#x8D34;&#x58C1;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E2;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6F84;&#x6E05;&#x57FA;&#x7840;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x5C55;&#x5FAE;&#x7535;&#x673A;&#x68B0;&#x7CFB;&#x7EDF; (MEMS) &#x8C10;&#x632F;&#x7684;&#x5927;&#x89C4;&#x6A21;&#x4F20;&#x611F;&#x5668;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7528;&#x4E8E;&#x76F4;&#x63A5;&#x6D4B;&#x91CF;&#x5355;&#x8D34;&#x58C1;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x7269;&#x7406;&#x6027;&#x80FD;&#x3001; &#x8D28;&#x91CF;&#x548C;&#x589E;&#x957F;&#x901F;&#x7387;&#x7684;&#x6570;&#x7EC4;&#x3002;&#x4E0E;&#x5E38;&#x89C4;&#x60AC;&#x81C2;&#x5927;&#x89C4;&#x6A21;&#x4F20;&#x611F;&#x5668;&#x4E0D;&#x540C;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x4F20;&#x611F;&#x5668;&#x4FDD;&#x7559;&#x7EDF;&#x4E00;&#x7684;&#x5927;&#x89C4;&#x6A21;&#x654F;&#x611F;&#x6027;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x8FDE;&#x63A5;&#x66F2;&#x9762;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x6D4B;&#x91CF;&#x9891;&#x7387;&#x504F;&#x79FB;&#x7684;&#x5927;&#x89C4;&#x6A21;&#x4F20;&#x611F;&#x5668;&#x4E0E;&#x6210;&#x957F; &#xFF08;&#x8F6F;&#xFF09; &#x548C;&#x56FA;&#x5B9A; (&#x786C;) &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5E76;&#x901A;&#x8FC7;&#x5206;&#x6790;&#x5EFA;&#x6A21;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6D3E;&#x751F;&#x7684;&#x975E;&#x56FA;&#x5B9A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x6768;&#x6C0F;&#x6A21;&#x91CF;&#x548C;&#x89E3;&#x5F00;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5927;&#x89C4;&#x6A21;&#x6D4B;&#x91CF;&#x5355;&#x5143;&#x521A;&#x5EA6;&#x7684;&#x4F9D;&#x8D56;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x589E;&#x957F;&#x5927;&#x89C4;&#x6A21;&#x4F20;&#x611F;&#x5668;&#x4E0A;&#x7684;&#x5355;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;50 + &#x5C0F;&#x65F6;&#x8861;&#x91CF;&#x5176;&#x8D28;&#x91CF;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x8D34;&#x58C1;&#x4EBA;&#x7ED3;&#x80A0;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x52A0;&#x4E86;&#x6210;&#x957F;&#x7387;&#x7684;&#x7FA4;&#x4F53;&#x6027;&#x8F83;&#x5927;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5E73;&#x5747;&#x589E;&#x957F;&#x7387;&#x7EBF;&#x6027;&#x9012;&#x589E;&#x7684;&#x7FA4;&#x4F53;&#x6027;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x5728; 3.25%/hr&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x654F;&#x611F;&#x7684;&#x5927;&#x89C4;&#x6A21;&#x4F20;&#x611F;&#x5668;&#x4E0E;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x65E0;&#x5173;&#x7684;&#x5927;&#x89C4;&#x6A21;&#x7075;&#x654F;&#x5EA6;&#x53EF;&#x4EE5;&#x52A0;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x5BF9;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x957F;&#x548C;&#x5730;&#x4F4D;&#xFF0C;&#x540C;&#x65F6;&#x76D1;&#x6D4B;&#xFF0C;&#x5E76;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7406;&#x60F3;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x7814;&#x7A76;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x957F;&#x3001; &#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x3001; &#x5206;&#x5316;&#x548C;&#x51CB;&#x4EA1;&#x3002;

&#x6D4B;&#x91CF;&#x7684;&#x8D34;&#x58C1;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x91CF;&#x548C;&#x589E;&#x957F;&#x3002;

The characterization of physical properties of cells such as their mass and stiffness has been of great interest and can have profound implications in cell biology, tissue engineering, cancer, and disease research. For example, the direct dependence of cell growth rate on cell mass for individual adherent human cells can elucidate the mechanisms underlying cell cycle progression. Here we develop an array of micro-electro-mechanical systems (MEMS) resonant mass sensors that can be used to directly measure the biophysical properties, mass, and growth rate of single adherent cells. Unlike conventional cantilever mass sensors, our sensors retain a uniform mass sensitivity over the cell attachment surface. By measuring the frequency shift of the mass sensors with growing (soft) cells and fixed (stiff) cells, and through analytical modeling, we derive the Young's modulus of the unfixed cell and unravel the dependence of the cell mass measurement on cell stiffness. Finally, we grew individual cells on the mass sensors and measured their mass for 50+ hours. Our results demonstrate that adherent human colon epithelial cells have increased growth rates with a larger cell mass, and the average growth rate increases linearly with the cell mass, at 3.25%/hr. Our sensitive mass sensors with a position-independent mass sensitivity can be coupled with microscopy for simultaneous monitoring of cell growth and status, and provide an ideal method to study cell growth, cell cycle progression, differentiation, and apoptosis.

Measurement of adherent cell mass and growth.

La caract&#xE9;risation des propri&#xE9;t&#xE9;s physiques des cellules telles que leur masse et la rigidit&#xE9; a &#xE9;t&#xE9; d&#x26;#39;un grand int&#xE9;r&#xEA;t et peut avoir de profondes implications en biologie cellulaire, ing&#xE9;nierie tissulaire, le cancer et la recherche de la maladie. Par exemple, la d&#xE9;pendance directe du taux de croissance des cellules de la masse cellulaire pour individuels adh&#xE9;rentes des cellules humaines peuvent &#xE9;lucider les m&#xE9;canismes qui sous-tendent la progression du cycle cellulaire. Ici, nous d&#xE9;veloppons un r&#xE9;seau de micro-syst&#xE8;mes &#xE9;lectro-m&#xE9;caniques (MEMS) de capteurs de masse de r&#xE9;sonance qui peuvent &#xEA;tre utilis&#xE9;s pour mesurer directement les propri&#xE9;t&#xE9;s biophysiques, la masse, et le taux de croissance de simples cellules adh&#xE9;rentes. Contrairement aux capteurs de masse en porte &#xE0; faux, nos capteurs de conserver une sensibilit&#xE9; de masse uniforme sur toute la surface de fixation cellulaire. En mesurant le d&#xE9;calage de fr&#xE9;quence des capteurs de masse avec la croissance (molle) et des cellules fixes (raide), et gr&#xE2;ce &#xE0; la mod&#xE9;lisation analytique, nous tirons le module de Young de la cellule non fix&#xE9;e et de d&#xE9;m&#xEA;ler la d&#xE9;pendance de la mesure de la masse cellulaire sur la rigidit&#xE9; des cellules. Enfin, nous avons grandi cellules individuelles sur les capteurs de masse et mesur&#xE9; leur masse pendant 50 heures +. Nos r&#xE9;sultats d&#xE9;montrent que les cellules du c&#xF4;lon adh&#xE9;rentes &#xE9;pith&#xE9;liales humaines ont augment&#xE9; les taux de croissance avec une plus grande masse de cellules, et le taux de croissance moyen augmente lin&#xE9;airement avec la masse cellulaire, &#xE0; 3,25% / h. Nos capteurs de masse sensibles avec une sensibilit&#xE9; de masse ind&#xE9;pendant de la position peut &#xEA;tre coupl&#xE9;e &#xE0; la microscopie pour la surveillance simultan&#xE9;e de la croissance cellulaire et de l&#x26;#39;&#xE9;tat, et de fournir une m&#xE9;thode id&#xE9;ale pour &#xE9;tudier la croissance des cellules, la progression du cycle cellulaire, la diff&#xE9;renciation et l&#x26;#39;apoptose.

Mesure de la masse de cellules adh&#xE9;rentes et de croissance

Die Charakterisierung der physikalischen Eigenschaften von Zellen wie ihrer Masse und Steifigkeit ist von gro&szlig;em Interesse und kann tief greifende Auswirkungen in Zelle Biologie, Tissue-Engineering, Krebs und Krankheit-Forschung haben. Beispielsweise kann die direkte Abh&auml;ngigkeit der Wachstumsrate der Zelle Zelle Masse f&uuml;r einzelne anhaftende menschliche Zellen die Mechanismen, die Zellzyklusprogression erhellen. Hier entwickeln wir ein Array von Mikro-Elektro-mechanischen Systemen (MEMS) resonanten Masse Sensoren, die verwendet werden k&ouml;nnen, um die biophysikalische Eigenschaften, Masse und Wachstum Rate der einzelnen adh&auml;rente Zellen direkt zu messen. Im Gegensatz zu herk&ouml;mmlichen Freischwinger Masse Sensoren bewahren Sie unsere Sensoren eine einheitliche Masse Empfindlichkeit &uuml;ber Zelle Ansatzfl&auml;che. Durch Messung der Frequenz-Verschiebung der Massen Sensoren mit wachsender (weich) und feste (steif) Zellen und durch analytische Modellierung, wir leiten das Elastizit&auml;tsmodul der ungebundenen Zelle und die Abh&auml;ngigkeit der Zelle Masse Messung auf Zelle Steifigkeit zu entwirren. Schlie&szlig;lich wuchs der einzelne Zellen auf die Massen Sensoren und ihre Masse f&uuml;r 50 + Stunden gemessen. Unsere Ergebnisse zeigen, dass anhaftende menschlichen Doppelpunkt Epithelzellen haben Wachstumsraten mit einer gr&ouml;&szlig;eren Masse der Zelle erh&ouml;ht, und die durchschnittliche Wachstumsrate linear mit der Masse der Zelle, bei 3.25%/hr steigt. Unsere empfindlichen Massen Sensoren mit einer Lage-unabh&auml;ngige Masse Empfindlichkeit Koppelbar mit Mikroskopie zur gleichzeitigen &Uuml;berwachung von Zellwachstum und Status und bieten eine ideale Methode, um Zellwachstum, Zellzyklusprogression, Differenzierung und Apoptose zu studieren.

Messung der anhaftende Zelle Masse und Wachstum.

La caratterizzazione delle propriet&agrave; fisiche delle cellule come la loro massa e rigidezza &egrave; stata di grande interesse e pu&ograve; avere profonde implicazioni nella biologia cellulare, ingegneria tissutale, cancro e ricerca delle malattie. Ad esempio, la dipendenza diretta del tasso di crescita delle cellule su cell mass per singole celle umane aderenti pu&ograve; delucidare i meccanismi alla base di progressione del ciclo cellulare. Qui sviluppiamo una serie di sistemi micro-elettro-meccanici (MEMS) sensori massa risonante che pu&ograve; essere utilizzato per misurare direttamente il biofisico propriet&agrave;, massa e tasso di crescita delle singole celle aderenti. A differenza dei sensori massa cantilever convenzionali, nostri sensori conservano una sensibilit&agrave; di massa uniforme sopra la superficie di attacco delle cellule. Misurando lo spostamento di frequenza dei sensori massa con crescente (morbido) e cellule fisse (rigide) e attraverso la modellazione analitica, noi derivano il modulo di Young della cella slegato e svelare la dipendenza della misurazione della massa cellulare sulla rigidit&agrave; della cellula. Infine, &egrave; cresciuto di singole celle sui sensori di massa e misurato la loro massa per 50++ ore. I nostri risultati dimostrano che aderente cellule epiteliali umane del colon hanno aumentato i tassi di crescita con una massa di cellule pi&ugrave; grande, e il tasso di crescita medio aumenta linearmente con la massa delle cellule, a 3.25%/hr. Nostri sensori sensibili di massa con una sensibilit&agrave; di massa indipendente dalla posizione possono essere accoppiati con microscopia per il monitoraggio simultaneo di status e di crescita delle cellule e forniscono un metodo ideale per studiare la crescita cellulare, ciclo cellulare, differenziazione e apoptosi.

Misurazione dell&#39;aderente cella massa e crescita.

&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x8CEA;&#x91CF;&#x3084;&#x525B;&#x6027;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7269;&#x7406;&#x7684;&#x6027;&#x8CEA;&#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x95A2;&#x5FC3;&#x3092;&#x96C6;&#x3081;&#x3066;&#x304D;&#x305F;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x3001;&#x7D44;&#x7E54;&#x5DE5;&#x5B66;&#x3001;&#x764C;&#x3001;&#x75BE;&#x60A3;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x6DF1;&#x9060;&#x306A;&#x610F;&#x5473;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305F;&#x3068;&#x3048;&#x3070;&#x3001;&#x500B;&#x3005;&#x306E;&#x63A5;&#x7740;&#x6027;&#x306E;&#x30D2;&#x30C8;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x584A;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x901F;&#x5EA6;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x306E;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x306E;&#x9032;&#x884C;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x89E3;&#x660E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x200B;&#x200B;&#x30ED;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#xFF08;MEMS&#xFF09;&#x3092;&#x76F4;&#x63A5;&#x751F;&#x7269;&#x7269;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x7279;&#x6027;&#x3001;&#x8CEA;&#x91CF;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5358;&#x4E00;&#x63A5;&#x7740;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x901F;&#x5EA6;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x5171;&#x9CF4;&#x8CEA;&#x91CF;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B5;&#x306E;&#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5F93;&#x6765;&#x306E;&#x30AB;&#x30F3;&#x30C1;&#x30EC;&#x30D0;&#x30FC;&#x306E;&#x8CEA;&#x91CF;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x3068;&#x306F;&#x7570;&#x306A;&#x308A;&#x3001;&#x5F53;&#x793E;&#x306E;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x63A5;&#x7740;&#x9762;&#x4E0A;&#x306B;&#x5747;&#x4E00;&#x306A;&#x8CEA;&#x91CF;&#x611F;&#x5EA6;&#x3092;&#x4FDD;&#x6301;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6210;&#x9577;&#xFF08;&#x30BD;&#x30D5;&#x30C8;&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x56FA;&#x5B9A;&#xFF08;&#x786C;&#x3044;&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x8CEA;&#x91CF;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x306E;&#x5468;&#x6CE2;&#x6570;&#x30B7;&#x30D5;&#x30C8;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x5206;&#x6790;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x901A;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x4E0D;&#x5B9A;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x30E4;&#x30F3;&#x30B0;&#x7387;&#x3092;&#x5C0E;&#x51FA;&#x3057;&#x3001;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x525B;&#x6027;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x8CEA;&#x91CF;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x306E;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x3092;&#x89E3;&#x660E;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x8CEA;&#x91CF;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x4E0A;&#x306E;&#x500B;&#x3005;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x6210;&#x9577;&#x3057;&#x3001;50&#x6642;&#x9593;&#x4EE5;&#x4E0A;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x8CEA;&#x91CF;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x4ED8;&#x7740;&#x6027;&#x30D2;&#x30C8;&#x7D50;&#x8178;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x584A;&#x3067;&#x6210;&#x9577;&#x7387;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x3001;&#x5E73;&#x5747;&#x6210;&#x9577;&#x7387;&#x304C;3.25&#xFF05;/ hr&#x3067;&#x3001;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x8CEA;&#x91CF;&#x306B;&#x6BD4;&#x4F8B;&#x3057;&#x3066;&#x5897;&#x52A0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x8CEA;&#x91CF;&#x611F;&#x5EA6;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x611F;&#x5EA6;&#x8CEA;&#x91CF;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30B9;&#x30C6;&#x30FC;&#x30BF;&#x30B9;&#x306E;&#x540C;&#x6642;&#x30E2;&#x30CB;&#x30BF;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3068;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x306E;&#x9032;&#x884C;&#x3001;&#x5206;&#x5316;&#x3001;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x7406;&#x60F3;&#x7684;&#x306A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

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&#xBD80;&#xCC29; &#xD55C; &#xCE21;&#xC815; &#xC140; &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBC0F; &#xC131;&#xC7A5;.

La caracterizaci&#xF3;n de las propiedades f&#xED;sicas de las c&#xE9;lulas, tales como su masa y la rigidez ha sido de gran inter&#xE9;s y puede tener profundas implicaciones en la biolog&#xED;a celular, la ingenier&#xED;a de tejidos, el c&#xE1;ncer y la investigaci&#xF3;n de enfermedades. Por ejemplo, la dependencia directa de la tasa de crecimiento de c&#xE9;lulas en masa de c&#xE9;lulas individuales para las c&#xE9;lulas humanas adherentes pueden aclarar los mecanismos que subyacen a la progresi&#xF3;n del ciclo celular. Aqu&#xED; se desarrollan una serie de micro-electro-mec&#xE1;nicos (MEMS), sensores de masa resonantes que se pueden utilizar para medir directamente las propiedades biof&#xED;sicas, masa, y la tasa de crecimiento de c&#xE9;lulas adherentes individuales. A diferencia de los sensores en voladizo de masas, nuestros sensores retener una sensibilidad masa uniforme sobre la superficie de uni&#xF3;n celular. Al medir el desplazamiento de la frecuencia de los sensores de masa con el aumento (suave) y las c&#xE9;lulas fijas (r&#xED;gidas), y por medio de modelos anal&#xED;ticos, se deriva el m&#xF3;dulo de Young de la c&#xE9;lula sin fijar y desentra&#xF1;ar la dependencia de la medici&#xF3;n de la masa de c&#xE9;lulas en la rigidez de la c&#xE9;lula. Por &#xFA;ltimo, se cultivaron c&#xE9;lulas individuales en los sensores de masa y se mide su masa de m&#xE1;s de 50 horas. Nuestros resultados demuestran que adherentes c&#xE9;lulas epiteliales del colon humanas han aumentado las tasas de crecimiento con una masa de c&#xE9;lulas grandes, y la tasa media de crecimiento se incrementa linealmente con la masa celular, en el 3,25% / h. Nuestros sensores de masa sensibles con una sensibilidad de masas independiente de la posici&#xF3;n puede ser acoplado con el microscopio para el monitoreo simult&#xE1;neo de crecimiento celular y el estado, y proporcionar un m&#xE9;todo ideal para estudiar el crecimiento celular, la progresi&#xF3;n del ciclo celular, diferenciaci&#xF3;n y apoptosis.

Medici&#xF3;n de la masa de c&#xE9;lulas adherentes y Crecimiento

&#xC6B0;&#xB9AC; &#xC0C8;&#xB85C; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xB41C; &#xB41C; &#xD478;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xBCC0;&#xD658; &#xBE5B; &#xBE44; &#xC0B0; (FTLS) &#xB3D9;&#xC801; &#xAD11; &#xC0B0;&#xB780; &#xC2DC;&#xAC04; &#xCD08; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC801; &#xADDC;&#xBAA8; &#xB2E8;&#xC77C; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC140; &#xACF5;&#xBD80;&#xB97C; &#xC801;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD65C;&#xC131; &#xB9D0;&#xB77C; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xACE0; &#xB098;&#xB178; &#xC140; &#xBCC0;&#xB3D9;&#xC740; &#xCE21;&#xC815; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; FTLS&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; spatio &#xC2DC;&#xAC04;&#xC801; &#xC2E0;&#xD638; glial &#xC138;&#xD3EC; (&#xC2E0;&#xACBD; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC8FC;&#xB41C; &#xC140; &#xD0C0;&#xC785;)&#xC758; &#xD765;&#xBBF8;&#xB85C;&#xC6B4; cytoskeleton &#xC5ED;&#xD559; &#xACF5;&#xAC1C; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xB9D0;&#xB77C; cytoskeleton&#xC758; &#xC561;&#xD2F0;&#xBE0C; &#xAE30;&#xC5EC; Cytochalasin-D, &#xB9D0;&#xB77C; &#xD569;/depolymerization&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xC57D;&#xBB3C;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xB3D9;&#xC801; &#xC18D;&#xC131;&#xC744; &#xBCC0;&#xC870; &#xD558; &#xC5EC; &#xC5BB;&#xC740; &#xD588;&#xB2E4;.

&#xB9D0;&#xB77C; &#xAD6C;&#xB3D9; &#xC140; &#xC5ED;&#xD559; &#xD478;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xBCC0;&#xD658; &#xBE5B; &#xBE44; &#xC0B0;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC870;&#xC0AC;.

Aplicamos el reci&eacute;n desarrollada Fourier transforma luz dispersi&oacute;n (FTLS) para el estudio de la dispersi&oacute;n de la luz din&aacute;mica en c&eacute;lulas vivas solas, en una escala temporal de segundos a horas. Las fluctuaciones de la c&eacute;lula de nanoescala se midieron con y sin la contribuci&oacute;n de los activos de la actina. Encontramos experimentalmente que las se&ntilde;ales spatio-temporales por FTLS revelan interesante din&aacute;mica del citoesqueleto de c&eacute;lulas gliales (el tipo celular predominante en el sistema nervioso). La contribuci&oacute;n activa del citoesqueleto de actina se obtuvo mediante la modulaci&oacute;n de sus propiedades din&aacute;micas por la Citocalasina-D, un f&aacute;rmaco que inhibe la polimerizaci&oacute;n/despolimerizaci&oacute;n de la actina.

Din&aacute;mica celular basadas en actina sondeado por la dispersi&oacute;n de la luz de la transformaci&oacute;n de Fourier.

We applied the newly developed Fourier transform light scattering (FTLS) to study dynamic light scattering in single live cells, at a temporal scale of seconds to hours. The nanoscale cell fluctuations were measured with and without the active actin contribution. We found experimentally that the spatio-temporal signals rendered by FTLS reveal interesting cytoskeleton dynamics in glial cells (the predominant cell type in the nervous system). The active contribution of actin cytoskeleton was obtained by modulating its dynamic properties via Cytochalasin-D, a drug that inhibits actin polymerization/depolymerization.

Actin-driven cell dynamics probed by Fourier transform light scattering.

Nous avons appliqu&eacute; la developp&eacute; r&eacute;cemment Fourier transform diffusion de la lumi&egrave;re (FTL) d&#39;&eacute;tudier la diffusion dynamique de la lumi&egrave;re dans des cellules vivantes unique, &agrave; une &eacute;chelle temporelle d&#39;heures en secondes. Les fluctuations de cellule nanom&eacute;triques ont &eacute;t&eacute; mesur&eacute;es avec et sans la contribution active de l&#39;actine. Nous avons constat&eacute; exp&eacute;rimentalement que les signaux spatio-temporelle rendus par FTL r&eacute;v&egrave;lent int&eacute;ressante dynamique du cytosquelette dans les cellules gliales (le type cellulaire pr&eacute;dominant dans le syst&egrave;me nerveux). La contribution active du cytosquelette d&#39;actine a &eacute;t&eacute; obtenue en modulant ses propri&eacute;t&eacute;s dynamiques via cytochalasine-D, un m&eacute;dicament qui inhibe la polym&eacute;risation/d&eacute;polym&eacute;risation de l&#39;actine.

Dynamique ax&eacute;e sur l&#39;actine cellulaire sond&eacute;e par la diffusion de la lumi&egrave;re Fourier transform.

Wir angewendet, das neu entwickelte Fourier Transform Licht Streuung (FTLS), Dynamische Lichtstreuung in Einzelzellen Leben im zeitlichen Ma&szlig;stab Sekunden bis Stunden zu studieren. Die nanoskaligen Zelle Schwankungen wurden mit und ohne der aktiven Aktin-Beitrag gemessen. Wir haben experimentell gefunden, dass die r&auml;umlich-zeitliche Signale von FTLS erbrachte interessante Zytoskelett Dynamik in Gliazellen (die vorherrschenden Zelltyp im Nervensystem) zeigen. Aktive Beteiligung des Aktin-Zytoskeletts wurde durch seine dynamischen Eigenschaften &uuml;ber Cytochalasin-D, ein Medikament, das hemmt die Aktin-Polymerisation/Depolymerisation Modulation erhalten.

Aktin-gesteuerte Zelle Dynamik durch Fourier-Transform-Licht Streuung sondiert.

Abbiamo applicato la recente sviluppata Fourier transform luce scattering (FTLS) per studiare la diffusione dinamica della luce in singole cellule vive, in una scala temporale dei secondi a ore. Le fluttuazioni di cella su scala nanometrica sono state misurate con e senza il contributo attivo dell&#39;actina. Abbiamo trovato sperimentalmente che i segnali di spazio-temporali restituiti da FTLS rivelano interessanti dinamiche del citoscheletro in cellule gliali (il tipo cellulare predominante nel sistema nervoso). Il contributo attivo del citoscheletro di actina &egrave; stato ottenuto modulando le propriet&agrave; dinamiche via citocalasina-D, un farmaco che inibisce la polimerizzazione/depolimerizzazione dell&#39;actina.

Dinamiche di actina-driven cella sondati dalla luce di trasformazione di Fourier scattering.

&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;&#x65B0;&#x3057;&#x304F;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x305F;&#x30D5;&#x30FC;&#x30EA;&#x30A8;&#x5909;&#x63DB;&#x5149;&#x6563;&#x4E71; (FTLS) &#x6642;&#x9593;&#x3092;&#x79D2;&#x306E;&#x6642;&#x9593;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30EB;&#x3067;&#x306E;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x751F;&#x304D;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30BB;&#x30EB;&#x3067;&#x52D5;&#x7684;&#x5149;&#x6563;&#x4E71;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x7814;&#x7A76;&#x306B;&#x9069;&#x7528;&#x3002;&#x30CA;&#x30CE;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30EB;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x3086;&#x3089;&#x304E;&#x3068;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306A;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x8CA2;&#x732E;&#x3092;&#x305B;&#x305A;&#x306B;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x5B9F;&#x9A13;&#x7684; FTLS &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C0;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x6642;&#x7A7A;&#x4FE1;&#x53F7;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE; &#xFF08;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306E;&#x512A;&#x52E2;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x578B;) &#x306E;&#x8208;&#x5473;&#x6DF1;&#x3044;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x306E;&#x7A4D;&#x6975;&#x7684;&#x306A;&#x8CA2;&#x732E;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x91CD;&#x5408;&#x30FB;&#x8131;&#x91CD;&#x5408;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x85AC;&#x7269;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30E9;&#x30B7;&#x30F3; D &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x52D5;&#x7684;&#x306A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D1;&#x30C6;&#x30A3;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x30D5;&#x30FC;&#x30EA;&#x30A8;&#x5909;&#x63DB;&#x5149;&#x6563;&#x4E71;&#x6CD5;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6; &#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x99C6;&#x52D5;&#x7D30;&#x80DE;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x3002;

&#x6211;&#x4EEC;&#x91C7;&#x7528;&#x4E86;&#x65B0;&#x5F00;&#x53D1;&#x5085;&#x91CC;&#x53F6;&#x53D8;&#x6362;&#x5149;&#x6563;&#x5C04; &#xFF08;FTLS&#xFF09;&#xFF0C;&#x7814;&#x7A76;&#x52A8;&#x6001;&#x5149;&#x6563;&#x5C04;&#x5728;&#x5355;&#x4E2A;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#xFF0C;&#x5728;&#x6570;&#x79D2;&#x5230;&#x5C0F;&#x65F6;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x5C3A;&#x5EA6;&#x3002;&#x7EB3;&#x7C73;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6CE2;&#x52A8;&#x6D4B;&#x91CF;&#x5E76;&#x6CA1;&#x6709;&#x79EF;&#x6781;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x8D21;&#x732E;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x901A;&#x8FC7;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x53D1;&#x73B0;&#x7531; FTLS &#x5448;&#x73B0;&#x7684;&#x65F6;&#x7A7A;&#x4FE1;&#x53F7;&#x63ED;&#x793A;&#x795E;&#x7ECF;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE; (&#x5728;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#xFF09; &#x4E2D;&#x7684;&#x6709;&#x8DA3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x3002;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x6240;&#x4F5C;&#x7684;&#x79EF;&#x6781;&#x8D21;&#x732E;&#x83B7;&#x5F97;&#x901A;&#x8FC7;&#x8C03;&#x8282; Cytochalasin D&#x3001; &#x6291;&#x5236;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x805A;&#x5408;/&#x89E3;&#x805A;&#x7684;&#x836F;&#x7269;&#x901A;&#x8FC7;&#x5176;&#x52A8;&#x6001;&#x5C5E;&#x6027;&#x3002;

&#x5085;&#x91CC;&#x53F6;&#x53D8;&#x6362;&#x5149;&#x6563;&#x5C04;&#x63A2;&#x6D4B;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x9A71;&#x52A8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x3002;

&#xACF5;&#xAC04; &#xBE5B; &#xAC04;&#xC12D; &#xB2E8;&#xCE35; &#xCD2C;&#xC601; (&#xC2AC;&#xB9BF;), &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC140; &#xAC19;&#xC740; &#xD22C;&#xBA85; &#xD55C; &#xAD6C;&#xC870;&#xC758; 3 &#xCC28;&#xC6D0; &#xC601;&#xC0C1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB808;&#xC774;&#xBE14; &#xC5C6;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC18C;&#xAC1C;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2AC;&#xB9BF; &#xAC04;&#xC12D; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5;&#xC758; &#xC6D0;&#xB9AC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xAD11;&#xB300;&#xC5ED; &#xD544;&#xB4DC;&#xC640; &#xB192;&#xC740; &#xC22B;&#xC790; &#xC870;&#xB9AC;&#xAC1C; &#xB300;&#xBB3C; &#xB80C;&#xC988;&#xC758; &#xBBF8;&#xD06C;&#xB860; &#xB2E8;&#xC704; &#xC77C;&#xAD00;&#xC131; &#xAE38;&#xC774; &#xB530;&#xB978; &#xAD11; &#xAC8C;&#xC774;&#xD305; &#xACB0;&#xD569; &#xD558; &#xC5EC;. &#xC704;&#xC0C1; &#xBCC0;&#xD654; &#xCE21;&#xC815;&#xC73C;&#xB85C; &#xCD08;&#xC810;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xBCC0;&#xD658; &#xAC1C;&#xCCB4;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC9C0;&#xB3C4; &#xAD74;&#xC808; &#xC778;&#xB371;&#xC2A4;&#xC640; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; 3 &#xCC28;&#xC6D0; &#xBD84;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC804;&#xCCB4; &#xC815;&#xBCF4;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD0DC;&#xC5B4;&#xB09C;&#xB41C; &#xADFC;&#xC0AC;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC7AC;&#xAD6C;&#xC131; &#xC54C;&#xACE0;&#xB9AC;&#xC998;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC0D8;&#xD50C; &#xAD6C;&#xC870;, &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; 3D &#xD544;&#xB4DC; deconvolution&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xBCF5;&#xAD6C;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; microspheres, &#xAD11;&#xC790; &#xACB0;&#xC815; &#xBC0F; &#xD760; &#xC5C6;&#xB294; &#xC0B4;&#xC544;&#xC788;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xBCF5;&#xC6D0;&#xB41C; &#xB2E8;&#xCE35; &#xAD74;&#xC808;&#xB960; &#xBD84;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xACF5;&#xAC04; &#xBE5B; &#xAC04;&#xC12D; &#xB2E8;&#xCE35; &#xCD2C;&#xC601; (&#xC2AC;&#xB9BF;)&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Presentamos la tomograf&iacute;a interferencia espacial de la luz (Raja), un m&eacute;todo sin etiqueta para obtener im&aacute;genes 3D de estructuras transparentes como c&eacute;lulas vivas. Raja utiliza el principio de la proyecci&oacute;n de imagen de interferometr&iacute;a con campos de banda ancha y combina la compuerta &oacute;ptico debido a la longitud de coherencia de microescala con eso de la lente del objetivo de gran apertura num&eacute;rica. Medir el desplazamiento de fase mapa asociado al objeto como se traduce a trav&eacute;s de enfoque proporciona informaci&oacute;n completa sobre la distribuci&oacute;n 3D asociada con el &iacute;ndice de refracci&oacute;n. Utilizando un algoritmo de reconstrucci&oacute;n basado en la aproximaci&oacute;n de Born, demostramos que la estructura de la muestra puede ser recuperada mediante una deconvoluci&oacute;n de campo 3D, complejo. Ilustramos el m&eacute;todo con distribuciones de reconstrucci&oacute;n tomogr&aacute;fica &iacute;ndice de refracci&oacute;n de microesferas, cristales fot&oacute;nicos y c&eacute;lulas vivas sin te&ntilde;ir.

Tomograf&iacute;a de interferencia de la luz espacial (Raja).

&#x6211;&#x4EEC;&#x76EE;&#x524D;&#x7A7A;&#x95F4;&#x5149;&#x5E72;&#x6D89;&#x65AD;&#x5C42;&#x6210;&#x50CF; &#xFF08;&#x7F1D;&#x9699;&#xFF09;&#xFF0C;&#x900F;&#x660E;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#xFF0C;&#x5982;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x4E09;&#x7EF4;&#x6210;&#x50CF;&#x65E0;&#x6807;&#x7B7E;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x72ED;&#x7F1D;&#x4E0E;&#x5BBD;&#x5E26;&#x9886;&#x57DF;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x5E72;&#x6D89;&#x6210;&#x50CF;&#x539F;&#x7406;&#x4E0E;&#x7ED3;&#x5408;&#x5149;&#x5B66;&#x6D47;&#x6CE8;&#x7531;&#x4E8E;&#x5FAE;&#x7C73;&#x5C3A;&#x5EA6;&#x76F8;&#x5E72;&#x957F;&#x5EA6;&#x4E0E;&#x9AD8;&#x6570;&#x503C;&#x5B54;&#x5F84;&#x7684;&#x7269;&#x955C;&#x3002;&#x6D4B;&#x91CF;&#x76F8;&#x79FB;&#x4E0E;&#x5BF9;&#x8C61;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x91CD;&#x70B9;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x51FA;&#x6765;&#x7684;&#x5730;&#x56FE;&#x63D0;&#x4F9B;&#x6709;&#x5173;&#x6298;&#x5C04;&#x7387;&#x4E0E;&#x5173;&#x8054;&#x7684; 3D &#x5206;&#x5E03;&#x7684;&#x5B8C;&#x6574;&#x4FE1;&#x606F;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E00;&#x79CD;&#x57FA;&#x4E8E;&#x51FA;&#x751F;&#x7684;&#x8FD1;&#x4F3C;&#x7684;&#x91CD;&#x5EFA;&#x7B97;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x663E;&#x793A;&#x6837;&#x672C;&#x7ED3;&#x6784;&#x53EF;&#x901A;&#x8FC7; 3D&#x3001; &#x590D;&#x6742;&#x9886;&#x57DF;&#x53CD;&#x5377;&#x79EF;&#x8FFD;&#x56DE;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BF4;&#x660E;&#x4E0E;&#x91CD;&#x5EFA;&#x65AD;&#x5C42;&#x6298;&#x5C04;&#x7387;&#x5206;&#x5E03;&#x5FAE;&#x7403;&#x3001; &#x5149;&#x5B50;&#x6676;&#x4F53;&#x548C;&#x5BB6;&#x4EBA;&#x6E05;&#x6E05;&#x767D;&#x767D;&#x7684;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;

&#x7A7A;&#x95F4;&#x5149;&#x5B66;&#x5E72;&#x6D89;&#x65AD;&#x5C42;&#x6210;&#x50CF; (&#x7F1D;)&#x3002;

We present spatial light interference tomography (SLIT), a label-free method for 3D imaging of transparent structures such as live cells. SLIT uses the principle of interferometric imaging with broadband fields and combines the optical gating due to the micron-scale coherence length with that of the high numerical aperture objective lens. Measuring the phase shift map associated with the object as it is translated through focus provides full information about the 3D distribution associated with the refractive index. Using a reconstruction algorithm based on the Born approximation, we show that the sample structure may be recovered via a 3D, complex field deconvolution. We illustrate the method with reconstructed tomographic refractive index distributions of microspheres, photonic crystals, and unstained living cells.

Spatial light interference tomography (SLIT).

Nous pr&eacute;sentons la tomographie de l&#39;interf&eacute;rence de lumi&egrave;re spatiale (fente), une m&eacute;thode sans &eacute;tiquette d&#39;imagerie 3D des structures transparentes telles que les cellules vivantes. FENTE utilise le principe de l&#39;imagerie interf&eacute;rom&eacute;trique avec des champs &agrave; large bande et combine le d&eacute;clenchement optique en raison de la longueur de coh&eacute;rence &agrave; l&#39;&eacute;chelle du micron avec celle de l&#39;objectif de forte ouverture num&eacute;rique. Mesurer le d&eacute;calage de phase associ&eacute; &agrave; l&#39;objet qu&#39;il est traduit par le biais de carte fournit une information compl&egrave;te sur la distribution 3D correspondant &agrave; l&#39;indice de r&eacute;fraction. &Agrave; l&#39;aide d&#39;un algorithme de reconstruction bas&eacute; sur l&#39;approximation de Born, nous montrons que la structure de l&#39;&eacute;chantillon peut &ecirc;tre recouvr&eacute;e par une d&eacute;convolution 3D, complexe de champ. Nous illustrons la m&eacute;thode avec des distributions de reconstruction tomographique indice de r&eacute;fraction de microsph&egrave;res, cristaux photoniques et cellules vivantes non color&eacute;s.

Tomographie d&#39;interf&eacute;rence lumineuse spatiale (fente).

Wir pr&auml;sentieren die r&auml;umliche Licht Interferenzen Tomographie (Schlitz), eine Bezeichnung-freie Methode f&uuml;r 3D-Imaging transparente Strukturen wie lebenden Zellen. Schlitz nutzt das Prinzip der interferometrische Bildgebung mit Breitband-Felder und verbindet die optischen Anspritzung aufgrund der Koh&auml;renzl&auml;nge Mikron-Skala mit der hohe numerische Apertur-Objektiv. Messung der Phasenverschiebung Karte, die dem Objekt zugeordnet, wie es durch Fokus &uuml;bersetzt bietet vollst&auml;ndige Informationen &uuml;ber die 3D Verteilung der Brechungsindex zugeordnet. Mit einen Wiederaufbau-Algorithmus basiert auf geb. Angleichung, zeigen wir, dass die Probe-Struktur &uuml;ber eine Entwindung 3D, komplexe Feld wiederhergestellt werden kann. Wir veranschaulichen die Methode mit rekonstruierten tomographischen Brechungsindex Verteilungen von Mikrosph&auml;ren, Photonische Kristalle und Ungef&auml;rbtes lebender Zellen.

R&auml;umliche Licht Interferenzen Tomographie (SLIT).

Vi presentiamo la tomografia di interferenza luminosa spaziale (fessura), un metodo privo di etichetta per l&#39;imaging 3D di strutture trasparenti come cellule vive. FESSURA utilizza il principio dell&#39;interferometric imaging con campi a banda larga e combina il gating ottico a causa della lunghezza di coerenza di micron-scala con quello della lente dell&#39;obiettivo alta apertura numerica. Misurare lo sfasamento mappa associato con l&#39;oggetto come &egrave; tradotto attraverso focus fornisce informazioni complete circa la distribuzione 3D associata l&#39;indice di rifrazione. Utilizzando un algoritmo di ricostruzione basato sull&#39;approssimazione di Born, mostriamo che la struttura del campione pu&ograve; essere recuperata tramite una deconvoluzione 3D, complesso campo. Illustriamo il metodo con indice di rifrazione tomografica ricostruito distribuzioni di microsfere, cristalli fotonici e cellule viventi non marcate.

Tomografia di interferenza luminosa spaziale (fessura).

&#x7A7A;&#x9593;&#x5149;&#x5E72;&#x6E09;&#x65AD;&#x5C64;&#x64AE;&#x5F71; (&#x30B9;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C8;) &#x900F;&#x660E;&#x306A;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x751F;&#x304D;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30BB;&#x30EB;&#x306A;&#x3069;&#x306E; 3 D &#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x7121;&#x6599;&#x306E;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EB;&#x6CD5;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;.&#x30B9;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C8; &#x30D6;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C9; &#x30D0;&#x30F3;&#x30C9; &#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C9;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x5E72;&#x6E09;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x539F;&#x7406;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3001;&#x30DF;&#x30AF;&#x30ED;&#x30F3; &#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x30B3;&#x30D2;&#x30FC;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B9;&#x9577;&#x3068;&#x9AD8;&#x958B;&#x53E3;&#x306E;&#x5BFE;&#x7269;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x306E;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5149;&#x30B2;&#x30FC;&#x30C8;&#x52D5;&#x4F5C;&#x3092;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x305F;&#x3002;&#x4F4D;&#x76F8;&#x30B7;&#x30D5;&#x30C8;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30AB;&#x30B9;&#x3092;&#x5909;&#x63DB;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x30AA;&#x30D6;&#x30B8;&#x30A7;&#x30AF;&#x30C8;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x30DE;&#x30C3;&#x30D7;&#x306F;&#x3001;&#x5C48;&#x6298;&#x7387;&#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B; 3&#x6B21;&#x5143;&#x5206;&#x5E03;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x5B8C;&#x5168;&#x306A;&#x60C5;&#x5831;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x751F;&#x307E;&#x308C;&#x306E;&#x8FD1;&#x4F3C;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F;&#x518D;&#x69CB;&#x6210;&#x30A2;&#x30EB;&#x30B4;&#x30EA;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x306F; 3 D&#x3001;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C9; &#x30C7;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DC;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x56DE;&#x5FA9;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7403;&#x3001;&#x30D5;&#x30A9;&#x30C8;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x7D50;&#x6676;&#x3001;&#x7121;&#x67D3;&#x8272;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x518D;&#x69CB;&#x6210;&#x65AD;&#x5C64;&#x5C48;&#x6298;&#x7387;&#x5206;&#x5E03;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x7A7A;&#x9593;&#x5149;&#x5E72;&#x6E09;&#x65AD;&#x5C64;&#x6CD5; &#xFF08;&#x30B9;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C8;&#xFF09;&#x3002;

Das Nervensystem ist eine komplexe, hoch geordnete, integrierte Netzwerk von Zellen. Verteilte Kulturen von Neuronen aktivieren Ermittlungen systeminterne zellul&auml;ren Funktionen ohne die Komplexit&auml;t, die inh&auml;renten im intakten Nervensystem. Diese Kultur wird eine homogen verteilte Bev&ouml;lkerung, die r&auml;umlich zuf&auml;lligen wird generiert. Trotz der riesigen Anzahl von Studien unter Verwendung verstreut Neuronen, wenige Studien Adresse die r&auml;umliche Verteilung von gro&szlig;en Populationen von Neuronen, in-vitro. Wir verwendet, Ink-Jet-Druck und Oberfl&auml;chenchemie gemusterten Bereiche mit Poly-Lysin Kraftschlu&szlig;beiwert (&sim;50 &mu;m Punkte) vor dem Hintergrund der fluorierten-Silan gegen&uuml;bergestellt. Quantitativ analysieren wir die Bev&ouml;lkerung aus gemusterten Neuronen auf gedruckten Protein-Spots und ungemusterten Neuronen. Mit einem Microarray-Scanner, erwarben wir gro&szlig;e Bilder (72 mm &times; 22 mm) der Muster und Neuronen mit und ohne Muster. Schnelle Fourier-Transformation (FFT)-Bild-Analyse wurde verwendet, um die globale Ausrichtung der Neuronen im Muster zu bestimmen. Durch Punkt-Muster-Analyse beschrieben wir die r&auml;umliche Organisation der verteilten Neuronen mit oder ohne, gemusterte Untergr&uuml;nde. Gemusterte Neuronen zeigen r&auml;umliche Organisation Eigenschaften erinnert der gedruckten Muster, mit r&auml;umlichen Verteilungen Vertreter der ungemusterten Neuronen. Vor allem zeigen sowohl gemusterte und ungemusterten Neuronen Abfahrt von null Modelle der vollst&auml;ndige r&auml;umliche Zuf&auml;lligkeit (CSR; ein homogener Poisson-Prozess) auf k&uuml;rzere Entfernungen mit Konformit&auml;t zu CSR, die bei l&auml;ngeren Strecken. Zellul&auml;re Morphometrie zeigen, dass im Vergleich zu ihren Gegenst&uuml;cken ungemusterten vor Ort-gemustert Neuronen eine deutliche Steigerung (p &lt; 0,0001 zeigen) in die mittlere dendritische Zirkularit&auml;t und eine Zunahme der Anzahl an mehr kreisf&ouml;rmige Neuronen. Durch Neurit Ablaufverfolgung zeigen wir, dass dendritische Prozesse auf gemusterten Bereichen auch sehr beschr&auml;nkt sind und sie durchschnittlich 58 % k&uuml;rzer als Dendriten der Neuronen ohne Muster sind. Unsere Ergebnisse zeigen, dass gemusterte Bereichen der r&auml;umlichen Organisation der Somata und Dendriten der kultivierten Neuronen &auml;ndern und traditionelle neuronale Kulturen von CSR abweichen.

Musteranalyse und r&auml;umliche Verteilung der Neuronen in der Kultur.

Il sistema nervoso &egrave; una rete complessa, altamente ordinato, integrata di cellule. Disperse le culture di neuroni attivare le indagini sulle funzioni intrinseche cellulare senza la complessit&agrave; inerente al sistema nervoso intatto. Questo processo di cultura genera una popolazione omogeneamente dispersa che si presume per essere spazialmente casuale. Nonostante il gran numero di studi che utilizzano dispersi i neuroni, pochi studi indirizzo la distribuzione spaziale di grandi popolazioni di neuroni, in vitro. Abbiamo utilizzato la stampa ink-jet e chimica delle superfici per definire aree fantasia di adesione poli-lisina (&sim;50 macchie &mu;m) giustapposta contro uno sfondo fluorurati-silano. Abbiamo analizzato quantitativamente le popolazioni di neuroni modellati su macchie di proteina stampato e non nanostrutturati neuroni. Utilizzando uno scanner per microarray, abbiamo acquisito grandi immagini (72 mm &times; 22 mm) di modelli e neuroni con e senza disegni. Fast Fourier transformation (FFT) image analysis &egrave; stato utilizzato per determinare l&#39;allineamento globale dei neuroni per modelli. Attraverso l&#39;analisi del modello di punto, abbiamo descritto l&#39;organizzazione spaziale dei neuroni dispersi con, o senza, substrati fantasia. Fantasia neuroni mostrano le caratteristiche di organizzazione spaziale che ricorda modelli stampati, con il rappresentante di distribuzioni spaziali di neuroni non nanostrutturati. Pi&ugrave; in particolare, i neuroni di fantasia e non nanostrutturati Visualizza partenza da null modelli di completa casualit&agrave; spaziali (CSR, un processo di Poisson omogeneo) a distanze con conformit&agrave; alla RSI che si verificano a distanze pi&ugrave; lunghe. Morfometria cellulare Mostra che quando rispetto alle loro controparti non nanostrutturate, spot-modellata neuroni presentano un aumento significativo (p &lt; 0,0001) la circolarit&agrave; dendritica media e un aumento del numero di neuroni pi&ugrave; circolari. Attraverso l&#39;analisi dei neuriti, mostriamo che processi dendritiche anche altamente sono confinati in aree di fantasia, e che sono in media inferiori a dendriti dei neuroni senza modelli il 58%. I nostri risultati mostrano che fantasia aree cambiano l&#39;organizzazione spaziale della somata e dendriti dei neuroni coltivati, e che tradizionali colture neuronali deviano dalla RSI.

Analisi del modello e distribuzione spaziale dei neuroni in coltura.

&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x590D;&#x6742;&#x3001; &#x9AD8;&#x6709;&#x5E8F;&#x3001; &#x7EFC;&#x5408;&#x7684;&#x7F51;&#x7EDC;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x5206;&#x6563;&#x7684;&#x6587;&#x5316;&#x4F7F;&#x5185;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x529F;&#x80FD;&#x6CA1;&#x6709;&#x5B8C;&#x597D;&#x7684;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x56FA;&#x6709;&#x590D;&#x6742;&#x6027;&#x7684;&#x8C03;&#x67E5;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E00;&#x6587;&#x5316;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x751F;&#x6210;&#x5747;&#x5300;&#x5206;&#x6563;&#x7684;&#x4EBA;&#x53E3;&#xFF0C;&#x5219;&#x5047;&#x5B9A;&#x4E3A;&#x7A7A;&#x95F4;&#x4E0A;&#x968F;&#x673A;&#x3002;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x5F88;&#x591A;&#x7814;&#x7A76;&#x5229;&#x7528;&#x5206;&#x6563;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#xFF0C;&#x51E0;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x89E3;&#x51B3;&#x5927;&#x91CF;&#x4EBA;&#x53E3;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#xFF0C;&#x4F53;&#x5916;&#x7684;&#x7A7A;&#x95F4;&#x5206;&#x5E03;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7528;&#x4E8E;&#x55B7;&#x58A8;&#x5370;&#x5237;&#x548C;&#x8868;&#x9762;&#x5316;&#x5B66;&#x5B9A;&#x4E49;&#x56FE;&#x6848;&#x6C1F;&#x7845;&#x70F7;&#x80CC;&#x666F;&#x4E0B;&#x5E76;&#x5217;&#x7684;&#x7C98;&#x8FDE;&#x591A;&#x805A;&#x8D56;&#x6C28;&#x9178; (&sim;50 &mu; m &#x70B9;) &#x7684;&#x5730;&#x533A;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4ECE;&#x6570;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x6253;&#x5370;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x70B9;&#x56FE;&#x6848;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x548C;&#x9635;&#x5217;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x4EBA;&#x53E3;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x82AF;&#x7247;&#x626B;&#x63CF;&#x4EEA;&#xFF0C;&#x540E;&#x5929;&#x5927;&#x56FE;&#x50CF; &#xFF08;72 &#x6BEB;&#x7C73; &times; 22 &#x6BEB;&#x7C73;&#xFF09; &#x7684;&#x6A21;&#x5F0F;&#x548C;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4E0E;&#x65E0;&#x6A21;&#x5F0F;&#x3002;&#x5FEB;&#x901F;&#x5085;&#x91CC;&#x53F6;&#x53D8;&#x6362; (FFT) &#x56FE;&#x50CF;&#x5206;&#x6790;&#x7528;&#x4E8E;&#x786E;&#x5B9A;&#x5168;&#x7403;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x5BF9;&#x6A21;&#x5F0F;&#x7684;&#x5BF9;&#x9F50;&#x65B9;&#x5F0F;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x70B9;&#x6A21;&#x5F0F;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63CF;&#x8FF0;&#x4E86;&#x5206;&#x6563;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x7528;&#x6216;&#x4E0D;&#x5E26;&#x56FE;&#x6848;&#x886C;&#x5E95;&#x7A7A;&#x95F4;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x3002;&#x5E26;&#x56FE;&#x6848;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x663E;&#x793A;&#x7A7A;&#x95F4;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7279;&#x5F81;&#x4E0E;&#x7A7A;&#x95F4;&#x5206;&#x5E03;&#x4EE3;&#x8868;&#x7684;&#x9635;&#x5217;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x5370;&#x82B1;&#x56FE;&#x6848;&#xFF0C;&#x8BA9;&#x4EBA;&#x60F3;&#x8D77;&#x3002;&#x6700;&#x503C;&#x5F97;&#x6CE8;&#x610F;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x56FE;&#x6848;&#x548C;&#x9635;&#x5217;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x663E;&#x793A;&#x7A7A;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x5B8C;&#x6574;&#x7A7A;&#x95F4;&#x968F;&#x673A;&#x6027; &#xFF08;&#x4F01;&#x4E1A;&#x793E;&#x4F1A;&#x8D23;&#x4EFB; &#xFF1B; &#x9F50;&#x6B21;&#x6CCA;&#x677E;&#x8FC7;&#x7A0B;&#xFF09; &#x79BB;&#x5F00;&#x5728;&#x8F83;&#x77ED;&#x7684;&#x8DDD;&#x79BB;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x6574;&#x5408;&#x5230;&#x4F01;&#x4E1A;&#x793E;&#x4F1A;&#x8D23;&#x4EFB;&#x53D1;&#x751F;&#x5728;&#x66F4;&#x957F;&#x7684;&#x8DDD;&#x79BB;&#x3002;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5F62;&#x6001;&#x7279;&#x5F81;&#x663E;&#x793A;&#x4E0E;&#x9635;&#x5217;&#x7684;&#x540C;&#x884C;&#x76F8;&#x6BD4;&#xFF0C;&#x73B0;&#x8D27;&#x56FE;&#x6848;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x663E;&#x8457;&#x589E;&#x52A0; (p &lt; 0.0001&#xFF09; &#x5E73;&#x5747;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x5FAA;&#x73AF;&#x548C;&#x66F4;&#x5706;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x6570;&#x76EE;&#x7684;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x8F74;&#x7A81;&#x8DDF;&#x8E2A;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x8FD8;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x9650;&#x4E8E;&#x56FE;&#x6848;&#x7684;&#x9886;&#x57DF;&#xFF0C;&#x548C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x5E73;&#x5747;&#x90FD;&#x6BD4;&#x65E0;&#x6A21;&#x5F0F;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x6811;&#x7A81;&#x77ED;&#x7684; 58%&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x663E;&#x793A;&#x56FE;&#x6848;&#x7684;&#x9886;&#x57DF;&#x6539;&#x53D8;&#x7A7A;&#x95F4;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x80DE;&#x4F53;&#x548C;&#x6811;&#x7A81;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#xFF0C;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x4F20;&#x7EDF;&#x6587;&#x5316;&#x504F;&#x79BB;&#x4F01;&#x4E1A;&#x793E;&#x4F1A;&#x8D23;&#x4EFB;&#x3002;

&#x6A21;&#x5F0F;&#x5206;&#x6790;&#x4E0E;&#x6587;&#x5316;&#x4E2D;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x7A7A;&#x95F4;&#x5206;&#x5E03;&#x3002;

The nervous system is a complex, highly-ordered, integrated network of cells. Dispersed cultures of neurons enable investigations into intrinsic cellular functions without the complexities inherent in the intact nervous system. This culture process generates a homogeneously dispersed population that is assumed to be spatially random. Despite the vast number of studies utilizing dispersed neurons, few studies address the spatial distribution of large populations of neurons, in vitro. We used ink-jet printing and surface chemistry to define patterned areas of poly-lysine adhesion (âˆ¼50 Î¼m spots) juxtaposed against a fluorinated-silane background. We quantitatively analysed populations of patterned neurons on printed protein spots, and unpatterned neurons. Using a microarray scanner, we acquired large images (72 mm Ã— 22 mm) of patterns, and neurons with and without patterns. Fast Fourier transformation (FFT) image analysis was used to determine global alignment of neurons to patterns. Through point pattern analysis, we described the spatial organization of dispersed neurons with, or without, patterned substrates. Patterned neurons show spatial organization characteristics reminiscent of printed patterns, with spatial distributions representative of unpatterned neurons. Most notably, both patterned and unpatterned neurons show departure from null models of complete spatial randomness (CSR; a homogeneous Poisson process) at shorter distances with conformity to CSR occurring at longer distances. Cellular morphometrics show that when compared to their unpatterned counterparts, spot-patterned neurons exhibit a significant increase (p < 0.0001) in the mean dendritic circularity and an increase in the number of more circular neurons. Through neurite tracing, we show that dendritic processes are also highly confined to patterned areas, and that they are on average 58% shorter than dendrites of neurons without patterns. Our findings show that patterned areas change the spatial organization of the somata and dendrites of cultured neurons, and that traditional neuronal cultures deviate from CSR.

Pattern analysis and spatial distribution of neurons in culture.

Le syst&#xE8;me nerveux est un complexe, hautement ordonn&#xE9;e, r&#xE9;seau int&#xE9;gr&#xE9; de cellules. Cultures de neurones dispers&#xE9;s &#xE0; permettre des enqu&#xEA;tes sur les fonctions cellulaires intrins&#xE8;ques sans les complexit&#xE9;s inh&#xE9;rentes au syst&#xE8;me nerveux intact. Ce processus g&#xE9;n&#xE8;re la culture d&#x26;#39;une population dispers&#xE9;e de fa&#xE7;on homog&#xE8;ne qui est suppos&#xE9; &#xEA;tre spatialement al&#xE9;atoire. Malgr&#xE9; le grand nombre d&#x26;#39;&#xE9;tudes utilisant des neurones dispers&#xE9;s, peu d&#x26;#39;&#xE9;tudes rem&#xE9;dier &#xE0; la r&#xE9;partition spatiale des populations de grands de neurones, in vitro. On utilise &#xE0; jet d&#x26;#39;encre d&#x26;#39;impression et de la chimie de surface pour d&#xE9;finir des zones &#xE0; motifs de poly-lysine adh&#xE9;rence (~ 50 taches um) juxtapos&#xE9;e contre un fond fluor&#xE9;-silane. Nous analys&#xE9; quantitativement les populations de neurones &#xE0; motifs sur des spots de prot&#xE9;ines imprim&#xE9;s, et sans motif neurones. En utilisant un scanner puces &#xE0; ADN, nous avons acquis de grandes images (72 mm &#xD7; 22 mm) de motifs, et les neurones avec et sans motifs. Transformation de Fourier rapide analyse de l&#x26;#39;image (FFT) a &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9;e pour d&#xE9;terminer l&#x26;#39;alignement global des neurones aux mod&#xE8;les. Gr&#xE2;ce &#xE0; l&#x26;#39;analyse du profil point, nous avons d&#xE9;crit l&#x26;#39;organisation spatiale des neurones dispers&#xE9;s avec, ou sans, motif substrats. Neurones &#xE0; motifs pr&#xE9;sentent des caract&#xE9;ristiques d&#x26;#39;organisation spatiale qui rappellent des motifs imprim&#xE9;s, avec le repr&#xE9;sentant de distributions spatiale des neurones sans motifs. Plus particuli&#xE8;rement, les deux neurones &#xE0; motifs et sans motif montrent d&#xE9;part &#xE0; partir de mod&#xE8;les nuls de hasard spatiale compl&#xE8;te des entreprises (RSE, un processus de Poisson homog&#xE8;ne) &#xE0; des distances plus courtes avec de la conformit&#xE9; en mati&#xE8;re de RSE se produisant &#xE0; des distances plus longues. Cellulaire morphom&#xE9;trie montrent que par rapport &#xE0; leurs homologues sans motifs, place &#xE0; motifs neurones pr&#xE9;sentent une augmentation significative (p &#x26;lt;0,0001) dans la circularit&#xE9; dendritique moyenne et une augmentation du nombre de neurones plus circulaires. Gr&#xE2;ce &#xE0; des neurites tra&#xE7;age, nous montrons que les processus dendritiques sont &#xE9;galement tr&#xE8;s limit&#xE9;es &#xE0; des zones &#xE0; motifs, et qu&#x26;#39;ils sont en moyenne 58% plus courte que les dendrites de neurones sans motifs. Nos r&#xE9;sultats montrent que les zones &#xE0; motifs de modifier l&#x26;#39;organisation spatiale de la soma et des dendrites de neurones en culture, et que les cultures traditionnelles neuronales s&#x26;#39;&#xE9;carter de la RSE.

Pattern Analysis and distribution spatiale des neurones en culture

&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x3001;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x306B;&#x79E9;&#x5E8F;&#x3001;&#x7D71;&#x5408;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x5206;&#x6563;&#x57F9;&#x990A;&#x306F;&#x3001;&#x7121;&#x50B7;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306B;&#x5185;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x8907;&#x96D1;&#x3055;&#x305B;&#x305A;&#x306B;&#x672C;&#x8CEA;&#x7684;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x57F9;&#x990A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x7A7A;&#x9593;&#x7684;&#x306B;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C0;&#x30E0;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x4EEE;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x5747;&#x4E00;&#x306B;&#x5206;&#x6563;&#x3057;&#x305F;&#x4EBA;&#x53E3;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5206;&#x6563;&#x3057;&#x305F;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x5229;&#x7528;&#x3057;&#x305F;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x81A8;&#x5927;&#x306A;&#x6570;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;in vitro&#x3067;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5927;&#x96C6;&#x56E3;&#x306E;&#x7A7A;&#x9593;&#x5206;&#x5E03;&#x306B;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30D5;&#x30C3;&#x7D20;&#x5316;&#x30B7;&#x30E9;&#x30F3;&#x3092;&#x80CC;&#x666F;&#x306B;&#x4E26;&#x7F6E;&#x30DD;&#x30EA;&#x30EA;&#x30B8;&#x30F3;&#x63A5;&#x7740;&#xFF08;&#x301C;50&#x3BC;m&#x306E;&#x30B9;&#x30DD;&#x30C3;&#x30C8;&#xFF09;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x9818;&#x57DF;&#x3092;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AF;&#x30B8;&#x30A7;&#x30C3;&#x30C8;&#x5370;&#x5237;&#x3068;&#x8868;&#x9762;&#x5316;&#x5B66;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x306B;&#x5370;&#x5237;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30B9;&#x30DD;&#x30C3;&#x30C8;&#x4E0A;&#x306B;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x96C6;&#x56E3;&#x3092;&#x89E3;&#x6790;&#x3057;&#x3001;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3092;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x5316;&#x3002;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x30B9;&#x30AD;&#x30E3;&#x30CA;&#x30FC;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3068;&#x3068;&#x305B;&#x305A;&#x306B;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x753B;&#x50CF;&#xFF08;72&#x30DF;&#x30EA;&#x30E1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EB;&#xD7;22&#x30DF;&#x30EA;&#x30E1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EB;&#xFF09;&#x3068;&#x3001;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3092;&#x53D6;&#x5F97;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x9AD8;&#x901F;&#x30D5;&#x30FC;&#x30EA;&#x30A8;&#x5909;&#x63DB;&#xFF08;FFT&#xFF09;&#x753B;&#x50CF;&#x89E3;&#x6790;&#x3001;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306B;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x30B0;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D0;&#x30EB;&#x30A2;&#x30E9;&#x30A4;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x70B9;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x5206;&#x6790;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x3001;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x3068;&#x304B;&#x3001;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x57FA;&#x677F;&#x3001;&#x305B;&#x305A;&#x306B;&#x5206;&#x6563;&#x3057;&#x305F;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x7A7A;&#x9593;&#x7684;&#x306A;&#x7D44;&#x7E54;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x7121;&#x5730;&#x306E;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x7A7A;&#x9593;&#x5206;&#x5E03;&#x306E;&#x4EE3;&#x8868;&#x3068;&#x3001;&#x5370;&#x5237;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x5F77;&#x5F7F;&#x3068;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x7A7A;&#x9593;&#x7684;&#x306A;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9577;&#x3044;&#x8DDD;&#x96E2;&#x3067;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x305F;CSR&#x3078;&#x306E;&#x9069;&#x5408;&#x6027;&#x3068;&#x77ED;&#x3044;&#x8DDD;&#x96E2;&#x3067;&#x3001;&#x6700;&#x3082;&#x9855;&#x8457;&#x306A;&#x306E;&#x306F;&#x3001;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3068;&#x7121;&#x5730;&#x306E;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x304C;&#x5B8C;&#x5168;&#x306A;&#x7A7A;&#x9593;&#x7684;&#x306A;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C0;&#x30E0;&#x6027;&#xFF08;&#x540C;&#x6B21;&#x30DD;&#x30A2;&#x30BD;&#x30F3;&#x904E;&#x7A0B;CSR&#xFF09;&#x306E;&#x30CC;&#x30EB;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x8131;&#x5374;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x7121;&#x5730;&#x306E;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3001;&#x643A;&#x5E2F;&#x5F62;&#x614B;&#x8A08;&#x6E2C;&#x30B7;&#x30E7;&#x30FC;&#x3001;&#x30B9;&#x30DD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x5E73;&#x5747;&#x6A39;&#x306E;&#x771F;&#x5186;&#x5EA6;&#x306E;&#x6709;&#x610F;&#x306A;&#x5897;&#x52A0;&#xFF08;p &#x26;lt;0.0001&#xFF09;&#x3068;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x5186;&#x5F62;&#x306E;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x6570;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3002;&#x795E;&#x7D4C;&#x7A81;&#x8D77;&#x306E;&#x30C8;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B9;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x6A39;&#x72B6;&#x7A81;&#x8D77;&#x306B;&#x3082;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x5316;&#x306E;&#x5206;&#x91CE;&#x306B;&#x9650;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306F;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306A;&#x3057;&#x306E;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x6A39;&#x72B6;&#x7A81;&#x8D77;&#x3088;&#x308A;&#x3082;58&#x30D1;&#x30FC;&#x30BB;&#x30F3;&#x30C8;&#x77ED;&#x3044;&#x5E73;&#x5747;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x9818;&#x57DF;&#x306F;&#x3001;&#x57F9;&#x990A;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x4F53;&#x3068;&#x6A39;&#x72B6;&#x7A81;&#x8D77;&#x306E;&#x7A7A;&#x9593;&#x7684;&#x306A;&#x7D44;&#x7E54;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x4F1D;&#x7D71;&#x7684;&#x306A;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x57F9;&#x990A;&#x306F;&#x3001;CSR&#x304B;&#x3089;&#x5916;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x5206;&#x6790;&#x3068;&#x6587;&#x5316;&#x306E;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x7A7A;&#x9593;&#x5206;&#x5E03;

&#xC2E0; &#xACBD;&#xACC4; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD558; &#xACE0;, &#xB192;&#xC740; &#xC8FC;&#xBB38; &#xC774;&#xBA70;, &#xD1B5;&#xD569; &#xB41C; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xBD84;&#xC0B0; &#xB41C; &#xBB38;&#xD654; &#xADF8;&#xB300;&#xB85C; &#xC2E0; &#xACBD;&#xACC4;&#xC5D0; &#xB0B4;&#xC7AC; &#xB41C; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xACE0; &#xB0B4;&#xC7A5; &#xC138;&#xD3EC; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC870;&#xC0AC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBB38;&#xD654; &#xACFC;&#xC815; &#xACF5;&#xAC04;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC784;&#xC758;&#xC758; &#xAC00;&#xC815; homogeneously &#xBD84;&#xC0B0; &#xB41C; &#xC778;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xAD11;&#xB300; &#xD55C; &#xC218;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xBD84;&#xC0B0; &#xD65C;&#xC6A9;, &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;, &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xB300;&#xADDC;&#xBAA8; &#xC778;&#xAD6C;&#xC758; &#xACF5;&#xAC04;&#xC801; &#xBD84;&#xD3EC;&#xB97C; &#xD574;&#xACB0; &#xD558;&#xB294; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC5F0;&#xAD6C;. &#xD3F4; &#xB9AC; lysine &#xC811;&#xCC29; (&sim;50 &mu; m &#xAD00;&#xAD11; &#xBA85;&#xC18C;) &#xBD88; silane &#xBC30;&#xACBD;&#xC5D0; &#xB300;&#xD574; juxtaposed&#xC758; &#xD328;&#xD134;&#xD654; &#xB41C; &#xC601;&#xC5ED;&#xC744; &#xC815;&#xC758; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xC789;&#xD06C; &#xC81C;&#xD2B8; &#xC778;&#xC1C4; &#xBC0F; &#xD45C;&#xBA74; &#xD654;&#xD559;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC591;&#xC801; &#xC778;&#xC1C4; &#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC18;&#xC810;&#xC5D0; &#xAF43;&#xBB34;&#xB2AC; &#xB274;&#xB7F0; &#xCD1D;&#xCE6D;&#xB41C; &#xB274;&#xB7F0;&#xC758; &#xC778;&#xAD6C; &#xBD84;&#xC11D;. Microarray &#xC2A4;&#xCE90;&#xB108;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xD328;&#xD134; &#xBC0F; &#xD328;&#xD134; &#xC5C6;&#xC774; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD070; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0; (72 m m &times; 22 m m) &#xD68D;&#xB4DD;. &#xACE0;&#xC18D; &#xD478;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xBCC0;&#xD658; (FFT) &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0; &#xBD84;&#xC11D; &#xD328;&#xD134; &#xB274;&#xB7F0;&#xC758; &#xAE00;&#xB85C;&#xBC8C; &#xB9DE;&#xCDA4;&#xC744; &#xD655;&#xC778; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD3EC;&#xC778;&#xD2B8; &#xD328;&#xD134; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574;, &#xB610;&#xB294; &#xD328;&#xD134;&#xD654; &#xB41C; &#xAE30;&#xD310; &#xC5C6;&#xC774; &#xBD84;&#xC0B0; &#xB41C; &#xB274;&#xB7F0;&#xC758; &#xACF5;&#xAC04;&#xC801; &#xC870;&#xC9C1;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAF43;&#xBB34;&#xB2AC; &#xB274;&#xB7F0; &#xD45C;&#xC2DC; &#xACF5;&#xAC04; &#xC870;&#xC9C1; &#xD2B9;&#xC131; &#xCD1D;&#xCE6D;&#xB41C; &#xB274;&#xB7F0;&#xC758; &#xB300;&#xD45C; &#xACF5;&#xAC04; &#xBD84;&#xD3EC;&#xC640; &#xC778;&#xC1C4; &#xD328;&#xD134;&#xC758; &#xC5F0;&#xC0C1;. &#xD2B9;&#xD788;, &#xAF43;&#xBB34;&#xB2AC;&#xC640; &#xCD1D;&#xCE6D; &#xB274;&#xB7F0; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC804;&#xCCB4; &#xACF5;&#xAC04; &#xC784;&#xC758;&#xC131; (CSR, &#xADE0;&#xC9C8; &#xD478;&#xC544;&#xC1A1; &#xACFC;&#xC815;)&#xC758; null &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD9C;&#xBC1C; &#xC801;&#xD569;&#xC131;&#xACFC; &#xC9E7;&#xC740; &#xAC70;&#xB9AC;&#xC5D0;&#xC11C; CSR&#xC744; &#xC774;&#xC0C1; &#xAC70;&#xB9AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD;. &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; morphometrics &#xD45C;&#xC2DC; &#xCD1D;&#xCE6D;&#xB41C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xB300;&#xC751;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xC2E0;&#xACBD; &#xBC18;&#xC810; &#xBB34;&#xB2AC; &#xC804;&#xC2DC; &#xD06C;&#xAC8C; &#xC99D;&#xAC00; (p &lt; 0.0001) &#xD3C9;&#xADE0; &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xC21C;&#xD658; &#xBC0F; &#xC21C;&#xD658; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC; &#xC218;&#xC758; &#xC99D;&#xAC00;&#xC5D0;. Neurite &#xCD94;&#xC801;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; &#xD328;&#xD134;&#xB41C; &#xC601;&#xC5ED;&#xB3C4; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xAD6D;&#xD55C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xD3C9;&#xADE0; 58% &#xD328;&#xD134; &#xC5C6;&#xC774; &#xB274;&#xB7F0;&#xC758; dendrites &#xBCF4;&#xB2E4; &#xC9E7;&#xC740; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD328;&#xD134;&#xB41C; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; somata&#xC758; &#xACF5;&#xAC04; &#xC870;&#xC9C1;&#xACFC; &#xAD50;&#xC591;&#xB41C; &#xB274;&#xB7F0;&#xC758; dendrites &#xBCC0;&#xACBD; &#xD558; &#xACE0; &#xC2E0;&#xACBD;&#xC758; &#xC804;&#xD1B5; &#xBB38;&#xD654; CSR&#xC5D0;&#xC11C; &#xC774;&#xD0C8;.

&#xD328;&#xD134; &#xBD84;&#xC11D; &#xBC0F; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xACF5;&#xAC04; &#xBD84;&#xD3EC;.

El sistema nervioso es un complejo, muy ordenada, la red integrada de las c&#xE9;lulas. Cultivos dispersos de neuronas facilitar la investigaci&#xF3;n en la intr&#xED;nsecos funciones celulares sin las complejidades inherentes en el sistema nervioso intacto. Este procedimiento de cultivo genera una poblaci&#xF3;n homog&#xE9;neamente disperso que se supone que es espacialmente aleatoria. A pesar de la gran cantidad de estudios que utilizan las neuronas dispersas, pocos estudios frente a la distribuci&#xF3;n espacial de las grandes poblaciones de neuronas in vitro. Se utiliz&#xF3; chorro de tinta de impresi&#xF3;n y la qu&#xED;mica de superficie para definir las &#xE1;reas estampadas de poli-lisina adherencia (~ 50 puntos micras) yuxtapuesta contra un fondo fluorado-silano. Nos analiza cuantitativamente las poblaciones de neuronas patrones de manchas de prote&#xED;nas impresos, y no pautada neuronas. El uso de un esc&#xE1;ner de microarrays, adquirimos im&#xE1;genes de gran tama&#xF1;o (72 mm x 22 mm) de los patrones y las neuronas con y sin patrones. La transformaci&#xF3;n r&#xE1;pida de Fourier (FFT) de an&#xE1;lisis de imagen se utiliz&#xF3; para determinar la alineaci&#xF3;n global de las neuronas a los patrones. Mediante el an&#xE1;lisis de punto de patr&#xF3;n, se describe la organizaci&#xF3;n espacial de las neuronas dispersas con, o sin, con dibujos sustratos. Neuronas con dibujos muestran las caracter&#xED;sticas de organizaci&#xF3;n espacial que recuerda a los patrones impresos, con el representante de la distribuci&#xF3;n espacial de las neuronas no pautadas. En particular, las neuronas muestran patrones y no pautada la salida de los modelos nulos de aleatoriedad espacial completa (RSE, un proceso de Poisson homog&#xE9;neo) a distancias m&#xE1;s cortas con la conformidad de la RSE se producen en distancias m&#xE1;s largas. Celular espect&#xE1;culo morfometr&#xED;a que en comparaci&#xF3;n con sus contrapartes no pautadas, con dibujos in situ las neuronas muestran un aumento significativo (p &#x26;lt;0,0001) en la circularidad dendr&#xED;ticas media y un aumento en el n&#xFA;mero de neuronas m&#xE1;s circulares. A trav&#xE9;s de neuritas trazado, nos muestran que los procesos dendr&#xED;ticas son tambi&#xE9;n muy limitado a las zonas modeladas, y que son en promedio 58% m&#xE1;s corta que las dendritas de las neuronas sin patrones. Nuestros hallazgos muestran que las &#xE1;reas estampadas cambiar la organizaci&#xF3;n espacial de la somata y las dendritas de las neuronas en cultivo, y que los cultivos neuronales tradicionales se apartan de la RSE.

Article	Year
Microfluidic devices for culturing primary mammalian neurons at low densities. Lab on a chip\| PubMed ID: 17653340	2007
Jones phase microscopy of transparent and anisotropic samples. Optics letters\| PubMed ID: 18516197	2008
Neuropeptidomics of the supraoptic rat nucleus. Journal of proteome research\| PubMed ID: 18816085	2008
Guiding neuron development with planar surface gradients of substrate cues deposited using microfluidic devices. Lab on a chip\| PubMed ID: 20390196	2010
Direct cellular peptidomics of supraoptic magnocellular and hippocampal neurons in low-density co-cultures. ACS chemical neuroscience\| PubMed ID: 20401326	2010
Measurement of adherent cell mass and growth. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America\| PubMed ID: 21068372	2010
Actin-driven cell dynamics probed by Fourier transform light scattering. Biomedical optics express\| PubMed ID: 21258463	2010
Spatial light interference tomography (SLIT). Optics express\| PubMed ID: 21996999	2011
Pattern analysis and spatial distribution of neurons in culture. Integrative biology : quantitative biosciences from nano to macro\| PubMed ID: 22057472	2011

Larry J. Millet

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