dissection-mouse-eye-for-whole-mount-retinal-pigment

Dissection of a Mouse Eye for a Whole Mount of the Retinal Pigment Epithelium

The retinal pigment epithelium (RPE) lies at the back of the mammalian eye, just under the neural retina, which contains the photoreceptors (rods and ...

Greehey Children's Cancer Research Institute and Department of Cellular and Structural Biology

Studi recenti suggeriscono che gli inibitori PARP1, molte delle quali sono attualmente in sperimentazione clinica, possono uccidere selettivamente le cellule mutanti tumori BRCA1/2. Si pensa che il successo di questa terapia &egrave; basato su immitigable letali danni al DNA nelle cellule tumorali risultante dalla perdita simultanea o inibizione delle due vie di riparazione del DNA danni: single-strand break (SSB) riparazione e riparazione di ricombinazione omologa (HRR). Presumibilmente, l&#39;inibizione dell&#39;attivit&agrave; PARP1 ostruisce la riparazione di tutti e durante la replicazione del DNA, queste lesioni causano collasso forcella replica e si trasformano in substrati per FCR. In realt&agrave;, diversi studi precedenti hanno indicato un fenotipo iper-recombinogenic in assenza di attivo PARP1 in vitro o in risposta ad agenti dannosi del DNA. In questo studio, ci dimostrano un aumento della frequenza di HRR spontanea in vivo in assenza di PARP1 usando l&#39;analisi p(un). Inoltre, abbiamo trovato che gli eventi HRR che si verificano nei topi nullizygous Parp1 sono associati con un aumento significativo di clonali, grandi eventi, al contrario di solito pi&ugrave; frequenti eventi singola cella, suggerendo un effetto nella replica delle cellule. In conclusione, i nostri dati dimostra PARP1 inibisce gli eventi HRR spontanei che supporta il modello di trasformazione di replica del DNA di tutti in substrati HRR.

PARP1 elimina gli eventi di ricombinazione omologa nel topo in vivo.

&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;PARP1&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306F;&#x3001;&#x81E8;&#x5E8A;&#x8A66;&#x9A13;&#x306B;&#x73FE;&#x5728;&#x3042;&#x308B;&#x305D;&#x306E;&#x3046;&#x3061;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x306B;BRCA1 / 2&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x6BBA;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5358;&#x9396;&#x5207;&#x65AD;&#xFF08;SSB&#xFF09;&#x306E;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x3068;&#x76F8;&#x540C;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x4FEE;&#x5FA9;&#xFF08;HRR&#xFF09;&#xFF1A;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x6210;&#x529F;&#x306F;&#x3001;2&#x3064;&#x306E;DNA&#x640D;&#x50B7;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x540C;&#x6642;&#x640D;&#x5931;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x6291;&#x5236;&#x304B;&#x3089;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x8EFD;&#x6E1B;&#x3067;&#x304D;&#x306A;&#x3044;&#x81F4;&#x547D;&#x7684;&#x306A;DNA&#x640D;&#x50B7;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x304A;&#x305D;&#x3089;&#x304F;&#x3001;PARP1&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x306F;&#x3001;SSBs&#x306E;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x3001;DNA&#x8907;&#x88FD;&#x6642;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x75C5;&#x5909;&#x306F;&#x3001;&#x8907;&#x88FD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30AF;&#x306E;&#x5D29;&#x58CA;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x3001;HRR&#x306E;&#x57FA;&#x8CEA;&#x306B;&#x5909;&#x63DB;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5B9F;&#x969B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x5148;&#x884C;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;in vitro&#x307E;&#x305F;&#x306F;DNA&#x640D;&#x50B7;&#x5264;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306B;&#x7A4D;&#x6975;&#x7684;&#x306B;PARP1&#x975E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x8D85;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x305D;&#x3053;&#x3067;&#x3001;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;p&#xFF08;UN&#xFF09;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;PARP1&#x975E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x81EA;&#x767A;&#x7684;&#x306A;HRR&#x983B;&#x5EA6;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;PARP1 nullizygous&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x305F;HRR&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x304C;&#x8907;&#x88FD;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x3088;&#x308A;&#x983B;&#x7E41;&#x306B;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3068;&#x306F;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x6709;&#x610F;&#x306A;&#x5897;&#x52A0;&#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x767A;&#x898B;&#x7D50;&#x8AD6;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;PARP1&#x304C;&#x81EA;&#x767A;HRR&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x3001;HRR&#x57FA;&#x677F;&#x306B;SSBs&#x306E;DNA&#x8907;&#x88FD;&#x5909;&#x63DB;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

PARP1&#x306F;&#x3001;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x76F8;&#x540C;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x306E;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;

&#xCD5C;&#xADFC; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC81C;&#xC548; &#xC911; &#xBA87; &#xAC1C;&#xB294; &#xD604;&#xC7AC; &#xC784;&#xC0C1; &#xC2DC;&#xD5D8;&#xC5D0;, PARP1 &#xC800; &#xD574;&#xC81C; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; BRCA1/2 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC8FD; &#xC77C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xC0DD;&#xAC01;&#xC774; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC758; &#xC131;&#xACF5;&#xC740; &#xACB0;&#xACFC; &#xB3D9;&#xC2DC; &#xC190;&#xC2E4; &#xB610;&#xB294; 2 &#xAC1C;&#xC758; DNA &#xC190;&#xC0C1; &#xBCF5;&#xAD6C; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xCE58;&#xBA85;&#xC801;&#xC778; &#xB4E4; DNA &#xC190;&#xC0C1;&#xC5D0; &#xAE30;&#xBC18;: &#xB2E8;&#xC77C; &#xAC00;&#xB2E5; &#xBE0C;&#xB808;&#xC774;&#xD06C; (SSB) &#xC218;&#xB9AC; &#xBC0F; &#xB3D9;&#xC885; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xBCF5;&#xAD6C; (HRR). &#xC5B4;&#xCA4C;&#xBA74;, Ssbs&#xC640; DNA &#xBCF5;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xBCF5;&#xAD6C;&#xB97C; &#xBC29;&#xD574; &#xD558;&#xB294; PARP1 &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xC800;&#xD574;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBCD1; &#xBCC0; &#xBCF5;&#xC81C; &#xD3EC;&#xD06C; &#xBD95;&#xAD34; &#xC6D0;&#xC778;&#xACFC; HRR&#xC758; &#xAE30;&#xD310;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCC0;&#xD658; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC0AC;&#xC2E4;, &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC774;&#xC804;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xD558;&#xC774;&#xD37C; recombinogenic &#xD615; &#xD65C;&#xC131; PARP1 &#xCCB4; &#xC678;&#xC758; &#xBD80;&#xC7AC; &#xB610;&#xB294; DNA &#xC190;&#xC0C1; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xD45C;&#xBA85; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; &#xC790;&#xBC1C;&#xC801;&#xC778; HRR PARP1 &#xC5C6;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0; p(un) &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC0DD;&#xCCB4;&#xC758; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBC1C;&#xACAC; HRR &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8; Parp1 nullizygous &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB354; &#xC790;&#xC8FC; &#xB2E8;&#xC77C; &#xC140; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8; &#xBC18;&#xB300;&#xB85C; &#xD070;, &#xD074;&#xB860; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xC99D;&#xAC00;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC; &#xBCF5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC81C;&#xC548;. &#xACB0;&#xB860;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; PARP1 &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;, HRR &#xC790;&#xBC1C;&#xC801;&#xC778; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC640; HRR &#xAE30;&#xD310;&#xC73C;&#xB85C; Ssbs&#xC758; DNA &#xBCF5;&#xC81C; &#xBCC0;&#xD615; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC9C0; &#xC6D0;&#xD558;&#xB294; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

PARP1 &#xC0DD;&#xC950; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3D9;&#xC885; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xB97C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E; PARP1 &#x6291;&#x5236;&#x5242;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x6709;&#x4E9B;&#x662F;&#x76EE;&#x524D;&#x5728;&#x4E34;&#x5E8A;&#x8BD5;&#x9A8C;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6709;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x5730;&#x6740;&#x6B7B; BRCA1/2 &#x7A81;&#x53D8;&#x7684;&#x764C;&#x75C7;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x4EBA;&#x4EEC;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x8FD9;&#x4E00;&#x7597;&#x6CD5;&#x7684;&#x6210;&#x529F;&#x57FA;&#x4E8E;&#x90C1;&#x90C1;&#x81F4;&#x547D;&#x4EA7;&#x751F;&#x5E76;&#x53D1;&#x635F;&#x5931;&#x6216;&#x4E24;&#x4E2A; DNA &#x635F;&#x4F24;&#x4FEE;&#x590D;&#x9014;&#x5F84;&#x6291;&#x5236;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE; DNA &#x635F;&#x4F24;&#xFF1A; &#x5355;&#x94FE;&#x65AD;&#x88C2; (SSB) &#x4FEE;&#x590D;&#x548C;&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#x4FEE;&#x590D; &#xFF08;HRR&#xFF09;&#x3002;&#x636E;&#x63A8;&#x6D4B;&#xFF0C;PARP1 &#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x59A8;&#x788D;&#x4FEE;&#x590D;&#x7684;&#x529E;&#x5B66;&#x56E2;&#x4F53;&#x548C;&#x5728; DNA &#x590D;&#x5236;&#x8FC7;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x75C5;&#x53D8;&#x5BFC;&#x81F4;&#x590D;&#x5236;&#x53C9;&#x5D29;&#x6E83;&#x548C;&#x6B63;&#x5728;&#x53D8;&#x6210; HRR &#x7684;&#x886C;&#x5E95;&#x3002;&#x4E8B;&#x5B9E;&#x4E0A;&#xFF0C;&#x4E00;&#x4E9B;&#x4EE5;&#x5F80;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x8D85; recombinogenic &#x578B;&#x4F53;&#x5916;&#x79EF;&#x6781; PARP1 &#x7F3A;&#x5E2D;&#x6216; DNA &#x7834;&#x574F;&#x6027;&#x4EE3;&#x7406;&#x54CD;&#x5E94;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x81EA;&#x53D1; HRR PARP1 &#x6CA1;&#x6709;&#x4F7F;&#x7528; p(un) &#x6D4B;&#x5B9A;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x9891;&#x7387;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0; Parp1 nullizygous &#x5C0F;&#x9F20;&#x53D1;&#x751F;&#x7684; HRR &#x4E8B;&#x4EF6;&#x5173;&#x8054;&#x5927;&#x3001; &#x65E0;&#x6027;&#x7CFB;&#x7684;&#x4E8B;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E0D;&#x662F;&#x901A;&#x5E38;&#x66F4;&#x9891;&#x7E41;&#x7684;&#x5355;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E8B;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x663E;&#x8457;&#x589E;&#x52A0;&#x8868;&#x660E;&#x4E2D;&#x590D;&#x5236;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x6548;&#x679C;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x6F14;&#x793A; PARP1 &#x6291;&#x5236;&#x81EA;&#x53D1; HRR &#x4E8B;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x5E76;&#x652F;&#x6301; DNA &#x590D;&#x5236;&#x8F6C;&#x5316;&#x7684;&#x529E;&#x5B66;&#x56E2;&#x4F53; HRR &#x886C;&#x5E95;&#x7684;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;

PARP1 &#x53D6;&#x6D88;&#x5728;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x3002;

Recent studies suggest that PARP1 inhibitors, several of which are currently in clinical trial, may selectively kill BRCA1/2 mutant cancers cells. It is thought that the success of this therapy is based on immitigable lethal DNA damage in the cancer cells resultant from the concurrent loss or inhibition of two DNA damage repair pathways: single-strand break (SSB) repair and homologous recombination repair (HRR). Presumably, inhibition of PARP1 activity obstructs the repair of SSBs and during DNA replication, these lesions cause replication fork collapse and are transformed into substrates for HRR. In fact, several previous studies have indicated a hyper-recombinogenic phenotype in the absence of active PARP1 in vitro or in response to DNA damaging agents. In this study, we demonstrate an increased frequency of spontaneous HRR in vivo in the absence of PARP1 using the p(un) assay. Furthermore, we found that the HRR events that occur in Parp1 nullizygous mice are associated with a significant increase in large, clonal events, as opposed to the usually more frequent single cell events, suggesting an effect in replicating cells. In conclusion, our data demonstrates that PARP1 inhibits spontaneous HRR events, and supports the model of DNA replication transformation of SSBs into HRR substrates.

PARP1 suppresses homologous recombination events in mice in vivo.

Des &#xE9;tudes r&#xE9;centes sugg&#xE8;rent que les inhibiteurs de PARP1 permet, dont plusieurs sont actuellement en essai clinique, peut tuer s&#xE9;lectivement les g&#xE8;nes BRCA1 / 2 mutants cellules de cancers. On pense que le succ&#xE8;s de cette th&#xE9;rapie est bas&#xE9;e sur les dommages d&#x26;#39;ADN immitigable l&#xE9;tale dans les cellules canc&#xE9;reuses qui en r&#xE9;sultent de la perte simultan&#xE9;e ou l&#x26;#39;inhibition de deux voies de r&#xE9;paration des dommages d&#x26;#39;ADN: simple brin pause (SSB) de r&#xE9;paration et de r&#xE9;paration recombinaison homologue (HRR). Vraisemblablement, l&#x26;#39;inhibition de l&#x26;#39;activit&#xE9; PARP1 fait obstacle &#xE0; la r&#xE9;paration de BSN et lors de la r&#xE9;plication d&#x26;#39;ADN, ces l&#xE9;sions provoquent l&#x26;#39;effondrement des fourches de r&#xE9;plication et se transforment en supports pour HRR. En fait, plusieurs &#xE9;tudes ant&#xE9;rieures ont indiqu&#xE9; un ph&#xE9;notype hyper-recombinog&#xE8;ne en l&#x26;#39;absence de PARP1 actif in vitro ou en r&#xE9;ponse &#xE0; des agents endommageant l&#x26;#39;ADN. Dans cette &#xE9;tude, nous d&#xE9;montrons une fr&#xE9;quence accrue de HRR spontan&#xE9;e in vivo en l&#x26;#39;absence de l&#x26;#39;aide de la PARP1 p (non) test. En outre, nous avons constat&#xE9; que les &#xE9;v&#xE9;nements qui se produisent dans HRR PARP1 souris nullizygous sont associ&#xE9;s &#xE0; une augmentation significative dans les grands &#xE9;v&#xE9;nements clonales, par opposition &#xE0; des &#xE9;v&#xE9;nements habituellement plus fr&#xE9;quents de cellules uniques, ce qui sugg&#xE8;re un effet dans les cellules de r&#xE9;plication. En conclusion, nos donn&#xE9;es d&#xE9;montrent que PARP1 inhibe les &#xE9;v&#xE9;nements HRR spontan&#xE9;es, et prend en charge le mod&#xE8;le de la transformation de la r&#xE9;plication de l&#x26;#39;ADN dans des substrats BSN HRR.

PARP1 Supprime &#xE9;v&#xE9;nements de recombinaison homologue chez la souris in Vivo

Neuere Studien legen nahe, dass PARP1-Inhibitoren, von denen einige in der klinischen Pr&uuml;fung sind, BRCA1/2 mutant Krebs Zellen selektiv t&ouml;ten k&ouml;nnen. Es wird vermutet, dass der Erfolg dieser Therapie auf immitigable t&ouml;dliche DNA-Sch&auml;den in den Krebszellen, die resultierende aus den gleichzeitigen Verlust oder Hemmung der zwei DNA-Schaden-Reparatur-Wege: Single-Strand-Pause (SSB) Reparatur und Homologe Rekombination Reparatur (HFR). Vermutlich, Hemmung der PARP1 Aktivit&auml;t behindert die Reparatur des SSBs und w&auml;hrend der DNA-Replikation, diese L&auml;sionen verursachen Replikation Gabel Zusammenbruch und verwandeln sich in Substraten f&uuml;r die HFR. Mehrere fr&uuml;here Studien haben in der Tat einen hyper-Recombinogenic-Ph&auml;notyp in Ermangelung von in-vitro-aktive PARP1 oder als Antwort auf DNA-sch&auml;digenden Einfluss erkl&auml;rt. In dieser Studie zeigen wir eine erh&ouml;hte Frequenz der spontanen HFR in-vivo in Ermangelung des PARP1 unter Verwendung der p(un)-Probe. Dar&uuml;ber hinaus fanden wir, dass die HFR-Ereignisse, die in Parp1 Nullizygous M&auml;use auftreten einen deutlichen Anstieg der gro&szlig;en, klonale Veranstaltungen, im Gegensatz zu den in der Regel h&auml;ufiger einzelne Zelle-Events, zugeordnet sind schl&auml;gt einen Effekt bei der Replikation der Zellen. Abschlie&szlig;end zeigt unsere Daten, dass PARP1 spontane HFR-Veranstaltungen hemmt und das Modell der DNA-Replikation-Umwandlung von SSBs in HFR Substrate unterst&uuml;tzt.

PARP1 unterdr&uuml;ckt homologe Rekombination Ereignisse bei M&auml;usen in-vivo.

Estudios recientes sugieren que inhibidores de la PARP1, varios de los cuales est&#xE1;n actualmente en ensayo cl&#xED;nico, pueden matar selectivamente a BRCA1 / 2 c&#xE1;nceres de c&#xE9;lulas mutantes. Se cree que el &#xE9;xito de esta terapia se basa en el da&#xF1;o inmitigable ADN letal en las c&#xE9;lulas cancerosas resultantes de la p&#xE9;rdida concurrente o inhibici&#xF3;n de las dos v&#xED;as de reparaci&#xF3;n del ADN da&#xF1;os: un solo filamento rotura (SSB) reparaci&#xF3;n y reparaci&#xF3;n de recombinaci&#xF3;n hom&#xF3;loga (HRR). Presumiblemente, la inhibici&#xF3;n de la actividad PARP1 obstruye la reparaci&#xF3;n de las bebidas azucaradas y durante la replicaci&#xF3;n del ADN, estas lesiones causan colapso de la replicaci&#xF3;n del tenedor y se transforman en sustratos para la FCR. De hecho, varios estudios previos han indicado un fenotipo hiper-recombinogenic en ausencia de PARP1 activa in vitro o en respuesta a los agentes que da&#xF1;an el ADN. En este estudio, hemos demostrado una mayor frecuencia de HRR espont&#xE1;nea in vivo en la ausencia de PARP1 con el p (ONU) de ensayo. Adem&#xE1;s, hemos encontrado que los acontecimientos que ocurren en HRR PARP1 ratones nullizygous est&#xE1;n asociados con un incremento significativo en grandes eventos, clonales, en contraposici&#xF3;n a los acontecimientos celulares generalmente m&#xE1;s frecuentes individuales, lo que sugiere un efecto en las c&#xE9;lulas replicantes. En conclusi&#xF3;n, nuestros datos demuestran que inhibe PARP1 eventos espont&#xE1;neos HRR, y es compatible con el modelo de transformaci&#xF3;n de la replicaci&#xF3;n del ADN de bebidas azucaradas en sustratos HRR.

Suprime PARP1 fen&#xF3;menos de recombinaci&#xF3;n hom&#xF3;loga en ratones in vivo

&#x30A6;&#x30A7;&#x30EB;&#x30CA;&#x30FC;&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#x306F;&#x65E9;&#x671F;&#x8001;&#x5316;&#x3084;&#x52A0;&#x9F62;&#x306B;&#x4F34;&#x3046;&#x75C5;&#x6C17;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x73FE;&#x308C;&#x308B;&#x7A00;&#x306A;&#x75BE;&#x60A3;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002; WRN&#x306F;&#x3001;WS&#x3067;&#x5909;&#x7570;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;5&#x4EBA;&#x306E;RecQ&#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x306E;&#x4E00;&#x3064;&#x3067;&#x3059;&#x3002; WS&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x3068;&#x5909;&#x66F4;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5897;&#x6B96;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3001;in vitro&#x8A66;&#x9A13;&#x3067;&#x306F;WRN&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x76F8;&#x540C;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x62C5;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;RecQ&#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x306F;&#xFF08;WRN&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#xFF09;&#x306E;&#x76F8;&#x540C;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x81EA;&#x767A;&#x7684;&#x306A;&#x76F8;&#x540C;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;WRN&#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;WRN&#x524A;&#x9664;&#x3067;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3092;&#x53D6;&#x5F97;&#x3057;&#x3001;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x30D4;&#x30F3;&#x30AF;&#x306E;&#x76EE;&#x306E;&#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x306A;&#x76F8;&#x540C;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3068;&#x305D;&#x308C;&#x3092;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x305F;&#x3002;&#x672C;&#x7A3F;&#x3067;&#x306F;&#x3001;WRN&#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x304C;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x4EE5;&#x524D;&#x306E;&#x5831;&#x544A;&#x306B;&#x53CD;&#x3057;&#x3066;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x3067;&#x76F8;&#x540C;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;WRN&#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x304C;&#x81EA;&#x767A;&#x7684;&#x76F8;&#x540C;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;DNA&#x306E;&#x524A;&#x9664;&#x306F;&#x5FC5;&#x8981;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;

&#xBCA0;&#xB974;&#xB108; &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70;&#xC740; &#xD76C;&#xADC0; &#xC7A5;&#xC560; &#xC870;&#xAE30; &#xB178;&#xD654;&#xC640; &#xB098;&#xC774; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC73C;&#xB85C; &#xBA85;&#xB2E8;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. WRN WS, &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC774;&#xBA70; 5 &#xC778;&#xAC04;&#xC758; RecQ helicase &#xAC00;&#xC871; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. WS &#xC140; genomic &#xBD88;&#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC744; &#xC804;&#xC2DC; &#xD558; &#xACE0; &#xD655;&#xC0B0;, &#xBCC0;&#xACBD; &#xBC0F; &#xCCB4; &#xC678; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC81C;&#xC548; &#xACBD;&#xACE0;&#xB294; &#xB3D9;&#xC885; &#xC7AC;&#xACB0;&#xD569;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xC5ED;&#xD560;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xCD5C;&#xADFC; &#xC5F0;&#xAD6C; (&#xACBD;&#xACE0; &#xD3EC;&#xD568;) RecQ helicases &#xAE30;&#xD0C0; &#xB3D9;&#xC885; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569;&#xC758; &#xCD08;&#xAE30; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8; &#xD64D;&#xBCF4; &#xC81C;&#xC548;. &#xC790;&#xBC1C;&#xC801;&#xC778; &#xB3D9;&#xC885; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569;&#xC5D0; &#xACBD;&#xACE0; helicase&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xD558;&#xAE30; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC0AD;&#xC81C; &#xACBD;&#xACE0; helicase &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xD68D;&#xB4DD; &#xD558; &#xACE0; in vivo &#xBD84;&#xD64D;&#xC0C9; &#xB208;&#xC774; &#xBD88;&#xC548;&#xC815; &#xD55C; &#xB3D9;&#xC885; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xACFC; &#xACB0;&#xD569; &#xB41C;. &#xC774; &#xB17C;&#xBB38;&#xC5D0;&#xC11C; WRN helicase &#xC5B5;&#xC81C; &#xB3D9;&#xC885; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC774;&#xC804; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;&#xC5D0; &#xBC18;&#xD558;&#xB294; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; WRN Helicase &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xC790;&#xBC1C;&#xC801;&#xC778; &#xB3D9;&#xC885; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xC911;&#xC7AC; DNA &#xC0AD;&#xC81C;&#xB97C; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC694; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El s&#xED;ndrome de Werner es una enfermedad rara que se manifiesta como el envejecimiento prematuro y las enfermedades relacionadas con la edad. AVS es el gen mutado en WS, y es uno de los cinco miembros humanos de la familia RecQ helicasa. WS c&#xE9;lulas exhiben inestabilidad gen&#xF3;mica y la proliferaci&#xF3;n alterada, y en estudios in vitro sugieren que AVS tiene un papel en la supresi&#xF3;n de la recombinaci&#xF3;n hom&#xF3;loga. Sin embargo, estudios m&#xE1;s recientes proponen que otros RecQ helicases (incluyendo WRN) promover los primeros eventos de recombinaci&#xF3;n hom&#xF3;loga. Para estudiar el papel de la helicasa WRN de la recombinaci&#xF3;n hom&#xF3;loga espont&#xE1;nea, se obtuvo un rat&#xF3;n con un dominio helicasa WRN eliminado y lo combin&#xF3; con los estudios in vivo de ojos rosados &#x200B;&#x200B;sistema inestable de recombinaci&#xF3;n hom&#xF3;loga. En este trabajo, demostramos que WRN helicasa no es necesaria para la supresi&#xF3;n de la recombinaci&#xF3;n hom&#xF3;loga en vivo contraria a los informes anteriores utilizando un modelo de rat&#xF3;n similar.

Rat&#xF3;n WRN helicasa de dominio no es necesario para eliminaci&#xF3;n espont&#xE1;nea recombinaci&#xF3;n hom&#xF3;loga mediada por ADN

&#x7EF4;&#x5C14;&#x7EB3; &middot; &#x7EFC;&#x5408;&#x5F81;&#x662F;&#x7F55;&#x89C1;&#x7684;&#x75BE;&#x75C5;&#xFF0C;&#x8868;&#x73B0;&#x4E3A;&#x8FC7;&#x65E9;&#x8870;&#x8001;&#x548C;&#x4E0E;&#x5E74;&#x9F84;&#x6709;&#x5173;&#x7684;&#x75BE;&#x75C5;&#x3002;&#x8B66;&#x544A;&#x662F;&#x5728; WS&#xFF0C;&#x7A81;&#x53D8;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x662F;&#x4E94;&#x4EBA; RecQ &#x89E3;&#x65CB;&#x9176;&#x5BB6;&#x65CF;&#x6210;&#x5458;&#x4E4B;&#x4E00;&#x3002;WS &#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x4E0D;&#x7A33;&#x5B9A;&#x548C;&#x6539;&#x53D8;&#x6269;&#x6563;&#xFF0C;&#x548C;&#x4F53;&#x5916;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x8B66;&#x544A;&#x5177;&#x6709;&#x6291;&#x5236;&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x5EFA;&#x8BAE; &#xFF08;&#x5305;&#x62EC;&#x8B66;&#x544A;&#xFF09; &#x5176;&#x4ED6; RecQ helicases &#x4FC3;&#x8FDB;&#x65E9;&#x671F;&#x53D1;&#x751F;&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#x7684;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x3002;&#x5B66;&#x4E60;&#x4E0A;&#x81EA;&#x53D1;&#x7684;&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#x8B66;&#x544A;&#x89E3;&#x65CB;&#x9176;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x83B7;&#x5F97;&#x9F20;&#x6807;&#x4E0E;&#x5DF2;&#x5220;&#x9664;&#x7684;&#x8B66;&#x544A;&#x89E3;&#x65CB;&#x9176;&#x57DF;&#x548C;&#x5B83;&#x4E0E;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x7C89;&#x8272;&#x773C;&#x775B;&#x7684;&#x4E0D;&#x7A33;&#x5B9A;&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x76F8;&#x7ED3;&#x5408;&#x3002;&#x5728;&#x672C;&#x6587;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x8B66;&#x544A;&#x89E3;&#x65CB;&#x9176;&#x4E0D;&#x5FC5;&#x8981;&#x6291;&#x5236;&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#x4E0E;&#x524D;&#x51E0;&#x6B21;&#x62A5;&#x544A;&#x4F7F;&#x7528;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6A21;&#x578B;&#x4F53;&#x5185;&#x3002;

&#x9F20;&#x6807;&#x8B66;&#x544A;&#x89E3;&#x65CB;&#x9176;&#x57DF;&#x4E0D;&#x9700;&#x8981;&#x81EA;&#x53D1;&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#x4ECB;&#x5BFC; DNA &#x7F3A;&#x5931;&#x3002;

Werner syndrome is a rare disorder that manifests as premature aging and age-related diseases. WRN is the gene mutated in WS, and is one of five human RecQ helicase family members. WS cells exhibit genomic instability and altered proliferation, and in vitro studies suggest that WRN has a role in suppressing homologous recombination. However, more recent studies propose that other RecQ helicases (including WRN) promote early events of homologous recombination. To study the role of WRN helicase on spontaneous homologous recombination, we obtained a mouse with a deleted WRN helicase domain and combined it with the in vivo pink-eyed unstable homologous recombination system. In this paper, we demonstrate that WRN helicase is not necessary for suppressing homologous recombination in vivo contrary to previous reports using a similar mouse model.

Mouse WRN Helicase Domain Is Not Required for Spontaneous Homologous Recombination-Mediated DNA Deletion.

Du syndrome de Werner est une maladie rare qui se manifeste par un vieillissement pr&#xE9;matur&#xE9; et maladies li&#xE9;es au vieillissement. WRN est le g&#xE8;ne mut&#xE9; dans WS, et est l&#x26;#39;un des cinq membres de la famille de l&#x26;#39;homme RecQ h&#xE9;licase. WS cellules pr&#xE9;sentent une instabilit&#xE9; g&#xE9;nomique et de la prolif&#xE9;ration alt&#xE9;r&#xE9;e, et dans les &#xE9;tudes in vitro sugg&#xE8;rent que WRN a un r&#xF4;le dans la suppression de la recombinaison homologue. Cependant, des &#xE9;tudes plus r&#xE9;centes proposent que d&#x26;#39;autres h&#xE9;licases RecQ (y compris les WRN) promouvoir des &#xE9;v&#xE9;nements pr&#xE9;coces de la recombinaison homologue. Pour &#xE9;tudier le r&#xF4;le de l&#x26;#39;h&#xE9;licase WRN sur la recombinaison homologue spontan&#xE9;e, nous avons obtenu une souris avec un WRN supprim&#xE9; h&#xE9;licase de domaine et l&#x26;#39;a combin&#xE9; avec le in vivo pink-eyed syst&#xE8;me de recombinaison homologue instable. Dans cet article, nous d&#xE9;montrons que WRN h&#xE9;licase n&#x26;#39;est pas n&#xE9;cessaire pour supprimer la recombinaison homologue dans contraires vivo pour les rapports pr&#xE9;c&#xE9;dents en utilisant un mod&#xE8;le de souris similaire.

Souris WRN h&#xE9;licase de domaine n&#x26;#39;est pas requise pour la suppression de recombinaison homologue m&#xE9;di&#xE9;e par l&#x26;#39;ADN spontan&#xE9;e

Werner-Syndrom ist eine seltene Erkrankung, die als vorzeitiger Alterung und altersbedingten Krankheiten manifestiert. WRN ist das Gen mutiert in WS und ist einer der f&uuml;nf menschlichen RecQ Helicase Familienmitglieder. WS-Zellen weisen genomische Instabilit&auml;t und Verbreitung ge&auml;ndert und in-vitro-Studien belegen, dass WRN eine Rolle hat bei der Unterdr&uuml;ckung der homologen Rekombination. Neuere Studien schlagen jedoch andere RecQ-Helikasen (einschlie&szlig;lich WRN) Fr&uuml;he Veranstaltungen der homologen Rekombination f&ouml;rdern. Um die Rolle der WRN Helicase auf spontane homologe Rekombination zu studieren, wir erhalten eine Maus mit einer gel&ouml;schten WRN-Helicase-Dom&auml;ne und kombiniert es mit dem in-vivo Rosa Augen unstable homologe Rekombination-System. In diesem Beitrag zeigen wir, dass WRN Helicase nicht erforderlich ist f&uuml;r die Unterdr&uuml;ckung von in-vivo entgegen fr&uuml;heren Berichten, die mit einem &auml;hnlichen Mausmodell homologe Rekombination.

Maus WRN-Helicase-Dom&auml;ne ist nicht f&uuml;r spontane homologe Rekombination-vermittelte DNA L&ouml;schung erforderlich.

Sindrome di Werner &egrave; una malattia rara che si manifesta come l&#39;invecchiamento precoce e malattie legate all&#39;et&agrave;. WRN &egrave; il gene mutato in WS ed &egrave; uno dei cinque umani RecQ elicasi membri della famiglia. Cellule WS presentano instabilit&agrave; genomica e alterata proliferazione e studi in vitro suggeriscono che WRN ha un ruolo nella soppressione di ricombinazione omologa. Tuttavia, studi pi&ugrave; recenti propongono che altri RecQ elicasi (tra cui AVV) promuovano primi eventi di ricombinazione omologa. Per studiare il ruolo dell&#39;elicasi WRN su ricombinazione omologa spontanea, abbiamo ottenuto un mouse con un dominio di elicasi WRN eliminato e combinato con il sistema in vivo con gli occhi rosa instabile ricombinazione omologa. In questa carta, dimostreremo che elicasi WRN non sono necessario per sopprimere la ricombinazione omologa in vivo contrariamente alle precedenti relazioni utilizzando un simile modello di mouse.

Mouse WRN Helicase dominio non &egrave; necessario per spontaneo omologhe ricombinazione mediata DNA Deletion.

&#x68C0;&#x6D4B;&#x548C;&#x4FEE;&#x590D; DNA &#x635F;&#x4F24;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x662F;&#x9884;&#x9632;&#x5404;&#x79CD;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x3002;&#x5DF2;&#x77E5;&#x529F;&#x80FD;&#x57FA;&#x56E0;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x6240;&#x6D89;&#x53CA;&#x7684;&#x635F;&#x5931;&#x662F;&#x5BFC;&#x81F4;&#x91CD;&#x5927;&#x7684;&#x53D1;&#x80B2;&#x7F3A;&#x9677;&#x548C;/&#x6216;&#x5411;&#x764C;&#x75C7;&#x6613;&#x611F;&#x6027;&#x3002;&#x8FD9;&#x7C7B; DNA &#x4FEE;&#x590D;&#x673A;&#x5236;&#x4E4B;&#x4E00;&#xFF0C;&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#xFF0C;&#x6709;&#x80FD;&#x529B;&#x4FEE;&#x590D;&#x5404;&#x79CD;&#x75C5;&#x53D8;&#x3002;&#x60F3;&#x8981;&#x5728; DNA &#x4FEE;&#x590D;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x6240;&#x6D89;&#x53CA;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x6572;&#x9664;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6A21;&#x578B;&#x7ECF;&#x5E38;&#x81F4;&#x547D;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x4F53;&#x5185;&#x7814;&#x7A76;&#x975E;&#x5E38;&#x56F0;&#x96BE;&#xFF0C;&#x5982;&#x679C;&#x4E0D;&#x662F;&#x4E0D;&#x53EF;&#x80FD;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7740;&#x624B;&#x5F00;&#x53D1;&#x4F53;&#x5185;&#x6761;&#x4EF6;&#x9F20;&#x6807;&#x6A21;&#x578B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x4FBF;&#x5229;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#x53C2;&#x4E0E;&#x8C03;&#x67E5;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6A21;&#x578B;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8861;&#x91CF;&#x4F7F;&#x7528;&#x7C89;&#x7EA2;&#x8272;&#x773C;&#x775B;&#x4E0D;&#x7A33;&#x5B9A;&#x9F20;&#x6807;&#x6A21;&#x578B;&#x65F6;&#xFF0C;&#x5728;&#x5176;&#x4E2D;&#x6211;&#x4EEC;&#x6709;&#x6761;&#x4EF6;&#x5730;&#x5207;&#x9664;&#x5168;&#x957F; Brca1 &#x6216;&#x80CC;&#x5149;&#x6A21;&#x7EC4;&#x7684;&#x81EA;&#x53D1;&#x6027;&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#x7684;&#x9891;&#x7387;&#x65E9;&#x671F;&#x53D1;&#x75C5;&#x4E73;&#x817A;&#x764C; 1&#xFF09;&#x3002;&#x5047;&#x8BBE;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x57FA;&#x56E0;&#x90FD;&#x6709;&#x53CD;&#x5BF9;&#x5728;&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x603B;&#x4E4B;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x652F;&#x6301;&#x4F53;&#x5916;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x535A;&#x83B1;&#x9709;&#x7D20;&#x6291;&#x5236;&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x5168;&#x957F; BRCA1 &#x4FC3;&#x8FDB;&#x8FD9;&#x4E00;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x3002;

&#x6709;&#x6761;&#x4EF6;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x6D4B;&#x91CF;&#x4F53;&#x5185;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x91CD;&#x8981;&#x57FA;&#x56E0;&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x7684;&#x9891;&#x7387;&#x3002;

The ability to detect and repair DNA damage is crucial to the prevention of various diseases. Loss of function of genes involved in these processes is known to result in significant developmental defects and/or predisposition to cancer. One such DNA repair mechanism, homologous recombination, has the capacity to repair a wide variety of lesions. Knockout mouse models of genes thought to be involved in DNA repair processes are frequently lethal, making in vivo studies very difficult, if not impossible. Therefore, we set out to develop an in vivo conditional mouse model system to facilitate investigations into the involvement of essential genes in homologous recombination. To test our model, we measured the frequency of spontaneous homologous recombination using the pink-eyed unstable mouse model, in which we conditionally excised either Blm or full-length Brca1 (breast cancer 1, early onset). These two genes are hypothesized to have opposing roles in homologous recombination. In summary, our in vivo data supports in vitro studies suggesting that BLM suppresses homologous recombination, while full-length BRCA1 promotes this process.

A conditional mouse model for measuring the frequency of homologous recombination events in vivo in the absence of essential genes.

La capacit&#xE9; &#xE0; d&#xE9;tecter et r&#xE9;parer les dommages &#xE0; l&#x26;#39;ADN est cruciale pour la pr&#xE9;vention de diverses maladies. La perte de fonction de g&#xE8;nes impliqu&#xE9;s dans ces processus est connu pour entra&#xEE;ner d&#x26;#39;importants d&#xE9;fauts de d&#xE9;veloppement et / ou la pr&#xE9;disposition au cancer. Un tel m&#xE9;canisme r&#xE9;paration de l&#x26;#39;ADN, la recombinaison homologue, a la capacit&#xE9; de r&#xE9;parer une grande vari&#xE9;t&#xE9; de l&#xE9;sions. Des mod&#xE8;les de souris knock-out de g&#xE8;nes seraient impliqu&#xE9;s dans les processus de r&#xE9;paration de l&#x26;#39;ADN sont souvent mortelle, ce qui rend les &#xE9;tudes in vivo tr&#xE8;s difficiles, voire impossible. Par cons&#xE9;quent, nous avons d&#xE9;cid&#xE9; de d&#xE9;velopper un syst&#xE8;me de souris in vivo mod&#xE8;le conditionnel &#xE0; faciliter les enqu&#xEA;tes sur l&#x26;#39;implication de g&#xE8;nes essentiels dans la recombinaison homologue. Pour tester notre mod&#xE8;le, nous avons mesur&#xE9; la fr&#xE9;quence de recombinaison homologue spontan&#xE9;e en utilisant le mod&#xE8;le pink-eyed souris instable, dans lequel nous conditionnellement excis&#xE9;e soit Brca1 Blm ou pleine longueur (cancer du sein 1, l&#x26;#39;apparition pr&#xE9;coce). Ces deux g&#xE8;nes sont &#xE9;mis l&#x26;#39;hypoth&#xE8;se d&#x26;#39;avoir adverse r&#xF4;les dans la recombinaison homologue. En r&#xE9;sum&#xE9;, nos donn&#xE9;es in vivo soutient des &#xE9;tudes in vitro sugg&#xE8;rent que BLM supprime la recombinaison homologue, tandis que sur toute la longueur du g&#xE8;ne BRCA1 favorise ce processus.

Un mod&#xE8;le de souris conditionnelle pour mesurer la fr&#xE9;quence des &#xE9;v&#xE9;nements de recombinaison homologue in vivo dans l&#x26;#39;absence de g&#xE8;nes essentiels

Die F&auml;higkeit zu erkennen und zu DNA-Sch&auml;den zu reparieren ist entscheidend f&uuml;r die Vermeidung von verschiedenen Krankheiten. Verlust der Funktion von Genen, die an diesen Prozessen beteiligt ist bekannt, dass erhebliche Entwicklungsst&ouml;rungen M&auml;ngel und/oder Veranlagung zu Krebs f&uuml;hren. Eine solche DNA Repair-Mechanismus, homologe Rekombination, hat die F&auml;higkeit, eine Vielzahl von Hautver&auml;nderungen zu reparieren. Knockout Mausmodelle von Genen, die an DNA-Reparaturprozesse beteiligt zu sein dachte h&auml;ufig t&ouml;dlich sind, machen in-vivo Studien sehr schwierig, wenn nicht gar unm&ouml;glich. Deshalb machten wir uns ein in-vivo bedingte Maus-Modell-System zur Erleichterung von Untersuchungen &uuml;ber die Einbeziehung der wesentlichen Gene in homologe Rekombination zu entwickeln. Um unser Modell zu testen, messen wir die H&auml;ufigkeit der spontanen homologe Rekombination mit rosa Augen unstable Mausmodell, in dem wir bedingt, Blm oder in Brca1 herausgeschnitten (Breast Cancer 1, fr&uuml;h einsetzende). Diese beiden Gene sind die Hypothese haben gegens&auml;tzliche Rollen in homologe Rekombination. Zusammenfassend l&auml;sst sich sagen unterst&uuml;tzt unsere in-vivo-Daten in-vitro-Studien, die darauf hindeutet, dass die BLM homologe Rekombination, unterdr&uuml;ckt, w&auml;hrend in BRCA1 diesen Prozess f&ouml;rdert.

Eine bedingte Maus-Modell zur Messung der Frequenz der homologen Rekombination Ereignisse in-vivo diesbez&uuml;glich keine wesentlichen Gene.

La capacit&agrave; di rilevare e riparare i danni del DNA &egrave; fondamentale per la prevenzione di varie malattie. Perdita di funzione di geni coinvolti in questi processi &egrave; noto per causare difetti di sviluppo significativi e/o predisposizione al cancro. Una tale DNA riparazione meccanismo, ricombinazione omologa, ha la capacit&agrave; di riparare un&#39;ampia variet&agrave; di lesioni. Modelli topo knockout di geni pensati per essere coinvolti nei processi di riparazione del DNA sono spesso letali, rendendo in vivo studi molto difficile, se non impossibile. Pertanto, abbiamo deciso di sviluppare un sistema di modello in vivo del mouse condizionali per agevolare le indagini, il coinvolgimento dei geni essenziali nella ricombinazione omologa. Per testare il nostro modello, abbiamo misurato la frequenza di ricombinazione omologa spontanea utilizzando il modello del mouse instabile con gli occhi rosa, in cui abbiamo asportato condizionalmente Blm o full-length Brca1 (breast cancer 1, ad esordio precoce). Questi due geni sono ipotizzati per avere opposti ruoli nella ricombinazione omologa. In sintesi, i nostri dati in vivo supporta gli studi in vitro, suggerendo che BLM sopprime la ricombinazione omologa, mentre full-length BRCA1 favorisce questo processo.

Un modello murino condizionale per misurare la frequenza degli eventi di ricombinazione omologa in vivo in assenza di geni essenziali.

DNA&#x640D;&#x50B7;&#x3092;&#x691C;&#x51FA;&#x3057;&#x3001;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x306F;&#x3001;&#x7A2E;&#x3005;&#x306E;&#x75BE;&#x60A3;&#x306E;&#x4E88;&#x9632;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x55AA;&#x5931;&#x306F;&#x3001;&#x91CD;&#x5927;&#x306A;&#x767A;&#x9054;&#x969C;&#x5BB3;&#x304A;&#x3088;&#x3073;/&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x764C;&#x306E;&#x7D20;&#x56E0;&#x306B;&#x306A;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;DNA&#x4FEE;&#x5FA9;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3001;&#x76F8;&#x540C;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x306F;&#x3001;&#x75C5;&#x5909;&#x306E;&#x591A;&#x7A2E;&#x591A;&#x69D8;&#x3092;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x6709;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; DNA&#x4FEE;&#x5FA9;&#x904E;&#x7A0B;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306F;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x56F0;&#x96E3;&#x3001;&#x4E0D;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x3044;in vivo&#x8A66;&#x9A13;&#x3067;&#x306E;&#x610F;&#x601D;&#x3001;&#x3057;&#x3070;&#x3057;&#x3070;&#x81F4;&#x6B7B;&#x7684;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x76F8;&#x540C;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x306B;&#x5FC5;&#x9808;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3092;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x6761;&#x4EF6;&#x4ED8;&#x304D;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B;&#x7740;&#x624B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x6761;&#x4EF6;&#x4ED8;&#x304D;&#x3067;BLM&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30D5;&#x30EB;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B0;&#x30B9;BRCA1&#xFF08;&#x4E73;&#x764C;1&#x3001;&#x65E9;&#x671F;&#x767A;&#x75C7;&#xFF09;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x3092;&#x6458;&#x51FA;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30D4;&#x30F3;&#x30AF;&#x306E;&#x76EE;&#x306E;&#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x306A;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x81EA;&#x767A;&#x7684;&#x306A;&#x76F8;&#x540C;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x306E;&#x983B;&#x5EA6;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;2&#x3064;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x76F8;&#x540C;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5F79;&#x5272;&#x306B;&#x53CD;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x4EEE;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8981;&#x7D04;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x3001;in vivo&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x3067;&#x305D;&#x306E;BLM&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3059;&#x308B;in vitro&#x8A66;&#x9A13;&#x3067;&#x306F;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x5B8C;&#x5168;&#x9577;&#x306E;BRCA1&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3057;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x3001;&#x76F8;&#x540C;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x5FC5;&#x9808;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x304C;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x5834;&#x5408;&#x306B;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D3;&#x30DC;&#x3067;&#x306E;&#x76F8;&#x540C;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x4E8B;&#x8C61;&#x306E;&#x983B;&#x5EA6;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6761;&#x4EF6;&#x4ED8;&#x304D;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;

&#xAC80;&#xC0C9; &#xBC0F; DNA &#xC190;&#xC0C1; &#xBCF5;&#xAD6C; &#xD558;&#xB294; &#xB2A5;&#xB825;&#xC740; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC758; &#xC608;&#xBC29;&#xC5D0; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC911;&#xC694;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC0C1;&#xC2E4; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xACB0;&#xD568; &#xBC0F; &#xC554; &#xCCB4;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD560; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD558;&#xB098; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; DNA &#xC218;&#xB9AC; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;, &#xB3D9;&#xC885; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569;&#xC740; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC7A5;&#xC560; &#xBCF5;&#xAD6C; &#xC6A9;&#xB7C9;&#xC774;. &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBAA8;&#xB378; &#xC720;&#xC804;&#xC790; DNA &#xBCF5;&#xAD6C; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC0DD;&#xAC01;&#xC758; &#xC790;&#xC8FC; &#xCE58;&#xBA85;&#xC801;&#xC778;, &#xC544;&#xC8FC; &#xC5B4;&#xB824;&#xC6B4;, &#xBD88;&#xAC00;&#xB2A5; &#xD55C; &#xACBD;&#xC6B0; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xB9CC;&#xB4E4;&#xAE30;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xB3D9;&#xC885; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569;&#xC5D0; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xCC38;&#xC5EC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC870;&#xC0AC;&#xB97C; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD558;&#xC5EC; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xC870;&#xAC74;&#xBD80; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBAA8;&#xB378; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xCC29;&#xC218;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC870;&#xAC74;&#xBD80;&#xB85C; excised Blm &#xB610;&#xB294; &#xC804;&#xCCB4; &#xAE38;&#xC774; Brca1 &#xBD84;&#xD64D;&#xC0C9; &#xB208;&#xC774; &#xBD88;&#xC548;&#xC815; &#xD55C; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xC790;&#xBC1C;&#xC801;&#xC778; &#xB3D9;&#xC885; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569;&#xC758; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218; &#xCE21;&#xC815; (&#xC720;&#xBC29;&#xC554; 1, &#xBC1C;&#xBCD1; &#xCD08;&#xAE30;). &#xC774; &#xB450; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB294; &#xBC18;&#xB300; &#xB3D9;&#xC885; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569;&#xC5D0; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xAC00;&#xC124;&#xC744; &#xC138;&#xC6E0;&#xB2E4;. &#xC694;&#xC57D; &#xD558;&#xC790;&#xBA74;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548;&#xC774; &#xACFC;&#xC815;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558;&#xB294; &#xC804;&#xCCB4; &#xAE38;&#xC774; BRCA1 BLM &#xB3D9;&#xC885; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xC5B5;&#xC81C; &#xCCB4; &#xC678; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xBD80;&#xC7AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3D9;&#xC885; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xC758; &#xBE48;&#xB3C4; &#xCE21;&#xC815; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xC870;&#xAC74;&#xBD80; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBAA8;&#xB378;.

La capacidad para detectar y reparar el da&#xF1;o del ADN es crucial para la prevenci&#xF3;n de diversas enfermedades. La p&#xE9;rdida de funci&#xF3;n de genes implicados en estos procesos es conocido por dar lugar a importantes defectos en el desarrollo y / o predisposici&#xF3;n al c&#xE1;ncer. Uno de estos mecanismos de reparaci&#xF3;n del ADN, la recombinaci&#xF3;n hom&#xF3;loga, tiene la capacidad para reparar una gran variedad de lesiones. Modelos de rat&#xF3;n knockout de genes se cree que participan en los procesos de reparaci&#xF3;n del ADN son a menudo letales, por lo que los estudios in vivo muy dif&#xED;ciles, si no imposible. Por lo tanto, nos propusimos desarrollar un sistema in vivo condicional modelo de rat&#xF3;n para facilitar las investigaciones sobre la participaci&#xF3;n de los genes esenciales en la recombinaci&#xF3;n hom&#xF3;loga. Para poner a prueba nuestro modelo, que mide la frecuencia de recombinaci&#xF3;n hom&#xF3;loga espont&#xE1;nea mediante el modelo de color rosa con los ojos del rat&#xF3;n inestable, en el que sea eliminado de forma condicional Blm BRCA1 o de larga duraci&#xF3;n (un c&#xE1;ncer de mama, de inicio temprano). Estos dos genes son la hip&#xF3;tesis de que oponerse a los roles en la recombinaci&#xF3;n hom&#xF3;loga. En resumen, nuestros datos in vivo apoya en estudios in vitro sugieren que la BLM suprime la recombinaci&#xF3;n hom&#xF3;loga, mientras que de cuerpo entero BRCA1 promueve este proceso.

Un modelo de rat&#xF3;n condicional para medir la frecuencia de los eventos de recombinaci&#xF3;n hom&#xF3;loga en vivo en ausencia de los genes esenciales

Article	Year
PARP1 suppresses homologous recombination events in mice in vivo. Nucleic acids research\| PubMed ID: 20660013	2010
Mouse WRN Helicase Domain Is Not Required for Spontaneous Homologous Recombination-Mediated DNA Deletion. Journal of nucleic acids\| PubMed ID: 20847942	2010
A conditional mouse model for measuring the frequency of homologous recombination events in vivo in the absence of essential genes. Molecular and cellular biology\| PubMed ID: 21709021	2011

Alison Claybon

Biography

JoVE Journal Publications

Other Publications