dissection-mouse-eye-for-whole-mount-retinal-pigment

Dissection of a Mouse Eye for a Whole Mount of the Retinal Pigment Epithelium

The retinal pigment epithelium (RPE) lies at the back of the mammalian eye, just under the neural retina, which contains the photoreceptors (rods and ...

Greehey Children's Cancer Research Institute and Department of Cellular and Structural Biology

&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x3082;&#x306F;&#x3084;&#x5236;&#x5FA1;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306B;&#x5F93;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3068;&#x304D;&#x304C;&#x3093;&#x304C;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x898F;&#x5236;&#x306E;&#x4E0D;&#x5728;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x7121;&#x8996;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8AA4;&#x3063;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x524D;&#x764C;&#x72B6;&#x614B;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x306B;&#x62E1;&#x5927;&#x3001;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x512A;&#x4F4D;&#x6027;&#x3092;&#x7372;&#x5F97;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x904E;&#x53BB;10&#x5E74;&#x9593;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x304C;misreplication&#x3001;&#x74B0;&#x5883;&#x7834;&#x58CA;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5916;&#x56E0;&#x6027;&#x640D;&#x50B7;&#x3092;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x6B20;&#x4E4F;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x3082;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x904E;&#x7A0B;&#x3067;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x3068;&#x306E;&#x95A2;&#x9023;&#x6027;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30D8;&#x30C6;&#x30ED;&#x63A5;&#x5408;&#x4F53;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x518D;&#x914D;&#x5217;&#x304C;&#x5931;&#x308F;&#x308C;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x5225;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x76F8;&#x540C;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5909;&#x7570;&#x306E;&#x4E00;&#x90E8;&#x306F;&#x3001;&#x767A;&#x764C;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x304C;&#x3001;&#x52A3;&#x6027;&#x306E;&#x767A;&#x764C;&#x6027;&#x5909;&#x7570;&#x304C;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x767A;&#x764C;&#x306E;&#x4E8C;&#x6B21;&#x4EE5;&#x964D;&#x306E;&#x624B;&#x9806;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x9AD8;&#x304F;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x983B;&#x5EA6;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3059;&#x308B;&#x60A3;&#x8005;&#x306F;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x3068;&#x767A;&#x764C;&#x3068;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3092;&#x652F;&#x63F4;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x764C;&#x306E;&#x4E0A;&#x6607;&#x983B;&#x5EA6;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

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&#xB3D9;&#xC885; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xBC0F; &#xBC1C;&#xC554;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El c&#xE1;ncer se desarrolla cuando las c&#xE9;lulas ya no siguen su patr&#xF3;n normal de crecimiento controlado. En la ausencia o el incumplimiento de dicha normativa, como resultado de cambios en su composici&#xF3;n gen&#xE9;tica, estas c&#xE9;lulas errantes adquirir una ventaja de crecimiento, expandi&#xE9;ndose en los clones precancerosos. Durante la &#xFA;ltima d&#xE9;cada, numerosos estudios han puesto de manifiesto la relevancia de la mutaci&#xF3;n gen&#xF3;mica en este proceso, ya sea por misreplication, da&#xF1;os al medio ambiente, o una deficiencia en la reparaci&#xF3;n de los da&#xF1;os end&#xF3;genos y ex&#xF3;genos. En este caso, hablamos de la recombinaci&#xF3;n hom&#xF3;loga como otro mecanismo que puede resultar en una p&#xE9;rdida de heterozigosidad o reordenamientos gen&#xE9;ticos. Algunas de estas alteraciones gen&#xE9;ticas podr&#xED;an jugar un papel primordial en la carcinog&#xE9;nesis, pero son m&#xE1;s propensos a estar involucrados en las etapas secundarias y subsiguientes de la carcinog&#xE9;nesis mediante el cual recesiva mutaciones oncog&#xE9;nicas son revelados. Los pacientes, cuyas c&#xE9;lulas presentan una mayor frecuencia de recombinaci&#xF3;n, tambi&#xE9;n tienen una elevada frecuencia de c&#xE1;ncer, m&#xE1;s el apoyo a la relaci&#xF3;n entre la recombinaci&#xF3;n y la carcinog&#xE9;nesis.

Recombinaci&#xF3;n hom&#xF3;loga y su papel en la carcinog&#xE9;nesis

&#x764C;&#x75C7;&#x53D1;&#x5C55;&#x65F6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0D;&#x518D;&#x9075;&#x5FAA;&#x5176;&#x6B63;&#x5E38;&#x63A7;&#x5236;&#x589E;&#x957F;&#x7684;&#x6A21;&#x5F0F;&#x3002;&#x5728;&#x7F3A;&#x5E2D;&#x6216;&#x65E0;&#x89C6;&#x8FD9;&#x9879;&#x89C4;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x5176;&#x9057;&#x4F20;&#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x6240;&#x5F15;&#x8D77;&#x7684;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x56DB;&#x5904;&#x6E38;&#x8361;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x83B7;&#x5F97;&#x589E;&#x957F;&#x4F18;&#x52BF;&#xFF0C;&#x6269;&#x5C55;&#x5230;&#x764C;&#x524D;&#x75C5;&#x53D8;&#x7684;&#x514B;&#x9686;&#x3002;&#x8FC7;&#x53BB;&#x5341;&#x5E74;&#xFF0C;&#x8BB8;&#x591A;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x76F8;&#x5173;&#x6027;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7A81;&#x53D8;&#x5728;&#x6B64;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x65E0;&#x8BBA;&#x662F;&#x901A;&#x8FC7; misreplication&#x3001; &#x73AF;&#x5883;&#x7684;&#x635F;&#x5BB3;&#x6216;&#x5185;&#x6E90;&#x6027;&#x548C;&#x5916;&#x6E90;&#x6027;&#x635F;&#x4F24;&#x4FEE;&#x590D;&#x7684;&#x7F3A;&#x9677;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x53E6;&#x4E00;&#x79CD;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4E22;&#x5931;&#x7684;&#x6742;&#x5408;&#x6027;&#x6216;&#x57FA;&#x56E0;&#x91CD;&#x6392;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x57FA;&#x56E0;&#x6539;&#x53D8;&#x7684;&#x4E00;&#x4E9B;&#x53EF;&#x80FD;&#x5728;&#x764C;&#x53D8;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x53D1;&#x6325;&#x4E3B;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x66F4;&#x6709;&#x53EF;&#x80FD;&#x8981;&#x53C2;&#x4E0E;&#x4E2D;&#x5B66;&#x548C;&#x540E;&#x7EED;&#x6B65;&#x9AA4;&#x7684;&#x764C;&#x53D8;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x9690;&#x6027;&#x764C;&#x57FA;&#x56E0;&#x7A81;&#x53D8;&#x88AB;&#x63ED;&#x9732;&#x3002;&#x60A3;&#x8005;&#xFF0C;&#x5176;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x663E;&#x793A;&#x7684;&#x91CD;&#x7EC4;&#x9891;&#x7387;&#x589E;&#x52A0;&#xFF0C;&#x4E5F;&#x6709;&#x764C;&#x75C7;&#xFF0C;&#x63D0;&#x5347;&#x7684;&#x9891;&#x7387;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x652F;&#x6301;&#x91CD;&#x7EC4;&#x548C;&#x764C;&#x53D8;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x8054;&#x7CFB;&#x3002;

&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#x548C;&#x5176;&#x764C;&#x53D8;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Cancer develops when cells no longer follow their normal pattern of controlled growth. In the absence or disregard of such regulation, resulting from changes in their genetic makeup, these errant cells acquire a growth advantage, expanding into precancerous clones. Over the last decade, many studies have revealed the relevance of genomic mutation in this process, be it by misreplication, environmental damage, or a deficiency in repairing endogenous and exogenous damage. Here, we discuss homologous recombination as another mechanism that can result in a loss of heterozygosity or genetic rearrangements. Some of these genetic alterations may play a primary role in carcinogenesis, but they are more likely to be involved in secondary and subsequent steps of carcinogenesis by which recessive oncogenic mutations are revealed. Patients, whose cells display an increased frequency of recombination, also have an elevated frequency of cancer, further supporting the link between recombination and carcinogenesis.

Homologous Recombination and Its Role in Carcinogenesis.

Le cancer se d&#xE9;veloppe lorsque des cellules ne suivent plus leur sch&#xE9;ma normal de croissance contr&#xF4;l&#xE9;e. En l&#x26;#39;absence ou le m&#xE9;pris d&#x26;#39;une telle r&#xE9;glementation, r&#xE9;sultant de changements dans leur composition g&#xE9;n&#xE9;tique, ces cellules errantes acqu&#xE9;rir un avantage de croissance, l&#x26;#39;expansion des clones pr&#xE9;canc&#xE9;reuses. Au cours de la derni&#xE8;re d&#xE9;cennie, de nombreuses &#xE9;tudes ont r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; la pertinence de la mutation g&#xE9;nomique dans ce processus, que ce soit par misreplication, atteintes &#xE0; l&#x26;#39;environnement, ou d&#x26;#39;une d&#xE9;ficience dans la r&#xE9;paration des dommages endog&#xE8;nes et exog&#xE8;nes. Ici, nous discutons de la recombinaison homologue comme un autre m&#xE9;canisme qui peut entra&#xEE;ner une perte d&#x26;#39;h&#xE9;t&#xE9;rozygotie ou r&#xE9;arrangements g&#xE9;n&#xE9;tiques. Certaines de ces alt&#xE9;rations g&#xE9;n&#xE9;tiques peuvent jouer un r&#xF4;le de premier plan dans la carcinogen&#xE8;se, mais ils sont plus susceptibles d&#x26;#39;&#xEA;tre impliqu&#xE9;s dans les &#xE9;tapes secondaires et ult&#xE9;rieures de la canc&#xE9;rogen&#xE8;se par lequel mutations r&#xE9;cessives oncog&#xE8;nes sont r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9;es. Les patients, dont les cellules d&#x26;#39;afficher une augmentation de la fr&#xE9;quence de recombinaison, ont &#xE9;galement une fr&#xE9;quence &#xE9;lev&#xE9;e de cancer, soutenir davantage le lien entre la recombinaison et la carcinogen&#xE8;se.

Recombinaison homologue et son r&#xF4;le dans la carcinogen&#xE8;se

Homologe Rekombination und seine Rolle bei der Krebsentstehung.

Il cancro si sviluppa quando le cellule non pi&ugrave; seguono loro normale modello di crescita controllata. Nell&#39;assenza o l&#39;inosservanza di tale regolamento, derivanti da cambiamenti nel loro corredo genetico, queste cellule errante acquisiscono un vantaggio di crescita, espansione nei cloni precancerosi. Nell&#39;ultimo decennio, molti studi hanno rivelato la pertinenza della mutazione genomiche in questo processo, che si tratti di riparazione, danno ambientale o un deficit nella riparazione dei danni endogeni ed esogeni. Qui, discuteremo la ricombinazione omologa come un altro meccanismo che pu&ograve; comportare una perdita di eterozigosi o riarrangiamenti genetici. Alcune di queste alterazioni genetiche possono giocare un ruolo primario nella cancerogenesi, ma essi sono pi&ugrave; probabilit&agrave; di essere coinvolti nella secondarie e successivi passaggi della carcinogenesi da cui sono rivelate mutazioni recessive oncogenica. I pazienti, le cui cellule visualizzare un aumento della frequenza di ricombinazione, hanno anche un&#39;elevata frequenza di cancro, sostenere ulteriormente il legame tra ricombinazione e carcinogenesi.

Ricombinazione omologa e il suo ruolo nella cancerogenesi.

&#x764C;&#x75C7;&#x53D1;&#x5C55;&#x65F6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0D;&#x518D;&#x9075;&#x5FAA;&#x5176;&#x6B63;&#x5E38;&#x63A7;&#x5236;&#x589E;&#x957F;&#x7684;&#x6A21;&#x5F0F;&#x3002;&#x5728;&#x7F3A;&#x5E2D;&#x6216;&#x65E0;&#x89C6;&#x8FD9;&#x9879;&#x89C4;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x5176;&#x9057;&#x4F20;&#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x6240;&#x5F15;&#x8D77;&#x7684;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x56DB;&#x5904;&#x6E38;&#x8361;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x83B7;&#x5F97;&#x589E;&#x957F;&#x4F18;&#x52BF;&#xFF0C;&#x6269;&#x5C55;&#x5230;&#x764C;&#x524D;&#x75C5;&#x53D8;&#x7684;&#x514B;&#x9686;&#x3002;&#x8BB8;&#x591A;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E00;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7A81;&#x53D8;&#x7684;&#x76F8;&#x5173;&#x6027;&#x8FC7;&#x53BB;&#x5341;&#x5E74;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x65E0;&#x8BBA;&#x662F;&#x901A;&#x8FC7; misreplication&#x3001; &#x73AF;&#x5883;&#x7684;&#x635F;&#x5BB3;&#x6216;&#x5185;&#x6E90;&#x6027;&#x548C;&#x5916;&#x6E90;&#x6027;&#x635F;&#x4F24;&#x4FEE;&#x590D;&#x7684;&#x7F3A;&#x9677;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x4F5C;&#x4E3A; DNA &#x4FEE;&#x590D;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4E22;&#x5931;&#x7684;&#x6742;&#x5408;&#x6027;&#x6216;&#x57FA;&#x56E0;&#x91CD;&#x6392;&#x4FA0;&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#x7684;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x57FA;&#x56E0;&#x6539;&#x53D8;&#x7684;&#x4E00;&#x4E9B;&#x53EF;&#x80FD;&#x5728;&#x764C;&#x53D8;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x53D1;&#x6325;&#x4E3B;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x66F4;&#x6709;&#x53EF;&#x80FD;&#x8981;&#x53C2;&#x4E0E;&#x4E2D;&#x5B66;&#x548C;&#x540E;&#x7EED;&#x6B65;&#x9AA4;&#x7684;&#x764C;&#x53D8;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x9690;&#x6027;&#x764C;&#x57FA;&#x56E0;&#x7A81;&#x53D8;&#x88AB;&#x63ED;&#x9732;&#x3002;&#x60A3;&#x8005;&#xFF0C;&#x5176;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x663E;&#x793A;&#x7684;&#x91CD;&#x7EC4;&#x9891;&#x7387;&#x589E;&#x52A0;&#xFF0C;&#x4E5F;&#x6709;&#x764C;&#x75C7;&#xFF0C;&#x63D0;&#x5347;&#x7684;&#x9891;&#x7387;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x652F;&#x6301;&#x91CD;&#x7EC4;&#x548C;&#x764C;&#x53D8;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x8054;&#x7CFB;&#x3002;

&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#x764C;&#x53D8;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Cancer develops when cells no longer follow their normal pattern of controlled growth. In the absence or disregard of such regulation, resulting from changes in their genetic makeup, these errant cells acquire a growth advantage, expanding into precancerous clones. Over the past decade many studies have revealed the relevance of genomic mutation in this process, be it by misreplication, environmental damage, or a deficiency in repairing endogenous and exogenous damage. Here we discuss the possibility of homologous recombination as an errant DNA repair mechanism that can result in loss of heterozygosity or genetic rearrangements. Some of these genetic alterations may play a primary role in carcinogenesis, but they are more likely to be involved in secondary and subsequent steps of carcinogenesis by which recessive oncogenic mutations are revealed. Patients, whose cells display an increased frequency of recombination, also have an elevated frequency of cancer, further supporting the link between recombination and carcinogenesis.

Role of homologous recombination in carcinogenesis.

Le cancer se d&#xE9;veloppe lorsque des cellules ne suivent plus leur sch&#xE9;ma normal de croissance contr&#xF4;l&#xE9;e. En l&#x26;#39;absence ou le m&#xE9;pris d&#x26;#39;une telle r&#xE9;glementation, r&#xE9;sultant de changements dans leur composition g&#xE9;n&#xE9;tique, ces cellules errantes acqu&#xE9;rir un avantage de croissance, l&#x26;#39;expansion des clones pr&#xE9;canc&#xE9;reuses. Au cours de la derni&#xE8;re d&#xE9;cennie de nombreuses &#xE9;tudes ont r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; la pertinence de la mutation g&#xE9;nomique dans ce processus, que ce soit par misreplication, atteintes &#xE0; l&#x26;#39;environnement, ou d&#x26;#39;une d&#xE9;ficience dans la r&#xE9;paration des dommages endog&#xE8;nes et exog&#xE8;nes. Ici, nous discutons de la possibilit&#xE9; d&#x26;#39;une recombinaison homologue comme un m&#xE9;canisme de r&#xE9;paration de l&#x26;#39;ADN errant qui peut entra&#xEE;ner une perte d&#x26;#39;h&#xE9;t&#xE9;rozygotie ou r&#xE9;arrangements g&#xE9;n&#xE9;tiques. Certaines de ces alt&#xE9;rations g&#xE9;n&#xE9;tiques peuvent jouer un r&#xF4;le de premier plan dans la carcinogen&#xE8;se, mais ils sont plus susceptibles d&#x26;#39;&#xEA;tre impliqu&#xE9;s dans les &#xE9;tapes secondaires et ult&#xE9;rieures de la canc&#xE9;rogen&#xE8;se par lequel mutations r&#xE9;cessives oncog&#xE8;nes sont r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9;es. Les patients, dont les cellules d&#x26;#39;afficher une augmentation de la fr&#xE9;quence de recombinaison, ont &#xE9;galement une fr&#xE9;quence &#xE9;lev&#xE9;e de cancer, soutenir davantage le lien entre la recombinaison et la carcinogen&#xE8;se.

R&#xF4;le de la recombinaison homologue dans la carcinogen&#xE8;se

Die Rolle der homologen Rekombination bei der Krebsentstehung.

Il cancro si sviluppa quando le cellule non pi&ugrave; seguono loro normale modello di crescita controllata. Nell&#39;assenza o l&#39;inosservanza di tale regolamento, derivanti da cambiamenti nel loro corredo genetico, queste cellule errante acquisiscono un vantaggio di crescita, espansione nei cloni precancerosi. Nell&#39;ultimo decennio molti studi hanno rivelato la pertinenza della mutazione genomiche in questo processo, che si tratti di riparazione, danno ambientale o un deficit nella riparazione dei danni endogeni ed esogeni. Qui si discute la possibilit&agrave; di ricombinazione omologa come un errante meccanismo che pu&ograve; comportare la perdita di eterozigosi o riarrangiamenti genetici di riparazione del DNA. Alcune di queste alterazioni genetiche possono giocare un ruolo primario nella cancerogenesi, ma essi sono pi&ugrave; probabilit&agrave; di essere coinvolti nella secondarie e successivi passaggi della carcinogenesi da cui sono rivelate mutazioni recessive oncogenica. I pazienti, le cui cellule visualizzare un aumento della frequenza di ricombinazione, hanno anche un&#39;elevata frequenza di cancro, sostenere ulteriormente il legame tra ricombinazione e carcinogenesi.

Ruolo della ricombinazione omologa nella cancerogenesi.

&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x3082;&#x306F;&#x3084;&#x5236;&#x5FA1;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306B;&#x5F93;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3068;&#x304D;&#x304C;&#x3093;&#x304C;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x898F;&#x5236;&#x306E;&#x4E0D;&#x5728;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x7121;&#x8996;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8AA4;&#x3063;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x524D;&#x764C;&#x72B6;&#x614B;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x306B;&#x62E1;&#x5927;&#x3001;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x512A;&#x4F4D;&#x6027;&#x3092;&#x7372;&#x5F97;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x904E;&#x53BB;10&#x5E74;&#x9593;&#x306B;&#x308F;&#x305F;&#x3063;&#x3066;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x304C;misreplication&#x3001;&#x74B0;&#x5883;&#x7834;&#x58CA;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5916;&#x56E0;&#x6027;&#x640D;&#x50B7;&#x3092;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x6B20;&#x4E4F;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x3082;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x904E;&#x7A0B;&#x3067;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x3068;&#x306E;&#x95A2;&#x9023;&#x6027;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30D8;&#x30C6;&#x30ED;&#x63A5;&#x5408;&#x4F53;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x518D;&#x914D;&#x5217;&#x304C;&#x5931;&#x308F;&#x308C;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x8AA4;&#x3063;&#x305F;DNA&#x4FEE;&#x5FA9;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x76F8;&#x540C;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x8B70;&#x8AD6;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5909;&#x7570;&#x306E;&#x4E00;&#x90E8;&#x306F;&#x3001;&#x767A;&#x764C;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x304C;&#x3001;&#x52A3;&#x6027;&#x306E;&#x767A;&#x764C;&#x6027;&#x5909;&#x7570;&#x304C;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x767A;&#x764C;&#x306E;&#x4E8C;&#x6B21;&#x4EE5;&#x964D;&#x306E;&#x624B;&#x9806;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x9AD8;&#x304F;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x983B;&#x5EA6;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3059;&#x308B;&#x60A3;&#x8005;&#x306F;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x3068;&#x767A;&#x764C;&#x3068;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3092;&#x652F;&#x63F4;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x764C;&#x306E;&#x4E0A;&#x6607;&#x983B;&#x5EA6;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x767A;&#x304C;&#x3093;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x76F8;&#x540C;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;

&#xC554; &#xC140;&#xC740; &#xB354; &#xC774;&#xC0C1; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xC81C;&#xC5B4; &#xC131;&#xC7A5; &#xD328;&#xD134;&#xC744; &#xB530;&#xB77C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558; &#xACE0; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBD80;&#xC7AC; &#xB610;&#xB294; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC720;&#xC804; &#xBA54;&#xC774;&#xD06C;&#xC5C5;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xBCC0;&#xD654;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xB798;&#xD55C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xADDC;&#xC815;&#xC744; &#xBB34;&#xC2DC; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC798;&#xBABB; &#xB41C; &#xC140; &#xC804; &#xC554; &#xD074;&#xB860;&#xC73C;&#xB85C; &#xD655;&#xB300; &#xC131;&#xC7A5; &#xC6B0;&#xC704;&#xB97C; &#xD68D;&#xB4DD;. &#xC9C0;&#xB09C; 10 &#xB144;&#xAC04; &#xB9CE;&#xC740; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294;&#xC774; &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC8C;&#xB188; &#xBCC0;&#xC774;&#xC758; &#xAD00;&#xB828;&#xC131;&#xC744; &#xBC1D;&#xD600;, misreplication, &#xD658;&#xACBD; &#xD53C;&#xD574;, &#xB610;&#xB294; &#xC0DD;, exogenous &#xD53C;&#xD574; &#xBCF5;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC798;&#xBABB; &#xB41C; DNA &#xC218;&#xB9AC; heterozygosity &#xB610;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC7AC;&#xBC30;&#xC5F4;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4; &#xADC0; &#xCC29;&#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC73C;&#xB85C; &#xB3D9;&#xC885; &#xC7AC;&#xACB0;&#xD569;&#xC758; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC744; &#xB17C;&#xC758; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xBC1C;&#xC554;&#xC5D0; &#xC8FC;&#xC694; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD560; &#xC218; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC720;&#xC804; &#xBCC0;&#xACBD;&#xC758; &#xC77C;&#xBD80; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC5F4;&#xC131; &#xAE08;&#xD558;&#xB294; &#xBCC0;&#xC774; &#xBC1D;&#xD600; &#xBC1C;&#xC554;&#xC758; &#xBCF4;&#xC870; &#xBC0F; &#xD6C4;&#xC18D; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0; &#xCC38;&#xC5EC; &#xD558; &#xAC8C; &#xB420; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xB354; &#xB192;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD658;&#xC790;, &#xB204;&#xAD6C;&#xC758; &#xC140; &#xD45C;&#xC2DC; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569;&#xC758; &#xBE48;&#xB3C4;&#xAC00; &#xC99D;&#xAC00;, &#xB610;&#xD55C; &#xC554;, &#xB192;&#xC740; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218; &#xCD94;&#xAC00; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569;&#xC640; &#xBC1C;&#xC554; &#xC0AC;&#xC774; &#xC5F0;&#xACB0;&#xC744; &#xC9C0; &#xC6D0;&#xD558;&#xB294; &#xC788;&#xB2E4;.

&#xBC1C;&#xC554;&#xC5D0; &#xB3D9;&#xC885; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El c&#xE1;ncer se desarrolla cuando las c&#xE9;lulas ya no siguen su patr&#xF3;n normal de crecimiento controlado. En la ausencia o el incumplimiento de dicha normativa, como resultado de cambios en su composici&#xF3;n gen&#xE9;tica, estas c&#xE9;lulas errantes adquirir una ventaja de crecimiento, expandi&#xE9;ndose en los clones precancerosos. Durante la &#xFA;ltima d&#xE9;cada numerosos estudios han puesto de manifiesto la relevancia de la mutaci&#xF3;n gen&#xF3;mica en este proceso, ya sea por misreplication, da&#xF1;os al medio ambiente, o una deficiencia en la reparaci&#xF3;n de los da&#xF1;os end&#xF3;genos y ex&#xF3;genos. Aqu&#xED; hablamos de la posibilidad de recombinaci&#xF3;n hom&#xF3;loga como un mecanismo de reparaci&#xF3;n del ADN errante que puede resultar en la p&#xE9;rdida de heterozigosidad o reordenamientos gen&#xE9;ticos. Algunas de estas alteraciones gen&#xE9;ticas podr&#xED;an jugar un papel primordial en la carcinog&#xE9;nesis, pero son m&#xE1;s propensos a estar involucrados en las etapas secundarias y subsiguientes de la carcinog&#xE9;nesis mediante el cual recesiva mutaciones oncog&#xE9;nicas son revelados. Los pacientes, cuyas c&#xE9;lulas presentan una mayor frecuencia de recombinaci&#xF3;n, tambi&#xE9;n tienen una elevada frecuencia de c&#xE1;ncer, m&#xE1;s el apoyo a la relaci&#xF3;n entre la recombinaci&#xF3;n y la carcinog&#xE9;nesis.

Papel de la recombinaci&#xF3;n hom&#xF3;loga en la carcinog&#xE9;nesis

Atm&#x3001; p53 &#x548C; Gadd45a &#x7A97;&#x4F53;&#x90E8;&#x5206;&#x7684; DNA &#x635F;&#x4F24;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53CD;&#x5E94;&#x9014;&#x5F84; &#xFF1B;&#x6CA1;&#x6709;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x7684;&#x4EFB;&#x4F55;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7ED3;&#x679C;&#x4E2D;&#x589E;&#x52A0;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x4E0D;&#x7A33;&#x5B9A;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FDB;&#x884C;&#x81EA;&#x53D1;&#x7684;&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#x7684;&#x9891;&#x7387;&#x5728; Atm&#x3001; p53 &#x6216; Gadd45a &#x7F3A;&#x9677;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4F53;&#x5185;&#x68C0;&#x67E5;&#x3002;P53 &#x7684;&#x7F3A;&#x5E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x6700;&#x5927;&#x589E;&#x52A0;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x3001; Atm&#xFF0C;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x8F83;&#x5C11;&#x589E;&#x52A0;&#x548C; Gadd45a &#x6CA1;&#x6709;&#x53EA;&#x7565;&#x6709;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;&#x5F15;&#x4EBA;&#x6CE8;&#x76EE;&#x7684;&#x89C2;&#x5BDF;&#x662F;&#x81EA;&#x53D1;&#x6027;&#x7684;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x53D1;&#x751F;&#x5728; atm &#x548C; trp53 &#x57FA;&#x56E0;&#x7A81;&#x53D8;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x7684;&#x5DEE;&#x522B;&#x3002;&#x5728;&#x5F00;&#x53D1;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7A0D;&#x540E;&#x589E;&#x52A0; atm &#x57FA;&#x56E0;&#x7A81;&#x53D8;&#x5C0F;&#x9F20;&#x57FA;&#x56E0;&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#x9891;&#x7387;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;p53 &#x4F3C;&#x4E4E;&#x5728;&#x6291;&#x5236;&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#x65E9;&#x5728;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x5F53;&#x5DF2;&#x77E5; p53 &#x662F;&#x81EA;&#x53D1;&#x5730;&#x4FC3;&#x8FDB; p21 &#x6D3B;&#x52A8;&#x65F6;&#x53D1;&#x6325;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x589E;&#x52A0;&#x81EA;&#x53D1;&#x91CD;&#x7EC4;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x662F;&#x5728; Gadd45a &#x548C; p53 &#x57FA;&#x56E0;&#x7F3A;&#x9677;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4E2D;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x3002;&#x8FD9;&#x65F6;&#x7A7A;&#x51B3;&#x8BAE;&#x5EFA;&#x8BAE; Atm &#x548C; p53 &#x53EF;&#x4EE5;&#x91C7;&#x53D6;&#x884C;&#x52A8;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x5728;&#x67D0;&#x4E9B;&#x4E0A;&#x4E0B;&#x6587;&#x4E2D;&#x4F53;&#x5185;&#x7EF4;&#x6301;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7684;&#x5B8C;&#x6574;&#x6027;&#x3002;

Atm&#x3001; p53 &#x548C; Gadd45a &#x57FA;&#x56E0;&#x7F3A;&#x9677;&#x5C0F;&#x9F20;&#x663E;&#x793A;&#x671F;&#x95F4;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E0D;&#x540C;&#x9636;&#x6BB5;&#x7684;&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#x7684;&#x9891;&#x7387;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;

Atm, p53, and Gadd45a form part of a DNA-damage cellular response pathway; the absence of any one of these components results in increased genomic instability. We conducted an in vivo examination of the frequency of spontaneous homologous recombination in Atm-, p53-, or Gadd45a-deficient mice. In the absence of p53, we observed the greatest increase in events, a lesser increase in the absence of Atm, and only a modest increase in the absence of Gadd45a. The striking observation was the difference in the time at which the spontaneous events occurred in atm and trp53 mutant mice. The frequency of homologous recombination in atm mutant mice was increased later during development. In contrast, p53 appears to have a role in suppressing homologous recombination early during development, when p53 is known to spontaneously promote p21 activity. The timing of the increased spontaneous recombination was similar in the Gadd45a- and p53-deficient mice. This temporal resolution suggests that Atm and p53 can act to maintain genomic integrity by different mechanisms in certain in vivo contexts.

Atm-, p53-, and Gadd45a-deficient mice show an increased frequency of homologous recombination at different stages during development.

Atm, p53, et font partie d&#x26;#39;une voie Gadd45a ADN dommages r&#xE9;ponse cellulaire, l&#x26;#39;absence de l&#x26;#39;une quelconque de ces r&#xE9;sultats dans les composants l&#x26;#39;instabilit&#xE9; g&#xE9;nomique accrue. Nous avons effectu&#xE9; une examen in vivo de la fr&#xE9;quence de recombinaison homologue spontan&#xE9;e dans ATM, p53-, ou Gadd45a souris d&#xE9;ficientes. En l&#x26;#39;absence de p53, nous avons observ&#xE9; la plus forte augmentation dans les &#xE9;v&#xE9;nements, dans une moindre augmentation de l&#x26;#39;absence de l&#x26;#39;ATM, et seulement une augmentation modeste en l&#x26;#39;absence de Gadd45a. L&#x26;#39;observation frappante est la diff&#xE9;rence dans le moment o&#xF9; les &#xE9;v&#xE9;nements spontan&#xE9;s eu lieu en atm et trp53 souris mutantes. La fr&#xE9;quence de recombinaison homologue dans des souris mutantes atm a &#xE9;t&#xE9; augment&#xE9; par la suite au cours du d&#xE9;veloppement. En revanche, p53 semble avoir un r&#xF4;le dans la r&#xE9;pression recombinaison homologue stade pr&#xE9;coce du d&#xE9;veloppement, lorsque p53 est connue pour promouvoir spontan&#xE9;ment p21 activit&#xE9;. Le moment de la recombinaison accrue spontan&#xE9;e &#xE9;tait similaire dans les Gadd45a-et p53-souris d&#xE9;ficientes. Cette r&#xE9;solution temporelle sugg&#xE8;re que l&#x26;#39;ATM et p53 peut agir pour maintenir l&#x26;#39;int&#xE9;grit&#xE9; du g&#xE9;nome par des m&#xE9;canismes diff&#xE9;rents dans certains contextes in vivo.

Atm-, P53-et Gadd45a souris d&#xE9;ficientes montrent une fr&#xE9;quence accrue de la recombinaison homologue lors des diff&#xE9;rentes &#xE9;tapes de d&#xE9;veloppement

Atm-, Anzeige-p53 und Gadd45a-defiziente M&#xE4;use eine erh&#xF6;hte H&#xE4;ufigkeit einer homologen Rekombination in verschiedenen Stadien w&#xE4;hrend der Entwicklung.

ATM, p53 e Gadd45a fanno parte di un percorso di risposta cellulare danno al DNA; l&#39;assenza di uno qualsiasi di questi componenti si traduce in maggiore instabilit&agrave; genomica. Abbiamo condotto un esame in vivo della frequenza di ricombinazione omologa spontanea in Atm, p53 o mouse Gadd45a-carenti. In assenza di p53, abbiamo osservato il pi&ugrave; grande aumento di eventi, un minore aumento in assenza di Atm e solo un modesto aumento in assenza di Gadd45a. L&#39;osservazione sorprendente &egrave; stata la differenza nel momento in cui gli eventi spontanei si &egrave; verificato nei topi mutanti atm e trp53. La frequenza di ricombinazione omologa in topi mutanti atm &egrave; stata aumentata pi&ugrave; successivamente durante lo sviluppo. Al contrario, p53 sembra avere un ruolo nella soppressione di ricombinazione omologa precocemente durante lo sviluppo, quando p53 &egrave; conosciuta per promuovere spontaneamente attivit&agrave; di p21. I tempi dell&#39;aumentata ricombinazione spontanea era simili in topi Gadd45a e p53-deficient. Questa risoluzione temporale suggerisce che Atm e p53 pu&ograve; agire per mantenere l&#39;integrit&agrave; genomica mediante diversi meccanismi in determinati contesti in vivo.

ATM, p53 e mouse carenti Gadd45a mostrano un aumento della frequenza di ricombinazione omologa in diverse fasi durante lo sviluppo.

ATM&#x306F;&#x3001;p53&#x3068;DNA&#x640D;&#x50B7;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5FDC;&#x7B54;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;Gadd45a&#x5F62;&#x90E8;&#x3068;&#x3001;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x306E;&#x4E0D;&#x5728;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;ATM&#x306F;&#x3001;p53-&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;Gadd45a&#x6B20;&#x640D;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x81EA;&#x767A;&#x7684;&#x306A;&#x76F8;&#x540C;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x306E;&#x983B;&#x5EA6;&#x306E;in vivo&#x8A66;&#x9A13;&#x3067;&#x5B9F;&#x65BD;&#x3057;&#x305F;&#x3002; p53&#x306E;&#x4E0D;&#x5728;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x6700;&#x5927;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3001;ATM&#x306E;&#x4E0D;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x4F4E;&#x3044;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x3001;Gadd45a&#x306E;&#x6709;&#x7121;&#x306E;&#x307F;&#x3067;&#x3055;&#x3055;&#x3084;&#x304B;&#x306A;&#x5897;&#x52A0;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5370;&#x8C61;&#x7684;&#x306A;&#x89B3;&#x5BDF;&#x306F;&#x3001;&#x81EA;&#x767A;&#x7684;&#x306A;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;ATM&#x3068;trp53&#x5909;&#x7570;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306B;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x6642;&#x523B;&#x306E;&#x5DEE;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002; ATM&#x5909;&#x7570;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x76F8;&#x540C;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x306E;&#x983B;&#x5EA6;&#x306F;&#x3001;&#x958B;&#x767A;&#x4E2D;&#x306B;&#x3001;&#x5F8C;&#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;p53&#x306F;p53&#x304C;&#x81EA;&#x767A;&#x7684;&#x306B;p21&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x5834;&#x5408;&#x306F;&#x3001;&#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x6642;&#x306B;&#x306F;&#x6291;&#x5236;&#x76F8;&#x540C;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x898B;&#x3048;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x81EA;&#x767A;&#x7684;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;Gadd45a&#x3068;p53&#x6B20;&#x640D;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x540C;&#x69D8;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x6642;&#x9593;&#x5206;&#x89E3;&#x80FD;&#x306F;&#x3001;ATM&#x3068;p53&#x304C;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30AD;&#x30B9;&#x30C8;&#x5185;&#x306E;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x5225;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x5B8C;&#x5168;&#x6027;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x884C;&#x52D5;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

ATM-&#x3001;P53-&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;Gadd45a&#x6B20;&#x640D;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x958B;&#x767A;&#x6642;&#x306B;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x76F8;&#x540C;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x983B;&#x5EA6;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3059;&#x308B;

Atm, p53, &#xBC0F; Gadd45a &#xC591;&#xC2DD; &#xBD80;&#xBD84;&#xC758; DNA &#xC190;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; &#xC751;&#xB2F5; &#xD1B5;&#xB85C;; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xAC00; &#xC5C6;&#xC73C;&#xBA74; &#xACB0;&#xACFC; &#xC99D;&#xAC00; genomic &#xBD88;&#xC548;&#xC815;&#xC131;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xD604;&#xAE08;, p53 &#xB610;&#xB294; Gadd45a &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC790;&#xBC1C;&#xC801;&#xC778; &#xB3D9;&#xC885; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xBE48;&#xB3C4;&#xC758; in vivo &#xC2DC;&#xD5D8;&#xC744; &#xC2E4;&#xC2DC;. P53&#xC758; &#xBD80;&#xC7AC;, Atm, &#xBD80;&#xC7AC;&#xC758; &#xB0AE;&#xC740; &#xC99D;&#xAC00; &#xC0AC;&#xAC74;&#xACFC; gadd45a&#xC758; &#xBD80;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xACB8;&#xC190; &#xD55C; &#xC99D;&#xAC00;&#xC5D0; &#xAC00;&#xC7A5; &#xD070; &#xC99D;&#xAC00; &#xAD00;&#xCC30;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB208;&#xC5D0; &#xB744;&#xB294; &#xC804;&#xB9DD;&#xB300;&#xB294; atm &#xBC0F; trp53 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC790;&#xBC1C;&#xC801;&#xC778; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD55C;&#xB294; &#xC2DC;&#xAC04; &#xCC28;&#xC774;. Atm &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC0DD;&#xC950; &#xB3D9;&#xC885; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xBE48;&#xB3C4; &#xB098;&#xC911; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC99D;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBC18;&#xBA74;, p53 p53 &#xC800;&#xC808;&#xB85C; p21 &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xB54C; &#xCD08;&#xAE30; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xB3D9;&#xC885; &#xC7AC;&#xACB0;&#xD569;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0A9;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC99D;&#xAC00; &#xC790;&#xBC1C;&#xC801;&#xC778; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xD0C0;&#xC774;&#xBC0D; Gadd45a &#xBC0F; p53 &#xACB0;&#xD54D; &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC801; &#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; Atm &#xBC0F; p53 vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xD2B9;&#xC815; &#xCEE8;&#xD14D;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4;&#xB978; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAC8C;&#xB188; &#xBB34;&#xACB0;&#xC131;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xD589;&#xB3D9; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Atm, p53 &#xBC0F; Gadd45a &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xC950; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3D9;&#xC885; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569;&#xC758; &#xBE48;&#xB3C4;&#xAC00; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558;&#xB294;&#xC9C0; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Atm, p53, y parte Gadd45a forma de una v&#xED;a de respuesta ADN-da&#xF1;o celular, la ausencia de cualquiera de estos componentes produce inestabilidad gen&#xF3;mica creciente. Hemos llevado a cabo un examen en vivo de la frecuencia de la tendencia espont&#xE1;nea de recombinaci&#xF3;n hom&#xF3;loga en ATM, p53-o Gadd45a ratones deficientes. En ausencia de p53, se observ&#xF3; el mayor incremento en los eventos, un aumento menor en ausencia de la ATM, y s&#xF3;lo un modesto incremento en la ausencia de Gadd45a. La observaci&#xF3;n llamativa fue la diferencia en el momento en que los acontecimientos espont&#xE1;neos ocurri&#xF3; en atm y Trp53 ratones mutantes. La frecuencia de recombinaci&#xF3;n hom&#xF3;loga en atm ratones mutantes se aument&#xF3; posteriormente durante el desarrollo. En contraste, p53 parece tener un papel en la supresi&#xF3;n de la recombinaci&#xF3;n hom&#xF3;loga temprano durante el desarrollo, cuando p53 es conocido para promover la actividad espont&#xE1;nea de p21. El momento de la recombinaci&#xF3;n espont&#xE1;nea aumento fue similar en los Gadd45a y los ratones deficientes en p53. Esta resoluci&#xF3;n temporal sugiere que la ATM y p53 puede actuar para mantener la integridad gen&#xF3;mica por diferentes mecanismos en ciertos contextos en vivo.

Atm, P53, y Gadd45a-ratones deficientes muestran una mayor frecuencia de recombinaci&#xF3;n hom&#xF3;loga en diferentes etapas del desarrollo

Ku70, DNA PKcs &#xD568;&#xAED8; ku86&#xB294; DNA&#xC5D0; &#xC885;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; (DNA-PK) &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; nonhomologous &#xB05D;&#xC5D0; &#xD569;&#xB958; &#xD558; &#xC5EC; DNA &#xC774;&#xC911; &#xAC00;&#xB2E5; &#xBE0C;&#xB808;&#xC774;&#xD06C; &#xC218;&#xB9AC; &#xAD00;&#xB828; &#xC591;&#xC2DD;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xC0AD;&#xC81C;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;&#xB85C; intrachromosomal &#xB3D9;&#xC885; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; (HR)&#xC5D0; Ku86 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC870;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xCE21;&#xC815;&#xD560; phenotypic &#xC0C9;&#xC18C; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xAC19;&#xC740; &#xC0AD;&#xC81C; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;. &#xBD84;&#xD64D;&#xC0C9; &#xB208;&#xC774; &#xBD88;&#xC548;&#xC815; &#xD55C; (&#xB9D0; &#xC7A5;&#xB09C;) &#xB300;&#xB9BD; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; 70 kb DNA &#xBCF5;&#xC81C; &#xBCF5;&#xC0AC;&#xBCF8;&#xC758; &#xC0AD;&#xC81C; &#xADC0;&#xC120; &#xB9DD;&#xB9C9; &#xC0C9;&#xC18C; &#xC0C1;&#xD53C; (RPE)&#xC758; &#xC140;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xAC80;&#xC740; &#xC0C9;&#xC18C; &#xCD95;&#xC801; &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; wildtype &#xD551;&#xD06C; &#xC678; &#xB208; &#xBC15;&#xC774; &#xD76C;&#xC11D; (p) &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB3D9;&#xC885; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xBE48;&#xB3C4; Ku86 &#xACB0;&#xD54D; &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD06C;&#xAC8C; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xAC00; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD55C; &#xC140;&#xC758; &#xD655;&#xC0B0; &#xAC10;&#xC18C; &#xB418;&#xC5C8;&#xACE0; Ku86 &#xACB0;&#xD54D; &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC9C0;&#xC5F0;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; ku86&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC9C1;&#xC811; &#xB610;&#xB294; &#xAC04;&#xC811;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB3D9;&#xC885; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; vivo&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C;.

Ku86 &#xACB0;&#xD54D; &#xAC10;&#xC18C; intrachromosomal &#xB3D9;&#xC885; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Ku70 y Ku86, junto con el ADN PKcs forman el ADN-dependiente de la prote&#xED;na quinasa (DNA-PK) complejo que est&#xE1; implicada en la reparaci&#xF3;n del ADN de cadena doble ruptura por no hom&#xF3;logo terminar uni&#xE9;ndose. Se investig&#xF3; el efecto de la mutaci&#xF3;n en Ku86 intracromosomal recombinaci&#xF3;n hom&#xF3;loga (HR), resultando en eliminaciones in vivo en ratones. Hemos cuantificado dichos eventos utilizando un ensayo de supresi&#xF3;n de la pigmentaci&#xF3;n fenot&#xED;pica. La eliminaci&#xF3;n de una copia de una duplicaci&#xF3;n de 70 kb de ADN en los ojos rosados &#x200B;&#x200B;resultados inestables alelo (juego de palabras) en la reversi&#xF3;n al tipo salvaje de ojos rosados &#x200B;&#x200B;de diluci&#xF3;n (p) de genes, lo que permite la acumulaci&#xF3;n de pigmento negro en las c&#xE9;lulas del epitelio pigmentario de la retina (EPR). Hemos encontrado que la frecuencia de recombinaci&#xF3;n hom&#xF3;loga se redujo significativamente en Ku86 ratones deficientes. Por otra parte, la proliferaci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas en las que los eventos de recombinaci&#xF3;n se produjo fue reducido y retraso en el desarrollo en los ratones deficientes Ku86. Estos datos indican un papel de Ku86 directa o indirectamente en la recombinaci&#xF3;n hom&#xF3;loga in vivo.

Ku86 deficiencia conduce a la reducci&#xF3;n de intracromos&#xF3;mica recombinaci&#xF3;n hom&#xF3;loga in vivo en ratones

Ku70 &#x548C; Ku86 &#x4E0E; DNA pkcs # &#x6784;&#x6210; DNA &#x4F9D;&#x8D56;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; (DNA PK) &#x590D;&#x6742;&#x7684; nhej &#x5305;&#x542B;&#x5728; DNA &#x53CC;&#x94FE;&#x65AD;&#x88C2;&#x4FEE;&#x590D;&#x4E2D;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8C03;&#x67E5;&#x4E2D;&#x5220;&#x9664;&#x5728;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4F53;&#x5185;&#x4EA7;&#x751F; intrachromosomal &#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4; (HR) Ku86 &#x7A81;&#x53D8;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x91CF;&#x5316;&#x8868;&#x578B;&#x7740;&#x8272;&#x6CD5;&#x68C0;&#x6D4B;&#x8FD9;&#x79CD;&#x5220;&#x9664;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x3002;70 Kb DNA &#x91CD;&#x590D;&#x7684;&#x7C89;&#x8272;&#x773C;&#x775B;&#x4E0D;&#x7A33;&#x5B9A; &#xFF08;&#x53CC;&#x5173;&#xFF09; &#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x526F;&#x672C;&#x5220;&#x9664;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4; tn &#x91CE;&#x6BD2;&#x7C89;&#x8272;&#x773C;&#x775B;&#x7A00;&#x91CA; (p) &#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x8272;&#x7D20;&#x4E0A;&#x76AE; (RPE) &#x7684;&#x9ED1;&#x8272;&#x989C;&#x6599;&#x79EF;&#x7D2F;&#x7684;&#x56DE;&#x5F52;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#x7684;&#x9891;&#x7387;&#x5927;&#x5927;&#x51CF;&#x5C11; Ku86 &#x7F3A;&#x9677;&#x5C0F;&#x9F20;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x5728;&#x91CD;&#x7EC4;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x53D1;&#x751F;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x662F;&#x51CF;&#x5C11;&#x548C; Ku86 &#x7F3A;&#x9677;&#x5C0F;&#x9F20;&#x53D1;&#x5C55;&#x8FDF;&#x7F13;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x4F5C;&#x7528;&#x4E3A; Ku86 &#x76F4;&#x63A5;&#x6216;&#x95F4;&#x63A5;&#x5728;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#x3002;

Ku86 &#x7F3A;&#x9677;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5728;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x51CF;&#x5C11; intrachromosomal &#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#x3002;

Ku70 and Ku86 together with DNA-PKcs form the DNA-dependent protein kinase (DNA-PK) complex that is involved in DNA double-strand break repair by nonhomologous end joining. We investigated the effect of Ku86 mutation on intrachromosomal homologous recombination (HR) resulting in deletions in vivo in mice. We quantified such deletion events using a phenotypic pigmentation assay. Deletion of one copy of a 70 kb DNA duplication in the pink-eyed unstable (pun) allele results in reversion to the wildtype pink-eyed dilution (p) gene, allowing black pigment accumulation in cells of the retinal pigment epithelium (RPE). We found that the frequency of homologous recombination was significantly reduced in Ku86 deficient mice. Furthermore, the proliferation of cells in which recombination events occurred was reduced and developmentally delayed in the Ku86 deficient mice. These data indicate a role for Ku86 directly or indirectly in homologous recombination in vivo.

Ku86 deficiency leads to reduced intrachromosomal homologous recombination in vivo in mice.

Ku70 et Ku86 avec DNA-PKcs former l&#x26;#39;ADN-prot&#xE9;ine kinase d&#xE9;pendante (DNA-PK) complexe qui est impliqu&#xE9;e dans la r&#xE9;paration d&#x26;#39;ADN double-brin pause par non homologue fin de rejoindre. Nous avons &#xE9;tudi&#xE9; l&#x26;#39;effet de la mutation sur Ku86 intrachromosomique recombinaison homologue (RH) r&#xE9;sultant des suppressions in vivo chez la souris. Nous avons quantifi&#xE9; les &#xE9;v&#xE9;nements de suppression de ces en utilisant un dosage ph&#xE9;notypique pigmentation. Suppression d&#x26;#39;une copie d&#x26;#39;une duplication de 70 ko ADN dans les pink-eyed instables r&#xE9;sultats all&#xE8;le (jeu de mots) dans le retour &#xE0; la souche sauvage pink-eyed dilution (p) du g&#xE8;ne, permettant l&#x26;#39;accumulation de pigment noir dans les cellules de l&#x26;#39;&#xE9;pith&#xE9;lium pigmentaire r&#xE9;tinien (EPR). Nous avons constat&#xE9; que la fr&#xE9;quence de recombinaison homologue a &#xE9;t&#xE9; significativement r&#xE9;duite dans Ku86 souris d&#xE9;ficientes. En outre, la prolif&#xE9;ration des cellules dans lesquelles les &#xE9;v&#xE9;nements de recombinaison s&#x26;#39;est produite a &#xE9;t&#xE9; r&#xE9;duite et un retard de d&#xE9;veloppement dans les souris d&#xE9;ficientes en Ku86. Ces donn&#xE9;es indiquent un r&#xF4;le &#xE0; jouer Ku86 directement ou indirectement dans la recombinaison homologue in vivo.

Ku86 carence entra&#xEE;ne une diminution des intrachromosomique recombinaison homologue in vivo chez la souris

Ku86-Mangel f&#xFC;hrt zu einer verminderten intrachromosomale homologe Rekombination in vivo in M&#xE4;usen.

Ku70 e Ku86 insieme al DNA-PKcs formano il DNA-dipendente chinasi di proteina (DNA-PK) complessa che &egrave; coinvolta nella riparazione del DNA double-strand break unendo nonhomologous fine. Abbiamo studiato l&#39;effetto della mutazione Ku86 su ricombinazione omologa intracromosomica (HR) con conseguente eliminazione in vivo nei topi. Abbiamo quantificato tali eventi di eliminazione usando un&#39;analisi fenotipica della pigmentazione. Eliminazione di una copia di una duplicazione del DNA 70 kb nell&#39;allele occhi rosa instabile (pun) provoca reversione al gene wildtype diluizione dagli occhi rosa (p), permettendo l&#39;accumulo di pigmento nero nelle cellule dell&#39;epitelio pigmentato retinico (RPE). Abbiamo trovato che la frequenza di ricombinazione omologa era significativamente ridotta nei topi carenti di Ku86. Inoltre, la proliferazione delle cellule in cui si sono verificati eventi di ricombinazione &egrave; stato ridotto e inerente allo sviluppo ritardata nei mouse carenti Ku86. Questi dati indicano un ruolo per Ku86 direttamente o indirettamente nella ricombinazione omologa in vivo.

Deficit di Ku86 conduce al ridotto intracromosomica ricombinazione omologa in vivo nei topi.

DNA-PKcs&#x306E;&#x3068;Ku70&#x306E;&#x3068;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;Ku86&#x306F;&#x3001;&#x975E;&#x76F8;&#x540C;&#x672B;&#x7AEF;&#x7D50;&#x5408;&#x306B;&#x3088;&#x308B;DNA&#x4E8C;&#x91CD;&#x9396;&#x5207;&#x65AD;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;DNA&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;DNA-PK&#xFF09;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x6B20;&#x5931;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3059;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x5185;&#x76F8;&#x540C;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#xFF08;HR&#xFF09;&#x306B;Ku86&#x5909;&#x7570;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x3001;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x8272;&#x7D20;&#x6C88;&#x7740;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x524A;&#x9664;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7DB2;&#x819C;&#x8272;&#x7D20;&#x4E0A;&#x76AE;&#xFF08;RPE&#xFF09;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x306B;&#x9ED2;&#x8272;&#x9854;&#x6599;&#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x91CE;&#x751F;&#x30D4;&#x30F3;&#x30AF;&#x306E;&#x76EE;&#x306E;&#x5E0C;&#x91C8;&#xFF08;P&#xFF09;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3078;&#x306E;&#x5FA9;&#x5E30;&#x306B;&#x30D4;&#x30F3;&#x30AF;&#x306E;&#x76EE;&#x306E;&#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x306A;&#xFF08;&#x3057;&#x3083;&#x308C;&#xFF09;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3067;70&#x30AD;&#x30ED;&#x30D0;&#x30A4;&#x30C8;DNA&#x8907;&#x88FD;&#x306E;&#x30B3;&#x30D4;&#x30FC;&#x306E;&#x524A;&#x9664;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x76F8;&#x540C;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x306E;&#x983B;&#x5EA6;&#x304C;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;Ku86&#x6B20;&#x640D;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002; Ku86&#x6B20;&#x640D;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x4E8B;&#x8C61;&#x304C;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x306F;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x3001;&#x767A;&#x9054;&#x9045;&#x5EF6;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x76F4;&#x63A5;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x9593;&#x63A5;&#x7684;&#x306B;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x3067;&#x306E;&#x76F8;&#x540C;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;Ku86&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Ku86&#x6B20;&#x640D;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;in vivo&#x3067;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x5185;&#x76F8;&#x540C;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x3092;&#x524A;&#x6E1B;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;

&#x5982; DNA &#x5220;&#x9664;&#x5927;&#x578B;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x91CD;&#x6392;&#x764C;&#x75C7;&#x7684;&#x75C5;&#x56E0;&#x5728;&#x53D1;&#x6325;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x7531;&#x63A5;&#x89E6;&#x81F4;&#x764C;&#x7269;&#x8D28;&#x6216;&#x7A81;&#x53D8;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x53C2;&#x4E0E;&#x7EF4;&#x6301;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7684;&#x5B8C;&#x6574;&#x7684;&#x8FD8;&#x53EF;&#x4EE5;&#x63D0;&#x5347; DNA &#x7F3A;&#x5931;&#x7684;&#x9891;&#x7387;&#x3002;&#x4F53;&#x5185;&#x7684; DNA &#x5220;&#x9664;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x7C89;&#x8272;&#x773C;&#x775B;&#x4E0D;&#x7A33;&#x5B9A; &#xFF08;&#x53CC;&#x5173;&#xFF09; &#x8F68;&#x8FF9;&#x5728;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x56FD;&#x5BB6;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80DA;&#x80CE;&#x5185;&#x5141;&#x8BB8;&#x5220;&#x9664;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x7684;&#x89C6;&#x89C9;&#x68C0;&#x6D4B;&#x3002;&#x5220;&#x9664;&#x91CD;&#x590D;&#x7684; 70 kb DNA &#x7247;&#x6BB5;&#x5185;&#x8425;&#x76D8;&#x8F68;&#x8FF9;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x526F;&#x672C;&#x8FD8;&#x539F;&#x7684;&#x7C89;&#x8272;&#x773C;&#x775B;&#x7A00; (p) &#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x5B83;&#x5C06;&#x7F16;&#x7801;&#x86CB;&#x767D;&#x8D1F;&#x8D23;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x9ED1;&#x8272;&#x9ED1;&#x8272;&#x7D20;&#x7684;&#x5927;&#x4F1A;&#x3002;&#x53D1;&#x751F;&#x5728; premelanocytes &#x4E2D;&#x5220;&#x9664;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x5BFC;&#x81F4;&#x540E;&#x4EE3;&#x548C;&#x65E0;&#x8272;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x8272;&#x7D20;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE; (RPE) &#x7684;&#x9ED1;&#x8272;&#x8272;&#x7D20;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE; (&#x773C;&#x70B9;) &#x8F7B;&#x7684;&#x7070;&#x8272;&#x76AE;&#x6BDB;&#x4E0A;&#x7684;&#x53EF;&#x89C1;&#x9ED1;&#x8865;&#x4E01; (&#x6BDB;&#x76AE;&#x666F;&#x70B9;)&#x3002;&#x5728;&#x6BDB;&#x76AE;&#x73B0;&#x573A;&#x68C0;&#x6D4B;&#x4E2D;&#xFF0C;10 &#x5C81; d pup&#xFF0C;&#x4F1A;&#x9075;&#x5B88;&#x6BDB;&#x76AE;&#x4E0A;&#x7684;&#x9ED1;&#x70B9;&#x3002;&#x773C;&#x6591;&#x68C0;&#x6D4B;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x5728;&#x5C0F;&#x9F20;&#x90FD;&#x727A;&#x7272;&#x5728; d 20&#x3001; &#x773C;&#x775B;&#x88AB;&#x5220;&#x9664;&#xFF0C;&#x548C; wholemount &#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x8272;&#x7D20;&#x4E0A;&#x76AE;&#x5E7B;&#x706F;&#x7247;&#x51C6;&#x5907;&#x773C;&#x73B0;&#x573A;&#x5206;&#x6790;&#x3002;&#x9891;&#x7387;&#x3001; &#x5927;&#x5C0F;&#x548C;&#x89C6;&#x795E;&#x7ECF;&#x7684;&#x773C;&#x70B9;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x786E;&#x5B9A;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x53EF;&#x7528;&#x4E8E;&#x7814;&#x7A76;&#x73AF;&#x5883;&#x5316;&#x5B66;&#x548C;&#x7269;&#x7406;&#x56E0;&#x7D20;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x4EE5;&#x53CA;&#x4F53;&#x5185; DNA &#x7F3A;&#x5931;&#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x63A7;&#x5236;&#x3002;

&#x4F53;&#x5185; DNA &#x5220;&#x9664;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x68C0;&#x6D4B;&#x764C;&#x75C7;&#x7684;&#x73AF;&#x5883;&#x548C;&#x9057;&#x4F20;&#x6613;&#x611F;&#x6027;&#x3002;

Large-scale genomic rearrangements such as DNA deletions play a role in the etiology of cancer. The frequency of DNA deletions can be elevated by exposure to carcinogens or by mutations in genes involved in the maintenance of genomic integrity. The in vivo DNA deletion assay allows a visual detection of deletion events within the pink-eyed unstable (pun) locus in developing mouse embryos. A deletion of one copy of a duplicated 70-kb DNA fragment within the pun locus restores the pink-eyed dilute (p) gene, which encodes a protein responsible for the assembly of a black color melanin complex. Deletion events occurring in premelanocytes cause visible black patches (fur-spots) on the light gray fur of offspring and black pigmented cells (eye-spots) on the unpigmented retinal pigment epithelium (RPE). In the fur-spot assay, 10-d-old pups are observed for black spots on the fur. In the eye-spot assay, mice are sacrificed at d 20, eyes are removed, and the wholemount RPE slides are prepared for eye-spot analysis. The frequency, size, and position relative to the optic nerve of the eye-spots are determined. This assay can be used to study the effect of environmental chemicals and physical agents as well as the genetic control of DNA deletions in vivo.

In vivo DNA deletion assay to detect environmental and genetic predisposition to cancer.

R&#xE9;arrangements g&#xE9;nomiques &#xE0; grande &#xE9;chelle telles que des d&#xE9;l&#xE9;tions d&#x26;#39;ADN jouent un r&#xF4;le dans l&#x26;#39;&#xE9;tiologie du cancer. La fr&#xE9;quence des d&#xE9;l&#xE9;tions de l&#x26;#39;ADN peut &#xEA;tre &#xE9;lev&#xE9; en cas d&#x26;#39;exposition &#xE0; des agents canc&#xE9;rig&#xE8;nes ou par des mutations dans les g&#xE8;nes impliqu&#xE9;s dans le maintien de l&#x26;#39;int&#xE9;grit&#xE9; g&#xE9;nomique. Le test in vivo d&#xE9;l&#xE9;tion de l&#x26;#39;ADN permet une d&#xE9;tection visuelle des &#xE9;v&#xE9;nements au sein de la suppression pink-eyed instable (jeu de mots) locus dans le d&#xE9;veloppement des embryons de souris. Une d&#xE9;l&#xE9;tion d&#x26;#39;une copie d&#x26;#39;un fragment d&#x26;#39;ADN de 70 kb en double dans le locus calembour restaure le pink-eyed dilution (p) du g&#xE8;ne, qui code pour une prot&#xE9;ine responsable de l&#x26;#39;assemblage d&#x26;#39;un complexe m&#xE9;lanine couleur noire. &#xC9;v&#xE9;nements suppression intervenant dans premelanocytes provoquer des taches noires visibles (fourrure-spots) sur la fourrure gris clair et noir de la prog&#xE9;niture des cellules pigment&#xE9;es (ocelles) sur l&#x26;#39;&#xE9;pith&#xE9;lium pigmentaire r&#xE9;tinien non pigment&#xE9;e (RPE). Dans le test de la fourrure place, 10-D-anciens chiots sont observ&#xE9;es pour des taches noires sur la fourrure. Dans le test oeil-place, les souris sont sacrifi&#xE9;es &#xE0; d 20, les yeux sont retir&#xE9;s, et les diapositives RPE wholemount sont pr&#xE9;par&#xE9;s pour les yeux d&#x26;#39;analyse sur place. La fr&#xE9;quence, la taille et la position relative du nerf optique des taches oculaires sont d&#xE9;termin&#xE9;s. Ce test peut &#xEA;tre utilis&#xE9; pour &#xE9;tudier l&#x26;#39;effet de produits chimiques de l&#x26;#39;environnement et les agents physiques, ainsi que le contr&#xF4;le g&#xE9;n&#xE9;tique de d&#xE9;l&#xE9;tions de l&#x26;#39;ADN in vivo.

Essai in vivo d&#x26;#39;ADN Suppression pour d&#xE9;terminer la pr&#xE9;disposition de l&#x26;#39;environnement et g&#xE9;n&#xE9;tique au cancer

In-vivo-DNA-Deletion-Assay zum Umwelt-und genetische Pr&#xE4;disposition f&#xFC;r Krebs zu erkennen.

Riarrangiamenti genomici come delezioni del DNA giocano un ruolo nell&#39;eziologia del cancro. La frequenza di delezioni del DNA pu&ograve; essere elevata dall&#39;esposizione ad agenti cancerogeni o da mutazioni in geni coinvolti nel mantenimento dell&#39;integrit&agrave; genomica. Il test in vivo di eliminazione del DNA permette una rilevazione visiva degli eventi di cancellazione entro il locus rosa-eyed instabile (gioco di parole) in embrioni di topo in via di sviluppo. Una delezione di una copia di un frammento di DNA 70 kb duplicato all&#39;interno del locus pun ripristina il rosa-eyed diluito (p) gene, che codifica per una proteina responsabile per l&#39;assemblaggio di un complesso di melanina colore nero. Cancellazione eventi che si verificano in premelanocytes causare macchie nere visibili (pelliccia-spot) sulla pelliccia grigia chiara della prole e cellule pigmentate nere (occhio-macchie) sull&#39;epitelio pigmentato retinico unpigmented (RPE). In pelliccia-spot test, 10-d-vecchio cuccioli sono osservati per macchie nere sulla pelliccia. Nel dosaggio occhio-spot, topi sono sacrificati a d 20, gli occhi sono stati rimossi e le diapositive RPE wholemount sono preparate per occhio macchia-analisi. La frequenza, la dimensione e la posizione rispetto al nervo ottico dell&#39;occhio-macchie sono determinati. Questo test pu&ograve; essere utilizzato per studiare l&#39;effetto delle sostanze chimiche ambientali e agenti fisici cos&igrave; come il controllo genetico delle delezioni del DNA in vivo.

Test eliminazione del DNA in vivo per rilevare ambientale e genetica predisposizione al cancro.

&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;DNA&#x306E;&#x6B20;&#x5931;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x518D;&#x7DE8;&#x6210;&#x306F;&#x3001;&#x304C;&#x3093;&#x306E;&#x75C5;&#x56E0;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; DNA&#x306E;&#x6B20;&#x5931;&#x306E;&#x983B;&#x5EA6;&#x306F;&#x3001;&#x767A;&#x30AC;&#x30F3;&#x6027;&#x7269;&#x8CEA;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x5B8C;&#x5168;&#x6027;&#x306E;&#x7DAD;&#x6301;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x9732;&#x5149;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x4E0A;&#x6607;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002; in vivo&#x3067;&#x306E;DNA&#x306E;&#x6B20;&#x5931;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x80DA;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B;&#x30D4;&#x30F3;&#x30AF;&#x306E;&#x76EE;&#x306E;&#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x306A;&#xFF08;&#x3057;&#x3083;&#x308C;&#xFF09;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5185;&#x306E;&#x6B20;&#x5931;&#x306E;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x8996;&#x899A;&#x7684;&#x306B;&#x691C;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x3083;&#x308C;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5EA7;&#x5185;&#x306E;&#x91CD;&#x8907;&#x3057;&#x305F;70-kb&#x306E;DNA&#x65AD;&#x7247;&#x306E;&#x30B3;&#x30D4;&#x30FC;&#x306E;&#x524A;&#x9664;&#x306F;&#x3001;&#x9ED2;&#x8272;&#x30E1;&#x30E9;&#x30CB;&#x30F3;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x7ACB;&#x3066;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30D4;&#x30F3;&#x30AF;&#x306E;&#x76EE;&#x306E;&#x5E0C;&#x91C8;&#xFF08;p&#xFF09;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x5FA9;&#x5143;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; premelanocytes&#x3067;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x524A;&#x9664;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x5B50;&#x5B6B;&#x3068;&#x7121;&#x7740;&#x8272;&#x306E;&#x7DB2;&#x819C;&#x8272;&#x7D20;&#x4E0A;&#x76AE;&#xFF08;RPE&#xFF09;&#x306B;&#x9ED2;&#x3044;&#x8272;&#x7D20;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;&#x30A2;&#x30A4;&#x30B9;&#x30DD;&#x30C3;&#x30C8;&#xFF09;&#x306E;&#x30E9;&#x30A4;&#x30C8;&#x30B0;&#x30EC;&#x30FC;&#x306E;&#x6BDB;&#x76AE;&#x306E;&#x4E0A;&#x3067;&#x76EE;&#x306B;&#x898B;&#x3048;&#x308B;&#x9ED2;&#x306E;&#x30D1;&#x30C3;&#x30C1;&#xFF08;&#x6BDB;&#x76AE;&#xB7;&#x30B9;&#x30DD;&#x30C3;&#x30C8;&#xFF09;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x3002;&#x6BDB;&#x76AE;&#x30B9;&#x30DD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3067;&#x306F;&#x3001;10-D-&#x53E4;&#x3044;PUP&#x306F;&#x6BDB;&#x76AE;&#x306B;&#x9ED2;&#x3044;&#x6591;&#x70B9;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A2;&#x30A4;&#x30B9;&#x30DD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304C;D 20&#x3067;&#x5C60;&#x6BBA;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x76EE;&#x304C;&#x524A;&#x9664;&#x3055;&#x308C;&#x3001;wholemount RPE&#x30B9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30C9;&#x306F;&#x30A2;&#x30A4;&#x30B9;&#x30DD;&#x200B;&#x200B;&#x30C3;&#x30C8;&#x5206;&#x6790;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x7528;&#x610F;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A2;&#x30A4;&#x30B9;&#x30DD;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x8996;&#x795E;&#x7D4C;&#x3078;&#x306E;&#x76F8;&#x5BFE;&#x983B;&#x5EA6;&#x3001;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x3001;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x304C;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;&#x3001;&#x74B0;&#x5883;&#x5316;&#x5B66;&#x7269;&#x8CEA;&#x3068;&#x7269;&#x7406;&#x5264;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;in vivo&#x3067;&#x306E;DNA&#x306E;&#x6B20;&#x5931;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x5236;&#x5FA1;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x306E;DNA&#x306E;&#x524A;&#x9664;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3067;&#x304C;&#x3093;&#x306B;&#x74B0;&#x5883;&#x3068;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x7D20;&#x56E0;&#x3092;&#x691C;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;

&#xC554;&#xC758; &#xBCD1; &#xC778;&#xC5D0; DNA &#xC0AD;&#xC81C; &#xB4F1; &#xB300;&#xADDC;&#xBAA8; genomic &#xC7AC;&#xBC30;&#xC5F4;&#xC5D0; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAC8C;&#xB188; &#xBB34;&#xACB0;&#xC131;&#xC758; &#xC720;&#xC9C0; &#xAD00;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xB610;&#xB294; &#xBC1C;&#xC554; &#xBB3C;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; DNA &#xC0AD;&#xC81C; &#xBE48;&#xB3C4; &#xB192;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. Vivo&#xC5D0;&#xC11C; DNA &#xC0AD;&#xC81C; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBC30;&#xC544;&#xC5D0; &#xBD84;&#xD64D;&#xC0C9; &#xB208;&#xC774; &#xBD88;&#xC548;&#xC815; &#xD55C; (&#xB9D0; &#xC7A5;&#xB09C;) &#xB85C;&#xCEE4; &#xC2A4; &#xB0B4; &#xC0AD;&#xC81C; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xC758; &#xBE44;&#xC8FC;&#xC5BC; &#xAC80;&#xC0C9;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9D0; &#xC7A5;&#xB09C; &#xB85C;&#xCEE4; &#xC2A4; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC911;&#xBCF5; &#xB41C; 70 kb DNA &#xC870;&#xAC01;&#xC758; &#xD55C; &#xBCF5;&#xC0AC;&#xBCF8;&#xC758; &#xC0AD;&#xC81C;&#xB294; &#xBD84;&#xD64D;&#xC0C9; &#xB208;&#xC774; &#xD76C;&#xC11D; (p) &#xC720;&#xC804;&#xC790;, &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAC80;&#xC815; &#xC0C9;&#xC0C1; &#xB2CC; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCC45;&#xC784;&#xC744; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD558;&#xB294; &#xBCF5;&#xC6D0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Premelanocytes&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xC0AD;&#xC81C; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8; &#xC790;&#xC190;&#xACFC; unpigmented &#xB9DD;&#xB9C9; &#xC0C9;&#xC18C; &#xC0C1;&#xD53C; (RPE)&#xC5D0; &#xAC80;&#xC740; &#xC0C9;&#xC18C; &#xC138;&#xD3EC; (&#xB208;-&#xAD00;&#xAD11; &#xBA85;&#xC18C;)&#xC758; &#xBC1D;&#xC740; &#xD68C;&#xC0C9; &#xBAA8;&#xD53C;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xC774;&#xB294; &#xAC80;&#xC740; &#xD328;&#xCE58; (&#xBAA8;&#xD53C;-&#xAD00;&#xAD11; &#xBA85;&#xC18C;)&#xB97C; &#xC77C;&#xC73C;&#xD0AC;. &#xBAA8;&#xD53C;-&#xD604;&#xC7A5; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC;&#xC5D0;&#xC11C; 10 d &#xB41C; &#xC0C8;&#xB07C; &#xBAA8;&#xD53C;&#xC5D0; &#xAC80;&#xC740; &#xBC18;&#xC810;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xB208; &#xD604;&#xC7A5; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC;&#xC5D0; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xB294; d 20&#xC5D0; &#xD76C;&#xC0DD; &#xD558; &#xACE0; &#xB208; &#xC81C;&#xAC70; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; wholemount RPE &#xC2AC;&#xB77C;&#xC774;&#xB4DC; &#xB208; &#xD604;&#xC7A5; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC900;&#xBE44;&#xAC00;. &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218;, &#xD06C;&#xAE30;, &#xBC0F; &#xB208; &#xBC18;&#xC810;&#xC758; &#xC2DC; &#xC2E0;&#xACBD;&#xC5D0; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801;&#xC778; &#xC704;&#xCE58; &#xACB0;&#xC815; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xD658;&#xACBD; &#xD654;&#xD559; &#xBB3C;&#xC9C8; &#xBC0F; &#xBB3C;&#xB9AC;&#xC801; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; DNA &#xC0AD;&#xC81C; in vivo &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC81C;&#xC5B4; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC554; &#xD658;&#xACBD;&#xACFC; &#xC720;&#xC804; predisposition &#xAC10;&#xC9C0; vivo&#xC5D0;&#xC11C; DNA &#xC0AD;&#xC81C; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC;.

Las grandes reordenamientos gen&#xF3;micos como deleciones de ADN juegan un papel en la etiolog&#xED;a del c&#xE1;ncer. La frecuencia de deleciones de ADN puede ser elevado por la exposici&#xF3;n a agentes carcin&#xF3;genos o por mutaciones en genes implicados en el mantenimiento de la integridad gen&#xF3;mica. El ensayo in vivo la supresi&#xF3;n del ADN permite la detecci&#xF3;n visual de los acontecimientos dentro de la supresi&#xF3;n de ojos rosados &#x200B;&#x200B;inestable (juego de palabras) lugar en el desarrollo de embriones de rat&#xF3;n. Una deleci&#xF3;n de una copia de un fragmento de ADN duplicadas 70-kb en el locus retru&#xE9;cano restaura la rosa de ojos diluido (p) del gen, que codifica una prote&#xED;na responsable para el montaje de un complejo de color negro melanina. Los eventos de eliminaci&#xF3;n que se producen en premelanocytes provocar visibles manchas negras de piel (puntos negros) en la piel de color gris claro y negro de la descendencia c&#xE9;lulas pigmentadas (manchas oculares) en el epitelio pigmentario de la retina no pigmentado (RPE). En el ensayo de la piel in situ, de 10 d de edad, los cachorros se observan manchas negras en la piel. En el ensayo ocular in situ, los ratones se sacrificaron a las 20 d, se quitan los ojos, y las diapositivas del EPR wholemount se preparan para el an&#xE1;lisis de mancha ocular. La frecuencia, el tama&#xF1;o y posici&#xF3;n relativa en el nervio &#xF3;ptico de las manchas oculares se determinan. Este ensayo puede ser utilizado para estudiar el efecto de los productos qu&#xED;micos ambientales y agentes f&#xED;sicos, as&#xED; como el control gen&#xE9;tico de las supresiones de ADN in vivo.

Ensayo in vivo de eliminaci&#xF3;n de ADN para detectar la predisposici&#xF3;n ambiental y gen&#xE9;tica al c&#xE1;ncer

DNA alterations of every type are associated with the incidence of carcinogenesis, often on the genomic scale. Although homologous recombination (HR) is an important pathway of DNA repair, evidence is accumulating that deleterious genomic rearrangements can result from HR. It therefore follows that HR events may play a causative role in carcinogenesis. HR is elevated in response to carcinogens. HR may also be increased or decreased when its upstream regulation is perturbed or components of the HR machinery itself are not fully functional. This chapter summarizes research findings that demonstrate an association between HR and carcinogenesis. Increased or decreased frequencies of HR have been found in cancer cells and cancer-prone hereditary human disorders characterized by mutations in genes playing a role in HR, such as ATM, Tp53, BRCA, BLM, and WRN genes. Another evidence linking perturbations in HR and carcinogenesis is provided by studies showing that exposure to carcinogens results in an increased frequency of HR resulting in DNA deletions in yeast, human cells, or mice.

Involvement of homologous recombination in carcinogenesis.

&#x6BCF;&#x79CD;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684; DNA &#x6539;&#x5EFA;&#x672A;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x764C;&#x53D8;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x5F80;&#x5F80;&#x5728;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x89C4;&#x6A21;&#x4E0A;&#x53D1;&#x751F;&#x7387;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4; (HR) &#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684; DNA &#x4FEE;&#x590D;&#x9014;&#x5F84;&#xFF0C;&#x7D2F;&#x79EF;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x4ECE; HR &#x5BFC;&#x81F4;&#x6709;&#x5BB3;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x91CD;&#x6392;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x4EBA;&#x529B;&#x8D44;&#x6E90;&#x7684;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x53EF;&#x80FD;&#x764C;&#x53D8;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x81F4;&#x75C5;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x4EBA;&#x529B;&#x8D44;&#x6E90;&#x88AB;&#x63D0;&#x5347;&#x4E2D;&#x81F4;&#x764C;&#x7269;&#x8D28;&#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;HR &#x8FD8;&#x53EF;&#x80FD;&#x589E;&#x52A0;&#x6216;&#x51CF;&#x5C11;&#x65F6;&#x5176;&#x4E0A;&#x6E38;&#x8C03;&#x63A7;&#x6444;&#x52A8;&#x6216;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x7684; HR &#x673A;&#x68B0;&#x672C;&#x8EAB;&#x4E0D;&#x662F;&#x529F;&#x80FD;&#x9F50;&#x5168;&#x3002;&#x672C;&#x7AE0;&#x6982;&#x8FF0;&#x4E86;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E; HR &#x548C;&#x764C;&#x53D8;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x5728;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x5BB9;&#x6613;&#x53D1;&#x751F;&#x764C;&#x75C7;&#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x6027;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x75BE;&#x75C5;&#x57FA;&#x56E0;&#x5728;&#x4EBA;&#x529B;&#x8D44;&#x6E90;&#xFF0C;&#x53D1;&#x6325;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5982; ATM&#x3001; Tp53&#x3001; BRCA&#x3001; &#x80CC;&#x5149;&#x6A21;&#x7EC4;&#x3001; &#x548C;&#x8B66;&#x544A;&#x57FA;&#x56E0;&#x7A81;&#x53D8;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#xFF0C;&#x627E;&#x5230;&#x4E86; HR &#x7684;&#x589E;&#x52A0;&#x6216;&#x51CF;&#x5C11;&#x9891;&#x7387;&#x3002;&#x6270;&#x52A8;&#x94FE;&#x63A5;&#x5728; HR &#x548C;&#x764C;&#x53D8;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x53E6;&#x4E00;&#x4E2A;&#x8BC1;&#x636E;&#x662F;&#x7531;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x66B4;&#x9732;&#x4E8E;&#x81F4;&#x764C;&#x7269;&#x8D28;&#xFF0C;&#x7ED3;&#x679C;&#x5728; HR &#x7684;&#x9891;&#x7387;&#x589E;&#x52A0;&#x9020;&#x6210;&#x9175;&#x6BCD;&#x3001; &#x4EBA;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6216;&#x5C0F;&#x9F20; DNA &#x7F3A;&#x5931;&#x3002;

&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#x764C;&#x53D8;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x53C2;&#x4E0E;&#x3002;

Alt&#xE9;rations de l&#x26;#39;ADN de chaque type sont associ&#xE9;s &#xE0; l&#x26;#39;incidence de la canc&#xE9;rogen&#xE8;se, souvent &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;chelle g&#xE9;nomique. Bien que la recombinaison homologue (RH) est une voie importante de la r&#xE9;paration de l&#x26;#39;ADN, les preuves s&#x26;#39;accumulent que les r&#xE9;arrangements g&#xE9;nomiques d&#xE9;l&#xE9;t&#xE8;res peuvent r&#xE9;sulter de RH. Il s&#x26;#39;ensuit donc que les &#xE9;v&#xE9;nements RH peut jouer un r&#xF4;le causal dans la carcinogen&#xE8;se. HR est &#xE9;lev&#xE9;e en r&#xE9;ponse &#xE0; des agents canc&#xE9;rig&#xE8;nes. RH peut &#xE9;galement &#xEA;tre augment&#xE9; ou diminu&#xE9; lorsque sa r&#xE9;gulation &#xE0; l&#x26;#39;amont est perturb&#xE9;e ou composants de la machinerie RH lui-m&#xEA;me ne sont pas enti&#xE8;rement fonctionnel. Ce chapitre r&#xE9;sume les r&#xE9;sultats des recherches qui d&#xE9;montrent une association entre les RH et la carcinogen&#xE8;se. Augmentation de la fr&#xE9;quence ou &#xE0; la baisse des RH ont &#xE9;t&#xE9; trouv&#xE9;s dans les cellules canc&#xE9;reuses et pr&#xE9;dispos&#xE9;es au cancer h&#xE9;r&#xE9;ditaire de l&#x26;#39;homme des troubles caract&#xE9;ris&#xE9;s par des mutations dans les g&#xE8;nes jouant un r&#xF4;le en mati&#xE8;re de RH, tels que l&#x26;#39;ATM, TP53, BRCA, BLM, WRN et les g&#xE8;nes. Une autre preuve reliant perturbations dans les RH et la carcinogen&#xE8;se est fournie par des &#xE9;tudes montrant que l&#x26;#39;exposition &#xE0; des agents canc&#xE9;rig&#xE8;nes dans les r&#xE9;sultats une fr&#xE9;quence accrue des RH dans les d&#xE9;l&#xE9;tions de l&#x26;#39;ADN r&#xE9;sultant de la levure, les cellules humaines, ou des souris.

Participation de la recombinaison homologue dans la carcinogen&#xE8;se

DNA-&Auml;nderungen jeder Art sind die Inzidenz der Karzinogenese, oft auf der genomischen Skala zugeordnet. Zwar homologe Rekombination (HR) ein wichtiger Weg zur DNA-Reparatur, ist Beweis ansammeln, dass sch&auml;dliche genomische Umlagerungen aus dem HR f&uuml;hren k&ouml;nnen. Es folgt daher, dass HR Veranstaltungen k&ouml;nnen eine kausale Rolle in der Karzinogenese spielen. HR ist als Reaktion auf Karzinogene erh&ouml;ht. HR kann auch erh&ouml;ht oder vermindert sich seine vorgelagerten Verordnung ist umwerfen oder Komponenten von der HR-Maschine selbst sind nicht voll funktionsf&auml;hig. In diesem Kapitel werden die Forschungsergebnisse, die eine Zuordnung zwischen HR und Karzinogenese veranschaulichen zusammengefasst. Erh&ouml;hter oder verringerte Frequenzen HR in Krebszellen und Krebs neigende menschlichen Erbkrankheiten zeichnet sich durch Mutationen in Genen, die eine Rolle im HR, wie ATM, Tp53, BRCA und BLM WRN-Gene gefunden. Ein weiterer Beweis verkn&uuml;pfen Perturbationen in HR und Karzinogenese wird durch Studien zeigen, dass die Exposition gegen&uuml;ber Karzinogenen Ergebnisse in eine erh&ouml;hte Frequenz der HR bereitgestellt was zu DNA-Deletionen in Hefe, menschliche Zellen oder M&auml;use.

Beteiligung der homologen Rekombination in der Karzinogenese.

Alterazioni del DNA di ogni tipo sono associati con l&#39;incidenza della cancerogenesi, spesso su scala genomica. Anche se la ricombinazione omologa (HR) &egrave; un importante percorso di riparazione del DNA, sta accumulando prove che riarrangiamenti genomici deleteri possono derivare da HR. Ne consegue pertanto che HR eventi possono giocare un ruolo causale nella cancerogenesi. HR &egrave; elevata in risposta ad agenti cancerogeni. HR pu&ograve; essere aumentato o diminuito quando il regolamento a monte &egrave; perturbato o componenti della macchina HR stessa non sono completamente funzionali. Questo capitolo riassume i risultati di ricerca che dimostrano un&#39;associazione tra HR e carcinogenesi. Frequenze aumentate o diminuite di HR sono state trovate nelle cellule tumorali e disturbi umani soggetto a cancro ereditari caratterizzati da mutazioni in geni giocando un ruolo in HR, quali geni ATM, Tp53, BRCA, BLM e avv. Un&#39;altra prova che collega perturbazioni in HR e carcinogenesi &egrave; fornita da studi che dimostrano che l&#39;esposizione ai risultati di agenti cancerogeni in un aumento della frequenza di HR con conseguente delezioni del DNA nel lievito, cellule umane o topi.

Coinvolgimento della ricombinazione omologa nella cancerogenesi.

&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x306E;DNA&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x3070;&#x3057;&#x3070;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x898F;&#x6A21;&#x3067;&#x3001;&#x767A;&#x764C;&#x306E;&#x767A;&#x751F;&#x7387;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x76F8;&#x540C;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#xFF08;HR&#xFF09;&#x306F;&#x3001;DNA&#x4FEE;&#x5FA9;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x8A3C;&#x62E0;&#x306F;&#x6709;&#x5BB3;&#x306A;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x518D;&#x7DE8;&#x6210;&#x306F;&#x3001;HR&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;HR&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x304C;&#x767A;&#x304C;&#x3093;&#x306E;&#x539F;&#x56E0;&#x3068;&#x306A;&#x308B;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x5F93;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; HR&#x306F;&#x3001;&#x767A;&#x30AC;&#x30F3;&#x6027;&#x7269;&#x8CEA;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x3066;&#x4E0A;&#x6607;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x4E0A;&#x6D41;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x304C;&#x4E71;&#x3055;&#x307E;&#x305F;&#x306F;HR&#x6A5F;&#x68B0;&#x81EA;&#x4F53;&#x306E;&#x6210;&#x5206;&#x304C;&#x5341;&#x5206;&#x306B;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x306B;HR&#x3082;&#x5897;&#x52A0;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3082;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x7AE0;&#x3067;&#x306F;&#x3001;HR&#x3068;&#x767A;&#x764C;&#x3068;&#x306E;&#x95A2;&#x9023;&#x6027;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3059;&#x308B;&#x7814;&#x7A76;&#x6210;&#x679C;&#x3092;&#x307E;&#x3068;&#x3081;&#x305F;&#x3082;&#x306E;&#x3067;&#x3059;&#x3002; HR&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3059;&#x308B;&#x5468;&#x6CE2;&#x6570;&#x306F;&#x3001;&#x304C;&#x3093;&#x7D30;&#x80DE;&#x3084;ATM&#x3001;TP53&#x3001;BRCA&#x3001;BLM&#x3001;WRN&#x3068;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;HR&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x764C;&#x3092;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x3084;&#x3059;&#x3044;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x306A;&#x30D2;&#x30C8;&#x306E;&#x75BE;&#x60A3;&#x3067;&#x767A;&#x898B;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; HR&#x3068;&#x767A;&#x764C;&#x306E;&#x6442;&#x52D5;&#x3092;&#x7D50;&#x3076;&#x3082;&#x3046;&#x4E00;&#x3064;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x306F;&#x3001;&#x9175;&#x6BCD;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;&#x7D30;&#x80DE;&#x3084;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;DNA&#x306E;&#x6B20;&#x5931;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3001;HR&#x306E;&#x983B;&#x5EA6;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306B;&#x767A;&#x304C;&#x3093;&#x6027;&#x7269;&#x8CEA;&#x3078;&#x306E;&#x66DD;&#x9732;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x7814;&#x7A76;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x767A;&#x304C;&#x3093;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x76F8;&#x540C;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;

&#xBAA8;&#xB4E0; &#xC885;&#xB958;&#xC758; DNA &#xBCC0;&#xACBD; &#xAC8C;&#xB188; &#xADDC;&#xBAA8;&#xB85C; &#xC790;&#xC8FC; &#xBC1C;&#xC554;&#xC758; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xACFC; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB3D9;&#xC885; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; (HR) DNA &#xC218;&#xB9AC;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xD1B5;&#xB85C;&#xAC00; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD574;&#xB85C;&#xC6B4; genomic &#xC7AC;&#xBC30;&#xC5F4; HR&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC99D;&#xAC70; &#xCD95;&#xC801; &#xC774;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xADF8; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC744; &#xB2E4;&#xC74C;&#xACFC; &#xAC19;&#xC774; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8; &#xBC1C;&#xC554;&#xC5D0; &#xC6D0;&#xC778;&#xC774; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC778;&#xC0AC;&#xB294; &#xBC1C;&#xC554; &#xBB3C;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0C1;&#xC2B9; &#xB41C;. &#xB610;&#xD55C; HR&#xC740; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558;&#xAC70;&#xB098; &#xC5C5;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xADDC;&#xC81C;&#xC758; &#xBD88;&#xC548;&#xC815; &#xD558;&#xAC70;&#xB098; &#xC790;&#xCCB4; HR &#xAE30;&#xACC4;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xAC00; &#xC644;&#xC804;&#xD788; &#xC791;&#xB3D9; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xAC10;&#xC18C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC7A5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC778;&#xC0AC;&#xC640; &#xBC1C;&#xC554; &#xC0AC;&#xC774; &#xC5F0;&#xACB0;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC8FC;&#xB294; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC694;&#xC57D; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. HR&#xC758; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218;&#xB97C; &#xC99D;&#xAC00; &#xB610;&#xB294; &#xAC10;&#xC18C; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC0F; &#xC554; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xAE30; &#xC26C;&#xC6B4; &#xC720;&#xC804; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC7A5;&#xC560; ATM, Tp53 BRCA BLM, &#xACBD;&#xACE0; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xB4F1; hr, &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD558;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xBCC0;&#xC774; &#xC758;&#xD574; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. HR &#xBC0F; &#xBC1C;&#xC554;&#xC5D0; &#xBB3C;&#xACB0;&#xC744; &#xC5F0;&#xACB0; &#xD558;&#xB294; &#xB610; &#xB2E4;&#xB978; &#xC99D;&#xAC70;&#xAC00; &#xD6A8; &#xBAA8;, &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC;, &#xB610;&#xB294; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0AD;&#xC81C;&#xB97C; DNA&#xC5D0; &#xB530;&#xB978; &#xACB0;&#xACFC; &#xBC1C;&#xC554; &#xBB3C;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C; HR&#xC758; &#xBE48;&#xB3C4;&#xAC00; &#xC99D;&#xAC00; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xB294; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC81C;&#xACF5; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBC1C;&#xC554;&#xC5D0; &#xB3D9;&#xC885; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569;&#xC758; &#xCC38;&#xC5EC;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Alteraciones del ADN de cada tipo est&#xE1;n asociados con la incidencia de la carcinog&#xE9;nesis, a menudo en la escala gen&#xF3;mica. A pesar de la recombinaci&#xF3;n hom&#xF3;loga (HR) es una importante v&#xED;a de reparaci&#xF3;n del ADN, se est&#xE1; acumulando evidencia de que los reordenamientos gen&#xF3;micos perjudiciales pueden resultar de recursos humanos. De ello se deduce que los acontecimientos de recursos humanos pueden desempe&#xF1;ar un papel causal en la carcinog&#xE9;nesis. HR se eleva en respuesta a los agentes carcin&#xF3;genos. De Derechos Humanos tambi&#xE9;n puede ser aumentado o disminuido, cuando su regulaci&#xF3;n aguas arriba est&#xE1; perturbado o componentes de la maquinaria de recursos humanos en s&#xED; no son completamente funcionales. Este cap&#xED;tulo resume los resultados de las investigaciones que demuestran una asociaci&#xF3;n entre AR y la carcinog&#xE9;nesis. Aumento o disminuci&#xF3;n de las frecuencias de los recursos humanos se han encontrado en las c&#xE9;lulas cancerosas y propensas al c&#xE1;ncer trastornos hereditarios humanos caracterizados por mutaciones en los genes que juegan un papel importante en recursos humanos, tales como cajeros autom&#xE1;ticos, TP53, BRCA, BLM, y los genes WRN. Otra evidencia que vincula a las perturbaciones en la FC y la carcinog&#xE9;nesis es proporcionada por los estudios que demuestran que la exposici&#xF3;n a agentes cancer&#xED;genos en los resultados de un aumento en la frecuencia de los recursos humanos resulta en supresiones de ADN en la levadura, las c&#xE9;lulas humanas, o los ratones.

La participaci&#xF3;n de recombinaci&#xF3;n hom&#xF3;loga en la carcinog&#xE9;nesis

Genomweiten RNA-Interferenz (RNAi)-Screening erm&ouml;glicht die Untersuchung der Rolle der einzelne Gene in einem Prozess der Wahl. Die meisten RNAi-Bildschirme identifizieren eine gro&szlig;e Anzahl von Genen mit einem kontinuierlichen Gradienten in der bewerteten Ph&auml;notyp. Screener m&uuml;ssen entscheiden, ob Gene mit der robustesten Ph&auml;notyp oder vollst&auml;ndige Farbverlauf der Gene, die eine Wirkung hervorrufen untersucht und wie Kandidatengene identifiziert. Die Autoren haben RNAi in Drosophila Zellen verwendet, um die Lebensf&auml;higkeit in einem 384-Well-Plattenformat zu untersuchen und vergleichen Sie 2 Bildschirme, unbehandelten Kontrolle und Behandlung. Vergleichen sie mehrere Methoden, Normalisierung, die verschiedene Funktionen innerhalb der Daten, einschlie&szlig;lich Quantil-Normalisierung, Hintergrund-Subtraktion, Skalierung, cellHTS2 nutzen (Boutros Et Al. 2006), und interquartile Range-Messung. In Anbetracht der falsch-positiven-Potenzial, das durch RNAi-Technologie entsteht, wurde eine robuste Validierungsmethode zum Zwecke der Gen-Auswahl f&uuml;r zuk&uuml;nftige Untersuchungen entwickelt. In einer retrospektiven Analyse beschreiben die Autoren die Verwendung von Validierungsdaten jede Normalisierung-Methode zu bewerten. Obwohl keine Methode idealerweise eine Kombination aus 2 Methoden gearbeitet, erfasst Hintergrund Subtraktion Quantil Normalisierung und cellHTS2, bei unterschiedlichen Schwellenwerten, folgten die meisten zuverl&auml;ssigen und vielf&auml;ltigen Kandidatengene. Schwellenwerte werden vorgeschlagen, je nachdem, ob ein paar Kandidatengene gew&uuml;nscht werden oder eine umfassendere Analyse der Systemebene angestrebt wird. Die Normalisierung Ans&auml;tze und experimentelles Design von Experimenten zur Validierung ausf&uuml;hren d&uuml;rften gelten f&uuml;r diese High-Throughput-Screening-Systeme zur Identifizierung von Genen f&uuml;r die Systemebene Analyse versuchen.

Eine Analyse der Normalisierung Methoden f&uuml;r Drosophila RNAi genomische Bildschirme und Entwicklung einer robusten Validierung-Regelung.

&#x5168;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4; RNA &#x5E72;&#x6270; (RNAi) &#x7B5B;&#x67E5;&#x7684;&#x9009;&#x62E9;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x5141;&#x8BB8;&#x7684;&#x5355;&#x4E2A;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x8C03;&#x67E5;&#x3002;&#x5927;&#x591A;&#x6570; RNAi &#x5C4F;&#x5E55;&#x5E26;&#x6709;&#x8FDE;&#x7EED;&#x6E10;&#x53D8;&#x5206;&#x644A;&#x8868;&#x578B;&#x786E;&#x5B9A;&#x5927;&#x91CF;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x3002;&#x5B89;&#x68C0;&#x5FC5;&#x987B;&#x51B3;&#x5B9A;&#x662F;&#x5426;&#x8981;&#x68C0;&#x67E5;&#x4E0E;&#x6700;&#x5F3A;&#x5065;&#x7684;&#x8868;&#x578B;&#x6216;&#x5145;&#x5206;&#x68AF;&#x5EA6;&#x9020;&#x6210;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x5982;&#x4F55;&#x786E;&#x5B9A;&#x5019;&#x9009;&#x57FA;&#x56E0;&#x3002;&#x4F5C;&#x8005;&#x6709;&#x7528;&#x4E8E; RNAi &#x5728;&#x679C;&#x8747;&#x7EC6;&#x80DE;&#x68C0;&#x67E5;&#x5728; 384 &#x4E95;&#x677F;&#x683C;&#x5F0F;&#x7684;&#x53EF;&#x884C;&#x6027;&#x548C;&#x6BD4;&#x8F83; 2 &#x5C4F;&#x5E55;&#x3001; &#x672A;&#x7ECF;&#x5904;&#x7406;&#x7684;&#x63A7;&#x5236;&#x548C;&#x6CBB;&#x7597;&#x3002;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x6BD4;&#x8F83;&#x591A;&#x7684;&#x5F52;&#x4E00;&#x5316;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x5229;&#x7528;&#x4E0D;&#x540C;&#x529F;&#x80FD;&#x5185;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x5206;&#x4F4D;&#x6570;&#x6B63;&#x5E38;&#x5316;&#x3001; &#x80CC;&#x666F;&#x51CF;&#x6CD5;&#x3001; &#x7F29;&#x653E;&#x3001; cellHTS2 (&#x5E03;&#x7279;&#x7F57;&#x65AF;&#x7B49;&#x4EBA;&#xFF0C;2006 &#x5E74;&#xFF09;&#xFF0C;&#x548C;&#x5DEE;&#x8303;&#x56F4;&#x6D4B;&#x91CF;&#x3002;&#x8003;&#x8651;&#x5230; RNAi &#x6280;&#x672F;&#x5F15;&#x8D77;&#x7684;&#x5047;&#x9633;&#x6027;&#x6F5C;&#x529B;&#xFF0C;&#x76EE;&#x7684;&#x662F;&#x4E3A;&#x4ECA;&#x540E;&#x7684;&#x8C03;&#x67E5;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x9009;&#x62E9;&#x76EE;&#x7684;&#x662F;&#x9C81;&#x68D2;&#x7684;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x5728;&#x56DE;&#x987E;&#x6027;&#x5206;&#x6790;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x8005;&#x63CF;&#x8FF0;&#x4E86;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x6570;&#x636E;&#x6765;&#x8BC4;&#x4F30;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x5F52;&#x4E00;&#x5316;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x4F7F;&#x7528;&#x3002;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x6CA1;&#x6709;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x7406;&#x60F3;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x5DE5;&#x4F5C; 2 &#x65B9;&#x6CD5;&#x7ED3;&#x5408;&#x8D77;&#x6765;&#xFF0C;&#x5176;&#x6B21;&#x662F;&#x5206;&#x4F4D;&#x6570;&#x6B63;&#x5E38;&#x5316;&#x548C; cellHTS2&#xFF0C;&#x5728;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x9608;&#x503C;&#xFF0C;&#x80CC;&#x666F;&#x51CF;&#x6CD5;&#x6355;&#x83B7;&#x6700;&#x53EF;&#x9760;&#x3001; &#x6700;&#x591A;&#x6837;&#x7684;&#x5019;&#x9009;&#x57FA;&#x56E0;&#x3002;&#x9608;&#x503C;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x6839;&#x636E;&#x662F;&#x5426;&#x9700;&#x8981;&#x51E0;&#x4E2A;&#x5019;&#x9009;&#x57FA;&#x56E0;&#x6216;&#x5BFB;&#x6C42;&#x66F4;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7EA7;&#x5206;&#x6790;&#x7684;&#x3002;&#x53EF;&#x80FD;&#x9002;&#x7528;&#x4E8E;&#x90A3;&#x4E9B;&#x8BD5;&#x56FE;&#x786E;&#x5B9A;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7EA7;&#x5206;&#x6790;&#x7684;&#x9AD8;&#x901A;&#x91CF;&#x7B5B;&#x9009;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x89C4;&#x8303;&#x5316;&#x65B9;&#x6CD5;&#x548C;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x8FDB;&#x884C;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x3002;

&#x679C;&#x8747; RNAi &#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x5C4F;&#x5E55;&#x548C;&#x9C81;&#x68D2;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x8BA1;&#x5212;&#x53D1;&#x5C55;&#x89C4;&#x8303;&#x5316;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x3002;

Genome-wide RNA interference (RNAi) screening allows investigation of the role of individual genes in a process of choice. Most RNAi screens identify a large number of genes with a continuous gradient in the assessed phenotype. Screeners must decide whether to examine genes with the most robust phenotype or the full gradient of genes that cause an effect and how to identify candidate genes. The authors have used RNAi in Drosophila cells to examine viability in a 384-well plate format and compare 2 screens, untreated control and treatment. They compare multiple normalization methods, which take advantage of different features within the data, including quantile normalization, background subtraction, scaling, cellHTS2 (Boutros et al. 2006), and interquartile range measurement. Considering the false-positive potential that arises from RNAi technology, a robust validation method was designed for the purpose of gene selection for future investigations. In a retrospective analysis, the authors describe the use of validation data to evaluate each normalization method. Although no method worked ideally, a combination of 2 methods, background subtraction followed by quantile normalization and cellHTS2, at different thresholds, captures the most dependable and diverse candidate genes. Thresholds are suggested depending on whether a few candidate genes are desired or a more extensive systems-level analysis is sought. The normalization approaches and experimental design to perform validation experiments are likely to apply to those high-throughput screening systems attempting to identify genes for systems-level analysis.

An analysis of normalization methods for Drosophila RNAi genomic screens and development of a robust validation scheme.

L&#x26;#39;&#xE9;chelle du g&#xE9;nome ARN interf&#xE9;rence (ARNi) de d&#xE9;pistage permet d&#x26;#39;&#xE9;tudier le r&#xF4;le des g&#xE8;nes individuels dans un processus de choix. La plupart des &#xE9;crans d&#x26;#39;ARNi identifier un grand nombre de g&#xE8;nes avec un gradient continu dans le ph&#xE9;notype &#xE9;valu&#xE9;. Crible doit d&#xE9;cider si d&#x26;#39;examiner des g&#xE8;nes avec le ph&#xE9;notype le plus robuste ou le gradient complet de g&#xE8;nes qui causent un effet et la fa&#xE7;on d&#x26;#39;identifier des g&#xE8;nes candidats. Les auteurs ont utilis&#xE9; l&#x26;#39;ARNi dans les cellules de drosophile pour examiner la viabilit&#xE9; dans un format de plaque de 384 puits et de comparer les 2 &#xE9;crans, le contr&#xF4;le non trait&#xE9; et le traitement. Ils comparent plusieurs m&#xE9;thodes de normalisation, qui tirent parti des caract&#xE9;ristiques diff&#xE9;rentes au sein des donn&#xE9;es, y compris la normalisation quantile, de soustraction de fond, mise &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;chelle, cellHTS2 (Boutros et al. 2006), et la mesure intervalle interquartile. Compte tenu du potentiel de faux-positifs qui d&#xE9;coule de l&#x26;#39;ARNi de la technologie, une m&#xE9;thode de validation robuste a &#xE9;t&#xE9; con&#xE7;u dans le but de la s&#xE9;lection g&#xE9;n&#xE9;tique pour des recherches futures. Dans une analyse r&#xE9;trospective, les auteurs d&#xE9;crivent l&#x26;#39;utilisation des donn&#xE9;es de validation pour &#xE9;valuer chaque m&#xE9;thode de normalisation. Bien qu&#x26;#39;aucune m&#xE9;thode a fonctionn&#xE9; id&#xE9;alement, une combinaison des 2 m&#xE9;thodes, de soustraction de fond suivie par la normalisation quantile et cellHTS2, &#xE0; des seuils diff&#xE9;rents, capture les g&#xE8;nes candidats les plus fiables et diversifi&#xE9;s. Les seuils sont propos&#xE9; en fonction de si peu de g&#xE8;nes candidats sont peu d&#xE9;sir&#xE9; ou d&#x26;#39;un plus vaste au niveau des syst&#xE8;mes d&#x26;#39;analyse est demand&#xE9;e. Les approches de normalisation et de la conception exp&#xE9;rimentale pour effectuer des exp&#xE9;riences de validation sont susceptibles de s&#x26;#39;appliquer &#xE0; ces syst&#xE8;mes de criblage &#xE0; haut d&#xE9;bit qui tentent d&#x26;#39;identifier les g&#xE8;nes pour les syst&#xE8;mes de niveau d&#x26;#39;analyse.

Une analyse des m&#xE9;thodes de normalisation pour des &#xE9;crans de Drosophila g&#xE9;nomiques RNAi et d&#xE9;veloppement d&#x26;#39;un syst&#xE8;me de validation robuste

Lo screening di genome-wide RNA interference (RNAi) permette di indagine del ruolo dei singoli geni in un processo di scelta. La maggior parte dei schermi RNAi identificano un gran numero di geni con una pendenza continua nel fenotipo valutato. Vagli devono decidere se esaminare i geni con il fenotipo pi&ugrave; robusto o il gradiente pieno di geni che causano un effetto e come identificare geni candidati. Gli autori hanno utilizzato RNAi in cellule di Drosophila per esaminare la fattibilit&agrave; in un formato 384 pozzetti piastra e confrontare 2 schermi, controllo non trattato e trattamento. Si confrontano pi&ugrave; metodi di normalizzazione, che approfitta delle caratteristiche differenti all&#39;interno dei dati, tra cui la normalizzazione quantile, sottrazione di sfondo, ridimensionamento, cellHTS2 (Boutros et al. 2006) e la misura di gamma interquartile. Considerando il potenziale di falsi positivi che nasce dalla tecnologia di RNAi, un metodo di convalida robusta &egrave; stato progettato ai fini della selezione genetica per indagini future. In un&#39;analisi retrospettiva, gli autori descrivono l&#39;utilizzo dei dati di convalida per valutare ogni metodo di normalizzazione. Anche se nessun metodo ha funzionato idealmente, una combinazione di 2 metodi, sottrazione sfondo seguita dalla normalizzazione quantile e cellHTS2, presso diverse soglie, cattura i geni candidati pi&ugrave; affidabile e diversificata. Soglie sono suggerite a seconda se sono voluti pochi geni candidati o un&#39;analisi di sistemi di livello pi&ugrave; ampia &egrave; chiesta. Gli approcci di normalizzazione e disegno sperimentale per effettuare esperimenti di convalida sono probabili da applicare a tali sistemi di high-throughput screening tentando di identificare i geni per l&#39;analisi di sistemi di livello.

Un&#39;analisi dei metodi di normalizzazione di genomici schermi RNAi della drosofila e lo sviluppo di uno schema di convalida robusto.

&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x30EF;&#x30A4;&#x30C9;&#x306A;RNA&#x5E72;&#x6E09;&#xFF08;RNAi&#xFF09;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x3001;&#x9078;&#x629E;&#x306E;&#x904E;&#x7A0B;&#x3067;&#x3001;&#x500B;&#x3005;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306E;RNAi&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x3001;&#x8A55;&#x4FA1;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x9023;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x52FE;&#x914D;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x591A;&#x6570;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3075;&#x308B;&#x3044;&#x306F;&#x3001;&#x6700;&#x3082;&#x5805;&#x7262;&#x306A;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3084;&#x52B9;&#x679C;&#x3001;&#x3069;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x5019;&#x88DC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x5B8C;&#x5168;&#x306A;&#x52FE;&#x914D;&#x3068;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8457;&#x8005;&#x3089;&#x306F;&#x3001;384&#x30A6;&#x30A7;&#x30EB;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30DE;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x3001;2&#x753B;&#x9762;&#x3001;&#x672A;&#x51E6;&#x7406;&#x306E;&#x5BFE;&#x7167;&#x3068;&#x6CBB;&#x7642;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;RNAi&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x3001;&#x5909;&#x4F4D;&#x306E;&#x6B63;&#x898F;&#x5316;&#x3001;&#x30D0;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B0;&#x30E9;&#x30A6;&#x30F3;&#x30C9;&#x6E1B;&#x7B97;&#x3001;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3001;cellHTS2&#xFF08;&#x30D6;&#x30C8;&#x30ED;&#x30B9;&#x3089;2006&#xFF09;&#x3001;&#x56DB;&#x5206;&#x4F4D;&#x7BC4;&#x56F2;&#x306E;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3092;&#x542B;&#x3081;&#x3066;&#x3001;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x5185;&#x306E;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x6D3B;&#x7528;&#x3057;&#x3001;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x6B63;&#x898F;&#x5316;&#x65B9;&#x5F0F;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; RNAi&#x6280;&#x8853;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;&#x507D;&#x967D;&#x6027;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x8003;&#x616E;&#x3057;&#x3001;&#x5805;&#x7262;&#x306A;&#x691C;&#x8A3C;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306F;&#x3001;&#x5C06;&#x6765;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x9078;&#x629E;&#x306E;&#x76EE;&#x7684;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x8A2D;&#x8A08;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30EC;&#x30C8;&#x30ED;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x5206;&#x6790;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x8457;&#x8005;&#x3089;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x306E;&#x6B63;&#x898F;&#x5316;&#x6CD5;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x691C;&#x8A3C;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x306A;&#x3044;&#x65B9;&#x6CD5;&#x304C;&#x7406;&#x60F3;&#x7684;&#x306B;&#x50CD;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x304C;&#x3001;2&#x3064;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x80CC;&#x666F;&#x5DEE;&#x5206;&#x6CD5;&#x306F;&#x3001;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x3057;&#x304D;&#x3044;&#x5024;&#x3067;&#x3001;&#x5909;&#x4F4D;&#x306E;&#x6B63;&#x898F;&#x5316;&#x3068;cellHTS2&#x7D9A;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x6700;&#x3082;&#x4FE1;&#x983C;&#x6027;&#x3068;&#x591A;&#x69D8;&#x6027;&#x306E;&#x5019;&#x88DC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x53D6;&#x5F97;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304D;&#x3044;&#x5024;&#x306F;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x5019;&#x88DC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x304C;&#x671B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x4EE5;&#x4E0A;&#x306E;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x89E3;&#x6790;&#x304C;&#x6C42;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x306B;&#x5FDC;&#x3058;&#x3066;&#x63D0;&#x6848;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6B63;&#x898F;&#x5316;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3068;&#x691C;&#x8A3C;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3092;&#x5B9F;&#x884C;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x30C7;&#x30B6;&#x30A4;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x89E3;&#x6790;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x3088;&#x3046;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30CF;&#x30A4;&#x30B9;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x30C3;&#x30C8;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306B;&#x9069;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;&#x306E;RNAi&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x753B;&#x9762;&#x3068;&#x5805;&#x7262;&#x306A;&#x691C;&#x8A3C;&#x624B;&#x6CD5;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6B63;&#x898F;&#x5316;&#x6CD5;&#x306E;&#x691C;&#x8A0E;

&#xAC8C;&#xB188; &#xC804;&#xCCB4; RNA &#xAC04;&#xC12D; (RNAi) &#xC2EC;&#xC0AC; &#xC120;&#xD0DD;&#xC758; &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC870;&#xC0AC;&#xB97C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; RNAi &#xD654;&#xBA74; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD615; &#xC5F0;&#xC18D; &#xADF8;&#xB77C;&#xB370;&#xC774;&#xC158;&#xC73C;&#xB85C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xB9CE;&#xC740; &#xC218;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC0C0; &#xACE0;&#xC694; &#xAC00;&#xC7A5; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xD45C;&#xD604; &#xD615; &#xB610;&#xB294; &#xC804;&#xCCB4; &#xADF8;&#xB77C;&#xB370;&#xC774;&#xC158; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC77C;&#xC73C;&#xD0A4;&#xB294; &#xC6D0;&#xC778;&#xC774; &#xB418;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xAC80;&#xC0AC; &#xC5EC;&#xBD80; &#xBC0F; &#xD6C4;&#xBCF4; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xACB0;&#xC815; &#xD574;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC800;&#xC790; 384-&#xC798; &#xD50C;&#xB808;&#xC774;&#xD2B8; &#xD615;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0DD;&#xC874; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD558; &#xACE0; 2 &#xC2A4;&#xD06C;&#xB9B0;, &#xCE58;&#xB8CC; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294; &#xC81C;&#xC5B4; &#xBC0F; &#xCE58;&#xB8CC; &#xBE44;&#xAD50; &#xCD08;&#xD30C;&#xB9AC; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; Rnai&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xB17C;&#xC9D1; &#xC815;&#xADDC;&#xD654;, &#xBC30;&#xACBD; &#xBE7C;&#xAE30;, &#xC2A4;&#xCF00;&#xC77C;&#xB9C1;, Cellhts2&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xD65C;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC1C;&#xC758; &#xC815;&#xADDC;&#xD654; &#xBC29;&#xBC95; &#xBE44;&#xAD50; (Boutros &#xC678;. 2006), &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; interquartile &#xBC94;&#xC704; &#xCE21;&#xC815;. RNAi &#xAE30;&#xC220;&#xC744;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xAC70;&#xC9D3; &#xAE0D;&#xC815; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC744; &#xACE0;&#xB824; &#xD558;&#xBA74; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC720;&#xD6A8;&#xC131; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB294; &#xD5A5;&#xD6C4; &#xC870;&#xC0AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC120;&#xD0DD;&#xC758; &#xBAA9;&#xC801;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xC124;&#xACC4; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD68C;&#xACE0;&#xC804; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC800;&#xC790; &#xAC01; &#xC815;&#xADDC;&#xD654; &#xBC29;&#xBC95; &#xD3C9;&#xAC00; &#xC720;&#xD6A8;&#xC131; &#xAC80;&#xC0AC; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBE44;&#xB85D; &#xC544;&#xBB34; &#xBC29;&#xBC95;&#xC774; &#xD6A8;&#xACFC;&#xAC00; &#xC774;&#xC0C1;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, 2 &#xAC1C;&#xC758; &#xBC29;&#xBC95;&#xC758; &#xC870;&#xD569;&#xC744;, &#xBC30;&#xACBD; &#xBE7C;&#xAE30; &#xB17C;&#xC9D1; &#xC815;&#xADDC;&#xD654; &#xBC0F; cellHTS2, &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xC784;&#xACC4;&#xAC12;&#xC5D0; &#xC774;&#xC5B4;&#xC11C; &#xAC00;&#xC7A5; &#xC2E0;&#xB8B0;&#xD560;&#xB9CC; &#xD558; &#xACE0; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xD6C4;&#xBCF4; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xCEA1;&#xCC98;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBA87; &#xD6C4;&#xBCF4; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD544;&#xC694; &#xC5EC;&#xBD80;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xAD8C;&#xC7A5; &#xB418;&#xB294; &#xC784;&#xACC4;&#xAC12; &#xB610;&#xB294; &#xB354; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xC218;&#xC900; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xBAA8;&#xC0C9;. &#xC815;&#xADDC;&#xD654; &#xBC29;&#xBC95; &#xBC0F; &#xAC80;&#xC99D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC744; &#xC218;&#xD589; &#xD558;&#xB294; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC124;&#xACC4; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xC218;&#xC900; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xD655;&#xC778; &#xD558;&#xB824;&#xACE0; &#xADF8; &#xB192;&#xC740; &#xCC98;&#xB9AC;&#xB7C9; &#xAC80;&#xC5F4; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xC801;&#xC6A9;&#xD560; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xC788;&#xB2E4;.

&#xCD08;&#xD30C;&#xB9AC; RNAi &#xAC8C;&#xB188; &#xD654;&#xBA74;&#xACFC; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC720;&#xD6A8;&#xC131; &#xAC80;&#xC0AC; &#xCCB4;&#xACC4;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC815;&#xADDC;&#xD654; &#xBC29;&#xBC95;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D;.

Todo el genoma ARN de interferencia (RNAi) de detecci&#xF3;n permite la investigaci&#xF3;n de la funci&#xF3;n de genes individuales en un proceso de elecci&#xF3;n. La mayor&#xED;a de las pantallas de RNAi identificar un gran n&#xFA;mero de genes con un gradiente continuo en el fenotipo evaluado. Los supervisores deben decidir si para examinar los genes con el fenotipo m&#xE1;s s&#xF3;lido o el gradiente completo de genes que causan un efecto y la forma de identificar los genes candidatos. Los autores han utilizado ARNi en c&#xE9;lulas Drosophila para examinar la viabilidad en un formato de placa de 384 pocillos y comparar 2 pantallas, el control sin tratamiento y tratamiento. Ellos comparan varios m&#xE9;todos de normalizaci&#xF3;n, que se aprovechan de diferentes caracter&#xED;sticas dentro de los datos, incluyendo cuantil normalizaci&#xF3;n, la sustracci&#xF3;n de fondo, escalada, cellHTS2 (Boutros et al. 2006), y la medici&#xF3;n rango intercuartil. Teniendo en cuenta el potencial de falsos positivos que surge de la tecnolog&#xED;a RNAi, un m&#xE9;todo de validaci&#xF3;n robusto fue dise&#xF1;ado con el prop&#xF3;sito de la selecci&#xF3;n de genes para futuras investigaciones. En un an&#xE1;lisis retrospectivo, los autores describen el uso de los datos de validaci&#xF3;n para evaluar cada m&#xE9;todo de normalizaci&#xF3;n. Aunque ning&#xFA;n m&#xE9;todo de trabajo ideal, una combinaci&#xF3;n de 2 m&#xE9;todos, la sustracci&#xF3;n de fondo seguido por cuantil normalizaci&#xF3;n y cellHTS2, en los umbrales diferentes, captura los genes candidatos m&#xE1;s confiables y diversa. Los umbrales se sugiere en funci&#xF3;n de si unos pocos genes candidatos se desean o una m&#xE1;s amplia a nivel de sistemas de an&#xE1;lisis se busca. Los enfoques de normalizaci&#xF3;n y el dise&#xF1;o experimental para llevar a cabo experimentos de validaci&#xF3;n es probable que se aplican a los sistemas de detecci&#xF3;n de alto rendimiento que tratan de identificar los genes para el an&#xE1;lisis a nivel de sistemas.

Un an&#xE1;lisis de los m&#xE9;todos de normalizaci&#xF3;n para las pantallas de Drosophila Gen&#xF3;mica RNAi y desarrollo de un esquema de validaci&#xF3;n robusto

&#x635F;&#x5BB3;&#x542F;&#x52A8;&#x65E8;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x5B58;&#x5728;&#x9002;&#x5F53;&#x7684;&#x65F6;&#x5019;&#x591A;&#x6548;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x6807;&#x8BC6;&#x57FA;&#x56E0;&#x635F;&#x5BB3;&#x751F;&#x5B58;&#x6240;&#x9700;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x57FA;&#x4E8E;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684; RNAi &#x5C4F;&#x5E55;&#x5BF9;&#x679C;&#x8747;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x548C;&#x70F7;&#x5242;&#x7532;&#x57FA; methanesulphonate (MMS)&#x3002;&#x635F;&#x5BB3;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x6267;&#x884C;&#x5176;&#x4ED6;&#x6A21;&#x578B;&#x751F;&#x7269;&#x62A5;&#x544A;&#x4E2D;&#x53EF;&#x80FD;&#x6D89;&#x53CA;&#x591A;&#x6548;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4EE5;&#x5916;&#x7684;&#x4E2D;&#x592E; DNA &#x4FEE;&#x590D;&#x7EC4;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x4F46;&#x8702;&#x7A9D;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x7684;&#x76F4;&#x89C2;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7EA7;&#x522B;&#x89C6;&#x56FE;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x635F;&#x5BB3;&#x751F;&#x5B58;&#xFF0C;&#x5B83;&#x4EEC;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x5173;&#x7CFB;&#x548C;&#x4E0A;&#x4E0B;&#x6587;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x4E00;&#x76F4;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x6BD4;&#x8F83;&#x4E0D;&#x540C;&#x6A21;&#x5F0F;&#x751F;&#x7269;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#xFF0C;&#x9274;&#x5B9A;&#x7684;&#x517B;&#x62A4;&#x548C;&#x5927;&#x6982;&#x662F;&#x751F;&#x5B58;&#x7684;&#x6838;&#x5FC3;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x5E94;&#x8BE5;&#x662F;&#x5373;&#x5C06;&#x4E3E;&#x884C;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A; 307 &#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x8868;&#x793A;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3001; &#x65B0;&#x9648;&#x4EE3;&#x8C22;&#x3001; 13 &#x6216;&#x9176;&#x901A;&#x8DEF;&#xFF0C;&#x5F71;&#x54CD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5B58;&#x6D3B;&#x7684; MMS &#x635F;&#x4F24;&#x3002;&#x6B63;&#x5982;&#x9884;&#x671F;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8DEF;&#x5F84;&#x7684;&#x591A;&#x6570;&#x6D89;&#x53CA; DNA &#x4FEE;&#x590D; &#xFF1B;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x8FD8;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E86;&#x51E0;&#x4E2A;&#x9014;&#x5F84;&#x6709;&#x66F4;&#x591A;&#x6837;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x529F;&#x80FD;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC; TOR &#x9014;&#x5F84;&#x3001; &#x8F6C;&#x5F55;&#x3001; &#x7FFB;&#x8BD1;&#x3001; &#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x3001; &#x8C37;&#x80F1;&#x7518;&#x80BD;&#x5408;&#x6210;&#x3001; &#x4E09;&#x78F7;&#x9178;&#x817A;&#x82F7;&#x5408;&#x6210; Notch &#x4FE1;&#x53F7;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x662F;&#x540C;&#x6837;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#x5728;&#x635F;&#x5BB3;&#x751F;&#x5B58;&#x3002;&#x4ECE;&#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x5C4F;&#x5E55;&#x6570;&#x636E;&#x7684;&#x6BD4;&#x8F83;&#x8868;&#x660E;&#x4E2A;&#x4F53;&#x57FA;&#x56E0;&#x7269;&#x79CD;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4FDD;&#x62A4;&#x9014;&#x5F84;&#x4E4B;&#x95F4;&#x6CA1;&#x6709;&#x91CD;&#x53E0;&#x6D53;&#x7F29;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x6F14;&#x793A;&#x529F;&#x80FD;&#x4FDD;&#x62A4;&#x7684;&#x901A;&#x8DEF;&#xFF0C;&#x4E94;&#x5171;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x5728;&#x679C;&#x8747;&#x548C;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x4E0E;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x54CD;&#x5E94;&#x4E2D;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7269;&#x79CD;&#x7684;&#x70F7;&#x57FA;&#x5316;&#x635F;&#x5BB3;&#x7684;&#x901A;&#x8DEF;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x86CB;&#x767D; interactome&#xFF0C;&#x76F8;&#x5F53;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x7684;&#x8FDE;&#x901A;&#x6027;&#x4E0E;&#x4F1A;&#x8005;&#x4E4B;&#x95F4;&#x679C;&#x8747; MMS &#x751F;&#x5B58;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x63D0;&#x51FA;&#x66F4;&#x9AD8;&#x7684;&#x987A;&#x5E8F;&#x5173;&#x7CFB;&#x3002;&#x6B64;&#x8FDE;&#x63A5;&#x6781;&#x5927;&#x5730;&#x6539;&#x5584;&#x4E86;&#x5F15;&#x5165;&#x7F51;&#x7EDC;&#x5185;&#x7684; 13 &#x786E;&#x5B9A;&#x901A;&#x8DEF;&#x7684;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x3002;&#x4ECE;&#x8D28;&#x7684;&#x65B9;&#x9762;&#x5C06;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5206;&#x7EC4;&#x5230;&quot;&#x8DEF;&#x5F84;&#x8282;&#x70B9;&quot;&#x6539;&#x8FDB; interactome &#x7EC4;&#x7EC7;&#xFF0C;&#x63ED;&#x793A;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x7EC4;&#x7EC7;&quot;MMS &#x751F;&#x5B58;&#x7F51;&#x7EDC;&quot;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F97;&#x51FA;&#x7684;&#x7ED3;&#x8BBA;&#x9274;&#x5B9A;&#x7684;&#x9014;&#x5F84;&#x53EF;&#x4EE5;&#x65B9;&#x4FBF;&#x6BD4;&#x8F83;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x5206;&#x6790;&#xFF0C;&#x76F4;&#x63A5;&#x57FA;&#x56E0;/orthologue &#x6BD4;&#x8F83;&#x5931;&#x8D25;&#x65F6;&#x3002;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x4E0A;&#x76F4;&#x89C2;&#x3001; &#x9AD8;&#x5EA6;&#x4E92;&#x8FDE;&#x7684; MMS &#x751F;&#x5B58;&#x7F51;&#x7EDC;&#x6848;&#x53D1;&#x540E;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684; interactome &#x5206;&#x6790;&#x7EB3;&#x5165;&#x6570;&#x636E;&#x901A;&#x8DEF;&#x3002;

&#x63ED;&#x793A;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7684; RNAi &#x5C4F;&#x5E55;&#x7684;&#x5B88;&#x6052;&#x7684;&#x635F;&#x5BB3;&#x751F;&#x5B58;&#x9014;&#x5F84;&#x7684;&#x4E00;&#x79CD;&#x7F51;&#x7EDC;&#x3002;

Damage initiates a pleiotropic cellular response aimed at cellular survival when appropriate. To identify genes required for damage survival, we used a cell-based RNAi screen against the Drosophila genome and the alkylating agent methyl methanesulphonate (MMS). Similar studies performed in other model organisms report that damage response may involve pleiotropic cellular processes other than the central DNA repair components, yet an intuitive systems level view of the cellular components required for damage survival, their interrelationship, and contextual importance has been lacking. Further, by comparing data from different model organisms, identification of conserved and presumably core survival components should be forthcoming. We identified 307 genes, representing 13 signaling, metabolic, or enzymatic pathways, affecting cellular survival of MMS-induced damage. As expected, the majority of these pathways are involved in DNA repair; however, several pathways with more diverse biological functions were also identified, including the TOR pathway, transcription, translation, proteasome, glutathione synthesis, ATP synthesis, and Notch signaling, and these were equally important in damage survival. Comparison with genomic screen data from Saccharomyces cerevisiae revealed no overlap enrichment of individual genes between the species, but a conservation of the pathways. To demonstrate the functional conservation of pathways, five were tested in Drosophila and mouse cells, with each pathway responding to alkylation damage in both species. Using the protein interactome, a significant level of connectivity was observed between Drosophila MMS survival proteins, suggesting a higher order relationship. This connectivity was dramatically improved by incorporating the components of the 13 identified pathways within the network. Grouping proteins into "pathway nodes" qualitatively improved the interactome organization, revealing a highly organized "MMS survival network." We conclude that identification of pathways can facilitate comparative biology analysis when direct gene/orthologue comparisons fail. A biologically intuitive, highly interconnected MMS survival network was revealed after we incorporated pathway data in our interactome analysis.

A network of conserved damage survival pathways revealed by a genomic RNAi screen.

Dommages initie une r&#xE9;ponse cellulaire pl&#xE9;iotropique visant &#xE0; la survie cellulaire, le cas &#xE9;ch&#xE9;ant. Pour identifier les g&#xE8;nes n&#xE9;cessaires &#xE0; la survie des dommages, nous avons utilis&#xE9; un &#xE9;cran &#xE0; base de cellules ARNi contre la g&#xE9;nome de la Drosophile et le m&#xE9;thyl m&#xE9;thanesulfonate agent alkylant (MMS). Des &#xE9;tudes similaires r&#xE9;alis&#xE9;es dans d&#x26;#39;autres organismes mod&#xE8;les indiquent que la r&#xE9;ponse aux dommages peuvent impliquer pl&#xE9;iotropiques processus cellulaires autres que les &#xE9;l&#xE9;ments centraux r&#xE9;paration de l&#x26;#39;ADN, et pourtant une vue intuitive niveau des syst&#xE8;mes des composants cellulaires n&#xE9;cessaires &#xE0; la survie des dommages, de leur interaction, et l&#x26;#39;importance contextuelle a fait d&#xE9;faut. En outre, en comparant les donn&#xE9;es de diff&#xE9;rents organismes mod&#xE8;les, l&#x26;#39;identification des composants de survie conserv&#xE9;s et sans doute de base devrait &#xEA;tre &#xE0; venir. Nous avons identifi&#xE9; 307 g&#xE8;nes, soit 13 de signalisation, m&#xE9;taboliques, ou des voies enzymatiques, qui affecte la survie cellulaire de dommages induits par MMS. Comme pr&#xE9;vu, la majorit&#xE9; de ces voies sont impliqu&#xE9;es dans la r&#xE9;paration d&#x26;#39;ADN, mais plusieurs voies avec plus de diverses fonctions biologiques ont &#xE9;galement &#xE9;t&#xE9; identifi&#xE9;s, y compris la voie de TOR, transcription, traduction, du prot&#xE9;asome, la synth&#xE8;se du glutathion, la synth&#xE8;se d&#x26;#39;ATP, et de la signalisation Notch, et ceux-ci &#xE9;taient tout aussi important dans la survie des dommages. Comparaison avec les donn&#xE9;es d&#x26;#39;&#xE9;cran g&#xE9;nomiques de Saccharomyces cerevisiae a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; aucun enrichissement chevauchement des g&#xE8;nes individuels entre les esp&#xE8;ces, mais une conservation des voies. Pour d&#xE9;montrer la conservation fonctionnelle des voies, cinq ont &#xE9;t&#xE9; test&#xE9;s chez la drosophile et les cellules de souris, avec chaque voie de r&#xE9;pondre &#xE0; des dommages d&#x26;#39;alkylation dans les deux esp&#xE8;ces. Utilisation de l&#x26;#39;interactome des prot&#xE9;ines, un niveau significatif de la connectivit&#xE9; a &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9;e entre prot&#xE9;ines chez la drosophile survie MMS, ce qui sugg&#xE8;re une relation d&#x26;#39;ordre sup&#xE9;rieur. Cette connectivit&#xE9; a &#xE9;t&#xE9; consid&#xE9;rablement am&#xE9;lior&#xE9; par l&#x26;#39;int&#xE9;gration des composants des 13 fili&#xE8;res identifi&#xE9;es au sein du r&#xE9;seau. Regroupement des prot&#xE9;ines dans des &#xAB;n&#x153;uds&#xBB; de la voie qualitativement am&#xE9;lior&#xE9; l&#x26;#39;organisation interactome, r&#xE9;v&#xE9;lant un tr&#xE8;s organis&#xE9;e &#x26;quot;R&#xE9;seau pour la Survie MMS.&#x26;quot; Nous concluons que l&#x26;#39;identification des voies peut faciliter l&#x26;#39;analyse de biologie comparative lorsque directs de g&#xE8;nes / orthologue comparaisons &#xE9;chouent. Un biologiquement intuitive, le r&#xE9;seau fortement interconnect&#xE9; survie MMS a &#xE9;t&#xE9; r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9;e apr&#xE8;s, nous avons int&#xE9;gr&#xE9; des donn&#xE9;es de la voie dans notre analyse interactome.

Un r&#xE9;seau de voies de survie conserv&#xE9;es dommages R&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; par un g&#xE9;nomique &#xE9;cran ARNi

Schaden initiiert pleiotropen zellul&auml;re Antwort abzielen, zellulare &uuml;berleben, wenn passend. Um die Identifizierung von Genen, die f&uuml;r Sch&auml;den &uuml;berleben ben&ouml;tigt, haben wir einen zellbasierte RNAi-Bildschirm an der Taufliege Genom und die Alkylantien Agent Methyl Methanesulphonate (MMS) verwendet. &Auml;hnliche Studien in anderen Modell-Organismen-Bericht, die Antwort zu besch&auml;digen k&ouml;nnen pleiotropen zellul&auml;re Prozesse beinhalten, anders als die zentrale DNA reparieren Komponenten, dennoch eine intuitive Systeme &Uuml;bersicht &uuml;ber die zellul&auml;ren Bestandteilen ben&ouml;tigt f&uuml;r Sch&auml;den &uuml;berleben, ihrer Wechselbeziehungen und kontextuellen Bedeutung hat gefehlt. Dar&uuml;ber hinaus durch den Vergleich von Daten aus verschiedenen Modellorganismen, Identifizierung von konserviert und Kernkomponenten &uuml;berleben sollte vermutlich bevorstehenden. Wir identifizieren 307 Gene, Signaltechnik, metabolische, 13 darstellt oder enzymatische Wege, die zellulare &Uuml;berleben der MMS-induzierten Sch&auml;den betreffen. Wie erwartet, die meisten dieser Wege sind involviert in der DNA-Reparatur; jedoch mehrere Wege mit vielf&auml;ltiger biologischer Funktionen wurden auch, einschlie&szlig;lich das TOR Weg, Transkription, &Uuml;bersetzung, Proteasom, Glutathion-Synthese, ATP-Synthese, und Notch Signalisierung und diese waren ebenso wichtig in Bezug auf Sch&auml;den &uuml;berleben. Vergleich mit genomischen Bildschirmdaten aus Saccharomyces Cerevisiae ergab keine &Uuml;berlappung Bereicherung einzelner Gene zwischen den Arten, sondern eine Erhaltung der Bahnen. Um die funktionelle Erhaltung der Wege zu demonstrieren, wurden f&uuml;nf in Drosophila und Maus Zellen, mit jedem Weg reagieren auf Alkylierung Besch&auml;digung bei beiden Spezies getestet. Verwenden die Protein-Interaktom, wurde ein signifikantes Ma&szlig; der Konnektivit&auml;t zwischen Drosophila MMS &uuml;berleben Proteinen, was auf eine h&ouml;here Ordnung Beziehung beobachtet. Diese Konnektivit&auml;t wurde drastisch verbessert, durch die Integration der Komponenten der identifizierten 13 Bahnen innerhalb des Netzwerks. Gruppieren von Proteinen in &quot;Weg-Knoten&quot; qualitativ verbessert die Interaktom-Organisation, offenbart ein straff organisierten &quot;MMS-&uuml;berleben-Netzwerk&quot;. Wir schlie&szlig;en, dass die Identifizierung der Wege vergleichende Biologie Analyse erleichtern kann, wenn nicht direkte gen/Orthologue Vergleiche. Ein biologisch intuitive, hochgradig vernetzten MMS &uuml;berleben Netzwerk aufgedeckt wurde, nachdem wir unsere Interaktom-Analyse Weg Daten zu schaffen.

Ein Netzwerk von konservierten Schaden &uuml;berleben Wege durch eine genomische RNAi-Bildschirm aufgedeckt.

Danni avvia una risposta cellulare pleiotropica finalizzata alla sopravvivenza cellulare quando appropriato. Per identificare i geni necessari per la sopravvivenza di danni, abbiamo utilizzato uno schermo di RNAi cell-based contro il genoma di Drosophila e l&#39;agente alchilante metile methanesulphonate (MMS). Simili studi eseguiti in altri report di organismi modello che danno risposta possono comportare pleiotropici processi cellulari diversi da componenti di riparazione del DNA centrale, eppure una visualizzazione a livello intuitivo sistemi dei componenti cellulari necessari per la sopravvivenza del danno, loro interrelazione e contestuale importanza &egrave; stato carente. Ulteriormente, confrontando i dati da diversi microrganismi, identificazione di conservato e presumibilmente i componenti principali di sopravvivenza dovrebbero essere imminente. Abbiamo identificato 307 geni, che rappresentano 13 segnalazione, metabolica, o vie enzimatiche, che influenzano la sopravvivenza cellulare di danni indotti da MMS. Come previsto, la maggior parte di questi percorsi &egrave; coinvolte nella riparazione del DNA; Tuttavia, inoltre sono stati individuati diversi percorsi con pi&ugrave; diverse funzioni biologiche, compreso il TOR pathway, trascrizione, traduzione, proteasoma, sintesi di glutatione, sintesi dell&#39;ATP e segnalazione Notch e questi sono stati ugualmente importanti nella sopravvivenza di danni. Confronto con dati genomic schermo da Saccharomyces cerevisiae ha rivelato nessun arricchimento di sovrapposizione dei singoli geni tra specie, ma una conservazione dei percorsi. Per dimostrare la conservazione funzionale delle vie, cinque sono stati testati nelle cellule di Drosophila e mouse, con ogni percorso rispondendo ai danni di alchilazione in entrambe le specie. Utilizzando la proteina interactome, un notevole livello di connettivit&agrave; &egrave; stato osservato tra le proteine di sopravvivenza della drosofila MMS, suggerendo una relazione di ordine superiore. Questa connettivit&agrave; &egrave; stata drasticamente migliorata incorporando i componenti dei 13 percorsi individuati all&#39;interno della rete. Raggruppare le proteine in &quot;nodi pathway&quot; qualitativamente migliorata l&#39;organizzazione interactome, rivelando un&#39;altamente organizzata &quot;MMS sopravvivenza rete.&quot; Concludiamo che identificazione di percorsi pu&ograve; facilitare l&#39;analisi comparativa biologia quando i confronti diretti gene/orthologue non riescono. Una rete di sopravvivenza biologicamente intuitiva, altamente interconnessa MMS &egrave; stata rivelata dopo che abbiamo incorporato dati percorso nella nostra analisi interactome.

Una rete di percorsi di sopravvivenza danno conservata rivelato da uno schermo di RNAi genomic.

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&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;RNAi&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x4FDD;&#x5B58;&#x98DF;&#x88AB;&#x5BB3;&#x751F;&#x5B58;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;

&#xC190;&#xC0C1;&#xC744; &#xB54C; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xC874;&#xC744; &#xACA8;&#xB0E5; &#xD55C; &#xB2E4; &#xBA74; &#xBC1C;&#xD604; &#xC131; &#xC138;&#xD3EC; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xC2DC;&#xC791; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD53C;&#xD574; &#xC0DD;&#xC874;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xCD08;&#xD30C;&#xB9AC; &#xAC8C;&#xB188; &#xBC0F; alkylating &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8; &#xBA54; &#xD2F8; methanesulphonate (MMS)&#xC5D0; &#xB300;&#xD574; &#xC140; &#xAE30;&#xBC18; RNAi &#xD654;&#xBA74;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC751;&#xB2F5; &#xC190;&#xC0C1;&#xC758; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xB2E4;&#xB978; &#xBAA8;&#xB378; &#xC720;&#xAE30; &#xCCB4; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC218;&#xD589; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xC911;&#xC559; DNA &#xBCF5;&#xAD6C; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;, &#xC544;&#xC9C1; &#xC138;&#xD3EC; &#xAD6C;&#xC131;&#xC758; &#xC9C1;&#xAD00;&#xC801;&#xC778; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xC218;&#xC900; &#xBCF4;&#xAE30; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xAD00;&#xACC4;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xCF58;&#xD150;&#xCE20; &#xC911;&#xC694;&#xC131; &#xBD80;&#xC871; &#xD588;&#xB2E4; &#xD53C;&#xD574; &#xC0DD;&#xC874;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xB2E4;&#xB978; &#xB2E4; &#xBA74; &#xBC1C;&#xD604; &#xC131; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xB2E4;&#xB978; &#xBAA8;&#xB378; &#xC720;&#xAE30; &#xCCB4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB97C; &#xBE44;&#xAD50; &#xD558; &#xC5EC; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xBCF4;&#xC874; &#xD558; &#xACE0; &#xC544;&#xB9C8;&#xB3C4; &#xD575;&#xC2EC; &#xC0DD;&#xC874; &#xAD6C;&#xC131; &#xCD9C;&#xAC04; &#xB418;&#xC5B4;&#xC57C;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xC2E0;&#xD638;, &#xC2E0;&#xC9C4; &#xB300;&#xC0AC;, 13 &#xB300;&#xD45C; 307 &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xB610;&#xB294; &#xD6A8;&#xC18C; &#xD1B5;&#xB85C; MMS &#xC190;&#xC0C1;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xC874;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACBD;&#xB85C; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84; &#xCC38;&#xC5EC; &#xC608;&#xC0C1; &#xB300;&#xB85C; DNA &#xC218;&#xB9AC;; &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xB354; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xAC00;&#xC9C4; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xACBD;&#xB85C; &#xB610;&#xD55C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;&#xB294; &#xD1A0;&#xB974;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xD1B5;&#xB85C;, &#xC804;&#xC0AC;, &#xBC88;&#xC5ED;, &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880;, glutathione &#xD569;&#xC131;, ATP &#xD569;&#xC131; &#xBC0F; &#xB178;&#xCE58; &#xC2E0;&#xD638;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD53C;&#xD574; &#xC0DD;&#xC874;&#xC5D0; &#xB3D9;&#xB4F1; &#xD558; &#xAC8C; &#xC911;&#xC694; &#xD588;&#xB2E4;. Saccharomyces cerevisiae&#xC758; &#xAC8C;&#xB188; &#xD654;&#xBA74; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xBE44;&#xAD50; &#xC885;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xACBD;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC874; &#xC0AC;&#xC774; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC911;&#xBCF5; &#xB18D;&#xCD95;&#xC744; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC1D;&#xD614;&#xB2E4;. &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBCF4;&#xC874;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; 5 &#xB450; &#xC885;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC54C;&#xD0AC;&#xD654;&#xC81C; &#xC190;&#xC0C1;&#xC5D0; &#xB300;&#xC751; &#xD558;&#xB294; &#xAC01; &#xD1B5;&#xB85C; &#xCD08;&#xD30C;&#xB9AC;&#xC640; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC704;&#xD558;&#xC5EC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC5F0;&#xACB0;&#xC758; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xC218;&#xC900; &#xB192;&#xC740; &#xC21C;&#xC11C; &#xAD00;&#xACC4;&#xB97C; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xCD08;&#xD30C;&#xB9AC; MMS &#xC0DD;&#xC874; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xAD00;&#xCC30; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xACB0;&#xC774; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C; &#xB0B4; 13 &#xD655;&#xC778; &#xB41C; &#xACBD;&#xB85C; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD569; &#xD558; &#xC5EC; &#xADF9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC1C;&#xC120; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC870;&#xC9C1;&#xC801;&#xC778;&#xB41C; &quot;MMS &#xC0DD;&#xC874; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C;.&quot; &#xACF5;&#xAC1C; &#xC704;&#xD558;&#xC5EC; &#xC870;&#xC9C1; &#xAC1C;&#xC120; &quot;&#xD1B5;&#xB85C; &#xB178;&#xB4DC;&quot;&#xB85C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xC9C8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xADF8;&#xB8F9;&#xD654; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC9C1;&#xC811; &#xC9C4;/orthologue &#xBE44;&#xAD50; &#xC2E4;&#xD328; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xBE44;&#xAD50; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC27D;&#xAC8C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xACB0;&#xB860; &#xC9C0;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC9C1;&#xAD00;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; &#xACE0;&#xB3C4;&#xB85C; &#xC0C1;&#xD638; MMS &#xC0DD;&#xC874; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC704;&#xD558;&#xC5EC; &#xBD84;&#xC11D; &#xACBD;&#xB85C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xD1B5;&#xD569; &#xD6C4; &#xBC1D;&#xD600;&#xC84C;&#xB2E4;.

&#xAC8C;&#xB188; RNAi &#xD654;&#xBA74; &#xACF5;&#xAC1C; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xD53C;&#xD574; &#xC0DD;&#xC874; &#xACBD;&#xB85C;&#xC758; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C;.

El da&#xF1;o se inicia una respuesta celular pleiotr&#xF3;pico destinado a la supervivencia celular cuando sea apropiado. Para identificar los genes necesarios para la supervivencia de los da&#xF1;os, se utiliz&#xF3; una pantalla de celular basado en el ARNi contra el genoma de Drosophila y el agente alquilante metil metanosulfonato (MMS). Estudios similares realizados en otros organismos modelo informan de que la respuesta puede implicar da&#xF1;os pleiotr&#xF3;picos procesos celulares que no sean los componentes centrales de reparaci&#xF3;n de ADN, sin embargo, una visi&#xF3;n intuitiva de los sistemas de nivel de los componentes celulares necesarios para la supervivencia de los da&#xF1;os, su interrelaci&#xF3;n, y la importancia del contexto ha faltado. Adem&#xE1;s, comparando los datos de diferentes organismos modelo, la identificaci&#xF3;n de los componentes de la supervivencia y el n&#xFA;cleo conservadas supuestamente deber&#xED;a ser la pr&#xF3;xima. Se identificaron 307 genes, lo que representa 13 de se&#xF1;alizaci&#xF3;n, metab&#xF3;licas, o de las v&#xED;as enzim&#xE1;ticas, que afecta a la supervivencia celular del da&#xF1;o inducido por MMS. Como era de esperar, la mayor&#xED;a de estas v&#xED;as est&#xE1;n involucrados en la reparaci&#xF3;n del ADN, sin embargo, varias v&#xED;as con m&#xE1;s funciones biol&#xF3;gicas diversas tambi&#xE9;n fueron identificados, incluyendo la v&#xED;a de TOR, transcripci&#xF3;n, traducci&#xF3;n, s&#xED;ntesis del proteasoma, el glutati&#xF3;n, la s&#xED;ntesis de ATP, y la se&#xF1;alizaci&#xF3;n de Notch, y estos son igualmente importantes en la supervivencia de los da&#xF1;os. La comparaci&#xF3;n con datos de la pantalla gen&#xF3;micas de Saccharomyces cerevisiae no revel&#xF3; el enriquecimiento de la superposici&#xF3;n de genes individuales entre las especies, pero la conservaci&#xF3;n de las v&#xED;as. Para demostrar la conservaci&#xF3;n funcional de las v&#xED;as, cinco fueron probados en Drosophila y c&#xE9;lulas de rat&#xF3;n, con cada v&#xED;a de responder a los da&#xF1;os alquilaci&#xF3;n en ambas especies. Uso de la interactoma prote&#xED;nas, un nivel significativo de conectividad se observ&#xF3; entre las prote&#xED;nas de Drosophila supervivencia MMS, lo que sugiere una relaci&#xF3;n de orden superior. Esta conectividad se mejor&#xF3; considerablemente mediante la incorporaci&#xF3;n de los componentes de las 13 v&#xED;as identificadas dentro de la red. Agrupaci&#xF3;n de las prote&#xED;nas en &#x26;quot;nodos&#x26;quot; de la v&#xED;a mejora cualitativa de la organizaci&#xF3;n interactoma, revelando una muy bien organizada &#x26;quot;red MMS de supervivencia.&#x26;quot; Llegamos a la conclusi&#xF3;n de que la identificaci&#xF3;n de las v&#xED;as puede facilitar el an&#xE1;lisis de la biolog&#xED;a comparativa, cuando directos de genes / orthologue comparaciones fallan. Un biol&#xF3;gicamente intuitiva, la red altamente interconectada de supervivencia MMS fue revelado despu&#xE9;s de que los datos incorporados en el an&#xE1;lisis de la v&#xED;a interactoma.

Una red de v&#xED;as de da&#xF1;o conservadas de supervivencia revelada por una pantalla de Gen&#xF3;mica RNAi

Un cat&#xE1;logo gen&#xF3;mico de las interacciones prote&#xED;na-prote&#xED;na es una fuente rica de informaci&#xF3;n, sobre todo para explorar las relaciones entre las prote&#xED;nas. Numerosos experimentos de sistemas a escala y en peque&#xF1;a escala se han realizado para identificar las interacciones, sin embargo, nuestro conocimiento de todas las interacciones de cualquier especie es incompleta, y los medios alternativos para ampliar estos mapas de la red que se necesita. Por lo tanto, tom&#xF3; un enfoque de la biolog&#xED;a comparativa para predecir interacciones prote&#xED;na-prote&#xED;na a trav&#xE9;s de cinco especies (humanos, ratones, moscas, gusanos y levaduras) y InterologFinder desarrollado para los bi&#xF3;logos de investigaci&#xF3;n para navegar f&#xE1;cilmente a estos datos. Tambi&#xE9;n hemos desarrollado una puntuaci&#xF3;n de confianza para las interacciones basadas en la evidencia experimental disponible y la conservaci&#xF3;n de las especies.

Construcci&#xF3;n y an&#xE1;lisis de redes de prote&#xED;nas interactoma por las comparaciones entre especies de la Cruz-

Un catalogo genomic di interazioni proteina-proteina &egrave; una ricca fonte di informazioni, specialmente per esplorare le relazioni tra le proteine. Numerosi sistemi-wide e piccoli esperimenti sono stati condotti per identificare le interazioni; Tuttavia, la nostra conoscenza di tutte le interazioni di qualsiasi specie &egrave; incompleto, e mezzi alternativi di espandere queste mappe di rete sono necessario. Abbiamo quindi preso un approccio comparativo biologia di prevedere le interazioni della proteina-proteina attraverso cinque specie (umani, mouse, volare, verme e lievito) e sviluppato InterologFinder per biologi ricerca navigare facilmente questi dati. Abbiamo anche sviluppato un punteggio di fiducia per le interazioni basato su prove sperimentali disponibili e conservazione attraverso la specie.

Costruzione e l&#39;analisi di reti interactome proteina da cross-specie i confronti.

&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xAC8C;&#xB188; &#xCE74;&#xD0C8;&#xB85C;&#xADF8;&#xB294; &#xD2B9;&#xD788; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xAD00;&#xACC4;&#xB97C; &#xD0D0;&#xD5D8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC815;&#xBCF4;&#xC758; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; &#xC18C;&#xC2A4;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC218;&#xB9CE;&#xC740; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xC804;&#xCCB4; &#xBC0F; &#xC18C;&#xADDC;&#xBAA8; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;;&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC2E4;&#xC2DC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5B4;&#xB5A4; &#xD55C; &#xC885;&#xC871;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xC644;&#xC804; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C; &#xC9C0;&#xB3C4; &#xD655;&#xC7A5; &#xD558;&#xB294; &#xB300;&#xCCB4; &#xC218;&#xB2E8; &#xD544;&#xC694; &#xD558;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; 5 &#xC885;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xC608;&#xCE21; &#xD558;&#xB294; &#xBE44;&#xAD50; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559; &#xC811;&#xADFC; &#xD588;&#xB2E4; (&#xC778;&#xAC04;, &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;, &#xBE44;&#xD589;, &#xBC8C;&#xB808;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xD6A8; &#xBAA8;) &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559;&#xC774;&#xC774; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB97C; &#xC27D;&#xAC8C; &#xD0D0;&#xC0C9;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; Interologfinder&#xB97C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558; &#xACE0; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xC885;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC801; &#xC99D;&#xAC70; &#xBC0F; &#xBCF4;&#xC874; &#xAE30;&#xBC18; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC2E0;&#xB8B0; &#xC810;&#xC218;&#xB97C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD588;&#xB2E4;.

&#xAD6C;&#xCD95; &#xD558; &#xACE0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC704;&#xD558;&#xC5EC; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C; &#xAC04; &#xC885; &#xBE44;&#xAD50; &#xBD84;&#xC11D;.

A genomic catalogue of protein-protein interactions is a rich source of information, particularly for exploring the relationships between proteins. Numerous systems-wide and small-scale experiments have been conducted to identify interactions; however, our knowledge of all interactions for any one species is incomplete, and alternative means to expand these network maps is needed. We therefore took a comparative biology approach to predict protein-protein interactions across five species (human, mouse, fly, worm, and yeast) and developed InterologFinder for research biologists to easily navigate this data. We also developed a confidence score for interactions based on available experimental evidence and conservation across species.

Building and analyzing protein interactome networks by cross-species comparisons.

&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; - &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x30AB;&#x30BF;&#x30ED;&#x30B0;&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x306B;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x9593;&#x306E;&#x95A2;&#x4FC2;&#x3092;&#x63A2;&#x7D22;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A;&#x60C5;&#x5831;&#x6E90;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x591A;&#x6570;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x5168;&#x4F53;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5C0F;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x5B9F;&#x9A13;&#x304C;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5B9F;&#x65BD;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x306E;&#x7A2E;&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x77E5;&#x8B58;&#x306F;&#x4E0D;&#x5B8C;&#x5168;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x4EE3;&#x66FF;&#x624B;&#x6BB5;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x30DE;&#x30C3;&#x30D7;&#x3092;&#x62E1;&#x5927;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x610F;&#x5473;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x3053;&#x3067;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x7C21;&#x5358;&#x306B;&#x3053;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x3092;&#x30CA;&#x30D3;&#x30B2;&#x30FC;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x8005;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;5&#x3064;&#x306E;&#x7A2E;&#xFF08;&#x30D2;&#x30C8;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3001;&#x30CF;&#x30A8;&#x3001;&#x30EF;&#x30FC;&#x30E0;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x9175;&#x6BCD;&#xFF09;&#x3068;&#x958B;&#x767A;InterologFinder&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; - &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6BD4;&#x8F03;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x306A;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x3068;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x7A2E;&#x9593;&#x3067;&#x5229;&#x7528;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x5B9F;&#x9A13;&#x7684;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3068;&#x4FDD;&#x5168;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x76F8;&#x4E92;&#x306E;&#x4FE1;&#x983C;&#x30B9;&#x30B3;&#x30A2;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9;&#x7A2E;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30FC;&#x30E0;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x306E;&#x69CB;&#x7BC9;&#x3068;&#x5206;&#x6790;

Un catalogue g&#xE9;nomique des interactions prot&#xE9;ine-prot&#xE9;ine est une source riche d&#x26;#39;informations, notamment pour explorer les relations entre les prot&#xE9;ines. De nombreuses exp&#xE9;riences de syst&#xE8;mes &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;chelle et &#xE0; petite &#xE9;chelle ont &#xE9;t&#xE9; men&#xE9;es pour identifier les interactions; toutefois, notre connaissance de toutes les interactions de n&#x26;#39;importe quelle esp&#xE8;ce est incomplet, et d&#x26;#39;autres moyens d&#x26;#39;&#xE9;tendre ces cartes r&#xE9;seau est n&#xE9;cessaire. Nous avons donc pris une approche de biologie comparative pour pr&#xE9;dire les interactions entre prot&#xE9;ines &#xE0; travers les cinq esp&#xE8;ces (homme, souris, la mouche, le ver, et de la levure) et InterologFinder d&#xE9;velopp&#xE9; pour les biologistes de recherche pour naviguer facilement ces donn&#xE9;es. Nous avons &#xE9;galement d&#xE9;velopp&#xE9; un score de confiance pour les interactions fond&#xE9;es sur des preuves exp&#xE9;rimentales disponibles et la conservation d&#x26;#39;une esp&#xE8;ce.

Construction et analyse des r&#xE9;seaux Interactome prot&#xE9;ines par la Croix-esp&#xE8;ces comparaisons

Ein genomischer Katalog von Protein-Protein Interaktionen ist eine reiche Quelle von Informationen, insbesondere f&uuml;r die Erforschung der Beziehungen zwischen Proteinen. Zahlreiche Systeme-weite und kleine Experimente wurden durchgef&uuml;hrt, um Interaktionen zu identifizieren; aber unser Wissen &uuml;ber alle Interaktionen f&uuml;r alle Arten ist unvollst&auml;ndig, und alternative M&ouml;glichkeiten um diese Netzwerkkarten zu erweitern ist erforderlich. Wir haben daher einen vergleichende Biologie-Ansatz zur Vorhersage von Protein-Protein Interaktionen &uuml;ber f&uuml;nf Arten (Mensch, Maus, fliegen, Schnecken und Hefe) und entwickelt InterologFinder f&uuml;r Forschung Biologen diese Daten einfach zu navigieren. Wir haben auch ein Vertrauensergebnis f&uuml;r Interaktionen auf der Grundlage von vorliegenden experimentellen Nachweise und Erhaltung Arten entwickelt.

Aufbau und Analyse von Protein Interaktom Netzwerke durch Kreuz-Arten Vergleiche.

&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;-&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x76EE;&#x5F55;&#x662F;&#x4FE1;&#x606F;&#x7684;&#x4E30;&#x5BCC;&#x6765;&#x6E90;&#xFF0C;&#x7279;&#x522B;&#x662F;&#x4FE1;&#x606F;&#x7684;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x63A2;&#x7D22;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x5173;&#x7CFB;&#x3002;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x65E0;&#x6570;&#x7684;&#x5168;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x548C;&#x5C0F;&#x89C4;&#x6A21;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528; &#xFF1B;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x4EFB;&#x4F55;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7269;&#x79CD;&#x7684;&#x6240;&#x6709;&#x4EA4;&#x4E92;&#x7684;&#x77E5;&#x8BC6;&#x662F;&#x4E0D;&#x5B8C;&#x6574;&#x7684;&#x5E76;&#x9700;&#x8981;&#x66FF;&#x4EE3;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x6269;&#x5927;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7F51;&#x7EDC;&#x5730;&#x56FE;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x56E0;&#x6B64;&#x82B1;&#x4E86;&#x6BD4;&#x8F83;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x65B9;&#x6CD5;&#x9884;&#x6D4B;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;-&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x8DE8;&#x4E94;&#x4E2A;&#x7269;&#x79CD; &#xFF08;&#x4EBA;&#x529B;&#x3001; &#x9F20;&#x6807;&#x3001; &#x98DE;&#x3001; &#x8815;&#x866B;&#x3001; &#x548C;&#x9175;&#x6BCD;) &#x548C;&#x5F00;&#x53D1;&#x7814;&#x7A76;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x5BB6;&#x80FD;&#x591F;&#x8F7B;&#x677E;&#x5730;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x6B64;&#x6570;&#x636E;&#x4E3A; InterologFinder&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x5236;&#x5B9A;&#x4E86;&#x57FA;&#x4E8E;&#x73B0;&#x6709;&#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x636E;&#x548C;&#x517B;&#x62A4;&#x8DE8;&#x7269;&#x79CD;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x7F6E;&#x4FE1;&#x5EA6;&#x5F97;&#x5206;&#x3002;

&#x5EFA;&#x8BBE;&#x548C;&#x8DE8;&#x7269;&#x79CD;&#x7684;&#x6BD4;&#x8F83;&#x5206;&#x6790;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28; interactome &#x7F51;&#x7EDC;&#x3002;

&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E; PARP1 &#x6291;&#x5236;&#x5242;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x6709;&#x4E9B;&#x662F;&#x76EE;&#x524D;&#x5728;&#x4E34;&#x5E8A;&#x8BD5;&#x9A8C;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6709;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x5730;&#x6740;&#x6B7B; BRCA1/2 &#x7A81;&#x53D8;&#x7684;&#x764C;&#x75C7;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x4EBA;&#x4EEC;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x8FD9;&#x4E00;&#x7597;&#x6CD5;&#x7684;&#x6210;&#x529F;&#x57FA;&#x4E8E;&#x90C1;&#x90C1;&#x81F4;&#x547D;&#x4EA7;&#x751F;&#x5E76;&#x53D1;&#x635F;&#x5931;&#x6216;&#x4E24;&#x4E2A; DNA &#x635F;&#x4F24;&#x4FEE;&#x590D;&#x9014;&#x5F84;&#x6291;&#x5236;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE; DNA &#x635F;&#x4F24;&#xFF1A; &#x5355;&#x94FE;&#x65AD;&#x88C2; (SSB) &#x4FEE;&#x590D;&#x548C;&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#x4FEE;&#x590D; &#xFF08;HRR&#xFF09;&#x3002;&#x636E;&#x63A8;&#x6D4B;&#xFF0C;PARP1 &#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x59A8;&#x788D;&#x4FEE;&#x590D;&#x7684;&#x529E;&#x5B66;&#x56E2;&#x4F53;&#x548C;&#x5728; DNA &#x590D;&#x5236;&#x8FC7;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x75C5;&#x53D8;&#x5BFC;&#x81F4;&#x590D;&#x5236;&#x53C9;&#x5D29;&#x6E83;&#x548C;&#x6B63;&#x5728;&#x53D8;&#x6210; HRR &#x7684;&#x886C;&#x5E95;&#x3002;&#x4E8B;&#x5B9E;&#x4E0A;&#xFF0C;&#x4E00;&#x4E9B;&#x4EE5;&#x5F80;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x8D85; recombinogenic &#x578B;&#x4F53;&#x5916;&#x79EF;&#x6781; PARP1 &#x7F3A;&#x5E2D;&#x6216; DNA &#x7834;&#x574F;&#x6027;&#x4EE3;&#x7406;&#x54CD;&#x5E94;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x81EA;&#x53D1; HRR PARP1 &#x6CA1;&#x6709;&#x4F7F;&#x7528; p(un) &#x6D4B;&#x5B9A;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x9891;&#x7387;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0; Parp1 nullizygous &#x5C0F;&#x9F20;&#x53D1;&#x751F;&#x7684; HRR &#x4E8B;&#x4EF6;&#x5173;&#x8054;&#x5927;&#x3001; &#x65E0;&#x6027;&#x7CFB;&#x7684;&#x4E8B;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E0D;&#x662F;&#x901A;&#x5E38;&#x66F4;&#x9891;&#x7E41;&#x7684;&#x5355;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E8B;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x663E;&#x8457;&#x589E;&#x52A0;&#x8868;&#x660E;&#x4E2D;&#x590D;&#x5236;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x6548;&#x679C;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x6F14;&#x793A; PARP1 &#x6291;&#x5236;&#x81EA;&#x53D1; HRR &#x4E8B;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x5E76;&#x652F;&#x6301; DNA &#x590D;&#x5236;&#x8F6C;&#x5316;&#x7684;&#x529E;&#x5B66;&#x56E2;&#x4F53; HRR &#x886C;&#x5E95;&#x7684;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;

PARP1 &#x53D6;&#x6D88;&#x5728;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x3002;

Recent studies suggest that PARP1 inhibitors, several of which are currently in clinical trial, may selectively kill BRCA1/2 mutant cancers cells. It is thought that the success of this therapy is based on immitigable lethal DNA damage in the cancer cells resultant from the concurrent loss or inhibition of two DNA damage repair pathways: single-strand break (SSB) repair and homologous recombination repair (HRR). Presumably, inhibition of PARP1 activity obstructs the repair of SSBs and during DNA replication, these lesions cause replication fork collapse and are transformed into substrates for HRR. In fact, several previous studies have indicated a hyper-recombinogenic phenotype in the absence of active PARP1 in vitro or in response to DNA damaging agents. In this study, we demonstrate an increased frequency of spontaneous HRR in vivo in the absence of PARP1 using the p(un) assay. Furthermore, we found that the HRR events that occur in Parp1 nullizygous mice are associated with a significant increase in large, clonal events, as opposed to the usually more frequent single cell events, suggesting an effect in replicating cells. In conclusion, our data demonstrates that PARP1 inhibits spontaneous HRR events, and supports the model of DNA replication transformation of SSBs into HRR substrates.

PARP1 suppresses homologous recombination events in mice in vivo.

Des &#xE9;tudes r&#xE9;centes sugg&#xE8;rent que les inhibiteurs de PARP1 permet, dont plusieurs sont actuellement en essai clinique, peut tuer s&#xE9;lectivement les g&#xE8;nes BRCA1 / 2 mutants cellules de cancers. On pense que le succ&#xE8;s de cette th&#xE9;rapie est bas&#xE9;e sur les dommages d&#x26;#39;ADN immitigable l&#xE9;tale dans les cellules canc&#xE9;reuses qui en r&#xE9;sultent de la perte simultan&#xE9;e ou l&#x26;#39;inhibition de deux voies de r&#xE9;paration des dommages d&#x26;#39;ADN: simple brin pause (SSB) de r&#xE9;paration et de r&#xE9;paration recombinaison homologue (HRR). Vraisemblablement, l&#x26;#39;inhibition de l&#x26;#39;activit&#xE9; PARP1 fait obstacle &#xE0; la r&#xE9;paration de BSN et lors de la r&#xE9;plication d&#x26;#39;ADN, ces l&#xE9;sions provoquent l&#x26;#39;effondrement des fourches de r&#xE9;plication et se transforment en supports pour HRR. En fait, plusieurs &#xE9;tudes ant&#xE9;rieures ont indiqu&#xE9; un ph&#xE9;notype hyper-recombinog&#xE8;ne en l&#x26;#39;absence de PARP1 actif in vitro ou en r&#xE9;ponse &#xE0; des agents endommageant l&#x26;#39;ADN. Dans cette &#xE9;tude, nous d&#xE9;montrons une fr&#xE9;quence accrue de HRR spontan&#xE9;e in vivo en l&#x26;#39;absence de l&#x26;#39;aide de la PARP1 p (non) test. En outre, nous avons constat&#xE9; que les &#xE9;v&#xE9;nements qui se produisent dans HRR PARP1 souris nullizygous sont associ&#xE9;s &#xE0; une augmentation significative dans les grands &#xE9;v&#xE9;nements clonales, par opposition &#xE0; des &#xE9;v&#xE9;nements habituellement plus fr&#xE9;quents de cellules uniques, ce qui sugg&#xE8;re un effet dans les cellules de r&#xE9;plication. En conclusion, nos donn&#xE9;es d&#xE9;montrent que PARP1 inhibe les &#xE9;v&#xE9;nements HRR spontan&#xE9;es, et prend en charge le mod&#xE8;le de la transformation de la r&#xE9;plication de l&#x26;#39;ADN dans des substrats BSN HRR.

PARP1 Supprime &#xE9;v&#xE9;nements de recombinaison homologue chez la souris in Vivo

Neuere Studien legen nahe, dass PARP1-Inhibitoren, von denen einige in der klinischen Pr&uuml;fung sind, BRCA1/2 mutant Krebs Zellen selektiv t&ouml;ten k&ouml;nnen. Es wird vermutet, dass der Erfolg dieser Therapie auf immitigable t&ouml;dliche DNA-Sch&auml;den in den Krebszellen, die resultierende aus den gleichzeitigen Verlust oder Hemmung der zwei DNA-Schaden-Reparatur-Wege: Single-Strand-Pause (SSB) Reparatur und Homologe Rekombination Reparatur (HFR). Vermutlich, Hemmung der PARP1 Aktivit&auml;t behindert die Reparatur des SSBs und w&auml;hrend der DNA-Replikation, diese L&auml;sionen verursachen Replikation Gabel Zusammenbruch und verwandeln sich in Substraten f&uuml;r die HFR. Mehrere fr&uuml;here Studien haben in der Tat einen hyper-Recombinogenic-Ph&auml;notyp in Ermangelung von in-vitro-aktive PARP1 oder als Antwort auf DNA-sch&auml;digenden Einfluss erkl&auml;rt. In dieser Studie zeigen wir eine erh&ouml;hte Frequenz der spontanen HFR in-vivo in Ermangelung des PARP1 unter Verwendung der p(un)-Probe. Dar&uuml;ber hinaus fanden wir, dass die HFR-Ereignisse, die in Parp1 Nullizygous M&auml;use auftreten einen deutlichen Anstieg der gro&szlig;en, klonale Veranstaltungen, im Gegensatz zu den in der Regel h&auml;ufiger einzelne Zelle-Events, zugeordnet sind schl&auml;gt einen Effekt bei der Replikation der Zellen. Abschlie&szlig;end zeigt unsere Daten, dass PARP1 spontane HFR-Veranstaltungen hemmt und das Modell der DNA-Replikation-Umwandlung von SSBs in HFR Substrate unterst&uuml;tzt.

PARP1 unterdr&uuml;ckt homologe Rekombination Ereignisse bei M&auml;usen in-vivo.

Studi recenti suggeriscono che gli inibitori PARP1, molte delle quali sono attualmente in sperimentazione clinica, possono uccidere selettivamente le cellule mutanti tumori BRCA1/2. Si pensa che il successo di questa terapia &egrave; basato su immitigable letali danni al DNA nelle cellule tumorali risultante dalla perdita simultanea o inibizione delle due vie di riparazione del DNA danni: single-strand break (SSB) riparazione e riparazione di ricombinazione omologa (HRR). Presumibilmente, l&#39;inibizione dell&#39;attivit&agrave; PARP1 ostruisce la riparazione di tutti e durante la replicazione del DNA, queste lesioni causano collasso forcella replica e si trasformano in substrati per FCR. In realt&agrave;, diversi studi precedenti hanno indicato un fenotipo iper-recombinogenic in assenza di attivo PARP1 in vitro o in risposta ad agenti dannosi del DNA. In questo studio, ci dimostrano un aumento della frequenza di HRR spontanea in vivo in assenza di PARP1 usando l&#39;analisi p(un). Inoltre, abbiamo trovato che gli eventi HRR che si verificano nei topi nullizygous Parp1 sono associati con un aumento significativo di clonali, grandi eventi, al contrario di solito pi&ugrave; frequenti eventi singola cella, suggerendo un effetto nella replica delle cellule. In conclusione, i nostri dati dimostra PARP1 inibisce gli eventi HRR spontanei che supporta il modello di trasformazione di replica del DNA di tutti in substrati HRR.

PARP1 elimina gli eventi di ricombinazione omologa nel topo in vivo.

&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;PARP1&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306F;&#x3001;&#x81E8;&#x5E8A;&#x8A66;&#x9A13;&#x306B;&#x73FE;&#x5728;&#x3042;&#x308B;&#x305D;&#x306E;&#x3046;&#x3061;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x306B;BRCA1 / 2&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x6BBA;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5358;&#x9396;&#x5207;&#x65AD;&#xFF08;SSB&#xFF09;&#x306E;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x3068;&#x76F8;&#x540C;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x4FEE;&#x5FA9;&#xFF08;HRR&#xFF09;&#xFF1A;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x6210;&#x529F;&#x306F;&#x3001;2&#x3064;&#x306E;DNA&#x640D;&#x50B7;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x540C;&#x6642;&#x640D;&#x5931;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x6291;&#x5236;&#x304B;&#x3089;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x8EFD;&#x6E1B;&#x3067;&#x304D;&#x306A;&#x3044;&#x81F4;&#x547D;&#x7684;&#x306A;DNA&#x640D;&#x50B7;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x304A;&#x305D;&#x3089;&#x304F;&#x3001;PARP1&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x306F;&#x3001;SSBs&#x306E;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x3001;DNA&#x8907;&#x88FD;&#x6642;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x75C5;&#x5909;&#x306F;&#x3001;&#x8907;&#x88FD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30AF;&#x306E;&#x5D29;&#x58CA;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x3001;HRR&#x306E;&#x57FA;&#x8CEA;&#x306B;&#x5909;&#x63DB;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5B9F;&#x969B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x5148;&#x884C;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;in vitro&#x307E;&#x305F;&#x306F;DNA&#x640D;&#x50B7;&#x5264;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306B;&#x7A4D;&#x6975;&#x7684;&#x306B;PARP1&#x975E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x8D85;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x305D;&#x3053;&#x3067;&#x3001;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;p&#xFF08;UN&#xFF09;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;PARP1&#x975E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x81EA;&#x767A;&#x7684;&#x306A;HRR&#x983B;&#x5EA6;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;PARP1 nullizygous&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x305F;HRR&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x304C;&#x8907;&#x88FD;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x3088;&#x308A;&#x983B;&#x7E41;&#x306B;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3068;&#x306F;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x6709;&#x610F;&#x306A;&#x5897;&#x52A0;&#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x767A;&#x898B;&#x7D50;&#x8AD6;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;PARP1&#x304C;&#x81EA;&#x767A;HRR&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x3001;HRR&#x57FA;&#x677F;&#x306B;SSBs&#x306E;DNA&#x8907;&#x88FD;&#x5909;&#x63DB;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

PARP1&#x306F;&#x3001;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x76F8;&#x540C;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x306E;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;

&#xCD5C;&#xADFC; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC81C;&#xC548; &#xC911; &#xBA87; &#xAC1C;&#xB294; &#xD604;&#xC7AC; &#xC784;&#xC0C1; &#xC2DC;&#xD5D8;&#xC5D0;, PARP1 &#xC800; &#xD574;&#xC81C; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; BRCA1/2 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC8FD; &#xC77C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xC0DD;&#xAC01;&#xC774; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC758; &#xC131;&#xACF5;&#xC740; &#xACB0;&#xACFC; &#xB3D9;&#xC2DC; &#xC190;&#xC2E4; &#xB610;&#xB294; 2 &#xAC1C;&#xC758; DNA &#xC190;&#xC0C1; &#xBCF5;&#xAD6C; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xCE58;&#xBA85;&#xC801;&#xC778; &#xB4E4; DNA &#xC190;&#xC0C1;&#xC5D0; &#xAE30;&#xBC18;: &#xB2E8;&#xC77C; &#xAC00;&#xB2E5; &#xBE0C;&#xB808;&#xC774;&#xD06C; (SSB) &#xC218;&#xB9AC; &#xBC0F; &#xB3D9;&#xC885; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xBCF5;&#xAD6C; (HRR). &#xC5B4;&#xCA4C;&#xBA74;, Ssbs&#xC640; DNA &#xBCF5;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xBCF5;&#xAD6C;&#xB97C; &#xBC29;&#xD574; &#xD558;&#xB294; PARP1 &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xC800;&#xD574;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBCD1; &#xBCC0; &#xBCF5;&#xC81C; &#xD3EC;&#xD06C; &#xBD95;&#xAD34; &#xC6D0;&#xC778;&#xACFC; HRR&#xC758; &#xAE30;&#xD310;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCC0;&#xD658; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC0AC;&#xC2E4;, &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC774;&#xC804;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xD558;&#xC774;&#xD37C; recombinogenic &#xD615; &#xD65C;&#xC131; PARP1 &#xCCB4; &#xC678;&#xC758; &#xBD80;&#xC7AC; &#xB610;&#xB294; DNA &#xC190;&#xC0C1; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xD45C;&#xBA85; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; &#xC790;&#xBC1C;&#xC801;&#xC778; HRR PARP1 &#xC5C6;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0; p(un) &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC0DD;&#xCCB4;&#xC758; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBC1C;&#xACAC; HRR &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8; Parp1 nullizygous &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB354; &#xC790;&#xC8FC; &#xB2E8;&#xC77C; &#xC140; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8; &#xBC18;&#xB300;&#xB85C; &#xD070;, &#xD074;&#xB860; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xC99D;&#xAC00;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC; &#xBCF5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC81C;&#xC548;. &#xACB0;&#xB860;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; PARP1 &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;, HRR &#xC790;&#xBC1C;&#xC801;&#xC778; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC640; HRR &#xAE30;&#xD310;&#xC73C;&#xB85C; Ssbs&#xC758; DNA &#xBCF5;&#xC81C; &#xBCC0;&#xD615; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC9C0; &#xC6D0;&#xD558;&#xB294; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

PARP1 &#xC0DD;&#xC950; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3D9;&#xC885; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xB97C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Estudios recientes sugieren que inhibidores de la PARP1, varios de los cuales est&#xE1;n actualmente en ensayo cl&#xED;nico, pueden matar selectivamente a BRCA1 / 2 c&#xE1;nceres de c&#xE9;lulas mutantes. Se cree que el &#xE9;xito de esta terapia se basa en el da&#xF1;o inmitigable ADN letal en las c&#xE9;lulas cancerosas resultantes de la p&#xE9;rdida concurrente o inhibici&#xF3;n de las dos v&#xED;as de reparaci&#xF3;n del ADN da&#xF1;os: un solo filamento rotura (SSB) reparaci&#xF3;n y reparaci&#xF3;n de recombinaci&#xF3;n hom&#xF3;loga (HRR). Presumiblemente, la inhibici&#xF3;n de la actividad PARP1 obstruye la reparaci&#xF3;n de las bebidas azucaradas y durante la replicaci&#xF3;n del ADN, estas lesiones causan colapso de la replicaci&#xF3;n del tenedor y se transforman en sustratos para la FCR. De hecho, varios estudios previos han indicado un fenotipo hiper-recombinogenic en ausencia de PARP1 activa in vitro o en respuesta a los agentes que da&#xF1;an el ADN. En este estudio, hemos demostrado una mayor frecuencia de HRR espont&#xE1;nea in vivo en la ausencia de PARP1 con el p (ONU) de ensayo. Adem&#xE1;s, hemos encontrado que los acontecimientos que ocurren en HRR PARP1 ratones nullizygous est&#xE1;n asociados con un incremento significativo en grandes eventos, clonales, en contraposici&#xF3;n a los acontecimientos celulares generalmente m&#xE1;s frecuentes individuales, lo que sugiere un efecto en las c&#xE9;lulas replicantes. En conclusi&#xF3;n, nuestros datos demuestran que inhibe PARP1 eventos espont&#xE1;neos HRR, y es compatible con el modelo de transformaci&#xF3;n de la replicaci&#xF3;n del ADN de bebidas azucaradas en sustratos HRR.

Suprime PARP1 fen&#xF3;menos de recombinaci&#xF3;n hom&#xF3;loga en ratones in vivo

Du syndrome de Werner est une maladie rare qui se manifeste par un vieillissement pr&#xE9;matur&#xE9; et maladies li&#xE9;es au vieillissement. WRN est le g&#xE8;ne mut&#xE9; dans WS, et est l&#x26;#39;un des cinq membres de la famille de l&#x26;#39;homme RecQ h&#xE9;licase. WS cellules pr&#xE9;sentent une instabilit&#xE9; g&#xE9;nomique et de la prolif&#xE9;ration alt&#xE9;r&#xE9;e, et dans les &#xE9;tudes in vitro sugg&#xE8;rent que WRN a un r&#xF4;le dans la suppression de la recombinaison homologue. Cependant, des &#xE9;tudes plus r&#xE9;centes proposent que d&#x26;#39;autres h&#xE9;licases RecQ (y compris les WRN) promouvoir des &#xE9;v&#xE9;nements pr&#xE9;coces de la recombinaison homologue. Pour &#xE9;tudier le r&#xF4;le de l&#x26;#39;h&#xE9;licase WRN sur la recombinaison homologue spontan&#xE9;e, nous avons obtenu une souris avec un WRN supprim&#xE9; h&#xE9;licase de domaine et l&#x26;#39;a combin&#xE9; avec le in vivo pink-eyed syst&#xE8;me de recombinaison homologue instable. Dans cet article, nous d&#xE9;montrons que WRN h&#xE9;licase n&#x26;#39;est pas n&#xE9;cessaire pour supprimer la recombinaison homologue dans contraires vivo pour les rapports pr&#xE9;c&#xE9;dents en utilisant un mod&#xE8;le de souris similaire.

Souris WRN h&#xE9;licase de domaine n&#x26;#39;est pas requise pour la suppression de recombinaison homologue m&#xE9;di&#xE9;e par l&#x26;#39;ADN spontan&#xE9;e

Werner-Syndrom ist eine seltene Erkrankung, die als vorzeitiger Alterung und altersbedingten Krankheiten manifestiert. WRN ist das Gen mutiert in WS und ist einer der f&uuml;nf menschlichen RecQ Helicase Familienmitglieder. WS-Zellen weisen genomische Instabilit&auml;t und Verbreitung ge&auml;ndert und in-vitro-Studien belegen, dass WRN eine Rolle hat bei der Unterdr&uuml;ckung der homologen Rekombination. Neuere Studien schlagen jedoch andere RecQ-Helikasen (einschlie&szlig;lich WRN) Fr&uuml;he Veranstaltungen der homologen Rekombination f&ouml;rdern. Um die Rolle der WRN Helicase auf spontane homologe Rekombination zu studieren, wir erhalten eine Maus mit einer gel&ouml;schten WRN-Helicase-Dom&auml;ne und kombiniert es mit dem in-vivo Rosa Augen unstable homologe Rekombination-System. In diesem Beitrag zeigen wir, dass WRN Helicase nicht erforderlich ist f&uuml;r die Unterdr&uuml;ckung von in-vivo entgegen fr&uuml;heren Berichten, die mit einem &auml;hnlichen Mausmodell homologe Rekombination.

Maus WRN-Helicase-Dom&auml;ne ist nicht f&uuml;r spontane homologe Rekombination-vermittelte DNA L&ouml;schung erforderlich.

Sindrome di Werner &egrave; una malattia rara che si manifesta come l&#39;invecchiamento precoce e malattie legate all&#39;et&agrave;. WRN &egrave; il gene mutato in WS ed &egrave; uno dei cinque umani RecQ elicasi membri della famiglia. Cellule WS presentano instabilit&agrave; genomica e alterata proliferazione e studi in vitro suggeriscono che WRN ha un ruolo nella soppressione di ricombinazione omologa. Tuttavia, studi pi&ugrave; recenti propongono che altri RecQ elicasi (tra cui AVV) promuovano primi eventi di ricombinazione omologa. Per studiare il ruolo dell&#39;elicasi WRN su ricombinazione omologa spontanea, abbiamo ottenuto un mouse con un dominio di elicasi WRN eliminato e combinato con il sistema in vivo con gli occhi rosa instabile ricombinazione omologa. In questa carta, dimostreremo che elicasi WRN non sono necessario per sopprimere la ricombinazione omologa in vivo contrariamente alle precedenti relazioni utilizzando un simile modello di mouse.

Mouse WRN Helicase dominio non &egrave; necessario per spontaneo omologhe ricombinazione mediata DNA Deletion.

&#x30A6;&#x30A7;&#x30EB;&#x30CA;&#x30FC;&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#x306F;&#x65E9;&#x671F;&#x8001;&#x5316;&#x3084;&#x52A0;&#x9F62;&#x306B;&#x4F34;&#x3046;&#x75C5;&#x6C17;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x73FE;&#x308C;&#x308B;&#x7A00;&#x306A;&#x75BE;&#x60A3;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002; WRN&#x306F;&#x3001;WS&#x3067;&#x5909;&#x7570;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;5&#x4EBA;&#x306E;RecQ&#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x306E;&#x4E00;&#x3064;&#x3067;&#x3059;&#x3002; WS&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x3068;&#x5909;&#x66F4;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5897;&#x6B96;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3001;in vitro&#x8A66;&#x9A13;&#x3067;&#x306F;WRN&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x76F8;&#x540C;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x62C5;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;RecQ&#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x306F;&#xFF08;WRN&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#xFF09;&#x306E;&#x76F8;&#x540C;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x81EA;&#x767A;&#x7684;&#x306A;&#x76F8;&#x540C;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;WRN&#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;WRN&#x524A;&#x9664;&#x3067;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3092;&#x53D6;&#x5F97;&#x3057;&#x3001;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x30D4;&#x30F3;&#x30AF;&#x306E;&#x76EE;&#x306E;&#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x306A;&#x76F8;&#x540C;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3068;&#x305D;&#x308C;&#x3092;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x305F;&#x3002;&#x672C;&#x7A3F;&#x3067;&#x306F;&#x3001;WRN&#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x304C;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x4EE5;&#x524D;&#x306E;&#x5831;&#x544A;&#x306B;&#x53CD;&#x3057;&#x3066;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x3067;&#x76F8;&#x540C;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;WRN&#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30FC;&#x30BC;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x304C;&#x81EA;&#x767A;&#x7684;&#x76F8;&#x540C;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;DNA&#x306E;&#x524A;&#x9664;&#x306F;&#x5FC5;&#x8981;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;

&#xBCA0;&#xB974;&#xB108; &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70;&#xC740; &#xD76C;&#xADC0; &#xC7A5;&#xC560; &#xC870;&#xAE30; &#xB178;&#xD654;&#xC640; &#xB098;&#xC774; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC73C;&#xB85C; &#xBA85;&#xB2E8;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. WRN WS, &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC774;&#xBA70; 5 &#xC778;&#xAC04;&#xC758; RecQ helicase &#xAC00;&#xC871; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. WS &#xC140; genomic &#xBD88;&#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC744; &#xC804;&#xC2DC; &#xD558; &#xACE0; &#xD655;&#xC0B0;, &#xBCC0;&#xACBD; &#xBC0F; &#xCCB4; &#xC678; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC81C;&#xC548; &#xACBD;&#xACE0;&#xB294; &#xB3D9;&#xC885; &#xC7AC;&#xACB0;&#xD569;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xC5ED;&#xD560;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xCD5C;&#xADFC; &#xC5F0;&#xAD6C; (&#xACBD;&#xACE0; &#xD3EC;&#xD568;) RecQ helicases &#xAE30;&#xD0C0; &#xB3D9;&#xC885; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569;&#xC758; &#xCD08;&#xAE30; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8; &#xD64D;&#xBCF4; &#xC81C;&#xC548;. &#xC790;&#xBC1C;&#xC801;&#xC778; &#xB3D9;&#xC885; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569;&#xC5D0; &#xACBD;&#xACE0; helicase&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xD558;&#xAE30; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC0AD;&#xC81C; &#xACBD;&#xACE0; helicase &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xD68D;&#xB4DD; &#xD558; &#xACE0; in vivo &#xBD84;&#xD64D;&#xC0C9; &#xB208;&#xC774; &#xBD88;&#xC548;&#xC815; &#xD55C; &#xB3D9;&#xC885; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xACFC; &#xACB0;&#xD569; &#xB41C;. &#xC774; &#xB17C;&#xBB38;&#xC5D0;&#xC11C; WRN helicase &#xC5B5;&#xC81C; &#xB3D9;&#xC885; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC774;&#xC804; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;&#xC5D0; &#xBC18;&#xD558;&#xB294; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; WRN Helicase &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xC790;&#xBC1C;&#xC801;&#xC778; &#xB3D9;&#xC885; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xC911;&#xC7AC; DNA &#xC0AD;&#xC81C;&#xB97C; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC694; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El s&#xED;ndrome de Werner es una enfermedad rara que se manifiesta como el envejecimiento prematuro y las enfermedades relacionadas con la edad. AVS es el gen mutado en WS, y es uno de los cinco miembros humanos de la familia RecQ helicasa. WS c&#xE9;lulas exhiben inestabilidad gen&#xF3;mica y la proliferaci&#xF3;n alterada, y en estudios in vitro sugieren que AVS tiene un papel en la supresi&#xF3;n de la recombinaci&#xF3;n hom&#xF3;loga. Sin embargo, estudios m&#xE1;s recientes proponen que otros RecQ helicases (incluyendo WRN) promover los primeros eventos de recombinaci&#xF3;n hom&#xF3;loga. Para estudiar el papel de la helicasa WRN de la recombinaci&#xF3;n hom&#xF3;loga espont&#xE1;nea, se obtuvo un rat&#xF3;n con un dominio helicasa WRN eliminado y lo combin&#xF3; con los estudios in vivo de ojos rosados &#x200B;&#x200B;sistema inestable de recombinaci&#xF3;n hom&#xF3;loga. En este trabajo, demostramos que WRN helicasa no es necesaria para la supresi&#xF3;n de la recombinaci&#xF3;n hom&#xF3;loga en vivo contraria a los informes anteriores utilizando un modelo de rat&#xF3;n similar.

Rat&#xF3;n WRN helicasa de dominio no es necesario para eliminaci&#xF3;n espont&#xE1;nea recombinaci&#xF3;n hom&#xF3;loga mediada por ADN

&#x7EF4;&#x5C14;&#x7EB3; &middot; &#x7EFC;&#x5408;&#x5F81;&#x662F;&#x7F55;&#x89C1;&#x7684;&#x75BE;&#x75C5;&#xFF0C;&#x8868;&#x73B0;&#x4E3A;&#x8FC7;&#x65E9;&#x8870;&#x8001;&#x548C;&#x4E0E;&#x5E74;&#x9F84;&#x6709;&#x5173;&#x7684;&#x75BE;&#x75C5;&#x3002;&#x8B66;&#x544A;&#x662F;&#x5728; WS&#xFF0C;&#x7A81;&#x53D8;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x662F;&#x4E94;&#x4EBA; RecQ &#x89E3;&#x65CB;&#x9176;&#x5BB6;&#x65CF;&#x6210;&#x5458;&#x4E4B;&#x4E00;&#x3002;WS &#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x4E0D;&#x7A33;&#x5B9A;&#x548C;&#x6539;&#x53D8;&#x6269;&#x6563;&#xFF0C;&#x548C;&#x4F53;&#x5916;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x8B66;&#x544A;&#x5177;&#x6709;&#x6291;&#x5236;&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x5EFA;&#x8BAE; &#xFF08;&#x5305;&#x62EC;&#x8B66;&#x544A;&#xFF09; &#x5176;&#x4ED6; RecQ helicases &#x4FC3;&#x8FDB;&#x65E9;&#x671F;&#x53D1;&#x751F;&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#x7684;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x3002;&#x5B66;&#x4E60;&#x4E0A;&#x81EA;&#x53D1;&#x7684;&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#x8B66;&#x544A;&#x89E3;&#x65CB;&#x9176;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x83B7;&#x5F97;&#x9F20;&#x6807;&#x4E0E;&#x5DF2;&#x5220;&#x9664;&#x7684;&#x8B66;&#x544A;&#x89E3;&#x65CB;&#x9176;&#x57DF;&#x548C;&#x5B83;&#x4E0E;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x7C89;&#x8272;&#x773C;&#x775B;&#x7684;&#x4E0D;&#x7A33;&#x5B9A;&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x76F8;&#x7ED3;&#x5408;&#x3002;&#x5728;&#x672C;&#x6587;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x8B66;&#x544A;&#x89E3;&#x65CB;&#x9176;&#x4E0D;&#x5FC5;&#x8981;&#x6291;&#x5236;&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#x4E0E;&#x524D;&#x51E0;&#x6B21;&#x62A5;&#x544A;&#x4F7F;&#x7528;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6A21;&#x578B;&#x4F53;&#x5185;&#x3002;

&#x9F20;&#x6807;&#x8B66;&#x544A;&#x89E3;&#x65CB;&#x9176;&#x57DF;&#x4E0D;&#x9700;&#x8981;&#x81EA;&#x53D1;&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#x4ECB;&#x5BFC; DNA &#x7F3A;&#x5931;&#x3002;

Werner syndrome is a rare disorder that manifests as premature aging and age-related diseases. WRN is the gene mutated in WS, and is one of five human RecQ helicase family members. WS cells exhibit genomic instability and altered proliferation, and in vitro studies suggest that WRN has a role in suppressing homologous recombination. However, more recent studies propose that other RecQ helicases (including WRN) promote early events of homologous recombination. To study the role of WRN helicase on spontaneous homologous recombination, we obtained a mouse with a deleted WRN helicase domain and combined it with the in vivo pink-eyed unstable homologous recombination system. In this paper, we demonstrate that WRN helicase is not necessary for suppressing homologous recombination in vivo contrary to previous reports using a similar mouse model.

Mouse WRN Helicase Domain Is Not Required for Spontaneous Homologous Recombination-Mediated DNA Deletion.

&#x4E0E;&#x539F;&#x4EE3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F53;&#x5916;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x62A5;&#x544A;&#x8BF4;&#xFF0C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x8FDF;&#x949D;&#x5B58;&#x5728;&#x73AF;&#x5883;&#x4E0B;&#x751F;&#x7406; O&#x2082; &#x6C34;&#x5E73;&#x76F8;&#x6BD4;&#x3002;&#x764C;&#x75C7;&#x662F;&#x4E3B;&#x8981;&#x7684;&#x5F02;&#x5E38;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x7684;&#x4E00;&#x79CD;&#x75BE;&#x75C5;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x5B66;&#x4E60;&#x73AF;&#x5883; O&#x2082; &#x4E0B;&#x751F;&#x957F;&#x7684;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53EF;&#x80FD;&#x4E0D;&#x53EF;&#x53D6;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x66F4;&#x597D;&#x5730;&#x7406;&#x89E3;&#x5BF9;&#x764C;&#x75C7;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7E41;&#x6B96; O&#x2082; &#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6BD4;&#x8F83;&#x589E;&#x957F;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x5375;&#x5DE2;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x56F4; &#xFF08;21%&#xFF09; &#x4E0B;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5C0F;&#x7EC4;&#x6216;&#x751F;&#x7406; (3%)O&#x2082;&#x3002;

14-3-3 &Sigma; &#x8868;&#x8FBE;&#x5F71;&#x54CD;&#x6C27;&#x6C14;&#x7684; G2/M &#x54CD;&#x5E94;&#x548C;&#x7684;&#x5375;&#x5DE2;&#x764C;&#x8F6C;&#x79FB;&#x5BC6;&#x5207;&#x76F8;&#x5173;&#x3002;

In vitro cell culture experiments with primary cells have reported that cell proliferation is retarded in the presence of ambient compared to physiological Oâ‚‚ levels. Cancer is primarily a disease of aberrant cell proliferation, therefore, studying cancer cells grown under ambient Oâ‚‚ may be undesirable. To understand better the impact of Oâ‚‚ on the propagation of cancer cells in vitro, we compared the growth potential of a panel of ovarian cancer cell lines under ambient (21%) or physiological (3%) Oâ‚‚.

14-3-3 Ïƒ expression effects G2/M response to oxygen and correlates with ovarian cancer metastasis.

Dans des exp&#xE9;riences de culture cellulaire in vitro avec des cellules primaires ont indiqu&#xE9; que la prolif&#xE9;ration cellulaire est retard&#xE9;e, en pr&#xE9;sence de ambiante par rapport &#xE0; physiologiques O niveaux &#x2082;. Le cancer est principalement une maladie de la prolif&#xE9;ration cellulaire aberrante, par cons&#xE9;quent, l&#x26;#39;&#xE9;tude des cellules canc&#xE9;reuses cultiv&#xE9;es dans des conditions ambiantes O &#x2082; peut &#xEA;tre ind&#xE9;sirable. Pour mieux comprendre l&#x26;#39;impact de O &#x2082; sur la propagation des cellules canc&#xE9;reuses in vitro, nous avons compar&#xE9; le potentiel de croissance d&#x26;#39;un panel de lign&#xE9;es cellulaires de cancer ovarien dans des conditions ambiantes (21%) ou physiologique (3%) O &#x2082;.

14-3-3 sigma Expression Effets G2 / M R&#xE9;ponse &#xE0; l&#x26;#39;oxyg&#xE8;ne et les corr&#xE9;lats avec m&#xE9;tastases du cancer de l&#x26;#39;ovaire

Zellproliferation in Anwesenheit der zur&uuml;ckgeblieben ist gegen&uuml;ber dem physiologischen O&#x2082; Berichten in vitro Zell-Kultur-Experimente mit Prim&auml;rzellen. Krebs ist in erster Linie eine Erkrankung der abnormale Zellproliferation, daher studieren Krebszellen unter Umgebungstemperatur O&#x2082; gewachsen kann unerw&uuml;nscht sein. Zum besseren Verst&auml;ndnis die Auswirkungen von O&#x2082; auf die Ausbreitung von Krebszellen, die in-vitro verglichen wir das Wachstum Potenzial eines Panels von Eierstock-Krebs-Zelllinien unter Umgebungstemperatur (21 %) oder physiologischer (3 %) O&#x2082;.

14-3-3 &Sigma; Ausdruck Effekten G2/M-Reaktion auf Sauerstoff und korreliert mit Eierstockkrebs Metastasen.

Gli esperimenti di cultura cellulare in vitro con cellule primarie hanno riferito che la proliferazione cellulare &egrave; ritardata in presenza di ambiente rispetto ai livelli fisiologici o &#x2082;. Il cancro &egrave; principalmente una malattia della proliferazione cellulare aberrante, pertanto, studiando le cellule tumorali coltivate in ambiente o &#x2082; potrebbe essere indesiderata. Per comprendere meglio l&#39;impatto di o &#x2082; sulla propagazione delle cellule tumorali in vitro, abbiamo confrontato la crescita potenziale di un pannello di linee di cellule di carcinoma ovarico sotto ambiente (21%) o fisiologica (3%) O &#x2082;.

14-3-3 &Sigma; espressione effetti G2/M risposta all&#39;ossigeno e correla con metastasi del cancro ovarico.

&#x521D;&#x4EE3;&#x57F9;&#x990A;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;in vitro&#x7D30;&#x80DE;&#x57F9;&#x990A;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3067;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x304C;&#x751F;&#x7406;&#x7684;&#x306A;O&#x2082;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x5468;&#x56F2;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x306E;&#x9045;&#x5EF6;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x764C;&#x306F;&#x3001;&#x4E3B;&#x306B;&#x7570;&#x5E38;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x306E;&#x75BE;&#x60A3;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x5468;&#x56F2;&#x306E;O&#x2082;&#x3067;&#x751F;&#x80B2;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x671B;&#x307E;&#x3057;&#x304F;&#x306A;&#x3044;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002; in vitro&#x3067;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x306B;O&#x2082;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x3088;&#x308A;&#x3088;&#x304F;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x5468;&#x56F2;&#x306E;&#xFF08;21&#xFF05;&#xFF09;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x751F;&#x7406;&#xFF08;3&#xFF05;&#xFF09;O&#x2082;&#x4E0B;&#x5375;&#x5DE3;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x306E;&#x30D1;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x6210;&#x9577;&#x529B;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x9178;&#x7D20;&#x3068;&#x5375;&#x5DE3;&#x304C;&#x3093;&#x306E;&#x8EE2;&#x79FB;&#x3068;&#x76F8;&#x95A2;&#x95A2;&#x4FC2;&#x306B;14-3-3&#x3C3;&#x306F;&#x5F0F;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;G2 / M&#x30EC;&#x30B9;&#x30DD;&#x30F3;&#x30B9;

1 &#xCC28; &#xC140;&#xACFC; &#xCCB4; &#xC678; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC30;&#xC591; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD; &#xC0DD;&#xB9AC; O&#x2082; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xC8FC;&#xBCC0; &#xC874;&#xC7AC; &#xC800; &#xB2A5;&#xC740; &#xBCF4;&#xACE0; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC554;&#xC740; &#xC8FC;&#xB85C; &#xD0C8; &#xC120; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD; &#xC9C8;&#xD658;, &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC8FC;&#xBCC0; O&#x2082; &#xC544;&#xB798;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC790;&#xB780; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xACF5;&#xBD80; &#xD558; &#xACE0; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC14;&#xB78C;&#xC9C1;&#xD55C;. O&#x2082; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC804;&#xD30C;&#xC5D0; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; &#xC601;&#xD5A5;, &#xB354; &#xB098;&#xC740; &#xC774;&#xD574;&#xB97C; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC131;&#xC7A5; &#xC8FC;&#xBCC0; (21%)&#xC5D0;&#xC11C; &#xB09C;&#xC18C; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778;&#xC758; &#xD328;&#xB110;&#xC758; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xB610;&#xB294; &#xC0DD;&#xB9AC; (3%)&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; O&#x2082;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

14-3-3 &Sigma; &#xC2DD; G2/M &#xC751;&#xB2F5; &#xC0B0;&#xC18C; &#xD6A8;&#xACFC; &#xBC0F; &#xB09C;&#xC18C; &#xC554; &#xC804;&#xC774; &#xAD00;&#xB828;.

En experimentos in vitro con c&#xE9;lulas de cultivo de c&#xE9;lulas primarias han informado de que la proliferaci&#xF3;n celular se retarda en presencia de ambiente en comparaci&#xF3;n con los niveles fisiol&#xF3;gicos de O $ &#x2082; $. El c&#xE1;ncer es principalmente una enfermedad de la proliferaci&#xF3;n celular aberrante, por lo tanto, el estudio de las c&#xE9;lulas cancerosas cultivadas en ambiente de O &#x2082; puede ser indeseable. Para comprender mejor el impacto de O &#x2082; en la propagaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas cancerosas in vitro, se compar&#xF3; el potencial de crecimiento de un panel de l&#xED;neas celulares de c&#xE1;ncer de ovario en condiciones ambientales (21%) o fisiol&#xF3;gicas (3%) &#x2082; O.

14-3-3 &#x3C3; Efectos Expresi&#xF3;n G2 / M la respuesta al ox&#xED;geno y se correlaciona con met&#xE1;stasis c&#xE1;ncer de ovario

&#x68C0;&#x6D4B;&#x548C;&#x4FEE;&#x590D; DNA &#x635F;&#x4F24;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x662F;&#x9884;&#x9632;&#x5404;&#x79CD;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x3002;&#x5DF2;&#x77E5;&#x529F;&#x80FD;&#x57FA;&#x56E0;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x6240;&#x6D89;&#x53CA;&#x7684;&#x635F;&#x5931;&#x662F;&#x5BFC;&#x81F4;&#x91CD;&#x5927;&#x7684;&#x53D1;&#x80B2;&#x7F3A;&#x9677;&#x548C;/&#x6216;&#x5411;&#x764C;&#x75C7;&#x6613;&#x611F;&#x6027;&#x3002;&#x8FD9;&#x7C7B; DNA &#x4FEE;&#x590D;&#x673A;&#x5236;&#x4E4B;&#x4E00;&#xFF0C;&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#xFF0C;&#x6709;&#x80FD;&#x529B;&#x4FEE;&#x590D;&#x5404;&#x79CD;&#x75C5;&#x53D8;&#x3002;&#x60F3;&#x8981;&#x5728; DNA &#x4FEE;&#x590D;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x6240;&#x6D89;&#x53CA;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x6572;&#x9664;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6A21;&#x578B;&#x7ECF;&#x5E38;&#x81F4;&#x547D;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x4F53;&#x5185;&#x7814;&#x7A76;&#x975E;&#x5E38;&#x56F0;&#x96BE;&#xFF0C;&#x5982;&#x679C;&#x4E0D;&#x662F;&#x4E0D;&#x53EF;&#x80FD;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7740;&#x624B;&#x5F00;&#x53D1;&#x4F53;&#x5185;&#x6761;&#x4EF6;&#x9F20;&#x6807;&#x6A21;&#x578B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x4FBF;&#x5229;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#x53C2;&#x4E0E;&#x8C03;&#x67E5;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6A21;&#x578B;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8861;&#x91CF;&#x4F7F;&#x7528;&#x7C89;&#x7EA2;&#x8272;&#x773C;&#x775B;&#x4E0D;&#x7A33;&#x5B9A;&#x9F20;&#x6807;&#x6A21;&#x578B;&#x65F6;&#xFF0C;&#x5728;&#x5176;&#x4E2D;&#x6211;&#x4EEC;&#x6709;&#x6761;&#x4EF6;&#x5730;&#x5207;&#x9664;&#x5168;&#x957F; Brca1 &#x6216;&#x80CC;&#x5149;&#x6A21;&#x7EC4;&#x7684;&#x81EA;&#x53D1;&#x6027;&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#x7684;&#x9891;&#x7387;&#x65E9;&#x671F;&#x53D1;&#x75C5;&#x4E73;&#x817A;&#x764C; 1&#xFF09;&#x3002;&#x5047;&#x8BBE;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x57FA;&#x56E0;&#x90FD;&#x6709;&#x53CD;&#x5BF9;&#x5728;&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x603B;&#x4E4B;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x652F;&#x6301;&#x4F53;&#x5916;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x535A;&#x83B1;&#x9709;&#x7D20;&#x6291;&#x5236;&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x5168;&#x957F; BRCA1 &#x4FC3;&#x8FDB;&#x8FD9;&#x4E00;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x3002;

&#x6709;&#x6761;&#x4EF6;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x6D4B;&#x91CF;&#x4F53;&#x5185;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x91CD;&#x8981;&#x57FA;&#x56E0;&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x7684;&#x9891;&#x7387;&#x3002;

The ability to detect and repair DNA damage is crucial to the prevention of various diseases. Loss of function of genes involved in these processes is known to result in significant developmental defects and/or predisposition to cancer. One such DNA repair mechanism, homologous recombination, has the capacity to repair a wide variety of lesions. Knockout mouse models of genes thought to be involved in DNA repair processes are frequently lethal, making in vivo studies very difficult, if not impossible. Therefore, we set out to develop an in vivo conditional mouse model system to facilitate investigations into the involvement of essential genes in homologous recombination. To test our model, we measured the frequency of spontaneous homologous recombination using the pink-eyed unstable mouse model, in which we conditionally excised either Blm or full-length Brca1 (breast cancer 1, early onset). These two genes are hypothesized to have opposing roles in homologous recombination. In summary, our in vivo data supports in vitro studies suggesting that BLM suppresses homologous recombination, while full-length BRCA1 promotes this process.

A conditional mouse model for measuring the frequency of homologous recombination events in vivo in the absence of essential genes.

La capacit&#xE9; &#xE0; d&#xE9;tecter et r&#xE9;parer les dommages &#xE0; l&#x26;#39;ADN est cruciale pour la pr&#xE9;vention de diverses maladies. La perte de fonction de g&#xE8;nes impliqu&#xE9;s dans ces processus est connu pour entra&#xEE;ner d&#x26;#39;importants d&#xE9;fauts de d&#xE9;veloppement et / ou la pr&#xE9;disposition au cancer. Un tel m&#xE9;canisme r&#xE9;paration de l&#x26;#39;ADN, la recombinaison homologue, a la capacit&#xE9; de r&#xE9;parer une grande vari&#xE9;t&#xE9; de l&#xE9;sions. Des mod&#xE8;les de souris knock-out de g&#xE8;nes seraient impliqu&#xE9;s dans les processus de r&#xE9;paration de l&#x26;#39;ADN sont souvent mortelle, ce qui rend les &#xE9;tudes in vivo tr&#xE8;s difficiles, voire impossible. Par cons&#xE9;quent, nous avons d&#xE9;cid&#xE9; de d&#xE9;velopper un syst&#xE8;me de souris in vivo mod&#xE8;le conditionnel &#xE0; faciliter les enqu&#xEA;tes sur l&#x26;#39;implication de g&#xE8;nes essentiels dans la recombinaison homologue. Pour tester notre mod&#xE8;le, nous avons mesur&#xE9; la fr&#xE9;quence de recombinaison homologue spontan&#xE9;e en utilisant le mod&#xE8;le pink-eyed souris instable, dans lequel nous conditionnellement excis&#xE9;e soit Brca1 Blm ou pleine longueur (cancer du sein 1, l&#x26;#39;apparition pr&#xE9;coce). Ces deux g&#xE8;nes sont &#xE9;mis l&#x26;#39;hypoth&#xE8;se d&#x26;#39;avoir adverse r&#xF4;les dans la recombinaison homologue. En r&#xE9;sum&#xE9;, nos donn&#xE9;es in vivo soutient des &#xE9;tudes in vitro sugg&#xE8;rent que BLM supprime la recombinaison homologue, tandis que sur toute la longueur du g&#xE8;ne BRCA1 favorise ce processus.

Un mod&#xE8;le de souris conditionnelle pour mesurer la fr&#xE9;quence des &#xE9;v&#xE9;nements de recombinaison homologue in vivo dans l&#x26;#39;absence de g&#xE8;nes essentiels

Die F&auml;higkeit zu erkennen und zu DNA-Sch&auml;den zu reparieren ist entscheidend f&uuml;r die Vermeidung von verschiedenen Krankheiten. Verlust der Funktion von Genen, die an diesen Prozessen beteiligt ist bekannt, dass erhebliche Entwicklungsst&ouml;rungen M&auml;ngel und/oder Veranlagung zu Krebs f&uuml;hren. Eine solche DNA Repair-Mechanismus, homologe Rekombination, hat die F&auml;higkeit, eine Vielzahl von Hautver&auml;nderungen zu reparieren. Knockout Mausmodelle von Genen, die an DNA-Reparaturprozesse beteiligt zu sein dachte h&auml;ufig t&ouml;dlich sind, machen in-vivo Studien sehr schwierig, wenn nicht gar unm&ouml;glich. Deshalb machten wir uns ein in-vivo bedingte Maus-Modell-System zur Erleichterung von Untersuchungen &uuml;ber die Einbeziehung der wesentlichen Gene in homologe Rekombination zu entwickeln. Um unser Modell zu testen, messen wir die H&auml;ufigkeit der spontanen homologe Rekombination mit rosa Augen unstable Mausmodell, in dem wir bedingt, Blm oder in Brca1 herausgeschnitten (Breast Cancer 1, fr&uuml;h einsetzende). Diese beiden Gene sind die Hypothese haben gegens&auml;tzliche Rollen in homologe Rekombination. Zusammenfassend l&auml;sst sich sagen unterst&uuml;tzt unsere in-vivo-Daten in-vitro-Studien, die darauf hindeutet, dass die BLM homologe Rekombination, unterdr&uuml;ckt, w&auml;hrend in BRCA1 diesen Prozess f&ouml;rdert.

Eine bedingte Maus-Modell zur Messung der Frequenz der homologen Rekombination Ereignisse in-vivo diesbez&uuml;glich keine wesentlichen Gene.

La capacit&agrave; di rilevare e riparare i danni del DNA &egrave; fondamentale per la prevenzione di varie malattie. Perdita di funzione di geni coinvolti in questi processi &egrave; noto per causare difetti di sviluppo significativi e/o predisposizione al cancro. Una tale DNA riparazione meccanismo, ricombinazione omologa, ha la capacit&agrave; di riparare un&#39;ampia variet&agrave; di lesioni. Modelli topo knockout di geni pensati per essere coinvolti nei processi di riparazione del DNA sono spesso letali, rendendo in vivo studi molto difficile, se non impossibile. Pertanto, abbiamo deciso di sviluppare un sistema di modello in vivo del mouse condizionali per agevolare le indagini, il coinvolgimento dei geni essenziali nella ricombinazione omologa. Per testare il nostro modello, abbiamo misurato la frequenza di ricombinazione omologa spontanea utilizzando il modello del mouse instabile con gli occhi rosa, in cui abbiamo asportato condizionalmente Blm o full-length Brca1 (breast cancer 1, ad esordio precoce). Questi due geni sono ipotizzati per avere opposti ruoli nella ricombinazione omologa. In sintesi, i nostri dati in vivo supporta gli studi in vitro, suggerendo che BLM sopprime la ricombinazione omologa, mentre full-length BRCA1 favorisce questo processo.

Article	Year
Homologous Recombination and Its Role in Carcinogenesis. Journal of biomedicine & biotechnology\| PubMed ID: 12488587	2002
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Atm-, p53-, and Gadd45a-deficient mice show an increased frequency of homologous recombination at different stages during development. Cancer research\| PubMed ID: 14500365	2003
Ku86 deficiency leads to reduced intrachromosomal homologous recombination in vivo in mice. DNA repair\| PubMed ID: 14706343	2004
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Mutant p53 disrupts role of ShcA protein in balancing Smad protein-dependent and -independent signaling activity of transforming growth factor-Î² (TGF-Î²). The Journal of biological chemistry\| PubMed ID: 22039050	2011
Mice heterozygous for CREB binding protein are hypersensitive to Î³-radiation and invariably develop myelodysplastic/myeloproliferative neoplasm. Experimental hematology\| PubMed ID: 22198154	2011

Alexander J. R. Bishop

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