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Use of Arabidopsis eceriferum Mutants to Explore Plant Cuticle Biosynthesis

The plant cuticle is a waxy outer covering on plants that has a primary role in water conservation, but is also an important barrier against the entry of ...

University of British Columbia - UBC

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CER4 &#x5BF9;&#x9152;&#x7CBE;&#x5F62;&#x6210;&#x8102;&#x80AA;&#x9170;&#x8F85;&#x9176;&#x8FD8;&#x539F;&#x9176;&#x53C2;&#x4E0E;&#x62DF;&#x5357;&#x82A5;&#x8868;&#x76AE;&#x8721;&#x751F;&#x4EA7;&#x8FDB;&#x884C;&#x7F16;&#x7801;&#x3002;

A waxy cuticle that serves as a protective barrier against uncontrolled water loss and environmental damage coats the aerial surfaces of land plants. It is composed of a cutin polymer matrix and waxes. Cuticular waxes are complex mixtures of very-long-chain fatty acids and their derivatives. We report here the molecular cloning and characterization of CER4, a wax biosynthetic gene from Arabidopsis (Arabidopsis thaliana). Arabidopsis cer4 mutants exhibit major decreases in stem primary alcohols and wax esters, and slightly elevated levels of aldehydes, alkanes, secondary alcohols, and ketones. This phenotype suggested that CER4 encoded an alcohol-forming fatty acyl-coenzyme A reductase (FAR). We identified eight FAR-like genes in Arabidopsis that are highly related to an alcohol-forming FAR expressed in seeds of jojoba (Simmondsia chinensis). Molecular characterization of CER4 alleles and genomic complementation revealed that one of these eight genes, At4g33790, encoded the FAR required for cuticular wax production. Expression of CER4 cDNA in yeast (Saccharomyces cerevisiae) resulted in the accumulation of C24:0 and C26:0 primary alcohols. Fully functional green fluorescent protein-tagged CER4 protein was localized to the endoplasmic reticulum in yeast cells by confocal microscopy. Analysis of gene expression by reverse transcription-PCR indicated that CER4 was expressed in leaves, stems, flowers, siliques, and roots. Expression of a beta-glucuronidase reporter gene driven by the CER4 promoter in transgenic plants was detected in epidermal cells of leaves and stems, consistent with a dedicated role for CER4 in cuticular wax biosynthesis. CER4 was also expressed in all cell types in the elongation zone of young roots. These data indicate that CER4 is an alcohol-forming FAR that has specificity for very-long-chain fatty acids and is responsible for the synthesis of primary alcohols in the epidermal cells of aerial tissues and in roots.

CER4 encodes an alcohol-forming fatty acyl-coenzyme A reductase involved in cuticular wax production in Arabidopsis.

Une cuticule cireuse qui sert de barri&#xE8;re protectrice contre la perte d&#x26;#39;eau incontr&#xF4;l&#xE9;e et manteaux dommages environnementaux les surfaces a&#xE9;riennes des plantes terrestres. Il est compos&#xE9; d&#x26;#39;une matrice polym&#xE8;re et la cutine cires. Cires cuticulaires sont des m&#xE9;langes complexes de tr&#xE8;s longue cha&#xEE;ne d&#x26;#39;acides gras et leurs d&#xE9;riv&#xE9;s. Nous rapportons ici le clonage mol&#xE9;culaire et la caract&#xE9;risation des cer4, un g&#xE8;ne de biosynth&#xE8;se de la cire d&#x26;#39;Arabidopsis (Arabidopsis thaliana). Arabidopsis cer4 mutants pr&#xE9;sentent diminue principaux alcools primaires souches et des esters de cire, et les niveaux l&#xE9;g&#xE8;rement sur&#xE9;lev&#xE9;es d&#x26;#39;ald&#xE9;hydes, des alcanes, les alcools secondaires, et les c&#xE9;tones. Ce ph&#xE9;notype a sugg&#xE9;r&#xE9; que cer4 cod&#xE9; un alcool de formation acyl-coenzyme A r&#xE9;ductase (FAR). Nous avons identifi&#xE9; huit g&#xE8;nes comme FAR-chez Arabidopsis qui sont fortement li&#xE9;s &#xE0; un (Simmondsia chinensis) l&#x26;#39;alcool formant FAR exprim&#xE9; dans les graines de jojoba. La caract&#xE9;risation mol&#xE9;culaire des all&#xE8;les et de compl&#xE9;mentation cer4 g&#xE9;nomique a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; que l&#x26;#39;un de ces huit g&#xE8;nes, At4g33790, cod&#xE9; le n&#xE9;cessaire pour la production FAR cire cuticulaire. L&#x26;#39;expression de l&#x26;#39;ADNc dans cer4 levure (Saccharomyces cerevisiae) ont abouti &#xE0; l&#x26;#39;accumulation de C24: 0 et C26: 0 alcools primaires. Enti&#xE8;rement fonctionnel prot&#xE9;ine fluorescente verte-&#xE9;tiquet&#xE9; cer4 prot&#xE9;ine a &#xE9;t&#xE9; localis&#xE9;e dans le r&#xE9;ticulum endoplasmique dans les cellules de levure par microscopie confocale. L&#x26;#39;analyse de l&#x26;#39;expression g&#xE9;nique par RT-PCR a indiqu&#xE9; que cer4 a &#xE9;t&#xE9; exprim&#xE9;e dans les feuilles, tiges, fleurs, siliques et les racines. Expression d&#x26;#39;un g&#xE8;ne rapporteur beta-glucuronidase dirig&#xE9;e par le promoteur cer4 dans les plantes transg&#xE9;niques a &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;tect&#xE9;e dans les cellules &#xE9;pidermiques des feuilles et des tiges, compatibles avec un r&#xF4;le sp&#xE9;cifique pour cer4 dans la biosynth&#xE8;se de cire cuticulaire. Cer4 a &#xE9;galement &#xE9;t&#xE9; exprim&#xE9; dans tous les types de cellules dans la zone d&#x26;#39;&#xE9;longation des racines jeunes. Ces donn&#xE9;es indiquent que cer4 est un alcool formant FAR qui a une sp&#xE9;cificit&#xE9; pour de tr&#xE8;s longue cha&#xEE;ne et acides gras est responsable de la synth&#xE8;se d&#x26;#39;alcools primaires dans les cellules &#xE9;pidermiques de tissus a&#xE9;riennes et dans les racines.

Cer4 Encode un alcool de formation acyl-coenzyme A r&#xE9;ductase impliqu&#xE9;e dans la production de cire cuticulaire chez Arabidopsis

Eine wachsartige Kutikula, die als sch&uuml;tzende Barriere gegen unkontrollierten Wasserverlust und Umweltsch&auml;den M&auml;ntel die Antenne Oberfl&auml;chen der Landpflanzen dient. Es besteht aus einer Polymermatrix Cutin und Wachse. Cuticular Wachse sind komplexe Mischungen von sehr langkettigen Fetts&auml;uren und ihre Derivate. Wir berichten hier die molekulare Klonierung und Charakterisierung von CER4, ein Wachs biosynthetischen gen von Arabidopsis (Arabidopsis Thaliana). Arabidopsis cer4 Mutanten weisen bedeutende Verringerungen der Vorbau prim&auml;ren Alkoholen und Wachsestern und leicht erh&ouml;hte Konzentrationen von Aldehyden, Alkane, sekund&auml;re Alkohole und Ketone. Dieser Ph&auml;notyp vorgeschlagen, dass CER4 ein Alkohol-bildenden fetthaltige Acyl-Coenzym A-Reduktase (FAR) codiert. Wir identifiziert acht FAR-&auml;hnliche Gene in Arabidopsis, die hoch mit einem Alkohol-bildenden weit ausgedr&uuml;ckt in Samen der Jojoba (Simmondsia Chinensis) zusammenh&auml;ngen. Molekulare Charakterisierung von CER4 Allele und genomische Erg&auml;nzung ergab, dass einer dieser acht Gene, At4g33790, FAR f&uuml;r eine cuticular Wachs Produktion codiert. Ausdruck von CER4 cDNA in der Hefe (Saccharomyces Cerevisiae) f&uuml;hrte die Anh&auml;ufung von C24:0 und C26:0 prim&auml;ren Alkoholen. Voll funktionsf&auml;higes gr&uuml;nes fluoreszierendes Protein-Tag CER4 Protein wurde auf dem Endoplasmatischen Retikulum in Hefezellen durch konfokale Mikroskopie lokalisiert. Analyse der Genexpression durch reverse Transkription-PCR ergab, dass CER4 in Bl&auml;ttern, Stengeln, Bl&uuml;ten, Schoten und Wurzeln zum Ausdruck kam. Ausdruck eines Beta-Glukuronidase-Reporter-Gens, angetrieben durch den CER4-Projekttr&auml;ger in transgenen Pflanzen wurde in Epidermiszellen der Bl&auml;tter und Stengel, mit einer dedizierten Rolle f&uuml;r CER4 in cuticular Wachs Biosynthese erkannt. CER4 wurde auch in allen Zelltypen in der Dehnung-Zone der jungen Wurzeln ausgedr&uuml;ckt. Diese Daten zeigen, dass CER4 ein Alkohol-bildenden ist fernen, die Spezifit&auml;t f&uuml;r sehr langkettigen Fetts&auml;uren und ist verantwortlich f&uuml;r die Synthese von prim&auml;ren Alkoholen in den Epidermiszellen der Antenne Gewebe und Wurzeln.

CER4 codiert ein Alkohol-bildenden fetthaltige Acyl-Coenzym cuticular Wachs Produktion in Arabidopsis eine Reduktase beteiligt.

Una cuticola cerosa che serve come una barriera protettiva contro la perdita d&#39;acqua incontrollata e cappotti di danno ambientale le superfici aeree delle piante terrestri. Esso &egrave; composto da una matrice polimerica di cutina e cere. Cere cuticolari sono miscele complesse di molto-lungo-catena acidi grassi e loro derivati. Riportiamo qui la clonazione molecolare e la caratterizzazione di CER4, un gene biosintetico cera da Arabidopsis (Arabidopsis thaliana). Mutanti di Arabidopsis cer4 esibiscono grandi diminuzioni nel gambo alcoli primari ed esteri di cera e leggermente elevati livelli di aldeidi, alcani, alcoli secondari e chetoni. Questo fenotipo ha suggerito che CER4 codificato un formando alcol grasso acil-coenzima A reduttasi (FAR). Abbiamo individuato otto geni estremo-come in Arabidopsis che sono altamente correlati ad un alcool-formando finora espressa in semi di jojoba (Simmondsia chinensis). Caratterizzazione molecolare di alleli CER4 e complementazione genomico ha rivelato che uno di questi otto geni, At4g33790, codificato l&#39;estremo necessaria per la produzione di cere cuticolari. Espressione di cDNA CER4 nel lievito (Saccharomyces cerevisiae) ha provocato l&#39;accumulo di C24:0 e alcoli di C26:0 primari. Completamente funzionale proteina fluorescente verde messo proteine CER4 era localizzata al reticolo endoplasmatico in cellule di lievito da microscopia confocal. Analisi dell&#39;espressione genica mediante PCR-trascrizione inversa indicano che CER4 &egrave; stato espresso in foglie, steli, fiori, silique e radici. Espressione di un gene reporter beta-glucuronidasi guidato dal promotore CER4 in piante transgeniche &egrave; stato rilevato in cellule epidermiche di foglie e steli, coerenti con un ruolo dedicato per CER4 nella biosintesi di cere cuticolari. CER4 &egrave; stato espresso anche in tutti i tipi di cellule nella zona di allungamento delle giovani radici. Questi dati indicano che CER4 &egrave; un alcool formando estremo che ha specificit&agrave; per molto-lungo-catena acidi grassi ed &egrave; responsabile per la sintesi di alcoli primari nelle cellule epidermiche di tessuti aerei e nelle radici.

CER4 codifica un formando alcol grasso acil-coenzima A reduttasi coinvolti nella produzione di cere cuticolari in Arabidopsis.

&#x5236;&#x5FA1;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x6C34;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x3084;&#x74B0;&#x5883;&#x7834;&#x58CA;&#x306E;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C8;&#x9678;&#x4E0A;&#x690D;&#x7269;&#x306E;&#x7A7A;&#x4E2D;&#x9762;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x4FDD;&#x8B77;&#x30D0;&#x30EA;&#x30A2;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3059;&#x308B;&#x308D;&#x3046;&#x306E;&#x30AD;&#x30E5;&#x30FC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30AF;&#x30EB;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30DD;&#x200B;&#x200B;&#x30EA;&#x30DE;&#x30FC;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3068;&#x30EF;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3067;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30AF;&#x30C1;&#x30AF;&#x30E9;&#x30EF;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306F;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x9577;&#x9396;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x305D;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x4F53;&#x306E;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x6DF7;&#x5408;&#x7269;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;CER4&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3068;&#x30AD;&#x30E3;&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30EA;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3001;&#x30B7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30CC;&#x30CA;&#x30BA;&#x30CA;&#x304B;&#x3089;&#x30EF;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x751F;&#x5408;&#x6210;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#xFF08;&#x30B7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30CC;&#x30CA;&#x30BA;&#x30CA;&#xFF09;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3002;&#x30B7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30CC;&#x30CA;&#x30BA;&#x30CA;cer4&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x5E79;&#x4E00;&#x30A2;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x3001;&#x30EF;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30A8;&#x30B9;&#x30C6;&#x30EB;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3068;&#x3001;&#x30A2;&#x30EB;&#x30C7;&#x30D2;&#x30C9;&#x985E;&#x3001;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30F3;&#x985E;&#x3001;&#x4E8C;&#x7D1A;&#x30A2;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30B1;&#x30C8;&#x30F3;&#x306E;&#x308F;&#x305A;&#x304B;&#x306B;&#x9AD8;&#x3044;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306F;CER4&#x306F;&#x30A2;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x30A2;&#x30B7;&#x30EB;&#x30B3;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B6;&#x30A4;&#x30E0;A&#x9084;&#x5143;&#x9175;&#x7D20;&#xFF08;FAR&#xFF09;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x79C1;&#x9054;&#x306F;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;FAR&#x30DB;&#x30DB;&#x30D0;&#x306E;&#x7A2E;&#x5B50;&#x4E2D;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x30A2;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#xFF08;&#x30DB;&#x30DB;&#x30D0;&#xFF09;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30B7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30CC;&#x30CA;&#x30BA;&#x30CA;&#x306E;8&#x3064;&#x306E;FAR-&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002; CER4&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3068;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x76F8;&#x88DC;&#x6027;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x7279;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;8&#x3064;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x4E00;&#x3064;&#x3001;At4g33790&#x306F;&#x3001;FAR&#x30AF;&#x30C1;&#x30AF;&#x30E9;&#x30EF;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002; 0&#x3068;C26&#xFF1A;0&#x7B2C;&#x4E00;&#x7D1A;&#x30A2;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x9175;&#x6BCD;&#x306E;cDNA CER4&#xFF08;&#x30B5;&#x30C3;&#x30AB;&#x30ED;&#x30DF;&#x30BB;&#x30B9;&#xB7;&#x30BB;&#x30EC;&#x30D3;&#x30B7;&#x30A8;&#xFF09;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;C24&#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3059;&#x308B;&#x7DD1;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30BF;&#x30B0;&#x4ED8;&#x304D;CER4&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x5171;&#x7126;&#x70B9;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x9175;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x5C0F;&#x80DE;&#x4F53;&#x306B;&#x5C40;&#x5728;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x9006;&#x8EE2;&#x5199;-PCR&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x89E3;&#x6790;&#x306F;CER4&#x306F;&#x8449;&#x3001;&#x830E;&#x3001;&#x82B1;&#x3001;siliques&#x3001;&#x6839;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x690D;&#x7269;&#x3067;CER4&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x99C6;&#x52D5;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3B2;-&#x30B0;&#x30EB;&#x30AF;&#x30ED;&#x30CB;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;&#x30AF;&#x30C1;&#x30AF;&#x30E9;&#x30EF;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x751F;&#x5408;&#x6210;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;CER4&#x5C02;&#x7528;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3066;&#x8449;&#x3084;&#x830E;&#x306E;&#x8868;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002; CER4&#x3082;&#x82E5;&#x3044;&#x6839;&#x306E;&#x4F38;&#x9577;&#x9818;&#x57DF;&#x5185;&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x578B;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;CER4&#x304C;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x9577;&#x9396;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x306B;&#x7279;&#x7570;&#x6027;&#x3092;&#x6301;&#x3061;&#x3001;&#x7A7A;&#x4E2D;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x8868;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x6839;&#x306E;&#x7B2C;&#x4E00;&#x7D1A;&#x30A2;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x5408;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8CAC;&#x4EFB;&#x304C;&#x3042;&#x308A;FAR-&#x30A2;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

CER4&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30CC;&#x30CA;&#x30BA;&#x30CA;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30AF;&#x30C1;&#x30AF;&#x30E9;&#x30EF;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x30A2;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x30A2;&#x30B7;&#x30EB;&#x30B3;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B6;&#x30A4;&#x30E0;A&#x9084;&#x5143;&#x9175;&#x7D20;&#x3092;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;

&#xD1A0;&#xC9C0; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC758; &#xACF5;&#xC911; &#xD45C;&#xBA74; &#xC81C;&#xC5B4; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xBB3C; &#xC190;&#xC2E4; &#xBC0F; &#xD658;&#xACBD; &#xD53C;&#xD574; &#xCF54;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBCF4;&#xD638;&#xBCBD;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xB294; &#xBC00;&#xB78D; &#xD45C; &#xD53C;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; cutin &#xD3F4;&#xB9AC;&#xBA38; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4;&#xC640; &#xC641; &#xC2A4;&#xB85C; &#xAD6C;&#xC131;. Cuticular &#xC641; &#xC2A4;&#xB294; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xAE34; &#xC0AC;&#xC2AC; &#xC9C0;&#xBC29;&#xC0B0;&#xACFC; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC720;&#xB3C4;&#xCCB4;&#xC758; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xD63C;&#xD569;&#xBB3C;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xBD84;&#xC790; &#xD074;&#xB85C;&#xB2DD; &#xBC0F; CER4, Arabidopsis (Arabidopsis thaliana)&#xC5D0;&#xC11C; &#xC641; &#xC2A4; &#xC0DD; &#xD569;&#xC131; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xBCF4;&#xACE0;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Arabidopsis cer4 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC804;&#xC2DC; &#xC904;&#xAE30; &#xC8FC; &#xC54C;&#xCF5C; &#xBC0F; &#xC641; &#xC2A4; &#xC5D0;&#xC2A4;&#xD14C; &#xB974; &#xC54C;&#xB370;&#xD558;&#xC774;&#xB4DC;, &#xC54C;&#xCE78;, 2 &#xCC28; &#xC54C;&#xCF54;&#xC62C;, ketones&#xC758; &#xC57D;&#xAC04; &#xB192;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC8FC;&#xC694; &#xAC10;&#xC18C;. &#xC774; &#xD615; CER4 &#xD55C; &#xC54C;&#xCF54;&#xC62C; &#xD615;&#xC131; &#xC9C0;&#xBC29; acyl-&#xCF54;&#xC5D4;&#xC790;&#xC784; (&#xC9C0;&#xAE08;&#xAE4C;&#xC9C0;)&#xC5D0; reductase &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xB41C; &#xC81C;&#xC548; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC54C;&#xCF54;&#xC62C;-&#xD615;&#xC131;&#xAE4C;&#xC9C0; &#xD638; &#xD638; &#xBC14; (Simmondsia &#xAF43;)&#xC758; &#xC528;&#xC557;&#xC744; &#xB2E8;&#xC704;&#xB85C; &#xAD00;&#xB828;&#xC774; &#xB192;&#xC740; Arabidopsis&#xC758; 8 &#xAC1C; &#xD30C; &#xAC19;&#xC740; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xACAC;. CER4 &#xB300;&#xB9BD; &#xBC0F; &#xAC8C;&#xB188; &#xBCF4;&#xC644;&#xC131;&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xD2B9;&#xC131; &#xD558;&#xB098; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; 8 &#xAC1C;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790;, At4g33790, cuticular &#xC641; &#xC2A4; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xD30C; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xB41C; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC2DD; &#xD6A8; &#xBAA8; (Saccharomyces cerevisiae)&#xC5D0;&#xC11C; CER4 Cdna&#xC758; C24:0 &#xBC0F; C26:0 &#xAE30;&#xBCF8; &#xC54C;&#xCF5C;&#xC758; &#xCD95;&#xC801; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8; &#xB2E4;. &#xC644;&#xBCBD; &#xD558; &#xAC8C; &#xC791;&#xB3D9; &#xB179;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0DC;&#xADF8; CER4 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; confocal &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD6A8; &#xBAA8; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; endoplasmic &#xADF8;&#xBB3C; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC18;&#xC804; &#xB179;&#xC74C; &#xBC29;&#xC1A1;-PCR&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D; &#xD45C;&#xC2DC; CER4 &#xC78E;, &#xC904;&#xAE30;, &#xAF43;, siliques, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xBFCC;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xD45C;&#xD604; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC2DD; &#xBCA0;&#xD0C0;-glucuronidase &#xB9AC;&#xD3EC;&#xD130; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC5D0; CER4 &#xBAA8;&#xD130;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAD6C;&#xB3D9;&#xC758; &#xC78E;&#xACFC; &#xC904;&#xAE30;, cuticular &#xC641; &#xC2A4; &#xC0DD; &#xD569;&#xC131;&#xC5D0; cer4&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC804;&#xC6A9;&#xB41C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58;&#xC758; &#xD45C; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Cer4&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xC5B4;&#xB9B0; &#xBFCC;&#xB9AC;&#xC758; &#xC2E0;&#xC7A5; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC140; &#xD615;&#xC2DD;&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; CER4 &#xC54C;&#xCF54;&#xC62C; &#xD615;&#xC131;&#xC740; &#xC9C0;&#xAE08;&#xAE4C;&#xC9C0; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xAE34; &#xC0AC;&#xC2AC; &#xC9C0;&#xBC29;&#xC0B0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD2B9;&#xC774;&#xC131;&#xC744; &#xAC00;&#xC9C0; &#xBA70; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC54C;&#xCF5C; &#xACF5;&#xC911; &#xC870;&#xC9C1;&#xC758; &#xD45C; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xBFCC;&#xB9AC;&#xC758; &#xD569;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCC45;&#xC784;.

CER4 &#xD55C; &#xC54C;&#xCF54;&#xC62C; &#xD615;&#xC131; &#xC9C0;&#xBC29; acyl-&#xCF54;&#xC5D4;&#xC790;&#xC784; Arabidopsis cuticular &#xC641; &#xC2A4; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC5D0; &#xAD00;&#xC5EC; &#xD558;&#xB294; reductase &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Una cut&#xED;cula cerosa que sirve como una barrera protectora contra la p&#xE9;rdida de agua no controlada y las capas ambientales de da&#xF1;os las superficies a&#xE9;reas de las plantas terrestres. Se compone de una matriz de pol&#xED;mero cutina y ceras. Ceras cuticulares son mezclas complejas de muy larga cadena de &#xE1;cidos grasos y sus derivados. Se presenta aqu&#xED; la clonaci&#xF3;n molecular y caracterizaci&#xF3;n de linfomas4, un gen biosint&#xE9;tico cera de Arabidopsis (Arabidopsis thaliana). Arabidopsis linfomas4 mutantes exhiben disminuciones importantes en alcoholes primarios madre y &#xE9;steres de cera, y niveles ligeramente elevados de aldeh&#xED;dos, alcanos, alcoholes secundarios, y cetonas. Este fenotipo sugiere que linfomas4 codificado un alcohol graso formador de acil-coenzima A reductasa (FAR). Se identificaron ocho FAR-como los genes en Arabidopsis que est&#xE1;n muy relacionados con un (Simmondsia chinensis) de alcohol se expresa en la formaci&#xF3;n de las FAR semillas de jojoba. Caracterizaci&#xF3;n molecular de alelos linfomas4 y complementaci&#xF3;n gen&#xF3;mico revel&#xF3; que uno de estos ocho genes, At4g33790, codific&#xF3; el FAR se requiere para la producci&#xF3;n de cera cuticular. Expresi&#xF3;n de ADNc en la levadura linfomas4 (Saccharomyces cerevisiae) dio como resultado la acumulaci&#xF3;n de C24: 0 y C26: 0 alcoholes primarios. Completamente funcional prote&#xED;na verde fluorescente de etiquetado linfomas4 prote&#xED;na se localiza en el ret&#xED;culo endopl&#xE1;smico en c&#xE9;lulas de levadura por microscop&#xED;a confocal. An&#xE1;lisis de la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica mediante PCR con transcripci&#xF3;n inversa indic&#xF3; que linfomas4 se expres&#xF3; en las hojas, tallos, flores, silicuas, y las ra&#xED;ces. Expresi&#xF3;n de un gen reportero beta-glucuronidasa dirigido por el promotor linfomas4 en plantas transg&#xE9;nicas se detect&#xF3; en las c&#xE9;lulas epid&#xE9;rmicas de las hojas y tallos, en consonancia con una funci&#xF3;n dedicada para linfomas4 en la bios&#xED;ntesis de cera cuticular. Linfomas4 tambi&#xE9;n se expres&#xF3; en todos los tipos de c&#xE9;lulas en la zona de elongaci&#xF3;n de las ra&#xED;ces j&#xF3;venes. Estos datos indican que linfomas4 es una FAR alcohol formador que tiene especificidad para muy larga cadena de &#xE1;cidos grasos y es responsable de la s&#xED;ntesis de alcoholes primarios en las c&#xE9;lulas epid&#xE9;rmicas de tejidos a&#xE9;reos y en las ra&#xED;ces.

Linfomas4 Codifica un alcohol de formaci&#xF3;n de acil-coenzima A reductasa involucrada en la producci&#xF3;n de cera cuticular en Arabidopsis

&#x89D2;&#x8D28;&#x5C42;&#x662F;&#x89D2;&#x8D28;&#x805A;&#x916F;&#x548C;&#x8721;&#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x57FA;&#x8D28;&#xFF0C;&#x6DB5;&#x76D6;&#x7A7A;&#x4E2D;&#x9646;&#x5730;&#x690D;&#x7269;&#x7684;&#x5668;&#x5B98;&#xFF0C;&#x4FDD;&#x62A4;&#x5979;&#x4EEC;&#x514D;&#x53D7;&#x73AF;&#x5883;&#x7684;&#x538B;&#x529B;&#x3002;&#x62DF;&#x5357;&#x82A5;&#x5357;&#x82A5; cer7 &#x7A81;&#x53D8;&#x5C55;&#x54C1;&#x51CF;&#x5C11;&#x89D2;&#x8D28;&#x5C42;&#x8721;&#x8D28;&#x79EF;&#x7D2F;&#x548C;&#x5305;&#x542B;&#x7684; ECERIFERUM3/WAX2/&#x6614;&#x65E5;-&#x6614;&#x65E5; (CER3/WAX2/&#x7AD6;&#x7434;&#xFF09;&#xFF0C;&#x5173;&#x952E;&#x8721;&#x751F;&#x7269;&#x5408;&#x6210;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x663E;&#x8457;&#x8F83;&#x4F4E;&#x8C08;&#x8BDD;&#x5185;&#x5BB9;&#x6C34;&#x5E73;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x5C55;&#x793A; CER7 &#x86CB;&#x767D;&#x662F;&#x5047;&#x5B9A; 3&#39;-5&#39; exoribonuclease &#x540C;&#x6E90;&#x9175;&#x6BCD;&#x6838;&#x7CD6;&#x6838;&#x9178;&#x9176; PH45 (RRP45p)&#xFF0C;&#x6838;&#x5FC3;&#x7684; RNA &#x52A0;&#x5DE5;&#x548C;&#x6709;&#x8FB1;&#x4EBA;&#x683C;&#x7684; exosome &#x63A7;&#x5236;&#x7684; CER3/WAX2/&#x7AD6;&#x7434;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x4E9A;&#x5355;&#x4F4D;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE; CER7 &#x7531;&#x7F16;&#x7801;&#x7684; CER3/WAX2/&#x7AD6;&#x7434;&#x8F6C;&#x5F55;&#x7684;&#x8D1F;&#x8C03;&#x8282;&#x7279;&#x5B9A; mRNA &#x7269;&#x79CD;&#x6709;&#x8FB1;&#x4EBA;&#x683C;&#x7684;&#x884C;&#x4E3A;&#x3002;&#x5728;&#x62DF;&#x5357;&#x82A5;&#xFF0C;&#x6307;&#x5B9A;&#x5728; RRP45a &#x4E2D;&#x627E;&#x5230;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x4E2A; RRP45p &#x540C;&#x6E90;&#x662F;&#x90E8;&#x5206;&#x529F;&#x80FD;&#x5197;&#x4F59;&#x7684; CER7&#xFF0C;&#x5E76;&#x5728;&#x62DF;&#x5357;&#x82A5;&#x4E2D;&#x7684; RRP45 &#x51FD;&#x6570;&#x7684;&#x5B8C;&#x6574;&#x635F;&#x5931;&#x662F;&#x81F4;&#x547D;&#x3002;&#x5C31;&#x6211;&#x4EEC;&#x6240;&#x77E5;&#xFF0C;CER7 &#x76EE;&#x524D;&#x662F;&#x552F;&#x4E00;&#x7684;&#x4F8B;&#x5B50;&#x7684;&#x5177;&#x4F53;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x6838;&#x5FC3; exosomal &#x4E9A;&#x5355;&#x4F4D;&#x3002;

&#x6838;&#x5FC3;&#x4E9A;&#x57FA;&#x7684;&#x964D;&#x89E3; RNA &#x52A0;&#x5DE5;/exosome &#x5177;&#x4F53;&#x5F71;&#x54CD;&#x5728;&#x62DF;&#x5357;&#x82A5;&#x4E2D;&#x89D2;&#x8D28;&#x5C42;&#x8721;&#x8D28;&#x5408;&#x6210;&#x7684;&#x3002;

The cuticle is an extracellular matrix composed of cutin polyester and waxes that covers aerial organs of land plants and protects them from environmental stresses. The Arabidopsis thaliana cer7 mutant exhibits reduced cuticular wax accumulation and contains considerably lower transcript levels of ECERIFERUM3/WAX2/YORE-YORE (CER3/WAX2/YRE), a key wax biosynthetic gene. We show here that CER7 protein is a putative 3'-5' exoribonuclease homologous to yeast Ribonuclease PH45 (RRP45p), a core subunit of the RNA processing and degrading exosome that controls the expression of CER3/WAX2/YRE. We propose that CER7 acts by degrading a specific mRNA species encoding a negative regulator of CER3/WAX2/YRE transcription. A second RRP45p homolog found in Arabidopsis, designated At RRP45a, is partially functionally redundant with CER7, and complete loss of RRP45 function in Arabidopsis is lethal. To our knowledge, CER7 is currently the only example of a core exosomal subunit specifically influencing a cellular process.

A core subunit of the RNA-processing/degrading exosome specifically influences cuticular wax biosynthesis in Arabidopsis.

La cuticule est une matrice extracellulaire compos&#xE9;e de polyester cutine et les cires qui couvre les organes a&#xE9;riens des plantes terrestres et les prot&#xE8;ge des agressions environnementales. Les Arabidopsis thaliana cer7 expositions mutants r&#xE9;duit l&#x26;#39;accumulation de c&#xE9;rumen cuticulaire et contient des niveaux nettement inf&#xE9;rieurs transcription de ECERIFERUM3/WAX2/YORE-YORE (CER3/WAX2/YRE), un g&#xE8;ne cl&#xE9; de la cire de biosynth&#xE8;se. Nous montrons ici que CER7 prot&#xE9;ine est une putative 3&#x26;#39;-5 &#x26;#39;exoribonucl&#xE9;ase homologue &#xE0; PH45 Ribonuclease levure (RRP45p), une sous-unit&#xE9; de base du traitement de l&#x26;#39;ARN et exosomes d&#xE9;gradants qui contr&#xF4;le l&#x26;#39;expression de CER3/WAX2/YRE. Nous proposons que CER7 actes par la d&#xE9;gradation d&#x26;#39;une esp&#xE8;ce d&#x26;#39;ARNm codant sp&#xE9;cifiques un r&#xE9;gulateur n&#xE9;gatif de la transcription CER3/WAX2/YRE. Un homologue RRP45p seconde trouv&#xE9; chez Arabidopsis, d&#xE9;sign&#xE9; Au RRP45a, est partiellement fonctionnellement redondant avec CER7, et la perte compl&#xE8;te de fonction RRP45 chez Arabidopsis est mortelle. &#xC0; notre connaissance, CER7 est actuellement le seul exemple d&#x26;#39;un sous-unit&#xE9; de base exosomales sp&#xE9;cifiquement influencer un processus cellulaire.

Un sous-unit&#xE9; de base de la Exosome RNA-processing/degrading Influences pr&#xE9;cis&#xE9;ment Biosynth&#xE8;se cire cuticulaire chez Arabidopsis

Die Kutikula ist eine extrazellul&auml;re Matrix, bestehend aus Cutin Polyester und Wachse, die Antenne Organe der Landpflanzen deckt und sch&uuml;tzt sie vor Umwelteinfl&uuml;sse. Der Arabidopsis Thaliana cer7 Mutant Exponate reduzierten cuticular Wachs Anh&auml;ufung und enth&auml;lt erheblich niedrigere Abschrift von ECERIFERUM3/WAX2/YORE-einst (CER3/WAX2/YRE), einem wichtigen Wachs biosynthetischen gen. Hier zeigen wir, dass CER7 Protein ist ein mutma&szlig;liches 3&#39;-5&#39; Exoribonuclease homologe zu Hefe Ribonuclease PH45 (RRP45p), ein Kern-Untereinheit der RNA Verarbeitung und erniedrigende Exosome, die den Ausdruck der CER3/WAX2/YRE steuert. Wir schlagen CER7 wirkt, indem es eine spezifische mRNA-Spezies, die Codierung eines negativen Regulator der Transkription CER3/WAX2/YRE erniedrigend. Eine zweite RRP45p Homolog gefunden in Arabidopsis, bestimmt am RRP45a, ist teilweise funktional redundant mit CER7 und vollst&auml;ndigen Funktionsverlust des RRP45 in Arabidopsis ist t&ouml;dlich. Unseres Wissens ist die CER7 derzeit das einzige Beispiel f&uuml;r eine Kern-Exosomal-Untereinheit, speziell einen zellul&auml;ren Prozess zu beeinflussen.

Eine Kern-Untereinheit des die Exosome RNA-Verarbeitung/erniedrigender beeinflusst speziell cuticular Wachs-Biosynthese in Arabidopsis.

La cuticola &egrave; una matrice extracellulare composta da poliestere cutina e cere che copre gli organi aerei delle piante terrestri e li protegge da sollecitazioni ambientali. Il mutante di Arabidopsis thaliana cer7 esibisce cere cuticolari ridotto accumulo e contiene considerevolmente pi&ugrave; bassi livelli di trascrizione di ECERIFERUM3/WAX2/un tempo-un tempo (CER3, WAX2, YRE), un gene biosintetico chiave cera. Mostriamo qui che CER7 proteina &egrave; un putativo 3&#39; -5 &#39; esoribonucleasi omologa al lievito ribonucleasi PH45 (RRP45p), una subunit&agrave; di nucleo del RNA processing e degradante exosome che controlla l&#39;espressione di CER3/WAX2/YRE. Proponiamo che CER7 agisce degradando una particolare specie di mRNA che codifica un regolatore negativo della trascrizione di CER3/WAX2/YRE. Un secondo omologo RRP45p trovato in Arabidopsis, indicato a RRP45a, &egrave; parzialmente funzionalmente ridondante con CER7 e perdita completa della funzione RRP45 in Arabidopsis &egrave; letale. A nostra conoscenza, CER7 &egrave; attualmente l&#39;unico esempio di una subunit&agrave; exosomal core specificatamente influenzare un processo cellulare.

Una subunit&agrave; di nucleo del RNA-elaborazione/degradazione exosome influenza specificamente biosintesi cuticolari cera in Arabidopsis.

&#x30AF;&#x30C1;&#x30AF;&#x30E9;&#x306F;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30DD;&#x200B;&#x200B;&#x30EA;&#x30A8;&#x30B9;&#x30C6;&#x30EB;&#x3068;&#x9678;&#x4E0A;&#x690D;&#x7269;&#x306E;&#x7A7A;&#x4E2D;&#x81D3;&#x5668;&#x3092;&#x30AB;&#x30D0;&#x30FC;&#x3057;&#x3001;&#x74B0;&#x5883;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x3092;&#x4FDD;&#x8B77;&#x3059;&#x308B;&#x30EF;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x6210;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x30B7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30CC;&#x30CA;&#x30BA;&#x30CA;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;cer7&#x5C55;&#x793A;&#x30AF;&#x30C1;&#x30AF;&#x30E9;&#x30EF;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x305B;&#x3001;ECERIFERUM3/WAX2/YORE-YORE&#xFF08;CER3/WAX2/YRE&#xFF09;&#x3001;&#x30AD;&#x30FC;&#x30EF;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x751F;&#x5408;&#x6210;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x304B;&#x306A;&#x308A;&#x4F4E;&#x3044;&#x8EE2;&#x5199;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;CER7&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x9175;&#x6BCD;&#x30EA;&#x30DC;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;PH45&#xFF08;RRP45p&#xFF09;&#x3001;CER3/WAX2/YRE&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;RNA&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x3068;&#x5206;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x30B3;&#x30A2;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x76F8;&#x540C;&#x306A;&#x63A8;&#x5B9A;3&#x26;#39;-5 &#x26;#39;exoribonuclease&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x3053;&#x3053;&#x306B;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;CER7 CER3/WAX2/YRE&#x8EE2;&#x5199;&#x306E;&#x8CA0;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3092;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;mRNA&#x7A2E;&#x306E;&#x884C;&#x70BA;&#x3002; RRP45a&#x3067;&#x6307;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30B7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30CC;&#x30CA;&#x30BA;&#x30CA;&#x3067;2&#x756A;&#x76EE;&#x306B;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;RRP45p&#x76F8;&#x540C;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;CER7&#x3068;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306B;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306B;&#x5197;&#x9577;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x30B7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30CC;&#x30CA;&#x30BA;&#x30CA;&#x306E;RRP45&#x95A2;&#x6570;&#x306E;&#x5B8C;&#x5168;&#x306A;&#x640D;&#x5931;&#x306F;&#x81F4;&#x547D;&#x7684;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x77E5;&#x308B;&#x9650;&#x308A;&#x3001;CER7&#x306F;&#x73FE;&#x5728;&#x3001;&#x7279;&#x306B;&#x7D30;&#x80DE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x30B3;&#x30A2;exosomal&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x4E00;&#x4F8B;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

RNA-processing/degrading&#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x30B3;&#x30A2;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x306B;&#x30B7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30CC;&#x30CA;&#x30BA;&#x30CA;&#x306B;&#x30AF;&#x30C1;&#x30AF;&#x30E9;&#x30EF;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x5408;&#x6210;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;

&#xD45C; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; cutin &#xD3F4; &#xB9AC; &#xC5D0;&#xC2A4;&#xD14C; &#xB974; &#xBC0F; &#xC641; &#xC2A4;&#xB85C; &#xAD6C;&#xC131; &#xB41C; &#xD1A0;&#xC9C0; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC758; &#xACF5;&#xC911; &#xAE30;&#xAD00; &#xBC0F; &#xD658;&#xACBD; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC744; &#xBCF4;&#xD638; &#xD558;&#xB294;. Arabidopsis thaliana cer7 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xCD95;&#xC801; &#xAC10;&#xC18C; cuticular &#xC641; &#xC2A4; &#xACE0; ECERIFERUM3/WAX2/&#xC61B;&#xB0A0;-&#xC61B;&#xB0A0; (CER3/WAX2/YRE), &#xD0A4; &#xC641; &#xC2A4; &#xC0DD; &#xD569;&#xC131; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD788; &#xB0AE;&#xC740; &#xC131;&#xC801; &#xC218;&#xC900; &#xD3EC;&#xD568;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0; CER7 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC740; &#xD55C; &#xC0C1; 3&#39;-5&#39; exoribonuclease &#xB3D9;&#xC885; &#xD6A8; Ribonuclease PH45 (RRP45p), &#xCC98;&#xB9AC; &#xD558; &#xACE0; CER3/WAX2/YRE&#xC758; &#xC2DD; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; exosome&#xB97C; &#xC800;&#xD558; &#xD558;&#xB294; RNA&#xC758; &#xD575;&#xC2EC; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; &#xD45C;&#xC2DC;. CER7 CER3/WAX2/YRE &#xC804;&#xC0AC;&#xC758; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;&#xB97C; &#xC778;&#xCF54;&#xB529; &#xD2B9;&#xC815; mRNA &#xC885; &#xC800;&#xD558;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC5ED;&#xD560; &#xC81C;&#xC548; &#xD55C;&#xB2E4;. Arabidopsis rrp45a&#xC5D0; &#xC9C0;&#xC815; &#xB41C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD558;&#xB294; &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; RRP45p &#xCCB4; CER7, &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC911;&#xBCF5; &#xC774;&#xBA70; &#xCE58;&#xBA85;&#xC801;&#xC778; Arabidopsis RRP45 &#xD568;&#xC218;&#xC758; &#xC644;&#xC804; &#xD55C; &#xC190;&#xC2E4; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC9C0;&#xC2DD;, CER7 &#xD604;&#xC7AC; &#xAD6C;&#xCCB4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; &#xD575;&#xC2EC; exosomal &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704;&#xC758; &#xC720;&#xC77C;&#xD55C; &#xC608;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

RNA &#xCC98;&#xB9AC;/&#xC800;&#xD558; exosome&#xC758; &#xD575;&#xC2EC; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; &#xD2B9;&#xBCC4;&#xD788; Arabidopsis&#xC758; cuticular &#xC641; &#xC2A4; &#xC0DD; &#xD569;&#xC131;&#xC744; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE69;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La cut&#xED;cula es una matriz extracelular compuesta de poli&#xE9;ster cutina y ceras que cubre los &#xF3;rganos a&#xE9;reos de las plantas terrestres y los protege del estr&#xE9;s ambiental. Los Arabidopsis thaliana mutantes cer7 exposiciones redujo la acumulaci&#xF3;n de cera cuticular y contiene considerablemente m&#xE1;s bajos niveles de transcripci&#xF3;n de ECERIFERUM3/WAX2/YORE-YORE (CER3/WAX2/YRE), un gen de bios&#xED;ntesis de cera clave. Hemos demostrado que la prote&#xED;na es CER7 una supuesta 3&#x26;#39;-5 &#x26;#39;exoribonuclease hom&#xF3;loga a la levadura ribonucleasa pH45 (RRP45p), una subunidad central del procesamiento del ARN y exosoma degradante que controla la expresi&#xF3;n de CER3/WAX2/YRE. Proponemos que CER7 actos degradantes por parte de una especie de ARNm espec&#xED;ficos que codifican un regulador negativo de la transcripci&#xF3;n CER3/WAX2/YRE. Un hom&#xF3;logo RRP45p segundo encontrado en Arabidopsis, designado en RRP45a, es parcialmente funcionalmente redundante con CER7, y la p&#xE9;rdida completa de la funci&#xF3;n RRP45 en Arabidopsis es letal. A nuestro entender, CER7 es actualmente el &#xFA;nico ejemplo de una subunidad central exosomal espec&#xED;ficamente influir en un proceso celular.

Una subunidad b&#xE1;sica de la exosoma RNA-processing/degrading concreto influye en la bios&#xED;ntesis de cera cuticular en Arabidopsis

&#x5B50;&#x77AC;&#x65F6;&#x53D7;&#x4F53;&#x6F5C;&#x5728; (TRP) &#x8FA3;&#x6912;&#x7D20;&#x53D7;&#x4F53;&#x7C7B;&#x578B; 1 (TRPV1) &#x662F;&#x914D;&#x4F53;&#x95E8;&#x63A7;&#x3001; Ca(2+) &#x900F;&#x6C34;&#x79BB;&#x5B50;&#x901A;&#x9053;&#x7684;&#x8DE8;&#x56FD;&#x6FC0;&#x8FDB;&#x515A;&#x5BB6;&#x65CF;&#x7684;&#x6E20;&#x9053;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x8868;&#x793A;&#x91CD;&#x7EC4;&#x4EBA;&#x7C7B; TRPV1 &#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x5EFA;&#x7ACB; &#xFF08;SH-SY5Y(hTRPV1))&#x3002;SH SY5Y &#x795E;&#x7ECF;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x88AB;&#x7A33;&#x5B9A;&#x8F6C;&#x67D3; hTRPV1 &#x4F7F;&#x7528; Amaxa &#x751F;&#x7269;&#x7CFB;&#x7EDF; &#xFF08;&#x6F6E;&#x9709;&#x7D20;&#x9009;&#x62E9;&#x4E0E; pIREShyg2 &#x4E2D;&#x7684; hTRPV1&#xFF09;&#x3002;&#x8FA3;&#x6912;&#x7D20;&#x3001; olvanil&#x3001; &#x6811;&#x916F;&#x6BD2;&#x7D20;&#x548C; endocannabinoid anandamide &#x589E;&#x52A0; [&#x6548;&#x80FD;&#x4E0E; Ca(2+)](i) (EC(50)) &#x503C; 2.9 nmol/L&#x3001; 34.7 nmol/L&#x3001; 0.9 nmol/L &#x548C; 4.6 &#x5FAE;&#x6469;&#x5C14;/&#x5347;&#xFF0C;&#x5206;&#x522B;&#x3002;&#x5047;&#x5B9A; endovanilloid N-arachidonoyl-&#x591A;&#x5DF4;&#x80FA;&#x589E;&#x52A0; [Ca(2+)](i)&#xFF0C;&#x4F46;&#x8FD9;&#x79CD;&#x53CD;&#x5E94;&#x6CA1;&#x6709;&#x8FBE;&#x5230;&#x6700;&#x5927;&#x503C;&#x3002;&#x8FA3;&#x6912;&#x7D20;&#x3001; anandamide&#x3001; &#x6811;&#x916F;&#x6BD2;&#x7D20;&#x548C; olvanil &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x589E;&#x52A0; [Ca(2+)](i) &#x963B;&#x788D;&#x4E86; TRPV1 &#x62EE;&#x6297;&#x5242; capsazepine &#x548C;&#x7898;&#x6811;&#x916F;&#x6BD2;&#x7D20;&#x4E0E;&#x6548;&#x529B; &#xFF08;&#x5927;&#x7EA6; 70 nmol/L &#x548C; 2 nmol/L&#x3001; K(B)) &#x5206;&#x522B;&#x3002;&#x8FA3;&#x6912;&#x7D20;&#x523A;&#x6FC0;&#x91CA;&#x653E;&#x53BB;&#x7532;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x7D20; [H (3)] pre-labelled &#x7684;&#x5355;&#x5206;&#x5B50;&#x819C;&#x7684; SH-SY5Y(hTRPV1) &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E; EC(50) &#x7684; 0.6 nmol/L &#x6307;&#x793A;&#x6269;&#x589E;&#x4E4B;&#x95F4; [Ca(2+)](i) &#x548C;&#x91CA;&#x653E;&#x3002;&#x5728;&#x704C;&#x6CE8;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x540C;&#x65F6;&#x6D4B;&#x91CF;&#x53BB;&#x7532;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x7D20;&#x91CA;&#x653E; [H (3)] &#x548C; [Ca(2+)](i) &#x548C;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684;&#x589E;&#x52A0; [Ca(2+)](i) &#x524D;&#x9762;&#x53D1;&#x5C04;&#x5668;&#x91CA;&#x653E;&#x3002;&#x8FA3;&#x6912;&#x7D20;&#x6CBB;&#x7597;&#x4E5F;&#x4EA7;&#x751F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6BD2;&#x53CD;&#x5E94; (EC(50) 155 nmol/L)&#xFF0C;&#x662F;&#x62EE;&#x6297;&#x5242;&#x654F;&#x611F;&#x548C;&#x955C;&#x50CF; [Ca(2+)](I) &#x54CD;&#x5E94;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6A21;&#x5F0F;&#x663E;&#x793A;&#x7B26;&#x5408; TRPV1 &#x6807;&#x51C6;&#x975E;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x795E;&#x7ECF;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x672C;&#x571F;&#x6587;&#x5316;&#x4E2D;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x836F;&#x7406;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;SH-SY5Y(hTRPV1) &#x7684;&#x4F18;&#x70B9;&#x662F; hTRPV1 &#x5BF9;&#x592B;&#x5987;&#x5230;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x751F;&#x5316;&#x673A;&#x68B0;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4EA7;&#x751F;&#x5927;&#x91CF;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;

&#x91CD;&#x7EC4;&#x4EBA;&#x7C7B; TRPV1 &#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x6D3B; SH SY5Y &#x795E;&#x7ECF;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x8FBE;&#x589E;&#x52A0; [Ca(2+)](i)&#xFF0C;&#x542F;&#x52A8;&#x795E;&#x7ECF;&#x9012;&#x8D28;&#x91CA;&#x653E;&#x5E76;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x8FDF;&#x53D1;&#x6027;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x3002;

The transient receptor potential (TRP) vanilloid receptor subtype 1 (TRPV1) is a ligand-gated, Ca(2+)-permeable ion channel in the TRP superfamily of channels. We report the establishment of the first neuronal model expressing recombinant human TRPV1 (SH-SY5Y(hTRPV1)). SH-SY5Y human neuroblastoma cells were stably transfected with hTRPV1 using the Amaxa Biosystem (hTRPV1 in pIREShyg2 with hygromycin selection). Capsaicin, olvanil, resiniferatoxin and the endocannabinoid anandamide increased [Ca(2+)](i) with potency (EC(50)) values of 2.9 nmol/L, 34.7 nmol/L, 0.9 nmol/L and 4.6 micromol/L, respectively. The putative endovanilloid N-arachidonoyl-dopamine increased [Ca(2+)](i) but this response did not reach a maximum. Capsaicin, anandamide, resiniferatoxin and olvanil mediated increases in [Ca(2+)](i) were inhibited by the TRPV1 antagonists capsazepine and iodo-resiniferatoxin with potencies (K(B)) of approximately 70 nmol/L and 2 nmol/L, respectively. Capsaicin stimulated the release of pre-labelled [(3)H]noradrenaline from monolayers of SH-SY5Y(hTRPV1) cells with an EC(50) of 0.6 nmol/L indicating amplification between [Ca(2+)](i) and release. In a perfusion system, we simultaneously measured [(3)H]noradrenaline release and [Ca(2+)](i) and observed that increased [Ca(2+)](i) preceded transmitter release. Capsaicin treatment also produced a cytotoxic response (EC(50) 155 nmol/L) that was antagonist-sensitive and mirrored the [Ca(2+)](I) response. This model displays pharmacology consistent with TRPV1 heterologously expressed in standard non-neuronal cells and native neuronal cultures. The advantage of SH-SY5Y(hTRPV1) is the ability of hTRPV1 to couple to neuronal biochemical machinery and produce large quantities of cells.

Activation of recombinant human TRPV1 receptors expressed in SH-SY5Y human neuroblastoma cells increases [Ca(2+)](i), initiates neurotransmitter release and promotes delayed cell death.

Le sous-type de r&eacute;cepteur une VANILLO&Iuml;DE transient receptor potentiel (TRP) 1 (TRPV1) est un canal de ligand-d&eacute;pendants, perm&eacute;able &agrave; la Ca(2+) ion de la super-famille des TRP de canaux. Nous rapportons la cr&eacute;ation du premier mod&egrave;le neuronal exprimant TRPV1 humaine recombinante (SH-SY5Y(hTRPV1)). Les cellules de neuroblastome humain SH-SY5Y ont &eacute;t&eacute; transfect&eacute;es stablement avec hTRPV1 en utilisant le biosyst&egrave;me Amaxa (hTRPV1 en pIREShyg2 avec la s&eacute;lection de l&#39;hygromycine). La capsa&iuml;cine, olvanil, r&eacute;sinif&eacute;ratoxine et l&#39;anandamide endocannabino&iuml;de augment&eacute; [Ca(2+)](i) avec puissance (valeurs EC(50)) de 2,9 nmol/L, 34,7 nmol/L, 0,9 nmol/L et 4,6 micromol/L, respectivement. Le putatif endovanilloid N-arachidonoyl-dopamine augmente [Ca(2+)](i) mais cette r&eacute;ponse n&#39;a pas atteint un maximum. La capsa&iuml;cine, l&#39;anandamide, r&eacute;sinif&eacute;ratoxine et olvanil m&eacute;di&eacute;e par des augmentations [Ca(2+)](i) sont inhib&eacute;es par le TRPV1 antagonistes la capsaz&eacute;pine et l&#39;iodo-r&eacute;sinif&eacute;ratoxine avec puissances (K(B)) d&#39;environ 70 nmol/L et 2 nmol/L, respectivement. La capsa&iuml;cine stimule la lib&eacute;ration de pr&eacute;&eacute;tiquet&eacute; [3 H] noradr&eacute;naline des monocouches de cellules de SH-SY5Y(hTRPV1) avec un EC(50) de 0,6 nmol/L indiquant d&#39;amplification entre [Ca(2+)](i) et lib&eacute;ration. Dans un syst&egrave;me de perfusion, nous avons mesur&eacute; simultan&eacute;ment la lib&eacute;ration de noradr&eacute;naline [3 H] et [Ca(2+)](i) et observ&eacute; cette augmentation [&eacute;metteur Ca(2+)](i) pr&eacute;c&eacute;d&eacute;. lib&eacute;rer Traitement de la capsa&iuml;cine a &eacute;galement produit une r&eacute;ponse cytotoxique (EC(50) 155 nmol/L) qui a &eacute;t&eacute; sensible au antagoniste et en sens inverse de la [Ca(2+)](I) r&eacute;ponse. Ce mod&egrave;le affiche compatible avec TRPV1 fa&ccedil;on h&eacute;t&eacute;rologue exprim&eacute;es dans des cellules non neuronales standards et les cultures de neurones natifs de pharmacologie. L&#39;avantage de SH-SY5Y(hTRPV1) est la capacit&eacute; des hTRPV1 &agrave; celui de machines biochimiques neuronale et produisent de grandes quantit&eacute;s de cellules.

Activation de r&eacute;cepteurs de TRPV1 recombinants humains exprim&eacute;s dans les cellules de neuroblastome humain de SH-SY5Y augmente [Ca(2+)](i), initie la lib&eacute;ration des neurotransmetteurs et favorise la mort cellulaire retard&eacute;e.

Der transienten Rezeptor potenzielle (TRP) Vanilloid-Rezeptor Subtyp unter 1 (TRPV1) ist ein ligandengesteuerte, Ca(2+)-durchl&auml;ssigen Ionenkanal in der TRP-Superfamilie der Kan&auml;le. Wir berichten die Einrichtung das erste neuronale Modell Ausdr&uuml;cken rekombinanten menschlichen TRPV1 (SH-SY5Y(hTRPV1)). SH-SY5Y menschlichen Neuroblastoma Zellen waren die mit hTRPV1 stabil transfected mit dem Amaxa Biosystem (hTRPV1 in pIREShyg2 mit Hygromycin-Auswahl). Capsaicin, Olvanil, Resiniferatoxin und das Endocannabinoid Anandamid erh&ouml;ht [Ca(2+)](i) mit Potenz (EC(50)) Werte 2,9 Nmol/L, 34,7 Nmol/L, 0, 9 Nmol/L und 4.6 Mikromol/L, beziehungsweise. Die vermeintliche Endovanilloid N-Arachidonoyl-Dopamin erh&ouml;ht [Ca(2+)](i) aber diese Antwort nicht erreicht ein Maximum. Capsaicin, Anandamid, Resiniferatoxin und Olvanil vermittelten Anstieg [Ca(2+)](i) wurden durch die TRPV1-Antagonisten Capsazepine und Iod-Resiniferatoxin mit Potenzen gehemmt (K(B)) von ca. 70 Nmol/L und 2 Nmol/L, beziehungsweise. Capsaicin stimuliert die Freisetzung von pre-labelled [(3) H] Noradrenalin aus Monolayers SH-SY5Y(hTRPV1) Zellen mit einem EC(50) von 0,6 Nmol/L, die Verst&auml;rkung zwischen [&quot;Ca(2+)](i)&quot; und &quot;Release&quot;. In einem System Perfusion wir gleichzeitig gemessen [(3) H] Noradrenalin-Freisetzung und [Ca(2+)](i) und beobachtet, dass erh&ouml;hte [Ca(2+)](i) vorangestellt Sender freizugeben. Capsaicin-Behandlung produzierte auch zytotoxische Reaktion (EC(50) 155 Nmol/L) die Antagonisten-Sensitive und gespiegelt [Ca(2+)](I) Antwort. Dieses Modell zeigt Pharmakologie TRPV1 heterologously ausgedr&uuml;ckt in nicht-neuronale Standardzellen und native neuronale Kulturen entsprechen. Der Vorteil des SH-SY5Y(hTRPV1) ist die F&auml;higkeit der hTRPV1 paar neuronale biochemischen Maschinen und produzieren gro&szlig;e Mengen von Zellen.

Aktivierung von rekombinanten menschlichen TRPV1-Rezeptoren in SH-SY5Y menschlichen Neuroblastoma Zellen ausgedr&uuml;ckt erh&ouml;ht [Ca(2+)](i), initiiert von Neurotransmitter-Freisetzung und verz&ouml;gerter Zelltod f&ouml;rdert.

Sottotipo dei recettori vanilloidi di (TRP) potenziale transient receptor 1 (TRPV1) &egrave; un canale ionico ligand-gated, Ca(2+)-permeabile nella superfamiglia dei canali TRP. Segnaliamo l&#39;istituzione del primo modello neuronale esprimendo TRPV1 umana ricombinante (SH-SY5Y(hTRPV1)). Cellule di neuroblastoma umano SH-SY5Y sono state stabilmente transfected con hTRPV1 usando il Amaxa Biosystem (hTRPV1 in pIREShyg2 con hygromycin selezione). Capsaicina, olvanil, resiniferatoxin e l&#39;endocannabinoide anandamide aumentata [Ca(2+)](i) con potenza (valori EC(50)) 2,9 nmol/L, 34,7 nmol/L, 0.9 nmol/L e 4,6 micromol/L, rispettivamente. Il endovanilloid putativo N-arachidonoil-dopamina aumentata [Ca(2+)](i) ma questa risposta non ha raggiunto un massimo. Capsaicina, anandamide, resiniferatoxin e olvanil mediata aumenti [Ca(2+)](i) sono stati inibiti dai capsazepine antagonisti TRPV1 e iodo-resiniferatoxin con potenze (K(B)) di circa 70 nmol/L e 2 nmol/L, rispettivamente. Capsaicina stimola il rilascio di noradrenalina [3 H] pre-labelled da monostrati di cellule SH-SY5Y(hTRPV1) con un EC(50) di 0,6 nmol/L che indica amplificazione tra [Ca(2+)](i) e rilascio. In un sistema di perfusione, abbiamo misurato simultaneamente il rilascio di noradrenalina [3 H] e [Ca(2+)](i) e osservato che maggiore [Ca(2+)](i) preceduto trasmettitore. rilasciare Trattamento di capsaicina produsse anche una risposta citotossica (155 EC(50) nmol/L) che fu antagonista-sensibili e specchia [Ca(2+)](I) risposta. Questo modello viene visualizzato farmacologia coerenza con TRPV1 heterologously espressa in cellule non-neuronali standard e culture native neuronale. Il vantaggio di SH-SY5Y(hTRPV1) &egrave; la capacit&agrave; di hTRPV1 di coppia per macchine biochimiche neuronali e produrre grandi quantit&agrave; di cellule.

Attivazione dei recettori TRPV1 umani ricombinanti espresso in cellule di neuroblastoma umano SH-SY5Y aumenti [Ca(2+)](i), avvia il rilascio di neurotrasmettitore e promuove la morte cellulare ritardata.

&#x904E;&#x6E21;&#x53D7;&#x5BB9;&#x5668;&#x96FB;&#x4F4D; (TRP) &#x30D0;&#x30CB;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7; 1 (TRPV1) &#x306F;&#x3001;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E; TRP &#x30B9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x3001;Ca(2+) &#x900F;&#x904E;&#x6027;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3; &#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x30D2;&#x30C8; TRPV1 &#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306E;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3092;&#x5831;&#x544A; &#xFF08;SH-SY5Y(hTRPV1))&#x3002;SH SY5Y &#x3072;&#x3068;&#x795E;&#x7D4C;&#x82BD;&#x816B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F; hTRPV1 &#x3092;&#x5B89;&#x5B9A;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x305F; Amaxa &#x30BD;&#x30D5;&#x30C8;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA; &#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0; &#xFF08;hygromycin &#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x3068; pIREShyg2 &#x3067; hTRPV1&#xFF09; &#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30AB;&#x30D7;&#x30B5;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x3001;olvanil&#x3001;resiniferatoxin&#x3001;&#x30AB;&#x30F3;&#x30CA;&#x30D3;&#x30CE;&#x30A4;&#x30C9; &#x30A2;&#x30CA;&#x30F3;&#x30C0;&#x30DF;&#x30C9;&#x5897;&#x52A0; [&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x52B9;&#x529B;&#x3092; &#xFF08;2.9 NMOL/L&#x3001;34.7 NMOL/L&#x3001;0.9 NMOL/L &#x3068; 4.6 micromol/L &#x306E; EC(50)) &#x5024;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3002;&#x63A8;&#x5B9A; endovanilloid N &#x30A2;&#x30E9;&#x30AD;&#x30C9;&#x30CE;&#x30A4;&#x30EB; &#x30C9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30DF;&#x30F3;&#x3092;&#x5897;&#x52A0; [&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306F;&#x3001;&#x6700;&#x5927;&#x304C;&#x5C4A;&#x304D;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30AB;&#x30D7;&#x30B5;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3; &#x30A2;&#x30CA;&#x30F3;&#x30C0;&#x30DF;&#x30C9;&#x3001;resiniferatoxin&#x3001;olvanil &#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F; [&#x3055;&#x305B;&#x305F; TRPV1 &#x62EE;&#x6297;&#x85AC; capsazepine &#x3068;&#x30E8;&#x30FC;&#x30C9;-resiniferatoxin &#x30DD;&#x30FC;&#x30C6;&#x30F3;&#x30B7;&#x30FC;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x963B;&#x5BB3;&#x304C;&#x8A8D;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x305F; (K(B)) &#x7D04; 70 NMOL/L &#x3068; 2 NMOL/L &#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3002;&#x30AB;&#x30D7;&#x30B5;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;0.6 &#x306E; EC(50) &#x3068; SH-SY5Y(hTRPV1) &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5358;&#x5206;&#x5B50;&#x819C;&#x304B;&#x3089; pre-labelled [3 H] &#x30CE;&#x30EB;&#x30A2;&#x30C9;&#x30EC;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x653E;&#x51FA;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0; NMOL/L &#x5897;&#x5E45; [&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3068;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3068;&#x306E;&#x9593;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x704C;&#x6D41;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x540C;&#x6642;&#x306B; [3 H] &#x30CE;&#x30EB;&#x30A2;&#x30C9;&#x30EC;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x653E;&#x51FA;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3068; [&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3068;&#x89B3;&#x5BDF; [&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x305D;&#x306E;&#x3082;&#x306E;&#x3068;&#x5897;&#x52A0;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x5148;&#x884C;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C3;&#x30BF;&#x3002;&#x30AB;&#x30D7;&#x30B5;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x51E6;&#x7F6E;&#x3082;&#x62EE;&#x6297;&#x85AC;&#x654F;&#x611F;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3001;[&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3002; &#x30DF;&#x30E9;&#x30FC;&#x5316;&#x7D30;&#x80DE;&#x50B7;&#x5BB3;&#x5FDC;&#x7B54; (EC(50) 155 nmol &#x306E;/L) &#x751F;&#x7523;&#x3053;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x85AC;&#x7406; TRPV1 heterologously &#x6A19;&#x6E96;&#x975E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x795E;&#x7D4C;&#x6587;&#x5316;&#x306E;&#x30CD;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x8868;&#x73FE;&#x3068;&#x4E00;&#x8CAB;&#x6027;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;SH-SY5Y(hTRPV1) &#x306E;&#x5229;&#x70B9; hTRPV1 &#x795E;&#x7D4C;&#x751F;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x6A5F;&#x68B0;&#x306E;&#x30AB;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EB;&#x3078;&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x91CF;&#x3092;&#x4F5C;&#x308A;&#x51FA;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x30D2;&#x30C8; TRPV1 &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316; SH SY5Y &#x3072;&#x3068;&#x795E;&#x7D4C;&#x82BD;&#x816B;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x5897;&#x52A0; [&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x4F1D;&#x9054;&#x7269;&#x8CEA;&#x653E;&#x51FA;&#x3092;&#x958B;&#x59CB;&#x3057;&#x3001;&#x9045;&#x5EF6;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC77C;&#xC2DC;&#xC801; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825; (TRP) vanilloid &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD558;&#xC704; 1 (TRPV1) &#xCC44;&#xB110;&#xC758; TRP superfamily&#xC758; &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC; &#xAC1C;&#xD3D0;, Ca(2+) &#xD22C;&#xACFC;&#xC131; &#xC774;&#xC628; &#xCC44;&#xB110; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCF4;&#xACE0; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xC778;&#xAC04; TRPV1 &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC2E0;&#xACBD; &#xBAA8;&#xB378; &#xC124;&#xB9BD; (SH-SY5Y(hTRPV1)). SH SY5Y &#xC778;&#xAC04; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC; Htrpv1&#xC640; &#xD398; &#xC548;&#xC815;&#xC801; &#xD588;&#xB2E4; Amaxa Biosystem&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; (hygromycin &#xC120;&#xD0DD;&#xACFC; Pireshyg2&#xC5D0; hTRPV1). Capsaicin, olvanil, resiniferatoxin &#xBC0F; endocannabinoid anandamide &#xC99D;&#xAC00; [&#xD798;&#xACFC; Ca(2+)](i) (EC(50)) &#xAC12; 2.9 nmol/L, 34.7 nmol/L, 0.9 nmol/L&#xC640; 4.6 micromol/L, &#xAC01;&#xAC01;. &#xC0C1; endovanilloid N-arachidonoyl-&#xB3C4;&#xD30C;&#xBBFC; &#xC99D;&#xAC00; [Ca(2+)](i) &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;&#xC774; &#xC751;&#xB2F5;&#xC774; &#xB3C4;&#xCC29; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xCD5C;&#xB300;. Capsaicin, anandamide, resiniferatoxin &#xBC0F; olvanil &#xC911;&#xC7AC; &#xC99D;&#xAC00; [Ca(2+)](i) TRPV1 &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C; capsazepine potencies&#xC640; &#xC694;&#xC624;&#xB4DC;-resiniferatoxin&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC800;&#xD574; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4; (&#xC57D; 70 nmol/L &#xBC0F; 2 nmol/L, K(B)) &#xAC01;&#xAC01;. Capsaicin &#xC790;&#xADF9; 0.6&#xC758; EC(50)&#xC640; SH-SY5Y(hTRPV1) &#xC140;&#xC758; monolayers&#xC5D0;&#xC11C; pre-labelled [(3) H] &#xB354;&#xC6B1; &#xCD9C;&#xC2DC; nmol/L [Ca(2+)](i) &#xCD9C;&#xC2DC; &#xC0AC;&#xC774; &#xC99D;&#xD3ED;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294;. &#xAD00;&#xB958; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB3D9;&#xC2DC;&#xC5D0; [(3) H] &#xB354;&#xC6B1; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xB97C; &#xCE21;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; [Ca(2+)](i) &#xAD00;&#xCC30; &#xADF8; &#xC99D;&#xAC00; [Ca(2+)](i) &#xC55E;&#xC5D0; &#xC1A1;&#xC2E0;&#xAE30; &#xCD9C;&#xC2DC;. Capsaicin &#xCE58;&#xB8CC; &#xB610;&#xD55C; &#xC0DD;&#xC0B0; cytotoxic &#xC751;&#xB2F5; (EC(50) 155 nmol/L)&#xB97C; &#xC801;&#xC5D0; &#xAC8C; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; &#xBBF8;&#xB7EC; [Ca(2+)](I) &#xC751;&#xB2F5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBAA8;&#xB378; &#xC57D;&#xB9AC;&#xD559; TRPV1 &#xD45C;&#xC900; &#xBE44; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xC2E0;&#xACBD; &#xB124;&#xC774;&#xD2F0;&#xBE0C; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD45C;&#xD604; heterologously&#xC640; &#xC77C;&#xCE58;&#xB97C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Sh-sy5y(htrpv1)&#xC758; &#xC7A5;&#xC810;&#xC740; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC0DD;&#xD654;&#xD559; &#xAE30;&#xACC4;&#xB97C; &#xBD80;&#xBD80;&#xC5D0; &#xAC8C; Htrpv1&#xC758; &#xB2A5;&#xB825; &#xC774;&#xBA70; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xB300;&#xB7C9; &#xC0DD;&#xC0B0;.

SH SY5Y &#xC778;&#xAC04; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xC778;&#xAC04; TRPV1 &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD45C;&#xD604; &#xC99D;&#xAC00; [Ca(2+)](i), &#xC2E0;&#xACBD; &#xC804;&#xB2EC; &#xBB3C;&#xC9C8; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC2DC;&#xC791; &#xD558; &#xACE0; &#xC9C0;&#xC5F0; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4;.

El receptor transitoria potencial (TRP) vaniloides receptor subtipo 1 (TRPV1) es un canal del ion Ca(2+)-permeable, ligando-bloqueado en la Superfamilia TRP de canales. Divulgamos el establecimiento del primer modelo neuronal expresando TRPV1 humana recombinante (SH-SY5Y(hTRPV1)). Las c&eacute;lulas de neuroblastoma humano SH-SY5Y estable fueron transfectadas con hTRPV1 con el Amaxa Biosystem (hTRPV1 en pIREShyg2 con Higromicina selecci&oacute;n). Capsaicina, olvanil, resiniferatoxina y el endocannabinoide anandamida aumentan [Ca(2+)](i) con potencia (EC(50)) valores de 2,9 nmol/L, 34.7 nmol/L, 0.9 nmol/L y 4.6 micromol/L, respectivamente. La supuesta endovanilloid N-arachidonoyl-dopamina aumentado [Ca(2+)](i) pero esta respuesta no lleg&oacute; a un m&aacute;ximo. Capsaicina, anandamida, resiniferatoxina y olvanil mediada por aumentos en [Ca(2+)](i) fueron inhibidos por el TRPV1 antagonistas capsazepine y iodo-resiniferatoxina con potencias (K(B)) de aproximadamente 70 nmol/L y 2 nmol/L, respectivamente. La capsaicina estimula la liberaci&oacute;n de noradrenalina de [3 H] etiquetada de monocapas de c&eacute;lulas SH-SY5Y(hTRPV1) con un EC(50) de 0.6 nmol/L, indicando la amplificaci&oacute;n entre [Ca(2+)](i) y liberaci&oacute;n. En un sistema de perfusi&oacute;n, medimos simult&aacute;neamente a la liberaci&oacute;n de noradrenalina de [3 H] y [Ca(2+)](i) y observ&oacute; que mayor [transmisor Ca(2+)](i) precedido. Suelte Tratamiento de la capsaicina tambi&eacute;n produjo una respuesta citot&oacute;xica (155 EC(50) nmol/L) que era sensible a la antagonista y reflej&oacute; la [Ca(2+)](I) respuesta. Este modelo muestra consistente con TRPV1 heterologously expresados en c&eacute;lulas no neuronales est&aacute;ndar y las culturas originarias del neuronales de la farmacolog&iacute;a. La ventaja del SH-SY5Y(hTRPV1) es la capacidad de hTRPV1 a la pareja a la maquinaria bioqu&iacute;mica neuronal y producir grandes cantidades de c&eacute;lulas.

Activaci&oacute;n de los receptores TRPV1 humanas recombinantes expresado en las c&eacute;lulas de neuroblastoma humano SH-SY5Y aumenta [Ca(2+)](i), inicia la liberaci&oacute;n de neurotransmisores y promueve la muerte celular retardada.

Anandamide N arachidonoylethanolamine AEA&#xFF09; &#x662F;&#x76EE;&#x524D;&#x51E0;&#x79CD;&#x751F;&#x7406;&#x529F;&#x80FD;&#x548C;&#x75BE;&#x75C5;&#x72B6;&#x6001;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x4EBA;&#x8840;&#x6D46;&#x4E2D;&#x7684; endocannabinoid&#x3002;AEA &#x8840;&#x6D46;&#x6D53;&#x5EA6;&#x663E;&#x8457;&#x53D8;&#x5316;&#x636E;&#x62A5;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x91CF;&#x5316; AEA &#x5145;&#x6EE1;&#x4E86;&#x65B9;&#x6CD5;&#x4E0A;&#x7684;&#x56F0;&#x96BE;&#x3002;&#x4EBA;&#x8840;&#x6D46;&#x4E2D;&#x5206;&#x6790;&#x7684; AEA &#x6B64;&#x5904;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x7684;&#x5FEB;&#x901F;&#x3001; &#x9AD8;&#x5EA6;&#x654F;&#x611F;&#x3001; &#x9C81;&#x68D2;&#x3001; &#x5177;&#x4F53;&#x4E14;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x53EF;&#x91CD;&#x73B0;&#x7684;&#x8D85;&#x9AD8;&#x6548;&#x6DB2;&#x76F8;&#x8272;&#x8C31;&#x4E32;&#x8054;&#x8D28;&#x8C31;&#x6CD5; (UPLC-MS/MS) &#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x8FD9;&#x5B8C;&#x5168;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x4F7F;&#x7528;&#x5168;&#x6EB4;&#x6C18; AEA (AEA d8) &#x4F5C;&#x4E3A;&#x5185;&#x90E8;&#x6807;&#x51C6;&#x8868;&#x793A;&#x6BD4;&#x4EE5;&#x524D;&#x6709;&#x6240;&#x6539;&#x8FDB;&#x5206;&#x6790;&#x8FD0;&#x884C;&#x65F6;&#x95F4; &#xFF08;4 &#x5206;&#x949F;&#xFF09;&#xFF0C;18.75 fmol/&#x6BEB;&#x5347;&#x8840;&#x6D46; 0.055 fmol &#x5217;&#x4E0A;&#x7684;&#xFF09; &#x7684;&#x68C0;&#x6D4B;&#x6781;&#x9650;&#x7684;&#x7CBE;&#x5EA6; &#xFF08;3.7&#x3001; 3.9 &#x548C; 1.66&#x3001; 6.65&#xFF0C;&#x548C; 133 fmol &#x5217;&#x4E0A;&#x7684; 4.8%&#x7684;&#x76F8;&#x5BF9;&#x6807;&#x51C6;&#x504F;&#x5DEE;&#xFF09; &#x548C;&#x51C6;&#x786E;&#x6027; (97.5 104.5%)&#x3002;AEA &#x5206;&#x6790;&#x662F;&#x7EBF;&#x6027;&#x8303;&#x56F4; 0.23 &#x5230; 19 nM (1.66 &#x81F3; 133 fmol &#x5217;&#x4E0A;&#xFF09;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x8BC1;&#x660E;&#x6B64;&#x65B9;&#x6CD5;&#x6D4B;&#x91CF;&#x7684; AEA &#x5404;&#x7EA7;&#x4E34;&#x5E8A;&#x6837;&#x54C1;&#x4E2D;&#x7684;&#x6709;&#x7528;&#x6027;&#xFF0C;&#x8840;&#x6D46;&#x6837;&#x54C1;&#x4ECE;&#x83B7;&#x5F97;&#x5973;&#x6027;&#x5FD7;&#x613F;&#x8005;&#x5728;&#x6708;&#x7ECF;&#x5468;&#x671F;&#x7684;&#x4E0D;&#x540C;&#x9636;&#x6BB5;&#x548C;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x5B55;&#x5987;&#x3002;AEA &#x8840;&#x6D46;&#x88AB;&#x663E;&#x8457; (P = 0.0078&#xFF09; &#x5728;&#x6708;&#x7ECF;&#x5468;&#x671F;&#x7684;&#x5375;&#x6CE1;&#x9636;&#x6BB5;&#x76F8;&#x6BD4;&#x9EC4;&#x4F53;&#x671F;&#x8F83;&#x4F4E;&#x3002;&#x6D53;&#x5EA6;&#x5728;&#x6000;&#x5B55;&#xFF0C;&#x6700;&#x4F4E;&#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#x76F8;&#x5F53;&#x4E8E;&#x90A3;&#x4E9B;&#x5728;&#x6708;&#x7ECF;&#x5468;&#x671F;&#x7684;&#x9EC4;&#x4F53;&#x671F;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x548C;&#x5C0F;&#x5E45;&#x589E;&#x52A0;&#x7B2C;&#x4E09;&#x4E2A;&#x56DB;&#x4E2A;&#x6708;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x548C;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x6B21;&#x56DB;&#x4E2A;&#x6708;&#x3002;&#x6700;&#x9AD8; AEA &#x8840;&#x6D46;&#x4E2D;&#x5987;&#x5973;&#x51FA;&#x73B0;&#x5728;&#x79EF;&#x6781;&#x7684;&#x52B3;&#x5DE5;&#xFF0C;&#x548C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x90FD;&#x5927;&#x5927; (P = 0.0147) &#x9AD8;&#x4E8E;&#x90A3;&#x4E9B;&#x6307;&#x51FA;&#x5987;&#x5973;&#x4E00;&#x8BCD;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x5728;&#x79EF;&#x6781;&#x7684;&#x52B3;&#x52A8;&#x529B;&#x3002;&#x7EDD;&#x7ECF;&#x540E;&#x7684;&#x5987;&#x5973;&#x66FE;&#x5728;&#x7EDD;&#x7ECF;&#x524D;&#x5987;&#x5973;&#x9EC4;&#x4F53;&#x671F;&#x671F;&#x95F4;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#x76F8;&#x5AB2;&#x7F8E;&#x7684; AEA &#x6D53;&#x5EA6;&#x548C;&#x663E;&#x8457; (P = 0.0389) &#x5375;&#x6CE1;&#x9636;&#x6BB5;&#x83B7;&#x5F97;&#x7684; AEA &#x8840;&#x6D46;&#x6D53;&#x5EA6;&#x8F83;&#x4F4E;&#x3002;&#x7075;&#x654F;&#x5EA6;&#x53CA;&#x7CBE;&#x786E;&#x5EA6;&#x6B64;&#x5904;&#x6240;&#x8FF0;&#x7684;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x65B9;&#x6CD5;&#x8868;&#x660E;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#x9002;&#x5408;&#x4E34;&#x5E8A;&#x6837;&#x54C1;&#x4E2D;&#x7684; AEA &#x5206;&#x6790;&#x548C;&#x8FDB;&#x884C;&#x8C03;&#x67E5;&#x7684; biomatrices &#x5305;&#x542B;&#x6570;&#x91CF;&#x6709;&#x9650;&#x7684; AEA &#x90FD;&#x53EF;&#x5229;&#x7528;&#x3002;

&#x8D85;&#x9AD8;&#x6027;&#x80FD;&#x6DB2;&#x76F8;&#x8272;&#x8C31;&#x4E32;&#x8054;&#x8D28;&#x8C31;&#x6CD5;&#x6D4B;&#x91CF;&#x65B9;&#x6CD5; anandamide &#x4EBA;&#x8840;&#x6D46;&#x4E2D;&#x3002;

Anandamide (N-arachidonoylethanolamine, AEA) is an endocannabinoid present in human plasma that is associated with several physiological functions and disease states. Significant variability in AEA plasma concentrations has been reported between studies, because quantification of AEA is fraught with methodological difficulties. A rapid, highly sensitive, robust, specific, and highly reproducible ultra high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (UPLC-MS/MS) method is described here for the analysis of AEA in human plasma. This fully validated method using octa-deuterated AEA (AEA-d8) as an internal standard represents an improvement over previous analyses in terms of run time (4 min), limit of detection (0.055 fmol on column, 18.75 fmol/ml plasma), precision (relative standard deviations of 3.7, 3.9, and 4.8% for 1.66, 6.65, and 133 fmol on column), and accuracy (97.5-104.5%). AEA analysis was linear over the range 0.23 to 19 nM (1.66 to 133 fmol on column). To demonstrate the usefulness of this method for the measurement of AEA levels in clinical samples, plasma samples obtained from female volunteers at different stages of the menstrual cycle and pregnant women were assayed. Plasma AEA concentrations were significantly (P=0.0078) lower in the luteal phase of the menstrual cycle compared to the follicular phase. In pregnancy, the concentrations were lowest in the first and second trimesters with levels comparable to those observed in the luteal phase of the menstrual cycle and modestly increased in the third trimester. The highest plasma AEA levels were observed in women in active labour, and these were significantly (P=0.0147) higher than those observed in women at term but not in active labour. Postmenopausal women had AEA concentrations comparable to levels observed during the luteal phase of premenopausal women and were significantly (P=0.0389) lower than AEA plasma concentrations obtained during the follicular phase. The sensitivity and precision of the validated method described here suggests that this method is suitable for the analysis of AEA in clinical samples and may be utilised for the investigation of biomatrices containing limited amounts of AEA.

Ultra performance liquid chromatography tandem mass spectrometry method for the measurement of anandamide in human plasma.

Anandamide (N-arachidonoylethanolamine, AEA) est un endocannabino&iuml;de pr&eacute;sent dans le plasma humain qui est associ&eacute; &agrave; plusieurs fonctions physiologiques et des &eacute;tats pathologiques. Une variabilit&eacute; significative dans les concentrations plasmatiques AEA a &eacute;t&eacute; signal&eacute;e entre les &eacute;tudes, parce que la quantification de l&#39;AEA se heurte &agrave; des difficult&eacute;s m&eacute;thodologiques. Nous d&eacute;crivons ici une m&eacute;thode de spectrom&eacute;trie de masse en tandem par chromatographie liquide (UPLC-MS/MS) haute performance ultra rapide, tr&egrave;s sensible, robuste, pr&eacute;cis et hautement reproductible pour l&#39;analyse de l&#39;AEA dans le plasma humain. Cette m&eacute;thode enti&egrave;rement valid&eacute;e &agrave; l&#39;aide de AEA octa deut&eacute;r&eacute; (AEA-d8) comme &eacute;talon interne repr&eacute;sente une am&eacute;lioration par rapport la pr&eacute;c&eacute;dente analyse en ce qui concerne le moment de l&#39;ex&eacute;cution (4 min), limite de d&eacute;tection (0,055 fmol sur colonne, 18,75 fmol/ml de plasma), pr&eacute;cision (&eacute;cart types relatifs de 3,7 3,9 et 4,8 % pour 1,66 et 6,65 133 fmol sur colonne) et l&#39;exactitude (104,5-97,5 %). Analyse de l&#39;AEA &eacute;tait lin&eacute;aire sur la bande de 0,23 &agrave; 19 nM (1,66 &agrave; 133 fmol sur colonne). Pour d&eacute;montrer l&#39;utilit&eacute; de cette m&eacute;thode pour la mesure des niveaux AEA dans les &eacute;chantillons cliniques, des &eacute;chantillons de plasma provenant de femmes volontaires &agrave; des stades diff&eacute;rents du cycle menstruel et les femmes enceintes ont &eacute;t&eacute; dos&eacute;es. Concentrations plasmatiques de l&#39;AEA &eacute;taient significativement (P = 0,0226) plus bas dans la phase lut&eacute;ale du cycle menstruel par rapport &agrave; la phase folliculaire. Pendant la grossesse, les concentrations &eacute;taient les plus faibles dans les premier et deuxi&egrave;me trimestres, avec des niveaux comparables &agrave; ceux observ&eacute;s dans la phase lut&eacute;ale du cycle menstruel et modestement augment&eacute; au troisi&egrave;me trimestre. Les plus hauts niveaux AEA plasmatique ont &eacute;t&eacute; observ&eacute;es chez les femmes dans la main-d&#39;&oelig;uvre active, et ceux-ci &eacute;taient significativement (P = 0.1152) sup&eacute;rieurs &agrave; ceux observ&eacute;s chez les femmes &agrave; terme mais pas dans la main-d&#39;&oelig;uvre active. Femmes m&eacute;nopaus&eacute;es pr&eacute;sentaient des concentrations de AEA comparables aux niveaux observ&eacute;s au cours de la phase lut&eacute;ale de la femme non m&eacute;nopaus&eacute;e et &eacute;taient significativement (P = 0.0389) plus faible que les concentrations plasmatiques AEA obtenues au cours de la phase folliculaire. La sensibilit&eacute; et la pr&eacute;cision de la m&eacute;thode valid&eacute;e d&eacute;crite ici sugg&egrave;re que cette m&eacute;thode est adapt&eacute;e pour l&#39;analyse de l&#39;AEA dans des &eacute;chantillons cliniques et peut-&ecirc;tre &ecirc;tre utilis&eacute;e pour l&#39;&eacute;tude des biomatrices contenant des quantit&eacute;s limit&eacute;es de l&#39;AEA.

M&eacute;thode spectrom&eacute;trie de masse tandem ultra performance liquid chromatography pour la mesure de l&#39;anandamide dans le plasma humain.

Anandamid (N-Arachidonoylethanolamine, AEA) ist ein Endocannabinoid im Blutplasma, die mit mehreren physiologischen Funktionen und Krankheitzust&auml;nden ist, vorhanden. Erhebliche Variabilit&auml;t der AEA-Plasmakonzentrationen wurde zwischen Studien, berichtet, weil die Quantifizierung der AEA mit methodischen Schwierigkeiten behaftet ist. Eine schnelle, hochsensible, robuste, spezifische und hoch reproduzierbare ultra high Performance liquid Chromatographie-Tandem-Massenspektrometrie (UPLC-MS/MS) Methode wird hier f&uuml;r die Analyse von AEA in humanem Plasma beschrieben. Diese vollst&auml;ndig validierten Methode mit Octa-deuterated AEA (AEA-d8) wie ein internes Standards eine Verbesserung gegen&uuml;ber der vorherigen stellt analysiert im Hinblick auf die Laufzeit (4 min), Nachweisgrenze (0,055 Fmol auf Spalte, 18,75 Fmol/ml Plasma), Genauigkeit (relative Standardabweichungen von 3,7 3,9 und 4,8 % f&uuml;r 1,66, 6,65 und 133 Fmol auf Spalte) und Genauigkeit (97,5-104,5 %). AEA-Analyse wurde linear &uuml;ber Bereich 0,23 bis 19 nM (1,66 bis 133 Fmol Spalte). Um den Nutzen dieser Methode zur Messung der AEA-Ebenen in klinischen Proben zu demonstrieren, Plasmaproben aus weiblichen Freiwilligen in den verschiedenen Phasen des Menstruationszyklus und schwangere Frauen wurden normalisiert. AEA Plasmakonzentrationen waren signifikant (P = 0.0078) in die Luteal-Phase des Menstruationszyklus im Vergleich zu der follikul&auml;ren Phase niedriger. In der Schwangerschaft waren die Konzentrationen in den ersten und zweiten Trimester mit Ebenen vergleichbar mit denen in der Luteal-Phase des Menstruationszyklus beobachtet und bescheiden stiegen im dritten Trimester am niedrigsten. Die h&ouml;chste AEA-Plasmaspiegel in aktive Arbeit bei Frauen beobachtet wurden, und diese waren erheblich (P = 0.0147) h&ouml;her als die bei Frauen am Begriff aber nicht im aktiven Arbeit zu beobachten. Frauen nach der Menopause hatte AEA Konzentrationen vergleichbar der Luteal-Phase der pr&auml;menopausalen Frauen beobachtet und waren signifikant (P = 0.0389) niedriger als AEA-Plasmaspiegel erreicht der follikul&auml;ren Phase. Die Empfindlichkeit und Genauigkeit der hier beschriebenen validierte Methode legt nahe, dass diese Methode eignet sich f&uuml;r die Analyse von AEA in klinischen Proben und f&uuml;r die Untersuchung von Biomatrices mit begrenzte Mengen an AEA genutzt werden kann.

Ultra-Performance liquid Chromatographie Tandem Massenspektrometrie Methode zur Messung von Anandamid in humanem Plasma.

Anandamide (N-arachidonoylethanolamine, AEA) &egrave; un endocannabinoide presenti nel plasma umano associato a diverse funzioni fisiologiche e Stati di malattia. Significativa variabilit&agrave; nelle concentrazioni plasmatiche AEA &egrave; stata segnalata tra gli studi, poich&eacute; la quantificazione dell&#39;AEA &egrave; irto di difficolt&agrave; metodologiche. Un metodo di rapida, altamente sensibile, robusto, specifiche e altamente riproducibile ultra high performance liquid chromatography-tandem spettrometria di massa (UPLC-MS/MS) &egrave; descritto qui per l&#39;analisi di AEA nel plasma umano. Questo metodo completamente convalidato utilizzando octa-deuterated AEA (AEA-d8) come standard interno rappresenta un miglioramento rispetto a precedenti analisi in termini di fase di esecuzione (4 min), limite di rilevazione (0.055 fmol su colonna, 18,75 fmol/ml di plasma), precisione (deviazioni standard relative di 3,7 3,9 e 4,8% per 1.66, 6.65 e 133 fmol sulla colonna) e precisione (97,5-104,5%). AEA analisi era lineare sopra la gamma 0,23 a 19 nM (1.66 a 133 fmol sulla colonna). Per dimostrare l&#39;utilit&agrave; di questo metodo per la misurazione dei livelli di AEA in campioni clinici, i campioni di plasma ottenuti da volontari femminile nelle diverse fasi del ciclo mestruale e le donne incinte sono state analizzate. Le concentrazioni plasmatiche AEA erano significativamente (P = 0.0078) pi&ugrave; bassa nella fase luteale del ciclo mestruale rispetto alla fase follicolare. In gravidanza, le concentrazioni sono state pi&ugrave; basse del primo e secondo trimestre con livelli paragonabili a quelli osservati nella fase luteale del ciclo mestruale e modestamente aumentato nel terzo trimestre. I pi&ugrave; alti livelli plasmatici di AEA sono stati osservati in donne in attivo del lavoro, e questi erano significativamente (P = 0.0147) superiori a quelli osservati nelle donne al termine, ma non nel lavoro attivo. Nelle donne in postmenopausa ha avuto concentrazioni AEA paragonabile ai livelli osservati durante la fase luteale di donne in premenopausa ed erano significativamente (P = 0.0389) inferiore a concentrazioni plasmatiche AEA ottenute durante la fase follicolare. La sensibilit&agrave; e la precisione del metodo convalidato descritto qui suggerisce che questo metodo &egrave; adatto per l&#39;analisi dell&#39;AEA in campioni clinici e pu&ograve; essere utilizzato per l&#39;indagine biomatrices che contiene una quantit&agrave; limitata di AEA.

Ultra performance liquid chromatography tandem mass spectrometry metodo per la misurazione di anandamide nel plasma umano.

&#x30A2;&#x30CA;&#x30F3;&#x30C0;&#x30DF;&#x30C9; &#xFF08;N arachidonoylethanolamine&#x3001;AEA&#xFF09;&#x3001;&#x30AB;&#x30F3;&#x30CA;&#x30D3;&#x30CE;&#x30A4;&#x30C9;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x751F;&#x7406;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3068;&#x75C5;&#x6C17;&#x306E;&#x72B6;&#x614B;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x3072;&#x3068;&#x8840;&#x6F3F;&#x4E2D;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3067;&#x3059;&#x3002;AEA &#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x65B9;&#x6CD5;&#x8AD6;&#x7684;&#x56F0;&#x96E3;&#x3092;&#x306F;&#x3089;&#x3093;&#x3067;&#x3044;&#x308B;&#x306E;&#x3067; AEA &#x8840;&#x6F3F;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x6709;&#x610F;&#x306A;&#x5909;&#x52D5;&#x306F;&#x7814;&#x7A76;&#x9593;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x3001;&#x6025;&#x901F;&#x306A;&#x6A5F;&#x5BC6;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x3001;&#x5805;&#x7262;&#x306A;&#x7279;&#x5B9A;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x518D;&#x73FE;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x8D85;&#x9AD8;&#x6027;&#x80FD;&#x6DB2;&#x4F53;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;-&#x30BF;&#x30F3;&#x30C7;&#x30E0;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x6CD5; (&#x7CBE;&#x5EA6;&#x306E;&#x6700;&#x65B0;-MS/MS&#xFF09; &#x6CD5; AEA &#x306E;&#x89E3;&#x6790;&#x3072;&#x3068;&#x8840;&#x6F3F;&#x4E2D;&#x306B;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x691C;&#x8A3C;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x3092;&#x5185;&#x90E8;&#x6A19;&#x6E96;&#x4EE5;&#x524D;&#x4EE5;&#x4E0A;&#x306E;&#x6539;&#x5584;&#x3092;&#x8868;&#x3059; octa &#x91CD;&#x6C34;&#x7D20; AEA &#xFF08;AEA &#xFF5E; d8) &#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x9762;&#x3067;&#x306F;&#x5B9F;&#x884C;&#x6642; (4 &#x5206;) &#xFF08;0.055 fmol &#x5217;&#x3001;18.75 fmol/ml &#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#xFF09; &#x306E;&#x691C;&#x51FA;&#x9650;&#x754C; (3.7&#x3001;3.9,&#x3001;1.66&#x3001;6.65&#x3001;133 fmol &#x5217;&#x3067; 4.8% &#x306E;&#x76F8;&#x5BFE;&#x6A19;&#x6E96;&#x504F;&#x5DEE;)&#x3001;&#x7CBE;&#x5EA6;&#x3068;&#x78BA;&#x5EA6; (97.5 104.5%) &#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;AEA &#x5206;&#x6790;&#x7BC4;&#x56F2; 0.23 &#x306B; 19 nM (1.66 &#x306B; 133 fmol &#x5217;&#x306B;) &#x7DDA;&#x5F62;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x81E8;&#x5E8A;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; AEA &#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x6CD5;&#x306E;&#x6709;&#x7528;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x8840;&#x6F3F;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x53D6;&#x5F97;&#x5973;&#x6027;&#x306E;&#x30DC;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30A2;&#x304B;&#x3089;&#x6708;&#x7D4C;&#x5468;&#x671F;&#x306E;&#x5404;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x3001;&#x598A;&#x5A20;&#x4E2D;&#x306E;&#x5973;&#x6027;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE; AEA &#x6FC3;&#x5EA6;&#x306F;&#x6709;&#x610F; &#xFF08;P p=0.0078&#xFF09; &#x5375;&#x80DE;&#x306E;&#x4F4D;&#x76F8;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6708;&#x7D4C;&#x5468;&#x671F;&#x306E;&#x9EC4;&#x4F53;&#x671F;&#x3067;&#x4F4E;&#x3044;&#x3002;&#x598A;&#x5A20;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306F;&#x6708;&#x7D4C;&#x5468;&#x671F;&#x306E;&#x9EC4;&#x4F53;&#x671F;&#x306B;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x3001;&#x63A7;&#x3048;&#x3081;&#x3067; 3 &#x756A;&#x76EE;&#x306E;&#x598A;&#x5A20;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x306B;&#x5339;&#x6575;&#x3059;&#x308B;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x6700;&#x521D;&#x3068; 2 &#x756A;&#x76EE;&#x306E;&#x5B66;&#x671F;&#x3067;&#x6700;&#x4F4E;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;AEA &#x306E;&#x6700;&#x9AD8;&#x8840;&#x6F3F;&#x5973;&#x6027;&#x3067;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306A;&#x52B4;&#x50CD;&#x3067;&#x8A8D;&#x3081;&#x3089;&#x308C;, &#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x304C;&#x6709;&#x610F;&#x306B;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F; &#xFF08;P = 0.0147) &#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7528;&#x8A9E;&#x3067;&#x5973;&#x6027;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306A;&#x52B4;&#x50CD;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x9AD8;&#x3044;&#x3002;&#x9589;&#x7D4C;&#x5F8C;&#x306E;&#x5973;&#x6027; AEA &#x6FC3;&#x5EA6;&#x306B;&#x5339;&#x6575;&#x3059;&#x308B;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x9589;&#x7D4C;&#x524D;&#x306E;&#x5973;&#x6027;&#x306E;&#x9EC4;&#x4F53;&#x671F;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3057;&#x3001;&#x6709;&#x610F; (P = 0.0389) &#x5375;&#x80DE;&#x671F;&#x4E2D;&#x306B;&#x53D6;&#x5F97;&#x3057;&#x305F; AEA &#x306E;&#x8840;&#x6F3F;&#x4E2D;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3088;&#x308A;&#x4F4E;&#x3044;&#x3002;&#x611F;&#x5EA6;&#x3068;&#x7CBE;&#x5EA6;&#x306E;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x305F;&#x691C;&#x8A3C;&#x6E08;&#x307F;&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306F;&#x81E8;&#x5E8A;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x306E; AEA &#x306E;&#x89E3;&#x6790;&#x306B;&#x9069;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3001;AEA &#x306E;&#x9650;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x91CF;&#x3092;&#x542B;&#x3080; biomatrices &#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x306E;&#x6D3B;&#x7528;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x8D85;&#x9AD8;&#x6027;&#x80FD;&#x6DB2;&#x4F53;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC; &#x30BF;&#x30F3;&#x30C7;&#x30E0;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x6CD5;&#x30A2;&#x30CA;&#x30F3;&#x30C0;&#x30DF;&#x30C9;&#x3072;&#x3068;&#x8840;&#x6F3F;&#x4E2D;&#x306E;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3002;

(N-arachidonoylethanolamine, AEA) Anandamide&#xB294; endocannabinoid &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBC0F; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8;&#xC5D0; &#xC874;&#xC7AC;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. AEA&#xC758; &#xC815;&#xB7C9;&#xD654; &#xBC29;&#xBC95; &#xB860; &#xC801; &#xC5B4;&#xB824;&#xC6C0;&#xC744; &#xD568;&#xAED8; &#xACE0;&#xBBFC; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; AEA &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xBCC0;&#xD654; &#xC0AC;&#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;, &#xBCF4;&#xACE0; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xAC8C;, &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C;, &#xAC15;&#xB825;&#xD55C;, &#xD2B9;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; &#xC7AC;&#xD604;&#xC131; &#xB192;&#xC740; &#xCD08; &#xACE0;&#xC131;&#xB2A5; &#xC561;&#xCCB4; &#xD06C;&#xB85C;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xADF8;&#xB798;&#xD53C; &#xD0E0;&#xB364; &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D; (UPLC MS/MS) &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB294; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8;&#xC5D0;&#xC11C; AEA&#xC758; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xC5EC;&#xAE30; &#xC124;&#xBA85; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC815;&#xBC00; (3.7, 3.9, &#xACE0; &#xC5F4;&#xC5D0; 1.66, 6.65, &#xBC0F; 133 fmol&#xC758; 4.8%&#xC758; &#xC0C1;&#xB300; &#xD45C;&#xC900; &#xD3B8;&#xCC28;), &#xACE0; &#xC815;&#xD655;&#xB3C4; (97.5 104.5%) &#xC2E4;&#xD589;&#xB41C; &#xC2DC;&#xAC04; (4 &#xBD84;), &#xD0D0;&#xC9C0; (0.055 fmol &#xC5F4;&#xC5D0;, 18.75 fmol/ml &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8;)&#xC758; &#xD55C;&#xB3C4; &#xCE21;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xC11D; &#xD558; &#xC5EC; &#xB0B4;&#xBD80; &#xD45C;&#xC900; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC774;&#xC804; &#xD1B5;&#xD574; &#xAC1C;&#xC120; octa deuterated AEA (AEA-d8)&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;&#xC774; &#xC644;&#xC804;&#xD788; &#xAC80;&#xC99D; &#xB41C; &#xBC29;&#xBC95;. AEA &#xBD84;&#xC11D; &#xC120;&#xD615; &#xBC94;&#xC704; 0.23 19 nM (&#xC5F4; 1.66 133 fmol) &#xD588;&#xB2E4;. &#xBC0F; &#xC784;&#xC0C1; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC5D0;&#xC11C; AEA &#xC218;&#xC900; &#xCE21;&#xC815;&#xC744; &#xC704;&#xD55C;&#xC774; &#xBC29;&#xBC95;&#xC758; &#xC720;&#xC6A9;&#xC131;&#xC744; &#xC785;&#xC99D;, &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xC0D8;&#xD50C; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC8FC;&#xAE30;&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5EC;&#xC131; &#xC790;&#xC6D0; &#xBD09;&#xC0AC;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC00;&#xC838;&#xC628; &#xC784;&#xC0B0;&#xBD80; &#xBD84;&#xC11D; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; AEA &#xB18D;&#xB3C4; &#xD06C;&#xAC8C; &#xD588;&#xB2E4; (P = 0.0078) follicular &#xC704;&#xC0C1;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC8FC;&#xAE30;&#xC758; luteal &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB0AE;&#xC740;. &#xC784;&#xC2E0;, &#xB18D;&#xB3C4; &#xC218;&#xC900;&#xC774; &#xADF8; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC8FC;&#xAE30;&#xC758; luteal &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xD558; &#xACE0; &#xACB8;&#xC190; &#xD558; &#xAC8C; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558;&#xB294; 3 &#xB2EC; &#xB3D9;&#xC548; &#xBE44;&#xAD50;&#xD560; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xBC0F; &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; trimesters&#xC5D0; &#xCD5C;&#xC800; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; AEA &#xC0C1;&#xBD80; &#xD65C;&#xC131; &#xB178;&#xB3D9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5EC;&#xC131;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB410;&#xB2E4; &#xACE0; &#xC774;&#xB4E4;&#xC740; &#xD06C;&#xAC8C; (P = 0.0147) &#xADF8; &#xAE30;&#xAC04;&#xC5D0; &#xC5EC;&#xC131;&#xB9CC; &#xD65C;&#xC131; &#xB178;&#xB3D9; &#xAD00;&#xCC30;. &#xD3D0; &#xACBD; &#xD6C4; &#xC5EC;&#xC131; AEA &#xB18D;&#xB3C4; &#xC218;&#xC900; premenopausal &#xC5EC;&#xC790;&#xC758; luteal &#xB2E8;&#xACC4; &#xAD00;&#xCC30; &#xB300; &#xB4F1; &#xD588; &#xACE0; &#xD06C;&#xAC8C; &#xD588;&#xB2E4; (P = 0.0389) follicular &#xB2E8;&#xACC4; &#xB3D9;&#xC548; &#xC5BB;&#xC740; AEA &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xB18D;&#xB3C4; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB0AE;&#xC740;. &#xAC10;&#xB3C4; &#xBC0F; &#xC815;&#xBC00;&#xB3C4; &#xC5EC;&#xAE30; &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xB294; &#xAC80;&#xC99D; &#xB41C; &#xBC29;&#xBC95;&#xC758;&#xC774; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC784;&#xC0C1; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC5D0;&#xC11C; AEA&#xC758; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xC801;&#xD569; &#xD558; &#xACE0; AEA &#xC81C;&#xD55C; &#xB41C; &#xC591;&#xC758; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; biomatrices&#xC758; &#xC870;&#xC0AC;&#xB97C; &#xC704;&#xD574; &#xC4F0;&#xC77C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB098;&#xC654;&#xB2E4;.

&#xC6B8;&#xD2B8;&#xB77C; &#xC131;&#xB2A5; &#xC561;&#xCCB4; &#xD06C;&#xB85C;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xADF8;&#xB798;&#xD53C; &#xD0E0;&#xB364; &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; anandamide &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xCE21;&#xC815;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C;.

Anandamida (N-arachidonoylethanolamine, AEA) es un endocannabinoide presente en el plasma humano que se asocia con varias funciones fisiol&oacute;gicas y Estados de enfermedad. Variabilidad significativa en las concentraciones plasm&aacute;ticas AEA ha divulgado entre los estudios, porque la cuantificaci&oacute;n de la AEA est&aacute; plagada de dificultades metodol&oacute;gicas. Aqu&iacute; se describe un m&eacute;todo de espectrometr&iacute;a de masas de t&aacute;ndem cromatograf&iacute;a l&iacute;quida (UPLC-MS/MS) de alto rendimiento ultra r&aacute;pido, altamente sensible, robusto, espec&iacute;fica y altamente reproducibles para el an&aacute;lisis de AEA en plasma humano. Este m&eacute;todo completamente validado como est&aacute;ndar interno representa una mejora sobre el anterior octa-deuterados AEA (AEA-d8) analiza en t&eacute;rminos de tiempo de ejecuci&oacute;n (4 minutos), l&iacute;mite de detecci&oacute;n (0.055 fmol en columna, 18,75 fmol/ml de plasma), precisi&oacute;n (desviaciones est&aacute;ndar relativas de 4,8% para fmol 1.66, 6.65 y 133 en columna, 3.7 y 3.9) y la precisi&oacute;n (97.5-104.5%). An&aacute;lisis de la AEA fue lineal sobre la gama 0.23 a 19 nM (1,66 a 133 fmol en columna). Para demostrar la utilidad de este m&eacute;todo para la medici&oacute;n de los niveles de la AEA en muestras cl&iacute;nicas, las muestras de plasma obtienen voluntarias en las diferentes etapas del ciclo menstrual y mujeres embarazadas fueron analizadas. Las concentraciones plasm&aacute;ticas de AEA fueron significativamente (P = 0.0077) menor en la fase lute&iacute;nica del ciclo menstrual en comparaci&oacute;n con la fase folicular. En el embarazo, las concentraciones fueron m&aacute;s bajas en los primeras y segundo trimestres con niveles comparables a los observados en la fase lute&iacute;nica del ciclo menstrual y aument&oacute; modestamente en el tercer trimestre. Los niveles m&aacute;s altos de la AEA de plasma fueron observados en las mujeres en trabajo de parto activo, y &eacute;stos fueron significativamente (P = 0.0147) superiores a los observados en mujeres a t&eacute;rmino pero no en trabajo activo. Mujeres postmenop&aacute;usicas ten&iacute;an concentraciones de AEA comparables a los niveles observados durante la fase l&uacute;tea de mujeres premenop&aacute;usicas y fueron significativamente (P = 0.0389) inferiores a las concentraciones plasm&aacute;ticas de la AEA obtenidas durante la fase folicular. La sensibilidad y precisi&oacute;n del m&eacute;todo validado descrito aqu&iacute; sugiere que este m&eacute;todo es adecuado para el an&aacute;lisis de AEA en muestras cl&iacute;nicas y puede ser utilizado para la investigaci&oacute;n de biomatrices que contiene una cantidad limitada de AEA.

M&eacute;todo de espectrometr&iacute;a de masas de t&aacute;ndem rendimiento ultra cromatograf&iacute;a l&iacute;quida para la medici&oacute;n de la anandamida en plasma humano.

&#x8721;&#x916F;&#x662F;&#x7531;&#x8102;&#x80AA;&#x9187;&#x548C;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5076;&#x901A;&#x5E38;&#x957F;&#x94FE;&#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&#x4E2D;&#x6027;&#x8102;&#x8D28; (C(16) &#x548C; C(18)) &#x6216;&#x94FE;&#x975E;&#x5E38;&#x957F; &#xFF08;C(20) &#x548C;&#x66F4;&#x957F;&#x65F6;&#x95F4;&#xFF09; &#x78B3;&#x7ED3;&#x6784;&#x3002;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x6709;&#x591A;&#x79CD;&#x751F;&#x7269;&#x529F;&#x80FD;&#x5728;&#x7EC6;&#x83CC;&#x3001; &#x6606;&#x866B;&#x3001; &#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x548C;&#x9646;&#x751F;&#x690D;&#x7269;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E14;&#x4EA6;&#x4E3A;&#x5404;&#x79CD;&#x5DE5;&#x4E1A;&#x5E94;&#x7528;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x57FA;&#x8D28;&#x3002;&#x5728;&#x690D;&#x7269;&#x91CC;&#xFF0C;&#x8721;&#x916F;&#x4E3B;&#x8981;&#x53D1;&#x73B0;&#x4E2D;&#x6D82;&#x5C42;&#x7684;&#x4E3B;&#x830E;&#x8868;&#x9762;&#x7684;&#x89D2;&#x8D28;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x4E5F;&#x79EF;&#x7D2F;&#x9AD8;&#x6D53;&#x5EA6;&#x79CD;&#x5B50;&#x6CB9;&#x4E2D;&#x7684;&#x51E0;&#x4E2A;&#x690D;&#x7269;&#x7269;&#x79CD;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x82AD; &#xFF08;&#x5E0C;&#x8499;&#x5F97;&#x6728;&#xFF09;&#xFF0C;&#x662F;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x5546;&#x4E1A;&#x6765;&#x6E90;&#x7684;&#x6C99;&#x6F20;&#x704C;&#x6728;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x7684;&#x8BC6;&#x522B;&#x4E0E;&#x8868;&#x5F81; WSD1&#xFF0C;&#x5728;&#x8721;&#x916F;&#x5408;&#x6210;&#x7684;&#x62DF;&#x5357;&#x82A5; (&#x62DF;&#x5357;&#x82A5;) &#x830E;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x7740;&#x5173;&#x952E;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x53CC;&#x5B98;&#x80FD;&#x56E2;&#x7684;&#x8721;&#x916F;&#x5408;&#x6210;&#x9176;/&#x7518;&#x6CB9;&#x4E8C;&#x916F;&#x9170;&#x57FA;&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176;&#x57FA;&#x56E0;&#x5BB6;&#x65CF;&#x6210;&#x5458;&#x9996;&#x6B21;&#x8BC1;&#x660E;&#x5E72;&#x8721; wsd1 &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x4E2D;&#x4E25;&#x91CD;&#x964D;&#x4F4E;&#x7684;&#x8721;&#x916F;&#x6C34;&#x5E73;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x86CB;&#x767D;&#x63D0;&#x53D6;&#x7269;&#x8868;&#x793A; WSD1 &#x7684;&#x5927;&#x80A0;&#x57C3;&#x5E0C;&#x6C0F;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x7684;&#x4F53;&#x5916;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x8868;&#x660E;&#x8FD9;&#x79CD;&#x9176;&#x5177;&#x6709;&#x9AD8;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x8721;&#x5408;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x548C;&#x5927;&#x7EA6; 10 &#x500D;&#x4F4E;&#x7EA7;&#x522B;&#x7684;&#x7518;&#x6CB9;&#x4E8C;&#x916F;&#x9170;&#x57FA;&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;WSD1 &#x57FA;&#x56E0;&#x5728;&#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD;&#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5BFC;&#x81F4;&#x79EF;&#x7D2F;&#x7684;&#x8721;&#x916F;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x7518;&#x6CB9;&#x4E09;&#x916F;&#xFF0C;&#x6307;&#x793A; WSD1 &#x4E3B;&#x8981;&#x7528;&#x4F5C;&#x8721;&#x5408;&#x9176;&#x3002;WSD1 &#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x5206;&#x6790;&#x663E;&#x793A;&#x8FD9;&#x79CD;&#x57FA;&#x56E0;&#x88AB;&#x8F6C;&#x5F55;&#x7684;&#x82B1;&#x3001; &#x830E;&#xFF0C;&#x9876;&#x90E8;&#x5206;&#x548C;&#x53F6;&#x3002;&#x529F;&#x80FD;&#x9F50;&#x5168;&#x9EC4;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x6807;&#x8BB0; WSD1 &#x86CB;&#x767D;&#x88AB;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x4E3A;&#x5185;&#x8D28;&#x7F51;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x8BE5;&#x751F;&#x7269;&#x5408;&#x6210;&#x7684;&#x8721;&#x916F;&#xFF0C;&#x9152;&#x7CBE;&#x5F62;&#x6210;&#x901A;&#x8DEF;&#x7684;&#x6700;&#x7EC8;&#x4EA7;&#x54C1;&#xFF0C;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x4E9A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8F66;&#x53A2;&#x91CC;&#x53D1;&#x751F;&#x3002;

&#x9274;&#x5B9A;&#x7684;&#x8721;&#x916F;&#x5408;&#x6210;&#x9176;/&#x9170;&#x8F85;&#x9176; a&#xFF1A; &#x7518;&#x6CB9;&#x4E8C;&#x916F;&#x9170; WSD1 &#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x5E72;&#x8721;&#x916F;&#x5408;&#x6210;&#x7684;&#x62DF;&#x5357;&#x82A5;&#x3002;

Wax esters are neutral lipids composed of aliphatic alcohols and acids, with both moieties usually long-chain (C(16) and C(18)) or very-long-chain (C(20) and longer) carbon structures. They have diverse biological functions in bacteria, insects, mammals, and terrestrial plants and are also important substrates for a variety of industrial applications. In plants, wax esters are mostly found in the cuticles coating the primary shoot surfaces, but they also accumulate to high concentrations in the seed oils of a few plant species, including jojoba (Simmondsia chinensis), a desert shrub that is the major commercial source of these compounds. Here, we report the identification and characterization of WSD1, a member of the bifunctional wax ester synthase/diacylglycerol acyltransferase gene family, which plays a key role in wax ester synthesis in Arabidopsis (Arabidopsis thaliana) stems, as first evidenced by severely reduced wax ester levels of in the stem wax of wsd1 mutants. In vitro assays using protein extracts from Escherichia coli expressing WSD1 showed that this enzyme has a high level of wax synthase activity and approximately 10-fold lower level of diacylglycerol acyltransferase activity. Expression of the WSD1 gene in Saccharomyces cerevisiae resulted in the accumulation of wax esters, but not triacylglycerol, indicating that WSD1 predominantly functions as a wax synthase. Analyses of WSD1 expression revealed that this gene is transcribed in flowers, top parts of stems, and leaves. Fully functional yellow fluorescent protein-tagged WSD1 protein was localized to the endoplasmic reticulum, demonstrating that biosynthesis of wax esters, the final products of the alcohol-forming pathway, occurs in this subcellular compartment.

Identification of the wax ester synthase/acyl-coenzyme A: diacylglycerol acyltransferase WSD1 required for stem wax ester biosynthesis in Arabidopsis.

Esters de cire sont des lipides neutres compos&#xE9;s d&#x26;#39;alcools aliphatiques et d&#x26;#39;acides, avec les deux moiti&#xE9;s habituellement &#xE0; longue cha&#xEE;ne (C (16) et C (18)) ou tr&#xE8;s longue cha&#xEE;ne structures de carbone (C (20) et plus). Ils ont diverses fonctions biologiques chez les bact&#xE9;ries, les insectes, les mammif&#xE8;res et les plantes terrestres et sont &#xE9;galement des substrats importants pour une vari&#xE9;t&#xE9; d&#x26;#39;applications industrielles. Chez les plantes, les esters de cire se trouvent principalement dans le rev&#xEA;tement des surfaces cuticules primaires pousses, mais ils peuvent &#xE9;galement s&#x26;#39;accumuler &#xE0; des concentrations &#xE9;lev&#xE9;es dans les huiles de graines de quelques esp&#xE8;ces de plantes, y compris de jojoba (Simmondsia chinensis), un arbuste du d&#xE9;sert qui est la principale source commerciale de ces compos&#xE9;s. Ici, nous rapportons l&#x26;#39;identification et la caract&#xE9;risation de WSD1, un membre de l&#x26;#39;ester de cire bifonctionnel synthase / diacylglyc&#xE9;rol acyltransf&#xE9;rase famille de g&#xE8;nes, qui joue un r&#xF4;le cl&#xE9; dans la synth&#xE8;se d&#x26;#39;esters de cire chez Arabidopsis (Arabidopsis thaliana) d&#xE9;coule, en tant que premier en &#xE9;vidence par ester de cire s&#xE9;v&#xE8;rement r&#xE9;duite les niveaux de la cire dans la tige de wsd1 mutants. Dans des tests in vitro utilisant des extraits de prot&#xE9;ines de Escherichia coli exprimant WSD1 montr&#xE9; que cette enzyme a un niveau &#xE9;lev&#xE9; d&#x26;#39;activit&#xE9; synthase cire et environ 10 fois plus faible niveau d&#x26;#39;activit&#xE9; diacylglyc&#xE9;rol acyltransf&#xE9;rase. L&#x26;#39;expression du g&#xE8;ne chez Saccharomyces cerevisiae WSD1 abouti &#xE0; l&#x26;#39;accumulation d&#x26;#39;esters de cire, mais pas triacylglyc&#xE9;rol, indiquant que les WSD1 principalement fonctionne comme un synthase cire. Les analyses de WSD1 expression a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; que ce g&#xE8;ne est transcrit dans les fleurs, les pi&#xE8;ces principales de tiges et les feuilles. Enti&#xE8;rement fonctionnelle jaune prot&#xE9;ine fluorescente-&#xE9;tiquet&#xE9; WSD1 prot&#xE9;ine a &#xE9;t&#xE9; localis&#xE9;e dans le r&#xE9;ticulum endoplasmique, ce qui d&#xE9;montre que la biosynth&#xE8;se des esters de cire, les produits finaux de la voie de l&#x26;#39;alcool de formation, se produit dans ce compartiment subcellulaire.

Identification de la synthase ester de cire / acyl-coenzyme A: WSD1 diacylglyc&#xE9;rol acyltransf&#xE9;rase n&#xE9;cessaire &#xE0; la biosynth&#xE8;se Ester souches de cire chez Arabidopsis

Wachsestern sind neutralen Lipiden bestehend aus aliphatischen Alkoholen und S&auml;uren, mit beiden Adsorptionseigenschaften normalerweise langkettige (C(16) und C(18)) oder sehr langkettigen (C(20) und l&auml;nger) Kohlenstoff-Strukturen. Sie haben vielf&auml;ltige biologische Funktionen in Bakterien, Insekten, S&auml;ugetiere und terrestrische Pflanzen und sind auch wichtige Substrate f&uuml;r eine Vielzahl industrieller Anwendungen. In Pflanzen, Wachsestern findet meist in die Nagelhaut, die Beschichtung der prim&auml;ren Shoot-Oberfl&auml;chen, aber sie sammeln auch in hohen Konzentrationen in der Samen&ouml;le wenige Pflanzenarten, einschlie&szlig;lich Jojoba (Simmondsia Chinensis), eine W&uuml;ste Strauch, der die gr&ouml;&szlig;te kommerzielle Quelle dieser Verbindungen ist. Hier berichten wir &uuml;ber die Identifizierung und Charakterisierung von WSD1, ein Mitglied der bifunktionelle Wachs Ester Synthase/Diacylglycerol Acyltransferase gen Familie, die Wachs-Ester-Synthese in Arabidopsis (Arabidopsis Thaliana) St&auml;ngel eine Schl&uuml;sselrolle spielt, als erstes stark reduzierten Wachs-Ester-Ebenen der im Vorbau Wachs wsd1 Mutanten belegt. In-vitro-Assays mit Protein Ausz&uuml;ge aus Escherichia coli Ausdr&uuml;cken WSD1 zeigte, dass dieses Enzym ein hohes Ma&szlig; an Wachs-Synthase-Aktivit&auml;t sowie etwa 10fach verbesserter unteren Diacylglycerol Acyltransferase Aktivit&auml;tsniveau hat. Ausdruck des WSD1-Gens in Saccharomyces Cerevisiae f&uuml;hrte die Anh&auml;ufung von Wachsestern, aber nicht Triacylglycerol, darauf hinweist, dass die WSD1 &uuml;berwiegend als eine Wachs-Synthase fungiert. Analysen des WSD1 Ausdrucks ergab, dass dieses Gen in Blumen, oberen Teile der Stiele, transkribiert ist und verl&auml;sst. Voll funktionsf&auml;higes fluoreszierendes Protein-Tag gelbes WSD1 Protein, Endoplasmatisches Reticulum, demonstrieren die Biosynthese von Wachsestern, die Endprodukte des Alkohol-bildenden Signalweges lokalisiert wurde, tritt in dieser subzellulare Fach.

Ermittlung der Wachs-Ester-Synthase/Acyl-Coenzym A: Diacylglycerol Acyltransferase WSD1 f&uuml;r Vorbau-Wachs-Ester-Biosynthese in Arabidopsis erforderlich.

Esteri di cera sono lipidi neutri composte da acidi, con entrambi moiety solitamente lunga catena e gli alcoli alifatici (C(16) e C(18)) o catena molto lunga (C(20) e pi&ugrave; a lungo) strutture di carbonio. Hanno diverse funzioni biologiche in batteri, insetti, mammiferi e piante terrestri e sono anche substrati importanti per una variet&agrave; di applicazioni industriali. Nelle piante, esteri di cera si trovano principalmente nelle cuticole rivestimento superfici sparare primaria, ma si accumulano anche ad elevate concentrazioni di oli di semi di alcune specie vegetali, tra cui jojoba (Simmondsia chinensis), un arbusto nel deserto che &egrave; la principale fonte commerciale di questi composti. Riportiamo l&#39;identificazione e la caratterizzazione di WSD1, un membro della cera bifunzionale estere sintasi/diacilglicerolo aciltransferasi gene famiglia, che svolge un ruolo chiave nella sintesi dell&#39;estere cera in Arabidopsis (Arabidopsis thaliana) gambi, come prima evidenziato da livelli estere cera gravemente ridotta nella cera dei mutanti wsd1 staminali. Saggi in vitro utilizzando estratti di proteina da Escherichia coli che esprimono WSD1 ha mostrato che questo enzima ha un alto livello di cera sintasi attivit&agrave; e circa 10 volte pi&ugrave; basso livello di diacilglicerolo aciltransferasi attivit&agrave;. Espressione del gene WSD1 in Saccharomyces cerevisiae ha provocato l&#39;accumulo di esteri di cera, ma non triacilglicerolo, indicando che WSD1 funziona prevalentemente come una cera sintasi. Analisi dell&#39;espressione di WSD1 ha rivelato che questo gene &egrave; trascritto in fiori, parti superiore dei gambi e foglie. Completamente funzionale proteina fluorescente gialla proteina-Tag WSD1 era localizzata al reticolo endoplasmatico, dimostrando che biosintesi di esteri di cera, i prodotti finali del percorso di formazione di alcool, si verifica in questo compartimento subcellulare.

Identificazione della cera ester sintasi/acil-coenzima r: diacilglicerolo aciltransferasi WSD1 necessaria per la biosintesi di ester staminali cera in Arabidopsis.

&#x30EF;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30A8;&#x30B9;&#x30C6;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x90E8;&#x5206;&#x306E;&#x9577;&#x9396;&#xFF08;C&#xFF08;16&#xFF09;&#x3068;C&#xFF08;18&#xFF09;&#xFF09;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x8D85;&#x9577;&#x9396;&#xFF08;C&#xFF08;20&#xFF09;&#x3068;&#x3088;&#x308A;&#x9577;&#x3044;&#xFF09;&#x70AD;&#x7D20;&#x69CB;&#x9020;&#x3067;&#x3001;&#x8102;&#x80AA;&#x65CF;&#x30A2;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068;&#x9178;&#x304B;&#x3089;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x4E2D;&#x6027;&#x8102;&#x8CEA;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x83CC;&#x3001;&#x6606;&#x866B;&#x3001;&#x54FA;&#x4E73;&#x52D5;&#x7269;&#x3001;&#x9678;&#x751F;&#x690D;&#x7269;&#x306E;&#x591A;&#x69D8;&#x306A;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x7523;&#x696D;&#x7528;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x57FA;&#x8CEA;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x690D;&#x7269;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30EF;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30A8;&#x30B9;&#x30C6;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x4E3B;&#x306B;&#x30AD;&#x30E5;&#x30FC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30AF;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x3067;&#x4E3B;&#x830E;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x30DB;&#x30DB;&#x30D0;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x690D;&#x7269;&#x7A2E;&#x306E;&#x7A2E;&#x5B50;&#x6CB9;&#x4E2D;&#x306B;&#x9AD8;&#x6FC3;&#x5EA6;&#xFF08;&#x30DB;&#x30DB;&#x30D0;&#xFF09;&#x3078;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x5546;&#x696D;&#x6E90;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x7802;&#x6F20;&#x306E;&#x4F4E;&#x6728;&#x3092;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;WSD1&#x306E;&#x540C;&#x5B9A;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7279;&#x5FB4;&#x3001;&#x30B7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30CC;&#x30CA;&#x30BA;&#x30CA;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30EF;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30A8;&#x30B9;&#x30C6;&#x30EB;&#x306E;&#x5408;&#x6210;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#xFF08;&#x30B7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30CC;&#x30CA;&#x30BA;&#x30CA;&#xFF09;&#x306E;&#x4E8C;&#x5B98;&#x80FD;&#x6027;&#x30EF;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30A8;&#x30B9;&#x30C6;&#x30EB;&#x5408;&#x6210;/&#x30B8;&#x30A2;&#x30B7;&#x30EB;&#x30B0;&#x30EA;&#x30BB;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x30A2;&#x30B7;&#x30EB;&#x57FA;&#x8EE2;&#x79FB;&#x9175;&#x7D20;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x306F;&#x6700;&#x521D;&#x8457;&#x3057;&#x304F;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x30EF;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30A8;&#x30B9;&#x30C6;&#x30EB;&#x3067;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306A;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x830E;&#x306E;&#x5831;&#x544A;wsd1&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x5E79;&#x30EF;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3067;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3002; WSD1&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x62BD;&#x51FA;&#x7269;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;in vitro&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x306F;&#x3001;&#x30EF;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30B7;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3068;&#x30B8;&#x30A2;&#x30B7;&#x30EB;&#x30B0;&#x30EA;&#x30BB;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x30A2;&#x30B7;&#x30EB;&#x57FA;&#x8EE2;&#x79FB;&#x9175;&#x7D20;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x7D04;10&#x500D;&#x4F4E;&#x3044;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002; Saccharomyces cerevisiae&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;WSD1&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;&#x30EF;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30B7;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x305D;&#x306E;WSD1&#x4E3B;&#x306B;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3001;&#x30C8;&#x30EA;&#x30A2;&#x30B7;&#x30EB;&#x30B0;&#x30EA;&#x30BB;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x3001;&#x30EF;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30A8;&#x30B9;&#x30C6;&#x30EB;&#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x3002; WSD1&#x5F0F;&#x306E;&#x89E3;&#x6790;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x82B1;&#x3001;&#x830E;&#x306E;&#x9802;&#x90E8;&#x3001;&#x8449;&#x306B;&#x8EE2;&#x5199;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3059;&#x308B;&#x9EC4;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30BF;&#x30B0;&#x4ED8;&#x304D;WSD1&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x5C0F;&#x80DE;&#x4F53;&#x306B;&#x5C40;&#x5728;&#x3057;&#x305F;&#x3001;&#x30EF;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30A8;&#x30B9;&#x30C6;&#x30EB;&#x3001;&#x30A2;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x6700;&#x7D42;&#x751F;&#x6210;&#x7269;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5408;&#x6210;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3067;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30EF;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30A8;&#x30B9;&#x30C6;&#x30EB;&#x5408;&#x6210;&#x9175;&#x7D20;/&#x30A2;&#x30B7;&#x30EB;&#x30B3;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B6;&#x30A4;&#x30E0;A&#x306E;&#x540C;&#x5B9A;&#xFF1A;&#x30B7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30CC;&#x30CA;&#x30BA;&#x30CA;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x830E;&#x306E;&#x30EF;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30A8;&#x30B9;&#x30C6;&#x30EB;&#x306E;&#x751F;&#x5408;&#x6210;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x30B8;&#x30A2;&#x30B7;&#x30EB;&#x30B0;&#x30EA;&#x30BB;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x30A2;&#x30B7;&#x30EB;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;WSD1

&#xC641; &#xC2A4; &#xC5D0;&#xC2A4;&#xD14C; &#xB974;&#xB294; &#xC9C0;&#xBC29; &#xC871; &#xC54C;&#xCF5C;&#xACFC; &#xC0B0; &#xB450; moieties &#xBCF4;&#xD1B5; &#xAE34; &#xCCB4;&#xC778;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xB8E8;&#xC5B4;&#xC9C4; &#xC911;&#xC131; &#xC9C0;&#xC9C8; (C(16) &#xBC0F; C(18)) &#xB610;&#xB294; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xAE34; &#xCCB4;&#xC778; (C(20) &#xC774;&#xC0C1;) &#xD0C4;&#xC18C; &#xAD6C;&#xC870;. &#xADF8;&#xB4E4; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;, &#xACE4;&#xCDA9;, &#xD3EC;&#xC720;&#xB958;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC9C0;&#xC0C1;&#xD30C; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xC788;&#xACE0; &#xB610;&#xD55C; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC0B0;&#xC5C5; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAE30;&#xD310;. &#xC8FC;&#xB85C; &#xC2DD;&#xBB3C;, &#xC641; &#xC2A4; &#xC5D0;&#xC2A4;&#xD14C; &#xB974;&#xB294; &#xAE30;&#xBCF8; &#xCD2C;&#xC601; &#xD45C;&#xBA74; &#xCF54;&#xD305; &#xC190;&#xD1B1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xB610;&#xD55C; &#xC528;&#xC557; &#xC624;&#xC77C; &#xD638; &#xD638; &#xBC14; (Simmondsia &#xAF43;)&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD55C; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC2DD;&#xBB3C; &#xC885;&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xB18D;&#xB3C4;&#xB97C; &#xCD95;&#xC801;&#xC774; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xC0C1;&#xC6A9; &#xC18C;&#xC2A4;&#xB294; &#xC0AC;&#xB9C9;&#xC758; &#xAD00;&#xBAA9;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; WSD1, Arabidopsis (Arabidopsis thaliana) &#xC904;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC641; &#xC2A4; &#xC5D0;&#xC2A4;&#xD14C; &#xB974; &#xD569;&#xC131;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; bifunctional &#xC641; &#xC2A4; &#xC5D0;&#xC2A4;&#xD14C; &#xB974; synthase/diacylglycerol acyltransferase &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xC77C;&#xC6D0;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xD655;&#xC778; &#xD558; &#xACE0; &#xC2EC;&#xAC01; &#xD558; &#xAC8C; &#xAC10;&#xC18C; &#xC641; &#xC2A4; &#xC5D0;&#xC2A4;&#xD14C; &#xB974; &#xB808;&#xBCA8;&#xC758; wsd1 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC758; &#xC904;&#xAE30; &#xC641; &#xC2A4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCC98;&#xC74C;&#xC73C;&#xB85C; &#xC785;&#xC99D; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;. Wsd1&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xCD94;&#xCD9C; &#xBB3C;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBD84;&#xC11D; &#xD558;&#xB294; &#xCCB4; &#xC678; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC774;&#xC774; &#xD6A8;&#xC18C;&#xB294; &#xC641; &#xC2A4; synthase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xACFC; diacylglycerol acyltransferase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xC57D; &#xC0AC;&#xC9C4; &#xB354; &#xB0AE;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xB2E4;. Saccharomyces cerevisiae&#xC5D0; WSD1 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD45C;&#xD604; &#xC641; &#xC2A4; &#xC5D0;&#xC2A4;&#xD14C; &#xB974;&#xB9CC; WSD1 &#xC8FC;&#xB85C; &#xC641; &#xC2A4; synthase&#xB85C; &#xC791;&#xB3D9; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; triacylglycerol &#xD558;&#xC9C0; &#xCD95;&#xC801; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8; &#xB2E4;. WSD1 &#xC2DD;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D;&#xC740;&#xC774; &#xC9C4; &#xAF43;, &#xC904;&#xAE30;&#xC758; &#xC0C1;&#xB2E8; &#xBD80;&#xBD84;&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF5;&#xC0AC;&#xD560; &#xB098;&#xBB47;&#xC78E; &#xBC1D;&#xD614;&#xB2E4;. &#xC644;&#xC804; &#xD55C; &#xAE30;&#xB2A5; &#xB178;&#xB780;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0DC;&#xADF8; WSD1 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xADF8; &#xC0DD; &#xD569;&#xC131; &#xC641; &#xC2A4; &#xC5D0;&#xC2A4;&#xD14C; &#xB974;, &#xC54C;&#xCF54;&#xC62C; &#xD615;&#xC131; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xCD5C;&#xC885; &#xC81C;&#xD488;&#xC758; &#xC2DC;&#xC5F0; endoplasmic &#xADF8;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;&#xB294;,&#xC774; subcellular &#xAD6C;&#xD68D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC641; &#xC2A4; &#xC5D0;&#xC2A4;&#xD14C; &#xB974; synthase/acyl-&#xCF54;&#xC5D4;&#xC790;&#xC784; a: diacylglycerol acyltransferase&#xC758; WSD1 Arabidopsis&#xC758; &#xC904;&#xAE30; &#xC641; &#xC2A4; &#xC5D0;&#xC2A4;&#xD14C; &#xB974; &#xC0DD; &#xD569;&#xC131;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C;.

&#xC9;steres de cera son l&#xED;pidos neutros compuestos de alcoholes alif&#xE1;ticos y &#xE1;cidos, con ambas mitades generalmente de cadena larga (C (16) y C (18)) o muy larga cadena (C (20) y m&#xE1;s) estructuras de carbono. Tienen diversas funciones biol&#xF3;gicas en bacterias, insectos, mam&#xED;feros y plantas terrestres y tambi&#xE9;n son sustratos importantes para una variedad de aplicaciones industriales. En las plantas, &#xE9;steres de cera se encuentran principalmente en el revestimiento de las superficies de las cut&#xED;culas tallo primario, sino que tambi&#xE9;n se acumulan en altas concentraciones en los aceites de semillas de algunas especies de plantas, incluidas las de jojoba (Simmondsia chinensis), un arbusto del desierto que es la fuente comercial importante de estos compuestos. Aqu&#xED;, se presenta la identificaci&#xF3;n y caracterizaci&#xF3;n de WSD1, un miembro de la cera de &#xE9;ster bifuncional sintasa / diacilglicerol aciltransferasa familia de genes, que desempe&#xF1;a un papel clave en la s&#xED;ntesis de &#xE9;ster de cera en Arabidopsis (Arabidopsis thaliana) se deriva, como la primera evidencia por &#xE9;ster de cera severamente reducida niveles de cera en el tallo de wsd1 mutantes. En ensayos in vitro utilizando extractos de prote&#xED;nas de Escherichia coli que expresan WSD1 mostr&#xF3; que esta enzima tiene un alto nivel de actividad sintasa cera y aproximadamente 10 veces menor nivel de actividad diacilglicerol aciltransferasa. La expresi&#xF3;n del gen WSD1 en Saccharomyces cerevisiae como resultado la acumulaci&#xF3;n de &#xE9;steres de cera, pero no triglic&#xE9;ridos, lo que indica que WSD1 predominantemente funciona como una cera sintasa. Los an&#xE1;lisis de expresi&#xF3;n WSD1 revel&#xF3; que este gen se transcribe en las flores, partes superiores de los tallos y hojas. Totalmente funcional amarillo fluorescente prote&#xED;na-etiquetados WSD1 prote&#xED;na se localiza en el ret&#xED;culo endoplasm&#xE1;tico, lo que demuestra que la bios&#xED;ntesis de los &#xE9;steres de cera, los productos finales de la v&#xED;a de alcohol formador, se produce en este compartimiento subcelular.

Identificaci&#xF3;n de la sintasa de &#xE9;ster de cera / acil-coenzima A: WSD1 diacilglicerol aciltransferasa necesario para la bios&#xED;ntesis Ester madre de cera en Arabidopsis

N Arachidonoylethanolamine anandamide AEA&#xFF09; &#x662F;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x7684; endocannabinoid &#x6765;&#x786E;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4ECE;&#x6B64;&#x6210;&#x4E3A;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x51E0;&#x4E2A;&#x751F;&#x7406;&#x529F;&#x80FD;&#x548C;&#x75BE;&#x75C5;&#x56FD;&#x5BB6;&#x8C03;&#x89E3;&#x3002;AEA &#x5DF2;&#x5206;&#x79BB;&#x51FA;&#x8BB8;&#x591A;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x548C;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#xFF0C;&#x5728;&#x4F4E; nanomolar &#x8303;&#x56F4;&#x5185;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x7528;&#x6709;&#x673A;&#x6EB6;&#x5242;&#x7684;&#x8102;&#x8D28;&#x63D0;&#x53D6;&#x6280;&#x672F;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6280;&#x672F;&#x90FD;&#x9700;&#x8981;&#x8F83;&#x591A;&#x91CF;&#x7684;&#x6EB6;&#x5242;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x5B83;&#x4EEC;&#x9002;&#x5408;&#x9AD8;&#x541E;&#x5410;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x4E0B;&#x5E72;&#x71E5;&#x3002;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x7684; AEA &#x4EBA;&#x8840;&#x6D46;&#x3001; &#x8840;&#x6E05;&#x3001; &#x725B;&#x5976;&#x3001; &#x5C3F;&#x6DB2;&#x3001; &#x7F8A;&#x6C34;&#x3001; &#x8179;&#x8154;&#x6DB2;&#x3001; &#x553E;&#x6DB2;&#x3001; &#x5375;&#x6CE1;&#x6DB2;&#x548C;&#x5375;&#x5DE2;&#x56CA;&#x80BF;&#x6DB2;&#x6D53;&#x5EA6;&#x8C03;&#x67E5;&#x56FA;&#x76F8;&#x8403;&#x53D6; (SPE) &#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;AEA &#x8840;&#x6E05;&#x548C;&#x8840;&#x6D46;&#x5206;&#x79BB; 20 &#x6210;&#x5E74;&#x5987;&#x5973;&#x7684;&#x8840;&#x6DB2;&#x4E2D;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230; (+ /-&#x6807;&#x51C6;&#x504F;&#x5DEE;&#x662F;&#x6307;&#xFF1A; 0.68+/-0.29 &#x548C; 0.64+/-0.28 nM&#xFF0C;&#x5206;&#x522B;)&#xFF0C;&#x4ECE;&#x5B55;&#x5987;&#x5728;&#x4E00;&#x8BCD; (1.37 + /-0.42 nM)&#xFF0C;&#x548C;&#x4ECE;&#x8110;&#x9759;&#x8109; (1.26 + /-0.33 nM) &#x548C;&#x8110;&#x52A8;&#x8109; (+ /-0.35nM 1.14)&#xFF0C;&#x725B;&#x5976;&#x4E2D;&#x7684; (+ /-0.05 0.12 nM) &#x548C;&#x4ECE;&#x7F8A;&#x6C34; (+ /-0.02 0.03 nM)&#x3001; &#x8179;&#x819C; (+ /-0.27 0.93 nM)&#x3001; &#x5375;&#x6CE1; (1.17 + /-0.51 nM&#xFF09;&#x4E0E;&#x5375;&#x5DE2;&#x56CA;&#x80BF; (0.32 + /-0.01 nM&#xFF09; &#x6D41;&#x4F53;&#x3002;AEA &#x662F;&#x553E;&#x6DB2;&#x548C;&#x5C3F;&#x6DB2;&#x4E2D;&#x65E0;&#x6CD5;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x3002;&#x4ECE;&#x8840;&#x6D46;&#x53D6;&#x5F97;&#x4E0E; SPE &#x7684; AEA &#x63D0;&#x53D6;&#x6548;&#x7387; 60%&#x662F;&#x4F18;&#x4E8E;&#x4F7F;&#x7528;&#x73B0;&#x6709;&#x7684;&#x6709;&#x673A;&#x6EB6;&#x5242;&#x8403;&#x53D6;&#x65B9;&#x6CD5;&#x5B9E;&#x73B0;&#x7684;&#x6548;&#x7387; 19%&#x3002;&#x91CF;&#x5316;&#x548C;&#x68C0;&#x6D4B;&#x7684; AEA &#x7684;&#x9650;&#x5236;&#x4E5F;&#x6709;&#x6240;&#x6539;&#x8FDB;&#x5927;&#x5927;&#x4F7F;&#x7528; SPE &#xFF08;8 &#x548C; 4 fmol/&#x6BEB;&#x5347;&#xFF09; &#x4E0E;&#x6709;&#x673A;&#x63D0;&#x53D6; &#xFF08;25&#x3001; 18.75 fmol/&#x6BEB;&#x5347;&#x8840;&#x6D46;) &#x76F8;&#x6BD4;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6539;&#x8FDB;&#x4F7F;&#x5F97;&#x5C0F;&#x8840;&#x6D46;&#x6837;&#x672C;&#x4E0E; SPE &#x7684;&#x4F7F;&#x7528;&#x3002;&#x5185;&#x548C;&#x5B9E;&#x65F6;&#x53D8;&#x5F02;&#x6027;&#x76F8;&#x82E5;&#xFF0C;&#x548C;&#x6C47;&#x96C6;&#x7684;&#x8840;&#x6D46;&#x6837;&#x672C;&#x5747;&#x503C; AEA &#x6D53;&#x5EA6; (1.18 nM&#x3001; n = 15&#xFF09; &#x662F;&#x5B8C;&#x5168;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x6280;&#x5DE7;&#x3002;&#x540C;&#x6837;&#xFF0C;&#x5F53;&#x52B3;&#x52A8;&#x548C; nonlaboring &#x5987;&#x5973;&#x4ECE; 56 &#x8840;&#x6D46;&#x6837;&#x54C1;&#x5206;&#x6790;&#x4E86;&#x4F7F;&#x7528;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x6280;&#x672F;&#xFF0C;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x6CA1;&#x6709;&#x63D0;&#x53D6;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x5DEE;&#x5F02;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x4E3A; AEA &#x63D0;&#x53D6; biomatrices&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53D6;&#x4EE3;&#x73B0;&#x6709;&#x7684;&#x6DB2;&#x4F53;&#x8403;&#x53D6;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x88AB;&#x5353;&#x8D8A;&#x7684;&#x901F;&#x5EA6;&#x3001; &#x8403;&#x53D6;&#x6548;&#x7387;&#x53CA;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x6837;&#x672C;&#x5927;&#x5C0F;&#x7684; SPE &#x6280;&#x672F;&#x63D0;&#x4F9B;&#x5F3A;&#x5065;&#x7684; SPE &#x6280;&#x672F;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x3002;

&#x56FA;&#x76F8;&#x6CD5;&#x63D0;&#x53D6;&#x548C;&#x4ECE;&#x591A;&#x4EBA; biomatrices anandamide &#x7684;&#x6D4B;&#x91CF;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;

N-Arachidonoylethanolamine (AEA, anandamide) was the first endocannabinoid to be identified and has since become associated with the mediation of several physiological functions and disease states. AEA has been isolated from numerous tissues and biofluids, in the low nanomolar range, using lipid extraction techniques with organic solvents. These techniques require the drying down of relatively large volumes of solvents, making them unsuitable for high-throughput analysis. Here we describe a solid-phase extraction (SPE) method for the investigation of AEA concentrations in human plasma, serum, milk, urine, amniotic fluid, peritoneal fluid, saliva, follicular fluid, and fluid from an ovarian cyst. AEA was detected in serum and plasma from blood isolated from 20 adult women (means+/-standard deviations: 0.68+/-0.29 and 0.64+/-0.28 nM, respectively), from pregnant women at term (1.37+/-0.42 nM), and from umbilical vein (1.26+/-0.33 nM) and umbilical artery (1.14+/-0.35nM), in milk (0.12+/-0.05 nM) and from amniotic (0.03+/-0.02 nM), peritoneal (0.93+/-0.27 nM), follicular (1.17+/-0.51 nM), and ovarian cyst (0.32+/-0.01 nM) fluids. AEA was undetectable in saliva and urine. The 60% AEA extraction efficiency achieved with SPE from plasma was superior to the 19% efficiency achieved using the existing organic solvent extraction method. Limits of quantification and detection for AEA were also improved dramatically using SPE (8 and 4 fmol/ml) compared with organic extraction (25 and 18.75 fmol/ml plasma). These improvements allow the use of smaller plasma samples with SPE. Intra- and interday variability were comparable, and the mean AEA concentration of pooled plasma samples (1.18 nM, n=15) was identical with the two techniques. Similarly, when 56 plasma samples from laboring and nonlaboring women were analyzed using both techniques, no extraction method-dependent differences were observed. Consequently, we provide evidence for a robust SPE technique for the extraction of AEA from biomatrices to replace the existing liquid extraction methods, with the SPE technique being superior in terms of speed, extraction efficiency, and sample size required.

A solid-phase method for the extraction and measurement of anandamide from multiple human biomatrices.

N-Arachidonoylethanolamine (AEA, anandamide) a &eacute;t&eacute; le premier endocannabino&iuml;de &agrave; identifier et est devenu associ&eacute; &agrave; la m&eacute;diation de plusieurs fonctions physiologiques et des &eacute;tats pathologiques. AEA a &eacute;t&eacute; isol&eacute; de nombreux tissus et liquides, dans le bas nanomolaire, utilisant des techniques d&#39;extraction de lipides avec des solvants organiques. Ces techniques exigent le s&eacute;chage dans des quantit&eacute;s relativement importantes de solvants, ce qui les rend impropres &agrave; l&#39;analyse de haut-d&eacute;bit. Nous d&eacute;crivons ici une m&eacute;thode d&#39;extraction en phase solide (SPE) pour l&#39;&eacute;tude des concentrations de AEA dans le plasma humain, le s&eacute;rum, lait, urine, liquide amniotique, liquide p&eacute;riton&eacute;al, salive, liquide folliculaire et liquide d&#39;un kyste de l&#39;ovaire. AEA a &eacute;t&eacute; d&eacute;tect&eacute;e dans le s&eacute;rum et le plasma du sang isol&eacute; de 20 femmes adultes (signifie +/-&eacute;cart-type : 0.68+/-0.29 et 0.64+/-0.28 nM, respectivement), de femmes enceintes &agrave; terme (1,37 +/-0,42 nM) et de la veine ombilicale (1,26 +/-0,33 nM) et l&#39;art&egrave;re ombilicale (1.14 +/-0 .35nM), dans le lait (0,12 +/-0,05 nM) et d&#39;amniotique (0,03 +/-0,02 nM), p&eacute;riton&eacute;ale (0,93 +/-0,27 nM), folliculaire (1.17 +/-0,51 nM)et kyste de l&#39;ovaire (0,32 +/-0,01 nM) fluides. AEA &eacute;tait ind&eacute;tectable dans la salive et l&#39;urine. L&#39;efficacit&eacute; d&#39;extraction de AEA 60 % r&eacute;alis&eacute;e avec SPE du plasma a &eacute;t&eacute; sup&eacute;rieure &agrave; l&#39;efficacit&eacute; de 19 % r&eacute;alis&eacute;e &agrave; l&#39;aide de la m&eacute;thode d&#39;extraction par solvant organique existant. Limites de quantification et de d&eacute;tection pour l&#39;AEA ont &eacute;t&eacute; &eacute;galement am&eacute;lior&eacute;s consid&eacute;rablement &agrave; l&#39;aide de SPE (8 et 4 fmol/ml) par rapport &agrave; l&#39;extraction organique (25 et 18,75 fmol/ml de plasma). Ces am&eacute;liorations permettent l&#39;utilisation de petits &eacute;chantillons de plasma avec SPE. Intra - et la variabilit&eacute; interday &eacute;taient comparables et la concentration moyenne de AEA d&#39;&eacute;chantillons de plasma (1,18 nM, n = 15) &eacute;tait identique avec les deux techniques. De m&ecirc;me, lorsque 56 &eacute;chantillons plasmatiques provenant de femmes travail et nonlaboring ont &eacute;t&eacute; analys&eacute;s en utilisant les deux techniques, aucune diff&eacute;rence de m&eacute;thode d&eacute;pendant d&#39;extraction ont &eacute;t&eacute; observ&eacute;s. En cons&eacute;quence, nous fournissons la preuve d&#39;une solide technique SPE pour l&#39;extraction de l&#39;AEA dans biomatrices pour remplacer les m&eacute;thodes existantes de l&#39;extraction liquide, avec la technique SPE &eacute;tant sup&eacute;rieur en termes de vitesse, l&#39;efficacit&eacute; de l&#39;extraction et taille de l&#39;&eacute;chantillon requis.

Une m&eacute;thode en phase solide pour l&#39;extraction et la mesure de l&#39;anandamide de multiples biomatrices humaine.

N-Arachidonoylethanolamine (AEA, Anandamid) war die erste Endocannabinoid identifiziert werden und mittlerweile hat die Vermittlung verschiedener K&ouml;rperfunktionen und Krankheitzust&auml;nden zugeordnet. AEA wurde von zahlreichen Geweben und hinter, im Bereich von niedrigen Nanomolar, isoliert mit Techniken der Lipid-Extraktion mit organischen L&ouml;sungsmitteln. Diese Techniken erfordern die Trocknung nach unten relativ gro&szlig;er Mengen an L&ouml;sungsmitteln, macht sie ungeeignet f&uuml;r Hochdurchsatz-Analyse. Hier beschreiben wir eine Festphasen-(SPE)-Extraktionsmethode zur Untersuchung der AEA-Konzentrationen im Blutplasma, Serum, Milch, Urin, Fruchtwasser, peritonealen Fl&uuml;ssigkeit, Speichel, follikul&auml;re Fl&uuml;ssigkeit und Fl&uuml;ssigkeit aus einer Ovarialzyste. AEA wurde in Serum und Plasma aus Blut isoliert von 20 erwachsenen Frauen erkannt (+/-Standardabweichung bedeutet: 0.68+/-0.29 und 0.64+/-0.28 nM bzw.), von Schwangeren am Begriff (1.37 +/-0,42 nM), und von Nabel-Vene (1.26 +/-0,33 nM) und Nabelgegend Arterie (1.14 +/-0 .35nM), in der Milch (0.12 +/-0,05 nM) und aus Amnionfl&uuml;ssigkeit (0,03 +/-0,02 nM), Peritonealdialyse (0.93 +/-0.27 nM), follikul&auml;re (1.17 +/-0.51 nM), und Ovarialzyste (0,32 +/-0,01 nM) Fl&uuml;ssigkeiten. AEA wurde im Speichel und im Urin nachweisbar. Die 60 %-AEA-Absaugleistung mit SPE aus Plasma erreicht war die 19 % Effizienz erreicht, mit der vorhandene organische L&ouml;sungsmittel-Extraktion-Methode &uuml;berlegen. Grenzen der Quantifizierung und Erkennung von AEA wurden auch verbessert drastisch mit SPE (8 und 4 Fmol/ml) im Vergleich mit organische Extraktion (25 und 18.75 Fmol/ml Plasma). Diese Verbesserungen erm&ouml;glichen die Verwendung von kleineren Plasmaproben mit SPE. Intra- und interday Variabilit&auml;t waren vergleichbar, und die mittlere AEA-Konzentration der gepoolten Plasmaproben (1,18 nM, n = 15) war identisch mit der beiden Techniken. Ebenso Wenn 56 Plasmaproben aus arbeitend und nonlaboring Frauen mit beiden Techniken analysiert wurden, wurden keine Extraktion-Methode-abh&auml;ngige Unterschiede beobachtet. Daher bieten wir Beweise f&uuml;r eine robuste SPE-Technik zur Gewinnung von AEA von Biomatrices die vorhandenen Fl&uuml;ssigkeit Extraktionsmethoden, mit der SPE-Technik &uuml;berlegen hinsichtlich Geschwindigkeit, Absaugleistung und erforderliche Stichprobenumfang zu ersetzen.

Eine Festphasen-Methode f&uuml;r die Extraktion und die Messung von Anandamid aus mehreren menschlichen Biomatrices.

N-Arachidonoylethanolamine (AEA, anandamide) fu il primo endocannabinoide per essere identificato e da allora &egrave; diventato associato con la mediazione di diverse funzioni fisiologiche e Stati di malattia. AEA &egrave; stato isolato da numerosi tessuti e ha, nella gamma bassa nanomolari, utilizzando tecniche di estrazione dei lipidi con solventi organici. Queste tecniche richiedono l&#39;essiccazione gi&ugrave; di volumi relativamente grandi di solventi, che li rende inadatti per l&#39;analisi di alto-rendimento. Qui descriviamo un metodo di estrazione di fase solida (SPE) per l&#39;indagine delle concentrazioni di AEA nel plasma umano, siero, latte, urina, liquido amniotico, liquido peritoneale, saliva, liquido follicolare e fluido da una cisti ovarica. AEA &egrave; stato rilevato nel siero e nel plasma dal sangue isolato da 20 donne adulte (significa + deviazioni standard: 0.68+/-0.29 e 0.64+/-0.28 nM, rispettivamente), da donne in gravidanza a termine (1,37 + 0,42 nM) e dalla vena ombelicale (1,26 + 0,33 nM) e arteria ombelicale (1.14 + /-0, .35nM), nel latte (0,12 + /-0,05 nM) e dal liquido amniotico (0,03 + /-0,02 nM), peritoneale (0.93 + 0,27 nM), follicolare (1,17 + 0,51 nM)e cisti ovarica (0,32 + /-0,01 nM) fluidi. AEA era rilevabile nella saliva e nelle urine. L&#39;efficienza di estrazione dell&#39;AEA 60% raggiunto con SPE da plasma era superiore per il 19% di efficienza ottenuto utilizzando il metodo di estrazione con solvente organico esistente. Limiti di quantificazione e di rilevamento per AEA inoltre sono stati migliorati drasticamente usando SPE (8 e 4 fmol/ml) confrontato con estrazione organica (25 e 18,75 fmol/ml di plasma). Questi miglioramenti consentono l&#39;utilizzo di piccoli campioni di plasma con SPE. Intra - e variabilit&agrave; interday erano paragonabili e la concentrazione media di AEA di campioni di plasma pool (1,18 nM, n = 15) era identico con le due tecniche. Analogamente, quando 56 campioni di plasma da donne lavoratrici e nonlaboring sono stati analizzati utilizzando entrambe le tecniche, sono state osservate differenze non dipendente dal metodo di estrazione. Di conseguenza, forniamo prove per una tecnica robusta SPE per l&#39;estrazione dell&#39;AEA da biomatrices per sostituire i metodi di estrazione liquido esistente, con la tecnica SPE essendo superiore in termini di velocit&agrave;, l&#39;efficienza di estrazione e dimensione del campione necessaria.

Un metodo di fase solida per l&#39;estrazione e la misurazione dell&#39;anandamide da pi&ugrave; biomatrices umana.

N-Arachidonoylethanolamine (AEA, &#x30A2;&#x30CA;&#x30F3;&#x30C0;&#x30DF;&#x30C9;) &#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x30AB;&#x30F3;&#x30CA;&#x30D3;&#x30CE;&#x30A4;&#x30C9;&#x3068;&#x4EE5;&#x6765;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x751F;&#x7406;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3068;&#x75C5;&#x6C17;&#x306E;&#x72B6;&#x614B;&#x306E;&#x8ABF;&#x505C;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;AEA &#x306F;&#x6709;&#x6A5F;&#x6EB6;&#x5264;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x8102;&#x8CEA;&#x306E;&#x62BD;&#x51FA;&#x306E;&#x6280;&#x8853;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x591A;&#x6570;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x3068;&#x6BDB;&#x7D30;&#x7BA1;&#x4F4E;&#x30CA;&#x30CE;&#x30E2;&#x30EB;&#x7BC4;&#x56F2;&#x5185;&#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C6;&#x30AF;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x306F;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x7684;&#x5927;&#x91CF;&#x6EB6;&#x5264;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306B;&#x306F;&#x4E0D;&#x5411;&#x304D;&#x9AD8;&#x30B9;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x30C3;&#x30C8;&#x5206;&#x6790;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x4E7E;&#x71E5;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x3072;&#x3068;&#x8840;&#x6F3F;&#x3001;&#x8840;&#x6E05;&#x3001;&#x725B;&#x4E73;&#x3001;&#x5C3F;&#x3001;&#x7F8A;&#x6C34;&#x3001;&#x8179;&#x8154;&#x6DB2;, &#x553E;&#x6DB2;, &#x5375;&#x80DE;&#x6DB2;&#x3001;&#x5375;&#x5DE3;&#x56A2;&#x816B;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x6D41;&#x4F53;&#x306E; AEA &#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x56FA;&#x76F8;&#x62BD;&#x51FA; &#xFF08;SPE&#xFF09; &#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;AEA &#x306F;&#x8840;&#x6E05;&#x3068;&#x8840;&#x6F3F; 20 &#x4EE3;&#x306E;&#x5973;&#x6027;&#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x8840;&#x6DB2;&#x304B;&#x3089;&#x4E2D;&#x306B;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F; (&plusmn; &#x6A19;&#x6E96;&#x504F;&#x5DEE;&#x3092;&#x610F;&#x5473;&#x3057;&#x307E;&#x3059;: 0.68+/-0.29 &#x3068; 0.64+/-0.28 nM &#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;)&#x3001;&#x598A;&#x5A66;&#x304B;&#x3089; (1.37 0.42 &plusmn; nM) &#x3068;&#x81CD;&#x9759;&#x8108;&#x304B;&#x3089; (1.26 &plusmn; 0.33 nM) &#x3068;&#x81CD;&#x52D5;&#x8108; (1.14) &plusmn; 0 .35nM &#x30DF;&#x30EB;&#x30AF;&#x306E; (0.12 &plusmn; 0.05 nM) &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7F8A;&#x6C34;&#x304B;&#x3089; (&plusmn; 0.02 0.03 nM), &#x8179;&#x819C; (0.93 0.27 &plusmn; nM), &#x6FFE;&#x80DE; (1.17 0.51 &plusmn; nM)&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5375;&#x5DE3;&#x56A2;&#x816B; &#xFF08;0.32 &plusmn; 0.01 nM) &#x6DB2;&#x3002;AEA &#x306F;&#x553E;&#x6DB2;&#x3084;&#x5C3F;&#x4E2D;&#x306B;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;SPE &#x3068;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x304B;&#x3089;&#x9054;&#x6210; 60 %aea &#x62BD;&#x51FA;&#x52B9;&#x7387;&#x306F;&#x65E2;&#x5B58;&#x306E;&#x6709;&#x6A5F;&#x6EB6;&#x5A92;&#x62BD;&#x51FA;&#x6CD5;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x9054;&#x6210; 19% &#x306E;&#x52B9;&#x7387;&#x306B;&#x512A;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x3068; AEA &#x306E;&#x691C;&#x51FA;&#x9650;&#x754C;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x5287;&#x7684;&#x306B;&#x6709;&#x6A5F;&#x62BD;&#x51FA; &#xFF08;25 &#x3068; 18.75 fmol/ml &#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#xFF09; &#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066; SPE (8 &#x3068; 4 fmol/ml) &#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x6539;&#x5584;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6539;&#x5584;&#x306F;&#x5C0F;&#x3055;&#x3044;&#x8840;&#x6F3F;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB; SPE &#x3068;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x3092;&#x8A31;&#x53EF;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5185;&#x30FB; interday &#x5909;&#x52D5;&#x3057;&#x305F;&#x5339;&#x6575;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x30D7;&#x30FC;&#x30EB;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x306E;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x306E;&#x5E73;&#x5747; AEA &#x6FC3;&#x5EA6; &#xFF08;1.18 nM, n = 15) &#x3068; 2 &#x3064;&#x306E;&#x30C6;&#x30AF;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x3068;&#x540C;&#x3058;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x6280;&#x8853;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x5973;&#x6027;&#x52B4;&#x50CD;&#x3068; nonlaboring &#x304B;&#x3089; 56 &#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE; &#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3057;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x306B;&#x3001;&#x62BD;&#x51FA;&#x6CD5;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x306F;&#x8A8D;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x65E2;&#x5B58;&#x306E;&#x6DB2;&#x4F53;&#x62BD;&#x51FA;&#x6CD5;&#x3001;&#x901F;&#x5EA6;&#x3001;&#x62BD;&#x51FA;&#x52B9;&#x7387;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB; &#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x306E;&#x9762;&#x3067;&#x512A;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B; SPE &#x30C6;&#x30AF;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x3092;&#x7F6E;&#x304D;&#x63DB;&#x3048;&#x308B; biomatrices &#x304B;&#x3089; AEA &#x306E;&#x62BD;&#x51FA;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30ED;&#x30D0;&#x30B9;&#x30C8;&#x306A; SPE &#x6CD5;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x62BD;&#x51FA;&#x3068;&#x30A2;&#x30CA;&#x30F3;&#x30C0;&#x30DF;&#x30C9;&#x8907;&#x6570;&#x4EBA;&#x9593; biomatrices &#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x306E;&#x56FA;&#x76F8;&#x6CD5;&#x3002;

N-Arachidonoylethanolamine (AEA, anandamide) &#xC2DD;&#xBCC4; &#xB420; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; endocannabinoid &#xB418;&#xC5C8;&#xACE0; &#xC774;&#xD6C4; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBC0F; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC758; &#xC911;&#xC7AC;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xB418;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. AEA &#xC720;&#xAE30; &#xC6A9; &#xB9E4;&#xC640; &#xC9C0;&#xC9C8; &#xCD94;&#xCD9C; &#xAE30;&#xBC95;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC870;&#xC9C1; &#xBC0F; &#xB0AE;&#xC740; nanomolar &#xBC94;&#xC704;&#xC5D0;&#xC11C; biofluids &#xACE0;&#xB9BD; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAE30;&#xC220;&#xC740; &#xBE44;&#xAD50;&#xC801; &#xB300;&#xB7C9;&#xC758; &#xC6A9; &#xC81C;, &#xADF8;&#xB4E4;&#xC744; &#xB192;&#xC740; &#xCC98;&#xB9AC;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xBD80;&#xC801; &#xD55C; &#xB9CC;&#xB4E4;&#xAE30;&#xC758; &#xB2E4;&#xC6B4; &#xAC74;&#xC870; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8;, &#xD608; &#xCCAD;, &#xC6B0;&#xC720;, &#xC18C;&#xBCC0;, &#xC591;&#xC218;, &#xBCF5; &#xB9C9; &#xC561;, &#xD0C0; &#xC561;, follicular &#xC720;&#xCCB4; &#xBC0F; &#xB09C;&#xC18C; &#xB0AD;&#xC885;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC561;&#xCCB4;&#xC5D0; AEA &#xB18D;&#xB3C4; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558;&#xB294; &#xACE0;&#xCCB4; &#xC0C1; &#xCD94;&#xCD9C; (SPE) &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC124;&#xBA85;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. AEA &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; 20 &#xC131;&#xC778; &#xC5EC;&#xC131;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xB41C; &#xD608;&#xC561;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD608; &#xCCAD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; (&#xD45C;&#xC900; &#xD3B8;&#xCC28; + &#xC758;&#xBBF8;: 0.68+/-0.29 &#xBC0F; 0.64+/-0.28 nM, &#xAC01;&#xAC01;), &#xC6A9;&#xC5B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC784;&#xC0B0;&#xBD80;&#xC5D0;&#xC11C; (0.42 &plusmn; 1.37 nM), &#xD0EF; &#xC904; &#xC815; &#xB9E5;&#xC5D0;&#xC11C; (0.33 + 1.26 nM)&#xACFC; &#xD0EF; &#xC904; &#xB3D9;&#xB9E5; (0.35nM &plusmn; 1.14) &#xC6B0;&#xC720;&#xC5D0; (0.05 &plusmn; 0.12 nM) &#xC591;&#xC218; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; (&plusmn; 0.02 0.03 nM), &#xBCF5; (0.27 &plusmn; 0.93 nM) follicular, (0.51 &plusmn; 1.17 nM)&#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xB09C;&#xC18C; &#xB0AD;&#xC885; (0.32 &plusmn; 0.01 nM) &#xCCB4;&#xC561;. AEA&#xB294; &#xD0C0; &#xC561;&#xACFC; &#xC18C;&#xBCC0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC10;&#xC9C0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8;&#xC5D0;&#xC11C; SPE&#xC640; &#xB2EC;&#xC131; 60 %aea &#xCD94;&#xCD9C; &#xD6A8;&#xC728; 19% &#xD6A8;&#xC728; &#xB2EC;&#xC131; &#xAE30;&#xC874; &#xC720;&#xAE30; &#xC6A9; &#xB9E4; &#xCD94;&#xCD9C; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC6B0;&#xC218;&#xD55C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC815;&#xB7C9;&#xD654; &#xBC0F; AEA&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC80;&#xC0C9;&#xC758; &#xD55C;&#xACC4; &#xB610;&#xD55C; SPE (8 &#xBC0F; 4 fmol/ml) &#xC720;&#xAE30; &#xCD94;&#xCD9C; (25&#xACFC; 18.75 fmol/ml &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8;)&#xC640; &#xBE44;&#xAD50;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD68D;&#xAE30;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC1C;&#xC120; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAC1C;&#xC120;&#xC758; SPE&#xC640; &#xC791;&#xC740; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xC0D8;&#xD50C; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB0B4;&#xBD80; &#xBC0F; interday &#xBCC0;&#xACBD; &#xC0AC;&#xD56D; &#xBE44;&#xAD50; &#xD588;&#xB2E4; &#xACE0; &#xD480;&#xB9C1;&#xB41C; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xC0D8;&#xD50C; &#xC758;&#xBBF8; AEA &#xB18D;&#xB3C4; (1.18 nM, n = 15) &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xD568;&#xAED8; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xCC2C;&#xAC00;&#xC9C0;&#xB85C;, &#xC624;&#xD574; &#xD558; &#xACE0; nonlaboring &#xC5EC;&#xC131;&#xC5D0;&#xC11C; 56 &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xC0D8;&#xD50C; &#xB450; &#xAE30;&#xC220;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBD84;&#xC11D;, &#xCD94;&#xCD9C; &#xBC29;&#xBC95; &#xC885;&#xC18D; &#xCC28;&#xC774;&#xAC00; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC; SPE &#xAE30;&#xC220;&#xC740; &#xC18D;&#xB3C4;, &#xCD94;&#xCD9C; &#xD6A8;&#xC728; &#xBC0F; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC0D8;&#xD50C; &#xD06C;&#xAE30; &#xC6B0;&#xC218;&#xD55C; &#xB418; &#xACE0; &#xAE30;&#xC874;&#xC758; &#xC561;&#xCCB4; &#xCD94;&#xCD9C; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xB300;&#xCCB4; &#xD558;&#xB294; biomatrices&#xC5D0;&#xC11C; AEA&#xC758; &#xCD94;&#xCD9C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xACAC;&#xACE0;&#xD55C; SPE &#xAE30;&#xBC95;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xCD94;&#xCD9C; &#xBC0F; anandamide &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC778;&#xAC04; biomatrices&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xCE21;&#xC815;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xACE0;&#xCCB4; &#xC0C1; &#xBC29;&#xBC95;.

N-Arachidonoylethanolamine (AEA, anandamida) fue la primera endocannabinoide para identificarse y desde entonces ha sido asociado con la mediaci&oacute;n de varias funciones fisiol&oacute;gicas y Estados de enfermedad. AEA ha sido aislado en numerosos tejidos y biofluidos, en el rango nanomolar baja, utilizando t&eacute;cnicas de extracci&oacute;n de l&iacute;pidos con disolventes org&aacute;nicos. Estas t&eacute;cnicas requieren la sequedad abajo de relativamente grandes cantidades de solventes, haci&eacute;ndolos inadecuados para el an&aacute;lisis de alto rendimiento. Aqu&iacute; se describe un m&eacute;todo de extracci&oacute;n en fase s&oacute;lida (SPE) para la investigaci&oacute;n de las concentraciones de AEA en plasma humano, suero, leche, orina, l&iacute;quido amni&oacute;tico, l&iacute;quido peritoneal, saliva, l&iacute;quido folicular y l&iacute;quido de un quiste ov&aacute;rico. AEA fue detectado en suero y plasma de sangre aislado de 20 mujeres adultas (significa +/-desviaciones est&aacute;ndar: nM 0.68+/-0.29 y 0.64+/-0.28, respectivamente), de mujeres embarazadas a t&eacute;rmino (1,37 + /-0.42 nM) y de la vena umbilical (1.26 +/-0,33 nM) y arteria umbilical (1.14 +/-0 .35nM), en la leche (0.12 +/-0.05 nM) y de amni&oacute;tico (0.03 +/-0.02 nM), peritoneal (0,93 +/-0.27 nM) folicular (1.17 +/-0,51 nM)y quiste ov&aacute;rico (0.32 +/-0.01 nM) fluidos. AEA era imperceptible en la saliva y orina. La eficiencia de extracci&oacute;n de AEA 60% lograda con SPE del plasma fue superior el 19% de eficiencia alcanzado mediante el m&eacute;todo de extracci&oacute;n por solventes org&aacute;nicos existentes. L&iacute;mites de cuantificaci&oacute;n y detecci&oacute;n de AEA tambi&eacute;n mejoraron dram&aacute;ticamente usando SPE (8 y 4 fmol/ml) en comparaci&oacute;n con la extracci&oacute;n org&aacute;nica (25 y 18,75 fmol/ml de plasma). Estas mejoras permiten el uso de peque&ntilde;as muestras de plasma con SPE. La variabilidad intra - y fueron comparables y la concentraci&oacute;n media de AEA de las muestras de plasma combinado (1,18 nM, n = 15) era id&eacute;ntico con las dos t&eacute;cnicas. Del mismo modo, cuando se analizaron 56 muestras de plasma de la mujer trabajadora y nonlaboring usando ambas t&eacute;cnicas, se observaron diferencias dependen del m&eacute;todo de extracci&oacute;n. En consecuencia, nos proporcionan la evidencia para una s&oacute;lida t&eacute;cnica SPE para la extracci&oacute;n de la AEA de biomatrices para reemplazar los m&eacute;todos existentes de extracci&oacute;n l&iacute;quido, con la t&eacute;cnica SPE, siendo superior en cuanto al tama&ntilde;o de la muestra necesaria, velocidad y eficiencia de la extracci&oacute;n.

Un m&eacute;todo de fase s&oacute;lida para la extracci&oacute;n y medici&oacute;n de anandamida de m&uacute;ltiples biomatrices humano.

Anandamide (N-arachidonoylethanolamide&#xFF09;&#x3001; &#x751F;&#x7269;&#x6D3B;&#x6027;&#x8102;&#xFF0C;&#x636E;&#x6089;&#xFF0C;&#x53D1;&#x6325;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x7EF4;&#x6301;&#x598A;&#x5A20;&#x548C;&#x5206;&#x5A29;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x662F; (1) &#x8BC4;&#x4F30;&#x4EA7;&#x5987;&#x4EBA;&#x6743; AEA &#x7EA7;&#x522B;&#xFF1A; &#x80CE;&#x754C;&#x9762;&#x548C; (2) &#x9A8C;&#x8BC1;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7; AEA &#x63D0;&#x53D6;&#x56FA;&#x4F53;&#x9636;&#x6BB5;&#x4F7F;&#x7528;&#x3002;&#x5728;&#x8110;&#x8840;&#x548C;&#x6BCD;&#x8840;&#x3001; &#x7F8A;&#x6C34;&#x3001; &#x80CE;&#x76D8;&#xFF0C;&#x5206;&#x6790;&#x4E86; AEA &#x548C;&#x80CE;&#x819C;&#x6536;&#x96C6;&#x671F;&#x95F4;&#x5256;&#x8179; (n = 14)&#x3002;&#x63D0;&#x53D6;&#x6548;&#x7387;&#x5206;&#x522B;&#x4E3A; 42 &#x548C;&#x80CE;&#x76D8;&#x53CA;&#x80CE;&#x819C;&#xFF0C;&#x4E3A; 36%&#x3002;AEA &#x7EC4;&#x7EC7;&#x88AB;&#x91CF;&#x5316;&#x4F7F;&#x7528;&#x540C;&#x4F4D;&#x7D20;&#x7A00;&#x91CA;&#x6CD5;&#x548C; UPLC-ESI-MS/MS &#x65E5;&#x95F4;&#x95F4;&#x53D8;&#x5F02;&#x4E3A;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x63BA; 0.2&#x3001; 1 &#x548C; 5pmol/g AEA &#x5C11;&#x4E8E; 12%&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5C16;&#x523A;&#x7684;&#x6837;&#x54C1;&#x7684;&#x51C6;&#x786E;&#x6027;&#x662F; 95%&#x81F3; 103%&#x7684;&#x80CE;&#x819C;&#x548C;&#x80CE;&#x76D8;&#x7684; 114%&#x548C; 99%&#x4E4B;&#x95F4;&#x3002;&#x610F;&#x5473;&#x7740; AEA &#x6D53;&#x5EA6;&#x662F; 2.72 + &#x6216;-1.04 pmol/g &#x4E3A;&#x80CE;&#x76D8;&#x548C; 1.19 + &#x6216;-0.68 pmol/g &#x7684;&#x80CE;&#x8863;&#x548C; 0.93 + &#x6216;-0.28&#x3001; 0.88 + &#x6216;-0.33&#x3001; 0.77 + &#x6216;-0.30 &#x548C; 0.06 + &#x6216;-0.04nM &#x5B55;&#x4EA7;&#x5987;&#x3001; &#x8110;&#x9759;&#x8109;&#x548C;&#x52A8;&#x8109;&#x8110;&#x8840;&#x6D46;&#x548C;&#x7F8A;&#x6C34;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x80CE;&#x819C;&#x7684;&#x80CE;&#x76D8;&#x4E2D;&#x53D1;&#x73B0; AEA &#x542B;&#x91CF;&#x8F83;&#x9AD8; (P &lt; 0.0001&#xFF09;&#xFF0C;&#x76F8;&#x6BD4;&#x8110;&#x52A8;&#x8109;&#x8110;&#x9759;&#x8109;&#x4E2D; (P = 0.0015)&#xFF0C;&#x548C;&#x4ECE;&#x6BCD;&#x4F53;&#x5FAA;&#x73AF;&#x76F8;&#x6BD4;&#x8110;&#x52A8;&#x8109;&#x8840;&#x6D46;&#x4E2D; (P = &#x5E26;&#x6765;&#x5BF9;&#x7ECF;&#x6D4E;&#xFF09;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x53D8;&#x5316;&#x5728;&#x4EA7;&#x5987; AEA &#x6D53;&#x5EA6;&#x7684;&#x76F8;&#x5173;&#x6027;&#xFF1A; &#x80CE;&#x754C;&#x9762;&#xFF0C;&#x9700;&#x8981;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x8C03;&#x67E5;&#x3002;

&#x4EBA;&#x4F53;&#x5973;&#x6027;&#x751F;&#x6B96;&#x7EC4;&#x7EC7; Anandamide &#x6C34;&#x5E73;&#xFF1A; &#x56FA;&#x76F8;&#x8403;&#x53D6;-&#x548C; ultraperformance &#x6DB2;&#x76F8;&#x8272;&#x8C31;&#x4E32;&#x8054;&#x8D28;&#x8C31;&#x6D4B;&#x91CF;&#x3002;

Anandamide (N-arachidonoylethanolamide), a bioactive lipid, is reported to play a role in pregnancy maintenance and parturition. Our aims were to (1) evaluate AEA levels at the human maternal:fetal interface and (2) validate the use of solid-phase extraction of AEA from tissues. AEA was analyzed in cord and maternal blood, amniotic fluid, placenta, and fetal membranes collected during Caesarean section (n=14). Extraction efficiencies were 42 and 36% for the placenta and the fetal membranes, respectively. Tissue AEA was quantified using an isotope-dilution method and UPLC-ESI-MS/MS giving intra- and inter-day variability for tissues spiked with 0.2, 1, and 5pmol/g AEA of less than 12%. Accuracy for these spiked samples was between 95% and 103% for fetal membranes and between 99% and 114% for placenta. Mean AEA concentrations were 2.72 + or - 1.04 pmol/g for placenta and 1.19 + or - 0.68 pmol/g for fetal membranes, and 0.93 + or - 0.28, 0.88 + or - 0.33, 0.77 + or - 0.30, and 0.06 + or - 0.04nM for maternal, umbilical vein, and umbilical artery plasma and amniotic fluid. Higher AEA concentrations were found in placenta compared to fetal membranes (P<0.0001), in umbilical vein compared with umbilical artery (P=0.0015), and in plasma from maternal circulation compared with umbilical artery (P=0.0152). The relevance of these changes in AEA concentrations at the maternal:fetal interface requires further investigation.

Anandamide levels in human female reproductive tissues: solid-phase extraction and measurement by ultraperformance liquid chromatography tandem mass spectrometry.

Lipides bioactif, l&#39;anandamide (N-arachidonoylethanolamide), est signal&eacute;e &agrave; jouer un r&ocirc;le dans le maintien de la grossesse et la parturition. Nos objectifs &eacute;taient: (1) &eacute;valuer les niveaux de l&#39;AEA &agrave; l&#39;humain maternel : interface foetale et (2) valider l&#39;utilisation de l&#39;extraction en phase solide de AEA de tissus. AEA a &eacute;t&eacute; analys&eacute;e dans le cordon et le sang maternel, le liquide amniotique, placenta et membranes foetales recueillies au cours de c&eacute;sarienne (n = 14). Efficacit&eacute; d&#39;extraction ont &eacute;t&eacute; respectivement de 42 et 36 % pour le placenta et les membranes foetales. Tissu AEA a &eacute;t&eacute; quantifi&eacute; &agrave; l&#39;aide d&#39;une m&eacute;thode de dilution isotopique et UPLC-ESI-MS/MS, donnant la variabilit&eacute; intra - et inter - jour pour tissus additionn&eacute;s de 0,2 et 1 5pmol/g AEA de moins de 12 %. Pr&eacute;cision pour ces &eacute;chantillons enrichis &eacute;tait entre 95 et 103 % pour membranes foetales et entre 99 et 114 % pour le placenta. AEA concentrations moyennes &eacute;taient 2,72 + ou - 1.04 pmol/g pour le placenta et 1,19 + ou - 0.68 pmol/g pour les membranes f&oelig;tales et 0,93 + ou - 0.28, 0,88 + ou - 0,33, 0,77 + ou - 0,30 et 0,06 + ou - 0.04nM pour la veine maternelle, ombilicale et plasma de l&#39;art&egrave;re ombilicale et du liquide amniotique. Des concentrations plus &eacute;lev&eacute;es de AEA trouv&eacute;es dans le placenta par rapport aux membranes foetales (P &lt; 0,0001), dans la veine ombilicale par rapport &agrave; l&#39;art&egrave;re ombilicale (P = 0,0015) et dans le plasma de la circulation maternelle par rapport &agrave; l&#39;art&egrave;re ombilicale (P = 0,0152). La pertinence de ces changements dans les concentrations de AEA &agrave; la maternelle : interface foetale exige de nouvelles enqu&ecirc;tes.

Niveaux d&#39;anandamide dans les tissus humains de reproduction f&eacute;minins : extraction en phase solide et mesure par spectrom&eacute;trie de masse tandem ultraperformance de chromatographie en phase liquide.

Anandamid (N-Arachidonoylethanolamide), eine bioaktive Lipide, wird berichtet, dass eine Rolle bei der Aufrechterhaltung der Schwangerschaft und Geburt. Unsere Ziele waren auswerten (1) AEA-Level bei menschlichen M&uuml;ttern: Validieren fetalen Schnittstelle und (2) die Verwendung von Festphasen-Extraktion von AEA aus Gewebe. AEA im Netzkabel und m&uuml;tterlichen Blut, Fruchtwasser, Plazenta analysiert wurde, und die fetale Membranen w&auml;hrend gesammelt Kaiserschnitt (n = 14). Extraktion Wirkungsgrade lagen 42 bzw. 36 % f&uuml;r die Plazenta und die fetalen Membranen. Gewebe AEA wurde mit Hilfe einer Isotop-Dilution-Methode und UPLC-ESI-MS/MS, Intra - und inter - Tag Variabilit&auml;t f&uuml;r Gewebe gespickt mit 0,2 und 1 5pmol/g AEA von weniger als 12 % quantifiziert. Genauigkeit f&uuml;r diese Spike Beispiele war zwischen 95 und 103 % f&uuml;r fetalen Membranen und 99 bis 114 % f&uuml;r Plazenta. Meine AEA-Konzentrationen waren 2,72 + oder - 1,04 Pmol/g f&uuml;r Plazenta und 1.19 + oder - 0,68 Pmol/g f&uuml;r fetalen Membranen und 0,93 + oder - 0,28, 0,88 + oder - 0,33, 0,77 + oder &ndash; 0.30 und 0,06 + oder - 0,04 f&uuml;r m&uuml;tterliche, Nabel-Vene, und Nabelgegend Arterie Plasma und Fruchtwasser. H&ouml;here Konzentrationen von AEA fanden sich in der Plazenta, die im Vergleich zu fetalen Membranen (P &lt; 0,0001), in Nabel-Vene gegen&uuml;ber Nabelgegend Arterie (P = 0,0015), und im Plasma aus dem m&uuml;tterlichen Verkehr gegen&uuml;ber Nabelgegend Arterie (P = 0.0152). Die Relevanz dieser &Auml;nderungen in AEA-Konzentrationen bei der m&uuml;tterlichen: fetale Schnittstelle erfordert weitere Untersuchungen.

Anandamid-Spiegel im menschlichen weiblichen reproduktiven Geweben: Festphasen-Extraktion und Messung von Ultraperformance Fl&uuml;ssigchromatographie Tandem-Massenspektrometrie.

Anandamide (N-Arachidonoilethanolamide), una lipide bioattive, &egrave; riferito a giocare un ruolo nel mantenimento della gravidanza e del parto. I nostri obiettivi sono stati (1) valutare i livelli di AEA al materno umano: interfaccia fetale e (2) convalidare l&#39;uso dell&#39;estrazione di fase solida dell&#39;AEA dai tessuti. AEA &egrave; stato analizzato nel midollo e sangue materno, liquido amniotico, placenta e membrane fetali raccolti durante il taglio cesareo (n = 14). Efficienza di estrazione era 42 e 36% per la placenta e le membrane fetali, rispettivamente. Tessuto AEA &egrave; stato quantificato utilizzando un metodo di diluizione isotopica e UPLC-ESI-MS/MS dando la variabilit&agrave; intra - e inter - giorno per tessuti a spillo con 0,2 e 1 5pmol/g AEA inferiore al 12%. Precisione per questi campioni a spillo era tra 95 e 103% per le membrane fetali e tra 99 e 114% per la placenta. Significa AEA concentrazioni erano 2,72 + o - 1,04 pmol/g per la placenta e 1,19 + o - 0,68 pmol/g per le membrane fetali e 0.93 + o - 0,28, 0.88 + o - 0.33, 0,77 + o - 0,30 e 0,06 + o - 0.04nM per la vena ombelicale, materna e arteria ombelicale plasma e liquido amniotico. Concentrazioni pi&ugrave; elevate di AEA sono state trovate nella placenta rispetto alle membrane fetali (P &lt; 0,0001), nella vena ombelicale confrontata con arteria ombelicale (P = 0,0015) e nel plasma dalla circolazione materna confrontato con arteria ombelicale (P = 0.0152). La rilevanza di questi cambiamenti nelle concentrazioni di AEA presso la materna: interfaccia fetale richiede ulteriori indagini.

Livelli di anandamide nell&#39;umani tessuti riproduttivi femminili: estrazione in fase solida e la misura di spettrometria di massa tandem in cromatografia liquida di ultraperformance.

&#x30A2;&#x30CA;&#x30F3;&#x30C0;&#x30DF;&#x30C9; (N-arachidonoylethanolamide&#xFF09;&#x3001;&#x751F;&#x7406;&#x6D3B;&#x6027;&#x8102;&#x8CEA;, &#x598A;&#x5A20;&#x7DAD;&#x6301;&#x3068;&#x5206;&#x5A29;&#x3067;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x306B;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x76EE;&#x7684; &#xFF08;1&#xFF09; AEA &#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x6BCD;&#x5B50;&#x306E;&#x4EBA;&#x9593;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#xFF1A; &#x80CE;&#x5150;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30A4;&#x30B9;&#x3068; (2) &#x7D44;&#x7E54;&#x304B;&#x3089; AEA &#x306E;&#x56FA;&#x76F8;&#x62BD;&#x51FA;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x3092;&#x691C;&#x8A3C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;AEA &#x3044;&#x305F;&#x5206;&#x6790;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3068;&#x6BCD;&#x4F53;&#x8840;, &#x7F8A;&#x6C34;, &#x80CE;&#x76E4;&#x3068;&#x80CE;&#x819C;&#x3092;&#x53CE;&#x96C6;&#x4E2D;&#x306B;&#x5E1D;&#x738B;&#x5207;&#x958B; (n = 14)&#x3002;&#x62BD;&#x51FA;&#x52B9;&#x7387;&#x3067;&#x3001;42 &#x80CE;&#x76E4;&#x3068;&#x80CE;&#x5150;&#x819C;&#x306E; 36% &#x3092;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x540C;&#x4F4D;&#x4F53;&#x5E0C;&#x91C8;&#x6CD5;&#x3068;&#x7CBE;&#x5EA6;&#x306E;&#x6700;&#x65B0;-ESI-MS/MS 5pmol/g 12 &#xFF05; &#x672A;&#x6E80;&#x306E; AEA 0.2&#x3001;1&#x3001;&#x30B9;&#x30D1;&#x30A4;&#x30AF;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x65E5;&#x9593;&#x5909;&#x52D5;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5; AEA &#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x3092;&#x884C;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30B9;&#x30D1;&#x30A4;&#x30AF;&#x306E;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x306E;&#x7CBE;&#x5EA6;&#x304A;&#x3088;&#x3073; 99% &#x3068; 114% &#x80CE;&#x76E4;&#x80CE;&#x5150;&#x819C; 103% &#x3068; 95% &#x9593;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;AEA &#x6FC3;&#x5EA6;&#x3044;&#x305F; 2.72 &#x308F;&#x3051;&#x3067; + &#x307E;&#x305F;&#x306F; - &#x80CE;&#x76E4;&#x306E; 1.04 pmol/g &#x3068; 1.19 + &#x307E;&#x305F;&#x306F; - 0.68 pmol/g &#x306E;&#x80CE;&#x5150;&#x819C;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x30FB; 0.93 + &#x307E;&#x305F;&#x306F; - 0.28&#x3001;0.88 + &#x307E;&#x305F;&#x306F; - &#x306E; 0.33&#x3001;0.77 + &#x307E;&#x305F;&#x306F; - 0.30 &#x3068; 0.06 + &#x307E;&#x305F;&#x306F; - 0.04nM &#x6BCD;&#x6027;&#x3001;&#x81CD;&#x9759;&#x8108;&#x3068;&#x81CD;&#x52D5;&#x8108;&#x8840;&#x6F3F;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7F8A;&#x6C34;&#x306E;&#x3002;AEA &#x306E;&#x9AD8;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306F;&#x80CE;&#x76E4;&#x80CE;&#x5150;&#x819C;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x3067;&#x767A;&#x898B;&#x3055;&#x308C;&#x305F; (P &lt; 0.0001)&#x3001;&#x81CD;&#x5E2F;&#x52D5;&#x8108;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x81CD;&#x5E2F;&#x9759;&#x8108;&#x3067; (P = 0.0015) &#x3068;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x81CD;&#x5E2F;&#x52D5;&#x8108;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x6BCD;&#x4F53;&#x306E;&#x5FAA;&#x74B0;&#x304B;&#x3089; (P = 0.0152)&#x3002;AEA &#x306E;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306F;&#x6BCD;&#x4F53;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3068;&#x306E;&#x95A2;&#x9023;&#x6027;: &#x80CE;&#x5150;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30A4;&#x30B9;&#x306F;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x8ABF;&#x67FB;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x5973;&#x6027;&#x306E;&#x751F;&#x6B96;&#x5668;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x30A2;&#x30CA;&#x30F3;&#x30C0;&#x30DF;&#x30C9; &#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#xFF1A; &#x56FA;&#x76F8;&#x62BD;&#x51FA;&#x3068; ultraperformance &#x6DB2;&#x4F53;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30BF;&#x30F3;&#x30C7;&#x30E0;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x6CD5;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3002;

Anandamide (N arachidonoylethanolamide) &#xC0DD;&#xB9AC; &#xD65C;&#xC131; &#xC9C0;&#xC9C8; &#xC784;&#xC2E0; &#xC720;&#xC9C0; &#xBC0F; &#xCD9C;&#xC0B0;&#xC5D0; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD560; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xC54C;&#xB824;&#xC84C;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xBAA9;&#xD45C; (1) &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xBAA8;&#xC131;&#xC5D0;&#xC11C; AEA &#xB808;&#xBCA8;&#xC744; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4;: &#xD0DC;&#xC544; &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xC774;&#xC2A4;&#xC640; (2) &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0;&#xC11C; AEA&#xC758; &#xACE0;&#xCCB4; &#xC0C1; &#xCD94;&#xCD9C; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC758; &#xC720;&#xD6A8;&#xC131;&#xC744; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. AEA &#xBD84;&#xC11D; &#xCF54;&#xB4DC;&#xC640; &#xBAA8;&#xC131; &#xD608;&#xC561;, &#xC591;&#xC218;, &#xD0DC; &#xBC18;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xD0DC;&#xC544; &#xB9C9; &#xB3D9;&#xC548; &#xC218;&#xC9D1; &#xB41C; &#xC81C;&#xC655; &#xC808; &#xAC1C; (n = 14). &#xCD94;&#xCD9C; &#xD6A8;&#xC728; 42 &#xBC0F; &#xD0DC; &#xBC18; &#xBC0F; &#xD0DC;&#xC544; &#xB9C9;&#xC758; 36%&#xB97C; &#xAC01;&#xAC01; &#xAE30;&#xB85D; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC870;&#xC9C1; AEA &#xB3D9;&#xC704; &#xC6D0;&#xC18C; &#xD76C;&#xC11D; &#xBC29;&#xBC95;&#xACFC; UPLC-ESI-MS/MS 0.2, 1, 5pmol/g 12% &#xBBF8;&#xB9CC;&#xC758; AEA&#xC640; &#xC544;&#xAD70; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB0B4;&#xACFC; &#xB610;&#xB294; day &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xC8FC;&#xB294; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xACC4;&#xB7C9; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC544;&#xAD70;&#xB41C;&#xC774; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC815;&#xD655;&#xB3C4; 95%, &#xD0DC;&#xC544; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9;&#xC758; 103% &#xBC0F; 99%&#xC640; &#xD0DC; &#xBC18;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; 114%. AEA &#xB18D;&#xB3C4; &#xD588;&#xB2E4; 2.72 &#xC758;&#xBBF8; + &#xB610;&#xB294;-1.04 pmol/&#xD0DC; &#xBC18;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; g&#xC640; 1.19 + &#xB610;&#xB294;-0.68 pmol/g &#xD0DC;&#xC544; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9; &#xBC0F; 0.93 + &#xB610;&#xB294;-0.28, 0.88 + &#xB610;&#xB294;-0.33, 0.77 + &#xB610;&#xB294;-0.30, &#xBC0F; 0.06 + &#xB610;&#xB294;-&#xC0B0; &#xBAA8;, &#xD0EF; &#xC904; &#xC815; &#xB9E5;&#xACFC; &#xD0EF; &#xC904; &#xB3D9;&#xB9E5; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xBC0F; &#xC591;&#xC218;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; 0.04nM. &#xB192;&#xC740; AEA &#xB18D;&#xB3C4; &#xD0DC;&#xC544; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xD0DC; &#xBC18;&#xC5D0; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xB2E4; (P &lt; 0.0001), &#xD0EF; &#xC904; &#xB3D9;&#xB9E5;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xD0EF; &#xC904; &#xC815; &#xB9E5;&#xC5D0; (P = 0.0015), &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xD0EF; &#xC904; &#xB3D9;&#xB9E5;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xBAA8;&#xC131; &#xC21C;&#xD658;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; (P = 0.0152). &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBCC0;&#xD654;&#xB294; &#xBAA8;&#xC131;&#xC5D0;&#xC11C; AEA &#xB18D;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828;&#xC131;: &#xD0DC;&#xC544; &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xC774;&#xC2A4; &#xCD94;&#xAC00; &#xC870;&#xC0AC; &#xD574;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC5EC;&#xC131; &#xC0DD;&#xC2DD; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0;&#xC11C; Anandamide &#xC218;&#xC900;: &#xACE0;&#xCCB4; &#xC0C1; &#xCD94;&#xCD9C; &#xBC0F; ultraperformance &#xC561;&#xCCB4; &#xD06C;&#xB85C;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xADF8;&#xB798;&#xD53C; &#xD0E0;&#xB364; &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCE21;&#xC815;.

Anandamida (N-arachidonoylethanolamide), un l&iacute;pido bioactivo, se divulga a desempe&ntilde;ar un papel en el mantenimiento del embarazo y parto. Nuestros objetivos fueron: (1) evaluar niveles AEA en el ser humano maternal: interfaz fetal y (2) validar el uso de extracci&oacute;n en fase s&oacute;lida de AEA de tejidos. AEA se analiz&oacute; en la m&eacute;dula y la sangre materna, l&iacute;quido amni&oacute;tico, placenta y membranas fetales recolectan durante ces&aacute;rea (n = 14). Eficiencias de extracci&oacute;n fueron 42 y 36% para la placenta y las membranas fetales, respectivamente. Tejido AEA se cuantific&oacute; usando un m&eacute;todo de diluci&oacute;n isot&oacute;pica y UPLC-ESI-MS/MS dando variabilidad intra - y inter - d&iacute;a para tejidos a&ntilde;adi&oacute; 0.2 y 1 5pmol/g AEA de menos de 12%. Exactitud para estas muestras inoculadas era entre 95% y 103% para membranas fetales y entre 99% y 114% para la placenta. Significa AEA concentraciones fueron 2,72 + o - 1.04 pmol/g para la placenta y 1,19 + o - 0.68 pmol/g para membranas fetales y 0,93 + o - 0.28, 0,88 + o - 0.33, 0,77 + o - 0.30 y 0,06 + o - 0.04nM de la vena umbilical, maternal y plasma de arteria umbilical y l&iacute;quido amni&oacute;tico. Concentraciones m&aacute;s altas de la AEA fueron encontradas en placenta comparado con membranas fetales (P &lt; 0.0001), en la vena umbilical con arteria umbilical (P = 0.0015) y en el plasma de la circulaci&oacute;n materna en comparaci&oacute;n con la arteria umbilical (P = 0.0152). La relevancia de estos cambios en las concentraciones de la AEA en el maternal: interfaz fetal requiere m&aacute;s investigaci&oacute;n.

Los niveles de anandamida en tejidos reproductivos femeninos humanos: extracci&oacute;n en fase s&oacute;lida y medici&oacute;n por espectrometr&iacute;a total en t&aacute;ndem ultraperformance cromatograf&iacute;a l&iacute;quida.

&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x5927;&#x9EBB;&#x3001; &#x8FA3;&#x6912;&#x548C;&#x8FC7;&#x6C27;&#x5316;&#x7269;&#x9176;&#x4F53;&#x589E;&#x6B96;&#x7269;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684; endocannabinoids Acylethanolamides anandamide &#xFF08;AEA&#xFF09; &#x548C;&#x50CF; 2 arachidonoylglycerol monoacylglycerols &#x7B49;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x3001; &#x53CA;&#x5176;&#x5404;&#x79CD;&#x53D7;&#x4F53;&#x3001; &#x5145;&#x4F5C;&#x7684;&#x819C; transporter(s) &#x548C;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x9176;&#x7684;&#x5408;&#x6210;&#xFF0C;&#x964D;&#x4F4E;&#x5B83;&#x4EEC;&#x90FD;&#x7EDF;&#x79F0;&#x4E3A;&quot;endocannabinoid &#x7CFB;&#x7EDF; (ECS)&quot;&#x3002;&#x4E0D;&#x660E;&#x786E;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x5206;&#x5B50;&#x673A;&#x5236;&#x63A7;&#x5236;&#x751F;&#x7269;&#x7684; ECS &#x64CD;&#x4F5C;&#x3002;&#x5728;&#x8FC7;&#x53BB;&#x5341;&#x5E74;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x4E00;&#x76F4;&#x5728;&#x51FA;&#x73B0;&#x8868;&#x660E; ECS &#x5728;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x751F;&#x6B96;&#x7684;&#x5404;&#x4E2A;&#x65B9;&#x9762;&#x8D77;&#x7740;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x6B21;&#x5BA1;&#x67E5;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x603B;&#x7ED3;&#x4E86;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F53;&#x524D;&#x7684;&#x7406;&#x89E3;&#xFF0C;&#x7279;&#x522B;&#x662F;&#x53C2;&#x4E0E;&#x79EF;&#x6781;&#x5C31;&#x4E1A;&#x63F4;&#x52A9;&#x8BA1;&#x5212;&#x548C;&#x76F8;&#x5173;&#x7684; ECS &#x5143;&#x7D20;&#x5728;&#x89C4;&#x7BA1;&#x3001; &#x5375;&#x5B50;&#x3001; &#x80DA;&#x80CE;&#x8F93;&#x5375;&#x7BA1;&#x8FD0;&#x8F93;&#x3001; &#x80DA;&#x6CE1;&#x690D;&#x5165;&#x3001; &#x80CE;&#x76D8;&#x53D1;&#x5C55;&#x548C;&#x598A;&#x5A20;&#x7ED3;&#x5C40;&#x548C;&#x7CBE;&#x5B50;&#x751F;&#x5B58;&#x7684;&#x52A8;&#x529B;&#x3001; &#x7CBE;&#x5B50;&#x83B7;&#x80FD;&#x548C;&#x9876;&#x4F53;&#x53CD;&#x5E94;&#x6B64;&#x89D2;&#x8272;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x5C06;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x8840;&#x6D46;&#x548C;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x79EF;&#x6781;&#x5C31;&#x4E1A;&#x63F4;&#x52A9;&#x8BA1;&#x5212;&#x53CA;&#x5176;&#x4ED6;&#x5927;&#x9EBB;&#x7D20;&#x53EF;&#x80FD;&#x4EE3;&#x8868;&#x5987;&#x5973;&#x81EA;&#x7136;&#x548C;&#x8F85;&#x52A9;&#x751F;&#x6B96;&#x548C;&#x598A;&#x5A20;&#x7ED3;&#x5C40;&#x7684;&#x53EF;&#x9760;&#x8BCA;&#x65AD;&#x6807;&#x5FD7;&#x7269;&#x7684;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3002;

Endocannabinoids &#x548C;&#x598A;&#x5A20;&#x3002;

Acylethanolamides such as anandamide (AEA), and monoacylglycerols like 2-arachidonoylglycerol are endocannabinoids that bind to cannabinoid, vanilloid and peroxisome proliferator-activated receptors. These compounds, their various receptors, the purported membrane transporter(s), and related enzymes that synthesize and degrade them are collectively referred to as the "endocannabinoid system (ECS)". Poorly defined cellular and molecular mechanisms control the biological actions of the ECS. Over the last decade evidence has been emerging to suggest that the ECS plays a significant role in various aspects of human reproduction. In this review, we summarize our current understanding of this role especially the involvement of AEA and related ECS elements in regulating oogenesis, embryo oviductal transport, blastocyst implantation, placental development and pregnancy outcomes, and sperm survival, motility, capacitation and acrosome reaction. Additionally, the possibility that plasma and tissue AEA and other cannabinoids may represent reliable diagnostic markers of natural and assisted reproduction and pregnancy outcomes in women will be discussed.

Endocannabinoids and pregnancy.

Acylethanolamides comme anandamide (AEA) et monoacylglyc&eacute;rols comme 2-arachidonoylglycerol sont les cannabino&iuml;des endog&egrave;nes qui se lient aux cannabino&iuml;des, VANILLO&Iuml;DE et peroxisome proliferator-activated receptors. Ces compos&eacute;s, leurs r&eacute;cepteurs diff&eacute;rents, la pr&eacute;tendue membrane ETX et connexes des enzymes qui synth&eacute;tisent et d&eacute;gradent les sont collectivement d&eacute;nomm&eacute;s &laquo; syst&egrave;me endocannabino&iuml;de (ECS) &raquo;. Les m&eacute;canismes cellulaires et mol&eacute;culaires mal d&eacute;finis contr&ocirc;lent les actions biologiques de l&#39;ECS. Au cours de la derni&egrave;re preuve de la d&eacute;cennie a &eacute;t&eacute; &eacute;mergentes pour sugg&eacute;rer que l&#39;ECS joue un r&ocirc;le significatif dans divers aspects de la reproduction humaine. Dans cette revue, nous r&eacute;sumons notre compr&eacute;hension de ce r&ocirc;le, en particulier la participation de l&#39;AEA et des &eacute;l&eacute;ments connexes d&#39;ECS dans la r&eacute;gulation ovogen&egrave;se, transport tubaire embryon, implantation du blastocyste, d&eacute;veloppement placentaire et la grossesse et la survie de sperme, motilit&eacute;, capacitation et r&eacute;action de l&#39;acrosome. En outre, la possibilit&eacute; que le plasma et les tissus AEA et autres cannabino&iuml;des peuvent repr&eacute;senter des marqueurs diagnostiques fiables des r&eacute;sultats naturels et assist&eacute;es de reproduction et grossesse chez les femmes est discut&eacute;e.

Cannabino&iuml;des endog&egrave;nes et grossesse.

Acylethanolamides z. B. Anandamid (AEA) und Kohlenhydrate wie 2-Arachidonylglycerol sind Endocannabinoide, die Cannabinoid, Vanilloid und Peroxisom-Proliferator-aktivierte Rezeptoren binden. Dieser Verbindungen, ihre verschiedenen Rezeptoren, die angeblichen Membran Transporter(s) und verwandte Enzyme, die synthetisieren und erniedrigen sie werden kollektiv als die &quot;Endocannabinoid-System (ECS)&quot; bezeichnet. Unzureichend definierte zellul&auml;re und Molekulare Mechanismen steuern die biologischen Wirkungen des ECS. In den letzten hat Jahrzehnt Beweise Schwellenl&auml;ndern wurde verlangt, dass ECS spielt eine bedeutende Rolle in den verschiedenen Aspekten der menschlichen Reproduktion. In diesem Bericht fassen wir unser gegenw&auml;rtige Verst&auml;ndnis dieser Rolle vor allem die Beteiligung der AEA und verwandte ECS-Elemente bei der Regulierung der Oogenese, Embryo oviductal Transport, Einnistung der Blastozyste, Plazenta-Entwicklung und Schwangerschaft und Spermien &uuml;berleben, Motilit&auml;t, Rechtsf&auml;higkeit und Akrosom Reaktion. Dar&uuml;ber hinaus wird die M&ouml;glichkeit, dass Plasma und Gewebe AEA und andere Cannabinoide zuverl&auml;ssige diagnostische Marker der nat&uuml;rlichen und assistierten Reproduktion and Pregnancy Outcomes bei Frauen darstellen kann diskutiert werden.

Endocannabinoide und Schwangerschaft.

Acylethanolamides come anandamide (AEA) e monoacylglycerols come 2-arachidonoylglycerol sono gli endocannabinoidi che si legano ai recettori dei cannabinoidi, vanilloidi e peroxisome proliferator-activated. Questi composti, loro recettori diversi, la presunta membrana transporter(s) e relativi enzimi che sintetizzano e degradano li sono collettivamente come il &quot;sistema di endocannabinoid (ECS)&quot;. Mal definiti meccanismi cellulari e molecolari controllano le azioni biologiche della ECS. Sopra l&#39;ultima prova decennio ha stato emergenti per suggerire che l&#39;ECS gioca un ruolo significativo in vari aspetti della riproduzione umana. In questa recensione, riassumiamo la nostra attuale comprensione di questo ruolo soprattutto il coinvolgimento di AEA ed elementi correlati ECS nella regolazione della reazione acrosomiale, capacitazione e ovogenesi, ovidotto trasporto dell&#39;embrione, l&#39;impianto di blastocisti, sviluppo placenta ed esiti di gravidanza e sopravvivenza degli spermatozoi, motilit&agrave;. Inoltre, sar&agrave; discussa la possibilit&agrave; che plasma e tessuto AEA e altri cannabinoidi possono rappresentare marcatori diagnostici affidabili dei risultati di riproduzione e gravidanza naturali e assistiti in donne.

Gli endocannabinoidi e gravidanza.

Acylethanolamides &#x306A;&#x3069;&#x30A2;&#x30CA;&#x30F3;&#x30C0;&#x30DF;&#x30C9; (AEA) &#x30E2;&#x30CE;&#x30A2;&#x30B7;&#x30EB;&#x30B0;&#x30EA;&#x30BB; 2-&#x30A2;&#x30E9;&#x30AD;&#x30C9;&#x30CE;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B0;&#x30EA;&#x30BB; &#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x306B;&#x30AB;&#x30F3;&#x30CA;&#x30D3;&#x30CE;&#x30A4;&#x30C9;&#x3001;&#x30D0;&#x30CB;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x3001;&#x30DA;&#x30EB;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x5897;&#x6B96;&#x56E0;&#x5B50;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x5185;&#x56E0;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x3001;&#x7A2E;&#x3005; &#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3001;&#x79F0;&#x3059;&#x308B;&#x819C; transporter(s) &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x95A2;&#x9023;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x3092;&#x5408;&#x6210;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x3092;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3092;&#x7DCF;&#x79F0;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x300C;&#x30AB;&#x30F3;&#x30CA;&#x30D3;&#x30CE;&#x30A4;&#x30C9; &#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0; (ECS)&#x300D;&#x547C;&#x3073;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x304C;&#x4E0D;&#x5341;&#x5206;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5206;&#x5B50;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;ECS &#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x884C;&#x52D5;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x904E;&#x53BB; 10 &#x5E74;&#x9593;&#x3001;ECS &#x304C;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x751F;&#x6B96;&#x306E;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x5074;&#x9762;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3059;&#x308B;&#x51FA;&#x73FE;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30EC;&#x30D3;&#x30E5;&#x30FC;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x7279;&#x306B; AEA &#x3068;&#x5375;&#x5DE3;&#x80DA;&#x5375;&#x7BA1;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3001;&#x80DA;&#x76E4;&#x80DE;&#x306E;&#x6CE8;&#x5165;&#x3001;&#x80CE;&#x76E4;&#x958B;&#x767A;&#x3068;&#x598A;&#x5A20;&#x8EE2;&#x5E30;&#x30FB;&#x7CBE;&#x5B50;&#x751F;&#x5B58;&#x904B;&#x52D5;&#x3001;&#x53D7;&#x7CBE;&#x80FD;&#x7372;&#x5F97;&#x3068;&#x5148;&#x4F53;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x95A2;&#x9023;&#x306E; ECS &#x8981;&#x7D20;&#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;&#x306E;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x7406;&#x89E3;&#x3092;&#x8981;&#x7D04;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE; &#x30FB; &#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5; AEA &#x3068;&#x4ED6;&#x306E;&#x30AB;&#x30F3;&#x30CA;&#x30D3;&#x30CE;&#x30A4;&#x30C9;&#x304C;&#x5973;&#x6027;&#x3067;&#x3001;&#x81EA;&#x7136;&#x3068;&#x30A2;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30C9;&#x751F;&#x6B96;&#x3068;&#x598A;&#x5A20;&#x7D50;&#x679C;&#x306E;&#x4FE1;&#x983C;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x8A3A;&#x65AD;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3092;&#x8868;&#x3059;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x8B70;&#x8AD6;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x5185;&#x56E0;&#x3068;&#x598A;&#x5A20;&#x3002;

Anandamide (AEA) &#xB4F1;&#xACFC; &#xAC19;&#xC740; 2 arachidonoylglycerol monoacylglycerols Acylethanolamides endocannabinoids cannabinoid, vanilloid &#xBC0F; peroxisome proliferator &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;, &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;, &#xC758;&#xB3C4;&#xC801;&#xC778;&#xB41C; &#xB9C9; transporter(s) &#xBC0F; &#xAD00;&#xB828;&#xB41C; &#xD6A8;&#xC18C;&#xB97C; &#xD569;&#xC131; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC744; &#xC800;&#xD558;&#xC744; &#xD1B5;&#xCE6D; &#xD558; &#xC5EC; &quot;endocannabinoid &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; (ECS)&quot; &#xC774;&#xB77C;&#xACE0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC800;&#xC870;&#xD55C; &#xC815;&#xC758; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC0F; &#xBD84;&#xC790; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; ECS&#xC758; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xB3D9;&#xC791;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC9C0;&#xB09C; 10 &#xB144;&#xAC04; &#xC99D;&#xAC70;&#xB294; ECS &#xC778;&#xAC04; &#xBCF5;&#xC81C;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xCE21;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC2E0;&#xD765; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xB9AC;&#xBDF0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294;&#xC774; &#xC5ED;&#xD560; AEA&#xC640; oogenesis, &#xD0DC;&#xC544; oviductal &#xC804;&#xC1A1;, blastocyst &#xC774;&#xC2DD;, &#xD0DC; &#xBC18; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xBC0F; &#xC784;&#xC2E0; &#xACB0;&#xACFC; &#xBC0F; &#xC815;&#xC790; &#xC0DD;&#xC874;, &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131;, capacitation &#xBC0F; acrosome &#xBC18;&#xC751; &#xC870;&#xC808;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; ECS &#xC694;&#xC18C; &#xD2B9;&#xD788; &#xCC38;&#xC5EC;&#xC758; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xD604;&#xC7AC; &#xC774;&#xD574; &#xC694;&#xC57D;. &#xB610;&#xD55C;, &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xBC0F; AEA &#xC870;&#xC9C1;&#xACFC; &#xB2E4;&#xB978; cannabinoids &#xC5EC;&#xC131;&#xC758; &#xC790;&#xC5F0; &#xBC0F; &#xBCF4;&#xC870; &#xBCF5;&#xC81C; &#xBC0F; &#xC784;&#xC2E0; &#xACB0;&#xACFC;&#xC758; &#xC2E0;&#xB8B0;&#xC131; &#xC788;&#xB294; &#xC9C4;&#xB2E8; &#xB9C8;&#xCEE4;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0BC; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Endocannabinoids&#xC640; &#xC784;&#xC2E0;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Acylethanolamides como anandamida (AEA) y monoacylglycerols como 2-araquidonilglicerol son endocannabinoides que unen a los receptores cannabinoides, vaniloides y peroxisome proliferator-activado. Estos compuestos, sus diferentes receptores, supuesta de la membrana transporter(s) y enzimas relacionadas que sintetizan y degradan son colectivamente denominadas el &quot;sistema endocannabinoide (ECS)&quot;. Mal definidos los mecanismos celulares y moleculares de control las acciones biol&oacute;gicas de la ECS. En los &uacute;ltimos ha ido surgiendo evidencia de la d&eacute;cada para sugerir que el ECS juega un papel importante en diversos aspectos de la reproducci&oacute;n humana. En esta revisi&oacute;n, resumimos nuestra comprensi&oacute;n actual de este papel especialmente la participaci&oacute;n de AEA y elementos relacionados ECS en la regulaci&oacute;n de la ovog&eacute;nesis, transporte oviducto embri&oacute;n, implantaci&oacute;n del blastocisto, desarrollo placentario y los resultados del embarazo y supervivencia de los espermatozoides, motilidad, capacitaci&oacute;n y reacci&oacute;n acros&oacute;mica. Adem&aacute;s, se discutir&aacute; la posibilidad de que el plasma y tejido AEA y otros cannabinoides pueden representar marcadores de diagn&oacute;stico confiables de resultados de reproducci&oacute;n y embarazo naturales y asistidos en mujeres.

Endocannabinoides y embarazo.

Endocannabinoids &#x5305;&#x62EC; N-acylethanolamides (&#x89D2;) &#x662F;&#x4E00;&#x5BB6;&#x4EBA;&#xFF0C;&#x7275;&#x8FDE;&#x8BB8;&#x591A;&#x751F;&#x7406;&#x8102;&#x8D28;&#x76F8;&#x5173;&#x4FE1;&#x53F7;&#x5206;&#x5B50;&#x548C;&#x75BE;&#x75C5;&#x72B6;&#x6001;&#x5F15;&#x8D77;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x901A;&#x8FC7;&#x5927;&#x9EBB;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;Anandamide N arachidonoylethanolamine AEA&#xFF09; &#x662F;&#x6700;&#x6709;&#x7279;&#x8272;&#x7684; endocannabinoid&#xFF0C;&#x5E76;&#x5DF2;&#x5728;&#x5F88;&#x591A;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x548C;&#x751F;&#x7269;&#x6D41;&#x4F53;&#x5305;&#x62EC;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x8840;&#x6D46;&#x548C;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x3002;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E; endocannabinoid &#x7684;&#x89D2;&#x4E2D;&#xFF0C;oleoylethanolamide (&#x8058;&#x4E66;) &#x548C; palmitoylethanolamide (&#x8C4C;&#x8C46;) &#x5C06;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x4EE5;&#x53CA;&#x968F;&#x884C;&#x4EBA;&#x5458;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x56E0;&#x4E3A;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x975E;&#x6CD5;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x751F;&#x7406;&#x5F71;&#x54CD;&#x5230; AEA &#x4F46;&#x6709;&#x5F88;&#x5C11;&#x6216;&#x6CA1;&#x6709;&#x5BF9;&#x5927;&#x9EBB;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x4EB2;&#x548C;&#x529B;&#x3002;&#x968F;&#x4ECE;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#xFF0C;&#x5982;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x89D2;&#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#x4F1A;&#x5927;&#x5927;&#x5F71;&#x54CD; AEA &#x7684;&#x7597;&#x6548;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6709;&#x51E0;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x8861;&#x91CF;&#x751F;&#x7269;&#x6D41;&#x4F53;&#x4E2D;&#x7684;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x3002;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x751F;&#x7269;&#x6D41;&#x4F53;&#x4E2D;&#x7684;&#x79EF;&#x6781;&#x5C31;&#x4E1A;&#x63F4;&#x52A9;&#x8BA1;&#x5212;&#x3001; &#x6D77;&#x5916;&#x6559;&#x80B2;&#x6D25;&#x8D34;&#x548C;&#x8C4C;&#x8C46;&#x5206;&#x6790;&#x5FEB;&#x901F;&#x7684;&#x3001; &#x9AD8;&#x5EA6;&#x654F;&#x611F;&#x7684;&#x3001; &#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x548C;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x53EF;&#x91CD;&#x73B0;&#x8D85;&#x9AD8;&#x6027;&#x80FD;&#x6DB2;&#x76F8;&#x8272;&#x8C31;&#x4E32;&#x8054;&#x8D28;&#x8C31; (UPLC-MS/MS) &#x65B9;&#x6CD5;&#x5305;&#x62EC;&#x8840;&#x6D46;&#x3001; &#x8840;&#x6E05;&#x3001; &#x6BCD;&#x4E73;&#x548C;&#x7F8A;&#x819C;&#x6D41;&#x4F53;&#x3002;&#x6B64;&#x7ECF;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x7528;&#x5168;&#x6C18; &#xFF08;AEA-d(8)&#x3001; OEA-d(2) &#x548C; PEA-d(4)) &#x7684;&#x5185;&#x90E8;&#x6807;&#x51C6;&#x3001; &#x4EE3;&#x8868;&#x4EE5;&#x524D;&#x5206;&#x6790;&#x7684;&#x89D2;&#x5EA6;&#x5BF9;&#x6539;&#x8FDB;&#x8FD0;&#x884C;&#x65F6;&#x95F4; &#xFF08;4 &#x5206;&#x949F;&#xFF09;&#xFF0C;&#x68C0;&#x6D4B; &#xFF08;AEA &#x548C;&#x8C4C;&#x8C46;&#x7684;&#x5217;&#x4E0A;&#x7684; 0.9 fmol) &#x548C;&#x7533;&#x9886;&#xFF0C;&#x5217;&#x4E0A;&#x7684; 4.4 fmol &#x7CBE;&#x5EA6;&#x7684;&#x9650;&#x5236; (&#x7E41;&#x5FD9;&#x5730;&#x533A;&#x7684;&#x76F8;&#x5BF9;&#x6807;&#x51C6;&#x504F;&#x5DEE;&#xFF1A; 3.1%&#xFF08;AEA&#xFF09;&#x3001; (&#x8058;&#x4E66;) &#x7684; 2.9%&#x548C; 5.4%(&#x8C4C;&#x8C46;) &#x4E3A; 133 fmol &#x5217;&#x4E0A;&#xFF09; &#x548C;&#x51C6;&#x786E;&#x6027; (95.1 1.049%)&#x3002;&#x7075;&#x654F;&#x5EA6;&#x53CA;&#x7CBE;&#x786E;&#x5EA6;&#x6B64;&#x5904;&#x6240;&#x8FF0;&#x7684;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x9002;&#x5408;&#x4E34;&#x5E8A;&#x6837;&#x54C1;&#x4E2D;&#x79EF;&#x6781;&#x5C31;&#x4E1A;&#x63F4;&#x52A9;&#x8BA1;&#x5212;&#x3001; &#x6D77;&#x5916;&#x6559;&#x80B2;&#x6D25;&#x8D34;&#x548C;&#x8C4C;&#x8C46;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#xFF0C;&#x5E76;&#x53EF;&#x80FD;&#x7528;&#x4E8E;&#x751F;&#x7269;&#x77E9;&#x9635;&#x5305;&#x542B;&#x6570;&#x91CF;&#x6709;&#x9650;&#x7684;&#x89D2;&#x7684;&#x8C03;&#x67E5;&#x3002;

&#x4E09;&#x4E2A; N acylethanolamides &#x5728;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x751F;&#x7269;-&#x77E9;&#x9635;&#x4F7F;&#x7528;&#x8D85;&#x9AD8;&#x6027;&#x80FD;&#x6DB2;&#x76F8;&#x8272;&#x8C31;&#x4E32;&#x8054;&#x8D28;&#x8C31;&#x6CD5;&#x540C;&#x65F6;&#x6D4B;&#x91CF;&#x3002;

Endocannabinoids including N-acylethanolamides (NAEs) are a family of lipid-related signaling molecules implicated in many physiological and disease states which elicit their activities via the cannabinoid receptors. Anandamide (N-arachidonoylethanolamine, AEA) is the most characterized endocannabinoid and has been detected in many tissues and bio-fluids including human plasma and the central nervous system. The endocannabinoid-like NAEs, oleoylethanolamide (OEA) and palmitoylethanolamide (PEA) are described as entourage compounds because they illicit similar physiological effects to AEA but have little or no affinity for cannabinoid receptors. As entourage compounds, levels of these NAEs can greatly influence the efficacy of AEA yet there are few studies which measure these compounds in bio-fluids. Here we describe a rapid, highly sensitive, specific and highly reproducible ultra-high-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (UPLC-MS/MS) method for the analysis of AEA, OEA, and PEA in human bio-fluids including plasma, serum, breast milk, and amniotic fluids. This validated method using deuterated (AEA-d(8), OEA-d(2), and PEA-d(4)) internal standards, represents an improvement over previous analyses in terms of run time (4 min), limit of detection (0.9 fmol on column for AEA and PEA and 4.4 fmol on column for OEA), precision (relative standard deviations of peak areas: 3.1% (AEA), 2.9% (OEA), and 5.4% (PEA) for 133 fmol on column) and accuracy (95.1-104.9%). The sensitivity and precision of the validated method described here suggests that this method is suitable for the analysis of AEA, OEA, and PEA in clinical samples and may be utilized for the investigation of bio-matrices containing limited amounts of NAEs.

Simultaneous measurement of three N-acylethanolamides in human bio-matrices using ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry.

Endocannabino&iuml;des y compris N-acylethanolamides (NAEs) sont une famille de lipides li&eacute;s les mol&eacute;cules de signalisation impliqu&eacute;es dans de nombreux physiologiques et &eacute;tats pathologiques qui suscitent leurs activit&eacute;s via les r&eacute;cepteurs cannabino&iuml;des. Anandamide (N-arachidonoylethanolamine, AEA) est le plus caract&eacute;ris&eacute; endocannabino&iuml;de et a &eacute;t&eacute; d&eacute;tect&eacute; dans de nombreux tissus et bio-fluides, y compris le plasma humain et le syst&egrave;me nerveux central. Les type endocannabino&iuml;de NAEs, oleoylethanolamide (OEA) et palmitoylethanolamide (PEA) sont d&eacute;crits comme entourage compos&eacute;s car ils ont des effets physiologiques similaires illicites d&#39;AEA, mais ont peu ou aucune affinit&eacute; pour les r&eacute;cepteurs cannabino&iuml;des. Comme entourage compos&eacute;s, des niveaux de ces NAEs peuvent grandement influencer l&#39;efficacit&eacute; de l&#39;AEA et pourtant il y a peu d&#39;&eacute;tudes qui mesurent ces compos&eacute;s dans les bio-fluides. Nous d&eacute;crivons ici une m&eacute;thode rapide, tr&egrave;s sensible, sp&eacute;cifique et hautement reproductible ultra performant liquid chromatography-spectrom&eacute;trie de masse (UPLC-MS/MS) pour l&#39;analyse de l&#39;AEA, OEA et pois en bio-fluides humains dont plasma, s&eacute;rum et lait maternel amniotique. Cette m&eacute;thode valid&eacute;e &agrave; l&#39;aide de deut&eacute;r&eacute; (AEA-d(8), OEA-d(2) et PEA-d(4)) des normes internes, repr&eacute;sente une am&eacute;lioration par rapport &agrave; des analyses ant&eacute;rieures en termes de dur&eacute;e (4 min), limite de d&eacute;tection (0,9 fmol sur colonne d&#39;AEA et pois) et 4,4 fmol sur colonne pour l&#39;OEA, pr&eacute;cise (&eacute;carts types relatifs de des pics : 3.1 % (AEA), 2,9 % (OEA) et 5,4 % (PEA) pour 133 fmol sur colonne) et pr&eacute;cision (104,9-95,1 %). La sensibilit&eacute; et la pr&eacute;cision de la m&eacute;thode valid&eacute;e d&eacute;crite ici sugg&egrave;re que cette m&eacute;thode est adapt&eacute;e pour l&#39;analyse de l&#39;AEA, OEA et pois dans des &eacute;chantillons cliniques et peut &ecirc;tre utilis&eacute;e pour l&#39;&eacute;tude des bio-matrices contenant des quantit&eacute;s limit&eacute;es de NAEs.

Mesure simultan&eacute;e des trois N-acylethanolamides dans les bio-matrices humaines utilisant ultra performance liquid chromatography-spectrom&eacute;trie de masse.

Endocannabinoide inklusive N-Acylethanolamides (NAEs) eine Familie der Lipid-bezogene signalisierende Molek&uuml;le verwickelt in vielen physiologischen sind und Krankheit-Staaten, die ihre Aktivit&auml;ten &uuml;ber die Cannabinoidrezeptoren zu entlocken. Anandamid (N-Arachidonoylethanolamine, AEA) ist am meisten gekennzeichnet Endocannabinoid und in vielen Geweben und Bio-Fl&uuml;ssigkeiten einschlie&szlig;lich Blutplasma und des zentralen Nervensystems erkannt wurde. Die NAEs Endocannabinoid-wie Oleoylethanolamide (OEA) und Palmitoylethanolamide (PEA) werden beschrieben, wie Entourage Verbindungen, weil sie illegale &auml;hnliche physiologische Effekte, AEA aber wenig oder gar keine Affinit&auml;t f&uuml;r Cannabinoidrezeptoren haben. Wie Entourage Verbindungen, k&ouml;nnen Ebenen diese NAEs erheblich die Wirksamkeit der AEA beeinflussen, dennoch gibt es einige Studien, die diese Verbindungen in Bio-Fl&uuml;ssigkeiten zu messen. Hier beschreiben wir eine schnelle, hoch sensible, spezifische und hoch reproduzierbare ultra-high-Performance liquid Chromatographie-Tandem-Massenspektrometrie (UPLC-MS/MS) Methode f&uuml;r die Analyse von AEA, OEA und PEA im menschlichen Bio-Fl&uuml;ssigkeiten einschlie&szlig;lich Plasma, Serum, Muttermilch und amniotische Fl&uuml;ssigkeit. Diese validierte Methode mit deuterated (AEA-d(8), OEA-d(2) und PEA-d(4)) interne Standards, stellt eine Verbesserung gegen&uuml;ber der vorherigen Analysen hinsichtlich der Laufzeit (4 min), Begrenzung der Erkennung (0,9 Fmol auf Spalte f&uuml;r AEA und PHENYLETHYLAMIN) und 4,4 Fmol auf Spalte f&uuml;r OEA, Pr&auml;zision (relativen Standardabweichungen der Peakfl&auml;chen: 3,1 % (AEA), 2,9 % (OEA) und 5,4 % (PEA) f&uuml;r 133 Fmol auf Spalte) und Genauigkeit (95,1-104,9 %). Die Empfindlichkeit und Genauigkeit der hier beschriebenen validierte Methode legt nahe, dass diese Methode eignet sich f&uuml;r die Analyse der AEA, OEA und PEA in klinischen Proben und f&uuml;r die Untersuchung von Bio-Matrizen mit begrenzte Mengen an NAEs genutzt werden kann.

Gleichzeitige Messung von drei N-Acylethanolamides in menschlichen Bio-Matrizen mit ultra-Performance liquid Chromatographie-Tandem-Massenspektrometrie.

Gli endocannabinoidi compresi N-acylethanolamides (NAEs) sono una famiglia di molecole di segnalazione lipido-correlati implicati in molti fisiologici e Stati di malattia che suscitano le loro attivit&agrave; attraverso i recettori dei cannabinoidi. Anandamide (N-arachidonoylethanolamine, AEA) &egrave; il pi&ugrave; caratterizzato degli endocannabinoidi ed &egrave; stato rilevato in molti tessuti e bio-fluidi tra cui plasma umano e il sistema nervoso centrale. L&#39;endocannabinoide-come NAEs, oleoylethanolamide (OEA) e palmitoylethanolamide (PEA) sono descritti come entourage composti perch&eacute; illeciti simili effetti fisiologici a AEA ma hanno poca o nessuna affinit&agrave; per i recettori dei cannabinoidi. Come composti di entourage, livelli di questi NAEs possono influenzare notevolmente l&#39;efficacia dell&#39;AEA ancora ci sono pochi studi che misurano questi composti in bio-fluidi. Qui descriviamo un metodo rapido, altamente sensibile, specifico e altamente riproducibile prestazioni ultra-elevate liquido cromatografia-spettrometria di massa tandem (UPLC-MS/MS) per l&#39;analisi dell&#39;AEA, OEA e pisello in bio-fluidi umani compresi, plasma, siero, latte materno e amniotico. Questo metodo convalidato utilizzando deuterated (standard interno AEA-d(8), OEA-d(2) e PEA-d(4)), rappresenta un miglioramento rispetto alle analisi precedenti in termini di fase (4 min), limite di rilevazione (0,9 fmol sulla colonna per AEA e piselli) e 4,4 fmol sulla colonna per OEA, precisione di esecuzione (deviazioni standard relative delle zone di picco: 3,1% (AEA), 2,9% (OEA) e 5.4% (PEA) per 133 fmol sulla colonna) e precisione (95.1-104,9%). La sensibilit&agrave; e la precisione del metodo convalidato descritto qui suggerisce che questo metodo &egrave; adatto per l&#39;analisi dell&#39;AEA, OEA e pisello in campioni clinici e pu&ograve; essere utilizzato per l&#39;indagine di bio-matrici contenenti una quantit&agrave; limitata di NAEs.

Misura simultanea di tre N-acylethanolamides in bio-matrici umane mediante spettrometria di massa tandem cromatografia liquida ultra performance.

&#x5185;&#x56E0;&#x542B;&#x3080; N-acylethanolamides (NAEs) &#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x751F;&#x7406;&#x7684;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x8102;&#x8CEA;&#x95A2;&#x9023;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x5BB6;&#x65CF;&#x306F;&#x3001;&#x30AB;&#x30F3;&#x30CA;&#x30D3;&#x30CE;&#x30A4;&#x30C9;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x51FA;&#x3059;&#x75C5;&#x6C17;&#x306E;&#x72B6;&#x614B;&#x3002;&#x30A2;&#x30CA;&#x30F3;&#x30C0;&#x30DF;&#x30C9; &#xFF08;N arachidonoylethanolamine&#x3001;AEA&#xFF09; &#x6700;&#x3082;&#x7279;&#x5FB4;&#x3068;&#x30AB;&#x30F3;&#x30CA;&#x30D3;&#x30CE;&#x30A4;&#x30C9;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x3068;&#x3072;&#x3068;&#x8840;&#x4E2D;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x6D41;&#x4F53;&#x3067;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30AB;&#x30F3;&#x30CA;&#x30D3;&#x30CE;&#x30A4;&#x30C9;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A; NAEs oleoylethanolamide &#xFF08;OEA) &#x3068; palmitoylethanolamide (&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30A6;) &#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x4E0D;&#x6CD5;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x751F;&#x7406;&#x7684;&#x52B9;&#x679C;&#x3092; AEA &#x304C;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x3001;&#x3042;&#x308B;&#x3044;&#x306F;&#x5168;&#x304F;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x30AB;&#x30F3;&#x30CA;&#x30D3;&#x30CE;&#x30A4;&#x30C9;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x306E;&#x3067; entourage &#x306E;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8FF0;&#x3079;&#x308B;&#x3002;Entourage &#x306E;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089; NAEs &#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306F;&#x307E;&#x3060;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x6D41;&#x4F53;&#x4E2D;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x306E;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x6570;&#x306E;&#x7814;&#x7A76; AEA &#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x5927;&#x304D;&#x304F;&#x5F71;&#x97FF;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F; AEA&#x3001;OEA&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30A6;&#x8C46;&#x306E;&#x89E3;&#x6790;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x6D41;&#x4F53;&#x306E;&#x6025;&#x901F;&#x306A;&#x6A5F;&#x5BC6;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x3001;&#x518D;&#x73FE;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x8D85;&#x9AD8;&#x6027;&#x80FD;&#x6DB2;&#x4F53;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;-&#x30BF;&#x30F3;&#x30C7;&#x30E0;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x6CD5; (&#x7CBE;&#x5EA6;&#x306E;&#x6700;&#x65B0;-MS/MS) &#x6CD5;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x8840;&#x6F3F;&#x3001;&#x8840;&#x6E05;&#x3001;&#x6BCD;&#x4E73;&#x3001;&#x7F8A;&#x819C;&#x306E;&#x4F53;&#x6DB2;&#x306A;&#x3069;&#x3002;&#x91CD;&#x6C34;&#x7D20;&#x5316;&#x3053;&#x306E;&#x691C;&#x8A3C;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528; (AEA-d(8)&#x3001;OEA-d(2)&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; PEA-d(4)) &#x306E;&#x5185;&#x90E8;&#x57FA;&#x6E96;&#x306F;&#x3001;&#x524D;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x306E;&#x9762;&#x3067;&#x6539;&#x5584;&#x5B9F;&#x884C;&#x6642;&#x9593; (4 &#x5206;) &#x691C;&#x51FA; (0.9 fmol AEA &#x3068;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30A6;&#x8C46;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5217;) &#x3068; 4.4 fmol OEA &#x306E;&#x5217;&#x306E;&#x7CBE;&#x5EA6;&#x306E;&#x9650;&#x754C;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x307E;&#x3059; (&#x76F8;&#x5BFE;&#x6A19;&#x6E96;&#x504F;&#x5DEE;&#x306F;&#x30D4;&#x30FC;&#x30AF;&#x9762;&#x7A4D;: 3.1% &#xFF08;AEA &#x306E;&#xFF09;&#x3001;2.9 &#xFF05; &#xFF08;OEA&#xFF09;&#x3001;5.4% (&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30A6;) 133 fmol &#x5217;&#x4E0A;) &#x3068;&#x7CBE;&#x5EA6; &#xFF08;104.9 95.1 &#xFF05;&#xFF09;&#x3002;&#x611F;&#x5EA6;&#x3068;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x305F;&#x691C;&#x8A3C;&#x6CD5;&#x306E;&#x7CBE;&#x5EA6;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x304C; AEA&#x3001;OEA &#x3092;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30A6;&#x8C46;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x81E8;&#x5E8A;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x9069;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3057;&#x3001;NAEs &#x306E;&#x9650;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x91CF;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x884C;&#x5217;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5229;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

3 &#x3064;&#x306E; N acylethanolamides &#x8D85;&#x9AD8;&#x6027;&#x80FD;&#x6DB2;&#x4F53;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;-&#x30BF;&#x30F3;&#x30C7;&#x30E0;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x6CD5;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x3072;&#x3068;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA; &#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x4E2D;&#x306E;&#x540C;&#x6642;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3002;

Endocannabinoids &#xD3EC;&#xD568; &#xD55C; N-acylethanolamides (NAEs)&#xB294; &#xB9CE;&#xC740; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8;&#xB294; &#xC9C0;&#xC9C8; &#xAD00;&#xB828; &#xC2E0;&#xD638; &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xAC00;&#xC871; &#xBC0F; cannabinoid &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xB294; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xC0C1;&#xD0DC;. (N-arachidonoylethanolamine, AEA) Anandamide &#xAC00;&#xC7A5; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC774; endocannabinoid &#xC774;&#xBA70; &#xB9CE;&#xC740; &#xC870;&#xC9C1;&#xACFC; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8;&#xC640; &#xC911;&#xC559; &#xC2E0; &#xACBD;&#xACC4;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD55C; &#xBC14;&#xC774;&#xC624; &#xCCB4;&#xC561;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Endocannabinoid &#xAC19;&#xC740; NAEs oleoylethanolamide (OEA) &#xBC0F; palmitoylethanolamide (&#xC644;&#xB450;&#xCF69;) &#xCE21;&#xADFC; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C; AEA &#xBD88;&#xBC95; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xD6A8;&#xACFC; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC788;&#xAE30; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xAC70;&#xC758; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD558;&#xAC8C; cannabinoid &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xAC19;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Entourage &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;, &#xBC14;&#xC774;&#xC624; &#xC720;&#xCCB4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;&#xC744; &#xCE21;&#xC815; &#xD558;&#xB294; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xC544;&#xC9C1; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; NAEs &#xC218;&#xC900;&#xC758; AEA&#xC758; &#xD6A8;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5; &#xD06C;&#xAC8C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xBC14;&#xC774;&#xC624; &#xCCB4;&#xC561;&#xC5D0;&#xC11C; AEA&#xC640; OEA, &#xC644;&#xB450;&#xCF69;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xAC8C; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; &#xAD6C;&#xCCB4;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC7AC;&#xD604; &#xCD08; &#xC131;&#xB2A5; &#xC561;&#xCCB4; &#xD06C;&#xB85C;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xADF8;&#xB798;&#xD53C; &#xD0E0;&#xB364; &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D; (UPLC MS/MS) &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC; &#xC124;&#xBA85; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8;, &#xD608; &#xCCAD;, &#xBAA8;&#xC720;, &#xC591;&#xC218; &#xB0B4; &#xCCB4;&#xC561; &#xB4F1;. &#xC774; &#xAC80;&#xC99D; &#xB41C; &#xBC29;&#xBC95; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xAE30; deuterated (AEA-d(8), OEA-d(2), &#xBC0F; PEA-d(4)) &#xB0B4;&#xBD80; &#xD45C;&#xC900;, &#xCE21;&#xBA74;&#xC758; &#xC774;&#xC804; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xAC1C;&#xC120; &#xC2E4;&#xD589; &#xC2DC;&#xAC04; (4 &#xBD84;), &#xD0D0;&#xC9C0; (AEA&#xC640; &#xC644; &#xB450; &#xC5F4;&#xC5D0; 0.9 fmol)&#xC640; OEA, &#xC5F4;&#xC5D0; 4.4 fmol &#xC815;&#xBC00;&#xB3C4;&#xC758; &#xD55C;&#xACC4;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4; (&#xD53C;&#xD06C; &#xB113;&#xC774;&#xC758; &#xC0C1;&#xB300; &#xD45C;&#xC900; &#xD3B8;&#xCC28;: 3.1% (AEA), 2.9% (OEA), &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; 5.4% (&#xC644; &#xB450;) &#xC5F4;&#xC5D0; 133 fmol)&#xC640; &#xC815;&#xD655;&#xB3C4; (95.1 104.9%). &#xAC10;&#xB3C4; &#xBC0F; &#xC815;&#xBC00;&#xB3C4; &#xC5EC;&#xAE30; &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xB294; &#xAC80;&#xC99D; &#xB41C; &#xBC29;&#xBC95;&#xC758;&#xC774; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC784;&#xC0C1; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC5D0;&#xC11C; AEA&#xC640; OEA, &#xC644;&#xB450;&#xCF69;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xC801;&#xD569; &#xD558; &#xACE0; &#xBC14;&#xC774;&#xC624; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; NAEs &#xC81C;&#xD55C; &#xB41C; &#xC591;&#xC758; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xC870;&#xC0AC;&#xB97C; &#xC704;&#xD574; &#xD65C;&#xC6A9; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB098;&#xC654;&#xB2E4;.

&#xC6B8;&#xD2B8;&#xB77C; &#xC131;&#xB2A5; &#xC561;&#xCCB4; &#xD06C;&#xB85C;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xADF8;&#xB798;&#xD53C; &#xD0E0;&#xB364; &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xBC14;&#xC774;&#xC624; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4;&#xC5D0; 3 N acylethanolamides&#xC758; &#xB3D9;&#xC2DC; &#xCE21;&#xC815;.

Endocannabinoides incluyendo N-acylethanolamides (NAEs) son una familia de mol&eacute;culas de se&ntilde;alizaci&oacute;n relacionada con l&iacute;pidos implicados en muchos fisiol&oacute;gicas y Estados de enfermedad que provocan sus actividades a trav&eacute;s de los receptores cannabinoides. Anandamida (N-arachidonoylethanolamine, AEA) es el m&aacute;s caracterizado endocannabinoide y se ha detectado en muchos tejidos y bio-l&iacute;quidos incluyendo plasma humano y el sistema nervioso central. Los NAEs endocannabinoide-como, oleoylethanolamide (OEA) y palmitoylethanolamide (PEA) se describen como entourage compuestos porque il&iacute;citos efectos fisiol&oacute;gicos similares a AEA pero tienen poca o ninguna afinidad por los receptores cannabinoides. Como entourage compuestos, niveles de estos NAEs pueden influir mucho la eficacia de la AEA sin embargo, hay pocos estudios que miden estos compuestos en bio-fluidos. Aqu&iacute; describimos un m&eacute;todo r&aacute;pido, altamente sensible, espec&iacute;fica y altamente reproducible ultra-alto-funcionamiento l&iacute;quido cromatograf&iacute;a-espectrometr&iacute;a total en t&aacute;ndem (UPLC-MS/MS) para el an&aacute;lisis de la AEA, OEA y guisante en bio-fluidos humanos incluyendo plasma, suero, leche materna y l&iacute;quido amni&oacute;tico. Este m&eacute;todo validado utilizando deuterados (AEA-d(8), OEA-d(2) y PEA-d(4)) est&aacute;ndares internos, representa una mejora sobre an&aacute;lisis anteriores en t&eacute;rminos de duraci&oacute;n (4 minutos), l&iacute;mite de detecci&oacute;n (0,9 fmol en columna por AEA y guisante) y 4,4 fmol en columna para OEA, precisi&oacute;n (desviaciones est&aacute;ndar relativas de zonas de pico: 3,1% (AEA), 2.9% (OEA) y 5,4% (PEA) de 133 fmol en columna) y exactitud (95.1-104.9%). La sensibilidad y precisi&oacute;n del m&eacute;todo validado descrito aqu&iacute; sugiere que este m&eacute;todo es adecuado para el an&aacute;lisis de la AEA, OEA y guisante en muestras cl&iacute;nicas y puede ser utilizado para la investigaci&oacute;n de bio-matrices que contienen una cantidad limitada de NAEs.

Medida simult&aacute;nea de tres N-acylethanolamides en humanos bio-matrices mediante espectrometr&iacute;a de masas t&aacute;ndem cromatograf&iacute;a l&iacute;quida ultra performance.

&#x529F;&#x80FD;&#x5305;&#x62EC;&#x9530;&#x8D85;&#x6C27;&#x5316;&#x7269;&#x6B67;&#x5316;&#x9176; &#xFF08;MnSOD&#xFF09;&#x3001; &#x8FC7;&#x6C27;&#x5316;&#x6C22;&#x9176; (CAT) &#x548C;&#x8C37;&#x80F1;&#x7518;&#x80BD;&#x8FC7;&#x6C27;&#x5316;&#x7269;&#x9176; (GPX-1) &#x7684;&#x5185;&#x6E90;&#x6027;&#x6297;&#x6C27;&#x5316;&#x9632;&#x5FA1;&#x57FA;&#x56E0;&#x591A;&#x6001;&#x6027;&#x5DF2;&#x88AB;&#x5173;&#x8054;&#x5230;&#x591A;&#x4E2A;&#x7AD9;&#x70B9;&#x7684;&#x764C;&#x75C7;&#x7684;&#x98CE;&#x9669;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x5047;&#x5B9A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x751F;&#x6B96;&#x53D8;&#x79CD;&#x901A;&#x8FC7;&#x6539;&#x53D8;&#x4E3B;&#x673A;&#x7684;&#x89E3;&#x6BD2;&#x8BF1;&#x53D8;&#x6D3B;&#x6027;&#x6C27;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x5F71;&#x54CD;&#x75BE;&#x75C5;&#x98CE;&#x9669;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5F88;&#x5C11;&#x6709;&#x7814;&#x7A76;&#x76F4;&#x63A5;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4E86;&#x8FD9;&#x4E00;&#x5047;&#x8BBE;&#x3002;8 Isoprostane F2&alpha; &#x7684;&#x6D53;&#x5EA6; &#xFF08;8-iso-PGF2&alpha;) &#x548C; 8-oxo-7,8-dihydro-2&#39;-deoxyguanosine (8-oxoxdG&#xFF09;-&#x654F;&#x611F;&#x6307;&#x6807;&#x7684;&#x8102;&#x8D28;&#x8FC7;&#x6C27;&#x5316;&#x53CA; DNA &#x6C27;&#x5316;&#x5206;&#x522B;-24 h &#x5C3F;&#x6DB2;&#x6837;&#x672C;&#x4ECE; 93 &#x5065;&#x5EB7;&#xFF0C;&#x83B7;&#x5F97;&#x53C2;&#x52A0;&#x5BA1;&#x5224;&#x81B3;&#x98DF;&#x5E72;&#x9884;&#x7684;&#x7EDD;&#x7ECF;&#x524D;&#x5987;&#x5973;&#x5728;&#x91CF;&#x5EA6;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x4ECE; MnSOD Val16Ala&#xFF0C;&#x732B; 262 C &#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x5206;&#x578B;&#x7684;&#x8840;&#x6DB2;&#x4E2D;&#x63D0;&#x53D6; DNA &gt; T&#xFF0C;&#x548C; GPX1 Pro198Leu &#x57FA;&#x56E0;&#x578B;&#x63A2;&#x9488;&#x6CD5;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x51E0;&#x4F55;&#x5E73;&#x5747;&#x6D53;&#x5EA6;&#x7684; 8-iso-PGF2(&alpha;) &#x548C; 8 oxoxdG &#x8DE8;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x51E0;&#x4E2A;&#x7279;&#x70B9;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x79CD;&#x65CF;&#x3001; &#x6559;&#x80B2;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x3001; &#x8EAB;&#x4F53;&#x8D28;&#x91CF;&#x6307;&#x6570;&#x548C;&#x8840;&#x6E05;&#x6297;&#x6C27;&#x5316;&#x6C34;&#x5E73;&#x5404;&#x4E0D;&#x76F8;&#x540C;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E5F;&#x51E0;&#x4E4E;&#x6CA1;&#x6709;&#x8BC1;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x751F;&#x7269;&#x6807;&#x5FD7;&#x7269;&#x4E0D;&#x540C;&#x8DE8;&#x4EFB;&#x4F55;&#x5BA1;&#x67E5;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x578B;&#x3002;&#x603B;&#x4E4B;&#xFF0C;&#x5185;&#x6E90;&#x6027;&#x6297;&#x6C27;&#x5316;&#x9632;&#x5FA1;&#x57FA;&#x56E0;&#x529F;&#x80FD;&#x591A;&#x6001;&#x6027;&#x4E0D;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x662F;&#x4E0E;&#x5E74;&#x8F7B;&#x3001; &#x5065;&#x5EB7;&#x7684;&#x5987;&#x5973;&#x5728;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x6027;&#x7684;&#x6C27;&#x5316;&#x5E94;&#x6FC0;&#x6C34;&#x5E73;&#x5BC6;&#x5207;&#x76F8;&#x5173;&#x3002;

&#x6C27;&#x5316;&#x6297;&#x6C27;&#x5316;&#x9632;&#x5FA1;&#x57FA;&#x56E0;&#x548C;&#x6CCC;&#x5C3F;&#x529F;&#x80FD;&#x591A;&#x6001;&#x6027;&#x4E4B;&#x95F4;&#x5173;&#x8054;&#x5F3A;&#x8C03;&#x751F;&#x7269;&#x6807;&#x5FD7;&#x7269;&#x5728;&#x5065;&#x5EB7;&#x3001; &#x7EDD;&#x7ECF;&#x524D;&#x5987;&#x5973;&#x3002;

Functional polymorphisms in endogenous antioxidant defense genes including manganese superoxide dismutase (MnSOD), catalase (CAT), and glutathione peroxidase (GPX-1) have been linked with risk of cancer at multiple sites. Although it is presumed that these germline variants impact disease risk by altering the host's ability to detoxify mutagenic reactive oxygen species, very few studies have directly examined this hypothesis. Concentrations of 8-isoprostane F2Î± (8-iso-PGF2Î±) and 8-oxo-7,8-dihydro-2'-deoxyguanosine (8-oxoxdG)-sensitive indicators of lipid peroxidation and DNA oxidation, respectively-were measured in 24-h urine samples obtained from 93 healthy, premenopausal women participating in a dietary intervention trial. In addition, DNA was extracted from blood for genotyping of MnSOD Val16Ala, CAT-262 CÂ >Â T, and GPX1 Pro198Leu genotypes by Taqman assay. Although geometric mean concentrations of 8-iso-PGF2(Î±) and 8-oxoxdG varied across several study characteristics including race, education level, body mass index, and serum antioxidant levels, there was little evidence that these biomarkers differed across any of the examined genotypes. In summary, functional polymorphisms in endogenous antioxidant defense genes do not appear to be strongly associated with systemic oxidative stress levels in young, healthy women.

Associations between functional polymorphisms in antioxidant defense genes and urinary oxidative stress biomarkers in healthy, premenopausal women.

Fonctionnelles polymorphismes dans les g&egrave;nes de d&eacute;fense antioxydante endog&egrave;ne dont mangan&egrave;se superoxyde dismutase (MnSOD), catalase (CAT) et glutathion peroxydase (GPX-1) ont &eacute;t&eacute; associ&eacute;es avec le risque de cancer &agrave; plusieurs endroits. Bien qu&#39;il est pr&eacute;sum&eacute; que ces variantes de la lign&eacute;e germinale impact risque de la maladie en alt&eacute;rant la capacit&eacute; des h&ocirc;tes &agrave; d&eacute;toxifier les esp&egrave;ces oxyg&eacute;n&eacute;es radicalaires mutag&egrave;nes, tr&egrave;s peu d&#39;&eacute;tudes ont examin&eacute; directement cette hypoth&egrave;se. Des concentrations de 8-isoprostane F2&alpha; (8-iso-PGF2&alpha;) et 8-oxo-7,8-dihydro-2&#39;-deoxyguanosine (8-oxoxdG)-indicateurs sensibles de la peroxydation lipidique et l&#39;oxydation de l&#39;ADN, respectivement-ont &eacute;t&eacute; mesur&eacute;es dans des &eacute;chantillons d&#39;urine de 24 h obtenus &agrave; partir de 93 en bonne sant&eacute;, les femmes premenopausal participant &agrave; un essai d&#39;intervention di&eacute;t&eacute;tique. En outre, l&#39;ADN a &eacute;t&eacute; extrait de sang pour le g&eacute;notypage de MnSOD Val16Ala, CAT-262C &gt; T et GPX1 Pro198Leu g&eacute;notypes par test Taqman. M&ecirc;me si la moyenne g&eacute;om&eacute;trique des concentrations de 8-iso-PGF2(&alpha;) et 8-oxoxdG variaient de plusieurs caract&eacute;ristiques de l&#39;&eacute;tude y compris la race, niveau de scolarit&eacute;, indice de masse corporelle et s&eacute;rique antioxydant, il y avait peu de preuves que ces biomarqueurs diff&eacute;raient travers n&#39;importe lequel des g&eacute;notypes examin&eacute;s. En r&eacute;sum&eacute;, fonctionnelles polymorphismes dans les g&egrave;nes de d&eacute;fense antioxydante endog&egrave;ne ne semblent pas &ecirc;tre fortement associ&eacute;e &agrave; des niveaux de stress oxydatif syst&eacute;mique chez la femme jeune, en bonne sant&eacute;e.

Associations entre fonctionnelles polymorphismes dans les g&egrave;nes de d&eacute;fense antioxydant et urinaire oxydatives soulignent biomarqueurs dans les femmes premenopausal en bonne sant&eacute;.

Funktionelle Polymorphismen in endogenen antioxidativen Abwehr Genen Mangan-Superoxiddismutase (MnSOD), Katalase (CAT) und Glutathion-Peroxidase (GPX-1) wurden mit Krebsrisiko an mehreren Standorten verbunden. Obwohl angenommen wird, dass diese Varianten Germline Krankheitsrisikos auswirken, durch die Ver&auml;nderung des Wirtes F&auml;higkeit, erbgutver&auml;ndernd reaktive Sauerstoffspezies zu entgiften, haben nur sehr wenige Studien direkt diese Hypothese untersucht. Konzentrationen von 8-Isoprostane-F2&alpha; (8-Iso-PGF2&alpha;) und 8-oxo-7,8-dihydro-2&#39;-deoxyguanosine (8-OxoxdG)-sensible Indikatoren f&uuml;r Lipidperoxidation und DNA-Oxidation, bzw.-im 24-h-Urinproben von gesunden, 93 pr&auml;menopausalen Frauen eine di&auml;tetische Intervention Studie gemessen wurden. Dar&uuml;ber hinaus wurde DNA aus dem Blut f&uuml;r die Genotypisierung von MnSOD Val16Ala, CAT-262 C extrahiert &gt; T, und GPX1 Pro198Leu Genotypen mit Taqman Assay. Obwohl geometrisches Mittel Konzentrationen von 8-iso-PGF2(&alpha;) und 8-OxoxdG &uuml;ber mehrere Studie Merkmale wie Rasse, Bildungsstand, Body-mass-Index und Antioxidans-Serumspiegel variiert, gab es kaum Anzeichen, dass diese Biomarker in jeder der untersuchten Genotypen unterschieden. Zusammenfassend l&auml;sst sich sagen werden funktionelle Polymorphismen in endogenen antioxidativen Abwehr Genen nicht stark verbunden mit systemischen oxidativen Stress in junge, gesunde Frauen werden angezeigt.

Zuordnungen zwischen funktionelle Polymorphismen in Antioxidans Verteidigung Genen und Harnwege oxidativen betonen Biomarker in gesunde und pr&auml;menopausalen Frauen.

Polimorfismi funzionali nei geni di difesa antiossidante endogeno manganese superossido dismutasi (MnSOD), la catalasi (CAT) e glutatione perossidasi (GPX-1) sono stati collegati con il rischio di cancro in pi&ugrave; siti. Anche se si presume che queste varianti di germline impatto rischio malattia alterando la capacit&agrave; dell&#39;ospite di disintossicare le specie ossigenate reattive mutageno, molto pochi studi hanno esaminato direttamente questa ipotesi. Concentrazioni di 8-isoprostane F2&alpha; (8-iso-PGF2&alpha;) e 8-oxo-7,8-dihydro-2&#39;-deoxyguanosine (8-oxoxdG)-sensibili indicatori di perossidazione lipidica e l&#39;ossidazione del DNA, rispettivamente-sono state misurate in campioni di urine 24 h ottenuti da 93 sano, le donne in premenopausa che partecipano a un intervento dietetico prova. Inoltre, il DNA &egrave; stato Estratto da sangue per la tipizzazione di MnSOD Val16Ala, CAT-262 C &amp;gt; T e Pro198Leu GPX1 genotipi mediante Taqman saggio. Sebbene concentrazioni media geometrica del 8-iso-PGF2(&alpha;) e 8-oxoxdG vario attraverso diverse caratteristiche di studio tra cui corsa, livello di istruzione, indice di massa corporea e i livelli sierici di antiossidante, c&#39;era poca evidenza che questi biomarcatori differivano attraverso uno qualsiasi dei genotipi esaminati. In sintesi, non sembrano essere fortemente associato con i livelli di stress ossidativo sistemico in donne giovani, sani polimorfismi funzionali nei geni di difesa antiossidante endogeno.

Associazioni tra polimorfismi funzionali nei geni di difesa antiossidante e urinario ossidativa stress biomarkers in donne in premenopausa, sane.

&#x30DE;&#x30F3;&#x30AC;&#x30F3; &#x30B9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30FC;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C9;&#x30B8;&#x30B9;&#x30E0;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC; (MnSOD)&#x3001;&#x30AB;&#x30BF;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; (CAT)&#x3001;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30C1;&#x30AA;&#x30F3;&#x30DA;&#x30EB;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC; (GPX-1&#xFF09; &#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x6297;&#x9178;&#x5316;&#x9632;&#x5FA1;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x591A;&#x578B;&#x306F;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3067;&#x304C;&#x3093;&#x306E;&#x30EA;&#x30B9;&#x30AF;&#x3068;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x751F;&#x6B96;&#x7D30;&#x80DE;&#x7CFB;&#x5217;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x5909;&#x7570;&#x539F;&#x6D3B;&#x6027;&#x9178;&#x7D20;&#x7A2E;&#x89E3;&#x6BD2;&#x3059;&#x308B;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x75C5;&#x6C17;&#x306E;&#x30EA;&#x30B9;&#x30AF;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3068;&#x63A8;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x76F4;&#x63A5;&#x3053;&#x306E;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A4;&#x30BD;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B9;&#x30BF;&#x30F3; F2&alpha; &#x306E;&#x6FC3;&#x5EA6; (8-iso-PGF2&alpha;&#xFF09; &#x3068; 8-oxo-7,8-dihydro-2&#39;-deoxyguanosine &#xFF08;8-oxoxdG)-&#x654F;&#x611F;&#x306A;&#x6307;&#x6A19;&#x306E;&#x8102;&#x8CEA;&#x904E;&#x9178;&#x5316;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3068; DNA &#x9178;&#x5316;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;-93 &#x304B;&#x3089;&#x5065;&#x5EB7;&#x3001;&#x9589;&#x7D4C;&#x524D;&#x306E;&#x5973;&#x6027;&#x306F;&#x98DF;&#x990C;&#x7642;&#x6CD5;&#x306E;&#x4ECB;&#x5165;&#x3067;&#x30C8;&#x30E9;&#x30A4;&#x30A2;&#x30EB;&#x53C2;&#x52A0;&#x3057;&#x3066;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x308B; 24 &#x6642;&#x9593;&#x5C3F;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;DNA &#x306E;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CE;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D4;&#x30F3;&#x30B0; MnSOD Val16Ala&#x3001;&#x732B; 262 C &#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8840;&#x6DB2;&#x304B;&#x3089;&#x62BD;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x76EE; T&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; GPX1 Pro198Leu &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x578B; Taqman &#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3002;&#x5E7E;&#x4F55;&#x5E73;&#x5747;&#x6FC3;&#x5EA6; 8-iso-PGF2(&alpha;) &#x3068; 8 oxoxdG &#x306E;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B9;&#x3001;&#x6559;&#x80B2;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3001;&#x30DC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30DE;&#x30B9;&#x6307;&#x6570;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x8840;&#x6E05;&#x6297;&#x9178;&#x5316;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x9593;&#x3067;&#x8A8D;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x304C;, &#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA; &#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x304C;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x578B;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x5168;&#x4F53;&#x3092;&#x7570;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0; &#x3002;&#x8981;&#x7D04;&#x3059;&#x308B;&#x3068;, &#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x6297;&#x9178;&#x5316;&#x9632;&#x5FA1;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x591A;&#x578B;&#x306F;&#x3001;&#x82E5;&#x3044;&#x3001;&#x5065;&#x5EB7;&#x306A;&#x5973;&#x6027;&#x306E;&#x5168;&#x8EAB;&#x9178;&#x5316;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9; &#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3068;&#x5F37;&#x304F;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x306F;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;

&#x6297;&#x9178;&#x5316;&#x9632;&#x5FA1;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3068;&#x5C3F;&#x4E2D;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x591A;&#x578B;&#x9593;&#x306E;&#x30A2;&#x30BD;&#x30B7;&#x30A8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x9178;&#x5316;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA; &#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x5065;&#x5EB7;&#x3001;&#x9589;&#x7D4C;&#x524D;&#x306E;&#x5973;&#x6027;&#x306E;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xB9DD;&#xAC04; superoxide dismutase (MnSOD), glutathione &#xACFC;&#xC0B0;&#xD654; &#xD6A8;&#xC18C; (&#xBA54;&#xD0C0;-1), catalase (&#xACE0;&#xC591;&#xC774;) &#xB4F1; &#xB0B4; &#xC0DD; &#xC801;&#xC778; &#xD56D; &#xC0B0;&#xD654; &#xBC29;&#xC5B4; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xAE30;&#xB2A5; polymorphisms &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC554;&#xC758; &#xC704;&#xD5D8;&#xC73C;&#xB85C; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBE44;&#xB85D; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBC88;&#xC9F8; &#xBCC0;&#xC885; &#xBCC0;&#xC774; &#xC6D0; &#xC131; &#xBC18;&#xC751;&#xC131; &#xC0B0;&#xC18C; &#xC885; &#xB3C5;&#xC744; &#xC81C;&#xAC70; &#xD558;&#xB294; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xBCC0;&#xACBD; &#xD558; &#xC5EC; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xC704;&#xD5D8;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xAC83;&#xC744; &#xCD94;&#xC815;, &#xAC70;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC;&#xC774; &#xAC00;&#xC124; &#xAC80;&#xC0AC; &#xC9C1;&#xC811;. 8 Isoprostane f2&alpha;&#xC758; &#xB18D;&#xB3C4; (8-iso-PGF2&alpha;) &#xBC0F; 8-oxo-7,8-dihydro-2&#39;-deoxyguanosine (8-oxoxdG)-&#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; &#xC9C0;&#xD45C; &#xC9C0;&#xC9C8; &#xACFC;&#xC0B0;&#xD654; &#xBC0F; DNA &#xC0B0;&#xD654;, &#xAC01;&#xAC01;-&#xC2DD;&#xC774;&#xC694;&#xBC95; &#xC911;&#xC7AC; &#xC7AC;&#xD310;&#xC5D0; &#xCC38;&#xC5EC; premenopausal &#xC5EC;&#xC790; 93 &#xAC74;&#xAC15;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5BB;&#xC740; 24 h &#xC18C;&#xBCC0; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCE21;&#xC815; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, DNA &#xC720;&#xC804;&#xD615; MnSOD Val16Ala, &#xACE0;&#xC591;&#xC774;-262 C&#xC758; &#xD608;&#xC561;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD94;&#xCD9C;&#xD55C; &amp;gt; T, &#xBC0F; Taqman &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC758;&#xD574; genotypes GPX1 Pro198Leu. 8-Iso-PGF2(&alpha;) 8 Oxoxdg&#xC758; &#xAE30; &#xD558; &#xD3C9;&#xADE0; &#xB18D;&#xB3C4;, &#xC778;&#xC885;, &#xAD50;&#xC721; &#xC218;&#xC900;, &#xCCB4; &#xC9C8;&#xB7C9; &#xC9C0; &#xC218;, &#xD608; &#xCCAD; &#xD56D; &#xC0B0;&#xD654; &#xC218;&#xCE58; &#xB4F1; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xD2B9;&#xC131;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; &#xB2E4;&#xC591; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xAC80;&#xC0AC; genotypes&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; &#xB2EC;&#xB790;&#xB2E4; &#xC57D;&#xAC04;&#xC758; &#xC99D;&#xAC70;&#xAC00; &#xC788;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC694;&#xC57D; &#xD558;&#xC790;&#xBA74;, &#xB0B4; &#xC0DD; &#xC801;&#xC778; &#xD56D; &#xC0B0;&#xD654; &#xBC29;&#xC5B4; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xAE30;&#xB2A5; polymorphisms &#xC80A;&#xACE0;, &#xAC74;&#xAC15; &#xD55C; &#xC5EC;&#xC131;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC870;&#xC9C1;&#xC758; &#xC0B0;&#xD654; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xC218;&#xC900;&#xC744; &#xAC15;&#xB825; &#xD558; &#xAC8C; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC0B0;&#xD654; &#xAE30;&#xB2A5; polymorphisms &#xC694;&#xB3C4; &#xD56D; &#xC0B0;&#xD654; &#xBC29;&#xC5B4; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC04;&#xC758; &#xC5F0;&#xACB0; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xAC74;&#xAC15;, premenopausal &#xC5EC;&#xC790;&#xC5D0; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;.

Polimorfismos funcionales en los genes de defensa antioxidantes end&oacute;genos como el super&oacute;xido dismutasa de manganeso (MnSOD), catalasa (CAT) y glutati&oacute;n peroxidasa (GPX-1) se han vinculado con el riesgo de c&aacute;ncer en m&uacute;ltiples sitios. Aunque se presume que estas variantes del germline impactan riesgo de la enfermedad mediante la alteraci&oacute;n de la capacidad del host para desintoxicar especies reactivas de ox&iacute;geno mutag&eacute;nicos, muy pocos estudios han examinado directamente esta hip&oacute;tesis. Concentraciones de 8-isoprostane F2&alpha; (8-iso-PGF2&alpha;) y 8-oxo-7,8-dihydro-2&#39;-deoxyguanosine (8-oxoxdG)-indicadores sensibles de la peroxidaci&oacute;n lip&iacute;dica y la oxidaci&oacute;n de DNA, respectivamente-fueron medidos en las muestras de orina de 24 h obtenidas de sano, 93 mujeres premenop&aacute;usicas que participan en una ensayo de intervenci&oacute;n diet&eacute;tica. Adem&aacute;s, se extrajo ADN de sangre para genotipificaci&oacute;n de MnSOD Val16Ala, CAT-262 C &gt; T y GPX1 Pro198Leu genotipos por ensayo Taqman. Aunque las concentraciones de la media geom&eacute;trica de 8-iso-PGF2(&alpha;) y 8-oxoxdG variaban a trav&eacute;s de varias caracter&iacute;sticas de estudio incluyendo raza, nivel de educaci&oacute;n, &iacute;ndice de masa corporal y niveles de antioxidantes, hubo pocas pruebas de que estos biomarcadores diferenciaron a trav&eacute;s de cualquiera de los genotipos examinados. En Resumen, polimorfismos funcionales en los genes de defensa antioxidante end&oacute;geno no parecen estar fuertemente asociada con los niveles de estr&eacute;s oxidativo sist&eacute;mico en mujeres j&oacute;venes, sanos.

Asociaciones entre polimorfismos funcionales en los genes de defensa antioxidante y urinaria oxidativas estr&eacute;s biomarcadores en mujeres premenop&aacute;usicas sanas.

Endocannabinoid &#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x53EF;&#x884C;&#x548C;&#x4E0D;&#x53EF;&#x884C;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x8C03;&#x5236;&#x5B55;&#x4E0E;&#x598A;&#x5A20;&#x6709;&#x5173;&#x7684;&#x6FC0;&#x7D20;&#x3002;

Modulation of the endocannabinoid system in viable and non-viable first trimester pregnancies by pregnancy-related hormones.

Modulation du syst&egrave;me endocannabino&iuml;de dans premier viable et non viable grossesses trimestre par les hormones li&eacute;es &agrave; la grossesse.

Modulation des Endocannabinoidsystems in lebensf&auml;higen und nicht lebensf&auml;higen ersten Trimester Schwangerschaften durch schwangerschaftsbedingte Hormone.

Modulazione del sistema endocannabinoide nel primo vitale e non vitali gravidanze trimestre da ormoni legate alla gravidanza.

&#x5909;&#x8ABF;&#x30AB;&#x30F3;&#x30CA;&#x30D3;&#x30CE;&#x30A4;&#x30C9; &#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3067;&#x5B9F;&#x884C;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x975E;&#x5B9F;&#x884C;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x5B66;&#x671F;&#x306E;&#x598A;&#x5A20;&#x598A;&#x5A20;&#x95A2;&#x9023;&#x30DB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3002;

&#xC2E4;&#xC6A9;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; &#xC2E4;&#xD589; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xBE44; &#xBA3C;&#xC800; endocannabinoid &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; &#xBCC0;&#xC870; &#xC784;&#xC2E0; &#xAD00;&#xB828; &#xD638;&#xB974;&#xBAAC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC784;&#xC2E0; &#xC784;&#xC2E0;.

Article	Year
CER4 encodes an alcohol-forming fatty acyl-coenzyme A reductase involved in cuticular wax production in Arabidopsis. Plant physiology\| PubMed ID: 16980563	2006
A core subunit of the RNA-processing/degrading exosome specifically influences cuticular wax biosynthesis in Arabidopsis. The Plant cell\| PubMed ID: 17351114	2007
Activation of recombinant human TRPV1 receptors expressed in SH-SY5Y human neuroblastoma cells increases [Ca(2+)](i), initiates neurotransmitter release and promotes delayed cell death. Journal of neurochemistry\| PubMed ID: 17442052	2007
Ultra performance liquid chromatography tandem mass spectrometry method for the measurement of anandamide in human plasma. Analytical biochemistry\| PubMed ID: 18555789	2008
Identification of the wax ester synthase/acyl-coenzyme A: diacylglycerol acyltransferase WSD1 required for stem wax ester biosynthesis in Arabidopsis. Plant physiology\| PubMed ID: 18621978	2008
A solid-phase method for the extraction and measurement of anandamide from multiple human biomatrices. Analytical biochemistry\| PubMed ID: 18823934	2009
Anandamide levels in human female reproductive tissues: solid-phase extraction and measurement by ultraperformance liquid chromatography tandem mass spectrometry. Analytical biochemistry\| PubMed ID: 20026294	2010
Endocannabinoids and pregnancy. Clinica chimica acta; international journal of clinical chemistry\| PubMed ID: 20302856	2010
Simultaneous measurement of three N-acylethanolamides in human bio-matrices using ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry. Analytical and bioanalytical chemistry\| PubMed ID: 20835819	2010
Associations between functional polymorphisms in antioxidant defense genes and urinary oxidative stress biomarkers in healthy, premenopausal women. Genes & nutrition\| PubMed ID: 22068340	2011
Modulation of the endocannabinoid system in viable and non-viable first trimester pregnancies by pregnancy-related hormones. Reproductive biology and endocrinology : RB&E\| PubMed ID: 22126420	2011

Patricia Lam

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