detection-signaling-effector-complexes-downstream-bmp4-using-situ-pla

Detection of Signaling Effector-Complexes Downstream of BMP4 Using <em>in situ</em> PLA, a Proximity Ligation Assay

BMPs are responsible for a wide range of developmental and biological effects. BMP receptors activate (phosphorylate) the Smad1/5/8 effectors, which then, ...

Imperial College, Hammersmith Hospital

Sox2 &#x9AD8;&#x5EA6;&#x8868;&#x793A;&#xFF0C;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x56FD;&#x5BB6;&#x7684;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x8BF1;&#x5BFC;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E14;&#x5DF2;&#x8BC1;&#x660E;&#x5728;&#x795E;&#x7ECF;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x8D77;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x7A7A; Sox2 &#x57FA;&#x56E0;&#x7A81;&#x53D8;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4E0D;&#x80FD;&#x8D85;&#x51FA;&#x690D;&#x5165;&#x672F;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A; SOX2 &#x5728;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x4E00;&#x76F4;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x3002;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B0;&#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x6A21;&#x578B;&#x6D89;&#x53CA; SOX2 &#x6210;&#x4EBA;&#x5927;&#x8111;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5E76;&#x63D0;&#x4F9B;&#x8BC1;&#x636E;&#x5B83;&#x53C2;&#x4E0E;&#x7EF4;&#x6301;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7279;&#x5B9A;&#x5730;&#x533A;&#x3001; &#x6269;&#x6563;&#x548C;/&#x6216;&#x7EF4;&#x62A4;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x795E;&#x7ECF;&#x518D;&#x751F;&#x4E2D;&#x3002;

SOX2 &#x6210;&#x4EBA;&#x795E;&#x7ECF;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;

Sox2 is expressed highly in the neuroepithelium of the developing CNS and has been shown to function in neural stem cells. Because Sox2-null mutant mice fail to develop beyond implantation, the role of SOX2 in the CNS has lacked validation. A new genetic model addresses the role of SOX2 in the adult brain and provides evidence that it is involved in the maintenance of neurons in specific regions, in the proliferation and/or maintenance of neural stem cells, and in neurogenesis.

SOX2 functions in adult neural stem cells.

Sox2 est exprim&#xE9;e fortement dans le neuro&#xE9;pith&#xE9;lium du syst&#xE8;me nerveux central en d&#xE9;veloppement et a &#xE9;t&#xE9; montr&#xE9; pour fonctionner dans des cellules souches neurales. Parce que Sox2-souris mutantes nulles ne parviennent pas &#xE0; d&#xE9;velopper au-del&#xE0; d&#x26;#39;implantation, le r&#xF4;le de SOX2 dans le SNC a manqu&#xE9; de validation. Un nouveau mod&#xE8;le g&#xE9;n&#xE9;tique porte sur le r&#xF4;le de SOX2 dans le cerveau adulte et fournit la preuve qu&#x26;#39;il est impliqu&#xE9; dans le maintien de neurones dans des r&#xE9;gions sp&#xE9;cifiques, dans la prolif&#xE9;ration et / ou le maintien des cellules souches neurales, et dans la neurogen&#xE8;se.

Fonctions SOX2 dans Cellules souches neuronales adultes

SOX2 Funktionen in adulten neuralen Stammzellen.

SOX2 &egrave; altamente espresso in neuroepithelium dello SNC in via di sviluppo e ha dimostrato di funzionare in cellule staminali neurali. Perch&eacute; topi mutanti Sox2-null non riescono a svilupparsi oltre l&#39;impianto, il ruolo di SOX2 nel SNC &egrave; mancata convalida. Un nuovo modello genetico affronta il ruolo di SOX2 nel cervello adulto e fornisce la prova che &egrave; coinvolta nella manutenzione dei neuroni in determinate regioni, la proliferazione e/o manutenzione delle cellule staminali neurali e nella neurogenesi.

SOX2 funzioni in cellule staminali neurali adulte.

Sox2&#x306F;&#x3001;&#x9014;&#x4E0A;CNS&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x4E0A;&#x76AE;&#x306B;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x306B;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; Sox2&#x306F;&#x3001;&#x30CC;&#x30EB;&#x5909;&#x7570;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x79FB;&#x690D;&#x3092;&#x8D85;&#x3048;&#x3066;&#x958B;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5931;&#x6557;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;SOX2&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306F;&#x3001;&#x691C;&#x8A3C;&#x304C;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x6210;&#x4F53;&#x8133;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;SOX2&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306B;&#x5BFE;&#x51E6;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x304C;&#x795E;&#x7D4C;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x304A;&#x3088;&#x3073;/&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x7DAD;&#x6301;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x795E;&#x7D4C;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x9818;&#x57DF;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7DAD;&#x6301;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x5927;&#x4EBA;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;SOX2&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;

Sox2 &#xAC1C;&#xBC1C; CNS neuroepithelium&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xD45C;&#xD604; &#xB418; &#xACE0; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC791;&#xB3D9; &#xD558;&#xB3C4;&#xB85D; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Sox2 null &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC0DD;&#xC950; &#xC8FC;&#xC785;&#xC744; &#xB118;&#xC5B4; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xC9C0;, &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; CNS&#xC5D0; SOX2 &#xC5ED;&#xD560; &#xC720;&#xD6A8;&#xC131; &#xAC80;&#xC0AC;&#xB97C; &#xBD80;&#xC871; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBAA8;&#xB378; SOX2 &#xC131;&#xC778; &#xB450;&#xB1CC;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD574;&#xACB0; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xD2B9;&#xC815; &#xC9C0;&#xC5ED;, &#xD655;&#xC0B0; &#xBC0F;/&#xB610;&#xB294; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC720;&#xC9C0; &#xBCF4;&#xC218; &#xBC0F; &#xC131;&#xCCB4; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC720;&#xC9C0;&#xC5D0; &#xAD00;&#xC5EC; &#xD558;&#xB294; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC131;&#xC778; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; SOX2 &#xAE30;&#xB2A5;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Sox2 se expresa altamente en el neuroepitelio del sistema nervioso central en desarrollo y se ha demostrado que funcionan en las c&#xE9;lulas madre neurales. Debido a que Sox2 nulo ratones mutantes no se desarrollan m&#xE1;s all&#xE1; de la implantaci&#xF3;n, el papel de Sox2 en el sistema nervioso central ha carecido de validaci&#xF3;n. Un modelo gen&#xE9;tico nuevo aborda la funci&#xF3;n de Sox2 en el cerebro adulto y proporciona pruebas de que est&#xE1; involucrado en el mantenimiento de las neuronas en regiones espec&#xED;ficas, en la proliferaci&#xF3;n y / o mantenimiento de las c&#xE9;lulas madre neurales, y en la neurog&#xE9;nesis.

Sox2 funciones en c&#xE9;lulas madre neurales adultas

&#x5206;&#x5B50;&#x673A;&#x5236;&#x548C;&#x8D1F;&#x8D23;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x5B50;&#x7C7B;&#x578B;&#x8EAB;&#x4EFD;&#x51FA;&#x73B0;&#x7684;&#x5185;&#x5728;&#x56E0;&#x7D20;&#x4E86;&#x89E3;&#x751A;&#x5C11;&#x3002;&#x51E0;&#x79CD;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x4E3B;&#x8981;&#x5728;&#x524D;&#x4F53;&#x7684;&#x8179;&#x4FA7;&#x7AEF;&#x8111;&#x4E2D;&#x8868;&#x793A;&#x5DF2;&#x63A7;&#x5236;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x89C4;&#x8303;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E00;&#x76F4;&#x4E0D;&#x6E05;&#x695A;&#x662F;&#x5426;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x524D;&#x4F53;&#xFF0C;&#x8FD8;&#x6307;&#x5B9A;&#x5B50;&#x7C7B;&#x578B;&#x6807;&#x8BC6;&#x6216; postmitotic &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#xFF0C;&#x53D1;&#x751F;&#x8FD9;&#x79CD;&#x60C5;&#x51B5;&#xFF0C;&#x65E0;&#x8BBA;&#x662F;&#x5426;&#x6D89;&#x53CA;&#x7684;&#x76F8;&#x540C;&#x6216;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;SOX1&#xFF0C;&#x82F1;&#x56FD;&#x653F;&#x5E9C;&#x6846;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF0C;&#x795E;&#x7ECF;&#x524D;&#x4F53;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5176;&#x4ED6; SOXB1 &#x4E9A;&#x79D1;&#x6210;&#x5458;&#x4E00;&#x9053;&#xFF0C;SOX2 &#x548C; SOX3&#xFF0C;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x8868;&#x793A;&#xFF0C;&#x6240;&#x6709;&#x4E09;&#x4E2A;&#x6709;&#x7275;&#x8FDE;&#x5728;&#x5927;&#x8111;&#x4E2D;&#x3002;SOX1 &#x8FD8;&#x552F;&#x4E00;&#x5730;&#x8868;&#x793A;&#x6784;&#x6210;&#x8179;&#x4FA7;&#x7EB9;&#x72B6;&#x4F53; (VS) &#x7684; telencephalic &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x9AD8;&#x7EA7;&#x522B;&#x3002;Sox1 null &#x57FA;&#x56E0;&#x7A81;&#x53D8;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4E2D;&#x7F3A;&#x5C11;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x3002;&#x5728;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8C08;&#x5230; SOX1 &#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6C34;&#x5E73;&#x4E0A;&#xFF0C;&#x63ED;&#x9732;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x6027;&#x8D28;&#x7684;&#x8981;&#x6C42;&#x548C;&#x65F6;&#x95F4;&#x5B89;&#x6392;&#x7684;&#x7F3A;&#x9677;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x751F;&#x6210;&#x8868;&#x8FBE; &beta;-&#x534A;&#x4E73;&#x7CD6;&#x82F7;&#x9176;&#x7684;&#x65B0;&#x578B; Sox1 null &#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0; VS &#x524D;&#x4F53;&#x548C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x65E9;&#x671F;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x5206;&#x5316;&#x4E2D;&#x7684; SOX1&#xFF0C;&#x6CA1;&#x6709;&#x53D7;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x65E0;&#x6CD5;&#x8FC1;&#x79FB;&#x5230;&#x5176;&#x9002;&#x5F53;&#x7684;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;SOX1&#xFF0C;&#x6CA1;&#x6709;&#x6697;&#x793A; Sox1 &#x8868;&#x793A;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x53D1;&#x6325;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x6784;&#x5EFA; VS &#x9886;&#x57DF;&#x7684;&#x5DE5;&#x4F5C;&#xFF0C;&#x4E5F;&#x5F71;&#x54CD; &#xFF08;&#x5982;&#x90A3;&#x4E9B;&#x8868;&#x793A; Pax6) &#x975E; Sox1 &#x8868;&#x793A; VS &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x8FC1;&#x79FB;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x662F;&#x5426; SOX1 &#x9700;&#x8981;&#x5728; postmitotic &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684; VS &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x8EAB;&#x4EFD;&#x51FA;&#x73B0;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4E2D;&#x7684; Sox1 &#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x88AB;&#x5B9A;&#x5411;&#x5230;&#x6240;&#x6709;&#x7684;&#x8179;&#x4FA7; telencephalic &#x524D;&#x4F53;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4EC5;&#x5F88;&#x5C11; VS &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8001;&#x9F20;&#x53C8;&#x7F3A;&#x4E4F; VS&#xFF09;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x5728;&#x524D;&#x4F53;&#x7684; SOX1 &#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x591F; VS &#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x5927;&#x90E8;&#x5206;&#x3002;&#x76F8;&#x53CD;&#xFF0C;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x4FDD;&#x6301;&#x5728;&#x54EA; Sox1 &#x7684;&#x51E0;&#x4E2A;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x90FD;&#x80FD;&#x591F;&#x8FC1;&#x79FB;&#x5230; VS&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;Sox1 &#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x524D;&#x4F53;&#x662F;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x591F;&#x7684; VS &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x8EAB;&#x4EFD;&#x548C;&#x8FC1;&#x79FB;&#xFF0C;&#x4F46;&#x8FD9;&#x5728; postmitotic &#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x9700;&#x8981;&#x7EE7;&#x7EED;&#x7684;&#x9A7B;&#x7559;&#x7684; SOX1 &#x6765;&#x5B8C;&#x6210;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x8FD8;&#x8868;&#x660E;&#x663E;&#x793A;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x5728;&#x7279;&#x5B9A;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x4EBA;&#x7FA4;&#x4E2D;&#x6709;&#x53EF;&#x80FD;&#x53D1;&#x6325;&#x8FDE;&#x7EED;&#x89D2;&#x8272;&#x4ECE;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x7684;&#x524D;&#x4F53;&#x53CA;&#x5176;&#x6700;&#x7EC8;&#x5206;&#x5316;&#x4E3A;&#x5176;&#x4ED6; SOXB1 &#x6210;&#x5458;&#x3002;

&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x8FC1;&#x79FB;&#x548C;&#x7AEF;&#x8111;&#x8179;&#x4FA7;&#x5B50;&#x7C7B;&#x578B;&#x6807;&#x8BC6;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E; SOX1&#x3002;

Little is known about the molecular mechanisms and intrinsic factors that are responsible for the emergence of neuronal subtype identity. Several transcription factors that are expressed mainly in precursors of the ventral telencephalon have been shown to control neuronal specification, but it has been unclear whether subtype identity is also specified in these precursors, or if this happens in postmitotic neurons, and whether it involves the same or different factors. SOX1, an HMG box transcription factor, is expressed widely in neural precursors along with the two other SOXB1 subfamily members, SOX2 and SOX3, and all three have been implicated in neurogenesis. SOX1 is also uniquely expressed at a high level in the majority of telencephalic neurons that constitute the ventral striatum (VS). These neurons are missing in Sox1-null mutant mice. In the present study, we have addressed the requirement for SOX1 at a cellular level, revealing both the nature and timing of the defect. By generating a novel Sox1-null allele expressing beta-galactosidase, we found that the VS precursors and their early neuronal differentiation are unaffected in the absence of SOX1, but the prospective neurons fail to migrate to their appropriate position. Furthermore, the migration of non-Sox1-expressing VS neurons (such as those expressing Pax6) was also affected in the absence of SOX1, suggesting that Sox1-expressing neurons play a role in structuring the area of the VS. To test whether SOX1 is required in postmitotic cells for the emergence of VS neuronal identity, we generated mice in which Sox1 expression was directed to all ventral telencephalic precursors, but to only a very few VS neurons. These mice again lacked most of the VS, indicating that SOX1 expression in precursors is not sufficient for VS development. Conversely, the few neurons in which Sox1 expression was maintained were able to migrate to the VS. In conclusion, Sox1 expression in precursors is not sufficient for VS neuronal identity and migration, but this is accomplished in postmitotic cells, which require the continued presence of SOX1. Our data also suggest that other SOXB1 members showing expression in specific neuronal populations are likely to play continuous roles from the establishment of precursors to their final differentiation.

Neuronal migration and ventral subtype identity in the telencephalon depend on SOX1.

On conna&#xEE;t peu les m&#xE9;canismes mol&#xE9;culaires et les facteurs intrins&#xE8;ques qui sont responsables de l&#x26;#39;&#xE9;mergence de l&#x26;#39;identit&#xE9; sous-type neuronal. Plusieurs facteurs de transcription qui sont exprim&#xE9;es principalement dans des pr&#xE9;curseurs du t&#xE9;lenc&#xE9;phale ventral a &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;montr&#xE9; que pour contr&#xF4;ler la sp&#xE9;cification des neurones, mais il a &#xE9;t&#xE9; difficile de savoir si l&#x26;#39;identit&#xE9; sous-type est &#xE9;galement pr&#xE9;cis&#xE9; dans ces pr&#xE9;curseurs, ou si cela se produit dans les neurones post-mitotiques, et qu&#x26;#39;il s&#x26;#39;agisse de la m&#xEA;me ou facteurs diff&#xE9;rents. SOX1, un facteur de transcription HMG bo&#xEE;te, est exprim&#xE9; largement dans pr&#xE9;curseurs neuraux avec les deux autres membres SOXB1 sous-famille, et SOX2 SOX3, et tous trois ont &#xE9;t&#xE9; impliqu&#xE9;s dans la neurogen&#xE8;se. SOX1 est aussi particuli&#xE8;rement exprim&#xE9; &#xE0; un niveau &#xE9;lev&#xE9; dans la majorit&#xE9; des neurones t&#xE9;lenc&#xE9;phaliques qui constituent le striatum ventral (VS). Ces neurones sont manquants dans Sox1-souris mutantes nulles. Dans la pr&#xE9;sente &#xE9;tude, nous avons abord&#xE9; la n&#xE9;cessit&#xE9; de SOX1 au niveau cellulaire, r&#xE9;v&#xE9;lant &#xE0; la fois la nature et le calendrier de la d&#xE9;fectuosit&#xE9;. En g&#xE9;n&#xE9;rant un roman Sox1-nulle all&#xE8;le exprimant la b&#xEA;ta-galactosidase, nous avons constat&#xE9; que les pr&#xE9;curseurs VS et leur diff&#xE9;renciation neuronale pr&#xE9;coce ne sont pas affect&#xE9;s en l&#x26;#39;absence de SOX1, mais les neurones ne parviennent pas &#xE0; migrer potentiels &#xE0; leur position appropri&#xE9;e. En outre, la migration des non-Sox1 exprimant neurones VS (tels que ceux exprimant Pax6) a &#xE9;galement &#xE9;t&#xE9; affect&#xE9;e en l&#x26;#39;absence de SOX1, ce qui sugg&#xE8;re que les neurones exprimant Sox1-jouent un r&#xF4;le dans la structuration de la zone de la VS. Pour tester si SOX1 est n&#xE9;cessaire dans les cellules post-mitotiques pour l&#x26;#39;&#xE9;mergence de l&#x26;#39;identit&#xE9; neuronale VS, nous avons g&#xE9;n&#xE9;r&#xE9; des souris dans lesquelles l&#x26;#39;expression Sox1 a &#xE9;t&#xE9; dirig&#xE9; vers tous les pr&#xE9;curseurs ventraux t&#xE9;lenc&#xE9;phaliques, mais &#xE0; seulement quelques neurones VS tr&#xE8;s peu. Ces souris n&#x26;#39;avaient pas encore la plupart des VS, ce qui indique que SOX1 expression de pr&#xE9;curseurs n&#x26;#39;est pas suffisante pour le d&#xE9;veloppement VS. A l&#x26;#39;inverse, les quelques neurones dans lequel Sox1 expression a &#xE9;t&#xE9; maintenu &#xE9;taient en mesure de migrer vers la VS. En conclusion, Sox1 expression des pr&#xE9;curseurs ne suffit pas pour VS identit&#xE9; neuronale et la migration, mais cela se fait dans les cellules post-mitotiques, qui n&#xE9;cessitent la pr&#xE9;sence continue de SOX1. Nos donn&#xE9;es sugg&#xE8;rent &#xE9;galement que d&#x26;#39;autres membres SOXB1 montrant une expression dans des populations neuronales sp&#xE9;cifiques sont susceptibles de jouer un r&#xF4;le continu de la mise en place de pr&#xE9;curseurs &#xE0; leur diff&#xE9;renciation finale.

La migration neuronale et l&#x26;#39;identit&#xE9; Sous ventrale du t&#xE9;lenc&#xE9;phale Comptez sur SOX1

Neuronale Migration und ventralen Subtyp Identit&#xE4;t im Telencephalon h&#xE4;ngen SOX1.

Poco &egrave; conosciuto circa i meccanismi molecolari e fattori intrinseci che sono responsabili per la nascita di identit&agrave; sottotipo neuronale. Diversi fattori di trascrizione che sono espressi principalmente in precursori del telencefalo ventrale hanno dimostrati di controllo neuronale specifica, ma &egrave; stato chiaro se sottotipo identit&agrave; viene specificato anche in questi precursori, o se questo succede nei neuroni postmitotic e se coinvolge i fattori uguali o diversi. SOX1, un fattore di trascrizione HMG box, &egrave; ampiamente espresso in precursori neurali insieme a due altri SOXB1 sottofamiglia membri, SOX2 e SOX3, e tutti e tre sono stati implicati nella neurogenesi. SOX1 &egrave; espresso anche in modo univoco a un livello elevato nella maggior parte dei neuroni telencefalici che costituiscono lo striato ventrale (VS). Questi neuroni sono mancanti in topi mutanti Sox1-null. Nel presente studio, abbiamo affrontato il requisito per SOX1 a livello cellulare, rivelando sia la natura e la tempistica del difetto. Generando un allele null Sox1 romanzo esprimendo la beta-galattosidasi, abbiamo trovato che i precursori VS e loro precoce differenziazione neuronale sono influenzate in assenza di SOX1, ma i futuri neuroni non riescono a migrare verso la loro posizione appropriata. Inoltre, la migrazione dei neuroni di VS non-Sox1-esprimere (ad esempio quelli che esprimono Pax6) &egrave; stata colpita anche in assenza di SOX1, suggerendo che i neuroni che esprimono Sox1 giocano un ruolo nella strutturazione dell&#39;area del VS. Per verificare se &egrave; necessaria SOX1 postmitotic celle per l&#39;emergere di un neurone identit&agrave; VS, abbiamo generato topi in cui Sox1 espressione era diretto a tutti i precursori telencefalici ventrali, ma a solo un pochi neuroni VS. Questi topi mancavano ancora la maggior parte della VS, che indica che SOX1 espressione dei precursori non &egrave; sufficiente per lo sviluppo VS. Al contrario, i pochi neuroni in cui Sox1 fu mantenuta espressione sono stati in grado di migrare verso il VS. In conclusione, Sox1 espressione dei precursori non &egrave; sufficiente per la migrazione e identit&agrave; neuronale VS, ma ci&ograve; avviene nelle cellule postmitotic, che richiedono la presenza continua di SOX1. I nostri dati suggeriscono anche che altri membri SOXB1 mostrando espressione in specifiche popolazioni neuronali sono propensi a giocare ruoli continui dall&#39;istituzione dei precursori a loro differenziazione finale.

Migrazione neuronale e identit&agrave; sottotipo ventrale nel telencefalo dipendono SOX1.

&#x30EA;&#x30C8;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x5206;&#x5B50;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3068;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30C7;&#x30F3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C6;&#x30A3;&#x306E;&#x51FA;&#x73FE;&#x306B;&#x8CAC;&#x4EFB;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x672C;&#x8CEA;&#x7684;&#x306A;&#x8981;&#x56E0;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x306F;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3002;&#x8179;&#x5074;&#x7D42;&#x8133;&#x306E;&#x524D;&#x99C6;&#x4F53;&#x3067;&#x4E3B;&#x306B;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4ED5;&#x69D8;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x30B5;&#x30D6;ID&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x524D;&#x99C6;&#x4F53;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x5206;&#x88C2;&#x7D42;&#x4E86;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3067;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x5834;&#x5408;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x540C;&#x3058;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3092;&#x6307;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5225;&#x306E;&#x8981;&#x56E0;&#x3002; SOX1&#x3001;HMG&#x30DC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x4E8C;&#x3064;&#x306E;SOXB1&#x30B5;&#x30D6;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x3001;SOX2&#x3068;SOX3&#x3068;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x795E;&#x7D4C;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x5E83;&#x304F;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x3001;3&#x3064;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x304C;&#x795E;&#x7D4C;&#x65B0;&#x751F;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; SOX1&#x3082;&#x4E00;&#x610F;&#x306B;&#x8179;&#x5074;&#x7DDA;&#x6761;&#x4F53;&#xFF08;VS&#xFF09;&#x3092;&#x69CB;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x7D42;&#x8133;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5927;&#x90E8;&#x5206;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x9AD8;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;Sox1-&#x30CC;&#x30EB;&#x5909;&#x7570;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x6B20;&#x843D;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6B20;&#x9665;&#x306E;&#x6027;&#x8CEA;&#x3068;&#x30BF;&#x30A4;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;SOX1&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8981;&#x4EF6;&#x306B;&#x5BFE;&#x51E6;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; &#x3B2;-&#x30AC;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x5C0F;&#x8AAC;Sox1-&#x30CC;&#x30EB;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;VS&#x524D;&#x99C6;&#x4F53;&#x3068;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x5206;&#x5316;&#x304C;SOX1&#x306E;&#x4E0D;&#x5728;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x304C;&#x3001;&#x5C06;&#x6765;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x30DD;&#x30B8;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3078;&#x306E;&#x79FB;&#x884C;&#x306B;&#x5931;&#x6557;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x975E;Sox1&#x767A;&#x73FE;VS&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#xFF08;&#x4F8B;&#x3048;&#x3070;&#x3001;Pax6&#x306E;&#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x3082;&#x306E;&#x306A;&#x3069;&#xFF09;&#x306E;&#x79FB;&#x884C;&#x306F;&#x3001;Sox1&#x767A;&#x73FE;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306F;VS&#x306E;&#x9818;&#x57DF;&#x3092;&#x69CB;&#x7BC9;&#x3059;&#x308B;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3001;SOX1&#x306E;&#x975E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; SOX1&#x306F;VS&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30C7;&#x30F3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C6;&#x30A3;&#x306E;&#x51FA;&#x73FE;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5206;&#x88C2;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3092;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;Sox1&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x8179;&#x5074;&#x7D42;&#x8133;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x6307;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3092;&#x4F5C;&#x88FD;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x3054;&#x304F;&#x5C11;&#x6570;VS&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3078;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x518D;&#x3073;&#x524D;&#x99C6;&#x4F53;&#x3067;SOX1&#x5F0F;&#x306F;VS&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5341;&#x5206;&#x3067;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3001;VS&#x306E;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x3092;&#x6B20;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x9006;&#x306B;&#x3001;Sox1&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x304C;&#x7DAD;&#x6301;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;VS&#x306B;&#x79FB;&#x884C;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D50;&#x8AD6;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306F;&#x3001;&#x524D;&#x99C6;&#x4F53;&#x3067;Sox1&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;VS&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30C7;&#x30F3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C6;&#x30A3;&#x3068;&#x79FB;&#x884C;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5341;&#x5206;&#x3067;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x304C;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x306F;SOX1&#x306E;&#x7D99;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x5B58;&#x5728;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x5206;&#x88C2;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x884C;&#x308F;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x96C6;&#x56E3;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x4ED6;&#x306E;SOXB1&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x304C;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x6700;&#x7D42;&#x7684;&#x306A;&#x5206;&#x5316;&#x306E;&#x524D;&#x99C6;&#x4F53;&#x306E;&#x8A2D;&#x7ACB;&#x304B;&#x3089;&#x9023;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x7D42;&#x8133;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x79FB;&#x52D5;&#x3068;&#x8179;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30C7;&#x30F3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C6;&#x30A3;&#x306F;SOX1&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;

&#xC791;&#xC740; &#xBD84;&#xC790; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xBC0F; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD558;&#xC704; &#xC815;&#xCCB4;&#xC131;&#xC758; &#xCD9C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xB0B4;&#xC7AC; &#xC131; &#xC694;&#xC778;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xB2E4;. &#xBCF5; &#xBD80; telencephalon&#xC758; &#xC804;&#xC870;&#xB97C; &#xC911;&#xC2EC;&#xC73C;&#xB85C; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790; &#xC81C;&#xC5B4; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC0AC;&#xC591; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xACC4;&#xC18D; &#xD558;&#xC9C0; &#xBD84;&#xBA85; &#xD558;&#xC704; &#xC815;&#xCCB4;&#xC131; &#xB610;&#xD55C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC804;&#xC870;&#xC5D0; &#xC9C0;&#xC815; &#xB41C; &#xC5EC;&#xBD80;&#xB97C; &#xB610;&#xB294; postmitotic &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0; &#xBC0F; &#xC5EC;&#xBD80; &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xB3D9;&#xC77C; &#xD558;&#xAC70;&#xB098; &#xB2E4;&#xB978; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. SOX1, HMG &#xC0C1;&#xC790; &#xB179;&#xC74C; &#xBC29;&#xC1A1; &#xC694;&#xC778;&#xC740; &#xB450; &#xBA85;&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; SOXB1 &#xC544; &#xD68C;&#xC6D0;, SOX2 &#xBC0F; SOX3, &#xD568;&#xAED8; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC804;&#xC870;&#xC5D0; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C; &#xD45C;&#xD604; &#xB418; &#xACE0; &#xC138; &#xAC00;&#xC9C0;&#xB97C; &#xBAA8;&#xB450; &#xC131;&#xCCB4;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xB418;&#xC5B4;. Sox1&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xC720;&#xC77C; &#xD558; &#xAC8C; &#xBCF5; &#xBD80;&#xAC00; (&#xB300;)&#xB97C; &#xAD6C;&#xC131; &#xD558;&#xB294; telencephalic &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB192;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; Sox1 null &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB204;&#xB77D; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD604;&#xC7AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBAA8;&#xB450; &#xBCF8;&#xC9C8;&#xC744; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD558;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; sox1&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC694;&#xAD6C;&#xB97C; &#xD574;&#xACB0; &#xD558; &#xACE0; &#xACB0;&#xD568;&#xC758; &#xD0C0;&#xC774;&#xBC0D;. &#xBCA0;&#xD0C0;-galactosidase &#xD45C;&#xD604; &#xC18C;&#xC124; Sox1 null &#xB300;&#xB9BD; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558; &#xC5EC; &#xC6B0;&#xB9AC; VS &#xC720;&#xB3C4;&#xCCB4;&#xC640; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xCD08;&#xAE30; &#xC2E0;&#xACBD; &#xBD84;&#xD654; SOX1, &#xBD80;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBC1B;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC7A0;&#xC7AC; &#xB274;&#xB7F0; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xC704;&#xCE58;&#xB85C; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;&#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC2E4;&#xD328; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xB610;&#xD55C;, Sox1 &#xD45C;&#xD604; VS &#xB274;&#xB7F0; (&#xADF8; &#xD45C;&#xD604; Pax6) &#xB4F1;&#xC758; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;&#xB3C4; SOX1, &#xC5C6;&#xC744; &#xACBD;&#xC6B0; Sox1 &#xD45C;&#xD604; &#xB274;&#xB7F0; &#xAD6C;&#xC870; &#xB300;&#xC758; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD560; &#xC81C;&#xC548;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744;. SOX1 VS &#xC2E0;&#xACBD; &#xC815;&#xCCB4;&#xC131;&#xC758; &#xCD9C;&#xD604;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; postmitotic &#xC140;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC9C0; &#xC5EC;&#xBD80;&#xB97C; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xD558;&#xB294; Sox1 &#xC2DD;&#xC740; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xBCF5; &#xBD80; telencephalic &#xC720;&#xB3C4;&#xCCB4;, &#xAC10;&#xB3C5;&#xB9CC; &#xD558; &#xC950; &#xC0DD;&#xC131;&#xC744; &#xAC70;&#xC758; &#xB300; &#xC2E0;&#xACBD;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC950; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xC804;&#xC870;&#xC5D0; SOX1 &#xC2DD; &#xB300; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; VS&#xC758; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC744; &#xBD80;&#xC871; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC18;&#xB300;&#xB85C; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; Sox1 &#xC2DD; &#xC720;&#xC9C0; &#xD588;&#xB2E4; VS &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB05D;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC804;&#xC870;&#xC5D0; Sox1 &#xC2DD; VS &#xC2E0;&#xACBD; id &#xBC0F; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;, &#xCDA9;&#xBD84; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC;&#xC774; sox1&#xC758; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778;&#xB41C; &#xC874;&#xC7AC;&#xB97C; &#xD544;&#xC694;&#xB85C; &#xD558;&#xB294; postmitotic &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC218;&#xD589; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xB610;&#xD55C; &#xB2E4;&#xB978; SOXB1 &#xD68C;&#xC6D0; &#xD2B9;&#xC815; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC778;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xC2DD;&#xC740; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xCD5C;&#xC885; &#xBD84;&#xD654;&#xC5D0; &#xC120;&#xAD6C;&#xC790;&#xC758; &#xC124;&#xB9BD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC2E0;&#xACBD; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xBC0F; &#xBCF5; &#xBD80; &#xD558;&#xC704; &#xC720;&#xD615; id&#xB294; telencephalon&#xC5D0;&#xC11C; sox1&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2EC;&#xB77C; &#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Poco se sabe sobre los mecanismos moleculares y los factores intr&#xED;nsecos que son responsables de la aparici&#xF3;n de la identidad subtipo neuronal. Varios factores de transcripci&#xF3;n que se expresan principalmente en los precursores del telenc&#xE9;falo ventral, se ha demostrado que controlar la especificaci&#xF3;n neuronal, pero no estaba claro si la identidad de subtipo tambi&#xE9;n se especifica en estos precursores, o si esto ocurre en las neuronas postmit&#xF3;ticas, y si se trata de la misma o factores diferentes. SOX1, un factor de transcripci&#xF3;n caja de HMG, se expresa ampliamente en los precursores neuronales, junto con los otros dos miembros de la subfamilia de SOXB1, Sox2 y Sox3, y los tres han sido implicados en la neurog&#xE9;nesis. SOX1 tambi&#xE9;n se expres&#xF3; &#xFA;nicamente en un nivel alto en la mayor&#xED;a de las neuronas telencef&#xE1;licas que constituyen el cuerpo estriado (VS). Estas neuronas no est&#xE1;n presentes en Sox1 nulo ratones mutantes. En el presente estudio, hemos abordado la necesidad de SOX1 a nivel celular, el cual revela la naturaleza y el momento del defecto. Mediante la generaci&#xF3;n de un nuevo alelo nulo Sox1-expresar la beta-galactosidasa, se encontr&#xF3; que los precursores de VS y su diferenciaci&#xF3;n neuronal temprana no se ven afectadas en ausencia de SOX1, pero las neuronas potenciales no pueden migrar a su posici&#xF3;n apropiada. Adem&#xE1;s, la migraci&#xF3;n de los no-Sox1 que expresan las neuronas VS (tales como los que expresan Pax6) tambi&#xE9;n se vio afectada en la ausencia de SOX1, lo que sugiere que Sox1 que expresan las neuronas juegan un papel en la estructuraci&#xF3;n de la zona de los SV. Para probar si SOX1 se requiere en las c&#xE9;lulas postmit&#xF3;ticas para el surgimiento de la identidad VS neuronal, hemos generado ratones en los que se dirigen Sox1 expresi&#xF3;n a todos los precursores telencef&#xE1;licas ventrales, pero a s&#xF3;lo unas neuronas VS muy pocos. Estos ratones carec&#xED;an de nuevo la mayor parte de los SV, lo que indica que SOX1 expresi&#xF3;n de precursores no es suficiente para el desarrollo VS. A la inversa, las pocas neuronas en el cual se mantuvo Sox1 expresi&#xF3;n fueron capaces de migrar a los SV. En conclusi&#xF3;n, Sox1 expresi&#xF3;n de precursores no es suficiente para la identidad VS neuronal y la migraci&#xF3;n, pero esto se logra en las c&#xE9;lulas postmit&#xF3;ticas, que requieren la presencia continua de SOX1. Nuestros datos tambi&#xE9;n sugieren que otros miembros de la SOXB1 muestran expresi&#xF3;n en poblaciones neuronales espec&#xED;ficas es probable que juegan un papel continuo desde el establecimiento de los precursores para su diferenciaci&#xF3;n final.

La migraci&#xF3;n neuronal y la identidad Subtipo ventral en el telenc&#xE9;falo Depende SOX1

To investigate the role of the Sry/hydroxymethylglutaryl box (Sox) transcription factors in the development of the pancreas, we determined the expression pattern of Sox factors in the developing mouse pancreas. By RT-PCR, we detected the presence of multiple Sox family members in both the developing pancreas and mature islets and then focused on two factors, Sox2 and Sox4. The expression field of Sox2, which plays a role in the maintenance of some stem cell populations, included the developing duodenum, but Sox2 was specifically excluded from the pancreatic buds. In contrast, Sox4 was detected broadly in the early pancreatic buds and eventually became restricted to the nuclei of all islet cells in the adult mouse. Mice homozygous for a null mutation of the sox4 gene showed normal pancreatic bud formation and endocrine cell differentiation up to embryonic day 12.5. Beyond that date, cultured pancreatic explants lacking sox4 failed to form normal islets. Instead, a markedly reduced number of endocrine cells were found scattered through the explant. We show here that several Sox transcription factors are expressed in the developing pancreas and in the islet, and that one of these factors, Sox4, is required for the normal development of pancreatic islets.

The HMG box transcription factor Sox4 contributes to the development of the endocrine pancreas.

&#x4E3A;&#x4E86;&#x8C03;&#x67E5; Sry/hydroxymethylglutaryl &#x6846; (Sox) &#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x5728;&#x80F0;&#x817A;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x51B3;&#x5FC3; Sox &#x56E0;&#x7D20;&#x5728;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x56FD;&#x5BB6;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80F0;&#x817A;&#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x6A21;&#x5F0F;&#x3002;&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;-&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x94FE;&#x53CD;&#x5E94;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x56FD;&#x5BB6;&#x80F0;&#x817A;&#x548C;&#x6210;&#x719F;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230; Sox &#x7684;&#x591A;&#x4E2A;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x6210;&#x5458;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#xFF0C;&#x7136;&#x540E;&#x4FA7;&#x91CD;&#x4E8E;&#x4E24;&#x4E2A;&#x56E0;&#x7D20;&#xFF0C;Sox2 &#x548C; Sox4&#x3002;Sox2 &#x7EF4;&#x62A4;&#x7684;&#x4E00;&#x4E9B;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7FA4;&#x4F53;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5B83;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x5B57;&#x6BB5;&#x5305;&#x62EC;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x56FD;&#x5BB6;&#x7684;&#x5341;&#x4E8C;&#x6307;&#x80A0;&#xFF0C;&#x4F46; Sox2 &#x7279;&#x522B;&#x6392;&#x9664;&#x80F0;&#x817A;&#x7684;&#x82BD;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;Sox4 &#x5927;&#x81F4;&#x65E9;&#x671F;&#x80F0;&#x817A;&#x764C;&#x82BD;&#x88AB;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#xFF0C;&#x5E76;&#x6700;&#x7EC8;&#x6210;&#x4E3A;&#x9650;&#x4E8E;&#x6210;&#x4EBA;&#x9F20;&#x6807;&#x4E2D;&#x7684;&#x6240;&#x6709;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x3002;&#x7EAF;&#x5408;&#x4E3A; null &#x7684; sox4 &#x57FA;&#x56E0;&#x7A81;&#x53D8;&#x5C0F;&#x9F20;&#x663E;&#x793A;&#x80DA;&#x80CE;&#x5929; 12.5 &#x6B63;&#x5E38;&#x80F0;&#x817A;&#x82BD;&#x5F62;&#x6210;&#x548C;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x3002;&#x8BE5;&#x65E5;&#x671F;&#x4E4B;&#x540E;&#x57F9;&#x517B;&#x80F0;&#x817A;&#x5916;&#x690D;&#x4F53;&#x7F3A;&#x4E4F; sox4 &#x672A;&#x80FD;&#x5F62;&#x6210;&#x6B63;&#x5E38;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x76F8;&#x53CD;&#xFF0C;&#x663E;&#x8457;&#x51CF;&#x5C11;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53D1;&#x73B0;&#x4E00;&#x4E9B;&#x88AB;&#x5916;&#x690D;&#x4F53;&#x901A;&#x8FC7;&#x5206;&#x6563;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x5C55;&#x793A;&#x8868;&#x793A;&#x51E0;&#x4E2A; Sox &#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x5728;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x56FD;&#x5BB6;&#x80F0;&#x817A;&#x548C;&#x80F0;&#x5C9B;&#xFF0C;&#x548C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x56E0;&#x7D20;&#x4E4B;&#x4E00;&#xFF0C;Sox4&#xFF0C;&#x662F;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7684;&#x6B63;&#x5E38;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;

&#x82F1;&#x56FD;&#x653F;&#x5E9C;&#x6846;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50; Sox4 &#x80F0;&#x817A;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x505A;&#x51FA;&#x8D21;&#x732E;&#x3002;

Pour &#xE9;tudier le r&#xF4;le de la bo&#xEE;te de Sry / hydroxym&#xE9;thylglutaryl (Sox) des facteurs de transcription dans le d&#xE9;veloppement du pancr&#xE9;as, nous avons d&#xE9;termin&#xE9; le profil d&#x26;#39;expression de facteurs Sox dans le pancr&#xE9;as de souris en d&#xE9;veloppement. Par RT-PCR, nous avons d&#xE9;tect&#xE9; la pr&#xE9;sence de plusieurs membres de la famille Sox tant dans le pancr&#xE9;as en d&#xE9;veloppement et les &#xEE;lots matures et ont ensuite port&#xE9; sur deux facteurs, Sox2 et Sox4. Le champ d&#x26;#39;expression de Sox2, qui joue un r&#xF4;le dans le maintien de certaines populations de cellules souches, notamment le duod&#xE9;num en d&#xE9;veloppement, mais Sox2 a &#xE9;t&#xE9; sp&#xE9;cifiquement exclus des bourgeons pancr&#xE9;atiques. En revanche, Sox4 a &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;tect&#xE9;e largement dans les bourgeons pancr&#xE9;atiques d&#xE9;but et finit par devenir restreinte aux noyaux de toutes les cellules des &#xEE;lots de Langerhans chez la souris adulte. Les souris homozygotes pour une mutation nulle du g&#xE8;ne a montr&#xE9; la formation normale sox4 bourgeon pancr&#xE9;atique et la diff&#xE9;renciation des cellules endocrines &#xE0; jour embryonnaire 12,5. Au-del&#xE0; de cette date, les explants pancr&#xE9;atiques culture manquent sox4 &#xE9;chou&#xE9; &#xE0; former des &#xEE;lots normaux. Au lieu de cela, un certain nombre nettement r&#xE9;duit de cellules endocrines ont &#xE9;t&#xE9; retrouv&#xE9;s &#xE9;parpill&#xE9;s &#xE0; travers l&#x26;#39;explant. Nous montrons ici que plusieurs des facteurs de transcription Sox sont exprim&#xE9;s dans le pancr&#xE9;as en d&#xE9;veloppement et dans l&#x26;#39;&#xEE;lot, et que l&#x26;#39;un de ces facteurs, Sox4, est n&#xE9;cessaire pour le d&#xE9;veloppement normal des &#xEE;lots pancr&#xE9;atiques.

Le Sox4 bo&#xEE;te HMG Transcription Factor contribue au d&#xE9;veloppement du pancr&#xE9;as endocrine

Um die Rolle der Transkriptionsfaktoren der Sry/Hydroxymethylglutaryl-Feld (Sox) in der Entwicklung der Bauchspeicheldr&uuml;se zu untersuchen, haben wir die Muster des Ausdrucks der Sox-Faktoren in der Entwicklung Maus Bauchspeicheldr&uuml;se festgestellt. Durch RT-PCR wir erkannt das Vorhandensein von mehreren Sox Familienmitglieder entwickelnden Bauchspeicheldr&uuml;se sowohl im Reifen Inselchen und konzentrierte sich dann auf zwei Faktoren, Sox2 und Sox4. Das Expression-Feld des Sox2, das spielt eine Rolle bei der Aufrechterhaltung der einige Stammzell-Populationen enthalten entwickelnden Duodenum, aber Sox2 wurde speziell von den pankreatischen Knospen ausgeschlossen. Im Gegensatz dazu Sox4 wurde weitgehend in den fr&uuml;hen Pankreas Knospen entdeckt und wurde schlie&szlig;lich auf den Kernen der alle Inselzellen in der adulten Maus beschr&auml;nkt. M&auml;use homozygot f&uuml;r eine null-Mutation im sox4-gen zeigten normale pankreatische Knospe Bildung und endokrine Zelldifferenzierung bis zu embryonalen Tag 12,5. Nach Ablauf dieser Frist konnte keine kultivierte Pankreas Explantaten fehlt sox4 normale Inselchen bilden. Stattdessen fand eine deutlich reduzierte Anzahl von endokrinen Zellen durch die Explant zerstreut. Wir zeigen hier, dass mehrere Sox Transkriptionsfaktoren in Entwicklungsl&auml;ndern Bauchspeicheldr&uuml;se und das Inselchen ausgedr&uuml;ckt werden, und einer dieser Faktoren, Sox4, f&uuml;r die normale Entwicklung des Pankreas Inselchen ben&ouml;tigt wird.

Der HMG-Feld-Transkriptionsfaktor Sox4 tr&auml;gt zur Entwicklung des endokrinen Pankreas.

Per indagare il ruolo dei fattori di trascrizione Sry/Idrossimetilglutaril casella (Sox) nello sviluppo del pancreas, abbiamo determinato il pattern di espressione dei fattori Sox del pancreas di topo in via di sviluppo. Mediante RT-PCR, abbiamo rilevato la presenza di pi&ugrave; membri della famiglia Sox nel pancreas in via di sviluppo e isolotti maturi e poi concentrati su due fattori, Sox2 e Sox4. Il campo di espressione di Sox2, che svolge un ruolo nel mantenimento di alcune popolazioni di cellule staminali, incluso il duodeno in via di sviluppo, ma Sox2 specificamente &egrave; stato escluso da germogli pancreatici. Al contrario, Sox4 &egrave; stato ampiamente rilevato nei primi germogli del pancreas e divenne infine limitato per i nuclei di tutte le cellule dell&#39;isolotto nel topo adulto. Topi omozigoti per una mutazione del gene sox4 null ha mostrato la differenziazione normale germoglio pancreatico formazione ed endocrine cella fino a 12.5 al giorno embrionale. Oltre tale data, colte del pancreas espianti privo di sox4 non &egrave; riuscito a formare isolotti normali. Invece, un numero notevolmente ridotto di cellule endocrine sono stato trovato sparsi attraverso l&#39;espianto. Mostriamo qui che diversi fattori di trascrizione Sox sono espressi nel pancreas in via di sviluppo e l&#39;isoletta, e che uno di questi fattori, Sox4, &egrave; necessario per il normale sviluppo di isole pancreatiche.

Il fattore di trascrizione di HMG box Sox4 contribuisce allo sviluppo del pancreas endocrino.

&#x81B5;&#x81D3;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;SRY /&#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x30AD;&#x30B7;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x30DC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#xFF08;&#x30BD;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#xFF09;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x304C;&#x958B;&#x767A;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x81B5;&#x81D3;&#x306E;&#x30BD;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002; RT-PCR&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x767A;&#x5C55;&#x9014;&#x4E0A;&#x81B5;&#x81D3;&#x3068;&#x6210;&#x719F;&#x3057;&#x305F;&#x5CF6;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306B;&#x8907;&#x6570;&#x306E;Sox&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x3092;&#x691C;&#x51FA;&#x3057;&#x3001;2&#x3064;&#x306E;&#x8981;&#x56E0;&#x3001;Sox2&#x3001;&#x53CA;&#x3073;SOX4&#x306B;&#x7126;&#x70B9;&#x3092;&#x5F53;&#x3066;&#x305F;&#x3002;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x96C6;&#x56E3;&#x306E;&#x7DAD;&#x6301;&#x306B;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;Sox2&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C9;&#x306F;&#x3001;&#x958B;&#x767A;&#x5341;&#x4E8C;&#x6307;&#x8178;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;Sox2&#x306E;&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x306B;&#x81B5;&#x81D3;&#x306E;&#x82BD;&#x304B;&#x3089;&#x9664;&#x5916;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;SOX4&#x306F;&#x3001;&#x65E9;&#x671F;&#x81B5;&#x81D3;&#x82BD;&#x3067;&#x5E83;&#x304F;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x6700;&#x7D42;&#x7684;&#x306B;&#x6210;&#x4F53;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x81B5;&#x5CF6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6838;&#x306B;&#x9650;&#x5B9A;&#x3068;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; SOX4&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30CC;&#x30EB;&#x5909;&#x7570;&#x306E;&#x30DB;&#x30E2;&#x63A5;&#x5408;&#x4F53;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x6B63;&#x5E38;&#x306A;&#x81B5;&#x81D3;&#x306E;&#x82B1;&#x82BD;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x6700;&#x5927;&#x80CE;&#x751F;12.5&#x301C;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x65E5;&#x3092;&#x8D85;&#x3048;&#x3066;&#x3001;SOX4&#x3092;&#x6B20;&#x304F;&#x57F9;&#x990A;&#x81B5;&#x81D3;&#x5916;&#x690D;&#x7247;&#x306F;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;&#x5CF6;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5931;&#x6557;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4EE3;&#x308F;&#x308A;&#x306B;&#x3001;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8457;&#x3057;&#x304F;&#x6E1B;&#x5C11;&#x6570;&#x306F;&#x3001;&#x690D;&#x6563;&#x5728;&#x304C;&#x8A8D;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x30BD;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x304C;&#x958B;&#x767A;&#x81B5;&#x81D3;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x81B5;&#x5CF6;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8981;&#x56E0;&#x3001;SOX4&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x304C;&#x3001;&#x81B5;&#x5CF6;&#x306E;&#x6B63;&#x5E38;&#x306A;&#x767A;&#x9054;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x3053;&#x3053;&#x306B;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

HMG&#x30DC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;SOX4&#x306F;&#x3001;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x81B5;&#x81D3;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;

&#xCDCC; &#xC7A5;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; Sry/hydroxymethylglutaryl &#xC0C1;&#xC790; (Sox) &#xB179;&#xC74C; &#xBC29;&#xC1A1; &#xC694;&#xC778;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC;, &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xCDCC; &#xC0AD;&#xC2A4; &#xC694;&#xC18C;&#xC758; &#xC2DD; &#xD328;&#xD134; &#xACB0;&#xC815;. RT-PCR&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xCDCC; &#xC131;&#xC219;&#xD55C; &#xB3C5;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC0AD;&#xC2A4; &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xB97C; &#xAC10;&#xC9C0; &#xD558; &#xACE0; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC694;&#xC778;, Sox2 &#xBC0F; sox4&#xC5D0; &#xCD08;&#xC810;&#xC744; &#xB9DE;&#xCD98;. &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC77C;&#xBD80; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xC9D1;&#xB2E8;&#xC758; &#xC720;&#xC9C0; &#xBCF4;&#xC218;&#xC5D0; &#xC5ED;&#xD560; Sox2 &#xC2DD; &#xD544;&#xB4DC; &#xD3EC;&#xD568; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xC2ED;&#xC774;&#xC9C0; Sox2 &#xCDCC; &#xC7A5; &#xC0C8;&#xC2F9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC81C;&#xC678; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBC18;&#xBA74;, Sox4 &#xCD08;&#xAE30; &#xCDCC; &#xC7A5; &#xC0C8;&#xC2F9;&#xC5D0; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C; &#xAC10;&#xC9C0; &#xD558; &#xACE0; &#xACB0;&#xAD6D; &#xC131;&#xC778; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC791;&#xC740; &#xC12C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD575;&#xC5D0; &#xC81C;&#xD55C; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC950; homozygous null sox4 &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xC774; &#xB300; &#xD55C; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xCDCC; &#xC7A5; &#xC0C8;&#xC2F9; &#xD615;&#xC131; &#xBC0F; &#xB0B4; &#xBD84; &#xBE44; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xD654;&#xB97C; &#xBC30;&#xC544; &#xD558;&#xB8E8; 12.5 &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;. &#xADF8; &#xB0A0;&#xC9DC;&#xB97C; &#xB118;&#xC5B4; sox4 &#xBD80;&#xC871; &#xD55C; &#xAD50;&#xC591;&#xB41C; &#xCDCC; &#xC7A5; explants &#xC815;&#xC0C1; &#xB3C5;&#xB3C4; &#xD615;&#xC131; &#xD558;&#xC9C0; &#xBABB;&#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB300;&#xC2E0;, &#xB0B4; &#xBD84; &#xBE44; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC218; &#xD604;&#xC800; &#xD558; &#xAC8C; &#xAC10;&#xC18C;&#xB294; explant&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xD769;&#xC5B4;&#xC838; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB410;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0; &#xD45C;&#xC2DC; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xCDCC; &#xC7A5; &#xBC0F; &#xC12C;, &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC0AD;&#xC2A4; &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790;&#xB294; &#xD45C;&#xD604; &#xD558; &#xACE0; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC694;&#xC18C;, Sox4, &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xAC00; &#xCDCC; &#xC7A5; &#xB3C5;&#xB3C4;&#xC758; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xBC1C;&#xC804;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C;.

HMG &#xC0C1;&#xC790; &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790; Sox4 &#xB0B4; &#xBD84; &#xBE44; &#xCDCC; &#xC7A5;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD55C;&#xB2E4;.

Para investigar el papel de la caja de Sry / hidroximetilglutaril (Medias) factores de transcripci&#xF3;n en el desarrollo del p&#xE1;ncreas, se determin&#xF3; el patr&#xF3;n de expresi&#xF3;n de los factores de los Medias Rojas en el p&#xE1;ncreas de rat&#xF3;n en desarrollo. Por RT-PCR, se detect&#xF3; la presencia de varios miembros de la familia de los Medias tanto en el desarrollo del p&#xE1;ncreas e islotes maduros y luego se centr&#xF3; en dos factores, Sox2 y SOX4. El campo de la expresi&#xF3;n de Sox2, que desempe&#xF1;a un papel en el mantenimiento de algunas poblaciones de c&#xE9;lulas madre, incluido el duodeno en desarrollo, pero Sox2 fue espec&#xED;ficamente excluida de las yemas pancre&#xE1;ticas. Por el contrario, SOX4 se detect&#xF3; en t&#xE9;rminos generales en las yemas de p&#xE1;ncreas y, finalmente, los primeros se restringi&#xF3; a los n&#xFA;cleos de todas las c&#xE9;lulas de los islotes en el rat&#xF3;n adulto. Los ratones homocigotos para una mutaci&#xF3;n nula del gen SOX4 mostr&#xF3; formaci&#xF3;n normal brote pancre&#xE1;tico y diferenciaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas endocrinas hasta el d&#xED;a embrionario 12,5. M&#xE1;s all&#xE1; de esa fecha, los explantes cultivados que carecen de p&#xE1;ncreas SOX4 no forman islotes normales. En su lugar, un n&#xFA;mero notablemente reducido de c&#xE9;lulas endocrinas se encuentran dispersos a trav&#xE9;s del explante. Mostramos aqu&#xED; que varios factores de transcripci&#xF3;n Sox se expresan en el p&#xE1;ncreas en desarrollo y en el islote, y que uno de estos factores, SOX4, se requiere para el desarrollo normal de los islotes pancre&#xE1;ticos.

La transcripci&#xF3;n de HMG Caja SOX4 factor contribuye al desarrollo del p&#xE1;ncreas endocrino

Sox2&#xFF0C;&#x5B83;&#x5C06;&#x7F16;&#x7801; SRY &#x7C7B;&#x4F3C;&#x82F1;&#x56FD;&#x6846;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF0C;&#x662F;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x3002;Sox2 &#x4ECB;&#x5BFC;&#x5176;&#x8F6C;&#x5F55;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x5F62;&#x6210;&#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x4E0E;&#x7279;&#x5B9A;&#x5408;&#x79DF;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x8BB8;&#x591A;&#x90FD;&#x662F;&#x672A;&#x77E5;&#x3002;&#x5728;&#x672C;&#x62A5;&#x544A;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x627E;&#x51FA;&#x534E;&#x4FA8;&#x57CE;-1&#x3001; Pou2f1 &#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x7F16;&#x7801;&#x4E3A;&#x534F;&#x56E0;&#x6570;&#x4E3A; Sox2 &#x9F20;&#x6807;&#x900F;&#x955C;&#x548C;&#x9F3B; placode &#x611F;&#x5E94;&#x7684;&#x4E0A;&#x4E0B;&#x6587;&#x4E2D;&#x3002;10 &#x6708; 1&#x3001; Sox2&#x3001; &#x548C; Pax6 co-expressed &#x955C;&#x5934;&#x548C;&#x9F3B; placode &#x611F;&#x5E94;&#x671F;&#x95F4;&#x4EE5;&#x53CA;&#x5728;&#x968F;&#x540E;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x9636;&#x6BB5;&#x3002;Sox2 &#x548C; Pou2f1 &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x7EC4;&#x5408;&#x5BFC;&#x81F4;&#x53D7;&#x635F;&#x7684;&#x955C;&#x5934; placode&#xFF0C;&#x5305;&#x542B;&#x773C;&#x7403;&#xFF0C;&#x773C;&#x8868;&#x578B;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x548C;&#x9F3B; placode &#x611F;&#x5E94;&#x7684;&#x5F7B;&#x5E95;&#x5931;&#x8D25;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x773C;&#x548C;&#x9F3B;&#x578B;&#x76F8;&#x4F3C; Pax6 &#x7A7A;&#x80DA;&#x80CE;&#x4E2D;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x627E;&#x51FA; DNA &#x7ED3;&#x5408;&#x4F4D;&#x70B9;&#x652F;&#x6301;&#x5408;&#x4F5C;&#x5F62;&#x6210;&#x7684; Sox2 &#x548C;&#x534E;&#x4FA8;&#x57CE;-1 &#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x590D;&#x6742;&#x548C;&#x8C03;&#x89E3; Pax6 &#x955C;&#x5934;&#x5916;&#x80DA;&#x5C42;&#x5242;&#x4F53;&#x5916;&#x7684; Sox2/&#x534E;&#x4FA8;&#x57CE;-1 &#x4F9D;&#x8D56;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x76F8;&#x540C;&#x7684; Sox &#x548C; Octamer &#x7ED1;&#x5B9A;&#x7AD9;&#x70B9; Pax6 &#x589E;&#x5F3A;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7684;&#x955C;&#x5934; placode &#x548C;&#x5176;&#x884D;&#x751F;&#x7269;&#x5728;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80DA;&#x80CE;&#x4E2D;&#x7684;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x3002;&#x96C6;&#x4F53;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E; Pou2f1&#x3001; Sox2 &#x548C; Pax6 &#x662F;&#x5229;&#x7528;&#x955C;&#x5934;&#x548C;&#x9F3B; placode &#x8BF1;&#x5BFC;&#x5206;&#x5B50;&#x901A;&#x8DEF;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F9D;&#x8D56;&#x7684;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x3002;

Sox2 &#x548C; Pou2f1 &#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#x63A7;&#x5236;&#x955C;&#x5934;&#x548C;&#x55C5; placode &#x53D1;&#x5C55;&#x3002;

Sox2, which encodes an SRY-like HMG box transcription factor, is critical for vertebrate development. Sox2 mediates its transcriptional effects through the formation of complexes with specific co-factors, many of which are unknown. In this report, we identify Oct-1, encoded by the Pou2f1 gene, as a co-factor for Sox2 in the context of mouse lens and nasal placode induction. Oct-1, Sox2, and Pax6 are co-expressed during lens and nasal placode induction and during subsequent developmental stages. Genetic combination of Sox2 and Pou2f1 mutant alleles results in impaired induction of the lens placode, an ocular phenotype that includes anophthalmia, and a complete failure of nasal placode induction. These ocular and nasal phenotypes closely resemble those observed in Pax6 null embryos. Moreover, we identify DNA-binding sites that support the cooperative formation of a complex between Sox2 and Oct-1 and mediate Sox2/Oct-1-dependent transactivation of the Pax6 lens ectoderm enhancer in vitro. We demonstrate that the same Sox- and Octamer-binding sites are essential for Pax6 enhancer activity in the lens placode and its derivatives in transgenic mouse embryos. Collectively, these results indicate that Pou2f1, Sox2 and Pax6 are interdependent components of a molecular pathway utilized in both lens and nasal placode induction.

Sox2 and Pou2f1 interact to control lens and olfactory placode development.

Sox2, qui code pour une SRY-like factor HMG transcription bo&#xEE;te, est essentielle pour le d&#xE9;veloppement des vert&#xE9;br&#xE9;s. Sox2 m&#xE9;die ses effets transcriptionnels &#xE0; travers la formation de complexes avec des co-facteurs sp&#xE9;cifiques, dont un grand nombre sont inconnus. Dans ce rapport, nous identifions Oct-1, cod&#xE9;e par le g&#xE8;ne Pou2f1, en tant que co-facteur de Sox2 dans le contexte de la souris optique et nasale placode induction. Oct-1, Sox2, et Pax6 sont co-exprim&#xE9;es au cours de la lentille et nasal placode induction et pendant les stades de d&#xE9;veloppement ult&#xE9;rieurs. Combinaison g&#xE9;n&#xE9;tique des mutants Sox2 et Pou2f1 r&#xE9;sultats all&#xE8;les dans l&#x26;#39;induction de troubles de la placode optique, un ph&#xE9;notype oculaire qui comprend anophtalmie, et un &#xE9;chec complet de l&#x26;#39;induction des placodes nasales. Ces ph&#xE9;notypes oculaires et nasales tr&#xE8;s proches de celles observ&#xE9;es dans Pax6 embryons nuls. En outre, nous identifions liaison &#xE0; l&#x26;#39;ADN des sites qui prennent en charge la formation de coop&#xE9;ratives d&#x26;#39;un complexe entre Sox2 et Oct-1 et de m&#xE9;diation de transactivation Sox2/Oct-1-dependent de l&#x26;#39;ectoderme Pax6 lentille enhancer in vitro. Nous d&#xE9;montrons que les Red Sox et m&#xEA;me Octamer sites de liaison sont essentielles pour Pax6 activit&#xE9; amplificatrice dans la placode objectif et de ses d&#xE9;riv&#xE9;s dans des embryons de souris transg&#xE9;niques. Collectivement, ces r&#xE9;sultats indiquent que Pou2f1, Sox2 et Pax6 sont des &#xE9;l&#xE9;ments interd&#xE9;pendants d&#x26;#39;une voie mol&#xE9;culaire utilis&#xE9;e &#xE0; la fois objectif et l&#x26;#39;induction des placodes nasales.

Sox2 et Pou2f1 interagissent pour contr&#xF4;ler Lens et le d&#xE9;veloppement placode olfactive

Sox2, das ein SRY-wie HMG-Feld-Transkriptionsfaktor codiert, ist entscheidend f&uuml;r vertebrate Entwicklung. Sox2 vermittelt ihre transkriptionelle Auswirkungen durch die Bildung von komplexen mit spezifischen Co-Faktoren, von die viele unbekannt sind. In diesem Bericht identifizieren wir Okt-1, als eine Co-factor f&uuml;r Sox2 im Rahmen des Maus-Objektiv und nasal Placode Induktion durch das Pou2f1-Gen codiert. Oct-1, Sox2 und Pax6 sind co-expressed bei Objektiv und nasal Placode Induktion und bei sp&auml;teren Entwicklungsstadien. Genetische Kombination Sox2 und Pou2f1 mutierten Allele f&uuml;hrt zu gest&ouml;rter Induktion von Objektiv Placode, einer okul&auml;rer Ph&auml;notyp, die Anophthalmie enth&auml;lt, und ein kompletter Fehlschlag der nasal Placode Induktion. Diese Augen und nasalen Ph&auml;notypen &auml;hnelt stark Pax6 null Embryonen beobachtet. Dar&uuml;ber hinaus identifizieren wir DNA-bindenen Websites, die unterst&uuml;tzen die kooperative Bildung eines Komplexes zwischen Sox2 und Oct-1 und Sox2/Okt-1-abh&auml;ngigen Transactivation von Pax6 Objektiv Ektoderm Enhancer in-vitro zu vermitteln. Wir zeigen, dass die gleichen Sox - und Octamer-Bindungsstellen f&uuml;r Pax6-Vergr&ouml;&szlig;erer-Aktivit&auml;t in der Objektiv Placode und seine Derivate in transgenen Maus Embryonen unerl&auml;sslich sind. Zusammenfassend zeigen diese Ergebnisse, dass Pou2f1, Sox2 und Pax6 voneinander abh&auml;ngigen Komponenten der molekularen Weg sowohl Objektiv als auch nasal Placode Induktion genutzt.

Sox2 und Pou2f1 interagieren Kontrolle Objektiv und olfaktorischen Placode Entwicklung.

Sox2, che codifica per un fattore di trascrizione di SRY-come HMG box, &egrave; fondamentale per lo sviluppo di vertebrati. SOX2 media suoi effetti trascrizionali attraverso la formazione di complessi con cofattori specifici, molti dei quali sono sconosciuti. In questa relazione, ci identifichiamo ott-1, codificata dal gene Pou2f1, come un cofattore per Sox2 nel contesto dell&#39;obiettivo del mouse e induzione placode nasale. Ott 1, Sox2 e Pax6 sono co-expressed durante la lente e induzione placode nasale e durante le fasi successive dello sviluppo. Genetica combinazione di alleli mutanti Sox2 e Pou2f1 risultati in induzione alterata del placode lente, un fenotipo oculare che include l&#39;anoftalmia e un completo fallimento dell&#39;induzione placode nasale. Questi fenotipi oculari e nasali assomigliano quelli osservati negli embrioni null Pax6. Inoltre, noi identificare siti di legame del DNA che supportano la formazione cooperativa di un complesso tra Sox2 e Oct-1 e mediano transactivation Sox2/ott-1-dipendente di enhancer l&#39;ectoderma di Pax6 lente in vitro. Dimostriamo che gli stessi siti di Sox - e Octamer-binding sono essenziali per attivit&agrave; enhancer Pax6 nel placode lente e suoi derivati in embrioni di topo transgenico. Collettivamente, questi risultati indicano che Pou2f1, Sox2 e Pax6 sono componenti interdipendenti di un pathway molecolare utilizzato in lente e per induzione placode nasale.

SOX2 e Pou2f1 interagire al controllo obiettivo e sviluppo placode olfattivo.

SRY&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;HMG&#x30DC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x578B;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x30EC;&#x30C8;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x767A;&#x751F;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002; Sox2&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x304C;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3001;&#x88DC;&#x200B;&#x200B;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x7279;&#x5B9A;&#x3068;&#x306E;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x305D;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x672C;&#x7A3F;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x3068;&#x9F3B;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306E;&#x6587;&#x8108;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;Sox2&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x88DC;&#x56E0;&#x5B50;&#x3068;&#x3057;&#x3066;Pou2f1&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x308B;10&#x6708; -  1&#x3092;&#x3001;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; 10&#x6708;1&#x3001;&#x30EC;&#x30C8;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;Pax6&#x306E;&#x306F;&#x3001;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x3068;&#x9F3B;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x6642;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x5171;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x969C;&#x5BB3;&#x3001;&#x7121;&#x773C;&#x7403;&#x75C7;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x773C;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3001;&#x9F3B;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306E;&#x5B8C;&#x5168;&#x306A;&#x5931;&#x6557;&#x3067;Sox2&#x3001;&#x53CA;&#x3073;Pou2f1&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x773C;&#x3068;&#x9F3B;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306F;&#x5BC6;&#x63A5;&#x306B;Pax6&#x306E;&#x30CC;&#x30EB;&#x80DA;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3082;&#x306E;&#x306B;&#x4F3C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;Sox2&#x3001;&#x53CA;&#x3073;10&#x6708; -  1&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x5354;&#x540C;&#x7D44;&#x5408;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;DNA&#x7D50;&#x5408;&#x90E8;&#x4F4D;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x3001;in vitro&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;Pax6&#x306E;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x5916;&#x80DA;&#x8449;&#x30A8;&#x30F3;&#x30CF;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x306E;Sox2/Oct-1-dependent&#x8EE2;&#x5199;&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x540C;&#x3058;&#x30BD;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3068;&#x516B;&#x91CF;&#x4F53;&#x7D50;&#x5408;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306F;&#x3001;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3068;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x80DA;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x305D;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x4F53;&#x3067;Pax6&#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30CF;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x6D3B;&#x6027;&#x306B;&#x5FC5;&#x9808;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x7DCF;&#x79F0;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;Pou2f1&#x3001;Sox2&#x3001;&#x53CA;&#x3073;Pax6&#x306E;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x3068;&#x9F3B;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3067;&#x5229;&#x7528;&#x3057;&#x305F;&#x5206;&#x5B50;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F9D;&#x5B58;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

Sox2&#x3001;&#x53CA;&#x3073;Pou2f1&#x306F;&#x3001;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x3068;&#x55C5;&#x677F;&#x958B;&#x767A;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5BFE;&#x8A71;

Sox2, SRY &#xAC19;&#xC740; HMG &#xC0C1;&#xC790; &#xC804;&#xC0AC; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD558;&#xB294; &#xCC99;&#xCD94; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Sox2 &#xC911;&#xC7AC;&#xC758; transcriptional &#xD6A8;&#xACFC; &#xB9CE;&#xC740; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C0;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xD2B9;&#xC815; &#xC694;&#xC778; &#xD568;&#xAED8; &#xB2E8;&#xC9C0;&#xC758; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574;. &#xC774; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; 10 &#xC6D4;-1, Pou2f1 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xB80C;&#xC988;&#xC640; &#xCF54; placode &#xC720;&#xB3C4;&#xC758; &#xCEE8;&#xD14D;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; Sox2 &#xC704;&#xD55C; co-factor&#xB85C; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xB41C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. 10 &#xC6D4; 1, Sox2, &#xBC0F; Pax6 &#xB80C;&#xC988;&#xC640; &#xCF54; placode &#xC720;&#xB3C4; &#xBC0F; &#xD6C4;&#xC18D; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xB2E8;&#xACC4; &#xC911; co-expressed. Sox2 &#xBC0F; Pou2f1 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xCCB4; &#xB300;&#xB9BD; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC870;&#xD569;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xB80C;&#xC988; placode, anophthalmia, &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xB208; &#xD45C;&#xD604; &#xD615;&#xC758; &#xC7A5;&#xC560;&#xC778;&#xB41C; &#xC720;&#xB3C4; &#xBC0F; &#xBE44; &#xAC15; placode &#xC720;&#xB3C4;&#xC758; &#xC644;&#xC804; &#xD55C; &#xC2E4;&#xD328;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB208;&#xACFC; &#xBE44; &#xAC15; &#xACE0;&#xAE30;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xBA74; Pax6 null &#xBC30;&#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB41C; &#xC720;&#xC0AC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC6B0;&#xB9AC; DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; Sox2 10 &#xC6D4;-1 &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xD611;&#xB825; &#xD615;&#xC131; &#xC9C0;&#xC6D0;&#xACFC; Sox2/10 &#xC6D4; 1 &#xC885;&#xC18D; transactivation Pax6 &#xB80C;&#xC988; ectoderm &#xC99D;&#xAC15; &#xCCB4; &#xC678;&#xC758; &#xC911;&#xC7AC;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xAC19;&#xC740; &#xC0AD;&#xC2A4;&#xC640; Octamer &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xB294; &#xB80C;&#xC988; placode&#xC5D0;&#xC11C; Pax6 &#xC99D;&#xAC15; &#xD65C;&#xB3D9; &#xBC0F; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBC30;&#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xC0C1;&#xD488;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC0E8; &#xB2E4;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; Pou2f1, Sox2, Pax6 &#xB80C;&#xC988;&#xC640; &#xCF54; placode &#xC720;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xD65C;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xBD84;&#xC790; &#xACBD;&#xB85C;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC758;&#xC874;&#xC801;&#xC778; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB294; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Sox2 &#xBC0F; Pou2f1 &#xC81C;&#xC5B4; &#xB80C;&#xC988; &#xBC0F; &#xD6C4; &#xAC01; placode &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Sox2, que codifica un gen SRY-como factor inhibidor de la HMG caja de la transcripci&#xF3;n, es fundamental para el desarrollo de los vertebrados. Sox2 mediador de los efectos de la transcripci&#xF3;n a trav&#xE9;s de la formaci&#xF3;n de complejos con espec&#xED;fica co-factores, muchos de los cuales son desconocidos. En este informe, se identifican octubre-1, codificada por el gen Pou2f1, como un co-factor de Sox2 en el contexto de la lente del rat&#xF3;n y la inducci&#xF3;n placoda nasal. Octubre-1, Sox2, y Pax6 son co-expresados &#x200B;&#x200B;en la lente y la inducci&#xF3;n placoda nasal, y durante las subsiguientes etapas de desarrollo. La combinaci&#xF3;n gen&#xE9;tica de Sox2 y Pou2f1 resultados alelos mutantes en la inducci&#xF3;n de alteraciones de la placoda lente, un fenotipo ocular que incluye anoftalmia, y un completo fracaso de la inducci&#xF3;n placoda nasal. Estos fenotipos oculares y nasales se asemejan mucho a los observados en Pax6 embriones nulos. Adem&#xE1;s, identificar el ADN de sitios de uni&#xF3;n que apoyan la formaci&#xF3;n cooperativa de un complejo entre Sox2 y oct 1-y mediar transactivaci&#xF3;n Sox2/Oct-1-dependent del ectodermo potenciador Pax6 lente in vitro. Se demuestra que los Medias-y el mismo Octamer sitios de uni&#xF3;n son esenciales para Pax6 potenciador de la actividad en la placoda lente y sus derivados en los embriones de ratones transg&#xE9;nicos. En conjunto, estos resultados indican que Pou2f1, Sox2 y Pax6 son componentes interdependientes de una v&#xED;a molecular utilizada tanto en la lente y la inducci&#xF3;n placoda nasal.

Sox2 y Pou2f1 interact&#xFA;an para controlar la lente y el Desarrollo placoda olfatoria

Sox1 nulles cellules des fibres de lentilles ne parviennent pas &#xE0; s&#x26;#39;allonger et ont perturb&#xE9; l&#x26;#39;expression de la gamma-crystalline. Nous avons &#xE9;valu&#xE9; l&#x26;#39;expression de prot&#xE9;ines et Pax6 Sox1 pendant les phases critiques de la morphogen&#xE8;se objectif, avec un accent particulier sur la diff&#xE9;renciation cellulaire de la fibre. Alors que Pax6 et Sox1 sont co-exprim&#xE9;es pendant les stades pr&#xE9;coces de la diff&#xE9;renciation cellulaire des fibres, Sox1 r&#xE9;gulation &#xE0; la hausse co&#xEF;ncide temporellement avec la r&#xE9;gulation n&#xE9;gative de Pax6, et ces prot&#xE9;ines pr&#xE9;sentent donc un profil d&#x26;#39;expression frappante inverse dans le compartiment de la cellule optique de fibre. En outre, Pax6 est inappropri&#xE9;e exprim&#xE9; dans les cellules des fibres de Sox1 souris nulles et la cible de Pax6, alpha5 int&#xE9;grine, est en m&#xEA;me temps mal exprim&#xE9;s. Enfin, nous d&#xE9;montrons une interaction g&#xE9;n&#xE9;tique entre Sox1 et Pax6, comme Sox1 h&#xE9;t&#xE9;rozygotie sauvetages partiellement le diam&#xE8;tre de Pax6 (Sey) lentilles en augmentant le nombre de cellules dans le compartiment cellulaire de la fibre.

Pax6 est mal exprim&#xE9;s dans Sox1 Null cellules fibreuses de lentilles

Sox1 null Objektiv Faser Zellen nicht verl&auml;ngern und Ausdruck der Gamma-Crystallin gest&ouml;rt haben. Wir haben den Ausdruck der Sox1 und Pax6 Proteine w&auml;hrend kritischer Phasen der Linse Morphogenese, mit besonderem Schwerpunkt auf Faser-Zelldifferenzierung evaluiert. W&auml;hrend Pax6 und Sox1 co-expressed w&auml;hrend der fr&uuml;hen Phasen der Faser Zelldifferenzierung, Sox1 bis-Verordnung f&auml;llt zeitlich mit dem Herunterregulation Pax6 und diese Proteine daher anzeigen ein markantes inverse Ausdrucksmuster im Objektiv Faser Zelle Fach. Dar&uuml;ber hinaus Pax6 wird in die Faser-Zellen Sox1 null M&auml;use unsachgem&auml;&szlig; ausgedr&uuml;ckt und das Pax6-Ziel, alpha5 Integrin, ist gleichzeitig misexpressed. Schlie&szlig;lich zeigen wir eine genetische Interaktion zwischen Sox1 und Pax6, da Sox1 Heterozygosit&auml;t teilweise durch Erh&ouml;hung der Anzahl der Zellen in die Faser Zelle Fach rettet den Durchmesser der Pax6(Sey) Linsen.

PAX6 ist in Sox1 null Objektiv Faser Zellen misexpressed.

Le cellule di fibra ottica null Sox1 non allungare e avere sconvolto l&#39;espressione di gamma-crystallin. Noi abbiamo valutato l&#39;espressione di proteine Sox1 e Pax6 durante fasi critiche della morfogenesi lente, con particolare focus sulla differenziazione delle cellule di fibra. Mentre Pax6 e Sox1 sono espressi durante le prime fasi della differenziazione delle cellule di fibra, Sox1 up-regolamento coincide temporalmente con la down-regulation di Pax6, e queste proteine quindi visualizzare un criterio di espressione inversa colpisce nel vano cella fibre lente. Inoltre, Pax6 impropriamente &egrave; espresso nelle cellule dei topi null Sox1 fibra e la destinazione di Pax6, integrina alpha5, &egrave; contemporaneamente misexpressed. Infine, dimostriamo un&#39;interazione genetica tra Sox1 e Pax6, come Sox1 eterozigosi salv&ograve; parzialmente il diametro delle lenti Pax6(Sey) aumentando il numero di cellule nel compartimento cellulare fibra.

PAX6 &egrave; misexpressed in cellule di fibra ottica null Sox1.

Sox1&#x30CC;&#x30EB;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x7E4A;&#x7DAD;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x4F38;&#x9577;&#x306B;&#x5931;&#x6557;&#x3057;&#x3001;&#x3B3;-&#x30AF;&#x30EA;&#x30B9;&#x30BF;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x4E2D;&#x65AD;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x7E4A;&#x7DAD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x306B;&#x7279;&#x306B;&#x7126;&#x70B9;&#x3092;&#x5F53;&#x3066;&#x3001;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;Sox1&#x3068;Pax6&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3057;&#x305F;&#x3002; Pax6&#x306E;&#x3068;Sox1&#x306F;&#x3001;&#x7E4A;&#x7DAD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x5171;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;Sox1&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;Pax6&#x306E;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x4E00;&#x6642;&#x7684;&#x306B;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x6C34;&#x6676;&#x4F53;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x5185;&#x306E;&#x5370;&#x8C61;&#x7684;&#x306A;&#x9006;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;Pax6&#x306E;&#x306F;&#x4E0D;&#x9069;&#x5207;&#x3001;ALPHA5&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x3001;Sox1 null&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3068;Pax6&#x306E;&#x6A19;&#x7684;&#x306E;&#x7E4A;&#x7DAD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x540C;&#x6642;&#x306B;misexpressed&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; Sox1&#x30D8;&#x30C6;&#x30ED;&#x63A5;&#x5408;&#x304C;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306B;&#x7E4A;&#x7DAD;&#x7D30;&#x80DE;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x5185;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x6570;&#x3092;&#x5897;&#x3084;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;Pax6&#x306E;&#xFF08;SEY&#xFF09;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x306E;&#x76F4;&#x5F84;&#x3092;&#x6551;&#x3046;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;Sox1&#x3068;Pax6&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

PAX6&#x306F;&#x3001;Sox1&#x30CC;&#x30EB;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x7E4A;&#x7DAD;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;Misexpressed&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;

Sox1 null lens fiber cells fail to elongate and have disrupted expression of gamma-crystallin. We have evaluated the expression of Sox1 and Pax6 proteins during critical stages of lens morphogenesis, with particular focus on fiber cell differentiation. While Pax6 and Sox1 are co-expressed during early stages of fiber cell differentiation, Sox1 up-regulation coincides temporally with the down-regulation of Pax6, and these proteins therefore display a striking inverse expression pattern in the lens fiber cell compartment. Furthermore, Pax6 is inappropriately expressed in the fiber cells of Sox1 null mice and the Pax6 target, alpha5 integrin, is simultaneously misexpressed. Finally, we demonstrate a genetic interaction between Sox1 and Pax6, as Sox1 heterozygosity partially rescues the diameter of Pax6(Sey) lenses by increasing the number of cells in the fiber cell compartment.

Pax6 is misexpressed in Sox1 null lens fiber cells.

Sox1 &#x7A7A;&#x6676;&#x72B6;&#x4F53;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x65E0;&#x6CD5;&#x62C9;&#x957F;&#xFF0C;&#x6270;&#x4E71;&#x4E86; &gamma;-&#x6676;&#x72B6;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC4;&#x4F30;&#x4E86;&#x86CB;&#x767D;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684; Sox1 &#x548C; Pax6 &#x955C;&#x5934;&#x5F62;&#x6001;&#xFF0C;&#x5C24;&#x5176;&#x4FA7;&#x91CD;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x9636;&#x6BB5;&#x3002;&#x867D;&#x7136; Pax6 &#x548C; Sox1 &#x90FD;&#x662F;&#x591A;&#x53D1;&#x6027;&#x9AA8;&#x9AD3;&#x7624;&#x7684;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x65E9;&#x671F;&#x9636;&#x6BB5;&#xFF0C;Sox1 &#x4E0A;&#x8C03;&#x6682;&#x65F6;&#x6B63;&#x503C; Pax6&#xFF0C;&#x4E0B;&#x8C03;&#x548C;&#x6676;&#x72B6;&#x4F53;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8F66;&#x53A2;&#x5185;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x56E0;&#x6B64;&#x663E;&#x793A;&#x4E86;&#x4E00;&#x4E2A;&#x4EE4;&#x4EBA;&#x9707;&#x60CA;&#x7684;&#x9006;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x6A21;&#x5F0F;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;Pax6 &#x4E0D;&#x6070;&#x5F53;&#x5730;&#x8868;&#x793A;&#xFF0C;Sox1 &#x7A7A;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5E76;&#x4E14; Pax6 &#x76EE;&#x6807;&#xFF0C;alpha5 &#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#xFF0C;&#x662F;&#x540C;&#x65F6; misexpressed&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x9057;&#x4F20;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528; Sox1 &#x548C; Pax6&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A; Sox1 &#x6742;&#x5408;&#x90E8;&#x5206;&#x8425;&#x6551;&#x7684; Pax6(Sey) &#x955C;&#x7247;&#x76F4;&#x5F84;&#x589E;&#x52A0;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8F66;&#x53A2;&#x5185;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x6570;&#x76EE;&#x3002;

Pax6 &#x88AB; misexpressed Sox1 &#x7A7A;&#x6676;&#x72B6;&#x4F53;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x3002;

Sox1 null &#xB80C;&#xC988; &#xC12C;&#xC720; &#xC140; &#xC5F0;&#xC7A5; &#xB418;&#xC9C0; &#xAC10;&#xB9C8;-crystallin&#xC758; &#xC2DD;&#xC744; &#xC911;&#xB2E8; &#xD574;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC12C;&#xC720; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xD654;&#xC5D0; &#xD2B9;&#xD788; &#xCD08;&#xC810; &#xB80C;&#xC988; morphogenesis&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xB2E8;&#xACC4; &#xB3D9;&#xC548; sox1&#xC640; Pax6 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD45C;&#xD604;&#xC2DD;&#xC744; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Pax6 &#xBC0F; sox1&#xB294; &#xC12C;&#xC720; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xD654;&#xC758; &#xCD08;&#xAE30; &#xB2E8;&#xACC4; &#xB3D9;&#xC548; co-expressed&#xB294;, Sox1 &#xC5C5; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xC158; &#xC77C;&#xC2DC;&#xC801; Pax6, &#xB2E4;&#xC6B4; &#xADDC;&#xC81C;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58; &#xD558; &#xACE0; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xB80C;&#xC988; &#xC12C;&#xC720; &#xC140; &#xAD6C;&#xD68D;&#xC5D0; &#xB208;&#xC5D0; &#xB744;&#xB294; &#xBC18;&#xC804; &#xD328;&#xD134; &#xD45C;&#xC2DC;. &#xB610;&#xD55C;, pax6&#xC740; &#xBD80;&#xC801;&#xC808; &#xD558; &#xAC8C; Sox1 null &#xC950;&#xC758; &#xC12C;&#xC720; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xD45C;&#xD604; &#xB418; &#xACE0; Pax6 &#xB300;&#xC0C1; alpha5 integrin&#xC740; &#xB3D9;&#xC2DC;&#xC5D0; misexpressed. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, Sox1 heterozygosity &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC12C;&#xC720; &#xC140; &#xAD6C;&#xD68D;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC140;&#xC758; &#xC218;&#xB97C; &#xB298;&#xB9BC;&#xC73C;&#xB85C;&#xC368; Pax6(Sey) &#xB80C;&#xC988;&#xC758; &#xC9C1;&#xACBD;&#xC744; &#xAD6C;&#xCD9C;&#xB85C; sox1&#xC640; Pax6, &#xC0AC;&#xC774; &#xC720;&#xC804; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Pax6 Sox1 null &#xB80C;&#xC988; &#xC12C;&#xC720; &#xC140;&#xC5D0; misexpressed &#xC774;&#xB2E4;.

Sox1 c&#xE9;lulas nulas de fibras de la lente no se alarguen y se han alterado la expresi&#xF3;n de la gamma-cristalina. Hemos evaluado la expresi&#xF3;n de Sox1 y Pax6 prote&#xED;nas durante las etapas cr&#xED;ticas de la morfog&#xE9;nesis del objetivo, con especial &#xE9;nfasis en la diferenciaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas de fibra. Mientras Pax6 y Sox1 son co-expresados &#x200B;&#x200B;durante las primeras etapas de la diferenciaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas de fibra, Sox1 la regulaci&#xF3;n coincide temporalmente con la baja regulaci&#xF3;n de Pax6, y por lo tanto, estas prote&#xED;nas muestra un llamativo patr&#xF3;n de expresi&#xF3;n inversa en el compartimiento de la lente de c&#xE9;lulas de la fibra. Adem&#xE1;s, se Pax6 inapropiada expresada en las c&#xE9;lulas de fibra de Sox1 ratones nulos y el objetivo Pax6, alfa5 integrina, se misexpressed simult&#xE1;neamente. Por &#xFA;ltimo, se demuestra una interacci&#xF3;n entre gen&#xE9;tica y Pax6 Sox1, como Sox1 heterocigosidad parcialmente rescata el di&#xE1;metro de PAX6 (Sey) las lentes al aumentar el n&#xFA;mero de c&#xE9;lulas en el compartimiento de las c&#xE9;lulas de la fibra.

Pax6 se misexpressed en Sox1 c&#xE9;lulas nulas lente de fibra

&#x6240;&#x793A;&#x51E0;&#x4E2A;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x6210;&#x5458;&#x7684; TGF-&beta; &#x5177;&#x6709;&#x5DF2;&#x4F5C;&#x4E3A; morphogens&#xFF0C;&#x63A7;&#x5236;&#x5404;&#x79CD;&#x5404;&#x6837;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x547D;&#x8FD0;&#x51B3;&#x5B9A;&#x6839;&#x636E;&#x6D53;&#x5EA6;&#x7684;&#x8F6C;&#x5316;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;-&beta; (TGF-&beta;) &#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x8C03;&#x63A7;&#x5728;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x53D1;&#x80B2;&#xFF0C;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x3002;&#x80DE;&#x5185;&#x8C03;&#x63A7; TGF-&beta; &#x901A;&#x8DEF;&#x5728;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x4E86;&#x89E3;&#x751A;&#x5C11;&#x3002;E3 &#x6CDB;&#x7D20;&#x8FDE;&#x63A5;&#x9176;&#x76EE;&#x6807;&#x7279;&#x5B9A;&#x86CB;&#x767D;&#x5E95;&#x7269;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x964D;&#x89E3;&#xFF0C;&#x548C;&#x51E0;&#x4E2A;&#x6240;&#x6D89;&#x53CA;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x8868;&#x660E; Arkadia&#xFF0C;&#x6838;&#x73AF;&#x57DF; E3 &#x6CDB;&#x7D20;&#x8FDE;&#x63A5;&#x9176;&#x662F;&#x5FC5;&#x4E0D;&#x53EF;&#x5C11;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#xFF0C;&#x8282;&#x70B9;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5B50;&#x96C6;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5176;&#x884C;&#x52A8;&#x5728;&#x80DA;&#x80CE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x673A;&#x5236;&#x6CA1;&#x6709;&#x5F97;&#x5230;&#x89E3;&#x51B3;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x627E;&#x5230; Arkadia &#x4FC3;&#x8FDB; Nodal &#x4FE1;&#x53F7;&#x5927;&#x81F4;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#xFF0C;&#x548C;&#x5B83;&#x662F;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x6700;&#x5927;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x547D;&#x8FD0;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6216;&#x7F3A;&#x3002;&#x5728;&#x80DA;&#x80CE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D; Arkadia &#x4E22;&#x5931;&#x9020;&#x6210;&#x6838;&#x79EF;&#x7D2F;&#x7684;&#x78F7; Smad2/3 (P-Smad2/3)&#xFF0C;&#x8282;&#x70B9;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7; &#xFF1B; &#x6548;&#x5E94;&#x5668;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5FC5;&#x987B;&#x88AB;&#x538B;&#x6291;&#x6216; hypoactive &#x4F5C;&#x4E3A;&#x5176;&#x76F4;&#x63A5;&#x76EE;&#x6807;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x662F;&#x51CF;&#x5C11;&#x6216;&#x4E27;&#x5931;&#x3002;&#x5206;&#x5B50;&#x53CA;&#x529F;&#x80FD;&#x5206;&#x6790;&#x663E;&#x793A;&#x4E0E;&#x4EA4;&#x4E92; Arkadia &#x548C; ubiquitinates P-Smad2/3 &#x5BFC;&#x81F4;&#x5176;&#x9000;&#x5316;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E14;&#x8FD9;&#x662F;&#x901A;&#x8FC7;&#x5728;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x57DF;&#xFF0C;&#x52A0;&#x5F3A;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x3002;&#x7B26;&#x5408;&#x8FD9;&#x4E00;&#x53CC;&#x91CD;&#x804C;&#x80FD;&#xFF0C;Arkadia &#x7EAF;&#x5408;&#x7A7A; (-/-) &#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x5F15;&#x5165;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x7D2F;&#x8BA1;&#x548C;&#x727A;&#x7272;&#x5176;&#x4E30;&#x5EA6; hypoactive P-Smad2/3&#x3002;Arkadia-/-&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5C31;&#x50CF; Smad2/&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x80FD;&#x5728;&#x5D4C;&#x5408;&#x4F53;&#xFF0C;&#x786E;&#x8BA4;&#x8FD9;&#x79CD;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x5728;&#x4F53;&#x5185;&#x5F62;&#x6210;&#x524D;&#x5185;&#x810F;&#x53EB;&#x548C; prechordal &#x677F;&#x3002;&#x968F;&#x7740; Arkadia &#x8868;&#x8FBE;&#x6C38;&#x8FDC;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x538B;&#x6291;&#xFF0C;&#x548C;&#x5728;&#x67D0;&#x4E9B;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E2D;&#x53EF;&#x589E;&#x5F3A;&#x4FE1;&#x53F7;&#xFF0C;&#x9000;&#x5316;&#x7684; P-Smad2/3 &#x7531; Arkadia &#x4E0D;&#x80FD;&#x53D1;&#x751F;&#x4E4B;&#x524D;&#x5176;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x4E2D;&#x7684;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;Arkadia &#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x673A;&#x5236;&#x4E0E;&#x76EE;&#x6807;&#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x8026;&#x5408;&#x9000;&#x5316;&#x7684; P-Smad2/3 &#x4FE1;&#x53F7;&#x5C42;&#x53E0;&#x7684;&#x7ED3;&#x675F;&#x65F6;&#x7EC8;&#x6B62;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x673A;&#x5236;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8003;&#x8651;&#x5B9E;&#x73B0;&#x9AD8;&#x6548;&#x7387;&#x548C;&#x6700;&#x5927;&#x7684; Nodal &#x4FE1;&#x53F7;&#x5728;&#x80DA;&#x80CE;&#x53D1;&#x751F;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x548C;&#x5FEB;&#x901F;&#x91CD;&#x7F6E;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x57FA;&#x56E0;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x4F7F;&#x5F97;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x80DE;&#x5916;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x52A8;&#x6001;&#x53D8;&#x5316;&#x4F5C;&#x51FA;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;

Arkadia &#x589E;&#x5F3A;&#x4E86; Nodal/TGF-&beta; &#x4FE1;&#x53F7;&#x7531;&#x8026;&#x5408;&#x78F7;-Smad2/3 &#x6D3B;&#x52A8;&#x53CA;&#x8425;&#x4E1A;&#x989D;&#x3002;

Regulation of transforming growth factor-beta (TGF-beta) signaling is critical in vertebrate development, as several members of the TGF-beta family have been shown to act as morphogens, controlling a variety of cell fate decisions depending on concentration. Little is known about the role of intracellular regulation of the TGF-beta pathway in development. E3 ubiquitin ligases target specific protein substrates for proteasome-mediated degradation, and several are implicated in signaling. We have shown that Arkadia, a nuclear RING-domain E3 ubiquitin ligase, is essential for a subset of Nodal functions in the embryo, but the molecular mechanism of its action in embryonic cells had not been addressed. Here, we find that Arkadia facilitates Nodal signaling broadly in the embryo, and that it is indispensable for cell fates that depend on maximum signaling. Loss of Arkadia in embryonic cells causes nuclear accumulation of phospho-Smad2/3 (P-Smad2/3), the effectors of Nodal signaling; however, these must be repressed or hypoactive as the expression of their direct target genes is reduced or lost. Molecular and functional analysis shows that Arkadia interacts with and ubiquitinates P-Smad2/3 causing their degradation, and that this is via the same domains required for enhancing their activity. Consistent with this dual function, introduction of Arkadia in homozygous null (-/-) embryonic stem cells activates the accumulated and hypoactive P-Smad2/3 at the expense of their abundance. Arkadia-/- cells, like Smad2-/- cells, cannot form foregut and prechordal plate in chimeras, confirming this functional interaction in vivo. As Arkadia overexpression never represses, and in some cells enhances signaling, the degradation of P-Smad2/3 by Arkadia cannot occur prior to their activation in the nucleus. Therefore, Arkadia provides a mechanism for signaling termination at the end of the cascade by coupling degradation of P-Smad2/3 with the activation of target gene transcription. This mechanism can account for achieving efficient and maximum Nodal signaling during embryogenesis and for rapid resetting of target gene promoters allowing cells to respond to dynamic changes in extracellular signals.

Arkadia enhances Nodal/TGF-beta signaling by coupling phospho-Smad2/3 activity and turnover.

R&#xE8;glement du facteur de croissance transformant b&#xEA;ta (TGF-b&#xEA;ta) de signalisation est essentielle au d&#xE9;veloppement des vert&#xE9;br&#xE9;s, ainsi que plusieurs membres de la famille du TGF-b&#xEA;ta a &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;montr&#xE9; que d&#x26;#39;agir comme morphog&#xE8;nes, contr&#xF4;ler une vari&#xE9;t&#xE9; de d&#xE9;cisions du destin cellulaire en fonction de la concentration. On conna&#xEE;t peu le r&#xF4;le de la r&#xE9;glementation intracellulaire de la voie TGF-b&#xEA;ta dans le d&#xE9;veloppement. E3 ubiquitine ligases substrats cibles prot&#xE9;iques sp&#xE9;cifiques pour la d&#xE9;gradation par le prot&#xE9;asome, et plusieurs sont impliqu&#xE9;s dans la signalisation. Nous avons montr&#xE9; que Arkadia, une ligase E3 nucl&#xE9;aire RING-domaine ubiquitine, est essentiel pour un sous-ensemble des fonctions nodales dans l&#x26;#39;embryon, mais le m&#xE9;canisme mol&#xE9;culaire de son action dans les cellules embryonnaires n&#x26;#39;ont pas &#xE9;t&#xE9; abord&#xE9;s. Ici, nous constatons que Arkadia facilite Nodal de signalisation globalement dans l&#x26;#39;embryon, et qu&#x26;#39;il est indispensable pour le destin des cellules qui en d&#xE9;pendent sur la signalisation maximales. Perte de Arkadia dans les cellules embryonnaires provoque une accumulation nucl&#xE9;aire de phospho-Smad2 / 3 (P-Smad2 / 3), les effecteurs de signalisation Nodal, mais ceux-ci doivent &#xEA;tre refoul&#xE9; ou hypoactif comme l&#x26;#39;expression de leurs g&#xE8;nes cibles directs est r&#xE9;duite ou perdue. L&#x26;#39;analyse mol&#xE9;culaire et fonctionnelle indique que Arkadia interagit avec et ubiquitinates P-Smad2 / 3 provoquant leur d&#xE9;gradation, et que c&#x26;#39;est par l&#x26;#39;interm&#xE9;diaire des m&#xEA;mes domaines &#xE0; prendre pour am&#xE9;liorer leur activit&#xE9;. Conform&#xE9;ment &#xE0; cette double fonction, l&#x26;#39;introduction d&#x26;#39;Arkadia dans nulle homozygote (- / -) des cellules souches embryonnaires active le cumul et hypoactif P-Smad2 / 3 au d&#xE9;triment de leur abondance. Arkadia-/ - cellules, telles que Smad2-/ - cellules, ne peuvent pas former la plaque intestin ant&#xE9;rieur et pr&#xE9;chordale dans les chim&#xE8;res, confirmant cette interaction fonctionnelle in vivo. Comme la surexpression Arkadia jamais r&#xE9;prime, et dans certaines cellules am&#xE9;liore la signalisation, la d&#xE9;gradation de la P-Smad2 / 3 par Arkadia ne peut pas se produire avant leur activation dans le noyau. Par cons&#xE9;quent, Arkadia fournit un m&#xE9;canisme de signalisation de terminaison &#xE0; la fin de la cascade de couplage par la d&#xE9;gradation de la P-Smad2 / 3 avec l&#x26;#39;activation de la transcription du g&#xE8;ne cible. Ce m&#xE9;canisme peut expliquer la r&#xE9;alisation efficace et maximale Nodal signalisation cours de l&#x26;#39;embryogen&#xE8;se et &#xE0; une rapide remise &#xE0; z&#xE9;ro des promoteurs de g&#xE8;nes cibles permettant aux cellules de r&#xE9;pondre &#xE0; des changements dynamiques des signaux extracellulaires.

Arkadia Am&#xE9;liore Nodal / TGF-b&#xEA;ta de signalisation par couplage d&#x26;#39;activit&#xE9; Phospho-Smad2 / 3 et Chiffre d&#x26;#39;affaires

Verordnung der Transformation von Wachstumsfaktor-Beta (TGF-Beta) Signalisierung ist in vertebrate Entwicklung kritisch, da mehrere Mitglieder der TGF-Beta-Familie nachweislich als Morphogens, handeln Steuern eine Vielzahl von Zelle Schicksal Entscheidungen je nach Konzentration. Wenig bekannt &uuml;ber die Rolle der intrazellul&auml;ren Verordnung des Biosyntheseweges TGF-Beta in Entwicklung. E3-Ubiquitin-Verkn&uuml;pfung Ziel spezifisches Protein Substrate f&uuml;r Proteasom-vermittelten Abbau und mehrere in Signalisierung verwickelt sind. Wir haben gezeigt, dass Arkadia, eine nukleare RING-Dom&auml;ne E3 Ubiquitin Ligase, wesentlich f&uuml;r eine Teilmenge der Nodal Funktionen im Embryo ist, aber nicht die molekulare Mechanismen ihres Handelns in den embryonalen Zellen gerichtet worden hatte. Hier finden wir, dass Arkadia Nodal signalisieren weitgehend in den Embryo erleichtert und es ist unentbehrlich f&uuml;r Zelle Schicksale, die maximale Signalisierung abh&auml;ngen. Arkadia in embryonalen Zellen entstehen nuklearen Anreicherung von Phospho-Smad2/3 (P-Smad2/3), die Effektoren Nodal signalisieren; Dennoch m&uuml;ssen diese verschwiegen werden oder Hypoactive als Ausdruck ihrer direkten Zielgene verringert wird oder verloren. Molekulare und funktionelle Analyse zeigt, dass Arkadia interagiert mit Ubiquitinates P-Smad2/3 verursacht, deren Abbau, und dass dies erfolgt &uuml;ber den gleichen Dom&auml;nen erforderlich zur Verbesserung ihrer T&auml;tigkeit. Einf&uuml;hrung von Arkadia in homozygot null (- / -) embryonalen Stammzellen in &Uuml;bereinstimmung mit dieser Doppelfunktion, aktiviert die kumulierten und Hypoactive P-Smad2/3 zu Lasten ihrer F&uuml;lle. Arkadia-/-Zellen, wie Smad2-/-Zellen, k&ouml;nnen nicht in Chim&auml;ren, Vorderdarm und prechordal Platte bilden best&auml;tigen diese funktionelle Interaktion in-vivo. Arkadia &Uuml;berexpression nie unterdr&uuml;ckt, und in einigen Zellen verbessert die Signalisierung, kann nicht der Abbau von P-Smad2/3 von Arkadia vor ihrer Aktivierung im Zellkern auftreten. Arkadia bietet daher einen Mechanismus f&uuml;r die Signalisierung der K&uuml;ndigung am Ende der Kaskade durch die Kopplung von Verschlechterung der P-Smad2/3 mit der Aktivierung der Ziel-gen-Transkription. Dieser Mechanismus kann f&uuml;r eine effiziente und maximale Nodal Signalisierung w&auml;hrend der Embryogenese und zum schnellen Zur&uuml;cksetzen von deiner gen-Promotoren Zellen erm&ouml;glicht auf dynamische Ver&auml;nderungen in extrazellul&auml;re Signale entfallen.

Arkadia verbessert Nodal/TGF-Beta Signalisierung durch Kopplung von Phospho-Smad2/3 Aktivit&auml;t und Umsatz.

Regolamento della trasformazione di segnalazione growth factor-beta (TGF-beta) &egrave; fondamentale nello sviluppo di vertebrati, come molti membri della famiglia TGF-beta hanno dimostrati di agire come morfogeni, controllando una serie di decisioni di destino delle cellule a seconda della concentrazione. Poco si sa circa il ruolo del regolamento intracellulare del percorso TGF-beta in sviluppo. E3 ubiquitina ligasi target substrati di proteine specifiche per la degradazione del proteasoma-mediata, e molti sono implicati nella segnalazione. Abbiamo dimostrato che Arkadia, un&#39;anello-dominio E3 ubiquitina ligasi nucleare, &egrave; essenziale per un sottoinsieme di funzioni nodali nell&#39;embrione, ma il meccanismo molecolare della sua azione in cellule embrionali non era stato affrontato. Qui, troviamo che Arkadia facilita Nodal segnalazione largamente nell&#39;embrione, e che &egrave; indispensabile per i destini delle cellule che dipendono dal massimo di segnalazione. Perdita di Arkadia in cellule embrionali provoca accumulo nucleare di fosfo-Smad2/3 (P-Smad2/3), gli effettori della segnalazione nodali; Tuttavia, queste devono essere repressi o ipoattivo come l&#39;espressione dei loro geni bersaglio diretto &egrave; ridotto o perso. Analisi molecolare e funzionale dimostra che Arkadia interagisce con e ubiquitinates P-Smad2/3 causando loro degradazione e che questo &egrave; tramite i domini stessi necessari per migliorare la loro attivit&agrave;. Coerente con questa duplice funzione, introduzione di Arkadia in omozigoti null (- / -) embryonic stem cells attiva l&#39;accumulati e ipoattivo P-Smad2/3 a scapito della loro abbondanza. Arkadia-/-cellule, come Smad2/celle, non forma apparentemente e piastra prechordal in chimere, confermando questa interazione funzionale in vivo. Come mai Arkadia sovraespressione reprime e in alcune cellule migliora la segnalazione, la degradazione della P-Smad2/3 da Arkadia non pu&ograve; verificarsi prima della loro attivazione nel nucleo. Pertanto, Arkadia fornisce un meccanismo di terminazione alla fine della cascata di segnalazione di degradazione del P-Smad2/3 di accoppiamento con l&#39;attivazione della trascrizione del gene bersaglio. Questo meccanismo pu&ograve; spiegare per conseguire efficienza e massimo Nodal segnalazione durante l&#39;embriogenesi e per il ripristino rapido dei promotori di gene bersaglio permettendo che le cellule di rispondere ai cambiamenti dinamici di segnali extracellulari.

Arkadia migliora Nodal/TGF-beta segnalazione di accoppiamento fosfo-Smad2/3 attivit&agrave; e fatturato.

TGF-&#x3B2;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306B;&#x5FDC;&#x3058;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x904B;&#x547D;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x306E;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x5236;&#x5FA1;&#x3001;&#x30E2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A9;&#x30B2;&#x30F3;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;-&#x3B2;&#xFF08;TGF-&#x3B2;&#xFF09;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x3092;&#x5909;&#x63DB;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306F;&#x3001;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x767A;&#x751F;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x30EA;&#x30C8;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x958B;&#x767A;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;TGF-&#x3B2;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5206;&#x89E3;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;E3&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x30EA;&#x30AC;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x6A19;&#x7684;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x306A;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x57FA;&#x8CEA;&#x306F;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x3001;&#x6838;RING&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;E3&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x30EA;&#x30AC;&#x30FC;&#x30BC;&#x306F;&#x3001;&#x80DA;&#x306E;&#x7D50;&#x7BC0;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x80DA;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x305D;&#x306E;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x6A5F;&#x69CB;&#x304C;&#x5BFE;&#x51E6;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x306F;&#x3001;&#x7BC0;&#x70B9;&#x304C;&#x80DA;&#x306B;&#x5E83;&#x304F;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x305D;&#x308C;&#x304C;&#x6700;&#x5927;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x904B;&#x547D;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x80DA;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x306F;&#x3001;Nodal&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x306E;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x3001;&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;-SMAD2 / 3&#x306E;&#x6838;&#x5185;&#x84C4;&#x7A4D;&#xFF08;P-SMAD2 / 3&#xFF09;&#x304C;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x306E;&#x6A19;&#x7684;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x304C;&#x6E1B;&#x5C11;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5931;&#x308F;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306F;&#x6291;&#x5727;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x6E1B;&#x5F31;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x89E3;&#x6790;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x306F;&#x3068;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5206;&#x89E3;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;P-SMAD2 / 3&#x3092;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x5316;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x304C;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3092;&#x5F37;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x540C;&#x4E00;&#x306E;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x4E8C;&#x91CD;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x5099;&#x3048;&#x305F;&#x3001;&#x4E00;&#x8CAB;&#x6027;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x30DB;&#x30E2;&#x63A5;&#x5408;&#x30CC;&#x30EB;&#x3067;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x306E;&#x5C0E;&#x5165;&#xFF08; -  /  - &#xFF09;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x8C4A;&#x304B;&#x3055;&#x3092;&#x72A0;&#x7272;&#x306B;&#x3057;&#x3066;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3057;&#x3001;&#x6E1B;&#x5F31;P-SMAD2 / 3&#x3092;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2; -  /  -  SMAD2-/&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE; - &#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x3001;&#x30AD;&#x30E1;&#x30E9;&#x306B;&#x524D;&#x8178;&#x3068;&#x810A;&#x7D22;&#x524D;&#x677F;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x6291;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x305A;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x3067;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x5F37;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x306B;&#x3088;&#x308B;P-SMAD2 / 3&#x306E;&#x5206;&#x89E3;&#x306F;&#x3001;&#x6838;&#x5185;&#x3067;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x5148;&#x7ACB;&#x3063;&#x3066;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x306F;&#x3001;&#x6A19;&#x7684;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3068;P-SMAD2 / 3&#x306E;&#x52A3;&#x5316;&#x3092;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x30AB;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30C9;&#x306E;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x7D42;&#x4E86;&#x3092;&#x5408;&#x56F3;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x306E;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30C3;&#x30AF;&#x306A;&#x5909;&#x5316;&#x306B;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x3001;&#x6A19;&#x7684;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x30EA;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x80DA;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x304B;&#x3064;&#x6700;&#x5927;&#x306E;Nodal&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x3092;&#x9054;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x304B;&#x3064;&#x8FC5;&#x901F;&#x306B;&#x8003;&#x616E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x306F;&#x3001;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;SMAD&#x200B;&#x200B;2 / 3&#x6D3B;&#x52D5;&#x3068;&#x58F2;&#x4E0A;&#x9AD8;&#x3092;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x7BC0;&#x70B9;/ TGF-&#x3B2;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x3092;&#x5F37;&#x5316;

&#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790;-&#xBCA0;&#xD0C0; (TGF-&#xBCA0;&#xD0C0;) &#xC2E0;&#xD638; &#xBCC0;&#xD658;&#xC758; &#xADDC;&#xCE59;&#xC740; &#xC911;&#xC694; &#xCC99;&#xCD94; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; TGF-&#xBCA0;&#xD0C0; &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; morphogens, &#xB18D;&#xB3C4; &#xB530;&#xB77C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC6B4;&#xBA85; &#xACB0;&#xC815;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC81C;&#xC5B4;. &#xC791;&#xC740; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0;&#xC11C; TGF-&#xBCA0;&#xD0C0; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xADDC;&#xC81C;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xB2E4;. E3 &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4; ligases &#xB300;&#xC0C1; &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880; &#xC911;&#xC7AC; &#xC800;&#xD558;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD2B9;&#xC815; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAE30;&#xD310; &#xBC0F; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; Arkadia, &#xD575; &#xBC18;&#xC9C0; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; E3 &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4; &#xB9AC;&#xAC00; &#xD0DC;&#xC544;, &#xAFB8;&#xBC85;&#xAFB8;&#xBC85; &#xC878; &#xAE30; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC758; &#xD558;&#xC704; &#xC9D1;&#xD569;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC218;&#xC801; &#xC774;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xBC30;&#xC544; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xADF8; &#xD589;&#xB3D9;&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xD574;&#xACB0; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0;&#xC11C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xCC3E;&#xC744; Arkadia Nodal &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C;&#xB294; &#xBC30;&#xC544;&#xC5D0; &#xC2E0;&#xD638;&#xC744; &#xC6A9;&#xC774; &#xD558; &#xAC8C; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xCD5C;&#xB300; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xC758;&#xC874; &#xD558;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC; &#xC6B4;&#xBA85;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC218;. Arkadia &#xBC30;&#xC544; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4;&#xB85C; &#xC778;&#xD574; &#xC778;-Smad2/3 (P-Smad2/3) &#xAFB8;&#xBC85;&#xAFB8;&#xBC85; &#xC878; &#xAE30; &#xC2E0;&#xD638;;&#xC758; &#xC774;&#xD399;&#xD130;&#xC758; &#xD575; &#xCD95;&#xC801; &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC774;&#xAC83;&#xC744; &#xC5B5;&#xC555; &#xD574;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC9C1;&#xC811;&#xC801;&#xC778; &#xB300;&#xC0C1; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD45C;&#xD604;&#xC73C;&#xB85C; hypoactive &#xAC10;&#xC18C; &#xB610;&#xB294; &#xC190;&#xC2E4; &#xB610;&#xB294;. &#xBD84;&#xC790; &#xBC0F; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC131; &#xBD84;&#xC11D;&#xC774; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4; Arkadia &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; ubiquitinates P-Smad2/3 &#xC6D0;&#xC778;&#xC774; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC800;&#xD558; &#xBC0F;&#xC774; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xAC15;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xAC19;&#xC740; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC774; &#xB4C0;&#xC5BC; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC73C;&#xB85C; &#xC77C;&#xAD00; &#xB41C;, homozygous null (/-) &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; Arkadia&#xC758; &#xB3C4;&#xC785; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xCD95;&#xC801; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xD48D;&#xC694;&#xB85C; &#xC6C0;&#xC758; &#xBE44;&#xC6A9; hypoactive P-Smad2/3. Arkadia-/-&#xC138;&#xD3EC;, Smad2/&#xC140;, &#xAC19;&#xC740; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD615;&#xC131; foregut &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; prechordal &#xD50C;&#xB808;&#xC774;&#xD2B8; chimeras&#xC5D0;&#xC11C; in vivo &#xAE30;&#xB2A5;&#xC774; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xD655;&#xC778;. Arkadia overexpression &#xACB0;&#xCF54; &#xB204;&#xB974;&#xB294;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC77C;&#xBD80; &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xD5A5;&#xC0C1;, &#xD575;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC815;&#xD488; &#xC778;&#xC99D; &#xC804;&#xC5D0; P-Smad2/3 Arkadia &#xC800;&#xD558; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; Arkadia &#xB300;&#xC0C1; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC804;&#xC0AC;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC640; P-Smad2/3&#xC758; &#xC800;&#xD558; &#xC5EC; &#xD3ED;&#xD3EC;&#xC758; &#xB05D;&#xC5D0; &#xC885;&#xB8CC; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC740; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; &#xCD5C;&#xB300; Nodal embryogenesis &#xB3D9;&#xC548; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xB2EC;&#xC131; &#xD558; &#xACE0; &#xB300;&#xC0C1; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD504;&#xB85C;&#xBAA8;&#xD130; &#xC140; &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xB3D9;&#xC801; &#xBCC0;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300;&#xC751;&#xC758; &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xAC8C; &#xC7AC;&#xC124;&#xC815; &#xC124;&#xBA85;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Arkadia Nodal/TGF-&#xBCA0;&#xD0C0; &#xC2E0;&#xD638; &#xC5EC; &#xC778;-Smad2/3 &#xD65C;&#xB3D9; &#xBC0F; &#xD68C;&#xC804;&#xC728;&#xC744; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xC2DC;&#xD0B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La regulaci&#xF3;n de factor de crecimiento transformante-beta (TGF-beta) de se&#xF1;alizaci&#xF3;n es cr&#xED;tico en el desarrollo de vertebrados, como varios miembros de la familia TGF-beta se ha demostrado que act&#xFA;an como morf&#xF3;genos, controlando una variedad de decisiones destino celular dependiendo de la concentraci&#xF3;n. Poco se sabe sobre el papel de la regulaci&#xF3;n intracelular de la v&#xED;a de TGF-beta en el desarrollo. E3 ubiquitina sustratos objetivo ligasas de prote&#xED;nas espec&#xED;ficas para proteasoma mediada por la degradaci&#xF3;n, y varios est&#xE1;n implicados en la se&#xF1;alizaci&#xF3;n. Hemos demostrado que Arkadia, una central nuclear ANILLO-dominio ubiquitina ligasa E3, es esencial para un subconjunto de las funciones nodales en el embri&#xF3;n, pero el mecanismo molecular de su acci&#xF3;n en las c&#xE9;lulas embrionarias no se hab&#xED;a abordado. Aqu&#xED;, nos encontramos con que Arkadia facilita nodal de se&#xF1;alizaci&#xF3;n en l&#xED;neas generales en el embri&#xF3;n, y que es indispensable para destinos celulares que dependen de la se&#xF1;alizaci&#xF3;n de m&#xE1;ximos. La p&#xE9;rdida de la Arcadia en las c&#xE9;lulas embrionarias provoca la acumulaci&#xF3;n nuclear de fosfato Smad2 / 3 (P-Smad2 / 3), los efectores de se&#xF1;alizaci&#xF3;n nodal, sin embargo, &#xE9;stas deben ser reprimidos o hipoactivo como la expresi&#xF3;n de sus genes diana directa se reduce o se pierde. El an&#xE1;lisis molecular y funcional muestra que interact&#xFA;a con Arkadia y ubiquitinates P-Smad2 / 3 causando su degradaci&#xF3;n, y que esto es a trav&#xE9;s de los mismos dominios necesarios para mejorar su actividad. De acuerdo con esta doble funci&#xF3;n, la introducci&#xF3;n de Arkadia en nulo homocigoto (- / -) las c&#xE9;lulas madre embrionarias se activa el acumulado y hipoactivo P-3 Smad2 / a expensas de su abundancia. Arkadia-/ - las c&#xE9;lulas, como Smad2 / - las c&#xE9;lulas, no pueden formar placas en el intestino anterior y precordal quimeras, lo que confirma esta interacci&#xF3;n funcional in vivo. Como nunca sobreexpresi&#xF3;n Arkadia reprime, y en algunas c&#xE9;lulas mejora de se&#xF1;alizaci&#xF3;n, de la degradaci&#xF3;n de la P-Smad2 / 3 por Arkadia no puede ocurrir antes de su activaci&#xF3;n en el n&#xFA;cleo. Por lo tanto, Arkadia proporciona un mecanismo para la se&#xF1;alizaci&#xF3;n de terminaci&#xF3;n en el extremo de la cascada por acoplamiento de la degradaci&#xF3;n de la P-Smad2 / 3 con la activaci&#xF3;n de la transcripci&#xF3;n del gen diana. Este mecanismo puede explicar el logro eficiente y m&#xE1;xima nodal de se&#xF1;alizaci&#xF3;n durante la embriog&#xE9;nesis y la r&#xE1;pida reposici&#xF3;n de los promotores de genes diana que permiten a las c&#xE9;lulas responder a los cambios din&#xE1;micos en las se&#xF1;ales extracelulares.

Arkadia Mejora Nodal / se&#xF1;alizaci&#xF3;n de TGF-beta mediante el acoplamiento de la actividad Phospho-Smad2 / 3 y el volumen de negocios

Trasformando growth factor-beta (TGF-beta) &egrave; controllato da una variet&agrave; di regolatori che bersaglio o recettori segnalazione o attivato Smad complessi di segnalazione. Tra i regolatori negativi, Smad7 antagonizza TGF-beta segnalazione principalmente attraverso il targeting per il segnalazione dei recettori, mentre c-sci e SnoN reprimere segnalazione a livello trascrizionale attraverso l&#39;inattivazione di Smad complessi. Abbiamo trovato in precedenza che Arkadia &egrave; un regolatore positivo di segnalazione di TGF-beta che induce la degradazione ubiquitina-dipendente di Smad7 attraverso il dominio C-terminale anello. Segnaliamo qui che Arkadia induce la degradazione di SnoN e c-sci oltre Smad7. Arkadia interagisce con SnoN e c-Ski nelle loro forme libere cos&igrave; come le forme associate a proteine Smad e gi&ugrave;-regola costitutivamente i livelli della loro espressione. Arkadia cos&igrave; sembra migliorare efficacemente la TGF-beta segnalazione attraverso la down-regulation simultanea di due tipi distinti di regolatori negativi, Smad7 e SnoN/c-sci e pu&ograve; giocare un ruolo importante nel determinare l&#39;intensit&agrave; della famiglia TGF-beta segnalazione nelle cellule bersaglio.

Arkadia induce la degradazione di SnoN e c-sci per migliorare transforming growth factor-beta segnalazione.

&#x8F6C;&#x5316;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50; &beta; (TGF-&beta;) &#x4FE1;&#x53F7;&#x7531;&#x5404;&#x79CD;&#x5404;&#x6837;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x6216;&#x8005;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#x6216;&#x6FC0;&#x6D3B; Smad &#x914D;&#x5408;&#x76D1;&#x7BA1;&#x90E8;&#x95E8;&#x63A7;&#x5236;&#x3002;&#x6D88;&#x6781;&#x7684;&#x76D1;&#x7BA1;&#x673A;&#x6784;&#xFF0C;Smad7 &#x62EE;&#x6297; TGF-&beta; &#x4FE1;&#x53F7;&#x4E3B;&#x8981;&#x901A;&#x8FC7;&#x9488;&#x5BF9;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#xFF0C;&#x800C; SnoN &#x548C; c &#x6ED1;&#x96EA;&#x538B;&#x5236;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5F55;&#x4E00;&#x7EA7;&#x901A;&#x8FC7; Smad &#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x706D;&#x6D3B;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0; Arkadia &#x662F;&#x8BF1;&#x4F7F; Smad7 &#x901A;&#x8FC7;&#x5176; C &#x672B;&#x7AEF;&#x73AF;&#x57DF;&#x7684;&#x6CDB;&#x7D20;&#x4F9D;&#x8D56;&#x9000;&#x5316;&#x7684; TGF-&beta; &#x4FE1;&#x53F7;&#x79EF;&#x6781;&#x76D1;&#x7BA1;&#x673A;&#x6784;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x62A5;&#x544A; Arkadia &#x8BF1;&#x5BFC; SnoN &#x548C; c &#x6ED1;&#x96EA;&#x9664;&#x4E86; Smad7 &#x7684;&#x9000;&#x5316;&#x3002;Arkadia &#x4E0E; SnoN &#x548C; c &#x6ED1;&#x96EA;&#x5728;&#x5176;&#x81EA;&#x7531;&#x7A97;&#x4F53;&#x4EE5;&#x53CA;&#x7A97;&#x4F53;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; Smad &#x86CB;&#x767D;&#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E00;&#x5411;&#x4E0B;&#x8C03;&#x8282;&#x5176;&#x8868;&#x8FBE;&#x6C34;&#x5E73;&#x3002;Arkadia &#x56E0;&#x6B64;&#x4E3A;&#x4E86;&#x6709;&#x6548;&#x5730;&#x63D0;&#x9AD8; TGF-&beta; &#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8FC7;&#x540C;&#x6B65;&#x5411;&#x4E0B;&#x8C03;&#x8282;&#x7684;&#x4E24;&#x79CD;&#x622A;&#x7136;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684; Smad7 &#x53CA; SnoN/c-&#x6ED1;&#x96EA;&#xFF0C;&#x8D1F;&#x76D1;&#x7BA1;&#x673A;&#x6784;&#x5C06;&#x51FA;&#x73B0;&#xFF0C;&#x5E76;&#x53EF;&#x80FD;&#x53D1;&#x6325;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x5728;&#x786E;&#x5B9A; TGF-&beta; &#x5BB6;&#x65CF;&#x5728;&#x9776;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x5F3A;&#x5EA6;&#x3002;

Arkadia &#x8BF1;&#x5BFC; SnoN &#x548C; c &#x6ED1;&#x96EA;&#x63D0;&#x9AD8;&#x8F6C;&#x5316;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;-&beta; &#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x7684;&#x9000;&#x5316;&#x3002;

Transforming growth factor-beta (TGF-beta) signaling is controlled by a variety of regulators that target either signaling receptors or activated Smad complexes. Among the negative regulators, Smad7 antagonizes TGF-beta signaling mainly through targeting the signaling receptors, whereas SnoN and c-Ski repress signaling at the transcriptional level through inactivation of Smad complexes. We previously found that Arkadia is a positive regulator of TGF-beta signaling that induces ubiquitin-dependent degradation of Smad7 through its C-terminal RING domain. We report here that Arkadia induces degradation of SnoN and c-Ski in addition to Smad7. Arkadia interacts with SnoN and c-Ski in their free forms as well as in the forms bound to Smad proteins, and constitutively down-regulates levels of their expression. Arkadia thus appears to effectively enhance TGF-beta signaling through simultaneous down-regulation of two distinct types of negative regulators, Smad7 and SnoN/c-Ski, and may play an important role in determining the intensity of TGF-beta family signaling in target cells.

Arkadia induces degradation of SnoN and c-Ski to enhance transforming growth factor-beta signaling.

Facteur de croissance transformant b&#xEA;ta (TGF-b&#xEA;ta) de signalisation est contr&#xF4;l&#xE9;e par une vari&#xE9;t&#xE9; de r&#xE9;gulateurs qui ciblent les r&#xE9;cepteurs de signalisation soit activ&#xE9; ou complexes Smad. Parmi les r&#xE9;gulateurs n&#xE9;gatifs, Smad7 antagonise de signalisation TGF-b&#xEA;ta principalement par le biais de ciblage des r&#xE9;cepteurs de signalisation, tandis que SnoN et c-Ski de r&#xE9;primer de signalisation au niveau transcriptionnel par l&#x26;#39;inactivation des complexes Smad. Nous avons d&#xE9;j&#xE0; constat&#xE9; que Arkadia est un r&#xE9;gulateur positif de la signalisation TGF-beta qui induit la d&#xE9;gradation de l&#x26;#39;ubiquitine-d&#xE9;pendante de Smad7 par son domaine C-terminal RING. Nous rapportons ici que Arkadia induit la d&#xE9;gradation de la SnoN et c-ski dans plus de Smad7. Arkadia interagit avec SnoN et c-ski dans leurs formes libres ainsi que dans les formes li&#xE9;s &#xE0; des prot&#xE9;ines Smad, et diminue la r&#xE9;gulation de mani&#xE8;re constitutive niveaux de leur expression. Arkadia semble donc am&#xE9;liorer efficacement le TGF-b&#xEA;ta de signalisation gr&#xE2;ce &#xE0; une r&#xE9;gulation simultan&#xE9;e de deux types distincts de r&#xE9;gulateurs n&#xE9;gatifs, les Smad7 et SnoN / c-ski, et peut jouer un r&#xF4;le important dans la d&#xE9;termination de l&#x26;#39;intensit&#xE9; de TGF-b&#xEA;ta de la famille de signalisation dans les cellules cibles .

Arkadia entra&#xEE;ne la d&#xE9;gradation des SnoN et C-Ski pour am&#xE9;liorer Transforming Growth Factor-beta de signalisation

Transforming Growth-Faktor-Beta (TGF-Beta) Signalisierung durch eine Vielzahl von Regulierungsbeh&ouml;rden kontrolliert wird, die entweder Signalling Rezeptoren als Ziel oder aktiviert Smad-komplexe. Unter den negativen Regulatoren, Smad7 antagonizes TGF-Beta Signalisierung vor allem durch die Ausrichtung auf die Signalisierung Rezeptoren, wohingegen SnoN und c-Ski unterdr&uuml;cken Signalisierung auf transkriptionelle Ebene durch Inaktivierung der Smad-komplexe. Vorher finden wir, dass Arkadia ist ein positiver Regulator TGF-Beta zu signalisieren, der Ubiquitin-abh&auml;ngige Abbau des Smad7 durch seinen RING der C-terminalen Dom&auml;ne bedingt. Wir berichten hier, dass Arkadia Abbau SnoN und c-Ski neben Smad7 induziert. Arkadia interagiert mit SnoN und c-Ski in ihrer freien Formen ebenso wie in den Formen, die Smad-Proteine gebunden und konstitutiv Down-reguliert Ebenen ihren Ausdruck. Arkadia so scheint effektiv erh&ouml;hen TGF-Beta Signalisierung durch gleichzeitige Herunterregulation zwei verschiedene Arten von negativen Regulatoren, Smad7 und SnoN/c-Ski, und kann eine wichtige Rolle bei der Bestimmung der Intensit&auml;t der TGF-Beta-Familie signalisieren in den Zielzellen.

Arkadia induziert Verschlechterung der SnoN und c-Ski transformierende Wachstumsfaktor-Beta-Signalisierung zu erh&ouml;hen.

&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;-&#x3B2;&#xFF08;TGF-&#x3B2;&#xFF09;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306F;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x307E;&#x305F;&#x306F;Smad&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x3069;&#x3061;&#x3089;&#x304B;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x898F;&#x5236;&#x5F53;&#x5C40;&#x306E;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x5236;&#x5FA1;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8CA0;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x3046;&#x3061;&#x3001;Smad7&#x304C;&#x3001;&#x4E3B;&#x306B;SnoN&#x304A;&#x3088;&#x3073;c-&#x30B9;&#x30AD;&#x30FC;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;Smad&#x306E;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x8EE2;&#x5199;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x6A19;&#x7684;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;TGF-&#x3B2;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306B;&#x62EE;&#x6297;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x4EE5;&#x524D;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;C&#x672B;&#x7AEF;&#x306E;RING&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;Smad7&#x306E;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x5206;&#x89E3;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;TGF-&#x3B2;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x6B63;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x306F;Smad7&#x304C;&#x307B;&#x304B;&#x306B;SnoN&#x304A;&#x3088;&#x3073;c-&#x30B9;&#x30AD;&#x30FC;&#x306E;&#x5206;&#x89E3;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x3053;&#x3053;&#x306B;&#x5831;&#x544A;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x81EA;&#x7531;&#x306A;&#x5F62;&#x3067;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;Smad&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x305F;&#x5F62;&#x3067;SnoN&#x304A;&#x3088;&#x3073;c-&#x30B9;&#x30AD;&#x30FC;&#x3068;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3057;&#x3001;&#x6052;&#x5E38;&#x7684;&#x306B;&#x305D;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3002;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306B;&#x8CA0;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;2&#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x3001;Smad7&#x304C;&#x3068;SnoN / C&#x30B9;&#x30AD;&#x30FC;&#x306E;&#x540C;&#x6642;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;TGF-&#x3B2;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x3092;&#x5F37;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x6A19;&#x7684;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;TGF-&#x3B2;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x5F37;&#x5EA6;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x4E0A;&#x3067;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x306F;&#x3001;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;-&#x3B2;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x3092;&#x5F37;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;SnoN&#x3068;C-&#x30B9;&#x30AD;&#x30FC;&#x306E;&#x5206;&#x89E3;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;

&#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790;-&#xBCA0;&#xD0C0; (TGF-&#xBCA0;&#xD0C0;) &#xC2E0;&#xD638; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC911; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xD558;&#xAC70;&#xB098; Smad &#xB2E8;&#xC9C0;&#xB97C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC81C;&#xC5B4; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xBCC0;&#xD615; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB124;&#xAC70;&#xD2F0;&#xBE0C; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130; &#xC911; Smad7 &#xBC18;&#xAC10; TGF-&#xBCA0;&#xD0C0; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xD0C0;&#xAC9F;&#xD305;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC8FC;&#xB85C; &#xC2E0;&#xD638; SnoN &#xBC0F; c &#xC2A4;&#xD0A4; &#xCC38;&#xB2E4; Smad &#xBCF5;&#xD569;&#xBB3C;&#xC758; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; transcriptional &#xC218;&#xC900; &#xC2E0;&#xD638; &#xBC18;&#xBA74;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xBC1C;&#xACAC; Arkadia&#xC758; C-&#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xB9C1; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; Smad7 &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4; &#xC885;&#xC18D; &#xC800;&#xD558;&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xB294; TGF-&#xBCA0;&#xD0C0; &#xC2DC;&#xADF8;&#xB110;&#xB9C1;&#xC758; &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xADDC;&#xC81C;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCF4;&#xACE0; &#xC5EC;&#xAE30; Arkadia SnoN &#xBC0F; Smad7 &#xC678;&#xC5D0; c-&#xC2A4;&#xD0A4;&#xC758; &#xC800;&#xD558;&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Arkadia SnoN &#xBC0F; c-&#xC2A4;&#xD0A4;&#xB294; &#xC790;&#xC720; &#xC591;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; Smad &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C; &#xD3FC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558; &#xACE0; &#xB2E4;&#xC6B4; constitutively &#xC870;&#xC808; &#xADF8;&#xB4E4; &#xC2DD;&#xC758; &#xC218;&#xC900;. Arkadia &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; TGF-&#xBCA0;&#xD0C0; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;, Smad7 &#xBC0F; SnoN/c &#xC2A4;&#xD0A4;&#xC758; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC885;&#xB958;&#xC758; &#xB3D9;&#xC2DC; &#xB2E4;&#xC6B4; &#xADDC;&#xC81C;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xC2DC;&#xD0A4;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xB098;&#xD0C0;&#xB098;&#xACE0; TGF-&#xBCA0;&#xD0C0; &#xAC00;&#xC871; &#xB300;&#xC0C1; &#xC140;&#xC5D0; &#xC2E0;&#xD638; &#xAC15;&#xB3C4; &#xACB0;&#xC815; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Arkadia &#xBCC0;&#xD615; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790;-&#xBCA0;&#xD0C0; &#xC2E0;&#xD638; &#xD5A5;&#xC0C1; SnoN c &#xC2A4;&#xD0A4;&#xC758; &#xC800;&#xD558;&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4; &#xD55C;&#xB2E4;.

Factor de crecimiento transformante beta (TGF-beta) de se&#xF1;alizaci&#xF3;n es controlado por una variedad de reguladores que se dirigen a cualquiera de se&#xF1;alizaci&#xF3;n receptores o activado complejos Smad. Entre los reguladores negativos, Smad7 antagoniza la se&#xF1;alizaci&#xF3;n de TGF-beta dirigida principalmente a trav&#xE9;s de los receptores de se&#xF1;alizaci&#xF3;n, mientras que SnoN y reprimir c-Ski de se&#xF1;alizaci&#xF3;n a nivel transcripcional a trav&#xE9;s de la inactivaci&#xF3;n de los complejos Smad. Hemos determinado anteriormente que Arkadia es un regulador positivo de la se&#xF1;alizaci&#xF3;n de TGF-beta que induce la ubiquitina-dependiente de la degradaci&#xF3;n de Smad7 a trav&#xE9;s de su dominio RING C-terminal. Presentamos aqu&#xED; que Arkadia induce la degradaci&#xF3;n de SnoN y C de esqu&#xED;, adem&#xE1;s de Smad7. Arkadia interact&#xFA;a con SnoN y C de esqu&#xED; en sus formas libres, as&#xED; como en las formas unidas a prote&#xED;nas Smad, y constitutivamente regula a la baja los niveles de su expresi&#xF3;n. Arkadia lo tanto, parece mejorar la eficacia de la se&#xF1;alizaci&#xF3;n de TGF-beta a trav&#xE9;s de regulaci&#xF3;n a la baja simult&#xE1;nea de dos tipos diferentes de reguladores negativos, Smad7 y SnoN / c-Ski, y puede desempe&#xF1;ar un papel importante en la determinaci&#xF3;n de la intensidad de la familia TGF-beta en las c&#xE9;lulas diana de se&#xF1;alizaci&#xF3;n .

Arkadia induce la degradaci&#xF3;n de la SnoN y C de esqu&#xED; para mejorar factor de crecimiento transformante-beta de se&#xF1;alizaci&#xF3;n

E3 ubiquitine ligases jouent un r&#xF4;le important dans la r&#xE9;gulation du facteur de croissance transformant b&#xEA;ta (TGF-beta) / Smad signalisation. Projection d&#x26;#39;un ligase E3 ubiquitine petite biblioth&#xE8;que interf&#xE9;rer ARN, &#xE0; l&#x26;#39;aide de TGF-b&#xEA;ta &#xE0; induction d&#x26;#39;un journaliste Smad3/Smad4-dependent lucif&#xE9;rase comme une lecture, a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; que Arkadia est un ubiquitine ligase E3 qui est absolument n&#xE9;cessaire pour cette r&#xE9;ponse TGF-b&#xEA;ta. Knockdown d&#x26;#39;Arcadie ou la surexpression d&#x26;#39;un mutant dominant n&#xE9;gatif abolit compl&#xE8;tement la transcription &#xE0; partir des reporters Smad3/Smad4-dependent, mais pas de journalistes ou de journalistes Smad1/Smad4-dependent entra&#xEE;n&#xE9;s par Smad2/Smad4/FoxH1 complexes. Nous montrons que Arkadia active sp&#xE9;cifiquement la transcription par l&#x26;#39;interm&#xE9;diaire des sites de liaison Smad3/Smad4 en induisant la d&#xE9;gradation de l&#x26;#39;SnoN r&#xE9;presseur transcriptionnel. Arkadia est essentielle pour la d&#xE9;gradation SnoN TGF-b&#xEA;ta-induite, mais il a peu d&#x26;#39;effet sur les niveaux de SnoN en l&#x26;#39;absence de signal. Arkadia interagit avec SnoN et induit son ubiquitinylation ind&#xE9;pendamment de TGF-beta/Activin signalisation, mais SnoN est efficacement d&#xE9;grad&#xE9;e que si elle forme un complexe avec deux Arkadia et phosphoryl&#xE9;e Smad2 ou Smad3. Enfin, nous d&#xE9;crivons une ligne de cellules cancer de l&#x26;#39;&#x153;sophage (SEG-1) que nous montrons a perdu l&#x26;#39;expression Arkadia et est d&#xE9;ficient pour la d&#xE9;gradation SnoN. R&#xE9;introduction de type sauvage Arkadia restaure TGF-b&#xEA;ta-transcription induite par Smad3/Smad4-dependent et la d&#xE9;gradation SnoN dans ces cellules, ce qui soul&#xE8;ve la possibilit&#xE9; que la perte de la fonction Arkadia peut &#xEA;tre pertinente dans le cancer.

Arkadia active la transcription Smad3/Smad4-dependent par signal de d&#xE9;clenchement induit par la d&#xE9;gradation des SnoN

E3 &#x6CDB;&#x7D20;&#x8FDE;&#x63A5;&#x9176;&#x53D1;&#x6325;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5728;&#x8C03;&#x8282;&#x8F6C;&#x5316;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50; &beta; (TGF-&beta;) / Smad &#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;&#x7B5B;&#x9009;&#x7684; E3 &#x6CDB;&#x7D20;&#x8FDE;&#x63A5;&#x9176;&#x5C0F;&#x5206;&#x5B50;&#x5E72;&#x6270; RNA &#x5E93;&#x3001; &#x8BFB;&#x51FA;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4F7F;&#x7528; TGF-&beta; &#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E; Smad4 &#x7684; Smad3 &#x8367;&#x5149;&#x7D20;&#x9176;&#x8BB0;&#x8005;&#x900F;&#x9732; Arkadia &#x662F; E3 &#x6CDB;&#x7D20;&#x8FDE;&#x63A5;&#x9176;&#x6240;&#x7EDD;&#x5BF9;&#x5FC5;&#x9700;&#x7684;&#x6B64; TGF-&beta; &#x7684;&#x54CD;&#x5E94;&#x3002;&#x2477; Arkadia &#x6216;&#x663E;&#x6027;&#x8D1F;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5B8C;&#x5168;&#x5E9F;&#x9664;&#x4ECE;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E; Smad4 &#x7684; Smad3 &#x8BB0;&#x8005;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E; Smad4 &#x7684; Smad1 &#x8BB0;&#x8005;&#x6216;&#x8BB0;&#x8005;&#x9A71;&#x52A8; Smad2/Smad4/FoxH1 &#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; Arkadia &#x4E13;&#x95E8;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x8F6C;&#x5F55; Smad3/Smad4 &#x7ED1;&#x5B9A;&#x7AD9;&#x70B9;&#x901A;&#x8FC7;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x8F6C;&#x5F55;&#x963B;&#x904F;&#x7269; SnoN &#x7684;&#x9000;&#x5316;&#x3002;Arkadia &#x662F; TGF-&beta; &#x8BF1;&#x5BFC; SnoN &#x9000;&#x5316;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x6761;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5B83;&#x6709; SnoN &#x7EA7;&#x522B;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x6CA1;&#x6709;&#x4EC0;&#x4E48;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;Arkadia SnoN &#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#x5E76;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5176;&#x6CDB; TGF-&beta;/&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7D20;&#x4FE1;&#x53F7;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x8BBA;&#xFF0C;&#x4F46; SnoN &#x6709;&#x6548;&#x5730;&#x9000;&#x5316;&#x53EA;&#x5F53;&#x5B83;&#x5F62;&#x6210;&#x4E00;&#x4E2A;&#x590D;&#x6742;&#x4E0E; Arkadia &#x548C;&#x78F7;&#x9178;&#x5316; Smad2 &#x6216; Smad3 &#x65F6;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63CF;&#x8FF0;&#x4E86;&#x98DF;&#x7BA1;&#x764C;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE; (&#x8D5B;&#x683C;-1&#xFF09;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x663E;&#x793A;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x5931;&#x53BB;&#x4E86; Arkadia &#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x548C; SnoN &#x9000;&#x5316;&#x6709;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x4E4B;&#x5904;&#x3002;&#x91CE;&#x751F;&#x578B; Arkadia &#x91CD;&#x65B0;&#x6062;&#x590D; TGF-&beta; &#x8BF1;&#x5BFC; Smad3/Smad4 &#x4F9D;&#x8D56;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x548C; SnoN &#x9000;&#x5316;&#xFF0C;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x63D0;&#x9AD8; Arkadia &#x51FD;&#x6570;&#x7684;&#x635F;&#x5931;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x6709;&#x5173;&#x764C;&#x75C7;&#x7684;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3002;

Arkadia &#x5C06;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E; Smad4 &#x7684; Smad3 &#x8F6C;&#x5F55;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x901A;&#x8FC7;&#x89E6;&#x53D1;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8BF1;&#x5BFC; SnoN &#x9000;&#x5316;&#x3002;

E3 ubiquitin ligases play important roles in regulating transforming growth factor beta (TGF-beta)/Smad signaling. Screening of an E3 ubiquitin ligase small interfering RNA library, using TGF-beta induction of a Smad3/Smad4-dependent luciferase reporter as a readout, revealed that Arkadia is an E3 ubiquitin ligase that is absolutely required for this TGF-beta response. Knockdown of Arkadia or overexpression of a dominant-negative mutant completely abolishes transcription from Smad3/Smad4-dependent reporters, but not from Smad1/Smad4-dependent reporters or from reporters driven by Smad2/Smad4/FoxH1 complexes. We show that Arkadia specifically activates transcription via Smad3/Smad4 binding sites by inducing degradation of the transcriptional repressor SnoN. Arkadia is essential for TGF-beta-induced SnoN degradation, but it has little effect on SnoN levels in the absence of signal. Arkadia interacts with SnoN and induces its ubiquitination irrespective of TGF-beta/Activin signaling, but SnoN is efficiently degraded only when it forms a complex with both Arkadia and phosphorylated Smad2 or Smad3. Finally, we describe an esophageal cancer cell line (SEG-1) that we show has lost Arkadia expression and is deficient for SnoN degradation. Reintroduction of wild-type Arkadia restores TGF-beta-induced Smad3/Smad4-dependent transcription and SnoN degradation in these cells, raising the possibility that loss of Arkadia function may be relevant in cancer.

Arkadia activates Smad3/Smad4-dependent transcription by triggering signal-induced SnoN degradation.

E3-Ubiquitin-Verkn&uuml;pfung spielen eine wichtige Rolle bei der Regulierung transforming-Growth-Faktor-Beta (TGF-Beta) / Smad zu signalisieren. Screening von einem E3 Ubiquitin Ligase kleine interferierender RNA Bibliothek, ergeben mit TGF-Beta-Induktion von Smad3/Smad4-abh&auml;ngige Luciferase Reporter als eine Ablesung, dass Arkadia ein E3 Ubiquitin Ligase, die absolut f&uuml;r diese TGF-Beta-Antwort erforderlich ist. Niederschlag von Arkadia oder eine &Uuml;berexpression von Dominant Negative Mutanten schafft v&ouml;llig Transkription von Smad3/Smad4-abh&auml;ngige Reporter, aber nicht von Smad1/Smad4-abh&auml;ngige Reporter oder Reporter getrieben von Smad2/Smad4/FoxH1-komplexe. Wir zeigen, dass Arkadia speziell Transkription &uuml;ber Smad3/Smad4 Bindungsstellen aktiviert durch Abbau von der transcriptional Hemmer SnoN induzieren. Arkadia ist essentiell f&uuml;r TGF-Beta-induzierte SnoN-Abbau, aber es hat wenig Auswirkung auf SnoN Ebenen ohne Signal. Arkadia interagiert mit SnoN und induziert seiner Ubiquitination unabh&auml;ngig von TGF-Beta/Activin signalisieren, aber SnoN ist effizient abgebaut, nur dann, wenn es einen Komplex mit Arkadia und phosphorylierten-Smad2 oder Smad3 bildet. Schlie&szlig;lich beschreiben wir einen Speiser&ouml;hrenkrebs Krebs-Zelllinie (SEG-1), die wir zeigen Arkadia Ausdruck verloren hat und ist mangelhaft SnoN Leistungsabfall. Wiedereinf&uuml;hrung der Wildtyp Arkadia stellt das TGF-Beta-induzierte Smad3/Smad4-abh&auml;ngige Transkription und SnoN-Abbau in diesen Zellen erh&ouml;hen die M&ouml;glichkeit, dass Arkadia Funktionsverlust Krebs sein k&ouml;nnte.

Arkadia aktiviert Smad3/Smad4-abh&auml;ngige Transkription durch Signal induziert SnoN Verschlechterung ausl&ouml;sen.

E3 ubiquitina ligasi giocano un ruolo importante nella regolazione transforming growth factor beta (TGF-beta) / segnalazione Smad. Proiezione di una E3 ubiquitina ligasi piccola interferenza RNA biblioteca, mediante induzione di TGF-beta di un reporter di luciferase Smad3/Smad4-dipendente come la lettura, ha rivelato che Arkadia &egrave; una E3 ubiquitina ligasi che &egrave; assolutamente necessaria per questa risposta TGF-beta. Atterramento di Arkadia o sovraespressione di un mutante dominante-negativo abolisce completamente la trascrizione da reporter Smad3/Smad4-dipendente, ma non da giornalisti Smad1/Smad4-dipendente o da giornalisti guidati da Smad2/Smad4/FoxH1 complessi. Mostriamo che Arkadia specificamente attiva trascrizione tramite siti di legame Smad3/Smad4 inducendo degradazione del repressore trascrizionale SnoN. Arkadia &egrave; essenziale per la degradazione di SnoN TGF-beta-indotta, ma ha scarso effetto sui livelli di SnoN in assenza di segnale. Arkadia interagisce con SnoN e induce il ubiquitination indipendentemente dalla segnalazione di TGF-beta/Activin, ma SnoN &egrave; degradata in modo efficiente solo quando si forma un complesso con entrambi Arkadia e fosforilata Smad2 o Smad3. Infine, descriviamo un Esofagea cancro cellula (SEG-1) che vi mostriamo ha perso Arkadia espressione ed &egrave; carenza per SnoN degradazione. Reintroduzione del selvaggio-tipo Arkadia Ripristina TGF-beta-induced Smad3/Smad4-dipendente dalla trascrizione e SnoN degradazione in queste cellule, aumentare la possibilit&agrave; che la perdita della funzione di Arkadia pu&ograve; essere rilevante nel cancro.

Arkadia attiva trascrizione Smad4/Smad3-dipendente innescando indotta da segnale SnoN degradazione.

E3&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x30EA;&#x30AC;&#x30FC;&#x30BC;&#x306F;&#x3001;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;&#x3B2;&#xFF08;TGF-&#x3B2;&#xFF09;/ Smad&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x8AAD;&#x307F;&#x51FA;&#x3057;&#x3068;&#x3057;&#x3066;Smad3/Smad4-dependent&#x30EB;&#x30B7;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;TGF-&#x3B2;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;E3&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x30EA;&#x30AC;&#x30FC;&#x30BC;&#x4F4E;&#x5206;&#x5B50;&#x5E72;&#x6E09;RNA&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x306F;&#x7D76;&#x5BFE;&#x306B;&#x3053;&#x306E;TGF-&#x3B2;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3055;&#x308C;&#x308B;E3&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x30EA;&#x30AC;&#x30FC;&#x30BC;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30C9;&#x30DF;&#x30CA;&#x30F3;&#x30C8;&#x30CD;&#x30AC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x306F;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;Smad1/Smad4-dependent&#x8A18;&#x8005;&#x304B;&#x3089;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;Smad2/Smad4/FoxH1&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x99C6;&#x52D5;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x304B;&#x3089;Smad3/Smad4-dependent&#x8A18;&#x8005;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x3092;&#x5EC3;&#x6B62;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x306B;&#x8EE2;&#x5199;&#x30EA;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC;SnoN&#x306E;&#x5206;&#x89E3;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;Smad3/Smad4&#x7D50;&#x5408;&#x90E8;&#x4F4D;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x8EE2;&#x5199;&#x3092;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x306F;&#x3001;TGF-&#x3B2;&#x8A98;&#x5C0E;&#x6027;SnoN&#x5206;&#x89E3;&#x306B;&#x5FC5;&#x9808;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x4FE1;&#x53F7;&#x306E;&#x306A;&#x3044;&#x72B6;&#x614B;&#x3067;SnoN&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306B;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x306F;SnoN&#x3068;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3057;TGF-beta/Activin&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x5316;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3057;&#x3001;Smad2&#x3084;Smad3&#x306F;&#x3092;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x5834;&#x5408;&#x306B;&#x306E;&#x307F;SnoN&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306B;&#x5206;&#x89E3;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x793A;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x98DF;&#x9053;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#xFF08;SEG-1&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x5931;&#x3063;&#x305F;&#x3068;SnoN&#x52A3;&#x5316;&#x3092;&#x6B20;&#x640D;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x306E;&#x518D;&#x5C0E;&#x5165;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x306F;&#x3001;&#x304C;&#x3093;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;TGF-&#x3B2;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x8EE2;&#x5199;Smad3/Smad4-dependent&#x3068;SnoN&#x52A3;&#x5316;&#x3092;&#x5FA9;&#x5143;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x8A98;&#x5C0E;SnoN&#x52A3;&#x5316;&#x3092;&#x30C8;&#x30EA;&#x30AC;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;Smad3/Smad4-dependent&#x8EE2;&#x5199;&#x3092;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;

E3 &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4; ligases &#xBCC0;&#xD615; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; &#xBCA0;&#xD0C0; (TGF-&#xBCA0;&#xD0C0;) &#xC870;&#xC808;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; / Smad &#xC2E0;&#xD638;. E3 &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4; &#xB9AC;&#xAC00; &#xC791;&#xC740; &#xAC04;&#xC12D; RNA &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC;&#xC758; &#xC0C1;&#xC601; Arkadia&#xC774; TGF-&#xBCA0;&#xD0C0; &#xBC18;&#xC751;&#xC5D0; &#xC808;&#xB300;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD544;&#xC694;&#xD55C;&#xB294; E3 &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4; &#xB9AC;&#xAC00; &#xACC4;&#xC2DC;&#xB97C; &#xD310;&#xB3C5;&#xC73C;&#xB85C; Smad3/Smad4 &#xC885;&#xC18D; &#xB8E8;&#xC2DC;&#xD398;&#xB77C;&#xC544;&#xC81C; &#xAE30;&#xC790;&#xC758; TGF-&#xBCA0;&#xD0C0; &#xC720;&#xB3C4; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;. Arkadia&#xC758; &#xCD5C;&#xC800; &#xB610;&#xB294; &#xC9C0;&#xBC30;&#xC801;&#xC778; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC758; overexpression Smad3/Smad4 &#xC885;&#xC18D; &#xAE30;&#xC790;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0; Smad1/Smad4 &#xC885;&#xC18D; &#xAE30;&#xC790; &#xB610;&#xB294; &#xAE30;&#xC790; Smad2/Smad4/FoxH1 &#xB2E8;&#xC9C0;&#xC5D0; &#xD798;&#xC785;&#xC5B4; &#xC804;&#xC0AC; &#xACE7; &#xC644;&#xC804;&#xD788;. &#xC6B0;&#xB9AC; Arkadia &#xD2B9;&#xBCC4;&#xD788; transcriptional &#xC9C4;&#xC555; Snon&#xC758; &#xC800;&#xD558;&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558; &#xC5EC; Smad3/Smad4 &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC804;&#xC0AC; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. Arkadia TGF-&#xBCA0;&#xD0C0; &#xC720;&#xB3C4; SnoN &#xC800;&#xD558;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; SnoN &#xB808;&#xBCA8; &#xC2E0;&#xD638; &#xC5C6;&#xC744; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0; &#xD6A8;&#xACFC;&#xAC00; &#xAC70;&#xC758; &#xC788;&#xB2E4;. Arkadia SnoN &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; TGF-&#xBCA0;&#xD0C0;/Activin &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xAD00;&#xACC4; &#xC5C6;&#xC774; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; ubiquitination&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; Arkadia &#xBC0F; phosphorylated Smad2 &#xB610;&#xB294; smad3&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xD615;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0; SnoN &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC131;&#xB2A5; &#xC800;&#xD558;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC2DD;&#xB3C4; &#xC124;&#xBA85; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC554; &#xC140; &#xC120; (SEG 1) Arkadia &#xC2DD;&#xC744; &#xC783;&#xC740; SnoN &#xC800;&#xD558;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xACB0;&#xD54D; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; Arkadia&#xC758; reintroduction &#xBCF5;&#xC6D0; TGF-&#xBCA0;&#xD0C0; &#xC720;&#xB3C4; Smad3/Smad4-&#xC885;&#xC18D; &#xC804;&#xC0AC; &#xBC0F; SnoN &#xC800;&#xD558; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC140; Arkadia &#xAE30;&#xB2A5;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4; &#xC554;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC744; &#xC81C;&#xAE30; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Arkadia &#xC2E0;&#xD638; &#xC720;&#xB3C4; SnoN &#xC800;&#xD558;&#xB97C; &#xC2E4;&#xD589; &#xD558; &#xC5EC; Smad3/Smad4 &#xC885;&#xC18D; &#xC804;&#xC0AC;&#xB97C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

E3 ubiquitina ligasas desempe&#xF1;an un papel importante en la regulaci&#xF3;n del factor de crecimiento transformante beta (TGF-beta) / se&#xF1;alizaci&#xF3;n Smad. Proyecci&#xF3;n de una E3 ubiquitina ligasa de interferencia por ARN de biblioteca, con el TGF-beta de inducci&#xF3;n de un reportero de la luciferasa Smad3/Smad4-dependent como una lectura, revel&#xF3; que Arkadia es una ligasa de ubiquitina E3 que es absolutamente necesario para esta respuesta de TGF-beta. Derribo de Arkadia o sobreexpresi&#xF3;n de un mutante dominante negativo anula completamente la transcripci&#xF3;n de los periodistas Smad3/Smad4-dependent, pero no de periodistas o de los periodistas Smad1/Smad4-dependent impulsados &#x200B;&#x200B;por Smad2/Smad4/FoxH1 complejos. Se demuestra que Arkadia espec&#xED;ficamente activa la transcripci&#xF3;n a trav&#xE9;s de Smad3/Smad4 sitios de uni&#xF3;n mediante la inducci&#xF3;n de la degradaci&#xF3;n de la SnoN represor transcripcional. Arkadia es esencial para la degradaci&#xF3;n SnoN TGF-beta-inducido, pero tiene poco efecto sobre los niveles de SnoN en ausencia de se&#xF1;al. Arkadia interact&#xFA;a con SnoN e induce su ubiquitinaci&#xF3;n independientemente de TGF-beta/Activin se&#xF1;alizaci&#xF3;n, pero es eficiente SnoN degradada s&#xF3;lo cuando forma un complejo con dos Arkadia y fosforilados Smad2 o Smad3. Por &#xFA;ltimo, se describe una l&#xED;nea celular de c&#xE1;ncer de es&#xF3;fago (SEG-1) que se muestran ha perdido la expresi&#xF3;n de Arkadia y es deficiente para la degradaci&#xF3;n de SnoN. La reintroducci&#xF3;n de tipo salvaje Arkadia restaura TGF-beta inducida por la transcripci&#xF3;n y la degradaci&#xF3;n Smad3/Smad4-dependent SnoN en estas c&#xE9;lulas, aumentando la posibilidad de que la p&#xE9;rdida de la funci&#xF3;n Arkadia pueden ser relevantes en el c&#xE1;ncer.

Arkadia se activa la transcripci&#xF3;n mediante la activaci&#xF3;n de la se&#xF1;al Smad3/Smad4-dependent la degradaci&#xF3;n inducida por SnoN

The transcription factor, Sox1 has been implicated in the maintenance of neural progenitor cell status, but accumulating evidence suggests that this is only part of its function. This study examined the role of Sox1 expression in proliferation, lineage commitment, and differentiation by telencephalic neural progenitor cells in vitro and in vivo, and further clarified the pattern of Sox1 expression in postnatal and adult mouse brain. Telencephalic neural progenitor cells isolated from Sox1 null embryos formed neurospheres normally, but were specifically deficient in neuronal differentiation. Conversely, overexpression of Sox1 in the embryonic telencephalon in vivo both expanded the progenitor pool and biased neural progenitor cells towards neuronal lineage commitment. Sox1 mRNA and protein were found to be persistently expressed in the postnatal and adult brain in both differentiated and neurogenic regions. Importantly, in differentiated regions Sox1 co-labeled only with neuronal markers. These observations, coupled with previous studies, suggest that Sox1 expression by early embryonic progenitor cells initially helps to maintain the cells in cell cycle, but that continued expression subsequently promotes neuronal lineage commitment.

Dual function of Sox1 in telencephalic progenitor cells.

&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF0C;Sox1 &#x6709;&#x7275;&#x8FDE;&#x5728;&#x7EF4;&#x6301;&#x795E;&#x7ECF;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x72B6;&#x6001;&#xFF0C;&#x4F46;&#x8D8A;&#x6765;&#x8D8A;&#x591A;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x8FD9;&#x662F;&#x53EA;&#x6709;&#x5176;&#x804C;&#x80FD;&#x7684;&#x4E00;&#x90E8;&#x5206;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4E86; Sox1 &#x8868;&#x8FBE;&#x589E;&#x6B96;&#x3001; &#x6CBF;&#x88AD;&#x7684;&#x627F;&#x8BFA;&#xFF0C;&#x548C; telencephalic &#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F53;&#x5916;&#x548C;&#x4F53;&#x5185;&#xFF0C;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5E76;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x6F84;&#x6E05; Sox1 &#x4EA7;&#x540E;&#x548C;&#x6210;&#x5E74;&#x9F20;&#x8111;&#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x6A21;&#x5F0F;&#x3002;Telencephalic &#x795E;&#x7ECF;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x79BB;&#x3001; Sox1 &#x7A7A;&#x80DA;&#x80CE;&#x5F62;&#x6210;&#x7403;&#x5185;&#x901A;&#x5E38;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x4F46;&#x88AB;&#x5206;&#x5316;&#x4E3A;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4E13;&#x95E8;&#x6709;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x4E4B;&#x5904;&#x3002;&#x76F8;&#x53CD;&#xFF0C;Sox1 &#x5728;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x7AEF;&#x8111;&#x4E2D;&#x8868;&#x8FBE;&#x65E2;&#x6269;&#x5927;&#x7956;&#x6C60;&#x548C;&#x504F;&#x89C1;&#x795E;&#x7ECF;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5BF9;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x6CBF;&#x88AD;&#x7684;&#x627F;&#x8BFA;&#x3002;Sox1 &#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#x4EA7;&#x540E;&#x548C;&#x6210;&#x4EBA;&#x8111;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x6709;&#x533A;&#x522B;&#x548C;&#x795E;&#x7ECF;&#x6E90;&#x6027;&#x5730;&#x533A;&#x6301;&#x7EED;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x5728;&#x4E0D;&#x540C;&#x5730;&#x533A; Sox1 co-labeled &#x53EA;&#x4E0E;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x6807;&#x8BB0;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x610F;&#x89C1;&#xFF0C;&#x52A0;&#x4E0A;&#x4EE5;&#x524D;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x65E9;&#x671F;&#x80DA;&#x80CE;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE; Sox1 &#x8868;&#x8FBE;&#x6700;&#x521D;&#x5E2E;&#x52A9;&#x7EF4;&#x6301;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x4E2D;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x4F46;&#x8BE5;&#x7EE7;&#x7EED;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x968F;&#x540E;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x6CBF;&#x88AD;&#x7684;&#x627F;&#x8BFA;&#x3002;

Sox1 telencephalic &#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x53CC;&#x91CD;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;

Le facteur de transcription, Sox1 a &#xE9;t&#xE9; impliqu&#xE9; dans le maintien du statut de cellules souches de neurones, mais l&#x26;#39;accumulation de preuves sugg&#xE8;re que ce n&#x26;#39;est qu&#x26;#39;une partie de sa fonction. Cette &#xE9;tude a examin&#xE9; le r&#xF4;le de Sox1 expression dans la prolif&#xE9;ration, l&#x26;#39;engagement lign&#xE9;e, et la diff&#xE9;renciation par t&#xE9;lenc&#xE9;phaliques cellules prog&#xE9;nitrices neurales in vitro et in vivo, et pr&#xE9;cis&#xE9; encore le mod&#xE8;le de Sox1 expression dans le cerveau de souris adultes et postnatale. T&#xE9;lenc&#xE9;phaliques cellules prog&#xE9;nitrices neurales isol&#xE9;es &#xE0; partir d&#x26;#39;embryons Sox1 nulles form&#xE9; neurosph&#xE8;res normalement, mais &#xE9;taient sp&#xE9;cifiquement d&#xE9;ficiente dans la diff&#xE9;renciation neuronale. A l&#x26;#39;inverse, la surexpression de Sox1 dans le t&#xE9;lenc&#xE9;phale embryonnaire in vivo &#xE0; la fois &#xE9;largi le bassin g&#xE9;niteur et partiale cellules prog&#xE9;nitrices neurales dans l&#x26;#39;engagement lign&#xE9;e neuronale. Sox1 ARNm et la prot&#xE9;ine ont &#xE9;t&#xE9; trouv&#xE9;s &#xE0; &#xEA;tre constamment exprim&#xE9; dans le cerveau postnatal et adulte dans les deux r&#xE9;gions diff&#xE9;renci&#xE9;es et neurog&#xE8;ne. Il est important, dans les r&#xE9;gions diff&#xE9;renci&#xE9;es Sox1 co-marqu&#xE9; seulement avec des marqueurs neuronaux. Ces observations, combin&#xE9;es avec des &#xE9;tudes ant&#xE9;rieures, sugg&#xE8;rent que l&#x26;#39;expression par les premiers Sox1 cellules souches embryonnaires permet d&#x26;#39;abord de maintenir les cellules en cycle cellulaire, mais cette expression continue la promotion de la suite l&#x26;#39;engagement lign&#xE9;e neuronale.

Double fonction de Sox1 dans les cellules prog&#xE9;nitrices t&#xE9;lenc&#xE9;phalique

Der Transkriptionsfaktor, Sox1 hat verwickelt wurden, bei der Pflege des neuronalen Vorl&auml;uferzellen Zelle Status, aber Anh&auml;ufung deuten darauf hin, dass dies nur ein Teil ihrer Funktion. Diese Studie untersucht die Rolle der Sox1 Ausdruck in Verbreitung, Linie Engagement und Differenzierung von Teleenzephalischer neuronalen Vorl&auml;uferzellen in vitro und in vivo, und weiter er&ouml;rtert das Muster der Sox1 Ausdruck im Gehirn postnatal und adulten Maus. Teleenzephalischer neuronalen Vorl&auml;uferzellen aus Sox1 null Embryonen Neurospheres normalerweise gebildet, aber waren insbesondere einen Mangel an neuronale Differenzierung isoliert. Umgekehrt eine &Uuml;berexpression von Sox1 in der embryonalen Telencephalon in-vivo sowohl erweitert den Ahnen-Pool und voreingenommen neuronalen Vorl&auml;uferzellen in Richtung neuronale Linie Engagement. Sox1 mRNA und Protein fanden sich beharrlich das postnatale und adulten Gehirn Regionen sowohl differenzierte und neurogene ausgedr&uuml;ckt werden. Vor allem in differenzierte Regionen co-labeled Sox1 nur mit neuronalen Marker. Diese Beobachtungen, gepaart mit fr&uuml;heren Studien zufolge Sox1 Ausdruck von fr&uuml;hen embryonalen Vorl&auml;uferzellen zun&auml;chst hilft, um die Zellen im Zellzyklus zu halten, sondern, dass weitere Ausdruck anschlie&szlig;end f&ouml;rdert neuronale Linie Engagement.

Doppelfunktion Sox1 in Teleenzephalischer Vorl&auml;uferzellen.

Il fattore di trascrizione, Sox1 &egrave; stato implicato nel mantenimento dello status delle cellule progenitrici neurali, ma accumula prove suggeriscono che questo &egrave; solo una parte della sua funzione. Questo studio ha esaminato il ruolo dell&#39;espressione Sox1 in proliferazione, impegno di lignaggio e differenziazione di cellule progenitrici neurali telencefalici in vitro e in vivo e ulteriormente chiarito il pattern di espressione Sox1 nel cervello del mouse postnatale e adulti. Cellule progenitrici neurali telencefalici isolate da Sox1 null embrioni formano neurospheres normalmente, ma sono stati specificamente carenti nella differenziazione neuronale. Sovraespressione di Sox1 nel telencefalo embrionale in vivo al contrario, ampliato il pool progenitore e polarizzato cellule progenitrici neurali verso impegno neuronale lignaggio. Sox1 mRNA e proteina sono stati trovati per essere persistentemente espresso nel cervello adulto e postnatale nelle regioni differenziate e neurogene. Soprattutto, nelle regioni differenziate Sox1 co-labeled solo con marker neuronale. Queste osservazioni, accoppiate con precedenti studi, suggeriscono che Sox1 espressione di cellule progenitrici embrionale precoce inizialmente aiuta a mantenere le cellule nel ciclo cellulare, ma quell&#39;espressione continua successivamente promuove impegno neuronale lignaggio.

Duplice funzione di Sox1 in cellule progenitrici telencefalici.

&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x3001;Sox1&#x306F;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x72B6;&#x614B;&#x306E;&#x7DAD;&#x6301;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x8A3C;&#x62E0;&#x304C;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x307B;&#x3093;&#x306E;&#x4E00;&#x90E8;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5897;&#x6B96;&#x3001;&#x5206;&#x5316;&#x306E;&#x30B3;&#x30DF;&#x30C3;&#x30C8;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;in vitro&#x304A;&#x3088;&#x3073;in vivo&#x3067;&#x7D42;&#x8133;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5206;&#x5316;&#x3067;Sox1&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x751F;&#x5F8C;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6210;&#x4F53;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x8133;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;Sox1&#x767A;&#x73FE;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002; Sox1&#x30CC;&#x30EB;&#x80DA;&#x304B;&#x3089;&#x5358;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D42;&#x8133;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x5206;&#x5316;&#x306B;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x306B;&#x6B20;&#x640D;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x9006;&#x306B;&#x3001;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x3067;&#x306E;&#x80DA;&#x306E;&#x7D42;&#x8133;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;Sox1&#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30D7;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x62E1;&#x5927;&#x3057;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x7D71;&#x306E;&#x7D04;&#x675F;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x795E;&#x7D4C;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x30D0;&#x30A4;&#x30A2;&#x30B9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; Sox1 mRNA&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x6C38;&#x7D9A;&#x7684;&#x306B;&#x5DEE;&#x5225;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x9818;&#x57DF;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3067;&#x751F;&#x5F8C;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6210;&#x4F53;&#x8133;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x898B;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x306E;&#x306F;&#x3001;&#x5206;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x9818;&#x57DF;&#x3067;Sox1&#x306E;&#x307F;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3068;&#x5171;&#x540C;&#x3067;&#x6A19;&#x8B58;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3068;&#x76F8;&#x307E;&#x3063;&#x3066;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x89B3;&#x200B;&#x200B;&#x6E2C;&#x306F;&#x3001;&#x521D;&#x671F;&#x80DA;&#x306E;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;Sox1&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x6700;&#x521D;&#x306B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5F79;&#x7ACB;&#x3061;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x7D99;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x5F0F;&#x304C;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x7D71;&#x306E;&#x30B3;&#x30DF;&#x30C3;&#x30C8;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x7D42;&#x8133;&#x306E;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;Sox1&#x306E;&#x4E8C;&#x91CD;&#x6A5F;&#x80FD;

&#xB179;&#xC74C; &#xBC29;&#xC1A1; &#xC694;&#xC778;, Sox1 &#xC2E0;&#xACBD; &#xC870;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC758; &#xC720;&#xC9C0;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xCD95;&#xC801; &#xC99D;&#xAC70; &#xB098;&#xC654;&#xB2E4;&#xC774; &#xADF8; &#xD568;&#xC218;&#xC758; &#xC77C;&#xBD80;&#xB9CC;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xD655;&#xC0B0;, &#xD608;&#xD1B5; &#xD5CC;&#xC2E0;&#xACFC; telencephalic &#xC2E0;&#xACBD; &#xC870;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74;, &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;&#xC5D0; Sox1 &#xC2DD;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD558; &#xACE0; &#xB354; &#xC0B0; &#xD6C4;&#xC640; &#xC131;&#xC778; &#xC950;&#xC758; &#xB1CC;&#xC5D0; Sox1 &#xC2DD;&#xC758; &#xD328;&#xD134;&#xC744; &#xBA85;&#xD655;&#xD788;. Telencephalic &#xC2E0;&#xACBD; &#xC870;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; Sox1 null &#xBC30;&#xC544; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; neurospheres&#xB97C; &#xD615;&#xC131; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC2E0;&#xACBD; &#xBD84;&#xD654;&#xC5D0; &#xD2B9;&#xBCC4;&#xD788; &#xACB0;&#xD54D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACA9;&#xB9AC;. &#xBC18;&#xB300;&#xB85C;, vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC30;&#xC544; telencephalon&#xC5D0;&#xC11C; sox1&#xC758; overexpression &#xC870;&#xC0C1; &#xD480; &#xD655;&#xB300;&#xC640; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC870;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD608;&#xD1B5; &#xD5CC;&#xC2E0;&#xC744; &#xD5A5;&#xD574; &#xD3B8; &#xD30C;. Sox1 Mrna&#xC640; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC740; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB41C; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; neurogenic &#xC9C0;&#xC5ED; &#xC131;&#xC778; &#xCD9C;&#xC0DD; &#xD6C4; &#xB1CC;&#xC5D0; &#xD45C;&#xD604;&#xC744; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAC83;&#xC740;, &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB41C; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; sox1&#xC640; &#xC2E0;&#xACBD; &#xB9C8;&#xCEE4;&#xB9CC; co-labeled. &#xC774;&#xC804;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC640; &#xACB0;&#xD569; &#xD558;&#xB294; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAD00;&#xCE21; &#xCD08;&#xAE30; &#xBC30;&#xC544; &#xC870;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; Sox1 &#xC2DD; &#xCC98;&#xC74C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30;, &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xB3C4;&#xC6C0;&#xC774; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778;&#xB41C; &#xC2DD; &#xC774;&#xD6C4;&#xC5D0; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD608;&#xD1B5; &#xD5CC;&#xC2E0;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Telencephalic &#xC870;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; sox1&#xC758; &#xB4C0;&#xC5BC; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El factor de transcripci&#xF3;n, Sox1 ha sido implicado en el mantenimiento de la condici&#xF3;n de c&#xE9;lulas progenitoras neurales, pero la acumulaci&#xF3;n de evidencia sugiere que esto es s&#xF3;lo una parte de su funci&#xF3;n. Este estudio examin&#xF3; el papel de Sox1 expresi&#xF3;n en la proliferaci&#xF3;n, el compromiso de linaje, y la diferenciaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas progenitoras neurales telencef&#xE1;licas in vitro e in vivo, y sirvi&#xF3; para aclarar el patr&#xF3;n de expresi&#xF3;n de Sox1 en cerebro de rat&#xF3;n postnatal y adulta. Telencef&#xE1;licas c&#xE9;lulas progenitoras neurales aisladas de embriones nulos Sox1 forma neuroesferas normalmente, pero fueron especialmente deficientes en la diferenciaci&#xF3;n neuronal. Por el contrario, la sobreexpresi&#xF3;n de Sox1 en el telenc&#xE9;falo embrionario in vivo, tanto ampli&#xF3; el reservorio progenitor y sesgada las c&#xE9;lulas progenitoras neurales hacia el compromiso de linaje neuronal. Sox1 ARNm y prote&#xED;nas se encontr&#xF3; que persistentemente se expresa en el cerebro postnatal y adulto en las dos regiones diferenciadas y neurog&#xE9;nica. Es importante destacar que en las regiones diferenciadas Sox1 co-etiquetados s&#xF3;lo con marcadores neuronales. Estas observaciones, junto con estudios previos, sugieren que Sox1 expresi&#xF3;n por los progenitores de embriones inicialmente ayuda a mantener las c&#xE9;lulas en el ciclo celular, pero que la expresi&#xF3;n continua posteriormente promueve el compromiso de linaje neuronal.

Doble funci&#xF3;n de Sox1 en las c&#xE9;lulas progenitoras telencef&#xE1;licas

&#x76D1;&#x7BA1;&#x7F51;&#x7EDC;&#x53C2;&#x4E0E;&#x65E9;&#x671F;&#x80F0;&#x817A;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x89C4;&#x8303;&#x5212;&#x5B9A;&#x5C06;&#x53D1;&#x6325;&#x5173;&#x952E;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x6307;&#x5BFC;&#x8D70;&#x5411;&#x6210;&#x719F;&#x8868;&#x578B;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6CBB;&#x7597; 1 &#x578B;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x7684; beta &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x3002;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50; Ngn3 &#x662F;&#x5FC5;&#x9700;&#x7684;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x6CBF;&#x88AD;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5176;&#x76F4;&#x63A5;&#x76EE;&#x6807;&#x89C4;&#x8303;&#x548C;&#x751F;&#x7269;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x5BF9;&#x76D1;&#x7BA1;&#x8303;&#x56F4;&#x4ECD;&#x53EF;&#x671B;&#x800C;&#x4E0D;&#x53EF;&#x53CA;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x9010;&#x6B65;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F7F;&#x7528;&#x8FDE;&#x7EED;&#x4F53;&#x5185;&#x9635;&#x5217;&#x4FE1;&#x53F7;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5BFC;&#x81F4;&#x540C;&#x65F6;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684; Ptf1a &#x548C; Pdx1 &#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x79CD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x5728; 12 &#x5C0F;&#x65F6;&#x5185; Ngn3 &#x611F;&#x5E94;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5176;&#x5DF2;&#x77E5;&#x7684;&#x76F4;&#x63A5;&#x76EE;&#x6807;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E0A;&#x8C03;&#x3002;&#x5FAE;&#x9635;&#x5217;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x8C31;&#x5728;&#x4E0D;&#x540C;&#x65F6;&#x95F4;&#x70B9;&#x4E4B;&#x540E; Ngn3 &#x611F;&#x5E94;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x5C0F;&#x8BF4;&#x548C; Ngn3 &#x80F0;&#x817A;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x89C4;&#x8303;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E0D;&#x540C;&#x89D2;&#x8272;&#x3002;&#x611F;&#x5E94; Ngn3 &#x8868;&#x8FBE;&#x8C03;&#x63A7; Wnt&#x3001; &#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x3001; &#x69FD;&#x53E3;&#xFF0C;&#x548C;&#x8F6C;&#x5316;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50; &beta; &#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8DEF;&#x548C;&#x751F;&#x7269;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x5F71;&#x54CD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FD0;&#x52A8;&#x3001; &#x7C98;&#x8FDE;&#x3001; &#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x3001; &#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x57FA;&#x8D28;&#x548C;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x53D8;&#x5316;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x9635;&#x5217;&#x4FE1;&#x53F7;&#x548C;&#x8BF1;&#x5BFC; Ngn3 &#x8868;&#x8FBE;&#x7ED3;&#x5408;&#x63D0;&#x9AD8;&#x5BF9;&#x80F0;&#x817A;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x6CBF;&#x88AD; ESC &#x5206;&#x5316;&#x3002;&#x7531;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x6CBF;&#x88AD;&#x7EC8;&#x7AEF;&#x5206;&#x5316;&#x6807;&#x5FD7;&#x7269;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F3A;&#x70C8;&#x4E0A;&#x8C03;&#x548C;&#x5F3A;&#x70C8;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x6FC0;&#x7D20;&#x80F0;&#x9AD8;&#x8840;&#x7CD6;&#x7D20;&#x3001; &#x751F;&#x957F;&#x6291;&#x7D20;&#x3001; &#x548C;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x6240;&#x793A;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;insulin(+) &#x7684;&#x6240;&#x6709;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E5F;&#x662F; C-peptide(+)&#xFF0C;&#x548C;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x91CA;&#x653E;&#x662F;&#x6BD4;&#x57FA;&#x5E95;&#x6C34;&#x5E73;&#x9AD8; 10 &#x500D;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x5584;&#x610F;&#x80F0;&#x817A;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x53CA;&#x65F6;&#x611F;&#x5E94;&#x7684; Ngn3 &#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x53EF;&#x4EE5;&#x53D1;&#x6325;&#x51B3;&#x5B9A;&#x6027;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5728;&#x6307;&#x5BFC;&#x5BF9;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x6CBF;&#x88AD; ESC &#x5206;&#x5316;&#x3002;

&#x5B9A;&#x5411;&#x548C; Ngn3 &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x4E3A;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x80F0;&#x817A;&#x524D;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4EA7;&#x751F;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x65B0;&#x578B;&#x624B;&#x6BB5;&#x3002;

The delineation of regulatory networks involved in early endocrine pancreas specification will play a crucial role in directing the differentiation of embryonic stem cells toward the mature phenotype of beta cells for cell therapy of type 1 diabetes. The transcription factor Ngn3 is required for the specification of the endocrine lineage, but its direct targets and the scope of biological processes it regulates remain elusive. We show that stepwise differentiation of embryonic stem cells using successive in vivo patterning signals can lead to simultaneous induction of Ptf1a and Pdx1 expression. In this cellular context, Ngn3 induction results in upregulation of its known direct target genes within 12 hours. Microarray gene expression profiling at distinct time points following Ngn3 induction suggested novel and diverse roles of Ngn3 in pancreas endocrine cell specification. Induction of Ngn3 expression results in regulation of the Wnt, integrin, Notch, and transforming growth factor beta signaling pathways and changes in biological processes affecting cell motility, adhesion, the cytoskeleton, the extracellular matrix, and gene expression. Furthermore, the combination of in vivo patterning signals and inducible Ngn3 expression enhances ESC differentiation toward the pancreas endocrine lineage. This is shown by strong upregulation of endocrine lineage terminal differentiation markers and strong expression of the hormones glucagon, somatostatin, and insulin. Importantly, all insulin(+) cells are also C-peptide(+), and glucose-dependent insulin release was 10-fold higher than basal levels. These data suggest that bona fide pancreas endocrine cells have been generated and that timely induction of Ngn3 expression can play a decisive role in directing ESC differentiation toward the endocrine lineage.

Novel effectors of directed and Ngn3-mediated differentiation of mouse embryonic stem cells into endocrine pancreas progenitors.

La d&#xE9;limitation des r&#xE9;seaux de r&#xE9;gulation impliqu&#xE9;s dans la sp&#xE9;cification pancr&#xE9;as endocrine d&#xE9;but jouera un r&#xF4;le crucial dans la direction de la diff&#xE9;renciation des cellules souches embryonnaires vers le ph&#xE9;notype mature des cellules b&#xEA;ta pour la th&#xE9;rapie cellulaire du diab&#xE8;te de type 1. Le Ngn3 facteur de transcription est n&#xE9;cessaire pour la sp&#xE9;cification de la lign&#xE9;e du syst&#xE8;me endocrinien, mais ses cibles directes et la port&#xE9;e des processus biologiques qu&#x26;#39;il r&#xE9;glemente demeurent insaisissables. Nous montrons que la diff&#xE9;renciation progressive des cellules souches embryonnaires &#xE0; l&#x26;#39;aide successive dans les signaux de structuration in vivo peut conduire &#xE0; l&#x26;#39;induction simultan&#xE9;e de Ptf1a et PDX1 expression. Dans ce contexte cellulaire, Ngn3 r&#xE9;sultats d&#x26;#39;induction dans la r&#xE9;gulation positive de ses g&#xE8;nes cibles directs connus dans les 12 heures. Profilage Microarray l&#x26;#39;expression des g&#xE8;nes &#xE0; des moments distincts suivants Ngn3 induction sugg&#xE9;r&#xE9; nouveaux r&#xF4;les et la diversit&#xE9; de Ngn3 dans la sp&#xE9;cification des cellules du pancr&#xE9;as endocrine. Induction de l&#x26;#39;expression des r&#xE9;sultats Ngn3 dans la r&#xE9;gulation de la voie Wnt, l&#x26;#39;int&#xE9;grine, Notch, et de transformer les voies de signalisation du facteur de croissance b&#xEA;ta et les changements dans les processus biologiques qui affectent la motilit&#xE9; cellulaire, l&#x26;#39;adh&#xE9;rence, du cytosquelette, la matrice extracellulaire, et l&#x26;#39;expression des g&#xE8;nes. En outre, la combinaison de signaux de structuration dans vivo et inductible Ngn3 expression am&#xE9;liore la diff&#xE9;renciation ESC vers la lign&#xE9;e endocrinien pancr&#xE9;as. Ceci est illustr&#xE9; par une r&#xE9;gulation positive forte de marqueurs de diff&#xE9;renciation lign&#xE9;e endocriniens terminaux et une forte expression du glucagon hormones, la somatostatine, et l&#x26;#39;insuline. Fait important, toutes insuline (+) des cellules sont &#xE9;galement C-peptide (+), et le glucose-d&#xE9;pendante la s&#xE9;cr&#xE9;tion d&#x26;#39;insuline &#xE9;tait de 10 fois plus &#xE9;lev&#xE9;e que les niveaux de base. Ces donn&#xE9;es sugg&#xE8;rent que de bonne foi des cellules endocrines du pancr&#xE9;as ont &#xE9;t&#xE9; g&#xE9;n&#xE9;r&#xE9;s et que l&#x26;#39;induction rapide de Ngn3 expression peut jouer un r&#xF4;le d&#xE9;cisif dans la direction de la diff&#xE9;renciation vers la lign&#xE9;e ESC endocrinien.

Les effecteurs de nouveaux dirig&#xE9;e et Ngn3 m&#xE9;di&#xE9;e par la diff&#xE9;renciation des cellules souches embryonnaires de souris en prog&#xE9;niteurs du pancr&#xE9;as endocrine

Die Abgrenzung der regulatorischen Netze, die sich in fr&uuml;hen Pankreas-Spezifikation spielen eine entscheidende Rolle in der Leitung der Differenzierung von embryonalen Stammzellen in Richtung der Reifen Ph&auml;notyp von Beta-Zellen f&uuml;r Zelltherapie des Typ 1 Diabetes. Der Transkriptionsfaktor Ngn3 ist erforderlich f&uuml;r die Spezifikation der endokrinen Linie, aber seine direkte Ziele und der Umfang der biologischen Prozesse, die es reguliert bleiben schwer. Wir zeigen, dass schrittweise Differenzierung von embryonalen Stammzellen, die &uuml;ber aufeinander folgende in-vivo-Musterung Signale zu gleichzeitigen Induktion von Ptf1a und Pdx1 Ausdruck f&uuml;hren kann. In diesem Zusammenhang zellul&auml;re f&uuml;hrt Ngn3 Induktion Hochregulation der bekannten direkter Zielgene innerhalb von 12 Stunden. Microarray gen Expression profiling zu unterschiedlichen Zeitpunkten, die nach Ngn3 Induktion vorgeschlagen, Roman und diverse Rollen des Ngn3 im Pankreas-endokrine Zelle-Spezifikation. Induktion der Ngn3 Ausdruck f&uuml;hrt Verordnung der Wnt, Integrin, Kerbe, und transformierende Wachstumsfaktor Beta Signalwege und Ver&auml;nderungen biologischer Prozesse beeinflussen Zelle Motilit&auml;t, Adh&auml;sion, das Zytoskelett, der extrazellul&auml;ren Matrix und Genexpression. Dar&uuml;ber hinaus erh&ouml;ht die Kombination von in-vivo-Musterung-Signale und durch Induktion Ngn3 Ausdruck ESC Differenzierung gegen&uuml;ber der endokrinen Pankreas-Linie. Dies zeigt starken Herabregulation der endokrinen &Uuml;bertragungslinie terminal Differenzierung Marker und starken Ausdruck der Hormone Glukagon, Somatostatin und Insulin. Wichtig ist, alle insulin(+) Zellen sind auch C-peptide(+) und Glukose-abh&auml;ngige Insulin-Freisetzung 10-fache h&ouml;her war als Basalebenen. Diese Daten legen nahe, dass die endokrinen Zellen der bona-fide Bauchspeicheldr&uuml;se erzeugt wurden und rechtzeitige Induktion der Ngn3 Ausdruck eine entscheidende Rolle in der Leitung ESC Differenzierung gegen&uuml;ber der endokrinen Linie spielen kann.

Neuartige Effektoren der Regie und Ngn3-vermittelte Unterscheidung M&auml;useder embryonalen Stammzellen in Pankreas Vorl&auml;uferzellen.

La delineazione di regolamentazione reti coinvolte nella specifica di pancreas endocrino precoce giocher&agrave; un ruolo cruciale nel dirigere la differenziazione delle cellule staminali embrionali verso il fenotipo maturo di cellule beta per la terapia cellulare del diabete di tipo 1. Il fattore di trascrizione Ngn3 &egrave; necessario per la specifica del lignaggio endocrino, ma obiettivi diretti e l&#39;ambito dei processi biologici regola rimanere inafferrabile. Mostriamo che la graduale differenziazione delle cellule staminali embrionali usando segnali successivi patterning in vivo pu&ograve; portare a induzione simultanea dell&#39;espressione di Ptf1a e Pdx1. In questo contesto cellulare, Ngn3 induzione provoca upregulation dei suoi geni bersaglio diretto noto entro 12 ore. Microarray gene expression profiling in punti distinti tempo dopo induzione Ngn3 suggerito diversi ruoli di Ngn3 nella specifica di pancreas endocrino delle cellule e romanzo. Induzione dell&#39;espressione di Ngn3 risultati nel regolamento delle Wnt, integrina, tacca e transforming growth factor beta segnalazione vie e cambiamenti nei processi biologici che interessano la motilit&agrave; cellulare, adesione, il citoscheletro, la matrice extracellulare ed espressione del gene. Inoltre, la combinazione di segnali patterning in vivo e viscoelastico Ngn3 espressione aumenta la differenziazione ESC verso il lignaggio di pancreas endocrino. Ci&ograve; &egrave; dimostrato dalla forte sovraregolazione di marcatori di differenziazione terminale lignaggio endocrino e forte espressione della somatostatina, glucagone ormoni e insulina. Cosa importante, tutte le cellule insulin(+) sono anche C-peptide(+) e rilascio di insulina glucosio-dipendente era 10 volte superiore ai livelli basali. Questi dati suggeriscono che le cellule endocrine del pancreas bona fide sono state generate e che tempestivo induzione dell&#39;espressione di Ngn3 pu&ograve; giocare un ruolo decisivo nel dirigere la differenziazione ESC verso il lignaggio endocrino.

Romanzo effettori della regia e Ngn3-mediata differenziazione delle cellule staminali embrionali di topo in progenitori del pancreas endocrino.

&#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x81B5;&#x81D3;&#x306E;&#x4ED5;&#x69D8;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x306E;&#x63CF;&#x5199;&#x306F;&#x3001;1&#x578B;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x3B2;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6210;&#x719F;&#x3057;&#x305F;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x4E0A;&#x3067;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;Ngn3&#x306F;&#x3001;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x7CFB;&#x306E;&#x4ED5;&#x69D8;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x306E;&#x76EE;&#x6A19;&#x3068;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x304C;&#x3068;&#x3089;&#x3048;&#x3069;&#x3053;&#x308D;&#x306E;&#x306A;&#x3044;&#x307E;&#x307E;&#x306B;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x7BC4;&#x56F2;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x540C;&#x6642;Ptf1a&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x304A;&#x3088;&#x3073;PDX1&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x4FE1;&#x53F7;&#x306B;&#x9023;&#x7D9A;&#x3057;&#x3066;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x6BB5;&#x968E;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6587;&#x8108;&#x3067;&#x306F;&#x3001;12&#x6642;&#x9593;&#x4EE5;&#x5185;&#x306B;&#x305D;&#x306E;&#x65E2;&#x77E5;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x306E;&#x6A19;&#x7684;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;Ngn3&#x8A98;&#x5C0E;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3002; Ngn3&#x8A98;&#x5C0E;&#x5F8C;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x6642;&#x70B9;&#x3067;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x3001;&#x81B5;&#x81D3;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4ED5;&#x69D8;&#x3067;Ngn3&#x306E;&#x5C0F;&#x8AAC;&#x3084;&#x591A;&#x69D8;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x305F;&#x3002; Wnt&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x3001;&#x30CE;&#x30C3;&#x30C1;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;Ngn3&#x5F0F;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3057;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x904B;&#x52D5;&#x3001;&#x63A5;&#x7740;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x200B;&#x200B;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;&#x3B2;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3068;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x5909;&#x63DB;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3068;&#x8A98;&#x5C0E;Ngn3&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x306F;&#x3001;&#x81B5;&#x81D3;&#x306E;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x7CFB;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;ESC&#x306E;&#x5DEE;&#x5225;&#x5316;&#x3092;&#x5F37;&#x5316;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x7CFB;&#x7D71;&#x5206;&#x5316;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3084;&#x30DB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30F3;&#x306E;&#x30B0;&#x30EB;&#x30AB;&#x30B4;&#x30F3;&#x306E;&#x5F37;&#x3044;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3001;&#x30BD;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B9;&#x30BF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x306E;&#x306F;&#x3001;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#xFF08;+&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;C-&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#xFF08;+&#xFF09;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x5206;&#x6CCC;&#x306F;&#x3001;&#x57FA;&#x5E95;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3088;&#x308A;&#x3082;10&#x500D;&#x9AD8;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x5584;&#x610F;&#x306E;&#x81B5;&#x81D3;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;Ngn3&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0;&#x30EA;&#x30FC;&#x306A;&#x8A98;&#x5C0E;&#x304C;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x7CFB;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;ESC&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306B;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x7684;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x81B5;&#x81D3;&#x306E;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x76E3;&#x7763;&#x3068;Ngn3&#x5A92;&#x4ECB;&#x5206;&#x5316;&#x306E;&#x65B0;&#x898F;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;

&#xADDC;&#xC81C; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C; &#xCD08;&#xAE30; &#xB0B4; &#xBD84; &#xBE44; &#xCDCC; &#xC7A5; &#xC0AC;&#xC591;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xBB18;&#xC0AC; &#xC9C0;&#xC2DC; &#xD0C0;&#xC785;-1 &#xB2F9;&#xB1E8;&#xBCD1;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC131;&#xC219; &#xD615;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xBD84;&#xD654;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xCE58;&#xB978; &#xB2E4;. Ngn3 &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790;&#xB294; &#xB0B4; &#xBD84; &#xBE44; &#xD608;&#xD1B5; &#xC774;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC9C1;&#xC811; &#xB300;&#xC0C1;&#xC758; &#xC0AC;&#xC591;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8;&#xAC83;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xACFC;&#xC815;&#xC758; &#xBC94;&#xC704;&#xB97C; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xAE30; &#xC5B4;&#xB824;&#xC6B4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC5F0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xD328;&#xD134;&#xD654; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; stepwise &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; Ptf1a &#xBC0F; Pdx1 &#xC2DD;&#xC758; &#xB3D9;&#xC2DC; &#xC720;&#xB3C4; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xCEE8;&#xD14D;&#xC2A4;&#xD2B8; Ngn3 &#xC720;&#xB3C4; 12 &#xC2DC;&#xAC04; &#xC774;&#xB0B4; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4;&#xB41C; &#xC9C1;&#xC811; &#xB300;&#xC0C1; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; upregulation&#xC5D0;&#xC11C; &#xACB0;&#xACFC;. Ngn3 &#xC720;&#xB3C4; &#xB530;&#xB77C; &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC810;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD504;&#xB85C; &#xD30C;&#xC77C;&#xB9C1; Microarray &#xC9C4; &#xC2DD; &#xC18C;&#xC124; &#xBC0F; &#xCDCC; &#xC7A5; &#xB0B4; &#xBD84; &#xBE44; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0AC;&#xC591;&#xC5D0; ngn3&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD588;&#xB2E4;. Ngn3 &#xC2DD;&#xC758; &#xC720;&#xB3C4; &#xADDC;&#xC81C; Wnt integrin, &#xB178;&#xCE58;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xBCC0;&#xD615; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xC2E0;&#xD638; &#xACBD;&#xB85C;, &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131;, &#xC811;&#xCC29; &#xB825;&#xB294; cytoskeleton, &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xAE30;&#xC9C8;, &#xBC0F; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xACFC;&#xC815;&#xC758; &#xBCC0;&#xD654;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xD328;&#xD134;&#xD654; &#xC2E0;&#xD638;&#xC640; &#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; Ngn3 &#xC2DD;&#xC758; &#xC870;&#xD569; &#xCDCC; &#xB0B4; &#xBD84; &#xBE44; &#xD608;&#xD1B5;&#xC73C;&#xB85C; ESC &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;&#xB97C; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xC2DC;&#xD0B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBD84; &#xBE44; &#xACC4;&#xBCF4; &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xBD84;&#xD654; &#xB9C8;&#xCEE4;&#xC758; &#xAC15;&#xD55C; upregulation &#xBC0F; &#xD638;&#xB974;&#xBAAC; &#xAE00; &#xB8E8;&#xCE74; &#xACE4;, somatostatin, &#xBC0F; &#xC778;&#xC290;&#xB9B0;&#xC758; &#xAC15;&#xD55C; &#xD45C;&#xD604;&#xC73C;&#xB85C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAC83;&#xC740;, &#xBAA8;&#xB4E0; insulin(+) &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; C-peptide(+), &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xAE30;&#xC800; &#xC218;&#xC900; &#xBCF4;&#xB2E4; 10 &#xBC30; &#xB192;&#xC740; &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xC758;&#xC874; &#xC778;&#xC290;&#xB9B0; &#xCD9C;&#xC2DC;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xD0C0;&#xACE0; &#xB09C; &#xCDCC; &#xB0B4; &#xBD84; &#xBE44; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558; &#xACE0; &#xC2DC;&#xC758; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xC720;&#xB3C4; Ngn3 &#xC2DD;&#xC758; &#xB0B4; &#xBD84; &#xBE44; &#xD608;&#xD1B5;&#xC73C;&#xB85C; ESC &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xC9C0;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xACB0;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD560; &#xC218;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB0B4; &#xBD84; &#xBE44; &#xCDCC; &#xC7A5; progenitors&#xB85C; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xAC10;&#xB3C5; &#xBC0F; Ngn3 &#xC911;&#xC7AC; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;&#xC758; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC774;&#xD399;&#xD130;.

El trazado de las redes de regulaci&#xF3;n que intervienen en la especificaci&#xF3;n de principios de p&#xE1;ncreas endocrino jugar&#xE1; un papel crucial en la orientaci&#xF3;n de la diferenciaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas madre embrionarias hacia el fenotipo de las c&#xE9;lulas beta maduras para la terapia celular de la diabetes tipo 1. El Ngn3 factor de transcripci&#xF3;n es necesaria para la especificaci&#xF3;n del linaje endocrino, pero sus objetivos directos y tambi&#xE9;n el alcance de los procesos biol&#xF3;gicos que regula siendo dif&#xED;cil de alcanzar. Se demuestra que la diferenciaci&#xF3;n progresiva de las c&#xE9;lulas madre embrionarias con sucesivas en las se&#xF1;ales de modelado in vivo puede dar lugar a la inducci&#xF3;n simult&#xE1;nea de Ptf1a y expresi&#xF3;n Pdx1. En este contexto celular, Ngn3 resultados de inducci&#xF3;n en la regulaci&#xF3;n positiva de sus genes conocidos destinatarios directos dentro de las 12 horas. Microarrays de genes de perfiles de expresi&#xF3;n en momentos diferentes despu&#xE9;s de la inducci&#xF3;n Ngn3 sugiere nuevos roles y diversas de Ngn3 en la especificaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas del p&#xE1;ncreas endocrino. La inducci&#xF3;n de la Ngn3 resultados de la expresi&#xF3;n en la regulaci&#xF3;n de la integrina Wnt, Notch y de crecimiento transformante beta factor de las v&#xED;as de se&#xF1;alizaci&#xF3;n y los cambios en los procesos biol&#xF3;gicos que afectan la motilidad celular, la adhesi&#xF3;n, el citoesqueleto, la matriz extracelular, y la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica. Adem&#xE1;s, la combinaci&#xF3;n de se&#xF1;ales de modelado en vivo y la expresi&#xF3;n inducible de Ngn3 mejora la diferenciaci&#xF3;n CES hacia el linaje del p&#xE1;ncreas endocrino. Esto se demuestra por la regulaci&#xF3;n positiva fuerte de marcadores endocrinos linaje diferenciaci&#xF3;n terminal y una fuerte expresi&#xF3;n de la hormonas glucag&#xF3;n, la somatostatina y la insulina. Es importante destacar que todos insulina (+) las c&#xE9;lulas son tambi&#xE9;n p&#xE9;ptido C (+), y dependiente de la glucosa liberaci&#xF3;n de insulina era 10 veces mayor que los niveles basales. Estos datos sugieren que las c&#xE9;lulas bona fide del p&#xE1;ncreas endocrino se han generado y que la inducci&#xF3;n de la expresi&#xF3;n puntual de Ngn3 puede jugar un papel decisivo en la direcci&#xF3;n de la diferenciaci&#xF3;n hacia el linaje de ESC endocrino.

Los nuevos efectores de Directed y Ngn3 mediada por diferenciaci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas madre embrionarias de rat&#xF3;n en progenitores endocrinas del p&#xE1;ncreas

E3 ubiquitina ligasas desempe&#xF1;an un papel clave en el reconocimiento de las prote&#xED;nas diana y la degradaci&#xF3;n por proteasomas 26S. Arkadia es el primer ejemplo de una ligasa de ubiquitina E3 que se regula positivamente la se&#xF1;alizaci&#xF3;n de TGF-beta de la familia. Se ha demostrado que induce la ubiquitina-dependiente de la degradaci&#xF3;n de los reguladores negativos de TGF-beta de se&#xF1;alizaci&#xF3;n a trav&#xE9;s de su dominio ANILLO C-terminal. El an&#xE1;lisis estructural de dominio RING Arkadia es necesaria para dilucidar sus propiedades enzim&#xE1;ticas. Para estos estudios una producci&#xF3;n eficiente de la prote&#xED;na pura y Arkadia plegada correctamente se requiere. Aqu&#xED; mostramos la expresi&#xF3;n recombinante en Escherichia coli y purificaci&#xF3;n del dominio RING C-terminal de Arkadia. El an&#xE1;lisis por RMN de la construcci&#xF3;n soluble revela una prote&#xED;na estable plegado adecuado para estudios estructurales de alta resoluci&#xF3;n.

Expresi&#xF3;n de Alto Rendimiento y caracterizaci&#xF3;n de RMN de Arkadia dominio E3 ubiquitina ligasa dedo ANILLO-H2

E3 &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4; ligases 26S proteasomes&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB300;&#xC0C1; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC778;&#xC2DD;&#xACFC; &#xC800;&#xD558;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC7AC;&#xC0DD;. Arkadia &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; TGF-&#xBCA0;&#xD0C0; &#xAC00;&#xC871; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294; E3 &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4; &#xB9AC;&#xAC00;&#xC758; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC608;&#xC81C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. TGF-&#xBCA0;&#xD0C0;&#xC758; C-&#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xB9C1; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC2DC;&#xADF8;&#xB110;&#xB9C1;&#xC758; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;&#xC758; &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4; &#xC885;&#xC18D; &#xC800;&#xD558;&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Arkadia &#xBC18;&#xC9C0; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC758; &#xAD6C;&#xC870; &#xBD84;&#xC11D;&#xC740; enzymatic &#xC18D;&#xC131;&#xC744; &#xBA85;&#xB8CC; &#xD558; &#xAC8C; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC21C;&#xC218; &#xD558; &#xACE0; &#xC62C;&#xBC14;&#xB974;&#xAC8C; &#xC811;&#xD78C; Arkadia &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC774; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0; &#xBC0F; Arkadia&#xC758; C-&#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xB9C1; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC758; &#xC815;&#xD654;&#xC5D0; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xC2DD; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;. &#xC218;&#xC6A9; &#xC131; &#xAC74;&#xC124;&#xC758; NMR &#xBD84;&#xC11D; &#xACE0;&#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; &#xAD6C;&#xC870; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xC801;&#xD569; &#xD55C; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC811;&#xD78C;&#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900;&#xB2E4;.

&#xACE0;&#xC218;&#xC775; &#xD45C;&#xD604;&#xACFC; Arkadia E3 &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4; &#xB9AC;&#xAC00; &#xBC18;&#xC9C0;-h 2 &#xC190;&#xAC00;&#xB77D; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC758; NMR &#xD2B9;&#xC131;&#xD654;.

E3&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x30EA;&#x30AC;&#x30FC;&#x30BC;&#x306F;&#x3001;26S&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x6A19;&#x7684;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x8A8D;&#x8B58;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5206;&#x89E3;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x306F;&#x3001;&#x7A4D;&#x6975;&#x7684;&#x306B;TGF-&#x3B2;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;E3&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x30EA;&#x30AC;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x4F8B;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;C&#x672B;&#x7AEF;&#x306E;RING&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;TGF-&#x3B2;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x8CA0;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x5206;&#x89E3;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x306E;RING&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x89E3;&#x6790;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x6027;&#x8CEA;&#x3092;&#x89E3;&#x660E;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x7D14;&#x7C8B;&#x306A;&#x3001;&#x6B63;&#x3057;&#x304F;&#x6298;&#x308A;&#x7573;&#x307E;&#x308C;&#x305F;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x751F;&#x7523;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x3068;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x306E;C&#x672B;&#x7AEF;RING&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x7CBE;&#x88FD;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6C34;&#x6EB6;&#x6027;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;NMR&#x89E3;&#x6790;&#x306F;&#x3001;&#x9AD8;&#x5206;&#x89E3;&#x80FD;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x7814;&#x7A76;&#x306B;&#x9069;&#x3057;&#x305F;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x6298;&#x308A;&#x7573;&#x307E;&#x308C;&#x305F;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3002;

&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;E3&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x30EA;&#x30AC;&#x30FC;&#x30BC;RING-H2&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x30AC;&#x30FC;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x9AD8;&#x53CE;&#x91CF;&#x767A;&#x73FE;&#x3068;NMR&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30AD;&#x30E3;&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30EA;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;

E3 &#x6CDB;&#x7D20;&#x8FDE;&#x63A5;&#x9176;&#x7531; 26S proteasomes &#x53D1;&#x6325;&#x5173;&#x952E;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x76EE;&#x6807;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x8BC6;&#x522B;&#x548C;&#x9000;&#x5316;&#x3002;Arkadia &#x662F;&#x7B2C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x793A;&#x4F8B;&#x7684; E3 &#x6CDB;&#x7D20;&#x8FDE;&#x63A5;&#x9176;&#x79EF;&#x6781;&#x89C4;&#x8303;&#x5BB6;&#x5EAD; TGF-&beta; &#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;&#x5B83;&#x8868;&#x660E;&#x8BF1;&#x4F7F;&#x6CDB;&#x7D20;&#x964D;&#x89E3;&#x7684; TGF-&beta; &#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8FC7;&#x5176; C &#x672B;&#x7AEF;&#x73AF;&#x57DF;&#x8D1F;&#x76D1;&#x7BA1;&#x673A;&#x6784;&#x3002;Arkadia &#x73AF;&#x57DF;&#x7ED3;&#x6784;&#x5206;&#x6790;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x9610;&#x660E;&#x5176;&#x9176;&#x5B66;&#x6027;&#x8D28;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x7814;&#x7A76;&#x9700;&#x8981;&#x7EAF;&#x548C;&#x6B63;&#x786E;&#x6298;&#x53E0; Arkadia &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x751F;&#x4EA7;&#x6548;&#x7387;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x4E2D;&#x5927;&#x80A0;&#x57C3;&#x5E0C;&#x6C0F;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x548C;&#x7EAF;&#x5316;&#x7684; Arkadia C &#x7EC8;&#x7AEF;&#x73AF;&#x57DF;&#x7684;&#x91CD;&#x7EC4;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x6784;&#x9020;&#x7684;&#x6838;&#x78C1;&#x5171;&#x632F;&#x5206;&#x6790;&#x63ED;&#x793A;&#x51FA;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x6298;&#x53E0;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x9002;&#x5408;&#x9AD8;&#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#x7ED3;&#x6784;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;

&#x4EA7;&#x91CF;&#x9AD8;&#x8868;&#x8FBE;&#x548C; Arkadia E3 &#x6CDB;&#x7D20;&#x8FDE;&#x63A5;&#x9176;&#x73AF; H2 &#x624B;&#x6307;&#x57DF;&#x7684;&#x6838;&#x78C1;&#x5171;&#x632F;&#x8868;&#x5F81;&#x3002;

E3 ubiquitin ligases play a key role in the recognition of target proteins and the degradation by 26S proteasomes. Arkadia is the first example of an E3 ubiquitin ligase that positively regulates TGF-beta family signaling. It has been shown to induce ubiquitin-dependent degradation of negative regulators of TGF-beta signaling through its C-terminal RING domain. Structural analysis of Arkadia RING domain is needed to elucidate its enzymatic properties. For such studies efficient production of pure and correctly folded Arkadia protein is required. Here we report the recombinant expression in Escherichia coli and purification of the C-terminal RING domain of Arkadia. NMR analysis of the soluble construct reveals a stable folded protein suitable for high resolution structural studies.

High yield expression and NMR characterization of Arkadia E3 ubiquitin ligase RING-H2 finger domain.

E3 ubiquitine ligases jouent un r&#xF4;le cl&#xE9; dans la reconnaissance des prot&#xE9;ines cibles et de la d&#xE9;gradation par les prot&#xE9;asomes 26S. Arkadia est le premier exemple d&#x26;#39;une ubiquitine ligase E3 qui r&#xE9;gule positivement la signalisation de la famille du TGF-b&#xEA;ta. Il a &#xE9;t&#xE9; montr&#xE9; pour induire la d&#xE9;gradation ubiquitine-d&#xE9;pendante des r&#xE9;gulateurs n&#xE9;gatifs de TGF-b&#xEA;ta de signalisation &#xE0; travers son domaine RING C-terminale. L&#x26;#39;analyse structurale du domaine RING Arkadia sont n&#xE9;cessaires pour &#xE9;lucider ses propri&#xE9;t&#xE9;s enzymatiques. Pour ces &#xE9;tudes une production efficace de prot&#xE9;ines Arkadia pur et correctement pli&#xE9;e est n&#xE9;cessaire. Nous rapportons ici l&#x26;#39;expression recombinante dans Escherichia coli et la purification du domaine RING C-terminale de Arkadia. L&#x26;#39;analyse par RMN de la construction r&#xE9;v&#xE8;le une prot&#xE9;ine soluble stable repli&#xE9;e adapt&#xE9;e aux &#xE9;tudes structurales &#xE0; haute r&#xE9;solution.

Expression &#xE0; haut rendement et la caract&#xE9;risation par RMN de Arkadia ligase E3 domaine en doigt RING ubiquitine-H2

E3-Ubiquitin-Verkn&uuml;pfung spielen eine Schl&uuml;sselrolle bei der Anerkennung von Zielproteinen sowie den Abbau von 26S Proteasomes. Arkadia ist das erste Beispiel f&uuml;r eine E3 Ubiquitin Ligase, das TGF-Beta Familie Signalisierung positiv reguliert. Es wurde nachgewiesen, Ubiquitin-abh&auml;ngige Abbau des negativen Regulatoren TGF-Beta zu signalisieren, durch seine C-Terminal RING-Dom&auml;ne zu veranlassen. Strukturanalyse von Arkadia RING Dom&auml;ne wird ben&ouml;tigt, um seine enzymatischen Eigenschaften herauszustellen. F&uuml;r solche Studien ist die effiziente Produktion von rein und korrekt gefalteten Arkadia Protein erforderlich. Hier berichten wir den rekombinanten Ausdruck in Escherichia coli und Reinigung der RING der C-terminalen Dom&auml;ne des Arkadia. NMR-Analyse der l&ouml;slichen Konstrukt offenbart eine stabile gefaltete Protein geeignet f&uuml;r hochaufl&ouml;sende strukturelle Studien.

High-Yield-Ausdruck und NMR-Charakterisierung von Arkadia E3 Ubiquitin Ligase RING-H2-Fingergebiet.

E3 ubiquitina ligasi giocano un ruolo chiave nel riconoscimento delle proteine bersaglio e la degradazione dai proteasomi 26S. Arkadia &egrave; il primo esempio di un E3 ubiquitina ligasi che regola positivamente la segnalazione famiglia TGF-beta. Essa ha dimostrato di indurre la degradazione ubiquitina-dipendente dei regolatori negativi del TGF-beta segnalazione attraverso il dominio C-terminale anello. Analisi strutturale del dominio Arkadia anello sono necessario per spiegare le propriet&agrave; enzimatiche. Per tali studi &egrave; necessaria un&#39;efficiente produzione di proteina Arkadia pura e correttamente piegata. Qui riportiamo l&#39;espressione ricombinante in Escherichia coli e purificazione del dominio C-terminale anello di Arkadia. Analisi NMR del costrutto solubile rivelano una proteina piegata stabile adatta per gli studi strutturali ad alta risoluzione.

Resa elevata espressione e caratterizzazione NMR del dominio di Arkadia E3 ubiquitina ligasi anello-H2 dito.

TGF-&beta; &#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC; repressors SnoN &#x548C;&#x6ED1;&#x96EA;&#x4F24;&#x52BF;&#x4E25;&#x91CD;&#x5377;&#x5165;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x764C;&#x75C7;&#x3002;

TGF-&beta; repressors SnoN &#x548C;&#x6ED1;&#x96EA;&#x662F;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x5927;&#x80A0;&#x764C;&#x53D8;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x53D7;&#x7275;&#x8FDE;&#x3002;

The TGF-beta signaling repressors SnoN and Ski have been critically implicated in human cancer.

TGF-beta repressors SnoN and Ski are implicated in human colorectal carcinogenesis.

Les r&#xE9;presseurs de signalisation TGF-b&#xEA;ta SnoN et Ski ont &#xE9;t&#xE9; gravement impliqu&#xE9;s dans le cancer humain.

TGF-b&#xEA;ta SnoN r&#xE9;presseurs et de ski sont impliqu&#xE9;s dans la canc&#xE9;rogen&#xE8;se humaine colorectal

Die TGF-Beta-Signalling-Repressoren SnoN und Ski haben kritisch in menschlichen Krebs verwickelt.

TGF-Beta-Repressoren SnoN und Ski sind in menschlichen Darm-Karzinogenese beteiligt.

I repressori di segnalazione di TGF-beta SnoN e sci sono stati criticamente implicati nel cancro umano.

Repressori TGF-beta SnoN e sci sono implicati nella carcinogenesi colorettale umano.

TGF-&#x3B2;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC;SnoN&#x3068;&#x30B9;&#x30AD;&#x30FC;&#x5834;&#x306F;&#x3001;&#x6279;&#x5224;&#x7684;&#x306B;&#x30D2;&#x30C8;&#x764C;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

TGF-&#x3B2;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC;&#x306E;SnoN&#x3068;&#x30B9;&#x30AD;&#x30FC;&#x5834;&#x306F;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;&#x5927;&#x8178;&#x767A;&#x304C;&#x3093;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;

&#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC554; TGF-&#xBCA0;&#xD0C0; &#xC2E0;&#xD638; repressors SnoN &#xBC0F; &#xC2A4;&#xD0A4; &#xBE44;&#xD310;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xB418;&#xC5B4;.

TGF-&#xBCA0;&#xD0C0; repressors SnoN &#xBC0F; &#xC2A4;&#xD0A4; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xB300; &#xC7A5; &#xBC1C;&#xC554;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Los represores de se&#xF1;alizaci&#xF3;n de TGF-beta y SnoN esqu&#xED; han resultado gravemente implicado en el c&#xE1;ncer humano.

TGF-beta SnoN represores y de esqu&#xED; est&#xE1;n implicados en la carcinog&#xE9;nesis colorrectal humano

&#x8F6C;&#x5316;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50; (TGF) &beta; &#x4FE1;&#x53F7;&#x5BB6;&#x65CF;&#x5305;&#x62EC; morphogens&#xFF0C;Nodal &#x548C;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7D20;&#xFF0C;&#x5982;&#x5728;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x53D1;&#x80B2;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x804C;&#x80FD;&#x3002;Morphogen &#x7684;&#x6D53;&#x5EA6;&#x662F;&#x54CD;&#x5E94;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x547D;&#x8FD0;&#x51B3;&#x5B9A;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x3002;Smad2 &#x548C; Smad3 &#x662F;&#x6548;&#x5E94;&#x5668; Nodal/&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7D20;&#x5206;&#x884C;&#x7684; TGFbeta &#x4FE1;&#x53F7;&#xFF1A; &#x4ED6;&#x4EEC;&#x6240;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#xFF0C;&#x8FDB;&#x5165;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x548C;&#x76F4;&#x63A5;&#x8F6C;&#x5F55;&#x9776;&#x57FA;&#x56E0;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x4E00;&#x76F4;&#x6CA1;&#x6709;&#x968F;&#x7740;&#x65F6;&#x95F4;&#x7684;&#x63A8;&#x79FB;&#x5173;&#x8054; Smad2/3 &#x6FC0;&#x6D3B;&#x6C34;&#x5E73;&#x4E0E;&#x53D1;&#x5C55;&#x89D2;&#x5EA6;&#x7684;&#x5185;&#x6E90;&#x6027;&#x76EE;&#x6807;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x6A21;&#x5F0F;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7528;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72; (ES) &#x7EC6;&#x80DE;&#x6765;&#x521B;&#x5EFA;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x5373;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7531;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x4E00;&#x6D3B;&#x52A8;&#x53D7;&#x4F53; (Alk4 *) &#x548C;&#x963B;&#x6B62;&#x4E13;&#x95E8; Smad2/3 &#x6FC0;&#x6D3B;&#x6291;&#x5236;&#x5242; &#xFF08;SB 431542) &#x5904;&#x7406;&#x6FC0;&#x6D3B; Smad2/3 &#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#x3002;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x548C;&#x9547;&#x538B;&#x671F;&#x95F4;&#x5728;&#x4E0D;&#x540C;&#x65F6;&#x95F4;&#x70B9;&#x7684;&#x5FAE;&#x9635;&#x5217;&#x5206;&#x6790;&#x4E86;&#x8F6C;&#x5F55;&#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A;&#x5FE0;&#x5B9E;&#x5730;&#x9075;&#x5FAA;&#x7684;&#x51E0;&#x4E2A;&#x57FA;&#x56E0;&#x548C;&#x53EF;&#x590D;&#x7528;&#x7684; Smad2/3 &#x6FC0;&#x6D3B;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#x3002;&#x4E8C;&#x5341;&#x4E03;&#x7684;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x662F;&#x65B0;&#x9896;&#x548C; Smad2/3 &#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x4E0B;&#x6E38;&#x7684;&#x65E9;&#x671F;&#x80DA;&#x80CE;&#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x56DE;&#x5E94; Smad2/3 &#x6FC0;&#x6D3B;&#x6CA1;&#x6709;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5408;&#x6210;&#x7684;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x88AB;&#x89C6;&#x4E3A;&#x76F4;&#x63A5;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ACB;&#x5373;&#x53CD;&#x5E94;&#x57FA;&#x56E0;&#x5305;&#x62EC;&#x80DE;&#x5185;&#x8D1F;&#x53CD;&#x9988;&#x56E0;&#x7D20;&#xFF0C;&#x5982; SnoN &#x548C;&#x6211;-Smad7&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x6291;&#x5236; Smad2/3 &#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5176;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x5E76;&#x4E0D;&#x5BFC;&#x81F4;&#x968F;&#x540E;&#x9547;&#x538B;&#x7684;&#x9776;&#x57FA;&#x56E0;&#x968F;&#x65F6;&#x95F4;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E;&#x8FD9;&#x79CD;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x53CD;&#x9988;&#x662F;&#x4F4E;&#x6548;&#x7684;&#x5728;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6216;&#x5B83;&#x62B5;&#x6D88; Arkadia &#x4ECB;&#x5BFC;&#x6CDB;&#x7D20;&#x964D;&#x89E3;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x76EE;&#x524D; ES &#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4EE5;&#x53CA;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6570;&#x636E;&#x5E93;&#xFF0C;&#x5305;&#x542B;&#x6210;&#x5343;&#x4E0A;&#x4E07; Smad2/3 &#x6FC0;&#x6D3B;&#x6A21;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x4E0B;&#x6E38;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x8C31;&#x4E2D;&#x5B58;&#x5728;&#x6216;&#x7F3A;&#x5C11;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x5408;&#x6210;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A;&#x9075;&#x5FAA;&#x6309;&#x6BD4;&#x4F8B;&#x548C; Smad2/3 &#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x9AD8;&#x7075;&#x654F;&#x5EA6;&#x53D8;&#x5316;&#x4E0E; 15-30 &#x5C0F;&#x65F6;&#x4EE5;&#x4E0A;&#x7684;&#x521D;&#x7EA7;&#x76EE;&#x6807;&#x57FA;&#x56E0;&#x3002;&#x4E0A;&#x8FF0;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x548C;&#x8D44;&#x6E90;&#x63D0;&#x4F9B;&#x7684;&#x5DE5;&#x5177;&#x6765;&#x7814;&#x7A76; morphogen &#x5728;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x68AF;&#x5EA6;&#x7684; Smad2/3 &#x6FC0;&#x6D3B;&#x76F4;&#x63A5;&#x53D8;&#x6210;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x9776;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#x3002;

The Transforming Growth Factor (TGF) beta signalling family includes morphogens, such as Nodal and Activin, with important functions in vertebrate development. The concentration of the morphogen is critical for fate decisions in the responding cells. Smad2 and Smad3 are effectors of the Nodal/Activin branch of TGFbeta signalling: they are activated by receptors, enter the nucleus and directly transcribe target genes. However, there have been no studies correlating levels of Smad2/3 activation with expression patterns of endogenous target genes in a developmental context over time. We used mouse Embryonic Stem (ES) cells to create a system whereby levels of activated Smad2/3 can be manipulated by an inducible constitutively active receptor (Alk4*) and an inhibitor (SB-431542) that blocks specifically Smad2/3 activation. The transcriptional responses were analysed by microarrays at different time points during activation and repression. We identified several genes that follow faithfully and reproducibly the Smad2/3 activation profile. Twenty-seven of these were novel and expressed in the early embryo downstream of Smad2/3 signalling. As they responded to Smad2/3 activation in the absence of protein synthesis, they were considered direct. These immediate responsive genes included negative intracellular feedback factors, like SnoN and I-Smad7, which inhibit the transcriptional activity of Smad2/3. However, their activation did not lead to subsequent repression of target genes over time, suggesting that this type of feedback is inefficient in ES cells or it is counteracted by mechanisms such as ubiquitin-mediated degradation by Arkadia. Here we present an ES cell system along with a database containing the expression profile of thousands of genes downstream of Smad2/3 activation patterns, in the presence or absence of protein synthesis. Furthermore, we identify primary target genes that follow proportionately and with high sensitivity changes in Smad2/3 levels over 15-30 hours. The above system and resource provide tools to study morphogen function in development.

Graded Smad2/3 activation is converted directly into levels of target gene expression in embryonic stem cells.

Le facteur de croissance transformant b&#xEA;ta (TGF) de la famille de signalisation b&#xEA;ta inclut morphog&#xE8;nes, comme Nodal et l&#x26;#39;activine, avec des fonctions importantes dans le d&#xE9;veloppement des vert&#xE9;br&#xE9;s. La concentration du morphog&#xE8;ne est essentiel pour les d&#xE9;cisions sort dans les cellules qui r&#xE9;pondent. Smad2 et Smad3 sont des effecteurs de la branche Nodal / activine de TGFbeta signalisation: ils sont activ&#xE9;s par des r&#xE9;cepteurs, p&#xE9;n&#xE9;trer dans le noyau et directement transcrire les g&#xE8;nes cibles. Cependant, il n&#x26;#39;ya pas eu d&#x26;#39;&#xE9;tudes corr&#xE9;lant les niveaux de Smad2 / 3 d&#x26;#39;activation avec des motifs d&#x26;#39;expression de g&#xE8;nes cibles endog&#xE8;nes dans un contexte de d&#xE9;veloppement au fil du temps. Nous avons utilis&#xE9; souches embryonnaires de souris (ES) cellules pour cr&#xE9;er un syst&#xE8;me dans lequel les niveaux de Smad2 activ&#xE9; / 3 peut &#xEA;tre manipul&#xE9;e par un r&#xE9;cepteur actif constitutivement inductible (Alk4 *) et un inhibiteur (SB-431542) qui bloque sp&#xE9;cifiquement Smad2 / 3 d&#x26;#39;activation. Les r&#xE9;ponses transcriptionnelles ont &#xE9;t&#xE9; analys&#xE9;s par puces &#xE0; ADN &#xE0; diff&#xE9;rents moments pendant l&#x26;#39;activation et la r&#xE9;pression. Nous avons identifi&#xE9; plusieurs g&#xE8;nes qui suivent fid&#xE8;lement et de fa&#xE7;on reproductible le profil Smad2 / 3 d&#x26;#39;activation. Vingt-sept d&#x26;#39;entre eux &#xE9;taient nouveaux et ont exprim&#xE9; dans les embryons pr&#xE9;coces de aval de signalisation Smad2 / 3. Comme ils ont r&#xE9;pondu &#xE0; Smad2 / 3 d&#x26;#39;activation en l&#x26;#39;absence de la synth&#xE8;se des prot&#xE9;ines, ils &#xE9;taient consid&#xE9;r&#xE9;s comme directement. Ces g&#xE8;nes imm&#xE9;diats sensibles inclus des facteurs n&#xE9;gatifs de r&#xE9;troaction intracellulaires, comme SnoN et I-Smad7, qui inhibent l&#x26;#39;activit&#xE9; transcriptionnelle de Smad2 / 3. Cependant, leur activation ne conduisent pas &#xE0; la r&#xE9;pression subs&#xE9;quente de g&#xE8;nes cibles au fil du temps, ce qui sugg&#xE8;re que ce type de r&#xE9;troaction est inefficace dans des cellules ES ou il est contrebalanc&#xE9; par des m&#xE9;canismes tels que la d&#xE9;gradation de l&#x26;#39;ubiquitine par Arkadia. Ici pr&#xE9;senter un syst&#xE8;me de cellules ES avec une base de donn&#xE9;es contenant le profil d&#x26;#39;expression de milliers de g&#xE8;nes en aval de structures d&#x26;#39;activation Smad2 / 3, en pr&#xE9;sence ou en absence de la synth&#xE8;se des prot&#xE9;ines. En outre, nous avons identifier les g&#xE8;nes cibles primaires qui suivent proportionnellement et avec les changements de sensibilit&#xE9; &#xE9;lev&#xE9;s dans Smad2 / 3 niveaux plus 15-30 heures. Le syst&#xE8;me ci-dessus et des ressources de fournir des outils pour &#xE9;tudier la fonction morphog&#xE8;ne dans le d&#xE9;veloppement.

Not&#xE9; Smad2 / 3 d&#x26;#39;activation est convertie directement en niveaux d&#x26;#39;expression g&#xE9;nique cibl&#xE9;e dans les cellules souches embryonnaires

Die Signalgebung Transforming Growth Factor (TGF) Beta-Familie umfasst Morphogens, wie Nodal und Activin, mit wichtigen Funktionen in vertebrate Entwicklung. Die Konzentration der Morphogen ist entscheidend f&uuml;r Schicksal Entscheidungen in den antwortenden Zellen. Smad2 und Smad3 sind Effektoren des Zweiges Nodal/Activin TGFbeta signalisieren: sie werden von Rezeptoren aktiviert, geben Sie den Kern und Zielgene direkt zu transkribieren. Jedoch gab es keine Studien, die Korrelation von Konzentrationen von Smad2/3 Aktivierung mit Ausdrucksmuster endogene Zielgene im entwicklungspolitischen Kontext im Laufe der Zeit. Wir verwendeten Maus embryonale Stammzellen (ES) Zellen, um ein System zu schaffen, wobei Ebenen der aktivierten Smad2/3 manipuliert werden kann, indem ein durch Induktion konstitutiv aktive Rezeptor (Alk4 *) und einen Inhibitor (SB-431542), der speziell Smad2/3 Aktivierung blockiert. Die transkriptionelle Antworten wurden von Microarrays zu verschiedenen Zeitpunkten w&auml;hrend der Aktivierung und Unterdr&uuml;ckung analysiert. Wir identifiziert mehrere Gene, die treu zu folgen und reproduzierbar die Smad2/3-Aktivierung-Profil. Siebenundzwanzig davon waren Roman und in der fr&uuml;hen Embryo stromabw&auml;rts Smad2/3 Signalisierung zum Ausdruck. Wie sie auf Smad2/3 Aktivierung in Ermangelung der Proteinsynthese reagierte, galten sie direkte. Diese sofortige reagieren Gene enthalten negative R&uuml;ckmeldungen der intrazellul&auml;ren Faktoren, wie SnoN und Smad7, welche die transkriptionelle Aktivit&auml;t der Smad2/3 hemmen. Jedoch f&uuml;hrte ihre Aktivierung nicht zu nachfolgenden Unterdr&uuml;ckung Zielgene im Laufe der Zeit darauf hindeutet, dass diese Art von Feedback ineffizient, in ES-Zellen ist oder es wird durch Mechanismen wie Ubiquitin vermittelten Abbaus durch Arkadia entgegengewirkt. Hier pr&auml;sentieren wir ein ES-Zellen-System zusammen mit einer Datenbank, die mit das Ausdruck-Profil Tausender Gene stromabw&auml;rts von Smad2/3 Aktivierung Mustern, in der Anwesenheit oder Abwesenheit der Proteinsynthese. Dar&uuml;ber hinaus identifizieren wir prim&auml;re Zielgene, die proportional und mit hoher Empfindlichkeit &Auml;nderungen in Smad2/3 Ebenen &uuml;ber 15-30 Stunden folgen. Die oben genannten System und Ressourcen bieten Tools zum Morphogen Funktion in der Entwicklung zu untersuchen.

Article	Year
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Pax6 is misexpressed in Sox1 null lens fiber cells. Gene expression patterns : GEP\| PubMed ID: 17306631	2007
Arkadia enhances Nodal/TGF-beta signaling by coupling phospho-Smad2/3 activity and turnover. PLoS biology\| PubMed ID: 17341133	2007
Arkadia induces degradation of SnoN and c-Ski to enhance transforming growth factor-beta signaling. The Journal of biological chemistry\| PubMed ID: 17510063	2007
Arkadia activates Smad3/Smad4-dependent transcription by triggering signal-induced SnoN degradation. Molecular and cellular biology\| PubMed ID: 17591695	2007
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High yield expression and NMR characterization of Arkadia E3 ubiquitin ligase RING-H2 finger domain. Biochemical and biophysical research communications\| PubMed ID: 19032943	2009
TGF-beta repressors SnoN and Ski are implicated in human colorectal carcinogenesis. Cellular oncology : the official journal of the International Society for Cellular Oncology\| PubMed ID: 19096149	2009
Graded Smad2/3 activation is converted directly into levels of target gene expression in embryonic stem cells. PloS one\| PubMed ID: 19172185	2009
The TGF-Î² signaling modulators TRAP1/TGFBRAP1 and VPS39/Vam6/TLP are essential for early embryonic development. Immunobiology\| PubMed ID: 20961651	2011
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Enhancement of TGF-Î² signaling responses by the E3 ubiquitin ligase Arkadia provides tumor suppression in colorectal cancer. Cancer research\| PubMed ID: 21998011	2011

Vasso Episkopou

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