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Assessment of the Synaptic Interface of Primary Human T Cells from Peripheral Blood and Lymphoid Tissue

The current understanding of the dynamics and structural features of T-cell synaptic interfaces has been largely determined through the use of ...

Thomas Jefferson University

Antibodies recognizing peptide bound to a major histocompatibility complex (MHC) protein usually have a higher affinity for the composite peptide.MHC (pMHC) ligand than T cell receptors (TCR) with the same specificity. Because the solvent-accessible peptide area constitutes only a small portion of the contacting pMHC surface, we hypothesized that the contribution of the MHC moiety to the TCR-pMHC complex stability is limited, ensuring a small increment of the binding energy delivered by the peptide to be distinguishable by the TCR or the peptide-specific antibody. This suggests that the gain in affinity of the antibody-pMHC interaction can be achieved through an increase in the on-rate without a significant change in the off-rate of the interaction. To test the hypothesis, we have analyzed the binding of an ovalbumin peptide (pOV8) and its variants associated with soluble H-2Kb protein to the 25-D1.16 monoclonal antibody and compared it with the binding of the same pMHC complexes to the OT-1 TCR. This comparison revealed a substantially higher on-rate of the antibody-pMHC interaction compared with the TCR-pMHC interaction. In contrast, both the antibody and the TCR-pMHC complexes exhibited comparably fast off-rates. Sequencing of the 25-D1.16 VH and VL genes showed that they have very few somatic mutations and those occur mainly in framework regions. We propose that the above features constitute a signature of the recognition of MHC-bound peptide antigens by TCR and TCR-like antibodies, which could explain why the latter are rarely produced in vivo.

Antibody specific for the peptide.major histocompatibility complex. Is it T cell receptor-like?

&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x9644;&#x5206;&#x5B50; (&#x7EFC;&#x5408;) &#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x529F;&#x80FD;&#x76F8;&#x5173;&#x6297;&#x539F;-1 (LFA-1&#xFF09; &#x4E92;&#x52A8;&#x4FC3;&#x8FDB; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x6297;&#x539F;&#x53D7;&#x4F53; (TCR)-&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x6740;&#x5BB3;&#x3002;&#x5256;&#x6790; TCR &#x548C;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x529F;&#x80FD;&#x76F8;&#x5173;&#x6297;&#x539F; 1 &#x7684;&#x8D21;&#x732E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BA1;&#x7B97;&#x6EB6;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x548C;&#x9897;&#x7C92;&#x91CA;&#x653E;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027; T &#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE; (CTL)&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x9897;&#x7C92;&#x518D;&#x5206;&#x914D;&#x548C;&#x5F62;&#x6001;&#x7684; CTL &#x4E2D;&#x5B58;&#x5728;&#x6216;&#x7F3A;&#x5C11;&#x7684; LFA 1 &#x53C2;&#x4E0E;&#x914D;&#x4F53; TCR &#x81EA;&#x7136;&#x523A;&#x6FC0;&#x4E86;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x5176;&#x4ED6;&#x7C98;&#x9644;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x4F8B;&#x5982; CD2 CD58 &#x7684;&#x4E92;&#x52A8;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x66FF;&#x6362;&#x7684; LFA-1 &#x6765;&#x89E6;&#x53D1; CTL &#x8131;&#x9897;&#x7C92;&#xFF0C;&#x751F;&#x4EA7; LFA 1 &#x7ED3;&#x624E;&#x662F;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6216;&#x7F3A;&#x7684;&#x6709;&#x6548;&#x76EE;&#x6807;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6EB6;&#x89E3;&#x91CA;&#x653E;&#x7684;&#x9897;&#x7C92;&#x3002;LFA &#x4ECB;&#x5BFC; 1 &#x7C98;&#x9644;&#x5230;&#x73BB;&#x7483;&#x652F;&#x6301;&#x7684;&#x53CC;&#x5C42;&#x7684;&#x66F4;&#x5927;&#x7684;&#x4EA4;&#x754C;&#x533A;&#x57DF;&#xFF0C;&#x7531; LFA 1 &#x9694;&#x79BB;&#x548C;&#x66F4;&#x7D27;&#x51D1;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x5F62;&#x72B6;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x662F;&#x542B;&#x6709;&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x7C98;&#x9644;&#x5206;&#x5B50;-1 &#x4E0E;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684; CD2 &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7C98;&#x9644;&#x5230;&#x5305;&#x542B; CD58 &#x7684;&#x53CC;&#x5C42;&#x76F8;&#x6BD4;&#x3002;&#x8F83;&#x5927;&#x7684;&#x63A5;&#x89E6;&#xFF0C;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x7C98;&#x9644;&#x5206;&#x5B50; 1 &#x786E;&#x5B9A;&#x9897;&#x7C92;&#x754C;&#x9762;&#x9644;&#x8FD1;&#x7684;&#x72EC;&#x7279;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x63D0;&#x4F9B; LFA 1 &#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x4E0D;&#x540C;&#x4FE1;&#x53F7;&#x57FA;&#x672C;&#x6307;&#x6325;&#x91CA;&#x653E;&#x6EB6;&#x9897;&#x7C92;&#x8868;&#x9762;&#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x8F74;&#x627F;&#x9776;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5BF9;&#x8C03;&#x89E3;&#x6709;&#x6548;&#x7834;&#x574F;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7531; CTL &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x3002;

&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x529F;&#x80FD;&#x76F8;&#x5173;&#x6297;&#x539F;-1 &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6BD2; T &#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6EB6;&#x7684;&#x6709;&#x6548;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7684;&#x72EC;&#x7279;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Lymphocyte function-associated antigen-1 (LFA-1) interaction with intercellular adhesion molecules (ICAMs) facilitates T cell antigen receptor (TCR)-mediated killing. To dissect TCR and LFA-1 contributions, we evaluated cytolytic activity and granule release by cytotoxic T lymphocytes (CTL) as well as intracellular granule redistribution and morphology of CTL stimulated with natural TCR ligand in the presence or absence of LFA-1 engagement. Although other adhesion mechanisms, e.g., CD2-CD58 interaction, could substitute for LFA-1 to trigger CTL degranulation, productive LFA-1 ligation was indispensable for effective target cell lysis by the released granules. LFA-1-mediated adhesion to glass-supported bilayers containing intercellular adhesion molecule-1 was characterized by a much larger junction area, marked by LFA-1 segregation, and a more compact cell shape compared with those observed for CD2-mediated adhesion to bilayers containing CD58. A larger contact induced by intercellular adhesion molecule 1 determined a unique positioning of granules near the interface. These data provide evidence that LFA-1 delivers a distinct signal essential for directing released cytolytic granules to the surface of antigen-bearing target cells to mediate the effective destruction of these cells by CTL.

Distinct role of lymphocyte function-associated antigen-1 in mediating effective cytolytic activity by cytotoxic T lymphocytes.

La fonction des lymphocytes-antig&#xE8;ne associ&#xE9; &#xE0;-1 (LFA-1) l&#x26;#39;interaction avec des mol&#xE9;cules d&#x26;#39;adh&#xE9;sion intercellulaire (ICAM) facilite r&#xE9;cepteur d&#x26;#39;antig&#xE8;ne de cellule T (TCR) &#xE0; m&#xE9;diation mort. Afin de diss&#xE9;quer TCR et LFA-1 contributions, nous avons &#xE9;valu&#xE9; l&#x26;#39;activit&#xE9; cytolytique et la lib&#xE9;ration des granules par les lymphocytes T cytotoxiques (CTL), ainsi que la redistribution des granules intracellulaires et la morphologie des CTL stimul&#xE9;s par TCR ligand naturel dans la pr&#xE9;sence ou l&#x26;#39;absence de LFA-1 d&#x26;#39;engagement. Bien que les m&#xE9;canismes d&#x26;#39;adh&#xE9;sion d&#x26;#39;autres, par exemple, CD2-CD58 interaction, pouvait se substituer &#xE0; LFA-1 pour d&#xE9;clencher la d&#xE9;granulation des CTL, productive LFA-1 de ligature a &#xE9;t&#xE9; indispensable pour la lyse des cellules cibles efficaces par les granules lib&#xE9;r&#xE9;s. Bicouches LFA-1 m&#xE9;di&#xE9;e par l&#x26;#39;adh&#xE9;rence au verre-support&#xE9;s contenant la mol&#xE9;cule-1 d&#x26;#39;adh&#xE9;sion intercellulaire a &#xE9;t&#xE9; caract&#xE9;ris&#xE9; par une zone de jonction beaucoup plus grande, marqu&#xE9;e par la s&#xE9;gr&#xE9;gation de LFA-1, et une forme plus compacte de cellules par rapport &#xE0; celles observ&#xE9;es pour CD2-m&#xE9;diation adh&#xE9;sion &#xE0; bicouches contenant CD58. Un contact plus importante induite par la mol&#xE9;cule d&#x26;#39;adh&#xE9;sion intercellulaire 1 d&#xE9;termin&#xE9;e d&#x26;#39;un positionnement unique de granul&#xE9;s pr&#xE8;s de l&#x26;#39;interface. Ces donn&#xE9;es fournissent la preuve que LFA-1 d&#xE9;livre un signal distinct essentiel pour diriger lib&#xE9;r&#xE9;s granules cytolytiques &#xE0; la surface des cellules cibles portant l&#x26;#39;antig&#xE8;ne &#xE0; la m&#xE9;diation de la destruction effective de ces cellules par les CTL.

R&#xF4;le distinct de la fonction lymphocytaire-antig&#xE8;ne-1 associ&#xE9; &#xE0; la m&#xE9;diation efficace l&#x26;#39;activit&#xE9; cytolytique par les lymphocytes T cytotoxiques

Distinct Rolle Lymphocyten-Funktions-assoziiertes Antigen-1 bei der Vermittlung wirksame zytolytische Aktivit&#xE4;t von zytotoxischen T-Lymphozyten.

Recettore dell&#39;antigene delle cellule T (TCR) facilita l&#39;interazione function-associated antigen-1 (LFA-1) dei linfociti con molecole di adesione intercellulare (ICAMs)-mediata uccidendo. Per sezionare i contributi TCR e LFA-1, abbiamo valutato citolitica rilascio attivit&agrave; e granulo da linfociti T citotossici (CTL), come pure la ridistribuzione di granulo intracellulare e morfologia di CTL stimolato con naturale ligando TCR in presenza o assenza di impegno di LFA-1. Anche se altri meccanismi di adesione, ad esempio, interazione CD2-CD58, potrebbero sostituire per LFA-1 attivare la degranulazione CTL, produttivo LFA-1 legatura era indispensabile per la lisi delle cellule bersaglio efficace da granuli rilasciati. Adesione LFA-1-mediata a bilayer supportati da vetro contenenti molecola di adesione intercellulare-1 &egrave; stato caratterizzato da un&#39;area pi&ugrave; vasta derivazione, segnata dalla segregazione di LFA-1 e una forma di cella pi&ugrave; compatta rispetto a quelli osservati per l&#39;adesione-CD2-mediata a bilayer contenenti CD58. Un maggiore contatto indotto dalla molecola di adesione intercellulare 1 determinato un posizionamento unico dei granuli vicino l&#39;interfaccia. Questi dati forniscono prove che LFA-1 fornisce un segnale distinto essenziale per dirigere rilasciati citolitica granuli sulla superficie delle cellule bersaglio antigene-cuscinetto per mediare l&#39;effettiva distruzione di queste cellule da CTL.

Ruolo distinto di linfociti function-associated antigen-1 nella mediazione efficace attivit&agrave; citolitica dai linfociti T citotossici.

&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#x6A5F;&#x80FD;&#x95A2;&#x9023;&#x6297;&#x539F;1&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x63A5;&#x7740;&#x5206;&#x5B50;&#xFF08;ICAMs&#xFF09;&#x3068;&#xFF08;LFA-1&#xFF09;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x304C;T&#x7D30;&#x80DE;&#x6297;&#x539F;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#xFF08;TCR&#xFF09;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x6BBA;&#x5BB3;&#x3092;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; TCR&#x3068;LFA-1&#x306E;&#x8CA2;&#x732E;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x50B7;&#x5BB3;&#x6027;T&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#xFF08;CTL&#xFF09;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;LFA-1&#x5A5A;&#x7D04;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x975E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x81EA;&#x7136;&#x306E;TCR&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x3067;&#x523A;&#x6FC0;&#x3057;&#x305F;CTL&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x9846;&#x7C92;&#x306E;&#x518D;&#x914D;&#x5E03;&#x3084;&#x5F62;&#x614B;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x6EB6;&#x89E3;&#x6D3B;&#x6027;&#x3068;&#x9846;&#x7C92;&#x653E;&#x51FA;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4ED6;&#x306E;&#x63A5;&#x7740;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x4F8B;&#x3048;&#x3070;&#x3001;CD2-CD58&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;&#x3001;CTL&#x9846;&#x7C92;&#x3092;&#x30C8;&#x30EA;&#x30AC;&#x3059;&#x308B;LFA-1&#x306E;&#x4EE3;&#x308F;&#x308A;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3082;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x751F;&#x7523;&#x6027;&#x306E;LFA-1&#x306E;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B2;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x304C;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x9846;&#x7C92;&#x3067;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306A;&#x6A19;&#x7684;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6EB6;&#x89E3;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x63A5;&#x7740;&#x3092;&#x542B;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x30AC;&#x30E9;&#x30B9;&#x3067;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x4E8C;&#x91CD;&#x5C64;&#x3078;&#x306E;LFA-1&#x5A92;&#x4ECB;&#x63A5;&#x7740;&#x5206;&#x5B50;-1&#x306F;LFA-1&#x5206;&#x96E2;&#x3057;&#x3001;&#x4E8C;&#x91CD;&#x5C64;&#x3078;&#x306E;CD2&#x4ECB;&#x5728;&#x6027;&#x306E;&#x63A5;&#x7740;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3082;&#x306E;&#x3068;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x30C8;&#x306A;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x5F62;&#x72B6;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x306F;&#x308B;&#x304B;&#x306B;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x63A5;&#x5408;&#x9762;&#x7A4D;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;CD58&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x63A5;&#x7740;&#x5206;&#x5B50;1&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x63A5;&#x89E6;&#x304C;&#x754C;&#x9762;&#x4ED8;&#x8FD1;&#x9846;&#x7C92;&#x306E;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x306A;&#x30DD;&#x30B8;&#x30B7;&#x30E7;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;LFA-1&#x304C;CTL&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306A;&#x7834;&#x58CA;&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x6297;&#x539F;&#x6709;&#x5229;&#x5B50;&#x6A19;&#x7684;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x653E;&#x51FA;&#x7D30;&#x80DE;&#x50B7;&#x5BB3;&#x9846;&#x7C92;&#x3092;&#x5C0E;&#x304F;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5FC5;&#x9808;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x7D30;&#x80DE;&#x50B7;&#x5BB3;&#x6027;T&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x6EB6;&#x89E3;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#x6A5F;&#x80FD;&#x95A2;&#x9023;&#x6297;&#x539F;1&#x306E;&#x660E;&#x78BA;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;

&#xC138;&#xD3EC; &#xC811;&#xCC29; &#xBD84;&#xC790; (ICAMs)&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xB9BC;&#xD504; &#xAD6C; &#xAE30;&#xB2A5; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xD56D; &#xC6D0;-1 (LFA-1) &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xC6A9;&#xC774; &#xD558; &#xAC8C; T &#xC138;&#xD3EC; &#xD56D; &#xC6D0; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (TCR)-&#xC8FD;&#xC774; &#xC911;&#xC7AC;. TCR&#xACFC; LFA-1 &#xAE30;&#xC5EC; &#xD574; &#xBD80;, &#xC6B0;&#xB9AC; cytotoxic T &#xC138;&#xD3EC; (CTL) &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4;&#xACFC; &#xB9BD; &#xC7AC;&#xBC30;&#xD3EC; cytolytic &#xD65C;&#xB3D9; &#xBC0F;&#xACFC; &#xB9BD; &#xCD9C;&#xC2DC; &#xD3C9;&#xAC00; &#xBC0F; CTL&#xC758; &#xD615;&#xD0DC;&#xD559; LFA-1&#xC758; &#xC874;&#xC7AC; &#xC720;&#xBB34;&#xC5D0; &#xC790;&#xC5F0; TCR ligand&#xC640; &#xC790;&#xADF9;. &#xB2E4;&#xB978; &#xC811;&#xCC29; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;, &#xC608;&#xB97C; &#xB4E4;&#xC5B4;, c d 2-CD58 &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC740; CTL degranulation &#xD2B8;&#xB9AC;&#xAC70; LFA-1&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB300;&#xCCB4;&#xD560; &#xC218;, &#xBE44;&#xB85D; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC131; LFA-1 &#xACB0; &#xCC30; &#xCD9C;&#xC2DC; &#xB41C;&#xACFC; &#xB9BD;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC778; &#xB300;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC6A9; &#xD574;&#xB97C; &#xC704;&#xD574; &#xBD88;&#xAC00;&#xACB0; &#xD588;&#xB2E4;. Cd58&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; bilayers c d 2&#xB97C; &#xC911;&#xC7AC; &#xC811;&#xCC29;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xAD00;&#xCC30; &#xADF8; &#xC720;&#xB9AC; &#xC9C0;&#xC6D0; bilayers&#xB294; &#xD6E8;&#xC52C; &#xB354; &#xD070; &#xC811;&#xD569; &#xC601;&#xC5ED;, LFA-1 &#xBD84;&#xB9AC; &#xBC0F; &#xB354; &#xB9CE;&#xC740; &#xC18C;&#xD615; &#xC140; &#xBAA8;&#xC591;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC811;&#xCC29; &#xBD84;&#xC790;-1 &#xD2B9;&#xC9D5; &#xC774;&#xC5C8;&#xB2E4; LFA-1 &#xC911;&#xC7AC; &#xC811;&#xCC29; &#xB825; &#xBE44;&#xAD50;. &#xD070; &#xC5F0;&#xB77D;&#xCC98; &#xC138;&#xD3EC; &#xC811;&#xCC29; &#xBD84;&#xC790; 1&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C;&#xACFC; &#xB9BD; &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xC774;&#xC2A4; &#xADFC;&#xCC98;&#xC758; &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; &#xC704;&#xCE58;&#xB97C; &#xACB0;&#xC815;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; LFA-1 CTL&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC774;&#xB4E4;&#xC774; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801; &#xD30C;&#xAD34; &#xC911;&#xC7AC; &#xD56D; &#xC6D0; &#xBCA0;&#xC5B4;&#xB9C1; &#xB300;&#xC0C1; &#xC140;&#xC758; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xCD9C;&#xC2DC; &#xB41C; cytolytic&#xACFC; &#xB9BD; &#xC5F0;&#xCD9C;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xD544;&#xC218; &#xB69C;&#xB837;&#xD55C; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB9BC;&#xD504; &#xAD6C; &#xAE30;&#xB2A5; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xD56D; &#xC6D0;-1 cytotoxic T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC778; cytolytic &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC911;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xACE0;&#xC720; &#xC5ED;&#xD560;.

Funci&#xF3;n de los linfocitos ant&#xED;geno asociado-1 (LFA-1) la interacci&#xF3;n con las mol&#xE9;culas de adhesi&#xF3;n intercelular (ICAM) facilita c&#xE9;lulas T del receptor de ant&#xED;geno (TCR)-destrucci&#xF3;n mediada. Para diseccionar TCR y LFA-1 contribuciones, se evalu&#xF3; la actividad citol&#xED;tica y liberaci&#xF3;n de gr&#xE1;nulos por los linfocitos T citot&#xF3;xicos (CTL), as&#xED; como redistribuci&#xF3;n gr&#xE1;nulo intracelular y la morfolog&#xED;a de CTL estimulados con ligando natural de TCR en presencia o ausencia de LFA-1 de compromiso. Aunque otros mecanismos de adhesi&#xF3;n, por ejemplo, CD2-CD58 interacci&#xF3;n, podr&#xED;a sustituir a la LFA-1 para activar la desgranulaci&#xF3;n de CTL, productivo de LFA-1 ligadura era indispensable para la lisis de c&#xE9;lulas diana efectiva por los gr&#xE1;nulos liberados. Bicapas LFA-1-mediada por la adhesi&#xF3;n a vidrio soportados que contienen mol&#xE9;cula de adhesi&#xF3;n intercelular-1 se caracteriza por un &#xE1;rea de uni&#xF3;n mucho m&#xE1;s grande, marcada por la segregaci&#xF3;n de LFA-1, y una forma de la c&#xE9;lula m&#xE1;s compacto en comparaci&#xF3;n con los observados para CD2 mediada por la adhesi&#xF3;n a bicapas que contiene CD58. Un contacto m&#xE1;s grande inducida por mol&#xE9;cula de adhesi&#xF3;n intercelular 1 determina un posicionamiento &#xFA;nico de gr&#xE1;nulos cerca de la interfaz. Estos datos confirman que la LFA-1 proporciona una se&#xF1;al distinta esencial para dirigir Autorizaciones de gr&#xE1;nulos citol&#xED;ticos a la superficie de las c&#xE9;lulas diana portadoras de ant&#xED;geno para mediar en la destrucci&#xF3;n efectiva de estas c&#xE9;lulas por CTL.

El Rol Distintivo de funci&#xF3;n de los linfocitos ant&#xED;geno-1 asociado en la mediaci&#xF3;n de la actividad citol&#xED;tica efectiva por parte de linfocitos T citot&#xF3;xicos

&#x7EC6;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027; T &#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE; (CTL) &#x53EF;&#x4EE5;&#x56DE;&#x5E94;&#x51E0;&#x4E2A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x80BD;-MHC-&#x6211; (&#x62B5;&#x62BC;-&#x6211;) &#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x5728;&#x65E0;&#x6570;&#x7684;&#x4E0E;&#x75C5;&#x6BD2;&#x65E0;&#x5173;&#x7684;&#x5185;&#x6E90;&#x6027;&#x81EA;&#x6211;&#x62B5;&#x62BC;-&#x6211;&#x663E;&#x793A;&#x5728;&#x75C5;&#x6BD2;&#x611F;&#x67D3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0A;&#x7684;&#x914D;&#x5408;&#x3002;&#x6F84;&#x6E05;&#x5173;&#x4E8E;&#x6D3B; CTL &#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x8BC6;&#x522B;&#x4E8B;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x5229;&#x7528;&#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&#x534A;&#x5BFC;&#x4F53;&#x7EB3;&#x7C73;&#x6676;&#x4F53;&#xFF0C;&#x91CF;&#x5B50;&#x70B9;&#x81EA;&#x7EC4;&#x88C5;&#x7684;&#x4F20;&#x611F;&#x5668;&#x8FDB;&#x884C;&#x63A7;&#x5236;&#x7684;&#x4E00;&#x4E9B;&#x6E90;&#x6027;&#x75C5;&#x6BD2; &#xFF08;&#x540C;&#x6E90;&#xFF09; &#x548C;&#x5176;&#x4ED6; &#xFF08;noncognate&#xFF09; &#x7684;&#x62B5;&#x62BC;-&#x6211;&#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x548C;&#x7531;&#x9632;&#x75C5;&#x6BD2; CD8(+) T &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0A;&#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x7279;&#x5F02;&#x6027; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53D7;&#x4F53; (TCR) &#x5BA1;&#x67E5;&#x5176;&#x8BC6;&#x522B;&#x3002;&#x7EB3;&#x7C73;&#x91CF;&#x5B50;&#x70B9;/&#x62B5;&#x62BC;-&#x6211;&#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x72EC;&#x7279;&#x7684;&#x4F53;&#x7CFB;&#x7ED3;&#x6784;&#x663E;&#x793A;&#x610F;&#x5916;&#x5F3A;&#x591A;&#x4EF7; CD8-MHC-&#x6211;&#x4E92;&#x52A8;&#x57FA;&#x7840;&#x7684; noncognate &#x62B5;&#x62BC;&#x5408;&#x4F5C;&#x8D21;&#x732E;-&#x6211;&#x8BA4;&#x8BC6;&#x5230;&#xFF0C;&#x540C;&#x6E90;&#x62B5;&#x62BC;-&#x7531; TCR &#x589E;&#x52A0; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x5408;&#x4F5C;&#x793E;&#xFF0C;CD8 &#x4F9D;&#x8D56;&#x8513;&#x5EF6;&#x5230;&#x8BB8;&#x591A;&#x5176;&#x4ED6; TCR &#x4ECE;&#x51E0;&#x4E2A;&#x6709;&#x6210;&#x6548;&#x5730;&#x53C2;&#x4E0E; TCR &#x4FE1;&#x53F7;&#x53EF;&#x4EE5;&#x89E3;&#x91CA;&#x7684; CTL &#x53CD;&#x5E94;&#x5230;&#x76EE;&#x524D;&#x51E0;&#x4E2A;&#x540C;&#x6E90;&#x62B5;&#x62BC;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x51FA;&#x8272;&#x80FD;&#x529B;-&#x6211;&#x914D;&#x5408;&#x3002;

&#x91CF;&#x5B50;&#x70B9;/&#x80BD;-MHC &#x751F;&#x7269;&#x4F20;&#x611F;&#x5668;&#x63ED;&#x793A;&#x81EA;&#x6211;&#x548C;&#x6269;&#x5145;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6297;&#x539F;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x5F3A;&#x4F9D;&#x8D56; CD8 &#x7684;&#x5408;&#x4F5C;&#x3002;

Cytotoxic T lymphocytes (CTL) can respond to a few viral peptide-MHC-I (pMHC-I) complexes among a myriad of virus-unrelated endogenous self pMHC-I complexes displayed on virus-infected cells. To elucidate the molecular recognition events on live CTL, we have utilized a self-assembled biosensor composed of semiconductor nanocrystals, quantum dots, carrying a controlled number of virus-derived (cognate) and other (noncognate) pMHC-I complexes and examined their recognition by antigen-specific T cell receptor (TCR) on anti-virus CD8(+) T cells. The unique architecture of nanoscale quantum dot/pMHC-I conjugates revealed that unexpectedly strong multivalent CD8-MHC-I interactions underlie the cooperative contribution of noncognate pMHC-I to the recognition of cognate pMHC-I by TCR to augment T cell responses. The cooperative, CD8-dependent spread of signal from a few productively engaged TCR to many other TCR can explain the remarkable ability of CTL to respond to virus-infected cells that present few cognate pMHC-I complexes.

Quantum dot/peptide-MHC biosensors reveal strong CD8-dependent cooperation between self and viral antigens that augment the T cell response.

Les lymphocytes T cytotoxiques (CTL) peut r&#xE9;pondre &#xE0; quelques virales peptide-CMH-I (pMHC-I) complexes entre une multitude de virus endog&#xE8;nes ind&#xE9;pendants auto-pMHC I complexes affich&#xE9;s sur les cellules infect&#xE9;es. Pour &#xE9;lucider les &#xE9;v&#xE9;nements de reconnaissance mol&#xE9;culaire sur CTL en direct, nous avons utilis&#xE9; un biocapteur auto-assembl&#xE9;e compos&#xE9;e de nanocristaux semi-conducteurs, les points quantiques, transportant un nombre contr&#xF4;l&#xE9; de d&#xE9;riv&#xE9; d&#x26;#39;un virus (apparent&#xE9;) et d&#x26;#39;autres (noncognate) pMHC-I complexes et examin&#xE9; leur reconnaissance par l&#x26;#39;antig&#xE8;ne sp&#xE9;cifique de r&#xE9;cepteur de cellule T (TCR) sur l&#x26;#39;anti-virus de CD8 (+) des cellules T. L&#x26;#39;architecture unique de l&#x26;#39;&#xE9;chelle nanom&#xE9;trique quantum dot / pMHC-je conjugue a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; que plus forte que pr&#xE9;vu multivalent CD8-CMH-I INTERACTIONS sous-tendent la contribution coop&#xE9;rative de noncognate pMHC-je &#xE0; la reconnaissance des apparent&#xE9; pMHC-je par le TCR &#xE0; am&#xE9;liorer la r&#xE9;ponse des lymphocytes T. La coop&#xE9;rative, CD8-d&#xE9;pendante propagation du signal &#xE0; partir d&#x26;#39;un petit nombre productive engag&#xE9;e TCR &#xE0; beaucoup d&#x26;#39;autres TCR peut expliquer la remarquable capacit&#xE9; des CTL pour r&#xE9;pondre aux cellules infect&#xE9;es qui pr&#xE9;sentent quelques-I apparent&#xE9;s pMHC complexes.

Quantum Dot / peptide-CMH Biocapteurs r&#xE9;v&#xE8;lent de fortes CD8 d&#xE9;pendant de la coop&#xE9;ration entre les antig&#xE8;nes du soi et virales qui augmentent la r&#xE9;ponse des lymphocytes T

Cytotoxische T-Lymphozyten (CTL) k&ouml;nnen Antworten auf einige wenige virale Peptid-MHC-I (pMHC-ich) komplexe unter eine Vielzahl von endogenen selbst pMHC Virus-nichts zu tun haben-ich komplexe auf Virus-infizierten Zellen angezeigt. Um die molekulare Erkennung-Ereignisse auf Leben CTL zu erhellen, wir haben genutzt einen monomolekularen Biosensor bestehend aus Halbleiter-Nanokristallen, Quantenpunkte, beladen mit kontrollierten zahlreichen Virus abgeleitet (Cognate) und andere (noncognate) pMHC-ich komplexe und deren Anerkennung durch Antigen-spezifische T-Zell-Rezeptor (TCR) auf Antiviren-CD8(+) T-Zellen untersucht. Die einzigartige Architektur von nanoskaligen Quantum Dot/pMHC-I-Konjugaten offenbart, dass unerwartet starke multivalenter CD8-MHC-I Wechselwirkungen den kooperativen Beitrag der noncognate pMHC zugrunde liegen-ich die Anerkennung der verwandten pMHC-I von TCR T-Zell-Antworten zu erweitern. Die kooperative, CD8-abh&auml;ngige Ausbreitung des Signals aus ein paar produktiv engagierten TCR auf viele andere TCR kann erkl&auml;ren, die bemerkenswerte F&auml;higkeit der CTL auf Virus-infizierten Zellen reagieren, die paar verwandten pMHC zu pr&auml;sentieren-ich komplexe.

Quantum Dot/Peptid-MHC-Biosensoren zeigen starke CD8-abh&auml;ngige Kooperation zwischen selbst- und virale Antigene, die die T-Zell-Antwort zu erg&auml;nzen.

Linfociti T citotossici (CTL) possono rispondere a pochi virale del peptide-MHC-I (pMHC-io) complessi tra una miriade di virus estranei endogene self pMHC-I complessi visualizzati su cellule infettate da virus. Per chiarire gli eventi di riconoscimento molecolare su CTL dal vivo, abbiamo utilizzato un biosensore autoassemblano composto di nanocristalli semiconduttori, quantum dots, portando un numero controllato di derivati da virus (cognate) e altri pMHC (noncognate)-I complessi ed esaminato il loro riconoscimento dal recettore delle cellule T antigene-specifiche (TCR) sulle cellule T cellule anti-virus. L&#39;architettura unica di nanoscale quantum dot/pMHC-I coniugati di ha rivelato che inaspettatamente forte polivalente CD8-MHC-I interazioni sottendono il contributo cooperativo di pMHC noncognate-I per il riconoscimento delle cognate pMHC-I da TCR per aumentare le risposte delle cellule T. La cooperativa, diffusione di CD8-dipendente del segnale da pochi TCR produttivamente impegnati a molti altri TCR pu&ograve; spiegare la capacit&agrave; notevole di CTL per rispondere alle cellule infettate da virus che presentano pochi pMHC cognate-I complessi.

Biosensori di quantum dot/peptide-MHC rivelano forte cooperazione CD8-dipendente tra s&eacute; e gli antigeni virali che aumentano la risposta delle cellule T.

&#x7D30;&#x80DE;&#x50B7;&#x5BB3;&#x6027;T&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#xFF08;CTL&#xFF09;&#x304C;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x611F;&#x67D3;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3068;&#x306F;&#x7121;&#x95A2;&#x4FC2;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x81EA;&#x5DF1;pMHC-I&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x7121;&#x6570;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;-MHC-I&#xFF08;pMHC-I&#xFF09;&#x932F;&#x4F53;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;CTL&#x4E0A;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x8A8D;&#x8B58;&#x4E8B;&#x8C61;&#x3092;&#x89E3;&#x660E;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x7531;&#x6765;&#xFF08;&#x540C;&#x65CF;&#xFF09;&#x3068;&#x4ED6;&#x306E;&#xFF08;&#x95A2;&#x9023;&#x306E;&#x306A;&#x3044;&#xFF09;pMHC-I&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6570;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x534A;&#x5C0E;&#x4F53;&#x30CA;&#x30CE;&#x7D50;&#x6676;&#x3001;&#x91CF;&#x5B50;&#x30C9;&#x30C3;&#x30C8;&#x304B;&#x3089;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x81EA;&#x5DF1;&#x7D44;&#x7E54;&#x5316;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x3092;&#x5229;&#x7528;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x8A8D;&#x8B58;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C1;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;CD8&#xFF08;+&#xFF09;T&#x7D30;&#x80DE;&#x4E0A;&#x306E;&#x6297;&#x539F;&#x7279;&#x7570;&#x7684;T&#x7D30;&#x80DE;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#xFF08;TCR&#xFF09;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3002;&#x30CA;&#x30CE;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x91CF;&#x5B50;&#x30C9;&#x30C3;&#x30C8;/ pMHC-I&#x306F;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x306A;&#x30A2;&#x30FC;&#x30AD;&#x30C6;&#x30AF;&#x30C1;&#x30E3;&#x304C;&#x4E88;&#x671F;&#x305B;&#x305A;&#x3001;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x591A;&#x4FA1;CD8-MHC-I&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x304C;&#x540C;&#x65CF;&#x8A8D;&#x8B58;pMHC-I TCR&#x306B;&#x3088;&#x308B;T&#x7D30;&#x80DE;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x5897;&#x5F37;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x306E;&#x306A;&#x3044;pMHC-I&#x306E;&#x5354;&#x529B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3092;&#x6839;&#x5E95;&#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5C11;&#x6570;&#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x306B;&#x5F93;&#x4E8B;TCR&#x304B;&#x3089;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306E;TCR&#x3078;&#x306E;&#x4FE1;&#x53F7;&#x306E;&#x5354;&#x8ABF;&#x3001;CD8&#x4F9D;&#x5B58;&#x666E;&#x53CA;&#x306F;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x540C;&#x65CF;pMHC-I&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3092;&#x63D0;&#x793A;&#x3059;&#x308B;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x611F;&#x67D3;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x53CD;&#x200B;&#x200B;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B;CTL&#x306E;&#x9A5A;&#x304F;&#x3079;&#x304D;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x91CF;&#x5B50;&#x30C9;&#x30C3;&#x30C8;/&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;-MHC&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;T&#x7D30;&#x80DE;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x88DC;&#x5F37;&#x81EA;&#x5DF1;&#x3068;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x6297;&#x539F;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x5F37;&#x3044;CD8&#x4F9D;&#x5B58;&#x306E;&#x5354;&#x529B;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;

Cytotoxic T &#xC138;&#xD3EC; (CTL) &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300;&#xC751;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xD3A9;&#xD0C0;&#xC774;&#xB4DC;-MHC-&#xB09C; (pMHC-&#xB098;) &#xC0DD; &#xC790;&#xAE30; pMHC &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xAD00;&#xB828;&#xC774; &#xC5C6;&#xB294; &#xBB34;&#xC218; &#xD55C; &#xAC00;&#xC6B4;&#xB370; &#xB2E8;&#xC9C0;-&#xB09C; &#xB2E8;&#xC9C0; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xD45C;&#xC2DC;. &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; CTL&#xC5D0; &#xBD84;&#xC790; &#xC778;&#xC2DD; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xB97C; &#xBA85;&#xB8CC; &#xD558; &#xAC8C;, &#xD558; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xD65C;&#xC6A9; &#xBC18;&#xB3C4;&#xCCB4; &#xBC29;&#xD638;, &#xC591;&#xC790; &#xC810; &#xB4E4;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xB8E8;&#xC5B4;&#xC838; &#xC870;&#xB9BD;&#xB41C; &#xBC14;&#xC774;&#xC624; &#xC13C;&#xC11C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xD30C;&#xC0DD; (&#xB3D9;&#xACC4;&#xC5B4;) &#xBC0F; &#xAE30;&#xD0C0; (noncognate) Pmhc&#xC758; &#xC81C;&#xC5B4; &#xBC88;&#xD638;&#xB97C; &#xB4E4;&#xACE0;-&#xB09C; &#xB2E8;&#xC9C0; &#xC548;&#xD2F0; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; CD8(+) T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xD56D; &#xC6D0; &#xD2B9;&#xC815; T &#xC138;&#xD3EC; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (TCR)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC778;&#xC2DD;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558; &#xACE0; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB098;&#xB178; &#xC591;&#xC790; &#xC810;/pMHC-&#xB09C; conjugates&#xC758; &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; &#xC544;&#xD0A4;&#xD14D;&#xCC98; &#xACF5;&#xAC1C;&#xB294; &#xC608;&#xAE30;&#xCE58; &#xC54A;&#xAC8C; &#xAC15;&#xD55C; &#xB610;&#xD55C; CD8-MHC-&#xB098; &#xC0C1;&#xD638; &#xD611;&#xB825; &#xAE30;&#xC5EC; noncognate Pmhc&#xC758; &#xAE30;&#xCD08;-&#xB098; &#xB3D9;&#xC871; Pmhc&#xC758; &#xC778;&#xC2DD;&#xC5D0;-&#xB098;&#xB294; T&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xC99D;&#xAC00; &#xC2DC;&#xD0A4;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; TCR. &#xD611;&#xB3D9; &#xC870;&#xD569;, CD8 &#xC885;&#xC18D; &#xD655;&#xC0B0; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC57D;&#xD63C;&#xB41C; TCR&#xC758; &#xC2E0;&#xD638;&#xAC00; &#xB2E4;&#xB978; &#xB9CE;&#xC740; TCR&#xC758; &#xBA87; &#xB3D9;&#xC871; Pmhc&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xB300;&#xC751; &#xD558;&#xB294; CTL&#xC758; &#xB180;&#xB77C;&#xC6B4; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xC124;&#xBA85;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;-&#xB09C; &#xB2E8;&#xC9C0;.

&#xC591;&#xC790; &#xC810;/&#xD3A9;&#xD0C0;&#xC774;&#xB4DC;-MHC biosensors &#xC790;&#xC2E0;&#xACFC; T&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558;&#xB294; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xD56D; &#xC6D0;&#xC744; &#xAC15;&#xD55C; CD8 &#xC885;&#xC18D; &#xD611;&#xB825; &#xACF5;&#xAC1C;.

Linfocitos T citot&#xF3;xicos (CTL) pueden responder a algunas virales p&#xE9;ptido-MHC-I (pMHC-I) entre los complejos de un gran n&#xFA;mero de virus end&#xF3;genos relacionados auto pMHC-I complejos que aparecen en c&#xE9;lulas infectadas por virus. Para dilucidar los eventos de reconocimiento molecular de CTL en vivo, hemos utilizado un biosensor auto-ensamblado compuesto de nanocristales semiconductores, puntos cu&#xE1;nticos, que llevan un n&#xFA;mero controlado de virus derivado de (af&#xED;n) y otras (noncognate) complejos pMHC-I y se examina su reconocimiento por ant&#xED;geno-espec&#xED;fica del receptor de c&#xE9;lulas T (TCR) en anti-virus CD8 (+) las c&#xE9;lulas T. La arquitectura &#xFA;nica de nanoescala punto cu&#xE1;ntico / pMHC I-conjuga revel&#xF3; que el inesperadamente fuerte multivalente CD8-MHC-I Interacciones subyacen a la contribuci&#xF3;n cooperativa de noncognate pMHC-I para el reconocimiento de los afines pMHC-I al TCR para aumentar las respuestas de c&#xE9;lulas T. La cooperativa, CD8-dependiente propagaci&#xF3;n de la se&#xF1;al desde unos pocos productivamente TCR a muchos otros TCR puede explicar la notable capacidad de CTL para responder a c&#xE9;lulas infectadas por virus que presentan pocos afines pMHC-I complejos.

Quantum Dot / Biosensores p&#xE9;ptido-MHC Reveal fuerte CD8 dependiente de la cooperaci&#xF3;n entre ant&#xED;genos propios y viral que aumentan la respuesta de c&#xE9;lulas T

&#x7834;&#x574F;&#x75C5;&#x6BD2;&#x611F;&#x67D3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684; CTL &#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6781;&#x5176;&#x654F;&#x611F;&#x548C;&#x6709;&#x6548;&#x7387;&#x7684;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4EE5;&#x524D;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E; LFA-1-&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x7C98;&#x9644;&#x5206;&#x5B50;-1 &#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x5468;&#x8FB9;&#x8D85;&#x5206;&#x5B50;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7FA4;&#x96C6; &#xFF08;pSMAC&#xFF09; &#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x7A81;&#x89E6;&#x4E2D;&#x8C03;&#x89E3;&#x5F62;&#x6210;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7D27;&#x5BC6;&#x7C98;&#x8FDE;&#x8DEF;&#x53E3;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x76EE;&#x6807;&#x7EC6;&#x80DE;&#x88C2;&#x89E3;&#x7684; CTL &#x7684;&#x654F;&#x611F;&#x6027;&#x3002;&#x672C;&#x6587;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6BD4;&#x8F83;&#x591A; (CD8(+)) &#x548C;&#x8F83;&#x5C11; (CD4(+)) &#x6709;&#x6548; CTL&#x3002; &#x7406;&#x89E3;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x6709;&#x6548;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x76EE;&#x6807;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6EB6;&#x89E3;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0; pSMAC &#x5F62;&#x6210;&#x5E9F;&#x9664;&#x6781;&#x5927;&#x5730;&#x635F;&#x5BB3;&#x4E86; CD8(+)&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F; CD4(+) CTL &#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x81EA;&#x6EB6;&#x9776;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x6CA1;&#x6709;&#x91CA;&#x653E;&#x9897;&#x7C92;&#x7684; CD8(+) &#x548C; CD4(+) CTL &#x91CF;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x4E0E;&#x6B64;&#x76F8;&#x4E00;&#x81F4;&#xFF0C;CD4(+) CTL &#x6253;&#x7834;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x66F4;&#x591A;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x5F80;&#x5F80;&#x6BD4;&#x505A; CD8(+) CTL&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4ECE;&#x754C;&#x9762;&#x7684;&#x6EB6;&#x5206;&#x5B50;&#x9038;&#x51FA;&#x3002;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; Ctheta &#x6291;&#x5236;&#x5242; CD4(+) CTL &#x6CBB;&#x7597;&#x589E;&#x52A0;&#x7A81;&#x89E6;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x548C;&#x7075;&#x654F;&#x5EA6;&#x7684;&#x7279;&#x5B9A;&#x76EE;&#x6807;&#x7EC6;&#x80DE;&#x88C2;&#x89E3;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684; pSMAC&#xFF0C;&#x5B83;&#x7531;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; Ctheta&#xFF0C;&#x804C;&#x80FD;&#x5C40;&#x9650;&#x5728;&#x7A81;&#x89E6;&#x754C;&#x9762;&#x4E0A;&#x7684;&#x91CA;&#x653E;&#x6EB6;&#x5206;&#x5B50;&#xFF0C;&#x5E76;&#x63D0;&#x9AD8;&#x6548;&#x7387;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6EB6;&#x89E3;&#x90E8;&#x5206;&#x63A7;&#x5236;&#x3002;

&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; C &theta; &#x89C4;&#x7BA1;&#x5468;&#x56F4;&#x7C98;&#x8FDE;&#x73AF;&#x4EA4;&#x754C;&#x5904;&#x7684;&#x7A33;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x5E76;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x76EE;&#x6807;&#x7EC6;&#x80DE;&#x88C2;&#x89E3;&#x7684; CTL &#x7684;&#x654F;&#x611F;&#x6027;&#x3002;

Destruction of virus-infected cells by CTL is an extremely sensitive and efficient process. Our previous data suggest that LFA-1-ICAM-1 interactions in the peripheral supramolecular activation cluster (pSMAC) of the immunological synapse mediate formation of a tight adhesion junction that might contribute to the sensitivity of target cell lysis by CTL. Herein, we compared more (CD8(+)) and less (CD4(+)) effective CTL to understand the molecular events that promote efficient target cell lysis. We found that abrogation of the pSMAC formation significantly impaired the ability of CD8(+) but not CD4(+) CTL to lyse target cells despite having no effect of the amount of released granules by both CD8(+) and CD4(+) CTL. Consistent with this, CD4(+) CTL break their synapses more often than do CD8(+) CTL, which leads to the escape of the cytolytic molecules from the interface. CD4(+) CTL treatment with a protein kinase Ctheta inhibitor increases synapse stability and sensitivity of specific target cell lysis. Thus, formation of a stable pSMAC, which is partially controlled by protein kinase Ctheta, functions to confine the released lytic molecules at the synaptic interface and to enhance the effectiveness of target cell lysis.

Protein kinase C theta regulates stability of the peripheral adhesion ring junction and contributes to the sensitivity of target cell lysis by CTL.

Destruction des cellules infect&#xE9;es par le virus par CTL est un processus extr&#xEA;mement sensible et efficace. Nos donn&#xE9;es ant&#xE9;rieures sugg&#xE8;rent que LFA-1-ICAM-1 interactions dans le groupe d&#x26;#39;activation supramol&#xE9;culaire p&#xE9;riph&#xE9;rique (pSMAC) de la synapse immunologique m&#xE9;diation formation d&#x26;#39;une jonction &#xE9;tanche adh&#xE9;rence qui pourraient contribuer &#xE0; la sensibilit&#xE9; de lyse des cellules cibles par les CTL. Ici, nous avons compar&#xE9; plus (CD8 (+)) et moins (CD4 (+)) CTL efficace pour comprendre les &#xE9;v&#xE9;nements mol&#xE9;culaires qui favorisent l&#x26;#39;efficacit&#xE9; lyse des cellules cibles. Nous avons constat&#xE9; que l&#x26;#39;abrogation de la formation pSMAC compromise de mani&#xE8;re significative la capacit&#xE9; des CD8 (+) mais pas CD4 (+) CTL &#xE0; lyser les cellules cibles, malgr&#xE9; n&#x26;#39;ayant pas d&#x26;#39;effet de la quantit&#xE9; de granul&#xE9;s lib&#xE9;r&#xE9;s &#xE0; la fois par CD8 (+) et CD4 (+) CTL . Conform&#xE9;ment &#xE0; cela, CD4 (+) CTL briser leurs synapses plus souvent que les CD8 (+) CTL, ce qui conduit &#xE0; la fuite des mol&#xE9;cules cytolytiques de l&#x26;#39;interface. CD4 (+) de traitement CTL avec un inhibiteur de la prot&#xE9;ine kinase Ctheta augmente la stabilit&#xE9; des synapses et la sensibilit&#xE9; de la lyse des cellules cibles sp&#xE9;cifiques. Ainsi, la formation d&#x26;#39;un pSMAC stable, ce qui est partiellement contr&#xF4;l&#xE9;e par la prot&#xE9;ine kinase Ctheta, les fonctions de confiner les mol&#xE9;cules lib&#xE9;r&#xE9;es lytiques &#xE0; l&#x26;#39;interface synaptique et d&#x26;#39;am&#xE9;liorer l&#x26;#39;efficacit&#xE9; de la lyse des cellules cibles.

Protein Kinase C Theta R&#xE9;gule la stabilit&#xE9; de la jonction de cycle adh&#xE9;sion p&#xE9;riph&#xE9;rique et contribue &#xE0; la sensibilit&#xE9; de la lyse des cellules cibles par les CTL

Zerst&ouml;rung des Virus-infizierten Zellen von CTL ist ein extrem empfindliches und effizienten Prozess. Unsere vorherigen Daten zufolge LFA-1-ICAM-1-Interaktionen in den peripheren supramolekulare Aktivierung-Cluster (pSMAC) von der immunologischen Synapse vermitteln Bildung von einer engen Adh&auml;sion-Kreuzung, die auf die Sensitivit&auml;t der Ziel-Zellen-Zerst&ouml;rung von CTL beitragen k&ouml;nnten. Hierin, verglichen wir mehr (CD8(+)) und weniger (CD4(+)) effektive CTL. zu verstehen, die molekularen Ereignisse, die effiziente F&ouml;rderung deiner Zellenzerst&ouml;rung Wir fanden, dass die Aufhebung der pSMAC-Formation wesentlich die F&auml;higkeit des CD8(+) aber nicht CD4(+) CTL Zielzellen beeintr&auml;chtigt trotz keine Wirkung des Betrags der ver&ouml;ffentlichten Granulat sowohl CD8(+) als auch CD4(+) CTL aufzul&ouml;sen. Folgerichtig CD4(+) CTL brechen ihre Synapsen weitere, oft als CD8(+) CTL, f&uuml;hrt zu die Flucht der CYTOLYTISCHE Molek&uuml;le von der Oberfl&auml;che. CD4(+) CTL-Behandlung mit einem Protein-Kinase-Ctheta-Inhibitor erh&ouml;ht Synapse Stabilit&auml;t und Empfindlichkeit des spezifischen Zielgruppen Zellenzerst&ouml;rung. Damit Bildung eine stabile pSMAC, die teilweise von Proteinkinase Ctheta, Funktionen die ver&ouml;ffentlichten lytischer Molek&uuml;le an der synaptischen Schnittstelle zu beschr&auml;nken und die Wirksamkeit der Ziel-Zellenzerst&ouml;rung kontrolliert wird.

Protein-Kinase C-Theta regelt die Stabilit&auml;t der peripheren Adh&auml;sion-Ring-Kreuzung und der Empfindlichkeit des Ziel-Zellen-Zerst&ouml;rung von CTL tr&auml;gt.

Distruzione delle cellule infettate da virus da CTL &egrave; un processo estremamente sensibile ed efficace. I nostri dati precedenti suggeriscono che le interazioni di LFA-1-ICAM-1 nel cluster (pSMAC) attivazione supramolecolare periferici della sinapsi immunologica mediano la formazione di una giunzione stretta aderenza che potrebbe contribuire alla sensibilit&agrave; di lisi delle cellule bersaglio da CTL. Nel presente documento, abbiamo confrontato pi&ugrave; (CD8(+)) e meno (CTL efficace CD4(+)). a comprendere gli eventi molecolari che promuovono efficiente target lisi delle cellule Abbiamo trovato che abrogazione della formazione pSMAC alterato significativamente la capacit&agrave; delle cellule, ma non CD4(+) CTL di lisare cellule bersaglio pur non avendo alcun effetto della quantit&agrave; di granuli rilasciate da cellule e da CD4(+) CTL. Coerentemente con questo, CD4(+) CTL rompere loro sinapsi pi&ugrave; spesso di cellule CTL, che conduce alla fuga di molecole citolitica dall&#39;interfaccia. Trattamento CD4(+) CTL con un inibitore di chinasi di proteina Ctheta aumenta la stabilit&agrave; sinapsi e sensibilit&agrave; di lisi delle cellule bersaglio specifiche. Cos&igrave;, la formazione di un pSMAC stabile, che &egrave; parzialmente controllata dalla chinasi di proteina Ctheta, funzioni di confinare le molecole litiche rilasciate all&#39;interfaccia sinaptica e a migliorare l&#39;efficacia della lisi delle cellule bersaglio.

Proteina chinasi C theta regola la stabilit&agrave; della giunzione anello periferico adesione e contribuisce alla sensibilit&agrave; di lisi delle cellule bersaglio di CTL.

CTL&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x611F;&#x67D3;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7834;&#x58CA;&#x306F;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x654F;&#x611F;&#x304B;&#x3064;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x4EE5;&#x524D;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x514D;&#x75AB;&#x5B66;&#x7684;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306E;&#x5468;&#x8FBA;&#x5206;&#x5B50;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#xFF08;pSMAC&#xFF09;&#x306E;LFA-1-ICAM-1&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;CTL&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x6A19;&#x7684;&#x7D30;&#x80DE;&#x6EB6;&#x89E3;&#x306E;&#x611F;&#x5EA6;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x5BC6;&#x7740;&#x63A5;&#x5408;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3088;&#x308A;&#xFF08;CD8&#xFF08;+&#xFF09;&#xFF09;&#x3068;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x6A19;&#x7684;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6EB6;&#x89E3;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x5206;&#x5B50;&#x4E8B;&#x8C61;&#x3092;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306A;CTL&#xFF08;CD4&#xFF08;+&#xFF09;&#xFF09;&#x672A;&#x6E80;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;CD8&#xFF08;+&#xFF09;&#x304A;&#x3088;&#x3073;CD4&#xFF08;+&#xFF09;CTL&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x653E;&#x51FA;&#x9846;&#x7C92;&#x306E;&#x91CF;&#x306B;&#x306F;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x6301;&#x305F;&#x306A;&#x3044;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x6A19;&#x7684;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x6EB6;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;CTL CD8&#xFF08;+&#xFF09;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;CD4&#xFF08;+&#xFF09;&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x640D;&#x306A;&#x308F;pSMAC&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x305D;&#x306E;&#x5EC3;&#x6B62;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3066;&#x3001;CD4&#xFF08;+&#xFF09;&#x304C;&#x3088;&#x308A;&#x983B;&#x7E41;&#x306B;CD8&#xFF08;+&#xFF09;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30A4;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x7D30;&#x80DE;&#x50B7;&#x5BB3;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x8131;&#x51FA;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;CTL&#x3092;&#x3001;&#x4F55;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x3001;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x3092;&#x7834;&#x308B;CTL&#x3002; CD4&#xFF08;+&#xFF09;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;Ctheta&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x3068;CTL&#x6CBB;&#x7642;&#x6CD5;&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x6A19;&#x7684;&#x7D30;&#x80DE;&#x6EB6;&#x89E3;&#x306E;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x3068;&#x611F;&#x5EA6;&#x3092;&#x5411;&#x4E0A;&#x3055;&#x305B;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306B;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306E;&#x754C;&#x9762;&#x3067;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3055;&#x308C;&#x6EB6;&#x89E3;&#x5206;&#x5B50;&#x3092;&#x9589;&#x3058;&#x8FBC;&#x3081;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x6A19;&#x7684;&#x7D30;&#x80DE;&#x6EB6;&#x89E3;&#x306E;&#x6709;&#x52B9;&#x6027;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;Ctheta&#x3001;&#x95A2;&#x6570;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5236;&#x5FA1;&#x3055;&#x308C;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;pSMAC&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;

&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;C&#x30B7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x5468;&#x8FBA;&#x63A5;&#x7740;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x63A5;&#x5408;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x3001;CTL&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x6A19;&#x7684;&#x7D30;&#x80DE;&#x6EB6;&#x89E3;&#x306E;&#x611F;&#x5EA6;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;

CTL&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD30C;&#xAD34;&#xB294; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC911;&#xC694; &#xD558; &#xACE0; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC774;&#xC804; &#xB370;&#xC774;&#xD130; LFA-1-ICAM-1 &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xBA74;&#xC5ED; &#xB0C5;&#xC758; &#xC8FC;&#xBCC0; supramolecular &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130; (pSMAC)&#xC758; CTL&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB300;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC6A9; &#xD574;&#xC758; &#xAC10;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xB2E8;&#xB2E8;&#xD55C; &#xC811;&#xCC29; &#xC811;&#xD569;&#xBD80;&#xC758; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xC911;&#xC7AC;&#xD560; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB354;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; (CD8(+)) &#xBC0F; &#xB354; &#xC801;&#xC740; (CD4(+)) &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC778; CTL. &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xD64D;&#xBCF4; &#xBD84;&#xC790; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8; &#xB300;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC6A9; &#xD574;&#xB97C; &#xC774;&#xD574; &#xD558; PSMAC &#xD615;&#xC131;&#xC758; &#xD3D0;&#xC9C0; &#xD06C;&#xAC8C; lyse CD8(+) &#xBC0F; CD4(+) CTL&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCD9C;&#xC2DC; &#xB41C;&#xACFC; &#xB9BD; &#xD06C;&#xAE30;&#xC758; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC8FC;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xB300;&#xC0C1; &#xC140;&#xC744; CD8(+) &#xD558;&#xC9C0; CD4(+) CTL&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC7A5;&#xC560;&#xB97C; &#xCC3E;&#xC558;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC77C;&#xAD00;&#xC131;, CD4(+) CTL &#xD734;&#xC2DD; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xB354; CD8(+) CTL &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xC774;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; cytolytic &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xD0C8;&#xCD9C;&#xC5D0; &#xC774;&#xB974;&#xAC8C; &#xD558;&#xB294; &#xAC83; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xC790;&#xC8FC;. CD4(+) CTL &#xCE58;&#xB8CC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; Ctheta &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; &#xB0C5; &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xACFC; &#xD2B9;&#xC815; &#xB300;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC6A9; &#xD574;&#xC758; &#xAC10;&#xB3C4; &#xC99D;&#xAC00;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; Ctheta, &#xD568;&#xC218; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xC774;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xB41C; &#xC6A9;&#xADE0;&#xC131; &#xBD84;&#xC790;&#xB97C; &#xC81C;&#xD55C; &#xD558; &#xACE0; &#xB300;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC6A9; &#xD574;&#xC758; &#xD6A8;&#xC728;&#xC131;&#xC744; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xD558; &#xC5EC; &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC81C;&#xC5B4; &#xB418;&#xB294; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC778; Psmac&#xC758; &#xD615;&#xC131;.

&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; C &#xC138;&#xD0C0; &#xC8FC;&#xBCC0; &#xC811;&#xCC29; &#xB9C1; &#xC5F0;&#xACB0;&#xC758; &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD558; &#xACE0; CTL&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB300;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC6A9; &#xD574;&#xC758; &#xAC10;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD55C;&#xB2E4;.

La destrucci&#xF3;n de c&#xE9;lulas infectadas por virus de CTL es un proceso sumamente sensible y eficiente. Los datos anteriores sugieren que la LFA-1-ICAM-1 las interacciones en el grupo de activaci&#xF3;n perif&#xE9;rica supramolecular (pSMAC) de la sinapsis inmunol&#xF3;gica mediar en la formaci&#xF3;n de una uni&#xF3;n fuerte adherencia que pueda contribuir a la sensibilidad de la lisis de las c&#xE9;lulas diana por CTL. Aqu&#xED;, en comparaci&#xF3;n m&#xE1;s (CD8 (+)) y menos (CD4 (+)) CTL eficaz para comprender los eventos moleculares que promueven la eficiencia de lisis de c&#xE9;lulas diana. Hemos encontrado que la supresi&#xF3;n de la formaci&#xF3;n pSMAC significativamente afectada la capacidad de CD8 (+) pero no de CD4 (+) CTL para lisar las c&#xE9;lulas diana a pesar de tener ning&#xFA;n efecto de la cantidad de gr&#xE1;nulos liberados por tanto CD8 (+) y CD4 (+) CTL . Consistente con esto, CD4 (+) CTL romper sus sinapsis m&#xE1;s a menudo que CD8 (+) CTL, lo que conduce a la fuga de las mol&#xE9;culas citol&#xED;ticas de la interfaz. CD4 (+) de tratamiento CTL con un inhibidor de la prote&#xED;na quinasa Ctheta sinapsis aumenta la estabilidad y la sensibilidad de lisis espec&#xED;fica de c&#xE9;lulas diana. As&#xED;, la formaci&#xF3;n de un pSMAC estable, que est&#xE1; parcialmente controlada por la prote&#xED;na quinasa Ctheta, funciones para confinar las mol&#xE9;culas liberadas l&#xED;ticas en la interfase sin&#xE1;ptica y para mejorar la eficacia de la lisis de c&#xE9;lulas objetivo.

Prote&#xED;na quinasa C theta regula la estabilidad de la uni&#xF3;n de adhesi&#xF3;n Anillo Perif&#xE9;rico y contribuye a la sensibilidad de la lisis celular de destino por CTL

We have utilized soluble HIV Gag-specific T-cell receptor (TCR) D3 with low affinity and TCR-like antibody 25-D1.16 recognizing its natural peptide-MHC (pMHC) ligand with high affinity to determine how affinity and off-rate of the receptor-pMHC interactions affect the sensitivity of pMHC detection on the cell surface. We found that with soluble TCR cognate pMHCs can be detected only at relatively high cell surface densities when the TCR was oligomerized using either Streptavidin or quantum dot (QD) scaffolds. While the higher affinity probe led to a greater sensitivity of pMHC detection, monomers and oligomers of the probe showed essentially the same detection limit, which is restricted by the sensitivity of standard flow cytometry technique. We have also shown that imaging of QD/TCR specifically bound to cognate pMHC on the cell surface yielded a very bright fluorescent signal that can enhance the sensitivity of viral peptide detection on infected cells.

Can oligomeric T-cell receptor be used as a tool to detect viral peptide epitopes on infected cells?

Cytolytic granules mediate killing of virus-infected cells by cytotoxic T lymphocytes. We show here that the granules can take long or short paths to the secretory domain. Both paths utilized the same intracellular molecular events, which have different spatial and temporal arrangements and are regulated by the kinetics of Ca(2+)-mediated signaling. Rapid signaling caused swift granule concentration near the microtubule-organizing center (MTOC) and subsequent delivery by the polarized MTOC directly to the secretory domain-the shortest path. Indolent signaling led to late recruitment of granules that moved along microtubules to the periphery of the synapse and then moved tangentially to fuse at the outer edge of the secretory domain-a longer path. The short pathway is associated with faster granule release and more efficient killing than the long pathway. Thus, the kinetics of early signaling regulates the quality of the T cell cytolytic response.

Kinetics of early T cell receptor signaling regulate the pathway of lytic granule delivery to the secretory domain.

&#x6EB6;&#x9897;&#x7C92;&#x8C03;&#x89E3;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027; T &#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x75C5;&#x6BD2;&#x611F;&#x67D3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6740;&#x4F24;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x5C55;&#x793A;&#x9897;&#x7C92;&#x53EF;&#x4EE5;&#x957F;&#x671F;&#x6216;&#x77ED;&#x671F;&#x7684;&#x8DEF;&#x5F84;&#x7684;&#x5206;&#x6CCC;&#x7684;&#x57DF;&#x3002;&#x4E24;&#x4E2A;&#x8DEF;&#x5F84;&#x5229;&#x7528;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x5206;&#x5B50;&#x4E8B;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x6709;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x7A7A;&#x95F4;&#x548C;&#x65F6;&#x95F4;&#x5B89;&#x6392;&#xFF0C;&#x5E76;&#x53D7; Ca(2+) &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x7684;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x3002;&#x5FEB;&#x901F;&#x4FE1;&#x53F7;&#x9020;&#x6210;&#x8FC5;&#x901F;&#x9897;&#x7C92;&#x6D53;&#x5EA6;&#x9644;&#x8FD1;&#x7684;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x5FC3; &#xFF08;MTOC&#xFF09; &#x548C;&#x968F;&#x540E;&#x4EA4;&#x4ED8;&#xFF0C;&#x6781;&#x5316; MTOC &#x76F4;&#x63A5;&#x5206;&#x6CCC;&#x57DF;&#x7684;&#x6700;&#x77ED;&#x8DEF;&#x5F84;&#x3002;&#x597D;&#x9038;&#x6076;&#x52B3;&#x4FE1;&#x53F7;&#x5BFC;&#x81F4;&#x9897;&#x7C92;&#x7684;&#x5468;&#x56F4;&#x7A81;&#x89E6;&#x540E;&#x6CBF;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x79FB;&#x52A8;&#xFF0C;&#x7136;&#x540E;&#x5207;&#x5411;&#x79FB;&#x52A8;&#xFF0C;&#x5728;&#x5916;&#x7F18;&#x7684;&#x957F;&#x8DEF;&#x5F84;&#x5206;&#x6CCC;&#x57DF; a &#x4FDD;&#x9669;&#x4E1D;&#x8FDF;&#x62DB;&#x8058;&#x3002;&#x77ED;&#x7684;&#x9014;&#x5F84;&#x6709;&#x8054;&#x7CFB;&#xFF0C;&#x9897;&#x7C92;&#x91CA;&#x653E;&#x901F;&#x5EA6;&#x66F4;&#x5FEB;&#x5E76;&#x4E14;&#x66F4;&#x6709;&#x6548;&#x5730;&#x6740;&#x6B7B;&#x6BD4;&#x957F;&#x7684;&#x901A;&#x8DEF;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x7684;&#x65E9;&#x671F;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8C03;&#x8282; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x6EB6;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x8D28;&#x91CF;&#x3002;

&#x65E9;&#x671F; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53D7;&#x4F53;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x7684;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x7814;&#x7A76;&#x89C4;&#x7BA1;&#x5411;&#x5206;&#x6CCC;&#x57DF;&#x6EB6;&#x9897;&#x7C92;&#x4F20;&#x9012;&#x7684;&#x9014;&#x5F84;&#x3002;

Granules cytolytiques m&#xE9;diation tuer des cellules infect&#xE9;es par les lymphocytes T cytotoxiques. Nous montrons ici que les granules peuvent prendre des chemins longs ou courts dans le domaine s&#xE9;cr&#xE9;toire. Les deux voies ont utilis&#xE9; les m&#xEA;mes &#xE9;v&#xE9;nements mol&#xE9;culaires intracellulaires, qui ont diff&#xE9;rents arrangements spatiaux et temporels et sont r&#xE9;glement&#xE9;s par la cin&#xE9;tique de Ca (2 +) la signalisation m&#xE9;di&#xE9;e. Signalisation rapide caus&#xE9; la concentration des granules rapide &#xE0; proximit&#xE9; du centre-microtubules organisation (MTOC) et la livraison ult&#xE9;rieure par le MTOC polaris&#xE9;e directement &#xE0; la s&#xE9;cr&#xE9;tion de domaine le plus court chemin. Signalisation indolents conduit &#xE0; la fin de recrutement de granul&#xE9;s qui se sont d&#xE9;plac&#xE9;s le long des microtubules &#xE0; la p&#xE9;riph&#xE9;rie de la synapse puis d&#xE9;plac&#xE9; tangentiellement &#xE0; fondre &#xE0; l&#x26;#39;ar&#xEA;te ext&#xE9;rieure de la s&#xE9;cr&#xE9;tion de domaine, un chemin plus long. La voie courte est associ&#xE9;e &#xE0; la lib&#xE9;ration rapide des granules et le meurtre plus efficace que la voie longue. Ainsi, la cin&#xE9;tique de la signalisation au d&#xE9;but r&#xE9;glemente la qualit&#xE9; de la r&#xE9;ponse des lymphocytes T cytolytiques.

Cin&#xE9;tique de r&#xE9;cepteur cellulaire T pr&#xE9;coce de signalisation R&#xE9;glementer le sentier de la livraison de granul&#xE9;s lytique au domaine s&#xE9;cr&#xE9;toire

Keiko Granulat vermitteln T&ouml;tung von Virus-infizierten Zellen durch zytotoxische T-Lymphozyten. Wir zeigen hier, dass das Granulat lange oder kurze Wege der sekretorischen Dom&auml;ne nehmen k&ouml;nnen. Beide Pfade verwendet die gleichen intrazellul&auml;ren Molekulare Ereignisse, die unterschiedliche r&auml;umliche und zeitliche Anordnungen und werden durch die Kinetik der Ca(2+)-vermittelte Signalisierung geregelt. Schnelle signalisieren verursacht rasche Untermodul Konzentration nahe dem Microtubule organizing Center (MTOC) und Nachlieferung von polarisierten MTOC direkt an der sekretorischen Dom&auml;ne &ndash; der k&uuml;rzeste Weg. Indolent Signalisierung f&uuml;hrte zu sp&auml;t Rekrutierung von Granulaten, die entlang der Mikrotubuli an die Peripherie von der Synapse verschoben und dann zog tangential, am &auml;u&szlig;eren Rand des sekretorischen Dom&auml;ne-a l&auml;nger Pfades zu verschmelzen. Der kurze Weg ist schneller Granulat-Freigabe zugeordnet und effizienter als des langen Weges zu t&ouml;ten. So regelt die Kinetik der fr&uuml;hen signalisieren die Qualit&auml;t der CYTOLYTISCHE T-Zell-Antwort.

Kinetik der fr&uuml;hen T-Zell-Rezeptor-Signalisierung regulieren die Pathway lytischer Untermodul Lieferumfang der sekretorischen Dom&auml;ne.

Granuli citolitica mediano l&#39;uccisione delle cellule infettate da virus dai linfociti T citotossici. Mostriamo qui che i granuli possono prendere percorsi lunghi o corti al dominio secretivo. Entrambi i percorsi utilizzati gli stessi eventi molecolari intracellulari, che hanno diverse disposizioni spaziali e temporali e sono regolamentati dalla cinetica di Ca(2+)-mediata segnalazione. Segnalazione rapida dovuta concentrazione swift granulo vicino al centro di organizzazione dei microtubuli (MTOC) e la successiva consegna dal MTOC polarizzato direttamente per il percorso pi&ugrave; breve, il dominio secretivo. Segnalazione indolente port&ograve; alla fine assunzione dei granuli che spostato lungo il microtubuli verso la periferia della sinapsi e poi spostato tangenzialmente al bordo esterno del secretivo dominio-un percorso pi&ugrave; lungo a fusibile. Il breve percorso &egrave; associato con rilascio di granuli pi&ugrave; veloce e pi&ugrave; efficiente uccidendo rispetto il percorso lungo. Cos&igrave;, la cinetica di segnalazione precoce regola la qualit&agrave; della risposta delle cellule T citolitica.

Cinetica dei primi T cell receptor signaling regolare il percorso di recapito del granulo litico al dominio secretivo.

&#x7D30;&#x80DE;&#x50B7;&#x5BB3;&#x6027;&#x9846;&#x7C92;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x50B7;&#x5BB3;&#x6027;T&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x611F;&#x67D3;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6B7B;&#x6EC5;&#x3092;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x9846;&#x7C92;&#x304C;&#x5206;&#x6CCC;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x9577;&#x3044;&#x304B;&#x77ED;&#x3044;&#x30D1;&#x30B9;&#x3092;&#x53D6;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3053;&#x306B;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30D1;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x7A7A;&#x9593;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6642;&#x9593;&#x7684;&#x306A;&#x30A2;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B8;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;Ca&#x306E;&#x52D5;&#x614B;&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x3092;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x306E;&#x3068;&#x540C;&#x3058;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x5229;&#x7528;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8FC5;&#x901F;&#x306A;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306F;&#x3001;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6210;&#x4E2D;&#x5FC3;&#xFF08;MTOC&#xFF09;&#x306B;&#x76F4;&#x63A5;&#x5206;&#x6CCC;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x6700;&#x77ED;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x504F;MTOC&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x306E;&#x914D;&#x4FE1;&#x306E;&#x8FD1;&#x304F;&#x306B;&#x8FC5;&#x901F;&#x9846;&#x7C92;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7121;&#x75DB;&#x6027;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306E;&#x5468;&#x56F2;&#x306B;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306B;&#x6CBF;&#x3063;&#x3066;&#x79FB;&#x52D5;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x5206;&#x6CCC;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3088;&#x308A;&#x9577;&#x3044;&#x30D1;&#x30B9;&#x306E;&#x5916;&#x5074;&#x306E;&#x7AEF;&#x306B;&#x878D;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x63A5;&#x7DDA;&#x65B9;&#x5411;&#x306B;&#x79FB;&#x52D5;&#x3057;&#x305F;&#x9846;&#x7C92;&#x306E;&#x5F8C;&#x671F;&#x52DF;&#x96C6;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x77ED;&#x3044;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x304C;&#x9577;&#x3044;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x901F;&#x3044;&#x9846;&#x7C92;&#x653E;&#x51FA;&#x3068;&#x3088;&#x308A;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x6BBA;&#x5BB3;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x52D5;&#x614B;&#x306F;&#x3001;T&#x7D30;&#x80DE;&#x7D30;&#x80DE;&#x50B7;&#x5BB3;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x8CEA;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3002;

&#x5206;&#x6CCC;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3078;&#x306E;&#x6EB6;&#x89E3;&#x6027;&#x9846;&#x7C92;&#x914D;&#x4FE1;&#x306E;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x521D;&#x671F;T&#x7D30;&#x80DE;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x52D5;&#x614B;

Cytolytic&#xACFC; &#xB9BD; cytotoxic T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC0B4;&#xC778;&#xC744; &#xC911;&#xC7AC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9BD; &#xBD84; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xAE38;&#xAC70;&#xB098; &#xC9E7;&#xC740; &#xACBD;&#xB85C; &#xAC78;&#xB9B4; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB450; &#xACBD;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xACF5;&#xAC04; &#xBC0F; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC900;&#xBE44; &#xD558; &#xACE0; &#xC2E0;&#xD638; Ca(2+) &#xC911;&#xC7AC;&#xC758; &#xC18D;&#xB3C4; &#xC758;&#xD574; &#xADDC;&#xC81C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xAC19;&#xC740; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xBD84;&#xC790; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xAC00; &#xD65C;&#xC6A9;. &#xBE60;&#xB978; &#xC2E0;&#xD638; microtubule &#xC870;&#xC9C1; &#xC13C;&#xD130; (MTOC) &#xADFC;&#xCC98; &#xBD84; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC758; &#xCD5C;&#xB2E8; &#xACBD;&#xB85C;&#xC5D0; &#xC9C1;&#xC811; &#xD3B8;&#xAD11;&#xB41C; MTOC&#xB85C; &#xD6C4;&#xC18D; &#xBC30;&#xB2EC; &#xC2E0;&#xC18D;&#xACFC; &#xB9BD; &#xC9D1;&#xC911;&#xC744; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB098;&#xD0DC; &#xD55C; &#xC2E0;&#xD638;&#xB294; &#xB0C5;&#xC758; &#xC8FC;&#xBCC0; microtubules &#xB530;&#xB77C; &#xC774;&#xB3D9; &#xD558; &#xACE0; &#xC774;&#xB3D9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC811;&#xC120; &#xBD84; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC744; &#xB354; &#xC774;&#xC0C1; &#xACBD;&#xB85C; &#xBC14;&#xAE65;&#xCABD; &#xAC00;&#xC7A5;&#xC790;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xD4E8;&#xC988;&#xB97C; &#xB9BD;&#xC758; &#xD6C4;&#xBC18; &#xBAA8;&#xC9D1; &#xC774;&#xB04C;&#xC5B4; &#xB0C8;&#xB2E4;. &#xC9E7;&#xC740; &#xD1B5;&#xB85C; &#xBE60;&#xB978;&#xACFC; &#xB9BD; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xAE34; &#xD1B5;&#xB85C; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xC8FD;&#xC774; &#xB354; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xCD08;&#xAE30; &#xC2E0;&#xD638; &#xC18D;&#xB3C4; &#xB860; T &#xC140; cytolytic &#xC751;&#xB2F5;&#xC758; &#xD488;&#xC9C8;&#xC744; &#xC870;&#xC808;.

&#xCD08;&#xAE30; T &#xC138;&#xD3EC; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC2E0;&#xD638;&#xC758; &#xC18D;&#xB3C4; &#xB860; &#xADDC;&#xC81C; &#xBD84; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xC6A9;&#xADE0;&#xC131;&#xACFC; &#xB9BD; &#xC804;&#xB2EC;&#xC758; &#xD1B5;&#xB85C;.

Gr&#xE1;nulos citol&#xED;ticos mediar la matanza de c&#xE9;lulas infectadas por virus por los linfocitos T citot&#xF3;xicos. Mostramos aqu&#xED; que los gr&#xE1;nulos pueden tomar caminos cortos o largos en el dominio de secreci&#xF3;n. Ambos caminos utiliz&#xF3; los mismos eventos intracelulares moleculares, que tienen diferentes arreglos espaciales y temporales y est&#xE1;n regulados por la cin&#xE9;tica de la Ca (2 +) mediada por la se&#xF1;alizaci&#xF3;n. Se&#xF1;alizaci&#xF3;n r&#xE1;pida causado la concentraci&#xF3;n de gr&#xE1;nulos r&#xE1;pida cerca del centro de la organizaci&#xF3;n de los microt&#xFA;bulos (COMT) y la entrega posterior de la COMT polariza de forma directa a la secreci&#xF3;n de dominio-el camino m&#xE1;s corto. Se&#xF1;alizaci&#xF3;n indolentes condujeron a la contrataci&#xF3;n tard&#xED;a de gr&#xE1;nulos que se mov&#xED;an a lo largo de los microt&#xFA;bulos a la periferia de la sinapsis y luego se traslad&#xF3; tangencialmente a fundir en el borde exterior de la secretora dominio un camino m&#xE1;s largo. La v&#xED;a corta se asocia con liberaci&#xF3;n de gr&#xE1;nulos m&#xE1;s r&#xE1;pido y la matanza m&#xE1;s eficiente que la v&#xED;a larga. As&#xED;, la cin&#xE9;tica de se&#xF1;alizaci&#xF3;n temprana regula la calidad de la respuesta de c&#xE9;lulas T citol&#xED;ticas.

Cin&#xE9;tica de receptores de c&#xE9;lulas T temprana de se&#xF1;alizaci&#xF3;n regular la v&#xED;a de la entrega de gr&#xE1;nulos l&#xED;ticos en el dominio de secretora

Cytotoxic T lymphocytes (CTL) play a critical role in immunity against viruses and cancer. The antigen receptor or T-cell receptor (TCR) on CTL determines the specificity toward target cells. The CD8 co-receptor functions in concert with the TCR to enhance TCR-mediated signaling, accounting for the remarkable sensitivity and swift signaling kinetics of the CTL response. The latter ensures efficient delivery and release of lytic granules, resulting in sensitive and rapid destruction of target cells.

Mechanisms controlling granule-mediated cytolytic activity of cytotoxic T lymphocytes.

Noncognate or self peptide-MHC (pMHC) ligands productively interact with T-cell receptor (TCR) and are always in a large access over the cognate pMHC on the surface of antigen presenting cells. We assembled soluble cognate and noncognate pMHC class I (pMHC-I) ligands at designated ratios on various scaffolds into oligomers that mimic pMHC clustering and examined how multivalency and density of the pMHCs in model clusters influences the binding to live CD8 T cells and the kinetics of TCR signaling. Our data demonstrate that the density of self pMHC-I proteins promotes their interaction with CD8 co-receptor, which plays a critical role in recognition of a small number of cognate pMHC-I ligands. This suggests that MHC clustering on live target cells could be utilized as a sensitive mechanism to regulate T cell responsiveness.

Evidence that the density of self peptide-MHC ligands regulates T-cell receptor signaling.

NK cells that mediate ADCC play an important role in tumor-specific immunity. We have examined factors limiting specific lysis of tumor cells by CD16.NK-92 cells induced by CNTO 95LF antibodies recognizing αV integrins that are overexpressed on many tumor cells. Although all tested tumor cells were killed by CD16.NK-92 effectors in the presence of the antibodies, the killing of target cells with a low level of ICAM-1 expression revealed a dramatic decrease in their specific lysis at high antibody concentration, revealing a dose limiting effect. A similar effect was also observed with primary human NK cells. The effect was erased after IFN-γ treatment of tumor cells resulting in upregulation of ICAM-1. Furthermore, killing of the same tumor cells induced by Herceptin antibody was significantly impaired in the presence of CNTO 95Ala-Ala antibody variant that blocks αV integrins but is incapable of binding to CD16. These data suggest that αV integrins on tumor cells could compensate for the loss of ICAM-1 molecules, thereby facilitating ADCC by NK cells. Thus, NK cells could exercise cytolytic activity against ICAM-1 deficient tumor cells in the absence of proinflammatory cytokines, emphasizing the importance of NK cells in tumor-specific immunity at early stages of cancer. 

Integrin receptors on tumor cells facilitate NK cell-mediated antibody-dependent cytotoxicity.

Pyropheophorbide a (Pyro) is a near-infrared (NIR) fluorescent dye and photosensitizer with high quantum yield that makes the dye suitable for tumor treatment both as an imaging and therapy agent. We have designed and synthesized a series of a Pyro-based NIR probes, based on the conjugation of Pyro with lipids. The nature of our probes requires the use of a lipophilic carrier to deliver the probes to cancer cell membranes. To address this, we have utilized lipid-based nanoparticles (LNPs) consisting of PEGylated lipids, which form the nanoparticle shell, and a lipid core. To endow the LNPs with targeting properties, nitrilotriacetic acid (NTA) lipids were included in the composition that enables the non-covalent attachment of His-tag targeting proteins preserving their functional activity. We found that the nature of the core molecules influence the nanoparticle size, shelf-life and stability at physiological temperature. Two different Pyro-lipid conjugates were loaded either into the core or shell of the LNPs. The conjugates revealed differential ability to be accumulated in the cell membrane of the target cells with time. Thus, the modular organization of the core-shell LNPs allows facile adjustment of their composition with goal to fine tuning the nanoparticle properties for in vivo application. 

Core-based lipid nanoparticles as a nanoplatform for delivery of near-infrared fluorescent imaging agents.

Integrin engagement on lymphocytes initiates "outside-in" signaling that is required for cytoskeleton remodeling and the formation of the synaptic interface. However, the mechanism by which the "outside-in" signal contributes to receptor-mediated intracellular signaling that regulates the kinetics of granule delivery and efficiency of cytolytic activity is not well understood. We have found that variations in ICAM-1 expression on tumor cells influence killing kinetics of these cells by CD16.NK-92 cytolytic effectors suggesting that changes in integrin ligation on the effector cells regulate the kinetics of cytolytic activity by the effector cells. To understand how variations of the integrin receptor ligation may alter cytolytic activity of CD16.NK-92 cells, we analyzed molecular events at the contact area of these cells exposed to planar lipid bilayers that display integrin ligands at different densities and activating CD16-specific antibodies. Changes in the extent of integrin ligation on CD16.NK-92 cells at the cell/bilayer interface revealed that the integrin signal influences the size and the dynamics of activating receptor microclusters in a Pyk2-dependent manner. Integrin-mediated changes of the intracellular signaling significantly affected the kinetics of degranulation of CD16.NK-92 cells providing evidence that integrins regulate the rate of target cell destruction in antibody-dependent cell cytotoxicity (ADCC). 

Integrins Influence the Size and Dynamics of Signaling Microclusters in a Pyk2-dependent Manner.

It is generally accepted that enumeration and characterization of antigen-specific T cells provide essential information about potency of the immune response. Here, we report a new technique to determine the frequency and potency of antigen-specific CD8 T cells. The assay measures changes of intracellular Ca in real time by fluorescent microscopy in individual CD8 T cells responding to cognate peptides. The T cells form continuous monolayer, enabling the cells to present the peptides to each other. This approach allows us to evaluate the kinetics of intracellular Ca signalling that characterizes the quality of T cell response. We demonstrate the usefulness of the assay examining the frequency and quality of cytomegalovirus-specific CD8 T cells from healthy donor and patient after haploidentical stem cell transplantation. The new assay has a potential to provide essential information determining the status of the immune system, disease morbidity, potency of therapeutic intervention and vaccine efficacy.

Evaluating frequency and quality of pathogen-specific T cells.

CD4+ T cells subsets have a wide range of important helper and regulatory functions in the immune system. Several studies have specifically suggested that circulating effector CD4+ T cells may play a direct role in control of HIV replication through cytolytic activity or autocrine β-chemokine production. However, it remains unclear whether effector CD4+ T cells expressing cytolytic molecules and β-chemokines are present within lymph nodes (LNs), a major site of HIV replication. Here, we report that expression of β-chemokines and cytolytic molecules are enriched within a CD4+ T cell population with high levels of the T-box transcription factors T-bet and eomesodermin (Eomes). This effector population is predominately found in peripheral blood and is limited in LNs regardless of HIV infection or treatment status. As a result, CD4+ T cells generally lack effector functions in LNs, including cytolytic capacity and IFNγ and β-chemokine expression, even in HIV elite controllers and during acute/early HIV infection. While we do find the presence of degranulating CD4+ T cells in LNs, these cells do not bear functional or transcriptional effector T cell properties and are inherently poor to form stable immunological synapses compared to their peripheral blood counterparts. We demonstrate that CD4+ T cell cytolytic function, phenotype, and programming in the peripheral blood is dissociated from those characteristics found in lymphoid tissues. Together, these data challenge our current models based on blood and suggest spatially and temporally dissociated mechanisms of viral control in lymphoid tissues.

Article	Year
Antibody specific for the peptide.major histocompatibility complex. Is it T cell receptor-like? The Journal of biological chemistry\| PubMed ID: 15302863	2004
Distinct role of lymphocyte function-associated antigen-1 in mediating effective cytolytic activity by cytotoxic T lymphocytes. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America\| PubMed ID: 15851656	2005
Quantum dot/peptide-MHC biosensors reveal strong CD8-dependent cooperation between self and viral antigens that augment the T cell response. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America\| PubMed ID: 17077145	2006
Protein kinase C theta regulates stability of the peripheral adhesion ring junction and contributes to the sensitivity of target cell lysis by CTL. Journal of immunology (Baltimore, Md. : 1950)\| PubMed ID: 18802085	2008
Can oligomeric T-cell receptor be used as a tool to detect viral peptide epitopes on infected cells? Clinical immunology (Orlando, Fla.)\| PubMed ID: 18845488	2009
Kinetics of early T cell receptor signaling regulate the pathway of lytic granule delivery to the secretory domain. Immunity\| PubMed ID: 19833088	2009
Mechanisms controlling granule-mediated cytolytic activity of cytotoxic T lymphocytes. Immunologic research\| PubMed ID: 22058021	2011
Evidence that the density of self peptide-MHC ligands regulates T-cell receptor signaling. PloS one\| PubMed ID: 22870225	2012
Integrin receptors on tumor cells facilitate NK cell-mediated antibody-dependent cytotoxicity. European journal of immunology\| PubMed ID: 24810893	2014
Core-based lipid nanoparticles as a nanoplatform for delivery of near-infrared fluorescent imaging agents. American journal of nuclear medicine and molecular imaging\| PubMed ID: 25250201	2014
Integrins Influence the Size and Dynamics of Signaling Microclusters in a Pyk2-dependent Manner. The Journal of biological chemistry\| PubMed ID: 25778396	2015
Evaluating frequency and quality of pathogen-specific T cells. Nature communications\| PubMed ID: 27786275	2016
Limited immune surveillance in lymphoid tissue by cytolytic CD4+ T cells during health and HIV disease. PLoS pathogens\| PubMed ID: 29652923	2018

Nadia Anikeeva

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