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IgY Technology: Extraction of Chicken Antibodies from Egg Yolk by Polyethylene Glycol (PEG) Precipitation

Hens can be immunized by means of  i.m. vaccination (Musculus pectoralis, left and right, injection volume  0.5-1.0 ml) or by means of Gene-Gun ...

Robert Koch-Institute

Proteotoxins comme la ricine, abrin, neurotoxines botulinique type A et B (BoNT/A, BoNT/B) et de l&#39;ent&eacute;rotoxine staphylococcique B (SEB) sont consid&eacute;r&eacute;s comme des agents de guerre biologiques potentiels qui pourraient &ecirc;tre utilis&eacute;s pour des attaques bioterroristes sur la cha&icirc;ne alimentaire. Dans cette &eacute;tude, nous avons utilis&eacute; une strat&eacute;gie de vaccination roman pour g&eacute;n&eacute;rer de haute affinit&eacute; des anticorps monoclonaux ou polyclonaux contre la ricine native, BoNT/A et BoNT/B. Les anticorps ont &eacute;t&eacute; utilis&eacute;s ainsi que des anticorps anti-SEB et abrin d&#39;&eacute;tablir un tableau tr&egrave;s sensible perle multiplex magn&eacute;tiques et fluorescent ayant une excellente sensibilit&eacute; entre 2 ng/L et 546 ng/L dans un volume d&#39;&eacute;chantillon minimale de 50 microL. Le test a &eacute;t&eacute; valid&eacute; &agrave; l&#39;aide de 20 diff&eacute;rents analytes de connexes et la pr&eacute;cision de dosage a &eacute;t&eacute; d&eacute;termin&eacute;e. Faire progresser la technologie actuelle du tableau de perle, le roman microbilles magn&eacute;tiques et fluorescent prouv&eacute; se pr&ecirc;tent &agrave; des proc&eacute;dures d&#39;enrichissement, par tout autre sensibilit&eacute; croissante &agrave; 0,3-85 ng/L, &agrave; partir d&#39;un volume d&#39;&eacute;chantillon de 500 microL. En outre, la m&eacute;thode a &eacute;t&eacute; appliqu&eacute;e avec succ&egrave;s pour l&#39;identification simultan&eacute;e des toxines cible dop&eacute;s dans les matrices alimentaires complexes comme les aliments pour b&eacute;b&eacute;s, lait et l&#39;yaourt. Sur la base de nos r&eacute;sultats, le test semble &ecirc;tre un bon outil pour un d&eacute;pistage &agrave; grande &eacute;chelle des &eacute;chantillons provenant de la cha&icirc;ne d&#39;approvisionnement alimentaire.

Quantification simultan&eacute;e des cinq des toxines bact&eacute;riennes et v&eacute;g&eacute;tales de matrices complexes en utilisant un test multiplex&eacute; suspension magn&eacute;tique fluorescent.

&#x5982;&#x84D6;&#x9EBB;&#x3001; &#x76F8;&#x601D;&#x3001; a &#x578B;&#x8089;&#x6BD2;&#x6BD2;&#x7D20; A &#x578B;&#x548C; B Proteotoxins (BoNT/BoNT/B A) &#x548C;&#x91D1;&#x9EC4;&#x8272;&#x8461;&#x8404;&#x7403;&#x83CC;&#x80A0;&#x6BD2;&#x7D20; B &#xFF08;SEB&#xFF09; &#x88AB;&#x89C6;&#x4E3A;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x6218;&#x5242;&#xFF0C;&#x53EF;&#x7528;&#x4E8E;&#x5BF9;&#x98DF;&#x7269;&#x94FE;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x6050;&#x6016;&#x4E3B;&#x4E49;&#x88AD;&#x51FB;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#x6211;&#x4EEC;&#x7528;&#x65B0;&#x578B;&#x514D;&#x75AB;&#x7B56;&#x7565;&#x6765;&#x751F;&#x6210;&#x672C;&#x673A;&#x84D6;&#x9EBB;&#x6BD2;&#x7D20;&#xFF0C;&#x9AD8;&#x4EB2;&#x548C;&#x529B;&#x5355;&#x514B;&#x9686;&#x548C;&#x591A;&#x514B;&#x9686;&#x6297;&#x4F53; BoNT/A &#x548C; BoNT/B&#x6297;&#x4F53;&#x4E0E; SEB &#x548C;&#x76F8;&#x601D;&#x5B50;&#x6BD2;&#x7D20;&#x7684;&#x6297;&#x4F53;&#x7528;&#x4E8E;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5177;&#x6709;&#x4F18;&#x79C0;&#x654F;&#x611F;&#x6027; 2l &#x5434;&#x548C; 546 &#x5434;/L 50 microL &#x6700;&#x5C0F;&#x6837;&#x672C;&#x91CF;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x654F;&#x611F;&#x7684;&#x78C1;&#x6027;&#x548C;&#x8367;&#x5149;&#x591A;&#x91CD;&#x73E0;&#x6570;&#x7EC4;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528; 20 &#x4E0D;&#x540C;&#x76F8;&#x5173;&#x5206;&#x6790;&#x7269;&#x8FDB;&#x884C;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x8BD5;&#x9A8C;&#x548C;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x7CBE;&#x5EA6;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684;&#x3002;&#x63A8;&#x8FDB;&#x73B0;&#x6709;&#x73E0;&#x9635;&#x5217;&#x6280;&#x672F;&#xFF0C;&#x65B0;&#x578B;&#x78C1;&#x6027;&#x548C;&#x8367;&#x5149;&#x5FAE;&#x7403;&#x8BC1;&#x660E;&#x6613;&#x4E8E;&#x6D53;&#x7F29;&#x7A0B;&#x5E8F;&#xFF0C;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x589E;&#x5F3A;&#x4E86;&#x654F;&#x611F;&#x5230; 0.3-85 &#x5434;/L&#xFF0C;500 microL &#x6837;&#x672C;&#x91CF;&#x4ECE;&#x5F00;&#x59CB;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x8BE5;&#x65B9;&#x6CD5;&#x5DF2;&#x6210;&#x529F;&#x5E94;&#x7528;&#x540C;&#x65F6;&#x8BC6;&#x522B;&#x7684;&#x5C16;&#x523A;&#x5165;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x98DF;&#x7269;&#x5982;&#x725B;&#x5976;&#x3001; &#x5A74;&#x513F;&#x98DF;&#x54C1;&#x548C;&#x9178;&#x5976;&#x77E9;&#x9635;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x6BD2;&#x7D20;&#x3002;&#x6839;&#x636E;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#xFF0C;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x662F;&#x5927;&#x89C4;&#x6A21;&#x68C0;&#x67E5;&#x6837;&#x54C1;&#x7684;&#x98DF;&#x54C1;&#x4F9B;&#x5E94;&#x94FE;&#x7684;&#x826F;&#x597D;&#x5DE5;&#x5177;&#x3002;

&#x540C;&#x65F6;&#x5B9A;&#x91CF;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x4E94;&#x7EC6;&#x83CC;&#x548C;&#x690D;&#x7269;&#x6BD2;&#x7D20;&#x4ECE;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x77E9;&#x9635;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E00;&#x79CD;&#x591A;&#x8DEF;&#x590D;&#x7528;&#x8367;&#x5149;&#x78C1;&#x60AC;&#x6D6E;&#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;

Proteotoxins such as ricin, abrin, botulinum neurotoxins type A and B (BoNT/A, BoNT/B) and staphylococcal enterotoxin B (SEB) are regarded as potential biological warfare agents which could be used for bioterrorism attacks on the food chain. In this study we used a novel immunisation strategy to generate high-affinity monoclonal and polyclonal antibodies against native ricin, BoNT/A, and BoNT/B. The antibodies were used along with antibodies against SEB and abrin to establish a highly sensitive magnetic and fluorescent multiplex bead array with excellent sensitivities between 2 ng/L and 546 ng/L from a minimal sample volume of 50 microL. The assay was validated using 20 different related analytes and the assay precision was determined. Advancing the existing bead array technology, the novel magnetic and fluorescent microbeads proved amenable to enrichment procedures, by further increasing sensitivity to 0.3-85 ng/L, starting from a sample volume of 500 microL. Furthermore, the method was successfully applied for the simultaneous identification of the target toxins spiked into complex food matrices like milk, baby food and yoghurt. On the basis of our results, the assay appears to be a good tool for large-scale screening of samples from the food supply chain.

Simultaneous quantification of five bacterial and plant toxins from complex matrices using a multiplexed fluorescent magnetic suspension assay.

Proteotoxins wie Ricin, Abrin, Botulinumneurotoxine Typ A und B (BoNT/A, BoNT/B) und Staphylokokken Enterotoxin B (SEB) gelten als potentielle biologische Kampfstoffe die Bioterrorismus Attacken auf die Nahrungskette verwendet werden k&ouml;nnten. In dieser Studie verwendeten wir eine neuartige Immunisierung-Strategie zum Generieren von hoher Affinit&auml;t monoklonale und polyklonale Antik&ouml;rper gegen native Rizin, BoNT/A und BoNT/B. Die Antik&ouml;rper wurden zusammen mit Antik&ouml;rpern gegen SEB und Abrin verwendet eine hochsensible magnetische und fluoreszierende multiplex Perlen-Array mit ausgezeichneten Empfindlichkeiten zwischen 2 ng/L und 546 ng/L aus einem minimalen Probenvolumen von 50 MicroL. Assays wurde mit 20 verschiedene verwandte Analyten validiert und die Assay-Pr&auml;zision wurde bestimmt. Voran die bestehende Perlen-Array-Technologie, die neuartige Magnet- und fluoreszierende Microbeads erwies sich als Parallelisierung auf Anreicherung Verfahren, indem die weiter zunehmende Empfindlichkeit gegen&uuml;ber 0,3-85 ng/L, beginnend mit einem Probenvolumen von 500 MicroL. Dar&uuml;ber hinaus wurde die Methode f&uuml;r die gleichzeitige Ermittlung der Ziel-Toxine Pfennigabsatz in komplexe Lebensmittelmatrizes wie Joghurt, Milch und Babynahrung erfolgreich angewendet. Ausgehend von unseren Ergebnissen scheint der Assay ein gutes Werkzeug f&uuml;r gro&szlig;angelegte Screening von Proben aus der Lebensmittelkette.

Gleichzeitige Quantifizierung der f&uuml;nf Bakterien- und Pflanze Giftstoffe aus komplexen Matrizen mit einem Multiplex fluoreszierende magnetischer Aufh&auml;ngung-Assay.

Proteotoxins come la ricina, abrina, neurotossine botulinica tipo A e B (BoNT/A, BoNT/B) e dell&#39;enterotossina stafilococcica B (SEB) sono considerati come potenziali agenti di guerra biologica che potrebbero essere utilizzati per gli attacchi di bioterrorismo per la catena alimentare. In questo studio abbiamo utilizzato una strategia di vaccinazione romanzo per generare anticorpi monoclonali e policlonali ad alta affinit&agrave; nativo ricina, BoNT/A e BoNT/B. Gli anticorpi sono stati utilizzati insieme ad anticorpi contro SEB e abrina per stabilire una matrice altamente sensibile tallone multiplex magnetiche e fluorescenti con eccellente sensibilit&agrave; tra 2 ng/L e 546 ng/L da un volume minimo del campione di 50 microL. Il test &egrave; stato validato utilizzando 20 diversi analiti correlati e la precisione del dosaggio &egrave; stata determinata. Ad avanzare la tecnologia di matrice perlina esistente, il romanzo microsfere magnetiche e fluorescenti dimostrato assoggettabile alle procedure di arricchimento, da ulteriori crescente sensibilit&agrave; di 0,3-85 ng/L, a partire da un volume del campione di 500 microL. Inoltre, il metodo &egrave; stato applicato con successo per l&#39;identificazione simultanea delle tossine destinazione a spillo in matrici alimentari complesse come il latte, pappe e yogurt. In base ai nostri risultati, il test sembra essere un buon strumento per lo screening su larga scala di campioni dalla catena di approvvigionamento alimentare.

Quantificazione simultanea di cinque tossine batteriche e pianta da matrici complesse utilizzando un dosaggio multiplex sospensione magnetica fluorescente.

&#x30EA;&#x30B7;&#x30F3;&#x3001;abrin&#x3001;&#x30DC;&#x30C4;&#x30EA;&#x30CC;&#x30B9; A &#x578B;&#x3084; B &#x306A;&#x3069;&#x306E; Proteotoxins &#xFF08;&#x30DC;&#x30F3;&#x30C8;/A&#x3001;&#x30DC;&#x30F3;&#x30C8;/B) &#x3068;&#x30D6;&#x30C9;&#x30A6;&#x7403;&#x83CC;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C6;&#x30ED;&#x30C8;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3; B &#xFF08;&#x30BB;&#x30D6;&#xFF09; &#x306F;&#x98DF;&#x7269;&#x9023;&#x9396;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30C6;&#x30ED;&#x653B;&#x6483;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x751F;&#x7269;&#x5175;&#x5668;&#x306E;&#x30A8;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x30C8;&#x3068;&#x6349;&#x3048;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x30CD;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6; &#x30EA;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x9AD8;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x6297;&#x4F53;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30DD;&#x30EA;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CA;&#x30EB;&#x6297;&#x4F53;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x65B0;&#x898F;&#x4E88;&#x9632;&#x63A5;&#x7A2E;&#x6226;&#x7565;&#x30DC;&#x30F3;&#x30C8;/A&#x3001;&#x30DC;&#x30F3;&#x30C8;/B&#x6297;&#x4F53; SEB &#x3068; abrin &#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x6297;&#x4F53;&#x3068;&#x3068;&#x3082;&#x306B;&#x9AD8;&#x611F;&#x5EA6;&#x78C1;&#x6C17;&#x30FB;&#x86CD;&#x5149;&#x591A;&#x91CD;&#x30D3;&#x30FC;&#x30C9;&#x914D;&#x5217;&#x512A;&#x308C;&#x305F;&#x611F;&#x5EA6; 2 ng/L &#x3068;&#x6700;&#x5C0F;&#x9650;&#x306E;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB; &#x30DC;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E; 50 microL &#x304B;&#x3089; 546 ng/L &#x306E;&#x9593;&#x3067;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;&#x3001;20 &#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x95A2;&#x9023; analytes &#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x691C;&#x8A3C;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3001;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306E;&#x7CBE;&#x5EA6;&#x304C;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x65E2;&#x5B58;&#x306E;&#x30D3;&#x30FC;&#x30BA; &#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x6280;&#x8853;&#x3092;&#x9032;&#x3081;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3001;&#x65B0;&#x5947;&#x78C1;&#x6C17;&#x30FB;&#x86CD;&#x5149;&#x30D3;&#x30FC;&#x30BA;&#x304C;&#x6FC3;&#x7E2E;&#x624B;&#x9806;&#x306B;&#x5F93;&#x3046;&#x8A3C;&#x660E;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x611F;&#x5EA6; 0.3 85 ng/L&#x3001;500 microL &#x306E;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB; &#x30DC;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30E0;&#x304B;&#x3089;&#x958B;&#x59CB;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x30DF;&#x30EB;&#x30AF;&#x3001;&#x30D9;&#x30D3;&#x30FC;&#x30D5;&#x30FC;&#x30C9;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30E8;&#x30FC;&#x30B0;&#x30EB;&#x30C8;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x98DF;&#x7269;&#x884C;&#x5217;&#x306B;&#x30B9;&#x30D1;&#x30A4;&#x30AF; &#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x6BD2;&#x7D20;&#x306E;&#x540C;&#x6642;&#x540C;&#x5B9A;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x304C;&#x6B63;&#x3057;&#x304F;&#x9069;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;&#x98DF;&#x54C1;&#x4F9B;&#x7D66;&#x30C1;&#x30A7;&#x30FC;&#x30F3;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x306E;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x826F;&#x3044;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x898B;&#x3048;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x4E94;&#x7D30;&#x83CC;&#x690D;&#x7269;&#x6BD2;&#x7D20;&#x591A;&#x91CD;&#x86CD;&#x5149;&#x78C1;&#x6C17;&#x30B5;&#x30B9;&#x30DA;&#x30F3;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; &#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x8907;&#x7D20;&#x884C;&#x5217;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x540C;&#x6642;&#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x3002;

&#xB9AC;, abrin, &#xBCF4; &#xD1A8; &#xB9AC;&#xB204;&#xC2A4; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD615; A, B &#xB4F1; Proteotoxins (BoNT/A, BoNT/B) &#xD3EC;&#xB3C4; enterotoxin B (SEB)&#xB294; &#xBA39;&#xC774; &#xC0AC;&#xC2AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBC14;&#xC774;&#xC624; &#xD14C;&#xB7EC; &#xACF5;&#xACA9;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559; &#xC804; &#xC694;&#xC6D0;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC04;&#xC8FC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB124;&#xC774;&#xD2F0;&#xBE0C; &#xB9AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB192;&#xC740; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xB2E8;&#xC77C; &#xD074;&#xB85C; &#xB110;&#xACFC; polyclonal &#xD56D; &#xCCB4;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558; &#xC18C;&#xC124; &#xC608;&#xBC29;&#xC811;&#xC885; &#xC804;&#xB7B5; &#xC0AC;&#xC6A9; BoNT/A &#xBC0F; BoNT/2. &#xD56D; &#xCCB4;&#xB294; 2 ng/L &#xBC0F; 50 Microl&#xC758; &#xCD5C;&#xC18C; &#xC0D8;&#xD50C; &#xBCFC;&#xB968;&#xC5D0;&#xC11C; 546 ng/L &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC6B0;&#xC218;&#xD55C; &#xAC10;&#xB3C4;&#xC640; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; &#xC790;&#xC11D; &#xBC0F; &#xD615;&#xAD11; &#xBA40;&#xD2F0;&#xD50C;&#xB809;&#xC2A4; &#xBE44;&#xB4DC; &#xC5B4;&#xB808;&#xC774; &#xC124;&#xC815; &#xC149;&#xACFC; abrin&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD56D; &#xCCB4;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; 20 &#xB2E4;&#xB978; &#xAD00;&#xB828;&#xB41C; analytes&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC720;&#xD6A8;&#xC131;&#xC744; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD558; &#xACE0; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC815;&#xBC00; &#xACB0;&#xC815; &#xD588;&#xB2E4;. &#xAE30;&#xC874; &#xBE44;&#xB4DC; &#xC5B4;&#xB808;&#xC774; &#xAE30;&#xC220; &#xBC1C;&#xC804;, &#xC18C;&#xC124; &#xC790;&#xC11D; &#xBC0F; &#xD615;&#xAD11; microbeads &#xC785;&#xC99D; &#xC758;&#xBB34;&#xAC00; &#xB18D;&#xCD95; &#xC808;&#xCC28;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB354;&#xC6B1; &#xC99D;&#xAC00; &#xAC10;&#xB3C4;&#xB97C; 0.3-85 ng/L, 500 Microl&#xC758; &#xC0D8;&#xD50C; &#xBCFC;&#xB968;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DC;&#xC791;. &#xB610;&#xD55C;, &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB294; &#xC131;&#xACF5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC6B0;&#xC720;, &#xC774;&#xC720;&#xC2DD;&#xACFC; &#xC694;&#xAD6C;&#xB974;&#xD2B8; &#xAC19;&#xC740; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC74C;&#xC2DD; &#xD589;&#xB82C;&#xC5D0; &#xC544;&#xAD70; &#xB300;&#xC0C1; &#xB3C5; &#xC18C;&#xC758; &#xB3D9;&#xC2DC; &#xC778;&#xC99D;&#xC5D0; &#xC801;&#xC6A9; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xADFC;&#xAC70; &#xD558; &#xC5EC; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC0D8;&#xD50C; &#xC2DD;&#xD488; &#xACF5;&#xAE09; &#xCCB4;&#xC778;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xB300;&#xADDC;&#xBAA8; &#xC2EC;&#xC0AC;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xC88B;&#xC740; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xAC00; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0A9;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB2E4;&#xC911;&#xD654; &#xB41C; &#xD615;&#xAD11; &#xB9C8;&#xADF8;&#xB124;&#xD2F1; &#xC11C; &#xC2A4; &#xD39C; &#xC158; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xD589;&#xB82C;&#xC5D0;&#xC11C; 5 &#xAC1C;&#xC758; &#xC138;&#xADE0; &#xBC0F; &#xC2DD;&#xBB3C; &#xB3C5; &#xC18C;&#xC758; &#xC815;&#xB7C9;&#xD654;&#xB97C; &#xB3D9;&#xC2DC;.

Proteotoxins como la ricina, abrina, neurotoxinas botul&iacute;nica tipo unas y B (BoNT/A, BoNT/B) y la enterotoxina estafiloc&oacute;cica B (SEB) son considerados como potenciales agentes de guerra biol&oacute;gica que podr&iacute;an ser utilizados para ataques de bioterrorismo de la cadena alimentaria. En este estudio se utiliz&oacute; una estrategia de inmunizaci&oacute;n novela para generar anticuerpos monoclonales y policlonales de alta afinidad contra ricina nativa, BoNT/A y BoNT/B. Los anticuerpos fueron utilizados junto con anticuerpos contra SEB y abrina establecer una matriz de alta sensibilidad magn&eacute;tica y fluorescente grano m&uacute;ltiplex con excelente sensibilidad entre 2 ng/L y 546 ng/L de un volumen de muestra m&iacute;nimo de 50 microL. El ensayo fue validado utilizando 20 analitos relacionados con diferentes y la precisi&oacute;n del ensayo se determin&oacute;. Avance de la tecnolog&iacute;a existente de la matriz de grano, la novela microesferas magn&eacute;ticas y fluorescente result&oacute; favorable a los procedimientos de enriquecimiento, por m&aacute;s sensibilidad creciente a 0.3-85 ng/L, a partir de un volumen de muestra de 500 microL. Adem&aacute;s, el m&eacute;todo fue aplicado con &eacute;xito para la identificaci&oacute;n simult&aacute;nea de las toxinas de destino tacon en matrices complejas de alimentos como la leche, alimentos para beb&eacute;s y yogur. En base a nuestros resultados, el ensayo parece ser una buena herramienta para la detecci&oacute;n a gran escala de las muestras de la cadena alimentaria.

Cuantificaci&oacute;n simult&aacute;nea de cinco toxinas bacterianas y la planta de matrices complejas usando un an&aacute;lisis de suspensi&oacute;n magn&eacute;tica fluorescente multiplexados.

&#x690D;&#x7269;&#x548C;&#x5FAE;&#x751F;&#x7269;&#x6BD2;&#x7D20;&#x84D6;&#x9EBB;&#x6BD2;&#x7D20;&#x3001; &#x91D1;&#x9EC4;&#x8272;&#x8461;&#x8404;&#x7403;&#x83CC;&#x80A0;&#x6BD2;&#x7D20; B &#xFF08;SEB&#xFF09; &#x548C; a &#x578B;&#x8089;&#x6BD2;&#x6BD2;&#x7D20; (BoNT) &#x7B49;&#x88AB;&#x89C6;&#x4E3A;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x6218;&#x5242;&#x3002;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x7B5B;&#x9009;&#x65B9;&#x6CD5;&#x662F;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x9700;&#x8981;&#x4F7F;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x751F;&#x7269;&#x4E4B;&#x5BB3;&#xFF0C;&#x5C24;&#x5176;&#x662F;&#x5BF9;&#x53D1;&#x751F;&#x5728;&#x590D;&#x6742;&#x793A;&#x4F8B;&#x77E9;&#x9635;&#x4E2D;&#x6BD2;&#x7D20;&#x7684;&#x6BEB;&#x4E0D;&#x542B;&#x7CCA;&#x7684;&#x548C;&#x654F;&#x611F;&#x9274;&#x5B9A;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x62A5;&#x544A;&#x63CF;&#x8FF0;&#x7684;&#x591A;&#x91CD;&#x4EB2;&#x51C0;&#x5316;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x5176;&#x6B21;&#x662F;&#x57FA;&#x8D28;&#x8F85;&#x52A9;&#x6FC0;&#x5149;&#x89E3;&#x5438;/&#x7535;&#x79BB; (&#x9A6C;&#x5C14;&#x8FEA;) &#x7EC4;&#x5408;-&#x57FA;&#x4E8E;&#x7684;&#x84D6;&#x9EBB;&#x6BD2;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;SEB&#xFF0C;&#x540C;&#x65F6;&#x67E5;&#x9A8C;&#x68C0;&#x6D4B; BoNT/A &#x548C; BoNT/B&#x8BE5;&#x65B9;&#x6CD5;&#x5305;&#x62EC;&#x4EB2;&#x548C;&#x6D53;&#x7F29;&#x6B65;&#x9AA4;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x4E3A;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x6C60;&#x4E2D;&#x7684;&#x6297;&#x4F53;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x9009;&#x5B9A;&#x7684;&#x56DB;&#x4E2A;&#x6BD2;&#x7D20;&#x4F7F;&#x7528;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x7684;&#x5355;&#x514B;&#x9686;&#x6297;&#x4F53;&#x3002;&#x6240;&#x9009;&#x7684;&#x6297;&#x4F53;&#x5141;&#x8BB8;&#x7279;&#x5B9A;&#x548C;&#x540C;&#x65F6;&#x6355;&#x83B7;&#x7684;&#x84D6;&#x9EBB;&#x6BD2;&#x86CB;&#x767D;&#x3001; SEB&#xFF0C;BoNT/A&#x3001; BoNT/B &#x548C;&#x76F8;&#x5E94;&#x7684; BoNT &#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x540E;&#x6765;&#x88AB;&#x5B9A;&#x8FDB;&#x884C;&#x8D28;&#x8C31;&#x98DE;&#x884C;&#x65F6;&#x95F4; (TOF) &#x8D28;&#x8C31;&#x6CD5; (MS)&#xFF0C;&#x4E0B;&#x9762;&#x7684;&#x80F0;&#x9176;&#x6D88;&#x5316;&#x3002;&#x5927;&#x7EA6; 500 fmol &#x6BD2;&#x7D20;&#x7684;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x6280;&#x672F;&#x7684;&#x654F;&#x611F;&#x6027;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6BD2;&#x7D20;&#x88AB;&#x63A2;&#x6D4B;&#x5185; 8 h&#xFF0C;&#x5373;&#x4F7F;&#x5728;&#x76EE;&#x524D;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x77E9;&#x9635;&#xFF0C;&#x5982;&#x725B;&#x5976;&#x6216;&#x679C;&#x6C41;&#x4E2D;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x57FA;&#x4E8E;&#x9A6C;&#x5C14;&#x8FEA;&#x7684;&#x591A;&#x91CD;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x5141;&#x8BB8;&#x7684;&#x5BC6;&#x5207;&#x76F8;&#x5173;&#x7684; BoNT &#x5174;&#x9686;-&#x548C;&#x5B50;&#x7C7B;&#x578B;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x5728;&#x5FB7;&#x56FD;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x771F;&#x5B9E;&#x7684;&#x4E2A;&#x6848;&#xFF0C;&#x98DF;&#x7269;&#x5F15;&#x81F4;&#x8089;&#x6BD2;&#x4E2D;&#x6BD2;&#x7684;&#x6B67;&#x89C6;&#x3002;

&#x591A;&#x91CD;&#x68C0;&#x6D4B;&#x7684;&#x5FAE;&#x751F;&#x7269;&#x548C;&#x690D;&#x7269;&#x6BD2;&#x7D20;&#x514D;&#x75AB;&#x4EB2;&#x548C;&#x5BCC;&#x96C6;&#x548C;&#x57FA;&#x8D28;&#x8F85;&#x52A9;&#x6FC0;&#x5149;&#x89E3;&#x5438;&#x7535;&#x79BB;/&#x8D28;&#x8C31;&#x6CD5;&#x3002;

Plant and microbial toxins such as ricin, staphylococcal enterotoxin B (SEB), and the botulinum neurotoxins (BoNT) are considered as potential biological warfare agents. Specific screening methods are, therefore, required that enable unambiguous and sensitive identification of these biohazards, particularly for the occurrence of the toxins in complex sample matrixes. The present study describes a combination of a multiplex-immunoaffinity purification approach, followed by matrix-assisted laser desorption/ionization (MALDI)-based detection for the simultaneous identification of ricin, SEB, BoNT/A, and BoNT/B. The method comprises an affinity enrichment step, using specific monoclonal antibodies for each of the four toxins which have been selected from a pool of antibodies. The selected antibodies allow for specific and simultaneous capture of ricin, SEB, BoNT/A, BoNT/B, and the corresponding BoNT complexes. These were subsequently identified by MALDI time-of-flight (TOF) mass spectrometry (MS), following tryptic digest. The sensitivity of the technique was approximately 500 fmol for each of the toxins. These toxins were detectable within 8 h, even when present in complex matrixes such as milk or juice. Furthermore, the MALDI-based multiplex assay allowed for the discrimination of closely related BoNT sero- and subtypes, including a real case of food-borne botulism in Germany.

Multiplex detection of microbial and plant toxins by immunoaffinity enrichment and matrix-assisted laser desorption/ionization mass spectrometry.

Plante et toxines microbiennes comme la ricine, ent&eacute;rotoxine staphylococcique B (SEB) et les neurotoxines botuliniques (BoNT) sont consid&eacute;r&eacute;s comme des agents de guerre biologiques potentiels. M&eacute;thodes de d&eacute;pistage sp&eacute;cifiques sont donc n&eacute;cessaires permettant l&#39;identification non ambigu&euml; et sensible de ces risques biologiques, notamment pour la pr&eacute;sence de toxines dans des matrices complexes d&#39;&eacute;chantillon. La pr&eacute;sente &eacute;tude d&eacute;crit une combinaison d&#39;une approche de purification multiplex-immunoaffinit&eacute;, suivie de d&eacute;sorption-ionisation de laser assist&eacute;e par matrice (MALDI)-base de d&eacute;tection pour l&#39;identification simultan&eacute;e de la ricine, SEB, BoNT/A et BoNT/B. La m&eacute;thode comprend une &eacute;tape d&#39;enrichissement affinit&eacute;, en utilisant des anticorps monoclonaux sp&eacute;cifiques pour chacun des quatre toxines qui ont &eacute;t&eacute; s&eacute;lectionn&eacute;s &agrave; partir d&#39;un pool d&#39;anticorps. Les anticorps s&eacute;lectionn&eacute;s permettent une capture sp&eacute;cifique et simultan&eacute;e de la ricine, SEB, BoNT/A, BoNT/B et les complexes de BoNT. Ceux-ci ont &eacute;t&eacute; par la suite identifi&eacute;s par MALDI temps de vol (TOF) spectrom&eacute;trie de masse (MS), digestion trypsique suivante. La sensibilit&eacute; de la technique &eacute;tait environ 500 fmol pour chacun des toxines. Ces toxines sont d&eacute;celables dans les 8 h, m&ecirc;me lorsqu&#39;ils sont pr&eacute;sents dans les matrices complexes tels que le lait ou le jus. Par ailleurs, le dosage multiplex &agrave; base de MALDI autoris&eacute; pour la discrimination des parentes BoNT sero - et sous-types, y compris un v&eacute;ritable cas de botulisme d&#39;origine alimentaire en Allemagne.

Multiplex detection of microbial et planter les toxines par enrichissement d&#39;immunoaffinit&eacute; et spectrom&eacute;trie de masse de d&eacute;sorption-ionisation laser assist&eacute;e par matrice.

Pflanze und mikrobielle Toxine wie Ricin, Staphylokokken Enterotoxin B (SEB) und die Botulinumneurotoxine (BoNT) gelten als potentielle biologische Kampfstoffe. Spezifische Screening-Methoden sind deshalb erforderlich, die eindeutige und sensible Identifizierung von diesen betroffen, besonders f&uuml;r das Auftreten der Toxine in komplexe Matrizen erm&ouml;glichen. Die vorliegende Studie beschreibt eine Kombination eines Multiplex-Immunoaffinity Reinigung Ansatzes, gefolgt von Matrix assisted Laser Desorption/Ionisation (MALDI)-basierte Erkennung f&uuml;r die gleichzeitige Ermittlung Rizin, SEB, BoNT/A und BoNT/B. Die Methode umfasst einen Affinit&auml;t Bereicherung Schritt, mit spezifischen monoklonalen Antik&ouml;rpern f&uuml;r die vier Toxine, die aus einem Pool von Antik&ouml;rpern ausgew&auml;hlt wurden. Die markierten Antik&ouml;rper k&ouml;nnen f&uuml;r spezifische und gleichzeitige Erfassung von Rizin, SEB, BoNT/A, BoNT/B und der entsprechenden BoNT-komplexe. Diese wurden sp&auml;ter durch MALDI Time-of-Flight (TOF) Massenspektrometrie (MS), folgende tryptic Digest gekennzeichnet. Die Empfindlichkeit der Technik war etwa 500 Fmol aller Gifte. Diese Toxine wurden nachweisbar innerhalb von 8 Stunden, auch wenn in komplexe Matrizen wie Milch oder Saft vorhanden. Ferner darf die MALDI-basierte multiplex-Assays f&uuml;r die Diskriminierung von eng verwandten BoNT Sero- und Subtypen, wie einen echten Fall von lebensmittelbedingten Botulismus in Deutschland.

Multiplex-Nachweis von Mikroorganismen und Pflanzen Giftstoffe durch Immunoaffinity Bereicherung und Matrix-unterst&uuml;tzte Laser-Desorption/Ionisation-Massenspektrometrie.

Pianta e tossine microbiche come la ricina, enterotossina stafilococcica B (SEB) e le neurotossine botulinica (BoNT) sono considerate come potenziali agenti di guerra biologica. Metodi di screening specifiche sono, pertanto, necessario che ne consentono l&#39;identificazione univoca e sensibile di questi rischi biologici, soprattutto per la presenza di tossine in matrici complesse campione. Il presente studio descrive una combinazione di un approccio di purificazione di immunoaffinity multiplex, seguito da desorbimento/ionizzazione del laser assistito da matrice (MALDI)-base di rilevamento per l&#39;identificazione simultanea di ricina, SEB, BoNT/A e BoNT/B. Il metodo comprende un passo di arricchimento di affinit&agrave;, utilizzando anticorpi monoclonali specifici per ciascuna delle quattro tossine che sono state selezionate da un pool di anticorpi. Gli anticorpi selezionati consentono di cattura specifica e simultanea di ricina, SEB, BoNT/A, BoNT/B e i corrispondenti complessi BoNT. Questi sono stati successivamente individuati da MALDI a tempo di volo (TOF) spettrometria di massa (MS), seguente triptico digest. La sensibilit&agrave; della tecnica &egrave; stato circa 500 fmol per ciascuna delle tossine. Queste tossine sono rilevabili entro 8 h, anche quando presenti in matrici complesse come latte o succo di frutta. Inoltre, l&#39;analisi multiplex MALDI-basata ha permesso per la discriminazione di sero BoNT strettamente correlati - e sottotipi, tra cui un vero e proprio caso di botulismo alimentare in Germania.

Multiplex rilevamento di microbiche e vegetali tossine di immunoaffinity arricchimento e spettrometria di massa di desorbimento/ionizzazione laser assistita da matrice.

&#x690D;&#x7269;&#x3084;&#x5FAE;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x6BD2;&#x7D20;&#x306E;&#x30EA;&#x30B7;&#x30F3;&#x3001;&#x30D6;&#x30C9;&#x30A6;&#x7403;&#x83CC;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C6;&#x30ED;&#x30C8;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3; B &#xFF08;&#x30BB;&#x30D6;&#xFF09; &#x30DC;&#x30C4;&#x30EA;&#x30CC;&#x30B9; (&#x30DC;&#x30F3;&#x30C8;) &#x306A;&#x3069;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x751F;&#x7269;&#x5175;&#x5668;&#x3068;&#x898B;&#x306A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x7279;&#x306B;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x8A66;&#x6599;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x6BD2;&#x7D20;&#x306E;&#x767A;&#x751F;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x77F3;&#x7DBF;&#x306E;&#x660E;&#x78BA;&#x306A;&#x654F;&#x611F;&#x306A;&#x8B58;&#x5225;&#x3092;&#x6709;&#x52B9;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x652F;&#x63F4;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B6;&#x30FC;&#x8131;&#x96E2;/&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x5316; &#xFF08;MALDI&#xFF09; &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066;&#x30DE;&#x30EB;&#x30C1;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9; immunoaffinity &#x306E;&#x6D44;&#x5316;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;-SEB&#x3001;&#x30EA;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x540C;&#x6642;&#x540C;&#x5B9A;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x691C;&#x51FA;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x30DC;&#x30F3;&#x30C8;/A&#x3001;&#x30DC;&#x30F3;&#x30C8;/B&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306F;&#x5404;&#x6297;&#x4F53;&#x306E;&#x30D7;&#x30FC;&#x30EB;&#x304B;&#x3089;&#x9078;&#x629E;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B; 4 &#x3064;&#x306E;&#x6BD2;&#x7D20;&#x306E;&#x7279;&#x7570;&#x30E2;&#x30CE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CA;&#x30EB;&#x6297;&#x4F53;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3092;&#x30A2;&#x30D5;&#x30A3;&#x30CB;&#x30C6;&#x30A3;&#x6FC3;&#x7E2E;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x3092;&#x542B;&#x307F;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9078;&#x629E;&#x3057;&#x305F;&#x6297;&#x4F53;&#x30EA;&#x30B7;&#x30F3;&#x3001;SEB&#x3001;&#x30DC;&#x30F3;&#x30C8;/A&#x3001;&#x30DC;&#x30F3;&#x30C8;/B&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B;&#x30DC;&#x30F3;&#x30C8;&#x932F;&#x4F53;&#x306E;&#x7279;&#x5B9A;&#x3068;&#x540C;&#x6642;&#x30AD;&#x30E3;&#x30D7;&#x30C1;&#x30E3;&#x3092;&#x8A31;&#x53EF;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C; MALDI &#x98DB;&#x884C;&#x6642;&#x9593; (TOF) &#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x6CD5;&#x306B;&#x3088;&#x308B; (MS) &#x4EE5;&#x4E0B;&#x306E;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D7;&#x30B7;&#x30F3;&#x6D88;&#x5316;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30C6;&#x30AF;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x306E;&#x611F;&#x5EA6;&#x306F;&#x7D04; 500 fmol &#x5404;&#x6BD2;&#x7D20;&#x306E;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6BD2;&#x7D20;&#x306F;&#x725B;&#x4E73;&#x3084;&#x30B8;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B9;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3067;&#x3055;&#x3048;&#x5B58;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x5834;&#x5408; 8 h &#x5185;&#x3067;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;MALDI &#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30DE;&#x30EB;&#x30C1;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9; &#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306E;&#x5BC6;&#x63A5;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x30DC;&#x30F3;&#x30C8; sero - &#x3068;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x3001;&#x30C9;&#x30A4;&#x30C4;&#x3067;&#x306F;&#x5B9F;&#x969B;&#x306E;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30DC;&#x30C4;&#x30EA;&#x30CC;&#x30B9;&#x98DF;&#x4E2D;&#x6BD2;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x5DEE;&#x5225;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x8A31;&#x53EF;&#x3002;

&#x591A;&#x91CD;&#x5316;&#x5FAE;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x691C;&#x51FA;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x690D;&#x7269;&#x6BD2;&#x7D20;&#x30A4;&#x30E0;&#x30CE;&#x30A2;&#x30D5;&#x30A3;&#x30CB;&#x30C6;&#x30A3;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30E0;&#x6FC3;&#x7E2E;&#x3068;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x652F;&#x63F4;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B6;&#x30FC;&#x8131;&#x96E2;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x5316;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x6CD5;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x3002;

&#xC2DD;&#xBB3C;&#xACFC; &#xBBF8;&#xC0DD;&#xBB3C; &#xB3C5; &#xC18C; &#xB9AC;, &#xD3EC;&#xB3C4; enterotoxin B (&#xC149;), &#xBCF4; &#xD1A8; &#xB9AC;&#xB204;&#xC2A4; &#xC2E0;&#xACBD; (BoNT) &#xB4F1; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559; &#xC804; &#xC694;&#xC6D0;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC04;&#xC8FC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xAD6C;&#xCCB4;&#xC801;&#xC778; &#xC2EC;&#xC0AC; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB294; &#xD2B9;&#xD788; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC608;&#xC81C; &#xD589;&#xB82C;&#xC5D0; &#xB3C5; &#xC18C;&#xC758; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801;&#xC758; &#xBA85;&#xD655; &#xD558; &#xACE0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xD544;&#xC694;&#xD55C;. &#xD604;&#xC7AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xBA40;&#xD2F0; &#xD50C;&#xB809;&#xC2A4; immunoaffinity &#xC815;&#xD654; &#xC811;&#xADFC; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; &#xBCF4;&#xC870; &#xB808;&#xC774;&#xC800; &#xD0C8; &#xCC29;/&#xC774;&#xC628;&#xD654; (MALDI) &#xB2E4;&#xC74C;&#xC758; &#xC870;&#xD569;&#xC5D0; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;-&#xB9AC; &#xC149;, &#xB3D9;&#xC2DC; &#xC2DD;&#xBCC4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC80;&#xC0C9; &#xAE30;&#xBC18; BoNT/A &#xBC0F; BoNT/2. &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB97C; &#xD2B9;&#xC815; &#xB2E8;&#xC77C; &#xD074;&#xB860; &#xD56D; &#xCCB4;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xAC01; 4 &#xAC1C;&#xC758; &#xB3C5; &#xC18C;&#xB97C; &#xD56D; &#xCCB4;&#xC758; &#xC218;&#xC601;&#xC7A5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC120;&#xC815; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xB18D;&#xCD95; &#xB2E8;&#xACC4;&#xB97C; &#xAD6C;&#xC131; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC120;&#xD0DD; &#xB41C; &#xD56D; &#xCCB4; &#xB9AC;, &#xC138; &#xBE0C;, BoNT/A, BoNT/B &#xBC0F; &#xD574;&#xB2F9; BoNT &#xBCF5;&#xD569;&#xBB3C;&#xC758; &#xAD6C;&#xCCB4;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; &#xB3D9;&#xC2DC; &#xCEA1;&#xCC98; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB4E4;&#xC740; &#xADF8; &#xD6C4; MALDI &#xBE44;&#xD589; &#xC2DC;&#xAC04; (TOF) &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D; (MS), tryptic &#xB2E4;&#xC74C; &#xB2E4;&#xC774;&#xC81C;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xAE30;&#xBC95;&#xC758; &#xAC10;&#xB3C4; &#xC57D; 500 fmol &#xB3C5; &#xC18C; &#xAC01; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB3C5; &#xC18C; &#xC6B0;&#xC720; &#xB098; &#xC8FC;&#xC2A4; &#xB4F1; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xD589;&#xB82C;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0; 8 h &#xC774;&#xB0B4; &#xAC10;&#xC9C0;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, MALDI &#xAE30;&#xBC18; &#xB2E4;&#xC911; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xBC00;&#xC811; &#xD558; &#xAC8C; &#xAD00;&#xB828; BoNT sero-&#xC640; &#xB3C5;&#xC77C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DD;&#xD488; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCF4; &#xD234; &#xB9AC;&#xB204;&#xC2A4; &#xC911;&#xB3C5;&#xC758; &#xC2E4;&#xC81C; &#xC0AC;&#xB840;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD55C; &#xD558;&#xC704;&#xC758; &#xCC28;&#xBCC4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD5C8;&#xC6A9;.

&#xBBF8;&#xC0DD;&#xBB3C;&#xC758; &#xAC80;&#xCD9C; &#xB2E4;&#xC911;&#xD654; &#xBC0F; &#xACF5;&#xC7A5; immunoaffinity &#xB18D;&#xCD95; &#xBC0F; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; &#xBCF4;&#xC870; &#xB808;&#xC774;&#xC800; &#xD0C8; &#xCC29;/&#xC774;&#xC628;&#xD654; &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D; &#xD558; &#xC5EC; &#xB3C5; &#xC18C;.

Planta y toxinas microbianas como ricina, enterotoxina estafiloc&oacute;cica B (SEB) y las neurotoxinas botul&iacute;nica (NTBo) se consideran como potenciales agentes de guerra biol&oacute;gica. M&eacute;todos de proyecci&oacute;n espec&iacute;fica son, por lo tanto, requiere que permiten la identificaci&oacute;n inequ&iacute;voca y sensible de estos riesgos biol&oacute;gicos, particularmente para la ocurrencia de las toxinas en matrices complejas de la muestra. El presente estudio describe una combinaci&oacute;n de un enfoque de purificaci&oacute;n m&uacute;ltiplex-inmunoafinidad, seguido de desorci&oacute;n/ionizaci&oacute;n de l&aacute;ser asistida por matriz (MALDI)-basado en la detecci&oacute;n de la identificaci&oacute;n simult&aacute;nea de ricina, SEB, BoNT/A y BoNT/B. El m&eacute;todo comprende una etapa de enriquecimiento de afinidad, utilizando anticuerpos monoclonales espec&iacute;ficos para cada una de las cuatro toxinas que han sido seleccionadas de un total de anticuerpos. Los anticuerpos seleccionados permiten captura espec&iacute;fica y simult&aacute;nea de ricina, SEB, BoNT/A, BoNT/B y los correspondientes complejos de BoNT. Estos fueron identificados posteriormente por MALDI tiempo de vuelo (TOF) espectrometr&iacute;a de masas (MS), digesti&oacute;n tr&iacute;ptica siguiente. La sensibilidad de la t&eacute;cnica fue de aproximadamente 500 fmol para cada una de las toxinas. Estas toxinas eran perceptibles dentro de 8 horas, incluso cuando se presenta en matrices complejas como la leche o jugo. Adem&aacute;s, el ensayo m&uacute;ltiple basadas en MALDI permitido para la discriminaci&oacute;n de BoNT estrechamente relacionados sero - y subtipos, incluyendo un caso real del botulismo de origen alimentario en Alemania.

Detecci&oacute;n de microbianas de m&uacute;ltiplex y planta toxinas por enriquecimiento de inmunoafinidad y espectrometr&iacute;a de masas desorci&oacute;n/ionizaci&oacute;n l&aacute;ser asistida por matriz.

A &#x578B;&#x8089;&#x6BD2;&#x6BD2;&#x7D20; (BoNT) &#x662F;&#x5DF2;&#x77E5;&#x7684;&#x7537;&#x5B50;&#x548C;&#x8089;&#x6BD2;&#x4E2D;&#x6BD2;&#x7684;&#x75C5;&#x6E90;&#x4F53;&#x7684;&#x6700;&#x6709;&#x6BD2;&#x7269;&#x8D28;&#x3002;&#x7531;&#x4E8E;&#x5176;&#x9AD8;&#x6BD2;&#x6027;&#x548C;&#x751F;&#x4EA7;&#x7684;&#x673A;&#x4F53;&#x68AD;&#x72B6;&#x82BD;&#x5B62;&#x6746;&#x83CC;&#x8089;&#x6BD2;&#x6746;&#x83CC;&#x7684;&#x53EF;&#x7528;&#x6027;&#xFF0C;BoNT &#x88AB;&#x89C6;&#x4E3A;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x6218;&#x5242;&#x3002;&#x8F7B;&#x5EA6;&#x5DF4;&#x6C0F;&#x6740;&#x83CC;&#x7684;&#x8FC7;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x5FEB;&#x901F;&#x4EA7;&#x54C1;&#x5206;&#x5E03;&#x3001; &#x6D88;&#x8D39;&#x725B;&#x5976;&#x4F9B;&#x5E94;&#x94FE;&#x957F;&#x671F;&#x4EE5;&#x6765;&#x88AB;&#x89C6;&#x4E3A;&#x751F;&#x7269;&#x6050;&#x6016;&#x4E3B;&#x4E49;&#x653B;&#x51FB;&#x7684;&#x6F5C;&#x5728;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;&#x56E0;&#x4E3A;&#x5C31;&#x6211;&#x4EEC;&#x6240;&#x77E5;&#xFF0C;&#x6CA1;&#x6709;&#x5173;&#x4E8E;&#x671F;&#x95F4;&#x5DF4;&#x6C0F;&#x6740;&#x83CC;&#x4E73;&#x4E2D;&#x7684; BoNT &#x706D;&#x6D3B;&#x7684;&#x5B9E;&#x8BC1;&#x6570;&#x636E;&#x53EF;&#x7528;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x65F6;&#x5019;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5BA4;&#x89C4;&#x6A21;&#x7684;&#x5DF4;&#x6C0F;&#x6740;&#x83CC;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x8C03;&#x67E5; BoNT &#x7C7B;&#x578B; (BoNT/A) &#x548C; BoNT/B&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x5404;&#x81EA;&#x7684;&#x914D;&#x5408;&#xFF0C;&#x5404;&#x9879;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x5F53;&#x6211;&#x4EEC;&#x76D1;&#x89C6;&#x725B;&#x5976;&#x78B1;&#x6027;&#x78F7;&#x9178;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#xFF0C;&#x662F;&#x4E1A;&#x754C;&#x516C;&#x8BA4;&#x7684;&#x6210;&#x529F;&#x5B8C;&#x6210;&#x5DF4;&#x6C0F;&#x6740;&#x83CC;&#x53C2;&#x6570;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x8BC1;&#x660E;&#x5DE5;&#x4E1A;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x76F8;&#x5AB2;&#x7F8E;&#x3002;&#x52A0;&#x70ED;&#x539F;&#x6599;&#x5976;&#x63BA;&#x4E00;&#x5B9A;&#x6570;&#x91CF;&#x7684; BoNT/A &#x6216; BoNT/B &#x6216;&#x5176;&#x5404;&#x81EA;&#x7684;&#x914D;&#x5408;&#x7269;&#xFF0C;&#x7ED3;&#x6784;&#x5B8C;&#x6574;&#x6027;&#x7684;&#x6BD2;&#x7D20;&#x4E4B;&#x4E00;&#x7531;&#x9176;&#x8054;&#x9176;&#x8054;&#x514D;&#x75AB;&#x5438;&#x9644;&#x6CD5; (ELISA) &#x548C;&#x5176;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x4EE5;&#x786E;&#x5B9A;&#x9F20;&#x6807;&#x751F;&#x7269;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x540E;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC1;&#x660E;&#x4E86;&#x8BE5;&#x6807;&#x51C6;&#x7684;&#x5DF4;&#x6C0F;&#x6740;&#x83CC;&#x5728; 15 72 &#x5EA6; C s &#x53EF;&#x706D;&#x6D3B;&#x81F3;&#x5C11; 99.99%&#x7684; BoNT/A &#x81F3;&#x5C11; 99.5%&#x7684;&#x5176;&#x5404;&#x81EA;&#x7684;&#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x548C; BoNT/B&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x5982;&#x679C;&#x6545;&#x610F; BoNTs &#x6216;&#x5176;&#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x88AB;&#x91CA;&#x653E;&#x5230;&#x725B;&#x5976;&#x4F9B;&#x5E94;&#x94FE;&#xFF0C;&#x6807;&#x51C6;&#x5DF4;&#x6C0F;&#x6740;&#x83CC;&#x6761;&#x4EF6;&#x5C06;&#x6BD4;&#x539F;&#x5148;&#x9884;&#x8BA1;&#x7684;&#x66F4;&#x5927;&#x5E45;&#x5EA6;&#x51CF;&#x5C11;&#x5176;&#x6D3B;&#x52A8;&#x4ECE;&#x800C;&#x964D;&#x4F4E;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x7684;&quot;BoNT &#x725B;&#x5976;&#x4E2D;&quot;&#x65B9;&#x6848;&#x7684;&#x5A01;&#x80C1;&#x7EA7;&#x522B;&#x3002;

&#x725B;&#x5976;&#x4E2D;&#x7684; a &#x578B;&#x8089;&#x6BD2;&#x6BD2;&#x7D20;&#x7684;&#x60C5;&#x51B5;&#xFF1A; &#x5B9E;&#x9A8C;&#x6570;&#x636E;&#x3002;

Botulinum neurotoxin (BoNT) is the most toxic substance known to man and the causative agent of botulism. Due to its high toxicity and the availability of the producing organism Clostridium botulinum, BoNT is regarded as a potential biological warfare agent. Because of the mild pasteurization process, as well as rapid product distribution and consumption, the milk supply chain has long been considered a potential target of a bioterrorist attack. Since, to our knowledge, no empirical data on the inactivation of BoNT in milk during pasteurization are available at this time, we investigated the activities of BoNT type A (BoNT/A) and BoNT/B, as well as their respective complexes, during a laboratory-scale pasteurization process. When we monitored milk alkaline phosphatase activity, which is an industry-accepted parameter of successfully completed pasteurization, our method proved comparable to the industrial process. After heating raw milk spiked with a set amount of BoNT/A or BoNT/B or one of their respective complexes, the structural integrity of the toxin was determined by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and its functional activity by mouse bioassay. We demonstrated that standard pasteurization at 72 degrees C for 15 s inactivates at least 99.99% of BoNT/A and BoNT/B and at least 99.5% of their respective complexes. Our results suggest that if BoNTs or their complexes were deliberately released into the milk supply chain, standard pasteurization conditions would reduce their activity much more dramatically than originally anticipated and thus lower the threat level of the widely discussed "BoNT in milk" scenario.

The case of botulinum toxin in milk: experimental data.

Neurotoxine botulique (BoNT) est la substance plus toxique connue pour l&#39;homme et l&#39;agent causal du botulisme. En raison de sa haute toxicit&eacute; et la disponibilit&eacute; de la productrice botulinum de Clostridium organisme, BoNT est consid&eacute;r&eacute; comme un agent de guerre biologique potentiel. En raison du processus de pasteurisation doux, ainsi que la rapide produit distribution et la consommation, la cha&icirc;ne d&#39;approvisionnement de lait a longtemps &eacute;t&eacute; consid&eacute;r&eacute; comme une cible potentielle d&#39;une attaque bioterroriste. Car, &agrave; notre connaissance, aucune donn&eacute;e empirique sur l&#39;inactivation de BoNT dans le lait pendant la pasteurisation n&#39;est disponibles en ce moment, nous avons &eacute;tudi&eacute; les activit&eacute;s de BoNT type A (BoNT/A) et BoNT/B, ainsi que leurs complexes respectifs, lors d&#39;un processus de pasteurisation de laboratoire. Lorsque nous avons mesur&eacute; l&#39;activit&eacute; phosphatase alcaline lait, qui est un param&egrave;tre reconnues de pasteurisation compl&eacute;t&eacute; avec succ&egrave;s, notre m&eacute;thode s&#39;est av&eacute;r&eacute;e comparable au processus industriel. Apr&egrave;s chauffage lait cru additionn&eacute; d&#39;une quantit&eacute; d&eacute;termin&eacute;e de BoNT/A ou BoNT/B ou l&#39;un de leurs complexes respectifs, l&#39;int&eacute;grit&eacute; structurale de la toxine a &eacute;t&eacute; d&eacute;termin&eacute; par dosage immunoenzymatique (ELISA) et son activit&eacute; fonctionnelle par des tests biologiques de la souris. Nous avons d&eacute;montr&eacute; que la pasteurisation standard &agrave; 72 degr&eacute;s C pendant 15 s inactive au moins 99,99 % de BoNT/A et BoNT/B et au moins 99,5 % de leurs complexes respectifs. Nos r&eacute;sultats sugg&egrave;rent que si BoNTs ou leurs complexes ont &eacute;t&eacute; d&eacute;lib&eacute;r&eacute;ment rel&acirc;ch&eacute;s dans la cha&icirc;ne d&#39;approvisionnement de lait, conditions de pasteurisation standard r&eacute;duirait leur activit&eacute; beaucoup plus spectaculaire que pr&eacute;vu et donc baisser le niveau de menace du sc&eacute;nario largement discut&eacute; &laquo; BoNT dans le lait &raquo;.

Le cas de la toxine botulique dans le lait : des donn&eacute;es exp&eacute;rimentales.

Botulinumneurotoxin (BoNT) ist die giftigste Substanz, die Mann und den Erreger des Botulismus bekannt. Aufgrund seiner hohen Toxizit&auml;t und die Verf&uuml;gbarkeit von den produzierenden Organismus Clostridium Botulinum gilt BoNT als potentielle biologische Kriegsf&uuml;hrung-Agent. Wegen des milden Pasteurisierung Prozess, als auch schnelle Produktvertrieb und Verbrauch wurde die Lieferkette Milch lange ein potenzielles Ziel von einen bioterroristischen Anschlag angesehen. Da, nach unserem Wissen keine empirischen Daten &uuml;ber die Inaktivierung von BoNT in der Milch w&auml;hrend der Pasteurisierung zu diesem Zeitpunkt vorliegen, untersucht wir die Aktivit&auml;ten von BoNT Typ A (BoNT/A) und BoNT/B, sowie ihre jeweiligen komplexe, w&auml;hrend einer Laborma&szlig;stab Pasteurisierung. Wenn wir Milch Aktivit&auml;t der alkalischen Phosphatase,, welche ein branchenweit akzeptierte Parameter der erfolgreich abgeschlossenen Pasteurisierung ist &uuml;berwacht, bewiesen unsere Methode vergleichbar mit der industriellen Prozess. Nachdem Spike mit einer gewissen BoNT/A-Heizung Rohmilch oder BoNT/B oder eins von ihren jeweiligen komplexen, die strukturelle Integrit&auml;t des Toxins wurde durch Enzyme-linked Immunosorbent Assay (ELISA) und seine funktionelle Aktivit&auml;t durch Maus-Bioassay bestimmt. Wir bewiesen, dass Norm Pasteurisieren bei 72 Grad C f&uuml;r 15 s inaktiviert mindestens 99,99 % von BoNT/A und BoNT/B und mindestens 99,5 % ihrer jeweiligen komplexe. Unsere Ergebnisse legen nahe, dass wenn BoNT oder ihre komplexe absichtlich in die Milch-Supply-Chain freigesetzt wurden, Norm Pasteurisierung Bedingungen ihrer T&auml;tigkeit viel dramatischer, als urspr&uuml;nglich erwartet und w&uuml;rde somit Gefahr des viel diskutierten &quot;BoNT in Milch&quot; Szenarios niedrigere.

Der Fall von Botulinumtoxin in Milch: experimentelle Daten.

Neurotossina botulinica (BoNT) &egrave; la sostanza pi&ugrave; tossica conosciuta per l&#39;uomo e l&#39;agente eziologico del botulismo. A causa della sua alta tossicit&agrave; e la disponibilit&agrave; del Clostridium botulinum di produzione organismo, BoNT &egrave; considerato come un potenziale agente di guerra biologica. A causa del delicato trattamento di pastorizzazione, cos&igrave; come rapida distribuzione e consumo, la catena di fornitura di latte a lungo &egrave; stata considerata un potenziale bersaglio di un attacco bioterroristico. Dal momento che, a nostra conoscenza, nessun dati empirici sull&#39;inattivazione di BoNT nel latte durante la pastorizzazione sono disponibili in questo momento, abbiamo studiato l&#39;attivit&agrave; di BoNT tipo A (BoNT/A) e BoNT/B, nonch&eacute; i loro rispettivi complessi, durante un processo di pastorizzazione su scala di laboratorio. Quando abbiamo monitorato l&#39;attivit&agrave; della fosfatasi alcalina di latte, che &egrave; un parametro accettato dall&#39;industria di pastorizzazione completato con successo, il nostro metodo dimostrato paragonabile al processo industriale. Dopo riscaldamento latte crudo a spillo con una determinata quantit&agrave; di BoNT/A o BoNT/B o uno dei loro rispettivi complessi, l&#39;integrit&agrave; strutturale della tossina &egrave; stato determinato dall&#39;analisi enzima-collegata dell&#39;immunosorbente (ELISA) e la sua attivit&agrave; funzionale di biotest. Abbiamo dimostrato che standard pastorizzazione a 72 gradi C per 15 s inattiva almeno il 99,99% di BoNT/A e BoNT/B e almeno il 99,5% dei loro rispettivi complessi. I nostri risultati suggeriscono che se BoNTs o loro complessi sono stati deliberatamente rilasciati nella filiera latte, pastorizzazione standard condizioni sarebbero ridurre la loro attivit&agrave; molto pi&ugrave; drasticamente di quanto originariamente previsto e quindi abbassare il livello di minaccia dello scenario ampiamente discusso &quot;BoNT nel latte&quot;.

Il caso della tossina botulinica nel latte: dati sperimentali.

&#x30DC;&#x30C4;&#x30EA;&#x30CC;&#x30B9;&#x795E;&#x7D4C;&#x6BD2;&#x7D20; &#xFF08;&#x30DC;&#x30F3;&#x30C8;) &#x4EBA;&#x9593;&#x3068;&#x30DC;&#x30C4;&#x30EA;&#x30CC;&#x30B9;&#x4E2D;&#x6BD2;&#x306E;&#x539F;&#x56E0;&#x3068;&#x306A;&#x308B;&#x30A8;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x30C8;&#x306B;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x6700;&#x3082;&#x6709;&#x6BD2;&#x306A;&#x7269;&#x8CEA;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x6BD2;&#x6027;&#x3068;&#x751F;&#x7523;&#x83CC;&#x30DC;&#x30C4;&#x30EA;&#x30CC;&#x30B9;&#x83CC;&#x306E;&#x53EF;&#x7528;&#x6027;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x30DC;&#x30F3;&#x30C8;&#x306F;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x751F;&#x7269;&#x5175;&#x5668;&#x306E;&#x30A8;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x307F;&#x306A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8EFD;&#x5EA6;&#x6BBA;&#x83CC;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x8FC5;&#x901F;&#x306A;&#x88FD;&#x54C1;&#x306E;&#x6D41;&#x901A;&#x3068;&#x6D88;&#x8CBB;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x30DF;&#x30EB;&#x30AF;&#x306E;&#x30B5;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4; &#x30C1;&#x30A7;&#x30FC;&#x30F3;&#x306F;&#x751F;&#x7269;&#x30C6;&#x30ED;&#x653B;&#x6483;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x9577;&#x304F;&#x8003;&#x616E;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x77E5;&#x8B58;&#x306B;&#x725B;&#x4E73;&#x6BBA;&#x83CC;&#x4E2D;&#x30DC;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x5316;&#x306E;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x3053;&#x306E;&#x6642;&#x70B9;&#x3067;&#x5229;&#x7528;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x5B9F;&#x9A13;&#x5BA4;&#x898F;&#x6A21;&#x306E;&#x6BBA;&#x83CC;&#x51E6;&#x7406;&#x4E2D;&#x306B;&#x30DC;&#x30F3;&#x30C8; &#x30BF;&#x30A4;&#x30D7; A &#xFF08;&#x30DC;&#x30F3;&#x30C8;/A&#xFF09; &#x3068;&#x30DC;&#x30F3;&#x30C8;/B&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x306E;&#x932F;&#x4F53;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x696D;&#x754C;&#x53D7;&#x3051;&#x5165;&#x308C;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x304C;&#x6B63;&#x5E38;&#x306B;&#x5B8C;&#x4E86;&#x3057;&#x305F;&#x6BBA;&#x83CC;&#x306E;&#x3067;&#x3059;&#x3001;&#x30DF;&#x30EB;&#x30AF; &#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30EA;&#x6027;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x76E3;&#x8996;&#x624B;&#x6CD5;&#x306F;&#x5DE5;&#x696D;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306B;&#x5339;&#x6575;&#x3059;&#x308B;&#x8A3C;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x751F;&#x4E73;&#x3092;&#x52A0;&#x71B1;&#x30B9;&#x30D1;&#x30A4;&#x30AF; &#x30DC;&#x30F3;&#x30C8;/A &#x306E;&#x8A2D;&#x5B9A;&#x91CF;&#x3092;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30DC;&#x30F3;&#x30C8;/B &#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x306E;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3001;&#x6BD2;&#x7D20;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x6574;&#x5408;&#x6027;&#x306E; 1 &#x3064;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x9175;&#x7D20;&#x6297;&#x4F53;&#x6CD5; (elisa) &#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x5F8C;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x6A19;&#x6E96;&#x306E;&#x6BBA;&#x83CC; 72 &#x5EA6; c &#x3067; 15 &#x5B9F;&#x8A3C; s &#x30DC;&#x30F3;&#x30C8;/A &#x306E; 99.99 &#xFF05; &#x4EE5;&#x4E0A;&#x3092;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30DC;&#x30F3;&#x30C8;/B &#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x306E;&#x932F;&#x4F53;&#x306E;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082; 99.5 &#xFF05;&#x3002;BoNTs &#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x932F;&#x4F53;&#x306B;&#x6545;&#x610F;&#x306B;&#x30DF;&#x30EB;&#x30AF;&#x306E;&#x30B5;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4; &#x30C1;&#x30A7;&#x30FC;&#x30F3;&#x306B;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5834;&#x5408;&#x306F;&#x3001;&#x6A19;&#x6E96;&#x7684;&#x306A;&#x6BBA;&#x83CC;&#x6761;&#x4EF6;&#x3060;&#x308D;&#x3046;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3092;&#x5F53;&#x521D;&#x4E88;&#x60F3;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x5287;&#x7684;&#x306B;&#x6E1B;&#x3089;&#x3059;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x3046;&#x3057;&#x3066;&#x5E83;&#x304F;&#x8B70;&#x8AD6;&#x300C;&#x30DC;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x30DF;&#x30EB;&#x30AF;&#x306F;&#x300D;&#x30B7;&#x30CA;&#x30EA;&#x30AA;&#x306E;&#x8105;&#x5A01;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x4E0B;&#x3052;&#x308B;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x30DF;&#x30EB;&#x30AF;&#x306E;&#x30DC;&#x30C4;&#x30EA;&#x30CC;&#x30B9;&#x6BD2;&#x7D20;&#x306E;&#x4E8B;&#x4F8B;: &#x5B9F;&#x9A13;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x3002;

&#xBCF4; &#xD1A8; &#xB9AC;&#xB204;&#xC2A4; neurotoxin (BoNT) &#xB0A8;&#xC790;&#xC640; &#xBCF4; &#xD234; &#xB9AC;&#xB204;&#xC2A4; &#xC911;&#xB3C5;&#xC758; &#xC6D0;&#xC778;&#xC774; &#xB418;&#xB294; &#xB300;&#xB9AC;&#xC778;&#xC73C;&#xB85C; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4; &#xAC00;&#xC7A5; &#xB3C5;&#xC131; &#xBB3C;&#xC9C8;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xB3C5;&#xC131;&#xACFC; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xC720;&#xAE30; &#xCCB4; Clostridium &#xBCF4; &#xD1A8; &#xB9AC;&#xB204;&#xC2A4;&#xC758; &#xAC00;&#xC6A9;&#xC131;, BoNT &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8;&#xB85C; &#xAC04;&#xC8FC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC57D;&#xD55C; &#xC0B4; &#xADE0; &#xACFC;&#xC815;&#xC73C;&#xB85C; &#xC2E0;&#xC18D;&#xD55C; &#xC81C;&#xD488; &#xC720;&#xD1B5;&#xACFC; &#xC18C;&#xBE44; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC6B0;&#xC720; &#xACF5;&#xAE09; &#xCCB4;&#xC778; &#xC624;&#xB798; &#xACE0;&#xB824; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4; bioterrorist &#xACF5;&#xACA9;&#xC758; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xB300;&#xC0C1;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC9C0;&#xC2DD;, &#xC6B0;&#xC720;&#xC758; &#xC800;&#xC628; &#xC0B4; &#xADE0; &#xBC95; &#xC911; Bont&#xC758; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xACBD;&#xD5D8;&#xC801; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xAC00;&#xC774; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;, &#xC774;&#xD6C4; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC2E4; &#xADDC;&#xBAA8; &#xC800;&#xC628; &#xC0B4; &#xADE0; &#xBC95; &#xACFC;&#xC815; BoNT &#xD0C0;&#xC785; (BoNT/A) BoNT/B, &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xB2E8;&#xC9C0;, &#xD65C;&#xB3D9; &#xC870;&#xC0AC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC131;&#xACF5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC644;&#xB8CC; &#xB41C; &#xC800;&#xC628; &#xC0B4; &#xADE0; &#xBC95;&#xC758; &#xC5C5;&#xACC4; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218;, &#xC6B0;&#xC720; &#xC54C;&#xCE7C;&#xB9AC; &#xC131; &#xC778;&#xC0B0; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xD6A8;&#xC18C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xBC29;&#xBC95;&#xC740; &#xC0B0;&#xC5C5; &#xACF5;&#xC815;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xC785;&#xC99D;. BoNT/A &#xC124;&#xC815;&#xB41C; &#xAE08;&#xC561;&#xC73C;&#xB85C; &#xC544;&#xAD70; &#xC6D0;&#xC2DC; &#xC6B0;&#xC720; &#xB09C;&#xBC29; &#xC2DC;&#xC124; &#xB610;&#xB294; BoNT/B &#xB610;&#xB294; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xB2E8;&#xC9C0;, &#xB3C5; &#xC18C;&#xC758; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xBB34;&#xACB0;&#xC131;&#xC744; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xB97C; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; bioassay&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD6A8;&#xC18C; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; immunosorbent &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; (ELISA) &#xBC0F; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xACB0;&#xC815; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; 15&#xC5D0; 72&#xB3C4; C&#xC5D0;&#xC11C; &#xD45C;&#xC900; &#xC800;&#xC628; &#xC0B4; &#xADE0; &#xBC95;&#xC744; &#xC2DC;&#xC5F0; s BoNT/A&#xC758; 99.99% &#xC774;&#xC0C1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0DD;&#xAE34;&#xB2E4; BoNT/B&#xC640; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xB2E8;&#xC9C0;&#xC758; 99.5% &#xC774;&#xC0C1;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xACBD;&#xC6B0; BoNTs &#xB610;&#xB294; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xB2E8;&#xC9C0; &#xC6B0;&#xC720; &#xACF5;&#xAE09; &#xCCB4;&#xC778;&#xC5D0; &#xC758;&#xB3C4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xB41C;, &#xD45C;&#xC900; &#xC0B4; &#xADE0; &#xC870;&#xAC74; &#xAC83;&#xC774; &#xC6D0;&#xB798; &#xC608;&#xC0C1; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xD6E8;&#xC52C; &#xB354; &#xADF9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC904;&#xC77C; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xB0AE;&#xC740; &#xC6B0;&#xC720;&#xC5D0; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C; &#xB17C;&#xC758; &quot;BoNT&quot; &#xC2DC;&#xB098;&#xB9AC;&#xC624;&#xC758; &#xC704;&#xD611; &#xC218;&#xC900;.

&#xC6B0;&#xC720;&#xC5D0; &#xBCF4; &#xD1A8; &#xB9AC;&#xB204;&#xC2A4; &#xB3C5; &#xC18C;&#xC758; &#xACBD;&#xC6B0;: &#xC2E4;&#xD5D8; &#xB370;&#xC774;&#xD130;.

Neurotoxina botul&iacute;nica (NTBo) es la sustancia m&aacute;s t&oacute;xica conocida por el hombre y el agente causante del botulismo. Debido a su alta toxicidad y la disponibilidad de la producci&oacute;n Clostridium botulinum de organismo, BoNT es considerado como un agente potencial de guerra biol&oacute;gica. Debido al proceso de pasteurizaci&oacute;n suave, as&iacute; como distribuci&oacute;n de productos r&aacute;pido y consumo, la cadena de suministro de leche durante mucho tiempo se ha considerado un potencial blanco de un ataque bioterrorista. Puesto que, a nuestro conocimiento, no hay datos emp&iacute;ricos sobre la inactivaci&oacute;n de la NTBo en la leche durante la pasteurizaci&oacute;n est&aacute;n disponibles en este momento, hemos investigado las actividades de la NTBo tipo A (BoNT/A) y BoNT/B, as&iacute; como sus respectivos complejos, durante un proceso de pasteurizaci&oacute;n a escala de laboratorio. Cuando supervisamos la actividad de la fosfatasa alcalina de leche, que es un par&aacute;metro aceptados en el sector de pasterizaci&oacute;n completada con &eacute;xito, nuestro m&eacute;todo result&oacute; comparable al proceso industrial. Despu&eacute;s de calentar la leche enriquecida con una cantidad fija de BoNT/A o BoNT/B o uno de sus respectivos complejos, la integridad estructural de la toxina se determin&oacute; por enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) y su actividad funcional por bioensayo de rat&oacute;n. Demostramos que pasteurizaci&oacute;n est&aacute;ndar a 72 grados C para 15 s hace inactivo por lo menos el 99.99% de BoNT/A y BoNT/B y al menos un 99.5% de sus respectivos complejos. Nuestros resultados sugieren que si BoNTs o sus complejos fueron liberados deliberadamente en la cadena de suministro de leche, las condiciones de pasteurizaci&oacute;n est&aacute;ndar reducir&iacute;a su actividad mucho m&aacute;s espectacular de lo previsto originalmente y as&iacute; bajar el nivel de amenaza del escenario &quot;BoNT ampliamente discutido en la leche&quot;.

El caso de la toxina botul&iacute;nica en leche: datos experimentales.

Les neurotoxines botulique sont produites par la bact&eacute;rie ana&eacute;robie Clostridium botulinum et sont divis&eacute;s en sept s&eacute;rotypes distincts (A &agrave; G) connus pour causer le botulisme chez les animaux et les humains. Dans cette &eacute;tude, un multiplex quantitative Real-time PCR assay pour la d&eacute;tection simultan&eacute;e des s&eacute;rotypes humains pathog&egrave;ne de Clostridium botulinum A, B, E et F a &eacute;t&eacute; d&eacute;velopp&eacute;. Bas&eacute;e sur la chimie TaqMan, nous avons utilis&eacute; cinq sets individuels amorce-sonde dans un PCR, combinant les deux mineur rainure liant - et verrouill&eacute; sondes contenant de l&#39;acide nucl&eacute;ique. Chaque sonde d&#39;hydrolyse a &eacute;t&eacute; &eacute;tiquet&eacute; individuellement avec des fluorochromes distinguables, permettant ainsi la discrimination entre les s&eacute;rotypes A, B, E et F. Afin d&#39;&eacute;viter les r&eacute;sultats faussement n&eacute;gatifs, nous avons con&ccedil;u un t&eacute;moin d&#39;amplification interne, qui a &eacute;t&eacute; amplifi&eacute; simultan&eacute;ment avec les g&egrave;nes quatre cibles, produisant ainsi une approche PCR pentaplexed avec une probabilit&eacute; de d&eacute;tection de 95 % entre 7 et 287 g&eacute;nomes par PCR. En outre, nous avons d&eacute;velopp&eacute; six individuels singleplex tests de PCR en temps r&eacute;el bas&eacute;s sur la chimie TaqMan pour la d&eacute;tection de c. botulinum s&eacute;rotypes A, B, C, D, E et F. Apr&egrave;s une analyse de 42 C. botulinum et 57 non-C. souches botulique, la singleplex et des tests de PCR multiplexes a montr&eacute; une excellente sp&eacute;cificit&eacute;. &Agrave; l&#39;aide de pointes &eacute;chantillons alimentaires, que nous avons pu d&eacute;tecter entre 10, 3 et 10 5 UFC/ml, respectivement. En outre, nous avons pu d&eacute;tecter de c. botulinum dans les &eacute;chantillons provenant de plusieurs cas de botulisme en Allemagne. Dans l&#39;ensemble, le test de pentaplexed ont montr&eacute; la sp&eacute;cificit&eacute; et la sensibilit&eacute; &eacute;lev&eacute;e et autoris&eacute;s pour la projection simultan&eacute;e et la diff&eacute;renciation des sp&eacute;cimens de c. botulinum A, B, E et F.

Pentaplexed quantitative PCR en temps r&eacute;el pour la d&eacute;tection simultan&eacute;e et la quantification des clostridia de productrices de neurotoxine botulique dans les aliments et les &eacute;chantillons cliniques.

A &#x578B;&#x8089;&#x6BD2;&#x6BD2;&#x7D20;&#x7531;&#x8089;&#x6BD2;&#x68AD;&#x83CC;&#x538C;&#x6C27;&#x7EC6;&#x83CC; &#x300B;&#xFF0C;&#x5206;&#x4E3A;&#x4E03;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x8840;&#x6E05;&#x578B; &#xFF08;A &#x5230; G&#xFF09; &#x5DF2;&#x77E5;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x8089;&#x6BD2;&#x4E2D;&#x6BD2;&#x7684;&#x52A8;&#x7269;&#x548C;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x591A;&#x8DEF;&#x590D;&#x7528;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5B9E;&#x65F6;&#x8367;&#x5149;&#x5B9A;&#x91CF; PCR &#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x540C;&#x65F6;&#x7684; A&#x3001; B&#x3001; E &#x548C; F &#x5F00;&#x53D1;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x81F4;&#x75C5;&#x6027; C.&#x8089;&#x6BD2;&#x6746;&#x83CC;&#x8840;&#x6E05;&#x578B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x57FA;&#x4E8E;&#x63A2;&#x9488;&#x5316;&#x5B66;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E94;&#x4E2A;&#x4EBA;&#x7684;&#x5E95;&#x6F06;&#x63A2;&#x5934;&#x5957;&#x5185;&#x4E00;&#x4E2A; PCR&#xFF0C;&#x7ED3;&#x5408;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5C0F;&#x6C9F;&#x8054;&#x7F16;&#x7A0B;&#x5E8F;-&#x548C;&#x9501;&#x5B9A;&#x542B;&#x6709;&#x6838;&#x9178;&#x7684;&#x63A2;&#x6D4B;&#x5668;&#x3002;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x6C34;&#x89E3;&#x63A2;&#x6D4B;&#x5668;&#x662F;&#x5355;&#x72EC;&#x6807;&#x6709;&#x533A;&#x522B; fluorochromes&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x4F7F; A&#x3001; B&#x3001; E &#x548C; F.&#x8840;&#x6E05;&#x578B;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x6B67;&#x89C6;&#x82E5;&#x8981;&#x907F;&#x514D;&#x51FA;&#x73B0;&#x5047;&#x9634;&#x6027;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x5185;&#x90E8;&#x653E;&#x5927;&#x63A7;&#x5236;&#xFF0C;&#x540C;&#x65F6;&#x4E0E;&#x56DB;&#x4E2A;&#x76EE;&#x6807;&#x57FA;&#x56E0;&#x6269;&#x589E;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x4EA7;&#x751F; pentaplexed &#x7684;&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x94FE;&#x53CD;&#x5E94;&#x65B9;&#x6CD5;&#x4E4B;&#x95F4; 7 &#x548C; 287 &#x6BCF; PCR &#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7B49;&#x6548;&#x9879; 95%&#x68C0;&#x6D4B;&#x6982;&#x7387;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5236;&#x5B9A;&#x4E86;&#x516D;&#x4E2A;&#x4EBA; singleplex &#x5B9E;&#x65F6; pcr &#x57FA;&#x7840;&#x7684; C.&#x8089;&#x6BD2;&#x6746;&#x83CC;&#x8840;&#x6E05;&#x578B; A&#x3001; B&#x3001; C&#x3001; D&#x3001; E &#x548C; F.&#x68C0;&#x6D4B;&#x63A2;&#x9488;&#x5316;&#x5B66;&#x5BF9; 42 C.&#x8089;&#x6BD2;&#x6746;&#x83CC;&#x548C; 57 &#x975E; C.&#x5206;&#x6790;&#x540E;&#x8089;&#x6BD2;&#x6746;&#x83CC;&#x83CC;&#x682A;&#x3001; singleplex &#x548C;&#x591A;&#x91CD; pcr &#x5C55;&#x793A;&#x4F18;&#x79C0;&#x7684;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x5C16;&#x523A;&#x98DF;&#x7269;&#x6837;&#x672C;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F97;&#x4EE5;&#x5206;&#x522B;&#x68C0;&#x6D4B; 10 &#xFF08;3&#xFF09; &#x548C; 10(5) CFU/ml &#x4E4B;&#x95F4;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x90FD;&#x80FD;&#x5728;&#x5FB7;&#x56FD;&#x7684;&#x8089;&#x6BD2;&#x4E2D;&#x6BD2;&#x7684;&#x51E0;&#x4E2A;&#x75C5;&#x4F8B;&#x7684;&#x6837;&#x672C;&#x4E2D;&#x68C0;&#x6D4B; C.&#x8089;&#x6BD2;&#x6746;&#x83CC;&#x3002;&#x603B;&#x4F53;&#x800C;&#x8A00;&#xFF0C;pentaplexed &#x6D4B;&#x5B9A;&#x8868;&#x660E;&#x9AD8;&#x7075;&#x654F;&#x5EA6;&#x548C;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x548C;&#x5141;&#x8BB8;&#x540C;&#x65F6;&#x7B5B;&#x9009;&#x548C;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x6807;&#x672C;&#x8FDB;&#x884C; A&#x3001; B&#x3001; E &#x548C; F.C.&#x8089;&#x6BD2;

Pentaplexed &#x5B9A;&#x91CF;&#x5B9E;&#x65F6; pcr &#x540C;&#x65F6;&#x68C0;&#x6D4B;&#x548C;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684; a &#x578B;&#x8089;&#x6BD2;&#x6BD2;&#x7D20;&#x751F;&#x4EA7;&#x68AD;&#x72B6;&#x98DF;&#x54C1;&#x53CA;&#x4E34;&#x5E8A;&#x6837;&#x54C1;&#x4E2D;&#x3002;

Botulinum neurotoxins are produced by the anaerobic bacterium Clostridium botulinum and are divided into seven distinct serotypes (A to G) known to cause botulism in animals and humans. In this study, a multiplexed quantitative real-time PCR assay for the simultaneous detection of the human pathogenic C. botulinum serotypes A, B, E, and F was developed. Based on the TaqMan chemistry, we used five individual primer-probe sets within one PCR, combining both minor groove binder- and locked nucleic acid-containing probes. Each hydrolysis probe was individually labeled with distinguishable fluorochromes, thus enabling discrimination between the serotypes A, B, E, and F. To avoid false-negative results, we designed an internal amplification control, which was simultaneously amplified with the four target genes, thus yielding a pentaplexed PCR approach with 95% detection probabilities between 7 and 287 genome equivalents per PCR. In addition, we developed six individual singleplex real-time PCR assays based on the TaqMan chemistry for the detection of the C. botulinum serotypes A, B, C, D, E, and F. Upon analysis of 42 C. botulinum and 57 non-C. botulinum strains, the singleplex and multiplex PCR assays showed an excellent specificity. Using spiked food samples we were able to detect between 10(3) and 10(5) CFU/ml, respectively. Furthermore, we were able to detect C. botulinum in samples from several cases of botulism in Germany. Overall, the pentaplexed assay showed high sensitivity and specificity and allowed for the simultaneous screening and differentiation of specimens for C. botulinum A, B, E, and F.

Pentaplexed quantitative real-time PCR assay for the simultaneous detection and quantification of botulinum neurotoxin-producing clostridia in food and clinical samples.

Botulinumneurotoxine werden durch das anaerobe Bakterium Clostridium Botulinum produziert und gliedern sich in sieben verschiedene Serotypen (A bis G) zu Botulismus bei Tieren und Menschen f&uuml;hren kann. In dieser Studie ein Multiplexer quantitativer Echtzeit-PCR-assay f&uuml;r die simultane Detektion der menschlichen pathogenen C. Botulinum Serotypen A, B, E und F entwickelt wurde. Auf der Grundlage der TaqMan-Chemie, verwendeten wir f&uuml;nf einzelne Grundierung-Probe-Sets innerhalb einer PCR, kombinieren beide minor Groove Binder - und Nukleins&auml;ure-haltigen Sonden gesperrt. Jede Hydrolyse-Sonde wurde individuell beschriftet mit unterscheidbar Fluorochrom, wodurch Diskriminierung zwischen der Serotypen A, B, E und F. Zur Vermeidung falsch-Negative Ergebnisse, gestalteten wir eine interne Amplifikationskontrolle, die gleichzeitig mit den vier Zielgene verst&auml;rkt wurde, woraus sich somit einen Pentaplexed-PCR-Ansatz mit 95 % Erkennungsrate Wahrscheinlichkeiten zwischen 7 und 287 Genom-&Auml;quivalente pro PCR. Dar&uuml;ber hinaus entwickelten wir sechs einzelne Singleplex Echtzeit-PCR-Assays basierend auf die TaqMan-Chemie zum Nachweis von C. Botulinum-Serotypen A, B, C, D, E und F. Bei der Analyse von 42 C. Botulinum und 57 nicht-C. Botulinum-St&auml;mme, die Singleplex und multiplex-PCR-Assays zeigte eine ausgezeichnete Spezifit&auml;t. Mit Pfennigabsatz Lebensmittelproben waren wir zwischen 10 Abs&auml;tze 3 und 10 Absatz 5 KBE/ml, bzw. zu erkennen. Dar&uuml;ber hinaus konnten wir C. Botulinum in Proben aus mehrere F&auml;lle von Botulismus in Deutschland zu erkennen. Insgesamt Pentaplexed Assays zeigten hohe Sensitivit&auml;t und Spezifit&auml;t und erlaubt die gleichzeitige Screening und Differenzierung von Exemplaren f&uuml;r C. Botulinum A, B, E und F.

Pentaplexed quantitative Echtzeit-PCR Assay f&uuml;r die simultane Detektion und Quantifizierung von Botulinum Neurotoxin-produzierenden Clostridien in Lebensmitteln und klinischen Proben.

Neurotossine botulinica sono prodotte dal batterio anaerobico Clostridium botulinum e sono divisi in sette distinti sierotipi (da A G) che causano il botulismo negli animali e nell&#39;uomo. In questo studio, un multiplex PCR quantitativa in tempo reale analisi per la rilevazione simultanea di sierotipi patogeni umani c. botulinum &egrave; stato sviluppato A, B, E e F. Basato sulla chimica TaqMan, abbiamo usato cinque set di primer-sonda individuali all&#39;interno di una PCR, combinando entrambi legante groove minori - e bloccato sonde contenenti acido nucleico. Ogni sonda idrolisi individualmente &egrave; stato etichettato con fluorocromi distinguibili, permettendo cos&igrave; la discriminazione tra i sierotipi A, B, E e F. Per evitare risultati falsi-negativi, abbiamo progettato un controllo di amplificazione interno, che &egrave; stato amplificato simultaneamente con i geni quattro bersaglio, producendo cos&igrave; un approccio PCR pentaplexed con probabilit&agrave; del 95% di rilevazione tra 7 e 287 equivalenti di genoma per PCR. Inoltre, abbiamo sviluppato sei singoli singleplex Real-Time PCR assays basato sulla chimica TaqMan per la rilevazione dei sierotipi di c. botulinum A, B, C, D, E e F. Su analisi di 42 C. botulinum e 57 non-C. ceppi botulino, singleplex e multiplex PCR dosaggi ha mostrato un&#39;ottima specificit&agrave;. Usando a spillo campioni alimentari, che siamo stati in grado di rilevare tra 10, paragrafo 3 e 5 CFU/ml, rispettivamente. Inoltre, siamo stati in grado di rilevare c. botulinum nei campioni da diversi casi di botulismo in Germania. In generale, il dosaggio di pentaplexed ha dimostrato elevata sensibilit&agrave; e specificit&agrave; e consentito per la proiezione simultanea e la differenziazione degli esemplari di c. botulinum A, B, E e F.

Pentaplexed quantitative Real-Time PCR test per la rilevazione simultanea e la quantificazione dei clostridi di produzione di neurotossina botulinica negli alimenti e nei campioni clinici.

&#x30DC;&#x30C4;&#x30EA;&#x30CC;&#x30B9;&#x5ACC;&#x6C17;&#x6027;&#x7D30;&#x83CC;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30B8;&#x30A6;&#x30E0;&#x5C5E;&#x30DC;&#x30C4;&#x30EA;&#x30CC;&#x30B9;&#x83CC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3001;&#x52D5;&#x7269;&#x3068;&#x30D2;&#x30C8;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30DC;&#x30C4;&#x30EA;&#x30CC;&#x30B9;&#x4E2D;&#x6BD2;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066; 7 &#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x8840;&#x6E05; (A &#xFF5E; G) &#x306B;&#x5206;&#x304B;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;, &#x591A;&#x91CD;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x30EA;&#x30A2;&#x30EB;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0; PCR &#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4; A&#x3001;B&#x3001;E&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; F &#x306B;&#x958B;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3072;&#x3068;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x30DC;&#x30C4;&#x30EA;&#x30CC;&#x30B9;&#x83CC;&#x306E;&#x8840;&#x6E05;&#x578B;&#x306E;&#x540C;&#x6642;&#x691C;&#x51FA;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x3002;TaqMan &#x5316;&#x5B66;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x526F;&#x6E9D;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C0;&#x30FC;-&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3068;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;&#x306F;&#x3001;&#x6838;&#x9178;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x3066; 1 &#x3064;&#x306E; PCR &#x5185;&#x306E; 5 &#x3064;&#x306E;&#x500B;&#x3005; &#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC; &#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6; &#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;&#x306E;&#x5404;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;&#x306F;&#x500B;&#x5225;&#x306B;&#x5F93;&#x3063;&#x3066;&#x8840;&#x6E05;&#x578B; A&#x3001;B&#x3001;E&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; F &#x306E;&#x8B58;&#x5225;&#x3092;&#x6709;&#x52B9;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x533A;&#x5225;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x8272;&#x7D20;&#x3092;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EB;&#x4ED8;&#x3051;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x507D;&#x9670;&#x6027;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3092;&#x56DE;&#x907F;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;95% &#x691C;&#x51FA;&#x78BA;&#x7387; pentaplexed PCR &#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1; 7 &#x53CA;&#x3073; 287 &#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x540C;&#x7B49; PCR &#x3042;&#x305F;&#x308A;&#x9593;&#x964D;&#x4F0F;&#x540C;&#x6642;&#x306B; 4 &#x3064;&#x306E;&#x76EE;&#x7684;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x5897;&#x5E45;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x5185;&#x90E8;&#x5897;&#x5E45;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x8A2D;&#x8A08;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005; 6 &#x500B;&#x3005; singleplex &#x30EA;&#x30A2;&#x30EB;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0; PCR &#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4; TaqMan &#x5316;&#x5B66;&#x30DC;&#x30C4;&#x30EA;&#x30CC;&#x30B9;&#x83CC;&#x306E;&#x8840;&#x6E05;&#x578B; A&#x3001;B&#x3001;C&#x3001;D&#x3001;E&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; f. &#x306E;&#x691C;&#x51FA;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F;&#x958B;&#x767A;42 C. &#x30DC;&#x30C4;&#x30EA;&#x30CC;&#x30B9;&#x3068; 57 c. &#x3068;&#x5206;&#x6790;&#x30DC;&#x30C4;&#x30EA;&#x30CC;&#x30B9;&#x682A;&#x3001;singleplex&#x3001;&#x30DE;&#x30EB;&#x30C1;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9; PCR &#x306E;&#x8A66;&#x91D1;&#x306F;&#x512A;&#x79C0;&#x306A;&#x7279;&#x7570;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C; 10 (3) &#x3068; 10 (5) CFU/ml &#x306E;&#x9593;&#x3092;&#x691C;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x305F;&#x98DF;&#x54C1;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB; &#x30B9;&#x30D1;&#x30A4;&#x30AF;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x30DC;&#x30C4;&#x30EA;&#x30CC;&#x30B9;&#x83CC;&#x30DC;&#x30C4;&#x30EA;&#x30CC;&#x30B9;&#x4E2D;&#x6BD2;&#x3067;&#x30C9;&#x30A4;&#x30C4;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x3067;&#x691C;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x305F;&#x3002;&#x5168;&#x4F53;&#x7684;&#x306B;&#x3001;pentaplexed &#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x9AD8;&#x3044;&#x611F;&#x5EA6;&#x3068;&#x7279;&#x7570;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3057;&#x3001;&#x540C;&#x6642;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3068;&#x5206;&#x5316;&#x30DC;&#x30C4;&#x30EA;&#x30CC;&#x30B9;&#x83CC; A&#x3001;B&#x3001;E&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; F &#x7528;&#x8A66;&#x6599;&#x306E;&#x8A31;&#x53EF;

Pentaplexed &#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x306E;&#x30EA;&#x30A2;&#x30EB;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0; PCR &#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306E;&#x540C;&#x6642;&#x691C;&#x51FA;&#x53CA;&#x3073;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x98DF;&#x54C1;&#x30FB;&#x81E8;&#x5E8A;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30DC;&#x30C4;&#x30EA;&#x30CC;&#x30B9;&#x795E;&#x7D4C;&#x6BD2;&#x3092;&#x751F;&#x7523;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30B8;&#x30A6;&#x30E0;&#x5C5E;&#x306E;&#x3002;

&#xBCF4; &#xD1A8; &#xB9AC;&#xB204;&#xC2A4; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD610; &#xAE30;&#xC131; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544; Clostridium &#xBCF4; &#xD1A8; &#xB9AC;&#xB204;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD558; &#xACE0; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xACFC; &#xC778;&#xAC04;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF4; &#xD234; &#xB9AC;&#xB204;&#xC2A4; &#xC911;&#xB3C5;&#xC744; &#xC77C;&#xC73C;&#xD0A4;&#xB294; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4; 7 &#xAC00;&#xC9C0; serotypes (A ~ G)&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xB204;&#xC5B4;&#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4;&#xC911;&#xD654; &#xB41C; &#xC815;&#xB7C9;&#xC801; &#xC2E4;&#xC2DC;&#xAC04; PCR &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; C. &#xBCF4; &#xD1A8; &#xB9AC;&#xB204;&#xC2A4; serotypes A, B, E &#xBC0F; F&#xB294; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC758; &#xB3D9;&#xC2DC; &#xAC80;&#xC0C9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; mrna&#xAC00; &#xAC80;&#xCD9C; &#xB410;&#xB2E4;. TaqMan &#xD654;&#xD559;&#xC744; &#xBC14;&#xD0D5;&#xC73C;&#xB85C;, &#xD55C; PCR&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xD575; &#xC0B0; &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C;&#xB97C; &#xACE0;&#xC815; &#xACB0;&#xD569; &#xB450; &#xBD80; &#xD648; &#xBC14;&#xC778;&#xB354;-&#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; 5 &#xAC1C;&#xC758; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xB1CC;&#xAD00; &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C; &#xC138;&#xD2B8;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAC01;&#xAC00; &#xC218; &#xBD84;&#xD574; &#xC870;&#xC0AC;&#xB294; &#xAC1C;&#xBCC4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; serotypes A, B, E &#xBC0F; f. &#xC0AC;&#xC774; &#xCC28;&#xBCC4;&#xC744; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xAD6C;&#xBCC4;&#xD560; &#xC218; &#xD615;&#xAD11; &#xD45C;&#xC2DC; False &#xBD80;&#xC815;&#xC801; &#xACB0;&#xACFC; &#xD53C;&#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC800;&#xC870;&#xD55C; PCR &#xB2F9; 7, 287 &#xAC8C;&#xB188; &#xB4F1;&#xAC00;&#xBB3C; &#xC0AC;&#xC774; 95% &#xAC80;&#xCD9C; &#xD655;&#xB960;&#xC73C;&#xB85C; pentaplexed PCR &#xC811;&#xADFC;&#xC744; &#xB3D9;&#xC2DC;&#xC5D0; 4 &#xAC1C;&#xC758; &#xB300;&#xC0C1; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC99D;&#xD3ED; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;, &#xB0B4;&#xBD80; &#xC99D;&#xD3ED; &#xC81C;&#xC5B4;&#xB97C; &#xC124;&#xACC4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBD84;&#xC11D; 6 &#xAC1C;&#xBCC4; singleplex &#xC2E4;&#xC2DC;&#xAC04; PCR &#xC2E4;&#xD5D8; C. &#xBCF4; &#xD1A8; &#xB9AC;&#xB204;&#xC2A4; serotypes A, B, C, D, E &#xBC0F; f.&#xC758; &#xAC80;&#xCD9C;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; TaqMan &#xD654;&#xD559; &#xAE30;&#xBC18; &#xAC1C;&#xBC1C; 42 C. &#xBCF4; &#xD1A8; &#xB9AC;&#xB204;&#xC2A4;&#xC640; 57 &#xBE44; C&#xC758; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2DC; &#xBCF4; &#xD1A8; &#xB9AC;&#xB204;&#xC2A4; &#xAE34;&#xC7A5;, singleplex &#xBC0F; &#xBA40;&#xD2F0;&#xD50C;&#xB809;&#xC2A4; PCR &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xB6F0;&#xC5B4;&#xB09C; &#xD2B9;&#xC774;&#xC131;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC544;&#xAD70; &#xC74C;&#xC2DD; &#xC0D8;&#xD50C; 10 (3)&#xC640; 10(5) CFU/ml, &#xAC01;&#xAC01; &#xAC10;&#xC9C0;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xB3C5;&#xC77C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF4; &#xD234; &#xB9AC;&#xB204;&#xC2A4; &#xC911;&#xB3C5;&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC0AC;&#xB840;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0D8;&#xD50C; C. &#xBCF4; &#xD1A8; &#xB9AC;&#xB204;&#xC2A4; &#xAC10;&#xC9C0;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC804;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, pentaplexed &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xB192;&#xC740; &#xBBFC;&#xAC10;&#xB3C4; &#xD2B9;&#xC774;&#xC131;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4; &#xACE0; &#xB3D9;&#xC2DC; &#xC0C1;&#xC601; &#xBC0F; A, B, E &#xBC0F; F. C. &#xBCF4; &#xD1A8; &#xB9AC;&#xB204;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD45C;&#xBCF8;&#xC758; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD5C8;&#xC6A9;

&#xB3D9;&#xC2DC; &#xAC80;&#xCD9C; &#xBC0F; &#xC815;&#xB7C9;&#xD654; &#xC74C;&#xC2DD;&#xACFC; &#xC784;&#xC0C1; &#xC0D8;&#xD50C; &#xBCF4; &#xD1A8; &#xB9AC;&#xB204;&#xC2A4; neurotoxin &#xC0DD;&#xC0B0; clostridia&#xC758; Pentaplexed &#xC591;&#xC801; &#xC2E4;&#xC2DC;&#xAC04; PCR &#xC2DC;&#xD5D8;.

Botul&iacute;nica neurotoxinas son producidas por la bacteria anaer&oacute;bica Clostridium botulinum y se dividen en siete distintos serotipos (A G) conocidos por causar botulismo en animales y seres humanos. En este estudio, una PCR en tiempo real cuantitativa multiplexado an&aacute;lisis para la detecci&oacute;n simult&aacute;nea de los serotipos de botul&iacute;nica C. pat&oacute;genos humanos se desarrollaron A, B, E y F. Basado en la qu&iacute;mica TaqMan, utilizamos cinco conjuntos de cartilla-sonda individuales dentro de una PCR, combinando ambas carpeta surco menor - y bloqueado las sondas de &aacute;cido nucleico que contienen. Cada sonda hidr&oacute;lisis fue etiquetada individualmente con fluorocromos distinguibles, permitiendo la discriminaci&oacute;n entre los serotipos A, B, E y f el. Para evitar resultados falsos negativos, dise&ntilde;amos un control de amplificaci&oacute;n interno, que simult&aacute;neamente se amplific&oacute; con los genes de cuatro objetivos, dando as&iacute; un enfoque PCR de pentaplexed con probabilidades de detecci&oacute;n del 95% entre 7 y 287 equivalentes de genoma por PCR. Adem&aacute;s, hemos desarrollado el an&aacute;lisis PCR en tiempo real singleplex individuales de seis, que basada en la qu&iacute;mica TaqMan para la detecci&oacute;n de los serotipos de C. botulinum A, B, C, D, E y f el. En el an&aacute;lisis de 42 C. botulinum y 57 no-C. cepas botul&iacute;nica, singleplex y an&aacute;lisis PCR m&uacute;ltiplexes demostraron una excelente especificidad. Usando tacon muestras alimentarias, que hemos sido capaces de detectar entre 10 y 5 10 UFC/ml, respectivamente. Adem&aacute;s, hemos sido capaces de detectar C. botulinum en muestras de varios casos de botulismo en Alemania. En general, el ensayo de pentaplexed demostr&oacute; la alta sensibilidad y especificidad y permiti&oacute; la proyecci&oacute;n simult&aacute;nea y diferenciaci&oacute;n de espec&iacute;menes para C. botulinum A, B, E y f el.

Pentaplexed cuantitativa en tiempo real an&aacute;lisis de PCR para la detecci&oacute;n simult&aacute;nea y cuantificaci&oacute;n de clostridios de productoras de la neurotoxina botul&iacute;nica en alimentos y muestras cl&iacute;nicas.

&#x5728;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x548C;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x610F;&#x5916;&#x548C;&#x9884;&#x5B9A;&#x84D6;&#x9EBB;&#x674F;&#x4E2D;&#x6BD2;&#x6709;&#x4E3A;&#x4EBA;&#x719F;&#x77E5;&#xFF0C;&#x4F46;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x4E00;&#x76F4;&#x96BE;&#x4EE5;&#x6349;&#x6478;&#x76F4;&#x5230; 1888 &#x5F53; Stillmark &#x5F52;&#x56E0;&#x5BF9;&#x51DD;&#x96C6;&#x7D20;&#x84D6;&#x9EBB;&#x6BD2;&#x7D20;&#x7684;&#x6BD2;&#x6027;&#x3002;&#x84D6;&#x9EBB;&#x79CD;&#x690D;&#x5168;&#x4E16;&#x754C;&#x5DE5;&#x4E1A;&#x84D6;&#x9EBB;&#x6CB9;&#x751F;&#x4EA7;&#x89C4;&#x6A21;&#x3002;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5728;&#x84D6;&#x9EBB;&#x6CB9;&#x751F;&#x4EA7;&#x4E2D;&#x7684;&#x526F;&#x4EA7;&#x54C1;&#x84D6;&#x9EBB;&#x6BD2;&#x86CB;&#x767D;&#x662F;&#x5927;&#x6279;&#x91CF;&#x751F;&#x4EA7;&#x6BCF; 100 &#x5E74;&#x4E07;&#x5428;&#x4EE5;&#x4E0A;&#x3002;&#x57FA;&#x4E8E;&#x5176;&#x53EF;&#x7528;&#x6027;&#x3001; &#x6BD2;&#x6027;&#x3001; &#x6613;&#x4E8E;&#x5236;&#x5907;&#x548C;&#x533B;&#x7597;&#x5BF9;&#x7B56;&#x76EE;&#x524D;&#x7F3A;&#x4E4F;&#xFF0C;&#x84D6;&#x9EBB;&#x6BD2;&#x7D20;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x6218;&#x5242;&#x83B7;&#x5F97;&#x4E86;&#x5173;&#x6CE8;&#x3002;&#x79CD;&#x5B50;&#x8FD8;&#x5305;&#x542B;&#x8F83;&#x5C11;&#x6709;&#x6BD2;&#xFF0C;&#x4F46;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x540C;&#x6E90;&#x84D6;&#x9EBB;&#x674F;&#x51DD;&#x96C6;&#x7D20;&#x548C;&#x751F;&#x7269;&#x78B1;&#x84D6;&#x9EBB;&#xFF0C;&#x548C;&#x5C24;&#x5176;&#x662F;&#x540E;&#x8005;&#x53EF;&#x7528;&#x4E8E;&#x8DDF;&#x8E2A;&#x4E2D;&#x6BD2;&#x3002;&#x540E;&#x6CB9;&#x63D0;&#x53D6;&#x548C;&#x89E3;&#x6BD2;&#xFF0C;&#x8131;&#x8102;&#x7684;&#x65B0;&#x95FB;&#x86CB;&#x7CD5;&#x7528;&#x4F5C;&#x6709;&#x673A;&#x80A5;&#x548C;&#x4F4E;&#x4EF7;&#x503C;&#x9972;&#x6599;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x65B9;&#x9762;&#x6709;&#x96F6;&#x661F;&#x62A5;&#x9053;&#x6765;&#x81EA;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x56FD;&#x5BB6;&#xFF0C;&#x663E;&#x7136;&#x4E0D;&#x591F;&#x6212;&#x6BD2;&#x80A5;&#x6599;&#x5438;&#x6536;&#x540E;&#x63CF;&#x8FF0;&#x52A8;&#x7269;&#x4E2D;&#x6BD2;&#x3002;&#x51E0;&#x5E74;&#x6765;&#xFF0C;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x5728;&#x5FB7;&#x56FD;&#x7684;&#x610F;&#x89C1;&#x4F7F;&#x6211;&#x4EEC;&#x731C;&#x6D4B;&#x7684;&#x6212;&#x6BD2;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x662F;&#x4E0D;&#x80FD;&#x59CB;&#x7EC8;&#x5F7B;&#x5E95;&#x6267;&#x884C;&#x548C;&#x63A7;&#x5236;&#xFF0C;&#x8981;&#x6C42;&#x660E;&#x786E;&#x8BF4;&#x660E;&#x80A5;&#x6599;&#x4E2D;&#x7684;&#x84D6;&#x9EBB;&#x6BD2;&#x86CB;&#x767D;&#x9608;&#x503C;&#x7684;&#x56FD;&#x9645;&#x89C4;&#x7AE0;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x9879;&#x68C0;&#x8BA8;&#x6211;&#x4EEC;&#x603B;&#x7ED3;&#x84D6;&#x9EBB;&#x6BD2;&#x7D20;&#x6216;&#x84D6;&#x9EBB;&#x79CD;&#x5B50;&#x5728;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x548C;&#x52A8;&#x7269;&#xFF0C;&#x7531;&#x4E8E;&#x4E0D;&#x5F53;&#x8131;&#x6BD2;&#x7684;&#x84D6;&#x9EBB;&#x997C;&#x7C95;&#x548C;&#x6CD5;&#x533B;&#x5206;&#x6790;&#x4E2D;&#x6BD2;&#x7279;&#x522B;&#x5F3A;&#x8C03;&#x6709;&#x610F;&#x548C;&#x65E0;&#x610F;&#x4E2D;&#x6BD2;&#x7684;&#x77E5;&#x8BC6;&#x3002;

&#x84D6;&#x9EBB;&#x4E2D;&#x6BD2;&#x5728;&#x4EBA;&#x6743;&#x548C; Veterinary Medicine-A &#x771F;&#x5B9E;&#x4E2A;&#x6848;&#x6458;&#x8981;&#x3002;

Accidental and intended Ricinus communis intoxications in humans and animals have been known for centuries but the causative agent remained elusive until 1888 when Stillmark attributed the toxicity to the lectin ricin. Ricinus communis is grown worldwide on an industrial scale for the production of castor oil. As by-product in castor oil production ricin is mass produced above 1 million tons per year. On the basis of its availability, toxicity, ease of preparation and the current lack of medical countermeasures, ricin has gained attention as potential biological warfare agent. The seeds also contain the less toxic, but highly homologous Ricinus communis agglutinin and the alkaloid ricinine, and especially the latter can be used to track intoxications. After oil extraction and detoxification, the defatted press cake is used as organic fertilizer and as low-value feed. In this context there have been sporadic reports from different countries describing animal intoxications after uptake of obviously insufficiently detoxified fertilizer. Observations in Germany over several years, however, have led us to speculate that the detoxification process is not always performed thoroughly and controlled, calling for international regulations which clearly state a ricin threshold in fertilizer. In this review we summarize knowledge on intended and unintended poisoning with ricin or castor seeds both in humans and animals, with a particular emphasis on intoxications due to improperly detoxified castor bean meal and forensic analysis.

Ricinus communis Intoxications in Human and Veterinary Medicine-A Summary of Real Cases.

Accidentelles et pr&eacute;vues Ricinus communis intoxications humaines et animales sont connues depuis des si&egrave;cles, mais l&#39;agent causal est rest&eacute; insaisissable jusqu&#39;en 1888 quand Stillmark attribuables &agrave; la toxicit&eacute; de la ricine de la lectine. Ricinus communis est cultiv&eacute; dans le monde entier &agrave; l&#39;&eacute;chelle industrielle pour la production d&#39;huile de ricin. Comme sous-produit de la production de l&#39;huile de ricin ricine est produit en masse au-dessus de 1 million de tonnes par an. Sur la base de sa disponibilit&eacute;, toxicit&eacute;, facilit&eacute; de pr&eacute;paration et de l&#39;absence actuelle de contre-mesures m&eacute;dicales, ricine a gagn&eacute; l&#39;attention comme agent de guerre biologique potentiel. Les graines contiennent &eacute;galement le moins toxique, mais tr&egrave;s homologue agglutinine de Ricinus communis et la ricinine alcalo&iuml;de, et surtout celui-ci peut &ecirc;tre utilis&eacute; pour effectuer le suivi des intoxications. Apr&egrave;s extraction de l&#39;huile et la d&eacute;sintoxication, le tourteau d&eacute;graiss&eacute; est utilis&eacute; comme engrais organique et comme aliments de faible valeur. Dans ce contexte, on a des rapports sporadiques de diff&eacute;rents pays, d&eacute;crivant des intoxications animales apr&egrave;s absorption d&#39;engrais &eacute;videmment insuffisamment d&eacute;toxifi&eacute;e. Observations en Allemagne depuis plusieurs ann&eacute;es, toutefois, nous ont amen&eacute;s &agrave; sp&eacute;culer que le processus de d&eacute;sintoxication n&#39;est pas toujours effectu&eacute; soigneusement et contr&ocirc;l&eacute;, appelant &agrave; des r&eacute;glementations internationales qui stipulent clairement un seuil de ricine dans les engrais. Dans cette revue, nous r&eacute;sumons les connaissances sur l&#39;empoisonnement avec des graines de ricin ou de ricin tant chez les humains et les animaux, avec un accent particulier sur les intoxications en raison des repas mal d&eacute;toxifi&eacute;s ricin et analyse m&eacute;dico-l&eacute;gale intentionnels et non intentionnels.

Ricinus communis Intoxications humaines et Veterinary Medicine-A R&eacute;sum&eacute; des cas r&eacute;els.

Versehentliche oder beabsichtigte Ricinus Communis Vergiftungen bei Mensch und Tier sind seit Jahrhunderten bekannt, aber der Erreger blieb schwer bis 1888 als Stillmark die Toxizit&auml;t f&uuml;r die Lektin-Rizin zur&uuml;ckzuf&uuml;hren. Ricinus Communis wird gro&szlig;technisch zur Herstellung von Rizinus&ouml;l weltweit angebaut. Als Nebenprodukt bei Rizinus&ouml;l Herstellung ist Rizin Masse &uuml;ber 1 Million Tonnen pro Jahr produziert. Auf der Grundlage seiner Verf&uuml;gbarkeit, Toxizit&auml;t, einfache Zubereitung und der derzeitige Mangel an medizinischen Gegenma&szlig;nahmen hat Rizin als potentielle biologische Kriegsf&uuml;hrung-Agent Aufmerksamkeit gewonnen. Die Samen enthalten auch die weniger giftig, aber hochgradig homologe Ricinus Communis Agglutinin und das Alkaloid Ricinine, und insbesondere Letzteres einsetzbar, Vergiftungen zu verfolgen. Nach der &Ouml;lf&ouml;rderung und Entgiftung dient der entfetteten Presse-Kuchen als organischer D&uuml;nger und als geringwertige Feed. In diesem Zusammenhang gab es sporadische Berichte aus verschiedenen L&auml;ndern beschreiben Tiere Vergiftungen nach Aufnahme von offensichtlich unzureichend entgiftete D&uuml;nger. Beobachtungen in Deutschland &uuml;ber mehrere Jahre, jedoch haben uns veranlasst, spekulieren, dass der Entgiftungsprozess ist nicht immer gr&uuml;ndlich durchgef&uuml;hrt und kontrolliert, fordert internationale Regelungen, die in D&uuml;nger eine Rizin-Schwelle deutlich. In diesem Bericht fassen wir wissen &uuml;ber beabsichtigte und unbeabsichtigte Vergiftung mit Rizin oder Kastor Samen sowohl bei Mensch und Tier, mit einem besonderen Schwerpunkt auf Vergiftungen durch unsachgem&auml;&szlig; entgiftete Castor Bean Mahlzeit und forensische Analysen.

Ricinus Communis Vergiftungen in der menschlichen und Veterinary Medicine-A Zusammenfassung der reale F&auml;lle.

Accidentale e previsti Ricinus communis intossicazioni nell&#39;uomo e negli animali sono stati conosciuti per secoli ma l&#39;agente eziologico &egrave; rimasto sfuggente fino al 1888 quando Stillmark attribuito alla tossicit&agrave; per la ricina lectina. Ricinus communis &egrave; coltivato in tutto il mondo su scala industriale per la produzione di olio di ricino. Come sottoprodotto della produzione di olio di ricino ricina &egrave; massa prodotta di sopra di 1 milione di tonnellate all&#39;anno. Sulla base della sua disponibilit&agrave;, tossicit&agrave;, facilit&agrave; di preparazione e l&#39;attuale mancanza di contromisure mediche, ricina ha guadagnato l&#39;attenzione come potenziale agente di guerra biologica. I semi contengono anche il meno tossico, ma altamente omologa Ricinus communis agglutinina e l&#39;alcaloide ricinine, e soprattutto quest&#39;ultimo pu&ograve; essere utilizzato per tenere traccia di intossicazioni. Dopo l&#39;estrazione dell&#39;olio e disintossicazione, il panello sgrassata &egrave; utilizzato come fertilizzante organico e come feed di basso valore. In questo contesto sono stati sporadici rapporti provenienti da diversi paesi che descrive animali intossicazioni dopo assorbimento del concime ovviamente insufficientemente detossificata. Osservazioni in Germania da diversi anni, tuttavia, ci hanno portato a ipotizzare che il processo di disintossicazione non sempre &egrave; eseguito accuratamente e controllato, la chiamata per i regolamenti internazionali che affermano chiaramente una soglia di ricina in fertilizzante. In questa recensione abbiamo riassumere la conoscenza sul previsto e non intenzionale avvelenamento con semi il ricin o ricino sia negli esseri umani e animali, con particolare enfasi sulle intossicazioni a causa di ricino impropriamente detossificati pasto e analisi forense.

Ricinus communis intossicazioni umane e Veterinary Medicine-A Sommario dei casi reali.

&#x5076;&#x7136;&#x3068;&#x610F;&#x56F3;&#x306E;&#x30D2;&#x30DE; &#xFF08;&#x30E8;&#x30B7;&#x4E2D;&#x6BD2;&#x4EBA;&#x9593;&#x3068;&#x52D5;&#x7269;&#x304C;&#x4F55;&#x4E16;&#x7D00;&#x306B;&#x3082;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x4F7F;&#x5F79;&#x30A8;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x30C8; 1888 Stillmark &#x30EC;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3; &#x30EA;&#x30B7;&#x30F3;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x6BD2;&#x6027;&#x3092;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x304D;&#x307E;&#x3067;&#x3068;&#x3089;&#x3048;&#x3069;&#x3053;&#x308D;&#x306E;&#x306A;&#x3044;&#x307E;&#x307E;&#x3002;&#x30C8;&#x30A6;&#x30B4;&#x30DE;&#x3001;&#x30D2;&#x30DE;&#x30B7;&#x6CB9;&#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x7523;&#x696D;&#x898F;&#x6A21;&#x3067;&#x4E16;&#x754C;&#x4E2D;&#x3067;&#x683D;&#x57F9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D2;&#x30DE;&#x30B7;&#x6CB9;&#x751F;&#x7523;&#x306E;&#x526F;&#x7523;&#x7269;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5E74;&#x9593; 100 &#x4E07;&#x30C8;&#x30F3;&#x4E0A;&#x8A18;&#x30EA;&#x30B7;&#x30F3;&#x304C;&#x5927;&#x91CF;&#x751F;&#x7523;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x53EF;&#x7528;&#x6027;&#x3001;&#x6BD2;&#x6027;&#x3001;&#x4F5C;&#x88FD;&#x306E;&#x5BB9;&#x6613;&#x3055;&#x3068;&#x533B;&#x7642;&#x5BFE;&#x7B56;&#x306E;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x30EA;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x751F;&#x7269;&#x5175;&#x5668;&#x306E;&#x30A8;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6CE8;&#x76EE;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7A2E;&#x5B50;&#x306F;&#x5C11;&#x306A;&#x3044;&#x306E;&#x6BD2;&#x6027;&#x304C;&#x9AD8;&#x3044;&#x76F8;&#x540C;&#x30D2;&#x30DE; &#xFF08;&#x30E8;&#x30B7;&#x51DD;&#x96C6;&#x7D20;&#x3068;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9; ricinine &#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3001;&#x7279;&#x306B;&#x5F8C;&#x8005;&#x304C;&#x4E2D;&#x6BD2;&#x3092;&#x8FFD;&#x8DE1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6CB9;&#x306E;&#x62BD;&#x51FA;&#x3068;&#x89E3;&#x6BD2;&#x5F8C;&#x8131;&#x8102;&#x30D7;&#x30EC;&#x30B9; &#x30B1;&#x30FC;&#x30AD;&#x6709;&#x6A5F;&#x80A5;&#x6599;&#x3068;&#x4F4E;&#x5024;&#x306E;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30AD;&#x30B9;&#x30C8;&#x3067;&#x306F;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x4E0D;&#x5341;&#x5206;&#x7121;&#x5BB3;&#x5316;&#x80A5;&#x6599;&#x306E;&#x53D6;&#x308A;&#x8FBC;&#x307F;&#x5F8C;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x4E2D;&#x6BD2;&#x3092;&#x8A18;&#x8FF0;&#x3059;&#x308B;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x56FD;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x6563;&#x767A;&#x7684;&#x306A;&#x5831;&#x544A;&#x304C;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x6570;&#x5E74;&#x306B;&#x308F;&#x305F;&#x3063;&#x3066;&#x30C9;&#x30A4;&#x30C4;&#x306E;&#x89B3;&#x6E2C;&#x306F;&#x89E3;&#x6BD2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306F;&#x5E38;&#x306B;&#x5FB9;&#x5E95;&#x7684;&#x306B;&#x5B9F;&#x884C;&#x3057;&#x3001;&#x5236;&#x5FA1;&#x3092;&#x63A8;&#x6E2C;&#x3059;&#x308B;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x80A5;&#x6599;&#x306E;&#x30EA;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x3057;&#x304D;&#x3044;&#x5024;&#x3092;&#x660E;&#x8A18;&#x56FD;&#x969B;&#x306E;&#x898F;&#x5247;&#x3092;&#x547C;&#x3073;&#x51FA;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30EC;&#x30D3;&#x30E5;&#x30FC;&#x306E;&#x76EE;&#x7684;&#x3068;&#x610F;&#x56F3;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x30EA;&#x30B7;&#x30F3;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30D2;&#x30DE;&#x7A2E;&#x5B50;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x4EBA;&#x9593;&#x3068;&#x52D5;&#x7269;&#x3001;&#x4E2D;&#x6BD2;&#x4E0D;&#x9069;&#x5207;&#x7121;&#x5BB3;&#x5316;&#x3072;&#x307E;&#x3057;&#x98DF;&#x4E8B;&#x3068;&#x6CD5;&#x533B;&#x5B66;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x7279;&#x306B;&#x91CD;&#x70B9;&#x4E2D;&#x6BD2;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x77E5;&#x8B58;&#x3092;&#x307E;&#x3068;&#x3081;&#x305F;&#x3082;&#x306E;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#x30C8;&#x30A6;&#x30B4;&#x30DE;&#x4E2D;&#x6BD2;&#x4EBA;&#x9593;&#x3068;&#x5B9F;&#x969B;&#x306E;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x6982;&#x8981;&#x3092; Veterinary Medicine-A&#x3002;

&#xC778;&#xAC04;&#xACFC; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC0AC;&#xACE0;&#xC640; &#xC758;&#xB3C4; &#xC544;&#xC8FC;&#xAE4C;&#xB9AC; &#xB77C;&#xACE0;&#xB3C4; intoxications &#xC218;&#xC138;&#xAE30; &#xB3D9;&#xC548; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC654;&#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC6D0;&#xC778;&#xC774; &#xB418;&#xB294; &#xB300;&#xB9AC;&#xC778; 1888 Stillmark lectin &#xC2E0;&#xC740; &#xB3C5;&#xC131;&#xC744; &#xD560;&#xB2F9; &#xD558;&#xB294; &#xB54C;&#xAE4C;&#xC9C0; &#xC560;&#xB9E4; &#xB0A8;&#xC544;. &#xC544;&#xC8FC;&#xAE4C;&#xB9AC; &#xB77C;&#xACE0;&#xB3C4; &#xBE44;&#xBC84; &#xC624;&#xC77C; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC0B0;&#xC5C5; &#xADDC;&#xBAA8; &#xC804; &#xC138;&#xACC4; &#xC7AC;&#xBC30; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBE44;&#xBC84; &#xC624;&#xC77C; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC758; &#xBD80;&#xC0B0;&#xBB3C;&#xB85C; &#xC2E0;&#xC740; &#xC5F0;&#xAC04; 1 &#xBC31;&#xB9CC; &#xD1A4; &#xC774;&#xC0C1;&#xC758; &#xB300;&#xB7C9; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xAC00;&#xC6A9;&#xC131;, &#xB3C5;&#xC131;, &#xC900;&#xBE44;&#xC758; &#xC6A9;&#xC774;&#xC131; &#xBC0F; &#xC758;&#xB8CC; &#xB300;&#xCC45;&#xC758; &#xD604;&#xC7AC; &#xBD80;&#xC871;, &#xADFC;&#xAC70; &#xC2E0;&#xC740; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC694;&#xC6D0;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD00;&#xC2EC;&#xC744; &#xC5BB;&#xACE0; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC528;&#xC557;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xC801;&#xC740; &#xB3C5;&#xC131; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB192;&#xC740; &#xB3D9;&#xC885; &#xC544;&#xC8FC;&#xAE4C;&#xB9AC; &#xB77C;&#xACE0;&#xB3C4; agglutinin &#xBC0F; &#xC54C;&#xCE7C;&#xB85C;&#xC774;&#xB4DC; ricinine &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xACE0; intoxications&#xB97C; &#xCD94;&#xC801; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xD2B9;&#xD788; &#xD6C4;&#xC790; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC11D;&#xC720; &#xCD94;&#xCD9C; &#xBC0F; &#xD574;&#xB3C5; &#xD6C4; defatted &#xD504;&#xB808;&#xC2A4; &#xCF00;&#xC774;&#xD06C;&#xB294; &#xB0AE;&#xC740; &#xAC00;&#xCE58; &#xD53C;&#xB4DC; &#xBC0F; &#xC720;&#xAE30; &#xBE44;&#xB8CC;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7F0;&#xC774; &#xB9E5;&#xB77D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xBA85; &#xCDA9;&#xBD84; detoxified &#xBE44;&#xB8CC;&#xC758; &#xD1B5;&#xD48D; &#xAD00; &#xD6C4; &#xB3D9;&#xBB3C; intoxications&#xB97C; &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xB294; &#xB2E4;&#xB978; &#xB098;&#xB77C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0B0;&#xBC1C;&#xC801; &#xC778; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xBA87; &#xB144; &#xB3D9;&#xC548; &#xB3C5;&#xC77C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCE21; &#xD574;&#xB3C5; &#xACFC;&#xC815;&#xC740; &#xD56D;&#xC0C1; &#xCCA0;&#xC800; &#xD558; &#xAC8C; &#xC218;&#xD589; &#xD558; &#xACE0;, &#xCD94;&#xCE21; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC774;&#xB048; &#xBE44;&#xB8CC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E0;&#xC740; &#xC784;&#xACC4;&#xAC12;&#xC744; &#xBD84;&#xBA85; &#xD558; &#xAC8C; &#xBA85;&#xC2DC; &#xD558;&#xB294; &#xAD6D;&#xC81C; &#xADDC;&#xC815;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC804;&#xD654;. &#xC774; &#xB9AC;&#xBDF0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC758;&#xB3C4; &#xD558; &#xACE0; &#xC758;&#xB3C4; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xB9AC; &#xB610;&#xB294; &#xC544;&#xC8FC;&#xAE4C;&#xB9AC; &#xC528; &#xB458; &#xB2E4; &#xC778;&#xAC04;&#xACFC; &#xB3D9;&#xBB3C;, &#xC798;&#xBABB; detoxified &#xBE44;&#xBC84; &#xCF69; &#xC2DD;&#xC0AC; &#xBC0F; &#xC815;&#xBC00; &#xBD84;&#xC11D; intoxications&#xC5D0; &#xD2B9;&#xBCC4; &#xD55C; &#xAC15;&#xC870;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xC911;&#xB3C5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC9C0;&#xC2DD;&#xC744; &#xC694;&#xC57D;.

&#xC544;&#xC8FC;&#xAE4C;&#xB9AC; &#xB77C;&#xACE0;&#xB3C4; &#xC778;&#xAC04;&#xACFC; Veterinary Medicine-A &#xC694;&#xC57D; &#xC2E4;&#xC81C; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0;&#xB294; Intoxications.

Accidentales e intencionados Ricinus communis intoxicaciones en humanos y animales son conocidas desde hace siglos pero el agente causativo segu&iacute;a siendo esquivo hasta 1888 cuando Stillmark atribuy&oacute; la toxicidad a la ricina lectinas. Ricinus communis crece en todo el mundo a escala industrial para la producci&oacute;n de aceite de ricino. Como subproducto en la producci&oacute;n de aceite de ricino ricina masa se produce por encima de 1 mill&oacute;n de toneladas por a&ntilde;o. Sobre la base de su disponibilidad, toxicidad, facilidad de preparaci&oacute;n y la actual falta de contramedidas m&eacute;dicas, ricina ha ganado atenci&oacute;n como potencial agente de guerra biol&oacute;gica. Las semillas contienen tambi&eacute;n el menos t&oacute;xico, pero altamente hom&oacute;loga Ricinus communis aglutinina y el alcaloide ricinine, y especialmente este &uacute;ltimo puede usarse para rastrear intoxicaciones. Despu&eacute;s de la extracci&oacute;n de petr&oacute;leo y la desintoxicaci&oacute;n, la torta de prensa desengrasada se utiliza como abono org&aacute;nico y como alimento de bajo valor. En este contexto, ha habido informes espor&aacute;dicos de diferentes pa&iacute;ses que describen intoxicaciones animales despu&eacute;s de la absorci&oacute;n de fertilizante obviamente escaso desintoxicado. Observaciones en Alemania durante varios a&ntilde;os, sin embargo, nos han llevado a especular que el proceso de desintoxicaci&oacute;n no siempre es bien realizado y controlado, pidiendo regulaciones internacionales que indican claramente un umbral de ricina en fertilizante. En esta revisi&oacute;n se resumieron conocimientos sobre previsto y no intencional, envenenamiento con semillas de ricino o castor tanto en los seres humanos y animales, con un &eacute;nfasis particular en intoxicaciones debido a mal desintoxicados ricino comida y an&aacute;lisis forense.

Article	Year
Simultaneous quantification of five bacterial and plant toxins from complex matrices using a multiplexed fluorescent magnetic suspension assay. The Analyst\| PubMed ID: 19768210	2009
Multiplex detection of microbial and plant toxins by immunoaffinity enrichment and matrix-assisted laser desorption/ionization mass spectrometry. Analytical chemistry\| PubMed ID: 20199054	2010
The case of botulinum toxin in milk: experimental data. Applied and environmental microbiology\| PubMed ID: 20363798	2010
Pentaplexed quantitative real-time PCR assay for the simultaneous detection and quantification of botulinum neurotoxin-producing clostridia in food and clinical samples. Applied and environmental microbiology\| PubMed ID: 20435756	2010
Ricinus communis Intoxications in Human and Veterinary Medicine-A Summary of Real Cases. Toxins\| PubMed ID: 22069699	2011

Diana Pauly

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