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Live Imaging of Dorsal Root Axons after Rhizotomy

The primary sensory axons injured by spinal root injuries fail to regenerate into the spinal cord, leading to chronic pain and permanent sensory loss. ...

Shriners Hospitals Pediatric Research Center and Department of Anatomy and Cell Biology

&#x80CC;&#x6839; (DR) &#x8F74;&#x7A81;&#x518D;&#x751F;&#x671F;&#x7968;&#x4E2D;&#x4F46;&#x8F6C;&#x8EAB;&#x6216;&#x505C;&#x6B62;&#x5728;&#x80CC;&#x6839;&#x8FDB;&#x5165;&#x533A; &#xFF08;DREZ&#xFF09;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x8FDB;&#x5165;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x3002;&#x751F;&#x957F;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x548C;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x5185;&#x5728;&#x589E;&#x957F;&#x6F5C;&#x529B;&#x7684;&#x518D;&#x751F;&#x5931;&#x8D25;&#x5F52;&#x7ED3;&#x4E3A;&#x65E9;&#x4E9B;&#x65F6;&#x5019;&#x4F9D;&#x9760;&#x4E8B;&#x540E;&#x5206;&#x6790;&#x6216;&#x5E38;&#x89C4;&#x8DDF;&#x8E2A;&#x6280;&#x672F;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x535A;&#x58EB;&#x518D;&#x751F;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x5728;&#x4F53;&#x5185;&#x5F71;&#x50CF;&#x5B66;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;&#x9057;&#x4F20;&#x7269;&#x8D28;&#x6807;&#x7B7E;&#xFF0C;thy1 YFPH &#x5C0F;&#x9F20;&#x535A;&#x58EB;&#x7231;&#x4E0A;&#x7F51;&#x7AD9;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x6A2A;&#x65AD;&#x7AD9;&#x70B9;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x52A0;&#x957F;&#x578B;&#x5927;&#x53E3;&#x5F84;&#x535A;&#x58EB;&#x8F74;&#x7A81;&#x548C;&#x6CBF;&#x6839;&#x5728;&#x589E;&#x957F; &gt; &#x5C0F;&#x53D8;&#x5F02;&#x6027;&#x4E0E; 1.5 m m/d&#x3002;&#x5947;&#x602A;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x5F88;&#x5C11;&#x5728;&#x9047;&#x5230;&#x661F;&#x5F62;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x540E;, DREZ &#x8F6C;&#x8FC7;&#x8EAB;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6E17;&#x900F;&#x5230;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x9886;&#x571F;&#xFF0C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x5728;&#x6B64;&#x8FC5;&#x901F;&#x9677;&#x5165;&#x505C;&#x6EDE;&#xFF0C;&#x7136;&#x540E;&#x4ECD;&#x7136;&#x5B8C;&#x5168;&#x4E0D;&#x52A8;&#x6216;&#x4E0D;&#x7A33;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x751A;&#x81F3;&#x540E;&#x7A7A;&#x8C03;&#x7684;&#x75C5;&#x53D8;&#xFF0C;&#x589E;&#x5F3A;&#x589E;&#x957F;&#x6CBF;&#x6839;&#x66F4;&#x6DF1;&#x3002;&#x505C;&#x6EDE;&#x4E0D;&#x524D;&#x7684;&#x8F74;&#x7A81;&#x7684;&#x63D0;&#x793A;&#x548C;&#x76F8;&#x90BB;&#x8F74;&#x6FC0;&#x70C8;&#x662F; immunolabeled &#x4E0E;&#x7A81;&#x89E6;&#x6807;&#x8BB0;&#x3002;&#x9488;&#x5BF9;&#x6700;&#x8FD1;&#x5BCC;&#x542B; DREZ &#x7684;&#x8D85;&#x5FAE;&#x7ED3;&#x6784;&#x5206;&#x6790;&#x5230;&#x8FBE;&#x53C2;&#x5C55;&#x7B49;&#x4E0A;&#x6D3B;&#x8DC3;&#x7684;&#x533A;&#x57DF;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x7A81;&#x89E6;&#x529F;&#x80FD;&#x805A;&#x5408;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x5C0F;&#x6CE1;&#x7A81;&#x89E6;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x8F74;&#x7A81;&#x53E6;&#x5916;&#x53D1;&#x73B0;&#x4E30;&#x5BCC;&#x5F25;&#x6F2B;&#x6027;&#x8F74;&#x7D22;&#x6982;&#x51B5;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x8F74;&#x7A81;&#x65E2;&#x4E0D;&#x51FB;&#x9000;&#x4E5F;&#x4E0D;&#x65AD;&#x5728; DREZ &#x6291;&#x5236;&#x751F;&#x957F;&#x6291;&#x5236;&#x5206;&#x5B50;&#x4F46;&#x8FC5;&#x901F;&#x7A33;&#x5B9A;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5B83;&#x4EEC;&#x4FB5;&#x5165;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x9886;&#x571F;&#x7684; DREZ&#xFF0C;&#x5F62;&#x6210;&#x5BF9;&#x975E;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x524D;&#x7EC8;&#x7AEF;&#x7ED3;&#x5C40;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x5411;&#x535A;&#x58EB;&#x518D;&#x751F;&#x7684;&#x8C03;&#x67E5;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x65B0;&#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x8303;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x5E76;&#x53EF;&#x80FD;&#x5E2E;&#x52A9;&#x4FC3;&#x4F7F;&#x91CD;&#x5927;&#x810A;&#x795E;&#x7ECF;&#x6839;&#x635F;&#x4F24;&#x540E;&#x7684;&#x518D;&#x751F;&#x3002;

&#x4F53;&#x5185;&#x6210;&#x50CF;&#x7684;&#x80CC;&#x6839;&#x518D;&#x751F;&#xFF1A; &#x5FEB;&#x901F;&#x56FA;&#x5B9A;&#x5316;&#x548C;&#x7A81;&#x89E6;&#x5206;&#x5316;&#x5728; CNS/&#x671F;&#x7968;&#x8FB9;&#x5883;&#x3002;

Dorsal root (DR) axons regenerate in the PNS but turn around or stop at the dorsal root entry zone (DREZ), the entrance into the CNS. Earlier studies that relied on conventional tracing techniques or postmortem analyses attributed the regeneration failure to growth inhibitors and lack of intrinsic growth potential. Here, we report the first in vivo imaging study of DR regeneration. Fluorescently labeled, large-diameter DR axons in thy1-YFPH mice elongated through a DR crush site, but not a transection site, and grew along the root at >1.5 mm/d with little variability. Surprisingly, they rarely turned around at the DREZ upon encountering astrocytes, but penetrated deeper into the CNS territory, where they rapidly stalled and then remained completely immobile or stable, even after conditioning lesions that enhanced growth along the root. Stalled axon tips and adjacent shafts were intensely immunolabeled with synapse markers. Ultrastructural analysis targeted to the DREZ enriched with recently arrived axons additionally revealed abundant axonal profiles exhibiting presynaptic features such as synaptic vesicles aggregated at active zones, but not postsynaptic features. These data suggest that axons are neither repelled nor continuously inhibited at the DREZ by growth-inhibitory molecules but are rapidly stabilized as they invade the CNS territory of the DREZ, forming presynaptic terminal endings on non-neuronal cells. Our work introduces a new experimental paradigm to the investigation of DR regeneration and may help to induce significant regeneration after spinal root injuries.

In vivo imaging of dorsal root regeneration: rapid immobilization and presynaptic differentiation at the CNS/PNS border.

Dorsaux des racines (DR) axones se r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;rer dans les PNS, mais demi-tour ou s&#x26;#39;arr&#xEA;ter &#xE0; la dorsale d&#x26;#39;entr&#xE9;e de la zone racine (DREZ), l&#x26;#39;entr&#xE9;e dans le SNC. Des &#xE9;tudes ant&#xE9;rieures qui reposaient sur des techniques classiques de tra&#xE7;age ou des analyses post-mortem a attribu&#xE9; l&#x26;#39;&#xE9;chec de r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration pour des inhibiteurs de croissance et le manque de potentiel de croissance intrins&#xE8;que. Ici, nous rapportons la premi&#xE8;re &#xE9;tude d&#x26;#39;imagerie in vivo de la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration DR. Marqu&#xE9; par fluorescence, de grand diam&#xE8;tre des axones DR dans THY1-YFPH souris allong&#xE9;e &#xE0; travers un site d&#x26;#39;&#xE9;crasement DR, mais pas un site de transection, et a grandi le long de la racine &#xE0;&#x26;gt; 1,5 mm / j avec peu de variabilit&#xE9;. &#xC9;tonnamment, ils ont rarement fait demi-tour &#xE0; la DREZ lors de la rencontre astrocytes, mais p&#xE9;n&#xE9;tr&#xE9; plus profond&#xE9;ment dans le territoire du SNC, o&#xF9; ils ont rapidement d&#xE9;croch&#xE9; et il est rest&#xE9; totalement immobile ou stable, m&#xEA;me apr&#xE8;s des l&#xE9;sions de conditionnement que la croissance accrue le long de la racine. Conseils axone au point mort et les arbres adjacents ont &#xE9;t&#xE9; intens&#xE9;ment immunomarqu&#xE9;es avec des marqueurs synaptiques. L&#x26;#39;analyse ultrastructurale cibl&#xE9;e &#xE0; l&#x26;#39;enrichi DREZ avec les axones r&#xE9;cemment arriv&#xE9;s en outre r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; abondantes profils pr&#xE9;sentent des caract&#xE9;ristiques axonales pr&#xE9;synaptiques comme les v&#xE9;sicules synaptiques agr&#xE9;g&#xE9;es au niveau des zones actives, mais les fonctionnalit&#xE9;s non post-synaptiques. Ces donn&#xE9;es sugg&#xE8;rent que les axones ne sont ni repouss&#xE9;, ni en permanence inhib&#xE9;e &#xE0; la DREZ par inhibiteur de croissance des mol&#xE9;cules, mais sont rapidement stabilis&#xE9;s comme ils envahissent le territoire de la CNS DREZ, formant les terminaisons pr&#xE9;synaptiques terminales sur des cellules non neuronales. Notre travail introduit un nouveau paradigme exp&#xE9;rimental pour l&#x26;#39;&#xE9;tude de la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration et DR peuvent aider &#xE0; induire une r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration significative apr&#xE8;s des blessures profondes &#xE9;pini&#xE8;re.

L&#x26;#39;imagerie in vivo de la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration des racines dorsale: Immobilisation rapide et de la diff&#xE9;renciation pr&#xE9;synaptique sur les syst&#xE8;mes CNS / PNS fronti&#xE8;res

Spinalganglien (DR) Axone in die PNS regenerieren aber umdrehen oder Haltestelle der Spinalganglien Eintrag Zone (DREZ), der Eintritt in die CNS. Fr&uuml;here Studien, die auf konventionellen Ablaufverfolgung Techniken oder Post-mortem-Analyse st&uuml;tzte zugeschrieben der Regenerierung nicht Wachstum-Inhibitoren und mangelnde intrinsische Wachstumspotenzial. Hier berichten wir &uuml;ber die erste in-vivo Bildgebung Studie der DR-Regeneration. Leuchtstoff beschriftet, gro&szlig;em Durchmesser DR Axone im thy1-YFPH-M&auml;use, die durch eine DR-Zerstampfung-Standort, aber keine Transection Website, l&auml;nglich und wuchs entlang der R&uuml;be auf &gt; 1,5 mm/d mit wenig Variabilit&auml;t. &Uuml;berraschend selten auf die DREZ auf die Begegnung mit Astrozyten umgedreht, sondern drangen tiefer in das CNS-Gebiet, wo sie schnell ins Stocken und blieb dann v&ouml;llig unbeweglich oder stabil, auch nach der Konditionierung L&auml;sionen, die Wachstum entlang der Wurzel erweitert. Festgeklemmten Axon Tipps und angrenzenden Sch&auml;chten wurden intensiv Immunolabeled mit Synapse-Markern. Ultrastrukturelle Analyse gezielt an die DREZ, angereichert mit vor kurzem angekommen Axone zus&auml;tzlich offenbarten reichlich axonale profile pr&auml;synaptischen Features wie synaptische Vesikel, die auf aktive Zonen, aber nicht postsynaptisches Features aggregierten ausstellen. Diese Daten legen nahe, dass Axone sind weder abgesto&szlig;en noch kontinuierlich an die DREZ durch Wachstum-hemmenden Molek&uuml;le gehemmt, sondern werden rasch stabilisiert, wie sie CNS Gebiet DREZ dringen, pr&auml;synaptische terminal Endungen auf nicht-neuronale Zellen bilden. Unsere Arbeit f&uuml;hrt ein neues experimentelles Paradigma in der Untersuchung der DR Regeneration und kann dazu beitragen, um wichtige Regeneration nach Verletzungen der Wirbels&auml;ule Stamm zu induzieren.

In-vivo imaging der Spinalganglien Regeneration: schnelle Immobilisierung und pr&auml;synaptischen Differenzierung bei der CNS/PNS-Grenze.

Assoni spinali (DR) rigenerano nel PNS ma girano intorno o arrestarsi la zona ingresso spinali (DREZ), l&#39;entrata nel sistema nervoso centrale. Studi precedenti che si basava su tecniche di analisi convenzionali o analisi post-mortem attribuita la mancata rigenerazione inibitori della crescita e della mancanza di intrinseco potenziale di crescita. Riportiamo il primo studio di imaging in vivo di rigenerazione DR. Fluorescente etichettati, assoni DR grande diametro nei topi thy1-YFPH attraverso un sito di crush DR, ma non un sito di transezione, di forma allungati e si &egrave; sviluppato lungo la radice a &amp;gt; 1,5 mm/d con poca variabilit&agrave;. Sorprendentemente, essi raramente si volt&ograve; a DREZ su incontrando gli astrociti, ma penetrato pi&ugrave; in profondit&agrave; nel territorio CNS, dove essi rapidamente una fase di stallo e quindi rimase completamente immobile o stabile, anche dopo lesioni che rafforzata crescita lungo la radice di condizionamento. Consigli di assone in stallo e alberi adiacenti sono stati intensamente immunolabeled con marcatori di sinapsi. Analisi ultrastrutturale mirato per la DREZ arricchita recentemente arrivato assoni inoltre rivelato profili assonale abbondanti espositrici presinaptiche caratteristiche quali le vescicole sinaptiche aggregate a zone attive, ma caratteristiche non postsinaptici. Questi dati suggeriscono che assoni sono n&eacute; respinti n&eacute; continuamente inibita presso la DREZ da molecole inibitorie di crescita ma sono stabilizzati rapidamente come invadere il territorio di CNS della DREZ, formando terminazioni presinaptiche terminale su cellule non-neuronali. Il nostro lavoro introduce un nuovo paradigma sperimentale per l&#39;indagine del DR rigenerazione e pu&ograve; aiutare a indurre la rigenerazione significativa dopo lesioni della radice spinale.

In vivo imaging di rigenerazione spinali: rapida immobilizzazione e differenziazione presinaptica alla frontiera CNS/PNS.

&#x5F8C;&#x6839;&#xFF08;DR&#xFF09;&#x306E;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306F;&#x3001;PNS&#x306E;&#x751F;&#x6210;&#x304C;&#x597D;&#x8EE2;&#x307E;&#x305F;&#x306F;CNS&#x306B;&#x6839;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA;&#x30BE;&#x30FC;&#x30F3;&#xFF08;DREZ&#xFF09;&#x3001;&#x5165;&#x308A;&#x53E3;&#x3067;&#x505C;&#x6B62;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5F93;&#x6765;&#x306E;&#x30C8;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x6280;&#x8853;&#x3084;&#x4E8B;&#x5F8C;&#x5206;&#x6790;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x4EE5;&#x524D;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6210;&#x9577;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x3068;&#x672C;&#x8CEA;&#x7684;&#x306A;&#x6F5C;&#x5728;&#x6210;&#x9577;&#x529B;&#x306E;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x518D;&#x751F;&#x306E;&#x969C;&#x5BB3;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;DR&#x518D;&#x751F;&#x306E;in vivo&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x6700;&#x521D;&#x306B;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x3066;&#x304F;&#x3060;&#x3055;&#x3044;&#x3002;&#x86CD;&#x5149;&#x6A19;&#x8B58;&#x3001;THY1-YFPH&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x5927;&#x5F84;DR&#x306E;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306F;&#x3001;DR&#x30AF;&#x30E9;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x4F38;&#x9577;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x96E2;&#x65AD;&#x90E8;&#x4F4D;&#x3001;&#x5C11;&#x3057;&#x3070;&#x3089;&#x3064;&#x304D;&#x3068;&#x26;gt; 1.5&#x30DF;&#x30EA;&#x30E1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EB;/ d&#x3067;&#x30EB;&#x30FC;&#x30C8;&#x306B;&#x6CBF;&#x3063;&#x3066;&#x6210;&#x9577;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x9A5A;&#x3044;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x3081;&#x3063;&#x305F;&#x306B;&#x30A2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30ED;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306B;&#x906D;&#x9047;&#x3057;&#x305F;&#x6642;&#x306B;DREZ&#x3067;&#x632F;&#x308A;&#x5411;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x304C;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x6025;&#x901F;&#x306B;&#x5931;&#x901F;&#x3057;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x30A8;&#x30A2;&#x30B3;&#x30F3;&#x306E;&#x75C5;&#x5909;&#x3057;&#x305F;&#x5F8C;&#x3001;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x52D5;&#x304B;&#x306A;&#x3044;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x3066;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x9818;&#x57DF;&#x3001;&#x6DF1;&#x304F;&#x6D78;&#x900F;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30EB;&#x30FC;&#x30C8;&#x306B;&#x6CBF;&#x3063;&#x3066;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6210;&#x9577;&#x3002;&#x30B9;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;&#x3057;&#x305F;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306E;&#x5148;&#x7AEF;&#x3068;&#x96A3;&#x63A5;&#x3057;&#x305F;&#x30B7;&#x30E3;&#x30D5;&#x30C8;&#x306F;&#x6FC0;&#x3057;&#x304F;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3067;&#x514D;&#x75AB;&#x6A19;&#x8B58;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x5230;&#x7740;&#x3057;&#x305F;&#x8EF8;&#x7D22;&#x3068;DREZ&#x6FC3;&#x7E2E;&#x3092;&#x5BFE;&#x8C61;&#x3068;&#x3057;&#x305F;&#x5FAE;&#x7D30;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x89E3;&#x6790;&#x306F;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306A;&#x30BE;&#x30FC;&#x30F3;&#x3067;&#x96C6;&#x8A08;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5C0F;&#x80DE;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x767A;&#x63EE;&#x3059;&#x308B;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306F;&#x3001;&#x3069;&#x3061;&#x3089;&#x3082;&#x53CD;&#x767A;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x3067;&#x3082;&#x7D99;&#x7D9A;&#x7684;&#x306B;&#x6210;&#x9577;&#x963B;&#x5BB3;&#x5206;&#x5B50;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;DREZ&#x3067;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x975E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x524D;&#x7D42;&#x672B;&#x306E;&#x7D42;&#x672B;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3057;&#x3001;DREZ&#x306E;CNS&#x306E;&#x9818;&#x571F;&#x3092;&#x4FB5;&#x7565;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6025;&#x901F;&#x306B;&#x5B89;&#x5B9A;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x4ED5;&#x4E8B;&#x306F;&#x3001;DR&#x518D;&#x751F;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306B;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x5B9F;&#x9A13;&#x30D1;&#x30E9;&#x30C0;&#x30A4;&#x30E0;&#x3092;&#x5C0E;&#x5165;&#x3057;&#x3001;&#x810A;&#x9AC4;&#x795E;&#x7D4C;&#x6839;&#x640D;&#x50B7;&#x5F8C;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x518D;&#x751F;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5F79;&#x7ACB;&#x3064;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

CNS / PNS&#x30DC;&#x30FC;&#x30C0;&#x30FC;&#x3067;&#x306E;&#x8FC5;&#x901F;&#x306A;&#x56FA;&#x5B9A;&#x5316;&#x3068;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5206;&#x5316;&#xFF1A;&#x5F8C;&#x6839;&#x795E;&#x7D4C;&#x518D;&#x751F;&#x306E;in vivo&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;

&#xC9C0; &#xB8E8;&#xD2B8; (DR) axons PNS&#xC5D0; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB3CC;&#xC544;&#xC11C; &#xB610;&#xB294; &#xC9C0; &#xB8E8;&#xD2B8; &#xD56D;&#xBAA9; &#xC601;&#xC5ED; (DREZ) CNS&#xC5D0; &#xC785;&#xAD6C; &#xC8FC; &#xC815;&#xCC28;. &#xAE30;&#xC874;&#xC758; &#xCD94;&#xC801; &#xAE30;&#xBC95; &#xB610;&#xB294; &#xC0AC;&#xD6C4; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xC758;&#xC874; &#xD558;&#xB294; &#xC774;&#xC804; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC131;&#xC7A5; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xC640; &#xBCF8;&#xC9C8;&#xC801;&#xC778; &#xC131;&#xC7A5; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC758; &#xBD80;&#xC871;&#xC744; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC131; &#xC2E4;&#xD328; &#xB54C;&#xBB38; &#xC774;&#xB77C;&#xACE0;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBC15;&#xC0AC; &#xC911;&#xC0DD;&#xC758; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; in vivo &#xC601;&#xC0C1; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;. &#xB193;&#xC5EC;&#xC788;&#xB294;&#xC9C0; &#xBC15;&#xC0AC; &#xD638;&#xAC10; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; transection &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xD1B5;&#xD574; &#xAE38;&#xCB49;&#xD55C; thy1 YFPH &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD070; &#xC9C1;&#xACBD; DR axons &#xB808;&#xC774;&#xBE14;&#xC774; &#xBC0F; &#xB8E8;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC131;&#xC7A5; &amp;gt; &#xC791;&#xC740; &#xBCC0;&#xD654;&#xC640; 1.5 m m/d. &#xB180;&#xB78D;&#xAC8C;&#xB3C4;, &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xAC70;&#xC758; &#xC774;&#xB2E4;, &#xBC1C;&#xC0DD; &#xC2DC; DREZ&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3CC;&#xC544; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xBE60;&#xB974;&#xAC8C; &#xAD50;&#xCC29; &#xD558; &#xACE0; &#xCEE8;&#xB514;&#xC154;&#xB2DD; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xB8E8;&#xD2B8;&#xB97C; &#xB530;&#xB77C; &#xC131;&#xC7A5; &#xD558;&#xB294; &#xBCD1; &#xBCC0; &#xD6C4;&#xC5D0; &#xC644;&#xC804;&#xD788; &#xC6C0;&#xC9C1;&#xC774;&#xC9C0; &#xB610;&#xB294; &#xC548;&#xC815;&#xC801; &#xC720;&#xC9C0;&#xC758; CNS &#xC601;&#xD1A0;&#xC5D0; &#xB354; &#xAE4A;&#xC774; &#xCE68;&#xD22C;. &#xC2E4;&#xC18D;&#xB41C; axon &#xD301;&#xACFC; &#xC778;&#xC811; &#xD55C; &#xC0E4;&#xD504;&#xD2B8; &#xB2EC;&#xC544; &#xB0C5; &#xB9C8;&#xCEE4; immunolabeled &#xD588;&#xB2E4;. Ultrastructural &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xCD5C;&#xADFC; &#xB18D;&#xCD95; DREZ &#xD558; &#xB3C4;&#xCC29; axons &#xB610;&#xD55C; &#xACC4;&#xC2DC; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; axonal &#xD504;&#xB85C;&#xD544; presynaptic &#xAE30;&#xB2A5; &#xD65C;&#xC131; &#xC601;&#xC5ED;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0; postsynaptic &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9D1;&#xACC4; &#xD558;&#xB294; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xC18C;&#xD3EC; &#xB4F1;&#xC744; &#xC804;&#xC2DC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xCD95; &#xC0AD;&#xB3C4; &#xACA9;&#xD1F4; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;&#xB294; DREZ&#xC5D0;&#xC11C; &#xC131;&#xC7A5; &#xC5B5;&#xC81C; &#xBD84;&#xC790;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC800;&#xD574; &#xD558; &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xBE44; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; presynaptic &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xC5D4;&#xB529; &#xD615;&#xC131; DREZ CNS &#xC601;&#xD1A0; &#xCE68;&#xB7B5;&#xC73C;&#xB85C; &#xBE60;&#xB974;&#xAC8C; &#xC548;&#xC815;&#xD654; &#xB41C;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC77C; &#xBC15;&#xC0AC; &#xC911;&#xC0DD;&#xC758; &#xC870;&#xC0AC;&#xC5D0; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xD328;&#xB7EC;&#xB2E4;&#xC784;&#xC744; &#xC18C;&#xAC1C; &#xD558; &#xACE0; &#xCC99;&#xCD94; &#xB8E8;&#xD2B8; &#xBD80;&#xC0C1; &#xD6C4; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC131;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xB3C4;&#xC6C0;&#xC774; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

In vivo &#xB290; &#xB8E8;&#xD2B8; &#xC911;&#xC0DD;&#xC758; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5;: &#xC2E0;&#xC18D;&#xD55C; &#xB3D9;&#xC6D0; &#xC815;&#xC9C0; &#xBC0F; CNS/PNS &#xD14C;&#xB450;&#xB9AC;&#xC5D0; presynaptic &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;.

La ra&#xED;z dorsal (RD) regenerar los axones en el SNP, sino dar la vuelta o detenerse en la zona de la ra&#xED;z dorsal de entrada (DREZ), la entrada en el SNC. Estudios anteriores que se basaban en las t&#xE9;cnicas convencionales de rastreo o an&#xE1;lisis post-mortem atribuy&#xF3; el fracaso de la regeneraci&#xF3;n a los inhibidores de crecimiento y la falta de potencial de crecimiento intr&#xED;nseco. Aqu&#xED;, se presenta la primera en el estudio de im&#xE1;genes in vivo de la regeneraci&#xF3;n DR. Marcado con fluorescencia, de gran di&#xE1;metro en los axones DR-thy1 YFPH ratones alargada a trav&#xE9;s de un sitio de aplastamiento DR, pero no un sitio de corte transversal, y creci&#xF3; a lo largo de la ra&#xED;z a&#x26;gt; 1,5 mm / d&#xED;a, con poca variabilidad. Sorprendentemente, pocas veces se dio la vuelta en el DREZ al encontrarse con los astrocitos, pero penetrado m&#xE1;s profundamente en el territorio del SNC, donde r&#xE1;pidamente se estanc&#xF3; y luego se mantuvo completamente inm&#xF3;vil o se mantiene estable, incluso despu&#xE9;s de las lesiones de aire acondicionado que un mayor crecimiento a lo largo de la ra&#xED;z. Estancados consejos ax&#xF3;n y ejes adyacentes fueron immunolabeled intensamente con los marcadores de sinapsis. El an&#xE1;lisis ultraestructural dirigido al enriquecimiento DREZ con axones reci&#xE9;n llegados, adem&#xE1;s, revel&#xF3; abundantes perfiles axonal presin&#xE1;ptica exhiban caracter&#xED;sticas tales como las ves&#xED;culas sin&#xE1;pticas que se ordenan a las zonas activas, pero las funciones no postsin&#xE1;pticos. Estos datos sugieren que los axones no son ni rechazado, ni inhibe de forma continua en el DREZ por mol&#xE9;culas inhibidoras del crecimiento, pero son r&#xE1;pidamente estabilizado, ya que invaden el territorio del SNC de la DREZ, formando terminaciones presin&#xE1;pticas de terminales en las c&#xE9;lulas no neuronales. Nuestro trabajo presenta un nuevo paradigma experimental para la investigaci&#xF3;n de la regeneraci&#xF3;n y la Rep&#xFA;blica Dominicana puede ayudar a inducir la regeneraci&#xF3;n significativa despu&#xE9;s de las lesiones de ra&#xED;ces espinales.

Im&#xE1;genes in vivo de la regeneraci&#xF3;n de ra&#xED;z dorsal: La inmovilizaci&#xF3;n r&#xE1;pida y diferenciaci&#xF3;n presin&#xE1;ptica en el SNC / frontera SNP

Andrew Skuba

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