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Supported Planar Bilayers for the Formation of Study of Immunological Synapses and Kinapse

Supported planar bilayers are powerful tools that can be used to model the molecular interactions in an immunological synapse.   To mimic the interactions ...

New York University - NYU

&#x6A21;&#x578B;&#x514D;&#x75AB;&#x7A81;&#x89E6; (IS) &#x4E2D;&#xFF0C;&#x5DF2;&#x5B9A;&#x4E49;&#x4E86;&#x77ED;&#x6682; TCR microclusters &#x548C;&#x957F;&#x5BFF;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; Ctheta &#x5BF9;&#x7126;&#x4E2D;&#x592E;&#x8D85;&#x5206;&#x5B50;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7FA4;&#x96C6; &#xFF08;cSMAC&#xFF09;&#x3002;&#x5728;&#x4E0D;&#x540C;&#x6A21;&#x578B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x5DF2; microclusters&#xFF0C;cSMAC&#xFF0C;&#x5728;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x6216;&#x5206;&#x5F00;&#x5F62;&#x6210;&#x591A;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x75AB;&#x6E90;&#x5730;&#x7684; TCR &#x4ECB;&#x5BFC; CD28 &#x534F;&#x540C;&#x523A;&#x6FC0;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;TCR &#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5171;&#x523A;&#x6FC0;&#x5206;&#x5B50;&#x751F;&#x7406; IS T &#x7EC6;&#x80DE;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x7EC6;&#x80DE; (DC) &#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x5173;&#x7CFB;&#x4EE4;&#x4EBA;&#x8D39;&#x89E3;&#x3002;&#x5728;&#x7279;&#x5B9A; Ag &#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6D3B;&#x5316;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D; T &#x7EC6;&#x80DE; DC &#x662F; TCR &#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x4E0E; CD28 CD80 &#x52A8;&#x6001;&#x5173;&#x7CFB;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x751F;&#x6210; CD80 eCFP &#x5C0F;&#x9F20;&#x4F7F;&#x7528;&#x7EC6;&#x83CC;&#x4EBA;&#x5DE5;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x6280;&#x672F;&#x3002;&#x813E; DCs&#x3001; &#x5185;&#x6E90;&#x6027; CD80 &#x548C; CD80 eCFP &#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x4E3A;&#x7B49;&#x79BB;&#x5B50;&#x819C;&#x548C;&#x9AD8;&#x5C14;&#x57FA;&#x3001; CD80 eCFP &#x5728;&#x4F53;&#x5185;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x5728; OT II T &#x7EC6;&#x80DE; DC &#x662F;&#xFF0C;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x591A;&#x4E2A;&#x9694;&#x79BB;&#x7684; TCR&#x3001; CD80 &#x548C; LFA 1 &#x7FA4;&#x96C6;&#x3002;T &#x7EC6;&#x80DE;-&#x76F4;&#x6D41;&#x5728;&#x7A81;&#x89E6; CD80 &#x96C6;&#x7FA4;&#x88AB; colocalized &#x4E0E; CD28 &#x548C; PKCtheta&#xFF0C;cSMAC &#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7279;&#x70B9;&#x3002;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x4E0E;&#x6297; MHC Ab TCR &#x6025;&#x6027;&#x5C01;&#x9501;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7ECF;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8FC5;&#x901F;&#x51CF;&#x5C11;&#x548C;&#x6570;&#x76EE;&#x548C;&#x5927;&#x5C0F; CD80 &#x7FA4;&#x96C6;&#xFF0C;TCR microclusters &#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7279;&#x70B9;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;T &#x7EC6;&#x80DE; DC &#x63A5;&#x53E3;&#x5305;&#x542B;&#x5171;&#x4EAB;&#x7279;&#x6027;&#x7684; microclusters &#x548C; cSMACs &#x7684;&#x52A8;&#x6001;&#x534F;&#x540C;&#x523A;&#x6FC0;&#x7076;&#x3002;

T &#x7EC6;&#x80DE;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x514D;&#x75AB;&#x7A81;&#x89E6;&#x5305;&#x542B;&#x62DB;&#x8058;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; C &theta; &#x7684; TCR &#x4F9D;&#x8D56; CD28 CD80 &#x96C6;&#x7FA4;&#x3002;

Short-lived TCR microclusters and a longer-lived protein kinase Ctheta-focusing central supramolecular activation cluster (cSMAC) have been defined in model immunological synapses (IS). In different model systems, CD28-mediated costimulatory interactions have been detected in microclusters, the cSMAC, or segregated from the TCR forming multiple distinct foci. The relationship between TCR and costimulatory molecules in the physiological IS of T cell-dendritic cell (DC) is obscure. To study the dynamic relationship of CD28-CD80 and TCR interactions in the T cell-DC IS during Ag-specific T cell activation, we generated CD80-eCFP mice using bacterial artificial chromosome transgenic technology. In splenic DCs, endogenous CD80 and CD80-eCFP localized to plasma membrane and Golgi apparatus, and CD80-eCFP was functional in vivo. In the OT-II T cell-DC IS, multiple segregated TCR, CD80, and LFA-1 clusters were detected. In the T cell-DC synapse CD80 clusters were colocalized with CD28 and PKCtheta, a characteristic of the cSMAC. Acute blockade of TCR signaling with anti-MHC Ab resulted in a rapid reduction in Ca(2+) signaling and the number and size of the CD80 clusters, a characteristic of TCR microclusters. Thus, the T cell-DC interface contains dynamic costimulatory foci that share characteristics of microclusters and cSMACs.

T cell-dendritic cell immunological synapses contain TCR-dependent CD28-CD80 clusters that recruit protein kinase C theta.

Courte dur&#xE9;e de vie microamas TCR et une prot&#xE9;ine kinase de plus longue dur&#xE9;e Ctheta-mise au point central du cluster d&#x26;#39;activation supramol&#xE9;culaire (cSMAC) ont &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;finis au niveau des synapses immunologiques mod&#xE8;le (IS). Dans les syst&#xE8;mes de diff&#xE9;rents mod&#xE8;les, les interactions de co-stimulation CD28 &#xE0; m&#xE9;diation ont &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;tect&#xE9;s dans microamas, le cSMAC, ou s&#xE9;par&#xE9;s de la TCR formant de multiples foyers distincts. La relation entre TCR et les mol&#xE9;cules co-stimulatrices dans le physiologique est de lymphocytes T-cellules dendritiques (DC) est obscure. Pour &#xE9;tudier la relation dynamique de CD28-CD80 et les interactions TCR dans la cellule T-DC est au cours de l&#x26;#39;Ag-activation des lymphocytes T sp&#xE9;cifiques, nous avons g&#xE9;n&#xE9;r&#xE9; des souris CD80-ECFP utilisant la technologie bact&#xE9;rienne chromosome artificiel transg&#xE9;nique. Dans les pays d&#xE9;velopp&#xE9;s spl&#xE9;niques, endog&#xE8;ne CD80 et CD80-ECFP localis&#xE9;e &#xE0; la membrane plasmique et appareil de Golgi, et CD80-ECFP &#xE9;tait fonctionnelle in vivo. Dans le T OT-II cellule-DC est, multiple distincts TCR, CD80, et LFA-1 foyers ont &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;tect&#xE9;s. Dans le lymphocyte T-DC synapse grappes CD80 sont colocalis&#xE9;s avec CD28 et PKCtheta, une caract&#xE9;ristique de l&#x26;#39;cSMAC. Blocus aigu&#xEB; des TCR de signalisation anti-MHC Ab a entra&#xEE;n&#xE9; une r&#xE9;duction rapide de la Ca (2 +) de signalisation et le nombre et la taille des clusters du CD80, une caract&#xE9;ristique de TCR microamas. Ainsi, la cellule T-DC interface contient des foyers de costimulation dynamique qui partagent des caract&#xE9;ristiques de microamas et cSMACs.

T Cell-dendritiques synapses immunologiques cellulaires contiennent des TCR-d&#xE9;pendants CD28-CD80 clusters qui recrutent la prot&#xE9;ine kinase C th&#xEA;ta

Kurzlebige TCR Mikrocluster und einer Quecksilberbelastung Protein Kinase Ctheta-konzentrieren zentrale supramolekulare Aktivierung Cluster (cSMAC) wurden im Modell immunologische Synapsen (IS) definiert. In verschiedenen Modellsysteme wurden CD28-vermittelte kostimulatorischen Interaktionen in Mikrocluster, die cSMAC, erkannt oder von TCR bilden mehrere unterschiedliche Herde ausgesondert. Die Beziehung zwischen TCR und kostimulatorischen Molek&uuml;len in der physiologischen IS der T-Zell-dendritischen Zellen (DC) ist unklar. Um das dynamische Verh&auml;ltnis von CD28-CD80 und TCR Interaktionen in der T-Zell-DC ist w&auml;hrend der Ag-spezifische T-Zell-Aktivierung zu studieren, haben wir CD80-eCFP M&auml;use mit bacterial artificial Chromosome transgenen Technologie generiert. In Milz DCs, endogene CD80 und CD80-eCFP lokalisiert zu Plasma war Membran und Golgi-Apparat und CD80-eCFP funktionell in Vivo. Im OT-II T-Zell-DC ist wurden mehrere getrennte TCR, CD80 und LFA-1 Cluster erkannt. In der T-Zell-DC wurden Synapse CD80 Clustern mit CD28 und PKCtheta, ein Merkmal der cSMAC colocalized. Akute Blockade der TCR Signalisierung mit Anti-MHC Ab ergab eine rasche Reduzierung Ca(2+) signalisieren und die Anzahl und Gr&ouml;&szlig;e der CD80 Cluster, ein Merkmal der TCR Mikrocluster. Die T-Zell-DC-Schnittstelle enth&auml;lt daher dynamische kostimulatorischen Herde, die Merkmale der Mikrocluster und cSMACs zu teilen.

T-Zell-Dendritische Zelle immunologische Synapsen enthalten TCR-abh&auml;ngige CD28-CD80-Clustern, die Protein-Kinase C-Theta zu rekrutieren.

Breve durata TCR microclusters e un balagh cluster centrale supramolecolare attivazione proteina chinasi Ctheta di messa a fuoco (cSMAC) sono stati definiti nelle sinapsi immunologica modello (IS). Nei sistemi di modello diverso, interazioni costimolazione CD28-mediata sono state rilevate in microclusters, cSMAC, o segregate da TCR formando molteplici focolai distinti. Il rapporto tra TCR e molecole di costimolazione &egrave; fisiologico della cellula T cellule dendritiche (DC) &egrave; oscuro. Per studiare il rapporto dinamico di CD28-CD80 e interazioni TCR nella cellula T-DC &egrave; durante l&#39;attivazione della cellula T Ag-specifici, abbiamo generato CD80-eCFP topi utilizzando la tecnologia transgenica cromosoma artificiale batterico. DCs splenica, CD80 endogeni e CD80-eCFP localizzata al plasma, membrana e apparato del Golgi e CD80-eCFP era funzionale in vivo. In OT-II T cell-DC &egrave;, sono stati rilevati pi&ugrave; segregato cluster TCR, CD80 e LFA-1. Nella cellula T-DC cluster CD80 sinapsi sono stati colocalized con CD28 e PKCtheta, una caratteristica della cSMAC. Blocco acuto del TCR segnalazione con Ab anti-MHC ha provocato una rapida riduzione nella segnalazione Ca(2+) e il numero e la dimensione dei cluster CD80, una caratteristica del TCR microclusters. Cos&igrave;, l&#39;interfaccia di cellule T-DC contiene foci di costimolazione dinamici che condividono caratteristiche di microclusters e cSMACs.

Sinapsi immunologica delle cellule dendritiche delle cellule t contengono TCR-dipendente CD28-CD80 cluster che recluta theta di proteina chinasi C.

&#x77ED;&#x547D;&#x306E;TCR&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x3068;&#x9577;&#x3044;&#x5BFF;&#x547D;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;Ctheta&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30AB;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x4E2D;&#x592E;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#xFF08;cSMAC&#xFF09;&#x304C;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x514D;&#x75AB;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#xFF08;IS&#xFF09;&#x3067;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5225;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3067;&#x306F;&#x3001;CD28&#x5A92;&#x4ECB;&#x523A;&#x6FC0;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x3001;cSMAC&#x3067;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;TCR&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x75C5;&#x5DE3;&#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x96E2;&#x3002; T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6A39;&#x72B6;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;DC&#xFF09;&#x304C;&#x3042;&#x3044;&#x307E;&#x3044;&#x306A;&#x306E;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x306B;TCR&#x3068;&#x5171;&#x523A;&#x6FC0;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x95A2;&#x4FC2;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002; T&#x7D30;&#x80DE;-DC&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;CD28-CD80&#x3068;TCR&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x52D5;&#x7684;&#x306A;&#x95A2;&#x4FC2;&#x3092;&#x52C9;&#x5F37;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x9280;&#x7279;&#x7570;&#x7684;T&#x7D30;&#x80DE;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x6642;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x83CC;&#x4EBA;&#x5DE5;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x5F62;&#x8CEA;&#x8EE2;&#x63DB;&#x6280;&#x8853;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;CD80-ECFP&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3092;&#x4F5C;&#x88FD;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x813E;&#x81D3;&#x306E;&#x6A39;&#x72B6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x306E;CD80&#x3068;CD80-ECFP&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x3084;&#x30B4;&#x30EB;&#x30B8;&#x4F53;&#x306B;&#x5C40;&#x5728;&#x3057;&#x3001;CD80-ECFP&#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x3067;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002; OT-II T&#x7D30;&#x80DE;-DC&#x3068;&#x3001;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x5206;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x305F;TCR&#x3001;CD80&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;LFA-1&#x306E;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x304C;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002; T&#x7D30;&#x80DE;-DC&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;CD80&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x306B;CD28&#x3068;PKCtheta&#x3001;cSMAC&#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x3068;&#x5171;&#x5C40;&#x5728;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6297;MHC&#x6297;&#x4F53;&#x3068;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;TCR&#x306E;&#x6025;&#x6027;&#x9589;&#x585E;&#x306F;&#x3001;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3068;CD80&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x6570;&#x3068;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x3001;TCR&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x304C;&#x6025;&#x6FC0;&#x306B;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;T&#x7D30;&#x80DE;-DC&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30D5;&#x30A7;&#x30FC;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x3068;cSMACs&#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x3092;&#x5171;&#x6709;&#x3001;&#x52D5;&#x7684;&#x523A;&#x6FC0;&#x306E;&#x75C5;&#x5DE3;&#x3092;&#x542B;&#x3093;&#x3067;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

T&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;&#x6A39;&#x72B6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x5B66;&#x7684;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;TCR-&#x4F9D;&#x5B58;CD28-CD80&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3082;&#x306E;&#x30EA;&#x30AF;&#x30EB;&#x30FC;&#x30C8;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;C&#x30B7;&#x30FC;&#x30BF;

&#xB2E8;&#xAE30; TCR microclusters &#xBC0F; &#xCD5C;&#xC18C;&#xB85C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; Ctheta &#xCD08;&#xC810;&#xC744; &#xC911;&#xC559; supramolecular &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130; (cSMAC) &#xBAA8;&#xB378; &#xBA74;&#xC5ED; &#xB0C5; (IS)&#xC5D0; &#xC815;&#xC758; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2E4;&#xB978; &#xBAA8;&#xB378; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0;&#xC11C; CD28-&#xC911;&#xC7AC; costimulatory &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0;&#xC11C; microclusters, cSMAC, &#xB610;&#xB294; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC00;&#xC9C0; foci &#xD615;&#xC131; TCR&#xC5D0;&#xC11C; &#xCC28;&#xBCC4; &#xB41C;. TCR&#xACFC; T &#xC138;&#xD3EC; &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; (DC)&#xC758; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; IS costimulatory &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xAD00;&#xACC4;&#xB294; &#xC560;&#xB9E4; &#xD55C;. Ag &#xAD00;&#xB828; T &#xC138;&#xD3EC; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; CD28 cd80&#xC758; &#xB3D9;&#xC801; &#xAD00;&#xACC4; &#xBC0F; T &#xC138;&#xD3EC;-DC&#xB294; TCR &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xC5F0;&#xAD6C; CD80 eCFP &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC138;&#xADE0; &#xC778;&#xACF5; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xAE30;&#xC220;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC0DD;&#xC131; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBE44;&#xC7A5; DCs, &#xC0DD; CD80 CD80 eCFP &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8;&#xB85C; &#xB9C9;&#xC640; Golgi &#xAE30;&#xAD6C; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; CD80 Ecfp&#xB294; vivo &#xAE30;&#xB2A5;. 2 &#xCC28; &#xC5F0;&#xC7A5; &#xC804; T &#xC138;&#xD3EC;-DC&#xB294; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xCC28;&#xBCC4;&#xB41C; TCR, CD80, &#xBC0F; LFA-1 &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130; &#xAC80;&#xCD9C; &#xD588;&#xB2E4;. T &#xC138;&#xD3EC;-DC &#xB0C5; CD80 &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130; cd28&#xC640; Pkctheta&#xB294; Csmac&#xC758; &#xD2B9;&#xC131; colocalized &#xD588;&#xB2E4;. &#xC548;&#xD2F0;-MHC Ab&#xC640; &#xC2E0;&#xD638; TCR&#xC758; &#xAE09;&#xC131; &#xBD09;&#xC1C4; Ca(2+) &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xAE09;&#xC18D; &#xD55C; &#xAC10;&#xC18C;&#xC640; &#xC218; TCR microclusters &#xD2B9;&#xC131; CD80 &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130;&#xC758; &#xD06C;&#xAE30;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACB0;&#xACFC;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, T &#xC138;&#xD3EC;-DC &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xC774;&#xC2A4;&#xC758; microclusters &#xBC0F; cSMACs &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xACF5;&#xC720; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC801; costimulatory foci &#xD3EC;&#xD568; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

T &#xC138;&#xD3EC; &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; &#xBA74;&#xC5ED; &#xB0C5; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; C &#xC138;&#xD0C0; &#xBAA8;&#xC9D1; TCR &#xC885;&#xC18D; CD28-CD80 &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130; &#xD3EC;&#xD568;.

De corta duraci&#xF3;n microclusters TCR y una prote&#xED;na quinasa de vida m&#xE1;s larga Ctheta de enfoque c&#xFA;mulo central la activaci&#xF3;n supramolecular (cSMAC) se han definido en el modelo de sinapsis inmunol&#xF3;gica (IS). En sistemas modelo diferentes, mediadas por CD28-interacciones estimuladoras se han detectado en microclusters, la cSMAC, o segregados del TCR formando distintos focos m&#xFA;ltiples. La relaci&#xF3;n entre el TCR y mol&#xE9;culas co-estimuladoras en el fisiol&#xF3;gico es de c&#xE9;lulas T de c&#xE9;lulas dendr&#xED;ticas (DC) es oscuro. Para estudiar la relaci&#xF3;n din&#xE1;mica de CD28-CD80 y las interacciones en el TCR de c&#xE9;lulas T-DC es en Ag-espec&#xED;fica de activaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas T, se generaron ratones CD80-ECFP que utilizan la tecnolog&#xED;a transg&#xE9;nica bacteriana cromosoma artificial. En los pa&#xED;ses en desarrollo espl&#xE9;nica, end&#xF3;genos CD80 y CD80 ECFP-localizado en la membrana plasm&#xE1;tica y el aparato de Golgi, y CD80-ECFP era funcional in vivo. En el T AT-II en c&#xE9;lulas ES de CC, m&#xFA;ltiples segregada TCR, CD80, y grupos de LFA-1 se detectaron. En la T DC c&#xE9;lulas CD80 sinapsis racimos se colocalized con CD28 y PKCtheta, una caracter&#xED;stica de la cSMAC. Bloqueo agudo de TCR se&#xF1;alizaci&#xF3;n con anti-MHC de Ab result&#xF3; en una reducci&#xF3;n r&#xE1;pida en Ca (2 +) de se&#xF1;alizaci&#xF3;n y el n&#xFA;mero y tama&#xF1;o de los racimos CD80, una caracter&#xED;stica del TCR microclusters. De este modo, las c&#xE9;lulas T-DC interfaz contiene focos coestimuladora din&#xE1;mica que comparten caracter&#xED;sticas de microclusters y cSMACs.

T-c&#xE9;lula dendr&#xED;ticas sinapsis inmunol&#xF3;gicas celulares contienen TCR dependientes de CD80-CD28 agrupaciones que reclutan prote&#xED;na quinasa C theta

Ca(2+) &#x6FC0;&#x6D3B; K(+) &#x901A;&#x9053; KCa3.1 &#x662F;&#x7ECF;&#x5927;&#x91CF;&#x6D8C;&#x5165;&#x548C;&#x968F;&#x540E;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x6240;&#x5FC5;&#x9700;&#x7684;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4EE5;&#x524D;&#x663E;&#x793A;&#x6838;&#x82F7;&#x4E8C;&#x78F7;&#x9178;&#x679C;&#x7CD6;&#x6FC0;&#x9176; beta (&#x76F8;&#x5173;-B)&#xFF0C;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7EC4;&#x6C28;&#x9178;&#x6FC0;&#x9176;&#xFF0C;&#x76F4;&#x63A5; phosphorylates &#x548C;&#x6FC0;&#x6D3B; KCa3.1 &#x548C; CD4 T &#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x6240;&#x9700;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x73B0;&#x5728;&#x663E;&#x793A;&#x7C7B;&#x4E8C;&#x78F7;&#x8102;&#x9170;&#x808C;&#x9187;-3 &#x6FC0;&#x9176; C2beta (&#x808C;&#x9187;-C2beta&#xFF09; &#x88AB;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53D7;&#x4F53; (TCR) &#x548C;&#x4E0A;&#x6E38;&#x7684;&#x51FD;&#x6570;&#x7684;&#x76F8;&#x5173; B &#x6FC0;&#x6D3B; KCa3.1 &#x901A;&#x9053;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x808C;&#x9187;-C2beta &#x7684; siRNA &#x5728;&#x4EBA;&#x7C7B; CD4 T &#x7EC6;&#x80DE;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5BFC;&#x81F4; KCa3.1 &#x901A;&#x9053;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x662F;&#x7531;&#x4E8E;&#x51CF;&#x5C11;&#x78F7;&#x8102;&#x9170;&#x808C;&#x9187;-3-&#x78F7;&#x9178; [PI (3) P] &#x56E0;&#x4E3A;&#x900F;&#x6790;&#x808C;&#x9187; C2beta siRNA &#x6CBB;&#x7597; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E; PI (3) P &#x6551;&#x51FA; KCa3.1 &#x901A;&#x9053;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x808C;&#x9187;-C2beta KCa3.1 &#x8F6C;&#x67D3; Jurkat T &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8FC7;&#x5EA6;&#x8868;&#x8FBE;&#x5BFC;&#x81F4; KCa3.1 &#x548C;&#x7ECF;&#x6D8C;&#x5165;&#xFF0C;&#x589E;&#x52A0; TCR &#x523A;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x5316;&#x800C;&#x6C89;&#x9ED8;&#x7684;&#x808C;&#x9187; C2beta &#x6291;&#x5236;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x54CD;&#x5E94;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x5168;&#x5185;&#x53CD;&#x5C04;&#x8367;&#x5149;&#x663E;&#x5FAE;&#x672F;&#x548C;&#x5E73;&#x9762;&#x8102;&#x53CC;&#x5C42;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x808C;&#x9187; C2beta colocalized &#x4E0E; Zap70 &#x548C;&#x5916;&#x5468;&#x8840;&#x4E2D;&#x514D;&#x75AB;&#x7A81;&#x89E6; microclusters &#x5728; TCR&#x3002;&#x8FD9;&#x662F;&#x9996;&#x6B21;&#x5C55;&#x793A;&#x7C7B;&#x4E8C;&#x3001; &#x808C;&#x9187;&#x5728; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6D3B;&#x5316;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x4E86;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x7C7B;&#x4E8C;&#x78F7;&#x8102;&#x9170;&#x808C;&#x9187;-3 &#x6FC0;&#x9176; C2beta &#x662F;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684; K + &#x901A;&#x9053; KCa3.1 &#x548C; CD4 T &#x7EC6;&#x80DE;&#x6240;&#x5FC5;&#x9700;&#x7684;&#x3002;

The Ca(2+)-activated K(+) channel KCa3.1 is required for Ca(2+) influx and the subsequent activation of T-cells. We previously showed that nucleoside diphosphate kinase beta (NDPK-B), a mammalian histidine kinase, directly phosphorylates and activates KCa3.1 and is required for the activation of human CD4 T lymphocytes. We now show that the class II phosphatidylinositol 3 kinase C2beta (PI3K-C2beta) is activated by the T-cell receptor (TCR) and functions upstream of NDPK-B to activate KCa3.1 channel activity. Decreased expression of PI3K-C2beta by siRNA in human CD4 T-cells resulted in inhibition of KCa3.1 channel activity. The inhibition was due to decreased phosphatidylinositol 3-phosphate [PI(3)P] because dialyzing PI3K-C2beta siRNA-treated T-cells with PI(3)P rescued KCa3.1 channel activity. Moreover, overexpression of PI3K-C2beta in KCa3.1-transfected Jurkat T-cells led to increased TCR-stimulated activation of KCa3.1 and Ca(2+) influx, whereas silencing of PI3K-C2beta inhibited both responses. Using total internal reflection fluorescence microscopy and planar lipid bilayers, we found that PI3K-C2beta colocalized with Zap70 and the TCR in peripheral microclusters in the immunological synapse. This is the first demonstration that a class II PI3K plays a critical role in T-cell activation.

The class II phosphatidylinositol 3 kinase C2beta is required for the activation of the K+ channel KCa3.1 and CD4 T-cells.

Le Ca (2 +)-actif K (+) du canal KCa3.1 est n&#xE9;cessaire pour le Ca (2 +) afflux et l&#x26;#39;activation subs&#xE9;quente des lymphocytes-T. On a montr&#xE9; que pr&#xE9;c&#xE9;demment nucl&#xE9;oside diphosphate kinase b&#xEA;ta (NDPK-B), une histidine kinase de mammif&#xE8;re, phosphoryle et active directement KCa3.1 et est n&#xE9;cessaire pour l&#x26;#39;activation de lymphocytes T CD4 humaine. Nous allons maintenant montrer que la classe II phosphatidylinositol 3-kinase C2beta (PI3K-C2beta) est activ&#xE9;e par le r&#xE9;cepteur des cellules T (TCR) et les fonctions en amont de NDPK-B pour activer KCa3.1 l&#x26;#39;activit&#xE9; du canal. Diminution de l&#x26;#39;expression de la PI3K-C2beta par siRNA en cellules CD4 des cellules T humaines a entra&#xEE;n&#xE9; une inhibition de l&#x26;#39;activit&#xE9; du canal KCa3.1. L&#x26;#39;inhibition &#xE9;tait due &#xE0; une diminution de phosphatidylinositol 3-phosphate [PI (3) P] parce dialyse PI3K-C2beta siARN-trait&#xE9; les cellules T avec PI (3) P sauv&#xE9; KCa3.1 l&#x26;#39;activit&#xE9; du canal. En outre, la surexpression de la PI3K-C2beta dans KCa3.1 transfect&#xE9;es Jurkat T-cellules conduit &#xE0; une augmentation TCR stimul&#xE9;e par l&#x26;#39;activation de KCa3.1 et Ca (2 +) afflux, tandis que taire de la PI3K-C2beta inhib&#xE9; les deux r&#xE9;ponses. Utilisation totale microscopie de fluorescence interne de r&#xE9;flexion et bicouches lipidiques planes, nous avons constat&#xE9; que la voie PI3K-C2beta colocalis&#xE9;s avec ZAP70 et le TCR dans microamas p&#xE9;riph&#xE9;riques dans la synapse immunologique. Il s&#x26;#39;agit de la premi&#xE8;re d&#xE9;monstration qu&#x26;#39;une classe II PI3K joue un r&#xF4;le essentiel dans l&#x26;#39;activation des lymphocytes T-.

La classe II phosphatidylinositol 3 kinase C2beta est requise pour l&#x26;#39;activation des canaux K + KCa3.1 et lymphocytes T CD4

K(+) Ca(2+) aktivierte Kanal KCa3.1 ist f&uuml;r Ca(2+) Zustrom und die anschlie&szlig;ende Aktivierung von T-Zellen erforderlich. Zuvor haben wir gezeigt, dass Nukleosid Diphosphat Kinase Beta (NDPK-B), eine S&auml;ugetier-Histidin-Kinase, direkt phosphorylates und aktiviert KCa3.1 und ist erforderlich f&uuml;r die Aktivierung der menschlichen CD4-T-Lymphozyten. Wir zeigen, dass das Klasse II Phosphatidylinositol 3 Kinase C2beta (PI3K-C2beta) wird aktiviert, indem der T-Zell-Rezeptor (TCR) und Funktionen stromaufw&auml;rts von NDPK-B KCa3.1 aktivieren-channel-Aktivit&auml;t. Verminderte Expression von PI3K-C2beta von SiRNA in humanen CD4 T-Zellen f&uuml;hrte Hemmung der KCa3.1 Channel-Aktivit&auml;ten. Die Hemmung war aufgrund verringerter Phosphatidylinositol-3-Phosphat (3) P PI], weil dialyzing PI3K-C2beta SiRNA behandelten T-Zellen mit PI (3) P KCa3.1 Channel-Aktivit&auml;ten gerettet. Zudem f&uuml;hrte eine &Uuml;berexpression von PI3K-C2beta in KCa3.1-transfected Jurkat T-Zellen um erh&ouml;hte TCR-stimuliert die Aktivierung des KCa3.1 und Ca(2+)-Zustrom, w&auml;hrend beide Antworten zum Schweigen der PI3K-C2beta gehemmt werden. Mit Totalreflexion Fluoreszenzmikroskopie und planare Lipid-Doppelschichten, fanden wir, dass mit Zap70 und TCR in peripheren Mikrocluster in der immunologischen Synapse PI3K-C2beta colocalized. Dies ist die erste Demonstration eine Klasse II PI3K eine kritische Rolle in T-Zell-Aktivierung.

Die Klasse II Phosphatidylinositol 3-Kinase ist C2beta f&uuml;r die Aktivierung des K +-Kanals KCa3.1 und CD4 T-Zellen erforderlich.

Il canale attivato Ca(2+) K(+) KCa3.1 &egrave; necessario per Ca(2+) afflusso e la successiva attivazione delle cellule T. Abbiamo dimostrato in precedenza che beta di chinasi del difosfato di nucleoside (NDPK-B), una chinasi istidina mammiferi, direttamente fosforila e attiva KCa3.1 ed &egrave; necessaria per l&#39;attivazione dei linfociti T CD4 umani. Mostriamo ora che la chinasi di fosfatidilinositolo 3 II classe C2beta (PI3K-C2beta) &egrave; attivato dal recettore delle cellule T (TCR) e funzioni a Monte di NDPK-B per attivare KCa3.1 canale attivit&agrave;. Diminuita espressione di PI3K-C2beta di siRNA in CD4 T-cellule umane ha provocato l&#39;inibizione dell&#39;attivit&agrave; del canale KCa3.1. L&#39;inibizione &egrave; stato a causa della diminuita fosfatidilinositolo-3-fosfato [PI (3) P] perch&eacute; dialyzing PI3K-C2beta trattati con siRNA T-cellule con PI (3) P salvato attivit&agrave; del canale KCa3.1. Inoltre, sovraespressione di PI3K-C2beta in KCa3.1-transfected Jurkat T-cellule ha portato alla maggiore attivazione TCR-stimolato di afflusso KCa3.1 e Ca(2+), considerando che il silenziamento di PI3K-C2beta inibito entrambe le risposte. Utilizzando la microscopia di fluorescenza di riflessione interna totale e lipidici planare, abbiamo trovato che PI3K-C2beta colocalized con Zap70 e il TCR in microclusters periferico in sinapsi immunologica. Questa &egrave; la prima dimostrazione che una classe II PI3K svolge un ruolo critico nell&#39;attivazione delle cellule T.

La chinasi del fosfatidilinositolo 3 II classe C2beta &egrave; richiesto per l&#39;attivazione del canale K + KCa3.1 e cellule T CD4.

&#x306E;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;K&#xFF08;+&#xFF09;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;KCa3.1&#x306F;&#x3001;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x6D41;&#x5165;&#x3068;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x305D;&#x306E;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30B7;&#x30C9;&#x4E8C;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x3B2;&#xFF08;NDPK-B&#xFF09;&#x3001;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;&#x30D2;&#x30B9;&#x30C1;&#x30B8;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306F;&#x3001;&#x76F4;&#x63A5;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3068;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;KCa3.1&#x3057;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;CD4 T&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x4ECA;&#x3001;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;II&#x306E;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30C1;&#x30B8;&#x30EB;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;3&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;C2beta&#xFF08;PI3K-C2beta&#xFF09;&#x306F;KCa3.1&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x4E0A;&#x6D41;&#x306E;NDPK-B&#x306E;T&#x7D30;&#x80DE;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#xFF08;TCR&#xFF09;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x30D2;&#x30C8;CD4 T&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;siRNA&#x306B;&#x3088;&#x308B;PI3K-C2beta&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x306F;KCa3.1&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x963B;&#x5BB3;&#x306F;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30C1;&#x30B8;&#x30EB;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;3  - &#x30EA;&#x30F3;&#x9178;[PI&#xFF08;3&#xFF09;P]&#x304C;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x3082;&#x306E;PI&#x3068;T&#x7D30;&#x80DE;PI3K-C2beta&#x306E;siRNA&#x3067;&#x51E6;&#x7406;&#x3057;&#x305F;&#x900F;&#x6790;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#xFF08;3&#xFF09;P&#x306F;KCa3.1&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x6551;&#x52A9;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;KCa3.1&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30B8;&#x30E3;&#x30FC;&#x30AB;&#x30C3;&#x30C8;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;PI3K-C2beta&#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;TCR&#x523A;&#x6FC0;KCa3.1&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3068;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x6D41;&#x5165;&#x306F;&#x3001;PI3K-C2beta&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x5185;&#x90E8;&#x5168;&#x53CD;&#x5C04;&#x86CD;&#x5149;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3068;&#x5E73;&#x9762;&#x8102;&#x8CEA;&#x4E8C;&#x91CD;&#x819C;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;PI3K-C2beta&#x306F;&#x514D;&#x75AB;&#x5B66;&#x7684;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x672B;&#x68A2;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;ZAP70&#x3068;TCR&#x3068;&#x5171;&#x5C40;&#x5728;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;II PI3K&#x306F;T&#x7D30;&#x80DE;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x521D;&#x3081;&#x3066;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;II&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30C1;&#x30B8;&#x30EB;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;3&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;C2beta&#x306F;K +&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;KCa3.1&#x304A;&#x3088;&#x3073;CD4 T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;

Ca(2+) &#xD65C;&#xC131;&#xD654; K(+) &#xCC44;&#xB110; Kca3.1&#xB294; Ca(2+) &#xC720;&#xC785; &#xBC0F; T-&#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD6C4;&#xC18D; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xADF8; &#xB274; &#xD074;&#xB808; &#xC624; &#xC2DC;&#xB4DC; diphosphate &#xB2C8; &#xBCA0;&#xD0C0; (NDPK-B), &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xD788;&#xC2A4;&#xD2F0;&#xB518; &#xB2C8; &#xC9C1;&#xC811; phosphorylates &#xBC0F; Kca3.1&#xC744; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC8FC;&#xBA70; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; CD4 T &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC694;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC774;&#xC81C;&#xB294; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; II phosphatidylinositol 3 &#xD0A4; C2beta &#xD45C;&#xC2DC; (PI3K-C2beta) T &#xC138;&#xD3EC; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (TCR)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC640; &#xC0C1;&#xB958; &#xAE30;&#xB2A5; KCa3.1 &#xD65C;&#xC131;&#xD654; NDPK-B&#xC758; &#xCC44;&#xB110; &#xD65C;&#xB3D9;. &#xC778;&#xAC04;&#xC758; CD4 T-&#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; Sirna&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; PI3K-c2beta&#xC758; &#xAC10;&#xC18C; &#xD45C;&#xD604; KCa3.1 &#xCC44;&#xB110; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xC800;&#xD574; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8; &#xB2E4;. Dialyzing PI3K C2beta siRNA &#xCDE8;&#xAE09; T-&#xC140; &#xD30C;&#xC774; (3) P &#xAD6C;&#xC870; KCa3.1 &#xCC44;&#xB110; &#xD65C;&#xB3D9; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC5B5;&#xC81C; &#xAC10;&#xC18C; phosphatidylinositol 3-&#xC778;&#xC0B0; &#xC5FC; [&#xD30C;&#xC774; (3) P] &#xB54C;&#xBB38; &#xC774;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, PI3K c2beta&#xC758; &#xC785;&#xC744; &#xBAA8;&#xB450; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xC800;&#xD574; &#xD558;&#xB294; &#xBC18;&#xBA74; KCa3.1 &#xD398; Jurkat T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; PI3K-C2beta overexpression KCa3.1 &#xBC0F; Ca(2+) &#xC720;&#xC785;&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; TCR &#xC790;&#xADF9; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xC774;&#xB04C;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xCD1D; &#xB0B4;&#xBD80; &#xBC18;&#xC0AC; &#xD615;&#xAD11; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95; &#xBC0F; &#xD3C9;&#xBA74; &#xC9C0;&#xC9C8; bilayers&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, PI3K C2beta zap70&#xC640; TCR &#xBA74;&#xC5ED; &#xB0C5; &#xC8FC;&#xBCC0; microclusters&#xC5D0;&#xC11C; colocalized&#xB97C; &#xCC3E;&#xC558;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xAC83;&#xC740; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xB370;&#xBAA8; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; II PI3K T &#xC138;&#xD3EC; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD074;&#xB798;&#xC2A4; II phosphatidylinositol 3 &#xB2C8; c2beta&#xB294; CD4 T-&#xC138;&#xD3EC;&#xC640; K + &#xCC44;&#xB110; Kca3.1&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El Ca (2 +) activada por K (+) del canal KCa3.1 se requiere para el Ca (2 +) llegada y la posterior activaci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas T. Anteriormente puso de manifiesto que la nucle&#xF3;sido difosfato quinasa beta (NDPK-B), una histidina quinasa de mam&#xED;feros, directamente fosforila y activa KCa3.1 y es necesario para la activaci&#xF3;n de linfocitos T CD4 humanos. Vamos a demostrar que la clase II fosfatidilinositol 3-quinasa C2beta (PI3K-C2beta) es activada por el receptor de c&#xE9;lulas T (TCR) y las funciones de aguas arriba de NDPK-B para activar KCa3.1 la actividad del canal. Disminuci&#xF3;n de la expresi&#xF3;n de PI3K-C2beta de siRNA en las c&#xE9;lulas CD4 c&#xE9;lulas T humanas como resultado la inhibici&#xF3;n de la actividad del canal KCa3.1. La inhibici&#xF3;n se debi&#xF3; a la disminuci&#xF3;n de la fosfatidilinositol 3-fosfato [PI (3) P] porque di&#xE1;lisis PI3K-C2beta siRNA tratados con las c&#xE9;lulas T con PI (3) P rescatado KCa3.1 la actividad del canal. Por otra parte, la sobreexpresi&#xF3;n de la PI3K-C2beta en KCa3.1 Jurkat transfectadas las c&#xE9;lulas T llevado a un aumento del TCR estimulada por la activaci&#xF3;n de KCa3.1 y Ca (2 +) influjo, mientras que el silenciamiento de la PI3K-C2beta inhibe tanto las respuestas. Uso total de microscop&#xED;a de fluorescencia de la reflexi&#xF3;n y el interior de las bicapas lip&#xED;dicas planas, encontramos que la PI3K-C2beta colocalized con Zap70 y TCR en el microclusters perif&#xE9;ricos en la sinapsis inmunol&#xF3;gica. Esta es la primera demostraci&#xF3;n de que una clase II PI3K juega un papel fundamental en la activaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas T.

La Clase II fosfatidilinositol 3-quinasa C2beta se requiere para la activaci&#xF3;n del canal de K + KCa3.1 y las c&#xE9;lulas T CD4

&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242; MHC &#x80BD;&#x590D;&#x5408;&#x4F53;&#x514D;&#x75AB;&#x7A81;&#x89E6; (IS) &#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8FC7;&#x6C47;&#x805A;&#x6210;&#x4E2D;&#x592E;&#x8D85;&#x5206;&#x5B50;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7FA4;&#x96C6; &#xFF08;cSMAC&#xFF09; &#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53D7;&#x4F53; (TCR) microclusters (MCs)&#x3002;&#x51B3;&#x5B9A;&#x56E0;&#x7D20;&#x548C; cSMAC &#x51FD;&#x6570;&#x4ECD;&#x7136;&#x672A;&#x77E5;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x6CDB;&#x7D20; (Ub) &#x548C; TSG101&#xFF0C;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x90A3;&#x4E48;&#x4E3A;&#x4E8C; &#x25CB; &#x25CB; &#x5728;&#x4FE1;&#x53F7;&#x5904;&#x7406; cSMAC &#x4E8B;&#x4EF6;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E3B; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684; siRNA&#xFF0C;&#x663E;&#x793A; TSG101 Ub &#x627F;&#x8BA4;&#x662F; cSMAC &#x5F62;&#x6210;&#x3001; TCR MC &#x4FE1;&#x53F7;&#x7EC8;&#x6B62;&#x3001; TCR &#x4E0B;&#x8C03;&#x548C; TCR MHC &#x80BD;&#x5206;&#x79BB;&#x5BCC; PKC theta &#x4FE1;&#x53F7;&#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x6240;&#x5FC5;&#x9700;&#x7684;&#x3002;&#x5F31;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242; MHC &#x80BD;&#x8BF1;&#x5BFC; CD80 &#x4F9D;&#x8D56; TCR MCs&#xFF0C;&#x6CA1;&#x6709;&#x62DB;&#x8058; TSG101 &#x6E38;&#x79BB;&#x5728; IS &#x7684;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x652F;&#x6301; CD80 &#x72EC;&#x7ACB; TCR MCs TSG101 &#x4F9D;&#x8D56;&#x627F;&#x8BA4;&#x4F5C;&#x4E3A; TCR &#x4E0B;&#x8C03;&#x5206;&#x5B50;&#x68C0;&#x67E5;&#x70B9;&#x3002;

&#x6CDB;&#x7D20;&#x53CA; TSG101 &#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x53CA;&#x4E2D;&#x592E;&#x8D85;&#x5206;&#x5B50;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7FA4;&#x96C6;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Agonist MHC-peptide complexes in the immunological synapse (IS) signal through T cell receptor (TCR) microclusters (MCs) that converge into a central supramolecular activation cluster (cSMAC). The determinants and function of the cSMAC remain unknown. We demonstrate an essential role for ubiquitin (Ub) and TSG101, but less so for HRS, in signal processing events at the cSMAC. Using siRNA in primary T cells, we show that Ub recognition by TSG101 is required for cSMAC formation, TCR MC signal termination, TCR downregulation, and segregation of TCR-MHC-peptide from PKC-theta-enriched signaling complexes. Weak agonist MHC-peptide induced CD80-dependent TCR MCs that dissociated in the center of the IS without recruiting TSG101. These results support TSG101-dependent recognition of CD80-independent TCR MCs as a molecular checkpoint for TCR downregulation.

Essential role of ubiquitin and TSG101 protein in formation and function of the central supramolecular activation cluster.

Agonistes complexes CMH-peptide de la synapse immunologique (IS) par le biais du signal de r&#xE9;cepteur de cellule T (TCR) microamas (MC) qui convergent en un groupe d&#x26;#39;activation supramol&#xE9;culaire centrale (cSMAC). Les d&#xE9;terminants et les fonctions de la cSMAC restent inconnus. Nous d&#xE9;montrons un r&#xF4;le essentiel pour l&#x26;#39;ubiquitine (Ub) et TSG101, mais moins pour les HRS, &#xE0; des &#xE9;v&#xE9;nements de traitement du signal &#xE0; la cSMAC. Utilisation de siRNA dans des cellules T primaires, nous montrons que la reconnaissance par Ub TSG101 est n&#xE9;cessaire &#xE0; la formation cSMAC, la r&#xE9;siliation TCR signal MC, la r&#xE9;gulation n&#xE9;gative du TCR, et la s&#xE9;gr&#xE9;gation des TCR-CMH-peptide &#xE0; partir de la PKC-theta enrichi de signalisation complexes. Faibles agonistes du CMH-peptide induites CD80-d&#xE9;pendants MC TCR que dissoci&#xE9; dans le centre de l&#x26;#39;IS sans recruter TSG101. Ces r&#xE9;sultats appuient TSG101-d&#xE9;pendante la reconnaissance de CD80-ind&#xE9;pendante MCs TCR comme un point de contr&#xF4;le mol&#xE9;culaire de la r&#xE9;gulation &#xE0; la baisse du TCR.

R&#xF4;le essentiel de la prot&#xE9;ine ubiquitine et TSG101 dans la formation et la fonction du cluster d&#x26;#39;activation supramol&#xE9;culaire centrale

Agonist MHC-Peptid-komplexen in der immunologischen Synapse (IS)-Signal durch T-Zell-Rezeptor (TCR) Mikrocluster (MCs), die zu einem zentralen supramolekulare Aktivierungs-Cluster (cSMAC) konvergieren. Die Determinanten und die Funktion der cSMAC bleiben unbekannt. Wir zeigen eine wesentliche Rolle f&uuml;r Ubiquitin (Ub) und TSG101, aber weniger f&uuml;r HRS, im Signal verarbeiten von Ereignissen in der cSMAC. Prim&auml;re T-Zellen mit SiRNA, zeigen wir, dass die Ub Anerkennung durch TSG101 f&uuml;r cSMAC Bildung, TCR MC Signalanbindung, TCR Heraufregulation und Trennung der TCR-MHC-Peptid aus PKC-Theta angereicherten Signalling komplexen erforderlich ist. Schwacher Agonist MHC-Peptid induzierten CD80-abh&auml;ngige TCR MCs, die in der Mitte der vs dissoziiert, ohne TSG101 zu rekrutieren. Diese Ergebnisse unterst&uuml;tzen TSG101-abh&auml;ngige Anerkennung von CD80-unabh&auml;ngige TCR MCs als eine molekulare Checkpoint f&uuml;r TCR Heraufregulation.

Wesentliche Rolle der Ubiquitin und TSG101 Protein in Entstehung und Funktion des zentralen supramolekulare Aktivierung Clusters.

Complessi MHC-peptide agonista in sinapsi immunologica (IS) il segnale attraverso T cell receptor (TCR) microclusters (MCs) che convergono in un cluster di attivazione supramolecolare centrale (cSMAC). Le determinanti e la funzione della cSMAC rimangono sconosciute. Dimostriamo un ruolo essenziale per il ubiquitin (Ub) e TSG101, ma di meno cos&igrave; per ore, in segnale elaborazione eventi presso la cSMAC. Utilizzando siRNA in cellule T primarie, mostriamo che Ub riconoscimento da parte di TSG101 &egrave; necessario per la formazione cSMAC, terminazione del segnale TCR MC, TCR downregulation e segregazione del TCR-MHC-peptide da PKC theta-arricchita di complessi di segnalazione. Debole agonista MHC-peptide indotta da MCs TCR CD80-dipendente che dissociato nel centro della &egrave; senza TSG101 di reclutamento. Questi risultati supportano il riconoscimento TSG101-dipendente di MCs TCR CD80-indipendente come un checkpoint molecolare per TCR downregulation.

Ruolo essenziale dell&#39;ubiquitina e proteina TSG101 nella formazione e nella funzione del cluster centrale attivazione supramolecolare.

&#x514D;&#x75AB;&#x5B66;&#x7684;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;MHC-&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#xFF08;IS&#xFF09;&#x3092;&#x4E2D;&#x592E;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#xFF08;cSMAC&#xFF09;&#x306B;&#x53CE;&#x675F;&#x3059;&#x308B;T&#x7D30;&#x80DE;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#xFF08;TCR&#xFF09;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#xFF08;MCS&#xFF09;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3002; cSMAC&#x306E;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;cSMAC&#x3067;&#x306E;&#x4FE1;&#x53F7;&#x51E6;&#x7406;&#x306E;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3067;&#x3001;HRS&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#xFF08;Ub&#xFF09;&#x3068;TSG101&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x3002;&#x4E00;&#x6B21;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;siRNA&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x305D;&#x306E;TSG101&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x8A8D;&#x8B58;&#x304C;cSMAC&#x5F62;&#x6210;&#x3001;TCR MC&#x306E;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7D42;&#x7AEF;&#x3001;TCR&#x306E;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;PKC-&#x3B8;&#x6FC3;&#x7E2E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x304B;&#x3089;TCR-MHC-&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x5206;&#x96E2;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8868;&#x793A;&#x306E;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x90E8;&#x306B;&#x89E3;&#x96E2;&#x304C;&#x52DF;&#x96C6;TSG101&#x304C;&#x306A;&#x3044;&#x3068;&#x5F31;&#x3044;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;MHC-&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x8A98;&#x5C0E;CD80&#x4F9D;&#x5B58;&#x306E;TCR&#x306E;MC&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;TCR&#x306E;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x30C1;&#x30A7;&#x30C3;&#x30AF;&#x30DD;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;CD80&#x975E;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x306E;TCR MC&#x306E;TSG101&#x4F9D;&#x5B58;&#x306E;&#x8A8D;&#x8B58;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x4E2D;&#x592E;&#x5206;&#x5B50;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x3068;TSG101&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;

&#xAE38; &#xD56D; &#xC81C; &#xC911;&#xC559; supramolecular &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130; (cSMAC)&#xB85C; &#xC218;&#xB834; &#xD558;&#xB294; T &#xC138;&#xD3EC; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (TCR) microclusters (MCs)&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xBA74;&#xC5ED; &#xB0C5; (IS) &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0;&#xC11C; MHC &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; &#xBCF5;&#xD569;&#xBB3C;. &#xACB0;&#xC815; &#xC694;&#xC778; &#xBC0F; &#xD568;&#xC218;&#xB294; Csmac&#xC758; &#xC54C; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4; (Ub)&#xC640; TSG101, &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC99D;&#xBA85; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB35C; &#xADF8;&#xB798;&#xC11C; &#xC2DC;&#xAC04;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0;&#xB294; Csmac&#xC5D0;&#xC11C; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xB97C; &#xCC98;&#xB9AC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Sirna&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xAE30;&#xBCF8; T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; Ub &#xC778;&#xC2DD; &#xD558; &#xC5EC; TSG101 cSMAC &#xD615;&#xC131;, TCR MC &#xC2E0;&#xD638; &#xC885;&#xB8CC;, TCR downregulation &#xBC0F; PKC &#xC138;&#xD0C0; &#xB18D;&#xCD95; &#xC2E0;&#xD638; &#xB2E8;&#xC9C0;&#xC5D0;&#xC11C; TCR MHC &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;&#xC758; &#xBD84;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694;&#xB294; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC57D;&#xD55C; &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C; MHC &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; TSG101 &#xBAA8;&#xC9D1; &#xC5C6;&#xC774; IS&#xC758; &#xC911;&#xC2EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD574;&#xB9AC; CD80 &#xC885;&#xC18D; TCR MCs &#xC720;&#xBC1C;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; TCR downregulation&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xAC80;&#xC0AC;&#xC810;&#xC73C;&#xB85C; CD80 &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; TCR Mcs&#xC758; TSG101 &#xC885;&#xC18D; &#xC778;&#xC2DD;&#xC744; &#xC9C0;&#xC6D0;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4;&#xC758; TSG101 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD615;&#xC131;&#xACFC; &#xC911;&#xC559; supramolecular &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560;.

Agonista de los complejos MHC-p&#xE9;ptido en la sinapsis inmunol&#xF3;gica (IS) de la se&#xF1;al a trav&#xE9;s del receptor de c&#xE9;lulas T (TCR) microclusters (MCS) que convergen en un cl&#xFA;ster de activaci&#xF3;n central supramolecular (cSMAC). Los factores determinantes y la funci&#xF3;n de la cSMAC siguen siendo desconocidos. Demostramos un papel esencial para la ubiquitina (Ub) y TSG101, pero no tanto para HRS, en los eventos de procesamiento de se&#xF1;ales en el cSMAC. Uso de siRNA en las c&#xE9;lulas T primarias, se muestra que el reconocimiento de la UB por TSG101 se requiere para la formaci&#xF3;n de cSMAC, TCR terminaci&#xF3;n de se&#xF1;al MC, regulaci&#xF3;n a la baja del TCR, y la segregaci&#xF3;n de TCR-MHC-p&#xE9;ptido de la PKC-theta enriquecida con complejos de se&#xF1;alizaci&#xF3;n. D&#xE9;biles agonistas MHC-p&#xE9;ptido inducidos CD80 que dependen de TCR MCs que se disocian en el centro de la contrataci&#xF3;n es sin TSG101. Estos resultados apoyan TSG101 dependiente del reconocimiento de CD80 independiente de MCs TCR como un puesto de control molecular de la regulaci&#xF3;n a la baja del TCR.

Article	Year
T cell-dendritic cell immunological synapses contain TCR-dependent CD28-CD80 clusters that recruit protein kinase C theta. Journal of immunology (Baltimore, Md. : 1950)\| PubMed ID: 18802089	2008
The class II phosphatidylinositol 3 kinase C2beta is required for the activation of the K+ channel KCa3.1 and CD4 T-cells. Molecular biology of the cell\| PubMed ID: 19587117	2009
Essential role of ubiquitin and TSG101 protein in formation and function of the central supramolecular activation cluster. Immunity\| PubMed ID: 20399684	2010

Santosha Vardhana

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