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Monitoring of Ubiquitin-proteasome Activity in Living Cells Using a Degron (dgn)-destabilized Green Fluorescent Protein (GFP)-based Reporter Protein

Proteasome is the main intracellular organelle involved in the proteolytic degradation of abnormal, misfolded, damaged or oxidized proteins 1, 2. ...

Institute for Biomedical Aging Research

&#xC778;&#xAC04; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC77C;&#xCC28; &#xB178;&#xD654;&#xB294; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xB178;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB110;&#xB9AC; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xB294; &#xD734;&#xB300; &#xC804;&#xD654; &#xBAA8;&#xB378;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xBD84;&#xBA85; telomere &#xCE68;&#xC2DD; &#xC77C;&#xCC28; &#xB178;&#xD654;&#xC758; &#xBC1C;&#xC804;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC;, &#xCD94;&#xAC00; &#xC694;&#xC18C; &#xB178;&#xD654; &#xD45C;&#xD604; &#xD615;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC;&#xC744; &#xAC00;&#xC815; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB178;&#xD654;&#xC758; &#xC790;&#xC720; &#xB77C; &#xB514; &#xCE7C; &#xC774;&#xB860;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xC0B0;&#xD654; &#xC190;&#xC0C1;; &#xB178;&#xD654;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xC6D0;&#xC778;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB41C; oncogenes &#xAE08;&#xD558;&#xB294; Ras, &#xAC19;&#xC740; &#xC2DD; 1 &#xCC28; &#xC140; &#xC870;&#xAE30; &#xB178;&#xD654;&#xB97C; &#xC77C;&#xC73C;&#xD0AC; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xB178;&#xD654;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; inducers &#xAC04;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xAD00;&#xACC4;&#xB97C; &#xC54C; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD604;&#xC7AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xD45C;&#xC900;&#xC758; &#xC81C;&#xC815; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; unmutated Ras &#xB178;&#xD654; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xB178;&#xD654;&#xB97C; &#xC720;&#xBC1C; &#xC131;&#xC7A5; &#xAC80;&#xAC70; &#xAE30;&#xC5EC;&#xD560; &#xC218; &#xAC00;&#xC124;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xD588;&#xB2E4;. Ras &#xC885;&#xC18D; &#xC2E0;&#xD638;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC9C0;&#xC810; &#xC870;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4; &#xB54C; Ras/&#xC601;&#xAD6D; &#xACF5;&#xAD70;/MEK/ERK &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xC81C;&#xC815; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558;&#xC9C0; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB178;&#xD654; &#xD45C;&#xD604; &#xD615;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0B0;&#xD654; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560; &#xD3C9;&#xAC00;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xAD00;&#xB828; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; kinases &#xC870;&#xC0AC;. P38 &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCC0;&#xACBD;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xB3D9;&#xC548; &#xB178;&#xD654; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC900; &#xD0A4;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC99D;&#xAC00; &#xAC10;&#xC9C0;&#xD560; &#xC218; &#xC6B0;&#xB9AC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xB354; &#xC80A;&#xC740; &#xB300;&#xC870; &#xBB3C;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xB178;&#xD654; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC18;&#xC751;&#xC131; &#xC0B0;&#xC18C; &#xC885; (&#xC120;&#xC0DD;&#xB2D8;)&#xC758; &#xC0C1;&#xBD80;&#xB97C; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xB178;&#xD654; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; ROS&#xC758; &#xCD95;&#xC801; &#xC81C;&#xC815; 6 &#xC6D4; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828;&#xC774; &#xC788;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC77C;&#xCC28; &#xB178;&#xD654;: Ras &#xC885;&#xC18D; &#xC2E0;&#xD638; &#xBC0F; &#xC0B0;&#xD654; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;.

&#x590D;&#x5236;&#x4EBA;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8870;&#x8001;&#x662F;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x4EBA;&#x4F53;&#x8870;&#x8001;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x5F88;&#x660E;&#x663E;&#x7AEF;&#x7C92;&#x4FB5;&#x8680;&#x7E41;&#x6B96;&#x8870;&#x8001;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x505A;&#x51FA;&#x8D21;&#x732E;&#xFF0C;&#x5047;&#x5B9A;&#x5176;&#x4ED6;&#x56E0;&#x7D20;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x8870;&#x8001;&#x7684;&#x8868;&#x578B;&#x3002;&#x8001;&#x5316;&#x7684;&#x81EA;&#x7531;&#x57FA;&#x7406;&#x8BBA;&#x8868;&#x660E;&#x6C27;&#x5316;&#x635F;&#x4F24;&#x662F;&#x8870;&#x8001;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x539F;&#x56E0;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x764C;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x5982;&#x7624; Ras&#xFF0C;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8BF1;&#x4F7F;&#x4E3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC7;&#x65E9;&#x8870;&#x8001;&#x3002;&#x4E0D;&#x77E5;&#x9053;&#x7684;&#x8870;&#x8001;&#x7684;&#x5404;&#x79CD;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5242;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x5173;&#x7CFB;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x62A5;&#x544A;&#x88AB;&#x9075;&#x5FAA;&#x672C;&#x6784;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x6B63;&#x5E38;&#xFF0C;unmutated &#x7684; Ras &#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x5728;&#x8870;&#x8001;&#x4EBA;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x8870;&#x8001;&#x751F;&#x957F;&#x902E;&#x6355;&#x7684;&#x5047;&#x8BF4;&#x3002;&#x5F53; Ras &#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x5404;&#x90E8;&#x95E8;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x8C03;&#x67E5;&#x65F6;&#xFF0C;&#x672A;&#x770B;&#x5230;&#x672C;&#x6784; Ras Raf MEK/ERK &#x901A;&#x8DEF;&#x7684;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x8BC4;&#x4F30;&#x4E3A;&#x8870;&#x8001;&#x7684;&#x8868;&#x578B;&#x7684;&#x6C27;&#x5316;&#x5E94;&#x6FC0;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x8C03;&#x67E5;&#x4E86;&#x5E94;&#x6FC0;&#x76F8;&#x5173;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x6211;&#x4EEC;&#x6CA1;&#x6709;&#x53D1;&#x73B0;&#x8BC1;&#x636E;&#x6539;&#x5EFA; p38 &#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x80FD;&#x5728;&#x8870;&#x8001;&#x7684;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x68C0;&#x6D4B;&#x541B;&#x6FC0;&#x9176;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x53D1;&#x73B0;&#x8870;&#x8001;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E;&#x5E74;&#x8F7B;&#x540C;&#x4E8B;&#x76F8;&#x6BD4;&#x66F4;&#x9AD8;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#x6C27; (ROS)&#x3002;&#x8870;&#x8001;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#x6C27;&#x7684;&#x79EF;&#x7D2F;&#x53EF;&#x80FD;&#x4E0E;&#x672C;&#x6784;&#x7684;&#x541B;&#x6FC0;&#x9176;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x6709;&#x5173;&#x3002;

&#x4EBA;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7E41;&#x6B96;&#x8870;&#x8001;&#xFF1A; Ras &#x4F9D;&#x8D56;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4E0E;&#x6C27;&#x5316;&#x5E94;&#x6FC0;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Replicative senescence of human fibroblasts is a widely used cellular model for human aging. While it is clear that telomere erosion contributes to the development of replicative senescence, it is assumed that additional factors contribute to the senescent phenotype. The free radical theory of aging suggests that oxidative damage is a major cause of aging; furthermore, the expression of activated oncogenes, such as oncogenic Ras, can induce premature senescence in primary cells. The functional relation between the various inducers of senescence is not known. The present study was guided by the hypothesis that constitutive activation of normal, unmutated Ras may contribute to senescence-induced growth arrest in senescent human fibroblasts. When various branches of Ras-dependent signaling were investigated, constitutive activation of the Ras/Raf/MEK/ERK pathway was not observed. To evaluate the role of oxidative stress for the senescent phenotype, we also investigated stress-related protein kinases. While we found no evidence for alterations in the activity of p38, we could detect an increased activity of Jun kinase in senescent fibroblasts. We also found higher levels of reactive oxygen species (ROS) in senescent fibroblasts compared to their younger counterparts. The accumulation of ROS in senescent cells may be related to the constitutive activation of Jun kinase.

Replicative senescence of human fibroblasts: the role of Ras-dependent signaling and oxidative stress.

La s&eacute;nescence r&eacute;plicative de fibroblastes humains est un mod&egrave;le cellulaire couramment utilis&eacute; pour le vieillissement humain. Bien qu&#39;il soit clair que l&#39;&eacute;rosion des t&eacute;lom&egrave;res contribue au d&eacute;veloppement de la s&eacute;nescence r&eacute;plicative, on pr&eacute;sume que les facteurs additionnels contribuent au ph&eacute;notype s&eacute;nescent. La th&eacute;orie de radical libre de vieillissement sugg&egrave;re que les dommages oxydatifs sont des principales causes du vieillissement ; en outre, l&#39;expression des oncog&egrave;nes activ&eacute;s, comme oncog&egrave;ne Ras, peut induire une s&eacute;nescence pr&eacute;matur&eacute;e dans les cellules primaires. On ne conna&icirc;t pas la relation fonctionnelle entre les diff&eacute;rents inducteurs de la s&eacute;nescence. La pr&eacute;sente &eacute;tude a &eacute;t&eacute; guid&eacute;e par l&#39;hypoth&egrave;se que l&#39;activation constitutive de la normale, Ras unmutated peut contribuer &agrave; l&#39;arr&ecirc;t de la croissance induite par la s&eacute;nescence dans les fibroblastes humains s&eacute;nescents. Lorsque nous avons &eacute;tudi&eacute;s les diff&eacute;rentes branches de la signalisation Ras-d&eacute;pendante, l&#39;activation constitutive de la voie Ras/Raf/MEK/ERK n&#39;a pas &eacute;t&eacute; observ&eacute;e. Pour &eacute;valuer le r&ocirc;le du stress oxydatif du ph&eacute;notype s&eacute;nescent, nous avons aussi &eacute;tudi&eacute; des kinases de prot&eacute;ines li&eacute;es au stress. Alors que nous avons ne trouv&eacute; aucune preuve d&#39;alt&eacute;rations de l&#39;activit&eacute; de p38, nous pouvons d&eacute;tecter une augmentation de l&#39;activit&eacute; de la kinase de Jun dans les fibroblastes s&eacute;nescents. Nous avons &eacute;galement constat&eacute; des niveaux plus &eacute;lev&eacute;s d&#39;esp&egrave;ces r&eacute;actives de l&#39;oxyg&egrave;ne (ROS) dans les fibroblastes s&eacute;nescents par rapport &agrave; leurs homologues plus jeunes. L&#39;accumulation de ROS dans les cellules s&eacute;nescentes peut &ecirc;tre li&eacute;e &agrave; l&#39;activation constitutive de la kinase de Jun.

La s&eacute;nescence r&eacute;plicative de fibroblastes humains : le r&ocirc;le du stress oxydatif et signalisation de Ras-d&eacute;pendante.

Zellalterung der menschlichen Fibroblasten ist ein weit verbreitetes zellul&auml;re Modell f&uuml;r menschliche Altern. W&auml;hrend es frei ist, dass Telomere Erosion zur Entwicklung der Zellalterung beitr&auml;gt, ist davon auszugehen, dass zus&auml;tzliche Faktoren der alternde Ph&auml;notyp beitragen. Die freie Radikale-Theorie des Alterns empfiehlt den oxidativen Sch&auml;den ist eine Hauptursache der Alterung; Dar&uuml;ber hinaus kann der Ausdruck aktivierte Onkogene, z. B. Onkogene Ras, vorzeitiges Altern in Prim&auml;rzellen veranlassen. Die funktionale Beziehung zwischen den verschiedenen Induktoren der Seneszenz ist nicht bekannt. Die vorliegende Studie st&uuml;tzte sich auf die Hypothese, dass konstitutive Aktivierung des normalen unmutated Ras zur Seneszenz induziert Wachstumanhalten in menschlichen Fibroblasten alternde beitragen kann. Als verschiedene Zweige der Ras-abh&auml;ngige Signalisierung untersucht wurden, wurde die konstitutive Aktivierung des Ras/Raf/MEK/ERK Signalweges nicht beobachtet. Um die Rolle des oxidativen Stress f&uuml;r die alternde Ph&auml;notyp zu bewerten, untersuchten wir auch stressbedingten Proteinkinasen. Solange wir keine Hinweise auf Ver&auml;nderungen in der T&auml;tigkeit des p38 gefunden, konnten wir eine erh&ouml;hte Aktivit&auml;t von Jun-Kinase in alternde Fibroblasten erkennen. Wir fanden auch die h&ouml;here Ebenen der reaktive Sauerstoffspezies (ROS) in alternde Fibroblasten im Vergleich zu ihren j&uuml;ngeren Kollegen. Die Anh&auml;ufung von ROS in alternde Zellen kann an die konstitutiven Aktivierung der Jun-Kinase zusammenh&auml;ngen.

Zellalterung der menschlichen Fibroblasten: die Rolle der Ras-abh&auml;ngige Signalisierung und oxidativen Stress.

Senescenza replicativa di fibroblasti umani &egrave; un modello di cellulare ampiamente usato per l&#39;invecchiamento umano. Mentre &egrave; chiaro che l&#39;erosione telomeri contribuisce allo sviluppo della senescenza replicativa, si presume che altri fattori contribuiscono per il fenotipo senescente. La teoria del radicale libero di invecchiamento suggerisce che il danno ossidativo &egrave; delle principali cause di invecchiamento; Inoltre, l&#39;espressione degli oncogeni attivati, ad esempio oncogeni Ras, pu&ograve; indurre precoce senescenza nelle cellule primarie. Non &egrave; noto il rapporto funzionale tra i vari induttori della senescenza. Il presente studio &egrave; stato guidato dall&#39;ipotesi che attivazione costitutiva del normale, Ras unmutated pu&ograve; contribuire all&#39;arresto di crescita indotta senescenza in fibroblasti umani senescenti. Quando sono stati studiati vari rami di segnalazione Ras-dipendente, attivazione costitutiva della via Ras/Raf/MEK/ERK non &egrave; stata osservata. Per valutare il ruolo dello stress ossidativo per il fenotipo senescente, abbiamo studiato anche le chinasi di proteina sollecit-relativi. Mentre abbiamo non trovato alcuna prova di alterazioni nell&#39;attivit&agrave; della p38, noi potremmo rilevare un aumento dell&#39;attivit&agrave; della chinasi Jun in fibroblasti senescenti. Abbiamo anche trovato i pi&ugrave; alti livelli di specie reattive dell&#39;ossigeno (ROS) in fibroblasti senescenti rispetto alle loro controparti pi&ugrave; giovani. L&#39;accumulo di ROS in cellule senescenti possa essere correlato all&#39;attivazione costitutiva della chinasi Jun.

Senescenza replicativa di fibroblasti umani: il ruolo dello stress ossidativo e segnalazione Ras-dipendente.

&#x8907;&#x88FD;&#x8001;&#x5316; &#xFF08;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x8001;&#x5316;&#x306F;&#x5E83;&#x304F;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x4FB5;&#x98DF;&#x8907;&#x88FD;&#x8001;&#x5316;&#x306E;&#x767A;&#x5C55;&#x306B;&#x5BC4;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x78BA;&#x3067;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x4ED8;&#x52A0;&#x7684;&#x306A;&#x8981;&#x56E0;&#x8001;&#x5316;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x60F3;&#x5B9A;&#x3057;&#x3066;&#x304F;&#x3060;&#x3055;&#x3044;&#x3002;&#x8001;&#x5316;&#x306E;&#x30D5;&#x30EA;&#x30FC;&#x30E9;&#x30B8;&#x30AB;&#x30EB;&#x7406;&#x8AD6;&#x9178;&#x5316;&#x640D;&#x50B7;&#x306F;&#x8001;&#x5316;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x539F;&#x56E0;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x767A;&#x764C; Ras &#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x6642;&#x671F;&#x5C1A;&#x65E9;&#x306E;&#x8001;&#x5316;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x521D;&#x4EE3;&#x57F9;&#x990A;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8001;&#x5316;&#x306E;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x8A98;&#x5C0E;&#x7269;&#x8CEA;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x9023;&#x95A2;&#x306F;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;&#x69CB;&#x6210;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;&#x7E04;&#x5F35;&#x308A; Ras &#x8001;&#x9F62;&#x3072;&#x3068;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8001;&#x5316;&#x8A98;&#x8D77;&#x6210;&#x9577;&#x902E;&#x6355;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5C0E;&#x304B;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Ras &#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x306E;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x679D;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x306B;&#x3001;Ras&#x3001;Raf&#x3001;MEK&#x3001;ERK &#x306E;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x69CB;&#x6210;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#x306F;&#x8A8D;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x8001;&#x9F62;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x9178;&#x5316;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x95A2;&#x9023;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005; p38 &#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x306F;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x304C;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x8001;&#x9F62;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE; Jun &#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D3;&#x30C6;&#x30A3;&#x3092;&#x691C;&#x51FA;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x3082;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x3088;&#x308A;&#x82E5;&#x3044;&#x540C;&#x7B49;&#x306B;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x8001;&#x5316;&#x7E4A;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x6D3B;&#x6027;&#x9178;&#x7D20;&#x7A2E; (ROS) &#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x898B;&#x3064;&#x3051;&#x305F;&#x3002;&#x8001;&#x5316;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185; ROS &#x306E;&#x84C4;&#x7A4D; Jun &#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x69CB;&#x6210;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8907;&#x88FD;&#x8001;&#x5316;: Ras &#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x3068;&#x9178;&#x5316;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3002;

Senescencia replicativa de fibroblastos humanos es un modelo celular ampliamente utilizado para el envejecimiento humano. Si bien resulta claro que la erosi&oacute;n de los tel&oacute;meros contribuye al desarrollo de la senescencia replicativa, se supone que otros factores contribuyen al fenotipo senescente. La teor&iacute;a de los radicales libres del envejecimiento sugiere que el da&ntilde;o oxidativo es una de las principales causas del envejecimiento; Adem&aacute;s, la expresi&oacute;n de oncogenes activados, como Ras oncog&eacute;nica, puede inducir la senescencia prematura en c&eacute;lulas primarias. No se conoce la relaci&oacute;n funcional entre las diferentes inductores de la senescencia. El presente estudio fue guiado por la hip&oacute;tesis de que la activaci&oacute;n constitutiva de lo normal, unmutated Ras puede contribuir a la detenci&oacute;n de crecimiento inducido por senescencia en fibroblastos humanos senescentes. Cuando investigaron a distintas ramas de se&ntilde;alizaci&oacute;n Ras-dependientes, no se observ&oacute; la activaci&oacute;n constitutiva de la v&iacute;a Ras/Raf/MEK/ERK. Para evaluar el papel del estr&eacute;s oxidativo para el fenotipo senescente, tambi&eacute;n investigamos kinases de prote&iacute;na relacionada con el estr&eacute;s. Mientras que no encontramos evidencia de alteraciones en la actividad de p38, pudimos detectar un aumento de la actividad de la quinasa de Jun en fibroblastos senescentes. Tambi&eacute;n encontramos altos niveles de especies reactivas del ox&iacute;geno (ROS) en los fibroblastos senescentes en comparaci&oacute;n con sus contrapartes m&aacute;s j&oacute;venes. La acumulaci&oacute;n de ROS en las c&eacute;lulas senescentes puede deberse a la activaci&oacute;n constitutiva de Jun quinasa.

Senescencia replicativa de fibroblastos humanos: el papel del estr&eacute;s oxidativo y se&ntilde;alizaci&oacute;n Ras-dependiente.

&#x5206;&#x6790;&#x4E86;&#x7684;&#x4EBA;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7E41;&#x6B96;&#x8870;&#x8001;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E3B;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECE;&#x4EBA;&#x8110;&#x9759;&#x8109;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE; (&#x8110;) &#x4F5C;&#x4E3A;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x6A21;&#x578B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x663E;&#x793A;&#x4E4B;&#x524D;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x7684; G1 &#x671F;&#x7684;&#x8870;&#x8001;&#x8110;&#x902E;&#x6355;&#x548C;&#x8870;&#x8001;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E9A;&#x7FA4;&#x7ECF;&#x5386;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x73B0;&#x5728;&#x6F14;&#x793A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x53D1;&#x751F;&#x7684;&#x51CB;&#x4EA1;&#xFF0C;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x534A;&#x80F1;&#x6C28;&#x9178;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; 3 &#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x6C27;&#x5316;&#x8FD8;&#x539F;&#x654F;&#x611F;&#x67D3;&#x6599; dihydrorhodamine 123&#xFF0C;&#x6D3B;&#x6027;&#x6C27;&#x7269;&#x79CD;&#x5927;&#x91CF;&#x79EF;&#x7D2F;&#x662F;&#x5728;&#x8870;&#x8001;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x5E74;&#x8F7B;&#x7684;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x786E;&#x5B9A;&#x662F;&#x5426;&#x589E;&#x52A0;&#x6C27;&#x5316;&#x5E94;&#x6FC0;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x8870;&#x8001;&#x7684;&#x8868;&#x578B;&#xFF0C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6CBB;&#x7597;&#x4F17;&#x6240;&#x5468;&#x77E5;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x51CF;&#x5C11;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x8C37;&#x80F1;&#x7518;&#x80BD;&#x6C34;&#x5E73;&#x589E;&#x52A0;&#x6C27;&#x5316;&#x5E94;&#x6FC0;&#x7684;&#x53D4;&#x4E01;&#x57FA;&#x8FC7;&#x6C27;&#x5316;&#x6C22; (tBHP)&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x5C55;&#x793A;&#x8F7B;&#x5EA6; tBHP &#x5E94;&#x529B;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x8FC7;&#x65E9;&#x8870;&#x8001;&#x7684;&#x4E9A;&#x7FA4;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x800C;&#x76F8;&#x4F3C;&#x7684;&#x81EA;&#x7136;&#x8870;&#x8001;&#x8110;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x589E;&#x957F;&#x902E;&#x6355;&#x3001; &#x8870;&#x8001;&#x76F8;&#x5173;&#x7684; &beta;-gal &#x6D3B;&#x6027;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x51CB;&#x4EA1;&#x8868;&#x578B;&#x7684;&#x8868;&#x578B;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x8FC7;&#x65E9;&#x8870;&#x8001;&#xFF0C;&#x4EBA;&#x4F53;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4E5F;&#x8BB8;&#x9002;&#x5408;&#x4E8E;&#x5206;&#x6790;&#x4E0E;&#x5E74;&#x9F84;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8870;&#x8001;&#x76F8;&#x5173;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#xFF1A; &#x6C27;&#x5316;&#x5E94;&#x6FC0;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Replicative senescence of human endothelial cells was analyzed, using primary endothelial cells from the human umbilical vein endothelial cells (HUVEC) as an experimental model system. We had shown before that senescent HUVEC arrest in the G1 phase of the cell cycle and that a subpopulation of the senescent cells undergoes cell death. We now demonstrate that cell death occurs by apoptosis, characterized by activation of caspase 3. Using the redox-sensitive dye dihydrorhodamine 123, a significant accumulation of reactive oxygen species is detected in senescent but not young endothelial cells. To determine if increased oxidative stress may contribute to the senescent phenotype, cells were treated with tert-butyl hydroperoxide (tBHP), which is known to increase oxidative stress by decreasing the intracellular glutathione levels. We show here that mild tBHP stress induces a phenotype of premature senescence in a subpopulation of the treated cells, which closely resembles the phenotype of naturally senescent HUVEC, including growth arrest, senescence-associated beta-gal activity, and apoptotic cell death. These results establish a model of premature senescence for human endothelial cells, which will be suitable to analyze mechanisms of age-associated cell death.

Senescence-associated cell death of human endothelial cells: the role of oxidative stress.

La s&eacute;nescence r&eacute;plicative de cellules endoth&eacute;liales humaines a &eacute;t&eacute; analys&eacute;e, en utilisant des cellules endoth&eacute;liales primaires des cellules endoth&eacute;liales des veines ombilicales humaines (HUVEC) comme un syst&egrave;me mod&egrave;le exp&eacute;rimental. Nous avions montr&eacute; avant que la mort des cellules s&eacute;nescente arrestation HUVEC en phase G1 du cycle cellulaire et qu&#39;il subit une sous-population des cellules s&eacute;nescentes. Nous d&eacute;montrons maintenant que cellules meurent par apoptose, caract&eacute;ris&eacute;e par l&#39;activation de la caspase 3. En utilisant le colorant redox-sensible dihydrorhodamine 123, une accumulation importante d&#39;esp&egrave;ces r&eacute;actives de l&#39;oxyg&egrave;ne est d&eacute;tect&eacute;e dans les cellules endoth&eacute;liales s&eacute;nescentes mais pas jeunes. Pour d&eacute;terminer si une augmentation du stress oxydatif peut contribuer au ph&eacute;notype de la s&eacute;nescent, les cellules ont &eacute;t&eacute; trait&eacute;es avec l&#39;hydroperoxyde de tert-butyle (tBHP), qui est connue pour augmenter le stress oxydatif en diminuant les niveaux de glutathion intracellulaire. Nous montrons ici que doux tBHP stress induit un ph&eacute;notype de la s&eacute;nescence pr&eacute;matur&eacute;e dans une sous-population de cellules trait&eacute;es, qui ressemble beaucoup &agrave; du ph&eacute;notype de HUVEC naturellement s&eacute;nescente, y compris l&#39;arr&ecirc;t de croissance, l&#39;activit&eacute; de b&ecirc;ta-gallon associ&eacute;s &agrave; la s&eacute;nescence et la mort cellulaire apoptotique. Ces r&eacute;sultats &eacute;tablissent un mod&egrave;le de la s&eacute;nescence pr&eacute;matur&eacute;e des cellules endoth&eacute;liales humaines, qui sera adapt&eacute; pour analyser les m&eacute;canismes d&#39;apoptose li&eacute;e &agrave; l&#39;&acirc;ge.

D&eacute;c&egrave;s associ&eacute;s &agrave; la s&eacute;nescence cellulaire des cellules endoth&eacute;liales humaines : le r&ocirc;le du stress oxydatif.

Zellalterung der menschliche Endothelzellen wurde analysiert, mit prim&auml;re Endothelzellen aus menschlichen Nabel-Vene Endothelzellen (HUVEC) als experimentelles Modellsystem. Wir hatten vor gezeigt, dass alternde HUVEC Verhaftung in der G1-Phase des Zellzyklus und, dass eine Subpopulation der alternde Zellen durchl&auml;uft Tod Zelle. Wir zeigen nun, dass Zelltod durch Apoptose, charakterisiert durch Aktivierung von Caspase 3 auftritt. Verwenden die Redox-Sensitive Farbstoff Dihydrorhodamine 123, ist eine bedeutende Ansammlung von reaktive Sauerstoffspezies in alternde aber nicht jung Endothelzellen erkannt. Um festzustellen, ob die erh&ouml;hter oxidativer Stress der alternde Ph&auml;notyp bedingen kann, wurden Zellen mit Tert-Butyl Cumolhydroperoxid (tBHP), behandelt, die bekannt ist, dass oxidativen Stress zu erh&ouml;hen, durch eine Verringerung der intrazellul&auml;ren Glutathion-Ebenen. Hier zeigen wir, dass milde tBHP Spannung einen Ph&auml;notyp der vorzeitigen Altern in einer Teilgesamtheit der behandelten Zellen, die &auml;hnelt sehr der Ph&auml;notyp der nat&uuml;rlich alternde HUVEC induziert, einschlie&szlig;lich Wachstumanhalten, Altern-verbundene Beta-Gallone-Aktivit&auml;t und Apoptotic Zellentod. Diese Ergebnisse stellen ein Modell der vorzeitigen Altern f&uuml;r menschliche Endothelzellen, die geeignet sind, die Mechanismen der Alters-assoziierten Zelltod analysieren werden.

Altern-verbundene Zellentod menschliche Endothelzellen: die Rolle des oxidativen Stress.

Senescenza replicativa delle cellule endoteliali umane &egrave; stata analizzata, utilizzando le cellule endoteliali primarie da cellule endoteliali di vena ombelicale umano (HUVEC) come sistema di modello sperimentale. Vi avevamo mostrato prima che senescente HUVEC arresto nella fase G1 del ciclo cellulare e che una sottopopolazione di cellule senescenti subisce la morte delle cellule. Abbiamo ora dimostrare che delle cellule morte avviene per apoptosi, caratterizzata dall&#39;attivazione di caspase 3. Usando la tintura di redox-sensibili dihydrorhodamine 123, un significativo accumulo di specie reattive dell&#39;ossigeno &egrave; rilevato in cellule endoteliali senescenti, ma non giovane. Per determinare se aumento dello stress ossidativo possa contribuire al fenotipo senescente, le cellule sono state trattate con terz-butil idroperossido (tBHP), che &egrave; noto per aumentare lo stress ossidativo diminuendo i livelli di glutatione intracellulare. Mostriamo qui che tBHP lieve sollecitazione induce un fenotipo di senescenza precoce in una sottopopolazione di cellule trattate, che ricorda da vicino il fenotipo delle HUVEC naturalmente senescenti, compreso l&#39;arresto di sviluppo, attivit&agrave; beta-gallone associato senescenza e morte cellulare apoptotica. Questi risultati stabiliscono un modello di senescenza precoce per le cellule endoteliali umane, che sar&agrave; adatto per analizzare i meccanismi di morte cellulare associate all&#39;et&agrave;.

Morte delle cellule senescenza-associati delle cellule endoteliali umane: il ruolo dello stress ossidativo.

&#x8907;&#x88FD;&#x8001;&#x5316; &#xFF08;&#x3072;&#x3068;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x5B9F;&#x9A13;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB; &#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3072;&#x3068;&#x81CD;&#x5E2F;&#x9759;&#x8108;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE; (&#x682A;) &#x304B;&#x3089;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x5206;&#x6790;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x524D;&#x306B;&#x8001;&#x5316;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x6D3B;&#x902E;&#x6355; G1 &#x671F;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x3067;&#x3001;&#x8001;&#x5316;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4E9C;&#x96C6;&#x56E3;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x4ECA;&#x3001;&#x30AB;&#x30B9;&#x30D1;&#x30FC;&#x30BC; 3 &#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x304C;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30EC;&#x30C9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x8272;&#x7D20;&#x30B8;&#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C0;&#x30DF;&#x30F3; 123 &#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x7A4D;&#x307F;&#x6D3B;&#x6027;&#x9178;&#x7D20;&#x7A2E;&#x306E;&#x8001;&#x5316;&#x304C;&#x3001;&#x82E5;&#x304F;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x306E;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9178;&#x5316;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3001;&#x8001;&#x9F62;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3092;&#x5224;&#x65AD;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30C1;&#x30AA;&#x30F3;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x9178;&#x5316;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x308B;&#x306B;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B; t-&#x30D6;&#x30C1;&#x30EB; &#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x30DA;&#x30EB;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C9; (tBHP) &#x3068;&#x6271;&#x308F;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x8EFD;&#x5EA6; tBHP &#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x304C;&#x6642;&#x671F;&#x5C1A;&#x65E9;&#x306E;&#x8001;&#x5316;&#x306B;&#x5BC6;&#x63A5;&#x306B;&#x81EA;&#x7136;&#x8001;&#x5316;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x6D3B;&#x3001;&#x5897;&#x6B96;&#x505C;&#x6B62;&#x3001;&#x8001;&#x5316;&#x95A2;&#x9023;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF; gal &#x6D3B;&#x52D5;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306B;&#x4F3C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x6271;&#x308F;&#x308C;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4E9C;&#x96C6;&#x56E3;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x6642;&#x671F;&#x5C1A;&#x65E9;&#x306E;&#x8001;&#x5316;&#x306E;&#x52A0;&#x9F62;&#x306B;&#x4F34;&#x3046;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x306E;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3092;&#x89E3;&#x6790;&#x3059;&#x308B;&#x5834;&#x5408;&#x306B;&#x9069;&#x3057;&#x3066;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30D2;&#x30C8;&#x306E;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x3072;&#x3068;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8001;&#x5316;&#x95A2;&#x9023;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;: &#x9178;&#x5316;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3002;

&#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC77C;&#xCC28; &#xB178;&#xD654; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xBAA8;&#xB378; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xD0EF; &#xC904; &#xC815; &#xB9E5; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; (HUVEC)&#xC5D0;&#xC11C; &#xC8FC; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBD84;&#xC11D; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30;&#xC758; g 1 &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB178;&#xD654; HUVEC &#xCCB4;&#xD3EC;&#xC640; &#xB178;&#xD654; &#xC138;&#xD3EC; subpopulation &#xACAA; &#xC2B5; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C; &#xC804;&#xC5D0; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC9C0;&#xAE08; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C; apoptosis, caspase 3&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC0B0;&#xD654;&#xC5D0; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; &#xC5FC;&#xB8CC; dihydrorhodamine 123&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xCD95;&#xC801; &#xBC18;&#xC751; &#xC0B0;&#xC18C; &#xC885;&#xC758; &#xB178;&#xD654; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0; &#xC80A;&#xC740; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC778;&#xC2DD; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC0B0;&#xD654; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC99D;&#xAC00; &#xB178;&#xD654; &#xD45C;&#xD604; &#xD615;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC;&#xD560; &#xC218;&#xB97C; &#xD655;&#xC778; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xC140; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; glutathione &#xC218;&#xC900; &#xAC10;&#xC18C; &#xD558; &#xC5EC; &#xC0B0;&#xD654; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; tert-&#xBD80; &#xD2F8; hydroperoxide (tBHP)&#xB85C; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0; &#xAC00;&#xBCBC;&#xC6B4; tBHP &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xB294; &#xBC00;&#xC811; &#xD558; &#xAC8C; &#xC720;&#xC0AC;&#xD55C; &#xC131;&#xC7A5; &#xAC80;&#xAC70;, &#xB178;&#xD654; &#xAD00;&#xB828; &#xBCA0;&#xD0C0; gal &#xD65C;&#xB3D9;&#xACFC; apoptotic &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xC790;&#xC5F0;&#xC2A4;&#xB7FD; &#xAC8C; &#xB178;&#xD654; HUVEC &#xD615; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC140; subpopulation &#xC870;&#xAE30; &#xB178;&#xD654;&#xC758; phenotype &#xC720;&#xB3C4; &#xD45C;&#xC2DC;. &#xC774; &#xACB0;&#xACFC; &#xC138;&#xD3EC; &#xB098;&#xC774; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC758; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xBD84;&#xC11D; &#xD558;&#xB294; &#xC801;&#xB2F9; &#xD55C; &#xAC83;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC870;&#xAE30; &#xB178;&#xD654;&#xC758; &#xBAA8;&#xB378; &#xC124;&#xC815;.

&#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xB178;&#xD654;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC8FD;&#xC74C;: &#xC0B0;&#xD654; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;.

Se analiz&oacute; la senescencia replicativa de las c&eacute;lulas endoteliales humanas, utilizando las c&eacute;lulas endoteliales primarias de las c&eacute;lulas endoteliales de la vena umbilical humano (HUVEC) como un sistema modelo experimental. Antes hab&iacute;amos demostrado que detenci&oacute;n HUVEC senescente en la fase G1 del ciclo celular y que se somete a una subpoblaci&oacute;n de las c&eacute;lulas senescentes muerte celular. Ahora demostramos que se produce la muerte celular por apoptosis, caracterizado por la activaci&oacute;n de la caspasa 3. Utilizando el tinte de redox sensible dihydrorhodamine 123, una acumulaci&oacute;n significativa de especies reactivas del ox&iacute;geno se detecta en las c&eacute;lulas endoteliales senescentes pero no j&oacute;venes. Para determinar si el aumento del estr&eacute;s oxidativo puede contribuir al fenotipo senescente, las c&eacute;lulas fueron tratadas con hidroper&oacute;xido de terc-butilo (tBHP), que es conocido por aumentar el estr&eacute;s oxidativo al disminuir los niveles de glutati&oacute;n intracelular. Aqu&iacute; mostramos que el estr&eacute;s leve tBHP induce un fenotipo de senescencia prematura en una subpoblaci&oacute;n de las c&eacute;lulas tratadas, que asemeja el fenotipo de HUVEC naturalmente senescente, incluyendo la detenci&oacute;n del crecimiento, la actividad beta-gal senescencia asociada y muerte celular apopt&oacute;tica. Estos resultados establecen un modelo de senescencia prematura de las c&eacute;lulas endoteliales humanas, que ser&aacute; conveniente analizar mecanismos de muerte celular relacionado con la edad.

Muerte de asociado de senescencia celular de c&eacute;lulas endoteliales humanas: el papel del estr&eacute;s oxidativo.

&#x4EBA;&#x4F53;&#x8870;&#x8001;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x7531;&#x8BB8;&#x591A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x9014;&#x5F84;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5728;&#x8BB8;&#x591A;&#x5C42;&#x9762;&#x4E0A;&#x4F5C;&#x51FA;&#x4E86;&#x89C4;&#x5B9A;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x8981;&#x7406;&#x89E3;&#x8FD9;&#x79CD;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x5E76;&#x5B9A;&#x4E49;&#x5B88;&#x6052;&#x7684;&#x8870;&#x8001;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x6587;&#x5316;&#x57FA;&#x4E8E;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x4F7F;&#x7528;&#x662F;&#x5F88;&#x666E;&#x904D;&#x7684;&#x505A;&#x6CD5;&#x3002;&#x4F53;&#x5916;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8870;&#x8001;&#x7684;&#x5C0F;&#x5B66;&#x7ECF;&#x5E38;&#x8BF4;&#x7684;&#x4F18;&#x70B9;&#x662F;&#x9AD8;&#x91CD;&#x590D;&#x6027;&#x76F8;&#x6BD4;&#x66F4;&#x52A0;&#x590D;&#x6742;&#x8001;&#x5316;&#x7684;&#x6709;&#x673A;&#x4F53;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x57F9;&#x517B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8001;&#x5316;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x662F;&#xFF0C;&#x50CF;&#x8001;&#x5316;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x53EA;&#x5B9A;&#x4E49;&#x7531;&#x9057;&#x4F20;&#x4F46;&#x4E5F;&#x7531;&#x73AF;&#x5883;&#x56E0;&#x7D20;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x5F88;&#x96BE;&#x533A;&#x5206;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B;&#x6761;&#x4EF6;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x6587;&#x7269;&#x548C;&#x8001;&#x5316;&#x7684;&#x771F;&#x6B63;&#x95EE;&#x9898;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#x6211;&#x4EEC;&#x8C03;&#x67E5;&#x8110; (&#x8110;&#x5E26;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF09;&#xFF0C;&#x8457;&#x540D;&#x7684;&#x8001;&#x5316;&#x548C;&#x6A21;&#x578B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7528;&#x4E8E;&#x4F53;&#x5916;&#x8001;&#x5316;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x4E0D;&#x540C;&#xFF0C;&#x65E9;&#x5DF2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B;&#x534F;&#x8BAE;&#x3002;&#x57F9;&#x517B;&#x6761;&#x4EF6;&#x786E;&#x5B9E;&#x6709;&#x5F88;&#x5927;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x3001; &#x590D;&#x5236;&#x4F7F;&#x7528;&#x5BFF;&#x547D;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x7387;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x91CD;&#x5927;&#x7684;&#x5DEE;&#x5F02;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x8FD8;&#x5404;&#x79CD;&#x5F3A;&#x5927;&#x6807;&#x8BB0;&#x5B9A;&#x4E49;&#x8870;&#x8001;&#x8110;&#xFF1A; &#x5F62;&#x6001;&#x5B66;&#x53D8;&#x5316;&#xFF0C;&#x589E;&#x52A0;&#x8870;&#x8001;&#x76F8;&#x5173; beta-&#x4E73;&#x7CD6;&#x67D3;&#x8272;&#xFF0C;G1 &#x671F;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x963B;&#x6EDE;&#xFF0C;&#x964D;&#x4F4E;&#x4E86;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x819C;&#x6F5C;&#x5728;&#x548C;&#x589E;&#x52A0;&#x4FEE;&#x9970;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x663E;&#x793A;&#x7684;&#x72EC;&#x7ACB;&#x4E8E;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x6587;&#x5316;&#x534F;&#x8BAE;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x6807;&#x8BB0;&#x4F53;&#x5185;&#x8001;&#x5316;&#x8FD8;&#x8003;&#x8651;&#x3002;

&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8870;&#x8001;&#x4F53;&#x5916;&#x57F9;&#x517B;&#x72EC;&#x7ACB;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x6807;&#x8BC6;&#x3002;

Human aging processes are regulated by many divergent pathways and on many levels. Thus, to understand such a complex system and define conserved mechanisms of aging, the use of cell culture-based models is a widespread practice. An often stated advantage of in vitro aging of primary cells is the high reproducibility compared to the much more intricate aging of organisms. However, the aging process of cultured cells is, like aging of organisms, not only defined by genetic but also by environmental factors, making it difficult to distinguish between cell culture condition-induced artefacts and true aspects of aging. Therefore we investigated aging of HUVEC (human umbilical vascular endothelial cells), a well-known and widely used model system for in vitro aging, with different, already well-established cell culture protocols. Culturing conditions had indeed a strong impact on cell proliferation, the replicative lifespan and apoptosis rates. However, despite these significant differences, we found also various robust markers that define senescent HUVEC: morphological changes, increased senescence-associated beta-galactosidase staining, cell cycle arrest in the G1 phase, lowered mitochondrial membrane potential and increased oxidatively modified proteins were displayed independent of cell culture protocols and could therefore be considered also as markers for in vivo aging.

Identification of cultivation-independent markers of human endothelial cell senescence in vitro.

Les processus de vieillissement humain sont r&eacute;gis par nombreuses voies divergentes et &agrave; plusieurs niveaux. Ainsi, pour comprendre un tel syst&egrave;me complex et d&eacute;finir des m&eacute;canismes conserv&eacute;s du vieillissement, l&#39;utilisation de mod&egrave;les fond&eacute;s sur la culture de cellules est une pratique tr&egrave;s r&eacute;pandue. Un avantage souvent d&eacute;clar&eacute; du vieillissement in vitro des cellules primaires est la reproductibilit&eacute; &eacute;lev&eacute;e par rapport au vieillissement des organismes beaucoup plus complexe. Toutefois, le processus de vieillissement des cellules cultiv&eacute;es est, comme le vieillissement des organismes, d&eacute;fini non seulement par la g&eacute;n&eacute;tique, mais aussi par des facteurs environnementaux, rendant difficile de distinguer des objets d&#39;induite par l&#39;&eacute;tat de la culture cellulaire et vrai aspects du vieillissement. Donc nous avons enqu&ecirc;t&eacute; sur le vieillissement des HUVEC (humains ombilicales cellules endoth&eacute;liales vasculaires), bien connu et syst&egrave;me mod&egrave;le employ&eacute; couramment pour le vieillissement in vitro, avec des protocoles de culture de cellules diff&eacute;rentes, d&eacute;j&agrave; bien &eacute;tablie. Conditions de culture avait en effet un fort impact sur la prolif&eacute;ration cellulaire, la dur&eacute;e de vie r&eacute;plicative et taux d&#39;apoptose. Cependant, malgr&eacute; ces diff&eacute;rences importantes, nous avons trouv&eacute; &eacute;galement divers marqueurs robustes qui d&eacute;finissent des HUVEC s&eacute;nescente : changements morphologiques, accrue associ&eacute;e &agrave; la s&eacute;nescence b&ecirc;ta-galactosidase coloration, arr&ecirc;t du cycle cellulaire en phase G1, membrane mitochondriale abaiss&eacute;e potentiels et une augmentation des prot&eacute;ines modifi&eacute;s par oxydation ont &eacute;t&eacute; affich&eacute; ind&eacute;pendamment de la cellule de protocoles de culture et ne pouvaient donc &ecirc;tre consid&eacute;r&eacute;es aussi comme marqueurs pour le vieillissement in vivo.

Identification de marqueurs ind&eacute;pendante de la culture de la s&eacute;nescence des cellules endoth&eacute;liales humaines in vitro.

Menschliche Alterungsprozesse werden von vielen unterschiedlichen Bahnen und auf vielen Ebenen reguliert. Um ein solch komplexes System zu verstehen und konservierte Mechanismen des Alterns zu definieren, ist die Verwendung von Zelle Kultur basierende Modelle so eine weit verbreitete Praxis. Ein oft genannten Vorteil von in-vitro-Alterung von Prim&auml;rzellen ist die hohe Reproduzierbarkeit im Vergleich zu der wesentlich komplexeren Altern der Organismen. Allerdings ist der Alterungsprozess der kultivierten Zellen, wie Alterung der Organismen, definiert nicht nur von genetischen, sondern auch durch Umweltfaktoren erschweren Zelle Kultur Zustand induziert Artefakte und wirklich Aspekte des Alterns zu unterscheiden. Daher haben wir untersucht Alterung der HUVEC (menschlicher Nabelschnur vaskul&auml;ren endothelialen Zellen), eine bekannte und eingesetzte Modellsystem zur in-vitro-Alterung, mit anderen, bereits etablierten Zellkultur-Protokolle. Die Z&uuml;chtung von Bedingungen hatte tats&auml;chlich einen starken Einfluss auf die Zellproliferation, Apoptose-Preise und die replicative Lebensdauer. Jedoch trotz dieser erheblichen Unterschiede fanden wir auch verschiedene robuste Marker, die alternde HUVEC definieren: morphologische Ver&auml;nderungen, verst&auml;rkt Altern-verbundene Beta-Galaktosidase F&auml;rbung, Verhaftung der Zellzyklus in der G1-Phase und gesenkten mitochondrischen Membrane potential und erh&ouml;hte oxidativ modifizierte Proteine wurden angezeigt, unabh&auml;ngig von der Zelle-Protokolle und k&ouml;nnte daher auch als Marker f&uuml;r die in-vivo-Alterung.

Kennung des Anbau-unabh&auml;ngige Marker f&uuml;r menschliche Endothelzellen Altern in-vitro.

Processi di invecchiamento umano sono regolati da numerosi sentieri divergenti e su molti livelli. Cos&igrave;, per capire un sistema cos&igrave; complesso e definire meccanismi conservati dell&#39;invecchiamento, l&#39;uso di modelli basati su coltura cellulare &egrave; una pratica diffusa. Un vantaggio spesso dichiarato di invecchiamento in vitro di cellule primarie &egrave; l&#39;alta riproducibilit&agrave; rispetto all&#39;invecchiamento molto pi&ugrave; intricato di organismi. Tuttavia, il processo di invecchiamento delle cellule in coltura &egrave;, come l&#39;invecchiamento degli organismi, definita non solo dalla genetica, ma anche da fattori ambientali, rendendo difficile distinguere tra cellule cultura condizione indotta da artefatti e veri aspetti dell&#39;invecchiamento. Pertanto abbiamo indagato invecchiamento delle HUVEC (ombelicale vascular endothelial cellule umane), un noto e diffuso sistema modello per l&#39;invecchiamento in vitro, con protocolli della coltura cellulare diverso, gi&agrave; ben consolidata. Condizioni di coltura ha avuto infatti un forte impatto sulla proliferazione cellulare, la durata replicativa e tassi di apoptosi. Tuttavia, nonostante queste differenze significative, abbiamo trovato anche vari marcatori robusti che definiscono HUVEC senescenti: cambiamenti morfologici, aumentata beta-galattosidasi senescenza-associati di colorazione, arresto del ciclo cellulare nella fase G1, abbassato membrana mitocondriale potenziali e aumentato le proteine agli modificato sono stati visualizzati indipendente di cella protocolli della coltura e quindi potrebbero essere considerate anche come marcatori per l&#39;invecchiamento in vivo.

Identificazione di marcatori di coltura-indipendente della senescenza delle cellule endoteliali umane in vitro.

&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x8001;&#x5316;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306F;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x5206;&#x5C90;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x898F;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3092;&#x7406;&#x89E3;&#x3057;&#x3001;&#x8001;&#x5316;&#x306E;&#x4FDD;&#x5B58;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x57F9;&#x990A;&#x6280;&#x8853;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x3092;&#x5E83;&#x7BC4;&#x306A;&#x7DF4;&#x7FD2;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x521D;&#x4EE3;&#x57F9;&#x990A;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E; in vitro &#x8001;&#x5316;&#x306E;&#x3057;&#x3070;&#x3057;&#x3070;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5229;&#x70B9;&#x306F;&#x306F;&#x308B;&#x304B;&#x306B;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x7D4C;&#x5E74;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x518D;&#x73FE;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x8001;&#x5316;&#x306B;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3060;&#x3051;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x57F9;&#x990A;&#x6761;&#x4EF6;&#x8A98;&#x8D77;&#x5DE5;&#x82B8;&#x54C1;&#x3068;&#x9AD8;&#x9F62;&#x5316;&#x306E;&#x771F;&#x306E;&#x5074;&#x9762;&#x3092;&#x533A;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x56F0;&#x96E3;&#x306E;&#x74B0;&#x5883;&#x8981;&#x56E0;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x57F9;&#x990A;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8001;&#x5316;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x6211;&#x3005; &#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE; &#xFF08;&#x3072;&#x3068;&#x81CD;&#x5E2F;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF09;&#x3001;&#x3088;&#x304F;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x306E;&#x8001;&#x5316;&#x3092;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3057;&#x3001;&#x5E83;&#x304F;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x3001;&#x3059;&#x3067;&#x306B;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x57F9;&#x990A;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30B3;&#x30EB;&#x3068;&#x306E; in vitro &#x8001;&#x5316;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB; &#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x57F9;&#x990A;&#x6761;&#x4EF6;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x3078;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x30C8;&#x3001;&#x5206;&#x88C2;&#x5BFF;&#x547D;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x7387;&#x78BA;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x9055;&#x3044;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x3082;&#x8001;&#x5316;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x6D3B;&#x3092;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3059;&#x308B;&#x5404;&#x7A2E;&#x306E;&#x5805;&#x7262;&#x306A;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3092;&#x767A;&#x898B;: &#x5F62;&#x614B;&#x5909;&#x5316;&#x5897;&#x52A0;&#x8001;&#x5316;&#x95A2;&#x9023; &beta; &#x30AC;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x67D3;&#x8272;, G1 &#x671F;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x306E;&#x505C;&#x6B62;&#x3001;&#x4E0B;&#x3052;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x819C;&#x96FB;&#x4F4D;&#x3068;&#x5897;&#x52A0;&#x306E;&#x9178;&#x5316;&#x7684;&#x5909;&#x66F4;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x57F9;&#x990A;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30B3;&#x30EB;&#x3044;&#x305F;&#x3001;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;in vivo &#x3067;&#x306E;&#x8001;&#x5316;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3082;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

In vitro &#x3072;&#x3068;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x8001;&#x5316;&#x306E;&#x683D;&#x57F9;&#x72EC;&#x7ACB;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x306E;&#x540C;&#x5B9A;&#x3002;

&#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xB178;&#xD654; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xB294; &#xB9CE;&#xC740; &#xBD84;&#xAE30; &#xACBD;&#xB85C; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD1B5;&#xC81C; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xAC19;&#xC740; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC744; &#xC774;&#xD574; &#xD558; &#xACE0; &#xB178;&#xD654;&#xC758; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xC815;&#xC758; &#xC140; &#xBB38;&#xD654; &#xAE30;&#xBC18; &#xBAA8;&#xB378;&#xC758; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC774; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. 1 &#xCC28; &#xC140;&#xC758; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB178;&#xD654;&#xB97C; &#xC790;&#xC8FC; &#xBA85;&#xC2DC; &#xB41C; &#xC7A5;&#xC810;&#xC740; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xC758; &#xD6E8;&#xC52C; &#xB354; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xB178;&#xD654;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xB192;&#xC740; &#xC7AC;&#xD604;&#xC131;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xBC30;&#xC591;&#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xB178;&#xD654; &#xACFC;&#xC815;&#xC740; &#xC140; &#xBB38;&#xD654; &#xC870;&#xAC74;&#xC744; &#xC774;&#xC6A9;&#xD55C; &#xACF5;&#xC608;&#xD488; &#xBC0F; &#xB178;&#xD654;&#xC758; &#xC9C4;&#xC815;&#xD55C; &#xCE21;&#xBA74;&#xC744; &#xAD6C;&#xBCC4; &#xD558; &#xACE0; &#xC5B4;&#xB824;&#xC6B4; &#xD658;&#xACBD; &#xC694;&#xC778;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xC758; &#xB178;&#xD654; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC815;&#xC758; &#xB41C; &#xAC83; &#xCC98;&#xB7FC;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; HUVEC (&#xC778;&#xAC04; &#xD0EF; &#xC904; &#xD608;&#xAD00; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;), &#xC798;-&#xC54C;&#xB824;&#xC9C4;&#xC758; &#xB178;&#xD654;&#xB97C; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558; &#xACE0; &#xC774;&#xBBF8; &#xC798; &#xC124;&#xB9BD;, &#xB2E4;&#xB978; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC30;&#xC591; &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0;&#xCF5C;&#xC744; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB178;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBAA8;&#xB378; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC744; &#xB110;&#xB9AC;. &#xBC30;&#xC591; &#xC870;&#xAC74; &#xC138;&#xD3EC; &#xD655;&#xC0B0;&#xC5D0; &#xAC15;&#xD55C; &#xC601;&#xD5A5;, &#xC77C;&#xCC28; &#xC218;&#xBA85; &#xBC0F; apoptosis &#xBE44;&#xC728; &#xCC38;&#xC73C;&#xB85C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xCC28;&#xC774;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xB9C8;&#xCEE4; &#xB178;&#xD654; HUVEC&#xB97C; &#xC815;&#xC758; &#xD558;&#xB294; &#xBC1C;&#xACAC;: &#xD615;&#xD0DC;&#xD559; &#xBCC0;&#xD654;, &#xB178;&#xD654; &#xAD00;&#xB828; &#xBCA0;&#xD0C0; galactosidase &#xC5BC;&#xB8E9;, g 1 &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30; &#xAC80;&#xAC70; &#xC99D;&#xAC00;, &#xB0AE;&#xCD98;&#xB41C; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC; &#xB9AC;&#xC544; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xACFC; &#xC99D;&#xAC00; oxidatively &#xC218;&#xC815;&#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC774; &#xC140;&#xC758; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xB3C5;&#xB9BD; &#xBB38;&#xD654; &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0;&#xCF5C; &#xBC0F; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xB178;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD45C;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C;&#xB3C4; &#xAC04;&#xC8FC; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xCCB4; &#xC678; &#xC778;&#xAC04; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xB178;&#xD654;&#xC758; &#xC7AC;&#xBC30; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; &#xB9C8;&#xCEE4;&#xC758; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Procesos de envejecimiento humano est&aacute;n regulados por muchos caminos divergentes y en muchos niveles. Por lo tanto, para entender un sistema tan complejo y definir mecanismos conservados del envejecimiento, el uso de modelos basados en la cultura de c&eacute;lula es una pr&aacute;ctica generalizada. Una ventaja a menudo indicada del envejecimiento in vitro de c&eacute;lulas primarias es la alta reproducibilidad en comparaci&oacute;n con el envejecimiento mucho m&aacute;s complejo de los organismos. Sin embargo, es el proceso de envejecimiento de las c&eacute;lulas cultivadas, como el envejecimiento de los organismos, no s&oacute;lo define por gen&eacute;tica, pero tambi&eacute;n por factores ambientales, lo que es dif&iacute;cil distinguir entre la c&eacute;lula cultura inducida por condici&oacute;n artefactos y verdaderos aspectos del envejecimiento. Por lo tanto investigamos envejecimiento de HUVEC (c&eacute;lulas endoteliales vasculares umbilicales humanas), un bien conocido y ampliamente utilizado sistema modelo para el envejecimiento in vitro, con protocolos de cultura diferente, ya bien establecida de la c&eacute;lula. Condiciones de cultivo de hecho tuvo un fuerte impacto en la proliferaci&oacute;n celular, la apoptosis tarifas y vida replicativa. Sin embargo, a pesar de estas diferencias significativas, encontramos tambi&eacute;n diversos marcadores robustos que definen HUVEC senescente: cambios morfol&oacute;gicos, aument&oacute; la senescencia asociada beta-galactosidasa coloraci&oacute;n, detenci&oacute;n del ciclo celular en la fase G1, membrana mitocondrial disminuci&oacute;n potencial y mayor prote&iacute;nas oxidativamente modificadas fueron mostrado independiente de c&eacute;lula protocolos de cultura y por lo tanto podr&iacute;an ser consideradas tambi&eacute;n como marcadores para el envejecimiento en vivo.

Identificaci&oacute;n de marcadores independientes del cultivo de la senescencia de c&eacute;lulas endoteliales humanas in vitro.

&#x8001;&#x5316;&#x7684;&#x81EA;&#x7531;&#x57FA;&#x7406;&#x8BBA;&#x3001; &#x521B;&#x9020;&#x548C;&#x79EF;&#x7D2F;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#x6C27;&#x7269;&#x79CD;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x5728;&#x90FD;&#x662F;&#x8001;&#x5316;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x3002;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#x6C27;&#x548C;&#x6D3B;&#x6027;&#x6C27;&#x635F;&#x4F24;&#x7684;&#x7A81;&#x51FA;&#x76EE;&#x6807;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x6765;&#x6E90;&#x3002;&#x800C;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53; DNA &#x548C;&#x819C;&#x88AB;&#x8BC1;&#x660E;&#x6C27;&#x5316;&#x4FEE;&#x9970;&#x4E0E;&#x8001;&#x9F84;&#x5316;&#xFF0C;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D;&#x6C27;&#x5316;&#x4E0D;&#x662F;&#x5F88;&#x4E86;&#x89E3;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x76EE;&#x7684;&#x662F;&#x4E0D;&#x504F;&#x4E0D;&#x501A;&#x7684;&#x5E74;&#x9F84;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D;&#x53CA;&#x5176;&#x4E2D;&#x6C27;&#x5316;&#x6D3B;&#x6027;&#x6C27;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x5E72;&#x6270;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7A33;&#x6001;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x9014;&#x5F84;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x7684;&#x8C03;&#x67E5;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;&#x5728;&#x5E74;&#x8F7B;&#x548C;&#x8870;&#x8001;&#x682A;&#x771F;&#x83CC;&#x8001;&#x5316;&#x6A21;&#x578B; Podospora &#x4EBA;&#x53C2;&#x679C;&#x4ECE;&#x5927;&#x8111;&#x7684;&#x8001;&#x5E74;&#x5927;&#x9F20; (17 &#x548C; 31 &#x4E2A;&#x6708;)&#xFF0C;&#x4E0E;&#x4EBA;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x6B63;&#x5E38;&#x548C;&#x5316;&#x5B66;&#x52A0;&#x901F;&#x4F53;&#x5916;&#x8001;&#x9F84;&#x5316;&#xFF0C;&#x5E74;&#x8F7B; &#xFF08;5 &#x4E2A;&#x6708;&#xFF09; &#x7684;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x5DEE;&#x5F02;&#x6BD4;&#x8F83;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x67D0;&#x4E9B;&#x5197;&#x4F59; posttranslationally &#x4FEE;&#x6539; ATP &#x5408;&#x6210;&#x9176;&#x53D7;&#x5F71;&#x54CD;&#x8DE8;&#x6240;&#x6709;&#x4E09;&#x4E2A;&#x7269;&#x79CD;&#x7684;&#x4E9A;&#x57FA;&#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x4EE3;&#x8868;&#x4E00;&#x822C;&#x5BB9;&#x6613;&#x70ED;&#x70B9;&#x76EE;&#x6807;&#x7684;&#x8001;&#x9F84;&#x5316;&#x95EE;&#x9898;&#xFF0C;&#x548C;&#x6709;&#x53EF;&#x80FD;&#x53D1;&#x8D77;&#x5404;&#x79CD;&#x4E0E;&#x5E74;&#x9F84;&#x6709;&#x5173;&#x7684;&#x75C5;&#x75C7;&#x548C;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x671F;&#x95F4;&#x79EF;&#x7D2F;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6C27;&#x5316;&#x5316;&#x5B66;&#x6210;&#x5206;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x4FEE;&#x6539;&#x88AB;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x4F7F;&#x7528; SAM &#x4F9D;&#x8D56; O-&#x7532;&#x57FA;&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176;&#x4ECE;&#x4F53;&#x80B2;&#x4EBA;&#x53C2;&#x679C; (PaMTH1)&#xFF0C;&#x4EE4;&#x4EBA;&#x60CA;&#x8BB6;&#xFF0C;&#x53D1;&#x73B0;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x7B79;&#x5907;&#x7684;&#x8870;&#x8001;&#x6587;&#x5316;&#x4E30;&#x5BCC;&#x5176;&#x4E2D;&#x7684;&#x793A;&#x4F8B;&#x3002;

&#x4ECE; Podospora &#x4EBA;&#x53C2;&#x679C;&#x3001; &#x5927;&#x9F20;&#x548C;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x7684;&#x5DEE;&#x5F02;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x5B66;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#x4E0E;&#x5E74;&#x9F84;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x6C27;&#x5316;&#x53D8;&#x5316;&#x7684;&#x4E0D;&#x540C;&#x6A21;&#x5F0F;&#x3002;

According to the 'free radical theory of ageing', the generation and accumulation of reactive oxygen species are key events during ageing of biological systems. Mitochondria are a major source of ROS and prominent targets for ROS-induced damage. Whereas mitochondrial DNA and membranes were shown to be oxidatively modified with ageing, mitochondrial protein oxidation is not well understood. The purpose of this study was an unbiased investigation of age-related changes in mitochondrial proteins and the molecular pathways by which ROS-induced protein oxidation may disturb cellular homeostasis. In a differential comparison of mitochondrial proteins from young and senescent strains of the fungal ageing model Podospora anserina, from brains of young (5 months) vs. older rats (17 and 31 months), and human cells, with normal and chemically accelerated in vitro ageing, we found certain redundant posttranslationally modified isoforms of subunits of ATP synthase affected across all three species. These appear to represent general susceptible hot spot targets for oxidative chemical changes of proteins accumulating during ageing, and potentially initiating various age-related pathologies and processes. This type of modification is discussed using the example of SAM-dependent O-methyltransferase from P. anserina (PaMTH1), which surprisingly was found to be enriched in mitochondrial preparations of senescent cultures.

Differential proteomic profiling of mitochondria from Podospora anserina, rat and human reveals distinct patterns of age-related oxidative changes.

Selon la &quot;th&eacute;orie radicalaire du vieillissement&quot;, la g&eacute;n&eacute;ration et l&#39;accumulation d&#39;oxyg&egrave;ne r&eacute;actif esp&egrave;ces sont les principaux &eacute;v&eacute;nements au cours du vieillissement des syst&egrave;mes biologiques. Les mitochondries sont une source majeure de ROS et objectifs importants pour les dommages caus&eacute;s par le ROS. Consid&eacute;rant que l&#39;ADN mitochondrial et les membranes ont &eacute;t&eacute; montr&eacute;s pour &ecirc;tre modifi&eacute;s par oxydation avec le vieillissement, l&#39;oxydation des prot&eacute;ines mitochondriales n&#39;est pas bien comprise. Le but de cette &eacute;tude &eacute;tait une enqu&ecirc;te impartiale d&#39;age-related changes in prot&eacute;ines mitochondriales et les voies mol&eacute;culaires par lesquels oxydation de prot&eacute;ine induite par le ROS peut-&ecirc;tre perturber l&#39;hom&eacute;ostasie cellulaire. Dans une comparaison diff&eacute;rentielle des prot&eacute;ines mitochondriales de souches jeunes et s&eacute;nescentes du vieillissement fongiques mod&egrave;le Podospora anserina, du cerveau des jeunes (5 mois) vs vieux rats (17 et 31 mois) et au vieillissement normale et chimiquement acc&eacute;l&eacute;r&eacute;e in vitro des cellules humaines, nous avons constat&eacute; certains redondants apr&egrave;s modification des isoformes des sous-unit&eacute;s de l&#39;ATP synthase touch&eacute;s &agrave; travers les trois esp&egrave;ces. Ceux-ci semblent repr&eacute;senter des cibles g&eacute;n&eacute;rales sensibles r&eacute;active pour des changements chimiques oxydatives des prot&eacute;ines s&#39;accumulent pendant le vieillissement et potentiellement initiant diff&eacute;rents processus et les pathologies li&eacute;es au vieillissement. Ce type de modification est discut&eacute; en utilisant l&#39;exemple de SAM-d&eacute;pendante O-m&eacute;thyltransf&eacute;rase de P. anserina (PaMTH1), qui s&#39;est av&eacute;r&eacute; &eacute;tonnamment pas &ecirc;tre enrichi en pr&eacute;parations mitochondriales des cultures s&eacute;nescentes.

Profilage de prot&eacute;omique diff&eacute;rentielle des mitochondries de Podospora anserina, le rat et l&#39;homme r&eacute;v&egrave;le des tendances distinctes de changements oxydatifs li&eacute;s &agrave; l&#39;&acirc;ge.

Nach der &quot;freie Radikale-Theorie des Alterns&quot;, die Generierung und Anh&auml;ufung von reaktiven Sauerstoff sind Arten wichtige Ereignisse w&auml;hrend der Alterung von biologischen Systemen. Mitochondrien sind eine wichtige Quelle von ROS und prominente Vorgaben f&uuml;r ROS-induzierten Sch&auml;den. Die mitochondriale DNA und Membranen oxidativ ver&auml;ndert werden, mit zunehmendem Alter verlieren gezeigt wurden, ist die mitochondriale Protein Oxydation nicht gut verstanden. Der Zweck dieser Studie war eine unvoreingenommene Untersuchung altersbedingter Ver&auml;nderungen der mitochondrialen Proteine und die molekularen Bahnen durch die Oxydation der ROS-induzierte Protein zellul&auml;re Hom&ouml;ostase st&ouml;ren kann. In einem differenziellen Vergleich der mitochondrialen Proteine aus jungen und alternde St&auml;mmen von pilzartige &Uuml;beralterung Modell Podospora Anserina, aus Gehirn junger (5 Monate) vs. &auml;ltere Ratten (17 und 31 Monate) und menschliche Zellen, mit normalen und chemisch beschleunigte in-vitro-Alterung fanden wir sicher, dass redundante posttranslational modifiziert Isoformen Untereinheiten des ATP-Synthase, die alle drei Arten betroffen. Diese erscheinen allgemein empf&auml;nglicher Hot-Spot-Ziele f&uuml;r oxidativen chemischen Ver&auml;nderungen von Proteinen, die Anh&auml;ufung w&auml;hrend der Alterung und potenziell initiieren verschiedene altersbedingte Krankheiten und Prozesse darstellen. Diese Art der &Auml;nderung wird erl&auml;utert am Beispiel der SAM-abh&auml;ngige O-Methyltransferase von p. Anserina (PaMTH1), die &uuml;berraschend war in mitochondriale Zubereitungen der alternde Kulturen bereichert werden.

Differenzielle Proteomic profiling von Mitochondrien aus Podospora Anserina, Ratte und Mensch zeigt unterschiedliche Muster von altersbedingten oxidative Ver&auml;nderungen.

Secondo la teoria di radicali liberi dell&#39;invecchiamento, la generazione e l&#39;accumulo di ossigeno reattive specie sono eventi chiave durante l&#39;invecchiamento dei sistemi biologici. I mitocondri sono la principale fonte di ROS e importanti obiettivi per danni indotti da ROS. Considerando che il DNA mitocondriale e le membrane sono state mostrate agli essere modificato con l&#39;invecchiamento, ossidazione mitocondriale di proteine non &egrave; ben compreso. Lo scopo di questo studio era un&#39;indagine imparziale dei cambiamenti legati all&#39;et&agrave; di proteine mitocondriali e le vie molecolari da cui ossidazione proteica indotta da ROS pu&ograve; disturbare l&#39;omeostasi cellulare. In un confronto differenziale delle proteine mitocondriali da giovani e senescenti ceppi dell&#39;invecchiamento fungine modello Podospora anserina, dal cervello di giovani (5 mesi) vs vecchi ratti (17 e 31 mesi) e le cellule umane, con l&#39;invecchiamento normale e chimicamente accelerato in vitro, abbiamo trovato alcuni ridondanti posttranslationally modificato isoforme della subunit&agrave; dell&#39;ATP sintasi colpite attraverso tutte e tre le specie. Queste sembrano rappresentare obiettivi generali suscettibili di hot spot per ossidativo modifiche chimiche delle proteine accumulano durante l&#39;invecchiamento e potenzialmente avviando diverse patologie legate all&#39;et&agrave; e processi. Questo tipo di modifica &egrave; discussa utilizzando l&#39;esempio di SAM-dipendente O-metiltransferasi da p. anserina (PaMTH1), che sorprendentemente &egrave; stato trovato per essere arricchito in preparazioni mitocondriale delle culture senescenti.

Proteomica differenziale profilatura dei mitocondri da Podospora anserina, ratto e umani rivela distinti modelli di cambiamenti ossidativi legati all&#39;et&agrave;.

&#x300C;&#x8001;&#x5316;&#x306E;&#x30D5;&#x30EA;&#x30FC;&#x30E9;&#x30B8;&#x30AB;&#x30EB;&#x7406;&#x8AD6; &#x300F;, &#x4E16;&#x4EE3;&#x3068;&#x6D3B;&#x6027;&#x9178;&#x7D20;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3088;&#x308B;&#x3068;&#x7A2E;&#x30AD;&#x30FC; &#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x4E2D;&#x306E;&#x8001;&#x5316;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E; ROS &#x3068; ROS &#x8A98;&#x8D77;&#x640D;&#x50B7;&#x306E;&#x8457;&#x540D;&#x306A;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x6E90;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2; DNA &#x3068;&#x819C;&#x306E;&#x8001;&#x5316;&#x3068;&#x9178;&#x5316;&#x7684;&#x5909;&#x66F4;&#x3059;&#x308B;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3001;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x9178;&#x5316;&#x306F;&#x3088;&#x304F;&#x7406;&#x89E3;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x76EE;&#x7684;&#x306F;&#x3001;&#x52A0;&#x9F62;&#x306B;&#x4F34;&#x3046;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3068;&#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x4F53;&#x306E;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30B9;&#x30BF;&#x30B7;&#x30B9; ROS &#x8A98;&#x8D77;&#x6027;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x9178;&#x5316;&#x3092;&#x59A8;&#x3052;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x5206;&#x5B50;&#x7D30;&#x9053;&#x306E;&#x516C;&#x5E73;&#x306A;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x771F;&#x83CC;&#x306E;&#x8001;&#x5316;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB; Podospora anserina &#x30E4;&#x30F3;&#x30B0; &#xFF08;5 &#x30F6;&#x6708;&#xFF09; &#x5BFE;&#x9AD8;&#x9F62;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8; &#xFF08;17 &#x3068; 31 &#x30F6;&#x6708;&#xFF09; &#x3068;&#x901A;&#x5E38;&#x3068;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x306B;&#x52A0;&#x901F;&#x306E; in vitro &#x8001;&#x5316;&#x3068;&#x3001;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8133;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x82E5;&#x3044;&#x3068;&#x8001;&#x5316;&#x306E;&#x7CFB;&#x7D71;&#x304B;&#x3089;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x5DEE;&#x5206;&#x6BD4;&#x8F03;&#x6211;&#x3005; &#x5197;&#x9577; posttranslationally &#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x9593;&#x3067;&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E; 3 &#x7A2E;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x308B; ATP &#x5408;&#x6210;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x5909;&#x66F4;&#x3092;&#x7279;&#x5B9A;&#x4E2D;&#x306B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306F;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x3084;&#x3059;&#x3044;&#x30DB;&#x30C3;&#x30C8; &#x30B9;&#x30DD;&#x30C3;&#x30C8; &#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x9AD8;&#x9F62;&#x5316;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x52A0;&#x9F62;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x75C5;&#x614B;&#x3084;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x958B;&#x59CB;&#x4E2D;&#x306B;&#x84C4;&#x7A4D;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x9178;&#x5316;&#x306E;&#x5316;&#x5B66;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x8868;&#x3059;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x7A2E;&#x306E;&#x5909;&#x66F4;&#x306F;&#x3001;&#x9A5A;&#x304F;&#x307B;&#x3069;&#x306E;&#x8001;&#x9F62;&#x6587;&#x5316;&#x306E;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x6E96;&#x5099;&#x306B;&#x6FC3;&#x7E2E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F; P. anserina (PaMTH1) &#x304B;&#x3089;&#x306E; SAM &#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3059;&#x308B;-o-&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x4F8B;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x5DEE;&#x52D5;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30FC;&#x30E0; Podospora anserina&#x3001;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30D2;&#x30C8;&#x304B;&#x3089;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x9178;&#x5316;&#x306E;&#x52A0;&#x9F62;&#x5909;&#x5316;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#39;&#xB178;&#xD654;&#xC758; &#xC790;&#xC720; &#xB77C; &#xB514; &#xCE7C; &#xC774;&#xB860;&#39;, &#xC0DD;&#xC131; &#xBC0F; &#xBC18;&#xC751;&#xC131; &#xC0B0;&#xC18C;&#xC758; &#xCD95;&#xC801;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC885; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; &#xB178;&#xD654; &#xC911; &#xC8FC;&#xC694; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xAC00; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; &#xC120;&#xC0DD;&#xB2D8;&#xACFC; &#xC120;&#xC0DD;&#xB2D8; &#xC190;&#xC0C1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC800;&#xBA85;&#xD55C; &#xBAA9;&#xD45C;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xC6D0;&#xCC9C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; DNA&#xC640; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9; &#xACE0;&#xB839; &#xD654;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xC218;&#xC815; oxidatively&#xB97C; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;, &#xBC18;&#xBA74; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0B0;&#xD654; &#xC798; &#xC774;&#xD574; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xBAA9;&#xC801;&#xC740; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC0F; &#xBD84;&#xC790; &#xACBD;&#xB85C; &#xC120;&#xC0DD;&#xB2D8; &#xC720;&#xB3C4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0B0;&#xD654;&#xAC00; &#xC138;&#xD3EC; &#xD56D;&#xC0C1;&#xC131;&#xC744; &#xBC29;&#xD574; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB098;&#xC774; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xBCC0;&#xD654;&#xC758; &#xD3B8;&#xACAC;&#xB41C; &#xC870;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC601; (5 &#xAC1C;&#xC6D4;) &#xC774;&#xC804; &#xC950; (17&#xACFC; 31 &#xAC1C;&#xC6D4;), &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC815;&#xC0C1;&#xACFC; &#xD654;&#xD559;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC00;&#xC18D;&#xD654; &#xB41C; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACE0;&#xB839; &#xD654;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xB300;&#xC758; &#xB450;&#xB1CC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACF0; &#xD321;&#xC774; &#xB178;&#xD654; &#xBAA8;&#xB378; Podospora anserina&#xC758; &#xC80A;&#xACE0; &#xB178;&#xD654; &#xC885;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xCC28;&#xB3D9; &#xBE44;&#xAD50;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD2B9;&#xC815; &#xC911;&#xBCF5; posttranslationally &#xBAA8;&#xB4E0; 3 &#xC885;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; ATP synthase subunits isoforms &#xC218;&#xC815;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB178;&#xD654;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC5F0;&#xB839; &#xAD00;&#xB828; pathologies &#xBC0F; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC2DC;&#xC791; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xCD95;&#xC801; &#xD558;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC0B0;&#xD654; &#xD654;&#xD559; &#xBCC0;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xCDE8;&#xC57D; &#xD56B; &#xC2A4;&#xD3FF; &#xB300;&#xC0C1;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0A9;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC720;&#xD615;&#xC758; &#xC218;&#xC815; &#xC758;&#xC678;&#xB85C; &#xB178;&#xD654; &#xBB38;&#xD654;&#xC758; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC; &#xB9AC;&#xC544; &#xC900;&#xBE44;&#xC5D0; &#xB18D;&#xCD95; &#xBC1C;&#xACAC; P. anserina (PaMTH1)&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0D8; &#xC885;&#xC18D; O-methyltransferase&#xC758; &#xC608;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xCC28;&#xB3D9; proteomic Podospora anserina, &#xC950;&#xC640; &#xC778;&#xAC04; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544;&#xC758; &#xD504;&#xB85C; &#xD30C;&#xC77C;&#xB9C1; &#xC0B0;&#xD654; &#xBCC0;&#xD654; &#xB098;&#xC774; &#xAD00;&#xB828;&#xC758; &#xB69C;&#xB837;&#xD55C; &#xD328;&#xD134;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900;&#xB2E4;.

Seg&uacute;n la teor&iacute;a radicales libres del envejecimiento, la generaci&oacute;n y acumulaci&oacute;n de ox&iacute;geno reactivo especies son eventos clave durante la crianza de los sistemas biol&oacute;gicos. Las mitocondrias son una importante fuente de ROS y objetivos prominentes para da&ntilde;o inducido por ROS. Mientras que el ADN mitocondrial y las membranas fueron demostradas oxidativamente modificarse con el envejecimiento, oxidaci&oacute;n de la prote&iacute;na mitocondrial no se comprende bien. El prop&oacute;sito de este estudio fue una investigaci&oacute;n imparcial de cambios relacionados con la edad en prote&iacute;nas mitocondriales y las v&iacute;as moleculares que oxidaci&oacute;n de la prote&iacute;na inducida por ROS puede disturbar la homeostasis celular. En una comparaci&oacute;n diferencial de prote&iacute;nas mitocondriales de jovenes y senescentes cepas de los hongos envejecimiento modelo Podospora anserina, de cerebros de j&oacute;venes (5 meses) vs ratas mayores (17 y 31 meses) y las c&eacute;lulas humanas, con normal y qu&iacute;micamente acelerado envejecimiento in vitro, encontramos ciertas redundantes posttranslationally modificaci&oacute;n isoformas de subunidades de la ATP sintasa afectados a trav&eacute;s de las tres especies. Estos parecen representar un objetivo general susceptibles hot spot para cambios qu&iacute;micos oxidativos de las prote&iacute;nas que se acumulan durante el envejecimiento y potencialmente iniciar varios procesos y patolog&iacute;as relacionadas con la edad. Este tipo de modificaci&oacute;n se discute usando el ejemplo de SAM-dependiente O-metiltransferasa de anserina p. (PaMTH1), que sorprendentemente se encontr&oacute; a enriquecerse en preparaciones mitocondriales de culturas senescentes.

Prote&oacute;mica diferencial perfiles de mitocondrias de Podospora anserina, rata y humanos revela patrones distintos de cambios oxidativos relacionada con la edad.

&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x8001;&#x5316;&#x7684;&#x7406;&#x8BBA;&#x9884;&#x6D4B;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4EA7;&#x751F;&#x6D3B;&#x6027;&#x6C27; (ROS) &#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x6539;&#x53D8;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x5728;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x5982;&#x679C;&#x8001;&#x5316;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x5E76;&#x4E0D;&#x662F;&#x6240;&#x6709;&#x7684;&#x7269;&#x79CD;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x6A21;&#x578B;&#x4E3A;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x8870;&#x8001;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8870;&#x8001;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6700;&#x8FD1;&#x62A5;&#x544A;&#x90E8;&#x5206;&#x89E3;&#x8026;&#x7684;&#x8870;&#x8001;&#x4EBA;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x547C;&#x5438;&#x94FE;&#x3002;&#x5728;&#x76EE;&#x524D;&#x7684;&#x901A;&#x4FE1;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5904;&#x7406;&#x53D7;&#x635F;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x8026;&#x5408;&#x548C;&#x65E9;&#x8870;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x56E0;&#x679C;&#x5173;&#x7CFB;&#x3002;&#x6162;&#x6027;&#x66B4;&#x9732;&#x4E8E;&#x5316;&#x5B66;&#x5076;&#x8054; carbonylcyanide p-trifluoromethoxyphenylhydrazone &#xFF08;FCCP&#xFF09; &#x5BFC;&#x81F4;&#x4E34;&#x65F6;&#x3001; &#x53EF;&#x9006;&#x8026;&#x7684;&#x6C27;&#x5316;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x4EBA;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;FCCP &#x4EE5;&#x5242;&#x91CF;&#x4F9D;&#x8D56;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x6291;&#x5236;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5F88;&#x5927;&#x6BD4;&#x4F8B;&#x5728; 12 &#x5929;&#x5185;&#x8F93;&#x5165;&#x8FC7;&#x65E9;&#x8870;&#x8001;&#x3002;&#x610F;&#x5916;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;FCCP &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6162;&#x6027;&#x63A5;&#x89E6;&#x5BFC;&#x81F4; ROS &#x751F;&#x4EA7;&#x4E2D;&#x7684;&#x5927;&#x91CF;&#x589E;&#x52A0;&#x548C; FCCP &#x5BF9;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x6D88;&#x9664;&#x7531; N-&#x4E59;&#x9170;&#x534A;&#x80F1;&#x6C28;&#x9178;&#x6297;&#x6C27;&#x5316;&#x5242;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x6297;&#x6C27;&#x5316;&#x5242;&#x6CBB;&#x7597;&#x5E76;&#x672A;&#x963B;&#x6B62;&#x8FC7;&#x65E9;&#x8870;&#x8001;&#xFF0C;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x4E2D;&#x7684;&#x6C27;&#x5316;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x51CF;&#x5C11;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x7279;&#x5F81;&#x8870;&#x8001;&#x4EBA;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x578B;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x8BC4;&#x4F30;&#x662F;&#x5426;&#x53EF;&#x80FD;&#x5728;&#x8FDB;&#x5316;&#x4FDD;&#x5B88;&#x8FD9;&#x4E00;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x89E3;&#x5076;&#x8054;&#x5BF9;&#x9175;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7E41;&#x6B96;&#x5BFF;&#x547D;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x4E5F;&#x6D89;&#x53CA;&#x5230;&#x3002;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x5728;&#x4EBA;&#x7684;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x90E8;&#x5206;&#x89E3;&#x8026;&#x7684;&#x9175;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7279;&#x5B9A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x6BCD;&#x4EB2;-&#x5BFF;&#x547D;&#x5927;&#x5E45;&#x4E0B;&#x964D;&#x548C;&#x4E2D;&#x6D3B;&#x6027;&#x6C27;&#xFF0C;&#x4F1A;&#x968F;&#x4E4B;&#x589E;&#x5F3A;&#x6C27;&#x5316; phsophorylation &#x7531;&#x8F7B;&#x5EA6;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x89E3;&#x5076;&#x8054;&#x6307;&#x793A;&#xFF0C;&#x5BFF;&#x547D;&#x7F29;&#x77ED;&#x53EF;&#x80FD;&#x4EE3;&#x8868;&quot;&#x516C;&#x5171;&quot;&#x8870;&#x8001;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

&#x90E8;&#x5206;&#x89E3;&#x8026;&#x7684;&#x6C27;&#x5316;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x4EBA;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x9175;&#x6BCD;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC7;&#x65E9;&#x8870;&#x8001;&#x3002;

The mitochondrial theory of aging predicts that functional alterations in mitochondria leading to reactive oxygen species (ROS) production contribute to the aging process in most if not all species. Using cellular senescence as a model for human aging, we have recently reported partial uncoupling of the respiratory chain in senescent human fibroblasts. In the present communication, we address a potential cause-effect relationship between impaired mitochondrial coupling and premature senescence. Chronic exposure of human fibroblasts to the chemical uncoupler carbonylcyanide p-trifluoromethoxyphenylhydrazone (FCCP) led to a temporary, reversible uncoupling of oxidative phosphorylation. FCCP inhibited cell proliferation in a dose-dependent manner, and a significant proportion of the cells entered premature senescence within 12 days. Unexpectedly, chronic exposure of cells to FCCP led to a significant increase in ROS production, and the inhibitory effect of FCCP on cell proliferation was eliminated by the antioxidant N-acetyl-cysteine. However, antioxidant treatment did not prevent premature senescence, suggesting that a reduction in the level of oxidative phosphorylation contributes to phenotypical changes characteristic of senescent human fibroblasts. To assess whether this mechanism might be conserved in evolution, the influence of mitochondrial uncoupling on replicative life span of yeast cells was also addressed. Similar to our findings in human fibroblasts, partial uncoupling of oxidative phsophorylation in yeast cells led to a substantial decrease in the mother-cell-specific life span and a concomitant incrase in ROS, indicating that life span shortening by mild mitochondrial uncoupling may represent a "public" mechanism of aging.

Partial uncoupling of oxidative phosphorylation induces premature senescence in human fibroblasts and yeast mother cells.

La th&eacute;orie mitochondriale du vieillissement pr&eacute;dit que des alt&eacute;rations fonctionnelles dans les mitochondries, conduisant &agrave; la production de r&eacute;actifs de l&#39;oxyg&egrave;ne (DRO) contribuent au processus de vieillissement dans la plupart pas toutes les esp&egrave;ces. &Agrave; l&#39;aide de s&eacute;nescence cellulaire comme un mod&egrave;le pour le vieillissement humain, nous avons r&eacute;cemment rapport&eacute; un d&eacute;couplage partiel de la cha&icirc;ne respiratoire dans les fibroblastes humains s&eacute;nescents. Dans la pr&eacute;sente communication, nous abordons une &eacute;ventuelle relation de cause &agrave; effet entre le couplage mitochondriale avec facult&eacute;s affaiblies et de s&eacute;nescence pr&eacute;matur&eacute;e. Exposition chronique des fibroblastes humains pour le d&eacute;coupleur chimique carbonylcyanure p-trifluoromethoxyphenylhydrazone (FCCP) conduit &agrave; un d&eacute;couplage temporaire et r&eacute;versible de la phosphorylation oxydative. FCCP inhibe la prolif&eacute;ration cellulaire de mani&egrave;re dose-d&eacute;pendante, et une proportion importante des cellules dans la s&eacute;nescence pr&eacute;matur&eacute;e dans les 12 jours. Contre toute attente, l&#39;exposition chronique des cellules &agrave; FCCP a conduit &agrave; une augmentation significative de la production de ROS, et l&#39;effet inhibiteur du FCCP sur la prolif&eacute;ration cellulaire a &eacute;t&eacute; &eacute;limin&eacute; par l&#39;antioxydant N-ac&eacute;tyl-cyst&eacute;ine. Cependant, traitement antioxydant n&#39;emp&ecirc;cha pas la s&eacute;nescence pr&eacute;matur&eacute;e, sugg&eacute;rant qu&#39;une r&eacute;duction du niveau de la phosphorylation oxydative contribue &agrave; des changements ph&eacute;notypiques caract&eacute;ristiques des fibroblastes humains s&eacute;nescents. Pour d&eacute;terminer si ce m&eacute;canisme peut &ecirc;tre conserv&eacute; dans l&#39;&eacute;volution, l&#39;influence de d&eacute;couplage mitochondriale sur r&eacute;plicative dur&eacute;e de vie des cellules de levure a &eacute;galement &eacute;t&eacute; abord&eacute;e. Similaire &agrave; nos constatations dans les fibroblastes humains, partielles de d&eacute;couplage de phsophorylation oxydative dans les cellules de levure a conduit &agrave; une diminution substantielle de la dur&eacute;e de vie de la m&egrave;re-sp&eacute;cifiques des cellules et une augmentation concomitante : en ROS, indiquant ce raccourcissement de la dur&eacute;e de vie par d&eacute;couplage mitochondrial doux peut repr&eacute;senter un m&eacute;canisme &laquo; public &raquo; du vieillissement.

Le d&eacute;couplage partiel de la phosphorylation oxydative induit la s&eacute;nescence pr&eacute;matur&eacute;e dans les fibroblastes humains et les cellules m&egrave;res de levure.

Die mitochondriale Theorie des Alterns prognostiziert, dass funktionelle Ver&auml;nderungen in den Mitochondrien zu reaktiven Sauerstoff-Spezies (ROS) f&uuml;hrt zu den Alterungsprozess in die meisten, wenn nicht alle Arten beitragen. Mit zellul&auml;ren Seneszenz als Modell f&uuml;r menschliche Altern, haben wir vor kurzem berichtet, teilweise Entkoppler der Atmungskette in alternde menschliche Fibroblasten. In der vorliegenden Mitteilung wenden wir uns eine m&ouml;gliche Ursache-Wirkung-Beziehung zwischen gest&ouml;rte mitochondriale Kupplung und vorzeitiges Altern. Chronischer Exposition von menschlichen Fibroblasten gegen&uuml;ber der chemischen Entkuppler Carbonylcyanide p-Trifluoromethoxyphenylhydrazone (FCCP) f&uuml;hrte zu eine tempor&auml;re, reversible Entkopplung der oxidativen Phosphorylierung. FCCP gehemmt Zellproliferation in einer Dosis-abh&auml;ngigen Weise, und ein erheblicher Anteil der Zellen in vorzeitige Seneszenz innerhalb von 12 Tagen. Unerwartet, chronischer Exposition von Zellen zu FCCP f&uuml;hrte zu einem deutlichen Anstieg der ROS-Produktion und die hemmende Wirkung von FCCP auf Zellproliferation durch das Antioxidans N-Acetyl-Cystein gestrichen wurde. Antioxidative Behandlung verhinderte jedoch nicht vorzeitig altern, was darauf hindeutet, dass eine Senkung des Niveaus der oxidativen Phosphorylierung zu ph&auml;notypische Ver&auml;nderungen charakteristisch f&uuml;r alternde menschlichen Fibroblasten beitr&auml;gt. Um zu beurteilen, ob dieser Mechanismus in der Evolution konserviert werden k&ouml;nnte, ist auch der Einfluss der mitochondrialen Abkopplung auf replicative Lebensdauer von Hefezellen angesprochen worden. &Auml;hnlich wie unsere Erkenntnisse in menschlichen Fibroblasten, partielle Entkopplung der oxidativen Phsophorylation in Hefezellen f&uuml;hrte zu einen erheblichen R&uuml;ckgang der die Mutter-zellspezifische Lebensspanne und einer damit einhergehenden Incrase in ROS, kann angibt, die Verk&uuml;rzung der Lebensdauer durch milde mitochondrialer Entkoppler einen &quot;&ouml;ffentlichen&quot; Mechanismus des Alterns vertreten.

Partielle Entkopplung der oxidativen Phosphorylierung induziert vorzeitiges Altern in menschlichen Fibroblasten und Mutter Hefezellen.

La teoria mitocondriale dell&#39;invecchiamento predice che alterazioni funzionali nei mitocondri che porta alla produzione di ossigeno reattivo (ROS) specie contribuiscono al processo di invecchiamento in maggior parte se non tutte le specie. Utilizzando senescenza cellulare come un modello per l&#39;invecchiamento umano, abbiamo recentemente segnalato lo sganciamento parziale della catena respiratoria in fibroblasti umani senescenti. Nella presente comunicazione, affrontiamo una potenziale relazione causa-effetto tra accoppiamento mitocondriale alterata e senescenza precoce. Esposizione cronica di fibroblasti umani per i chimici sono carbonylcyanide p-trifluorometossifenil idrazone (FCCP) portato ad un temporaneo, reversibile sganciamento della fosforilazione ossidativa. FCCP inibito la proliferazione cellulare in maniera dose-dipendente, e una percentuale significativa delle cellule entrato senescenza precoce entro 12 giorni. Inaspettatamente, l&#39;esposizione cronica delle cellule a FCCP ha portato a un significativo aumento della produzione di ROS, e l&#39;effetto inibitorio del FCCP sulla proliferazione delle cellule &egrave; stata eliminata dall&#39;antiossidante N-acetil-cisteina. Tuttavia, trattamento antiossidante non ha impedito la senescenza precoce, suggerendo che una riduzione del livello di fosforilazione ossidativa contribuisce alle variazioni fenotipiche caratteristici di fibroblasti umani senescenti. Per valutare se questo meccanismo potrebbe essere conservato nell&#39;evoluzione, &egrave; stato affrontato anche l&#39;influenza di disgiungere mitocondriale su durata replicativa delle cellule di lievito. Simili ai nostri risultati in fibroblasti umani, parziali sganciamento del phsophorylation ossidativo nelle cellule di lievito ha condotto ad una diminuzione sostanza la durata della vita madre-cellula-specifico e un concomitante strisciamento in ROS, indicando che accorciare la durata della vita di lieve disgiungere mitocondriale pu&ograve; rappresentare un meccanismo di &quot;pubblico&quot; dell&#39;invecchiamento.

Sganciamento parziale della fosforilazione ossidativa induce precoce senescenza in fibroblasti umani e di cellule di lievito madre.

&#x8001;&#x5316;&#x306E;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x7406;&#x8AD6;&#x306F;&#x6D3B;&#x6027;&#x9178;&#x7D20;&#x7A2E; (ROS) &#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x5909;&#x5316;&#x304C;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x7A2E;&#x3001;&#x8001;&#x5316;&#x306E;&#x904E;&#x7A0B;&#x3067;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306E;&#x5834;&#x5408;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3068;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x8001;&#x5316;&#x3092;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x8001;&#x5316;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x6700;&#x8FD1;&#x8001;&#x9F62;&#x3072;&#x3068;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x547C;&#x5438;&#x9396;&#x306E;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306A;&#x8131;&#x5171;&#x5F79;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x901A;&#x4FE1;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x969C;&#x5BB3;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D50;&#x5408;&#x3068;&#x6642;&#x671F;&#x5C1A;&#x65E9;&#x306E;&#x8001;&#x5316;&#x3068;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x56E0;&#x679C;&#x95A2;&#x4FC2;&#x306B;&#x5BFE;&#x51E6;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6162;&#x6027;&#x66DD;&#x9732;&#x3072;&#x3068;&#x7E4A;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5316;&#x5B66;&#x89E3;&#x653E; carbonylcyanide &#x30C8;&#x30EA;&#x30D5;&#x30EB;&#x30AA;&#x30ED;&#x30E1;&#x30C8;&#x30AD;&#x30B7;&#x30D5;&#x30A7;&#x30CB;&#x30EB;&#x30D2;&#x30C9;&#x30E9;&#x30BE;&#x30F3; &#xFF08;FCCP&#xFF09; &#x306F;&#x4E00;&#x6642;&#x3001;&#x30EA;&#x30D0;&#x30FC;&#x30B7;&#x30D6;&#x30EB;&#x306E;&#x9178;&#x5316;&#x7684;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3092;&#x8131;&#x5171;&#x5F79;&#x306B;&#x5C0E;&#x3044;&#x305F;&#x3002;FCCP &#x306F;&#x7528;&#x91CF;&#x4F9D;&#x5B58;&#x7684;&#x306B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x305F;&#x3057;&#x3001;12 &#x65E5;&#x4EE5;&#x5185;&#x6642;&#x671F;&#x5C1A;&#x65E9;&#x306E;&#x8001;&#x5316;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x304B;&#x306A;&#x308A;&#x306E;&#x5272;&#x5408;&#x3092;&#x5165;&#x529B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E88;&#x671F;&#x305B;&#x305A;&#x3001;FCCP &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6162;&#x6027;&#x66DD;&#x9732; ROS &#x751F;&#x7523;&#x306E;&#x5927;&#x5E45;&#x306A;&#x5897;&#x52A0;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x3063;&#x305F;&#x3057;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x6291;&#x5236;&#x52B9;&#x679C; FCCP &#x306E; N-&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;-&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x9178;&#x5316;&#x9632;&#x6B62;&#x5264;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3075;&#x308B;&#x3044;&#x843D;&#x3068;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x6297;&#x9178;&#x5316;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x9178;&#x5316;&#x7684;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x4F4E;&#x6E1B;&#x8001;&#x9F62;&#x3072;&#x3068;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306B;&#x5BC4;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3001;&#x6642;&#x671F;&#x5C1A;&#x65E9;&#x306E;&#x8001;&#x5316;&#x3092;&#x4E88;&#x9632;&#x3057;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x9032;&#x5316;&#x3067;&#x7BC0;&#x7D04;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x8907;&#x88FD;&#x5BFF;&#x547D;&#x300D;&#x306B;&#x9175;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x8131;&#x5171;&#x5F79;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3082;&#x5BFE;&#x51E6;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x3072;&#x3068;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;, &#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x7279;&#x7570;&#x5BFF;&#x547D;&#x306E;&#x5927;&#x5E45;&#x306A;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3068; ROS &#x306F;&#x3001;47137 &#x3092;&#x4F75;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x4E3B;&#x5C0E;&#x9175;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x9178;&#x5316; phsophorylation &#x306E;&#x8131;&#x5171;&#x5F79;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306A;&#x8EFD;&#x5EA6;&#x306E;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x8131;&#x5171;&#x5F79;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x305D;&#x306E;&#x5BFF;&#x547D;&#x77ED;&#x7E2E;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x8001;&#x5316;&#x306E;&#x300C;&#x30D1;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x300D;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x8868;&#x3059;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

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&#xC0B0;&#xD654; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xC758; &#xBD80;&#xBD84; &#xBD84;&#xB9AC; &#xC2DC; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xD6A8; &#xBAA8; &#xC5B4;&#xBA38;&#xB2C8; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC870;&#xAE30; &#xB178;&#xD654;&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La teor&iacute;a mitocondrial del envejecimiento predice que alteraciones funcionales en la mitocondria hacia la producci&oacute;n de ox&iacute;geno reactivo (ROS) las especies contribuyen al proceso de envejecimiento adentro la mayor&iacute;a si no todas las especies. Usando la senescencia celular como un modelo de envejecimiento humano, recientemente hemos divulgado el desacoplamiento parcial de la cadena respiratoria en fibroblastos humanos senescentes. En la presente comunicaci&oacute;n, nos dirigimos a una potencial relaci&oacute;n causa-efecto entre la deteriorada acoplamiento mitocondrial y envejecimiento prematuro. Exposici&oacute;n cr&oacute;nica de fibroblastos humanos a la qu&iacute;mica uncoupler carbonylcyanide p-trifluoromethoxyphenylhydrazone (FCCP) conducido a un temporal, reversible el desacoplamiento de la fosforilaci&oacute;n oxidativa. FCCP inhibe la proliferaci&oacute;n celular en forma dosis dependiente, y una proporci&oacute;n significativa de las c&eacute;lulas entr&oacute; senescencia prematura dentro de 12 d&iacute;as. Inesperadamente, la exposici&oacute;n cr&oacute;nica de las c&eacute;lulas al FCCP condujo a un incremento en la producci&oacute;n de ROS, y el efecto inhibitorio del FCCP sobre proliferaci&oacute;n celular fue eliminado por el antioxidante n-acetil-ciste&iacute;na. Sin embargo, el tratamiento antioxidante no previno senescencia prematura, sugiriendo que una reducci&oacute;n en el nivel de fosforilaci&oacute;n oxidativa contribuye a fenot&iacute;picas cambios caracter&iacute;sticos de fibroblastos humanos senescentes. Para determinar si este mecanismo podr&iacute;a conservarse en evoluci&oacute;n, se abord&oacute; tambi&eacute;n la influencia de desacoplamiento mitocondrial en vida replicativa de las c&eacute;lulas de levadura. Similar a nuestros hallazgos en fibroblastos humanos, parciales desacoplar del phsophorylation oxidativo en las c&eacute;lulas de levadura que condujo a una disminuci&oacute;n sustancial en la vida de la madre-celular-espec&iacute;fico y una concomitante incrase en ROS, indicando ese acortamiento de la vida &uacute;til de desacoplamiento mitocondrial suave puede representar un mecanismo de &quot;p&uacute;blico&quot; del envejecimiento.

Desacoplamiento parcial de la fosforilaci&oacute;n oxidativa induce la senescencia prematura en fibroblastos humanos y c&eacute;lulas de levadura madre.

Las c&eacute;lulas madre mesenquimales (MSC) son capaces de diferenciarse en hueso, grasa, cart&iacute;lago, tend&oacute;n y otras c&eacute;lulas progenitoras de &oacute;rgano. A pesar de la abundancia de MSC en el organismo, poco se conoce acerca de sus propiedades en vivo o sobre sus nichos en vivo correspondientes. Por lo tanto se aislaron MSC de biopsias de hueso esponjoso (esponjoso) de adultos sanos. En comparaci&oacute;n con la m&eacute;dula circundante, cuatro veces mayor n&uacute;mero de formadoras de colonias unidades fue encontrada dentro de la red apretada de la superficie del hueso trabecular. En estos sitios, gama de concentraciones de ox&iacute;geno de 1% a 7%. En MSC cultivada en ox&iacute;geno tan baja como 3%, las tasas de muerte celular y transcripci&oacute;n gen&eacute;tica inducida por hipoxia permanecieron sin cambios, mientras que vida proliferativa in vitro aument&oacute; significativamente, con unos 10 doblajes de poblaci&oacute;n adicional antes de llegar a la detenci&oacute;n de crecimiento terminal. Sin embargo, la capacidad de diferenciaci&oacute;n en la progenie de adipogenic fue disminuida y diferenciaci&oacute;n osteog&eacute;nica no era perceptible en el 3% de ox&iacute;geno. A su vez, MSC que previamente hab&iacute;a sido cultivada en el 3% de ox&iacute;geno posteriormente podr&iacute;a ser estimulado para distinguir con &eacute;xito en 20% de ox&iacute;geno. Estos datos soporte nuestro preliminar encontrar primaria MSC se enriquecen en la superficie del hueso esponjoso. Niveles bajos de ox&iacute;geno en esta ubicaci&oacute;n proporcionan un entorno que extiende la vida &uacute;til celular y adem&aacute;s es instructivo para la troncalidad de MSC permitiendo la proliferaci&oacute;n sobre el est&iacute;mulo al suprimir la diferenciaci&oacute;n.

Tensi&oacute;n de ox&iacute;geno reducido aten&uacute;a la capacidad de diferenciaci&oacute;n de c&eacute;lulas madre mesenquimales humanas y prolonga su vida &uacute;til.

&#x9AA8;&#x9AD3;&#x95F4;&#x5145;&#x8D28;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE; (MSC) &#x90FD;&#x80FD;&#x5206;&#x5316;&#x4E3A;&#x9AA8;&#x3001; &#x8102;&#x80AA;&#x3001; &#x8F6F;&#x9AA8;&#x3001; &#x808C;&#x8171;&#x548C;&#x5176;&#x4ED6;&#x5668;&#x5B98;&#x7684;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x751F;&#x7269;&#x4F53;&#x5185;&#x7684; MSC &#x4E30;&#x5EA6;&#xFF0C;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x9C9C;&#x4E3A;&#x4EBA;&#x77E5;&#x7684;&#x6709;&#x5173;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x5C5E;&#x6027;&#x6216;&#x5176;&#x76F8;&#x5E94;&#x7684;&#x4F53;&#x5185;&#x58C1;&#x9F9B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x56E0;&#x6B64;&#x5206;&#x79BB; MSC &#x6D77;&#x7EF5;&#x72B6; &#xFF08;&#x9AA8;&#xFF09; &#x6D3B;&#x68C0;&#x7684;&#x5065;&#x5EB7;&#x6210;&#x4EBA;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x5468;&#x56F4;&#x7684;&#x9AA8;&#x9AD3;&#xFF0C;4 &#x500D;&#x9AD8;&#x4E00;&#x4E9B;&#x7684;&#x96C6;&#x843D;&#x5F62;&#x6210;&#x5355;&#x4F4D;&#x5185;&#x7684;&#x9AA8;&#x5C0F;&#x6881;&#x8868;&#x9762;&#x7D27;&#x7F51;&#x7EDC;&#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5730;&#x70B9;&#xFF0C;&#x6C27;&#x6D53;&#x5EA6;&#x8303;&#x56F4;&#x4E3A;&#x4ECE; 1%&#x5230; 7%&#x3002;MSC &#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x4F4E;&#x81F3; 3%&#x7684;&#x6C27;&#x6C14;&#xFF0C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x548C;&#x4F4E;&#x6C27;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x5F55;&#x7387;&#x4FDD;&#x6301;&#x4E0D;&#x53D8;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x4F53;&#x5916;&#x589E;&#x6B96;&#x5BFF;&#x547D;&#x5927;&#x5927;&#x589E;&#x52A0;&#xFF0C;&#x7EA6; 10 &#x989D;&#x5916;&#x4EBA;&#x53E3;&#x5E76;&#x5408;&#x6570;&#x5230;&#x8FBE;&#x7EC8;&#x7AEF;&#x589E;&#x957F;&#x902E;&#x6355;&#x524D;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5230;&#x540E;&#x4EE3;&#x6210;&#x8102;&#x5206;&#x5316;&#x80FD;&#x529B;&#x88AB;&#x524A;&#x5F31;&#xFF0C;&#x6CA1;&#x6709;&#x5411;&#x6210;&#x9AA8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x662F;&#x5728; 3%&#x6C27;&#x6C14;&#x63A2;&#x6D4B;&#x3002;&#x53CD;&#x8FC7;&#x6765;&#xFF0C;&#x968F;&#x540E;&#x53EF;&#x4EE5;&#x523A;&#x6FC0;&#x4E86;&#x4EE5;&#x524D; 3%&#x6C27;&#x6C14;&#x5728;&#x4F53;&#x5916;&#x57F9;&#x517B;&#x7684;&#x7855;&#x58EB;&#x6210;&#x529F;&#x5206;&#x5316;&#x5728; 20%&#x7684;&#x6C27;&#x6C14;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x652F;&#x6301;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x521D;&#x6B65;&#x7ED3;&#x679C;&#x7684;&#x9996;&#x8981; MSC &#x6D53;&#x7F29;&#x5728;&#x677E;&#x8D28;&#x9AA8;&#x7684;&#x8868;&#x9762;&#x3002;&#x6B64;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F4E;&#x6C27;&#x6C34;&#x5E73;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E00;&#x4E2A;&#x73AF;&#x5883;&#xFF0C;&#x5EF6;&#x957F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5BFF;&#x547D;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E14;&#x662F;&#x6709;&#x6559;&#x80B2;&#x610F;&#x4E49;&#x7684; MSC stemness &#x5141;&#x8BB8;&#x540E;&#x523A;&#x6FC0;&#x540C;&#x65F6;&#x6291;&#x5236;&#x5206;&#x5316;&#x589E;&#x6B96;&#x3002;

&#x51CF;&#x5C11;&#x7684;&#x6C27;&#x5F20;&#x529B;&#x6291;&#x5236;&#x9AA8;&#x9AD3;&#x95F4;&#x5145;&#x8D28;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5B9A;&#x5411;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x5E76;&#x5EF6;&#x957F;&#x5176;&#x4F7F;&#x7528;&#x5BFF;&#x547D;&#x3002;

Mesenchymal stem cells (MSC) are capable of differentiating into bone, fat, cartilage, tendon and other organ progenitor cells. Despite the abundance of MSC within the organism, little is known about their in vivo properties or about their corresponding in vivo niches. We therefore isolated MSC from spongy (cancellous) bone biopsies of healthy adults. When compared with the surrounding marrow, a fourfold higher number of colony-forming units was found within the tight meshwork of trabecular bone surface. At these sites, oxygen concentrations range from 1% to 7%. In MSC cultured at oxygen as low as 3%, rates for cell death and hypoxia-induced gene transcription remained unchanged, while in vitro proliferative lifespan was significantly increased, with about 10 additional population doublings before reaching terminal growth arrest. However, differentiation capacity into adipogenic progeny was diminished and no osteogenic differentiation was detectable at 3% oxygen. In turn, MSC that had previously been cultured at 3% oxygen could subsequently be stimulated to successfully differentiate at 20% oxygen. These data support our preliminary finding that primary MSC are enriched at the surface of spongy bone. Low oxygen levels in this location provide a milieu that extends cellular lifespan and furthermore is instructive for the stemness of MSC allowing proliferation upon stimulation while suppressing differentiation.

Reduced oxygen tension attenuates differentiation capacity of human mesenchymal stem cells and prolongs their lifespan.

Cellules souches m&eacute;senchymateuses (CSM) sont capables de faire la diff&eacute;rence en os, graisse, cartilages, tendon et autres cellules prog&eacute;nitrices de l&#39;organe. Malgr&eacute; l&#39;abondance du SMC au sein de l&#39;organisme, on conna&icirc;t leurs propri&eacute;t&eacute;s in vivo ou de leurs niches in vivo correspondantes. Nous avons donc isol&eacute; MSC de biopsies de l&#39;os spongieux (spongieux) des adultes en bonne sant&eacute;. En comparaison avec la moelle environnante, un plus grand nombre par quatre formant des colonies unit&eacute;s a &eacute;t&eacute; trouv&eacute; dans le maillage serr&eacute; de la surface de l&#39;os trab&eacute;culaire. &Agrave; ces endroits, la gamme de concentrations d&#39;oxyg&egrave;ne de 1 % &agrave; 7 %. Chez MSC cultiv&eacute;e &agrave; aussi peu que 3 % d&#39;oxyg&egrave;ne, taux de mort cellulaire et la transcription des g&egrave;nes induits par l&#39;hypoxie sont demeur&eacute;es inchang&eacute;es, tandis que la dur&eacute;e de vie prolif&eacute;rative in vitro a augment&eacute; significativement, avec environ 10 doublements de population suppl&eacute;mentaire avant d&#39;arriver &agrave; l&#39;arrestation de croissance terminale. Cependant, capacit&eacute; de diff&eacute;renciation dans la prog&eacute;niture adipocytaire est diminu&eacute;e et aucune diff&eacute;renciation ost&eacute;og&eacute;nique n&#39;est d&eacute;celable &agrave; 3 % d&#39;oxyg&egrave;ne. &Agrave; son tour, MSC qui avait pr&eacute;c&eacute;demment &eacute;t&eacute; cultiv&eacute;e &agrave; 3 % d&#39;oxyg&egrave;ne pourrait ult&eacute;rieurement &ecirc;tre stimul&eacute;e pour diff&eacute;rencier avec succ&egrave;s &agrave; 20 % d&#39;oxyg&egrave;ne. Ces soutien de donn&eacute;es nos pr&eacute;liminaires concluant que primaire MSC sont enrichies &agrave; la surface de l&#39;os spongieux. Faibles niveaux d&#39;oxyg&egrave;ne dans cet emplacement fournissent un milieu qui prolonge la dur&eacute;e de vie cellulaire et en outre est instructif pour le stemness du SMC permettant la prolif&eacute;ration lors de la stimulation tout en supprimant la diff&eacute;renciation.

Tension r&eacute;duite d&#39;oxyg&egrave;ne att&eacute;nue la capacit&eacute; de diff&eacute;renciation des cellules souches m&eacute;senchymateuses humaines et prolonge leur dur&eacute;e de vie.

Mesenchymaler Stammzellen (MSC) sind in der Lage, in Knochen, Fett, Knorpel, Sehnen und andere Orgel-Vorl&auml;uferzellen zu unterscheiden. Trotz der F&uuml;lle von MSC innerhalb des Organismus ist wenig &uuml;ber ihre in-vivo-Eigenschaften oder ihre entsprechenden in-vivo-Nischen bekannt. Wir daher isoliert MSC aus schwammig (Spongiosa) Biopsien von gesunden Erwachsenen. Im Vergleich zu den umliegenden Knochenmark, eine vierfache h&ouml;here Anzahl von Kolonienbildende Einheiten innerhalb der engen Geflecht der trabekul&auml;ren Knochenoberfl&auml;che gefunden wurde. An diesen Standorten, Sauerstoff-Konzentrationen reichen von 1 % bis 7 %. Im MSC kultiviert an Sauerstoff so niedrig wie 3 % unver&auml;ndert Preise f&uuml;r Zelltod und Hypoxie-induzierten gen-Transkription, w&auml;hrend in-vitro-proliferative Lebensdauer deutlich erh&ouml;ht wurde, mit ca. 10 zus&auml;tzliche Bev&ouml;lkerung Verdoppelungen vor terminal Wachstumanhalten erreichen. Allerdings Differenzierung F&auml;higkeit in Adipogenic Nachkommenschaft gemindert wurde und keine osteogenen Differenzierung war nachweisbar bei 3 % Sauerstoff. Wiederum konnte MSC, die zuvor bei 3 % Sauerstoff kultiviert wurde, hatte anschlie&szlig;end stimuliert werden, um erfolgreich bei 20 % Sauerstoff zu unterscheiden. Diese Daten unterst&uuml;tzen unsere vorl&auml;ufige Feststellung, dass prim&auml;re MSC werden an der Oberfl&auml;che des schwammigen Knochen angereichert. Niedrigen Sauerstoffgehalt in dieser Lage sorgt ein Milieu, das zellul&auml;re Lebensdauer erweitert und au&szlig;erdem ist aufschlussreich f&uuml;r die Stemness des MSC erlaubt Verbreitung auf Anregung w&auml;hrend unterdr&uuml;ckt Differenzierung.

Reduzierte Sauerstoff Spannung d&auml;mpft Differenzierung Kapazit&auml;t menschlicher mesenchymaler Stammzellen und ihre Lebensdauer verl&auml;ngert.

Cellule staminali mesenchimali (MSC) sono in grado di differenziare in osso, grasso, cartilagine, tendini e altre cellule progenitrici di organo. Nonostante l&#39;abbondanza di MSC all&#39;interno dell&#39;organismo, poco si sa sulle loro propriet&agrave; in vivo o su loro corrispondenti nicchie in vivo. Abbiamo pertanto isolato MSC da biopsie di osso spugnoso (spugnoso) di adulti sani. Quando confrontato con il midollo circostante, un numero quattro volte maggiore di formanti unit&agrave; &egrave; stato trovato all&#39;interno del trabecolato stretto della superficie ossea trabecolare. In questi siti, intervallo di concentrazioni di ossigeno dall&#39;1% al 7%. Nella MSC coltivate a basso quanto 3% di ossigeno, tariffe per la trascrizione genica indotta da ipossia e morte delle cellule &egrave; rimasta invariate, mentre &egrave; stato aumentato significativamente durata proliferativa in vitro, con circa 10 accoppiamenti popolazione supplementare prima di raggiungere l&#39;arresto di sviluppo terminale. Tuttavia, &egrave; stata diminuita capacit&agrave; di differenziazione nella progenie di adipogenic e nessuna differenziazione osteogeniche era rilevabile al 3% di ossigeno. A sua volta, MSC che in precedenza era stata colta al 3% di ossigeno potrebbe essere stimolato successivamente differenziare correttamente al 20% di ossigeno. Questi dati supporto nostro preliminare constatazione primaria MSC sono arricchiti alla superficie dell&#39;osso spugnoso. Bassi livelli di ossigeno in questa sede forniscono un milieu che estende la durata della vita cellulare ed inoltre &egrave; istruttivo per la stemness di MSC permettendo la proliferazione dopo stimolazione mentre sopprimere la differenziazione.

Tensione di ossigeno ridotto attenua la capacit&agrave; di differenziazione delle cellule staminali mesenchimali umane e prolunga la durata della loro vita.

&#x9593;&#x8449;&#x7CFB;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE; &#xFF08;MSC&#xFF09; &#x306F;&#x3001;&#x9AA8;&#x3001;&#x8102;&#x80AA;&#x3001;&#x8EDF;&#x9AA8;&#x3001;&#x8171;&#x3068;&#x4ED6;&#x81D3;&#x5668;&#x306E;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x533A;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x3067;&#x306E; MSC &#x306E;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306B;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B; in vivo &#x3067;&#x306E;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C1;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E; in vivo &#x3067;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D1;&#x30C6;&#x30A3;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066; MSC &#x5065;&#x5EB7;&#x306A;&#x5927;&#x4EBA;&#x306E;&#x30B9;&#x30DD;&#x30F3;&#x30B8; &#xFF08;&#x6D77;&#x7DBF;&#xFF09; &#x9AA8;&#x751F;&#x691C;&#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x96E2;&#x3002;&#x5468;&#x56F2;&#x306E;&#x9AA8;&#x9AC4;&#x3067;&#x306F;&#x3001;4 &#x500D;&#x3088;&#x308A;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30A4;&#x30C8;&#x306A;&#x6D77;&#x7DBF;&#x9AA8;&#x8868;&#x9762;&#x306E;&#x7DB2;&#x76EE;&#x5185;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3067;&#x306F;&#x3001;1 &#xFF05; &#x304B;&#x3089; 7 &#xFF05; &#x306E;&#x9178;&#x7D20;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x7BC4;&#x56F2;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30BF;&#x30FC;&#x30DF;&#x30CA;&#x30EB;&#x6210;&#x9577;&#x902E;&#x6355;&#x306B;&#x9054;&#x3059;&#x308B;&#x524D;&#x306B;&#x7D04; 10 &#x306E;&#x8FFD;&#x52A0;&#x4EBA;&#x53E3; doublings &#x3068; in vitro &#x5897;&#x6B96;&#x5BFF;&#x547D;&#x304C;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x4E00;&#x65B9;&#x3067;&#x9178;&#x7D20; 3 &#xFF05; &#x3068;&#x4F4E;&#x304F;&#x57F9;&#x990A; MSC &#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x7387;&#x306F;&#x4F4E;&#x9178;&#x7D20;&#x8A98;&#x5C0E;&#x6027;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x3001;&#x6A2A;&#x9019;&#x3044;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x5206;&#x5316;&#x80FD;&#x529B;&#x8102;&#x80AA;&#x5206;&#x5316;&#x6B21;&#x4EE3;&#x306B;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x3001;&#x9AA8;&#x5206;&#x5316;&#x304C; 3 &#xFF05; &#x9178;&#x7D20;&#x3067;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x306A;&#x3044;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3067;&#x306F;&#x3001;3 &#xFF05; &#x9178;&#x7D20;&#x3067;&#x524D;&#x57F9;&#x990A;&#x3057;&#x305F; MSC &#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x3001;&#x6B63;&#x5E38;&#x306B; 20 &#xFF05; &#x306E;&#x9178;&#x7D20;&#x3067;&#x533A;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x523A;&#x6FC0;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3002;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA;&#x3092;&#x898B;&#x3064;&#x3051;&#x308B;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x4E88;&#x5099; MSC &#x5BCC;&#x307E;&#x6D77;&#x7DBF;&#x9AA8;&#x8868;&#x9762;&#x3067;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306E;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3002;&#x4F4E;&#x9178;&#x7D20;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3053;&#x306E;&#x5834;&#x6240;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5897;&#x6B96;&#x523A;&#x6FC0;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5206;&#x5316;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5BFF;&#x547D;&#x3092;&#x62E1;&#x5F35;&#x3057;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B; MSC &#x306E;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x6027;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6709;&#x76CA;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x74B0;&#x5883;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x4F4E;&#x9178;&#x7D20;&#x5F35;&#x529B;&#x30D2;&#x30C8;&#x9593;&#x8449;&#x7CFB;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x6E1B;&#x8870;&#x3057;&#x3066;&#x81EA;&#x5206;&#x306E;&#x5BFF;&#x547D;&#x3092;&#x5EF6;&#x3070;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

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&#xAC10;&#xC18C; &#xC0B0;&#xC18C; &#xAE34;&#xC7A5; &#xC778;&#xAC04; &#xC911;&#xAC04; &#xC5FD; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xBD84;&#xD654; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xC57D;&#xD654; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC218;&#xBA85;&#xC744; &#xC5F0;&#xC7A5;.

&#x7EC6;&#x80DE;&#x8870;&#x8001;&#x73B0;&#x5728;&#x88AB;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x80BF;&#x7624;&#x6291;&#x5236;&#x673A;&#x5236;&#x548C;&#x8870;&#x8001;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x79EF;&#x7D2F;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F5C;&#x51FA;&#x8D21;&#x732E;&#x7684;&#x5404;&#x79CD;&#x4EBA;&#x4F53;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x8001;&#x5316;&#x3002;&#x7EC6;&#x80DE;&#x80FD;&#x91CF;&#x4EE3;&#x8C22;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x88AB;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x662F;&#x80BF;&#x7624;&#x53D1;&#x751F;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x4E8B;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x4E5F;&#x4F17;&#x6240;&#x5468;&#x77E5;&#xFF0C;&#x4F4E;&#x771F;&#x6838;&#x6A21;&#x578B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x8001;&#x5316;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x80FD;&#x91CF;&#x4EE3;&#x8C22;&#x7684;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8870;&#x8001;&#x76F8;&#x5173;&#x53D8;&#x5316;&#x4F7F;&#x7528;&#x4F53;&#x5916;&#x8870;&#x8001;&#x7684;&#x8110;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8870;&#x8001;&#x7EC6;&#x80DE; ATP &#x6C34;&#x5E73;&#x5927;&#x5E45;&#x51CF;&#x5C11;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x7684;&#x6D88;&#x8D39;&#x548C;&#x751F;&#x4EA7;&#x7684;&#x4E73;&#x9178;&#x5927;&#x5927;&#x589E;&#x52A0;&#x8870;&#x8001;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x6CA1;&#x6709;&#x5173;&#x7CFB;&#x627E;&#x4E4B;&#x95F4;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x4EE3;&#x8C22;&#x4EA7;&#x7269;&#x8F6C;&#x5316;&#x7387;&#xFF0C;&#x65E2;&#x4E0D;&#x5E74;&#x8F7B;&#x7684;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x4E5F;&#x4E0D;&#x5728;&#x8870;&#x8001;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5B83;&#x6307;&#x793A;&#x8BE5;&#x7CD6;&#x9175;&#x89E3;&#x4E0D;&#x662F;&#x6700;&#x4E3B;&#x8981;&#x7684;&#x80FD;&#x6E90;&#x6765;&#x6E90;&#x4EBA;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x4E2D;&#x3002;&#x53E6;&#x4E00;&#x65B9;&#x9762;&#xFF0C;&#x8C37;&#x6C28;&#x9170;&#x80FA;&#x6D88;&#x8D39;&#x589E;&#x52A0;&#x8870;&#x8001;&#x8110;&#x4E2D;&#x5E76;&#x4E14;&#x5BFC;&#x81F4;&#x65E9;&#x65E5;&#x901A;&#x8FC7;&#x548C;&#x540E;&#x671F;&#x901A;&#x8FC7;&#x589E;&#x6B96;&#x80FD;&#x529B;&#x5927;&#x5E45;&#x5EA6;&#x51CF;&#x5C11;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5510;&#xFF0C;&#x4E00;&#x79CD;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x8C37;&#x6C28;&#x9170;&#x80FA;&#x9176;&#xFF0C;&#x7531; glutaminolysis &#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x8C37;&#x6C28;&#x9170;&#x80FA;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x8870;&#x8001;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5E74;&#x8F7B;&#x8110;&#x5185;&#x4E24;&#x4E2A;&#x901A;&#x9053;&#x4E2D;&#x3002;&#x5728;&#x4E00;&#x8D77;&#xFF0C;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;glutaminolysis &#x662F;&#x5728;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x4E00;&#x4E2A;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x80FD;&#x6E90;&#x6765;&#x6E90;&#x548C;&#x5728;&#x8FD9;&#x6761;&#x6B65;&#x9053;&#xFF0C;&#x6539;&#x5EFA;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8870;&#x8001;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x8C37;&#x6C28;&#x9170;&#x80FA;&#x9176;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x6240;&#x81F4;&#x7684;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC7;&#x65E9;&#x8870;&#x8001;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;

Cellular senescence is now recognized as an important mechanism of tumor suppression, and the accumulation of senescent cells may contribute to the aging of various human tissues. Alterations of the cellular energy metabolism are considered key events in tumorigenesis and are also known to play an important role for aging processes in lower eukaryotic model systems. In this study, we addressed senescence-associated changes in the energy metabolism of human endothelial cells, using the HUVEC model of in vitro senescence. We observed a drastic reduction in cellular ATP levels in senescent endothelial cells. Although consumption of glucose and production of lactate significantly increased in senescent cells, no correlation was found between both metabolite conversion rates, neither in young endothelial cells nor in the senescent cells, which indicates that glycolysis is not the main energy source in HUVEC. On the other hand, glutamine consumption was increased in senescent HUVEC and inhibition of glutaminolysis by DON, a specific inhibitor of glutaminase, led to a significant reduction in the proliferative capacity of both early passage and late passage cells. Moreover, inhibition of glutaminase activity induced a senescent-like phenotype in young HUVEC within two passages. Together, the data indicate that glutaminolysis is an important energy source in endothelial cells and that alterations in this pathway play a role in endothelial cell senescence.

Premature senescence of human endothelial cells induced by inhibition of glutaminase.

S&eacute;nescence cellulaire est maintenant reconnue comme un important m&eacute;canisme de suppression tumorale et l&#39;accumulation de cellules s&eacute;nescentes peut-&ecirc;tre contribuer au vieillissement des diff&eacute;rents tissus humains. Alt&eacute;rations du m&eacute;tabolisme &eacute;nerg&eacute;tique cellulaire sont consid&eacute;r&eacute;s comme des &eacute;v&eacute;nements cl&eacute;s dans la tumorigen&egrave;se et sont &eacute;galement connues pour jouer un r&ocirc;le important pour le processus de vieillissement dans les syst&egrave;mes eucaryotes mod&egrave;le inf&eacute;rieurs. Dans cette &eacute;tude, nous avons abord&eacute; s&eacute;nescence associ&eacute;e &agrave; des changements dans le m&eacute;tabolisme &eacute;nerg&eacute;tique des cellules endoth&eacute;liales humaines, en utilisant le mod&egrave;le HUVEC de s&eacute;nescence in vitro. Nous avons observ&eacute; une r&eacute;duction drastique des niveaux d&#39;ATP cellulaires dans les cellules endoth&eacute;liales s&eacute;nescentes. Bien que la consommation de glucose et de la production de lactate significativement augment&eacute; dans les cellules s&eacute;nescentes, aucune corr&eacute;lation entre les deux taux de conversion du m&eacute;tabolite, dans les cellules endoth&eacute;liales jeunes ni dans les cellules s&eacute;nescentes, qui indique que la glycolyse n&#39;est pas la principale source d&#39;&eacute;nergie en HUVEC. En revanche, la consommation de glutamine a augment&eacute; chez HUVEC s&eacute;nescente et inhibition de la glutaminolyse de DON, un inhibiteur sp&eacute;cifique de la glutaminase, conduit &agrave; une r&eacute;duction significative de la capacit&eacute; prolif&eacute;rative de passage pr&eacute;coce et tardive passage des cellules. De plus, l&#39;inhibition de l&#39;activit&eacute; de la glutaminase induite par un ph&eacute;notype s&eacute;nescentes ressemblant au jeune HUVEC dans deux passages. Ensemble, les donn&eacute;es indiquent que glutaminolyse est une source importante d&#39;&eacute;nergie dans les cellules endoth&eacute;liales et des alt&eacute;rations que cette voie jouent un r&ocirc;le dans la s&eacute;nescence des cellules endoth&eacute;liales.

S&eacute;nescence pr&eacute;matur&eacute;e des cellules endoth&eacute;liales humaines induites par l&#39;inhibition de la glutaminase.

Zellul&auml;ren Seneszenz wird jetzt als ein wichtiger Mechanismus der Unterdr&uuml;ckung der Tumor erkannt, und die Ansammlung der alternde Zellen kann dazu beitragen, die Alterung der verschiedenen menschlichen Geweben. Ver&auml;nderungen des zellul&auml;ren Energiestoffwechsels gelten als wichtige Ereignisse in der Tumorentstehung und bekannterma&szlig;en auch eine wichtige Rolle f&uuml;r Alterungsprozesse im unteren eukaryotischen Modellsystemen. In dieser Studie behandelt wir altern-assoziierte Ver&auml;nderungen in den Energiestoffwechsel der menschlichen Endothelzellen, mit dem HUVEC-Modell von in-vitro-Altern. Wir beobachteten eine drastische Reduktion der zellul&auml;ren ATP-Konzentrationen in alternde Endothelzellen. Obwohl der Verbrauch von Glukose und Produktion von Laktat in alternde Zellen deutlich erh&ouml;ht, wurde keine Korrelation zwischen beiden Metabolit Conversion-raten, weder junge Endothelzellen noch die alternde Zellen, das angibt, dass die Glykolyse ist nicht die wichtigste Energiequelle in HUVEC gefunden. Auf der anderen Seite, Glutamin Verbrauch stieg in alternde HUVEC und Hemmung der Glutaminolyse von DON, einen spezifischen Inhibitor der Glutaminase, f&uuml;hrte zu einer erheblichen Verringerung der proliferativen Kapazit&auml;t der fr&uuml;hen Durchgang und sp&auml;ten Durchgang Zellen. Dar&uuml;ber hinaus induzierte Hemmung der Glutaminase Aktivit&auml;t einen alternde-&auml;hnlichen Ph&auml;notyp in jungen HUVEC innerhalb zwei Passagen. Zusammen, zeigen die Daten dieser Glutaminolyse ist eine wichtige Energiequelle in Endothelzellen und dass Ver&auml;nderungen in diesem Weg spielen eine Rolle bei endothelial Zellen Altern.

Vorzeitige Alterung des menschlichen Endothelzellen induziert durch Hemmung der Glutaminase.

Senescenza cellulare &egrave; ora riconosciuto come un importante meccanismo di soppressione del tumore e l&#39;accumulo di cellule senescenti possa contribuire all&#39;invecchiamento dei vari tessuti umani. Alterazioni del metabolismo energetico cellulare sono considerati eventi chiave nella tumorigenesi e sono noti anche a giocare un ruolo importante per i processi di invecchiamento in sistemi eucarioti inferiori. In questo studio, abbiamo affrontato la senescenza-associated cambiamenti nel metabolismo energetico delle cellule endoteliali umane, utilizzando il modello HUVEC della senescenza in vitro. Abbiamo osservato una drastica riduzione dei livelli di ATP cellulare nelle cellule endoteliali senescenti. Anche se il consumo di glucosio e la produzione di lattato aumentato significativamente in cellule senescenti, nessuna correlazione &egrave; stata trovata tra due tassi di conversione metabolita, n&eacute; nelle giovani cellule endothelial cellule senescenti, che indica che la glicolisi non &egrave; la principale fonte di energia in HUVEC. D&#39;altra parte, &egrave; stato aumentato consumo di glutamina in HUVEC senescenti e inibizione della glutaminolysis di DON, un inibitore specifico di glutaminase, ha portato ad una significativa riduzione della capacit&agrave; proliferativa di passaggio precoce e tardiva passaggio le cellule. Inoltre, l&#39;inibizione dell&#39;attivit&agrave; di glutaminase indotta da un fenotipo simile senescenti in HUVEC giovani all&#39;interno di due passaggi. Insieme, i dati indicano che glutaminolysis &egrave; una fonte importante di energia nelle cellule endoteliali e che alterazioni in questo percorso un ruolo in senescenza delle cellule endoteliali.

Precoce senescenza delle cellule endoteliali umane indotta dall&#39;inibizione di glutaminase.

&#x7D30;&#x80DE;&#x8001;&#x5316;&#x306F;&#x4ECA;&#x816B;&#x760D;&#x6291;&#x5236;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8A8D;&#x8B58;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x8001;&#x5316;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x306F;&#x3001;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x30D2;&#x30C8;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x9AD8;&#x9F62;&#x5316;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306F;&#x816B;&#x760D;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3068;&#x898B;&#x306A;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x4F4E;&#x3044;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB; &#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x8001;&#x5316;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x518D;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;, in vitro &#x3067;&#x8001;&#x5316;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x6D3B;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x8001;&#x5316;&#x306B;&#x4F34;&#x306A;&#x3046;&#x5909;&#x5316;&#x3072;&#x3068;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x3092;&#x5BFE;&#x51E6;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8001;&#x5316;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E; ATP &#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x5927;&#x5E45;&#x306A;&#x524A;&#x6E1B;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6D88;&#x8CBB;&#x306E;&#x8840;&#x7CD6;&#x5024;&#x3068;&#x4E73;&#x9178;&#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x306B;&#x8001;&#x5316;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x76F8;&#x95A2;&#x4E21;&#x65B9;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x7269;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x30B8;&#x30E7;&#x30F3;&#x7387;&#x306F;&#x3001;&#x82E5;&#x3044;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3082;&#x305D;&#x306E;&#x89E3;&#x7CD6;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x6E90;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3001;&#x8001;&#x5316;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x4E00;&#x65B9;&#x3067;&#x3001;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x6D88;&#x8CBB;&#x8001;&#x5316;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x6D3B;&#x3067;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x3001;glutaminolysis &#x30C9;&#x30F3;&#x3001;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x963B;&#x5BB3;&#x65E9;&#x671F;&#x6210;&#x7ACB;&#x3068;&#x5F8C;&#x534A;&#x306E;&#x901A;&#x8DEF;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x80FD;&#x529B;&#x306E;&#x5927;&#x5E45;&#x524A;&#x6E1B;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x3063;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x306F;&#x8001;&#x5316;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3067; 2 &#x3064;&#x306E;&#x901A;&#x8DEF;&#x5185;&#x306E;&#x82E5;&#x3044;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3001;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x6E90;&#x53CA;&#x3073;&#x305D;&#x306E;&#x5909;&#x66F4;&#x304C;&#x3053;&#x306E;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3067;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x8001;&#x5316;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x305D;&#x306E; glutaminolysis &#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3072;&#x3068;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6642;&#x671F;&#x5C1A;&#x65E9;&#x306E;&#x8001;&#x5316;&#x3002;

&#xC774;&#xC81C; &#xC138;&#xD3EC; &#xB178;&#xD654;&#xB294; &#xC885;&#xC591; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778;&#xC2DD; &#xD558; &#xACE0; &#xB178;&#xD654; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xCD95;&#xC801; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC870;&#xC9C1; &#xB178;&#xD654;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC138;&#xD3EC; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xB300;&#xC0AC;&#xC758; &#xBCC0;&#xACBD; tumorigenesis&#xC5D0; &#xD0A4; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xB85C; &#xAC04;&#xC8FC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC0F; &#xB0AE;&#xC740; &#xC9C4; &#xD575; &#xBAA8;&#xB378; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB178;&#xD654; &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xB610;&#xD55C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB178;&#xD654;&#xC758; HUVEC &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xB300;&#xC0AC; &#xBCC0;&#xD654; &#xB178;&#xD654;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xD574;&#xACB0;. &#xB178;&#xD654; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; ATP &#xB808;&#xBCA8;&#xC758; &#xAE09;&#xACA9; &#xD55C; &#xAC10;&#xC18C;&#xB97C; &#xAD00;&#xCC30;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB178;&#xD654; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9;&#xC758; &#xC18C;&#xBE44;&#xC640; &#xC816; &#xC0B0;&#xC758; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD06C;&#xAC8C; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB450; &#xB300;&#xC0AC; &#xC0B0;&#xBB3C; &#xBCC0;&#xD658; &#xC18D;&#xB3C4;, &#xC80A;&#xC740; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xB3C4; &#xB178;&#xD654; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xADF8; &#xBD84;&#xD574;&#xB294; HUVEC&#xC5D0;&#xC11C; &#xC8FC;&#xC694; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xC6D0; &#xAC04;&#xC758; &#xC0C1;&#xAD00; &#xAD00;&#xACC4;&#xAC00; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB410;&#xB2E4;. &#xB2E4;&#xB978; &#xD55C;&#xD3B8;&#xC73C;&#xB85C;, &#xB178;&#xD654; HUVEC &#xAE00;&#xB8E8;&#xD0C0;&#xBBFC; &#xC18C;&#xBE44;&#xB294; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558; &#xACE0; &#xC5B5;&#xC81C;&#xB85C; &#xB3C8;, glutaminase&#xC758; &#xD2B9;&#xC815; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; glutaminolysis&#xC758; &#xC140; &#xCD08;&#xAE30; &#xD1B5;&#xB85C; &#xBC0F; &#xB2A6;&#xC740; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xC99D;&#xC2DD; &#xB2A5;&#xB825;&#xC5D0; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xAC10;&#xC18C;&#xB97C; &#xC8FC;&#xB3C4;. &#xB610;&#xD55C;, glutaminase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xC800;&#xD574; &#xC80A;&#xC740; HUVEC &#xB450; &#xAD6C;&#xC808; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB178;&#xD654; &#xAC19;&#xC740; &#xD45C;&#xD604; &#xD615;&#xC744; &#xC720;&#xBC1C;. &#xD568;&#xAED8;, &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xD574;&#xB2F9; glutaminolysis&#xC740; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xC6D0; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0;&#xC774; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC5D0; &#xADF8; &#xBCC0;&#xACBD; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xB178;&#xD654;&#xC5D0; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Glutaminase&#xC758; &#xC800;&#xD574;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; &#xC778;&#xAC04; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC870;&#xAE30; &#xB178;&#xD654;.

Senescencia celular es ahora reconocida como un importante mecanismo de supresi&oacute;n tumoral, y la acumulaci&oacute;n de c&eacute;lulas senescentes puede contribuir al envejecimiento de diferentes tejidos humanos. Alteraciones del metabolismo energ&eacute;tico celular son considerados acontecimientos claves en la tumorig&eacute;nesis y tambi&eacute;n se saben que juega un papel importante para los procesos de envejecimiento en sistemas de modelo eucariotas inferiores. En este estudio, nos dirigimos a senescencia asociada a cambios en el metabolismo energ&eacute;tico de las c&eacute;lulas endoteliales humanas, utilizando el modelo HUVEC de senescencia in vitro. Observamos una reducci&oacute;n dr&aacute;stica en los niveles celulares de ATP en c&eacute;lulas endoteliales senescentes. Aunque el consumo de glucosa y la producci&oacute;n de lactato aumentaron significativamente en las c&eacute;lulas senescentes, se encontr&oacute; ninguna correlaci&oacute;n entre ambos tipos de conversi&oacute;n del metabolito, en c&eacute;lulas endoteliales j&oacute;venes ni en las c&eacute;lulas senescentes, que indica que la gluc&oacute;lisis no es la fuente principal de energ&iacute;a en HUVEC. Por el contrario, aument&oacute; el consumo de glutamina en HUVEC senescente e inhibici&oacute;n de glutaminolysis por DON, un inhibidor espec&iacute;fico de la glutaminasa, condujo a una reducci&oacute;n significativa en la capacidad proliferativa de paso temprano y tarde paso las c&eacute;lulas. Por otra parte, inhibici&oacute;n de la actividad de la glutaminasa indujo a senescentes-como fenotipo en HUVEC joven en dos pasos. Juntos, los datos indican que glutaminolysis es una fuente importante de energ&iacute;a en las c&eacute;lulas endoteliales y alteraciones en este camino desempe&ntilde;an un papel en la senescencia de c&eacute;lulas endoteliales.

Senescencia prematura de las c&eacute;lulas endoteliales humanas inducida por la inhibici&oacute;n de la glutaminasa.

&#x4ECE;&#x8F83;&#x4F4E;&#x7684;&#x771F;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5DF2;&#x77E5;&#x7684;&#x4EE3;&#x8C22;&#x7387;&#x548C;&#x4E5F;&#x7684;&#x8001;&#x5316;&#x7387;&#x7531;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x6837;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50; (IGF) &#x7684;&#x4E25;&#x683C;&#x63A7;&#x5236;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x901A;&#x8DEF;&#x3002;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x7406;&#x8BBA;&#x7684;&#x8001;&#x5316;&#x610F;&#x5473;&#x7740;&#x66F4;&#x591A;&#x7684;&#x4EE3;&#x8C22;&#x7387;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x6D3B;&#x52A8;&#x589E;&#x52A0; &#xFF1B;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x751F;&#x4EA7;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#x6C27;&#x7269;&#x79CD;&#x9020;&#x6210;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6539;&#x52A8;&#x4F1A;&#x52A0;&#x5FEB;&#x8870;&#x8001;&#x7684;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x5982;&#x679C;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x6D3B;&#x52A8;&#x53D7;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;/&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x6837;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x4FE1;&#x53F7;&#x5904;&#x7406;&#x95EE;&#x9898;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x4E86;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x786E;&#x5B9A;&#x4F9D;&#x8D56;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x6837;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x5BF9;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7528;&#x4E8E; DU145 &#x524D;&#x5217;&#x817A;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5DF2;&#x77E5;&#x7684;&#x5B8C;&#x597D;&#x7684;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x6837;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x901A;&#x8DEF;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x9AD8;&#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#x7684;&#x547C;&#x5438;&#x6D4B;&#x91CF;&#x6280;&#x672F;&#x89E3;&#x51B3;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x6837;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x5BF9;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x8868;&#x660E;&#x786E;&#x5B9E;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x529F;&#x80FD;&#x7531;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x6837;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3001; &#x89C4;&#x7BA1;&#x548C;&#x547C;&#x5438;&#x4E0A;&#x8C03;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x8981;&#x6C42;&#x78F7;&#x8102;&#x9170;&#x808C;&#x9187; 3-&#x6FC0;&#x9176;/AKT &#x4FE1;&#x53F7;&#xFF0C;&#x4F46;&#x72EC;&#x7ACB;&#x4E8E;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x6837;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x5BF9;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x96C6;&#x4F53;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x76D1;&#x7BA1;&#x76F8;&#x58F0;&#x4E0E;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;/&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x6837;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x529F;&#x80FD;&#x3001; &#x5377;&#x5165;&#x63A7;&#x5236;&#x8001;&#x5316;&#x7684;&#x901F;&#x5EA6;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4E3B;&#x8981;&#x9014;&#x5F84;&#x3002;

&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x6837;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x4FE1;&#x53F7;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x547C;&#x5438;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

From experiments with lower eukaryotes it is known that the metabolic rate and also the rate of aging are tightly controlled by the insulin-like growth factor (IGF)/insulin signal transduction pathway. The mitochondrial theory of aging implies that an increased metabolic rate leads to increased mitochondrial activity; increased production of reactive oxygen species due to these alterations would speed up the aging process. To address the question if mitochondrial activity is influenced by insulin/IGF signaling, we have established an experimental system to determine the influence of IGF-I-dependent signaling on mitochondrial function. We used DU145 prostate cancer cells, known for the intact IGF signal transduction pathway, to address the influence of IGF receptor activation on mitochondrial function by high-resolution respirometry. These experiments revealed that indeed mitochondrial function is regulated by IGF signaling, and up-regulation of respiration seems to require phosphoinositide 3-kinase/AKT signaling, but is independent of IGF effects on cell cycle progression. Collectively these data establish a regulatory cross-talk between insulin/IGF signal transduction and mitochondrial function, two major pathways implicated in controlling the rate of aging.

Insulin-like growth factor-induced signals activate mitochondrial respiration.

Des exp&eacute;riences avec eucaryotes inf&eacute;rieurs, on sait que le taux m&eacute;tabolique, ainsi que le taux de vieillissement sont &eacute;troitement contr&ocirc;l&eacute;s par le facteur de croissance analogue &agrave; l&#39;insuline (IGF) / insuline voie de transduction de signal. La th&eacute;orie mitochondriale du vieillissement implique qu&#39;une augmentation du taux m&eacute;tabolique conduit &agrave; l&#39;augmentation de l&#39;activit&eacute; mitochondriale ; augmentation de la production d&#39;esp&egrave;ces r&eacute;actives de l&#39;oxyg&egrave;ne en raison de ces modifications acc&eacute;l&eacute;rerait le processus de vieillissement. Pour r&eacute;pondre &agrave; la question si l&#39;activit&eacute; mitochondriale est influenc&eacute;e par la signalisation de l&#39;insuline/IGF, nous avons &eacute;tabli un syst&egrave;me exp&eacute;rimental pour d&eacute;terminer l&#39;influence de l&#39;IGF-I-d&eacute;pendante de signalisation sur la fonction mitochondriale. Nous avons utilis&eacute; des cellules de cancer de la prostate DU145, connus pour la voie de transduction de signal IGF intacte, se pour attaquer &agrave; l&#39;influence de l&#39;activation du r&eacute;cepteur IGF sur la fonction mitochondriale en haute r&eacute;solution respirom&eacute;trie. Ces exp&eacute;riences ont r&eacute;v&eacute;l&eacute; que la fonction mitochondriale en effet est r&eacute;glement&eacute;e par l&#39;IGF de signalisation et r&eacute;gulation de la respiration semble exiger phosphoinositide 3-kinase/AKT et signalisation, mais est ind&eacute;pendante des effets de l&#39;IGF sur la progression du cycle cellulaire. Ces donn&eacute;es &eacute;tablissent collectivement une r&eacute;glementation diaphonie entre l&#39;insuline/IGF transduction du signal et de la fonction mitochondriale, deux principales voies impliqu&eacute;es dans le contr&ocirc;le de la vitesse de vieillissement.

Signaux d&#39;induite par le facteur de croissance analogue &agrave; l&#39;insuline activent la respiration mitochondriale.

Aus Experimenten mit niedrigeren Eukaryoten ist bekannt, dass die metabolische Rate und auch die Rate des Alterns von der Insulin-Like Growth Factor (IGF) streng kontrolliert werden / Insulin signal Transduktion Weg. Die mitochondriale Theorie des Alterns impliziert, dass eine erh&ouml;hte Stoffwechselrate zu erh&ouml;hte mitochondriale Aktivit&auml;t f&uuml;hrt; erh&ouml;hte Produktion von reaktive Sauerstoffspezies durch diese Ver&auml;nderungen w&uuml;rde den Alterungsprozess beschleunigen. Um die Frage zu l&ouml;sen wenn Insulin/IGF Signalisierung mitochondriale Aktivit&auml;t beeinflusst ist, haben wir ein Experimentalsystem um zu bestimmen, den Einfluss von IGF-abh&auml;ngigen Signalisierung auf die mitochondriale Funktion etabliert. Wir haben DU145 Prostatakrebszellen, bekannt f&uuml;r die intakt IGF-Signal-Transduktion Pathway, um den Einfluss von IGF-Rezeptor-Aktivierung auf mitochondriale Funktion durch hochaufl&ouml;sende Respirationstest zu adressieren. Diese Experimente ergaben, dass tats&auml;chlich mitochondriale Funktion wird durch IGF signalisieren, und oben-Regulierung der Atmung Phosphoinositide 3-Kinase/AKT Signalisierung erforderlich scheint, sondern ist unabh&auml;ngig von IGF-Auswirkungen auf die Zellzyklusprogression. Gemeinsam schaffen diese Daten eine regulatorische Nebensprechen zwischen Insulin/IGF-Signaltransduktion und mitochondriale Funktion, zwei wichtige Wege, die Kontrolle des Alterns in Verbindung gebracht.

Insulin-wie Wachstum Faktor-induzierten Signale aktivieren mitochondriale Atmung.

Da esperimenti con gli eucarioti inferiori &egrave; noto che il tasso metabolico e anche il tasso di invecchiamento sono strettamente controllati dal fattore di crescita insulino-simile (IGF) insulina pathway di trasduzione del segnale. La teoria mitocondriale dell&#39;invecchiamento implica che un tasso metabolico aumentato conduce all&#39;aumento dell&#39;attivit&agrave; mitocondriale; aumento della produzione di specie reattive dell&#39;ossigeno, a causa di queste alterazioni potrebbe accelerare il processo di invecchiamento. Per risolvere la questione se l&#39;attivit&agrave; mitocondriale &egrave; influenzato da insulina/IGF di segnalazione, abbiamo istituito un sistema sperimentale per determinare l&#39;influenza di IGF-I-dipendente di segnalazione sulla funzione mitocondriale. Abbiamo utilizzato le cellule del cancro alla prostata DU145, note per il pathway di trasduzione di segnale IGF intatto, per affrontare l&#39;influenza dell&#39;attivazione del recettore IGF sulla funzione mitocondriale da respirometry ad alta risoluzione. Questi esperimenti hanno rivelato infatti mitocondriale funzione &egrave; regolata da segnalazione di IGF, che sembra richiedere fosfoinositide 3-chinasi/AKT signaling up-regolazione della respirazione, ma &egrave; indipendente degli effetti IGF sulla progressione del ciclo cellulare. Collettivamente questi dati stabiliscono un regolamentazione cross-talk tra la trasduzione del segnale di insulina/IGF e la funzione mitocondriale, due percorsi principali implicati nel controllo del tasso di invecchiamento.

Insulin-like growth factor-indotta segnali attivano respirazione mitocondriale.

&#x4F4E;&#x3044;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x304B;&#x3089;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x7387;&#x3068;&#x9AD8;&#x9F62;&#x5316;&#x7387;&#x306F;&#x3057;&#x3063;&#x304B;&#x308A;&#x3068;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x69D8;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50; (IGF) &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5236;&#x5FA1;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3092;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;/&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3; &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3002;&#x8001;&#x5316;&#x306E;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x7406;&#x8AD6;&#x5897;&#x52A0;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x7387;&#x304C;&#x5897;&#x52A0;&#x306E;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x6D3B;&#x6027;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x610F;&#x5473;&#x3059;&#x308B;;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x6D3B;&#x6027;&#x9178;&#x7D20;&#x7A2E;&#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x306F;&#x3001;&#x8001;&#x5316;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x30B9;&#x30D4;&#x30FC;&#x30C9;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x3067;&#x3057;&#x3087;&#x3046;&#x3002;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x6D3B;&#x6027;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;/IGF &#x3092;&#x5408;&#x56F3;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x5834;&#x5408;&#x306E;&#x8CEA;&#x554F;&#x306B;&#x5BFE;&#x51E6;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x79C1;&#x9054;&#x306F; IGF &#x4F9D;&#x5B58;&#x578B;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0; &#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x4E0A;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x5224;&#x65AD;&#x3059;&#x308B;&#x5B9F;&#x9A13;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7121;&#x50B7;&#x306E; IGF &#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B; DU145 &#x524D;&#x7ACB;&#x817A;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x9AD8;&#x5206;&#x89E3;&#x80FD; respirometry &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x6A5F;&#x80FD;&#x4E0A; IGF &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x306B;&#x5BFE;&#x51E6;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x78BA;&#x304B;&#x306B;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3001;IGF &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x898F;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3068;&#x547C;&#x5438;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; &#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C1;&#x30C9; 3-&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;/AKT &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3001;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x306E;&#x9032;&#x884C;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059; IGF &#x306E;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7DCF;&#x79F0;&#x3057;&#x3066;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x898F;&#x5236;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9;&#x30C8;&#x30FC;&#x30AF; &#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;/IGF &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x3068;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x6A5F;&#x80FD;&#x9AD8;&#x9F62;&#x5316;&#x7387;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B; 2 &#x3064;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x69D8;&#x5897;&#x6B96;&#x56E0;&#x5B50;&#x8A98;&#x5C0E;&#x4FE1;&#x53F7;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x547C;&#x5438;&#x3092;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC2E0;&#xC9C4; &#xB300;&#xC0AC; &#xC18D;&#xB3C4;&#xB3C4; &#xB178;&#xD654;&#xC758; &#xC18D;&#xB3C4; &#xC778;&#xC290;&#xB9B0; &#xAC19;&#xC740; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; (IGF)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC81C;&#xC5B4; &#xB2E8;&#xB2E8;&#xD788; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xB2E4; &#xB0AE;&#xC740; &#xC9C4;&#xD575;&#xC0DD;&#xBB3C; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC778;&#xC290;&#xB9B0; &#xC2E0;&#xD638; &#xBCC0;&#xD658; &#xD1B5;&#xB85C; /. &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; &#xB178;&#xD654; &#xC774;&#xB860; &#xC758;&#xBBF8; &#xC99D;&#xAC00; &#xB300;&#xC0AC; &#xC728; &#xC99D;&#xAC00; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; &#xD65C;&#xB3D9;; &#xB9AC;&#xB4DC; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBCC0;&#xACBD;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778;&#xD574; &#xBC18;&#xC751; &#xC0B0;&#xC18C; &#xC885;&#xC758; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xC99D;&#xAC00; &#xB178;&#xD654; &#xACFC;&#xC815;&#xC744; &#xC18D;&#xB3C4; &#xAC83; &#xC774;&#xB2E4;. &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC778;&#xC290;&#xB9B0;/IGF &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0; &#xBB38;&#xC81C;&#xB97C; &#xD574;&#xACB0; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC6B0;&#xB9AC; IGF &#xC885;&#xC18D;&#xC801; &#xC2E0;&#xD638; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xD655;&#xC778; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC744; &#xC124;&#xB9BD; &#xD588;&#xB2E4;. DU145 &#xC804;&#xB9BD;&#xC120; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC;, &#xADF8;&#xB300;&#xB85C; IGF &#xC2E0;&#xD638; &#xC804;&#xB2EC; &#xACBD;&#xB85C; &#xB300; &#xD55C; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4; &#xACE0;&#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; respirometry&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; IGF &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC758; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xD574;&#xACB0; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xBC1D;&#xD600; &#xC2E4;&#xC81C;&#xB85C; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC2E0;&#xD638;, IGF&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xADDC;&#xC81C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC0F; &#xD638;&#xD761;&#xC758; &#xC5C5; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xC158; phosphoinositide 3-kinase/AKT &#xC2E0;&#xD638;, &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xAC83; &#xCC98;&#xB7FC; &#xBCF4;&#xC774;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30; &#xC9C4;&#xD589;&#xC5D0; IGF &#xD6A8;&#xACFC;&#xC758; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD1D;&#xCE6D; &#xD558; &#xC5EC; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xC124;&#xC815; &#xC2E0;&#xD638; &#xC804;&#xB2EC; &#xC778;&#xC290;&#xB9B0;/IGF&#xC640; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; &#xAE30;&#xB2A5; &#xB178;&#xD654;&#xC758; &#xC18D;&#xB3C4; &#xC81C;&#xC5B4;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC8FC;&#xC694; &#xACBD;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xADDC;&#xC81C; &#xC7A1;&#xB2F4;.

&#xC778;&#xC290;&#xB9B0; &#xAC19;&#xC740; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; &#xC720;&#xB3C4; &#xC2E0;&#xD638; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; &#xD638;&#xD761;&#xC744; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

De experimentos con eucariotas inferiores se conoce que la tasa metab&oacute;lica y tambi&eacute;n la tasa de envejecimiento son estrechamente controlados por el factor de crecimiento similar a la insulina (IGF) / v&iacute;a de transducci&oacute;n de la se&ntilde;al de insulina. La teor&iacute;a mitocondrial del envejecimiento implica que una mayor tasa metab&oacute;lica conduce al aumento de la actividad mitocondrial; aumento de la producci&oacute;n de especies reactivas de ox&iacute;geno debido a estas alteraciones acelerar&iacute;a el proceso de envejecimiento. Para abordar la cuesti&oacute;n de si la actividad mitocondrial est&aacute; influenciada por la se&ntilde;alizaci&oacute;n de la insulina/IGF, hemos establecido un sistema experimental para determinar la influencia de la se&ntilde;alizaci&oacute;n de IGF--dependiente en la funci&oacute;n mitocondrial. Utilizamos las c&eacute;lulas de c&aacute;ncer de pr&oacute;stata DU145, conocidas por la v&iacute;a de transducci&oacute;n de se&ntilde;al de intacta IGF, para hacer frente a la influencia de la activaci&oacute;n del receptor IGF en la funci&oacute;n mitocondrial por respirometr&iacute;a de alta resoluci&oacute;n. Estos experimentos revelaron que la funci&oacute;n mitocondrial en efecto est&aacute; regulada por la se&ntilde;alizaci&oacute;n de IGF, y parece requerir fosfatidilinositol 3-quinasa/AKT se&ntilde;alizaci&oacute;n para arriba-regulaci&oacute;n de la respiraci&oacute;n, pero es independiente de los efectos IGF en la progresi&oacute;n del ciclo celular. Colectivamente estos datos establecen una reglamentaci&oacute;n diafon&iacute;a entre transduction de la se&ntilde;al de insulina/IGF y la funci&oacute;n mitocondrial, dos v&iacute;as principales implicadas en el control de la tasa de envejecimiento.

Se&ntilde;ales de inducida por el factor de crecimiento insulina-como activan la respiraci&oacute;n mitocondrial.

&#x7EC6;&#x80DE;&#x8870;&#x8001;&#x79F0;&#x4E3A;&#x5BF9;&#x80BF;&#x7624;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#xFF0C;&#x6709;&#x529B;&#x673A;&#x5236;&#x548C;&#x4F53;&#x5916;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8870;&#x8001;&#x4E5F;&#x53CD;&#x6620;&#x4E86;&#x4F53;&#x5185;&#x8001;&#x5316;&#x7684;&#x81F3;&#x5C11;&#x67D0;&#x4E9B;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x8001;&#x5316;&#x7684;&#x81EA;&#x7531;&#x57FA;&#x7406;&#x8BBA;&#x8868;&#x660E;&#x6D3B;&#x6027;&#x6C27;&#x7269;&#x79CD;&#x7684;&#x8001;&#x5316;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8870;&#x8001;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x3002;&#x9664;&#x4E86;&#x6838;&#x9178;&#x53CA;&#x8840;&#x8102;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x635F;&#x5BB3;&#xFF0C;&#x4E5F;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x6C27;&#x5316;&#x4FEE;&#x6539;&#x88AB;&#x63CF;&#x8FF0;&#x4E3A;&#x6F5C;&#x5728;&#x81F4;&#x75C5;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x4E2D;&#x8870;&#x8001;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x540E;&#x4FEE;&#x6539;&#x5728;&#x8870;&#x8001;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x86CB;&#x767D;&#x6307;&#x6807;&#x7684;&#x8EAB;&#x4EFD;&#x4ECD;&#x4E0D;&#x6E05;&#x695A;&#x3002;&#x5728;&#x76EE;&#x524D;&#x7684;&#x901A;&#x4FE1;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5206;&#x6790;&#x4E86;&#x8870;&#x8001;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x76AE;&#x80A4;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x6C27;&#x5316;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x540E;&#x4FEE;&#x6539;&#x7684;&#x53D1;&#x751F;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x4E0E;&#x8870;&#x8001;&#x7684;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#x5728;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7FB0;&#x57FA;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x548C;&#x5E74;&#x9F84;&#x4FEE;&#x6539;&#x6C34;&#x5E73;&#x663E;&#x8457;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528; 2D &#x51DD;&#x80F6;&#x7535;&#x6CF3;&#x548C;&#x514D;&#x75AB;&#x5370;&#x8FF9;&#x53D1;&#x73B0;&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x540C;&#x6E90;&#x86CB;&#x767D; 70 &#x662F;&#x5E74;&#x9F84;&#x4FEE;&#x6539;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x771F;&#x6B63;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;

Hsc70 &#x7684;&#x8870;&#x8001;&#x4EBA;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x5E74;&#x9F84;&#x4FEE;&#x6539;&#x4E3A;&#x76EE;&#x6807;&#x7684;&#x6807;&#x8BC6;&#x3002;

Cellular senescence is known as a potent mechanism of tumor suppression, and cellular senescence in vitro also reflects at least some features of aging in vivo. The Free Radical Theory of aging suggests that reactive oxygen species are important causative agents of aging and cellular senescence. Besides damage of nucleic acids and lipids, also oxidative modifications of proteins have been described as potential causative events in the senescence response. However, the identity of protein targets for post-translational modifications in senescent cells has remained unclear. In the present communication, we analyzed the occurrence of oxidative posttranslational modifications in senescent human endothelial cells and dermal fibroblasts. We found a significant increase in the level of protein carbonyls and AGE modification with senescence in both cell types. Using 2D-Gel electrophoresis and Western Blot we found that heat shock cognate protein 70 is a bona fide target for AGE modification in human fibroblasts.

Identification of Hsc70 as target for AGE modification in senescent human fibroblasts.

S&eacute;nescence cellulaire est connue comme un puissant m&eacute;canisme de suppression tumorale et s&eacute;nescence cellulaire in vitro refl&egrave;te aussi au moins quelques caract&eacute;ristiques de vieillissement in vivo. La th&eacute;orie radicalaire du vieillissement sugg&egrave;re que les esp&egrave;ces r&eacute;actives de l&#39;oxyg&egrave;ne sont des agents &eacute;tiologiques importants de la s&eacute;nescence cellulaire et vieillissement. Outre les d&eacute;g&acirc;ts des lipides et des acides nucl&eacute;iques, &eacute;galement de modifications oxydatives des prot&eacute;ines ont &eacute;t&eacute; d&eacute;crits comme &eacute;ventuels &eacute;v&eacute;nements causatifs dans la r&eacute;ponse de la s&eacute;nescence. Toutefois, l&#39;identit&eacute; des prot&eacute;ines cibles pour des modifications post-traductionnelles dans les cellules s&eacute;nescentes est rest&eacute;e incertaine. Dans la pr&eacute;sente communication, nous avons analys&eacute; la pr&eacute;sence des modifications post-traductionnelles oxydatives dans les cellules endoth&eacute;liales humaines s&eacute;nescentes et fibroblastes dermiques. Nous avons constat&eacute; une augmentation significative du niveau des carbonyles de prot&eacute;ine et de la modification de l&#39;&acirc;ge avec la s&eacute;nescence chez les deux types de cellules. &Agrave; l&#39;aide de l&#39;&eacute;lectrophor&egrave;se sur Gel 2D et le Western Blot, nous avons constat&eacute; que heat shock protein apparent&eacute; 70 est une v&eacute;ritable cible pour modification d&#39;&acirc;ge dans les fibroblastes humains.

Identification de Hsc70 comme cible pour la modification d&#39;&acirc;ge dans les fibroblastes humains s&eacute;nescents.

Zellul&auml;ren Seneszenz ist bekannt als potenter Mechanismus der Tumor Unterdr&uuml;ckung und in-vitro-zellul&auml;ren Seneszenz spiegelt auch zumindest einige Merkmale des Alterns in-vivo. Die freie Radikale-Theorie des Alterns legt nahe, dass reaktive Sauerstoffspezies wichtige Erreger von Alterungs- und zellul&auml;ren Seneszenz sind. Neben Schaden von Nukleins&auml;uren und Lipiden wurden auch oxidative Modifikationen von Proteinen als m&ouml;gliche urs&auml;chliche Ereignisse in der Seneszenz Antwort beschrieben. Die Identit&auml;t des Protein-Ziele f&uuml;r &Uuml;bersetzungs&auml;nderungen in alternde Zellen blieb jedoch unklar. In der vorliegenden Mitteilung analysierten wir das Eintreten des oxidativen posttranslationale Modifikationen der alternde menschliche Endothelzellen und dermalen Fibroblasten. Wir fanden eine deutliche Steigerung des Niveaus der Protein CARBONYLE und Alter &Auml;nderung mit Altern in beiden Zelltypen. Mit 2D Gelelektrophorese und Western Blot fanden wir, dass Hitze Schock cognate Protein 70 ein gutgl&auml;ubiger Ziel f&uuml;r Alter &Auml;nderung in menschlichen Fibroblasten ist.

Kennung des Hsc70 als Ziel f&uuml;r Alter &Auml;nderung in alternde menschliche Fibroblasten.

Senescenza cellulare &egrave; conosciuto come un potente meccanismo di soppressione del tumore e senescenza cellulare in vitro riflette anche almeno alcune caratteristiche dell&#39;invecchiamento in vivo. La teoria del radicale libero di invecchiamento suggerisce che le specie reattive dell&#39;ossigeno sono importanti agenti eziologici della senescenza cellulare e invecchiamento. Oltre ai danni di acidi nucleici e lipidi, anche modifiche ossidativa delle proteine sono state descritte come potenziali eventi causali nella risposta senescenza. Tuttavia, l&#39;identit&agrave; degli obiettivi della proteina per traslazionali nelle cellule senescenti &egrave; rimasta poco chiara. Nella presente comunicazione, abbiamo analizzato la presenza di modifiche di posttranslational ossidativa in cellule endoteliali umane senescenti e fibroblasti dermici. Abbiamo trovato un aumento significativo del livello di carbonyls della proteina e la modifica di et&agrave; con senescenza in entrambi i tipi di cella. Usando 2D-Gel elettroforesi e Western Blot abbiamo scoperto che la proteina di cognate shock termico 70 &egrave; una destinazione bona fide per la modifica di et&agrave; in fibroblasti umani.

Identificazione di Hsc70 come destinazione per la modifica di et&agrave; in fibroblasti umani senescenti.

&#x30BB;&#x30CD;&#x30C3;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B9;&#x816B;&#x760D;&#x6291;&#x5236;&#x306E;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3057;&#x3001;in vitro &#x7D30;&#x80DE;&#x8001;&#x5316;&#x8001;&#x5316; in vivo &#x306E;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x307E;&#x305F;&#x53CD;&#x6620;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8001;&#x5316;&#x306E;&#x30D5;&#x30EA;&#x30FC;&#x30E9;&#x30B8;&#x30AB;&#x30EB;&#x306E;&#x7406;&#x8AD6;&#x306F;&#x3001;&#x6D3B;&#x6027;&#x9178;&#x7D20;&#x7A2E;&#x9AD8;&#x9F62;&#x5316;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x8001;&#x5316;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x75C5;&#x539F;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6838;&#x9178;&#x3068;&#x8102;&#x8CEA;&#x306E;&#x88AB;&#x5BB3;&#x306E;&#x307B;&#x304B;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x9178;&#x5316;&#x7684;&#x4FEE;&#x98FE;&#x8001;&#x5316;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x4F7F;&#x5F79;&#x4E8B;&#x8C61;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8A18;&#x8F09;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x30DD;&#x30B9;&#x30C8;&#x7FFB;&#x8A33;&#x306E;&#x4FEE;&#x6B63;&#x8001;&#x5316;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6A19;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30C7;&#x30F3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C6;&#x30A3;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3053;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x901A;&#x4FE1;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x8001;&#x5316;&#x306E;&#x3072;&#x3068;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3084;&#x771F;&#x76AE;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x9178;&#x5316;&#x7684;&#x4FEE;&#x98FE;&#x306E;&#x767A;&#x751F;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x7A2E;&#x985E;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8001;&#x5316;&#x3068;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x30AB;&#x30EB;&#x30DC;&#x30CB;&#x30EB;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x3068;&#x5E74;&#x9F62;&#x306E;&#x5909;&#x66F4;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x304C;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;2&#x6B21;&#x5143;&#x30B2;&#x30EB;&#x306E;&#x96FB;&#x6C17;&#x6CF3;&#x52D5;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x897F;&#x90E8;&#x306E;&#x3057;&#x307F;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x6211;&#x3005; &#x540C;&#x65CF; hsp 70 &#x5E74;&#x9F62;&#x6539;&#x8CEA;&#x3072;&#x3068;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5584;&#x610F;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;

&#x8001;&#x9F62;&#x3072;&#x3068;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5E74;&#x9F62;&#x306E;&#x4FEE;&#x6B63;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x3066; Hsc70 &#x306E;&#x540C;&#x5B9A;

&#xC138;&#xD3EC; &#xB178;&#xD654;&#xC758; &#xC885;&#xC591; &#xC5B5;&#xC81C;, &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xC774;&#xB77C;&#xACE0; &#xD558; &#xACE0; &#xCCB4; &#xC678; &#xC138;&#xD3EC; &#xB178;&#xD654; &#xB610;&#xD55C; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xB178;&#xD654;&#xC758; &#xC77C;&#xBD80; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xBC18;&#xC601; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC790;&#xC720; &#xB798; &#xB514; &#xCE7C; &#xB178;&#xD654; &#xC774;&#xB860; &#xBC18;&#xC751;&#xC131; &#xC0B0;&#xC18C; &#xC885; &#xB178;&#xD654; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC; &#xB178;&#xD654;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC6D0;&#xC778;&#xC774; &#xB418;&#xB294; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8;&#xB294; &#xB098;&#xC654;&#xB2E4;. &#xC9C0;&#xC9C8; &#xBC0F; &#xD575; &#xC0B0;&#xC758; &#xC190;&#xC0C1;, &#xC678;&#xC5D0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC0B0;&#xD654; &#xC218;&#xC815; &#xC124;&#xBA85; &#xB418;&#xC5B4; &#xB178;&#xD654; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xC6D0;&#xC778; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xB85C;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xD3EC;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBC88;&#xC5ED; &#xC0C1; &#xC218;&#xC815; &#xB178;&#xD654; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB300;&#xC0C1;&#xC758; &#xC815;&#xCCB4;&#xC131; &#xBD88;&#xBD84;&#xBA85; &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xB2E4;. &#xD604;&#xC7AC; &#xD1B5;&#xC2E0; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xB178;&#xD654; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xD53C;&#xBD80; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0B0;&#xD654; posttranslational &#xC218;&#xC815; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xC744; &#xBD84;&#xC11D; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB450; &#xC140; &#xD615;&#xC2DD;&#xC5D0; &#xB178;&#xD654; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xCE74;&#xC640; &#xB098;&#xC774; &#xC218;&#xC815; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD06C;&#xAC8C; &#xC99D;&#xAC00; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xC11C;&#xCABD; &#xC624; &#xC810; &#xBC0F; 2 &#xCC28;&#xC6D0; &#xC824; &#xC804;&#xAE30; &#xC774;&#xB3D9; &#xBC95;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC5F4; &#xCDA9;&#xACA9; &#xB3D9;&#xC871; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; 70&#xC740; &#xC778;&#xAC04; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB098;&#xC774; &#xC218;&#xC815;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD0C0;&#xACE0; &#xB09C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC744; &#xCC3E;&#xC558;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB178;&#xD654; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB098;&#xC774; &#xC218;&#xC815;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; hsc70&#xC758; &#xC2DD;&#xBCC4;.

Senescencia celular es conocida como un potente mecanismo de supresi&oacute;n tumoral, y senescencia celular in vitro tambi&eacute;n refleja al menos algunas de las caracter&iacute;sticas del envejecimiento en vivo. La teor&iacute;a de los radicales libres del envejecimiento sugiere que las especies reactivas del ox&iacute;geno son importantes agentes causales de la senescencia celular y envejecimiento. Adem&aacute;s da&ntilde;o de &aacute;cidos nucleicos y l&iacute;pidos, tambi&eacute;n la modificaci&oacute;n oxidativa de prote&iacute;nas ha sido descrita como posibles eventos causativos en la respuesta de la senescencia. Sin embargo, la identidad de los objetivos de la prote&iacute;na para modificaciones post-traduccionales de c&eacute;lulas senescentes sigue siendo confusa. En la presente comunicaci&oacute;n, analizamos la ocurrencia de modificaciones postraduccionales oxidativos en c&eacute;lulas endoteliales humanas senescentes y fibroblastos d&eacute;rmicos. Encontramos un aumento significativo en el nivel de carbonilos de prote&iacute;na y modificaci&oacute;n de la edad con la senescencia en ambos tipos celulares. Usando 2D-electroforesis y Western Blot encontramos que prote&iacute;na cognado de choque de calor 70 es un objetivo de buena fe para la modificaci&oacute;n de la edad en fibroblastos humanos.

Identificaci&oacute;n de Hsc70 como destino para la modificaci&oacute;n de la edad en fibroblastos humanos senescentes.

&#x8001;&#x5316;&#x7684;&#x81EA;&#x7531;&#x57FA;&#x7406;&#x8BBA;&#x5EFA;&#x8BAE; ROS (&#x6D3B;&#x6027;&#x6C27;) &#x662F;&#x4E3B;&#x8981;&#x9A71;&#x52A8;&#x529B;&#x7684;&#x8001;&#x5316;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E14;&#x8FD8;&#x8BA4;&#x771F;&#x53C2;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8870;&#x8001;&#x3002;&#x9664;&#x4E86;&#x66FE;&#x63CF;&#x8FF0;&#x8FC7;&#x7684;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x547C;&#x5438;&#x94FE;&#xFF0C;ROS &#x7684;&#x66FF;&#x4EE3;&#x6765;&#x6E90;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8870;&#x8001;&#x3002;Noxs (NADPH &#x6C27;&#x5316;&#x9176;&#xFF09; &#x662F;&#x77E5;&#x540D;&#x6765;&#x6E90;&#x8D85;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x6D89;&#x53CA;&#x5178;&#x578B;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x7684;&#x6210;&#x5458;&#x79F0;&#x4E3A; Nox2 &#x8FDB;&#x7A0B;&#x4F5C;&#x51FA;&#x8D21;&#x732E;&#x7684;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3001; &#x6297;&#x83CC;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x8FD1;&#x5E74;&#x6765;&#x975E;&#x541E;&#x566C;&#x540C;&#x7CFB;&#x7269;&#x7684; Nox2 &#x5DF2;&#x786E;&#x5B9A;&#x6240;&#x6D89;&#x53CA;&#x7684;&#x4E3B;&#x673A;&#x9632;&#x5FA1;&#x4EE5;&#x5916;&#x7684;&#x5176;&#x4ED6;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x9176;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x8D85;&#x6C27;&#x9634;&#x79BB;&#x5B50;&#x90FD;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x53D1;&#x6325;&#x4E3B;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7; MAPKs (&#x4E1D;&#x88C2;&#x7D20;&#x6D3B;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176;&#xFF09; &#x548C;&#x5E94;&#x6FC0;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x6FC0;&#x9176;&#x4FE1;&#x53F7;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E5F;&#x53EF;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8870;&#x8001;&#xFF0C;&#x4F17;&#x6240;&#x5468;&#x77E5;&#xFF0C;&#x6D89;&#x53CA;&#x6C27;&#x81EA;&#x7531;&#x57FA;&#x3002;&#x5728;&#x8110; &#xFF08;&#x4EBA;&#x8110;&#x9759;&#x8109;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF09;&#xFF0C;Nox4 &#x4E3B;&#x8981;&#x8868;&#x793A;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5176;&#x8110;&#x590D;&#x5236;&#x8870;&#x8001;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x6709;&#x5F85;&#x9610;&#x660E;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528; shRNA (&#x5C0F;&#x53D1;&#x5939; RNA)-&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x7EC4;&#x5408;&#x5F0F; Nox4&#xFF0C;&#x7275;&#x8FDE;&#x6162;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8F7D;&#x4F53;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5904;&#x7406;&#x95EE;&#x9898;&#x7684;&#x7EC8;&#x8EAB;&#x67AF;&#x7AED; Nox4 &#x5728;&#x8110;&#x4E2D;&#x662F;&#x5426;&#x4F1A;&#x5F71;&#x54CD;&#x8870;&#x8001;&#x7684;&#x8868;&#x578B;&#x3002;&#x7EC4;&#x5408;&#x5F0F; Nox4 &#x540E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x8110;&#x7684;&#x7E41;&#x6B96;&#x4F7F;&#x7528;&#x5BFF;&#x547D;&#x5927;&#x5E45;&#x5EA6;&#x5EF6;&#x957F;&#x3002;&#x5947;&#x602A;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x5E73;&#x5747;&#x7AEF;&#x7C92;&#x957F;&#x5EA6;&#x5927;&#x5927;&#x51CF;&#x5C11; Nox4 &#x67AF;&#x7AED;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E2D;&#x3002;Nox4 &#x6D88;&#x8017;&#x4E86;&#x5BF9; MAPKs &#x548C;&#x5E94;&#x6FC0;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x6FC0;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x65E0;&#x660E;&#x663E;&#x5F71;&#x54CD;&#xFF0C;&#x4F46;&#x51CF;&#x5C11; DNA &#x6C27;&#x5316;&#x635F;&#x4F24;&#x7684;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E; Nox4 &#x6D3B;&#x52A8;&#x589E;&#x52A0;&#x8110;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x635F;&#x5931;&#x7684;&#x7E41;&#x6B96;&#x6F5C;&#x529B;&#xFF0C;&#x81F3;&#x5C11;&#x662F;&#x90E8;&#x5206;&#x72EC;&#x7ACB;&#x7AEF;&#x7C92;&#x81EA;&#x7136;&#x51CF;&#x5458;&#x7684;&#x6C27;&#x5316;&#x635F;&#x4F24;&#x3002;

NADPH &#x6C27;&#x5316;&#x9176; Nox4 &#x9650;&#x5236;&#x590D;&#x5236;&#x4EBA;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5BFF;&#x547D;&#x3002;

The free radical theory of aging proposes that ROS (reactive oxygen species) are major driving forces of aging, and are also critically involved in cellular senescence. Besides the mitochondrial respiratory chain, alternative sources of ROS have been described that might contribute to cellular senescence. Noxs (NADPH oxidases) are well-known sources of superoxide, which contribute to the antimicrobial capabilities of macrophages, a process involving the prototypical member of the family referred to as Nox2. However, in recent years non-phagocytic homologues of Nox2 have been identified that are involved in processes other than the host defence. Superoxide anions produced by these enzymes are believed to play a major role in signalling by MAPKs (mitogen-activated protein kinases) and stress-activated kinases, but could also contribute to cellular senescence, which is known to involve oxygen radicals. In HUVECs (human umbilical vein endothelial cells), Nox4 is predominantly expressed, but its role in replicative senescence of HUVECs remains to be elucidated. Using shRNA (small-hairpin RNA)-mediated knockdown of Nox4, implicating lentiviral vectors, we addressed the question of whether lifelong depletion of Nox4 in HUVECs would influence the senescent phenotype. We found a significant extension of the replicative lifespan of HUVECs upon knockdown of Nox4. Surprisingly, mean telomere length was significantly reduced in Nox4-depleted cells. Nox4 depletion had no discernable influence on the activity of MAPKs and stress-activated kinases, but reduced the degree of oxidative DNA damage. These results suggest that Nox4 activity increases oxidative damage in HUVECs, leading to loss of replicative potential, which is at least partly independent of telomere attrition.

The NADPH oxidase Nox4 restricts the replicative lifespan of human endothelial cells.

La th&eacute;orie radicalaire du vieillissement propose que ROS (reactive oxygen species) sont les principaux &eacute;l&eacute;ments moteurs du vieillissement et sont &eacute;galement gravement impliqu&eacute;s dans la s&eacute;nescence cellulaire. En outre, la cha&icirc;ne respiratoire mitochondriale, les sources alternatives de ROS ont &eacute;t&eacute; d&eacute;crits qui pourraient contribuer &agrave; la s&eacute;nescence cellulaire. Noxs (oxydases NADPH) sont des sources connues de superoxyde, qui contribuent aux capacit&eacute;s antimicrobiennes des macrophages, un processus impliquant le membre prototypique de la famille d&eacute;nomm&eacute; Nox2. Cependant, ces derni&egrave;res ann&eacute;es les homologues non phagocytaires de Nox2 ont &eacute;t&eacute; identifi&eacute;s qui sont impliqu&eacute;s dans des processus autres que la d&eacute;fense de l&#39;h&ocirc;te. Anions superoxydes produites par ces enzymes sont cens&eacute;es jouer un r&ocirc;le majeur dans la signalisation MAPK (mitogen-prot&eacute;ines kinases activ&eacute;es) et kinases activ&eacute;s par le stress, mais pourraient aussi contribuer &agrave; la s&eacute;nescence cellulaire, dont on sait qu&#39;impliquent les radicaux d&#39;oxyg&egrave;ne. Dans les HUVECs (cellules endoth&eacute;liales de veine ombilicale humaine), Nox4 est principalement exprim&eacute;, mais son r&ocirc;le dans la s&eacute;nescence r&eacute;plicative des HUVECs reste &agrave; &eacute;lucider. &Agrave; l&#39;aide de shARN (petit-hairpin RNA)-m&eacute;di&eacute;e par la pr&eacute;cipitation de Nox4, impliquant des vecteurs LENTIVIRAUX, nous avons abord&eacute; la question de savoir si &eacute;puisement continu de Nox4 dans les HUVECs influencerait le ph&eacute;notype s&eacute;nescent. Nous avons trouv&eacute; une extension significative de la dur&eacute;e de vie r&eacute;plicative d&#39;HUVECs sur la pr&eacute;cipitation de Nox4. &Eacute;tonnamment, la longueur moyenne des t&eacute;lom&egrave;res a &eacute;t&eacute; significativement r&eacute;duite dans les cellules Nox4 appauvri. Appauvrissement de nox4 n&#39;avait aucune influence discernable sur l&#39;activit&eacute; des MAPK et kinases activ&eacute;s par le stress, mais r&eacute;duisit le degr&eacute; des dommages oxydatifs &agrave; l&#39;ADN. Ces r&eacute;sultats sugg&egrave;rent que l&#39;activit&eacute; Nox4 augmente les dommages oxydatifs dans HUVECs, conduisant &agrave; la perte de potentiel r&eacute;plicatif, qui est au moins partiellement ind&eacute;pendant de l&#39;attrition des t&eacute;lom&egrave;res.

La NADPH oxydase Nox4 limite la dur&eacute;e de vie r&eacute;plicative de cellules endoth&eacute;liales humaines.

Die freie Radikale-Theorie des Alterns wird vorgeschlagen, dass ROS (reaktive Sauerstoffspezies) wichtige sind Triebkr&auml;fte des Alterns und engagieren sich auch kritisch in der zellul&auml;ren Seneszenz. Neben die Mitochondriale Atmungskette, alternative Energiequellen ROS wurden beschrieben k&ouml;nnte, die zur zellul&auml;ren Seneszenz beitragen. NOXS (NADPH Oxidases) sind bekannte Quellen von Superoxid, die auf die antimikrobiellen Funktionen der Makrophagen, ein Prozess, der das prototypische Mitglied der Familie genannt Nox2 beitragen. Jedoch wurden in den letzten Jahren nicht phagozytische Homologen des Nox2 identifiziert, die in Prozessen als Host Verteidigung beteiligt sind. Superoxid-Anionen, die durch diese Enzyme produziert werden geglaubt, um eine wichtige Rolle in der Signalisierung von MAPKs (Mitogen-aktivierte Proteinkinasen) und Spannung aktivierte Kinasen, sondern k&ouml;nnte auch dazu beitragen, zellul&auml;ren Seneszenz, die bekannt ist, Sauerstoff-Radikale zu beteiligen. In HUVECs (menschliche Nabelschnur Venen Endothelzellen) Nox4 wird &uuml;berwiegend ausgedr&uuml;ckt, aber seine Rolle bei der Zellalterung von HUVECs muss noch gekl&auml;rt werden. Mit ShRNA (klein-Haarnadel RNA)-vermittelte Niederschlag von Nox4, zielbewu&szlig;t Lentivirale Vektoren, wir behandelt die Frage, ob lebenslanges Ersch&ouml;pfung der Nox4 in HUVECs der alternde Ph&auml;notyp beeinflussen w&uuml;rde. Wir fanden eine erhebliche Ausweitung der replicative Lebensdauer von HUVECs nach Niederschlag von Nox4. &Uuml;berraschenderweise war mittlere Telomer-L&auml;nge in Nox4-abgereichertem Zellen deutlich reduziert. Nox4 Ersch&ouml;pfung hatte keinen erkennbaren Einfluss auf die Aktivit&auml;t von MAPKs und Druck aktivierte Kinasen, sondern reduziert den Grad der oxidativen DNA-Sch&auml;den. Diese Ergebnisse legen nahe, dass Nox4 Aktivit&auml;t oxidativen Sch&auml;den in HUVECs steigert, f&uuml;hrt zum Verlust des replicative Potentials, die zumindest teilweise unabh&auml;ngigen Telomer Zerm&uuml;rbungskrieg.

Die NADPH-Oxidase Nox4 schr&auml;nkt die replicative Lebensdauer der menschliche Endothelzellen.

La teoria del radicale libero di invecchiamento propone che i ROS (specie reattive dell&#39;ossigeno) sono importanti alla guida delle forze di invecchiamento e sono anche criticamente coinvolti nella senescenza cellulare. Oltre la catena respiratoria mitocondriale, fonti alternative di ROS sono state descritte che potrebbe contribuire alla senescenza cellulare. Noxs (ossidasi di NADPH) sono ben note fonti del superossido, che contribuiscono alla capacit&agrave; antimicrobica dei macrofagi, un processo che coinvolge il prototipo membro della famiglia indicato come Nox2. Tuttavia, negli ultimi anni non fagocitica omologhi di Nox2 sono stati identificati che sono coinvolti in processi diversi dalla difesa ospite. Gli anioni superossido prodotti da questi enzimi sono creduti di giocare un ruolo importante nella segnalazione di MAPKs (chinasi di proteina mitogene-attivata) e la chinasi attivata da stress, ma potrebbero anche contribuire a senescenza cellulare, che &egrave; noto a coinvolgere i radicali dell&#39;ossigeno. In HUVECs (cellule endoteliali di vena ombelicale umana), Nox4 &egrave; prevalentemente espressa, ma relativo ruolo in senescenza replicativa di HUVECs rimane per essere chiarita. Utilizzo di shRNA (piccolo-hairpin RNA)-mediata atterramento di Nox4, implicando vettori lentivirali, abbiamo affrontato la questione del se permanente deplezione del Nox4 in HUVECs avrebbe influenzato il fenotipo senescente. Abbiamo trovato una significativa estensione della durata replicativa di HUVECs su atterramento di Nox4. Sorprendentemente, lunghezza media telomero era significativamente ridotta nelle cellule Nox4 impoverito. Nox4 esaurimento non aveva alcuna influenza sull&#39;attivit&agrave; di MAPKs e chinasi attivata da stress percepibile, ma riduce il grado di danno ossidativo al DNA. Questi risultati suggeriscono che Nox4 attivit&agrave; aumenta il danno ossidativo in HUVECs, portando alla perdita di potenzialit&agrave; replicativa, che &egrave; almeno in parte indipendente di logoramento telomeri.

Il NADPH ossidasi Nox4 limita la durata della vita replicativa delle cellule endoteliali umane.

&#x8001;&#x5316;&#x306E;&#x30D5;&#x30EA;&#x30FC;&#x30E9;&#x30B8;&#x30AB;&#x30EB;&#x7406;&#x8AD6; ROS (&#x6D3B;&#x6027;&#x9178;&#x7D20;&#x7A2E;) &#x304C;&#x4E3B;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;&#x99C6;&#x52D5;&#x529B;&#x306E;&#x9AD8;&#x9F62;&#x5316;&#x3068;&#x3082;&#x6279;&#x5224;&#x7684;&#x306B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8001;&#x5316;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x547C;&#x5438;&#x9396;&#x3001;ROS &#x306E;&#x4EE3;&#x66FF;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x6E90;&#x3092;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x307B;&#x304B;&#x306E;&#x8AAC;&#x660E;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8001;&#x5316;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3002;Noxs (NADPH &#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;) Nox2 &#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x306E;&#x539F;&#x578B;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x3001;&#x6297;&#x83CC;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3059;&#x308B;&#x30B9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30FC;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C9;&#x306E;&#x65E2;&#x77E5;&#x306E;&#x30BD;&#x30FC;&#x30B9;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x8FD1;&#x5E74;&#x3067;&#x306F;&#x975E;&#x8CAA;&#x98DF;&#x30DB;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B0; Nox2 &#x306E;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x9632;&#x885B;&#x4EE5;&#x5916;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x9175;&#x7D20;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30B9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30FC;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C9;&#x9670;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x306F; map &#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; (&#x30DE;&#x30A4;&#x30C8;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;) &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306B;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x9178;&#x7D20;&#x30E9;&#x30B8;&#x30AB;&#x30EB;&#x3092;&#x4F34;&#x3046;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8001;&#x5316;&#x306B;&#x3082;&#x8CA2;&#x732E;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6BD4;&#x8F03; (&#x3072;&#x3068;&#x81CD;&#x5E2F;&#x9759;&#x8108;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF09;&#x3001;Nox4 &#x306F;&#x4E3B;&#x306B;&#x8868;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x8907;&#x88FD;&#x8001;&#x5316; &#xFF08;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x305D;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x9042;&#x884C;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;ShRNA &#xFF08;&#x5C0F;&#x30D8;&#x30A2;&#x30D4;&#x30F3; RNA&#xFF09; &#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;-&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C1;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x3001;implicating Nox4 &#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3067; Nox4 &#x306E;&#x751F;&#x6DAF;&#x306E;&#x67AF;&#x6E07;&#x306F;&#x8001;&#x9F62;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x306E;&#x8CEA;&#x554F;&#x306B;&#x5BFE;&#x51E6;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F; Nox4 &#x306E;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x6642;&#x6BD4;&#x8F03;&#x306E;&#x5206;&#x88C2;&#x5BFF;&#x547D;&#x306E;&#x5927;&#x5E45;&#x306A;&#x5EF6;&#x9577;&#x304C;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x9A5A;&#x3044;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;&#x5E73;&#x5747;&#x306E;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x306E;&#x9577;&#x3055;&#x306F; Nox4 &#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306F;&#x6709;&#x610F;&#x306B;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Nox4 &#x67AF;&#x6E07; discernable map &#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x306B;&#x306F;&#x5F71;&#x97FF;&#x304C;&#x9178;&#x5316;&#x7684; DNA &#x640D;&#x50B7;&#x306E;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x3092;&#x8EFD;&#x6E1B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Nox4 &#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D3;&#x30C6;&#x30A3;&#x304C;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x9577;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306E;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x8907;&#x88FD;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x640D;&#x5931;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x6BD4;&#x8F03;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x9178;&#x5316;&#x7684;&#x640D;&#x50B7;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

NADPH &#x9178;&#x5316;&#x9175;&#x7D20; Nox4 &#x306F;&#x3072;&#x3068;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x88C2;&#x5BFF;&#x547D;&#x3092;&#x5236;&#x9650;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC120;&#xC0DD;&#xB2D8; (&#xBC18;&#xC751;&#xC131; &#xC0B0;&#xC18C; &#xC885;)&#xB294; &#xC8FC;&#xC694; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xC790;&#xC720; &#xB77C; &#xB514; &#xCE7C; &#xB178;&#xD654; &#xC774;&#xB860; &#xB178;&#xD654;&#xC758; &#xC138;&#xB825;&#xC744; &#xC6B4;&#xC804; &#xD558; &#xACE0;&#xB3C4; &#xBE44;&#xD310;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC138;&#xD3EC; &#xB178;&#xD654;&#xC5D0; &#xAD00;&#xC5EC; &#xD558;&#xB294;. &#xC678;&#xC5D0; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; &#xD638;&#xD761; &#xC0AC;&#xC2AC;, &#xC120;&#xC0DD;&#xB2D8;&#xC758; &#xB300;&#xCCB4; &#xC18C;&#xC2A4; &#xC124;&#xBA85; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC; &#xB178;&#xD654;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Noxs (NADPH oxidases)&#xB294; Nox2 &#xB77C;&#xACE0; &#xD558;&#xB294; &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0;&#xD0C0;&#xC785; &#xBA64;&#xBC84;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC758; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;, &#xD56D;&#xADE0; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD558;&#xB294; superoxide&#xC758; &#xC798; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4; &#xC18C;&#xC2A4;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xCD5C;&#xADFC; &#xBA87; &#xB144; &#xB3D9;&#xC548;&#xC5D0; nox2&#xC758; &#xBE44; phagocytic homologues &#xC2DD;&#xBCC4; &#xB41C; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBC29;&#xC5B4; &#xC774;&#xC678;&#xC758; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C;. Superoxide &#xC74C;&#xC774;&#xC628;&#xC774;&#xC774; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0DD;&#xC131; &#xB41C; MAPKs (&#xBB3C;&#xC9C8; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; kinases) &#xBC0F; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; kinases &#xC2E0;&#xD638; &#xC804;&#xB2EC;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xCD94;&#xC815; &#xB41C;&#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB610;&#xD55C; &#xC0B0;&#xC18C; &#xB798; &#xB514; &#xCE7C;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC138;&#xD3EC; &#xB178;&#xD654;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. HUVECs (&#xC778;&#xAC04; &#xD0EF; &#xC904; &#xC815; &#xB9E5; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;), Nox4 &#xC8FC;&#xB85C; &#xD45C;&#xD604; &#xB41C; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; Huvecs&#xC758; &#xC77C;&#xCC28; &#xB178;&#xD654;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560; &#xD574;&#xBA85; &#xB420; &#xC788;&#xB2E4;. ShRNA (&#xC791;&#xC740; &#xD5E4;&#xC5B4;&#xD540; RNA)&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;-&#xCD5C;&#xC800;&#xC758; &#xC911;&#xC7AC; Nox4, lentiviral &#xBCA1;&#xD130; &#xC5F0;&#xB8E8;&#xC758; &#xC6B0;&#xB9AC; Nox4 Huvecs&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xD3C9;&#xC0DD; &#xACE0;&#xAC08; &#xB178;&#xD654; &#xD45C;&#xD604; &#xD615; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; &#xAC83; &#xC5EC;&#xBD80;&#xC758; &#xC9C8;&#xBB38;&#xC744; &#xD574;&#xACB0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; Nox4 &#xCD5C;&#xC800;&#xC758; &#xC2DC; Huvecs&#xC758; &#xC77C;&#xCC28; &#xC218;&#xBA85;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xD655;&#xC7A5;&#xC744; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xB180;&#xB78D;&#xAC8C;&#xB3C4;, &#xD3C9;&#xADE0; telomere &#xAE38;&#xC774; Nox4 &#xACE0;&#xAC08; &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD06C;&#xAC8C; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4;. Nox4 &#xACE0;&#xAC08; MAPKs &#xBC0F; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; kinases &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xB69C;&#xB837;&#xD55C; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC544;&#xB2C8; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC0B0;&#xD654; DNA &#xC190;&#xC0C1;&#xC758; &#xC815;&#xB3C4; &#xAC10;&#xC18C;. &#xC774; &#xACB0;&#xACFC; Nox4 &#xD65C;&#xB3D9; HUVECs, &#xC77C;&#xCC28; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC740; &#xC801;&#xC5B4;&#xB3C4; &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; telomere &#xC778;&#xC6D0; &#xAC10;&#xC18C;&#xC728;&#xC758; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4;&#xB85C; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9C0;&#xB294; &#xC0B0;&#xD654; &#xC190;&#xC0C1;&#xC744; &#xC99D;&#xAC00; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

NADPH &#xC0B0;&#xD654; &#xD6A8;&#xC18C; Nox4 &#xC778;&#xAC04; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC77C;&#xCC28; &#xC218;&#xBA85;&#xC744; &#xC81C;&#xD55C;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La teor&iacute;a de los radicales libres del envejecimiento propone que los ROS (especies reactivas del ox&iacute;geno) son grandes dinamizadores del envejecimiento y participan tambi&eacute;n cr&iacute;ticamente en senescencia celular. Adem&aacute;s de la cadena respiratoria mitocondrial, fuentes alternativas de ROS se han descrito puede contribuir a la senescencia celular. Noxs (oxidasas NADPH) son fuentes conocidas de super&oacute;xido, que contribuyen a la capacidad antimicrobiana de los macr&oacute;fagos, un proceso que involucra al prototipo miembro de la familia denominada Nox2. Sin embargo, en los &uacute;ltimos a&ntilde;os no fagoc&iacute;ticas hom&oacute;logos de Nox2 se han identificado que participan en procesos que no sea la defensa del hu&eacute;sped. Aniones super&oacute;xido producidas por estas enzimas se creen que juega un papel importante en la se&ntilde;alizaci&oacute;n por MAPKs (quinasas activadas por mit&oacute;genos prote&iacute;na) y quinasas activada por estr&eacute;s, pero tambi&eacute;n podr&iacute;an contribuir a la senescencia celular, lo que se conoce para involucrar a los radicales de ox&iacute;geno. En HUVECs (c&eacute;lulas endoteliales de la vena umbilical humana), Nox4 predominante se expresa, pero su papel en la senescencia replicativa de HUVECs dilucidarse. Usando shRNA (RNA peque&ntilde;o-horquilla)-mediada por la ca&iacute;da de Nox4, implicando vectores lentivirales, abordamos la cuesti&oacute;n de si el agotamiento permanente de Nox4 en HUVECs influyen en el fenotipo senescente. Encontramos una extensi&oacute;n significativa de la vida replicativa de HUVECs sobre la ca&iacute;da de Nox4. Sorprendentemente, la longitud telom&eacute;rica media se redujo significativamente en las c&eacute;lulas Nox4-agotado. Nox4 agotamiento no ten&iacute;a ninguna influencia discernible sobre la actividad de las MAPKs y quinasas activada por estr&eacute;s, pero redujo el grado del da&ntilde;o oxidativo del ADN. Estos resultados sugieren que la actividad de la Nox4 aumenta el da&ntilde;o oxidativo en HUVECs, llevando a la p&eacute;rdida de potencial replicativa, que es al menos parcialmente independiente de desgaste del tel&oacute;mero.

Article	Year
Replicative senescence of human fibroblasts: the role of Ras-dependent signaling and oxidative stress. Experimental gerontology\| PubMed ID: 12470828	2002
Senescence-associated cell death of human endothelial cells: the role of oxidative stress. Experimental gerontology\| PubMed ID: 14580868	2003
Identification of cultivation-independent markers of human endothelial cell senescence in vitro. Biogerontology\| PubMed ID: 17377850	2007
Differential proteomic profiling of mitochondria from Podospora anserina, rat and human reveals distinct patterns of age-related oxidative changes. Experimental gerontology\| PubMed ID: 17689904	2007
Partial uncoupling of oxidative phosphorylation induces premature senescence in human fibroblasts and yeast mother cells. Free radical biology & medicine\| PubMed ID: 17697939	2007
Reduced oxygen tension attenuates differentiation capacity of human mesenchymal stem cells and prolongs their lifespan. Aging cell\| PubMed ID: 17925003	2007
Premature senescence of human endothelial cells induced by inhibition of glutaminase. Biogerontology\| PubMed ID: 18317946	2008
Insulin-like growth factor-induced signals activate mitochondrial respiration. Biotechnology journal\| PubMed ID: 18383021	2008
Identification of Hsc70 as target for AGE modification in senescent human fibroblasts. Biogerontology\| PubMed ID: 19009367	2009
The NADPH oxidase Nox4 restricts the replicative lifespan of human endothelial cells. The Biochemical journal\| PubMed ID: 19681754	2009

Hermann Unterluggauer

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