patch-clamp-capacitance-measurements-ca2-imaging-at-single-nerve

Patch-clamp Capacitance Measurements and Ca<sup>2+</sup> Imaging at Single Nerve Terminals in Retinal Slices

Visual stimuli are detected and conveyed over a wide dynamic range of light intensities and frequency changes by specialized neurons in the vertebrate ...

Oregon Health and Science University

&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x5206;&#x6CCC;&#x4F17;&#x6240;&#x5468;&#x77E5;&#xFF0C;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x589E;&#x52A0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7ECF;&#x6D53;&#x5EA6; ([Ca(2+)](i))&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E; Ca(2+) &#x72EC;&#x7ACB;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x8FD8;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8BF1;&#x53D1;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x5206;&#x6CCC;&#x3002;&#x5728;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x5B8C;&#x6574;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80F0;&#x5C9B;&#x548C; RINm5F &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; C (PKC) &#x6FC0;&#x6D3B;&#x5242;&#x4F5B;&#x6CE2; 12-&#x8089;&#x8C46;&#x853B;&#x9178;&#x916F; 13-&#x4E59;&#x9178;&#x916F; (PMA) &#x6216;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; A &#xFF08;PKA&#xFF09; &#x6FC0;&#x6D3B;&#x5242;&#x773C;&#x538B;&#x5347;&#x9AD8;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x5206;&#x6CCC;&#x6CA1;&#x6709;&#x53D8;&#x5316; [Ca(2+)](i)&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x4FDD;&#x6301; PMA &#x6216;&#x773C;&#x538B;&#x5347;&#x9AD8;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x5206;&#x6CCC;&#x80DE;&#x5916;&#x6216;&#x6E38;&#x79BB;&#x7ECF;&#x88AB;&#x5265;&#x593A;&#x4E86;&#x4E0E;&#x4E59;&#x4E8C;&#x9187; bis(beta-amino ethyl ether)-N&#xFF0C;N&#xFF0C;N &#x7EC6;&#x80DE;&#x6CBB;&#x7597;&#x65F6;&#xFF0C;&#x751A;&#x81F3; &#39;&#xFF0C;N&#39;-&#x4E59;&#x4E8C;&#x80FA;&#x56DB;&#x4E59;&#x9178; (EGTA) &#x6216; 1&#x3001; 2 bis(2-amino phenoxy) &#x4E59;&#x70F7;-N&#xFF0C;N&#xFF0C;N&#39;&#xFF0C;N&#39;-&#x300B; &#x4E59;&#x4E8C;&#x80FA;&#x56DB;&#x9178;&#x56DB; (&#x4E59;&#x9170;&#x6C27;&#x57FA;&#x7532;&#x57FA;&#x916F;) &#xFF08;BAPTA / AM) RINm5F &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x3002;&#x4FC3;&#x6CCC; PMA &#x548C;&#x773C;&#x538B;&#x5347;&#x9AD8;&#x7684;&#x884C;&#x52A8;&#x5206;&#x522B;&#x7531; GF109203X &#x548C; H89&#xFF0C;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x6291;&#x5236; PKC &#x548C; PKA&#xFF0C;&#x88AB;&#x963B;&#x6B62;&#x3002;PMA &#x6CBB;&#x7597;&#x9020;&#x6210; PKC alpha &#x548C; PKC epsilon &#x6613;&#x4F4D;&#x4ECE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x6DB2;&#x819C;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x5C31;&#x610F;&#x5473;&#x7740;&#x6709;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x5730; PKC alpha &#x548C; PKC epsilon &#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#x53EF;&#x80FD;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x5206;&#x6CCC;&#x3002;&#x9AD8; K(+) &#x548C; PMA &#x8054;&#x5408;&#x663E;&#x793A;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x5206;&#x6CCC;&#x7684; PMA &#x5355;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;PMA &#x548C;&#x773C;&#x538B;&#x5347;&#x9AD8;&#x8BF1;&#x53D1;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x5206;&#x6CCC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5B8C;&#x6210; Ca(2+) &#x4F9D;&#x8D56;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x5206;&#x6CCC;&#x4E86;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E; PKC &#x548C; PKA &#x53EF;&#x4EE5;&#x5F15;&#x8D77;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x5206;&#x6CCC;&#x4E0D;&#x53EA;&#x5728; Ca(2+) &#x654F;&#x611F;&#x800C;&#x4E14;&#x5728; Ca(2+) &#x65E0;&#x5173;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x4ECE;&#x5355;&#x72EC;&#x7684;&#x53EF;&#x8C03;&#x6574;&#x6C60;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x3002;

&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; A &#x548C; C &#x8BF1;&#x53D1;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x91CA;&#x653E; Ca2 +-&#x4E0D;&#x533A;&#x5206;&#x6C60;&#x3002;

Insulin secretion is known to depend on an increase in intracellular Ca(2+) concentration ([Ca(2+)](i)). However, recent studies have suggested that insulin secretion can also be evoked in a Ca(2+)-independent manner. In the present study we show that treatment of intact mouse islets and RINm5F cells with protein kinase C (PKC) activator phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) or protein kinase A (PKA) activator forskolin promoted insulin secretion with no changes of [Ca(2+)](i). Moreover, insulin secretion mediated by PMA or forskolin was maintained even when extracellular or cytosolic Ca(2+) was deprived by treatment of cells with ethylene glycol bis(beta-amino ethyl ether)-N,N,N',N'-tetraacetic acid (EGTA) or 1,2-bis(2-amino phenoxy)ethane-N,N,N',N'-tetraacetic acid tetrakis(acetoxy methyl ester) (BAPTA/AM) in RINm5F cells. The secretagogue actions of PMA and forskolin were blocked by GF109203X and H89, selective inhibitors for PKC and PKA, respectively. PMA treatment caused translocation of PKC-alpha and PKC- epsilon from cytosol to membrane, implying that selectively PKC-alpha and PKC- epsilon isoforms might be important for insulin secretion. Co-treatment with high K(+) and PMA showed a comparable level of insulin secretion to that of PMA alone. In addition, PMA and forskolin evoked insulin secretion in cells where Ca(2+)-dependent insulin secretion was completed. Our data suggest that PKC and PKA can elicit insulin secretion not only in a Ca(2+)-sensitive manner but also in a Ca(2+)-independent manner from separate releasable pools.

Protein kinase A- and C-induced insulin release from Ca2+ -insensitive pools.

La s&eacute;cr&eacute;tion d&#39;insuline est connue &agrave; d&eacute;pendre d&#39;une augmentation de la concentration intracellulaire de Ca(2+) ([Ca(2+)](i)). Cependant, des &eacute;tudes r&eacute;centes ont sugg&eacute;r&eacute; que la s&eacute;cr&eacute;tion d&#39;insuline peut aussi &ecirc;tre &eacute;voqu&eacute;e de mani&egrave;re ind&eacute;pendante de la Ca(2+). Dans la pr&eacute;sente &eacute;tude, nous montrons que le traitement des &icirc;lots de souris intactes et RINm5F des cellules avec la prot&eacute;ine kinase C (PKC) activateur phorbol 12-myristate 13-ac&eacute;tate (PMA) ou prot&eacute;ine kinase A (PKA) activateur forskoline promu la s&eacute;cr&eacute;tion d&#39;insuline sans modification de [Ca(2+)](i). En outre, la s&eacute;cr&eacute;tion d&#39;insuline v&eacute;hicul&eacute;e par les PMA ou la forskoline a &eacute;t&eacute; maintenue m&ecirc;me lorsque Ca(2+) extracellulaire ou cytosolique a &eacute;t&eacute; priv&eacute; par traitement des cellules avec l&#39;&eacute;thyl&egrave;ne glycol bis(beta-amino ethyl ether)-N, N, N&#39;, N&#39;-t&eacute;traac&eacute;tique (EGTA) ou bis(2-amino phenoxy)-1, 2 &eacute;thane-N, N, N&#39;, N&#39;-t&eacute;trakis acide t&eacute;traac&eacute;tique (ac&eacute;toxy m&eacute;thylester) (BAPTA / AM) dans les cellules RINm5F. Les actions de s&eacute;cr&eacute;tagogue de l&#39;EGR et la forskoline ont &eacute;t&eacute; bloqu&eacute;es par GF109203X et H89, inhibiteurs s&eacute;lectifs de la PKC et PKA, respectivement. Traitement de PMA caus&eacute; la translocation de la PKC-alpha et de PKC-epsilon du cytosol &agrave; membrane, ce qui implique que s&eacute;lectivement des isoformes PKC-alpha et epsilon-PKC pourrait &ecirc;tre important pour la s&eacute;cr&eacute;tion d&#39;insuline. Cotraitement avec haute k et les PMA ont montr&eacute; un niveau comparable de la s&eacute;cr&eacute;tion d&#39;insuline &agrave; celle des PMA seul. En outre, PMA et la forskoline &eacute;voqu&eacute;e par la s&eacute;cr&eacute;tion d&#39;insuline dans les cellules o&ugrave; la s&eacute;cr&eacute;tion d&#39;insuline Ca(2+)-d&eacute;pendante a &eacute;t&eacute; achev&eacute;e. Nos donn&eacute;es sugg&egrave;rent que PKC et PKA peuvent d&eacute;clencher la s&eacute;cr&eacute;tion d&#39;insuline pas uniquement de mani&egrave;re sensible &agrave; la Ca(2+) mais aussi d&#39;une fa&ccedil;on de Ca(2+)-ind&eacute;pendante de poules lib&eacute;rables distinctes.

Prot&eacute;ine kinase A et C-induite par la lib&eacute;ration d&#39;insuline de Ca2 +-piscines insensibles.

Proteinkinase A-und C-induzierte Insulinfreisetzung aus den Ca2 +-unempfindlich Pools.

Secrezione di insulina &egrave; conosciuta per dipendere da un aumento della concentrazione intracellulare di Ca(2+) ([Ca(2+)](i)). Tuttavia, recenti studi hanno suggerito che la secrezione di insulina pu&ograve; anche essere evocata in modo indipendente dal Ca(2+). Nel presente studio ci mostra che il trattamento degli isolotti del mouse intatto e le cellule RINm5F con protein chinasi C (PKC) attivatore forbolo miristato 12 13-acetato (PMA) o proteina chinasi A (PKA) attivatore forskolina promosso secrezione di insulina con nessun cambiamento di [Ca(2+)](i). Inoltre, la secrezione di insulina mediata da PMA o la forskolina &egrave; stata mantenuta anche quando Ca(2+) extracellulare o citosolica fu tolta dal trattamento delle cellule con glicole etilenico bis(beta-amino ethyl ether)-N, N, N&#39;, N&#39;-acido etilendiamminotetraacetico (EGTA) o 1,2-bis(2-amino phenoxy) etano-N, N, N&#39;, N&#39;-tetrakis acido etilendiamminotetraacetico (acetossi metilestere) (BAPTA / AM) nelle cellule RINm5F. Le azioni secretagogo del PMA e forskolina sono state bloccate da GF109203X e H89, inibitori selettivi per PKC e PKA, rispettivamente. Trattamento di PMA causato traslocazione di PKC-alfa e PKC epsilon dal citosol alla membrana, implicando che selettivamente isoforme di PKC-alfa e PKC epsilon potrebbe essere importante per la secrezione di insulina. Co-Treatment ad alto K(+) e PMA ha mostrato un livello comparabile di secrezione di insulina a quello della PMA da solo. Inoltre, PMA e forskolina evocato la secrezione di insulina nelle cellule dove &egrave; stata completata la secrezione di insulina Ca(2+)-dipendente. I nostri dati suggeriscono che PKC e PKA pu&ograve; suscitare la secrezione di insulina non solo in maniera sensibile Ca(2+) ma anche in maniera indipendente Ca(2+) da piscine rilasciabile separate.

Proteina chinasi A - e C-induced rilascio di insulina da Ca2 +-piscine insensibile.

&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x5206;&#x6CCC;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x6FC3;&#x5EA6; ([Ca(2+)](i)). &#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3059;&#x308B;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;Ca(2+) &#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x5206;&#x6CCC;&#x3092;&#x307E;&#x305F;&#x8A98;&#x767A;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x79C1;&#x9054;&#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x81B5;&#x5CF6;&#x3068; RINm5F &#x7D30;&#x80DE;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; C (PKC) &#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; &#x30DB;&#x30EB;&#x30DC;&#x30FC;&#x30EB; 12-&#x30DF;&#x30EA;&#x30B9;&#x30C1;&#x30F3;&#x9178; 13 &#x30A2;&#x30BB;&#x30C6;&#x30FC;&#x30C8; &#xFF08;PMA&#xFF09; &#x3084;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; A(PKA) &#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; &#x30D5;&#x30A9;&#x30EB;&#x30B9;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3002; &#x306E;&#x5909;&#x66F4;&#x306A;&#x3057;&#x3067;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x5206;&#x6CCC;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x7D30;&#x80DE;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0; &#x30A8;&#x30C1;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B0; bis(beta-amino ethyl ether)-N, N, N &#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x596A;&#x308F;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x5206;&#x6CCC;&#x306E; PMA &#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30D5;&#x30A9;&#x30EB;&#x30B9;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5A92;&#x4ECB;&#x7DAD;&#x6301;&#x3055;&#x308C;&#x305F; &#39;&#x3001;N&#39;-&#x56DB;&#x9162;&#x9178; (&#x80C3;&#x7BA1;&#x5F0F;) &#x307E;&#x305F;&#x306F; 1, 2&#xFF0C; bis(2-amino phenoxy) &#x30A8;&#x30BF;&#x30F3;-N, N, N&#39;, N&#39;-&#x56DB;&#x9178;&#x30C6;&#x30C8;&#x30E9;&#x30AD;&#x30B9; (&#x30A2;&#x30BB;&#x30C8;&#x30AD;&#x30B7; &#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x30A8;&#x30B9;&#x30C6;&#x30EB;&#xFF09; (&#x3053;&#x308C;&#x3089;/&#x5348;&#x524D;&#xFF09; RINm5F &#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x3002;PMA &#x3068;&#x30D5;&#x30A9;&#x30EB;&#x30B9;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x5206;&#x6CCC;&#x4FC3;&#x9032;&#x884C;&#x52D5;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066; GF109203X &#x3068;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x963B;&#x5BB3;&#x85AC; PKC &#x30FB; PKA&#x3001;H89 &#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;PMA &#x6CBB;&#x7642; PKC &alpha; &#x3068; PKC &#x30A4;&#x30D7;&#x30B7;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x8EE2;&#x6D41;&#x304B;&#x3089;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x819C;&#x3092;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x306B; PKC &alpha; &#x3068; PKC &#x30A4;&#x30D7;&#x30B7;&#x30ED;&#x30F3; &#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0; &#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x5206;&#x6CCC;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3059;&#x308B;&#x539F;&#x56E0;&#x3002;Co-treatment &#x9AD8;&#x306B;&#x65BC;&#x3044;&#x3066;&#x3068; PMA &#x3068;&#x540C;&#x7B49;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x5206;&#x6CCC;&#x306F; PMA &#x306B;&#x5358;&#x72EC;&#x3067;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;PMA &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30D5;&#x30A9;&#x30EB;&#x30B9;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3; Ca(2+) &#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x5206;&#x6CCC;&#x304C;&#x5B8C;&#x6210;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x5206;&#x6CCC;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F; PKC &#x30FB; PKA &#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x5206;&#x6CCC;&#x3082;&#x5225;&#x3005; &#x306E;&#x8131;&#x7740;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30D7;&#x30FC;&#x30EB;&#x304B;&#x3089; Ca(2+) &#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067; Ca(2+) &#x306B;&#x654F;&#x611F;&#x306A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x5F15;&#x304D;&#x51FA;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; A &#x3068; C &#x523A;&#x6FC0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x653E;&#x51FA;&#x304B;&#x3089; ca 2 +-&#x533A;&#x5225;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x30D7;&#x30FC;&#x30EB;&#x3002;

&#xC778;&#xC290;&#xB9B0; &#xBD84; &#xBE44; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; Ca(2+) &#xB18D;&#xB3C4; ([Ca(2+)](i)) &#xC99D;&#xAC00;&#xC5D0; &#xC758;&#xC874; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xCD5C;&#xADFC; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xC778;&#xC290;&#xB9B0; &#xBD84; &#xBE44; Ca(2+) &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC16;&#xB294; &#xC218; &#xAC74;&#xC758; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD604;&#xC7AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; &#xADF8;&#xB300;&#xB85C; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xB3C5;&#xB3C4; &#xBC0F; RINm5F &#xC140; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; C (PKC) &#xD65C;&#xC131;&#xAE30; phorbol 12-myristate 13-&#xCD08; &#xC0B0; (PMA) &#xB610;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; A (PKA) &#xD65C;&#xC131;&#xAE30; forskolin&#xC758; &#xCE58;&#xB8CC; [Ca(2+)](i) &#xBCC0;&#xD654; &#xC5C6;&#xC774; &#xC778;&#xC290;&#xB9B0; &#xBD84; &#xBE44;&#xB97C; &#xC2B9;&#xC9C4; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, PMA &#xB610;&#xB294; forskolin &#xC911;&#xC7AC; &#xC778;&#xC290;&#xB9B0; &#xBD84; &#xBE44; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xB610;&#xB294; cytosolic ca(2+)&#xB294; &#xC5D0;&#xD2F8;&#xB80C; &#xAE00;&#xB9AC;&#xCF5C; bis(beta-amino ethyl ether)-N, N, N &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xC140;&#xC758; &#xCC98;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC15;&#xD0C8; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0; &#xC720;&#xC9C0; &#xD588;&#xB2E4; &#39;, N&#39;-tetraacetic &#xC0B0; (EGTA) &#xB610;&#xB294; 1, 2-bis(2-amino phenoxy) &#xD0C4;-N, N, N&#39;, N&#39;-tetraacetic &#xC0B0; tetrakis (acetoxy &#xBA54; &#xD2F8; &#xC5D0;&#xC2A4;&#xD14C; &#xB974;) (BAPTA /) RINm5F &#xC140;&#xC5D0;. PMA&#xC640; forskolin&#xC758; &#xAC04;&#xC811;&#xC801;&#xC778; &#xD589;&#xB3D9; &#xAC01;&#xAC01; GF109203X &#xBC0F; H89, PKC&#xC640; PKA, &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCC28;&#xB2E8; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. PMA &#xCC98;&#xB9AC; &#xB9C9;, &#xC120;&#xD0DD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; PKC-&#xC54C;&#xD30C;&#xC640; PKC epsilon isoforms &#xAC83; &#xC778;&#xC290;&#xB9B0; &#xBD84; &#xBE44;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC554;&#xC2DC;&#xB97C; cytosol&#xC5D0;&#xC11C; PKC-&#xC54C;&#xD30C;&#xC640; PKC epsilon&#xC758; &#xC804; &#xC88C;&#xB97C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB192;&#xC740; K(+)&#xC640; PMA co-treatment &#xD63C;&#xC790; PMA&#xC758; &#xC778;&#xC290;&#xB9B0; &#xBD84; &#xBE44;&#xC758; &#xC720;&#xC0AC;&#xD55C; &#xC218;&#xC900;&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, PMA&#xC640; forskolin Ca(2+) &#xC885;&#xC18D; &#xC778;&#xC290;&#xB9B0; &#xBD84; &#xBE44; &#xC644;&#xB8CC; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC778;&#xC290;&#xB9B0; &#xBD84; &#xBE44;&#xB97C; &#xBD88;&#xB7EC; &#xC77C;&#xC73C;&#xCF30;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; PKA &#xBC0F; PKC &#xAC1C;&#xBCC4; releasable &#xD480;&#xC5D0;&#xC11C; Ca(2+) &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; &#xBC29;&#xC2DD; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; ca(2+)&#xC5D0; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; &#xBC29;&#xC2DD; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC778;&#xC290;&#xB9B0; &#xBD84; &#xBE44;&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4; &#xC218; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; A&#xC640; C&#xB97C; &#xC774;&#xC6A9;&#xD55C; &#xC778;&#xC290;&#xB9B0; &#xCD9C;&#xC2DC;&#xC5D0;&#xC11C; Ca2 +-&#xAD6C;&#xBD84; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294; &#xD480;.

La secreci&oacute;n de insulina se sabe que dependen de un aumento en la concentraci&oacute;n intracelular de CA ([Ca(2+)](i)). Sin embargo, estudios recientes han sugerido que la secreci&oacute;n de insulina tambi&eacute;n puede ser evocada en forma independiente de la Ca(2+). En el presente estudio mostramos que tratamiento de islotes intactos de rat&oacute;n y c&eacute;lulas RINm5F con prote&iacute;na quinasa C (PKC) activador forbol miristato 12 13-acetato (PMA) o prote&iacute;na quinasa A (PKA) activador forskoline promueve la secreci&oacute;n de insulina sin cambios de [Ca(2+)](i). Por otra parte, la secreci&oacute;n de insulina mediada por la PMA o la forskoline se mantuvo incluso cuando CA extracelular o citos&oacute;lica fue privado por el tratamiento de c&eacute;lulas con glicol de etileno bis(beta-amino ethyl ether)-N, N, N&#39;, N&#39;-&aacute;cido etilendiaminotetraac&eacute;tico (EGTA) o 1, 2-bis(2-amino phenoxy)-etano-N, N, N&#39;, N&#39;-tetraac&eacute;tico &aacute;cido tetrakis (&eacute;ster met&iacute;lico de acetoxy) (BAPTA / AM) en c&eacute;lulas RINm5F. Las acciones de secretagogos de PMA y forskoline fueron bloqueadas por GF109203X y H89, inhibidores selectivos de la PKC y PKA, respectivamente. PMA tratamiento caus&oacute; translocaci&oacute;n de PKC-alfa y PKC-&eacute;psilon del citosol a la membrana, lo que implica que selectivamente isoformas de PKC-alfa y PKC-epsilon podr&iacute;an ser importantes para la secreci&oacute;n de insulina. Co-tratamiento con alta capacidad y PMA mostr&oacute; un nivel comparable de la secreci&oacute;n de insulina a la de PMA sola. Adem&aacute;s, el PMA y forskoline evocan secreci&oacute;n de insulina en las c&eacute;lulas donde se complet&oacute; la secreci&oacute;n de insulina dependiente Ca(2+). Nuestros datos sugieren que la PKC y PKA pueden provocar la secreci&oacute;n de insulina no solamente de una manera sensible a la Ca(2+) sino tambi&eacute;n de manera independiente de la Ca(2+) de piscinas liberables.

Prote&iacute;na quinasa A y C-inducida la liberaci&oacute;n de insulina de Ca2 +-piscinas insensibles.

&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5728;&#x51E0;&#x4E2A;&#x80DE;&#x5185;&#x4FE1;&#x53F7;&#x89C4;&#x7BA1;&#x7684;&#x5927;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#xFF0C;&#x4F8B;&#x5982;&#x901A;&#x8FC7;&#x80DE;&#x5410;&#x9ECF;&#x86CB;&#x767D;&#x5206;&#x6CCC;&#x548C;&#x79BB;&#x5B50;&#x901A;&#x8FC7;&#x79BB;&#x5B50;&#x901A;&#x9053;&#x548C;&#x8F6C;&#x8FD0;&#x7684;&#x8FD0;&#x8F93;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x78B3;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x5B89;&#x57F9;&#xFF0C;&#x5148;&#x524D;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x9053;&#x7684;&#x80DE;&#x836F;&#x7406;&#x6D3B;&#x5316;&#x7684;&#x8425;&#x5730;&#x4F9D;&#x8D56;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; (PKA) &#x6216;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; C (PKC)&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x6E38;&#x79BB; Ca2 + &#x6D53;&#x5EA6;&#x7684;&#x589E;&#x52A0;&#x53EF;&#x4EE5;&#x523A;&#x6FC0;&#x5206;&#x6CCC;&#x9897;&#x7C92;&#x7684;&#x72D7;&#x80F0;&#x7BA1;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE; (PDEC) ([Ca2 +] &#x6211;&#xFF09;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4E86;&#x662F;&#x5426;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x80DE;&#xFF0C;&#x8C03;&#x5236;&#x800C;&#x6210;&#x7684;&#x53D7;&#x5185;&#x6E90;&#x6027;&#x4F53;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x589E;&#x52A0;&#x8425;&#x548C; [Ca2 +] &#x4E00;&#x3001; &#x4F4E;&#x6D53;&#x5EA6;&#x7684;&#x4E09;&#x78F7;&#x9178;&#x817A;&#x82F7;&#x6D3B;&#x5316; &#xFF08;&lt; 10 microM&#xFF09; &#x8BF1;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185; Ca2 + &#x632F;&#x8361;&#x4F46;&#x6CA1;&#x6709;&#x91CD;&#x5927;&#x80DE;&#x3002; &#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;100 microM ATP &#x8BF1;&#x5BFC;&#x6301;&#x7EED; [Ca2 +] &#x5347;&#x9AD8;&#xFF0C;&#x5E76;&#x589E;&#x52A0;&#x80DE;&#x7387; 7 &#x500D;&#x3002; Ca2 + &#x6216;&#x80DE;&#x8425;&#x5730;&#x4E4B;&#x8DEF;&#x7684;&#x8D21;&#x732E;&#x901A;&#x8FC7;&#x4F7F;&#x7528; Ca2 + &#x87AF;&#x5408;&#x5242; BAPTA &#x6216; PKA &#x6291;&#x5236;&#x5242; H 89 &#x6216; Rp 8-&#x6EB4;&#x817A;&#x82F7; 3&#39;&#xFF0C;&#x6D4B;&#x8BD5; [Ca2 +] &#x6211;&#x4E0A;&#x5347;&#x6216;&#x6291;&#x5236; PKA &#x7684;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x90E8;&#x5206;&#x51CF;&#x5C11;&#x80DE;; &#x7ED3;&#x5408;&#x4F7F;&#x7528;&#x65F6;&#xFF0C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x5E9F;&#x9664;&#x80DE;.&#x5728;&#x7ED3;&#x8BBA;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x4E09;&#x78F7;&#x9178;&#x817A;&#x82F7;&#x6D53;&#x5EA6; &gt; 10 microM &#x523A;&#x6FC0;&#x80DE;&#x5410;&#x7684; PDEC &#x901A;&#x8FC7; Ca2 + &#x548C;&#x8425;&#x5730;&#x7684;&#x9014;&#x5F84;&#x3002; 5&#39;-&#x73AF; monophosphorothioate&#x3002; &#x53BB;&#x9664;

&#x80DE;&#x560C;&#x5464;&#x80F0;&#x7BA1;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x8C03;&#x8282;&#x3002;

In epithelial cells, several intracellular signals regulate the secretion of large molecules such as mucin via exocytosis and the transport of ions through channels and transporters. Using carbon fiber amperometry, we previously reported that exocytosis of secretory granules in dog pancreatic duct epithelial cells (PDEC) can be stimulated by pharmacological activation of cAMP-dependent protein kinase (PKA) or protein kinase C (PKC), as well as by an increase of intracellular free Ca2+ concentration ([Ca2+]i). In this study, we examined whether exocytosis in these cells is modulated by activation of endogenous P2Y receptors, which increase cAMP and [Ca2+]i. Low concentrations of ATP (<10 microM) induced intracellular Ca2+ oscillation but no significant exocytosis. In contrast, 100 microM ATP induced a sustained [Ca2+]i rise and increased the exocytosis rate sevenfold. The contribution of Ca2+ or cAMP pathways to exocytosis was tested by using the Ca2+ chelator BAPTA or the PKA inhibitors H-89 or Rp-8-bromoadenosine 3',5'-cyclic monophosphorothioate. Removal of [Ca2+]i rise or inhibition of PKA each partially reduced exocytosis; when combined, they abolished exocytosis. In conclusion, ATP at concentrations >10 microM stimulates exocytosis from PDEC through both Ca2+ and cAMP pathways.

Regulation of exocytosis by purinergic receptors in pancreatic duct epithelial cells.

Dans les cellules &eacute;pith&eacute;liales, plusieurs signaux intracellulaires r&eacute;gulent la s&eacute;cr&eacute;tion de grosses mol&eacute;cules comme la mucine par exocytose et le transport des ions &agrave; travers les canaux et les transporteurs. &Agrave; l&#39;aide de fibre de carbone amp&eacute;rom&eacute;trie, nous avons d&eacute;j&agrave; indiqu&eacute; que l&#39;exocytose des granules de s&eacute;cr&eacute;tion pancr&eacute;atique chien cellules &eacute;pith&eacute;liales (PDEC) peuvent &ecirc;tre stimul&eacute;es par l&#39;activation pharmacologique-prot&eacute;ine kinase AMPc d&eacute;pendante (PKA) ou de la prot&eacute;ine kinase C (PKC), ainsi que par une augmentation de concentration Ca2 + libre intracellulaire ([Ca2 +] i). Dans cette &eacute;tude, nous avons examin&eacute; si l&#39;exocytose dans ces cellules est modul&eacute;e par l&#39;activation des r&eacute;cepteurs P2Y endog&egrave;nes, augmenter le cAMP et [Ca2 +] i. faibles concentrations d&#39;ATP (&lt; microM 10) intracellulaire Ca2 + oscillation induite mais pas significatif exocytose. en revanche, 100 microM ATP induit un soutenue [Ca2 +] i rise et acc&eacute;l&eacute;r&eacute; l&#39;exocytose septuple. la contribution de Ca2 + ou camps voies d&#39;exocytose a &eacute;t&eacute; test&eacute;e &agrave; l&#39;aide du ch&eacute;lateur du Ca2 + BAPTA ou les inhibiteurs de la PKA H-89 ou Rp-8-bromoad&eacute;nosine 3 &laquo;, 5 &raquo;-monophosphorothioate cyclique. suppression de [Ca2 +] je prends la parole ou l&#39;inhibition de la PKA chacune partiellement r&eacute;duite exocytose ; lorsqu&#39;il est combin&eacute;, ils ont aboli exocytose. en conclusion, ATP, &agrave; des concentrations &amp;gt; 10 microM stimule l&#39;exocytose de PDEC par Ca2 + et de voies de camps.

R&egrave;glement de l&#39;exocytose de r&eacute;cepteurs purinergiques dans les cellules &eacute;pith&eacute;liales des canaux pancr&eacute;atiques.

Verordnung der Exozytose durch purinerger in Pankreasgang Epithelzellen.

Nelle cellule epiteliali, diversi segnali intracellulari regolano la secrezione di molecole di grandi dimensioni quali la mucina tramite esocitosi e il trasporto di ioni attraverso canali e trasportatori. Utilizzando fibra di carbonio amperometria, abbiamo riferito in precedenza che esocitosi dei granuli secretori nel dotto pancreatico cane cellule epiteliali (PDEC) possono essere stimolate da farmacologico attivazione della chinasi di proteina accampamento-dipendente (PKA) o proteina chinasi C (PKC), nonch&eacute; da un incremento del libero Ca2 + concentrazione intracellulare ([Ca2 +] i). In questo studio, abbiamo esaminato se esocitosi in queste cellule sono modulata dall&#39;attivazione dei recettori endogeni di P2Y, che aumentano il cAMP e [Ca2 +] i. basse concentrazioni di ATP (&lt; 10 microM) intracellulare Ca2 + oscillazione indotta ma nessun significativo esocitosi. In contrasto 100 microM ATP indotta da una sostenuta [Ca2 +] i rise e aumentato il tasso di esocitosi sevenfold. il contributo di Ca2 + o percorsi cAMP per esocitosi &egrave; stato testato utilizzando il Ca2 + chelante BAPTA o gli inibitori PKA H-89 o Rp-8-bromoadenosine 3&#39;, 5&#39;-ciclico monophosphorothioate. rimozione di [Ca2 +] i rise o inibizione della PKA ciascuno parzialmente ridotto esocitosi; quando combinati, hanno abolito esocitosi. In conclusione, ATP a concentrazioni &amp;gt; 10 microM stimola esocitosi da PDEC attraverso il Ca2 + e percorsi cAMP.

Regolamento di esocitosi di recettori purinergici nelle cellule epiteliali del dotto pancreatico.

&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB; &#x30E0;&#x30C1;&#x30F3; &#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x7D4C;&#x7531;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x5206;&#x6CCC;&#x3068;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3; &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB; &#x30FB; &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x8F38;&#x9001;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x70AD;&#x7D20;&#x7E4A;&#x7DAD;&#x3057;&#x305F;&#x96FB;&#x6D41;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x6CD5;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x4EE5;&#x524D;&#x305D;&#x306E;&#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x5831;&#x544A;&#x306E;&#x5206;&#x6CCC;&#x9846;&#x7C92;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x72AC;&#x81B5;&#x7BA1;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE; (PDEC) cAMP &#x4F9D;&#x5B58;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; (PKA) &#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; C (PKC) &#x306E;&#x85AC;&#x7406;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x904A;&#x96E2; ca 2 + &#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x523A;&#x6FC0;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068; ([ca 2 +] &#x79C1;&#x306F;&#xFF09;&#x3002;&#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D7;&#x3068; [ca 2 +] i. &#x4F4E;&#x6FC3;&#x5EA6; ATP &#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3001;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x306E; P2Y &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5909;&#x8ABF;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x691C;&#x8A0E; (&lt; 10 microM) &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185; ca 2 + &#x632F;&#x52D5;&#x304C;&#x306A;&#x3044;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3002; &#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;100 &#x306E; microM ATP &#x8A98;&#x8D77;&#x306F;&#x6301;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A; [ca 2 &#x4E0A;&#x6607;&#x3057;&#x3001;&#x958B;&#x53E3;&#x653E;&#x51FA;&#x7387;&#x3092; 7 &#x500D;&#x5897;&#x52A0; +]&#x3002; ca 2 + &#x3084;&#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D7;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3078;&#x306E;&#x8CA2;&#x732E;&#x3001;ca 2 + &#x30AD;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x5264;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x307E;&#x305F;&#x306F; PKA &#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x3068; H 89 &#x307E;&#x305F;&#x306F; Rp 8 bromoadenosine &#x306B; 3&#39;, 5&#39; &#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;-&#x7E70;&#x8FD4;&#x3057; monophosphorothioate&#x3002; &#x9664;&#x53BB; [ca 2 +] &#x79C1;&#x306F;&#x4E0A;&#x6607;&#x307E;&#x305F;&#x306F; PKA &#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x306F;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x6E1B;&#x5C11;; &#x7D50;&#x5408;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3002; &#x7D50;&#x8AD6;&#x3001;ATP &#x6FC3;&#x5EA6;&#x3067;&#x5EC3;&#x6B62;&#x76EE; 10 microM &#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x304B;&#x3089; ca 2 + &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D7;&#x306E;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x901A;&#x3057;&#x3066; PDEC &#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x81B5;&#x7BA1;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30D7;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306E;&#x898F;&#x5236;&#x3002;

&#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xC2E0;&#xD638; &#xC870;&#xC808; mucin exocytosis &#xD1B5;&#xD574; &#xAC19;&#xC740; &#xD070; &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xBD84; &#xBE44;&#xC640; &#xC774;&#xC628; &#xCC44;&#xB110; &#xBC0F; &#xC804;&#xC1A1;&#xAE30;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC804;&#xC1A1;. &#xD0C4;&#xC18C; &#xC12C;&#xC720; amperometry&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xACE0; &#xADF8; exocytosis &#xCEA0;&#xD504; &#xC885;&#xC18D; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; (PKA) &#xB610;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; C (PKC)&#xC758; &#xC57D;&#xB9AC; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xBB34;&#xB8CC; Ca2 + &#xB18D;&#xB3C4;&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; &#xC758;&#xD574; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; (PDEC) &#xC790;&#xADF9; &#xC218; &#xBD84;&#xACFC; &#xB9BD; &#xAC1C; &#xCDCC; &#xC7A5; &#xB355;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; ([Ca2 +] i). &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC; exocytosis &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC140;&#xC5D0;&#xB294; &#xCEA0;&#xD504;&#xC640; [Ca2 +] ATP&#xC758; i. &#xB0AE;&#xC740; &#xB18D;&#xB3C4; &#xC99D;&#xAC00; &#xC0DD; P2Y &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBCC0;&#xC870; &#xC5EC;&#xBD80;&#xB97C; &#xAC80;&#xC0AC; (&lt; 10 microM) &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; Ca2 + &#xBC1C;&#xC9C4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC544;&#xBB34; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; exocytosis. &#xBC18;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C; 100 microM ATP &#xC720;&#xB3C4; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; [Ca2 +] &#xC0C1;&#xC2B9; &#xD558; &#xACE0; &#xCE60; &#xBC30;&#xC758; exocytosis &#xC18D;&#xB3C4; &#xC99D;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4;. Ca2 + &#xB610;&#xB294; exocytosis &#xCEA0;&#xD504; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xAE30;&#xC5EC;&#xB294; Ca2 + chelator BAPTA &#xB610;&#xB294; H-89 &#xB610;&#xB294; &#xB77C;&#xC778;&#xB780;&#xD2B8;-8-bromoadenosine&#xC758; PKA &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; 3&#39;, 5&#39;-&#xC8FC;&#xAE30;&#xC801; monophosphorothioate. &#xC81C;&#xAC70;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC758; [Ca2 +] &#xB098;&#xB294; &#xC0C1;&#xC2B9; &#xB610;&#xB294; &#xC5B5;&#xC81C; PKA&#xC758; &#xAC01;&#xAC01; &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC10;&#xC18C; exocytosis; &#xACB0;&#xD569; &#xB420; &#xB54C;, &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xD3D0;&#xC9C0; exocytosis. &#xACB0;&#xB860;, ATP &#xB18D;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &amp;gt; 10 microM &#xC790;&#xADF9; exocytosis Ca2 +&#xC640; &#xCEA0;&#xD504; &#xACBD;&#xB85C; &#xD1B5;&#xD574; PDEC&#xC5D0;&#xC11C;.

&#xCDCC; &#xC7A5; &#xB355;&#xD2B8; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; purinergic &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; exocytosis &#xADDC;&#xC815;.

En las c&eacute;lulas epiteliales, varias se&ntilde;ales intracelulares regulan la secreci&oacute;n de mol&eacute;culas grandes como mucina via exocitosis y el transporte de iones a trav&eacute;s de canales y transportadores. Usando la fibra de carbono Amperometr&iacute;a, Divulgamos previamente esa exocitosis de gr&aacute;nulos secretores en conducto pancre&aacute;tico perro c&eacute;lulas epiteliales (PDEC) pueden ser estimuladas por activaci&oacute;n farmacol&oacute;gica de la quinasa dependiente de cAMP (PKA) o prote&iacute;na quinasa C (PKC), as&iacute; como por un aumento de libre Ca2 + concentraci&oacute;n intracelular ([Ca2 +] i). En este estudio, se examin&oacute; si la exocitosis en estas c&eacute;lulas es modulada por la activaci&oacute;n de los receptores P2Y end&oacute;genas, que aumentan el campo y la [Ca2 +] i. bajas concentraciones de ATP (&lt; 10 microM) intracelular Ca2 + oscilaci&oacute;n inducida pero no significativo exocitosis. En contraste, 100 microM ATP inducida por una sostenida [Ca2 +] i subida y aument&oacute; la tasa de exocitosis s&eacute;ptuple. La contribuci&oacute;n de Ca2 + o Campamentos caminos hacia la exocitosis se evalu&oacute; mediante el Ca2 + quelante BAPTA o los inhibidores de la PKA H-89 o Rp-8-bromoadenosine 3&#39;, 5&#39;-c&iacute;clico monophosphorothioate. Eliminaci&oacute;n de [Ca2 +] subida o inhibici&oacute;n de PKA cada parcialmente reducido exocitosis; cuando se combinan, aboli&oacute; exocitosis. En conclusi&oacute;n, ATP a concentraciones &gt; 10 microM estimula la exocitosis de PDEC por Ca2 + y caminos de campo.

Reglamento de exocitosis por receptores purin&eacute;rgicos en c&eacute;lulas epiteliales del conducto pancre&aacute;tico.

&#x5927;&#x9F20;&#x524D;&#x5217;&#x817A;&#x795E;&#x7ECF;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x7EC6;&#x80DE; (RPNECs) &#x663E;&#x793A;&#x5404;&#x79CD;&#x5404;&#x6837;&#x7684;&#x79BB;&#x5B50;&#x901A;&#x9053;&#x548C;&#x5C55;&#x793A; alpha-adrenergic &#x8C03;&#x63A7;&#x7684;&#x6E38;&#x79BB;&#x7ECF;&#x6D53;&#x5EA6; ([Ca(2+)])(c)&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x560C;&#x8C03;&#x63A7; [Ca(2+)](c) &#x548C;&#x80DE;&#x5410;&#x8C03;&#x67E5;&#x65B0;&#x9C9C;&#x5B64;&#x7ACB;&#x7684;&#x5355;&#x4E2A; RPNECs &#x663E;&#x793A;&#x55DC;&#x94EC;&#x7C92;&#x86CB;&#x767D; A &#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;RPNECs P2X &#x548C; P2Y &#x53D7;&#x4F53;&#x5B58;&#x5728;&#x5206;&#x522B;&#x7ECF; Ca(2+) &#x900F;&#x9633;&#x79BB;&#x5B50;&#x901A;&#x9053;&#x77AC;&#x6001;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x4E0E;&#x91CA;&#x653E;&#x7684;&#x7ECF;&#x80DE;&#x5185;&#x5546;&#x5E97;&#x7684; ATP&#xFF0C;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x3002;&#x77AC;&#x6001;&#x62B5;&#x6E2F;&#x9633;&#x79BB;&#x5B50;&#x5F53;&#x524D;&#x88AB;&#x6709;&#x6548;&#x6FC0;&#x6D3B; &alpha;&#x3001; &beta;-methyleneadenosine 5&#39;-&#x4E09;&#x78F7;&#x9178; (&alpha;&#x3001; &beta;-MeATP) &#x548C;&#x963B;&#x6B62; 2&#39;&#xFF0C;3&#39; &#x4E09;-O-(2&#xFF0C;4.6-trinitrophenyl) 5&#39;-&#x78F7;&#x9178;&#x817A;&#x82F7;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x5B58;&#x5728; P2X(1) &#x6216; P2X(3) &#x7684;&#x5B50;&#x7C7B;&#x578B;&#x3002;&#x5B58;&#x50A8;&#x7ECF;&#x91CA;&#x653E;&#xFF0C;ATP &#x548C; utp &#x7F06;&#x7EBF;&#x662F;&#x540C;&#x6837;&#x5F3A;&#x5927;&#xFF0C;&#x6307;&#x793A;&#x529F;&#x80FD;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684; P2Y(2) &#x6216; P2Y(4) &#x7684;&#x5B50;&#x7C7B;&#x578B;&#x3002;&#x4ECE; RPNECs &#x9006;&#x8F6C;&#x5F55; PCR &#x5206;&#x6790;&#x786E;&#x8BA4;&#x4E86; P2X(1) &#x548C; P2Y(2) &#x57FA;&#x56E0;&#x3002;&#x963F;&#x5C14;&#x6CD5;&#x7684;&#x9002;&#x7528;&#x8303;&#x56F4;&#xFF0C;&beta;-MeATP &#x8BF1;&#x5BFC;&#x5927;&#x548C;&#x77AC;&#x6001;&#x5347;&#x5E45; [Ca(2+)](c)&#xFF0C;&#x800C;&#x4E0D;&#x51CF;&#x6BD2;&#x7531;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7535;&#x538B;&#x7ECF;&#x901A;&#x9053;&#x963B;&#x6EDE;&#x5242;&#x6216;&#x6D88;&#x8017;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x7684;&#x7ECF;&#x5546;&#x5E97;&#xFF0C;&#x4F46;&#x901A;&#x8FC7;&#x7701;&#x7565;&#x80DE;&#x5916;&#x7ECF;&#x5E9F;&#x9664;&#x4E86;&#x3002;Utp &#x7F06;&#x7EBF;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x589E;&#x52A0; [Ca(2+)](c) 55%&#x7684;&#x5CF0;&#x503C; Delta[Ca(2+)](c) &#x8BF1;&#x5BFC; &alpha;&#xFF0C;&beta;-MeATP&#x3002;&#x963F;&#x5C14;&#x6CD5;&#x7684;&#x9002;&#x7528;&#x8303;&#x56F4;&#xFF0C;beta MeATP &#x98CE;&#x81F4;&#x9AD8;&#x5C14;&#x57FA;&#x54CD;&#x5E94;&#x7684; RPNECs &#x6240;&#x76D1;&#x6D4B;&#x7684;&#x78B3;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x5B89;&#x57F9;&#x548C;&#x7535;&#x5BB9;&#x6D4B;&#x91CF;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x5174;&#x8DA3;&#xFF0C;utp &#x7F06;&#x7EBF;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x786E;&#x5B9E;&#x4E0D;&#x4FC3;&#x4F7F;&#x5B89;&#x57F9;&#x7535;&#x6D41;&#xFF0C;&#x4F46;&#x51CF;&#x5C11;&#x819C;&#x7535;&#x5BB9;&#xFF0C;&#x6307;&#x793A;&#x51C0;&#x541E;&#x3002;&#x4ECE;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5047;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x5927;&#x5E45;&#x4E0A;&#x5347;&#x4E2D; [Ca(2+)](c) P2X &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7ECF;&#x6D8C;&#x5165;&#x662F;&#x5FC5;&#x9700;&#x7684;&#x80DE;&#xFF0C;&#x800C;&#x76F8;&#x5BF9;&#x7F13;&#x6162;&#x91CA;&#x653E;&#x7684;&#x5B58;&#x50A8;&#x7ECF;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5728; RPNECs &#x5185;&#x7684;&#x541E;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x560C;&#x5464;&#x53D7;&#x4F53;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185; Ca2 + &#x4FE1;&#x53F7;&#x548C;&#x5927;&#x9F20;&#x524D;&#x5217;&#x817A;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x80DE;&#x8026;&#x5408;&#x5728;&#x4E00;&#x8D77;&#x3002;

Rat prostate neuroendocrine cells (RPNECs) display a variety of ion channels and exhibit alpha-adrenergic regulation of cytosolic Ca(2+) concentration ([Ca(2+)])(c). In this study, purinergic regulation of [Ca(2+)](c) and exocytosis was investigated in freshly isolated single RPNECs showing chromogranin A immunoreactivity. The presence of P2X and P2Y receptors in RPNECs was verified by the transient activation of Ca(2+)-permeable cationic channels and the release of Ca(2+) from intracellular stores by extracellular ATP, respectively. The transient inward cationic current was effectively activated by alpha,beta-methyleneadenosine 5'-triphosphate (alpha,beta-MeATP) and blocked by 2',3'-O-(2,4,6-trinitrophenyl)adenosine 5'-triphosphate, suggesting the presence of a P2X(1) or P2X(3) subtype. For the release of stored Ca(2+), ATP and UTP were equally potent, indicating the functional expression of the P2Y(2) or P2Y(4) subtype. The mRNAs for P2X(1) and P2Y(2) were confirmed from reverse transcription-PCR analysis of RPNECs. The application of alpha,beta-MeATP induced large and transient increases in [Ca(2+)](c), which were not attenuated by the blockers of voltage-activated Ca(2+) channels or by depleting intracellular Ca(2+) stores, but were abolished by omitting extracellular Ca(2+). The application of UTP increased [Ca(2+)](c) to 55% of the peak Delta[Ca(2+)](c) induced by alpha,beta-MeATP. The application of alpha,beta-MeATP induced exocytotic responses of RPNECs as monitored by carbon fiber amperometry and capacitance measurements. To our interest, the application of UTP did not induce amperometric currents, but reduced the membrane capacitance, indicating a net endocytosis. From these results, we postulate that a sharp rise in [Ca(2+)](c) by the P2X-mediated Ca(2+) influx is required for exocytosis, whereas the relatively slow release of stored Ca(2+) induces endocytosis in RPNECs.

Purinergic receptors coupled to intracellular Ca2+ signals and exocytosis in rat prostate neuroendocrine cells.

Cellules neuroendocrines la prostate de rat (RPNECs) affichent une vari&eacute;t&eacute; de canaux ioniques et pi&egrave;ce alpha-r&eacute;gulation de la concentration cytosolique heterodimeric ([Ca(2+)])(c). Dans cette &eacute;tude, r&eacute;gulation purinergique du [Ca(2+)](c) et exocytose a &eacute;tudi&eacute; chez fra&icirc;chement isol&eacute;es RPNECs uniques montrant l&#39;immunor&eacute;activit&eacute; de la chromogranine A. La pr&eacute;sence de r&eacute;cepteurs P2X et P2Y dans RPNECs a &eacute;t&eacute; v&eacute;rifi&eacute;e par l&#39;activation transitoire des canaux cationiques perm&eacute;able &agrave; la Ca(2+) et la lib&eacute;ration de heterodimeric des r&eacute;serves intracellulaires par l&#39;ATP extracellulaire, respectivement. Le courant entrant transitoire de cationique est effectivement activ&eacute; par alpha, b&ecirc;ta-m&eacute;thyl&egrave;nead&eacute;nosine 5&#39;-triphosphate (alpha, b&ecirc;ta-MeATP) et bloqu&eacute; par 2&#39;, 3 &#39;ad&eacute;nosine - O-(2,4,6-trinitroph&eacute;nyl) 5&#39;-triphosphate, sugg&eacute;rant la pr&eacute;sence d&#39;un sous-type P2X(1) ou P2X(3). La lib&eacute;ration de heterodimeric stock&eacute;e, ATP et UTP &eacute;taient tout aussi puissant, qui indique l&#39;expression fonctionnelle du sous-type P2Y(2) ou P2Y(4). L&#39;ARNm pour P2X(1) et P2Y(2) ont &eacute;t&eacute; confirm&eacute;s par analyse de reverse transcription-PCR de RPNECs. L&#39;application d&#39;alpha, b&ecirc;ta MeATP induite par des augmentations importantes et transitoires [Ca(2+)](c), qui n&#39;&eacute;taient pas att&eacute;nu&eacute; par les bloqueurs de canaux heterodimeric activ&eacute;s par tension ou par un appauvrissement des r&eacute;serves intracellulaires de heterodimeric, mais ont &eacute;t&eacute; abolies en omettant heterodimeric extracellulaire. L&#39;application de l&#39;UTP augmente [Ca(2+)](c) &agrave; 55 % du pic Delta[Ca(2+)](c) induite par alpha, b&ecirc;ta-MeATP. L&#39;application d&#39;alpha, b&ecirc;ta MeATP exocytotique r&eacute;ponses de RPNECs sous la supervision de capacitance et de fibre de carbone amp&eacute;rom&eacute;trie mesures induites. &Agrave; nos int&eacute;r&ecirc;ts, l&#39;application de l&#39;UTP n&#39;induisait pas amp&eacute;rom&eacute;trique courants, mais r&eacute;duit la capacit&eacute; de la membrane, indiquant une endocytose net. D&#39;apr&egrave;s ces r&eacute;sultats, nous postulons qu&#39;une forte hausse [Ca(2+)](c) par l&#39;afflux de m&eacute;diation P2X heterodimeric est requise pour l&#39;exocytose, alors que la lib&eacute;ration lente de heterodimeric stock&eacute;e provoque l&#39;endocytose dans RPNECs.

R&eacute;cepteurs purinergiques coupl&eacute; &agrave; des signaux de Ca2 + intracellulaires et exocytose dans les cellules neuroendocrines la prostate de rat.

Purinerger gekoppelt an Ca2 +-Signale und Exozytose in Rattenprostata neuroendokrinen Zellen intrazellul&#xE4;r.

Cellule neuroendocrine prostatiche ratto (RPNECs) visualizzare una variet&agrave; di canali ionici ed esibiscono alfa-adrenergici regolamento della concentrazione citosolica di Ca(2+) ([Ca(2+)])(c). In questo studio, purinergic regolamento di [Ca(2+)](c) ed esocitosi fu indagato in appena isolato singolo RPNECs mostrando immunoreattivit&agrave; Cromogranina A. La presenza di recettori P2X e P2Y in RPNECs &egrave; stata verificata l&#39;attivazione transitoria dei canali cationici Ca(2+)-permeabile e il rilascio di Ca(2+) dai depositi intracellulari di ATP extracellulare, rispettivamente. La corrente transitoria di cationica verso l&#39;interno in modo efficace &egrave; stata attivata da alfa, beta-methyleneadenosine 5&#39;-trifosfato (alfa, beta-MeATP) e bloccato da 2&#39;, 3 &#39;adenosina - O-(2, 4,6-trinitrophenyl) 5&#39;-trifosfato, suggerendo la presenza di un sottotipo di P2X(1) o P2X(3). Per il rilascio di Ca(2+) memorizzati, ATP e UTP erano altrettanto potente, che indica l&#39;espressione funzionale del sottotipo P2Y(2) o P2Y(4). il mRNA per P2X(1) e P2Y(2) sono stati confermati da analisi PCR-trascrizione inversa di RPNECs. L&#39;applicazione di alfa, beta-MeATP indotta da grandi e transitori aumenti in [Ca(2+)](c), che non sono stati attenuati i bloccanti dei canali Ca(2+) voltaggio-attivati o lesive intracellulare Ca(2+) negozi, ma sono stati aboliti omettendo Ca(2+) extracellulare. L&#39;applicazione di UTP aumentata [Ca(2+)](c) al 55% del picco Delta[Ca(2+)](c) indotta da alfa, beta-MeATP. L&#39;applicazione di alfa, beta-MeATP indotta da questo risposte di RPNECs come monitorate dalla capacitanza e fibra di carbonio amperometria le misurazioni. Di nostro interesse, l&#39;applicazione di UTP non ha indotto le correnti amperometrico, ma riduce la capacit&agrave; della membrana, che indica un netto endocitosi. Da questi risultati, abbiamo postulato che un forte aumento [Ca(2+)](c) dall&#39;afflusso Ca(2+) P2X-mediata &egrave; richiesto per esocitosi, considerando che il relativamente lento rilascio di stored Ca(2+) induce endocitosi in RPNECs.

Recettori purinergici accoppiati a segnali di Ca2 + intracellulare ed esocitosi di cellule neuroendocrine della prostata di ratto.

&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x524D;&#x7ACB;&#x817A;&#x795E;&#x7D4C;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x7D30;&#x80DE; (RPNECs) &#x30A4;&#x30AA;&#x30F3; &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x3001;&#x5C55;&#x793A; &alpha; &#x30A2;&#x30C9;&#x30EC;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x898F;&#x5236;&#x306E;&#x30BE;&#x30EB;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x6FC3;&#x5EA6; ([Ca(2+)])(c)&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30D7;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x898F;&#x5236; [Ca(2+)](c) &#x3068;&#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3057;&#x305F;&#x65B0;&#x9BAE;&#x5358;&#x96E2;&#x306E;&#x5358;&#x4E00; RPNECs &#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30B0;&#x30E9;&#x30CB;&#x30F3; A &#x967D;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;RPNECs &#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; P2X &#x3068; P2Y &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x306F; Ca(2+) &#x900F;&#x904E;&#x6027;&#x30AB;&#x30C1;&#x30AA;&#x30F3; &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x904E;&#x6E21;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916; ATP &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30B9;&#x30C8;&#x30A2;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x306E;&#x653E;&#x51FA;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x691C;&#x8A3C;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1;&#x3001;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;-methyleneadenosine 5 &#x904E;&#x6E21;&#x5BFE;&#x5185;&#x30AB;&#x30C1;&#x30AA;&#x30F3;&#x96FB;&#x6D41;&#x304C;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306B;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F; &#39;-&#x4E09;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178; (&#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1;&#x3001;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;-MeATP&#xFF09; &#x3068; 2&#39;, 3 &#39;-O - &#xFF08;2,4,6-trinitrophenyl) &#x30A2;&#x30C7;&#x30CE;&#x30B7;&#x30F3; 5&#39; &#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;-&#x4E09;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x3001;P2X(1) &#x307E;&#x305F;&#x306F; P2X(3) &#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B9;&#x30C8;&#x30A2;&#x30C9;&#x306E;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x306E;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9; ATP &#x3068; UTP P2Y(2) &#x307E;&#x305F;&#x306F; P2Y(4) &#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x5747;&#x7B49;&#x306B;&#x5F37;&#x529B;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;P2X(1) &#x3068; P2Y(2) &#x306E; Mrna &#x306F; RPNECs &#x306E;&#x9006;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; PCR &#x89E3;&#x6790;&#x304B;&#x3089;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x7248; MeATP &#x8A98;&#x8D77;&#x5927;&#x4E00;&#x904E;&#x6027;&#x306B;&#x5897;&#x52A0; [Ca(2+)](c)&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x5E97;&#x3092;&#x7834;&#x58CA;&#x96FB;&#x5727;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6; &#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0; &#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30CD;&#x30EB;&#x906E;&#x65AD;&#x85AC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6E1B;&#x8870;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x304C;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x3092;&#x7701;&#x7565;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x5EC3;&#x6B62;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;UTP &#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x5897;&#x52A0; [&#x30D4;&#x30FC;&#x30AF; &alpha; &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B; Delta[Ca(2+)](c) &#x306E; 55 %ca(2+)](c) &#x30D9;&#x30FC;&#x30BF; MeATP&#x3002;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x7248; MeATP &#x70AD;&#x7D20;&#x7E4A;&#x7DAD;&#x3057;&#x305F;&#x96FB;&#x6D41;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x6CD5;&#x3068;&#x30AD;&#x30E3;&#x30D1;&#x30B7;&#x30BF;&#x30F3;&#x30B9;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3092;&#x30E2;&#x30CB;&#x30BF;&#x30FC;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B; RPNECs &#x306E;&#x5206;&#x6CCC;&#x53CD;&#x5FDC;&#x8A98;&#x767A;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x95A2;&#x5FC3;&#x3092; UTP &#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; &#x30A2;&#x30F3;&#x30DA;&#x30ED; &#x30E1;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x96FB;&#x6D41;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x7D14;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x819C;&#x306E;&#x9759;&#x96FB;&#x5BB9;&#x91CF;&#x3092;&#x524A;&#x6E1B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x304B;&#x3089;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x4EEE;&#x5B9A;&#x306F;&#x6025;&#x6FC0;&#x306B;&#x4E0A;&#x6607; [Ca(2+)](c) P2X &#x3092;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x6D41;&#x5165;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x306F;&#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306B;&#x5FC5;&#x9808;&#x30B9;&#x30C8;&#x30A2;&#x30C9; &#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x7684;&#x9045;&#x3044;&#x89E3;&#x653E; RPNECs &#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3002;

&#x30D7;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185; ca 2 + &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x3068;&#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9; &#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x524D;&#x7ACB;&#x817A;&#x795E;&#x7D4C;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3002;

&#xC950; &#xC804;&#xB9BD;&#xC120; neuroendocrine &#xC140; (RPNECs) &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC774;&#xC628; &#xCC44;&#xB110;&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD558; &#xACE0; cytosolic Ca(2+) &#xB18D;&#xB3C4; ([Ca(2+)])(c) alpha-adrenergic &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xC158; &#xC804;&#xC2DC;. Purinergic &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xC158;&#xC758;&#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; [Ca(2+)](c) &#xBC0F; exocytosis &#xC870;&#xC0AC; &#xAC13; &#xACA9;&#xB9AC; &#xB41C; &#xB2E8;&#xC77C; Rpnecs&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xB294; chromogranin A immunoreactivity. Rpnecs&#xC758; P2X &#xBC0F; P2Y &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xB294; &#xAC01;&#xAC01; Ca(2+) &#xD22C;&#xACFC;&#xC131; &#xC591;&#xC774;&#xC628; &#xCC44;&#xB110;&#xC758; &#xACFC;&#xB3C4; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; ATP&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xC0C1;&#xC810;&#xC5D0;&#xC11C; ca(2+)&#xC758; &#xBC29;&#xCD9C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD655;&#xC778; &#xD588;&#xB2E4;. &#xACFC;&#xB3C4; &#xC548;&#xCABD;&#xC73C;&#xB85C; &#xC591;&#xC774;&#xC628; &#xC804;&#xB958; &#xC54C;&#xD30C;, &#xBCA0;&#xD0C0; methyleneadenosine 5&#39;-&#xC0BC;&#xC778;&#xC0B0; (&#xC54C;&#xD30C;, &#xBCA0;&#xD0C0;-MeATP)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBC0F; &#xCC28;&#xB2E8; 2&#39;, 3&#39;-O-(2,4,6-trinitrophenyl) &#xC544;&#xB370;&#xB178;&#xC2E0; 5&#39;-&#xC0BC;&#xC778;&#xC0B0;, P2X(1) &#xB610;&#xB294; P2X(3) &#xD558;&#xC704;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xB97C; &#xC81C;&#xC548;. &#xC800;&#xC7A5; &#xB41C; ca(2+)&#xC758; &#xCD9C;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; ATP &#xBC0F; UTP &#xD588;&#xB2E4; &#xB3D9;&#xB4F1; &#xD558; &#xAC8C; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; P2Y(2) &#xB610;&#xB294; P2Y(4) &#xD558;&#xC704; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC2DD;. P2X(1) &#xBC0F; P2Y(2)&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; mRNAs Rpnecs&#xC758; &#xC5ED;&#xBC29;&#xD5A5; &#xC804;&#xC0AC;-PCR &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC54C;&#xD30C;&#xC758; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;, &#xBCA0;&#xD0C0; MeATP &#xC720;&#xB3C4; &#xD06C;&#xACE0; &#xC77C;&#xC2DC;&#xC801; &#xC99D;&#xAC00; [Ca(2+)](c), &#xC804;&#xC555; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; Ca(2+) &#xCC44;&#xB110; &#xCC28;&#xB2E8;&#xC81C; &#xB610;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; Ca(2+) &#xC800;&#xC7A5;&#xC18C;&#xB97C; &#xC5C6;&#xC560;&#xACE0; &#xAC10;&#xC1E0; &#xB418;&#xC9C0; &#xD588;&#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; ca(2+)&#xC744; &#xC0DD;&#xB7B5; &#xD558; &#xC5EC; &#xD3D0;&#xC9C0; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. UTP&#xC758; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8; &#xC99D;&#xAC00; [Delta[Ca(2+)](c) &#xC54C;&#xD30C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; &#xD53C;&#xD06C;&#xC758; 55%&#xB97C; Ca(2+)](c) &#xBCA0;&#xD0C0; MeATP. &#xC54C;&#xD30C; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8; &#xBCA0;&#xD0C0; MeATP exocytotic RPNECs amperometry &#xD0C4;&#xC18C; &#xC12C;&#xC720; &#xBC0F; &#xCEE4;&#xD328;&#xC2DC;&#xD134;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCE21;&#xC815; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC18;&#xC751; &#xC720;&#xB3C4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xAD00;&#xC2EC;&#xC744; UTP &#xC751;&#xC6A9; amperometric &#xC804;&#xB958;&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; net endocytosis &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xB9C9; &#xCEE4;&#xD328;&#xC2DC;&#xD134;&#xC2A4;&#xB97C; &#xAC10;&#xC18C;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xACF5;&#xC900; &#xB0A0;&#xCE74;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC0C1;&#xC2B9; [P2X &#xC911;&#xC7AC; Ca(2+) &#xC720;&#xC785;&#xC73C;&#xB85C; ca(2+)](c)&#xAC00; &#xD544;&#xC694; exocytosis, &#xC800;&#xC7A5; &#xB41C; ca(2+)&#xC758; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB290;&#xB9B0; &#xBC29;&#xCD9C;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xD55C;&#xB2E4; endocytosis Rpnecs&#xC5D0; &#xBC18;&#xBA74;.

Purinergic &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; Ca2 + &#xC2E0;&#xD638; &#xBC0F; exocytosis &#xC950; &#xC804;&#xB9BD;&#xC120; neuroendocrine &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xACB0;&#xD569;.

C&eacute;lulas neuroendocrinas pr&oacute;stata de rata (RPNECs) Mostrar una variedad de canales i&oacute;nicos y exhiben alfa-adren&eacute;rgicos regulaci&oacute;n de la concentraci&oacute;n citos&oacute;lica de CA ([Ca(2+)])(c). En este estudio, regulaci&oacute;n purin&eacute;rgicos de [Ca(2+)](c) y exocitosis fue investigada en RPNECs solos reci&eacute;n aislados mostrando la inmunoreactividad de cromogranina A. Se verific&oacute; la presencia de receptores P2X y P2Y en RPNECs por la activaci&oacute;n transitoria de canales cati&oacute;nicos Ca(2+)-permeable y la liberaci&oacute;n de CA intracelular tiendas por ATP extracelular, respectivamente. La corriente transitoria de cati&oacute;nica interna efectivamente fue activada por alfa, beta-methyleneadenosine 5&#39;-trifosfato (alfa, beta-MeATP) y hab&iacute;a bloqueado por 2&#39;, 3&#39;-O-(2,4,6-trinitrophenyl) 5&#39;-trifosfato de adenosina, sugiriendo la presencia de un subtipo P2X(1) o P2X(3). La liberaci&oacute;n de CA almacenados, ATP y UTP fueron igualmente potente, indicando la expresi&oacute;n funcional del subtipo P2Y(2) o P2Y(4). Fueron confirmados los mRNAs para P2X(1) y P2Y(2) de an&aacute;lisis de la transcripci&oacute;n reversa-PCR de RPNECs. La aplicaci&oacute;n de alfa, beta-MeATP indujo aumentos grandes y transitorios en [Ca(2+)](c), que no fueron atenuados por los bloqueadores de los canales activados por voltaje de CA o por agotamiento de tiendas de CA intracelulares, pero fueron suprimidos omitiendo CA extracelular. La aplicaci&oacute;n de UTP aumentado [Ca(2+)](c) al 55% del pico Delta[Ca(2+)](c) inducida por alfa, beta-MeATP. La aplicaci&oacute;n de alfa, beta-MeATP inducidas exocit&oacute;tico de RPNECs como supervisada por capacitancia y fibra de carbono Amperometr&iacute;a mediciones. Para nuestro inter&eacute;s, la aplicaci&oacute;n de UTP no indujeron amperom&eacute;trico corrientes, pero redujo la capacitancia de la membrana, lo que indica un neto endocitosis. De estos resultados, postulamos que una fuerte subida en [Ca(2+)](c) por el influjo de CA P2X-mediada es necesaria para la exocitosis, Considerando que la relativamente lenta liberaci&oacute;n de CA almacenado induce endocitosis en RPNECs.

Receptores purin&eacute;rgicos junto a se&ntilde;ales de Ca2 + intracelulares y exocitosis en las c&eacute;lulas neuroendocrinas pr&oacute;stata de rata.

Agouti-related protein (AgRP) is an orexigenic peptide which is composed of three parts; the amino (N)-terminus, the middle part, and the carboxyl (C)-terminus. AgRP has been implicated in various cell signaling, but the precise role of each parts are currently unclear. In this study, we have attempted to determine which part of AgRP was critical for insulin secretion. We have found that the C-terminus of AgRP specifically increases the intracellular calcium concentration in pancreatic beta Rin5mf cells in a PLC-dependent manner, whereas the middle part and C-terminus have little effects on calcium release. This calcium response can be observed in the freshly isolated primary beta cells also. Moreover, amperometric measurement reveals that the C-terminus of AgRP increases the rate of exocytosis in Rin5mf cells. We further show that this region of AgRP is responsible for insulin secretion in a PLC-dependent manner. Taken together, these results indicate that the C-terminus of AgRP can participate in the insulin secretion in pancreatic beta cells, through the modulation of calcium release.

C-terminal part of AgRP stimulates insulin secretion through calcium release in pancreatic beta Rin5mf cells.

&#x8C5A;&#x9F20;&#x76F8;&#x5173;&#x86CB;&#x767D; (&#x8349;&#x6839;) &#x662F; orexigenic &#x591A;&#x80BD;&#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&#x4E09;&#x4E2A;&#x90E8;&#x4EF6; &#xFF1B;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178; (N)-&#x603B;&#x7AD9;&#x3001; &#x4E2D;&#x95F4;&#x90E8;&#x5206;&#x53CA; (C)-&#x603B;&#x7AD9;&#x7FA7;&#x57FA;&#x3002;&#x8349;&#x6839;&#x5377;&#x5165;&#x5404;&#x79CD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4F20;&#x9012;&#xFF0C;&#x4F46;&#x662F;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x90E8;&#x4EF6;&#x7684;&#x786E;&#x5207;&#x4F5C;&#x7528;&#x76EE;&#x524D;&#x8FD8;&#x4E0D;&#x6E05;&#x695A;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BD5;&#x56FE;&#x786E;&#x5B9A;&#x8349;&#x6839;&#x7684;&#x54EA;&#x4E00;&#x90E8;&#x5206;&#x662F;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x5206;&#x6CCC;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x7684;&#x8349;&#x6839; C &#x603B;&#x7AD9;&#x4E13;&#x95E8;&#x589E;&#x52A0; PLC &#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#xFF0C;Rin5mf &#x80F0;&#x817A; &beta; &#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x9499;&#x79BB;&#x5B50;&#x6D53;&#x5EA6;&#x800C;&#x4E2D;&#x95F4;&#x90E8;&#x5206;&#x548C; C &#x603B;&#x7AD9;&#x6709;&#x9499;&#x91CA;&#x653E;&#x5C0F;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x9499;&#x53CD;&#x5E94;&#x4E5F;&#x53EF;&#x770B;&#x5230;&#x65B0;&#x9C9C;&#x5B64;&#x7ACB;&#x539F; &beta; &#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x5B89;&#x57F9;&#x6D4B;&#x91CF;&#x63ED;&#x793A;&#x4E86;&#x8349;&#x6839; C-&#x5DF4;&#x58EB;&#x603B;&#x7AD9;&#x589E;&#x52A0;&#x7684; Rin5mf &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x80DE;&#x901F;&#x5EA6;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x8868;&#x660E;&#x8FD9;&#x4E00;&#x533A;&#x57DF;&#x7684;&#x8349;&#x6839;&#x662F;&#x8D1F;&#x8D23;&#x5206;&#x6CCC;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E; PLC &#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x3002;&#x603B;&#x4E4B;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E; C-&#x603B;&#x7AD9;&#x7684;&#x8349;&#x6839;&#x53EF;&#x4EE5;&#x53C2;&#x4E0E;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x5206;&#x6CCC;&#x7684;&#x80F0;&#x817A; &beta; &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x8C03;&#x5236;&#x7684;&#x9499;&#x91CA;&#x653E;&#x3002;

&#x8349;&#x6839; C &#x7EC8;&#x7AEF;&#x90E8;&#x5206;&#x523A;&#x6FC0;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x5206;&#x6CCC;&#x901A;&#x8FC7; Rin5mf &#x80F0;&#x817A; &beta; &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x9499;&#x91CA;&#x653E;&#x3002;

Prot&eacute;ine agouti (AGPR) est un peptide orexig&egrave;ne qui se compose de trois parties ; les amin&eacute;s N-terminus, la partie du milieu et l&#39;extr&eacute;mit&eacute; c-terminale du carboxyle. AGPR a &eacute;t&eacute; impliqu&eacute; dans la signalisation de cellules diff&eacute;rentes, mais le r&ocirc;le pr&eacute;cis de chacune des parties ne sont actuellement pas claires. Dans cette &eacute;tude, nous avons tent&eacute; de d&eacute;terminer quelle partie d&#39;AGPR &eacute;tait critique pour la s&eacute;cr&eacute;tion d&#39;insuline. Nous avons trouv&eacute; que l&#39;extr&eacute;mit&eacute; C-terminale d&#39;AGPR augmente notamment la concentration de calcium intracellulaire dans les cellules b&ecirc;ta du pancr&eacute;as Rin5mf mani&egrave;re PLC-d&eacute;pendante, tandis que la partie du milieu et l&#39;extr&eacute;mit&eacute; C-terminale ont peu d&#39;effets sur la lib&eacute;ration de calcium. Cette r&eacute;ponse de calcium peut &ecirc;tre observ&eacute;e dans les cellules fra&icirc;chement isol&eacute;es de beta primaires aussi. En outre, mesure amp&eacute;rom&eacute;trique r&eacute;v&egrave;le que l&#39;extr&eacute;mit&eacute; C-terminale d&#39;AGPR augmente le taux d&#39;exocytose dans les cellules Rin5mf. De plus, nous montrons que cette r&eacute;gion d&#39;AGPR est responsable de la s&eacute;cr&eacute;tion d&#39;insuline en fonction de la PLC. Pris ensemble, ces r&eacute;sultats indiquent que l&#39;extr&eacute;mit&eacute; C-terminale d&#39;AGPR peut participer &agrave; la s&eacute;cr&eacute;tion de l&#39;insuline dans les cellules b&ecirc;ta du pancr&eacute;as, par le biais de la modulation de la lib&eacute;ration de calcium.

Partie C-terminale d&#39;AGPR stimule la s&eacute;cr&eacute;tion d&#39;insuline par l&#39;interm&eacute;diaire de la lib&eacute;ration de calcium dans les cellules b&ecirc;ta du pancr&eacute;as Rin5mf.

C-terminale Teil des AgRP stimuliert die Insulinsekretion durch Calcium-Freisetzung in pankreatischen beta-Zellen Rin5mf.

Agouti-related protein (AgRP) &egrave; un peptide di orexigenic che si compone di tre parti; il terminus amminico (N) capolinea, la parte centrale e carbossilico (C)-. AgRP &egrave; stata implicata nella segnalazione delle cellule diverse, ma il ruolo preciso di ogni parti sono attualmente poco chiaro. In questo studio, abbiamo cercato di determinare quale parte di AgRP &egrave; stato fondamentale per la secrezione di insulina. Abbiamo trovato che il C-terminale di AgRP in particolare aumenta la concentrazione di calcio intracellulare nelle cellule beta del pancreas Rin5mf modo PLC-dipendente, mentre la parte centrale e C-terminale sono piccoli effetti sul rilascio di calcio. Questa risposta di calcio pu&ograve; essere osservata anche nelle cellule beta primarie appena isolate. Inoltre, misurazione amperometrica rivela che il C-terminale di AgRP aumenta il tasso di esocitosi di cellule Rin5mf. Abbiamo ulteriormente mostrano che questa regione di AgRP &egrave; responsabile della secrezione di insulina in modo dipendente dal PLC. Presi insieme, questi risultati indicano che il C-terminale di AgRP pu&ograve; partecipare la secrezione di insulina nelle cellule beta del pancreas, attraverso la modulazione del rilascio di calcio.

Parte C-terminale di AgRP stimola la secrezione di insulina attraverso il rilascio di calcio nelle cellule beta del pancreas Rin5mf.

&#x30A2;&#x30B0;&#x30FC;&#x30C1;&#x95A2;&#x9023;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; (AgRP) &#x306F;&#x3001;3 &#x3064;&#x306E;&#x90E8;&#x5206;&#x304B;&#x3089;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x308B; orexigenic &#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C3;&#x30C9;&#x3067;&#x3059;;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178; (N) - &#x30C6;&#x30EB;&#x30DF;&#x30CA;&#x30B9;&#x3001;&#x4E2D;&#x592E;&#x90E8;&#x3001;&#x30AB;&#x30EB;&#x30DC;&#x30AD;&#x30B7;&#x30EB;&#x57FA; (C) - &#x7D42;&#x70B9;&#x3002;AgRP &#x306F;&#x3001;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x5404;&#x90E8;&#x54C1;&#x306E;&#x6B63;&#x78BA;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x306F;&#x73FE;&#x5728;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;, &#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x5206;&#x6CCC;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x91CD;&#x8981;&#x306A; AgRP &#x306E;&#x3069;&#x306E;&#x90E8;&#x5206;&#x3092;&#x5224;&#x65AD;&#x3057;&#x3088;&#x3046;&#x3068;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E2D;&#x592E;&#x90E8;&#x3068; C &#x672B;&#x7AEF;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x653E;&#x51FA;&#x306B;&#x5C11;&#x3057;&#x5F71;&#x97FF;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057; AgRP &#x306E; C &#x672B;&#x7AEF;&#x304C;&#x7279;&#x306B;&#x81B5; &beta; Rin5mf &#x7D30;&#x80DE;&#x306F; PLC &#x4F9D;&#x5B58;&#x7684;&#x306B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x5FDC;&#x7B54;&#x65B0;&#x9BAE;&#x5358;&#x96E2;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA; &#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x7D30;&#x80DE;&#x3082;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x30A2;&#x30F3;&#x30DA;&#x30ED; &#x30E1;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x6E2C;&#x5B9A; AgRP &#x306E; C &#x672B;&#x7AEF;&#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9; Rin5mf &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7387;&#x304C;&#x5897;&#x52A0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B; AgRP &#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x5730;&#x57DF;&#x304C; PLC &#x4F9D;&#x5B58;&#x7684;&#x306B;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x5206;&#x6CCC;&#x306E;&#x8CAC;&#x4EFB;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x53D6;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;AgRP &#x306E; C &#x672B;&#x7AEF;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x653E;&#x51FA;&#x306E;&#x5909;&#x8ABF;&#x3092;&#x901A;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x81B5;&#x81D3;&#x306E;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x5206;&#x6CCC;&#x306B;&#x53C2;&#x52A0;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

AgRP &#x306E; C &#x672B;&#x7AEF;&#x90E8;&#x5206;&#x81B5; &beta; Rin5mf &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x653E;&#x51FA;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x5206;&#x6CCC;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Agouti &#xAD00;&#xB828; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (AgRP); &#xC138; &#xBD80;&#xBD84;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD6C;&#xC131; &#xB41C; orexigenic &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; &#xC774;&#xB2E4; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; (N)-&#xC885;&#xC810; &#xC911;&#xAC04; &#xBD80;&#xBD84;&#xACFC; carboxyl (C)-&#xC885;&#xC810;. AgRP &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xAC01; &#xBD80;&#xD488;&#xC758; &#xC815;&#xD655;&#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC740; &#xD604;&#xC7AC; &#xBA85;&#xD655; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; Agrp&#xC758; &#xC5B4;&#xB290; &#xBD80;&#xBD84;&#xC774; &#xC778;&#xC290;&#xB9B0; &#xBD84; &#xBE44;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xACB0;&#xC815; &#xD558;&#xB824;&#xACE0; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xAC00;&#xC6B4;&#xB370; &#xBD80;&#xBD84; &#xBC0F; C-&#xB9D0;&#xB2E8; &#xCE7C;&#xC298; &#xCD9C;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xC791;&#xC740; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE60; &#xBC18;&#xBA74; Agrp&#xC758; C &#xB9D0;&#xB2E8; &#xD2B9;&#xD788; PLC&#xC5D0; &#xC885;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xCDCC; &#xC7A5; &#xBCA0;&#xD0C0; Rin5mf &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xCE7C;&#xC298; &#xB18D;&#xB3C4; &#xC99D;&#xAC00; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; &#xCE7C;&#xC298; &#xC751;&#xB2F5; &#xAC13; &#xACA9;&#xB9AC; &#xB41C; &#xAE30;&#xBCF8; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xAD00;&#xCC30;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, amperometric &#xCE21;&#xC815; Agrp&#xC758; C &#xB9D0;&#xB2E8; exocytosis Rin5mf &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC18D;&#xB3C4; &#xC99D;&#xAC00; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB354; Agrp&#xC758;&#xC774; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC740; PLC&#xC5D0; &#xC885;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778;&#xC290;&#xB9B0; &#xBD84; &#xBE44;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCC45;&#xC784;&#xC740; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD568;&#xAED8; &#xCC0D;&#xC740;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; Agrp&#xC758; C &#xB9D0;&#xB2E8; &#xCE7C;&#xC298; &#xC790;&#xB8CC;&#xC758; &#xBCC0;&#xC870;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xCDCC; &#xC7A5; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC778;&#xC290;&#xB9B0; &#xBD84; &#xBE44;&#xC5D0; &#xCC38;&#xC5EC;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Agrp&#xC758; C-&#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xBD80;&#xBD84; Rin5mf &#xCDCC; &#xC7A5; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCE7C;&#xC298; &#xCD9C;&#xC2DC;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC778;&#xC290;&#xB9B0; &#xBD84; &#xBE44;&#xB97C; &#xC790;&#xADF9;.

Agouti (AgRP) es un p&eacute;ptido de orex&iacute;geno que se compone de tres partes; el amino (N)-terminal, la parte media y el carboxilo terminal (C). AgRP se ha implicado en la se&ntilde;alizaci&oacute;n de c&eacute;lulas diferentes, pero el papel exacto de cada piezas son actualmente confuso. En este estudio, hemos intentado determinar que parte de AgRP era cr&iacute;tico para la secreci&oacute;n de insulina. Hemos encontrado que el c-terminal de AgRP espec&iacute;ficamente aumenta la concentraci&oacute;n de calcio intracelular en las c&eacute;lulas de Rin5mf de celulas PANCREATICAS beta en una forma dependiente de PLC, mientras que la parte central y c-terminal tienen peque&ntilde;os efectos en la liberaci&oacute;n de calcio. Esta respuesta de calcio puede observarse tambi&eacute;n en las c&eacute;lulas primarias reci&eacute;n aisladas de beta. Por otra parte, medici&oacute;n amperim&eacute;trica revela que el c-terminal de AgRP aumenta la tasa de exocitosis en las c&eacute;lulas Rin5mf. Adem&aacute;s, mostramos que esta regi&oacute;n de AgRP es responsable de la secreci&oacute;n de insulina en una forma dependiente de PLC. Tomados en conjunto, estos resultados indican que el c-terminal de AgRP puede participar en la secreci&oacute;n de insulina en las c&eacute;lulas beta pancre&aacute;ticas, a trav&eacute;s de la modulaci&oacute;n de la liberaci&oacute;n de calcio.

Parte C-terminal de AgRP estimula la secreci&oacute;n de insulina a trav&eacute;s de la liberaci&oacute;n de calcio en las c&eacute;lulas beta pancre&aacute;ticas Rin5mf.

&#x80F0;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x88C2;&#x5176; NH(2) &#x603B;&#x7AD9;&#x516C;&#x5F00;&#x6813;&#x7CFB;&#x914D;&#x4F53;&#x65F6;&#xFF0C;&#x5C06;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x53D7;&#x4F53;-2 (PAR-2&#xFF09;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4EE5;&#x524D;&#x8868;&#x660E;&#x9762;&#x503C; 2 &#x6FC0;&#x6D3B;&#x80F0;&#x7BA1;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE; (PDEC) &#x7684;&#x79BB;&#x5B50;&#x901A;&#x9053;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x73B0;&#x5728;&#x4F7F;&#x7528;&#x7518;&#x6CB9;&#x4E8C;&#x916F;&#x7684;&#x5B9E;&#x65F6;&#x5149;&#x5B66;&#x8367;&#x5149;&#x63A2;&#x9488;&#x3001; &#x8425;&#x5730;&#x7684;&#x84DD;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;-Epac1-&#x9EC4;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x3001; PH(PLC-delta1) &#x589E;&#x5F3A;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x4E3A;&#x7B2C; 4&#xFF0C;5-&#x4E8C;&#x78F7;&#x9178;&#x78F7;&#x8102;&#x9170;&#x808C;&#x9187;&#xFF0C;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; Cgamma (PKCgamma)-C1-&#x9EC4;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x5B9A;&#x4E49;&#x8C03;&#x89E3;&#x72D7; PDEC PAR 2 &#x6548;&#x5E94;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8DEF;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x9762;&#x503C; 2 &#x6FC0;&#x6D3B;&#x4E0D;&#x523A;&#x6FC0;&#x8425;&#x5730;&#x7684;&#x589E;&#x52A0;&#xFF0C;&#x5B83;&#x8BF1;&#x4F7F;&#x78F7;&#x8102;&#x9176;&#x6C34;&#x89E3;&#x78F7;&#x8102;&#x9170;&#x808C;&#x9187; 4&#xFF0C;5-&#x4E8C;&#x78F7;&#x9178;&#x808C;&#x9187; 1,4,5 &#x548C;&#x7518;&#x6CB9;&#x4E8C;&#x916F; (C)&#x3002;&#x4ECE;&#x808C;&#x9187;&#x80DE;&#x7ECF;&#x52A8;&#x5458; 1,4,5 &#x5185;&#x654F;&#x611F;&#x7ECF;&#x5B58;&#x50A8;&#x5E76;&#x968F;&#x540E;&#x7ECF;&#x6D8C;&#x5165;&#x5546;&#x5E97;&#x7ECF;&#x8425;&#x7ECF;&#x6E20;&#x9053;&#x5BFC;&#x81F4;&#x53CC;&#x76F8;&#x589E;&#x52A0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7ECF;&#x6D53;&#x5EA6; ([Ca(2+)](i))&#xFF0C;&#x5370; 1 &#x67D3;&#x6599;&#x7528;&#x6765;&#x8861;&#x91CF;&#x3002;&#x5355;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x5B89;&#x57F9;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x589E;&#x52A0; [Ca(2+)](i) &#x5728;&#x8F6C;&#x53CC;&#x80DE;&#x4E2D;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x539F;&#x56E0;&#x3002;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x8868;&#x660E;&#x8BE5;&#x80F0;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x8FD8;&#x4F1A;&#x6FC0;&#x6D3B; PKC &#x540C;&#x5DE5;&#x9176;&#xFF0C;&#x523A;&#x6FC0;&#x66F4;&#x591A;&#x80DE;&#x3002;&#x5E76;&#x8054;&#x589E;&#x52A0;&#x80DE;&#x5410;&#xFF0C;&#x4ECE; PDEC &#x7684;&#x9ECF;&#x86CB;&#x767D;&#x5206;&#x6CCC;&#x4E5F;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x80F0;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x6216;&#x9762;&#x503C; 2 &#x6FC0;&#x6D3B;&#x80BD;&#x3002;&#x7B26;&#x5408;&#x6D46;&#x819C;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x7684; PAR 2&#xFF0C;1 microm &#x9C81;&#x7C73;&#x90A3;&#x80F0;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x786E;&#x5B9E;&#x4E0D;&#x4FC3;&#x4F7F;&#x80DE;&#x4E2D;&#x6781;&#x5316; PDEC &#x819C; &#xFF1B;&#x53E6;&#x4E00;&#x65B9;&#x9762;&#xFF0C;&#x5728;&#x6444;&#x6C0F; 37 &#x5EA6; 10 microm &#x80F0;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x635F;&#x574F;&#x4E0A;&#x76AE;&#x5C4F;&#x969C;&#x8DB3;&#x591F;&#x4F7F;&#x5B83;&#x80FD;&#x591F;&#x8FBE;&#x5230;&#x5E76;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x6D46;&#x819C; PAR 2&#xFF0C;&#x4EE5;&#x523A;&#x6FC0;&#x80DE;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x5728; PDEC&#xFF0C;PAR 2 &#x6FC0;&#x6D3B;&#x589E;&#x52A0; [Ca(2+)](i) &#x548C;&#x6FC0;&#x6D3B; PKC &#x523A;&#x6FC0;&#x80DE;&#x53CA;&#x9ECF;&#x86CB;&#x767D;&#x5206;&#x6CCC;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x51FD;&#x6570;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8C03;&#x89E3; PAR 2 &#x5728;&#x4E0D;&#x540C;&#x578B;&#x53F7;&#x7684;&#x80F0;&#x817A;&#x708E;&#x7684;&#x62A5;&#x9053;&#x7684;&#x4FDD;&#x62A4;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x53D7;&#x4F53;-2 &#x589E;&#x52A0;&#x80F0;&#x7BA1;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x591A;&#x4E2A;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x9014;&#x5F84;&#x901A;&#x8FC7;&#x80DE;&#x3002;

Protease-activated receptor-2 (PAR-2) is activated when trypsin cleaves its NH(2) terminus to expose a tethered ligand. We previously demonstrated that PAR-2 activates ion channels in pancreatic duct epithelial cells (PDEC). Using real-time optical fluorescent probes, cyan fluorescence protein-Epac1-yellow fluorescence protein for cAMP, PH(PLC-delta1)-enhanced green fluorescent protein for phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate, and protein kinase Cgamma (PKCgamma)-C1-yellow fluorescence protein for diacylglycerol, we now define the signaling pathways mediating PAR-2 effect in dog PDEC. Although PAR-2 activation does not stimulate a cAMP increase, it induces phospholipase C to hydrolyze phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate into inositol 1,4,5-trisphosphate and diacylglycerol. Intracellular Ca(2+) mobilization from inositol 1,4,5-trisphosphate-sensitive Ca(2+) stores and a subsequent Ca(2+) influx through store-operated Ca(2+) channels cause a biphasic increase in intracellular Ca(2+) concentration ([Ca(2+)](i)), measured with Indo-1 dye. Single-cell amperometry demonstrated that this increase in [Ca(2+)](i) in turn causes a biphasic increase in exocytosis. A protein kinase assay revealed that trypsin also activates PKC isozymes to stimulate additional exocytosis. Paralleling the increased exocytosis, mucin secretion from PDEC was also induced by trypsin or the PAR-2 activating peptide. Consistent with the serosal localization of PAR-2, 1 microm luminal trypsin did not induce exocytosis in polarized PDEC monolayers; on the other hand, 10 microm trypsin at 37 degrees C damaged the epithelial barrier sufficiently so that it could reach and activate the serosal PAR-2 to stimulate exocytosis. Thus, in PDEC, PAR-2 activation increases [Ca(2+)](i) and activates PKC to stimulate exocytosis and mucin secretion. These functions may mediate the reported protective role of PAR-2 in different models of pancreatitis.

Protease-activated receptor-2 increases exocytosis via multiple signal transduction pathways in pancreatic duct epithelial cells.

Prot&eacute;ase-activated receptor-2 (PAR-2) est activ&eacute; lorsque la trypsine Clive son terminus NH(2) d&#39;exposer un ligand captif. Nous avons d&eacute;montr&eacute; pr&eacute;c&eacute;demment que PAR-2 active des canaux ioniques dans les cellules &eacute;pith&eacute;liales du canal pancr&eacute;atique (PDEC). Utilisant des sondes fluorescentes optiques en temps r&eacute;el, prot&eacute;ine de fluorescence jaune-Epac1-prot&eacute;ine de fluorescence cyan pour le cAMP, prot&eacute;ine fluorescente verte am&eacute;lior&eacute;e PH(PLC-delta1) pour phosphatidylinositol 4, 5-bisphosphate et la prot&eacute;ine kinase Cgamma (PKCgamma) - C1 - jaune fluorescence de diacylglyc&eacute;rol, nous d&eacute;finissons maintenant les voies de signalisation m&eacute;diation PAR-2 effet chez chien PDEC. Bien que l&#39;activation de PAR-2 ne stimule pas une augmentation de l&#39;AMPc, il induit une phospholipase C &agrave; hydrolyser le phosphatidylinositol 4, 5-bisphosphate en inositol 1,4,5-trisphosphate et diacylglyc&eacute;rol. Mobilisation intracellulaire de Ca(2+) de l&#39;inositol trisphosphate sensible-1,4,5 Ca(2+) stocke et un afflux de Ca(2+) ult&eacute;rieur par magasin fonctionnant Ca(2+) canaux entra&icirc;ne une augmentation biphasique concentration intracellulaire de Ca(2+) ([Ca(2+)](i)), mesur&eacute;e &agrave; l&#39;aide de colorants Indo-1. Amp&eacute;rom&eacute;trie monocellulaires ont d&eacute;montr&eacute; que cette augmentation [Ca(2+)](i) dans tour provoque un biphasique augmenter dans l&#39;exocytose. Une analyse de prot&eacute;ine kinase a r&eacute;v&eacute;l&eacute; que la trypsine active &eacute;galement les isozymes de la PKC pour stimuler l&#39;exocytose suppl&eacute;mentaire. Parall&egrave;le &agrave; l&#39;augmentation de l&#39;exocytose, s&eacute;cr&eacute;tion de mucine du PDEC est &eacute;galement induite par la trypsine ou le peptide activant PAR-2. Compatible avec la localisation s&eacute;reuse de PAR-2, 1 microm luminale trypsine n&#39;induisait pas exocytose dans les monocouches PDEC polaris&eacute;es ; en revanche, la trypsine microm 10 &agrave; 37 degr&eacute;s C endommag&eacute; de la barri&egrave;re &eacute;pith&eacute;liale suffisamment afin qu&#39;elle puisse atteindre et activer la s&eacute;reuse PAR-2 afin de stimuler l&#39;exocytose. Ainsi, dans le PDEC, PAR-2 activation augmente [Ca(2+)](i) et active la PKC pour stimuler la s&eacute;cr&eacute;tion de l&#39;exocytose et de mucine. Ces fonctions peuvent m&eacute;dier le r&ocirc;le protecteur signal&eacute; de PAR-2 dans les diff&eacute;rents mod&egrave;les de pancr&eacute;atite.

Prot&eacute;ase-activated receptor-2 augmente l&#39;exocytose par l&#39;interm&eacute;diaire de multiples voies de transduction de signal dans les cellules &eacute;pith&eacute;liales du canal pancr&eacute;atique.

Protease-aktivierten Rezeptor-2 (PAR-2) wird aktiviert, wenn Trypsin spaltet ihren Endbahnhof NH(2) gefesselte Ligand verf&uuml;gbar zu machen. Wir zeigten bereits, dass PAR-2 Ionenkan&auml;le Bauchspeicheldr&uuml;senhauptgangs Epithelzellen (PDEC) aktiviert. Mit Echtzeit-optische fluoreszierende Sonden, Cyan Fluoreszenz-Protein-Epac1-gelbe Fluoreszenz-Protein f&uuml;r Lager, PH(PLC-delta1) erh&ouml;hter gr&uuml;n fluoreszierendes Protein f&uuml;r Phosphatidylinositol-4, 5-bisphosphat und Protein-Kinase-Cgamma (PKCgamma) - C1 - gelbe Fluoreszenz Protein f&uuml;r Diacylglycerol, definieren wir nun die Vermittlung von PAR-2-Effekt in Hund PDEC Signalwege. Zwar PAR-2 Aktivierung keine Erh&ouml;hung der cAMP sprechen, induziert es Phospholipase C bis Phosphatidylinositol-4, 5-bisphosphat in Inosit 1,4,5-Trisphosphate und Diacylglycerol zu hydrolysieren. Intrazellul&auml;re Ca(2+) Mobilisierung von Inosit 1,4,5-Trisphosphate-Sensitive Ca(2+) speichert und ein anschlie&szlig;ende Ca(2+) Zustrom durch Speicher-betriebenen Ca(2+) Kan&auml;le verursachen eine Erh&ouml;hung der biphasische intrazellul&auml;re Ca(2+) Konzentration ([Ca(2+)](i)), gemessen mit Indo-1 Farbstoff. Einzellige Amperometry gezeigt, dass dieser Anstieg [Ca(2+)](i) wiederum dazu f&uuml;hrt, dass eine biphasische Zunahme der Exozytose. Ein Protein-Kinase-Probe ergab, dass Trypsin aktiviert auch PKC-Isoenzyme um zus&auml;tzliche Exozytose zu stimulieren. Parallel zur erh&ouml;hten Exozytose, war Mucin Sekretion von PDEC auch durch Trypsin oder das aktivierende PAR-2-Peptid ausgel&ouml;st. In &Uuml;bereinstimmung mit der serosal Lokalisierung von PAR-2, 1 Microm luminalen Trypsin nicht Exozytose in polarisierten PDEC Monolayers induzieren; auf der anderen Seite besch&auml;digt 10 Microm Trypsin bei 37 Grad C die epitheliale Barriere ausreichend damit es k&ouml;nnte erreichen und die serosal PAR-2 aktivieren um Exozytose zu stimulieren. So in PDEC, PAR-2 Aktivierung erh&ouml;ht [Ca(2+)](i) und aktiviert PKC um Exozytose und Mucin-Sekretion stimulieren. Diese Funktionen k&ouml;nnen die gemeldete sch&uuml;tzende Rolle der PAR-2 in verschiedenen Modellen von Pankreatitis vermitteln.

Protease-aktivierten Rezeptor-2 erh&ouml;ht Exozytose &uuml;ber mehrere Wege der Signal-Transduktion Bauchspeicheldr&uuml;senhauptgangs Epithelzellen.

Recettori attivati da proteasi-2 (PAR-2) viene attivato quando tripsina fende capolinea NH(2) per esporre un ligando legato. Abbiamo precedentemente dimostrato che PAR-2 attiva i canali ionici nelle cellule epiteliali del dotto pancreatico (PDEC). Utilizzando sonde fluorescenti ottiche in tempo reale, proteina proteina-Epac1-giallo fluorescenza fluorescenza ciano per cAMP, PH(PLC-delta1)-enhanced proteina fluorescente verde per fosfatidilinositolo 4,5-bisfosfato e proteina chinasi Cgamma (PKCgamma) - C1 - giallo fluorescenza per diacilglicerolo, definiamo ora le vie di segnalazione mediando PAR-2 effetto nel cane PDEC. Anche se PAR-2 attivazione non stimola un aumento del cAMP, esso induce la fosfolipasi C per idrolizzare fosfatidilinositolo 4,5-bisfosfato in inositolo 1.4.5-trifosfato e diacilglicerolo. Intracellulare Ca(2+) mobilitazione da inositolo 1.4.5-trifosfato-sensitive Ca(2+) memorizza e un afflusso di Ca(2+) successiva attraverso canali Ca(2+) store-operati causano un aumento bifasico in concentrazione intracellulare di Ca(2+) ([Ca(2+)](i)), misurato con la tintura di Indo-1. Cella singola amperometria ha dimostrato che questo aumento [Ca(2+)](i) a sua volta causa un bifasico aumentare nell&#39;esocitosi. Un&#39;analisi della chinasi di proteina ha rivelato che tripsina attiva anche isoenzimi PKC per stimolare ulteriori esocitosi. Parallelamente l&#39;esocitosi aumentata, secrezione di mucina da PDEC &egrave; stata anche indotta da tripsina o del peptide di attivazione di PAR-2. Coerente con la localizzazione sierose di PAR-2, 1 microm Luminale tripsina non ha indotto esocitosi in monostrati PDEC polarizzate; d&#39;altra parte, 10 microm tripsina a 37 gradi C danneggiato la barriera epiteliale sufficientemente che potrebbe raggiungere e attivare le sierose PAR-2 per stimolare esocitosi. Cos&igrave;, in PDEC, PAR-2 attivazione aumenta [Ca(2+)](i) e attiva la PKC per stimolare la secrezione di esocitosi e mucina. Queste funzioni possono mediare il ruolo protettivo segnalato di PAR-2 in diversi modelli di pancreatite.

2-Recettori attivati da proteasi aumenta esocitosi attraverso molteplici vie di trasduzione del segnale nelle cellule epiteliali del dotto pancreatico.

&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; 2 &#xFF08;&#x30D1;&#x30FC;-2&#xFF09; &#x306F;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D7;&#x30B7;&#x30F3; &#x30C6;&#x30B6;&#x30FC; &#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x3092;&#x516C;&#x958B;&#x3059;&#x308B;&#x305D;&#x306E; NH(2) &#x672B;&#x7AEF;&#x3092;&#x5207;&#x65AD;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x304D;&#x306B;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x4EE5;&#x524D;&#x3001;&#x30D1;&#x30FC; 2 &#x30A4;&#x30AA;&#x30F3; &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x81B5;&#x7BA1;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE; (PDEC) &#x3092;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x8A3C;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30EA;&#x30A2;&#x30EB;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0;&#x5149;&#x86CD;&#x5149;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6; &#x30B7;&#x30A2;&#x30F3;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; Epac1 &#x9EC4;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D7;&#x3001;PH(PLC-delta1) &#x5F37;&#x5316;&#x7DD1;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30C1;&#x30B8;&#x30EB;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB; 4, 5-&#x30D3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x3001;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; Cgamma (PKCgamma) - C1 - &#x9EC4;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30B8;&#x30A2;&#x30B7;&#x30EB;&#x30B0;&#x30EA;&#x30BB; &#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x4ECA;&#x72AC; PDEC &#x30D1;&#x30FC; 2 &#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D1;&#x30FC; 2 &#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; &#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D7;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x304C;&#x3001;&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30EA;&#x30D1;&#x30FC;&#x30BC; C &#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;&#x4E09;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178; 1,4,5 - &#x3068;&#x30B8;&#x30A2;&#x30B7;&#x30EB;&#x30B0;&#x30EA;&#x30BB; &#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x306B;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30C1;&#x30B8;&#x30EB;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB; 4, 5-&#x30D3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;1,4,5 &#x30C8;&#x30EA;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0; &#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x52D5;&#x54E1;&#x3092;&#x683C;&#x7D0D;&#x3057;&#x3001;&#x5F8C;&#x7D9A;&#x306E;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x6D41;&#x5165;&#x30B9;&#x30C8;&#x30A2;&#x4F5C;&#x52D5;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0; &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x539F;&#x56E0;&#x3068;&#x4E8C;&#x76F8;&#x6027;&#x5897;&#x52A0;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x6FC3;&#x5EA6; ([&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9; 1 &#x67D3;&#x4ED8;&#x6E2C;&#x5B9A; Ca(2+)](i))&#x3002;&#x5358;&#x4E00;&#x30BB;&#x30EB;&#x3057;&#x305F;&#x96FB;&#x6D41;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x6CD5;&#x306E;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306F;&#x4E8C;&#x76F8;&#x6027;&#x5897;&#x52A0;&#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3067;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x539F;&#x56E0;&#x306B;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3002;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D7;&#x30B7;&#x30F3;&#x8FFD;&#x52A0;&#x958B;&#x53E3;&#x5206;&#x6CCC;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3059;&#x308B; PKC &#x30A2;&#x30A4;&#x30BD;&#x30B6;&#x30A4;&#x30E0;&#x3092;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306B;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5897;&#x52A0;&#x306E;&#x958B;&#x53E3;&#x5206;&#x6CCC;&#x3068;&#x4E26;&#x884C;&#x3057;&#x3066;&#x3001;PDEC &#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x7C98;&#x6DB2;&#x306E;&#x5206;&#x6CCC;&#x3082;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D7;&#x30B7;&#x30F3;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30D1;&#x30FC; 2 &#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x8CAB;&#x6027;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x30D1;&#x30FC; 2 &#x306E;&#x6F3F;&#x819C;&#x5C40;&#x5728;&#x306F;&#x3001;1 microm luminal &#x30C8;&#x30EA;&#x30D7;&#x30B7;&#x30F3; &#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x504F;&#x5149; PDEC &#x5358;&#x5206;&#x5B50;&#x819C;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;;&#x305D;&#x306E;&#x4E00;&#x65B9;&#x3067;&#x3001;37 &#x2103; &#x3067; 10 microm &#x30C8;&#x30EA;&#x30D7;&#x30B7;&#x30F3;&#x4E0A;&#x76AE;&#x306E;&#x30D0;&#x30EA;&#x30A2;&#x306F;&#x305D;&#x308C;&#x304C;&#x5230;&#x9054;&#x3067;&#x304D;&#x6F3F;&#x306E;&#x30D1;&#x30FC; 2 &#x958B;&#x53E3;&#x5206;&#x6CCC;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3059;&#x308B;&#x3092;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x5341;&#x5206;&#x306B;&#x640D;&#x50B7;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;PDEC &#x3067;&#x30D1;&#x30FC; 2 &#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x5897;&#x52A0; [&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3068;&#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3068;&#x7C98;&#x6DB2;&#x306E;&#x5206;&#x6CCC;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3059;&#x308B; PKC &#x3092;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x95A2;&#x6570;&#x306F;&#x3001;&#x30D1;&#x30FC; 2 &#x81B5;&#x708E;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3067;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x4FDD;&#x8B77;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; 2 &#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x81B5;&#x7BA1;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x8907;&#x6570;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xD504;&#xB85C; &#xD14C;&#xC544; &#xC81C;-&#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;-2 (&#xD30C;-2) trypsin &#xACE0;&#xB300;&#xC758; &#xD14C;&#xB354; &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC;&#xB97C; &#xB178;&#xCD9C; &#xD558;&#xB294; NH(2) &#xC885;&#xCC29;&#xC5ED; &#xB54C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xD30C; 2 &#xCDCC; &#xC7A5; &#xB355;&#xD2B8; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; (PDEC)&#xC758; &#xC774;&#xC628; &#xCC44;&#xB110;&#xC744; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC2E4;&#xC2DC;&#xAC04; &#xAD11; &#xD615;&#xAD11; &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C;, &#xCEA0;&#xD504;&#xC758; &#xC2DC;&#xC548;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; Epac1 &#xB178;&#xB780; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;, PH(PLC-delta1) &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; phosphatidylinositol 4, 5-bisphosphate&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB179;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xBC0F; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; Cgamma (PKCgamma)-C1-&#xB178;&#xB780;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; diacylglycerol&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C;, &#xC9C0;&#xAE08; &#xD30C; 2 &#xAC1C; PDEC &#xD6A8;&#xACFC; &#xC911;&#xC7AC; &#xC2E0;&#xD638; &#xACBD;&#xB85C; &#xC815;&#xC758; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD30C; 2 &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xCEA0;&#xD504; &#xC99D;&#xAC00; &#xC790;&#xADF9; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;, &#xBE44;&#xB85D; phospholipase C inositol 1,4,5 trisphosphate &#xBC0F; diacylglycerol phosphatidylinositol 4, 5 bisphosphate hydrolyze&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Inositol&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; Ca(2+) &#xB3D9;&#xC6D0; 1,4,5 trisphosphate &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; ca(2+)&#xB97C; &#xC800;&#xC7A5; &#xD558; &#xACE0; &#xC800;&#xC7A5;&#xC18C; &#xC6B4;&#xC601; Ca(2+) &#xCC44;&#xB110;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xD6C4;&#xC18D; Ca(2+) &#xC720;&#xC785; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; Ca(2+) &#xB18D;&#xB3C4; ([Ca(2+)](i)), &#xC778;&#xB3C4; 1 &#xC5FC;&#xB8CC;&#xB85C; &#xCE21;&#xC815; &#xB098;&#xC544;&#xC84C;&#xB2E4; &#xC99D;&#xAC00; &#xC6D0;&#xC778;. &#xB2E8;&#xC77C; &#xC140; amperometry&#xB294; &#xC785;&#xC99D;&#xC774; &#xC99D;&#xAC00; [ca(2+)](i)&#xB294; &#xB098;&#xC544;&#xC84C;&#xB2E4; exocytosis &#xC99D;&#xAC00; &#xCC28;&#xB840; &#xC6D0;&#xC778;&#xC5D0;. &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xD2B8;&#xB9BD; &#xC2E0; &#xB610;&#xD55C; &#xCD94;&#xAC00;&#xC801;&#xC778; exocytosis &#xC790;&#xADF9; PKC isozymes &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC99D;&#xAC00; exocytosis&#xB97C; &#xBCD1;&#xB82C;&#xB85C; &#xC5F0;&#xACB0;, PDEC&#xC5D0;&#xC11C; mucin &#xBD84; &#xBE44;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xD2B8;&#xB9BD; &#xC2E0; &#xC774;&#xB098; &#xD30C; 2 &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xBC1C; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xD30C; 2&#xC758; serosal &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58; 1 microm luminal trypsin &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xC9C0; exocytosis &#xD3B8;&#xAD11;&#xB41C; PDEC monolayers;&#xC5D0; &#xB2E4;&#xB978; &#xD55C;&#xD3B8;&#xC73C;&#xB85C;, 37&#xB3C4; C&#xC5D0;&#xC11C; 10 microm trypsin &#xC190;&#xC0C1; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC7A5;&#xBCBD;&#xC744; &#xCDA9;&#xBD84;&#xD788; &#xB3C4;&#xB2EC; &#xD558; &#xACE0; serosal &#xD30C;-2 exocytosis &#xC790;&#xADF9; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, PDEC, &#xD30C; 2 &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC99D;&#xAC00; [Ca(2+)](i) exocytosis &#xBC0F; mucin &#xBD84; &#xBE44;&#xB97C; &#xC790;&#xADF9; &#xD558;&#xB294; PKC&#xB97C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD568;&#xC218;&#xB294; &#xCDCC; &#xC7A5; &#xC5FC;&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0; &#xD30C; 2&#xC758; &#xBCF4;&#xACE0; &#xB41C; &#xBCF4;&#xD638; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC911;&#xC7AC; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD504;&#xB85C; &#xD14C;&#xC544; &#xC81C;-&#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; 2 exocytosis &#xCDCC; &#xC7A5; &#xB355;&#xD2B8; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC2E0;&#xD638; &#xC804;&#xB2EC; &#xACBD;&#xB85C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC99D;&#xAC00;.

Proteasa activada del receptor-2 (PAR-2) se activa cuando la tripsina hiende su terminal NH(2) para exponer un ligando atado. Hemos demostrado previamente que PAR-2 activa canales i&oacute;nicos en las c&eacute;lulas epiteliales del conducto pancre&aacute;tico (PDEC). Utilizando sondas fluorescentes &oacute;pticas en tiempo real, prote&iacute;na de la fluorescencia de la prote&iacute;na-Epac1-amarillo cian fluorescencia Camp, prote&iacute;na verde fluorescente PH(PLC-delta1) mejorada para Fosfatidilinositol 4, 5-bifosfato y prote&iacute;na quinasa Cgamma (PKCgamma) - C1 - amarillo fluorescencia para diacilglicerol, ahora definimos las v&iacute;as de se&ntilde;alizaci&oacute;n mediar PAR-2 efecto en perro PDEC. Aunque PAR-2 activaci&oacute;n no estimula un aumento del campo, induce la fosfolipasa C para hidrolizar Fosfatidilinositol 4, 5-bifosfato en inositol 1,4,5-trifosfato y diacilglicerol. Movilizaci&oacute;n de CA intracelular de inositol 1,4,5 trifosfato-sensible CA almacena y una posterior afluencia de CA a trav&eacute;s de canales de CA de tienda que funciona causar un aumento de bif&aacute;sico en la concentraci&oacute;n intracelular de CA ([Ca(2+)](i)), medido con el tinte de Indo-1. Unicelulares Amperometr&iacute;a demostr&oacute; que este aumento en [Ca(2+)](i) en vuelta, provocando un bif&aacute;sico aumento en exocitosis. Un ensayo de la cinasa de prote&iacute;na revel&oacute; que tripsina activa tambi&eacute;n isoenzimas PKC para estimular exocitosis adicional. Ser paralelo a la creciente exocitosis, secreci&oacute;n de mucina de PDEC fue inducida tambi&eacute;n por tripsina o el p&eacute;ptido activador de PAR-2. De acuerdo con la localizaci&oacute;n serosas de PAR-2, 1 microm luminal tripsina no indujo exocitosis en monocapas PDEC polarizadas; por otra parte, 10 microm tripsina a 37 grados C da&ntilde;a la barrera epitelial suficientemente para que pudiera alcanzar y activar el serosal PAR-2 para estimular exocitosis. As&iacute;, en PDEC, PAR-2 activaci&oacute;n aumenta [Ca(2+)](i) y activa PKC para estimular la secreci&oacute;n de exocitosis y mucina. Estas funciones pueden mediar el papel protector divulgado de PAR-2 en diferentes modelos de pancreatitis.

Proteasa activada receptor-2 aumenta la exocitosis mediante m&uacute;ltiples v&iacute;as de transducci&oacute;n de se&ntilde;al en las c&eacute;lulas epiteliales del conducto pancre&aacute;tico.

&#x8C37;&#x6C28;&#x9178;&#x8F6C;&#x8FD0;&#x4F53;&#x8868;&#x793A;&#x6574;&#x4E2A;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E3B;&#x8981;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x5728;&#x54EA;&#x91CC;&#x8981;&#x6E05;&#x9664;&#x91CA;&#x653E;&#x7684;&#x8C37;&#x6C28;&#x9178;&#x4ECE;&#x7A81;&#x89E6;&#x524D;&#x7EC8;&#x7AEF;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x4E2D;&#x5927;&#x9F20;&#x677E;&#x679C;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8F6C;&#x8FD0;&#x65B0;&#x578B;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x6B64;&#x7535;&#x8F6C;&#x8FD0;&#x86CB;&#x767D;&#x8FDB;&#x884C;&#x5916;&#x6765;&#x5F53;&#x524D;&#x54CD;&#x5E94; L-&#x8C37;&#x6C28;&#x9178;&#x548C; L &#x6216; D-&#x5929;&#x95E8;&#x51AC;&#x6C28;&#x9178;&#x548C;&#x53BB;&#x6781;&#x5316;&#x819C;&#x7247;&#x94B3;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x4E2D;&#x7684;&#x819C;&#x3002;Ca2 + &#x6210;&#x50CF;&#x8868;&#x660E;&#x8F6C;&#x8FD0;&#x86CB;&#x767D;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x53BB;&#x6781;&#x5316;&#x8BF1;&#x5BFC; Ca2 + &#x5927;&#x91CF;&#x901A;&#x8FC7;&#x7535;&#x538B;&#x95E8;&#x63A7;&#x6027; Ca2 + &#x901A;&#x9053;&#x3002;Ca2 + &#x4E0A;&#x5347;&#x6700;&#x540E;&#x8BF1;&#x53D1;&#x8C37;&#x6C28;&#x9178;&#x80DE;&#x6240;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x7684;&#x78B3;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x5B89;&#x57F9;&#x548C;&#x9AD8;&#x6548;&#x6DB2;&#x76F8;&#x8272;&#x8C31;&#x6CD5;&#x3002;&#x5728;&#x5BC6;&#x5BC6;&#x7684;&#x677E;&#x679C;&#x4F53;&#x677E;&#x679C;&#x4F53;&#x7247;&#xFF0C;&#x6709;&#x6548;&#x5730;&#x4ECE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x91CA;&#x653E;&#x7684;&#x8C37;&#x6C28;&#x9178;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x8C37;&#x6C28;&#x9178;&#x8F6C;&#x8FD0;&#x4F53;&#x5728;&#x76F8;&#x90BB;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x6C2F;&#x5316;&#x94BE;&#x6781;&#x5316;&#x6216;&#x4E59;&#x9170;&#x80C6;&#x78B1;&#x7684; Ca2 + &#x4FE1;&#x53F7;&#x4F20;&#x64AD;&#x901A;&#x8FC7;&#x51E0;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x5C42;&#x7531;&#x4E8E;&#x84C4;&#x70ED;&#x5F0F;&quot;&#x8C37;&#x6C28;&#x9178;&#x7684;&#x8C37;&#x6C28;&#x9178;&#x91CA;&#x653E;&quot;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x8C37;&#x6C28;&#x9178;&#x8F6C;&#x8FD0;&#x4F53;&#x8C03;&#x89E3; L-&#x8C37;&#x6C28;&#x9178;&#x540C;&#x6B65;&#x7684;&#x63D0;&#x5347;&#x548C;&#x4ECE;&#x800C;&#x6709;&#x6548;&#x677E;&#x679C;&#x817A;&#x4E2D;&#x4E8B;&#x5148;&#x786E;&#x5B9A;&#x6291;&#x5236;&#x4EE3;&#x8C22;&#x578B;&#x8C37;&#x6C28;&#x9178;&#x53D7;&#x4F53;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E0B;&#x8C03;&#x892A;&#x9ED1;&#x6FC0;&#x7D20;&#x5206;&#x6CCC;&#x3002;

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Glutamate transporters are expressed throughout the CNS where their major role is to clear released glutamate from presynaptic terminals. Here, we report a novel function of the transporter in rat pinealocytes. This electrogenic transporter conducted inward current in response to L-glutamate and L- or D-aspartate and depolarized the membrane in patch-clamp experiments. Ca2+ imaging demonstrated that the transporter-mediated depolarization induced a significant Ca2+ influx through voltage-gated Ca2+ channels. The Ca2+ rise finally evoked glutamate exocytosis as detected by carbon-fiber amperometry and by HPLC. In pineal slices with densely packed pinealocytes, glutamate released from the cells effectively activated glutamate transporters in neighboring cells. The Ca2+ signal generated by KCl depolarization or acetylcholine propagated through several cell layers by virtue of the regenerative "glutamate-induced glutamate release." Therefore, we suggest that glutamate transporters mediate synchronized elevation of L-glutamate and thereby efficiently downregulate melatonin secretion via previously identified inhibitory metabotropic glutamate receptors in the pineal gland.

Glutamate transporter-mediated glutamate secretion in the mammalian pineal gland.

Transporteurs de glutamate sont exprim&eacute;es tout au long de la CNS, o&ugrave; leur r&ocirc;le majeur est d&#39;effacer le glutamate lib&eacute;r&eacute; des terminaisons pr&eacute;synaptiques. Nous rapportons ici une nouvelle fonction du transporteur dans les pin&eacute;alocytes de rat. Ce transporteur &eacute;lectrog&eacute;nique men&eacute;e courant entrant en r&eacute;ponse &agrave; L-glutamate et L - ou D-aspartate et d&eacute;polaris&eacute; la membrane dans les exp&eacute;riences de patch-clamp. Imagerie Ca2 + a d&eacute;montr&eacute; que la d&eacute;polarisation induite par le transporteur induit un afflux significatif de Ca2 + par le biais de canaux Ca2 + voltage-d&eacute;pendants. La hausse de Ca2 +, enfin, &eacute;voqu&eacute;e par exocytose de glutamate tel que d&eacute;tect&eacute; par amp&eacute;rom&eacute;trie en fibre de carbone et par HPLC. Dans la glande pin&eacute;ale tranches avec des pin&eacute;alocytes des, glutamate lib&eacute;r&eacute; des cellules effectivement activ&eacute; transporteurs de glutamate dans les cellules voisines. Le Ca2 + signal g&eacute;n&eacute;r&eacute; par la d&eacute;polarisation de KCl ou l&#39;ac&eacute;tylcholine propag&eacute;e par le biais de plusieurs couches de cellules en vertu de la r&eacute;g&eacute;n&eacute;ration &laquo; la lib&eacute;ration de glutamate induite par le glutamate. &raquo; Par cons&eacute;quent, nous sugg&eacute;rons que les transporteurs de glutamate m&eacute;dient &eacute;l&eacute;vation synchronis&eacute;e de L-glutamate et ainsi efficacement r&eacute;gulent la s&eacute;cr&eacute;tion de m&eacute;latonine par l&#39;interm&eacute;diaire de r&eacute;cepteurs de glutamate m&eacute;tabotropique inhibitrice pr&eacute;c&eacute;demment identifi&eacute;s dans la glande pin&eacute;ale.

Glutamate glutamate induite par le transporteur de s&eacute;cr&eacute;tion dans la glande pin&eacute;ale chez les mammif&egrave;res.

Glutamat-Transporter werden im gesamten CNS ausgedr&uuml;ckt, wo ihre Hauptrolle ist ver&ouml;ffentlichten Glutamat von pr&auml;synaptischen Terminals zu l&ouml;schen. Hier berichten wir &uuml;ber eine neue Funktion des Transporters in Ratte Pinealocytes. Diese elektrizit&auml;tserzeugende Transporter durchgef&uuml;hrt nach innen Strom in Reaktion auf L-Glutamat und L - oder D-Aspartat und ersch&uuml;tterten die Membran in Patch-Clamp-Experimenten. Ca2 + Bildgebung zeigte, dass die Depolarisierung Transporter-vermittelte einen erheblichen Ca2 + Zustrom durch Spannung-Gating Ca2 + Kan&auml;le induziert. Der Ca2 +-Anstieg evoziert schlie&szlig;lich Glutamat Exozytose, wie durch Kohlefaser-Amperometry und HPLC erkannt. Zirbeldr&uuml;se Scheiben mit dicht gepackten Pinealocytes aktiviert Glutamat ver&ouml;ffentlicht aus den Zellen effektiv Glutamat-Transporter im benachbarten Zellen. Das Ca2 +-Signal generiert von KCl Depolarisation oder Acetylcholin weitergegeben durch mehrere Schichten der Zelle aufgrund der regenerativen &quot;induziert durch Glutamat-Release&quot;. Daher wird empfohlen, dass Glutamat-Transporter synchronisierte Erh&ouml;hung von L-Glutamat und damit effizient gulieren Melatonin-Sekretion &uuml;ber zuvor identifizierten hemmenden Metabotropic Glutamat-Rezeptoren in der Zirbeldr&uuml;se zu vermitteln.

Glutamat-Transporter-vermittelte Glutamat-Sekretion in den S&auml;ugetier-Pineal Dr&uuml;se.

I trasportatori di glutammato sono espresse in tutto lo SNC dove loro ruolo principale &egrave; quello di cancellare glutammato rilasciato dai terminali presinaptiche. Riportiamo una funzione romanzo del trasportatore nel ratto pinealocytes. Questo trasportatore elettrogeniche condotto corrente verso l&#39;interno in risposta alla L-glutammato e L-D-aspartato e depolarized la membrana in esperimenti di patch-clamp. Ca2 + imaging ha dimostrato che la depolarizzazione mediata da trasportatore indotta da un afflusso significativo del Ca2 + attraverso canali Ca2 + voltaggio-dipendenti. L&#39;aumento di Ca2 + evocato infine esocitosi glutammato come rilevato da fibra di carbonio amperometria e HPLC. Nella ghiandola pineale fette con densamente pinealocytes, glutammato rilasciato dalle cellule efficacemente attivato i trasportatori di glutammato in celle vicine. Il Ca2 + segnale generato dalla depolarizzazione di KCl o acetilcolina propagato attraverso diversi strati cellulari in virt&ugrave; della rigenerativa &quot;indotta da glutammato glutammato release.&quot; Pertanto, suggeriamo che i trasportatori di glutammato mediano sincronizzato elevazione del L-glutammato e quindi efficacemente sottoregola secrezione di melatonina attraverso i recettori del glutammato metabotropico inibitorio precedentemente identificati nella ghiandola pineale.

Glutammato glutammato mediata da trasportatore secrezione della ghiandola pineale dei mammiferi.

&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x9178;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x7D42;&#x672B;&#x304B;&#x3089;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x9178;&#x3092;&#x30AA;&#x30D5;&#x306B;&#x305D;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x306F;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x5168;&#x4F53;&#x3067;&#x8868;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8; pinealocytes &#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x65B0;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x8D77;&#x96FB;&#x529B;&#x578B;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306F;&#x5185;&#x5411;&#x304D;&#x96FB;&#x6D41; l-&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x9178;&#x3068;&#x30A2;&#x30B9;&#x30D1;&#x30E9;&#x30AE;&#x30F3;&#x3084; D &#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x3066;&#x5B9F;&#x65BD;&#x3057;&#x3001;&#x819C;&#x30D1;&#x30C3;&#x30C1; &#x30FB; &#x30AF;&#x30E9;&#x30F3;&#x30D7;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3067;&#x7121;&#x504F;&#x5149;&#x5316;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Ca 2 + &#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0; &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x8131;&#x5206;&#x6975;&#x96FB;&#x4F4D; ca 2 + &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x5927;&#x5E45;&#x306A; ca 2 + &#x6D41;&#x5165;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x9AD8;&#x901F;&#x6DB2;&#x4F53;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x3067;&#x70AD;&#x7D20;&#x7E4A;&#x7DAD;&#x3057;&#x305F;&#x96FB;&#x6D41;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x6CD5;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F; ca 2 + &#x4E0A;&#x6607;&#x306F;&#x6700;&#x7D42;&#x7684;&#x306B;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x9178;&#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x8A98;&#x767A;&#x3002;&#x677E;&#x679C;&#x4F53;&#x306E;&#x30B9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B9;&#x306B;&#x5BC6;&#x96C6; pinealocytes &#x3068;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x9178;&#x304B;&#x3089;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306B;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x96A3;&#x63A5;&#x30BB;&#x30EB; &#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x9178;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; &#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x3002;KCl &#x8131;&#x5206;&#x6975;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F; ca 2 + &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x3001;&#x518D;&#x751F;&#x306E;&#x304A;&#x304B;&#x3052;&#x3067;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5C64;&#x300C;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x9178;&#x6027;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x9178;&#x653E;&#x51FA;.&#x300D;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x9178;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; l-&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x9178;&#x306E;&#x540C;&#x671F;&#x306E;&#x6A19;&#x9AD8;&#x3068;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306B;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5; &#x30EC;&#x30FC;&#x30C8; &#x30E1;&#x30E9;&#x30C8;&#x30CB;&#x30F3;&#x5206;&#x6CCC;&#x677E;&#x679C;&#x4F53;&#x3067;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6291;&#x5236;&#x6027;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x578B;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x9178;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x677E;&#x679C;&#x4F53;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x9178;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x9178;&#x5206;&#x6CCC;&#x3002;

&#xC870;&#xBBF8;&#xB8CC; &#xC804;&#xC1A1;&#xAE30; CNS &#xC5B4;&#xB514; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560; presynaptic &#xD130;&#xBBF8;&#xB110;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD9C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xC870;&#xBBF8;&#xB8CC;&#xB97C; &#xCDE8;&#xC18C; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xD45C;&#xD604; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC950; pinealocytes&#xC5D0; &#xC804;&#xC1A1;&#xC758; &#xC18C;&#xC124; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xBCF4;&#xACE0;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; electrogenic &#xC804;&#xC1A1; &#xC2E4; L-glutamate&#xC640; aspartate L &#xB610;&#xB294; D &#xC548;&#xCABD;&#xC73C;&#xB85C; &#xD604;&#xC7AC; &#xC2E4;&#xC2DC; &#xD558; &#xACE0; &#xD328;&#xCE58; &#xD074;&#xB7A8;&#xD504; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9C9; depolarized. Ca2 + &#xC601;&#xC0C1; &#xC804;&#xC1A1; &#xC911;&#xC7AC; depolarization &#xC804;&#xC555; &#xAC1C;&#xD3D0; Ca2 + &#xCC44;&#xB110;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; Ca2 + &#xC720;&#xC785; &#xC720;&#xB3C4; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD0C4;&#xC18C; &#xC12C;&#xC720; amperometry &#xBC0F; HPLC&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAC10;&#xC9C0; Ca2 + &#xC99D;&#xAC00; &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C; &#xC870;&#xBBF8;&#xB8CC; exocytosis&#xB97C; &#xBD88;&#xB7EC; &#xC77C;&#xC73C;&#xCF30;&#xB2E4;. &#xBC00;&#xB3C4;&#xAC00; &#xD3EC;&#xC7A5;&#xB41C; pinealocytes&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xB1CC;&#xC758; &#xC870;&#xAC01; &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC1C;&#xD45C; &#xD558;&#xB294; &#xC870;&#xBBF8;&#xB8CC; &#xC778;&#xC811; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; glutamate &#xC804;&#xC1A1;&#xAE30; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;. KCl depolarization &#xB610;&#xB294; &#xC544; &#xC138; &#xD2F8; &#xCF5C;&#xB9B0;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0DD;&#xC131; &#xB41C; Ca2 + &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xB355;&#xD0DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC138;&#xD3EC; &#xCE35;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC804;&#xD30C; &quot;&#xC0B0; &#xC5FC; &#xC0B0; &#xC5FC;&#xC744; &#xC774;&#xC6A9;&#xD55C; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4;.&quot; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC870;&#xBBF8;&#xB8CC; &#xC804;&#xC1A1;&#xAE30; &#xB3D9;&#xAE30;&#xD654; &#xB41C; L-glutamate &#xC0C1;&#xC2B9; &#xBC0F; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD568;&#xC73C;&#xB85C;&#xC368; downregulate &#xBA5C; &#xB77C; &#xD1A0; &#xB2CC; &#xBD84; &#xBE44;&#xB294; &#xB1CC;&#xC758; &#xC1A1;&#xACFC;&#xC120;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xD655;&#xC778; &#xB41C; &#xAE08;&#xC9C0; metabotropic glutamate &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC911;&#xC7AC; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC870;&#xBBF8;&#xB8CC; &#xC870;&#xBBF8;&#xB8CC; &#xC804;&#xC1A1; &#xC911;&#xC7AC; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958;&#xC758; &#xC1A1;&#xACFC;&#xC120;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84; &#xBE44;.

Transportadores de glutamato se expresan a trav&eacute;s del CNS donde su funci&oacute;n principal es limpiar glutamato liberado de las terminales presin&aacute;pticas. Presentamos una novedosa funci&oacute;n del transportador en rata pinealocitos. Este transportador electr&oacute;genos realiz&oacute; una corriente interna en respuesta a L-glutamato y L - o D-aspartato y depolarized de la membrana en experimentos de patch-clamp. Ca2 + proyecci&oacute;n de imagen demostr&oacute; que la despolarizaci&oacute;n mediada por transportador inducida por una afluencia importante del Ca2 + a trav&eacute;s de canales voltaje-bloqueados Ca2 +. El aumento de Ca2 + finalmente evoc&oacute; la exocitosis de glutamato como detectado por fibra de carbono Amperometr&iacute;a y por HPLC. En rebanadas pineales con densamente pinealocitos, glutamato liberado de las c&eacute;lulas con eficacia activa transportadores de glutamato en los vecinos de las c&eacute;lulas. El Ca2 + se&ntilde;al generada por la despolarizaci&oacute;n de KCl o acetilcolina se propaga a trav&eacute;s de varias capas de c&eacute;lulas en virtud de la regeneraci&oacute;n &quot;la liberaci&oacute;n de glutamato inducida por glutamato.&quot; Por lo tanto, sugerimos que los transportadores de glutamato median elevaci&oacute;n sincronizada del L-glutamato y tal modo eficiente secreci&oacute;n de la melatonina downregulate trav&eacute;s de receptores de glutamato metabotr&oacute;picos inhibitorio previamente identificadas en la gl&aacute;ndula pineal.

Secreci&oacute;n de glutamato mediado por transportador de glutamato en la gl&aacute;ndula pineal mam&iacute;fera.

&#x63D0;&#x5347;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7ECF;&#x6D53;&#x5EA6; ([Ca(2+)](i)) &#x89E6;&#x53D1;&#x80DE;&#x5410;&#x7684;&#x80F0;&#x7BA1;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x6CCC;&#x9897;&#x7C92;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8FD8;&#x63A7;&#x5236;&#x9897;&#x7C92;&#x8FD0;&#x52A8;&#x3002;&#x9057;&#x4F20;&#x7269;&#x8D28;&#x6807;&#x8BB0;&#x9897;&#x7C92;&#x7684;&#x8FD0;&#x52A8;&#x7A81;&#x7136;&#x505C;&#x6B62; [Ca(2+)](i) &#x589E;&#x52A0;&#x540E;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x4E1D;&#x72B6;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D; (F-&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;) &#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6574;&#x4E2A;&#x52A8;&#x529B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x91CD;&#x5408;&#x3002;&#x9AD8;&#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#xFF0C;&#x65B0;&#x7684; F-&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7F51;&#x5F88;&#x6D53;&#x7684;&#x9897;&#x7C92;&#x5927;&#x5C0F;&#x7684;&#x8702;&#x7A9D;&#x7ED3;&#x6784;&#x51FA;&#x73B0;&#x8EAB;&#x4F53;&#x88AB;&#x56F0;&#x5728;&#x91CC;&#x9762;&#x3002;&#x4E0E; latrunculin B F-&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x89E3;&#x805A;&#x963B;&#x6B62; F-&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x5F62;&#x6210;&#x548C;&#x9897;&#x7C92;&#x7684;&#x902E;&#x6355;&#x3002;&#x6709;&#x8DA3;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x5F53;&#x76D1;&#x6D4B;&#x4E0E;&#x5168;&#x5185;&#x53CD;&#x5C04;&#x8367;&#x5149;&#x663E;&#x5FAE;&#x672F;&#xFF0C;&#x56FA;&#x5B9A;&#x5316;&#x7684;&#x9897;&#x7C92;&#x4ECD;&#x8D70;&#x5411;&#x6162;&#x6162;&#x5730;&#x3001; &#x534F;&#x8C03;&#x4E00;&#x81F4;&#x5730;&#x7B49;&#x79BB;&#x5B50;&#x819C;&#x3002;&#x8FD9;&#x7EC4;&#x6613;&#x4F4D;&#x5E9F;&#x9664;&#x4E86;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x53D7;&#x4F53;&#x963B;&#x6EDE;&#x5242;&#x3002;&#x80DE;&#x6D4B;&#x5B9A; microamperometry &#x5EFA;&#x8BAE;&#xFF0C;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x81F4;&#x5BC6; F-&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x6291;&#x5236;&#x7F51;&#x80DE;&#x5728;&#x5C0F;&#x7ECF;&#x4E0A;&#x5347; &lt; 1 microm&#x3002;&#x5927; [Ca(2+)](i) &#x4E0A;&#x6DA8;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x80DE;&#x7531;&#x4E8E;&#x9897;&#x7C92;&#x548C;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x7EDF;&#x7B79;&#x6613;&#x4F4D;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE; Ca(2+) &#x4F9D;&#x8D56;&#x51BB;&#x7ED3;&#x7684;&#x9897;&#x7C92;&#x7B5B;&#x9009;&#x51FA;&#x5F31;&#x7684;&#x6295;&#x5165;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5141;&#x8BB8;&#x901A;&#x8FC7;&#x63A7;&#x5236;&#x9897;&#x7C92;&#x8FD0;&#x52A8;&#x7684;&#x80DE;&#x5410;&#x4E0B;&#x66F4;&#x5927;&#x7684;&#x6295;&#x5165;&#x3002;

&#x63A7;&#x5236;&#x6D41;&#x52A8;&#x6027;&#x9897;&#x7C92;&#x548C;&#x80DE;&#x7531; Ca2 +-F-&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x5728;&#x80F0;&#x817A;&#x764C;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F9D;&#x8D56;&#x5F62;&#x6210;&#x5BFC;&#x7BA1;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;

Elevation of intracellular Ca(2+) concentration ([Ca(2+)](i)) triggers exocytosis of secretory granules in pancreatic duct epithelia. In this study, we find that the signal also controls granule movement. Motions of fluorescently labeled granules stopped abruptly after a [Ca(2+)](i) increase, kinetically coincident with formation of filamentous actin (F-actin) in the whole cytoplasm. At high resolution, the new F-actin meshwork was so dense that cellular structures of granule size appeared physically trapped in it. Depolymerization of F-actin with latrunculin B blocked both the F-actin formation and the arrest of granules. Interestingly, when monitored with total internal reflection fluorescence microscopy, the immobilized granules still moved slowly and concertedly toward the plasma membrane. This group translocation was abolished by blockers of myosin. Exocytosis measured by microamperometry suggested that formation of a dense F-actin meshwork inhibited exocytosis at small Ca(2+) rises <1 microm. Larger [Ca(2+)](i) rises increased exocytosis because of the co-ordinate translocation of granules and fusion to the membrane. We propose that the Ca(2+)-dependent freezing of granules filters out weak inputs but allows exocytosis under stronger inputs by controlling granule movements.

Control of granule mobility and exocytosis by Ca2+ -dependent formation of F-actin in pancreatic duct epithelial cells.

&Eacute;l&eacute;vation de la concentration intracellulaire de Ca(2+) ([Ca(2+)](i)) d&eacute;clenche l&#39;exocytose des granules de s&eacute;cr&eacute;tion dans l&#39;&eacute;pith&eacute;lium du canal pancr&eacute;atique. Dans cette &eacute;tude, nous constatons que le signal de contr&ocirc;le &eacute;galement le mouvement de granule. Mouvements des granules fluorescent &eacute;tiquet&eacute;s s&#39;est arr&ecirc;t&eacute; brusquement apr&egrave;s une [Ca(2+)](i) croissance, cin&eacute;tiquement co&iuml;ncide avec la formation de filaments d&#39;actine (actine-F) dans le cytoplasme en entier. &Agrave; haute r&eacute;solution, le r&eacute;seau d&#39;actine F nouvel &eacute;tait si dense que les structures cellulaires de taille de granule est apparu physiquement pi&eacute;g&eacute;s dedans. D&eacute;polym&eacute;risation de l&#39;actine F avec Latrunculine B bloqu&eacute; tant la formation de l&#39;actine F et l&#39;arrestation de granules. Fait int&eacute;ressant, lorsque surveill&eacute; avec la microscopie de fluorescence de r&eacute;flexion totale interne, les granules immobilis&eacute;es encore d&eacute;plac&eacute; lentement et de mani&egrave;re concert&eacute;e vers la membrane plasmique. Cette translocation de groupe a &eacute;t&eacute; abolie par les bloqueurs de la myosine. Exocytose mesur&eacute;e par microamperometry a sugg&eacute;r&eacute; que la formation d&#39;une exocytose de meshwork inhib&eacute;e actine F dense &agrave; petits Ca(2+) rises &lt; 1 microm. Plus grande [Ca(2+)](i) rises accrue exocytose &agrave; cause de la translocation de coordonner des granules et de fusion de la membrane. Nous proposons que le gel de Ca(2+) d&eacute;pendant des granules filtre les entr&eacute;es faibles mais permet l&#39;exocytose sous entr&eacute;es plus fortes en contr&ocirc;lant les mouvements de granule.

Contr&ocirc;le de la mobilit&eacute; de granule et exocytose par le Ca2 +-d&eacute;pendante formation d&#39;actine-F dans le pancr&eacute;as conduit les cellules &eacute;pith&eacute;liales.

Erh&ouml;hung der intrazellul&auml;ren Ca(2+) Konzentration ([Ca(2+)](i)) l&ouml;st Exozytose sekretorisches Granulat in Bauchspeicheldr&uuml;senhauptgangs Epithelien. In dieser Studie finden wir, dass das Signal auch Untermodul Bewegung steuert. Bewegungen der Leuchtstoff beschriftetem Granulat abrupt gestoppt, nachdem eine [Ca(2+)](i) Steigerung, kinetisch zusammenfallend mit der Bildung der filament&ouml;sen Aktin (F-Actin) im gesamten Cytoplasma. Mit hoher Aufl&ouml;sung war die neue F-Actin-Netzwerk so dicht, dass zellul&auml;re Strukturen der Korngr&ouml;&szlig;e k&ouml;rperlich gefangen in ihm erschien. Depolymerisation von F-Actin mit Latrunculin B blockiert die F-Actin-Bildung und die Verhaftung von Granulaten. Interessanterweise zog mit Totalreflexion Fluoreszenzmikroskopie &uuml;berwacht, das immobilisierte Granulat noch langsam und Entwicklungsprojekte in Richtung der Plasmamembran. Diese Translokation Gruppe wurde durch Blocker von Myosin abgeschafft. Exozytose gemessen von Microamperometry vorgeschlagen, dass Bildung von einem dichten F-Actin Netzwerk gehemmt Exozytose an kleinen Ca(2+) steigt &lt; 1 Microm. Gr&ouml;&szlig;ere [Ca(2+)](i) steigt erh&ouml;hte Exozytose wegen der koordinieren-Translokation von Granulaten und Verschmelzung auf die Membrane. Wir schlagen vor, Ca(2+)-abh&auml;ngige Einfrieren von Granulat heraus schwach Eing&auml;nge filtert erm&ouml;glicht aber Exozytose unter st&auml;rkeren Eing&auml;nge Untermodul Bewegungen steuern.

Kontrolle der Untermodul Mobilit&auml;t und Exozytose von Ca2 +-abh&auml;ngige Bildung von F-Actin im Pankreas duct Epithelzellen.

Elevazione della concentrazione intracellulare di Ca(2+) ([Ca(2+)](i)) innesca esocitosi dei granuli secretori nell&#39;epitelio del dotto pancreatico. In questo studio, troviamo che il segnale controlla anche il movimento di granulo. Moti di granuli fluorescente contrassegnati bruscamente interrotto dopo un [Ca(2+)](i) aumento, cineticamente coincida con formazione di actina filamentosa (F-actina) nel citoplasma intero. Ad alta risoluzione, il nuovo reticolo di F-actina &egrave; stato cos&igrave; denso che strutture cellulari di dimensioni granulo apparvero fisicamente intrappolate in essa. Depolimerizzazione di F-actina con latrunculin B bloccato sia la formazione di F-actina e l&#39;arresto dei granuli. &Egrave; interessante notare che, quando monitorati con microscopia di fluorescenza di riflessione interna totale, i granuli immobilizzati ancora spostato lentamente e concertata verso la membrana plasmatica. Questa traslocazione di gruppo &egrave; stata abolita da bloccanti della miosina. Esocitosi misurata da microamperometry ha suggerito che formazione di un denso esocitosi di trabecolato inibito F-actina a piccoli aumenti di Ca(2+) &lt; 1 microm. Pi&ugrave; grandi [Ca(2+)](i) aumenti aumento esocitosi a causa della traslocazione di coordinare dei granuli e la fusione alla membrana. Proponiamo che il congelamento Ca(2+)-dipendente dei granuli filtra deboli ingressi ma permette esocitosi sotto forti ingressi di controllo dei movimenti del granulo.

Controllo della mobilit&agrave; del granulo ed esocitosi di Ca2 +-dipendente dalla formazione di F-actina in pancreatico cellule epiteliali del condotto.

&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x4E0A;&#x6607; ([Ca(2+)](i)) &#x30C8;&#x30EA;&#x30AC;&#x30FC;&#x81B5;&#x7BA1;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x6CCC;&#x9846;&#x7C92;&#x306E;&#x958B;&#x53E3;&#x653E;&#x51FA;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;, &#x9846;&#x7C92;&#x306E;&#x52D5;&#x304D;&#x3082;&#x3001;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x898B;&#x3064;&#x3051;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x86CD;&#x5149;&#x306B;&#x5206;&#x985E;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x9846;&#x7C92;&#x306E;&#x904B;&#x52D5;&#x304C;&#x7A81;&#x7136;&#x505C;&#x6B62;&#x3001;[&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x5F8C;&#x3001;&#x901F;&#x5EA6;&#x8AD6;&#x7684; (F &#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;) &#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3; &#x30D5;&#x30A3;&#x30E9;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9AD8;&#x89E3;&#x50CF;&#x5EA6;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x65B0;&#x3057;&#x3044; F &#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x7DB2;&#x76EE;&#x9846;&#x7C92;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x69CB;&#x9020;&#x304C;&#x305D;&#x308C;&#x3067;&#x7269;&#x7406;&#x7684;&#x306B;&#x9589;&#x3058;&#x8FBC;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x767B;&#x5834;&#x3068;&#x3066;&#x3082;&#x5BC6;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;F-&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x8131;&#x91CD;&#x5408; latrunculin B &#x3068; F &#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x9846;&#x7C92;&#x306E;&#x902E;&#x6355;&#x3092;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8208;&#x5473;&#x6DF1;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;&#x5168;&#x5185;&#x90E8;&#x53CD;&#x5C04;&#x86CD;&#x5149;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3068;&#x3092;&#x76E3;&#x8996;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x56FA;&#x5B9A;&#x5316;&#x9846;&#x7C92;&#x307E;&#x3060;&#x3086;&#x3063;&#x304F;&#x308A;&#x3068;&#x5B89;&#x4FDD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x819C;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x79FB;&#x52D5;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x8EE2;&#x5EA7;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AB;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5EC3;&#x6B62;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Microamperometry &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x793A;&#x5506;&#x305D;&#x306E;&#x5BC6;&#x306A; F &#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x6291;&#x5236;&#x7DB2;&#x76EE;&#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3067;&#x5C0F;&#x3055;&#x306A;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x4E0A;&#x6607;&#x306E;&#x5F62;&#x6210; &lt; 1 microm&#x3002;&#x5927;&#x304D;&#x3044; [&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x4E0A;&#x6607;&#x5897;&#x52A0;&#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9; &#x30B3;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30CD;&#x30FC;&#x30C8;&#x8EE2;&#x5EA7;&#x9846;&#x7C92;&#x3068;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3002;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B; Ca(2+) &#x4F9D;&#x5B58;&#x51CD;&#x7D50;&#x9846;&#x7C92;&#x304C;&#x3046;&#x3061;&#x306E;&#x5F31;&#x3044;&#x5165;&#x529B;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30BF;&#x30FC;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x5F37;&#x3044;&#x5165;&#x529B;&#x4E0B;&#x9846;&#x7C92;&#x306E;&#x52D5;&#x304D;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x9846;&#x7C92;&#x306E;&#x30E2;&#x30D3;&#x30EA;&#x30C6;&#x30A3;&#x3068;&#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9; ca 2 + &#x306E;&#x5236;&#x5FA1;-F &#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x4F9D;&#x5B58;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3067;&#x81B5;&#x7BA1;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3002;

&#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; Ca(2+) &#xB18D;&#xB3C4; &#xC0C1;&#xC2B9; ([Ca(2+)](i)) &#xD2B8;&#xB9AC;&#xAC70; exocytosis &#xCDCC; &#xC7A5; &#xB355;&#xD2B8; &#xC0C1;&#xD53C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xACFC; &#xB9BD;&#xC758;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; &#xB9BD; &#xC6C0;&#xC9C1;&#xC784;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xCC3E;&#xC744;. &#xB193;&#xC5EC;&#xC788;&#xB294;&#xC9C0; &#xB808;&#xC774;&#xBE14;&#xC774; &#xC788;&#xB294; &#xB9BD; [Ca(2+)](i) &#xC99D;&#xAC00;, &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8;&#xC5D0; filamentous &#xB9D0;&#xB77C; (F-&#xB9D0;&#xB77C;)&#xC758; &#xD615;&#xC131; &#xC774;&#xB098; &#xC77C;&#xCE58; &#xD6C4; &#xAC11;&#xC790;&#xAE30; &#xC911;&#xC9C0;&#xC758; &#xC6C0;&#xC9C1;&#xC784;. &#xB192;&#xC740; &#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; F-&#xB9D0;&#xB77C; &#xCC44;&#xB110; &#xADF8;&#xB798;&#xC11C; &#xACE0;&#xBC00;&#xB3C4; &#xB9BD; &#xD06C;&#xAE30;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xAD6C;&#xC870; &#xBB3C;&#xB9AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xADF8;&#xAC83;&#xC5D0; &#xAC07;&#xD600; &#xB4F1;&#xC7A5; &#xD588;&#xB2E4;. Latrunculin B&#xC640; F &#xB9D0;&#xB77C;&#xC758; depolymerization F &#xB9D0;&#xB77C; &#xD615;&#xC131; &#xBC0F;&#xACFC; &#xB9BD;&#xC758; &#xCCB4;&#xD3EC;&#xB97C; &#xCC28;&#xB2E8;. &#xD765;&#xBBF8;&#xB86D;&#xAC8C;&#xB3C4;, &#xCD1D; &#xB0B4;&#xBD80; &#xBC18;&#xC0AC; &#xD615;&#xAD11; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95;&#xC744; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0; &#xC6C0;&#xC9C1;&#xC774;&#xC9C0;&#xACFC; &#xB9BD; &#xC5EC;&#xC804;&#xD788; &#xCC9C;&#xCC9C;&#xD788; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; concertedly &#xD5A5;&#xD574; &#xC774;&#xB3D9; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xADF8;&#xB8F9; &#xC804;&#xC740; myosin &#xCC28;&#xB2E8;&#xC81C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD3D0;&#xC9C0; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. Microamperometry&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCE21;&#xC815; exocytosis &#xC81C;&#xC548; &#xADF8; &#xC791;&#xC740; Ca(2+) &#xC0C1;&#xC2B9;&#xC5D0; &#xBC00;&#xB3C4; F &#xB9D0;&#xB77C; &#xCC44;&#xB110; &#xC800;&#xD574; exocytosis &#xD615;&#xC131; &lt; 1 microm. &#xD070; [Ca(2+)](i) &#xC0C1;&#xC2B9; &#xC99D;&#xAC00; exocytosis&#xACFC; &#xB9BD; &#xB9C9; &#xC735;&#xD569;&#xC758; &#xACF5;&#xB3D9; &#xC804; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0;. &#xADF8;&#xACFC; &#xB9BD; Ca(2+) &#xC885;&#xC18D; &#xB3D9;&#xACB0; &#xC57D;&#xD55C; &#xC785;&#xB825; &#xD544;&#xD130;&#xB9C1; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB9BD; &#xC6C0;&#xC9C1;&#xC784;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558; &#xC5EC; &#xAC15;&#xD55C; &#xC785;&#xB825; &#xC544;&#xB798; exocytosis &#xC81C;&#xC548; &#xD55C;&#xB2E4;.

&#xACFC; &#xB9BD; &#xC131;&#xACFC; exocytosis Ca2 +&#xC758; &#xC81C;&#xC5B4;-&#xCDCC; &#xC7A5;&#xC5D0;&#xC11C; F &#xB9D0;&#xB77C;&#xC758; &#xC885;&#xC18D; &#xD615;&#xC131; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xB355;&#xD2B8;.

Elevaci&oacute;n de la concentraci&oacute;n de CA intracelular ([Ca(2+)](i)) desencadena la exocitosis de gr&aacute;nulos secretores en epitelio del conducto pancre&aacute;tico. En este estudio, nos encontramos con que la se&ntilde;al tambi&eacute;n controla el movimiento de gr&aacute;nulo. Movimientos de fluorescencia etiquetados gr&aacute;nulos detenidos bruscamente despu&eacute;s de un [Ca(2+)](i) aumento, cin&eacute;ticamente coincidente con la formaci&oacute;n de la actina filamentosa (F-actina) en el citoplasma todo. En alta resoluci&oacute;n, la nueva red de F-actina era tan densa que las estructuras celulares de granulometr&iacute;a aparecieron f&iacute;sicamente atrapadas en ella. Despolimerizaci&oacute;n de la F-actina con LATRUNCULINA B bloquea tanto la formaci&oacute;n de la F-actina y la detenci&oacute;n de gr&aacute;nulos. Curiosamente, se intenta controlar con microscop&iacute;a de fluorescencia de reflexi&oacute;n interna total, los gr&aacute;nulos inmovilizados todav&iacute;a mueve lentamente y de manera concertada hacia la membrana plasm&aacute;tica. Este desplazamiento del grupo fue abolida por los bloqueadores de la miosina. Exocitosis midiendo microamperometry sugirieron que la formaci&oacute;n de un denso exocitosis de red inhibida de F-actina en peque&ntilde;os desniveles de CA &lt; 1 microm. Mayor [Ca(2+)](i) se levanta mayor exocitosis debido a la translocaci&oacute;n de coordinar de gr&aacute;nulos y fusi&oacute;n a la membrana. Proponemos que la congelaci&oacute;n de Ca(2+)-dependiente de gr&aacute;nulos filtra entradas d&eacute;biles pero permite exocitosis bajo fuertes entradas por control de movimientos de gr&aacute;nulo.

Control de la movilidad del gr&aacute;nulo y exocitosis por Ca2 +-formaci&oacute;n dependiente de la F-actina en p&aacute;ncreas c&eacute;lulas epiteliales del conducto.

Cellule insulari pancreatiche utilizzano neurotrasmettitori come l-glutammato di regolare la secrezione dell&#39;ormone. Abbiamo determinato quali tipi di cellule in isolotti pancreatici del mouse express canali di recettori ionotropici glutammato (iGluRs) e descrivere le propriet&agrave; biofisiche dettagliate e ruoli fisiologici di questi recettori. Correnti attraverso iGluRs e la conseguente depolarizzazione della membrana sono state misurate con metodi di patch-clamp. CA(2+) afflusso attraverso canali Ca(2+) tensione-gated e Ca(2+)-evocato esocitosi sono stati rilevati da Ca(2+) imaging e fibra di carbonio microamperometry. Considerando che iGluR2 immunoreattivit&agrave; di glutammato recettore &egrave; stato rilevato utilizzando anticorpi specifici in immunocytochemically identificato mouse alfa - e beta-cellule, iGluRs funzionali sono state rilevate solo nelle cellule alfa. Veloce applicazione del l-glutammato di celle ha suscitato rapidamente attivando e desensibilizzazione verso l&#39;interno delle correnti a -60 mV. Da criteri funzionali, le correnti sono state identificate come alpha-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazolepropionate recettori (AMPA). Essi sono stati attivati e insensibili da AMPA e sono stati attivati solo debolmente da Kainato. La desensibilizzazione da AMPA &egrave; stato inibito da cyclothiazide, e le correnti sono state bloccate da 6-cyano-7-nitroquinoxaline-2,3-dione (CNQX). Isolotto iGluRs ha mostrato permeabilit&agrave; non selettivi catione con una bassa permeabilit&agrave; Ca(2+) (P(Ca)/P(Na) = 0,16). Attivazione dei recettori AMPA indotta da una sequenza di azioni cellulare nelle cellule alfa: 1) la depolarizzazione della membrana da 27 + 3 mV, 2) aumento intracellulare Ca(2+) principalmente mediata dalla tensione-gated Ca(2+) canali attivati durante la depolarizzazione della membrana e 3) aumento dell&#39;esocitosi di aumento Ca(2+). In conclusione, iGluRs espresso in cellule di topo alfa assomigliano a basso Recettore AMPA permeabile Ca(2+) nel cervello e pu&ograve; stimolare esocitosi.

Caratteristiche e funzioni di {alpha}-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazolepropionate recettori espressi nel mouse del pancreas {alpha}-cellule.

&#x80F0;&#x5C9B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F7F;&#x7528; l-&#x8C37;&#x6C28;&#x9178;&#x7B49;&#x795E;&#x7ECF;&#x9012;&#x8D28;&#x8C03;&#x8282;&#x8377;&#x5C14;&#x8499;&#x5206;&#x6CCC;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A;&#x9F20;&#x6807;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7684;&#x54EA;&#x4E9B;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#x8868;&#x793A;&#x79BB;&#x5B50;&#x578B;&#x8C37;&#x6C28;&#x9178;&#x53D7;&#x4F53;&#x901A;&#x9053; &#xFF08;iGluRs&#xFF09;&#xFF0C;&#x5E76;&#x8BF4;&#x660E;&#x8BE6;&#x7EC6;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x7269;&#x7406;&#x7279;&#x6027;&#x548C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x751F;&#x7406;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7; iGluRs &#x548C;&#x7531;&#x6B64;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x819C;&#x53BB;&#x6781;&#x5316;&#x7535;&#x6D41;&#x6D4B;&#x91CF;&#x4E0E;&#x819C;&#x7247;&#x94B3;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x7535;&#x538B;&#x95E8;&#x63A7;&#x6027;&#x7ECF;&#x6E20;&#x9053;&#x548C; Ca(2+) &#x8BF1;&#x53D1;&#x80DE;&#x7ECF;&#x6D8C;&#x5165;&#x67E5;&#x51FA;&#x4E86;&#x7ECF;&#x6210;&#x50CF;&#x548C;&#x78B3;&#x7EA4;&#x7EF4; microamperometry&#x3002;&#x800C;&#x4F7F;&#x7528;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x6297;&#x4F53;&#x5728; immunocytochemically &#x786E;&#x5B9A;&#x9F20;&#x6807; alpha-&#x548C; &beta;-&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230; iGluR2 &#x8C37;&#x6C28;&#x9178;&#x53D7;&#x4F53;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x529F;&#x80FD; iGluRs &#x4EC5;&#x5728; &alpha;-&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x3002;L-&#x8C37;&#x6C28;&#x9178;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x5FEB;&#x901F;&#x5E94;&#x7528;&#x5F15;&#x8D77;&#x4E86;&#x8FC5;&#x901F;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x548C;&#x8131;&#x654F;&#x892A;&#x62B5;&#x6E2F;&#x7535;&#x6D41;&#x5728;-60 mV&#x3002;&#x6309;&#x529F;&#x80FD;&#x6807;&#x51C6;&#xFF0C;&#x7535;&#x6D41;&#x88AB;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E3A; alpha-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazolepropionate (AMPA) &#x53D7;&#x4F53;&#x3002;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x88AB;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x548C;&#x8FDF;&#x949D;&#x7684; AMPA&#xFF0C;&#x548C;&#x88AB;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x53EA;&#x6709;&#x5F31;&#x7684;&#x6D77;&#x4EBA;&#x9178;&#x3002;Cyclothiazide&#xFF0C;&#x88AB;&#x6291;&#x5236;&#x7684; AMPA &#x8131;&#x654F;&#x548C;&#x7535;&#x6D41;&#x88AB;&#x6321;&#x4F4F; 6-cyano-7-nitroquinoxaline-2,3-dione (CNQX)&#x3002;&#x80F0;&#x5C9B; iGluRs &#x663E;&#x793A;&#x975E;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x9633;&#x79BB;&#x5B50;&#x6E17;&#x900F;&#x7387;&#x4F4E;&#x7684;&#x7ECF;&#x6E17;&#x900F; (P(Ca)/P(Na) = 0.16&#xFF09;&#x3002;AMPA &#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x5F15;&#x8D77;&#x4E00;&#x7CFB;&#x5217; &alpha; &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x64CD;&#x4F5C;&#xFF1A; 1&#xFF09; &#x901A;&#x8FC7; + /-3 27 &#x819C;&#x7684;&#x53BB;&#x6781;&#x5316; mV&#xFF0C;2&#xFF09; &#x4E0A;&#x5347;&#x4E3B;&#x8981;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7535;&#x538B;&#x95E8;&#x63A7;&#x6027;&#x7ECF;&#x6E20;&#x9053;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x671F;&#x95F4;&#x819C;&#x53BB;&#x6781;&#x5316;&#x548C; 3&#xFF09; &#x589E;&#x52A0;&#x80DE;&#x80DE;&#x7ECF;&#x7ECF;&#x4E0A;&#x5347;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;iGluRs &#x5728;&#x5C0F;&#x9F20; &alpha; &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x8868;&#x8FBE;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x4F4E; Ca(2+) &#x900F; AMPA &#x53D7;&#x4F53;&#x5728;&#x5927;&#x8111;&#x4E2D;&#x7684;&#xFF0C;&#x5E76;&#x53EF;&#x4EE5;&#x523A;&#x6FC0;&#x80DE;&#x3002;

&#x7279;&#x6027;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x7684; {alpha}-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazolepropionate &#x53D7;&#x4F53;&#x5728;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80F0;&#x817A; {&#x5B57;&#x6BCD;} &#x8868;&#x793A;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;

Pancreatic islet cells use neurotransmitters such as l-glutamate to regulate hormone secretion. We determined which cell types in mouse pancreatic islets express ionotropic glutamate receptor channels (iGluRs) and describe the detailed biophysical properties and physiological roles of these receptors. Currents through iGluRs and the resulting membrane depolarization were measured with patch-clamp methods. Ca(2+) influx through voltage-gated Ca(2+) channels and Ca(2+)-evoked exocytosis were detected by Ca(2+) imaging and carbon-fiber microamperometry. Whereas iGluR2 glutamate receptor immunoreactivity was detected using specific antibodies in immunocytochemically identified mouse alpha- and beta-cells, functional iGluRs were detected only in the alpha-cells. Fast application of l-glutamate to cells elicited rapidly activating and desensitizing inward currents at -60 mV. By functional criteria, the currents were identified as alpha-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazolepropionate (AMPA) receptors. They were activated and desensitized by AMPA, and were activated only weakly by kainate. The desensitization by AMPA was inhibited by cyclothiazide, and the currents were blocked by 6-cyano-7-nitroquinoxaline-2,3-dione (CNQX). Islet iGluRs showed nonselective cation permeability with a low Ca(2+) permeability (P(Ca)/P(Na) = 0.16). Activation of the AMPA receptors induced a sequence of cellular actions in alpha-cells: 1) depolarization of the membrane by 27 +/- 3 mV, 2) rise in intracellular Ca(2+) mainly mediated by voltage-gated Ca(2+) channels activated during the membrane depolarization, and 3) increase of exocytosis by the Ca(2+) rise. In conclusion, iGluRs expressed in mouse alpha-cells resemble the low Ca(2+)-permeable AMPA receptor in brain and can stimulate exocytosis.

Characteristics and functions of {alpha}-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazolepropionate receptors expressed in mouse pancreatic {alpha}-cells.

Cellules des &#xEE;lots pancr&#xE9;atiques utiliser neurotransmetteurs tels que la L-glutamate de r&#xE9;guler la s&#xE9;cr&#xE9;tion de l&#x26;#39;hormone. Nous avons d&#xE9;termin&#xE9; quels types de cellules des &#xEE;lots pancr&#xE9;atiques de souris dans les canaux ionotropiques du glutamate exprimer des r&#xE9;cepteurs de l&#x26;#39;iGluRs) et d&#xE9;crire les propri&#xE9;t&#xE9;s biophysiques et d&#xE9;taill&#xE9;es des r&#xF4;les physiologiques de ces r&#xE9;cepteurs. Courants &#xE0; travers iGluRs et la d&#xE9;polarisation de la membrane r&#xE9;sultant ont &#xE9;t&#xE9; mesur&#xE9;s avec des m&#xE9;thodes de patch-clamp. Ca (2 +) l&#x26;#39;influx par voltage-d&#xE9;pendants Ca (2 +) et les canaux Ca (2 +)-a &#xE9;voqu&#xE9; l&#x26;#39;exocytose ont &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;tect&#xE9;s par le Ca (2 +) d&#x26;#39;imagerie et de fibre de carbone microamperometry. Attendu que iGluR2 immunor&#xE9;activit&#xE9; des r&#xE9;cepteurs du glutamate a &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;tect&#xE9;e en utilisant des anticorps sp&#xE9;cifiques chez la souris par immunocytochimie identifi&#xE9; alpha-et b&#xEA;ta-cellules, iGluRs fonctionnels ont &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;tect&#xE9;s seulement dans les alpha-cellules. Application rapide de L-glutamate de cellules provoqu&#xE9;e activant rapidement et d&#xE9;sensibiliser courants entrants &#xE0; -60 mV. Par des crit&#xE8;res fonctionnels, les courants ont &#xE9;t&#xE9; identifi&#xE9;s comme alpha-amino-3-hydroxy-5-m&#xE9;thyl-4-isoxazolepropionate (AMPA) des r&#xE9;cepteurs. Ils ont &#xE9;t&#xE9; activ&#xE9;s et d&#xE9;sensibilis&#xE9;s par l&#x26;#39;AMPA, et ont &#xE9;t&#xE9; activ&#xE9;s que faiblement par le kainate. La d&#xE9;sensibilisation par l&#x26;#39;AMPA a &#xE9;t&#xE9; inhib&#xE9;e par cyclothiazide, et les courants ont &#xE9;t&#xE9; bloqu&#xE9;s par la 6-cyano-7-nitroquinoxaline-2 ,3-dione (CNQX). IGluRs Islet a montr&#xE9; une perm&#xE9;abilit&#xE9; cationique non s&#xE9;lectif avec un faible teneur en Ca (2 +) perm&#xE9;abilit&#xE9; (P (Ca) / P (Na) = 0,16). L&#x26;#39;activation des r&#xE9;cepteurs AMPA induit une s&#xE9;quence d&#x26;#39;actions cellulaires dans les cellules alpha-: 1) la d&#xE9;polarisation de la membrane par 27 + / - 3 mV, 2) augmentation de la concentration intracellulaire de Ca (2 +) principalement m&#xE9;di&#xE9;e par voltage-d&#xE9;pendants Ca (2 + canaux) activ&#xE9;es lors de la d&#xE9;polarisation de la membrane, et 3) l&#x26;#39;augmentation de l&#x26;#39;exocytose par le Ca (2 +) hausse. En conclusion, iGluRs exprim&#xE9; chez la souris alpha-cellules ressemblent &#xE0; faible teneur en Ca (2 +)-perm&#xE9;able r&#xE9;cepteur AMPA dans le cerveau et peut stimuler l&#x26;#39;exocytose.

Caract&#xE9;ristiques et fonctions de {alpha}-amino-3-hydroxy-5-m&#xE9;thyl-4-isoxazolepropionate r&#xE9;cepteurs exprim&#xE9;s dans des pancr&#xE9;as de souris {alpha}-cellules

Pankreatische Inselzellen verwenden Neurotransmitter wie l-Glutamat, um Hormon-Sekretion zu regulieren. Wir bestimmt, welche Zelltypen Maus Pankreas Inselchen ionotrope Glutamat-Rezeptor-Kan&auml;le (iGluRs) schnelles und beschreiben die detaillierte biophysikalische Eigenschaften und physiologischen Funktionen dieser Rezeptoren. Str&ouml;me durch iGluRs und die resultierende Membran-Depolarisation wurden mit Patch-Clamp-Methoden gemessen. Ca(2+) Zustrom durch Spannung-Gating Ca(2+) Kan&auml;le und Exozytose Ca(2+) hervorgerufen wurden von Ca(2+) Bildgebung und Kohlefaser-Microamperometry erkannt. W&auml;hrend iGluR2 Glutamat-Rezeptor-Immunoreactivity mit spezifische Antik&ouml;rpern in Membranunterseite identifiziert Maus Alpha entdeckt wurde und Beta-Zellen, wurden funktionale iGluRs nur in den Alpha-Zellen entdeckt. Schnelle Anwendung von l-Glutamat auf Zellen l&ouml;ste schnell aktivieren und Desensibilisierung nach innen Str&ouml;me bei-60 mV. Nach funktionalen Kriterien wurden die Str&ouml;mungen als alpha-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazolepropionate (AMPA) Rezeptoren identifiziert. Sie wurden aktiviert und von AMPA desensibilisiert und wurden aktiviert nur schwach von Kainate. Die Desensibilisierung von AMPA wurde durch Cyclothiazide gehemmt, und die Str&ouml;me 6-cyano-7-nitroquinoxaline-2,3-dione (CNQX) geblockt wurden. Inselchen iGluRs zeigte unselektiv kation Permeabilit&auml;t mit einer niedrigen Ca(2+)-Durchl&auml;ssigkeit (P(Ca)/P(Na) = 0.16). Aktivierung der AMPA-Rezeptoren induziert eine Folge von zellul&auml;ren Aktionen in den Alpha-Zellen: 1) Depolarisierung der Membran von 27 +/-3 mV, 2) Anstieg der intrazellul&auml;ren Ca(2+) haupts&auml;chlich von Spannung-Gating Ca(2+) Kan&auml;le aktiviert, w&auml;hrend die Membran-Depolarisierung und 3) Erh&ouml;hung der Exozytose vermittelt durch den Ca(2+) Aufstieg. Abschlie&szlig;end iGluRs ausgedr&uuml;ckt in Maus Alpha-Zellen &auml;hneln den niedrigen Ca(2+)-durchl&auml;ssigen AMPA-Rezeptor im Gehirn und Exozytose stimulieren k&ouml;nnen.

Merkmale und Funktionen des {alpha}-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazolepropionate Rezeptoren in Maus Pankreas {Alpha} ausgedr&uuml;ckt-Zellen.

&#x81B5;&#x5CF6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x30DB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30F3;&#x306E;&#x5206;&#x6CCC;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;L-&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x9178;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x4F1D;&#x9054;&#x7269;&#x8CEA;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x81B5;&#x5CF6;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x578B;&#x306F;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x578B;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x9178;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#xFF08;iGluRs&#xFF09;&#x8868;&#x73FE;&#x3057;&#x3001;&#x8A73;&#x7D30;&#x306A;&#x751F;&#x7269;&#x7269;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x7279;&#x6027;&#x3068;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x751F;&#x7406;&#x7684;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x8A18;&#x8FF0;&#x3059;&#x308B;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002; iGluRs&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x819C;&#x306E;&#x8131;&#x5206;&#x6975;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x96FB;&#x6D41;&#x306F;&#x30D1;&#x30C3;&#x30C1;&#x30AF;&#x30E9;&#x30F3;&#x30D7;&#x6CD5;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002; Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x306E;&#x96FB;&#x4F4D;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3068;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x6D41;&#x5165;&#x8A98;&#x767A;&#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x306E;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x70AD;&#x7D20;&#x7E4A;&#x7DAD;microamperometry&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002; iGluR2&#x578B;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x9178;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5FDC;&#x6027;&#x304C;&#x514D;&#x75AB;&#x7D30;&#x80DE;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x3B1;-&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x3B2;-&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x306A;&#x6297;&#x4F53;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x691C;&#x51FA;&#x3057;&#x305F;&#x306E;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3001;&#x6A5F;&#x80FD;iGluRs&#x306F;&#x3001;&#x3B1;-&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x3078;&#x306E;L-&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x9178;&#x306E;&#x9AD8;&#x901F;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6025;&#x901F;&#x306B;-60 mV&#x3067;&#x5185;&#x5411;&#x304D;&#x96FB;&#x6D41;&#x3092;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3057;&#x3001;&#x8131;&#x611F;&#x4F5C;&#x8A98;&#x767A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306A;&#x57FA;&#x6E96;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x96FB;&#x6D41;&#x304C;&#x3B1;-&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;-3  - &#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x30AD;&#x30B7;-5  - &#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;-4  -  isoxazolepropionate&#xFF08;AMPA&#xFF09;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306F;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3057;&#x3001;&#x8131;&#x611F;&#x4F5C;AMPA&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30AB;&#x30A4;&#x30CB;&#x30F3;&#x9178;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x306E;&#x307F;&#x5F31;&#x304F;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; AMPA&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x8131;&#x611F;&#x4F5C;&#x306F;&#x3001;&#x30C1;&#x30A2;&#x30B8;&#x30C9;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x963B;&#x5BB3;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x96FB;&#x6D41;&#x306F;&#x3001;6  - &#x30B7;&#x30A2;&#x30CE;-7  -  nitroquinoxaline -2,3  - &#x30B8;&#x30AA;&#x30F3;&#xFF08;CNQX&#xFF09;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x81B5;&#x5CF6;iGluRs&#x306F;&#x3001;&#x4F4E;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x900F;&#x904E;&#x6027;&#xFF08;P&#xFF08;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#xFF09;/ P&#xFF08;&#x30CA;&#xFF09;= 0.16&#xFF09;&#x3068;&#x975E;&#x9078;&#x629E;&#x6027;&#x967D;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x306E;&#x900F;&#x904E;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002; AMPA&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x3B1;-&#x7D30;&#x80DE;&#x4E2D;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4E00;&#x9023;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#xFF1A;1&#xFF09;27&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x819C;&#x306E;&#x8131;&#x5206;&#x6975;+ /  -  3 mV&#x306E;&#x3001;2&#xFF09;&#x4E3B;&#x306B;&#x96FB;&#x4F4D;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;Ca&#xFF08;2&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;Ca&#x306E;&#x4E0A;&#x6607;&#xFF08;2 +&#xFF09;+ &#xFF09;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x819C;&#x306E;&#x8131;&#x5206;&#x6975;&#x6642;&#x306B;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3001;3&#xFF09;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x306E;&#x4E0A;&#x6607;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3068;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D50;&#x8AD6;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3B1;-&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;iGluRs&#x306F;&#x3001;&#x8133;&#x5185;&#x306E;&#x4F4E;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x900F;&#x904E;&#x6027;AMPA&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306B;&#x4F3C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x81B5;&#x81D3;&#x3B1;-&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3B1;-&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;-3  - &#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x30AD;&#x30B7;-5  - &#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;-4  -  isoxazolepropionate&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;

&#xCDCC; &#xC7A5; &#xC12C; &#xC138;&#xD3EC; &#xD638;&#xB974;&#xBAAC; &#xBD84; &#xBE44;&#xB97C; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; l-glutamate &#xAC19;&#xC740; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC804;&#xB2EC; &#xBB3C;&#xC9C8;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xCDCC; &#xC7A5; &#xB3C5;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xC140; &#xC720;&#xD615;&#xC744; &#xC775;&#xC2A4;&#xD504;&#xB808;&#xC2A4; ionotropic glutamate &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xCC44;&#xB110; (iGluRs) &#xACB0;&#xC815; &#xB418;&#xBA70; &#xC790;&#xC138;&#xD55C; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xB9AC; &#xC18D;&#xC131; &#xBC0F; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xC5ED;&#xD560;&#xC5D0; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. IGluRs &#xBC0F; &#xACB0;&#xACFC; &#xB9C9; depolarization &#xD1B5;&#xD574; &#xC804;&#xB958; &#xD328;&#xCE58; &#xD074;&#xB7A8;&#xD504; &#xBC29;&#xBC95;&#xC73C;&#xB85C; &#xCE21;&#xC815; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. Ca(2+) &#xCC44;&#xB110; &#xC804;&#xC555; &#xAC1C;&#xD3D0; &#xBC0F; ca(2+)&#xC744; &#xBD88;&#xB7EC; &#xC77C;&#xC73C;&#xCF30;&#xB2E4; exocytosis&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC720;&#xC785; Ca(2+) Ca(2+) &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xBC0F; &#xD0C4;&#xC18C; &#xC12C;&#xC720; microamperometry&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. IGluR2 glutamate &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; immunoreactivity&#xC5D0;&#xC11C; immunocytochemically &#xC2DD;&#xBCC4; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC54C;&#xD30C;-&#xBC0F; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xC138;&#xD3EC;, &#xD2B9;&#xC815; &#xD56D; &#xCCB4;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xAC80;&#xC0C9; &#xB41C; &#xBC18;&#xBA74; &#xAE30;&#xB2A5; iGluRs &#xC54C;&#xD30C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xB9CC; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC140;&#xC5D0; l-glutamate&#xC758; &#xBE60;&#xB978; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8; elicited &#xAE09;&#xC18D; &#xD558; &#xAC8C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558; &#xACE0; &#xB454;&#xAC10;-60&#xC5D0;&#xC11C; &#xC548;&#xCABD;&#xC73C;&#xB85C; &#xC804;&#xB958; mV. &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xAE30;&#xC900;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC804;&#xB958;&#xB97C; alpha-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazolepropionate (AMPA) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB85C; &#xD655;&#xC778; &#xB410;&#xB2E4;. &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB41C; AMPA, &#xC758;&#xD574; desensitized &#xD558; &#xACE0; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB41C; kainate&#xC5D0; &#xC758;&#xD574;&#xB9CC; &#xC57D;&#xD558;&#xAC8C;. AMPA, &#xB454;&#xAC10;&#xB3C4; cyclothiazide&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC800;&#xD574; &#xD558; &#xACE0; &#xC804;&#xB958;&#xB97C; 6-cyano-7-nitroquinoxaline-2,3-dione (CNQX)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCC28;&#xB2E8; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC12C; iGluRs &#xB0AE;&#xC740; Ca(2+) &#xCE68;&#xD22C;&#xC131;&#xC640;&#xB294; &#xBE44;&#xC120;&#xD0DD;&#xC801; &#xC591;&#xC774;&#xC628; &#xCE68;&#xD22C;&#xC131;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4; (P(Ca)/P(Na) = 0.16). AMPA &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC720;&#xB3C4; &#xC54C;&#xD30C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC791;&#xC5C5; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;: 1) 3 + 27 &#xC5EC; &#xB9C9; depolarization mV, Ca(2+) &#xC99D;&#xAC00; &#xD558; &#xC5EC; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; Ca(2+) &#xC8FC;&#xB85C; &#xB9C9; depolarization &#xBC0F; exocytosis&#xC758; 3) &#xC99D;&#xAC00; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; Ca(2+) &#xCC44;&#xB110; &#xC804;&#xC555; &#xAC1C;&#xD3D0;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC911;&#xC7AC;&#xC5D0; 2) &#xC0C1;&#xC2B9;. &#xB05D;&#xC73C;&#xB85C;, iGluRs &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC54C;&#xD30C; &#xC138;&#xD3EC; &#xB2E8;&#xC704;&#xB85C; &#xB450;&#xB1CC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB0AE;&#xC740; Ca(2+) &#xD22C;&#xACFC;&#xC131; AMPA &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC640; &#xC720;&#xC0AC; &#xD558; &#xACE0; exocytosis&#xB97C; &#xC790;&#xADF9; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD2B9;&#xC131; &#xBC0F; &#xAE30;&#xB2A5; {&#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xCDCC; &#xC7A5; {&#xC54C;&#xD30C;}&#xC5D0; &#xD45C;&#xD604; &#xB41C; alpha}-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazolepropionate &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;-&#xC140;.

C&#xE9;lulas de los islotes pancre&#xE1;ticos utilizan neurotransmisores como la L-glutamato de regular la secreci&#xF3;n de hormonas. Se determin&#xF3; que los tipos de c&#xE9;lulas en los islotes pancre&#xE1;ticos de rat&#xF3;n expresar ionotr&#xF3;picos de los canales de los receptores de glutamato (iGluRs) y describir las propiedades detalladas biof&#xED;sicos y las funciones fisiol&#xF3;gicas de estos receptores. Las corrientes a trav&#xE9;s de iGluRs y la despolarizaci&#xF3;n de la membrana resultante se midieron con m&#xE9;todos patch-clamp. Ca (2 +) a trav&#xE9;s de flujo voltaje de Ca (2 +) y los canales de Ca (2 +)-evoc&#xF3; exocitosis fueron detectados por Ca (2 +) de im&#xE1;genes y microamperometry de fibra de carbono. Considerando que el iGluR2 inmunorreactividad de receptores de glutamato se detect&#xF3; el uso de anticuerpos espec&#xED;ficos identificados en el rat&#xF3;n immunocytochemically alfa y beta de las c&#xE9;lulas, iGluRs funcionales s&#xF3;lo se detect&#xF3; en las c&#xE9;lulas alfa. R&#xE1;pida aplicaci&#xF3;n de L-glutamato en las c&#xE9;lulas provoc&#xF3; r&#xE1;pidamente la activaci&#xF3;n y la desensibilizaci&#xF3;n de corrientes hacia el interior a -60 mV. Por criterios funcionales, las corrientes fueron identificados como alfa-amino-3-hidroxi-5-metil-4-isoxazolepropionate (AMPA). Se activaron y desensibilizado por AMPA, y se activa s&#xF3;lo d&#xE9;bilmente por kainato. La desensibilizaci&#xF3;n por AMPA fue inhibida por ciclotiazida, y las corrientes fueron bloqueados por 6-ciano-7-nitroquinoxalina-2 ,3-diona (CNQX). IGluRs Islet mostraron permeabilidad cati&#xF3;n no selectivo con un bajo nivel de Ca (2 +) permeabilidad (P (Ca) / P (Na) = 0,16). La activaci&#xF3;n de los receptores AMPA induce una secuencia de acciones celulares en las c&#xE9;lulas alfa: 1) la despolarizaci&#xF3;n de la membrana por 27 + / - 3 mV, 2) aumento de intracelular de Ca (2 +) mediada principalmente por el voltaje de Ca (2 + canales activados) durante la despolarizaci&#xF3;n de la membrana, y 3) aumento de la exocitosis por el Ca (2 +) aumento. En conclusi&#xF3;n, iGluRs expresado en rat&#xF3;n alfa-c&#xE9;lulas se asemejan a la baja de Ca (2 +) permeable a los receptores AMPA en el cerebro y puede estimular la exocitosis.

Caracter&#xED;sticas y funciones de {alpha}-amino-3-hidroxi-5-metil-4-isoxazolepropionate receptores expresados &#x200B;&#x200B;en el p&#xE1;ncreas de rat&#xF3;n {alpha}-c&#xE9;lulas

&#x6269;&#x5C55;&#x9886;&#x57DF;&#x7684;&#x819C;&#x7535;&#x5BB9;&#x6D4B;&#x91CF;&#x5230;&#x590D;&#x6742;&#x5F62;&#x8C8C;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x672B;&#x68A2;&#x3002;

Extending the realm of membrane capacitance measurements to nerve terminals with complex morphologies.

Extension du royaume de mesures capacitance de la membrane aux terminaisons nerveuses avec des morphologies complexes

Erweitern den Bereich der Membran Kapazit&auml;tsmessungen an Nervenenden mit komplexer Morphologien.

Estendendo il Regno della membrana di terminali nervosi con morfologie complesse misurazioni di capacitanza.

&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x5F62;&#x614B;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x795E;&#x7D4C;&#x672B;&#x7AEF;&#x306B;&#x819C;&#x5BB9;&#x91CF;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x306E;&#x30EC;&#x30EB;&#x30E0;&#x306E;&#x62E1;&#x5F35;

&#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xBB38;&#xBC95;&#xACFC; &#xD568;&#xAED8; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xCEE4;&#xD328;&#xC2DC;&#xD134;&#xC2A4; &#xCE21;&#xC815; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778;&#xC758; &#xC601;&#xC5ED;&#xC744; &#xD655;&#xC7A5;.

Article	Year
Protein kinase A- and C-induced insulin release from Ca2+ -insensitive pools. Cellular signalling\| PubMed ID: 12639716	2003
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Purinergic receptors coupled to intracellular Ca2+ signals and exocytosis in rat prostate neuroendocrine cells. The Journal of biological chemistry\| PubMed ID: 15100230	2004
C-terminal part of AgRP stimulates insulin secretion through calcium release in pancreatic beta Rin5mf cells. Neuropeptides\| PubMed ID: 15978665	2005
Protease-activated receptor-2 increases exocytosis via multiple signal transduction pathways in pancreatic duct epithelial cells. The Journal of biological chemistry\| PubMed ID: 18448425	2008
Glutamate transporter-mediated glutamate secretion in the mammalian pineal gland. The Journal of neuroscience : the official journal of the Society for Neuroscience\| PubMed ID: 18945893	2008
Control of granule mobility and exocytosis by Ca2+ -dependent formation of F-actin in pancreatic duct epithelial cells. Traffic (Copenhagen, Denmark)\| PubMed ID: 19192247	2009
Characteristics and functions of {alpha}-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazolepropionate receptors expressed in mouse pancreatic {alpha}-cells. Endocrinology\| PubMed ID: 20189997	2010
Extending the realm of membrane capacitance measurements to nerve terminals with complex morphologies. The Journal of physiology\| PubMed ID: 20551018	2010

Mean-Hwan Kim

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