stretching-short-sequences-dna-with-constant-force-axial-optical

Stretching Short Sequences of DNA with Constant Force Axial Optical Tweezers

Single-molecule techniques for stretching DNA of contour lengths  less than a kilobase are fraught with experimental difficulties. However, many ...

University of Michigan 

&#x5149;&#x954A;&#x662F;&#x5355;&#x5206;&#x5B50;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x6709;&#x529B;&#x5DE5;&#x5177;&#x3002;&#x8BB8;&#x591A;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x8981;&#x6C42;&#x5728;&#x6052;&#x5F20;&#x529B;&#x4E0B;&#x4E3E;&#x884C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5206;&#x5B50;&#xFF0C;&#x800C;&#x8861;&#x91CF;&#x5176;&#x6269;&#x5C55;&#x540D;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x63D0;&#x51FA;&#x4E24;&#x4E2A;&#x8BA1;&#x5212;&#xFF0C;&#x57FA;&#x4E8E;&#x626B;&#x63CF;&#x7EBF;&#x5149;&#x5B66;&#x954A;&#x5B50;&#xFF0C;&#x5B8C;&#x6210;&#x6B64;&#x4EFB;&#x52A1;&#xFF0C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x5168;&#x5149;&#x66FF;&#x4EE3;&#x4F9D;&#x8D56;&#x7535;&#x5B50;&#x53CD;&#x9988;&#x4FDD;&#x6301;&#x5E38;&#x6570;&#x751F;&#x6548;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E3A;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x529B;&#x91CF;&#x5939;&#x9677;&#x9631;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x65B9;&#x6848;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x4E00;&#x675F;&#x6FC0;&#x5149;&#x5FEB;&#x901F;&#x626B;&#x63CF;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x5BA2;&#x89C2;&#x3001; &#x6709;&#x6548;&#x8DDD;&#x79BB;&#x8FBE; 8 microm &#x521B;&#x5EFA;&#x6269;&#x5C55;&#x7684;&#x4E00;&#x7EF4;&#x5149;&#x5B66;&#x52BF;&#x7684;&#x7126;&#x5E73;&#x9762;&#x7684;&#x4E00;&#x6761;&#x7EBF;&#x6CBF;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x4EFB;&#x4E00;&#x5728;&#x626B;&#x63CF;&#x671F;&#x95F4;&#x8C03;&#x8282;&#x6FC0;&#x5149;&#x675F;&#x5F3A;&#x5EA6;&#x6216;&#x901A;&#x8FC7;&#x4F7F;&#x7528;&#x975E;&#x5BF9;&#x79F0;&#x7684;&#x675F;&#x6D41;&#x5256;&#x9762;&#x4E2D;&#x663E;&#x5FAE;&#x7269;&#x955C;&#x7684;&#x540E;&#x7126;&#x5E73;&#x9762;&#x521B;&#x5EFA;&#x72EC;&#x7ACB;&#x4E8E;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x7684;&#x4FA7;&#x5411;&#x529B;&#x5BF9;&#x4E00;&#x4E2A;&#x88AB;&#x56F0;&#x7684;&#x7C92;&#x5B50;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6280;&#x672F;&#xFF0C;&#x8FBE; 2.69 pN &#x90E8;&#x961F;&#x5DF2;&#x5E94;&#x7528;&#x8FBE; 3.4 microm &#x4E0E;&#x6B8B;&#x4F59;&#x7684;&#x5F39;&#x7C27;&#x5E38;&#x6570;&#x7684;&#x8DDD;&#x79BB; &lt; 26.6 fN/microm&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6280;&#x672F;&#x4E00;&#x8D77;&#x4F7F;&#x7528;&#x5FEB;&#x901F;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x6D4B;&#x91CF;&#x65B9;&#x6848;&#xFF0C;&#x6B63;&#x5728;&#x7814;&#x7A76;&#x653E;&#x5BBD;&#x5BF9;&#x5916;&#x90E8;&#x6052;&#x529B;&#x4E9A;&#x6BEB;&#x79D2;&#x7EA7;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#x7684; lambda DNA &#x5206;&#x5B50;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4ECE;&#x8815;&#x866B;&#x72B6;&#x94FE;&#x6A21;&#x578B;&#x9884;&#x6D4B;&#x6BD4;&#x8F83;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;

&#x5168;&#x5149;&#x5E38;&#x6570;&#x529B;&#x6FC0;&#x5149;&#x954A;&#x5B50;&#x3002;

Optical tweezers are a powerful tool for the study of single biomolecules. Many applications require that a molecule be held under constant tension while its extension is measured. We present two schemes based on scanning-line optical tweezers to accomplish this, providing all-optical alternatives to force-clamp traps that rely on electronic feedback to maintain constant-force conditions for the molecule. In these schemes, a laser beam is rapidly scanned along a line in the focal plane of the microscope objective, effectively creating an extended one-dimensional optical potential over distances of up to 8 microm. A position-independent lateral force acting on a trapped particle is created by either modulating the laser beam intensity during the scan or by using an asymmetric beam profile in the back focal plane of the microscope objective. With these techniques, forces of up to 2.69 pN have been applied over distances of up to 3.4 microm with residual spring constants of <26.6 fN/microm. We used these techniques in conjunction with a fast position measurement scheme to study the relaxation of lambda-DNA molecules against a constant external force with submillisecond time resolution. We compare the results to predictions from the wormlike chain model.

All-optical constant-force laser tweezers.

Pinces optiques constituent un outil puissant pour l&#x26;#39;&#xE9;tude de biomol&#xE9;cules uniques. De nombreuses applications n&#xE9;cessitent qu&#x26;#39;une mol&#xE9;cule se tiendra sous tension constante tandis que son extension est mesur&#xE9;e. Nous pr&#xE9;sentons deux r&#xE9;gimes fond&#xE9;s sur l&#x26;#39;analyse en ligne des pinces optiques pour ce faire, fournir tout-optiques des solutions de rechange &#xE0; la force-clamp pi&#xE8;ges qui reposent sur la r&#xE9;troaction &#xE9;lectronique pour maintenir constante la force d&#x26;#39;conditions de la mol&#xE9;cule. Dans ces r&#xE9;gimes, un faisceau laser est rapidement balay&#xE9; le long d&#x26;#39;une ligne dans le plan focal de l&#x26;#39;objectif du microscope, cr&#xE9;ant ainsi une longue unidimensionnel potentiel optique sur des distances allant jusqu&#x26;#39;&#xE0; 8 microm. Un ind&#xE9;pendant de la position de force lat&#xE9;rale agissant sur une particule pi&#xE9;g&#xE9;e est cr&#xE9;&#xE9; par l&#x26;#39;une moduler l&#x26;#39;intensit&#xE9; du faisceau laser pendant le balayage ou en utilisant un profil de faisceau asym&#xE9;trique dans le plan focal arri&#xE8;re de l&#x26;#39;objectif de microscope. Avec ces techniques, les forces de jusqu&#x26;#39;&#xE0; 2,69 pN ont &#xE9;t&#xE9; appliqu&#xE9;es sur des distances pouvant aller jusqu&#x26;#39;&#xE0; 3,4 microm&#xE8;tre avec des constantes &#xE9;lastiques r&#xE9;siduelles de &#x26;lt;26,6 fN / microm&#xE8;tre. On utilise ces techniques en liaison avec un syst&#xE8;me de mesure de position rapide pour &#xE9;tudier la relaxation des mol&#xE9;cules d&#x26;#39;ADN de la lambda-encontre d&#x26;#39;une force externe constante avec une r&#xE9;solution temporelle milliseconde. Nous comparons les r&#xE9;sultats &#xE0; des pr&#xE9;dictions &#xE0; partir du mod&#xE8;le de cha&#xEE;ne vermiforme.

Tout-optique &#xE0; force constante laser Pince &#xE0; &#xE9;piler

All-optische Konstante-Kraft Laserpinzette.

Pinzette ottiche sono un potente strumento per lo studio delle biomolecole singolo. Molte applicazioni richiedono che una molecola terr&agrave; sotto costante tensione, mentre la sua estensione &egrave; misurato. Vi presentiamo due schemi basati sulla linea di scansione ottiche pinzette per compire questo, fornendo alternative all-optical a trappole di forza-pinza che si basano su feedback elettronico per mantenere le condizioni di forza costante per la molecola. In questi regimi, un fascio laser viene analizzato rapidamente lungo una linea nel piano focale dell&#39;obiettivo del microscopio, creando effettivamente un potenziale ottico unidimensionale esteso su distanze di fino a 8 microm. Una forza laterale posizione-indipendente che agisce su una particella intrappolata &egrave; creata modulando l&#39;intensit&agrave; del fascio laser durante la scansione o utilizzando un profilo asimmetrico trave nel piano focale posteriore dell&#39;obiettivo del microscopio. Con queste tecniche, sono state applicate le forze di pN fino a 2,69 su distanze di fino a 3,4 microm con costanti primavera residua di &lt; 26,6 fN/microm. Abbiamo usato queste tecniche in combinazione con un sistema di misurazione veloce posizione per studiare il rilassamento delle molecole di DNA lambda contro una forza esterna costante con risoluzione temporale submillisecond. Confrontiamo i risultati per le previsioni dal modello catena vermi.

Pinzetta ottica laser di forza costante.

&#x5149;&#x30D4;&#x30F3;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x751F;&#x4F53;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x62E1;&#x5F35;&#x5B50;&#x304C;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x9593;&#x5206;&#x5B50;&#x306F;&#x4E00;&#x5B9A;&#x306E;&#x5F35;&#x529B;&#x4E0B;&#x3067;&#x958B;&#x50AC;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x5B9A;&#x529B;&#x72B6;&#x614B;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x96FB;&#x5B50;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30C9;&#x30D0;&#x30C3;&#x30AF;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x5F37;&#x5236;&#x7684;&#x306B;&#x30AF;&#x30E9;&#x30F3;&#x30D7;&#x30C8;&#x30E9;&#x30C3;&#x30D7;&#x3078;&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x5149;&#x306E;&#x4EE3;&#x66FF;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3092;&#x9054;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x8D70;&#x67FB;&#x7DDA;&#x5149;&#x30D4;&#x30F3;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;2&#x3064;&#x306E;&#x30B9;&#x30AD;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x63D0;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30B9;&#x30AD;&#x30FC;&#x30E0;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B6;&#x30FC;&#x30D3;&#x30FC;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x6025;&#x901F;&#x306B;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306B;8&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#x306E;&#x8DDD;&#x96E2;&#x307E;&#x3067;&#x62E1;&#x5F35;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x4E00;&#x6B21;&#x5143;&#x5149;&#x5B66;&#x30DD;&#x30C6;&#x30F3;&#x30B7;&#x30E3;&#x30EB;&#x3092;&#x4F5C;&#x6210;&#x3057;&#x3001;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x5BFE;&#x7269;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x306E;&#x7126;&#x70B9;&#x9762;&#x306B;&#x6CBF;&#x3063;&#x3066;&#x30B9;&#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6355;&#x6349;&#x7C92;&#x5B50;&#x306B;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x6A2A;&#x65B9;&#x5411;&#x306E;&#x529B;&#x306F;&#x3001;&#x30B9;&#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x4E2D;&#x306B;&#x5909;&#x8ABF;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B6;&#x30D3;&#x30FC;&#x30E0;&#x5F37;&#x5EA6;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x5BFE;&#x7269;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x306E;&#x5F8C;&#x7126;&#x70B9;&#x9762;&#x306B;&#x975E;&#x5BFE;&#x79F0;&#x30D3;&#x30FC;&#x30E0;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x4F5C;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6280;&#x8853;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;2.69 pN&#x306E;&#x6700;&#x5927;&#x306E;&#x529B;&#x306F;&#x3001;&#x26;lt;26.6 FN /&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#x306E;&#x6B8B;&#x7559;&#x30D0;&#x30CD;&#x5B9A;&#x6570;3.4&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#x307E;&#x3067;&#x306E;&#x8DDD;&#x96E2;&#x3067;&#x9069;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x3001;&#x30B5;&#x30D6;&#x30DF;&#x30EA;&#x79D2;&#x306E;&#x6642;&#x9593;&#x5206;&#x89E3;&#x80FD;&#x3067;&#x4E00;&#x5B9A;&#x5916;&#x529B;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x30E9;&#x30E0;&#x30C0;-DNA&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x7DE9;&#x548C;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x9AD8;&#x901F;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x65B9;&#x5F0F;&#x3068;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3066;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6280;&#x8853;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x307F;&#x307F;&#x305A;&#x9396;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x4E88;&#x6E2C;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x5168;&#x5149;&#x5B9A;&#x529B;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B6;&#x30FC;&#x30D4;&#x30F3;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;

&#xAD11;&#xD559; &#xD540;&#xC14B; &#xB2E8;&#xC77C; biomolecules &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9CE;&#xC740; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xD655;&#xC7A5;&#xC740; &#xCE21;&#xC815; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; &#xAE34;&#xC7A5;&#xC744; &#xC544;&#xB798; &#xAC1C;&#xCD5C; &#xB418;. &#xC120;&#xBB3C;&#xC774; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xAD6C;&#xC870; &#xAE30;&#xBC18; &#xC2A4;&#xCE94; &#xB77C;&#xC778; &#xAD11;&#xD559; &#xD540;&#xC14B;&#xC73C;&#xB85C;,&#xC774;&#xB97C; &#xC704;&#xD574; &#xBD84;&#xC790;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C1;&#xC218;-&#xD3EC;&#xC2A4; &#xC870;&#xAC74;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC804;&#xC790; &#xD53C;&#xB4DC;&#xBC31;&#xC5D0; &#xC758;&#xC874; &#xD558;&#xB294; &#xD3EC;&#xC2A4; &#xD074;&#xB7A8;&#xD504; &#xD2B8;&#xB7A9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xAD11;&#xD559; &#xB300;&#xC548;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC2A4;&#xD0A4;&#xB9C8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB808;&#xC774;&#xC800; &#xBE54; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xCD5C;&#xB300; 8 microm&#xC758; &#xAC70;&#xB9AC; &#xD655;&#xC7A5;&#xB41C; 1 &#xCC28;&#xC6D0; &#xAD11; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825; &#xCC3D;&#xC870; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xBAA9;&#xD45C;&#xC758; &#xCD08;&#xC810;&#xBA74;&#xC5D0; &#xB77C;&#xC778;&#xC744; &#xB530;&#xB77C; &#xBE60;&#xB974;&#xAC8C; &#xAC80;&#xC0C9; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAC07;&#xD78C;&#xB41C; &#xC785;&#xC790;&#xC5D0; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xC704;&#xCE58;&#xC5D0; &#xAD00;&#xACC4; &#xC5C6;&#xC774; &#xCE21;&#xBA74; &#xD798; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xBAA9;&#xD45C;&#xC758; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xCD08;&#xC810;&#xBA74; &#xBE44;&#xB300;&#xCE6D; &#xBE54; &#xD504;&#xB85C; &#xD30C;&#xC77C;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC2A4;&#xCE94; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC5B4;&#xB290; &#xB808;&#xC774;&#xC800; &#xBE54; &#xAC15;&#xB3C4; &#xBCC0;&#xC870; &#xD558; &#xC5EC; &#xC0DD;&#xC131; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAE30;&#xC220;&#xB85C; &#xCD5C;&#xB300; 2.69 Pn&#xC758; &#xD798;&#xC758; &#xC794;&#xC5EC; &#xC2A4;&#xD504;&#xB9C1; &#xC0C1;&#xC218;&#xC640; &#xCD5C;&#xB300; 3.4 microm&#xC758; &#xAC70;&#xB9AC;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC801;&#xC6A9; &#xB41C; &lt; 26.6 fN/microm. Submillisecond &#xC2DC;&#xAC04; &#xBD84;&#xD574;&#xB2A5;&#xC73C;&#xB85C; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; &#xC678;&#xBD80;&#xC758; &#xD798;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB78C;&#xB2E4; DNA &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xC774;&#xC644; &#xACF5;&#xBD80; &#xBE60;&#xB978; &#xC704;&#xCE58; &#xCE21;&#xC815; &#xCCB4;&#xACC4;&#xC640; &#xD568;&#xAED8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAE30;&#xBC95;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; wormlike &#xCCB4;&#xC778; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC608;&#xCE21; &#xACB0;&#xACFC; &#xBE44;&#xAD50;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBAA8;&#xB4E0; &#xAD11;&#xD559; &#xC0C1;&#xC218; &#xD3EC;&#xC2A4; &#xB808;&#xC774;&#xC800; &#xD540;&#xC14B;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Las pinzas &#xF3;pticas son una herramienta poderosa para el estudio de biomol&#xE9;culas individuales. Muchas aplicaciones requieren que una mol&#xE9;cula se mantiene bajo tensi&#xF3;n constante, mientras que su extensi&#xF3;n se mide. Se presentan dos esquemas basados &#x200B;&#x200B;en unas pinzas de l&#xED;nea de exploraci&#xF3;n-&#xF3;pticos para lograr esto, proporcionando totalmente &#xF3;pticas alternativas a forzar-clamp trampas que se basan en la retroalimentaci&#xF3;n electr&#xF3;nica para mantener constante la fuerza de las condiciones de la mol&#xE9;cula. En estos esquemas, un haz de l&#xE1;ser es r&#xE1;pidamente escaneado a lo largo de una l&#xED;nea en el plano focal del objetivo del microscopio, creando una extensa unidimensional potencial &#xF3;ptica a distancias de hasta 8 micras. Una posici&#xF3;n independiente de la fuerza lateral que act&#xFA;a sobre una part&#xED;cula atrapada se crea por tanto la modulaci&#xF3;n de la intensidad del haz l&#xE1;ser durante la exploraci&#xF3;n o mediante el uso de un perfil de haz asim&#xE9;trico en el plano focal posterior del objetivo del microscopio. Con estas t&#xE9;cnicas, las fuerzas de hasta 2,69 pN se han aplicado a distancias de hasta 3,4 micras, con constantes de resorte residuales de &#x26;lt;26,6 FN / micras. Hemos utilizado estas t&#xE9;cnicas en combinaci&#xF3;n con un r&#xE9;gimen de posici&#xF3;n de medici&#xF3;n r&#xE1;pida para estudiar la relajaci&#xF3;n de las mol&#xE9;culas de ADN lambda contra una fuerza constante externa con resoluci&#xF3;n de tiempo submillisecond. Comparamos los resultados con las predicciones del modelo de cadena de gusano.

Todo &#xF3;ptica constante de la fuerza de pinzas l&#xE1;ser

&#x5728;&#x5404;&#x79CD;&#x5404;&#x6837;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x8FC7;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x57FA;&#x56E0;&#x8C03;&#x63A7;&#x53CA;&#x9057;&#x4F20;&#x8F6C;&#x5316;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x86CB;&#x767D;&#x4ECB;&#x5BFC; DNA &#x5FAA;&#x73AF;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x5FAA;&#x73AF;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x5316;&#x5B66;&#x662F;&#x65E2;&#x5B9A;&#x7684;&#x73AF;&#x95ED;&#x5408;&#x7EA6;&#x675F;&#x8702;&#x7A9D;&#x73AF;&#x5883;&#x4E2D;&#x7684;&#x529B;&#x5B66;&#x5DF2;&#x6536;&#x5230;&#x6CE8;&#x610F;&#x8F83;&#x5C11;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x5355;&#x5206;&#x5B50;&#x6D4B;&#x91CF;&#x663E;&#x793A;&#x673A;&#x68B0;&#x7EA6;&#x675F;&#x6709; DNA &#x5FAA;&#x73AF;&#x5177;&#x6709;&#x91CD;&#x5927;&#x5F71;&#x54CD;&#x548C;&#x6FC0;&#x52B1;&#x9700;&#x8981;&#x66F4;&#x5168;&#x9762;&#x7684;&#x8868;&#x5F81;&#x7D27;&#x5F20;&#x5C40;&#x52BF;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x6A21;&#x578B;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x4E2A;&#x8815;&#x866B;&#x72B6;&#x94FE; DNA&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BA1;&#x7B97;&#x5982;&#x4F55;&#x8FDE;&#x7EED;&#x62C9;&#x4F38;&#x57FA;&#x677F;&#x7684; DNA &#x4F1A;&#x5F71;&#x54CD;&#x5FAA;&#x73AF;&#x5F62;&#x6210;&#x6982;&#x7387;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#xFF0C;&#x5F53;&#x5FAA;&#x73AF;&#x5927;&#x5C0F; &gt; 100 bp&#xFF0C;&#x5F20;&#x529B;&#x4E3A; 500 fN &#x53EF;&#x4EE5;&#x63D0;&#x9AD8;&#x4E24;&#x4E2A;&#x6570;&#x91CF;&#x7EA7;&#x7684;&#x73AF;&#x95ED;&#x5408;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#xFF0C;&#x4E0E; RNA &#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x548C;&#x5176;&#x4ED6;&#x5206;&#x5B50;&#x9A6C;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x7684;&#x673A;&#x68B0;&#x90E8;&#x961F;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x5F71;&#x54CD;&#x8F6C;&#x5F55;&#x8C03;&#x63A7;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x7684; piconewton &#x90E8;&#x961F;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x652F;&#x90E8;&#x961F;&#x662F;&#x5C0F;&#x3002;&#x4E0E;&#x73B0;&#x6709;&#x7684;&#x7406;&#x8BBA;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0; for &#x5FAA;&#x73AF; &lt; 200 bp&#xFF0C;&#x7D27;&#x5F20;&#x5C40;&#x52BF;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x662F;&#x4E00;&#x5B9A;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E0A;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x94FE;&#x63A5;&#x5668;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4E2D;&#x7684; DNA &#x7ED3;&#x5408;&#x57DF;&#x7684;&#x76F8;&#x5BF9;&#x65B9;&#x5411;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x89C2;&#x70B9;&#x6700;&#x8FD1; DNA &#x5FAA;&#x73AF;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x548C;&#x672A;&#x6765;&#x7EC6;&#x89C2;&#x529B;&#x5B66;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x3002;

&#x4E2D;&#x65AD;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x4ECB;&#x5BFC; DNA DNA &#x57FA;&#x8D28;&#x4E2D;&#x7D27;&#x5F20;&#x7684;&#x5FAA;&#x73AF;&#x3002;

Protein-mediated DNA looping is important in a variety of biological processes, including gene regulation and genetic transformation. Although the biochemistry of loop formation is well established, the mechanics of loop closure in a constrained cellular environment has received less attention. Recent single molecule measurements show that mechanical constraints have a significant impact on DNA looping and motivate the need for a more comprehensive characterization of the effects of tension. By modeling DNA as a wormlike chain, we calculate how continuous stretching of the substrate DNA affects the loop formation probability. We find that when the loop size is >100 bp, a tension of 500 fN can increase the time required for loop closure by two orders of magnitude. This force is small compared to the piconewton forces that are associated with RNA polymerases and other molecular motors, indicating that intracellular mechanical forces might affect transcriptional regulation. In contrast to existing theory, we find that for loops <200 bp, the effect of tension is partly dependent on the relative orientation of the DNA-binding domains in the linker protein. Our results provide perspective on recent DNA looping experiments and suggestions for future micromechanical studies.

Disruption of protein-mediated DNA looping by tension in the substrate DNA.

Boucle d&#x26;#39;ADN en prot&#xE9;ines m&#xE9;diation est important dans une vari&#xE9;t&#xE9; de processus biologiques, y compris la r&#xE9;gulation des g&#xE8;nes et la transformation g&#xE9;n&#xE9;tique. Bien que la biochimie de la formation de la boucle est bien &#xE9;tabli, les m&#xE9;canismes de fermeture de boucle dans un environnement contraint cellulaire a re&#xE7;u moins d&#x26;#39;attention. De r&#xE9;centes mesures de mol&#xE9;cules simples montrent que les contraintes m&#xE9;caniques ont un impact significatif sur l&#x26;#39;ADN en boucle et de motiver la n&#xE9;cessit&#xE9; d&#x26;#39;une caract&#xE9;risation plus compl&#xE8;te des effets de tension. Par la mod&#xE9;lisation d&#x26;#39;ADN comme une cha&#xEE;ne vermiforme, nous calculons combien &#xE9;tirage en continu de l&#x26;#39;ADN substrat influe sur la probabilit&#xE9; de formation de la boucle. Nous constatons que lorsque la taille de la boucle est&#x26;gt; 100 pb, une tension de 500 fN peut augmenter le temps n&#xE9;cessaire pour la fermeture de boucle par deux ordres de grandeur. Cette force est faible par rapport aux forces picoNewton qui sont associ&#xE9;s &#xE0; des ARN polym&#xE9;rases et d&#x26;#39;autres moteurs mol&#xE9;culaires, ce qui indique que les forces m&#xE9;caniques intracellulaires pourrait affecter la r&#xE9;gulation transcriptionnelle. Contrairement &#xE0; la th&#xE9;orie existante, nous constatons que pour les boucles &#x26;lt;200 pb, l&#x26;#39;effet de la tension est en partie d&#xE9;pendante de l&#x26;#39;orientation relative des domaines de liaison d&#x26;#39;ADN de la prot&#xE9;ine de liaison. Nos r&#xE9;sultats fournissent point de vue sur les exp&#xE9;riences r&#xE9;centes en boucle d&#x26;#39;ADN et des suggestions pour de futures &#xE9;tudes microm&#xE9;caniques.

Perturbation de la prot&#xE9;ine-ADN m&#xE9;di&#xE9;e par Looping tension dans l&#x26;#39;ADN substrat

Behinderung der Protein-vermittelte DNA-Schleife durch die Spannung in der Substrat-DNA.

Mediata da proteine DNA loop &egrave; importante in una variet&agrave; di processi biologici, tra cui regolazione genica e trasformazione genetica. Sebbene la biochimica della formazione del ciclo &egrave; ben consolidata, la meccanica di chiusura ciclo in un ambiente cellulare vincolato ha ricevuto meno attenzione. Recenti misurazioni a singola molecola mostrano che i vincoli meccanici hanno un impatto significativo sul DNA looping e motivano la necessit&agrave; di una pi&ugrave; completa caratterizzazione degli effetti di tensione. Di modellazione del DNA come una catena di vermi, calcoliamo come continuo allungamento del substrato DNA interessa la probabilit&agrave; di formazione del ciclo. Troviamo che quando la dimensione del loop &egrave; &amp;gt; 100 bp, una tensione di 500 fN pu&ograve; aumentare il tempo necessario per la chiusura del ciclo da due ordini di grandezza. Questa forza &egrave; piccola rispetto alle forze piconewton che sono associate con la RNA polimerasi e altri motori molecolari, che indica che le forze meccaniche intracellulare possono influire sulla regolazione trascrizionale. In contrasto con la teoria esistente, che troviamo per loop &lt; 200 bp, l&#39;effetto di tensione dipende in parte il relativo orientamento dei domini della proteina linker DNA-binding. Nostri risultati forniscono una prospettiva su recenti esperimenti di ciclaggio del DNA e suggerimenti per gli studi futuri micromeccanici.

Interruzione di mediata da proteine DNA looping dalla tensione nel substrato del DNA.

&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; - &#x5A92;&#x4ECB;DNA&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x304C;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x5236;&#x5FA1;&#x3068;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5909;&#x63DB;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3001;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x751F;&#x5316;&#x5B66;&#x304C;&#x5341;&#x5206;&#x306B;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x5236;&#x7D04;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x643A;&#x5E2F;&#x96FB;&#x8A71;&#x74B0;&#x5883;&#x3067;&#x306E;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30B8;&#x30E3;&#x306E;&#x4ED5;&#x7D44;&#x307F;&#x306F;&#x3042;&#x307E;&#x308A;&#x6CE8;&#x76EE;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x5358;&#x4E00;&#x5206;&#x5B50;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6A5F;&#x68B0;&#x7684;&#x306A;&#x5236;&#x7D04;&#x304C;DNA&#x306E;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306B;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x30C6;&#x30F3;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x3088;&#x308A;&#x5305;&#x62EC;&#x7684;&#x306A;&#x7279;&#x6027;&#x8A55;&#x4FA1;&#x306E;&#x5FC5;&#x8981;&#x6027;&#x3092;&#x52D5;&#x6A5F;&#x3065;&#x3051;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x307F;&#x307F;&#x305A;&#x9396;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;DNA&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x57FA;&#x8CEA;DNA&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x78BA;&#x7387;&#x3092;&#x3069;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3092;&#x9023;&#x7D9A;&#x7684;&#x306B;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30C3;&#x30C1;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x8A08;&#x7B97;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x306F;&#x26;gt; 100 bp&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x304D;&#x3001;500 FN&#x306E;&#x30C6;&#x30F3;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306F;2&#x6841;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x9589;&#x9396;&#x306B;&#x8981;&#x3059;&#x308B;&#x6642;&#x9593;&#x3092;&#x5897;&#x3084;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x529B;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x6A5F;&#x68B0;&#x7684;&#x306A;&#x529B;&#x306F;&#x3001;&#x8EE2;&#x5199;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3001;RNA&#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;&#x4ED6;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30D4;&#x30B3;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30C8;&#x30F3;&#x306E;&#x529B;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x5C0F;&#x3055;&#x3044;&#x3002;&#x65E2;&#x5B58;&#x306E;&#x7406;&#x8AD6;&#x3068;&#x306F;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x26;lt;200 bp&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x5F35;&#x529B;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x306F;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AB;&#x30FC;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;DNA&#x7D50;&#x5408;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x76F8;&#x5BFE;&#x7684;&#x306A;&#x65B9;&#x5411;&#x306B;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;DNA&#x306E;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3068;&#x4ECA;&#x5F8C;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30B7;&#x30F3;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x63D0;&#x6848;&#x306B;&#x8996;&#x70B9;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; - &#x5A92;&#x4ECB;DNA&#x306E;&#x7834;&#x58CA;&#x306F;&#x3001;&#x57FA;&#x8CEA;DNA&#x306E;&#x5F35;&#x529B;&#x3067;&#x306E;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;

&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;-&#xC911;&#xC7AC; DNA &#xBC18;&#xBCF5; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC740; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC870;&#xC808; &#xB4F1; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC911;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB8E8;&#xD504; &#xD615;&#xC131;&#xC758; &#xC0DD;&#xD654;&#xD559; &#xC798; &#xC124;&#xB9BD; &#xBE44;&#xB85D; &#xC81C;&#xD55C; &#xB41C; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xD658;&#xACBD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD3D0;&#xC1C4; &#xB8E8;&#xD504;&#xC758; &#xC5ED;&#xD559; &#xB35C; &#xAD00;&#xC2EC;&#xC744; &#xBC1B;&#xACE0; &#xC788;&#xB2E4;. &#xCD5C;&#xADFC; &#xB2E8;&#xC77C; &#xBD84;&#xC790; &#xCE21;&#xC815; &#xAE30;&#xACC4; &#xC81C;&#xC57D; DNA &#xBC18;&#xBCF5;&#xC5D0; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE60; &#xAE34;&#xC7A5; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC758; &#xB354; &#xD3EC;&#xAD04;&#xC801;&#xC778; &#xD2B9;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xD544;&#xC694; &#xB3D9;&#xAE30; &#xBD80;&#xC5EC;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. DNA wormlike &#xCCB4;&#xC778;&#xC73C;&#xB85C; &#xBAA8;&#xB378;&#xB9C1; &#xD558; &#xC5EC; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; &#xAE30;&#xD310;&#xC758; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xCE6D; &#xC5F0;&#xC18D; DNA &#xB8E8;&#xD504; &#xD615;&#xC131; &#xD655;&#xB960;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xACC4;&#xC0B0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xCC3E;&#xC744; &#xB54C; &#xB8E8;&#xD504; &#xD06C;&#xAE30; &amp;gt; 100 bp, 500&#xC758; &#xAE34;&#xC7A5; fN &#xB450; &#xC99D;&#xAC00;&#xD560; &#xB8E8;&#xD504; &#xD3D0;&#xC1C4;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC744; &#xB298;&#xB9B4; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xD3EC;&#xC2A4; RNA &#xD3F4; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xAE30;&#xACC4;&#xC801;&#xC778; &#xD798; transcriptional &#xADDC;&#xC81C;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE60; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xB2E4;&#xB978; &#xBD84;&#xC790; &#xBAA8;&#xD130;&#xC640; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; piconewton &#xC138;&#xB825;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xC791;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAE30;&#xC874; &#xC774;&#xB860;&#xC740; &#xBC18;&#xBA74; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xB8E8;&#xD504;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCC3E;&#xC744; &lt; 200 bp, &#xAE34;&#xC7A5;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB9C1;&#xCEE4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0;&#xC11C; DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC758; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801; &#xBC29;&#xD5A5;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2EC;&#xB77C; &#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xCD5C;&#xADFC; DNA &#xBC18;&#xBCF5; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xACFC; &#xBBF8;&#xB798; micromechanical &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC81C;&#xC548;&#xC5D0; &#xAD00;&#xC810;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xAE30;&#xD310; DNA&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAE34;&#xC7A5; &#xD558; &#xC5EC; &#xBC18;&#xBCF5; DNA &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC911;&#xC7AC;&#xC758; &#xC911;&#xB2E8;.

La prote&#xED;na mediada por un bucle de ADN es importante en una variedad de procesos biol&#xF3;gicos, incluyendo la regulaci&#xF3;n de genes y la transformaci&#xF3;n gen&#xE9;tica. A pesar de la bioqu&#xED;mica de la formaci&#xF3;n de la lazada est&#xE1; bien establecida, los mecanismos de cierre de lazo en un entorno celular restringida ha recibido menos atenci&#xF3;n. Recientes mediciones de una sola mol&#xE9;cula muestran que las restricciones mec&#xE1;nicas tienen un impacto significativo en el bucle de ADN y motivar la necesidad de una caracterizaci&#xF3;n m&#xE1;s completa de los efectos de la tensi&#xF3;n. Por ADN modelado como una cadena de gusano, calculamos c&#xF3;mo continuo estiramiento del ADN substrato afecta la probabilidad de formaci&#xF3;n de bucle. Se encuentra que cuando el tama&#xF1;o del bucle es&#x26;gt; 100 pb, una tensi&#xF3;n de 500 fN puede aumentar el tiempo requerido para el cierre de bucle en dos &#xF3;rdenes de magnitud. Esta fuerza es peque&#xF1;a en comparaci&#xF3;n con las fuerzas picoNewton que est&#xE1;n asociados con las polimerasas de ARN y otros motores moleculares, lo que indica que intracelulares fuerzas mec&#xE1;nicas podr&#xED;an afectar la regulaci&#xF3;n transcripcional. En contraste con la teor&#xED;a existente, nos encontramos con que los bucles &#x26;lt;200 pb, el efecto de la tensi&#xF3;n depende en parte de la orientaci&#xF3;n relativa de los dominios de uni&#xF3;n al ADN en la prote&#xED;na enlazador. Nuestros resultados proporcionan una perspectiva sobre los &#xFA;ltimos experimentos de ADN de bucle y sugerencias para futuros estudios de micro-mec&#xE1;nicos.

La alteraci&#xF3;n de las prote&#xED;nas de ADN mediada por un bucle mediante la tensi&#xF3;n en el sustrato de ADN

Tethered particle microscopy is a powerful tool to study the dynamics of DNA molecules and DNA-protein complexes in single-molecule experiments. We demonstrate that stroboscopic total internal reflection microscopy can be used to characterize the three-dimensional spatiotemporal motion of DNA-tethered particles. By calculating characteristic measures such as symmetry and time constants of the motion, well-formed tethers can be distinguished from defective ones for which the motion is dominated by aberrant surface effects. This improves the reliability of measurements on tether dynamics. For instance, in observations of protein-mediated DNA looping, loop formation is distinguished from adsorption and other nonspecific events.

Three-dimensional characterization of tethered microspheres by total internal reflection fluorescence microscopy.

&#x6813;&#x7CFB;&#x7684;&#x7C92;&#x5B50;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x662F;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x7684; DNA &#x5206;&#x5B50;&#x4E0E; DNA-&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x590D;&#x5408;&#x4F53;&#x5355;&#x5206;&#x5B50;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x7684;&#x6709;&#x529B;&#x5DE5;&#x5177;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC1;&#x660E;&#x8BE5;&#x9891;&#x95EA;&#x5168;&#x5185;&#x53CD;&#x5C04;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x53EF;&#x7528;&#x4E8E;&#x4E09;&#x7EF4;&#x65F6;&#x7A7A;&#x7C92;&#x5B50;&#x8FD0;&#x52A8;&#x7684; DNA &#x6813;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x8BA1;&#x7B97;&#x7279;&#x5F81;&#x7684;&#x63AA;&#x65BD;&#xFF0C;&#x4F8B;&#x5982;&#x5BF9;&#x79F0;&#x6027;&#x548C;&#x65F6;&#x95F4;&#x5E38;&#x6570;&#x7684;&#x8BAE;&#x6848;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4ECE;&#x6709;&#x7F3A;&#x9677;&#x7684;&#x533A;&#x5206;&#x6807;&#x51C6;&#x683C;&#x5F0F;&#x7CFB;&#x7EF3;&#x4E3A;&#x8BE5;&#x8FD0;&#x52A8;&#x7531;&#x5F02;&#x5E38;&#x7684;&#x8868;&#x9762;&#x6548;&#x679C;&#x3002;&#x8FD9;&#x63D0;&#x9AD8;&#x4E86;&#x7CFB;&#x7EF3;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x6D4B;&#x91CF;&#x503C;&#x7684;&#x53EF;&#x9760;&#x6027;&#x3002;&#x4F8B;&#x5982;&#xFF0C;&#x5728;&#x610F;&#x89C1;&#x4E2D;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x4ECB;&#x5BFC; DNA &#x5FAA;&#x73AF;&#xFF0C;&#x5FAA;&#x73AF;&#x5F62;&#x6210;&#x6709;&#x522B;&#x4E8E;&#x5438;&#x9644;&#x548C;&#x5176;&#x4ED6;&#x975E;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x7684;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x3002;

&#x6813;&#x7CFB;&#x5FAE;&#x7403;&#x7684;&#x5168;&#x5185;&#x53CD;&#x5C04;&#x8367;&#x5149;&#x663E;&#x5FAE;&#x4E09;&#x7EF4;&#x8868;&#x5F81;&#x3002;

Microscopie de particules captif est un outil puissant pour &#xE9;tudier la dynamique des mol&#xE9;cules d&#x26;#39;ADN et ADN-prot&#xE9;ines complexes en une seule mol&#xE9;cule d&#x26;#39;exp&#xE9;riences. Nous d&#xE9;montrons que la microscopie stroboscopique r&#xE9;flexion interne totale peut &#xEA;tre utilis&#xE9;e pour caract&#xE9;riser le mouvement en trois dimensions spatio-temporelle de l&#x26;#39;ADN-captifs particules. En calculant les mesures caract&#xE9;ristiques tels que les constantes de sym&#xE9;trie et l&#x26;#39;heure de la motion, bien form&#xE9;s attaches peut &#xEA;tre distingu&#xE9;e de celles d&#xE9;fectueuses pour lesquelles le mouvement est domin&#xE9; par des effets de surface aberrantes. Cela am&#xE9;liore la fiabilit&#xE9; des mesures sur la dynamique d&#x26;#39;attache. Par exemple, dans les observations de boucle d&#x26;#39;ADN en prot&#xE9;ines m&#xE9;diation, formation de la boucle se distingue de l&#x26;#39;adsorption et d&#x26;#39;autres &#xE9;v&#xE9;nements non sp&#xE9;cifiques.

La caract&#xE9;risation tridimensionnelle des microsph&#xE8;res captif par Total microscopie de fluorescence de r&#xE9;flexion interne

Dreidimensionale Charakterisierung von tethered Mikrokugeln durch Total Internal Reflection Fluorescence Mikroskopie.

Particella tethered microscopia &egrave; un potente strumento per studiare la dinamica delle molecole di DNA e DNA-proteina complessi esperimenti di singola molecola. Dimostriamo che microscopia stroboscopico riflessione interna totale pu&ograve; essere utilizzato per caratterizzare il moto spatiotemporal tridimensionale delle particelle di DNA legato. Calcolando misure caratteristici come simmetria e tempo costanti del moto, attacchi ben formati possono essere distinti da quelli difettosi per cui il movimento &egrave; dominato da aberranti effetti di superficie. Questo migliora l&#39;affidabilit&agrave; delle misurazioni sulle dinamiche tether. Per esempio, nelle osservazioni di mediata da proteine DNA looping, ciclo formazione si distingue da altri eventi aspecifici e adsorbimento.

Caratterizzazione tridimensionale di microsfere legate da microscopia di fluorescenza di riflessione interna totale.

&#x30C6;&#x30B6;&#x30FC;&#x7C92;&#x5B50;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3001;&#x5358;&#x4E00;&#x5206;&#x5B50;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3067;&#x306F;DNA&#x5206;&#x5B50;&#x3068;DNA-&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x3001;&#x30B9;&#x30C8;&#x30ED;&#x30DC;&#x5185;&#x90E8;&#x5168;&#x53CD;&#x5C04;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x306F;&#x3001;DNA-&#x30C6;&#x30B6;&#x30FC;&#x7C92;&#x5B50;&#x306E;&#x4E09;&#x6B21;&#x5143;&#x6642;&#x7A7A;&#x9593;&#x904B;&#x52D5;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x904B;&#x52D5;&#x306E;&#x5BFE;&#x79F0;&#x6027;&#x3068;&#x6642;&#x5B9A;&#x6570;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x306E;&#x63AA;&#x7F6E;&#x3092;&#x7B97;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x6574;&#x5F62;&#x5F0F;&#x306E;&#x30C6;&#x30B6;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x52D5;&#x304D;&#x304C;&#x7570;&#x5E38;&#x306A;&#x8868;&#x9762;&#x52B9;&#x679C;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x652F;&#x914D;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x6B20;&#x9665;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x3082;&#x306E;&#x304B;&#x3089;&#x533A;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x30C6;&#x30B6;&#x30FC;&#x306E;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x306E;&#x4FE1;&#x983C;&#x6027;&#x3092;&#x5411;&#x4E0A;&#x3055;&#x305B;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4F8B;&#x3048;&#x3070;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; - &#x5A92;&#x4ECB;DNA&#x306E;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x89B3;&#x6E2C;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x304C;&#x5438;&#x7740;&#x3057;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;&#x975E;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x306A;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3068;&#x533A;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x5168;&#x5185;&#x90E8;&#x53CD;&#x5C04;&#x86CD;&#x5149;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30C6;&#x30B6;&#x30FC;&#x30DF;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30A2;&#x306E;&#x4E09;&#x6B21;&#x5143;&#x7279;&#x6027;

&#xBC27;&#xC904;&#xB85C; &#xB9E4; &#xC778;&#xB41C; &#xC785;&#xC790; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; DNA &#xBD84;&#xC790;&#xC640; &#xB2E8;&#xC77C; &#xBD84;&#xC790; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0;&#xC11C; DNA &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBCF5;&#xD569;&#xBB3C;&#xC758; &#xC5ED;&#xD559; &#xACF5;&#xBD80;&#xB97C; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8; stroboscopic &#xCD1D; &#xB0B4;&#xBD80; &#xBC18;&#xC0AC; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; DNA &#xB2FF;&#xB294; &#xC785;&#xC790;&#xC758; 3 &#xCC28;&#xC6D0; spatiotemporal &#xB3D9;&#xC791; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBAA8;&#xC158;&#xC758; &#xB300;&#xCE6D; &#xBC0F; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC0C1;&#xC218; &#xAC19;&#xC740; &#xD2B9;&#xC131; &#xCE21;&#xC815;&#xC744; &#xACC4;&#xC0B0; &#xD558; &#xC5EC; &#xC62C;&#xBC14;&#xB978; &#xD615;&#xC2DD;&#xC758; &#xBC27;&#xC904; &#xACB0;&#xD568;&#xC774; &#xC788;&#xB294; &#xAC83; &#xB4E4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD6C;&#xBD84;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xBAA8;&#xC158; &#xD0C8; &#xC120; &#xD45C;&#xBA74; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC758;&#xD574; &#xC9C0;&#xBC30;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C;. &#xBC27;&#xC904; &#xC5ED;&#xD559;&#xC758; &#xCE21;&#xC815;&#xC758; &#xC2E0;&#xB8B0;&#xC131; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC608;&#xB97C; &#xB4E4;&#xC5B4;, &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC911;&#xC7AC; DNA &#xBC18;&#xBCF5; &#xAD00;&#xCC30;, &#xB8E8;&#xD504; &#xD615;&#xC131; &#xD761;&#xCC29; &#xBC0F; &#xAE30;&#xD0C0; &#xC77C;&#xBC18; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD6C;&#xBCC4; &#xB41C;&#xB2E4;.

&#xCD1D; &#xB0B4;&#xBD80; &#xBC18;&#xC0AC; &#xD615;&#xAD11; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC18D;&#xBC15; &#xB418; microspheres&#xC758; 3 &#xCC28;&#xC6D0; &#xD2B9;&#xC131;.

Microscop&#xED;a de part&#xED;culas atados es una poderosa herramienta para estudiar la din&#xE1;mica de las mol&#xE9;culas de ADN y las prote&#xED;nas de ADN en experimentos complejos sola mol&#xE9;cula. Se demuestra que estrobosc&#xF3;pico microscop&#xED;a de reflexi&#xF3;n interna total se puede utilizar para caracterizar el movimiento espacio-temporal tridimensional de sujetos, ADN-part&#xED;culas. Al calcular las medidas caracter&#xED;sticos tales como constantes de simetr&#xED;a y el tiempo del movimiento, bien formadas correas se pueden distinguir de defectuosos aquellos para los que est&#xE1; dominado el movimiento por los efectos de superficie aberrantes. Esto mejora la confiabilidad de las mediciones sobre la din&#xE1;mica de amarre. Por ejemplo, en las observaciones de bucle de ADN mediada por la prote&#xED;na, la formaci&#xF3;n de bucle se distingue de adsorci&#xF3;n y otros eventos no espec&#xED;ficos.

Caracterizaci&#xF3;n tridimensional de las microesferas anclada por Total microscop&#xED;a de fluorescencia de reflexi&#xF3;n interna

&#x591A;&#x5C42;&#x8F6F;&#x5149;&#x523B;&#x6280;&#x672F;&#x7528;&#x4E8E;&#x51C6;&#x5907;&#x5141;&#x8BB8;&#x4F53;&#x5185;&#x91C7;&#x96C6;&#x7684;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x795E;&#x7ECF;&#x9012;&#x8D28;&#x7684; poly(dimethylsiloxane) &#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x82AF;&#x7247;&#x7684;&#x63A8;-&#x62C9;&#x4F4E;&#x6D41;&#x91CF;&#x704C;&#x6CE8;&#x3002;&#x8BE5;&#x82AF;&#x7247;&#x91C7;&#x7528;&#x4E86;&#x6C14;&#x52A8;&#x9A71;&#x52A8;&#x7684;&#x8815;&#x52A8;&#x6CF5;&#x63A8;&#x62C9;&#x5F0F;&#x704C;&#x6CE8;&#x63A2;&#x5934;&#x5411;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4EBA;&#x5DE5;&#x8111;&#x810A;&#x6DB2;&#x3001; &#x62C9;&#x4ECE;&#x8FD9;&#x9879;&#x8C03;&#x67E5;&#x7684;&#x6837;&#x672C;&#x3001; &#x6267;&#x884C;&#x5728;&#x7EBF;&#x884D;&#x751F;&#x4E0E; o-phthaldialdehyde&#xFF0C;&#x5E76;&#x63A8;&#x5165;&#x9AD8;&#x901F;&#x6BDB;&#x7EC6;&#x7BA1;&#x7535;&#x6CF3;-&#x6FC0;&#x5149;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x8367;&#x5149;&#x4EEA;&#x63A7;&#x6D41;&#x52A8;&#x6027;&#x55B7;&#x6CB9;&#x5668;&#x7684;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x884D;&#x751F;&#x7269;&#x3002;&#x8815;&#x52A8;&#x53D6;&#x5F97;&#x4E86;&#x8FDE;&#x7EED;&#x9A71;&#x52A8;&#x516D;&#x3001; 200 microm &#x5BBD; 15 microm &#x9AD8;&#x63A7;&#x5236;&#x9600;&#x95E8;&#xFF0C;&#x5F00;&#x8F66;&#x6D41;&#x4F53;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E09;&#x4E2A;&#x6D41;&#x63A7;&#x6E20;&#x9053;&#x540C;&#x7B49;&#x5C3A;&#x5BF8;&#x3002;Electropherograms &#x4E0E; 100,000 &#x7406;&#x8BBA;&#x677F;&#x83B7;&#x5F97;&#x5927;&#x7EA6; 20 s &#x95F4;&#x9694;&#x3002;&#x5CF0;&#x503C;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x7684;&#x76F8;&#x5BF9;&#x6807;&#x51C6;&#x504F;&#x5DEE;&#x662F;&#x4F53;&#x5916;&#xFF0C;4%&#xFF0C;&#x5174;&#x594B;&#x6027;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x68C0;&#x6D4B;&#x9650;&#x503C;&#x662F;&#x5927;&#x7EA6; 60 nM&#x3002;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x6D4B;&#x91CF;&#xFF0C;&#x63A8;&#x62C9;&#x5F0F;&#x63A2;&#x6D4B;&#x5668;&#x88AB;&#x690D;&#x5165;&#x7684;&#x9EBB;&#x9189;&#x5927;&#x9F20;&#x7EB9;&#x72B6;&#x4F53;&#x548C;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x6D53;&#x5EA6;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x76D1;&#x6D4B;&#x540C;&#x65F6;&#x5728; 50 nL/&#x5206;&#x949F; o Phosphorylethanolamine&#x3001; &#x8C37;&#x6C28;&#x9178;&#x3001; &#x5929;&#x95E8;&#x51AC;&#x6C28;&#x9178;&#x3001; &#x725B;&#x78FA;&#x9178;&#x3001; &#x8C37;&#x6C28;&#x9170;&#x80FA;&#x3001; &#x4E1D;&#x6C28;&#x9178;&#x3001; &#x53D6;&#x6837;&#x548C;&#x7518;&#x6C28;&#x9178;&#xFF0C;&#x73B0;&#x5728;&#x6240;&#x6709;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x5728;&#x4F53;&#x5185;&#x4E0E;&#x76F8;&#x5BF9;&#x6807;&#x51C6;&#x504F;&#x5DEE;&#x7684; 10%&#x4EE5;&#x4E0A; 4 h &#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x5CF0;&#x503C;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x65B9;&#x9762;&#x3002;&#x57FA;&#x5E95;&#x7684;&#x8C37;&#x6C28;&#x9178;&#x6D53;&#x5EA6;&#x662F; 1.9 + /-0.6 microM (n = 4&#xFF09; &#x5728;&#x7528;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x597D;&#x7684;&#x534F;&#x8BAE;&#x3002;&#x76D1;&#x6D4B;&#x4ECE; 10 &#x5206;&#x949F; 70 &#x6BEB;&#x7C73; K(+) &#x901A;&#x8FC7;&#x6CF5;&#x7684;&#x63A8;&#x9001;&#x901A;&#x9053;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x6240;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x9012;&#x8D28;&#x7684;&#x52A8;&#x6001;&#x53D8;&#x5316;&#x7684;&#x8868;&#x73B0;&#x3002;&#x8054;&#x5408;&#x7684;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x5141;&#x8BB8;&#x65F6;&#x95F4;&#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#x4E3A; multianalyte &#x76D1;&#x6D4B;&#x7684;&#x5927;&#x7EA6; 45 s &#x7A7A;&#x95F4;&#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#x4E0E;&#x5E38;&#x89C4;&#x5FAE;&#x900F;&#x6790;&#x63A2;&#x9488;&#x4E0E; 4 &#x6BEB;&#x7C73;&#x957F;&#x5EA6;&#x6BD4; 65-fold &#x66F4;&#x597D;&#x3002;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x6F14;&#x793A;&#x4E0E;&#x8F6C;&#x79FB;&#x5230;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x8BBE;&#x5907;&#x4EE5;&#x4F9B;&#x5728;&#x7EBF;&#x5206;&#x6790;&#x4ECE;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x5FAE;&#x73AF;&#x5883;&#x91C7;&#x6837;&#x7684;&#x53EF;&#x884C;&#x6027;&#x3002;

&#x4F4E;&#x6D41;&#x91CF;&#x63A8;&#x62C9;&#x704C;&#x6CE8;&#x91C7;&#x6837;&#x4E0E;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x7684;&#x5728;&#x7EBF;&#x5206;&#x6790;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x82AF;&#x7247;&#x3002;

Multilayer soft lithography was used to prepare a poly(dimethylsiloxane) microfluidic chip that allows for in vivo sampling of amino acid neurotransmitters by low-flow push-pull perfusion. The chip incorporates a pneumatically actuated peristaltic pump to deliver artificial cerebrospinal fluid to a push-pull perfusion probe, pull sample from the probe, perform on-line derivatization with o-phthaldialdehyde, and push derivatized amino acids into the flow-gated injector of a high-speed capillary electrophoresis-laser-induced fluorescence instrument. Peristalsis was achieved by sequential actuation of six, 200 microm wide by 15 microm high control valves that drove fluid through three fluidic channels of equal dimensions. Electropherograms with 100,000 theoretical plates were acquired at approximately 20-s intervals. Relative standard deviations of peak heights were 4% in vitro, and detection limits for the excitatory amino acids were approximately 60 nM. For in vivo measurements, push-pull probes were implanted in the striatum of anesthetized rats and amino acid concentrations were monitored while sampling at 50 nL/min. o-Phosphorylethanolamine, glutamate, aspartate, taurine, glutamine, serine, and glycine were all detected with stable peak heights observed for over 4 h with relative standard deviations of 10% in vivo. Basal concentrations of glutamate were 1.9 +/- 0.6 microM (n = 4) in good agreement with similar methods. Monitoring of dynamic changes of neurotransmitters resulting from 10-min applications of 70 mM K(+) through the push channel of the pump was demonstrated. The combined system allows temporal resolution for multianalyte monitoring of approximately 45 s with spatial resolution 65-fold better than conventional microdialysis probe with 4-mm length. The system demonstrates the feasibility of sampling from a complex microenvironment with transfer to a microfluidic device for on-line analysis.

Microfluidic chip for low-flow push-pull perfusion sampling in vivo with on-line analysis of amino acids.

Lithographie molle multicouche a &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9; pour pr&#xE9;parer un poly (dim&#xE9;thylsiloxane) &#xE0; puce microfluidique qui permet &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;chantillonnage in vivo de neurotransmetteurs d&#x26;#39;acides amin&#xE9;s par de faible d&#xE9;bit de perfusion push-pull. La puce comprend une pompe p&#xE9;ristaltique &#xE0; actionnement pneumatique pour d&#xE9;livrer artificielle liquide c&#xE9;phalo-rachidien &#xE0; une sonde de perfusion push-pull, tirer &#xE9;chantillon de la sonde, effectuer en ligne d&#xE9;rivatisation avec l&#x26;#39;o-phtaldiald&#xE9;hyde, et pousser acides amin&#xE9;s d&#xE9;riv&#xE9;s d&#x26;#39;&#xE9;coulement dans l&#x26;#39;injecteur-d&#xE9;pendants d&#x26;#39;une grande vitesse &#xE9;lectrophor&#xE8;se capillaire-induit par laser instrument de fluorescence. P&#xE9;ristaltisme a &#xE9;t&#xE9; r&#xE9;alis&#xE9;e par actionnement s&#xE9;quentiel de six ans, l&#x26;#39;&#xE9;chelle 200 microm par des vannes de contr&#xF4;le de haute Microm 15 qui ont conduit de fluide &#xE0; travers trois canaux fluidiques de dimensions &#xE9;gales. &#xC9;lectroph&#xE9;rogrammes avec 100.000 plateaux th&#xE9;oriques ont &#xE9;t&#xE9; acquises &#xE0; environ 20-S intervalles. Les d&#xE9;viations standard relatives de la hauteur des pics ont &#xE9;t&#xE9; de 4% in vitro, et des limites de d&#xE9;tection pour les acides amin&#xE9;s excitateurs &#xE9;taient environ 60 nM. Pour des mesures in vivo, push-pull sondes ont &#xE9;t&#xE9; implant&#xE9;es dans le striatum de rats anesth&#xE9;si&#xE9;s et les concentrations d&#x26;#39;acides amin&#xE9;s ont &#xE9;t&#xE9; suivis pendant l&#x26;#39;&#xE9;chantillonnage &#xE0; 50 nL / min. o-phosphoryl&#xE9;thanolamine, le glutamate, l&#x26;#39;aspartate, la taurine, la glutamine, la s&#xE9;rine, la glycine et ont tous &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;tect&#xE9;s avec les hauteurs des pics stables observ&#xE9;s depuis plus de 4 h avec des &#xE9;carts types relatifs de 10% in vivo. Les concentrations basales de glutamate ont &#xE9;t&#xE9; de 1,9 + / - 0,6 microM (n = 4) en bon accord avec des m&#xE9;thodes similaires. La surveillance des changements dynamiques de neurotransmetteurs r&#xE9;sultant de 10 min-applications de 70 mM de K (+) par l&#x26;#39;interm&#xE9;diaire du canal de poussoir de la pompe a &#xE9;t&#xE9; &#xE9;tablie. Le syst&#xE8;me combin&#xE9; permet la r&#xE9;solution temporelle pour la surveillance multianalyte d&#x26;#39;environ 45 s avec une r&#xE9;solution spatiale de 65 fois mieux que la sonde de microdialyse classique avec 4 mm de longueur. Le syst&#xE8;me d&#xE9;montre la faisabilit&#xE9; de l&#x26;#39;&#xE9;chantillonnage &#xE0; partir d&#x26;#39;un micro-environnement complexe avec le transfert &#xE0; un dispositif microfluidique pour l&#x26;#39;analyse en ligne.

Puce microfluidique pour des d&#xE9;bits de push-pull d&#x26;#39;&#xE9;chantillonnage de perfusion in vivo avec une analyse en ligne des acides amin&#xE9;s

Mehrlagige weiche Lithographie wurde einen Poly Microfluidic Chip vorzubereiten, der in-vivo Probenahme von Aminos&auml;ure Neurotransmittern erm&ouml;glicht von Low-Flow-Push-Pull-Perfusion verwendet. Der Chip enth&auml;lt eine pneumatisch bet&auml;tigte Schlauchpumpe Gegentakt-Perfusion Sonde k&uuml;nstliche Liquor cerebrospinalis abliefern, Probe von der Sonde ziehen, f&uuml;hren Sie Online Derivatisierung mit o-Phthaldialdehyd und schieben derivatized Aminos&auml;uren in der Fluss-Gating Injektor eines Hochgeschwindigkeits-Kapillar-Elektrophorese-Laser-induzierte Fluoreszenz-Instruments. Peristaltik wurde durch sequenzielle Ansteuerung von sechs erreicht, breit und 15 Microm stark Kontrolle 200 Microm Ventile, fuhr Fl&uuml;ssigkeit durch drei fluidische Kan&auml;le gleich Dimensionen. Electropherograms mit 100.000 theoretische Platten wurden in etwa 20-s Abst&auml;nden erworben. Relativen Standardabweichungen der Peakh&ouml;hen waren 4 % in-vitro- und Nachweisgrenzen f&uuml;r die exzitatorischen Aminos&auml;uren waren etwa 60 nM. F&uuml;r in-vivo-Messungen Push-Pull-Sonden wurden implantiert im Striatum von narkotisierten Ratten Aminos&auml;ure-Konzentrationen wurden &uuml;berwacht w&auml;hrend der Probenahme auf 50 nL/min. o-Phosphoethanolamin, Glutamat, Aspartat, Taurin, Glutamin, Serin und Glycin wurden mit stabilen Peakh&ouml;hen beobachtet &uuml;ber 4 h mit relativen Standardabweichungen von 10 % in-vivo erkannt. Basale Konzentrationen von Glutamat wurden 1,9 +/-0,6 MicroM (n = 4) in guter &Uuml;bereinstimmung mit &auml;hnlichen Methoden. &Uuml;berwachung der dynamischen &Auml;nderungen von Neurotransmittern aus 10-min-Anwendungen von 70 mM K(+) durch den Push-Kanal der Pumpe wurde demonstriert. Das kombinierte System erm&ouml;glicht zeitlichen Aufl&ouml;sung Multianalyte &Uuml;berwachung von etwa 45 s mit r&auml;umlicher Aufl&ouml;sung 65-fold besser als konventionelle Microdialysis Sonde mit 4-mm-L&auml;nge. Das System zeigt die Machbarkeit der Probenahme aus einer komplexen Mikromilieu mit Transfer auf ein Microfluidic-Ger&auml;t f&uuml;r die Online-Analyse.

Microfluidic Chip f&uuml;r Low-Flow-Push-Pull-Perfusion Probenahme in-vivo mit on-line Analyse von Aminos&auml;uren.

Litografia soft multistrato &egrave; stato utilizzato per preparare un chip microfluidico poly(dimethylsiloxane) che permette di campionamento in vivo di aminoacidi neurotrasmettitori da perfusione basso flusso push-pull. Il chip incorpora una pompa peristaltica ad azionamento pneumatico per consegnare liquor artificiale ad una sonda di perfusione push-pull, tirare il campione dalla sonda, eseguire on-line derivatizzazione con dialdeide o-ftalica e spingere derivatizzate aminoacidi nell&#39;iniettore gated la portata di uno strumento ad alta velocit&agrave; capillare fluorescenza indotta da laser elettroforesi. Peristalsi &egrave; stato raggiunto da azionamento sequenza di sei, 200 microm wide da 15 microm alto controllo Valvole quel fluido guidato attraverso tre canali fluidici di uguali dimensioni. Elettroferogrammi con 100.000 piastre teoriche sono state acquisite a intervalli di circa 20-s. Relative deviazioni standard delle altezze dei picchi 4% in vitro e i limiti di rilevazione per gli aminoacidi eccitatori erano circa 60 nM. Per le misurazioni in vivo, push-pull sonde furono impiantate nello striato di ratti anestetizzati e concentrazioni di aminoacidi sono stati monitorati durante il campionamento a 50 nL/min. o-Phosphorylethanolamine, glutammato, aspartato, taurina, glutammina, Serina e glicina sono stati rilevati con altezze dei picchi stabile osservate per oltre 4 h con relative deviazioni standard del 10% in vivo. Concentrazioni basali di glutammato sono stati 1.9 + 0,6 microM (n = 4) in buon accordo con metodi simili. Monitoraggio dei cambiamenti dinamici dei neurotrasmettitori derivanti da applicazioni di 10 min di 70 mM K(+) attraverso il canale di Spinta della pompa &egrave; stata dimostrata. Il sistema combinato consente risoluzione temporale per il monitoraggio di molteplici di circa 45 s con risoluzione spaziale 65-fold meglio di sonda per Microdialisi convenzionale con 4 mm di lunghezza. Il sistema dimostra la fattibilit&agrave; di campionamento da un microambiente complesso con il trasferimento a un dispositivo microfluidico per analisi on-line.

Chip microfluidico per campionamento di perfusione basso flusso push-pull in vivo con analisi on-line di aminoacidi.

&#x591A;&#x5C64;&#x30BD;&#x30D5;&#x30C8;&#x30EA;&#x30BD;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x306F;&#x3001;&#x4F4E;&#x6D41;&#x91CF;&#x306E;&#x30D7;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x30D7;&#x30EB;&#x704C;&#x6D41;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x795E;&#x7D4C;&#x4F1D;&#x9054;&#x7269;&#x8CEA;&#x306E;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x3001;&#x30DD;&#x30EA;&#xFF08;&#x30B8;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B7;&#x30ED;&#x30AD;&#x30B5;&#x30F3;&#xFF09;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x3092;&#x4F5C;&#x88FD;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x306F;&#x3001;&#x30D7;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x30D7;&#x30EB;&#x704C;&#x6D41;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;&#x306B;&#x4EBA;&#x5DE5;&#x8133;&#x810A;&#x9AC4;&#x6DB2;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x7A7A;&#x6C17;&#x5727;&#x8815;&#x52D5;&#x30DD;&#x30F3;&#x30D7;&#x3092;&#x5185;&#x8535;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;&#x304B;&#x3089;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x51FA;&#x3057;&#x3001;O-&#x30D5;&#x30BF;&#x30EB;&#x3068;&#x30AA;&#x30F3;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x8A98;&#x5C0E;&#x4F53;&#x5316;&#x3092;&#x884C;&#x3044;&#x3001;&#x6D41;&#x308C;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B8;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x306B;&#x8A98;&#x5C0E;&#x4F53;&#x5316;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x3092;&#x62BC;&#x3059;&#x9AD8;&#x901F;&#x30AD;&#x30E3;&#x30D4;&#x30E9;&#x30EA;&#x30FC;&#x96FB;&#x6C17;&#x6CF3;&#x52D5; - &#x30EC;&#x30FC;&#x30B6;&#x30FC;&#x8A98;&#x8D77;&#x86CD;&#x5149;&#x697D;&#x5668;&#x3002;&#x8815;&#x52D5;&#x306F;&#x3001;6&#x3064;&#x306E;&#x9023;&#x7D9A;&#x4F5C;&#x52D5;&#x3001;&#x540C;&#x3058;&#x5BF8;&#x6CD5;&#x306E;3&#x6D41;&#x4F53;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3092;&#x901A;&#x3057;&#x3066;&#x6D41;&#x4F53;&#x3092;&#x904B;&#x8EE2;&#x3057;&#x305F;15&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x5236;&#x5FA1;&#x5F01;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5E45;200&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x9054;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002; 10&#x4E07;&#x7406;&#x8AD6;&#x6BB5;&#x6570;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED;&#x306F;&#x3001;&#x7D04;20&#x79D2;&#x9593;&#x9694;&#x3067;&#x53D6;&#x5F97;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30D4;&#x30FC;&#x30AF;&#x9AD8;&#x3055;&#x306E;&#x76F8;&#x5BFE;&#x6A19;&#x6E96;&#x504F;&#x5DEE;&#x306F;&#x3001;in vitro&#x3067;4&#xFF05;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3001;&#x3068;&#x8208;&#x596E;&#x6027;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x306E;&#x691C;&#x51FA;&#x9650;&#x754C;&#x306F;&#x7D04;60 nm&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002; 50 NL / min&#x3067;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x4E2D;&#x306B;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3067;&#x3001;&#x30D7;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x30D7;&#x30EB;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;&#x306F;&#x9EBB;&#x9154;&#x4E0B;&#x306E;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x7DDA;&#x6761;&#x4F53;&#x306B;&#x79FB;&#x690D;&#x3057;&#x305F;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x30E2;&#x30CB;&#x30BF;&#x30FC;&#x3057;&#x305F;&#x3002; O-Phosphorylethanolamine&#x3001;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x9178;&#x3001;&#x30A2;&#x30B9;&#x30D1;&#x30E9;&#x30AE;&#x30F3;&#x9178;&#x3001;&#x30BF;&#x30A6;&#x30EA;&#x30F3;&#x3001;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x3001;&#x30BB;&#x30EA;&#x30F3;&#x3001;&#x30B0;&#x30EA;&#x30B7;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;in vivo&#x3067;&#x306E;10&#xFF05;&#x306E;&#x76F8;&#x5BFE;&#x6A19;&#x6E96;&#x504F;&#x5DEE;&#x3067;4&#x6642;&#x9593;&#x306B;&#x308F;&#x305F;&#x3063;&#x3066;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x30D4;&#x30FC;&#x30AF;&#x306E;&#x9AD8;&#x3055;&#x3092;&#x691C;&#x51FA;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x3068;&#x826F;&#x304F;&#x4E00;&#x81F4;&#x3067;0.6&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#xFF08;N = 4&#xFF09; - &#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x9178;&#x306E;&#x57FA;&#x790E;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306F;1.9 + /&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x30DD;&#x30F3;&#x30D7;&#x306E;&#x30D7;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;70mM&#x306E;K&#xFF08;+&#xFF09;&#x306E;10&#x5206;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;&#x795E;&#x7D4C;&#x4F1D;&#x9054;&#x7269;&#x8CEA;&#x306E;&#x52D5;&#x7684;&#x5909;&#x5316;&#x306E;&#x30E2;&#x30CB;&#x30BF;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x304C;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x8907;&#x5408;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;4 mm&#x306E;&#x9577;&#x3055;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x3001;&#x5F93;&#x6765;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30C0;&#x30A4;&#x30A2;&#x30EA;&#x30B7;&#x30B9;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;&#x3088;&#x308A;&#x3082;65&#x500D;&#x512A;&#x308C;&#x305F;&#x7A7A;&#x9593;&#x5206;&#x89E3;&#x80FD;&#x306F;&#x7D04;45&#x79D2;&#x306E;multianalyte&#x76E3;&#x8996;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6642;&#x9593;&#x5206;&#x89E3;&#x80FD;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x30AA;&#x30F3;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x5206;&#x6790;&#x7528;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x3078;&#x306E;&#x8EE2;&#x9001;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x74B0;&#x5883;&#x304B;&#x3089;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x4F4E;&#x6D41;&#x91CF;&#x7528;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x306E;&#x30AA;&#x30F3;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x5206;&#x6790;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x30D7;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x30D7;&#x30EB;&#x704C;&#x6D41;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;

&#xBA40;&#xD2F0; &#xB808;&#xC774;&#xC5B4; &#xC18C;&#xD504;&#xD2B8; &#xB9AC;&#xC18C; &#xADF8;&#xB798;&#xD53C;&#xB294; &#xB0AE;&#xC740; &#xD750;&#xB984; &#xD478;&#xC2DC; &#xD480; &#xAD00;&#xB958;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC804;&#xB2EC; &#xBB3C;&#xC9C8;&#xC758; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xC0D8;&#xD50C;&#xB9C1; &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; poly(dimethylsiloxane) &#xBBF8;&#xC138; &#xCE69; &#xC900;&#xBE44; &#xD558; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xACF5;&#xAE30; &#xC791;&#xB3D9; &#xC2DD; &#xAC1C;&#xD3D0; &#xC5F0;&#xB3D9; &#xD38C;&#xD504; &#xC911;&#xCD94; &#xC2E0; &#xACBD;&#xACC4; &#xC778;&#xACF5; &#xD478;&#xC2DC; &#xD480; &#xAD00;&#xB958; &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558; &#xACE0;, &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC744; &#xBF51;&#xC544; &#xD558; &#xACE0;, o-phthaldialdehyde&#xC640; &#xC628;&#xB77C;&#xC778; derivatization &#xC218;&#xD589; &#xD558; &#xACE0;, &#xACE0;&#xC18D; &#xBAA8; &#xC138;&#xAD00; &#xC804;&#xAE30; &#xC774;&#xB3D9; &#xBC95; &#xB808;&#xC774;&#xC800; &#xC720;&#xB3C4; &#xD615;&#xAD11; &#xC545;&#xAE30;&#xC758; &#xD750;&#xB984; &#xAC1C;&#xD3D0; &#xC778;&#xC81D;&#xD130;&#xC5D0; derivatized &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0;&#xC744; &#xBC00;&#xC5B4;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD569; &#xD558;&#xB294; &#xCE69;. &#xC5F0;&#xB3D9; 6 &#xC21C;&#xCC28;&#xC801; &#xAC1C;&#xD3D0;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB2EC;&#xC131; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;, 200 microm 15 microm &#xB192;&#xC740; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558; &#xC5EC; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xB3D9;&#xB4F1;&#xD55C; &#xD06C;&#xAE30;&#xC758; &#xC138; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC720;&#xCCB4; &#xCC44;&#xB110;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xADF8; &#xCC28;&#xB97C; &#xBAB0;&#xACE0; &#xC561;&#xCCB4; &#xBC38;&#xBE0C;. 100000 &#xC774;&#xB860; &#xBC88;&#xD638;&#xD310; Electropherograms &#xC57D; 20 s &#xAC04;&#xACA9;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778;&#xC218; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD53C;&#xD06C; &#xB192;&#xC774;&#xC758; &#xC0C1;&#xB300; &#xD45C;&#xC900; &#xD3B8;&#xCC28; 4% &#xCCB4; &#xC678;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xD765;&#xBD84; &#xC131;&#xC758; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC80;&#xCD9C; &#xD55C;&#xACC4; &#xD588;&#xB2E4; &#xC57D; 60 nM. In vivo &#xCE21;&#xC815;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD478;&#xC2DC; &#xD480; &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C; &#xCDE8; &#xC950;&#xAC00; &#xC774;&#xC2DD; &#xD588;&#xB2E4; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; &#xB18D;&#xB3C4; 50 nL/&#xBD84; o-Phosphorylethanolamine, &#xC870;&#xBBF8;&#xB8CC;, aspartate, &#xD0C0;&#xC6B0; &#xB9B0;, &#xAE00;&#xB8E8;&#xD0C0;&#xBBFC;, &#xB5A0;&#xB4E4;&#xACE0;, &#xC0D8;&#xD50C;&#xB9C1; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1; &#xD588;&#xB2E4; &#xBC0F; &#xAE00;&#xB9AC;&#xC2E0; &#xBAA8;&#xB450; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xD53C;&#xD06C; &#xB192;&#xC774; vivo&#xC5D0;&#xC11C; 10%&#xC758; &#xC0C1;&#xB300; &#xD45C;&#xC900; &#xD3B8;&#xCC28;&#xC640; 4 &#xC2DC;&#xAC04; &#xC774;&#xC0C1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAD00;&#xCC30;&#xB85C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC870;&#xBBF8;&#xB8CC;&#xC758; &#xAE30;&#xC800; &#xB18D;&#xB3C4; 0.6 microM &plusmn; 1.9 &#xD588;&#xB2E4; (n = 4)&#xC5D0;&#xC11C; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xBC29;&#xBC95;&#xC73C;&#xB85C; &#xC88B;&#xC740; &#xACC4;&#xC57D;. 10 &#xBD84; 70 m m K(+) &#xD38C;&#xD504;&#xC758; &#xD478;&#xC2DC; &#xCC44;&#xB110;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC804;&#xB2EC; &#xBB3C;&#xC9C8;&#xC758; &#xB3D9;&#xC801; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1; &#xD558;&#xB294; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xACB0;&#xD569; &#xB41C; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC744; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC801; &#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; multianalyte 45 &#xC57D; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1; &#xACF5;&#xAC04; &#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; 65-fold 4 m m &#xAE38;&#xC774; &#xAC00;&#xC9C4; &#xAE30;&#xC874;&#xC758; microdialysis &#xC870;&#xC0AC; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB354; &#xB098;&#xC740;. &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xC628;&#xB77C;&#xC778; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xACB0;&#xD569; &#xC7A5;&#xCE58;&#xC5D0; &#xC804;&#xC1A1; &#xB41C; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; microenvironment&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0D8;&#xD50C;&#xB9C1;&#xC758; &#xD0C0;&#xB2F9;&#xC131;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB0AE;&#xC740; &#xD750;&#xB984; &#xD478;&#xC2DC; &#xD480; &#xAD00;&#xB958; &#xC0D8;&#xD50C;&#xB9C1; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0;&#xC758; &#xC628;&#xB77C;&#xC778; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xBBF8;&#xC138; &#xCE69;.

Litograf&#xED;a blanda multicapa se utiliz&#xF3; para preparar un poli (dimetilsiloxano) chip de microfluidos que permite en el muestreo in vivo de neurotransmisores de amino&#xE1;cidos por push-pull de bajo flujo de perfusi&#xF3;n. El chip incorpora una bomba perist&#xE1;ltica de accionamiento neum&#xE1;tico para entregar el l&#xED;quido cefalorraqu&#xED;deo artificial con una sonda de la perfusi&#xF3;n push-pull, tire de la muestra de la sonda, realice en l&#xED;nea derivatizaci&#xF3;n con o-ftaldialdeh&#xED;do y empuje derivatizados amino&#xE1;cidos en el inyector de flujo cerrado de un alta velocidad electroforesis capilar-inducida por l&#xE1;ser instrumento de fluorescencia. El peristaltismo se logr&#xF3; mediante el accionamiento secuencial de seis, 200 micras de ancho por 15 v&#xE1;lvulas de control Microm altas que condujeron fluido a trav&#xE9;s de tres canales flu&#xED;dicos de iguales dimensiones. Electroferogramas con 100.000 platos te&#xF3;ricos fueron adquiridas a unos intervalos de 20-S. Las desviaciones est&#xE1;ndar de alturas de los picos fueron 4% in vitro, y los l&#xED;mites de detecci&#xF3;n para los amino&#xE1;cidos excitatorios eran aproximadamente 60 nM. Para las mediciones in vivo, push-pull sondas fueron implantados en el cuerpo estriado de ratas anestesiadas y las concentraciones de amino&#xE1;cidos fueron monitoreadas durante el muestreo a 50 Nl / min. o-Phosphorylethanolamine, glutamato, aspartato, taurina, glutamina, serina, glicina y se detectaron todos con alturas de los picos observados estables durante m&#xE1;s de 4 h con desviaciones t&#xED;picas relativas de 10% en vivo. Las concentraciones basales de glutamato fueron de 1,9 + / - 0,6 micromolar (n = 4) en buen acuerdo con m&#xE9;todos similares. Seguimiento de los cambios din&#xE1;micos de neurotransmisores derivados de 10-min aplicaciones de 70 mM de K (+) a trav&#xE9;s del canal de empuje de la bomba se demostr&#xF3;. El sistema combinado permite la resoluci&#xF3;n temporal para el seguimiento multianal&#xED;tico de aproximadamente 45 s con una resoluci&#xF3;n espacial 65-veces mejor que la sonda de microdi&#xE1;lisis convencional con 4-mm de longitud. El sistema demuestra la viabilidad de toma de muestras de un complejo microambiente con la transferencia a un dispositivo de microfluidos para el an&#xE1;lisis en l&#xED;nea.

Chip de microfluidos para el bajo flujo push-pull de muestreo de perfusi&#xF3;n in vivo con el an&#xE1;lisis en l&#xED;nea de los amino&#xE1;cidos

We have applied tethered particle microscopy (TPM) as a single molecule analysis tool to studies of the conformational dynamics of poly-uridine(U) messenger (m)RNA and 16S ribosomal (r)RNA molecules. Using stroboscopic total internal reflection illumination and rigorous selection criteria to distinguish from nonspecific tethering, we have tracked the nanometer-scale Brownian motion of RNA-tethered fluorescent microspheres in all three dimensions at pH 7.5, 22 degrees C, in 10 mM or 100 mM NaCl in the absence or presence of 10 mM MgCl(2). The addition of Mg(2+) to low-ionic strength buffer results in significant compaction and stiffening of poly(U) mRNA, but not of 16S rRNA. Furthermore, the motion of poly(U)-tethered microspheres is more heterogeneous than that of 16S rRNA-tethered microspheres. Analysis of in-plane bead motion suggests that poly(U) RNA, but less so 16S rRNA, can be modeled both in the presence and absence of Mg(2+) by a statistical Gaussian polymer model. We attribute these differences to the Mg(2+)-induced compaction of the relatively weakly structured and structurally disperse poly(U) mRNA, in contrast to Mg(2+)-induced reinforcement of existing secondary and tertiary structure contacts in the highly structured 16S rRNA. Both effects are nonspecific, however, as they are dampened in the presence of higher concentrations of monovalent cations.

Mg2+-induced compaction of single RNA molecules monitored by tethered particle microscopy.

&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x5BF9; poly-uridine(U) (m) &#x4FE1;&#x4F7F; RNA &#x548C; 16S &#x6838;&#x7CD6;&#x4F53; (r) RNA &#x5206;&#x5B50;&#x6784;&#x8C61;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x7814;&#x7A76;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x79CD;&#x5355;&#x5206;&#x5B50;&#x5206;&#x6790;&#x5DE5;&#x5177;&#x5E94;&#x7528;&#x6813;&#x7CFB;&#x7684;&#x7C92;&#x5B50;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C; (TPM)&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x9891;&#x95EA;&#x5168;&#x5185;&#x53CD;&#x5C04;&#x7167;&#x660E;&#x548C;&#x4E25;&#x683C;&#x7684;&#x7504;&#x9009;&#x6807;&#x51C6;&#x975E;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x4E2D;&#x7EE7;&#x533A;&#x522B;&#x5F00;&#x6765;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x627E;&#x5230;&#x7EB3;&#x7C73;&#x5C3A;&#x5EA6;&#x5E03;&#x6717;&#x8FD0;&#x52A8;&#x7684; RNA &#x62F4;&#x8367;&#x5149;&#x5FAE;&#x7403;&#x5728; pH 7.5&#xFF0C;22 &#x6444;&#x6C0F;&#x5EA6;&#xFF0C;&#x5728; 10 &#x6216; 100 m m &#x6C2F;&#x5316;&#x94A0; 10 &#x6BEB;&#x7C73; MgCl(2) &#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x6216;&#x7F3A;&#x5E2D;&#x7684;&#x6240;&#x6709;&#x4E09;&#x4E2A;&#x65B9;&#x9762;&#x3002;Mg(2+) &#x52A0;&#x5165;&#x4F4E;&#x79BB;&#x5B50;&#x5F3A;&#x5EA6;&#x7F13;&#x51B2;&#x7ED3;&#x679C;&#x5728;&#x91CD;&#x5927;&#x538B;&#x5B9E;&#x548C; poly(U) &#x52A0;&#x52B2; mRNA&#xFF0C;&#x800C;&#x4E0D;&#x662F; 16S rRNA&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x805A; (U) &#x7684;&#x8BAE;&#x6848;-&#x6813;&#x7CFB;&#x7684;&#x5FAE;&#x7403;&#x662F;&#x66F4;&#x6BD4; 16S rRNA &#x62F4;&#x5FAE;&#x7403;&#x7684;&#x5F02;&#x7C7B;&#x3002;&#x5728;&#x5E73;&#x9762;&#x73E0;&#x8FD0;&#x52A8;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;poly(U) RNA&#xFF0C;&#x4F46;&#x5C11;&#x8FD9;&#x4E48; 16S rRNA&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8FDB;&#x884C;&#x5EFA;&#x6A21;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x548C;&#x6CA1;&#x6709; Mg(2+) &#x7684;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#x7531;&#x7EDF;&#x8BA1;&#x9AD8;&#x65AF;&#x805A;&#x5408;&#x7269;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5DEE;&#x5F02;&#x5BF9;&#x8BF1;&#x5BFC; Mg(2+) &#x538B;&#x5B9E;&#x5EA6;&#x8F83;&#x5F31;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x5C5E;&#x6027;&#x548C;&#x7ED3;&#x6784;&#x4E0A;&#x9A71;&#x6563; poly(U) &#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x8BF1;&#x5BFC; Mg(2+) &#x52A0;&#x56FA;&#x73B0;&#x6709;&#x4E8C;&#x7EA7;&#x548C;&#x4E09;&#x7EA7;&#x7ED3;&#x6784;&#x4E2D;&#x7684;&#x8054;&#x7CFB;&#x4EBA;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x7ED3;&#x6784;&#x5316;&#x4E0E; 16S rRNA&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x6548;&#x679C;&#x662F;&#x975E;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x7684;&#x56E0;&#x4E3A;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x6291;&#x5236;&#x5728;&#x573A;&#x7684;&#x5355;&#x4EF7;&#x9633;&#x79BB;&#x5B50;&#x542B;&#x91CF;&#x8F83;&#x9AD8;&#x7684;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#x3002;

Mg2 +-&#x538B;&#x5B9E;&#x7531;&#x6813;&#x7CFB;&#x7684;&#x7C92;&#x5B50;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x76D1;&#x6D4B;&#x5355;&#x4E2A; RNA &#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;

Nous avons appliqu&#xE9; la microscopie de particules captif (TPM) comme un outil d&#x26;#39;analyse seule mol&#xE9;cule &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;tude de la dynamique conformationnelle de poly-uridine (U) messager (m) ARN ribosomal 16S et (r) des mol&#xE9;cules d&#x26;#39;ARN. Utilisation de l&#x26;#39;&#xE9;clairage stroboscopique de r&#xE9;flexion totale interne et crit&#xE8;res de s&#xE9;lection rigoureux pour distinguer &#xE0; partir d&#x26;#39;attache non sp&#xE9;cifique, nous avons suivi le mouvement brownien &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;chelle nanom&#xE9;trique de l&#x26;#39;ARN-captif microsph&#xE8;res fluorescentes dans les trois dimensions &#xE0; pH 7,5, 22 &#xB0; C, en 10 mm ou 100 mM de NaCl en l&#x26;#39;absence ou la pr&#xE9;sence de 10 mM de MgCl (2). L&#x26;#39;addition de Mg (2 +) &#xE0; faible r&#xE9;sistance ioniques r&#xE9;sultats tampons dans compactage significatif et de raidissement de poly (U) ARNm, mais non de l&#x26;#39;ARNr 16S. En outre, la motion de poly (U)-captif microsph&#xE8;res est plus h&#xE9;t&#xE9;rog&#xE8;ne que celle de l&#x26;#39;ARNr 16S-captifs microsph&#xE8;res. Analyse de mouvement dans le plan de talon indique que le poly (U) ARN, mais moins 16S ARNr, peut &#xEA;tre mod&#xE9;lis&#xE9;e la fois en pr&#xE9;sence et en l&#x26;#39;absence de Mg (2 +) par un mod&#xE8;le statistique gaussienne polym&#xE8;re. Nous attribuons ces diff&#xE9;rences &#xE0; l&#x26;#39;Mg (2 +) induite par le compactage de la relativement faiblement structur&#xE9;s et structurellement disperser poly (U) l&#x26;#39;ARNm, &#xE0; la diff&#xE9;rence de Mg (2 +) induite par le renforcement des contacts existants de la structure secondaire et tertiaire dans le tr&#xE8;s structur&#xE9; ARNr 16S. Ces deux effets ne sont pas sp&#xE9;cifiques, cependant, car ils sont att&#xE9;nu&#xE9;es dans la pr&#xE9;sence de concentrations plus &#xE9;lev&#xE9;es de cations monovalents.

Mg 2 + induite par compactage des mol&#xE9;cules d&#x26;#39;ARN simple suivie en microscopie particules captif

Wir haben gefesselte Partikel-Mikroskopie (TPM) als ein einzelnes Molek&uuml;l-Analysetool auf Studien von Konformations&auml;nderungen Dynamik poly-uridine(U) Kurier (m) RNA und 16S ribosomale (R) RNA-Molek&uuml;le angewendet. Mit stroboskopische Totalreflexion Beleuchtung und strengen Auswahlkriterien von unspezifische Anbindehaltung unterscheiden, haben wir die Nanometer-Skala Brownsche Bewegung der RNA-gefesselte fluoreszierenden Mikrosph&auml;ren in allen drei Dimensionen bei pH 7,5, 22 Grad C, 10 mM oder 100 mM NaCl in das Fehlen oder Vorhandensein von 10 mM MgCl(2) verfolgt. Der Zusatz von Mg(2+) an niedrige Ionenst&auml;rke Puffer f&uuml;hrt zu erheblichen Komprimierung und Versteifung der poly(U) mRNA, nicht aber der 16S rRNA. Dar&uuml;ber hinaus die Bewegung der Poly (U)-gefesselte Mikrosph&auml;ren ist heterogener als der 16S rRNA-gefesselte Mikrosph&auml;ren. Analyse der Bewegung in der Ebene Perlen schl&auml;gt vor, dass poly(U) RNA, aber weniger also 16S rRNA, kann modelliert werden sowohl in der Anwesenheit und Abwesenheit von Mg(2+) durch eine statistische Gau&szlig;schen Polymer-Modell. Wir f&uuml;hren diese Unterschiede auf die Mg(2+)-induzierte Verdichtung von der relativ schwach strukturierten und strukturell zerstreuen poly(U) mRNA, im Gegensatz zu Mg(2+)-induzierte St&auml;rkung der vorhandenen sekund&auml;re und terti&auml;re Struktur-Kontakten in die stark strukturierte 16S rRNA. Beide Effekte sind jedoch unspezifisch, da sie in Anwesenheit von h&ouml;heren Konzentrationen von monovalenten kationen ged&auml;mpft werden.

MG2 +-induzierte Verdichtung des einzelnen RNA-Molek&uuml;le, die von gefesselte Partikel Mikroskopie &uuml;berwacht.

Abbiamo applicato particella tethered microscopia (TPM) come uno strumento di analisi della singola molecola agli studi delle dinamiche conformazionali di molecole del RNA ribosomiale (r) del RNA e 16S poly-uridine(U) Messaggero (m). Utilizzando illuminazione stroboscopica riflessione interna totale e criteri di selezione rigorosi per distinguere da aspecifici tethering, noi abbiamo monitorato la scala nanometrica browniano delle microsfere fluorescenti RNA legato in tutte le tre dimensioni a pH 7.5, 22 gradi C, in 10 o 100 mM NaCl nell&#39;assenza o la presenza di 10 mM MgCl(2). L&#39;aggiunta di Mg(2+) a risultati tampone forza ionica bassa compattazione significativi e irrigidimento di poly(U) mRNA, ma non di rRNA 16S. Inoltre, il movimento dei poli (U)-microsfere tethered sono pi&ugrave; eterogenea rispetto a quello del 16S rRNA-tethered microsfere. Analisi del moto nel piano perlina suggeriscono che poly(U) RNA, ma meno cos&igrave; 16S rRNA, per possono essere modellata sia in presenza e in assenza di Mg(2+) di un modello statistico polimero gaussiana. Ci attribuiscono queste differenze per la compattazione Mg(2+)-indotta di relativamente debolmente strutturato e strutturalmente disperdere poly(U) mRNA, in contrasto con rinforzo Mg(2+)-indotta di contatti di struttura secondaria e terziaria esistenti in altamente strutturato 16S rRNA. Entrambi gli effetti sono aspecifici, tuttavia, come essi sono smorzate in presenza di concentrazioni pi&ugrave; elevate di cationi monovalenti.

MG2 +-indotta compattazione di singole molecole di RNA monitorati da microscopia particella tethered.

&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30DD;&#x30EA;-&#x30A6;&#x30EA;&#x30B8;&#x30F3;&#xFF08;U&#xFF09;&#x30E1;&#x30C3;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B8;&#x30E3;&#x30FC;&#xFF08;m&#xFF09;&#x306E;RNA&#x3068;16S&#x30EA;&#x30DC;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#xFF08;r&#xFF09;&#x306F;RNA&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x7ACB;&#x4F53;&#x69CB;&#x9020;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3001;&#x5358;&#x4E00;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x89E3;&#x6790;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30C6;&#x30B6;&#x30FC;&#x7C92;&#x5B50;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#xFF08;TPM&#xFF09;&#x3092;&#x9069;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x975E;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x306A;&#x30C6;&#x30B6;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3068;&#x533A;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x30B9;&#x30C8;&#x30ED;&#x30DC;&#x5185;&#x90E8;&#x5168;&#x53CD;&#x5C04;&#x7167;&#x660E;&#x3068;&#x53B3;&#x683C;&#x306A;&#x9078;&#x629E;&#x57FA;&#x6E96;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;10 mM&#x307E;&#x305F;&#x306F;100 mM&#x306E;NaCl&#x4E2D;&#x3067;&#x3001;pH7.5&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x4E09;&#x6B21;&#x5143;&#x3001;22&#x2103;&#x3067;RNA-&#x30C6;&#x30B6;&#x30FC;&#x86CD;&#x5149;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30A2;&#x306E;&#x30CA;&#x30CE;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x30D6;&#x30E9;&#x30A6;&#x30F3;&#x904B;&#x52D5;&#x3092;&#x8FFD;&#x8DE1;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;10mM&#x306E;MgCl 2&#x306E;&#x975E;&#x5B58;&#x5728;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x884C;&#x308F;&#x308C;&#x308B;&#x3002;&#x30DD;&#x30EA;&#xFF08;U&#xFF09;mRNA&#x306E;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;16S rRNA&#x306E;&#x5927;&#x5E45;&#x306A;&#x5727;&#x7E2E;&#x3068;&#x88DC;&#x525B;&#x306E;&#x4F4E;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x5F37;&#x5EA6;&#x7DE9;&#x885D;&#x6DB2;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306B;Mg&#x306E;&#x6DFB;&#x52A0;&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x30DD;&#x30EA;&#xFF08;U&#xFF09; - &#x30C6;&#x30B6;&#x30FC;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7403;&#x306E;&#x52D5;&#x304D;&#x306F;&#x3001;16S rRNA&#x3092;&#x30C6;&#x30B6;&#x30FC;&#x30DF;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30A2;&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x4E0D;&#x5747;&#x8CEA;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x9762;&#x5185;&#x306E;&#x30D3;&#x30FC;&#x30BA;&#x306E;&#x52D5;&#x304D;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x306F;&#x3001;&#x30DD;&#x30EA;&#xFF08;U&#xFF09;RNA&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x306E;16S rRNA&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x7D71;&#x8A08;&#x7684;&#x30AC;&#x30A6;&#x30B9;&#x30DD;&#x30EA;&#x30DE;&#x30FC;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306B;&#x3088;&#x308B;Mg&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x975E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3067;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x6BD4;&#x8F03;&#x7684;&#x5F31;&#x304F;&#x3001;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;Mg&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x5727;&#x7E2E;&#x306B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x3092;&#x5C5E;&#x6027;&#x3068;&#x69CB;&#x9020;&#x7684;&#x306B;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x306B;&#x69CB;&#x9020;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5185;&#x306E;&#x65E2;&#x5B58;&#x306E;&#x4E8C;&#x6B21;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x4E09;&#x6B21;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x63A5;&#x70B9;&#x306E;Mg&#x3068;&#x306F;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x88DC;&#x5F37;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30DD;&#x30EA;&#xFF08;U&#xFF09;&#x306E;mRNA&#x3092;&#x5206;&#x6563;&#x3055;&#x305B;&#x308B;16S rRNA&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x3002;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x4E00;&#x4FA1;&#x967D;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x306E;&#x9AD8;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x6E7F;&#x3089;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3068;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x975E;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;

&#x30C6;&#x30B6;&#x30FC;&#x7C92;&#x5B50;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3067;&#x76E3;&#x8996;&#x3059;&#x308B;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;RNA&#x5206;&#x5B50;&#x306E;Mg2 +&#x306E;&#x8A98;&#x767A;&#x6027;&#x5727;&#x7E2E;

&#xC6B0;&#xB9AC; poly-uridine(U) (m) &#xBA54;&#xC2E0;&#xC800; RNA&#xC640; 16S ribosomal (r) RNA &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xC5ED;&#xD559;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB97C; &#xB2E8;&#xC77C; &#xBD84;&#xC790; &#xBD84;&#xC11D; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xB85C; &#xC18D;&#xBC15; &#xB418; &#xC785;&#xC790; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; (TPM)&#xB97C; &#xC801;&#xC6A9; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Stroboscopic &#xCD1D; &#xB0B4;&#xBD80; &#xBC18;&#xC0AC; &#xC870;&#xBA85; &#xBC0F; &#xC5C4;&#xACA9;&#xD55C; &#xC120;&#xD0DD; &#xAE30;&#xC900;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB9E4; &#xD2B9;&#xC774; &#xD604;&#xC0C1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD6C;&#xBCC4;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB098;&#xB178;&#xBBF8;&#xD130; &#xC2A4;&#xCF00;&#xC77C;&#xC758; 10mm &#xB610;&#xB294; 10mm Mgcl(2)&#xC758; &#xC874;&#xC7AC; &#xB610;&#xB294; &#xBD80;&#xC7AC;&#xC5D0; 100 m m NaCl pH 7.5, 22&#xB3C4; C&#xC5D0;&#xC11C; &#xBAA8;&#xB4E0; 3 &#xCC28;&#xC6D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD615;&#xAD11; microspheres RNA &#xB2FF;&#xB294; &#xBE0C;&#xB77C;&#xC6B4; &#xBAA8;&#xC158; &#xCD94;&#xC801;. Mg(2+)&#xC758; &#xB0AE;&#xC740; &#xC774;&#xC628; &#xC138;&#xAE30; &#xBC84;&#xD37C; &#xACB0;&#xACFC;: &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC555;&#xCD95; &#xBC0F; poly(u)&#xC758; &#xC2A4;&#xD2F0;&#xD504;&#xB2DD; &#xCD94;&#xAC00; mRNA, &#xC544;&#xB2C8;&#xC9C0;&#xB9CC; 16S Rrna&#xC758;. &#xB610;&#xD55C;, &#xD3F4; &#xB9AC; (U)&#xC758; &#xBAA8;&#xC158;-&#xD14C;&#xB354; microspheres 16S rRNA &#xB2FF;&#xB294; microspheres&#xC758; &#xADF8;&#xAC83; &#xBCF4;&#xB2E4;&#xB294; &#xB354; &#xB9CE;&#xC740; &#xB2E4;&#xB978; &#xC720;&#xD615;&#xC758; &#xC774;&#xB2E4;. &#xBE44;&#xD589;&#xAE30;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD6C;&#xC2AC; &#xBAA8;&#xC158; &#xBD84;&#xC11D; &#xADF8; poly(U) RNA, &#xC81C;&#xC548; &#xB418;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB108;&#xBB34; 16S rRNA &#xB35C; &#xC218; &#xBAA8;&#xB378;&#xB9C1; &#xC874;&#xC7AC;&#xC640; mg(2+)&#xC758; &#xBD80;&#xC7AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBAA8;&#xB450; &#xD1B5;&#xACC4; &#xAC00;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xD3F4;&#xB9AC;&#xBA38; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574;. &#xC6B0;&#xB9AC; mg(2+)&#xC744; &#xC774;&#xC6A9;&#xD55C; &#xC555;&#xCD95; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC57D;&#xD558;&#xAC8C; &#xAD6C;&#xC870;&#xD654;&#xC5D0; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xCC28;&#xC774; &#xD2B9;&#xC131; &#xBC0F; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; poly(U) &#xBD84;&#xC0B0; Mg(2+) &#xC720;&#xB3C4; &#xAC15;&#xD654;&#xC758; &#xACE0;&#xB3C4;&#xB85C; &#xAD6C;&#xC870;&#xD654; &#xB41C; &#xAE30;&#xC874;&#xC758; 2 &#xCC28; &#xBC0F; 3 &#xCC28; &#xAD6C;&#xC870; &#xC5F0;&#xB77D;&#xCC98;&#xB294; &#xB2EC;&#xB9AC; mRNA 16S rRNA. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xB450; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778;,, &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xB192;&#xC740; &#xB18D;&#xB3C4; &#xC5EC;&#xB7EC;&#xCC28;&#xB840; &#xC591;&#xC774;&#xC628;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC; &#xC57D;&#xD654; &#xB418; &#xC11C;.

Mg2 +-&#xC720;&#xBC1C; &#xD14C;&#xB354; &#xC785;&#xC790; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1; RNA &#xBD84;&#xC790;&#xB97C; &#xB2E8;&#xC77C;&#xC758; &#xC555;&#xCD95;.

Hemos aplicado la microscop&#xED;a part&#xED;culas atados (TPM) como una herramienta de an&#xE1;lisis de mol&#xE9;cula &#xFA;nica a los estudios de la din&#xE1;mica de conformaci&#xF3;n de poli-uridina (U) del ARN mensajero (m) y 16S ribosomal (r) mol&#xE9;culas de ARN. Usando la iluminaci&#xF3;n estrobosc&#xF3;pica de reflexi&#xF3;n total interna y rigurosos criterios de selecci&#xF3;n de distinguir de la inmovilizaci&#xF3;n no espec&#xED;fica, que han seguido el movimiento a escala nanom&#xE9;trica browniano de ARN-atado microesferas fluorescentes en las tres dimensiones a un pH de 7,5, 22 &#xBA; C, en 10 mm o 100 mM de NaCl en la ausencia o presencia de 10 mM de MgCl (2). La adici&#xF3;n de Mg (2 +) a baja i&#xF3;nicos resultados de la resistencia de amortiguamiento en compactaci&#xF3;n significativa y endurecimiento de poli (U) ARNm, pero no de rRNA 16S. Adem&#xE1;s, el movimiento de poli (U)-anclada microesferas es m&#xE1;s heterog&#xE9;neo que el de ARNr 16S-atados microesferas. El an&#xE1;lisis de movimiento en el plano tal&#xF3;n sugiere que el poli (U) ARN, pero menos del ARNr 16S, se puede modelar tanto en presencia como en ausencia de Mg (2 +) por un modelo estad&#xED;stico gaussiano pol&#xED;mero. Se atribuyen estas diferencias al Mg (2 +) inducida por la compactaci&#xF3;n de la estructura relativamente d&#xE9;bil y estructuralmente dispersar poli (U) ARNm, en contraste con Mg (2 +) inducida por el refuerzo de los contactos existentes de estructura secundaria y terciaria en el muy estructurado ARNr 16S. Ambos efectos son inespec&#xED;ficos, sin embargo, a medida que se humedecido en presencia de altas concentraciones de cationes monovalentes.

Mg 2 + inducida por la compactaci&#xF3;n de las mol&#xE9;culas individuales de ARN supervisados &#x200B;&#x200B;por Microscop&#xED;a de part&#xED;culas atados

&#x8FD1;&#x5E74;&#x6765;&#xFF0C;&#x4E00;&#x573A;&#x9769;&#x547D;&#x4E2D;&#x53D1;&#x751F;&#x4E86;&#x57FA;&#x672C;&#x7684;&#x79D1;&#x5B66;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x5229;&#x7528;&#x65B0;&#x578B;&#x5355;&#x5206;&#x5B50;&#x63A2;&#x6D4B;&#x548C;&#x64CD;&#x7EB5;&#x5DE5;&#x5177;&#x6765;&#x8DDF;&#x8E2A;&#x548C;&#x5206;&#x6790;&#x751F;&#x7269;&#x5927;&#x5206;&#x5B50;&#x524D;&#x6240;&#x672A;&#x6709;&#x7684;&#x7EC6;&#x8282;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x6208;&#x767B;&#x7814;&#x7A76;&#x4F1A;&#x8BAE;&#x98CE;&#x683C;&#x4F1A;&#x8BAE;&#xFF0C;&#x4E3B;&#x529E;&#x7684;&#x5BC6;&#x6B47;&#x6839;&#x5927;&#x5B66;&#x3001; &#x7A81;&#x51FA;&#x663E;&#x793A;&#x5F53;&#x524D;&#x72B6;&#x6001;&#x548C;&#x672A;&#x6765;&#x7684;&#x524D;&#x666F;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E0A;&#x5347;&#x7684;&#x5B57;&#x6BB5;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8005;&#x5F00;&#x59CB;&#x628A;&#x5B83;&#x4E0E;&#x4E3B;&#x6D41;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x548C;&#x7EB3;&#x7C73;&#x6280;&#x672F;&#x3002;

&#x5728;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x4E0B;&#xFF1A; &#x7F8E;&#x56FD;&#x5BC6;&#x6B47;&#x6839;&#x5927;&#x5B66; 2006&#x5E74;&#x5355;&#x5206;&#x5B50;&#x4E13;&#x9898;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x4F1A;&#x3002;

In recent years, a revolution has occurred in the basic sciences, which exploits novel single molecule detection and manipulation tools to track and analyze biopolymers in unprecedented detail. A recent Gordon Research Conference style meeting, hosted by the University of Michigan, highlighted current status and future perspectives of this rising field as researchers begin to integrate it with mainstream biology and nanotechnology.

Under the microscope: single molecule symposium at the University of Michigan, 2006.

Ces derni&#xE8;res ann&#xE9;es, une r&#xE9;volution s&#x26;#39;est produite dans le domaine des sciences de base, qui exploite roman d&#xE9;tection de mol&#xE9;cule unique et d&#x26;#39;outils de manipulation de suivre et d&#x26;#39;analyser les biopolym&#xE8;res de d&#xE9;tail sans pr&#xE9;c&#xE9;dent. Une recherche r&#xE9;cente conf&#xE9;rence Gordon style, h&#xE9;berg&#xE9; par l&#x26;#39;Universit&#xE9; du Michigan, a soulign&#xE9; la situation actuelle et perspectives d&#x26;#39;avenir de ce domaine la hausse comme les chercheurs commencent &#xE0; l&#x26;#39;int&#xE9;grer avec la biologie et la nanotechnologie int&#xE9;grer.

Sous le microscope: Symposium mol&#xE9;cule unique &#xE0; l&#x26;#39;Universit&#xE9; du Michigan, 2006

In den letzten Jahren aufgetreten nutzt die neuartige Einzelmolek&uuml;l Erkennung und Manipulation Tools zum Nachverfolgen und Analysieren von Biopolymeren in noch nie da gewesenen Detail eine Revolution in der Grundlagenforschung. Ein k&uuml;rzlich Gordon Research Conference Stil treffen, veranstaltet von der University of Michigan, hervorgehobene aktueller Status und Zukunftsperspektiven dieses aufstrebenden Feldes als Forscher beginnen, um sie mit etablierten Biologie und Nanotechnologie zu integrieren.

Unter dem Mikroskop: Einzelmolek&uuml;l-Symposium an der University of Michigan, 2006.

Negli ultimi anni, una rivoluzione si &egrave; verificato nelle scienze di base, che sfrutta strumenti di rilevazione e manipolazione romanzo singola molecola per monitorare e analizzare i biopolimeri in dettaglio senza precedenti. Un recente stile Gordon Research Conference incontro, ospitato dall&#39;Universit&agrave; del Michigan, evidenziato lo stato attuale e prospettive future di questo campo nascente come i ricercatori cominciano a integrarlo con nanotecnologia e biologia mainstream.

Sotto il microscopio: Simposio di singola molecola presso l&#39;Universit&agrave; del Michigan, 2006.

&#x8FD1;&#x5E74;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x9769;&#x547D;&#x304C;&#x524D;&#x4F8B;&#x306E;&#x306A;&#x3044;&#x8A73;&#x7D30;&#x306B;&#x751F;&#x4F53;&#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x3092;&#x8FFD;&#x8DE1;&#x3057;&#x3001;&#x5206;&#x6790;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x5358;&#x4E00;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x691C;&#x51FA;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x64CD;&#x4F5C;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x5229;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x57FA;&#x672C;&#x7684;&#x306A;&#x79D1;&#x5B66;&#x3001;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7814;&#x7A76;&#x8005;&#x306F;&#x4E3B;&#x6D41;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x3084;&#x30CA;&#x30CE;&#x30C6;&#x30AF;&#x30CE;&#x30ED;&#x30B8;&#x30FC;&#x3068;&#x306E;&#x7D71;&#x5408;&#x3092;&#x958B;&#x59CB;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x30DF;&#x30B7;&#x30AC;&#x30F3;&#x5927;&#x5B66;&#x304C;&#x4E3B;&#x50AC;&#x3057;&#x3001;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x30B4;&#x30FC;&#x30C9;&#x30F3;&#x7814;&#x7A76;&#x4F1A;&#x8B70;&#x30B9;&#x30BF;&#x30A4;&#x30EB;&#x306E;&#x4F1A;&#x8B70;&#x306F;&#x3001;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x72B6;&#x614B;&#x3068;&#x3053;&#x306E;&#x7ACB;&#x3061;&#x4E0A;&#x304C;&#x308A;&#x5206;&#x91CE;&#x306E;&#x5C06;&#x6765;&#x5C55;&#x671B;&#x3092;&#x5F37;&#x8ABF;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x5358;&#x4E00;&#x5206;&#x5B50;&#x30B7;&#x30F3;&#x30DD;&#x30B8;&#x30A6;&#x30E0;&#x3001;2006&#x5E74;&#x30DF;&#x30B7;&#x30AC;&#x30F3;&#x5927;&#x5B66;&#xFF1A;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x4E0B;

&#xCD5C;&#xADFC; &#xBA87; &#xB144; &#xB3D9;&#xC548;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD601;&#xBA85;&#xC744; &#xCD94;&#xC801; &#xD558; &#xACE0; &#xC804;&#xB840; &#xC5C6;&#xB294; &#xC815;&#xBC00;&#xB3C4;&#xC5D0; biopolymers &#xBD84;&#xC11D; &#xC18C;&#xC124; &#xB2E8;&#xC77C; &#xBD84;&#xC790; &#xAC80;&#xCD9C; &#xBC0F; &#xC870;&#xC791; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC774;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xCD08; &#xACFC;&#xD559;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD5C;&#xADFC; &#xACE0; &#xB4E0; &#xB9AC;&#xC11C;&#xCE58; &#xCEE8;&#xD37C;&#xB7F0;&#xC2A4; &#xC2A4;&#xD0C0;&#xC77C; &#xD68C;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC6D0; &#xC8FC;&#xB958; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559;&#xACFC; &#xB098;&#xB178;&#xAE30;&#xC220;&#xC73C;&#xB85C; &#xADF8;&#xAC83;&#xC744; &#xD1B5;&#xD569; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC744; &#xC2DC;&#xC791;&#xC73C;&#xB85C; &#xBBF8;&#xC2DC;&#xAC04; &#xB300;&#xD559;, &#xAC15;&#xC870; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xD604;&#xC7AC; &#xC0C1;&#xD0DC; &#xBC0F;&#xC774; &#xC0C1;&#xC2B9; &#xD544;&#xB4DC;&#xC758; &#xAD00;&#xC810;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD638;&#xC2A4;&#xD305;.

&#xD604;&#xBBF8;&#xACBD;: &#xB2E8;&#xC77C; &#xBD84;&#xC790; &#xC2EC;&#xD3EC;&#xC9C0;&#xC5C4; 2006 &#xBBF8;&#xC2DC;&#xAC04; &#xB300;&#xD559;&#xC5D0;&#xC11C;.

En los &#xFA;ltimos a&#xF1;os, ha producido una revoluci&#xF3;n en las ciencias b&#xE1;sicas, que explota la detecci&#xF3;n de la novela de una sola mol&#xE9;cula y manipulaci&#xF3;n de herramientas para rastrear y analizar los biopol&#xED;meros en un detalle sin precedentes. Una reciente investigaci&#xF3;n de Gordon &#xAA; sesi&#xF3;n estilo, organizado por la Universidad de Michigan, puso de relieve la situaci&#xF3;n actual y perspectivas de futuro de este campo aumentando a medida que los investigadores comienzan a integrarse con la biolog&#xED;a general y la nanotecnolog&#xED;a.

Bajo el microscopio: Simposio sola mol&#xE9;cula de la Universidad de Michigan, 2006

&#x86CB;&#x767D;&#x4ECB;&#x5BFC; DNA &#x5FAA;&#x73AF;&#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5171;&#x540C;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x8C03;&#x63A7;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x4E00;&#x79CD;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5C06;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x76F8;&#x540C;&#x7684; DNA &#x5206;&#x5B50;&#x4E0A;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x8FD0;&#x7B97;&#x7B26;&#x65F6;&#xFF0C;&#x5C31;&#x4F1A;&#x51FA;&#x73B0;&#x5FAA;&#x73AF;&#x3002;&#x90E8;&#x5206;&#xFF0C;&#x662F;&#x7531; basepair DNA &#x5E8F;&#x5217;&#x7684;&#x8DE8;&#x7F51;&#x77ED;&#x8BAF;&#xFF0C;&#x5F71;&#x54CD;&#x5176;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x5C5E;&#x6027;&#x63A7;&#x5236;&#x5FAA;&#x73AF;&#x7684;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3002;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7ED3;&#x6784;&#x5C5E;&#x6027;&#x662F;&#x56FA;&#x6709;&#x7684;&#x6216;&#x65E0;&#x5E94;&#x529B;&#x66F2;&#x7387;&#x3002;&#x5728;&#x672C;&#x6587;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63A2;&#x8BA8;&#x5E8F;&#x5217;&#x4F9D;&#x8D56;&#x5185;&#x5728;&#x66F2;&#x7387;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x901A;&#x8FC7;&#x884C;&#x4F7F;&#x7684;&#x8DE8;&#x7F51;&#x77ED;&#x8BAF;&#x7684; DNA &#x8BA1;&#x7B97;&#x6746;&#x6A21;&#x578B;&#xFF0C;&#x9002;&#x7528;&#x4E8E; LacR-DNA &#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x5FAA;&#x73AF;&#x3002;&#x8DE8;&#x7F51;&#x77ED;&#x8BAF;&#x7684; dna &#x4E0E;&#x5DF2;&#x77E5;&#x5E8F;&#x5217;&#x5F00;&#x59CB;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x9996;&#x5148;&#x8BA1;&#x7B97;&#x5185;&#x5728;&#x7684;&#x87BA;&#x65CB;&#x8F74;&#x7684;&#x66F2;&#x7387;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x6746;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x8F93;&#x5165;&#x3002;&#xFF08;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7684;&#x8FD0;&#x8425;&#x5546;&#xFF09; &#x4E0E; LacR &#x7684;&#x6676;&#x4F53;&#x7ED3;&#x6784;&#x7136;&#x540E;&#x5B9A;&#x4E49;&#x52A8;&#x6001;&#x6746;&#x6A21;&#x578B;&#x6240;&#x9884;&#x6D4B;&#x7684;&#x80FD;&#x91CF;&#x5B66;&#x548C;&#x5E72;&#x9884;&#x7684; DNA &#x73AF;&#x62D3;&#x6251;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x7684;&#x8FB9;&#x754C;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6A21;&#x5F0F;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x91CD;&#x5927;&#x8D21;&#x732E;&#x662F;&#x5176;&#x9884;&#x6D4B;&#x8303;&#x56F4;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x5F2F;&#x66F2; &#xFF08;&#x8BBE;&#x8BA1;&#xFF09; &#x5E8F;&#x5217;&#x5DF2;&#x53D1;&#x5E03;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x6570;&#x636E;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x8BE5;&#x6A21;&#x578B;&#x6210;&#x529F;&#x5730;&#x9884;&#x6D4B;&#x4ECE;&#x8367;&#x5149;&#x5171;&#x632F;&#x80FD;&#x91CF;&#x8F6C;&#x79FB;&#x6D4B;&#x91CF;&#xFF0C;&#x5DF2;&#x77E5;&#x73AF;&#x5316;&#x68C0;&#x6D4B;&#x4E0E; LacR DNA &#x590D;&#x6742;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x5DF2;&#x77E5;&#x7684;&#x94FE;&#x63A5;&#x6570;&#x5206;&#x5E03;&#x7684;&#x73AF;&#x8DEF;&#x62D3;&#x6251;&#x4ECE;&#x7ADE;&#x4E89;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x53CA;&#x4ECE;&#x51DD;&#x80F6;&#x6D41;&#x52A8;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5DF2;&#x77E5;&#x7684;&#x76F8;&#x5BF9;&#x5FAA;&#x73AF;&#x5927;&#x5C0F;&#x5DF2;&#x77E5;&#x7684;&#x76F8;&#x5BF9;&#x5FAA;&#x73AF;&#x7A33;&#x5B9A;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x8BA1;&#x7B97;&#x7ED3;&#x679C;&#x63ED;&#x793A;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x5F2F;&#x66F2;&#x7684;&#x5E8F;&#x5217;&#x5F80;&#x5F80;&#x964D;&#x4F4E;&#x7CBE;&#x529B;&#x5145;&#x6C9B;&#x7684;&#x5FAA;&#x73AF;&#x5F62;&#x6210;&#x6210;&#x672C;&#x3001; &#x6269;&#x5927;&#x7A33;&#x5B9A;&#x548C;&#x4ECB;&#x7A33;&#x7684;&#x73AF;&#x72B6;&#x5404;&#x56FD;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x80FD;&#x91CF;&#x5206;&#x5E03;&#x548C;&#x5927;&#x5927;&#x6539;&#x53D8;&#x73AF;&#x5F62;&#x62D3;&#x6251;&#x3002;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x5E8F;&#x5217;&#x7684;&#x5185;&#x5728;&#x66F2;&#x7387;&#x5217;&#x5165;&#x8FD8;&#x5BFC;&#x81F4;&#x975E;&#x5747;&#x5300;&#x637B;&#x5EA6;&#x548C;&#x9700;&#x8981;&#x5BA1;&#x8BAE;&#x7684;&#x516B;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x62D3;&#x6251;&#x4ECE; LacR-DNA &#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x5DF2;&#x77E5;&#x7684;&#x6676;&#x4F53;&#x7ED3;&#x6784;&#x3002;

DNA &#x7684;&#x5185;&#x5728;&#x66F2;&#x7387;&#x5F71;&#x54CD; LacR &#x4ECB;&#x5BFC;&#x5FAA;&#x73AF;&#x3002;

Protein-mediated DNA looping is a common mechanism for regulating gene expression. Loops occur when a protein binds to two operators on the same DNA molecule. The probability of looping is controlled, in part, by the basepair sequence of inter-operator DNA, which influences its structural properties. One structural property is the intrinsic or stress-free curvature. In this article, we explore the influence of sequence-dependent intrinsic curvature by exercising a computational rod model for the inter-operator DNA as applied to looping of the LacR-DNA complex. Starting with known sequences for the inter-operator DNA, we first compute the intrinsic curvature of the helical axis as input to the rod model. The crystal structure of the LacR (with bound operators) then defines the requisite boundary conditions needed for the dynamic rod model that predicts the energetics and topology of the intervening DNA loop. A major contribution of this model is its ability to predict a broad range of published experimental data for highly bent (designed) sequences. The model successfully predicts the loop topologies known from fluorescence resonance energy transfer measurements, the linking number distribution known from cyclization assays with the LacR-DNA complex, the relative loop stability known from competition assays, and the relative loop size known from gel mobility assays. In addition, the computations reveal that highly curved sequences tend to lower the energetic cost of loop formation, widen the energy distribution among stable and meta-stable looped states, and substantially alter loop topology. The inclusion of sequence-dependent intrinsic curvature also leads to nonuniform twist and necessitates consideration of eight distinct binding topologies from the known crystal structure of the LacR-DNA complex.

Intrinsic curvature of DNA influences LacR-mediated looping.

Boucle d&#x26;#39;ADN en prot&#xE9;ines m&#xE9;diation est un m&#xE9;canisme commun de r&#xE9;glementation de l&#x26;#39;expression des g&#xE8;nes. Les boucles se produisent quand une prot&#xE9;ine se lie &#xE0; deux op&#xE9;rateurs sur le m&#xEA;me mol&#xE9;cule d&#x26;#39;ADN. La probabilit&#xE9; de bouclage est command&#xE9;, en partie, par la s&#xE9;quence de paires de bases inter-op&#xE9;rateurs d&#x26;#39;ADN, qui influe sur les propri&#xE9;t&#xE9;s structurelles. Une propri&#xE9;t&#xE9; structurelle est la courbure intrins&#xE8;que ou sans stress. Dans cet article, nous explorons l&#x26;#39;influence de la s&#xE9;quence-d&#xE9;pendante courbure intrins&#xE8;que par l&#x26;#39;exercice d&#x26;#39;un mod&#xE8;le de calcul pour la tige de l&#x26;#39;ADN inter-op&#xE9;rateur tel qu&#x26;#39;il est appliqu&#xE9; &#xE0; la boucle du complexe ADN-LaCr. De d&#xE9;part avec des s&#xE9;quences connues de l&#x26;#39;ADN pour inter-op&#xE9;rateurs, on calcule d&#x26;#39;abord la courbure intrins&#xE8;que de l&#x26;#39;axe de l&#x26;#39;h&#xE9;lice en entr&#xE9;e au mod&#xE8;le tige. La structure cristalline de la LaCr (avec les op&#xE9;rateurs consolid&#xE9;s) d&#xE9;finit ensuite les conditions aux limites n&#xE9;cessaires requises pour le mod&#xE8;le tige dynamique qui pr&#xE9;dit les &#xE9;nergies et la topologie de la boucle d&#x26;#39;ADN intervenant. Une contribution majeure de ce mod&#xE8;le est sa capacit&#xE9; &#xE0; pr&#xE9;dire un large &#xE9;ventail de donn&#xE9;es exp&#xE9;rimentales publi&#xE9;es pour tr&#xE8;s cintr&#xE9;e (con&#xE7;u) s&#xE9;quences. Le mod&#xE8;le pr&#xE9;dit avec succ&#xE8;s la boucle topologies connues &#xE0; partir des mesures de r&#xE9;sonance de fluorescence de transfert d&#x26;#39;&#xE9;nergie, la distribution num&#xE9;ro de liaison connue &#xE0; partir des essais de cyclisation avec le complexe ADN-LaCr, la stabilit&#xE9; de la boucle parent connu &#xE0; partir des essais de la concurrence, et la taille de la boucle parent connu &#xE0; partir de tests de mobilit&#xE9; de gel. En outre, les calculs r&#xE9;v&#xE8;lent que les s&#xE9;quences fortement incurv&#xE9;es ont tendance &#xE0; abaisser le co&#xFB;t &#xE9;nerg&#xE9;tique de la formation de la boucle, d&#x26;#39;&#xE9;largir la distribution de l&#x26;#39;&#xE9;nergie entre les stables et les m&#xE9;ta-&#xE9;tats stables en boucle, et modifier sensiblement topologie en boucle. L&#x26;#39;inclusion de s&#xE9;quence d&#xE9;pendant de courbure intrins&#xE8;que non uniforme conduit &#xE9;galement &#xE0; la torsion et n&#xE9;cessite examen de huit liaison distincte topologies de la structure cristalline du complexe connue LaCr-ADN.

Courbure intrins&#xE8;que de l&#x26;#39;ADN Influences LaCr m&#xE9;di&#xE9;e par Looping

Protein-vermittelte DNA Schleifen ist ein gemeinsamer Mechanismus f&uuml;r die Regulierung der Genexpression. Schleifen auftreten, wenn ein Protein an zwei Operatoren die gleichen DNA-Molek&uuml;l bindet. Die Wahrscheinlichkeit von Schleifen ist teilweise durch die Basepair-Sequenz der DNA und Interoperator kontrolliert, die strukturellen Eigenschaften beeinflusst. Eine strukturelle Eigenschaft ist die intrinsische oder stressfrei Kr&uuml;mmung. In diesem Artikel untersuchen wir den Einfluss der Sequenz-abh&auml;ngige intrinsischen Kr&uuml;mmung durch die Aus&uuml;bung einer computational Stab-Modell f&uuml;r die Interoperator DNA getroffener Schleifen von der LacR-DNA-Komplex. Beginnend mit bekannten Reihenfolgen f&uuml;r die Interoperator DNA, berechnen wir zun&auml;chst die intrinsische Kr&uuml;mmung der spiralf&ouml;rmigen Achse als Eingabe f&uuml;r das Stab-Modell. Die Kristallstruktur von LacR (mit gebundenen Operatoren) definiert dann die erforderlichen Randbedingungen f&uuml;r das dynamische Stab-Modell, die vorhersagt, die Energetik und die Topologie der dazwischenliegende DNA-Schleife ben&ouml;tigt. Ein wichtiger Beitrag dieses Modells ist seine F&auml;higkeit, eine breite Palette von ver&ouml;ffentlichten experimentellen Daten f&uuml;r hoch gebogen (gestaltete) Sequenzen vorherzusagen. Das Modell erfolgreich prognostiziert die Schleife-Topologien, bekannt aus Fluoreszenz Resonanz Energie Transfer-Messungen, die Verkn&uuml;pfung Nummer Verteilung bekannt aus Cyclisierung mit der LacR-DNA-Komplex, die relative Schleife-Stabilit&auml;t von Wettbewerb-Assays und die relative Schleife Gr&ouml;&szlig;e bekannt aus Gel Mobilit&auml;t bekannt. Dar&uuml;ber hinaus zeigen die Berechnungen, dass stark gekr&uuml;mmte Sequenzen tendenziell energetische Kostensenkung der Schleife Bildung und verbreitern der Energieverteilung zwischen stabilen und metastabil geschlungene Staaten wesentlich &auml;ndern Schleife Topologie. Die Einbeziehung der Sequenz-abh&auml;ngige intrinsischen Kr&uuml;mmung auch f&uuml;hrt zu ungleichm&auml;&szlig;ige Torsion und erfordert Betrachtung der acht unterschiedliche Bindung Topologien aus der bekannten Kristallstruktur des Komplexes LacR-DNA.

Intrinsischen Kr&uuml;mmung der DNA beeinflusst LacR-vermittelte Schleifen.

Mediata da proteine DNA loop &egrave; un meccanismo comune per regolare l&#39;espressione genica. Loop si verificano quando una proteina si lega a due operatori sulla stessa molecola di DNA. La probabilit&agrave; di looping &egrave; controllata, in parte, dalla sequenza di DNA inter-operator, che influenza le propriet&agrave; strutturali basepair. Una propriet&agrave; strutturale &egrave; la curvatura intrinseca o senza stress. In questo articolo, esploreremo l&#39;influenza della curvatura intrinseca dipendente dalla sequenza esercitando un modello computazionale rod per la inter-operator del DNA come applicato a ciclo continuo del complesso LacR-DNA. A partire da sequenze di note per il DNA inter-operator, calcoliamo prima la curvatura intrinseca dell&#39;asse elicoidale come input per il modello di asta. La struttura di cristallo del Derby (con gli operatori associati) definisce quindi le necessarie condizioni al contorno necessarie per il modello dinamico rod che predice l&#39;energetica e la topologia del ciclo frapposizione del DNA. Un importante contributo di questo modello &egrave; la sua capacit&agrave; di prevedere un&#39;ampia gamma di dati sperimentali pubblicati per sequenze altamente piegate (progettati). Il modello predice con successo le topologie di ciclo conosciute dalle misure trasferimento di energia di risonanza di fluorescenza, la distribuzione che collega numero conosciuta da dosaggi di ciclizzazione con il complesso DNA-Derby, la stabilit&agrave; del ciclo relativo conosciuta da dosaggi di concorrenza e la dimensione del relativo ciclo conosciuto da gel mobilit&agrave; dosaggi. Inoltre, i calcoli rivelano che sequenze altamente curve tendono ad abbassare il costo energetico della formazione di loop, ampliare la distribuzione di energia tra gli stati stabili e metastabile cappio e alterare sostanzialmente loop topologia. L&#39;inclusione di curvatura intrinseca sequenza-dipendente anche conduce a torsione non uniforme e necessita di considerazione di otto topologie associazione distinta dalla struttura del cristallo conosciuto del complesso LacR-DNA.

Curvatura intrinseca del DNA influenza mediata LacR looping.

&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; - &#x5A92;&#x4ECB;DNA&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x304C;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306F;&#x540C;&#x3058;DNA&#x5206;&#x5B50;&#x4E0A;&#x306B;2&#x3064;&#x306E;&#x6F14;&#x7B97;&#x5B50;&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x304D;&#x306B;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x304C;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x78BA;&#x7387;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x7279;&#x6027;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x30AA;&#x30DA;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x9593;&#x306E;DNA&#x306E;&#x5869;&#x57FA;&#x5BFE;&#x306E;&#x914D;&#x5217;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306B;&#x5236;&#x5FA1;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3064;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D1;&#x30C6;&#x30A3;&#x306F;&#x3001;&#x7D44;&#x307F;&#x8FBC;&#x307F;&#x95A2;&#x6570;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x30D5;&#x30EA;&#x30FC;&#x306A;&#x66F2;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7A3F;&#x3067;&#x306F;&#x3001;LACR-DNA&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306B;&#x9069;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30AA;&#x30DA;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x9593;&#x306E;DNA&#x306E;&#x8A08;&#x7B97;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C9;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x884C;&#x4F7F;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3059;&#x308B;&#x56FA;&#x6709;&#x306E;&#x66F2;&#x7387;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x63A2;&#x308B;&#x3002;&#x30AA;&#x30DA;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x9593;&#x306E;DNA&#x306E;&#x65E2;&#x77E5;&#x306E;&#x200B;&#x200B;&#x914D;&#x5217;&#x304B;&#x3089;&#x59CB;&#x307E;&#x308B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C9;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3078;&#x306E;&#x5165;&#x529B;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3089;&#x305B;&#x3093;&#x8EF8;&#x306E;&#x5185;&#x90E8;&#x66F2;&#x7387;&#x3092;&#x8A08;&#x7B97;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; LACR&#x306E;&#x7D50;&#x6676;&#x69CB;&#x9020;&#xFF08;&#x7D50;&#x5408;&#x6F14;&#x7B97;&#x5B50;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#xFF09;&#x304C;&#x4ECB;&#x5728;&#x3059;&#x308B;DNA&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x8AD6;&#x3068;&#x30C8;&#x30DD;&#x30ED;&#x30B8;&#x30FC;&#x3092;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3059;&#x308B;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30C3;&#x30AF;&#x306A;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C9;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x5883;&#x754C;&#x6761;&#x4EF6;&#x3092;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x8CA2;&#x732E;&#x306F;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x66F2;&#x304C;&#x3063;&#x305F;&#xFF08;&#x8A2D;&#x8A08;&#xFF09;&#x914D;&#x5217;&#x306E;&#x516C;&#x958B;&#x5B9F;&#x9A13;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306E;&#x5E83;&#x3044;&#x7BC4;&#x56F2;&#x3092;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x6B63;&#x5E38;&#x306B;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x304C;&#x86CD;&#x5149;&#x5171;&#x9CF4;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x79FB;&#x52D5;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3001;LACR-DNA&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3092;&#x74B0;&#x5316;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x304B;&#x3089;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x6570;&#x5206;&#x5E03;&#x3001;&#x7AF6;&#x5408;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x304B;&#x3089;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x76F8;&#x5BFE;&#x7684;&#x306A;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x3001;&#x30B2;&#x30EB;&#x79FB;&#x52D5;&#x5EA6;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x304B;&#x3089;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x76F8;&#x5BFE;&#x7684;&#x306A;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x5927;&#x304D;&#x3055;&#x304B;&#x3089;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30C8;&#x30DD;&#x30ED;&#x30B8;&#x3092;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x8A08;&#x7B97;&#x306F;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x6E7E;&#x66F2;&#x3057;&#x305F;&#x914D;&#x5217;&#x306F;&#x3001;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x30B3;&#x30B9;&#x30C8;&#x3092;&#x524A;&#x6E1B;&#x3057;&#x3001;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x6E96;&#x5B89;&#x5B9A;&#x72B6;&#x614B;&#x9593;&#x306E;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x5206;&#x5E03;&#x3092;&#x5E83;&#x3052;&#x3001;&#x5B9F;&#x8CEA;&#x7684;&#x306B;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x30C8;&#x30DD;&#x30ED;&#x30B8;&#x200B;&#x200B;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3059;&#x308B;&#x50BE;&#x5411;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3059;&#x308B;&#x56FA;&#x6709;&#x306E;&#x66F2;&#x7387;&#x3092;&#x542B;&#x3081;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3082;&#x306D;&#x3058;&#x308C;&#x3092;&#x4E0D;&#x5747;&#x4E00;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x3068;8&#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x7D50;&#x5408;&#x306E;&#x5BFE;&#x4FA1;&#x304C;LACR-DNA&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x65E2;&#x77E5;&#x306E;&#x7D50;&#x6676;&#x69CB;&#x9020;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x30C8;&#x30DD;&#x30ED;&#x30B8;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x306A;&#x308B;&#x3002;

DNA&#x306E;&#x672C;&#x8CEA;&#x7684;&#x306A;&#x66F2;&#x7387;&#x304C;LACR&#x5A92;&#x4ECB;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;

DNA &#xBC18;&#xBCF5; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC911;&#xC7AC; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604; &#xC870;&#xC808;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB8E8;&#xD504;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAC19;&#xC740; DNA &#xBD84;&#xC790;&#xC5D0; &#xB450; &#xC5F0;&#xC0B0;&#xC790;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD560; &#xB54C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBD80;&#xBD84;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC18;&#xBCF5;&#xC758; &#xD655;&#xB960;&#xC758; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xC18D;&#xC131;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE69;&#xB2C8;&#xB2E4; inter-operator DNA&#xC758; basepair &#xC21C;&#xC11C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC81C;&#xC5B4; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD55C; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xC18D;&#xC131; &#xB0B4;&#xC7A5; &#xB610;&#xB294; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xBB34;&#xB8CC; &#xACE1;&#xB960; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBB38;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; LacR DNA &#xBCF5;&#xD569;&#xCCB4;&#xC758; &#xBC18;&#xBCF5; &#xC801;&#xC6A9;&#xC73C;&#xB85C; &#xC804;&#xC0B0; &#xB9C9;&#xB300; &#xBAA8;&#xB378; inter-operator DNA&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC6B4;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xC885;&#xC18D; &#xB0B4;&#xC7A5; &#xACE1;&#xB960;&#xC758; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC0B4;&#xD3B4;&#xBD05;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBA3C;&#xC800; &#xB85C;&#xB4DC; &#xBAA8;&#xB378;&#xC758; &#xC785;&#xB825;&#xC73C;&#xB85C; &#xD5EC;&#xB9AC;&#xCEEC; &#xCD95;&#xC758; &#xBCF8;&#xC9C8;&#xC801;&#xC778; &#xACE1;&#xB960;&#xC744; &#xACC4;&#xC0B0; inter-operator DNA&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xC2DC;&#xC791;. (&#xBC14;&#xC6B4;&#xB4DC; &#xC0AC;&#xC5C5;&#xC790;)&#xC640; Lacr&#xC758; &#xACB0;&#xC815; &#xAD6C;&#xC870;&#xC5D0; &#xB108; &#xC9C0;&#xB860;&#xACFC; &#xC911;&#xAC04; DNA &#xB8E8;&#xD504; &#xD1A0;&#xD3F4;&#xB85C;&#xC9C0;&#xB97C; &#xC608;&#xCE21; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC801; &#xB85C;&#xB4DC; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xACBD;&#xACC4; &#xC870;&#xAC74;&#xC744; &#xC815;&#xC758; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBAA8;&#xB378;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xAE30;&#xC5EC; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xAD6C;&#xBD80;&#xB7EC;&#xC9C4;&#xB41C; (&#xC124;&#xACC4;) &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC8C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xC758; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xBC94;&#xC704;&#xB97C; &#xC608;&#xCE21; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD615;&#xAD11; &#xACF5;&#xBA85; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xC804;&#xC1A1; &#xCE21;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4; LacR DNA &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; cyclization &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4; &#xC5F0;&#xACB0; &#xBC88;&#xD638; &#xBA54;&#xC77C; &#xB8E8;&#xD504; &#xD1A0;&#xD3F4;&#xB85C;&#xC9C0;&#xB97C; &#xC131;&#xACF5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC608;&#xCE21; &#xD558;&#xB294; &#xBAA8;&#xB378; &#xACBD;&#xC7C1; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC824; &#xC774;&#xB3D9;&#xC131; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4; &#xC0C1;&#xB300; &#xB8E8;&#xD504; &#xD06C;&#xAE30;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4; &#xC0C1;&#xB300; &#xB8E8;&#xD504; &#xC548;&#xC815;&#xC131;. &#xB610;&#xD55C;, &#xACC4;&#xC0B0; &#xB192;&#xC740; &#xACE1;&#xC120;&#xB41C; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xB8E8;&#xD504; &#xD615;&#xC131;&#xC758; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xBE44;&#xC6A9; &#xC808;&#xAC10;, &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; meta-stable &#xBC18;&#xBCF5;&#xB41C; &#xC0C1;&#xD0DC; &#xAC04;&#xC758; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xBD84;&#xBC30; &#xD655;&#xB300; &#xBC0F; &#xC2E4;&#xC9C8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB8E8;&#xD504; &#xD1A0;&#xD3F4;&#xB85C;&#xC9C0;&#xB97C; &#xBCC0;&#xACBD; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xD5A5;&#xC774; &#xACF5;&#xAC1C;. &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xC885;&#xC18D; &#xB0B4;&#xC7A5; &#xACE1;&#xB960;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xB610;&#xD55C; nonuniform &#xD2B8;&#xC704;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB97C; &#xB9AC;&#xB4DC; &#xD558; &#xACE0; LacR-DNA &#xBCF5;&#xD569;&#xCCB4;&#xC758; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4;&#xB41C; &#xACB0;&#xC815; &#xAD6C;&#xC870;&#xC5D0;&#xC11C; 8 &#xAC1C;&#xC758; &#xACE0;&#xC720;&#xD55C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xD1A0;&#xD3F4;&#xB85C;&#xC9C0; &#xACE0;&#xB824;&#xB97C; &#xD544;&#xC694;&#xB85C;.

DNA&#xC758; &#xACE0;&#xC720;&#xD55C; &#xACE1;&#xB960; &#xBC18;&#xBCF5; LacR &#xC911;&#xC7AC; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE69;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La prote&#xED;na mediada por un bucle de ADN es un mecanismo com&#xFA;n para la regulaci&#xF3;n de la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica. Los bucles se producen cuando una prote&#xED;na se une a dos operadores en la misma mol&#xE9;cula de ADN. La probabilidad de bucle est&#xE1; controlado, en parte, por la secuencia de pares de bases de ADN entre operadores, que influye en sus propiedades estructurales. Una caracter&#xED;stica de la estructura es la curvatura intr&#xED;nseca o sin estr&#xE9;s. En este art&#xED;culo se analiza la influencia de la secuencia que dependen de la curvatura intr&#xED;nseca mediante el ejercicio de un modelo computacional para la barra de ADN entre operadores que se aplican a la reproducci&#xF3;n indefinida del complejo LACR de ADN. Comenzando con secuencias conocidas para el ADN entre operadores, primero calcular la curvatura intr&#xED;nseca del eje helicoidal como entrada al modelo de varilla. La estructura cristalina de la LACR (con los operadores consolidados) a continuaci&#xF3;n, define las condiciones de contorno necesarias necesarios para el modelo de varilla din&#xE1;mica que predice la energ&#xE9;tica y la topolog&#xED;a del bucle de ADN intermedio. Una contribuci&#xF3;n importante de este modelo es su capacidad para predecir una amplia gama de publicados los datos experimentales de gran inclinaci&#xF3;n (dise&#xF1;ado) las secuencias. El modelo predice con &#xE9;xito el bucle topolog&#xED;as conocido a partir de mediciones de fluorescencia de resonancia de transferencia de energ&#xED;a, la distribuci&#xF3;n de n&#xFA;mero de enlace conocido a partir de ensayos de ciclaci&#xF3;n con el complejo LACR-ADN, la estabilidad del bucle relativa conocido de ensayos de competici&#xF3;n, y el tama&#xF1;o relativo bucle conocido a partir de ensayos de movilidad en gel. Adem&#xE1;s, los c&#xE1;lculos muestran que las secuencias altamente curvas tienden a reducir el coste energ&#xE9;tico de la formaci&#xF3;n de bucle, ampliar la distribuci&#xF3;n de energ&#xED;a entre los estados estables en bucle y meta-estable, y altera sustancialmente topolog&#xED;a de bucle. La inclusi&#xF3;n de secuencia que dependen de la curvatura intr&#xED;nseca tambi&#xE9;n conduce a no uniforme giro y requiere la consideraci&#xF3;n de ocho uni&#xF3;n distinta topolog&#xED;as de la estructura cristalina conocida del complejo LACR-ADN.

Curvatura intr&#xED;nseca del ADN influye en LACR mediada por bucle

Exploraci&#xF3;n de las pinzas &#xF3;pticas de l&#xED;nea son una herramienta poderosa para el estudio de los sistemas coloidales o biomolecular en el r&#xE9;gimen de baja fuerza. Se presenta un m&#xE9;todo r&#xE1;pido, de alta resoluci&#xF3;n de posici&#xF3;n de la part&#xED;cula esquema de medici&#xF3;n que ampl&#xED;a las capacidades de estos instrumentos en el &#xE1;mbito de las mediciones din&#xE1;micas. La t&#xE9;cnica se basa en la detecci&#xF3;n s&#xED;ncrona de la luz l&#xE1;ser hacia el disperso durante una l&#xED;nea de exploraci&#xF3;n. Se demuestra una resoluci&#xF3;n de la posici&#xF3;n de mejor que 50 nm para anchos de banda de tanto como 40 kHz para pares de microesferas atrapadas en un potencial de la l&#xED;nea plana en separaciones de centro a centro de 1.7-6 micras.

Mediciones r&#xE1;pidas de posici&#xF3;n con exploraci&#xF3;n lineal Pinzas &#xD3;pticas

&#x626B;&#x63CF;&#x7EBF;&#x5149;&#x954A;&#x662F;&#x5F3A;&#x6709;&#x529B;&#x7684;&#x5DE5;&#x5177;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x80F6;&#x4F53;&#x6216;&#x4F4E;&#x73B0;&#x884C;&#x5236;&#x5EA6;&#x4E2D;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x5206;&#x5B50;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x76EE;&#x524D;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x6269;&#x5C55;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6587;&#x4E66;&#x5230;&#x52A8;&#x6001;&#x6D4B;&#x91CF;&#x9886;&#x57DF;&#x5FEB;&#x901F;&#x3001; &#x9AD8;&#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#x7684;&#x7C92;&#x5B50;&#x7684;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x6D4B;&#x91CF;&#x65B9;&#x6848;&#x3002;&#x6280;&#x672F;&#x57FA;&#x4E8E;&#x540C;&#x6B65;&#x68C0;&#x6D4B;&#x7684;&#x5411;&#x524D;&#x5206;&#x6563;&#x6FC0;&#x5149;&#x706F;&#x884C;&#x626B;&#x63CF;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x7684;&#x6BD4; 50 &#x7684;&#x7ACB;&#x573A;&#x51B3;&#x8BAE; nm &#x5E26;&#x5BBD;&#x9AD8;&#x8FBE; 40 kHz &#x7684;&#x5FAE;&#x7403;&#x5BF9;&#x88AB;&#x56F0;&#x5728;&#x6F5C;&#x5728;&#x5728;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x5230;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x5206;&#x8272;&#x7684; 1.7 6 microm &#x5E73;&#x7EBF;&#x3002;

&#x5FEB;&#x901F;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x6D4B;&#x91CF;&#x7684;&#x626B;&#x63CF;&#x7EBF;&#x5149;&#x5B66;&#x954A;&#x5B50;&#x3002;

Scanning line optical tweezers are a powerful tool for the study of colloidal or biomolecular systems in the low-force regime. We present a fast, high-resolution particle position measurement scheme that extends the capabilities of these instruments into the realm of dynamic measurements. The technique is based on synchronous detection of forward-scattered laser light during a line scan. We demonstrate a position resolution of better than 50 nm for bandwidths of as much as 40 kHz for pairs of microspheres trapped in a flat line potential at center-to-center separations of 1.7-6 microm.

Fast position measurements with scanning line optical tweezers.

Pinces de ligne de balayage optique sont un outil puissant pour l&#x26;#39;&#xE9;tude des syst&#xE8;mes collo&#xEF;daux ou biomol&#xE9;culaire dans le r&#xE9;gime de faible vigueur. Nous pr&#xE9;sentons un rapide, &#xE0; haute r&#xE9;solution r&#xE9;gime de mesure des particules de position qui &#xE9;tend les capacit&#xE9;s de ces instruments dans le domaine des mesures dynamiques. La technique est bas&#xE9;e sur la d&#xE9;tection synchrone de la lumi&#xE8;re laser diffus&#xE9;e vers l&#x26;#39;avant au cours d&#x26;#39;une ligne de balayage. Nous d&#xE9;montrons une r&#xE9;solution de position de mieux &#xE0; 50 nm pour des largeurs de bande jusqu&#x26;#39;&#xE0; 40 kHz pour des paires de microsph&#xE8;res pi&#xE9;g&#xE9;s dans un potentiel ligne plate au centre &#xE0; centre de 1,7 &#xE0; 6 s&#xE9;parations microm.

Des mesures de position rapide avec balayage pinces optiques de ligne

Scan Linie Optische Pinzette sind ein m&auml;chtiges Werkzeug f&uuml;r die Erforschung der kolloidalen oder biomolekularen Systemen der Low-Force-Regelung. Wir pr&auml;sentieren Ihnen eine schnelle, hochaufl&ouml;sende Partikel-Stellung-Messung-Schema, das die F&auml;higkeiten dieser Instrumente in das Reich der dynamische Messungen erweitert. Die Technik basiert auf synchrone Erkennung von vorw&auml;rtsgestreutem Laserlicht w&auml;hrend einer Zeilenkamera. Wir zeigen eine Stellung-Aufl&ouml;sung von besser als 50 nm f&uuml;r Bandbreiten von mehr als 40 kHz f&uuml;r Paare der Mikrosph&auml;ren in flache Linie potential an Mitte-Mitte von 1,7-6 Microm Farbseparationen gefangen.

Schnelle Positionsmessungen mit Scan-Linie Optische Pinzette.

Scansione riga ottica pinzette sono un potente strumento per lo studio di colloidale o sistemi biomolecolari in regime di bassa-forza. Vi presentiamo uno schema di misura di posizione particella veloce, ad alta risoluzione che estende le funzionalit&agrave; di questi strumenti nel Regno delle misure dinamiche. La tecnica &egrave; basata sulla rilevazione sincrona di luce diffusa diretta laser durante una scansione in linea. Dimostriamo una risoluzione posizione meglio di 50 nm per larghezze di banda di tanto quanto 40 kHz per coppie di microsfere intrappolato in una linea retta potenziale a separazioni center-centro di 1,7-6 microm.

Misure di posizione veloce con una pinzetta ottica linea di scansione.

&#x8D70;&#x67FB;&#x7DDA;&#x5149;&#x30D4;&#x30F3;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x4F4E;&#x529B;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30B3;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x3084;&#x751F;&#x4F53;&#x5206;&#x5B50;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x52D5;&#x7684;&#x306A;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x5024;&#x306E;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6A5F;&#x5668;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x62E1;&#x5F35;&#x3057;&#x3001;&#x9AD8;&#x901F;&#x3001;&#x9AD8;&#x5206;&#x89E3;&#x80FD;&#x306E;&#x7C92;&#x5B50;&#x306E;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x65B9;&#x5F0F;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x6280;&#x8853;&#x306F;&#x3001;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x4E2D;&#x306B;&#x524D;&#x65B9;&#x6563;&#x4E71;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B6;&#x30FC;&#x5149;&#x306E;&#x540C;&#x671F;&#x691C;&#x6CE2;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;1.7&#x304B;&#x3089;6&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#x306E;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x9593;&#x306E;&#x5206;&#x96E2;&#x306E;&#x5E73;&#x5766;&#x7DDA;&#x96FB;&#x4F4D;&#x306B;&#x9589;&#x3058;&#x8FBC;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30A2;&#x306E;&#x30DA;&#x30A2;&#x306E;&#x9650;&#x308A;40 kHz&#x306E;&#x5E2F;&#x57DF;&#x5E45;&#x306E;&#x512A;&#x308C;&#x305F;50 nm&#x306E;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x5206;&#x89E3;&#x80FD;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x8D70;&#x67FB;&#x7DDA;&#x5149;&#x30D4;&#x30F3;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x9AD8;&#x901F;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x6E2C;&#x5B9A;

&#xC2A4;&#xCE94; &#xB77C;&#xC778; &#xAD11;&#xD559; &#xD540;&#xC14B;&#xC740; &#xCF5C; &#xB85C;&#xC774;&#xB4DC; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xB3C4;&#xAD6C; &#xB610;&#xB294; &#xB0AE;&#xC740; &#xBB34;&#xB825; &#xC815;&#xAD8C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC14;&#xC774;&#xC624; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB3D9;&#xC801; &#xCE21;&#xC815; &#xC601;&#xC5ED;&#xC73C;&#xB85C;&#xC774; &#xC545;&#xAE30;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xD655;&#xC7A5; &#xD558;&#xB294; &#xBE60;&#xB974;&#xACE0;, &#xACE0;&#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; &#xC785;&#xC790; &#xC704;&#xCE58; &#xCE21;&#xC815; &#xAE30;&#xBC95; &#xC81C;&#xC2DC;. &#xC774; &#xAE30;&#xC220;&#xC740; &#xB77C;&#xC778; &#xC2A4;&#xCE94; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC55E;&#xC73C;&#xB85C; &#xD769;&#xC5B4;&#xC838; &#xB808;&#xC774;&#xC800; &#xBE5B;&#xC758; &#xB3D9;&#xAE30; &#xAC80;&#xCD9C;&#xC744; &#xAE30;&#xBC18;&#xC73C;&#xB85C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. 50 &#xC774;&#xC0C1;&#xC758; &#xC704;&#xCE58; &#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; &#xC2DC;&#xC5F0; microspheres &#xC30D;&#xC73C;&#xB85C; 40 Khz&#xC758; &#xB300;&#xC5ED;&#xD3ED;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB274; &#xBA55;&#xC2DC;&#xCF54; 1.7 6 microm&#xC758; &#xBD84;&#xD310; &#xC13C;&#xD130; &#xC13C;&#xD130;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xD50C;&#xB7AB; &#xB77C;&#xC778;&#xC5D0; &#xAC07;&#xD600;.

&#xBE60;&#xB978; &#xC704;&#xCE58; &#xCE21;&#xC815; &#xC2A4;&#xCE94; &#xC120; &#xAD11;&#xD559; &#xD540;&#xC14B;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#x7F8E;&#x56FD;&#x52A0;&#x5229;&#x798F;&#x5C3C;&#x4E9A;&#x5927;&#x5B66;&#x5723;&#x8FED;&#x6208;&#xFF0C;&#x5728;&#x5723;&#x5730;&#x4E9A;&#x54E5;&#xFF0C;&#x52A0;&#x5229;&#x798F;&#x5C3C;&#x4E9A;&#x5DDE;&#x5728; 2007 &#x5E74; 9 &#x6708; 7-8 &#x6708;&#x671F;&#x95F4;&#x4E3E;&#x884C;&#x4E86;&#x7F8E;&#x56FD;&#x79D1;&#x5B66;&#x9662;&#x7684;&#x7EB3;&#x7C73;&#x836F;&#x7269; (AANM) &#x7B2C;&#x4E09;&#x6B21;&#x5E74;&#x5EA6;&#x4F1A;&#x8BAE;&#x3002;&#x4F1A;&#x8BAE;&#x7684;&#x6210;&#x529F;&#x5E73;&#x79FB;&#x7EB3;&#x7C73;&#x836F;&#x7269;&#x91CD;&#x70B9;&#xFF1A; &#x4ECE;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5BA4;&#x5230;&#x5E8A;&#x8FB9;&#x3002;&#x6709;&#x56DB;&#x4E2A;&#x57FA;&#x8C03;&#x6F14;&#x8BB2;&#xFF0C;&#x5728;&#x8FD9;&#x6B21;&#x4F1A;&#x8BAE;&#x7684; 8 &#x4E2A;&#x79D1;&#x5B66;&#x4E13;&#x9898;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x4F1A;&#x3002;&#x7814;&#x7A76;&#x4EBA;&#x5458;&#x548C;&#x8C03;&#x67E5;&#x4EBA;&#x5458;&#x62A5;&#x544A;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x548C;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x5F53;&#x524D;&#x7EB3;&#x7C73;&#x836F;&#x7269;&#x7814;&#x7A76;&#x548C;&#x4E34;&#x5E8A;&#x5E94;&#x7528;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x4F1A;&#x8BAE;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x4EE4;&#x4EBA;&#x632F;&#x594B;&#x7684;&#x4FE1;&#x606F;&#x7EB3;&#x7C73;&#x836F;&#x7269;&#x4E34;&#x5E8A;&#x7684;&#x76F8;&#x5173;&#x7814;&#x7A76;&#x548C;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x53D1;&#x5C55;&#x4F1A;&#x7ED9;&#x4E34;&#x5E8A;&#x5B9E;&#x8DF5;&#x5E26;&#x6765;&#x597D;&#x5904;&#x7684;&#x7EB3;&#x7C73;&#x836F;&#x7269;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x6218;&#x7565;&#x3002;

&#x4ECE;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5BA4;&#x5230;&#x5E8A;&#x8FB9;&#xFF1A; &#x6210;&#x529F;&#x5E73;&#x79FB;&#x7EB3;&#x7C73;&#x836F;&#x7269;&#xFF1A; &#x7EB3;&#x7C73;&#x836F;&#x7269;&#x7F8E;&#x56FD;&#x79D1;&#x5B66;&#x9662;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E09;&#x6B21;&#x5E74;&#x5EA6;&#x4F1A;&#x8BAE;&#x7684;&#x4EAE;&#x70B9;&#x3002;

The Third Annual Meeting of the American Academy of Nanomedicine (AANM) was held at the University of California San Diego, in San Diego, California during September 7-8, 2007. The meeting was focused on successful translational nanomedicine: from bench to bedside. There were four keynote lectures and eight scientific symposiums in this meeting. The researchers and investigators reported the results and process of current nanomedicine research and approaches to clinical applications. The meeting provided exciting information for nanomedicine clinical-related researches and strategy for further development of nanomedicine research which will be benefits to clinical practice.

From bench to bedside: successful translational nanomedicine: highlights of the Third Annual Meeting of the American Academy of Nanomedicine.

La troisi&#xE8;me r&#xE9;union annuelle de l&#x26;#39;American Academy of nanom&#xE9;decine (AANM) a eu lieu &#xE0; l&#x26;#39;Universit&#xE9; de Californie &#xE0; San Diego, &#xE0; San Diego, en Californie au cours de Septembre 7-8, 2007. La rencontre &#xE9;tait ax&#xE9;e sur la nanom&#xE9;decine translationnelle succ&#xE8;s: de la paillasse au chevet. Il y avait quatre conf&#xE9;rences pl&#xE9;ni&#xE8;res et huit colloques scientifiques &#xE0; cette r&#xE9;union. Les chercheurs et les enqu&#xEA;teurs ont rapport&#xE9; les r&#xE9;sultats et le processus de la recherche en nanom&#xE9;decine et les approches actuelles &#xE0; des applications cliniques. La r&#xE9;union a fourni l&#x26;#39;information passionnante pour la nanom&#xE9;decine clinique li&#xE9;es &#xE0; des recherches et la strat&#xE9;gie pour la poursuite du d&#xE9;veloppement de la recherche en nanom&#xE9;decine, qui aura des avantages &#xE0; la pratique clinique.

Des laboratoires: nanom&#xE9;decine r&#xE9;ussie translationnelle: Faits saillants de la troisi&#xE8;me r&#xE9;union annuelle de l&#x26;#39;American Academy of nanom&#xE9;decine

Die dritte Jahrestagung der American Academy der Nanomedizin (AANM) fand der University of California San Diego, San Diego, Kalifornien w&auml;hrend September 7-8, 2007. Das Treffen konzentrierte sich auf erfolgreiche translational Nanomedizin: von Bank zu Bett. Es gab vier Keynote-Vortr&auml;ge und acht wissenschaftlichen Symposien in diesem Treffen. Die Forscher und die Ermittler berichtet die Ergebnisse und die aktuelle Forschung der Nanomedizin und Ans&auml;tze f&uuml;r die klinische Anwendung. Das Treffen bot spannende Informationen f&uuml;r Nanomedizin klinischen Zusammenhang mit Forschungen und Strategie zur Weiterentwicklung der Nanomedizin-Forschung die Vorteile f&uuml;r die klinische Praxis haben werden.

Von Bank zu Bett: erfolgreiche translational Nanomedizin: H&ouml;hepunkte der dritten Jahrestagung der amerikanischen Akademie der Nanomedizin.

La terza riunione annuale dell&#39;Accademia americana della nanomedicina (AANM) si tenne presso l&#39;Universit&agrave; della California di San Diego, a San Diego, in California, durante 7-8 settembre 2007. L&#39;incontro si &egrave; concentrato sulla nanomedicina traslazionale successo: dalla panchina al capezzale. C&#39;erano quattro lezioni di keynote e otto simposi scientifici in questo incontro. I ricercatori e gli investigatori ha riferito i risultati e il processo di ricerca attuale nanomedicina e approcci alle applicazioni cliniche. L&#39;incontro ha fornito interessanti informazioni per nanomedicina ricerche cliniche correlate e strategia per l&#39;ulteriore sviluppo della nanomedicina ricerca che sar&agrave; benefici alla pratica clinica.

Dal banco al capezzale: successo nanomedicina traslazionale: highlights della terza riunione annuale dell&#39;Accademia americana della nanomedicina.

&#x30CA;&#x30CE;&#x30E1;&#x30C7;&#x30A3;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x30A2;&#x30E1;&#x30EA;&#x30AB;&#x30A2;&#x30AB;&#x30C7;&#x30DF;&#x30FC;&#xFF08;AANM&#xFF09;&#x306E;&#x7B2C;3&#x56DE;&#x5E74;&#x6B21;&#x7DCF;&#x4F1A;&#x306F;9&#x6708;7-8&#x3001;2007&#x5E74;&#x306B;&#x30AB;&#x30EA;&#x30D5;&#x30A9;&#x30EB;&#x30CB;&#x30A2;&#x5DDE;&#x30B5;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A8;&#x30B4;&#x3067;&#x3001;&#x30AB;&#x30EA;&#x30D5;&#x30A9;&#x30EB;&#x30CB;&#x30A2;&#x5927;&#x5B66;&#x30B5;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x200B;&#x200B;&#x30A8;&#x30B4;&#x6821;&#x3067;&#x958B;&#x50AC;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C1;&#x304B;&#x3089;&#x30D9;&#x30C3;&#x30C9;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C9;&#x3078;&#xFF1A;&#x4F1A;&#x8B70;&#x306F;&#x6210;&#x529F;&#x3057;&#x305F;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30CA;&#x30EB;&#x30CA;&#x30CE;&#x30E1;&#x30C7;&#x30A3;&#x30B7;&#x30F3;&#x306B;&#x7126;&#x70B9;&#x3092;&#x5F53;&#x3066;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; 4&#x57FA;&#x8ABF;&#x8B1B;&#x6F14;&#x3068;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x4F1A;&#x8B70;&#x306E;8&#x3064;&#x306E;&#x79D1;&#x5B66;&#x7684;&#x306A;&#x30B7;&#x30F3;&#x30DD;&#x30B8;&#x30A6;&#x30E0;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7814;&#x7A76;&#x8005;&#x3084;&#x7814;&#x7A76;&#x8005;&#x306F;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x30CA;&#x30CE;&#x30E1;&#x30C7;&#x30A3;&#x30B7;&#x30F3;&#x7814;&#x7A76;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x81E8;&#x5E8A;&#x5FDC;&#x7528;&#x3078;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3068;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4F1A;&#x8B70;&#x306F;&#x3001;&#x30CA;&#x30CE;&#x30E1;&#x30C7;&#x30A3;&#x30B7;&#x30F3;&#x3001;&#x81E8;&#x5E8A;&#x95A2;&#x9023;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3068;&#x81E8;&#x5E8A;&#x5B9F;&#x8DF5;&#x3078;&#x306E;&#x30E1;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x306A;&#x308B;&#x30CA;&#x30CE;&#x30E1;&#x30C7;&#x30A3;&#x30B7;&#x30F3;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x3055;&#x3089;&#x306A;&#x308B;&#x767A;&#x5C55;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6226;&#x7565;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x523A;&#x6FC0;&#x7684;&#x306A;&#x60C5;&#x5831;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x6210;&#x529F;&#x3057;&#x305F;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30CA;&#x30EB;&#x30CA;&#x30CE;&#x30E1;&#x30C7;&#x30A3;&#x30B7;&#x30F3;&#xFF1A;&#x30CA;&#x30CE;&#x30E1;&#x30C7;&#x30A3;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x30A2;&#x30E1;&#x30EA;&#x30AB;&#x30A2;&#x30AB;&#x30C7;&#x30DF;&#x30FC;&#x306E;&#x7B2C;3&#x56DE;&#x5E74;&#x6B21;&#x7DCF;&#x4F1A;&#x306E;&#x30CF;&#x30A4;&#x30E9;&#x30A4;&#x30C8;&#x306F;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C1;&#x304B;&#x3089;&#x30D9;&#x30C3;&#x30C9;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C9;&#x3078;

2007 &#xB144; 9 &#xC6D4; 7-8 &#xB144; &#xB3D9;&#xC548; &#xC0CC;&#xB514;&#xC5D0;&#xACE0;, &#xCE98;&#xB9AC;&#xD3EC;&#xB2C8;&#xC544;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xCE98;&#xB9AC;&#xD3EC;&#xB2C8;&#xC544; &#xB300;&#xD559; &#xC0CC;&#xB514;&#xC5D0;&#xACE0; Nanomedicine (AANM)&#xC758; &#xBBF8;&#xAD6D; &#xC544;&#xCE74;&#xB370;&#xBBF8;&#xC758; &#xC138; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC5F0;&#xB840; &#xD68C;&#xC758; &#xAC1C;&#xCD5C; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xD68C;&#xC758; &#xC131;&#xACF5;&#xC801;&#xC778; &#xBCC0;&#xD658; nanomedicine&#xC5D0; &#xC9D1;&#xC911; &#xD588;&#xB2E4;: &#xBA38;&#xB9AC; &#xB9E1;&#xC5D0; &#xBCA4;&#xCE58;&#xC5D0;&#xC11C;. 4 &#xAC1C;&#xC758; &#xAE30;&#xC870; &#xAC15;&#xC758; 8 &#xAC1C;&#xC758; &#xACFC;&#xD559; &#xC2EC;&#xD3EC;&#xC9C0;&#xC5C4;&#xC774;&#xC774; &#xD68C;&#xC758; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC6D0;&#xACFC; &#xC218; &#xC0AC;&#xAD00; &#xACB0;&#xACFC; &#xD604;&#xC7AC; nanomedicine &#xC5F0;&#xAD6C; &#xBC0F; &#xC784;&#xC0C1; &#xC751;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xC811;&#xADFC; &#xD558;&#xB294; &#xACFC;&#xC815;&#xC744; &#xBCF4;&#xACE0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD68C;&#xC758; nanomedicine &#xC784;&#xC0C1; &#xAD00;&#xB828; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD765;&#xBBF8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC815;&#xBCF4; &#xBC0F; &#xC784;&#xC0C1; &#xC5F0;&#xC2B5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD61C;&#xD0DD;&#xC744; &#xB420; &#xAC83;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4; nanomedicine &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xCD94;&#xAC00; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC804;&#xB7B5;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBA38;&#xB9AC; &#xB9E1;&#xC5D0; &#xBCA4;&#xCE58;&#xC5D0;&#xC11C;: &#xC131;&#xACF5;&#xC801;&#xC778; &#xBCC0;&#xD658; nanomedicine: Nanomedicine&#xC758; &#xBBF8;&#xAD6D; &#xC544;&#xCE74;&#xB370;&#xBBF8;&#xC758; &#xC138; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC5F0;&#xB840; &#xD68C;&#xC758;&#xC758; &#xD558;&#xC774;&#xB77C;&#xC774;&#xD2B8;.

La Tercera Reuni&#xF3;n Anual de la Academia Americana de Nanomedicina (AANM) se celebr&#xF3; en la Universidad de California en San Diego, en San Diego, California, durante 7 a 8 septiembre, 2007. La reuni&#xF3;n se centr&#xF3; en la nanomedicina &#xE9;xito traslacional: del laboratorio al paciente. Hubo cuatro conferencias magistrales y ocho simposios cient&#xED;ficos en esta reuni&#xF3;n. Los investigadores y los investigadores reportaron los resultados de la investigaci&#xF3;n y el proceso de la nanomedicina y enfoques actuales de las aplicaciones cl&#xED;nicas. La reuni&#xF3;n brind&#xF3; la informaci&#xF3;n interesante para la nanomedicina cl&#xED;nica relacionados con las investigaciones y la estrategia para el desarrollo ulterior de la investigaci&#xF3;n la nanomedicina, que ser&#xE1; beneficios para la pr&#xE1;ctica cl&#xED;nica.

Del laboratorio al paciente: Nanomedicina &#xE9;xito traslacional: Lo m&#xE1;s destacado de la Tercera Reuni&#xF3;n Anual de la Academia Americana de Nanomedicina

Valvole di pressione azionato poly(dimethylsiloxane) (PDMS) sono stati caratterizzati rispetto alla loro propriet&agrave; elettromeccanico. Le misure della valvola apertura e orari di chiusura, pressioni di soglia e gli spettri di impedenza per valvole chiuse possono essere utilizzate per valutare la qualit&agrave; dei dispositivi in generale, determinare la loro idoneit&agrave; per applicazioni specializzate, come la fornitura elettriche isolate fluidici scompartimenti per patch planare di bloccaggio e specificano le condizioni di funzionamento ideale. Per i nostri disegni valvola particolare, segnaliamo orari di apertura della valvola dell&#39;ordine di 10-100 micros, che li rende adatti per applicazioni di scambio rapido di buffer. Possono effettivamente fornire isolamento elettrico reversibile tra compartimenti contigui fluidici con resistenze tipiche di 5 Gohms nello stato chiuso, che soddisfa il requisito di gigaohm per applicazioni di serraggio patch.

Propriet&agrave; elettromeccanica di pressione azionato poly(dimethylsiloxane) microfluidica push-down valvole.

Druck bet&auml;tigt Poly (PDMS) Ventile haben in Bezug auf ihre elektromechanischen Eigenschaften charakterisiert. Messungen der Ventil&ouml;ffnung und Schlie&szlig;zeiten Schwelle Druck und Impedanz Spektren f&uuml;r geschlossene Ventile dient zur Beurteilung der Qualit&auml;t der Ger&auml;te im Allgemeinen, bestimmen ihre Eignung f&uuml;r spezielle Anwendungen, wie die Bereitstellung von elektrischer isoliert fluidische F&auml;cher f&uuml;r F&uuml;llfl&auml;che spannen, und geben Sie ideale Bedingungen. F&uuml;r unsere speziellen Ventil-Designs berichten wir Ventil-&Ouml;ffnungszeiten des Ordens 10-100-Mikrofone, macht sie f&uuml;r schnelle Puffer Exchange-Anwendungen geeignet. Sie k&ouml;nnen effektiv reversible elektrische Isolierung zwischen fluidische Hauptabteilungen mit typischen Widerst&auml;nden von 5 Gohms im geschlossenen Zustand, bieten die die Gigaohm f&uuml;r Patch spannen Anwendungen erf&uuml;llt.

Elektromechanische Eigenschaften Druck bet&auml;tigt Poly mikrofluidische Pushdown Ventile.

&#x5173;&#x4E8E;&#x5176;&#x673A;&#x7535;&#x6027;&#x80FD;&#x7279;&#x70B9;&#x662F;&#x538B;&#x529B;&#x9A71;&#x52A8; poly(dimethylsiloxane) (&#x805A;&#x4E8C;&#x7532;&#x57FA;&#x7845;&#x6C27;&#x70F7;) &#x9600;&#x95E8;&#x3002;&#x9600;&#x95E8;&#x5F00;&#x5EA6;&#x53CA;&#x5173;&#x95ED;&#x65F6;&#x95F4;&#x3001; &#x9608;&#x503C;&#x7684;&#x538B;&#x529B;&#xFF0C;&#x548C;&#x5C01;&#x95ED;&#x9600;&#x95E8;&#x7684;&#x963B;&#x6297;&#x8C31;&#x6D4B;&#x91CF;&#x53EF;&#x7528;&#x4E8E;&#x4E00;&#x822C;&#x8BC4;&#x4F30;&#x8BBE;&#x5907;&#x7684;&#x8D28;&#x91CF;&#xFF0C;&#x786E;&#x5B9A;&#x5176;&#x9002;&#x7528;&#x4E8E;&#x4E13;&#x95E8;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#xFF0C;&#x4F8B;&#x5982;&#x63D0;&#x4F9B;&#x7535;&#x6C14;&#x9694;&#x79BB;&#x6D41;&#x63A7;&#x8F66;&#x53A2;&#x4E3A;&#x5E73;&#x9762;&#x7247;&#x5939;&#x7D27;&#xFF0C;&#x5E76;&#x6307;&#x5B9A;&#x7406;&#x60F3;&#x7684;&#x7ECF;&#x8425;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7279;&#x6B8A;&#x9600;&#x95E8;&#x8BBE;&#x8BA1;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x9600;&#x95E8;&#x5F00;&#x653E;&#x65F6;&#x95F4;&#x7EA6;&#x4E3A; 10-100 &#x5FAE;&#x7C73;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x5B83;&#x4EEC;&#x9002;&#x5408;&#x5FEB;&#x901F;&#x7F13;&#x51B2;&#x533A; exchange &#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x3002;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6709;&#x6548;&#x5730;&#x63D0;&#x4F9B;&#x53EF;&#x9006; 5 Gohms &#x5904;&#x4E8E;&#x5173;&#x95ED;&#x72B6;&#x6001;&#xFF0C;&#x7B26;&#x5408; gigaohm &#x8981;&#x6C42;&#x5939;&#x7D27;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x7684;&#x4FEE;&#x8865;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x7684;&#x5178;&#x578B;&#x963B;&#x529B;&#x4E0E;&#x76F8;&#x90BB;&#x6D41;&#x63A7;&#x8F66;&#x53A2;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x7535;&#x6C14;&#x9694;&#x79BB;&#x3002;

&#x538B;&#x529B;&#x5F15;&#x7206; poly(dimethylsiloxane) &#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x63A8;&#x9600;&#x95E8;&#x7684;&#x673A;&#x7535;&#x6027;&#x80FD;&#x3002;

Pressure-actuated poly(dimethylsiloxane) (PDMS) valves have been characterized with respect to their electromechanical properties. Measurements of the valve opening and closing times, threshold pressures, and impedance spectra for closed valves can be used to assess the quality of the devices in general, determine their suitability for specialized applications, such as providing electrical isolated fluidic compartments for planar patch clamping, and specify ideal operating conditions. For our particular valve designs, we report valve opening times of the order of 10-100 micros, making them suitable for rapid buffer exchange applications. They can effectively provide reversible electrical isolation between adjacent fluidic compartments with typical resistances of 5 Gohms in the closed state, which meets the gigaohm requirement for patch clamping applications.

Electromechanical properties of pressure-actuated poly(dimethylsiloxane) microfluidic push-down valves.

Pression actionn&#xE9;e par poly (dim&#xE9;thylsiloxane) (PDMS) vannes ont &#xE9;t&#xE9; caract&#xE9;ris&#xE9;s &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;gard de leurs propri&#xE9;t&#xE9;s &#xE9;lectrom&#xE9;caniques. Les mesures de la vanne d&#x26;#39;ouverture et de fermeture, les pressions de seuil, et les spectres d&#x26;#39;imp&#xE9;dance pour vannes ferm&#xE9;es peuvent &#xEA;tre utilis&#xE9;s pour &#xE9;valuer la qualit&#xE9; des dispositifs en g&#xE9;n&#xE9;ral, de d&#xE9;terminer leur ad&#xE9;quation pour des applications sp&#xE9;cialis&#xE9;es, telles que la fourniture &#xE9;lectrique isol&#xE9;s compartiments fluidiques pour le patch plane de serrage, et pr&#xE9;ciser les conditions de fonctionnement id&#xE9;ales. Pour nos mod&#xE8;les de vannes particuli&#xE8;res, nous rapportons les horaires d&#x26;#39;ouverture de vanne de l&#x26;#39;ordre de 10-100 micros, les rendant aptes &#xE0; des applications rapides &#xE9;change de tampon. Ils peuvent fournir efficacement r&#xE9;versible isolation &#xE9;lectrique entre compartiments adjacents fluidiques avec des r&#xE9;sistances typiques de 5 GOhm &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;tat ferm&#xE9;, ce qui r&#xE9;pond &#xE0; l&#x26;#39;exigence pour les applications gigaohm patch-clamp.

Propri&#xE9;t&#xE9;s &#xE9;lectrom&#xE9;caniques de pression actionn&#xE9; par poly (dim&#xE9;thylsiloxane) microfluidique Poussez vers le bas Vannes

&#x5727;&#x529B;&#x4F5C;&#x52D5;&#x30DD;&#x30EA;&#xFF08;&#x30B8;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B7;&#x30ED;&#x30AD;&#x30B5;&#x30F3;&#xFF09;&#xFF08;PDMS&#xFF09;&#x30D0;&#x30EB;&#x30D6;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x96FB;&#x6C17;&#x7279;&#x6027;&#x306B;&#x95A2;&#x3057;&#x3066;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x9589;&#x3058;&#x305F;&#x30D0;&#x30EB;&#x30D6;&#x306E;&#x56DE;&#x958B;&#x9589;&#x5F01;&#x3001;&#x3057;&#x304D;&#x3044;&#x5024;&#x5727;&#x529B;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D4;&#x30FC;&#x30C0;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x306E;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x306F;&#x4E00;&#x822C;&#x306B;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x306E;&#x54C1;&#x8CEA;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x5E73;&#x9762;&#x30D1;&#x30C3;&#x30C1;&#x30AF;&#x30E9;&#x30F3;&#x30D7;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x96FB;&#x6C17;&#x7D76;&#x7E01;&#x578B;&#x6D41;&#x4F53;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x306A;&#x3069;&#x3001;&#x7279;&#x6B8A;&#x306A;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x9069;&#x6027;&#x3092;&#x5224;&#x65AD;&#x3059;&#x308B;&#x7406;&#x60F3;&#x7684;&#x306A;&#x52D5;&#x4F5C;&#x6761;&#x4EF6;&#x3092;&#x6307;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30D0;&#x30EB;&#x30D6;&#x8A2D;&#x8A08;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x6025;&#x901F;&#x306A;&#x30D0;&#x30C3;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x4EA4;&#x63DB;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x9069;&#x3057;&#x3066;&#x3001;10&#x304B;&#x3089;100&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C0;&#x30FC;&#x306E;&#x958B;&#x5F01;&#x6642;&#x9593;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x30D1;&#x30C3;&#x30C1;&#x30AF;&#x30E9;&#x30F3;&#x30D7;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;gigaohm&#x8981;&#x4EF6;&#x3092;&#x6E80;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x9589;&#x3058;&#x305F;&#x72B6;&#x614B;&#x3067;5 Gohms&#x3001;&#x5178;&#x578B;&#x7684;&#x306A;&#x62B5;&#x6297;&#x5024;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x96A3;&#x63A5;&#x3057;&#x305F;&#x6D41;&#x4F53;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x9593;&#x306E;&#x53EF;&#x9006;&#x7684;&#x306A;&#x96FB;&#x6C17;&#x7684;&#x7D76;&#x7E01;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x5727;&#x529B;&#x4F5C;&#x52D5;&#x30DD;&#x30EA;&#xFF08;&#x30B8;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B7;&#x30ED;&#x30AD;&#x30B5;&#x30F3;&#xFF09;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30D7;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30D0;&#x30EB;&#x30D6;&#x306E;&#x96FB;&#x6C17;&#x7279;&#x6027;

&#xC555;&#xB825; &#xC791;&#xB3D9; poly(dimethylsiloxane) (PDMS) &#xBC38;&#xBE0C;&#xB294; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC804;&#xAE30; &#xC18D;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300;&#xD574; &#xD2B9;&#xC9D5; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC38;&#xBE0C; &#xAC1C;&#xBC29; &#xB2EB;&#xB294; &#xC2DC;&#xAC04;, &#xC784;&#xACC4;&#xAC12; &#xC555;&#xB825;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xD3D0;&#xC1C4; &#xBC38;&#xBE0C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC784;&#xD53C;&#xB358;&#xC2A4; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC;&#xC758; &#xCE21;&#xC815; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC18C;&#xC790;&#xC758; &#xD488;&#xC9C8;&#xC744; &#xD3C9;&#xAC00;, &#xD3C9;&#xBA74; &#xD328;&#xCE58; &#xD074;&#xB7A8;&#xD551;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC804;&#xAE30; &#xC808;&#xC5F0;&#xB41C; &#xC720;&#xCCB4; &#xAD6C;&#xD68D;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xB4F1; &#xD2B9;&#xC218; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC790;&#xC2E0;&#xC758; &#xC801;&#xD569;&#xC131;&#xC744; &#xACB0;&#xC815; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB420; &#xACE0; &#xC774;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xB3D9;&#xC791; &#xC870;&#xAC74;&#xC744; &#xC9C0;&#xC815; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xD2B9;&#xC815; &#xBC38;&#xBE0C; &#xC124;&#xACC4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBC38;&#xBE0C; &#xC601;&#xC5C5; &#xC2DC;&#xAC04; 10-100 &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; &#xC21C;&#xC11C;&#xC758; &#xC2E0;&#xC18D;&#xD55C; &#xBC84;&#xD37C; exchange &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC5D0; &#xC801;&#xD569; &#xD55C; &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; &#xBCF4;&#xACE0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD328;&#xCE58; &#xC751;&#xC6A9; &#xD074;&#xB7A8;&#xD551;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; gigaohm &#xC694;&#xAD6C; &#xC0AC;&#xD56D;&#xC5D0; &#xBD80;&#xD569; &#xD558;&#xB294; &#xB2EB;&#xD78C;&#xB41C; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0;&#xC11C; 5 Gohms&#xC758; &#xC804;&#xD615;&#xC801;&#xC778; 50ohm &#xC778;&#xC811; &#xC720;&#xCCB4; &#xAD6C;&#xD68D; &#xAC04;&#xC758; &#xAC00;&#xC5ED; &#xC804;&#xAE30;&#xC801; &#xC808;&#xC5F0;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Poly(dimethylsiloxane) &#xC555;&#xB825; &#xC791;&#xB3D9; &#xBBF8;&#xC138; &#xD478;&#xC2DC; &#xB2E4;&#xC6B4; &#xBC38;&#xBE0C;&#xC758; &#xC804;&#xAE30; &#xC18D;&#xC131;.

Accionado por presi&#xF3;n de poli (dimetilsiloxano) (PDMS) v&#xE1;lvulas se han caracterizado con respecto a sus propiedades electromec&#xE1;nicos. Las mediciones de la v&#xE1;lvula de apertura y cierre, la presi&#xF3;n de umbral, y los espectros de impedancia para las v&#xE1;lvulas cerradas puede ser utilizado para evaluar la calidad de los dispositivos en general, determinar su idoneidad para aplicaciones especializadas, tales como el suministro de fluidos el&#xE9;ctricos compartimentos aislados para el parche plano de sujeci&#xF3;n, y especificar las condiciones ideales de funcionamiento. Para nuestros dise&#xF1;os de v&#xE1;lvulas especiales, se presenta los tiempos de apertura de v&#xE1;lvula del orden de 10 a 100 micros, haci&#xE9;ndolas adecuadas para aplicaciones de amortiguaci&#xF3;n de cambio r&#xE1;pido. Ellos pueden proveer efectivamente el aislamiento el&#xE9;ctrico reversible entre los compartimentos adyacentes de fluidos con las resistencias t&#xED;picas de 5 Gohms en el estado cerrado, el cual cumple con el requisito gigaohmio para aplicaciones de parches de sujeci&#xF3;n.

Propiedades electromec&#xE1;nicas de presi&#xF3;n accionada por poli (dimetilsiloxano) de microfluidos de empujar hacia abajo las v&#xE1;lvulas

Optische Pinzette leistungsstarke Werkzeuge zum Bearbeiten von biomolekularen Systemen geworden, aber sind immer schwieriger zu verwenden, wenn die Gr&ouml;&szlig;e der Molek&uuml;le &lt; 1 Microm. Viele wichtige biologische Strukturen und Prozesse, jedoch auftreten auf der Submikron-L&auml;ngenskala. Daher haben wir entwickelt und zeichnet sich eine optische Manipulation-Protokoll, das diese L&auml;ngenskala zug&auml;nglich macht, durch Dehnung des Molek&uuml;ls in axialer Richtung des Laserstrahls, damit Vermeidung Artefakte aus sterische Hindernisse aus der Mikroskop-Deckglas und andere Oberfl&auml;cheneffekte zu begrenzen. Das Molek&uuml;l wird durch eine Kombination von optischen Farbverlauf und backscattering Kr&auml;fte, wodurch die Notwendigkeit f&uuml;r elektronisches Feedback unter Konstanten mechanischen Spannung gehalten. Wir demonstrieren das Dienstprogramm dieser Methode durch eine Messung der Kraft-Erweiterung Beziehung eines 1298 bp-ds-DNA-Molek&uuml;ls.

Stretching Submikron Biomolek&uuml;le mit Konstante-Kraft axial Optische Pinzette.

Pinzette ottiche sono diventati strumenti potenti per manipolare sistemi biomolecolari, ma sono sempre pi&ugrave; difficili da utilizzare quando la dimensione delle molecole &egrave; &lt; 1 microm. Molte importanti strutture biologiche e i processi, tuttavia, si verificano sulla scala di lunghezza di submicron. Pertanto, abbiamo sviluppato e caratterizzato un protocollo manipolazione ottica che rende questa scala di lunghezza accessibile allungando la molecola in direzione assiale del fascio laser, evitando cos&igrave; di limitare gli artefatti da ostacoli sterico da microscopio coprivetrino e altri effetti di superficie. La molecola &egrave; tenuta sotto costante tensione meccanica da una combinazione di forze gradiente ottiche e backscattering, eliminando la necessit&agrave; di feedback elettronico. Noi di dimostrare l&#39;utilit&agrave; di questo metodo attraverso una misurazione del rapporto forza-estensione di una molecola di ds-DNA 1298 bp.

Stretching submicron biomolecole con una pinzetta ottica assiale costante di forza.

&#x5149;&#x954A;&#x5DF2;&#x6210;&#x4E3A;&#x529F;&#x80FD;&#x5F3A;&#x5927;&#x7684;&#x5DE5;&#x5177;&#x6765;&#x64CD;&#x4F5C;&#x751F;&#x7269;&#x5206;&#x5B50;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x4F46;&#x8D8A;&#x6765;&#x8D8A;&#x96BE;&#x65F6;&#xFF0C;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x5927;&#x5C0F;&#xFF0C;&#x8BF7;&#x4F7F;&#x7528; &lt; 1 microm&#x3002;&#x8BB8;&#x591A;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x7ED3;&#x6784;&#x548C;&#x8FDB;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x53D1;&#x751F;&#x5728;&#x4E9A;&#x5FAE;&#x7C73;&#x957F;&#x5EA6;&#x8303;&#x56F4;&#x5185;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5236;&#x5B9A;&#x548C;&#x7279;&#x70B9;&#x5149;&#x5B66;&#x64CD;&#x7EB5;&#x534F;&#x8BAE;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x8FD9;&#x79CD;&#x957F;&#x5EA6;&#x89C4;&#x6A21;&#x53EF;&#x8BBF;&#x95EE;&#x7684;&#x6FC0;&#x5149;&#x675F;&#x7684;&#x8F74;&#x5411;&#x65B9;&#x5411;&#x62C9;&#x4F38;&#x5206;&#x5B50;&#x4ECE;&#x800C;&#x907F;&#x514D;&#x9650;&#x5236;&#x4ECE;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C; coverslip &#x548C;&#x5176;&#x4ED6;&#x8868;&#x9762;&#x6548;&#x5E94;&#x7684;&#x7A7A;&#x95F4;&#x4F4D;&#x963B;&#x969C;&#x788D;&#x4E2D;&#x7684;&#x5DE5;&#x4EF6;&#x3002;&#x5206;&#x5B50;&#x662F;&#x7531;&#x5149;&#x5B66;&#x68AF;&#x5EA6;&#x90E8;&#x961F;&#x548C;&#x540E;&#x5411;&#x6563;&#x5C04;&#xFF0C;&#x7701;&#x53BB;&#x4E86;&#x7535;&#x5B50;&#x53CD;&#x9988;&#x7684;&#x7EC4;&#x5408;&#xFF0C;&#x6052;&#x673A;&#x68B0;&#x5F20;&#x529B;&#x4E0B;&#x4E3E;&#x884C;&#x7684;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC1;&#x660E;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#x901A;&#x8FC7;&#x6D4B;&#x91CF; 1298 bp ds DNA &#x5206;&#x5B50;&#x529B;&#x6269;&#x5C55;&#x5173;&#x7CFB;&#x7684;&#x5B9E;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x3002;

&#x7528;&#x5E38;&#x6570;&#x529B;&#x8F74;&#x5411;&#x5149;&#x954A;&#x62C9;&#x4F38;&#x4E9A;&#x5FAE;&#x7C73;&#x7EA7;&#x751F;&#x7269;&#x5206;&#x5B50;&#x3002;

Optical tweezers have become powerful tools to manipulate biomolecular systems, but are increasingly difficult to use when the size of the molecules is <1 microm. Many important biological structures and processes, however, occur on the submicron length scale. Therefore, we developed and characterized an optical manipulation protocol that makes this length scale accessible by stretching the molecule in the axial direction of the laser beam, thus avoiding limiting artifacts from steric hindrances from the microscope coverslip and other surface effects. The molecule is held under constant mechanical tension by a combination of optical gradient forces and backscattering forces, eliminating the need for electronic feedback. We demonstrate the utility of this method through a measurement of the force-extension relationship of a 1298 bp ds-DNA molecule.

Stretching submicron biomolecules with constant-force axial optical tweezers.

Pinces optiques sont devenus des outils puissants pour manipuler les syst&#xE8;mes biomol&#xE9;culaires, mais sont de plus en plus difficile &#xE0; utiliser lorsque la taille des mol&#xE9;cules est &#x26;lt;1 microm&#xE8;tre. Beaucoup de structures importantes et des processus biologiques, cependant, se produisent sur l&#x26;#39;&#xE9;chelle de longueur submicronique. Par cons&#xE9;quent, on d&#xE9;velopp&#xE9; et caract&#xE9;ris&#xE9; un protocole de manipulation optique qui rend cette &#xE9;chelle de longueur accessible par &#xE9;tirage de la mol&#xE9;cule dans la direction axiale du faisceau laser, &#xE9;vitant ainsi les artefacts de limitation de freins st&#xE9;riques de la lamelle de microscope et des effets de surface d&#x26;#39;autres. La mol&#xE9;cule est maintenu sous tension m&#xE9;canique constante par une combinaison de forces de gradient optiques et les forces de r&#xE9;trodiffusion, &#xE9;liminant le besoin de r&#xE9;troaction &#xE9;lectronique. Nous d&#xE9;montrons l&#x26;#39;utilit&#xE9; de cette m&#xE9;thode par le biais d&#x26;#39;une mesure de la relation force-extension d&#x26;#39;un pb ds 1298-mol&#xE9;cule d&#x26;#39;ADN.

Stretching Biomol&#xE9;cules submicroniques avec force constante pinces optiques axiales

&#x5149;&#x30D4;&#x30F3;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x4F53;&#x5206;&#x5B50;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3092;&#x64CD;&#x4F5C;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x304C;&#x26;lt;1&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x304D;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x307E;&#x3059;&#x307E;&#x3059;&#x56F0;&#x96E3;&#x3067;&#x3059;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x69CB;&#x9020;&#x3068;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x30B5;&#x30D6;&#x30DF;&#x30AF;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x9577;&#x3055;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30EB;&#x3067;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x305F;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B6;&#x30D3;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x8EF8;&#x65B9;&#x5411;&#x306B;&#x5206;&#x5B50;&#x3092;&#x5EF6;&#x4F38;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x9577;&#x3055;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30EB;&#x306B;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BB;&#x30B9;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x3001;&#x5149;&#x64CD;&#x4F5C;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30B3;&#x30EB;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x306E;&#x30AB;&#x30D0;&#x30FC;&#x30AC;&#x30E9;&#x30B9;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x52B9;&#x679C;&#x304B;&#x3089;&#x7ACB;&#x4F53;&#x969C;&#x5BB3;&#x304B;&#x3089;&#x5236;&#x9650;&#x3059;&#x308B;&#x30A2;&#x30FC;&#x30C1;&#x30D5;&#x30A1;&#x30AF;&#x30C8;&#x3092;&#x56DE;&#x907F;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5206;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x96FB;&#x5B50;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30C9;&#x30D0;&#x30C3;&#x30AF;&#x306E;&#x5FC5;&#x8981;&#x6027;&#x3092;&#x6392;&#x9664;&#x3057;&#x3001;&#x5149;&#x52FE;&#x914D;&#x529B;&#x3068;&#x6563;&#x4E71;&#x529B;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x4E00;&#x5B9A;&#x306E;&#x6A5F;&#x68B0;&#x7684;&#x5F35;&#x529B;&#x306E;&#x4E0B;&#x3067;&#x958B;&#x50AC;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;1298 bp&#x3067;&#x306E;ds-DNA&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x529B; - &#x62E1;&#x5F35;&#x95A2;&#x4FC2;&#x306E;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306E;&#x6709;&#x7528;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3002;

&#x5B9A;&#x529B;&#x8EF8;&#x5149;&#x30D4;&#x30F3;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3067;&#x30B5;&#x30D6;&#x30DF;&#x30AF;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x751F;&#x4F53;&#x5206;&#x5B50;&#x3092;&#x4F38;&#x3070;&#x3059;

&#xAD11;&#xD559; &#xD540;&#xC14B; &#xBC14;&#xC774;&#xC624; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC744; &#xC870;&#xC791; &#xD558;&#xB294; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xB3C4;&#xAD6C; &#xB418;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xB54C; &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xD06C;&#xAE30;&#xB294; &#xC810;&#xC810; &#xB354; &#xC5B4;&#xB824;&#xC6B4; &lt; 1 microm. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xB9CE;&#xC740; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xAD6C;&#xC870;&#xC640; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;,, &#xC11C;&#xBE0C; &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB860; &#xAE38;&#xC774; &#xADDC;&#xBAA8;&#xB85C; &#xBC1C;&#xC0DD;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558; &#xACE0; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; coverslip &#xBC0F; &#xB2E4;&#xB978; &#xD45C;&#xBA74; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC785;&#xCCB4;&#xC801; hindrances&#xC5D0;&#xC11C; &#xC544;&#xD2F0;&#xD329;&#xD2B8;&#xB97C; &#xC81C;&#xD55C; &#xD53C;&#xD558;&#xB294; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xAD11;&#xD559; &#xC870;&#xC791; &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0;&#xCF5C;&#xC744; &#xB808;&#xC774;&#xC800; &#xAD11;&#xC120;&#xC758; &#xCD95; &#xBC29;&#xD5A5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xC790;&#xB97C; &#xB298;&#xB824;&#xC11C; &#xAE38;&#xC774; &#xADDC;&#xBAA8;&#xAC00; &#xC561;&#xC138;&#xC2A4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xAC8C; &#xD2B9;&#xC9D5;. &#xBD84;&#xC790; &#xAD11;&#xD559; &#xADF8;&#xB77C;&#xB370;&#xC774;&#xC158; &#xC138;&#xB825;&#xACFC; &#xC804;&#xC790; &#xD53C;&#xB4DC;&#xBC31;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694;&#xC131;&#xC744; &#xC5C6;&#xC560; backscattering &#xD798;&#xC758; &#xC870;&#xD569;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; &#xAE30;&#xACC4;&#xC801;&#xC778; &#xAE34;&#xC7A5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC1C;&#xCD5C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. 1298 Bp ds DNA &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xD798;-&#xD655;&#xC7A5; &#xAD00;&#xACC4;&#xC758; &#xCE21;&#xC815;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574;&#xC774; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xC758; &#xC720;&#xD2F8;&#xB9AC;&#xD2F0;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC0C1;&#xC218;-&#xD798; &#xCD95; &#xAD11;&#xD559; &#xD540;&#xC14B;&#xC73C;&#xB85C; &#xBBF8;&#xD06C;&#xB860; biomolecules &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xCE6D;.

Las pinzas &#xF3;pticas se han convertido en poderosas herramientas para manipular los sistemas biomoleculares, pero son cada vez m&#xE1;s dif&#xED;ciles de usar cuando el tama&#xF1;o de las mol&#xE9;culas es &#x26;lt;1 micras. Muchas de las estructuras y procesos biol&#xF3;gicos importantes, sin embargo, ocurren en la escala de longitud de sub-microm&#xE9;tricas. Por lo tanto, hemos desarrollado y caracterizado un protocolo manipulaci&#xF3;n &#xF3;ptico que hace que esta escala de longitud accesible por el estiramiento de la mol&#xE9;cula en la direcci&#xF3;n axial del haz de l&#xE1;ser, evitando as&#xED; los artefactos limitantes de impedimentos est&#xE9;ricos del cubreobjetos de microscopio y otros efectos superficiales. La mol&#xE9;cula se mantiene bajo tensi&#xF3;n mec&#xE1;nica constante por una combinaci&#xF3;n de fuerzas de gradiente &#xF3;pticas y las fuerzas de retrodispersi&#xF3;n, eliminando la necesidad de realimentaci&#xF3;n electr&#xF3;nica. Se demuestra la utilidad de este m&#xE9;todo a trav&#xE9;s de una medici&#xF3;n de la relaci&#xF3;n de fuerza de extensi&#xF3;n de un 1298 pb ds-ADN mol&#xE9;cula.

El estiramiento Biomol&#xE9;culas submicr&#xF3;nicas con fuerza constante axiales Pinzas &#xD3;pticas

&#x4E0E;&#x86CB;&#x767D;&#x4ECB;&#x5BFC; DNA &#x5FAA;&#x73AF;&#x9519;&#x7EFC;&#x590D;&#x6742;&#x76F8;&#x5173;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#x4EFB;&#x4F55;&#x6270;&#x4E71;&#x4E86;&#x5FAA;&#x73AF;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x673A;&#x68B0;&#x7EA6;&#x675F;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5728;&#x57FA;&#x56E0;&#x8C03;&#x63A7;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x7269;&#x7406;&#x6A21;&#x578B;&#x9884;&#x6D4B;&#x5C0F;&#x4E8E; piconewton &#x7684;&#x529B;&#x91CF;&#x53EF;&#x80FD;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x963B;&#x6B62; DNA &#x5F62;&#x6210;&#x5FAA;&#x73AF;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x770B;&#x6765;&#x5F20;&#x529B;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5206;&#x5B50;&#x5F00;&#x5173;&#x7684; RNA &#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x7684;&#x845B;&#x8FD0;&#x52A8;&#x4E0E;&#x5173;&#x8054;&#x63A7;&#x4EF6;&#x7684;&#x5F88;&#x591A;&#x8F83;&#x5927;&#x7684;&#x90E8;&#x961F;&#x3002;&#x56E0;&#x4E3A;&#x4E4B;&#x524D;&#x5B83;&#x6863;&#xFF0C;RNAP &#x53EF;&#x4EE5;&#x8D85;&#x8FC7; 20 pN &#x65BD;&#x52A0;&#x529B;&#x91CF;&#xFF0C;&#x886C;&#x5E95;&#x7D27;&#x5F20;&#x5F00;&#x5173;&#39; &#x53EF;&#x4EE5;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E24;&#x4E2A;&#x6570;&#x91CF;&#x7EA7;&#x7684;&#x529B;&#x91CF;&#x4F18;&#x52BF;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x662F;&#x6700;&#x8FD1;&#x4F53;&#x5916;&#x5FAE;&#x64CD;&#x4F5C;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x4E2D;&#x770B;&#x5230;&#x7684;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x7BC7;&#x6587;&#x7AE0;&#x6211;&#x4EEC;&#x73B0;&#x6709;&#x7406;&#x8BBA;&#x4E0E; DNA &#x5FAA;&#x73AF;&#x4F53;&#x5916;&#x548C;&#x4F53;&#x5185;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x6570;&#x636E;&#x63D0;&#x4F9B;&#x65B0;&#x89C6;&#x89D2;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x9610;&#x8FF0;&#x5F20;&#x529B;&#x548C;&#x5404;&#x79CD;&#x5404;&#x6837;&#x7684;&#x5176;&#x4ED6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x7684;&#x673A;&#x68B0;&#x9650;&#x5236;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x5E8F;&#x5217;&#x5177;&#x4F53;&#x66F2;&#x7387;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x8FDE;&#x63A5;&#x548C;&#x8D85;&#x7EC6;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F3A;&#x8C03;&#x7684;&#x4E30;&#x5BCC;&#x6027;&#x548C;&#x591A;&#x7528;&#x9014;&#x7684; DNA &#x529B;&#x5B66;&#x5F00;&#x8F9F;&#x4E86;&#x57FA;&#x56E0;&#x8C03;&#x63A7;&#x63A2;&#x7D22;&#x5168;&#x65B0;&#x8303;&#x5F0F;&#x3002;

Femtonewton &#x90E8;&#x961F;&#x505A;&#x4F1A;&#x5F71;&#x54CD;&#x9057;&#x4F20;&#x529F;&#x80FD;&#x5417;&#xFF1F;&#x4E00;&#x6B21;&#x5BA1;&#x67E5;&#x3002;

Protein-Mediated DNA looping is intricately related to gene expression. Therefore any mechanical constraint that disrupts loop formation can play a significant role in gene regulation. Polymer physics models predict that less than a piconewton of force may be sufficient to prevent the formation of DNA loops. Thus, it appears that tension can act as a molecular switch that controls the much larger forces associated with the processive motion of RNA polymerase. Since RNAP can exert forces over 20 pN before it stalls, a 'substrate tension switch' could offer a force advantage of two orders of magnitude. Evidence for such a mechanism is seen in recent in vitro micromanipulation experiments. In this article we provide new perspective on existing theory and experimental data on DNA looping in vitro and in vivo. We elaborate on the connection between tension and a variety of other intracellular mechanical constraints including sequence specific curvature and supercoiling. In the process, we emphasize that the richness and versatility of DNA mechanics opens up a whole new paradigm of gene regulation to explore.

Do femtonewton forces affect genetic function? A review.

Boucle d&#x26;#39;ADN Prot&#xE9;ines-Mediated est intimement li&#xE9;e &#xE0; l&#x26;#39;expression des g&#xE8;nes. Par cons&#xE9;quent, toute contrainte m&#xE9;canique qui perturbe la formation de boucles peuvent jouer un r&#xF4;le important dans la r&#xE9;gulation des g&#xE8;nes. Polym&#xE8;res mod&#xE8;les de la physique pr&#xE9;voient que moins d&#x26;#39;un piconewton de la force peut &#xEA;tre suffisant pour emp&#xEA;cher la formation de boucles d&#x26;#39;ADN. Ainsi, il appara&#xEE;t que la tension peut agir comme un interrupteur mol&#xE9;culaire qui contr&#xF4;le les forces beaucoup plus importantes associ&#xE9;es &#xE0; la requ&#xEA;te de l&#x26;#39;ARN polym&#xE9;rase processive. Depuis ARNP peuvent exercer des forces de plus de 20 pN avant qu&#x26;#39;il s&#x26;#39;arr&#xEA;te, un &#xAB;interrupteur substrat tension&#xBB; pourrait offrir un avantage vigueur de deux ordres de grandeur. Preuve d&#x26;#39;un tel m&#xE9;canisme est vu au cours des derni&#xE8;res exp&#xE9;riences de micromanipulation in vitro en. Dans cet article nous offrir une perspective nouvelle sur la th&#xE9;orie existante et les donn&#xE9;es exp&#xE9;rimentales sur l&#x26;#39;ADN en boucle in vitro et in vivo. Nous &#xE9;laborons sur le lien entre la tension et une vari&#xE9;t&#xE9; d&#x26;#39;autres intracellulaires contraintes m&#xE9;caniques, y compris la courbure s&#xE9;quence sp&#xE9;cifique et surenroulement. Dans le processus, nous soulignons que la richesse et la polyvalence de la m&#xE9;canique d&#x26;#39;ADN ouvre un tout nouveau paradigme de la r&#xE9;gulation des g&#xE8;nes &#xE0; explorer.

Ne Forces Femtonewton affecter la fonction g&#xE9;n&#xE9;tique? Un examen

Protein-vermittelte DNA Schleifen ist aufwendig Genexpression verwandt. Daher kann alle mechanischen Einschr&auml;nkungen, die die Schleife Bildung spaltet in Genregulation eine bedeutende Rolle spielen. Polymer Physik Modelle sagen voraus, dass weniger als ein Piconewton Kraft m&ouml;glicherweise ausreichend zur Vermeidung der Entstehung von DNA in einer Schleife. So scheint es, dass die Spannung als molekulare Schalter fungieren kann, der die prozessualen Bewegung der RNS-Polymerase Steuerelemente die viel gr&ouml;&szlig;ere Kr&auml;fte zugeordnet. Da Name Kr&auml;fte &uuml;ber 20 pN aus&uuml;ben kann bevor es St&auml;nde, k&ouml;nnte eine &#39;Substrat Spannung wechseln&#39; einen Kraft-Vorteil von zwei Gr&ouml;&szlig;enordnungen anbieten. Beweise f&uuml;r ein solches Verfahren ist in den letzten Mikromanipulation in-vitro-Experimente gesehen. In diesem Artikel stellen wir neue Perspektive auf vorhandene Theorie und experimentelle Daten &uuml;ber die DNA zu Schleifen, in-vitro und in vivo. Wir erarbeiten f&uuml;r die Verbindung zwischen Spannung und eine Vielzahl von anderen intrazellul&auml;ren mechanischen Einschr&auml;nkungen einschlie&szlig;lich Sequenz bestimmte Kr&uuml;mmung und supercoiling. Dabei betonen wir, dass den Reichtum und die Vielseitigkeit der DNA Mechanik er&ouml;ffnet ein ganz neues Paradigma der Genregulation zu erkunden.

Wirken Femtonewton Kr&auml;fte genetischen Funktion? Ein R&uuml;ckblick.

Mediata da proteine DNA loop &egrave; riccamente correlati all&#39;espressione del gene. Pertanto qualsiasi vincolo meccanico che interrompe il ciclo di formazione pu&ograve; svolgere un ruolo significativo nella regolazione dei geni. Polimero fisica modelli predicono che meno di un piconewton della forza pu&ograve; essere sufficiente a prevenire la formazione di DNA loop. Quindi, sembra che la tensione pu&ograve; agire come un interruttore molecolare che controlli le forze molto pi&ugrave; grandi associati con il movimento della RNA polimerasi processive. Poich&eacute; RNAP pu&ograve; esercitare forze sopra pN 20 prima bancarelle, un &#39;interruttore di tensione substrato&#39; potrebbe offrire un vantaggio di forza dei due ordini di grandezza. Prove per un tale meccanismo sono visto in recenti esperimenti in vitro micromanipolazione. In questo articolo forniamo nuove prospettive sulla teoria esistente e dati sperimentali sul DNA looping in vitro e in vivo. Noi approfondire la connessione tra tensione e una variet&agrave; di altri vincoli meccanici intracellulari tra cui curvatura specifica sequenza e superavvolgimento. Nel processo, sottolineiamo che la ricchezza e la versatilit&agrave; della meccanica del DNA apre un intero nuovo paradigma di regolazione genica da esplorare.

Femtonewton forze incidono sulla funzione genetica? Una recensione.

&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;DNA&#x306E;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x304C;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x6DF7;&#x4E71;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x6A5F;&#x68B0;&#x7684;&#x306A;&#x5236;&#x7D04;&#x306F;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x7269;&#x7406;&#x5B66;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x529B;&#x306E;&#x30D4;&#x30B3;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30C8;&#x30F3;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x306F;&#x3001;DNA&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x9632;&#x3050;&#x306E;&#x306B;&#x5341;&#x5206;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3068;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x7DCA;&#x5F35;&#x306F;&#x3001;RNA&#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30C3;&#x30B7;&#x30D6;&#x904B;&#x52D5;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3088;&#x308A;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x529B;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x5206;&#x5B50;&#x30B9;&#x30A4;&#x30C3;&#x30C1;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002; RNAP&#x306F;&#x5C4B;&#x53F0;&#x306E;&#x524D;&#x306B;20 pN&#x306E;&#x4E0A;&#x306E;&#x529B;&#x3092;&#x767A;&#x63EE;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x306E;&#x3067;&#x3001; &#x26;quot;&#x57FA;&#x677F;&#x306E;&#x30C6;&#x30F3;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x30B9;&#x30A4;&#x30C3;&#x30C1;&#x304C;&#x26;quot; 2&#x6841;&#x306E;&#x529B;&#x306E;&#x512A;&#x4F4D;&#x6027;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x306F;&#x3001;in vitro&#x3067;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30CB;&#x30D4;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6700;&#x8FD1;&#x3067;&#x898B;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x8A18;&#x4E8B;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x65E2;&#x5B58;&#x306E;&#x7406;&#x8AD6;&#x3068;in vitro&#x304A;&#x3088;&#x3073;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;DNA&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306B;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x8996;&#x70B9;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x3001;&#x7DCA;&#x5F35;&#x3068;&#x914D;&#x5217;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x306A;&#x66F2;&#x7387;&#x3068;&#x8D85;&#x3089;&#x305B;&#x3093;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x4ED6;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x6A5F;&#x68B0;&#x7684;&#x306A;&#x5236;&#x7D04;&#x306E;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x9593;&#x306E;&#x63A5;&#x7D9A;&#x3092;&#x8A73;&#x8FF0;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x904E;&#x7A0B;&#x3067;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;DNA&#x306E;&#x529B;&#x5B66;&#x306E;&#x8C4A;&#x304B;&#x3055;&#x3068;&#x591A;&#x69D8;&#x6027;&#x3092;&#x63A2;&#x7D22;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x5236;&#x5FA1;&#x306E;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30D1;&#x30E9;&#x30C0;&#x30A4;&#x30E0;&#x3092;&#x5207;&#x308A;&#x958B;&#x304F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5F37;&#x8ABF;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

Femtonewton&#x8ECD;&#x306F;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x304B;&#xFF1F;&#x30EC;&#x30D3;&#x30E5;&#x30FC;

&#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604; DNA &#xBC18;&#xBCF5; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC911;&#xC7AC; &#xAD00;&#xB828; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD558; &#xAC8C; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xB8E8;&#xD504; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xBC29;&#xD574; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xACC4;&#xC801;&#xC778; &#xC81C;&#xC57D; &#xC870;&#xAC74; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC870;&#xC808;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xACE0;&#xBD84;&#xC790; &#xBB3C;&#xB9AC;&#xD559; &#xBAA8;&#xB378; &#xC608;&#xCE21; &#xB825;&#xC758; piconewton DNA&#xC758; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xBC29;&#xC9C0; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB35C; &#xBC18;&#xBCF5;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC7A5;&#xB825; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD6E8;&#xC52C; &#xB354; &#xD070; &#xC138;&#xB825;&#xC758; RNA &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C; processive &#xBAA8;&#xC158; &#xC5F0;&#xAD00; &#xBD84;&#xC790; &#xC2A4;&#xC704;&#xCE58;&#xB85C; &#xC791;&#xB3D9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0A9;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xD3EC;&#xC7A5; &#xB9C8;&#xCC28; RNAP 20 Pn&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xD798;&#xC744; &#xBC1C;&#xD718;&#xD560; &#xC218;, &#xC774;&#xD6C4; &#39;&#xAE30;&#xD310; &#xAE34;&#xC7A5; &#xC2A4;&#xC704;&#xCE58;&#39; &#xC218; &#xB450; &#xBC30;&#xB098; &#xD798; &#xD65C;&#xC6A9;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558; &#xAC8C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD5C;&#xADFC; &#xCCB4; &#xC678; micromanipulation &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xBCFC; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBB38;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xAE30;&#xC874; &#xC774;&#xB860;&#xACFC; DNA &#xBC18;&#xBCF5; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xC5D0; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xAD00;&#xC810;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xAE34;&#xC7A5; &#xD558; &#xACE0; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xD2B9;&#xC815; &#xACE1;&#xB960;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD55C; &#xB2E4;&#xB978; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xAE30;&#xACC4;&#xC801; &#xC81C;&#xC57D; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC5F0;&#xACB0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC815;&#xAD50;&#xD55C; &#xBC0F; supercoiling. &#xC774; &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xD48D;&#xC694;&#xB85C; &#xC6C0;&#xACFC; DNA &#xC5ED;&#xD559;&#xC758; &#xD0D0;&#xD5D8; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC870;&#xC808;&#xC758; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xD328;&#xB7EC;&#xB2E4;&#xC784;&#xC744; &#xC5F4;&#xACE0; &#xAC15;&#xC870;.

Femtonewton &#xC138;&#xB825; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xD569;&#xB2C8;&#xAE4C;? &#xAC80;&#xD1A0;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La prote&#xED;na mediada por un bucle de ADN est&#xE1; &#xED;ntimamente relacionada con la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica. Por tanto, cualquier restricci&#xF3;n mec&#xE1;nica que altera la formaci&#xF3;n de bucle puede desempe&#xF1;ar un papel importante en la regulaci&#xF3;n g&#xE9;nica. Pol&#xED;meros modelos f&#xED;sicos predicen que menos de un picoNewton de la fuerza puede ser suficiente para evitar la formaci&#xF3;n de bucles de ADN. As&#xED;, parece que la tensi&#xF3;n puede actuar como un interruptor molecular que controla las fuerzas mucho mayores asociados con el movimiento de la RNA polimerasa procesiva. Desde RNAP puede ejercer fuerzas sobre las 20 PN antes de que se ahogue, un &#x26;quot;interruptor de sustrato de la tensi&#xF3;n&#x26;quot; podr&#xED;a ofrecer una ventaja vigor de dos &#xF3;rdenes de magnitud. La evidencia de este mecanismo se observa en los &#xFA;ltimos a&#xF1;os en los experimentos in vitro de micromanipulaci&#xF3;n. En este art&#xED;culo se proporciona una nueva perspectiva en la teor&#xED;a existente y los datos experimentales sobre el ADN bucle in vitro e in vivo. Elaboramos en la conexi&#xF3;n entre la tensi&#xF3;n y una variedad de otras limitaciones mec&#xE1;nicas intracelulares incluyendo curvatura secuencia espec&#xED;fica y superenrollamiento. En el proceso, hacemos hincapi&#xE9; en que la riqueza y versatilidad de la mec&#xE1;nica de ADN se abre todo un nuevo paradigma de la regulaci&#xF3;n g&#xE9;nica para explorar.

No Fuerzas Femtonewton afectar la funci&#xF3;n gen&#xE9;tica? Una revisi&#xF3;n

Hemos medido la elasticidad entr&#xF3;pica de la doble cadena de ADN mol&#xE9;culas que van de 247 a 1298 pb de longitud axial con fuerza de cierre, pinzas &#xF3;pticas. Se demuestra que los efectos entr&#xF3;picos finales y las fuerzas de los excluidos-volumen de los archivos adjuntos de la superficie a ser significativa para tales mol&#xE9;culas cortas. La longitud efectiva persistencia de las mol&#xE9;culas m&#xE1;s cortas disminuye en un factor de 2 en comparaci&#xF3;n con el valor establecido para las mol&#xE9;culas largas, y las fuerzas excluidos volumen extender las mol&#xE9;culas a aproximadamente un tercio de su longitud de contorno nominal. Interpretamos estos resultados en el marco de un modelo semiflexible varilla inextensible.

Efectos entr&#xF3;picos l&#xED;mite de la elasticidad de las mol&#xE9;culas cortas de ADN

&#x6211;&#x4EEC;&#x6D4B;&#x91CF;&#x4E86; 247 &#x81F3; 1298 bp &#x5728;&#x4F7F;&#x7528;&#x8F74;&#x5411;&#x529B;&#x5939;&#x5149;&#x954A;&#x957F;&#x5EA6;&#x4E0D;&#x7B49;&#x7684;&#x53CC;&#x94FE; DNA &#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x71B5;&#x5F39;&#x6027;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x6DF7;&#x4E71;&#x7684;&#x7EC8;&#x70B9;&#x6548;&#x5E94;&#x548C;&#x6392;&#x9664;&#x5377;&#x90E8;&#x961F;&#x4ECE;&#x8868;&#x9762;&#x9644;&#x4EF6;&#x6210;&#x4E3A;&#x8FD9;&#x79CD;&#x77ED;&#x5206;&#x5B50;&#x6765;&#x8BF4;&#x610F;&#x4E49;&#x91CD;&#x5927;&#x3002;&#x6709;&#x6548;&#x7684;&#x6301;&#x4E45;&#x6027;&#x957F;&#x5EA6;&#x6700;&#x77ED;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684;&#x6BD4;&#x8F83;&#x957F;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#xFF0C;&#x4E3A;&#x65E2;&#x5B9A;&#x503C;&#x7684; 2 &#x500D;&#x548C;&#x90E8;&#x961F;&#x6392;&#x9664;&#x5377;&#x6269;&#x5C55;&#x5230;&#x5176;&#x540D;&#x4E49;&#x7684;&#x8F6E;&#x5ED3;&#x957F;&#x5EA6;&#x7EA6;&#x6709;&#x4E09;&#x5206;&#x4E4B;&#x4E00;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C06;&#x89E3;&#x91CA;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7EF3;&#x5B50;&#x534A;&#x6746;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x6846;&#x67B6;&#x4E2D;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;

&#x71B5;&#x8FB9;&#x754C;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x77ED; DNA &#x5206;&#x5B50;&#x5F39;&#x6027;&#x3002;

We have measured the entropic elasticity of double-stranded-DNA molecules ranging from 247 to 1298 bp in length using axial force-clamp optical tweezers. We show that entropic end effects and excluded-volume forces from surface attachments become significant for such short molecules. The effective persistence length of the shortest molecules decreases by a factor of 2 compared to the established value for long molecules, and excluded-volume forces extend the molecules to about one third of their nominal contour length. We interpret these results in the framework of an inextensible semiflexible rod model.

Entropic boundary effects on the elasticity of short DNA molecules.

Nous avons mesur&#xE9; l&#x26;#39;&#xE9;lasticit&#xE9; entropique de double brin d&#x26;#39;ADN-mol&#xE9;cules allant de 247 &#xE0; 1298 pb de longueur en utilisant la force axiale-clamp pinces optiques. Nous montrons que les effets finaux entropiques et exclus volume des forces de pi&#xE8;ces jointes de surface deviennent importants pour ces mol&#xE9;cules courtes. La longueur de persistance effective des courts mol&#xE9;cules diminue d&#x26;#39;un facteur de 2 par rapport &#xE0; la valeur &#xE9;tablie pour de longues mol&#xE9;cules, et les forces de volume exclu d&#x26;#39;&#xE9;tendre les mol&#xE9;cules &#xE0; environ un tiers de leur longueur de contour nominale. Nous interpr&#xE9;tons ces r&#xE9;sultats dans le cadre d&#x26;#39;un mod&#xE8;le semi-flexible tige inextensible.

Article	Year
All-optical constant-force laser tweezers. Biophysical journal\| PubMed ID: 15345573	2004
Disruption of protein-mediated DNA looping by tension in the substrate DNA. Biophysical journal\| PubMed ID: 15653717	2005
Three-dimensional characterization of tethered microspheres by total internal reflection fluorescence microscopy. Biophysical journal\| PubMed ID: 15923224	2005
Microfluidic chip for low-flow push-pull perfusion sampling in vivo with on-line analysis of amino acids. Analytical chemistry\| PubMed ID: 16255611	2005
Mg2+-induced compaction of single RNA molecules monitored by tethered particle microscopy. Biophysical journal\| PubMed ID: 16500956	2006
Under the microscope: single molecule symposium at the University of Michigan, 2006. Biopolymers\| PubMed ID: 17080420	2007
Intrinsic curvature of DNA influences LacR-mediated looping. Biophysical journal\| PubMed ID: 17766355	2007
Fast position measurements with scanning line optical tweezers. Optics letters\| PubMed ID: 18007944	2002
From bench to bedside: successful translational nanomedicine: highlights of the Third Annual Meeting of the American Academy of Nanomedicine. Nanomedicine : nanotechnology, biology, and medicine\| PubMed ID: 18068093	2007
Electromechanical properties of pressure-actuated poly(dimethylsiloxane) microfluidic push-down valves. Analytical chemistry\| PubMed ID: 18576665	2008
Stretching submicron biomolecules with constant-force axial optical tweezers. Biophysical journal\| PubMed ID: 19486692	2009
Do femtonewton forces affect genetic function? A review. Journal of biological physics\| PubMed ID: 19669453	2006
Entropic boundary effects on the elasticity of short DNA molecules. Physical review. E, Statistical, nonlinear, and soft matter physics\| PubMed ID: 19792069	2009
Femtonewton entropic forces can control the formation of protein-mediated DNA loops. Physical review letters\| PubMed ID: 20366742	2010
Protein-mediated DNA loop formation and breakdown in a fluctuating environment. Physical review letters\| PubMed ID: 20867418	2010

Jens -Christian Meiners

Biography

JoVE Journal Publications

Other Publications